CN103717202B - 用于增强皮肤细胞中胶原合成的化妆品组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于增强皮肤细胞中胶原的合成的化妆品组合物，它含有0.001-0.5wt％三角褐指藻提取物、0.00001-2.0wt％二聚体三肽-43或水解大米蛋白、以及化妆品助剂。含有两种组分组合的化妆品组合物对于皮肤细胞中I型胶原的合成具有协同效应，且对于已知对I型胶原的合成具有增强作用的其他物质具有增效剂作用。

Description

用于增强皮肤细胞中胶原合成的化妆品组合物

技术领域

本发明涉及化妆品领域中的一种对皮肤中胶原的合成具有增强作用的组合物。

背景技术

胶原作为哺乳动物体内最丰富的蛋白质，具有重要的结构性作用，有助于增强组织的机械强度，所以人们提出一些创造性的建议，以促进胶原的合成。有很多出版物公开了用于这一目的的植物提取物的用途，例如JP2010006743公开了使用松树皮提取物加胶原以及钙或钠的化合物。WO2009／058613公开了使用中国籽油和食用仙人掌籼提取物来刺激胶原的合成。

其他建议旨在使用肽或氨基酸。US2010160244公开了一种由必需氨基酸、抗氧化剂、有机渗透剂和补充硫源构成的混合物。WO2009／018126公开了一种具有基本序列Gly-Pro-J的胶原相关多肽，其中J是Pro或Hyp，且具有胶原模拟性能。

发明内容

本发明的目的是增强皮肤中胶原的合成，且提供一种用于该目的的化妆品组合物。

本发明的发明人已发现，可通过使用包含下列组分的组合物来增强皮肤中胶原的合成：

三角褐指藻提取物0.001-0.5wt％；

二聚体三肽-43或水解大米蛋白0.00001-2.0wt％，优选0.00005-2.0wt％；

以及一或多种化妆品助剂，为组合物100％总量的余量，组合物组分的给定百分比通常与组合物的总重量相关。

三角褐指藻提取物的一种已知的商品是辛酸／癸酸三酸甘油酯&三角褐指藻提取物&生育酚(Carpylic／CapricTriglyceride&PhaeodactylumTricornutumExtract&Tocopherol，INCI名称)，例如法国巴黎Soliance的(商标名)。在WO02／080876A2中也描述了使用三角褐指藻提取物来作为美容剂。三角褐指藻提取物增强了蛋白酶体的活性，且通过影响细胞中蛋白酶体的活性而有助于保护皮肤细胞免受紫外线照射的有害影响。

三角褐指藻提取物是通过NaOH和乙醇对培养的海洋浮游植物的进行消化而制备得到的，且在该提取之后，例如在30℃-100℃的温度范围内，使用一种诸如庚烷或己烷的饱和烃，以及诸如硫酸的强酸的混合物，进行过滤和蒸发。三角褐指藻提取物增强了蛋白酶体的活性，且通过影响细胞中蛋白酶体的活性而有助于保护在紫外线作用下的细胞。

根据本发明，辛酸／癸酸三酸甘油酯&三角褐指藻提取物&生育酚的优选范围是0.01-0.5wt％，尤其是0.03-0.2wt％。包含在用于本发明组合物中的三角褐指藻提取物，含量为0.001-0.5wt％。

二聚体三肽-43的一种已知商品是ProlixirS(商品名，法国ISPVincience)或水溶液&丁二醇&二聚体三肽-43(Aqua&ButyleneGlycol&DimerTripeptide-43，INCI名称)。ProlixirS20含有0.01％二聚体三肽-43。水解大米蛋白的一种已知商品是ProlixirICE(商品名，法国ISPVincience)或水溶液&丙三醇&水解大米蛋白(Aqua&Glycerin&HydrolyzedRiceProtein，INCI名称)。ProlixirICE含有0.5％水解大米蛋白。二聚体三肽-43和水解大米蛋白是如WO2010／122244A1中所述的植物水解物，且具有如下通式(I)表示的多种生物活性肽：

X₁-[Asp，Cys，Arg]-X₂

其中：

X1是天冬酰胺、赖氨酸、天门冬氨酸、缬氨酸、精氨酸或不存在；

X2是组氨酸、赖氨酸、精氨酸或不存在。

优选肽水解物富含下列生物活性肽：Arg-Asp-Cys-Arg-Arg；Asn-Asp-Cys-Arg-Lys；Asp-Cys-Arg-His；Val-Asp-Cys-Arg；Asp-Cys-Arg。这意味着丰富的肽水解物是由分子量小于6kDa的肽组成的，且富含含有3-5个氨基酸的生物活性肽，这些氨基酸包括至少一个天冬氨酸残基、一个半胱氨酸残基和一个精氨酸残基。

二聚体三肽-43水解物和水解大米蛋白水解物是通过玉米水解(ZeamayzL.)或豌豆水解(Pisumsativum)以及大米水解(OryzasativaL.)而制得的，如在此引为参考的WO2010／122244A1中所述。水解物被描述为蛋白酶体活化剂，且对非功能性蛋白质和泛素-蛋白酶体系统产生影响。

根据本发明，水&丁二醇&二聚体三肽-43和水&丙三醇&水解大米蛋白的优选范围是0.1-1.0wt％。

令人意外的是，根据对正常的人类成纤维细胞的蛋白质印迹检测(WesternBlot，三角褐指藻提取物与二聚体三肽-43或水解大米蛋白的组合对I型胶原的合成显示出显著增强的效果，超过I型胶原的提高合成物质的效果。对真皮层密度的临床研究表明，本发明的组合物在为期四周每日两次的使用后，使真皮层的密度显著增加。

在本发明的另一实施方式中，用于增强皮肤中胶原合成的化妆品组合物包含下列组分：

(1)三角褐指藻提取物0.001-0.5wt％；

(2)二聚体三肽-43或水解大米蛋白0.00001-2.0wt％，优选0.00005-2.0wt％；

(3)一或多种对I型胶原合成具有增强作用的物质0.1-9.0wt％；所有浓度均与组合物的总重量有关；以及

(4)其他化妆品助剂或其混合物，为组合物100％总量的余量。

对I型胶原合成具有增强作用的物质例如为诸如二肽和六肽的几个肽；其他植物的提取物，例如槟榔(槟榔籽提取物)、竹节人参提取物、白茶提取物、玫瑰果提取物、非洲吊灯树果提取物；或一种特殊的油，例如芡欧鼠尾草籽油或水解大豆粉产品。优选物质是酪氨酸-精氨酸二肽，例如乙酰二肽-1十六烷基酯(例如)、六肽-11(例如)、水解大豆粉(例如)和非洲吊灯树果提取物或其混合物。

已知水解大豆粉能够促进胶原纤维的收缩和保护弹力纤维免受酶的攻击。

优选的Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly六肽是棕榈酰-VGVAPG肽或六肽-11。

优选的二肽是N-乙酰基-酪氨酸-精氨酸六十二烷基酯或乙酰二肽-1十六烷基酯。

对I型胶原的合成具有增强作用的另一优选物质是非洲吊灯树果提取物，尤其是其与六肽-11、乙酰二肽-1十六烷基酯以及水解大豆粉组成的混合物。

通过添加三角褐指藻提取物与二聚体三肽-43或水解大米蛋白的组合物，使这些物质对I型胶原合成的增强作用显著提高。这通过申请人进行的比较测试得到验证。

组合物可能含有的化妆品助剂包括例如一种或多种抗氧化剂、自由基清除剂、无机和有机防晒霜(紫外线过滤剂)、乳化剂、颜料、防腐剂、凝胶剂、染料、香水、稳定剂、成膜剂、软化剂、调理剂、保湿物质、螯合剂、SPF增效剂、湿润剂、抗炎天然活性剂、pH调节剂等。

特别优选的是抗氧化剂、自由基清除剂、紫外线过滤剂、乳化剂、保湿物质、凝胶剂、SPF增效剂、软化剂、硅酮油、乳化稳定剂、pH调节剂、防腐剂。

其他可用于组合物的皮肤病或化妆品助剂包括例如水、维他命、酶、其他植物提取物、聚合物、酶、磷脂、泛酰醇、尿囊素、合成醚和酯、脂肪酸、一价和多价醇、硅树脂、矿物质、另外的油(特别是植物油)、蜡、生物技术提取物。生物技术提取物例如包括CLR修复合物或酵母复合物B(二者均属CLR，德国柏林化学实验室，KurtRichterGmbH博士)；Stimulhyal，Primalhyal50或300(均属SOLIANCE，法国巴黎)。

特别优选的是水、维他命、其他植物提取物和提取物的混合物、合成聚合物、酯、醚、脂肪酸、一价和多价醇、硅树脂、硅酸盐、蜡。

本发明的化妆品组合物可如所述那样，还有利地含有抗氧化剂。抗氧化剂包括例如维他命，例如维他命C及其衍生物，例如抗坏血酸酯、磷酸盐和棕榈酸盐；叶酸及其衍生物；维他命E及其衍生物，例如维生素E醋酸酯；黄酮或类黄酮；此外还有氨基酸，例如组氨酸、酪胺酸、色氨酸及其衍生物；咪唑，例如顺式或反式尿刊宁酸及其衍生物；肽，例如D，L-肌肽、D-肌肽、L-肌肽及其衍生物；透明质酸；蕃茄红素；尿酸及其衍生物；α-羟基酸，例如柠檬酸、乳酸、苹果酸；α-羟基脂肪酸，例如棕榈酸、植酸、乳铁蛋白；甘露糖及其衍生物；脂酮酸及其衍生物，例如二氢脂酮酸；阿魏酸及其衍生物；硫醇，例如谷胱甘肽、半胱胺酸和胱氨酸。

尤其优选添加透明质酸和维他命E。

另一优选的与化妆品组合物相关的自由基清除剂是由下列植物提取物构成的混合物：圆当归、茶树叶提取物、水黄皮籽提取物、阿拉比卡咖啡树籽提取物的醇制剂、胶囊脂质体制剂或非胶囊油性制剂。所有制剂可另外含有苦橙(酸橙)皮提取物。脂质体封装植物的特殊自由基清除剂的混合物含有1％-4％绿茶叶提取物、1％-4％绿色咖啡、1％-4％水黄皮籽提取物、1％-4％圆当归根提取物、2％-10％磷脂，溶于水-醇悬浮液中，其中醇含量在4％-12％的范围内，其中所有浓度均与自由基清除剂混合物的重量有关。

这类自由基清除剂混合物在本发明的化妆品组合物中的含量是0.01-1.0wt％，相对于组合物的总重量。

本发明的化妆品组合物可用于不同的化妆品中，例如润肤剂、润肤油、乳霜、日霜、晚霜、防紫外线的日常护理产品、凝胶、面膜、香脂、粉剂、紧致眼霜、粉底、有色乳霜、填充剂、织物面膜、前防晒品、防晒品、后防晒品、美黑乳液、化妆品、粉饼、光保护产品、喷雾液、卸妆剂、洗面奶、目标产品、粉底、腮红粉、如淋浴和沭浴露或盐的卫浴产品、口红、止汗膏。

乳液产品包括多重乳液、微米乳液和纳米乳液，形式有W／O、O／W、W／Si、Si／W、W／O／W、O／W／O、O／W／Si和W／Si／W乳液(O=油，W=水，Si=硅树脂)。还包括其他的诸如Si／O的无水系统产品。

前防晒产品例如包括前防晒凝胶、前防晒润肤剂、前防晒乳霜或前防晒油。防晒产品是凝胶、乳霜、润肤剂、润肤油、喷雾液或日常防护保养产品，它们具有不同的防晒系数(SunProtectionFactor，SPF)，范围从SPF2至SPF50，例如SPF6、SPF10、SPF15、SPF20、SPF25、SPF30、SPF50和SPF50+。不同SPF值取决于紫外线过滤物质的类型和数量。

用于制备凝胶的适合的化妆品凝胶形成剂是卡波姆、黄烷胶、角叉菜胶、阿拉伯胶、瓜尔豆胶、琼脂-琼脂、藻酸盐和侵填体、硅酸镁铝、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、季铵化纤维素、季铵化瓜尔胶、如丙烯酸酯／C10-30丙烯酸烷基酯交联聚合物的特定聚丙烯、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮。

特别优选的是黄烷胶、卡波姆、丙烯酰二甲基牛磺酸铵／VP共聚物丙烯酰二甲基牛磺酸铵／山嵛醇聚醚-25丙烯酸甲酯交联聚合物丙烯酸酯／C12-22烷基丙烯酸甲酯共聚物、硅酸镁铝、丙烯酸钠／丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、丙烯酸羟乙酯／丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、多元酯-5与丙烯酸酯／新癸酸乙烯酯交联聚合物、聚丙烯酸钠、聚丙烯酰胺／C13-14异构烷烃／月桂醇聚醚7／苯乙烯／丙烯酸酯共聚物十二烷基硫酸钠。

对于防晒产品的制备，更有利的做法是在组合物中一同使用发明性的晒黑组分，该组分对应于水溶性和／或油溶性UVA或UVB过滤剂或二者。有利的油溶性UVB过滤剂包括4-氨基苯甲酸衍生物，例如4-(二甲基氨基)-苯甲酸-(2-乙基己基)酯；肉桂酸的酯，例如4-甲氧基肉桂酸(2-乙基己基)酯；苯甲酮衍生物，例如2-羟基-4-甲氧基苯甲酮。

优选的油溶性紫外线过滤剂是丁基-甲氧基苯甲酰基甲烷、甲氧基肉桂酸乙基己酯、水杨酸乙基己酯、以及二乙基己基苯酚甲氧苯基三嗪。

水溶性UVB过滤剂例如是二苯甲酮或3-亚苄基樟脑或盐的磺酸衍生物，例如2-苯基苯并咪唑-5-磺酸的Na或K盐。

UVA过滤剂包括二苯甲酰基甲烷衍生物，例如丁基-甲氧基苯甲酰基甲烷。

特别优选的是丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷、甲氧基肉桂酸乙基己酯、水杨酸乙基己酯、奥克立林、甲氧基肉桂酸乙基己酯、对-甲氧基肉桂酸异戊酯、乙基己基三嗪酮、二乙基己基丁酰胺基三嗪酮、亚甲基双苯并三唑基四甲基苯酚、苯基二苯并咪唑四磺酸二钠、双乙基己基氧苯酚甲氧基苯基三嗪、二苯甲酮-3。作为防晒过滤剂的无机颜料是金属氧化物，例如TiO2、SiO2、Fe2O3、ZrO2、MnO、A12O3，这些也可用于混合物。

有可能使用发明性化妆品组合物与晒黑剂的混合物。这类晒黑剂例如是靛红、甘油醛、内消旋酒石酸醛、戊二醛、赤藓酮糖、二氢吡唑-4，5-二酮衍生物、二羟基丙酮(DHA)、4，4-二羟基二氢吡唑-5-二酮衍生物。

本发明的组合物也可含有湿润剂，例如丙三醇、丁二醇、丙二醇及其混合物。

本发明的组合物也可含有保湿剂、毛孔收缩剂或凝固剂，大部分源于植物和藻类，例如榛水、PisumSativum(豌豆)提取物。

本发明的化妆品组合物进一步还可包含组分油、乳化剂、酯和颜料。

用于本发明的油可以是平常的化妆品油，例如矿物油、氢化聚异丁烯、合成的或天然的角鲨烷、饱和或不饱和蔬菜油、或其中的两种或更多种的混合物。

特别适合的油例如是硅酮油、矿物油、氢化聚异丁烯、聚异戊二烯、角鲨烷、三癸偏苯三酸、三甲基丙烷三异硬脂酸酯、异癸柠檬酸盐、新戊二醇二庚酸酯、PPG-15-硬脂基醚、金盏花油、希蒙得木油、鳄梨油、澳洲坚果油、蓖麻油、可可油、印加果油、椰子油、玉米油、棉花籽油、橄榄油、棕榈仁油、菜籽油、红花籽油、芝麻油、大豆油、葵花籽油、小麦胚芽油、葡萄核油、夏威夷坚果油、布里蒂油、金盏花油、蓟油及其混合物。

取决于所选择的油，固体成分的化妆品性能如柔软性、硬度或扩散效应会受到影响。

适合的多元醇的酯是C10-C15脂肪酸和醇的酯、C10-C15脂肪酸和乙二醇的酯、或羟基脂肪酸的酯。支链C12-C15烷基酯共轭多元醇的二或三酯的其他酯在油相中特别有利，且直链醇和支链酸的酯特别有利。所有这些适合的酯均起源于伯醇。优选的酯是碳酸二辛／癸椰油酸酯、癸二酸二异丙酯／己二酸二丁酯和棕榈酸异丙酯。

适合的油相物质包括异十六烷、PEG-40-硬脂酸酯、山梨醇酐硬脂酸酯、二十二醇、新戊二醇二庚酸酯、丙二醇辛酸、己二酸二辛酯、可可辛酸酯／癸酸酯、己二酸二乙基己基酯、二异丙基二聚亚油酸酯、二异硬脂醇二聚亚油酸酯、异十六烷、乳油木果(牛油果)酱、C12-13烷基乳酸酯、二-C12-13烷基酒石酸盐、三-C12-13烷基柠檬酸盐、C12-15烷基乳酸酯、PPG二辛酸酯、二乙烯乙二醇二辛酸酯、白芒花油、巴巴苏油、希蒙得木油、米油、C12-15烷基油酸酯、鳄梨油、三癸新戊酸酯、蜂蜡、十八烷醇和聚山梨醇酯60、C18-26三酸甘油脂、棕榈醇&鲸蜡硬脂醇糖苷、乙酰化羊毛脂、VP／二十烯共聚物、羟基硬脂酸甘油酯、C18-36酸乙二醇酯，与一些物质一同使用，例如C18-36三酸甘油脂、辛酸／癸酸三酸甘油酯、羟基硬脂酸甘油酯及其混合物。适当和优选的物质还有十六醇&硬脂酸甘油酯&PEG75硬脂酸酯&鲸蜡醇聚醚-20&硬脂醇聚醚-20、月桂基葡糖苷&聚甘油-2二聚羟基硬脂酸酯、山嵛醇聚醚-25、聚酰胺-3&季戊四醇四二叔丁基羟基肉桂酸酯、聚酰胺-4、PEG-100硬脂酸酯、鲸蜡基磷酸钾、硬脂酸和锂蒙脱石。

根据本发明的化妆品组合物可优选存在的形式有O／W或W／O乳液以及由上述类型的多重、微米或纳米乳液构成的乳液。用于O／W乳液适合的乳化剂例如是2-30mol的环氧乙烷对线性C8-C22脂肪醇、C12-C22脂肪酸和C8-C15烷基酚的加成产物；1-30mol的环氧乙烷对丙三醇的加成产物C12-C22脂肪酸单酯和二酯；丙三醇单酯和二酯以及山梨醇单酯和C6-C22脂肪酸二酯、多元甘油醇酯和聚甘油酯的二酯；环氧乙烷对蓖麻油的加成产物；以及两性表面活性剂。

用于W／O乳液适合的乳化剂例如是2-15mol环氧乙烷对蓖麻油的加成产物、C12-C22脂肪酸和甘油、聚丙三醇、乙二醇、季戊四醇、糖醇(例如索氏体)、葡萄糖苷(例如纤维素)、聚亚烷基二醇、羊毛醇、聚硅氧烷聚烷基聚醚共聚物。

用于多重乳液和微米乳液的适合的乳化剂例如是三山嵛精PEG-20酯、PEG-12二甲聚硅氧烷交联聚合物、月桂基PEG／PPG-18／18硅氧烷、包括环戊硅氧烷在内的PEG-PPG-19／19二甲聚硅氧烷、聚甘油-6二油酸酯、以及PEG-8辛酸／癸酸甘油酯。

颜料、颜料混合物或具有类颜料效果的粉末，还包括那些具有珍珠光泽效果的颜料，例如可包括氧化铁、诸如赭石的铝硅酸盐、二氧化钛、云母、高岭土、含锰粘土、二氧化硅、氧化锌、碳酸钙、滑石、云母-氧化钛、云母-氧化钛-氧化铁、尼龙珠、陶瓷珠、发泡和非发泡的合成聚合物粉末、粉状天然有机化合物，例如磨碎的固体藻类、磨碎的植物部位、封装和非封装的谷类淀粉和云母-氧化钛-有机染料。

进一步地，化妆品助剂是蜡。

蜡可选白天然植物蜡、动物蜡、天然和合成的矿物蜡以及合成蜡。包括巴西棕榈蜡、小烛树蜡、地蜡、蜂蜡、褐煤蜡、羊毛蜡、纯地蜡、微晶蜡、石蜡、凡士林、硅蜡、聚乙二醇蜡或聚乙二醇酯蜡。

本发明的另一目的是用于增强皮肤中胶原合成的化妆品组合物的化妆品用途，其中所述组合物含有：

三角褐指藻提取物0.001-0.5wt％；二聚体三肽-43或水解大米蛋白0.00001-2.0wt％，优选0.00005-2.0wt％，百分比与组合物的总重量有关；以及其他化妆品助剂或其混合物，达到组合物100％总量的余量。

特别优选的化妆品组合物的用途，其中组合物含有：

(1)三角褐指藻提取物0.001-0.5wt％

(2)二聚体三肽-43或水解大米蛋白0.00001-2.0wt％，优选0.00005-2.0wt％；

(3)一或多种对I型胶原合成具有增强作用的物质0.1-9.0wt％；所有浓度均与组合物的总重量相关；以及

(4)其他化妆品助剂或其混合物，为组合物100％总量的余量。

本发明的另一目的是提供一种通过向皮肤施用组合物来增强皮肤细胞中I型胶原合成的方法，该组合物含有三角褐指藻提取物0.001-0.5wt％二聚体三肽-43或水解大米蛋白0.00001-2.0wt％，优选0.00005-2.0wt％，浓度与组合物总重量相关；以及其他化妆品助剂或其混合物，为组合物100％总量的余量。

特别优选的一种方法，其中组合物含有：

(1)三角褐指藻提取物0.001-0.5wt％；

(2)二聚体三肽-43或水解大米蛋白0.00001-2.0wt％，优选0.00005-2.0wt％；

(3)一或多种对I型胶原的合成具有增强作用的物质0.1-9.0wt％；所有浓度均与组合物的总重量有关；以及

(4)其他化妆品助剂和它们的混合物，总量达到组合物的余量。

本发明将通过实施例来对化妆品组合物进行详细的描述。如未特别说明，所有给出的百分比数字均为重量百分比。

附图说明

图1a在对正常人类成纤维细胞的I型胶原的WesternBlot检测之后组分A和B的各自色谱结果。

图1b根据图1a结果进行图像分析之后绘制的柱形图。

图2a在对正常人类成纤维细胞的I型胶原的WesternBlot检测之后组分A和B的共同色谱结果。

图2b根据图2a结果在图像分析之后绘制的柱形图。

图3根据图1b和2b和一组胶原增效剂的结果而绘制的柱形图。

图4在16位女性为期四周每天两次地使用了本发明的实施例1中的乳霜之后得到的真皮层密度的超声波测量结果；显示了长期施用后对真皮密度的作用，在连续施用28天后显著增加了真皮层密度。

具体实施方式

实施例1-3日霜

A相

B相

C相

*阿拉比卡咖啡籽提取物(2％)、绿茶叶提取物(2％)、圆当归根提取物(2％)、水黄皮籽提取物(2％)、卵磷脂、乙醇(6％)、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、柠檬酸、抗坏血酸、水、PEG-8。

在搅拌的条件下，将A相组分混合且加热至70℃-75℃。在搅拌的条件下，将B相组分单独混合且加热至70℃-75℃。将A相添加到B相中，并在相同的温度下搅拌同时乳化。随后使乳液冷却，且在约30℃-35℃的温度下，将单独制备的C相添加到混合物中，并同时搅拌均匀。

实施例4-6日霜

A相

B相

C相

*阿拉比卡咖啡籽提取物(2％)、绿茶叶提取物(2％)、圆当归根提取物(2％)、水黄皮籽提取物(2％)、卵磷脂、乙醇(6％)、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、柠檬酸、抗坏血酸、水、PEG-8。

在搅拌的条件下，将A相组分混合且加热至70℃-75℃。在搅拌的条件下，将B相组分单独混合且加热至70℃-75℃。将A相添加到B相中，并在相同的温度下搅拌同时乳化。随后使乳液冷却，且在约30℃-35℃的温度下，将单独制备的C相添加到混合物中，并同时搅拌均匀。

实施例7比较测试

I型胶原的WesternBlot检测

分别使用组分A、B和C来单独或组合处理正常的成纤维细胞六天，且分别在培养基中稀释。随后提取胶原，且通过免疫印迹方法使用化学发光检测试剂盒来检测I型胶原。将从处理过的细胞得到的I型胶原的谱带强度与未处理过的细胞的谱带强度作比较。此外，使用图像分析软件来对谱带的强度进行定量。

结果显示在图1-3中。

在图像分析之后，采用体外蛋白质印迹法对I型胶原合成进行检测，结果如下：

(1)组分A=二聚体三肽-430.005wt％：无活性

浓度对应于0.5wt％ProlixirS

(2)组分B=三角褐指藻提取物0.00025％=2.5μg／ml：

浓度对应于0.005wt％11.9％

(1)和(2)的结果也显示在图1a和1b中。“U”=未处理

(对照)，A和B是组分。

(3)组分A和B=0.005wt％二聚体三肽-43+0.0002517.1％

wt％三角褐指藻提取物(2.51μg／ml)：

结果显示，在加入无活性的组分A后，第一协同效应从11.9％增至17.1％。结

果显示在图2a和2b中。“U”=未处理(对照)，A和B是组分。

(4)组分C=胶原增效剂17.4％

胶原增效剂是下列物质的混合物：6ppmN-乙酰-酪氨酸-精

氨酸-O-十六烷基酯+0.015wt％水解大豆粉+0.05wt％

六肽-11+0.005wt％非洲吊灯树果提取物：

(5)具有如(1)、(2)和(4)中所示的相同浓度的组分A、42.1％

B和C：

结果显示，主活性物(组分)A和B与一组胶原增效剂之间的第二协同效应，从17.1％(组分A+B)在加入组分C效应17.4％之后，总效应达到42.1％。所有结果均显示在图3中。“U”=未处理(对照)；A、B和C分别是组分。

实施例8

对白人女性的临床研究

临床研究的目的是，将本发明的组合物为期四周每日应用到脸部和颈部上之后，评估真皮层发生的结构变化。

测试小组包括16位年龄从40至59岁的女性。整个测试小组的平均年龄是49±2岁(平均值±sem)。所有志愿者都属于白种人。

测试以超声测量为基础。Dermascan-C系统(皮质科技公司，丹麦Hadsund)用于获得太阳穴的间隔紧密的B-扫描图像的序列。在测量时，在同一限定区域上进行三个测量。对于每次数据采集，软件计算出不同的参数：真皮层(A)、LEP、MEP和HEP的总面积以及结果被表示为LEP／A、MEP／A和HEP／A。

LEP=强度为对应于低回声像素的0至30像素的区域；

MEP=强度为对应于中等回声像素的31至80像素的区域；

HEP=强度为对应于高回声像素的81至255像素的区域。

结果示于图4中。

Claims (6)

1.一种用于增强皮肤中胶原合成的化妆品组合物，包括：

三角褐指藻提取物0.001-0.5wt％；

二聚体三肽-43或水解大米蛋白0.00001-2.0wt％，且所述浓度与所述组合物总重量相关；以及

其他化妆品助剂或其混合物，为所述组合物100％总量的余量。

2.一种用于增强皮肤中胶原合成的化妆品组合物，包括：

(1)三角褐指藻提取物0.001-0.5wt％；

(2)二聚体三肽-43或水解大米蛋白0.00001-2.0wt％；

(3)一或多种对I型胶原的合成具有增强作用的物质0.1-9.0wt％；所有浓度均与所述组合物的总重量相关；以及

(4)其他化妆品助剂或其混合物，为所述组合物100％总量的余量。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中，具有增强作用的所述物质中的至少一个选自下列组分：二肽、六肽、植物提取物、大豆粉及其混合物。

4.根据权利要求2或3所述的组合物，其中，具有增强作用的物质选自下列物质：乙酰二肽-1十六烷基酯、六肽-11、水解大豆粉、非洲吊灯树果提取物及其混合物。

5.根据权利要求1-2中的任一所述的组合物，其含有0.01-1.0wt％自由基清除剂。

6.根据权利要求1-2中的任一所述的组合物，其含有0.00005-2.0wt％二聚体三肽-43或水解大米蛋白。