CN101570774A - 微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法 - Google Patents

微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法 Download PDF

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周庆礼
刘安军
王维君
陈文东
娄山
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Abstract

本发明涉及一种微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法，步骤是(1)制备花生蛋白；(2)多肽制备；(3)微生物发酵；(4)分离；(5)形成成品。本发明采用复合酶水解，一方面使之达到一定的酶解程度，另一方面边酶解边对其进行修饰，以改良酶解产物花生多肽的风味，使之作为食品添加剂或营养蛋白质的原料。本发明所采用的微生物蛋白酶，与动物蛋白酶、植物蛋白酶相比具有溶解性好、活力高、专一性强的特点，能够对蛋白质进行较深程度的水解。

Description

微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法
技术领域
本发明属于食品领域，特别是涉及一种微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法。
背景技术
花生蛋白是一种营养价值较高的植物蛋白，其生物价(Bv)为58，效率值为117，含有人体所需的8种必需氨基酸，尤其富含精氨酸(9％)，而精氨酸具有免疫促进功能，对维护人体健康和幼儿发育具有重要作用。研究发现，蛋白质经水解制得的肽有比蛋白质更好的营养性能；实验证实肽的吸收率比氨基酸高，且比氨基酸更易、更快地通过小肠黏膜被人体吸收利用。花生蛋白活性多肽在营养保健领域具有多种卓越的生理功能：一是多肽可由肠道不经降解直接吸收，其吸收速度和吸收率比蛋白质和氨基酸都高，因而可作为肠道营养剂和流质食物的形式提供给处于特殊身体状况下的人群；二是它不仅提供人体必须的蛋白营养，还能有效降低血液中胆固醇和甘油三脂的含量，加快体内耗能，燃烧脂肪，抵抗肥胖；三是花生蛋白活性多肽能够为人体提供丰富的氨基酸，促进蛋白质合成，抑制核糖核酸酶活性下降，清除人体内的自由基与重金属，改善细胞代谢，为免疫系统制备对抗细菌和感染的抗体。此外，在提高人体免疫功能方面，花生多肽与其它多肽有显著不同，花生多肽含有白藜芦醇，它对心血管疾病和动脉硬化有明显的抑制作用，亦可藉此促进人类肿瘤细胞的凋亡，或是通过肿瘤抑制因子P53的表现来达到抗肿瘤活性。
目前，多肽的生产主要有合成与蛋白质体外水解两种方法，合成法主要有化学合成、DNA重组技术合成、酶法合成等三种方法。合成法虽然可按人们的意愿合成任意活性肽，但目前因为成本高、副反应物多及残留物等问题制约着其发展；而重组DNA技术如果有望成功，将会有广阔前景。体外水解蛋白质为肽有三种方法：酸水解、碱水解及酶法水解，前两种方法简单易操作，但可能存在营养和毒理方面有害的效应，因此其应用受到了一定的限制；蛋白质酶法水解能在一定的条件下进行定位水解产生特定的肽.且易于控制水解进程，并具有高度的专一性，一般不会导致营养方面的损失，也不会产生毒理上的问题；同时酶作用具有特异性，可在温和条件下进行，能耗低，因而能较好地满足肽的生产需要。在多肽生产中酶的选择是关键，它不仅影响最后产品的得率、反应速度，而且直接影响产品的风味和理化特征。
现有的酶解工艺包括单酶酶解和酸解，酶水解易产生苦、咸、涩等不良风味圈，影响了食用的要求；此外，还存在着肽链长度差别大等问题。
发明内容
本发明的目的在于克服现有工艺制作花生蛋白多肽所存在的不足，提供一种通过专一水解酶结合微生物连续发酵制备花生多肽饮品的方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法，其步骤是：
(1)制备花生蛋白：低温压榨花生粕经过粉碎、溶解、高压喷射破乳，然后，用3mol/L的氢氧化钠调PH值6-8，于恒温水中搅拌浸提，低温真空条件下提取，完全浸提后，将上层油吸出，再将浸提液进行离心分离得到花生蛋白质；
(2)多肽制备：花生蛋白溶液加热85-95℃，10-20min后冷却至常温，调解pH6-8，加蛋白酶进行酶解，形成蛋白多肽混合液；
(3)微生物发酵：将上述蛋白多肽混合液加入链霉菌培养发酵，35-40℃，发酵20-26h；
(4)分离：将上述制备的发酵液分离菌体，并利用膜过滤的方式，除去大分子肽(蛋白)以及多糖物质；
(5)形成成品：将上述滤液直接灌装杀菌，或者浓缩干燥制粉，即形成成品。
而且，所述蛋白酶为细菌蛋白酶和菠萝蛋白酶。
而且，所述蛋白酶酶解时以0.1mol/L的NaOH滴定，并保持反应体系的pH维持恒定。
本发明的优点和积极效果是：
本发明采用复合酶水解，一方面使之达到一定的酶解程度，另一方面边酶解边对其进行修饰，以改良酶解产物花生多肽的风味，使之作为食品添加剂或营养蛋白质的原料。本发明所采用的微生物蛋白酶，与动物蛋白酶、植物蛋白酶相比具有溶解性好、活力高、专一性强的特点，能够对蛋白质进行较深程度的水解。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
一种微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法，制备方法的步骤是：
(1)制备花生蛋白：10kg低温压榨花生粕粉碎至80目以上，加入40kg水，在40℃以下温水溶解，通过0.03-0.04MPa高压喷射破乳过程5-8分钟，然后，用3mol/L的氢氧化钠调PH值6-8，于恒温水中搅拌浸提；在不高于65℃真空条件下提取，完全浸提后，将上层油吸出，再将浸提液进行离心分离得到花生蛋白质，其固形物蛋白质含量不低于85％；
(2)多肽制备：将上述的花生蛋白溶液加热90℃、15min后冷却，调解pH6-8，加入细菌蛋白酶(30000U)和菠萝蛋白酶(35000U)进行酶解，酶解时以0.1mol/L的NaOH滴定，保持反应体系的pH维持恒定，形成蛋白多肽混合液；
(3)微生物发酵：将上述(2)制备之蛋白多肽混合液加入链霉菌培养发酵，35-40℃，发酵24h，以进一步利用微生物分解蛋白质和多肽；
(4)分离：将上述(3)制备的发酵液分离菌体，并利用膜过滤的方式，除去大分子肽(蛋白)以及多糖物质；
(5)形成成品：将滤液直接灌装杀菌得液体产品46kg；或者浓缩干燥制粉，成品8.2kg。

Claims (3)

1、一种微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法，其特征在于：制备方法的步骤是：
(1)制备花生蛋白：低温压榨花生粕经过粉碎、溶解、高压喷射破乳，然后，用3mol/L的氢氧化钠调PH值6-8，于恒温水中搅拌浸提，低温真空条件下提取，完全浸提后，将上层油吸出，再将浸提液进行离心分离得到花生蛋白质；
(2)多肽制备：花生蛋白溶液加热85-95℃，10-20min后冷却至常温，调解pH6-8，加蛋白酶进行酶解，形成蛋白多肽混合液；
(3)微生物发酵：将上述蛋白多肽混合液加入链霉菌培养发酵，35-40℃，发酵20-26h；
(4)分离：将上述制备的发酵液分离菌体，并利用膜过滤的方式，除去大分子肽(蛋白)以及多糖物质；
(5)形成成品：将上述滤液直接灌装杀菌，或者浓缩干燥制粉，即形成成品。
2、根据权利要求1所述的微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法，其特征在于：所述蛋白酶为细菌蛋白酶和菠萝蛋白酶。
3、根据权利要求1所述的微生物发酵法制备花生蛋白多肽的方法，其特征在于：所述蛋白酶酶解时以0.1mol/L的NaOH滴定，并保持反应体系的pH维持恒定。
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