CN101233937A

CN101233937A - 一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法

Info

Publication number: CN101233937A
Application number: CNA2008100206263A
Authority: CN
Inventors: 杨瑞金; 卢蓉蓉; 张文斌
Original assignee: Jiangnan University
Current assignee: Jiangnan University
Priority date: 2008-02-04
Filing date: 2008-02-04
Publication date: 2008-08-06

Abstract

一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，属于生物工程和膜技术领域。本发明采用酶法水解-纳滤浓缩脱盐工艺制备泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的方法，本发明以泥鳅为原料，以1∶1比例加水，采用蛋白酶在pH3～10，30℃～60℃下进行酶解反应，蛋白酶用量为泥鳅匀浆和水总重量的1％－3％，酶解2－10h，米用pH－STAT或TNBS法控制水解度在12％～20％，反应结束后加热灭酶，离心过滤，得滤液即酶解液，酶解液用纳滤膜进行纳滤浓缩脱盐，得到泥鳅富硒活性肽营养液，再经喷雾干燥，即制得泥鳅富硒活性肽营养粉。本发明优点是处理量大、分离条件温和、流程简单及能耗较低，可实现规模化生产。

Description

一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法

技术领域

一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，具体涉及利用酶法水解以及利用纳滤膜浓缩脱盐的方法，用泥鳅蛋白制备泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉，属于生物工程和膜技术领域。

背景技术

泥鳅被誉为“水中人参”，味道鲜美，营养价值极高，蛋白质、糖类、矿物质(钙，磷，铁)和维生素(V_B，V_A，V_C)均比一般鱼虾高。蛋白质含量达到18克/100克泥鳅，有机硒含量达到35微克/100克泥鳅。自古以来，泥鳅就被人们认为具有较高的药用价值。据《医学入门》查考，泥鳅性甘、平，具“补中、止泄”之功能。《本草纲目》中记载：泥鳅有暖中益气之功效，对治疗肝炎、小儿盗汗、痔疮、皮肤瘙痒、跌打损伤、手指疔、阳痿、乳痈等症都有一定疗效。经现代医学临床验证，采取泥鳅食疗，既能强身增加体内营养，又可补中益气、护肝除黄、壮阳利尿、清热解毒、消痞散结等药用功效。综合考虑泥鳅在食品领域和医药领域的利用价值，利用其营养丰富和药用价值高的特点，可将泥鳅开发成各种保健食品。

泥鳅富硒活性肽营养液、营养粉是泥鳅蛋白水解的中间产物，泥鳅富硒活性肽营养液与泥鳅的氨基酸组成相同，但其分子量比泥鳅蛋白要小得多。因此，泥鳅富硒活性肽营养液具有良好的水溶性，优良的吸湿保湿功能，较好的酸、热稳定性。

水解蛋白富含具有多种生理活性的多肽和氨基酸，这些肽可以充分被人体吸收，补充人体所需的营养，调节机体功能，促进身体健康。随着生物技术和其它高新技术的发展，国内外对泥鳅的食用研究也越来越重视。泥鳅肉中蛋白含量占其干重的80％，氨基酸组成完善，具有很高的营养价值。据报道，泥鳅提取物具有保肝护肝、防治肝炎、增强基体免疫力等功效。因此，富含泥鳅富硒活性肽营养液的食品具有很好的营养保健价值，可以作为一种功能性食品，其研究开发也因此受到重视。

因为泥鳅的营养价值丰富，国内外对以泥鳅为原料的保健品和药品的开发刚刚开始，仅有少量粗加工的专利和研究报道，尚未能对泥鳅进行深度加工和综合利用。

膜分离技术是用天然或人工合成的高分子膜，以外界能量或化学位差为推动力，对双组分或多组分的溶质和溶剂进行分离、分级、提纯和富集的方法。此技术具有分离效率高、分离条件温和、流程简单及能耗较低，而它具有效率、设备价格、运行费用等都相差不大等优点，因此在蛋白质的浓缩、酶的分离与精制、发酵产品的分离与精制等方面应用广泛。

发明内容

本发明目的是提供一种采用酶法水解-纳滤浓缩脱盐工艺制备泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的方法。

本发明的技术方案：一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，利用酶法水解泥鳅蛋白，再用纳滤技术浓缩并脱盐，步骤为：

1)以泥鳅为原料，捣碎制备匀浆；

2)泥鳅匀浆以1∶1比例加水，采用蛋白酶在pH3～10，30-60℃下进行酶解反应，蛋白酶用量为泥鳅匀浆和水总重量的1％-3％，酶解2-10h，采用pH-STAT或TNBS法控制水解度DH为12％～20％；

3)反应结束后灭酶，离心过滤，得滤液即酶解液；

4)酶解液用纳滤膜进行纳滤脱盐及初步浓缩，得到泥鳅富硒活性肽营养液；或酶解液用纳滤膜进行纳滤脱盐浓缩，然后喷雾干燥，即制得泥鳅富硒活性肽营养粉。

酶解液的纳滤脱盐浓缩，纳滤的截留分子量为150-300Dalton。

纳滤后浓缩液进行喷雾干燥，干燥条件为：进风温度：150℃-220℃，出风温度：60℃-100℃。

制备的泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉用于直接制成胶囊、冲剂、口服液或口服含片；或作为功能性食品配料用于保健食品或普通食品的配方中。

纳滤(NF)膜是介于反渗透(RO)膜和超滤(UF)膜之间的一种膜，其膜表面孔径处于纳米级范围(10^-9米)。纳滤膜由于截留分子量介于超滤和反渗透之间，同时还存在道南(Donnan)离子效应的影响，因此对低分子量有机物和盐的分离有很好的效果，且具有不影响分离物质的生物活性、节能、无公害等特点。

粗蛋白的测定：微量凯氏定氮法。

糖原的测定：苯酚-硫酸法。

本发明的有益效果：首先采用酶法水解泥鳅蛋白，虽然传统的酸法和自溶法水解简单、便宜，但其缺点是水解度不易控制，且氨基酸破坏大。酶法水解条件温和，水解度易控制，对氨基酸破坏小，而且具有专一性。因此，采用酶法水解泥鳅蛋白，不仅可以大大提高泥鳅肽的产量，而且产品的相对分子质量可以得到控制，大大提高产品的功能性。

然后利用纳滤膜分离技术进行浓缩及脱盐，具有处理量大、分离条件温和、流程简单及能耗较低等优点，是一种高效的浓缩方法，可实现工业化生产。

附图说明

图1纳滤膜脱盐浓缩压力与渗透通量的关系。

图2纳滤膜脱盐浓缩温度与渗透通量的关系(ΔP＝0.9MPa)。

图3纳滤膜脱盐浓缩时间与渗透通量的关系(ΔP＝0.9MPa)。

具体实施方式

实施例1水解度(DH)＝18％的泥鳅富硒活性肽营养液和营养粉的制备

泥鳅肉捣碎得匀浆，以1∶1比例加水，采用酸性蛋白酶在pH3.0-4.0、40℃下进行酶解反应，酶用量为泥鳅匀浆和水总重量的1％-3％，酶解2-10h，采用TNBS法控制水解度在18％，反应结束后加热灭酶，离心过滤后，滤液用美国陶氏化学公司提供的截留分子量150Dalton的聚酰胺纳滤膜进行脱盐浓缩，在脱盐过程中不断加水稀释料液，并保持浓缩液的体积不变。脱盐后，料液经进一步浓缩即得泥鳅富硒活性肽营养液，或继续进行喷雾干燥即制得泥鳅富硒活性肽营养粉。

DH＝18％的泥鳅富硒活性肽营养液溶液纳滤浓缩实验

图1显示，随着操作压力的增大，膜两侧的压力差增加，膜的渗透通量增大，从图中看出，清水通量和酶解液通量随压力近似成线性增大，但由于浓差极化、膜面污染及膜孔堵塞等原因，水解液的渗透通量增加幅度小于清水通量的增加幅度。

图2显示，随温度升高，膜的渗透通量增大。温度高，料液粘度小，流动状态好，扩散及传质系数高，各种分子的活化能提高，减小浓差极化的影响，从而膜的渗透通量提高。

图3显示，随时间的延长，通量呈现下降趋势。初期，料液中的大分子在膜的表面迅速沉积，产生浓差极化、凝胶层、膜孔堵塞及膜吸附等现象，使透过液阻力剧增，通量骤减；然后，膜表面的沉积层逐渐增加，浓差极化及阻力加强，通量的下降趋势趋于缓和；后期，当边界层的浓度和厚度达到一定的动态后，膜通量较为稳定。产品为淡黄色粉末，复水性良好。

表1纳滤膜分离前后泥鳅富硒活性肽营养液产品的成分比较

项目	肽含量(％)	糖含量(％)	灰分(％)
项目	肽含量(％)	糖含量(％)	灰分(％)	膜分离前	62.50	6.66	7.72
膜分离后	66.09	5.36	5.76	膜分离前	62.50	6.66	7.72

实施例2水解度(DH)＝20％的泥鳅富硒活性肽营养液和营养粉的制备

泥鳅肉捣碎得匀浆，以1∶1比例加水，采用碱性蛋白酶Alcalase，于60℃、pH8.5下进行酶解反应，酶用量为泥鳅匀浆和水总重量的1％-3％，酶解2-10h，采用pH-STAT法控制水解度在20％，反应结束后加热灭酶，离心过滤后，滤液用截留分子量为300Dalton的纳滤膜进行脱盐浓缩，在脱盐过程中不断加水稀释料液，并保持浓缩液的体积不变。脱盐后，料液经进一步浓缩即得泥鳅富硒活性肽营养液，继续进行喷雾干燥即制得泥鳅富硒活性肽营养粉末。

Claims

1、一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，其特征在于利用酶法水解泥鳅蛋白，再用纳滤技术浓缩并脱盐，步骤为：

1)以泥鳅为原料，捣碎制备匀浆；

3)反应结束后灭酶，离心过滤，得滤液即酶解液；

2、根据权利要求1所述的一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，其特征在于酶解液的纳滤脱盐浓缩，纳滤的截留分子量为150-300Dalton。

3.根据权利要求1所述的一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，其特征在于纳滤后浓缩液进行喷雾干燥，干燥条件为：进风温度：150℃-220℃，出风温度：60℃-100℃。

4、权利要求1所述方法制备的泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的应用，其特征是泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉用于直接制成胶囊、冲剂、口服液或口服含片；或作为功能性食品配料用于保健食品或普通食品的配方中。