CN101057878A

CN101057878A - 一种石榴皮提取物及其制备方法

Info

Publication number: CN101057878A
Application number: CN 200710106039
Authority: CN
Inventors: 孙步祥; 汤凌志; 李�杰; 梁远胜; 杨文国; 陈振鹏; 韦兴
Original assignee: GUILIN LAIYIN BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Current assignee: GUILIN LAIYIN BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Priority date: 2007-05-30
Filing date: 2007-05-30
Publication date: 2007-10-24
Anticipated expiration: 2027-05-30
Also published as: CN100589813C

Abstract

本发明公开了一种石榴皮提取物及其制备方法，以石榴皮为原料，经低碳醇如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇等作为提取溶媒提取、浓缩、柱层析、浓缩、干燥，得到粉末状石榴皮提取物，通过对柱层析工艺的深入研究，利用工艺条件的改变和组合，从石榴皮中提取出不同含量的安石榴甙。本发明得到的石榴皮提取物为红色或红褐色，粉末状，味苦涩，其中安石榴甙的重量含量为40％以上或者98％以上。

Description

一种石榴皮提取物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种石榴皮提取物及其制备方法，具体的说，本发明涉及一种含有安石榴甙的石榴皮提取物及从石榴皮中提取安石榴甙的制备方法。

背景技术

石榴(Pomegranate)，别名：安石榴、西榴、水晶榴，为石榴科植物石榴Punica granatum L.的果实。石榴皮(Pomegranate Rind)，别名：石榴壳、酸石榴皮、安石榴酸实壳、酸榴皮、西榴皮，为石榴科植物石榴的果皮，秋季采收成熟果实，剥取果皮，晒干。石榴皮为不规则的片状或瓢状，大小不一，厚1.5～3mm，外表面红棕色、棕黄色或暗棕色，略有光泽，粗糙，有多数疣状突起，有的有突起的筒状宿萼及粗短果梗或果梗痕。内表面黄色或红棕色，有隆起呈网状的果蒂残痕，质硬而脆，断面黄色，略显颗粒状，无臭，味苦涩，性温，味酸、涩，主治：涩肠止血，驱虫、治久泻，脱肛，虫积腹痛，疥癣疔疮，汤火烫伤，霉疮肿毒，并可悦面去痤疮，牢牙固齿，乌须染发等。石榴皮中含有丰富的没食子酸、苹果酸、熊果酸、桦皮酸、异槲皮甙、安石榴甙(Punicalagin)、石榴皮素B(GranatinB)与安石榴林(Punicalin)等。石榴皮提取物的主要成分是安石榴甙(Punicalagin)，药理研究表明，石榴皮提取物有收敛作用，对痢疾杆菌、伤寒杆菌以及金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、结核杆菌及多种皮肤真菌等有抑制作用，并有抗病毒作用及对绦虫、蛔虫、肝吸虫等有驱虫致用；同时，含有安石榴甙的石榴皮提取物可用于治疗高血糖、高血压类病症及抗动脉粥样硬化、抗癌、抗肿瘤等，也可用于抗氧化、抗衰老、改善更年期综合症、皮肤美白等方面。

目前，从石榴皮中一般是提取糅花酸或多酚，如专利“申请号200510002081.X一种石榴皮制备鞣花酸的方法”，该发明公开了一种以石榴皮为原料制备鞣花酸的方法，以石榴皮为原料，经溶剂萃取、蒸发浓缩、酸化水解及结晶等过程可制备出价格昂贵的医用高纯度鞣花酸。经过专利检索，没有发现从石榴皮提取物，或者从石榴皮中提取安石榴甙的专利。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种石榴皮提取物，具体的说，是一种含有安石榴甙的石榴皮提取物。

本发明的目的之二是提供一种从石榴皮中提取安石榴甙的制备方法。

本发明所述的石榴皮提取物为红色或红褐色，粉末状，味苦涩，其中安石榴甙的重量含量为40％以上或者98％以上。

为得到不同规格的石榴皮提取物，本发明采用如下技术方案：

本发明从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，是以石榴皮为原料，通过：

原料前处理→溶媒提取→浓缩→柱层析(1)→浓缩→干燥，得到石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为40％以上；

或者，本发明从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，是以石榴皮为原料，通过：

原料前处理→溶媒提取→浓缩→离心→柱层析(1)→浓缩→稀释→柱层析(2)→浓缩→干燥，得到石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为98％以上。

本发明方法所述的原料为新鲜或干制后的石榴皮，在提取前需先将石榴皮进行清洗、破碎或粉碎。

本发明方法所述提取方法为加热提取。

本发明方法中所述提取溶媒为低碳醇，所述低碳醇为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇或丁醇，所述低碳醇的重量浓度为40％～95％；优化选择，所述低碳醇的重量浓度为50％～80％。

本发明方法所述提取方法中的加热提取，提取次数是影响收率和含量的一个关键，一般提取次数为1～3次，根据试验，综合考虑提取设备使用空间的利用率及成品的有效物含量，提取次数最好为2次；溶媒用量为原料重量的8～10倍，温度为50～90℃，提取时间为溶媒沸腾后1～3小时。

本发明所述用低碳醇提取石榴皮后需要进行回收低碳醇处理，温度控制在60℃以下，真空度控制在0.06Mpa以上，回收低碳醇的药液与原料重量比应控制在1∶2～5之间，回收的低碳醇控制在5度以内。

本发明所述的提取液，在进柱前，需经过浓缩(蒸汽压力0.15-0.30MPa，真空度控制在0.06Mpa以上，时间约1小时)、离心(离心速度：200-250Kg/h)。

本发明所述的柱层析(1)包括如下步骤：

1)将浓缩、离心后的滤液，通过柱层析，用树脂进行吸附；

2)用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为30-40％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；

3)将洗脱液浓缩，得到膏状的石榴皮提取液，再通过干燥得到粉末状的石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为40％以上。

或者：将柱层析(1)后得到的膏状提取液，再通过柱层析(2)，如下步骤：

1)向膏状的石榴皮提取液加入1-2倍重量的95％乙醇，稀释、混匀；

2)将稀释后的溶液通过柱层析，用树脂进行吸附；

3)用相当于进柱液体体积5-8倍的纯净水清洗树脂；

4)用15-25％乙醇清洗树脂，当流出液变浅红时，开始收集流出液，当流出液颜色由浅红变深红再变浅，当流出液颜色接近无色时，停止洗脱；

5)用55-70％乙醇清洗树脂，当流出液变浅红时，开始收集流出液，当流出液颜色由浅红变深再变浅，当流出液颜色接近无色时，可停止洗脱；

6)合并两次收集的流出液，浓缩，再通过干燥得到粉末状的石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为98％以上。

本发明方法柱层析过程中所述洗脱液浓缩是指，石榴皮洗脱液，经过滤，然后浓缩(真空浓缩，温度控制在60摄氏度以下，真空度0.06-0.1MPa)，浓缩至15～25婆美度左右，即浓缩至原来提取液体积的1/5-1/3，得到膏状的石榴皮提取物。

本发明所述柱层析树脂选自型号为D101、D102、AB-8或HP-20型的大孔吸附树脂、型号为HP20SS或SP20SS的小粒度合成吸附树脂。

本发明所述干燥，是指通过喷雾干燥(进风口温度180～200℃，出风口温度85～90℃)或冷冻干燥，得到粉末状石榴皮提取物。

本发明的优点在于：

●从石榴皮中一般是提取糅花酸或多酚，而本发明从石榴皮中提取出了安石榴甙；

●通过对柱层析工艺的深入研究，利用工艺条件的改变和组合，从石榴皮中提取出不同含量的安石榴甙；

●生产工艺简单、生产周期短。

本发明方法得到的含有安石榴甙的石榴皮提取物可广泛应用于抗菌、消炎、治疗高血糖、高血压类病症及抗动脉粥样硬化、抗癌、抗肿瘤等，也可用于抗氧化、抗衰老、改善更年期综合症、皮肤美白等方面。

附图说明

附图1安石榴甙(98％)的HPLC图谱。

附图2安石榴甙(40％)的HPLC图谱。

附图3安石榴甙(Punicalagin)的化学结构。

具体实施方式

实施例1

1)前处理：将新鲜的石榴果皮清洗、破碎；

2)提取：将破碎后的石榴果皮置于8倍量40％甲醇中于80℃提取2次，提取过程中不时搅拌，加热至沸腾后保持温度2小时，收取第一次提取料液，第二次提取再加入10倍量的40％甲醇，加热沸腾保温2小时，收取第二次提取料液；

3)浓缩、过滤：将提取液浓缩、离心过滤；

4)将浓缩、离心后的滤液，通过柱层析，用型号为D101型树脂进行吸附；

5)用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为40％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；

6)将洗脱液浓缩，得到膏状的石榴皮提取液，再通过干燥得到粉末状的石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为40％以上。

实施例2

1)前处理：将干制后的石榴果皮清洗、粉碎；

2)提取：将破碎后的石榴果皮置于10倍量65％乙醇中于80℃提取2次，提取过程中不时搅拌，加热至沸腾后保持温度2小时，收取第一次提取料液，第二次提取再加入8倍量的65％乙醇，加热沸腾保温2小时，收取第二次提取料液；

3)浓缩、过滤：将提取液浓缩、离心过滤；

4)将浓缩、离心后的滤液，通过柱层析，用型号为HP20SS的小粒度合成吸附树脂进行吸附；

5)用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为35％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；

实施例3

1)前处理：将干制后的石榴果皮清洗、粉碎；

3)将浓缩、离心后的提取液，通过柱层析，用型号为HP20SS的小粒度合成吸附树脂进行吸附；

4)用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为30％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；

5)将洗脱液浓缩，得到膏状的石榴皮提取液，加入2倍重量的95％乙醇，稀释、混匀；

6)将稀释后的溶液通过柱层析，用型号为HP20SS树脂进行吸附；

7)用相当于进柱液体体积8倍的纯净水清洗树脂，然后用15％乙醇清洗树脂，当流出液变浅红时，开始收集流出液，当流出液颜色由浅红变深红再变浅，当流出液颜色接近无色时，停止洗脱；

8)用70％乙醇清洗树脂，当流出液变浅红时，开始收集流出液，当流出液颜色由浅红变深再变浅，当流出液颜色接近无色时，可停止洗脱；

9)合并两次收集的流出液，浓缩，再通过干燥得到粉末状的石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为98％以上。

实施例4

1)前处理：将新鲜的石榴果皮清洗、破碎；

2)提取：将破碎后的石榴果皮置于8倍量95％丙醇中于90℃提取1次，提取过程中不时搅拌，加热至沸腾后保持温度3小时，收取提取料液；

3)将浓缩、离心后的提取液，通过柱层析，用型号为SP20SS的小粒度合成吸附树脂进行吸附；

4)用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为35％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；

5)将洗脱液浓缩，得到膏状的石榴皮提取液，加入1倍重量的95％乙醇，稀释、混匀；

6)将稀释后的溶液通过柱层析，用型号为SP20SS树脂进行吸附；

7)用相当于进柱液体体积8倍的纯净水清洗树脂，然后用25％乙醇清洗树脂，当流出液变浅红时，开始收集流出液，当流出液颜色由浅红变深红再变浅，当流出液颜色接近无色时，停止洗脱；

8)用55％乙醇清洗树脂，当流出液变浅红时，开始收集流出液，当流出液颜色由浅红变深再变浅，当流出液颜色接近无色时，可停止洗脱；

实施例5

1)前处理：将干制后的石榴果皮清洗、粉碎；

2)提取：将粉碎后的石榴果皮置于8倍量80％丁醇中于90℃提取1次，提取过程中不时搅拌，加热至沸腾后保持温度3小时，收取提取料液；

3)将浓缩、离心后的提取液，通过柱层析，用型号为AB-8的大孔吸附树脂进行吸附；

6)将稀释后的溶液通过柱层析，用型号为AB-8的大孔吸附树脂进行吸附；

Claims

1、一种从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，其特征在于：以石榴皮为原料，经提取溶媒提取、浓缩、柱层析(1)、浓缩、干燥，得到粉末状石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为40％以上。

2、如权利要求1所述从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，包括如下步骤：

1)前处理：将原料进行清洗、破碎或粉碎；

2)提取：将破碎后的原料置于原料重量8～10倍的提取溶媒中提取1～3次，温度为50～90℃；

3)浓缩、过滤：将提取液浓缩、离心过滤；

4)将浓缩、离心后的滤液，通过柱层析，用树脂进行吸附；

5)用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为40％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到膏状的石榴皮提取液；

6)干燥：得到粉末状的石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为40％以上。

3、一种从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，其特征在于：以石榴皮为原料，经提取溶媒提取、浓缩、柱层析(1)、浓缩、稀释、柱层析(2)、浓缩、干燥，得到粉末状石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为98％以上。

4、如权利要求3所述从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，包括如下步骤：

1)前处理：将原料进行清洗、破碎或粉碎；

3)浓缩、过滤：将提取液浓缩、离心过滤；

4)将浓缩、离心后的滤液，通过柱层析，用树脂进行吸附，然后，用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为40％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到膏状的石榴皮提取液；

5)向膏状的石榴皮提取液加入1-2倍重量的95％乙醇，稀释、混匀；

6)将稀释后的溶液再次通过柱层析，用树脂进行吸附，用相当于进柱液体体积5-8倍的纯净水清洗树脂；

7)用15-25％乙醇清洗树脂，当流出液变浅红时，开始收集流出液，当流出液颜色由浅红变深红再变浅，当流出液颜色接近无色时，停止洗脱；

8)用55-70％乙醇清洗树脂，当流出液变浅红时，开始收集流出液，当流出液颜色由浅红变深再变浅，当流出液颜色接近无色时，可停止洗脱；

9)收集柱层析的流出液，浓缩，得到膏状的石榴皮提取液；

10)干燥：得到粉末状的石榴皮提取物，其中安石榴甙的重量含量为98％以上。

5、如权利要求1至4任一所述从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，其特征在于：所述的原料为新鲜或干制后的石榴皮。

6、如权利要求1或4任一所述从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，其特征在于：所述提取溶媒为低碳醇，所述低碳醇为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇或丁醇。

7、如权利要求6所述从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，其特征在于：所述低碳醇的重量浓度为40％～95％。

8、如权利要求7所述从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，其特征在于：所述低碳醇的重量浓度为50％～80％。

9、如权利要求1或4任一所述从石榴皮中提取石榴皮提取物的方法，其特征在于：所述柱层析树脂选自型号为D101、D102、AB-8或HP-20型的大孔吸附树脂、型号为HP20SS或SP20SS的小粒度合成吸附树脂。

10、一种石榴皮提取物，其特征在于：由权利要求1或3所述提取方法得到，提取物为粉末状，为红色或红褐色，味苦涩，其中安石榴甙的重量含量为40％以上或者98％以上。