CN101010423A - 生产l-谷氨酸的微生物和生产l-谷氨酸的方法 - Google Patents

生产l-谷氨酸的微生物和生产l-谷氨酸的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101010423A
CN101010423A CNA2005800298560A CN200580029856A CN101010423A CN 101010423 A CN101010423 A CN 101010423A CN A2005800298560 A CNA2005800298560 A CN A2005800298560A CN 200580029856 A CN200580029856 A CN 200580029856A CN 101010423 A CN101010423 A CN 101010423A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ala
gly
leu
val
glu
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA2005800298560A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101010423B (zh
Inventor
平野圣子
山口美喜子
中村纯
伊藤久生
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ajinomoto Co Inc
Original Assignee
Ajinomoto Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ajinomoto Co Inc filed Critical Ajinomoto Co Inc
Publication of CN101010423A publication Critical patent/CN101010423A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101010423B publication Critical patent/CN101010423B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/14Glutamic acid; Glutamine
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0008Oxidoreductases (1.) acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2)
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/08Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及具有L-谷氨酸生产能力的棒状杆菌型细菌,其至少以与非突变菌株或野生型菌株相同的生长速率生长,而且其具有的胞内α-酮戊二酸脱氢酶活性小于非突变或野生型菌株的一半,并通过将突变引入到染色体odhA基因的编码区或表达控制区而获得,所述染色体odhA基因编码α-酮戊二酸脱氢酶复合物的Elo亚基。

Description

生产L-谷氨酸的微生物和生产L-谷氨酸的方法
技术领域
本发明涉及生产L-谷氨酸的微生物和利用所述微生物生产L-谷氨酸的方法。L-谷氨酸广泛用于食品工业,例如,作为生产调味品的原料。
相关技术简述
已通过发酵方法利用生产L-谷氨酸的棒状杆菌型细菌如属于短杆菌属(Brevibacterium)和棒杆菌属(Corynebacterium)的细菌以工业规模常规生产L-谷氨酸。为了提高棒状杆菌型细菌的L-谷氨酸生产能力,将从自然界分离的菌株或这些菌株的人工突变体用作生产L-谷氨酸的棒状杆菌型细菌。
已经报导了许多使用重组DNA技术,通过增强L-谷氨酸生物合成酶活性而提高L-谷氨酸生产能力的技术。例如,已报导了具有扩增的柠檬酸合酶基因的棒状杆菌型细菌(JP07-121228B),和具有扩增的谷氨酸脱氢酶基因的棒状杆菌型细菌(EP955368)。
在物质的发酵生产中,维持细菌细胞的充分生长以充分生产目标物质是有必要的。相应地,培育目标物质的生物合成增强的菌株而不引起细菌生长下降是有必要的。在L-谷氨酸的生产中,已报导降低α-酮戊二酸脱氢酶活性是有利的(JP06-237779A和WO95/34672)。然而,还没有降低α-酮戊二酸脱氢酶活性同时维持足够的L-谷氨酸生产水平的报导。
发明内容
本发明的目的是提供提高棒状杆菌型细菌的L-谷氨酸生产能力的技术,所述棒状杆菌型细菌用于L-谷氨酸的发酵生产。当α-酮戊二酸脱氢酶基因被破坏时,通过TCA循环产生的能量减少,导致细菌生长的阻滞。结果,可能无法获得足够的L-谷氨酸产率。
因此,降解L-谷氨酸的能力降低同时维持正常的生长速率的突变菌株可用于有效地生产L-谷氨酸。通过将突变引入到编码棒状杆菌型细菌α-酮戊二酸脱氢酶复合物的E1o亚基的染色体odhA基因而获得了突变菌株,所述突变菌株具有降低的α-酮戊二酸脱氢酶活性,并且保持了几乎与野生型菌株相同的生长速率。发现利用这样的突变菌株有效地生产L-谷氨酸。
本发明的目的是提供生产L-谷氨酸的棒状杆菌型细菌,其包含
a)胞内α-酮戊二酸脱氢酶活性,该活性小于非突变或野生型菌株的一半,和
b)在染色体odhA基因的编码区或表达控制区中的突变,所述染色体odhA基因编码α-酮戊二酸脱氢酶复合物的E1o亚基,
其中所述细菌几乎以与非突变或野生型菌株相同的生长速率生长。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述odhA基因编码选自下组的蛋白质:
(A)包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的蛋白质,
(B)包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的蛋白质,其中在所述蛋白质中取代、缺失、插入、或添加了一个或几个氨基酸,并且其中所述蛋白质具有α-酮戊二酸脱氢酶复合物的E1o亚基的活性,
(C)包含SEQ ID NO:10的氨基酸37至1257的蛋白质,和
(D)包含SEQ ID NO:10的氨基酸37至1257的蛋白质,其中在所述蛋白质中取代、缺失、插入、或添加了一个或几个氨基酸,并且其中所述蛋白质具有α-酮戊二酸脱氢酶复合物的E1o亚基的活性。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述几个氨基酸是2至20个氨基酸。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述odhA基因选自下组:
(a)包含SEQ ID NO:9的核苷酸443至4213的基因,
(b)能够在严紧条件下与以下物质杂交的基因:包含SEQ ID NO:9的核苷酸443至4213的多核苷酸或由包含SEQ ID NO:9的核苷酸443至4213的多核苷酸制备的探针,并且其中所述基因编码蛋白质,该蛋白质具有α-酮戊二酸脱氢酶复合物的E1o亚基的活性,
(c)包含SEQ ID NO:9的核苷酸551至4213的基因,和
(d)能够在严紧条件下与以下物质杂交的基因:包含SEQ ID NO:9的核苷酸551至4213的多核苷酸或由包含SEQ ID NO:9的核苷酸551至4213的多核苷酸制备的探针,并且其中所述基因编码蛋白质,该蛋白质具有α-酮戊二酸脱氢酶复合物的E1o亚基的活性。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述突变被引入到编码焦磷酸硫胺素结合区的区域。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述突变包括氨基酸的缺失,所述氨基酸从下组选择:SEQ ID NO:10所示氨基酸序列中686位的Gly、687位的Leu、688位的Gly、713位的Asn、714位的Asn及其组合。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述突变被引入到包含SEQ ID NO:9的核苷酸2534至2548的区域。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述突变包括在包含SEQ ID NO:10的氨基酸698至702的区域中缺失一个或多个氨基酸。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述突变包括氨基酸的替换,所述氨基酸从下组选择:SEQ ID NO:10所示氨基酸序列中698位的Lys、699位的Leu、700位的Arg、702位的Tyr、及其组合。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述突变被引入到包含SEQ ID NO:9的核苷酸1094至1111的区域。
本发明的又一目的是提供如上所述的棒状杆菌型细菌,其中所述突变包括在包含SEQ ID NO:10的氨基酸218至224的区域中缺失一个或多个氨基酸。
本发明的又一目的是提供生产L-谷氨酸的方法,包括:
a)在培养基中培养根据权利要求1的棒状杆菌型细菌和
b)从培养基和/或所述细菌收集L-谷氨酸。
本发明的又一目的是提供编码突变的α-酮戊二酸脱氢酶的基因,所述基因选自下组:
(a)包含从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4213的基因,或者包含从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4210的基因,
(b)能够在严紧条件下与以下物质杂交的基因:包含从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4213的多核苷酸、包含从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4210的多核苷酸、由从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4213制备的探针、或由从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4210制备的探针,并且其中所述基因编码具有α-酮戊二酸脱氢酶活性的蛋白质,通过与E2o和E3亚基形成复合物,该蛋白质的α-酮戊二酸脱氢酶活性小于野生型或非突变菌株的α-酮戊二酸脱氢酶活性的一半,
(c)包含从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4213的基因,或者包含从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4210的基因,和
(d)能够在严紧条件下与以下物质杂交的基因:包含从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4213的多核苷酸、包含从SEQ JD NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4210的多核苷酸、由从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4213制备的探针、或由从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4210制备的探针,并且其中所述基因编码具有α-酮戊二酸脱氢酶活性的蛋白质,通过与E2o和E3亚基形成复合物,该蛋白质的α-酮戊二酸脱氢酶活性小于野生型或非突变菌株的α-酮戊二酸脱氢酶活性的一半。
本发明的又一目的是提供突变的α-酮戊二酸脱氢酶,其选自下组:
(a)从SEQ ID NO:12、14、16、45、47和49组成的组中选择的蛋白质,
(b)从SEQ ID NO:12、14、16、45、47和49组成的组中选择的蛋白质,其中在所述蛋白质中取代、缺失或添加了一个或几个氨基酸,并且其中通过与E2o和E3亚基形成复合物,所述蛋白质显示的α-酮戊二酸脱氢酶活性小于野生型或非突变菌株的α-酮戊二酸脱氢酶活性的一半,
(c)包含从SEQ ID NO:12、45、47和49组成的组中选择的氨基酸序列的氨基酸37至1256的蛋白质,包含氨基酸序列SEQ ID NO:14的氨基酸37至1255的蛋白质,或者包含氨基酸序列SEQ ID NO:16的氨基酸37至1254的蛋白质,和
(d)包含从SEQ ID NO:12、45、47和49组成的组中选择的氨基酸序列的氨基酸37至1256的蛋白质,包含氨基酸序列SEQ ID NO:14的氨基酸37至1255的蛋白质,或者包含氨基酸序列SEQ ID NO:16的氨基酸37至1254的蛋白质,其中在所述蛋白质中取代、缺失、或添加了一个或几个氨基酸,并且其中通过与E2o和E3亚基形成复合物,所述蛋白质显示的α-酮戊二酸脱氢酶活性小于野生型或非突变菌株的α-酮戊二酸脱氢酶活性的一半。
附图说明
图1显示质粒pBS3的构建。
图2显示质粒pBS4S的构建。
图3显示质粒pBSOAGN的构建。
图4显示质粒pBSOA2-2的构建。
图5显示培养各菌株时L-谷氨酸浓度的变化。
图6显示各菌株的生长速率。
图7显示培养各菌株时残糖(residual sugar)量的变化。
优选实施方案的说明
以下将详细描述本发明。
<1>本发明的棒状杆菌型细菌
本发明的棒状杆菌型细菌具有生产L-谷氨酸的能力,并且几乎以与非突变菌株或野生型菌株相同的生长速率生长。通过将突变引入到odhA基因的编码区或表达控制区,本发明的棒状杆菌型细菌所具有的胞内α-酮戊二酸脱氢酶(以下也称为″α-KGDH″)活性小于非突变菌株或野生型菌株的活性的一半,所述odhA基因编码α-KGDH复合物的E1o亚基。
α-KGDH也称为酮戊二酸脱氢酶或2-酮戊二酸脱氢酶。
在本发明中,棒状杆菌型细菌的例子包括常规的棒状杆菌型细菌,也包括曾经分类为短杆菌属但目前分类为棒杆菌属的细菌(Int.J.Syst.Bacteriol.,41,255(1991)),以及非常接近棒杆菌属细菌的短杆菌属细菌。这样的棒状杆菌型细菌的例子包括下述的细菌。
嗜乙酰乙酸棒杆菌(Corynebacterium acetoacidophilum)
醋谷棒杆菌(Corynebacterium acetoglutamicum)
烷醇棒杆菌(Corynebacterium alkanolyticum)
美棒杆菌( Corynebacterium callunae)
谷氨酸棒杆菌(Coynebacterium glutamicum)
百合花棒杆菌(Corynebacterium lilium)
栖糖蜜棒杆菌(Corynebacterium melassecola)
嗜热产氨棒杆菌(Corynebacterium thermoaminogenes)(Corynebacteriumefficiens)
力士棒杆菌(Corynebacterium herculis)
二歧短杆菌(Brevibacterium divaricatum)
黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)
Brevibacterium immariophilum
乳发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)(谷氨酸棒杆菌)
玫瑰色短杆菌(Brevibacterium roseum)
解糖短杆菌(Brevibacterium saccharolyticum)
生硫短杆菌(Brevibacterium thiogenitalis)
产氨棒杆菌(Corynebacterium ammoniagenes)
白色短杆菌(Brevibacterium album)
蜡状短杆菌(Brevibacterium cerinum)
嗜氨微杆菌(Microbacterium ammoniaphilum)
棒状杆菌型细菌的具体实例如下:
嗜乙酰乙酸棒杆菌ATCC13870
醋谷棒杆菌ATCC15806
烷醇棒杆菌ATCC21511
美棒杆菌ATCC15991
谷氨酸棒杆菌ATCC13020,ATCC13032,ATCC13060,ATCC13869
百合花棒杆菌ATCC15990
栖糖蜜棒杆菌ATCC17965
Corynebacterium efficiens AJ12340(FERM BP-1539)
力士棒状杆菌ATCC13868
二歧短杆菌ATCC14020
黄色短杆菌ATCC13826,ATCC14067,AJ12418(FERM BP-2205)
Brevibacterium immariophilum ATCC14068
乳发酵短杆菌(谷氨酸棒杆菌)ATCC13869
玫瑰色短杆菌ATCC13825
解糖短杆菌ATCC14066
生硫短杆菌ATCC19240
产氨棒杆菌ATCC6871,ATCC6872
白色短杆菌ATCC15111
蜡状短杆菌ATCC15112
嗜氨微杆菌ATCC15354。
这些菌株可从美国典型培养物保藏中心(ATCC,地址:P.O.Box1549,Manassas,VA 20108,United States ofAmerica)获得。即,给予每个菌株唯一的登记号,该登记号列于ATCC的目录中。可以使用此登记号来定购菌株。根据布达佩斯条约的规定,将AJ12340菌株于1989年10月27日保藏在通商产业省工业技术院生命工学工业技术研究所(the National Institute of Bioscienceand Human-Technology,Agency of Industrial Science and Technology,Ministryof International Trade and Industry)(目前为,独立行政法人产业技术综合研究所特许微生物保藏中心(International Patent Organism Depositary,NationalInstitute of Advanced Industrial Science and Technology),地址为TsukubaCentral 6,1-1,Higashi 1-chome,Tsukuba-shi,Ibaraki-ken,305-5466,日本),并给予登记号FERM BP-1539。根据根据布达佩斯条约的规定,于1989年1月5日将AJ12418菌株保藏在通商产业省工业技术院生命工学工业技术研究所,并给予登记号FERM BP-2205。
在本发明中,″L-谷氨酸生产能力″指当在培养基中培养本发明的棒状杆菌型细菌时,导致在培养基中累积足够量的L-谷氨酸的能力。L-谷氨酸生产能力可以是培育本发明的棒状杆菌型细菌的亲本株的特性,或者是通过突变、基因重组等等所赋予或增强的特性。另外,可以通过向编码α-酮戊二酸脱氢酶复合物的E1o亚基的odhA基因中引入突变而赋予L-谷氨酸生产能力。
赋予L-谷氨酸生产能力的方法的例子包括增强编码L-谷氨酸生物合成酶的基因的表达。涉及L-谷氨酸生物合成的酶的例子包括谷氨酸脱氢酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸合成酶、异柠檬酸脱氢酶、乌头酸水合酶、柠檬酸合酶、磷酸烯醇丙酮酸羧化酶、丙酮酸羧化酶、丙酮酸脱氢酶、丙酮酸激酶、磷酸烯醇丙酮酸合酶、烯醇化酶、磷酸甘油酸变位酶、磷酸甘油酸激酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、磷酸丙糖异构酶、果糖二磷酸醛缩酶、磷酸果糖激酶、和磷酸葡糖异构酶。
这些基因表达的增强可以通过将包含这种基因的DNA片段整合到能够在棒状杆菌型细菌中自主复制的适当质粒中,并用所得质粒转化细菌细胞;通过同源重组、接合(conjugation)、移位(transposition)等等将这种基因整合到染色体中;或者将突变引入这种基因的启动子区来实现(WO/0018935)。
当上述基因通过质粒引入或者被整合在染色体上时,用于所述基因表达的启动子可以是任何启动子,只要它能够在棒状杆菌型细菌中起作用。这种启动子的例子包括lac启动子、trp启动子、trc启动子、PS2启动子、和pL启动子。也可以使用所述基因的天然启动子。
经修饰而使柠檬酸合成酶基因、磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因、和/或谷氨酸脱氢酶基因表达增强的微生物的例子包括JP2001-333769A(EP1078989A)、JP2000-106869A  (EP955368A)、JP2000-189169A  (EP952221A)、和JP2001-333769A (EP1078989A)中公开的那些微生物。
赋予L-谷氨酸生产能力的修饰包括减小或消除酶的活性,所述酶催化合成除L-谷氨酸之外的化合物并由L-谷氨酸生物合成途径分支的反应。这些酶的例子包括异柠檬酸裂解酶、乙酰磷酸转移酶、乙酸激酶、乙酰羟酸合酶、乙酰乳酸合酶、乙酰甲酸转移酶、乳酸脱氢酶、谷氨酸脱羧酶、和1-焦磷酸脱氢酶。
为了减小或消除上述酶的活性,可以将导致酶活性减小或丧失的突变或缺失引入到染色体上酶的基因中。这可以通过例如破坏染色体上编码酶的基因,或者通过修饰基因的表达控制序列如启动子和/或Shine Dargarno(SD)序列来实现。此外,可以通过引入导致氨基酸取代的错义突变、产生终止密码子的无义突变、或者在编码区中添加或缺失一个或两个核苷酸的移码突变、或者通过缺失基因的一部分来减小或消除这些酶的活性(Journal of biologicalChemistry 272:8611-8617(1997))。另外,可以通过构建其编码区被缺失的编码突变酶的基因,并通过同源重组用所得基因替换染色体基因来减小或消除这些酶的活性。
也可以通过筛选对有机酸类似物或呼吸作用抑制剂有抗性的菌株,或者通过筛选对细胞壁合成抑制剂敏感的菌株来赋予L-谷氨酸生产能力。这些方法的例子包括赋予对于苯并吡喃酮(benzopirone)或萘醌(Naphtoquinone)的抗性(JP56-1889A)、赋予对于HOQNO的抗性(JP56-140895A)、赋予对于α-酮丙二酸的抗性(JP57-2689A)、赋予对于胍的抗性(JP56-35981A)、和赋予对于青霉素的敏感性(JP04-88994A)。
这些细菌的具体例子包括下述菌株。
黄色短杆菌AJ11355(FERMP-5007;JP56-1889A)
谷氨酸棒杆菌AJ11355(FERMP-5020;JP56-1889A)
黄色短杆菌AJ1217(FERMP-4318;JP57-2689A)
谷氨酸棒杆菌AJ11218(FERMP-4319;JP57-2689A)
黄色短杆菌AJ11564(FERMP-5472;JP56-140895A)
黄色短杆菌AJ11439(FERMP-5136;JP56-35981A)
谷氨酸棒杆菌H7684(FERMBP-3004;JP04-88994A)
本发明的棒状杆菌型细菌可以通过向编码α-KGDH复合物E1o亚基的染色体odhA基因引入突变,并挑选几乎以与非突变菌株或野生型菌株相同的生长速率生长,其显示的α-KGDH活性小于非突变菌株或野生型菌株的活性的一半的那些菌株,从如前所述具有L-谷氨酸生产能力的棒状杆菌型细菌获得。或者,可以首先将这种突变引入到odhA基因,之后赋予L-氨基酸生产能力。
本发明中,α-KDGH活性指催化α-酮戊二酸(2-酮戊二酸)的氧化脱羧反应,产生丁二酰-CoA的活性。上述反应由α-KDGH复合物催化,所述α-KDGH复合物包括三种亚基,即α-酮戊二酸脱氢酶(E1o,ECl.2.4.2)、二氢硫辛酰胺-S-琥珀酰转移酶(E2o,EC:2.3.1.61)、和二氢硫辛酰胺脱氢酶(E3,EC:1.8.1.4)。也就是说,这三种亚基催化下述各个反应:
E1o亚基:
2-酮戊二酸+[二氢硫辛酰赖氨酸-残基琥珀酰转移酶]硫辛酰赖氨酸=[二氢硫辛酰赖氨酸-残基琥珀酰转移酶]S-琥珀酰二氢硫辛酰赖氨酸+CO2
E2o亚基:
CoA+酶N6-(S-琥珀酰二氢硫辛酰)赖氨酸=丁二酰-CoA+酶N6-(二氢硫辛酰)赖氨酸
E3亚基:
蛋白质N6-(二氢硫辛酰)赖氨酸+NAD+=蛋白质N6-(硫辛酰)赖氨酸+NADH+H+
″α-KDGH复合物″的活性指催化以上三种反应的总反应的活性。
在大肠杆菌(Escherichia coli)中,这三种亚基形成复合物。
在棒状杆菌型细菌的情况中,E1o亚基由odhA基因编码,E3亚基由lpd基因编码(GenBank登录号Y16642;SEQ ID NO:17)。E2o亚基是作为双功能蛋白与E1o亚基一起由odhA基因编码(Usuda et al.,Microbiology 1996 142,3347-3354),还是由GenBank数据库中登记为登录号NC_003450的NCg12126(SEQ ID NO:27)的单独基因所编码存在争议。因此,除了E1o亚基之外,odhA基因可编码E2o亚基。
本发明的棒状杆菌型细菌在染色体odhA基因中具有突变。odhA基因包括,例如,具有编码SEQ ID NO:10所示氨基酸序列的核苷酸序列的基因。odhA基因还包括例如具有编码SEQ ID NO:51所示氨基酸序列的核苷酸序列的基因。此外,尽管SEQ ID NO:9的核苷酸序列中551至553位的″gtg″是Val的密码子,但有可能翻译为Met,并可在该密码子启动翻译。因此,odhA基因还包括具有编码SEQ ID NO:10的氨基酸37至1257的氨基酸序列的核苷酸序列的基因。另外,odhA基因还可以是编码具有SEQ ID NO:10或51所示氨基酸序列,或SEQ ID NO:10的氨基酸37至1257的氨基酸序列的蛋白质的基因,其包括一个或几个氨基酸的取代、缺失、插入或添加,只要其显示α-KGDH复合物E1o亚基的活性。E1o亚基本身的活性可以用Massey etal.(Biochim.Biophys.Acta 38,447-460)的方法测定。此处所用″几个″优选为2至20个,更优选2至10个,特别优选2至5个。
更具体地,odhA基因优选具有SEQ ID NO:9的核苷酸443至4213的核苷酸序列,或SEQ ID NO:9的核苷酸551至4213的核苷酸序列。odhA基因可以具有SEQ ID NO:50所示的核苷酸序列。另外,由于odhA基因的核苷酸序列在棒状杆菌型细菌的菌种或菌株之间可以有所不同,因而odhA基因可以为在严紧条件下与具有SEQ ID NO:9核苷酸443至4213的核苷酸序列的多核苷酸、具有SEQ ID NO:50所示核苷酸序列、或SEQ ID NO:9的核苷酸551至4213的核苷酸序列的多核苷酸、或者由所述核苷酸序列制备的探针杂交的基因,只要所述基因编码的蛋白质显示α-KGDH复合物E1o亚基的活性。如此处所用的″严紧条件″为在此条件下形成所谓的特异性杂合体且不形成非特异性杂合体的条件。难以用任何的数值清楚地表示此条件。然而,严紧条件的例子包括在其条件下,DNA于Southern杂交通常洗涤的盐浓度下互相杂交的条件,即在1×SSC、0.1%SDS在60℃,优选0.1×SSC、0.1%SDS在60℃,更优选0.1×SS℃、0.1%SDS在68℃洗涤一次或优选2-3次。
本发明中,″突变被引入到染色体odhA基因中″包括其中染色体上的odhA基因被突变的odhA基因替换而产生基本相同的条件的情况,在该条件中突变被直接引入到染色体odhA基因中。
上述突变不仅可以在编码区引入,还可以在odhA基因的表达控制区引入。表达控制区包括,例如启动子、SD序列、和操纵子。odhA基因的表达控制区包括SEQ ID NO:9的核苷酸1至442的核苷酸序列。odhA基因的表达控制序列也可以通过基因分析软件如GENETYX或者通过GoIdstein et al.(Prokaryotic promoters in biotechnology.Biotechnol.Annu.Rev.,1995,1,105-128)中公开的方法鉴定。
″α-KGDH活性小于非突变或野生型菌株的α-KGDH活性的一半″优选指培养4小时的本发明棒状杆菌型细菌的每单位细胞(每单位蛋白质重量)的α-KGDH活性小于在相同条件下培养的棒状杆菌型细菌的非突变菌株或野生型菌株活性的一半。这种α-KGDH活性减小的棒状杆菌型细菌的例子包括其中每个细胞的α-KGDH分子数目减少的细菌,和其中每个α-KGDH分子的活性减小的细菌。用作对照的野生型棒状杆菌型细菌的例子包括乳发酵短杆菌ATCC13869菌株。本发明的棒状杆菌型细菌的胞内α-KGDH活性优选小于非突变或野生型菌株所述活性的40%,更优选小于其30%。虽然α-KGDH活性可以降低到不可检测的水平,但优选没有完全消除该活性。可以用Shiio et al.的方法(Isamu Shiio and Kyoko Ujigawa-Takeda,Agric.Biol.Chem.,44(8),1897-1904,1980)测定α-KGDH活性(α-KGDH复合物的活性)。
作为胞内α-KGDH活性减小的结果,棒状杆菌型细菌的L-谷氨酸生产能力提高。本发明中,″提高L-谷氨酸生产能力″优选指当在培养基中培养已在odhA基因中引入突变的棒状杆菌型细菌菌株时,由突变的棒状杆菌型细菌累积在培养基中的L-谷氨酸量大于由野生型或非突变菌株累积的量,或者突变的棒状杆菌型细菌生产L-谷氨酸的速率高于野生型或非突变菌株的生产速率。
短语“与野生型菌株或非突变菌株相比,细菌几乎以相同的生长速率生长”优选指本发明的细菌几乎以与野生型菌株如乳发酵短杆菌ATCC13869相同的生长速率生长。此处,″几乎以相同的生长速率″指野生型或非突变菌株生长速率的80%或更高,更优选90%、或更优选95%或更高。本发明的棒状杆菌型细菌在任何培养温度下都几乎以与野生型或非突变菌株相同的生长速率生长不是必需的。也就是说,在低温下显示足够的生长速率但在高温下显示降低的生长速率的棒状杆菌型细菌,如实施例中所示的GN-2-2菌株也包括于本发明的棒状杆菌型细菌中。
例如,可以通过在培养基中接种相同数目的各菌株的细胞,并在预定时间后比较活细胞数来比较本发明的菌株和野生型或非突变菌株的生长速率。当使用液体培养基时,可以根据例如预定时间后600nm波长的光密度(OD)或细菌细胞的重量计算活细胞数目。当使用固体培养基如平板培养基时,可以根据预定时间后出现的菌落数计算活细胞数目。
向染色体上的odhA基因引入突变的方法的例子包括用X-射线或紫外线照射棒状杆菌型细菌,以及用诱变剂如N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍处理棒状杆菌型细菌。也可以通过制备突变的odhA基因,并通过同源重组技术用此突变的odhA基因替换染色体odhA基因将突变引入到染色体上的odhA基因中。这种突变的odhA基因可以通过易错PCR、DNA改组、或StEP-PCR(FirthAE,Patrick WM;Bioinformatics.2005 Jun 2;Statistics of protein libraryconstruction.),或重叠-延伸PCR(overlap-extension PCR)(Urban,A.,Neukirchen,S.and Jaeger,K.E.,A rapid and efficient method for site-directedmutagenesis using one-step overlap extension PCR.Nucleic Acids Res,25,2227-8.(1997))制备。
同源重组可以通过使用线性DNA的称为″Red-驱动的整合(Red-drivenintegration)″的方法(Datsenko,K.A.,PNAS,97(12),6640-6645,2000),或者通过使用具有温度敏感性复制起点的质粒的方法(USP6303383,和JP05-007491A)来进行。向染色体odhA基因引入突变也可以通过使用不能在棒状杆菌型细菌细胞中复制的质粒或能够通过接合转移到棒状杆菌型细菌的质粒来进行。
用于棒状杆菌型细菌的这种温度敏感性质粒的例子包括p48K和pSFKT2(JP2000-262288A)、pHSC4(法国专利Laid-open公布号2667875,1992和JP5-7491A)、pBS5T等等。这些质粒在棒状杆菌型细菌中可以在至少25℃的温度自主复制,但不能在37℃的温度自主复制。含有pHSC4的AJ12571菌株依据布达佩斯条约的规定于1991年8月26日保藏在通商产业省工业技术院生命工学工业技术研究所(National Institute of Bioscience and HumanTechnology,Agency of Industrial Science and Technology,Ministry ofInternational Trade and Industry)(目前为产业技术综合研究所特许微生物保藏中心International Patent Organism Depositary,National Institute of AdvancedIndustrial Science and Technology,其地址为Tsukuba Central 6,1-1,Higashi1-chome,Tsukuba-shi,Ibaraki-ken 305-5466,Japan),给予保藏号FERMBP-3524。
不能在棒状杆菌型细菌细胞中复制的质粒优选为可在埃希氏菌属的细菌细胞中复制的质粒,其例子包括pHSG299(Takara Bio)和pHSG399(TakaraBio)。能够通过接合转移到棒状杆菌型细菌的质粒的例子包括pK19mobsacB(J.Bacteriology 174:5462-65(1992))。
将突变的odhA基因插入到温度敏感性质粒或者不能在棒状杆菌型细菌中复制的质粒中,所获得的重组质粒用于转化棒状杆菌型细菌。转化可以通过常规方法进行。例如,可以使用用氯化钙处理感受体细胞以增加DNA通透性的方法,其已报导用于大肠杆菌(Mandel,M.and Higa,A.,J.MoI.Biol.,53,159(1970)),和使用从生长细胞制备的感受态细胞以引入DNA的方法,其已报导用于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)(Duncan,C.H.,Wilson,G.A.andYoung,RE.,Gene,1,153(1977))。除了这些方法外,还可以使用将重组DNA引入到原生质体-样或原生质球-样(protoplast-or spheroplast-like)受体细胞中的方法,其已报导可用于枯草芽孢杆菌、放线菌类(actinomytetes)和酵母(Chang,S.and Choen,S.N.,Molec.Gen.Genet.,168,111(1979);Bibb,M.J.,Ward,J.M.and Hopwood,O.A.,Nature,274,398(1978);Hinnen,.A.Hicks,J.B.and Fink,G.R.,Proc.Natl.Sci.USA,75,1929(1978))。此外,棒状杆菌型细菌的转化还可以通过电脉冲法进行(Sugimoto et al,JP2-207791A)。
在使用在棒状杆菌型细菌的细胞中无能的质粒的情况下,染色体上的野生型odhA基因由质粒上的突变odhA基因所替换。
在使用温度敏感性质粒的情况下,在热敏感性复制起点不起作用的温度(例如25℃)培养转化的菌株,以获得引入了所述质粒的菌株。然后,在高温下培养转化体以除去温度敏感性质粒,并涂布在含抗生素药物如卡那霉素的平板培养基上。虽然去除了所述质粒的菌株不能在含这种抗生素药物的平板上生长,但其中染色体odhA基因被突变的odhA基因替换的少数菌株能够生长并出现菌落。
在这种如上所述将含突变odhA基因的重组DNA整合到染色体DNA中的菌株中,重组DNA导致与原来存在于染色体上的odhA基因重组,并将染色体odhA基因与突变odhA基因的融合基因插入到染色体,以使重组DNA的其它部分(载体区段、温度敏感性复制起点和药物抗性标记)存在于融合基因之间。然后,为了在染色体DNA上只留下突变的odhA基因,将一个拷贝的odhA基因连同载体区段(包括温度敏感性复制起点和药物抗性标记)从染色体DNA去除。在这种情况下,将正常odhA基因留在染色体DNA上,并将突变的odhA基因从染色体DNA切除,或者相反,将突变的odhA基因留在染色体DNA上,将正常odhA基因从染色体DNA切除。然后,可以使用PCR、Southern杂交等选择在染色体上只留下突变odhA基因的菌株。
可以使用编码果聚糖蔗糖酶的sacB基因作为重组标志物来进行同源重组。编码果聚糖蔗糖酶的sacB基因用于有效选择菌株,在所述菌株中,染色体odhA基因被突变的odhA基因所替换,并从染色体消除(cure)载体部分(Schafer,A.et al.,Gene 145(1994)69-73)。也就是说,在棒状杆菌型细菌的情况中,当果聚糖蔗糖酶表达时,通过蔗糖同化产生的果聚糖对细菌来说变得致命,并由此细菌不能生长。因此,通过在含蔗糖平板上培养,可以选择其中在载体中的突变odhA基因和染色体odhA基因之间发生取代,并从中消除了载体的其它部分的菌株。
sacB基因的例子包括下述基因。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subillus):sacB GenBank登录号X02730(SEQ IDNO:19)
解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliqufaciens):sacB GenBank登录号X52988
运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis):sacB GenBank登录号L33402
嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus):surB GenBank登录号U34874
Lactobacillus sanfranciscensis:frfA GenBank登录号AJ508391
Acetobacter xylinus:lsxA GenBank登录号AB034152
Gluconacetobacter diazotrophicus:lsdA GenBank登录号L41732
<2>本发明的突变的odhA基因
将要引入到染色体odhA基因中的突变没有具体限制,只要其为将α-KGDH活性降至低于非突变菌株或野生型菌株α-KGDH活性的一半,但不引起细菌生长延缓的突变。所述突变的具体例子包括下述突变。
(1)焦磷酸硫胺素结合区中的突变
该突变被引入到辅酶焦磷酸硫胺素的结合区。焦磷酸硫胺素结合区指相应于由odhA基因(SEQ ID NO:9)的核苷酸2498至2584编码区的区域。该区域的氨基酸序列如SEQ ID NO:10中氨基酸686至714所示。该区域中突变的例子包括导致一个或多个氨基酸残基缺失的突变,所述氨基酸残基选自下组:686位的Gly、687位的Leu、688位的Gly、713位的Asn、和714位的Asn。
也可以在odhA基因(SEQ ID NO:9)的核苷酸2534至2548的区域引入焦磷酸硫胺素结合区中的突变。该突变命名为GN型突变。GN型突变优选为导致一个或多个氨基酸残基缺失和/或取代的突变,所述氨基酸残基选自下组:SEQ ID NO:10中698位的Lys、699位的Leu、700位的Arg、701位的Gly、和702位的Tyr。这种突变的例子为缺失SEQ ID NO:10中701位的Gly的突变。具有该突变的突变odhA基因的例子包括具有SEQ ID NO:13的核苷酸443至4213的核苷酸序列的基因,和具有SEQ ID NOS:44、46或48的核苷酸443至4210的核苷酸序列的基因,和由这些基因编码的突变α-KGDH蛋白如SEQ ID NOS:14、45、47、和49所示。具有该突变的突变odhA基因的例子还包括具有SEQ ID NO:13的核苷酸551至4213的核苷酸序列的基因和具有SEQ ID NOS:44、46或48的核苷酸551至4210的核苷酸序列的基因,由这些基因编码的突变α-KGDH蛋白如SEQ ID NOS:14的氨基酸37至1255、和SEQ ID NOS:45、47、和49的氨基酸37至1256所示。在SEQ ID NO:13的核苷酸序列中引入在SEQ ID NO:9的2538位缺失″t″和在SEQ ID NO:9的2543至2547位缺失″ggcta″的突变。
另外,具有突变的突变odhA基因也是优选的,所述突变导致从SEQ IDNO:10中698位的Lys、699位的Leu、700位的Arg、和702位的Tyr组成的组中选择的一个或多个氨基酸残基被另一种氨基酸所替换。所述″另一种氨基酸″没有具体限制,只要其不同于原来的氨基酸,并选自天然氨基酸如Lys、Glu、Thr、Val、Leu、Ile、Ser、Asp、Asn、Gln、Arg、Cys、Met、Phe、Trp、Tyr、Gly、Ala、Pro、和His。然而,优选698位的Lys被除碱性氨基酸如Arg和His之外的氨基酸所替换,699位的Leu被除疏水性脂肪族氨基酸如Ile和Val之外的氨基酸所替换,700位的Arg被除碱性氨基酸如Lys和His之外的氨基酸所替换,702位的Tyr被除羟基氨基酸如Ser和Thr之外的氨基酸所替换。特别优选698位的Lys被疏水性脂肪族氨基酸如Ile、Leu、或Val所替换,699位的Leu被羟基氨基酸如Ser、Thr或Tyr所替换,700位的Arg被含硫氨基酸如Cys或Met所替换,702位的Tyr被疏水性脂肪族氨基酸如Ile、Leu、或Val所替换。
GN型突变可以同时导致701位的Gly的缺失和从SEQ ID NO:10中698位的Lys、699位的Leu、700位的Arg、和702位的Tyr组成的组中选择的一个或多个氨基酸残基的替换。这种突变odhA基因的例子包括具有SEQ IDNOS:44、46、和48的核苷酸443至4210的核苷酸序列的基因。由这些突变odhA基因编码的突变α-KGDH蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NOS:45、47、和49所示。这种突变odhA基因的例子还包括具有SEQ ID NOS:44、46、和48的核苷酸551至4210的核苷酸序列的基因。由这些突变odhA基因编码的突变α-KGDH蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NOS:45、47、和49的氨基酸37至1256所示。然而,在焦磷酸硫胺素结合区具有突变的突变odhA基因不限于这些例子。
(2)2-2型突变
这种类型的突变优选为引入到odhA基因(SEQ ID NO:9)的核苷酸1094至1111区域中的突变,其导致选自SEQ ID NO:10中选自218位的Asp、219位的Val、220位的Ile、221位的Asp、222位的Gly、223位的Lys、和224位的Pro的一个或多个氨基酸残基的缺失和/或取代。2-2型突变优选为在SEQID NO:10中221位缺失Asp的突变。具有此突变的odhA基因的例子包括具有SEQ ID NO:11的核苷酸443至4213的核苷酸序列的odhA基因,或者具有SEQ ID NO:11的核苷酸551至4213的核苷酸序列的odhA基因。由这些基因编码的突变α-KGDH的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:12的37至1256位氨基酸所示。SEQ ID NO:11的核苷酸序列具有在SEQ IDNO:9所示核苷酸序列中缺失1094至1098的″gacgt″并用″ggcc″替换1110至1111的″ag″的突变。
2-2型突变还优选为替换选自219位的Val、220位的Ile、221位的Asp、222位的Gly、和223位的Lys的一个或多个氨基酸的突变。虽然替换这些氨基酸的氨基酸没有具体限制,但优选用除脂肪族疏水性氨基酸如Ile和Leu之外的氨基酸替换219位的Val,用除脂肪族疏水性氨基酸如Leu之外的氨基酸替换220位的Ile,用除酸性氨基酸如Glu之外的氨基酸替换221位的Asp,以及用除简单氨基酸如Ala之外的氨基酸替换222位的Gly。更优选用碱性氨基酸如His、Arg和Lys替换219位的Val、220位的Ile、和221位的Asp,用氨基酸如Asp和Gln替换222位的Gly,以及用氨基酸如Gly和Ala替换223位的Lys。
然而,具有2-2型突变的突变odhA基因不限于这些例子。
(3)GN2-2型突变
该突变同时包括GN型突变和2-2型突变。具有此突变的odhA基因的例子包括具有SEQ ID NO:15的核苷酸443至4213的核苷酸序列的odhA基因,或者具有SEQ ID NO:15的核苷酸551至4213的核苷酸序列的odhA基因。由这些基因编码的突变α-KGDH的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:16或SEQID NO:16的氨基酸37至1254所示。然而,具有GN2-2型突变的突变odhA基因不限于这些例子。
用于本发明的其他类型的突变odhA基因可以利用ygg突变株,如以下实施例5中所述的ATCC13869-L来筛选。也就是说,将随机突变引入到odhA基因中,并用于转化ygg突变菌株。从转化体选择几乎以与野生型菌株或非突变菌株相同的生长速率生长,并显示小于野生型菌株或非突变菌株的一半α-KGDH活性的菌株,之后测序。由此可以获得突变的odhA基因。
由上述突变odhA基因编码的α-KGDH复合物的突变E1o亚基是蛋白质,其通过与α-KGDH复合物的E2o和E3亚基形成复合物,具有小于野生型或非突变菌株α-KGDH活性一半的α-KGDH活性,并且在棒状杆菌型细菌中表达时不引起棒状杆菌型细菌严重的生长延缓。
认为即便是一个或几个氨基酸被其它氨基酸所替换,突变E1o亚基的这些特性也将保持,所述一个或几个氨基酸是除上述GN型或2-2型突变体中被替换的特定氨基酸之外的氨基酸,例如不影响酶活性的氨基酸。因此,在以上提到的突变E1o亚基蛋白的氨基酸序列(例如,SEQ ID NOS:12、14、16、45、47和49,SEQ ID NOS:12、45、47和49的氨基酸37至1256,SEQ IDNO:14的氨基酸37至1255,或者SEQ ID NO:16的氨基酸37至1254)中,可以替换除GN型或2-2型突变体中被取代的特定氨基酸之外的其它一个或几个氨基酸,只要所编码的蛋白质通过与α-KGDH E2o亚基和E3亚基蛋白一起形成复合物,显示小于野生型α-KGDH复合物一半的α-KGDH活性。此处″几个″优选指2至20个,更优选2至10个,并特别优选2至5个。这种氨基酸取代可以是通过源于细菌个体差异和菌种差异的天然存在的突变所引起的取代,其中odhA基因由所述细菌衍生。例如,具有编码氨基酸序列SEQID NO:51的核苷酸序列的突变odhA基因也可用于本发明,其中对应于上述GN-型突变或2-2型突变的氨基酸被缺失和/或取代。氨基酸序列SEQ ID NO:51中对应于GN-型突变或2-2型突变的这些氨基酸可以很容易地通过比对SEQ ID NOS:10和51的氨基酸序列来鉴定。上述取代优选为保守性取代。在芳香族氨基酸的情况中,保守性取代指phe、trp、和tyr之间的相互取代。在疏水性氨基酸的情况中,保守性取代指leu、ile、和val之间的相互取代。在极性氨基酸的情况中,保守性取代指gln和asn之间的相互取代。在碱性氨基酸的情况中,保守性取代指arg、lys、和his之间的相互取代。在酸性氨基酸的情况中,保守性取代为asp和glu之间的相互取代。在含羟基氨基酸的情况中,保守性取代指ser和thr之间的取代。保守性取代还包括:ser或thr取代ala,gln、his或lys取代arg;glu、gln、lys、his或asp取代asn;asn、glu或gln取代asp;ser或ala取代cys;asn、glu、lys、his、asp或arg取代gln;asn、gln、lys或asp取代glu;val取代gly;asn、lys、gln、arg或tyr取代his;leu、met、val或phe取代ile;ile、met、val或phe取代leu;asn、glu、gln、his或arg取代lys;ile、leu、val或phe取代met;trp、tyr、met、ile或leu取代phe;thr或ala取代ser;ser或ala取代thr;phe或tyr取代trp;his、phe、或trp取代tyr;以及met、ile、或leu取代val。
当E1o亚基和E2o亚基由单个odhA基因编码时,α-KGDH复合物可以包括SEQ ID NO:10(或SEQ ID NO:10的氨基酸37至1257)的蛋白质和SEQID NO:18的蛋白质。当E1o亚基由odhA基因编码且E2o亚基由SEQ ID NO:27的基因编码时,α-KGDH复合物可以包括SEQ ID NO:10的蛋白质、SEQID NO:18的蛋白质、和SEQ ID NO:28的蛋白质。
本发明的突变odhA基因是编码上述突变α-KGDH E1o亚基的基因。本发明的突变odhA基因可以是在严紧条件下,与各自具有SEQ ID NO:11、13、或15的核苷酸443至4213的核苷酸序列的多核苷酸,与各自具有SEQ ID NO:44、46或48的核苷酸443至4210的核苷酸序列的多核苷酸,与SEQ ID NO:11、13、或15的核苷酸551至4213的核苷酸序列,或与SEQ ID NO:44、46、或48的核苷酸443至4210的核苷酸序列,或与从所述序列制备的探针杂交的基因,只要该基因编码通过与E2o亚基和E3亚基蛋白形成复合物,显示小于野生型α-KGDH复合物一半的α-KGDH活性的蛋白质。严紧条件的例子包括在其条件下,DNAs于Southem杂交通常洗涤的盐浓度下互相杂交的条件,即在1×SSC、0.1%SDS在60℃,优选0.1×SSC、0.1%SDS在60℃,更优选0.1×SSC、0.1%SDS在68℃的条件下洗涤一次或优选2-3次。
<3>生产L-谷氨酸的方法
可以通过在培养基中培养本发明的棒状杆菌型细菌,导致L-谷氨酸在培养基中和/或在细菌细胞中累积,并从培养基和/或细菌细胞收集L-谷氨酸来生产L-谷氨酸。在本发明的生产方法中,优选通过例如在25至40℃培养本发明的棒状杆菌型细菌8至120小时来生产L-谷氨酸。如果在低温下显示足够的生长速率但在高温下显示减小的生长速率的菌株,如实施例中所示的GN-2-2菌株用于L-谷氨酸生产,则优选在低温下如25至30℃培养这种菌株8至30小时,以使所述菌株能够生长;然后在高温下如34至40℃将所得细菌细胞保温16至48小时,使所述菌株能够生产L-谷氨酸。
所述培养基可以是包含碳源、氮源、无机盐、和任选有机微量营养物如氨基酸和维生素的常规培养基。合成培养基或天然培养基均可使用。可以使用任何种类的碳源和氮源,只要它们能够被要培养的菌株所利用。
糖类如葡萄糖、丙三醇、果糖、蔗糖、麦芽糖、甘露糖、半乳糖、淀粉水解物、和糖蜜可以用作碳源。此外,有机酸如醋酸和柠檬酸、以及醇如乙醇也可以单独或组合作为碳源使用。氨、铵盐如硫酸铵、碳酸铵、氯化铵、磷酸铵、和乙酸铵、硝酸盐等可以用作氮源。氨基酸、维生素、脂肪酸、核酸、包含蛋白胨的物质、酪蛋白氨基酸、酵母提取物、和大豆蛋白分解产物可以以少量使用作为有机营养物。当使用其生长需要氨基酸等的营养缺陷型突变株时,优选添加这种所需的营养物。磷酸盐、镁盐、钙盐、铁盐、锰盐等可以作为无机盐使用。
优选通过控制发酵温度并将培养基的pH调节至3到9来进行需氧培养。培养期间pH降低时,通过添加碱如碳酸钙或氨气来中和培养基。培养约10至约120小时使培养基中累积大量的L-谷氨酸。
此外,可以使用液体培养基进行培养,所述液体培养基被调节至生产的L-谷氨酸结晶并析出的条件。L-谷氨酸结晶的条件包括pH5.0至4.0,优选pH4.5至4.0,更优选pH4.3至4.0,特别优选pH4.0(EP1233069、EP1233070)。
培养完成后,可以通过常规方法从培养基收集L-谷氨酸。例如可以通过从培养基去除细菌细胞并浓缩L-谷氨酸或者通过使用离子交换层析来收集L-谷氨酸。当在L-谷氨酸结晶并析出的条件下进行培养时,可以例如通过离心或过滤来收集结晶的L-谷氨酸。在这种情况下,也可以在溶解的L-谷氨酸结晶后收集溶解在培养基中的L-谷氨酸。
实施例
以下本发明将通过参考以下非限制性实施例更具体地解释本发明。
实施例1
<1>携带sacB基因的载体的构建
(A)pBS3的构建
使用枯草芽孢杆菌的染色体DNA作为模板,SEQ ID NOS:21和22的寡核苷酸作为引物通过PCR,获得了sacB基因(SEQ ID NO:19)。按照以下程序用LAtaq(可由TaKaRa获得)进行PCR:94℃预变性5分钟的一个循环;94℃变性30秒、49℃退火30秒、72℃延伸2分钟的25个循环。用常规方法纯化所得PCR产物,然后用BglII和BamHI消化并平端化。将所述片段插入到已用AvaII消化且平端化的pHSG299中。所得DNA用于转化大肠杆菌JM109(可由Takara Bio获得)的感受态细胞。然后,将转化的细菌细胞涂布到含25μg/ml卡那霉素(以下缩写为″Km″)的LB琼脂平板上,保温一夜。此后,选择出现的菌落作为转化体。从所得转化体分离质粒,并将具有目的PCR产物插入物的质粒命名为pBS3。图1显示构建pBS3的方法。
(B)pBS4S的构建
使用不引起氨基酸取代的交换(cross-over)PCR来破坏pBS3上卡那霉素抗性基因中的SmaI识别位点。首先使用pBS3作为模板,SEQ ID NOS:23和24的合成DNAs作为引物进行PCR,以获得卡那霉素抗性基因的N末端片段。另一方面,为了获得卡那霉素抗性基因的C末端片段,使用pBS3作为模板,SEQ ID NOS:25和26的合成DNAs作为引物进行PCR。按照以下程序用Pyrobest DNA聚合酶(可由TaKaRa Bio获得)进行PCR:98℃预变性5分钟;及98℃变性10秒、57℃退火30秒、72℃延伸1分钟的25个循环。SEQ ID NOS:24和25相互之间部分互补,而且不包含SmaI识别位点。然后,为了获得不含SmaI识别位点的突变卡那霉素抗性基因的全长片段,将上述N末端和C末端基因产物以基本上等摩尔的量互相混合。使用所述基因产物作为模板,SEQ ID NOS:23和26的合成DNAs作为引物进行PCR,以获得引入了突变的Km抗性基因。按照以下程序用Pyrobest DNA聚合酶(可由TaKaRaBio获得)进行PCR:98℃预变性5分钟;及98℃变性10秒、57℃退火30秒、72℃延伸1.5分钟的25个循环。
用常规方法纯化PCR产物,接下来用BanII消化,然后插入到pBS3的上述BanII识别位点中。所得质粒用于转化大肠杆菌JM109(可由Takara Bio获得)的感受态细胞。即,将转化的细菌细胞涂布到包含25μg/ml卡那霉素的LB琼脂培养基上,并保温一夜。此后,选择出现的菌落作为转化体。从所得转化体分离质粒,并将具有目的PCR产物插入物的质粒命名为pBS4S。图2显示构建pBS4S的方法。
<2>将odhA突变(GN-型)引入到谷氨酸棒杆菌ATCC13869菌株中
编码棒状杆菌型细菌α-酮戊二酸脱氢酶的odhA的序列已有报导(Microbiology 142,3347-3354(1996),GenBank登录号D84102)。
本发明的发明人成功培育的生产L-谷氨酸的细菌菌株GN的核苷酸序列分析显示,该菌株在odhA基因(SEQ ID NO:9)的核苷酸序列中具有核苷酸2538和核苷酸2543至2547的缺失,如表1所示。表1还显示了由突变odhA基因编码的突变E1o亚基的氨基酸序列。
表1
菌株  odhA基因的核苷酸序列
ATCC13869  GCT AAG CTG CGTGGC TAC GAC GTC GGA GGC ACC ATC
OAGN  GCT AAG C-G CGT--- --C GAC GTC GGA GGC ACC ATC
菌株  E1o亚基的氨基酸序列
ATCC13869  Ala Lys Leu Arg Gly Tyr Asp Val Gly Gly Thr Ile
OAGN  Ala Lys Arg Val--- ---Asp Val Gly Gly Thr Ile
然后,将该突变odhA基因引入到谷氨酸棒杆菌2256菌株(ATCC13869)中并评估。首先制备用于将这些突变引入到谷氨酸棒杆菌2256菌株(ATCC13869)中的质粒。使用Bacterial Genomic DNA Purif.试剂盒(由MSTechnosystems Co.,Ltd.生产)从上述GN菌株提取染色体DNA,使用所获得的染色体DNA作为模板,SEQ ID NOS:1和2的寡核苷酸作为引物进行PCR。按照以下程序使用Pyrobest聚合酶(可由TaKaRa Bio获得)进行PCR以扩增约2.75kb的片段:98℃变性10秒、50℃退火30秒、72℃延伸3分钟的30个循环。所述引物在5’端包含BamHI识别序列,并设计用于扩增GenBank登录号D84102序列的核苷酸1521至4270的区域。扩增的片段用BamHI消化,并连接到用BamHI消化的pBS4S载体(Ligation kit Ver.2,使用可从Takara Bio获得的产品),由此获得质粒pBSOAGN(图3显示构建方法)。
通过电脉冲法(JP02-207791A)将pBSOAGN导入到谷氨酸棒杆菌ATCC13869菌株中,将所获得的细菌细胞涂布到含25μg/ml卡那霉素的CM-Dex琼脂培养基(5g/l葡萄糖、10g/l多蛋白胨、10g/l酵母提取物、1g/lKH2PO4、0.4g/l MgSO4·7H2O、0.01g/l FeSO4·7H2O、0.01g/l MnSO4·4-5H2O、3g/l尿素、1.2g/l大豆蛋白水解物、和20g/l琼脂,pH调节到7.5)。25℃培养后,通过使用PCR确认出现的菌落为一次重组菌株(once recombinantstrain),在此菌株中,pBSOAGN通过同源重组整合在染色体上。使用候选菌株的染色体DNA作为模板,具有特异于pBS4S的序列(SEQ ID NO:3)的核苷酸序列的寡核苷酸和具有特异于染色体上的序列(SEQ ID NO:4)的核苷酸序列的寡核苷酸作为引物进行PCR。也就是说,由于pBS4S的序列在非重组菌株的染色体上不存在,因而如果所述候选菌株不是重组菌株,则没有片段通过PCR被扩增。将所获得的一次重组菌株在25℃在含25μg/ml卡那霉素的CM-Dex液体培养基中培养一天,适当稀释所得培养物并涂布到S10平板上,所述S10平板具有上述CM-Dex培养基的组成,其中只是用10g/l的蔗糖替换5g/l的葡萄糖。选择了几个生长在S10平板上并显示卡那霉素敏感性的菌株,然后通过Sanger的方法(J.MoI.Biol.,143,161(1980))确认odhA序列的核苷酸序列。使用BigDye终止物测序试剂盒(由Applied Biysystems生产)通过遗传Analyzer ABI310(由Applied Biosystems生产)分析核苷酸序列。将如此获得的携带GN-型突变odhA基因的菌株命名为ATCC13869 OAGN。
<3>将2-2型突变odhA基因导入谷氨酸棒杆菌ATCC13869菌株中
本发明的发明人成功培育的生产L-谷氨酸的″2-2″菌株的核苷酸序列分析显示,该菌株在odhA基因(SEQ ID NO:9)中包含核苷酸1094至1098的缺失和以″ggcc″替换处于1110至1111的″ag″,如表2所示。表2还显示了由突变odhA基因编码的突变E1o亚基的氨基酸序列。
表2
菌株 odhA基因的核苷酸序列
ATCC13869  AAC TCC TAC GAC GTC ATC GAC GGC AAG CCA ACC CTG
OA2-2  AAC TCC TAC---CAT CGA CGG CAG GCC CCA ACC CTG
菌株  E1o亚基的氨基酸序列
ATCC13869  Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro Thr Leu
 OA2-2  Asn Ser Tyr---His Arg Arg Gln Ala Pro Thr Leu
然后,将该突变的odhA基因导入到谷氨酸棒杆菌2256菌株(ATCC13869)中并评估。首先制备用于将这些突变引入到谷氨酸棒杆菌2256中的质粒。用Bacterial Genomic DNA Purif.试剂盒(由MS Technosystems Co.,Ltd.生产)从2-2菌株分离染色体DNA,使用此染色体DNA作为模板,SEQ ID NOS:5和6的寡核苷酸作为引物进行PCR。按照以下程序使用TaKaRa Ex Taq(可由TaKaRa Bio获得)进行PCR以扩增约2.0kb的片段:94℃变性30秒、55℃退火10秒、72℃延伸2分钟的25个循环。所述引物在5’端包含BamHI识别序列,该引物设计用于扩增GenBank登录号D84102核苷酸序列的核苷酸51至2150区域。扩增的片段用BamHI消化,并使用TakaraBio的Ligation kit Ver.2连接到经BamHI消化的pBS4S载体,由此获得质粒pBSOA2-2(图4显示构建图)。实施与实施例1<2>中所述相同的步骤以获得携带2-2型突变odhA基因的菌株(ATCC13869 OA2-2菌株)。
<4>将2-2型突变引入到ATCC13869 OAGN菌株的GN型odhA基因中
按照与实施例1<2>中所述相同的方法,将实施例1<3>中构建的质粒pBSOA2-2导入实施例1<2>中制备的ATCC13869 OAGN菌株中,以获得odhA基因中同时携带GN型和2-2型突变的ATCC13869菌株。以下由2-2型突变和GN型突变组成的双突变也称为GN2-2突变。
虽然在实施例1<2>至<4>中,所述突变株使用通过PCR扩增的突变odhA基因制备,所述PCR利用来自GN菌株或2-2菌株的染色体DNA作为模板,但它们也可以通过使用突变的odhA基因制备,所述突变的odhA基因通过定点诱变技术如使用Mutan-Super Express Km试剂盒(Takara Bio)的技术获得。例如,可以如以下所述获得具有类似于实施例1<2>中制备的pBSOAGN的结构的质粒。即,使用SEQ ID NOS:2和5的合成DNAs作为引物,野生型odhA基因的染色体DNA作为模板,通过PCR制备odhA基因片段,并将所得PCR片段克隆到Mutan-Super Express Km试剂盒附带的质粒pKF19k的BamHI识别位点。接下来,使用所得质粒模板和具有磷酸化的5’-末端的SEQ ID NO:7的合成DNA引物和Mutan-Super Express Km试剂盒附带的选择引物进行另一PCR。用所得PCR产物转化sup0大肠杆菌,例如MV1184菌株(可由Takara Bio获得),结果构建了包含突变odhA基因片段的质粒。最后,用BamHI消化所述片段并插入到pBS4S载体中,由此可以构建与pBSOAGN类似的质粒。
类似地,为了获得包含2-2型突变的odhA基因,可以用具有磷酸化的5’-末端的SEQ ID NO:8的合成DNA代替上述方法中具有磷酸化的5’-末端的SEQ ID NO:7的合成DNA来构建类似于pBSOA2-2的质粒。
此外,为了获得包含GN2-2双突变的odhA基因,从上述类似于pBSOAGN的质粒切除或PCR扩增包含GN-型突变的片段,并用于替换上述类似于pBSOA2-2的质粒上的相应片段。
实施例 2
菌株ATCC13869 OAGN、OA2-2、和OAGN2-2降解谷氨酸的能力的对比
虽然携带野生型odhA基因的菌株能够同化培养基中的L-谷氨酸,但推测由于odhA突变而削弱或消除了α-KGDH活性的菌株也具有减小的降解谷氨酸的能力。然后,使用实施例1<2>至<4>中制备的各odhA突变株ATCC13869 OAGN、OA2-2、和OAGN2-2测定降解谷氨酸的能力。各菌株均在CM-Dex平板上在25℃培养一天,然后接种到液体培养基中,所述液体培养基由20g/l谷氨酸钠、2.64g/l(NH4)2SO4、0.5g/l KH2PO4、0.5g/l K2HPO4、0.25g/l MgSO4·7H2O、0.01g/l FeSO4·7H2O、0.01g/l MnSO4·4-5H2O、0.01g/lCaCl2、0.02mg/l CuSO4、40g/l MOPS、0.03g/l原儿茶酸(protocatechinic acid)、200μg/l维生素B1、和300μg/l生物素(用NaOH调节至pH6.7)组成,之后在25℃和34℃培养50小时。分别测定起点、和培养25小时和50小时后谷氨酸的量,并比较25℃和34℃培养的菌株之间降解的(degraded)谷氨酸的量。表3显示结果。特别地,GN2-2突变株显示降解的谷氨酸的量明显减小,尤其是当培养温度为34℃时。这些结果表明引入GN2-2突变能够有效地减小α-KGDH活性,具有此突变的菌株优选用于L-谷氨酸生产。
表3:降解的谷氨酸的量
菌株 25小时 50小时
25℃ 34℃  25℃ 34℃
 ATCC13869  15     15  15.4   15.4
 OAGN  3.8    5.8  9.4    10.0
 OA2-2  11.7   15.1  15.4   15.4
 OAGN2-2  0.7    0.5  4.9    1.0
(单位:g/l)
实施例3
ATCC13869 OAGN、OA2-2、和OAGN2-2菌株α-KGDH活性的对比
菌株ATCC13869 OAGN、OA2-2、和OAGN2-2的α-KGDH活性如下所述使用实施例4中自培养起始4小时后收集的培养液测定。所述活性按照Agric.Biol.Che m.,44(8),p1897(1980)中所述方法测定。具体地,在用0.2%氯化钠洗涤细菌细胞后,将其悬浮在含30%甘油的100mM TES-NaOH(pH7.5)缓冲溶液中。用Bioruptor(Olympus)超声处理细菌细胞,然后离心以去除未破裂的细菌细胞,之后使用Sephadex-G25(Amersham Pharmacia)用相同缓冲液凝胶过滤。将如此获得的制备物用作粗酶溶液。将所述粗制酶溶液添加到含100mM TES-NaOH (pH7.7)、5mM MgCl2、0.2mM CoA、0.3mM辅羧酶(cocarboxylase)、1mMα-酮戊二酸、3mM L-半胱氨酸、和1mM乙酰吡啶-腺嘌呤-二核苷酸的反应体系,用Hitachi分光光度计U-2001在31.5℃在365nm测定吸收。在粗制酶溶液中蛋白浓度的测量中,使用蛋白质测试(Bio-Rad)。牛血清白蛋白用作标准蛋白质。
表4显示测定α-KGDH活性的结果。与ATCC13869相比,引入GN型突变、2-2型突变、和GN2-2型突变导致α-KGDH活性减小。特别地,在引入GN2-2型突变的菌株的情况中,观测到相当大的活性减小。这表明GN型突变、2-2型突变、和GN2-2型突变是减小α-KGDH活性的突变。
表4:α-KGDH活性
 菌株  培养温度25℃     培养温度34℃
 ATCC13869OAGNOA2-2OAGN2-2  0.0360.0010.0070.001>     0.0210.0020.0090.001>
(单位:ΔAbs/min/mg蛋白质)
实施例4
菌株ATCC13869 OAGN、OA2-2、和OAGN2-2的L-谷氨酸生产能力的对比
在发酵釜培养中检验菌株ATCC13869 OAGN、OA2-2、和OAGN2-2的L-谷氨酸生产能力。首先,将上述四种菌株在25℃在CM-Dex琼脂培养基上培养一天,并将所得的细菌细胞接种在300ml灭菌的种子培养基(seed medium)中,所述种子培养基含60g/l葡萄糖、1.54g/l H3PO4、1.45g/l KOH、0.9g/lMgSO4·7H2O、0.01g/l FeSO4·7H2O、670μg/l维生素B1、3,200μg/l生物素、0.28g/l DL-Met、1.54g/l大豆蛋白水解物、和0.1ml/l消泡剂AZ-20R,一直培养到糖被完全耗尽。在培养期间,以1/l VVM通气来搅拌培养基,以使溶解氧的浓度保持在不小于5%。用氨气将培养期间的pH控制到pH7.2。然后,将30ml所得种子培养物接种到270ml含80g/l葡萄糖、3.46g/l KH2PO4、1.0g/l MgSO4·7H2O、0.01g/l FeSO4·7H2O、0.01g/l MnSO4·4-5H2O、230μg/l维生素B1、525μg/l生物素、0.35g/l大豆蛋白水解物、和0.2ml/l消泡剂AZ-20R的主培养基中,在25℃或34℃培养。培养期间如上所述进行通气。用氨气将培养期间的pH控制在pH7.3。
表5显示自培养起始约7.5小时后累积的L-谷氨酸的量。图5、6和7分别显示L-谷氨酸累积、细菌细胞量、和残余糖分的时间进程。ATCC13869菌株不累积L-谷氨酸,而OAGN和OAGN2-2突变菌株累积L-谷氨酸。特别地,当这些菌株在34℃培养时,所累积的L-谷氨酸的量显著增加。每种引入突变的菌株都显示几乎与野生型菌株相同的生长速率。
由这些结果证实GN型突变、2-2型突变、和GN2-2型突变对增加L-谷氨酸生产是有效的。发现在这些突变当中,GN2-2型突变对L-谷氨酸生产有最显著的影响。
表5:引入odhA突变的菌株所生产的L-谷氨酸(GIu)的量
 菌株   25℃Glu(g/L)     34℃Glu(g/L)
 ATCC13869OAGNOA2-2OAGN2-2   0.240.180.590.38     0.131.884.705.13
实施例5
用yggB突变菌株筛选odhA突变菌株
<L30型yggB突变菌株的构建>
首先,由ATCC13869菌株构建在yggB基因中具有突变的突变菌株。L30型突变为在yggB基因(SEQ ID NO:29)中用″T″替换1768位的″C″的突变。具有L30型突变的突变yggB基因如SEQ ID NO:31所示,由该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:32所示。所述突变yggB基因以与实施例1中相同的方法构建。即,使用SEQ ID NOS:33和34的引物和ATCC13869菌株的染色体DNA模板通过PCR制备编码ygg基因N-末端部分的片段。以类似的方式使用SEQ ID NOS:35和36的引物和ATCC13869菌株的染色体DNA模板通过PCR制备编码ygg基因C-末端部分的片段。随后,利用SEQ ID NOS:37和35的引物以及等量的N-末端片段和C-末端片段的混合物模板通过PCR获得包含L30型突变的yggB基因片段。用SacI消化所得PCR产物并连接到SacI消化的pBS4S,由此获得用于引入所述突变的质粒(pBS4 yggB-L)。将所得pBS4 yggB-L整合到ATCC13869菌株的染色体中,然后按照与实施例1中类似的方法将其从所述菌株消除。测定所得卡那霉素抗性菌株yggB基因的核苷酸序列,并选择其中yggB基因被L30型替换的菌株。将具有SEQ ID NO:31的yggB基因的菌株命名为ATCC13869-L菌株。该菌株可用于odhA突变基因的筛选。
<ygg、odhA双突变菌株的构建>
然后,将表6所示的各种突变引入到ATCC13869-L菌株的染色体odhA基因中。表6中显示了各菌株相应于SEQ ID NO:9的核苷酸2528至2562区域的核苷酸序列。表7中显示了各菌株相应于SEQ ID NO:10的氨基酸696至707区域的氨基酸序列。
引入具有核苷酸序列SEQ ID NO:42的odhA基因的L30sucA8菌株可以如下获得。使用SEQ ID NOS:2和5的引物通过PCR制备突变的odhA基因片段。所得片段用BamHI消化并连接到Mutan-Super Express Km(Takara Bio)附带的质粒pKF19m的BamHI位点。然后,使用具有磷酸化的5’-末端的引物SEQ ID NO:38和Mutan-Super Express Km的选择引物进行PCR,所得PCR产物用于转化sup0-大肠杆菌菌株如MV1184菌株,以得到包含突变odhA片段的质粒。将该片段插入到pBS4S质粒中,按照与实施例1中类似的方法用所得质粒转化ATCC13869-L菌株,由此获得所述质粒整合到其染色体中的菌株。然后,从这些菌株中选择对蔗糖有抗性且对卡那霉素敏感的菌株。测定所选择菌株的odhA基因的核苷酸序列,并选择其中由于odhA基因中的移码突变而使α-KGDH功能缺陷的菌株作为ATCC13869-L30sucA8 (odhA8)菌株。其它的odhA突变菌株可以使用yggB突变菌株通过类似的方法获得。
引入了具有核苷酸序列SEQ ID NO:44的突变odhA基因的sucA801菌株可以通过与上述类似的方法获得,所述方法中,用具有磷酸化的5’-末端的引物SEQ ID NO:39代替引物SEQ ID NO:38。
引入了具有核苷酸序列SEQ ID NO:46的突变odhA基因的sucA805菌株可以通过与上述类似的方法获得,所述方法中,用具有磷酸化的5’-末端的引物SEQ ID NO:40代替引物SEQ ID NO:38。
引入了具有核苷酸序列SEQ ID NO:48的突变odhA基因的sucA77菌株可以通过与上述类似的方法获得,所述方法中,用具有磷酸化的5’-末端的引物SEQ ID NO:41代替引物SEQ ID NO:38。
L30sucA8菌株没有胞内α-KGDH,因为sucA8突变是引起α-KGDH蛋白不成熟截断的移码突变。另一方面,sucA801菌株、sucA805菌株和sucA77菌株具有减小的但有一些α-KGDH活性,因为这些突变不是移码突变,而且不引起α-KGDH蛋白的不成熟截断。
表6:odhA突变基因的部分核苷酸序列
 菌株  odhA基因的核苷酸序列
 ATCC13869-L  CTG GCT AAG CTG CGT GGC TAC GAC GTC GGA GGC ACC
 L30sucA8  CTG GCT AAG CTG CGT       C GAC GTC GGA GGC ACC
 L30sucA801  CTG GCT AAG CTG CGT     CTC GAC GTC GGA GGC ACC
 L30sucA805  CTG GCT AAA AGC TGC     GTC GAC GTC GGA GGC ACC
 L30sucA77  CTG GCT ATA AGC TGC     GTC GAC GTC GGA GGC ACC
表7:odhA突变体的氨基酸序列
菌株 E1o亚基的氨基酸序列
野生的 Leu Ala Lys Leu Arg Gly Tyr Asp Val Gly Gly Thr
L30sucA8(ΔsucA) Leu Ala Lys Leu Arg         Arg Arg Arg Arg His
 L30sucA801  Leu Ala Lys Leu Arg---Leu Asp Val Gly Gly Thr
 L30sucA805  Leu Ala Lys Ser Cys---Val Asp Val Gly Gly Thr
 L30sucA77  Leu Ala Ile Ser Cys---Val Asp Val Gly Gly Thr
<使用携带各种突变odhA基因的菌株生产L-谷氨酸>
通过在坂口(Sakaguchi)烧瓶中培养所得odhA突变菌株来评估这些菌株的L-谷氨酸生产力。将表6列出的各种菌株在CM-Dex琼脂培养基上在31.5℃培养过夜,然后将1/6的培养物转移到20ml含60g/l葡萄糖、22.5g/l(NH4)2SO4、1g/l KH2PO4、0.4g/l MgSO4·7H2O、0.01g/l FeSO4·7H2O、0.01g/lMnSO4·4-5H2O、200μg/l维生素B1、0.48g/l大豆蛋白水解物、和300μg/l生物素(用KOH调节至pH 8.0)的培养基中,添加CaCO3并在31.5℃、115rpm搅动培养。培养19小时后累积的L-谷氨酸的量如表8所示。sucA801、sucA805、和sucA77菌株显示高于ATCC13869-L菌株和sucA8菌株的L-谷氨酸生产力,其中ATCC13869-L菌株携带野生型odhA基因,而SucA8菌株携带含有移码突变的odhA基因。这些结果显示,通过将突变引入到odhA基因的焦磷酸硫胺素结合区附近区域中以调节α-KGDH活性,从而有效地生产了L-谷氨酸。
表8:odhA突变菌株的L-谷氨酸生产
 菌株  L-谷氨酸(g/L)
 ATCC13869-L  4.9
 L30sucA8  19.8
 L30sucA801  22.1
 L30sucA805  23.8
 L30sucA77  21.6
序列表
<110>味之素株式会社(Ajinomoto Co.,Inc.)
<120>C453-C5043
<130>生产L-谷氨酸的微生物和生产L-谷氨酸的方法
<150>JP2004-264458
<151>2004-09-10
<160>51
<170>PatentIn version 3.1
<210>1
<211>40
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>1
gccgggatcc tccggtgaat tcctgcgtac catgtctcgc                         40
<210>2
<211>40
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>2
gccgggatcc ctgtgtgatt cacactgcat aaggccctct                         40
<210>3
<211>24
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>3
gcttccggct cgtatgttgt gtgg                                          24
<210>4
<211>20
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400> 4
gatcgtgacc gcacagattc                                               20
<210>5
<211>40
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>5
gccgggatcc ccatcgccgc catccctgat ggtttcaatc                        40
<210>6
<211>40
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>6
gccgggatcc ggccctggcc tgcggcggtg tcgatggcgg                        40
<210>7
<211>33
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>7
gctaagcgcg tcgacgtcgg aggcaccatc cac                               33
<210>8
<211>42
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>8
ctcctaccat cgacggcagg ccccaaccct gatcgtgcct ga                     42
<210>9
<211>4394
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(443)..(4213)
<223>
<400>9
gtcgacaagc aaaatcgaag cggcagcacg ccgcgtcgga gccttaaacg ccatcgccgc   60
catccctgat ggtttcaatc atcaagtcgg tgaacgcggg cgcaacctgt catccggaca  120
gcgccaactg atcgcgctgg cgcgcgccga actcatcgag ccttccatca tgcttctcga  180
cgaagccacc tccaccctcg accccgccac cgaagccgtt atcctcaacg cctccgatcg  240
agtcactaag ggacgcacca gcatcatcgt cgcgcaccgc ttggcaaccg ctaaaagggc    300
cgaccgtatt cttgttgttg aacaaggacg tatcattgag gacggatctc acgacgcgtt    360
gttgtctgct aacggcacct acgcccgcat gtggcattta atggcctgac acgttatttt    420
taggagaact gtcaacaaat ta atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag     472
                         Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln
                         1               5                   10
cca acg acc aac gtt aca gtg gat aaa ata aag ctc aat aaa ccc tca      520
Pro Thr Thr Asn Val Thr Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser
                15                  20                  25
aga agc aag gaa aag agg cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act      568
Arg Ser Lys Glu Lys Arg Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr
            30                  35                  40
ttc ggc cag aat gcg tgg ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag      616
Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln
        45                  50                  55
aag gac ccc aag tcc gtg gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg      664
Lys Asp Pro Lys Ser Val Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala
    60                  65                  70
cag ggg gga cca aat gct acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca      712
Gln Gly Gly Pro Asn Ala Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser
75                  80                  85                  90
gcg ccc aag gag tct gcg aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc      760
Ala Pro Lys Glu Ser Ala Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala
                95                  100                 105
aag gca gca ccg cgc gta gaa acc aag ccg gcc gcc aag acc gcc cct      808
Lys Ala Ala Pro Arg Val Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro
            110                 115                 120
aag gcc aag gag tcc tca gtg cca cag caa cct aag cttccg gag cca       856
Lys Ala Lys Glu Ser Ser Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro
        125                 130                 135
gga caa acc cca atc agg ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg      904
Gly Gln Thr Pro Ile Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met
    140                 145                 150
gat atc tcc ctg gaa atc cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca      952
Asp Ile Ser Leu Glu Ile Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro
155                 160                 165                 170
gct cgc ctc atg ttc gaa aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag     1000
Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys
                175                 180                 185
cgc acc cgc ggt ggc aag atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc     1048
Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala
            190                 195                 200
atg gtg aag gca gtc atg gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac gac     1096
Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp
        205                 210                 215
gtc atc gac ggc aag cca acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg     1144
Val Ile Asp Gly Lys Pro Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu
    220                 225                 230
ggc ctt gcc atc gac ctt cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc     1192
Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val
235                 240                 245                 250
gta gca gcc atc aag gaa acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc     1240
Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu
                255                 260                 265
gca gca tac gaa gac atc gtg aca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc     1288
Ala Ala Tyr Glu Asp Ile Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr
            270                 275                 280
atg gat gac tac cag ggc gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc     1336
Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly
        285                 290                 295
atc ggt acc cgc cac tct gtc cca cgt ctg acc aag ggc cag ggc acc     1384
Ile Gly Thr Arg His Ser Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr
    300                 305                 310
atc atc ggt gtc ggt tcc atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct    1432
Ile Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala
315                 320                 325                 330
tcc gaa gac cgc ctt gca gag ctc ggc gtt gga aag ctt gtc acc atc    1480
Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile
                335                 340                 345
acc tcc acc tac gat cac cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa    1528
Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu
            350                 355                 360
ttc ctg cgt acc atg tct cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gat    1576
Phe Leu Arg Thr Met Ser Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp
        365                 370                 375
gag atc ttc gac gca atg aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca    1624
Glu Ile Phe Asp Ala Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala
    380                 385                 390
cag gac gtt cca aac acc ggt gtt gat aag aac acc cgc gtc atg cag    1672
Gln Asp Val Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln
395                 400                 405                 410
ctc att gag gca tac cgc tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac    1720
Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn
                415                 420                 425
cca ctt tca tgg gtt cag cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac    1768
Pro Leu Ser Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp
        430                 435                 440
ctc gac atc gag acc cac agc ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc    1816
Leu Asp Ile Glu Thr His Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr
        445                 450                 455
ttc agc gtc ggt ggc ttc ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag    1864
Phe Ser Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu
    460                 465                 470
gta ctg tcc cgc ctg cgc gct gcc tac acc ttg aag gtc ggc tcc gaa    1912
Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu
475                 480                 485                 490
tac acc cac atc ctg gac cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc    1960
Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg
                495                 500                 505
ctc gaa gcc gga atg cca aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc    2008
Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile
            510                 515                 520
ctg cag aag ctg aac gcc gca gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc    2056
Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr
        525                 530                 535
aag tac gtc ggc cag aag cgc ttc tcc ctc gaa ggt gca gaa gct ctc    2104
Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu
    540                 545                 550
atc cca ctg atg gac tcc gcc atc gac acc gcc gca ggc cag ggc ctc    2152
Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu
555                 560                 565                 570
gac gaa gtt gtc atc ggt atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg    2200
Asp Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu
                575                 580                 585
ttc aac atc gtg ggc aag cca ctg gcatcc atc ttc aac gag ttt gaa     2248
Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu
            590                 595                 600
ggc caa atg gag cag ggc cag atc ggt ggc tcc ggt gac gtg aag tac    2296
Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr
        605                 610                 615
cac ctc ggt tcc gaa ggc cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag    2344
His Leu Gly Ser Glu Gly Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu
    620                 625                 630
atc aag gtc tcc ctg act gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac     2392
Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn
635                 640                 645                 650
cca gtg atg gaa ggt atc gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag       2440
Pro Val Met Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys
                655                 660                 665
ggc gta gac ggc aag act gtt gtg cca ctg ctg ctc cac ggt gac gct       2488
Gly Val Asp Gly Lys Thr Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala
            670                 675                 680
gca ttc gca ggc ctg ggc atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct aag       2536
Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys
        685                 690                 695
ctg cgt ggc tac gac gtc gga ggc acc atc cac atc gtg gtg aac aac       2584
Leu Arg Gly Tyr Asp Val Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn
    700                 705                 710
cag atc ggc ttc acc acc acc cca gac tcc agc cgc tcc atg cac tac       2632
Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr
715                 720                 725                 730
gca acc gac tac gcc aag gca ttc ggc tgc cca gtc ttc cac gtc aat       2680
Ala Thr Asp Tyr Ala Lys Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn
                735                 740                 745
ggt gat gac cca gag gca gtt gtc tgg gtt ggc cag ctg gca acc gag       2728
Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu
            750                 755                 760
tac cgt cgt cgc ttc ggc aag gac gtc ttc atc gac ctc gtt tgc tac       2776
Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr
        765                 770                 775
cgc ctc cgc ggc cac aac gaa gct gat gat cct tcc atg acc cag cca       2824
Arg Leu Arg Gly His Asn Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro
    780                 785                 790
aag atg tat gag ctc atc acc ggc cgc gag acc gtt cgt gct cag tac       2872
Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr
795                 800                 805                 810
acc gaa gac ctg ctc gga cgt gga gac ctc tcc aac gaa gat gca gaa       2920
Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu
                815                 820                 825
gca gtc gtc cgc gac ttc cac gac cag atg gaa tct g tg ttc aac gaa      2968
Ala Val Val Arg Asp Phe His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu
            830                 835                 840
gtc aag gaa ggc ggc aag aag cag gct gag gca cag acc ggc atc acc       3016
Val Lys Glu Gly Gly Lys Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr
        845                 850                 855
ggc tcc cag aag ctt cca cac ggc ctt gag acc aac atc tcc cgt gaa       3064
Gly Ser Gln Lys Leu Pro His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu
    860                 865                 870
gag ctc ctg gaa ctg gga cag gct ttc gcc aac acc cca gaa ggc ttc       3112
Glu Leu Leu Glu Leu Gly Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe
875                 880                 885                 890
aac tac cac cca cgt gtg gct cca gtt gct aag aag cgc gtc tcc tct       3160
Asn Tyr His Pro Arg Val Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser
                895                 900                 905
 gtc acc gaa ggt ggc atc gac tgg gca tgg ggc gag ctc ctc gcc ttc      3208
Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe
            910                 915                 920
ggt tcc ctg gct aac tcc ggc cgc ttg gtt cgc ctt gca ggt gaa gat       3256
Gly Ser Leu Ala Asn Ser Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp
        925                 930                 935
tcc cgc cgc ggt acc ttc acc cag cgc cac gca gtt gcc atc gac cca       3304
Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro
    940                 945                 950
gcg acc gct gaa gag ttc aac cca ctc cac gag ctt gca cag tcc aag       3352
Ala Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys
955                 960                 965                 970
ggc aac aac ggt aag ttc ctg gtc tac aac tcc gca ctg acc gag tac       3400
Gly Asn Asn Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr
                975                 980                 985
gca ggc atg ggc ttc gag tac ggc tac tcc gta gga aac gaa gac tcc       3448
Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Ash Glu Asp Set
            990                 995                 1000
gtc gtt gca tgg gaa gca cag ttc ggc gac ttc gcc aac ggc gct           3493
Val Val Ala Trp Glu Ala Gln Phe Gly Asp Phe Ala Ash Gly Ala
        1005                1010                1015
cag acc atc atc gat gag tac gtc tcc tca ggc gaa gct aag tgg           3538
Gln Thr Ile Ile Asp Glu Tyr Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp
        1020                1025                1030
ggc cag acc tcc aag ctg atc ctt ctg ctg cct cac ggc tac gaa           3583
Gly Gln Thr Ser Lys Leu Ile Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu
        1035                1040                1045
ggc cag ggc cca gac cac tct tcc gca cgt atc gag cgc ttc ctg           3628
Gly Gln Gly Pro Asp His Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu
        1050                1055                1060
cag ctg tgc gct gag ggt tcc atg act gtt gct cag cca tcc acc           3673
Gln Leu Cys Ala Glu Gly Ser Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr
        1065                1070                1075
cca gca aac cac ttc cac ctg ctg cgt cgt cac gct ctg tcc gac           3718
Pro Ala Ash His Phe His Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp
        1080                1085                1090
ctg aag cgt cca ctg gtt atc ttc acc ccg aag tcc atg ctg cgt           3763
Leu Lys Arg Pro Leu Val Ile Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg
        1095                1100                1105
aac aag gct gct gcc tcc gca cca gaa gac ttc act gag gtc acc           3208
Asn Lys Ala Ala Ala Ser Ala Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr
        1110                1115                1120
aag ttc caa tcc gtg atc gac gat cca aac gtt gca gat gca gcc           3853
Lys Phe Gln Ser Val Ile Asp Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala
        1125                1130                1135
aag gtg aag aag gtc atg ctg gtc tcc ggc aag ctg tac tac gaa           3898
Lys Val Lys Lys Val Met Leu Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu
        1140                1145                1150
ttg gca aag cgc aag gag aag gac gga cgc gac gac atc gcg atc           3943
Leu Ala Lys Arg Lys Glu Lys Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile
        1155                1160                1165
gtt cgt atc gaa atg ctc cac cca att ccg ttc aac cgc atc tcc           3988
Val Arg Ile Glu Met Leu His Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser
        1170                1175                1180
gag gct ctt gcc ggc tac cct aac gct gag gaa gtc ctc ttc gtt           4033
Glu Ala Leu Ala Gly Tyr Pro Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val
        1185                1190                1195
cag gat gag cca gca aac cag ggc cca tgg ccg ttc tac cag gag           4078
Gln Asp Glu Pro Ala Ash Gln Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu
        1200                1205                1210
cac ctc cca gag ctg atc ccg aac atg cca aag atg cgc cgc gtt           4123
His Leu Pro Glu Leu Ile Pro Ash Met Pro Lys Met Arg Arg Val
        1215                1220                1225
tcc cgc cgc gct cag tcc tcc acc gca act ggt gtt gct aag gtg           4168
Ser Arg Arg Ala Gln Ser Ser Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val
        1230                1235                1240
cac cag ctg gag gag aag cag ctt atc gac gag gct ttc gag gct           4213
His Gln Leu Glu Glu Lys Gln Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
        1245                1250                1255
taagtcttta tagtcctgca ctagcctaga gggccttatg cagtgtgaat cacacagcat     4273
aaggcccttt ttgctgccgt ggttgcctaa ggtggaaggc atgaaacgaa tctgtgcggt     4333
cacgatctct tcagtacttt tgctaagtgg ctgctcctcc acttccacca cgcagctcga     4393
g                                                                     4394
<210>10
<211>1257
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>10
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Ala
65                  70                  75                  80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                 85                  90                  95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                 120                 125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro
    210                 215                 220
Thr Leu Ile Val Pro Glu Hi sIle Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu
225                 230                 235                 240
Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu
                245                 250                 255
Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile
            260                 265                 270
Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly
        275                 280                 285
Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser
    290                 295                 300
Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser
305                 310                 315                 320
Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His
            340                 345                 350
Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser
        355                 360                 365
Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met
    370                 375                 380
Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr
 385                 390                 395                 400
Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg
                405                 410                 415
Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln
            420                 425                 430
Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His
        435                 440                 445
Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Ser Val Gly Gly Phe
    450                 455                 460
Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg
465                 470                 475                 480
Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr Hi sIle Leu Asp
                485                 490                 495
Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro
            500                 505                 510
Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala
        515                 520                 525
Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys
    530                 535                 540
Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser
545                 550                 555                 560
Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly
                565                 570                 575
Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys
            580                 585                 590
Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly
        595                 600                 605
Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly
    610                 615                 620
Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr
625                 630                 635                 640
Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile
                645                 650                 655
Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr
            660                 665                 670
Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly
        675                 680                 685
Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Leu Arg Gly Tyr Asp Val
    690                 695                 700
Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr
705                 710                 715                 720
Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys
                725                 730                 735
Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala
            740                 745                 750
Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly
        755                 760                 765
Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn
    770                 775                 780
Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile
785                 790                 795                 800
Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly
                805                 810                 815
Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe
            820                 825                 830
His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys
        835                 840                 845
Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro
    850                 855                 860
His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly
865                 870                 875                 880
Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val
                885                 890                 895
Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile
            900                 905                 910
Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser
        915                 920                 925
Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe
    930                 935                 940
Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe
945                 950                 955                 960
Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe
                965                 970                 975
Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu
            980                 985                 990
Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val Val Ala Trp Glu Ala
        995                 1000                1005
Gln Phe Gly Asp Phe Ala Asn Gly Ala Gln Thr Ile Ile Asp Glu
    1010                 1015               1020
Tyr Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp Gly Gln Thr Ser Lys Leu
    1025                1030                1035
Ile Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu Gly Gln Gly Pro Asp His
    1040                1045                1050
Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln Leu Cys Ala Glu Gly
    1055                1060                1065
Ser Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro Ala Asn His Phe His
    1070                1075                1080
Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu Lys Arg Pro Leu Val
    1085                1090                1095
Ile Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn Lys Ala Ala Ala Ser
    1100                1105                1110
Ala Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr Lys Phe Gln Ser Val Ile
    1115                1120                1125
Asp Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala Lys Val Lys Lys Val Met
    1130                1135                1140
Leu Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu Ala Lys Arg Lys Glu
    1145                1150                1155
Lys Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val Arg Ile Glu Met Leu
    1160                1165                1170
His Pro Ile Pro Phe Ash Arg Ile Ser Glu Ala Leu Ala Gly Tyr
    1175                1180                1185
Pro Ash Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Asn
    1190                1195                1200
Gln Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Glu Leu Ile
    1205                1210                1215
Pro Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser Arg Arg Ala Gln Ser
    1220                1225                1230
Ser Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His Gln Leu Glu Glu Lys
    1235                1240                1245
Gln Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
    1250                1255
<210>11
<211>4391
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(443)..(4213)
<223>
<400>11
gtcgacaagc aaaatcgaag cggcagcacg ccgcgtcgga gccttaaacg ccatcgccgc                60
catccctgat ggtttcaatc atcaagtcgg tgaacgcggg cgcaacctgt catccggaca               120
gcgccaactg atcgcgctgg cgcgcgccga actcatcgag ccttccatca tgcttctcga               180
cgaagccacc tccaccctcg accccgccac cgaagccgtt atcctcaacg cctccgatcg               240
agtcactaag ggacgcacca gcatcatcgt cgcgcaccgc ttggcaaccg ctaaaagggc               300
cgaccgtatt cttgttgttg aacaaggacg tatcattgag gacggatctc acgacgcgtt               360
gttgtctgct aacggcacct acgcccgcat gtggcattta atggcctgac acgttatttt               420
taggagaact gtcaacaaat ta atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag                472
                         Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln
                         1               5               10
cca acg acc aac gtt aca gtg gat aaa ata aag ctc aat aaa ccc tca                 520
Pro Thr Thr Ash Val Thr Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser
                15                  20                  25
aga agc aag gaa aag agg cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act                 568
Arg Set Lys Glu Lys Arg Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr
            30                  35                  40
ttc ggc cag aat gcg tgg ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag      616
Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln
        45                  50                  55
aag gac ccc aag tcc gtg gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg      664
Lys Asp Pro Lys Ser Val Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala
    60                  65                  70
cag ggg gga cca aat gct acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca      712
Gln Gly Gly Pro Asn Ala Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser
75                  80                  85                  90
gcg ccc aag gag tct gcg aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc      760
Ala Pro Lys Glu Ser Ala Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala
                95                  100                 105
aag gca gca ccg cgc gta gaa acc aag ccg gcc gcc aag acc gcc cct      808
Lys Ala Ala Pro Arg Val Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro
            110                 115                 120
aag gcc aag gag tcc tca gtg cca cag caa cct aag ctt ccg gag cca      856
Lys Ala Lys Glu Ser Ser Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro
        125                 130                 135
gga caa acc cca atc agg ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg      904
Gly Gln Thr Pro Ile Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met
    140                 145                 150
gat atc tcc ctg gaa atc cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca      952
Asp Ile Ser Leu Glu Ile Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro
155                 160                 165                 170
gct cgc ctc atg ttc gaa aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag     1000
Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys
                175                 180                 185
cgc acc cgc ggt ggc aag atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc     1048
Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala
            190                 195                 200
atg gtg aag gca gtc atg gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac cat     1096
Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr His
        205                 210                 215
cga cgg cag gcc cca acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg ggc     1144
Arg Arg Gln Ala Pro Thr Leu Ile Val Pro Glu Hi s Ile Asn Leu Gly
    220                 225                 230
ctt gcc atc gac ctt cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc gta     1192
Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val
235                 240                 245                 250
gca gcc atc aag gaa acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc gca     1240
Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala
                255                 260                 265
gca tac gaa gac atc gtg aca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc atg     1288
Ala Tyr Glu Asp Ile Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met
            270                 275                 280
gat gac tac cag ggc gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc atc     1336
Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile
        285                 290                 295
ggt acc cgc cac tct gtc cca cgt ctg acc aag ggc cag ggc acc atc     1384
Gly Thr Arg His Ser Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile
    300                 305                 3l0
atc ggt gtc ggt tcc atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct tcc     1432
Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser
315                 320                 325                 330
gaa gac cgc ctt gca gag ctc ggc gtt gga aag ctt gtc acc atc acc     1480
Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr
                335                 340                 345
tcc acc tac gat cac cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa ttc     1528
Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe
            350                 355                 360
ctg cgt acc atg tct cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gat gag     1576
Leu Arg Thr Met Ser Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu
        365                 370                 375
atc ttc gac gca atg aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca cag      1624
Ile Phe Asp Ala Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln
    380                 385                 390
gac gtt cca aac acc ggt gtt gat aag aac acc cgc gtc atg cag ctc      1672
Asp Val Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu
395                 400                 405                 410
att gag gca tac cgc tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac cca      1720
Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro
                415                 420                 425
ctt tca tgg gtt cag cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac ctc      1768
Leu Ser Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu
            430                 435                 440
gac atc gag acc cac agc ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc ttc      1816
Asp Ile Glu Thr His Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe
       445                 450                 455
agc gtc ggt ggc ttc ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag gta      1864
Ser Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val
    460                 465                 470
ctg tcc cgc ctg cgc gct gcc tac acc ttg aag gtc ggc tcc gaa tac      1912
Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr
475                 480                 485                 490
acc cac atc ctg gac cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc ctc      1960
Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu
                 495                 500                 505
gaa gcc gga atg cca aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc ctg      2008
Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu
            510                 515                 520
cag aag ctg aac gcc gca gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc aag      2056
Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys
        525                 530                 535
tac gtc ggc cag aag cgc ttc tcc ctc gaa ggt gca gaa gct ctc atc      2104
Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile
    540                 545                 550
cca ctg atg gac tcc gcc atc gac acc gcc gca ggc cag ggc ctc gac      2152
Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp
555                 560                 565                 570
gaa gtt gtc atc ggt atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg ttc      2200
Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe
                575                 580                 585
aac atc gtg ggc aag cca ctg gca tcc atc ttc aac gag ttt gaa ggc      2248
Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly
            590                 595                 600
caa atg gag cag ggc cag atc ggt ggc tcc ggt gac gtg aag tac cac      2296
Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His
        605                 610                 615
ctc ggt tcc gaa ggc cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag atc      2344
Leu Gly Ser Glu Gly Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile
    620                 625                 630
aag gtc tcc ctg act gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac cca      2392
Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro
635                 640                 645                 650
gtg atg gaa ggt atc gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag ggc      2440
Val Met Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly
                655                 660                 665
gta gac ggc aag act gtt gtg cca ctg ctg ctc cac ggt gac gct gca      2488
Val Asp Gly Lys Thr Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala
            670                 675                 680
ttc gca ggc ctg ggc atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct aag ctg      2536
Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Leu
        685                 690                 695
cgt ggc tac gac gtc gga ggc acc atc cac atc gtg gtg aac aac cag      2584
Arg Gly Tyr Asp Val Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln
    700                 705                 710
atc ggc ttc acc acc acc cca gac tcc agc cgc tcc atg cac tac gca    2632
Ile Gly Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala
715                 720                 725                 730
acc gac tac gcc aag gca ttc ggc tgc cca gtc ttc cac gtc aat ggt    2680
Thr Asp Tyr Ala Lys Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly
                735                 740                 745
gat gac cca gag gca gtt gtc tgg gtt ggc cag ctg gca acc gag tac    2728
Asp Asp Pro Glu Ala Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr
            750                 755                 760
cgt cgt cgc ttc ggc aag gac gtc ttc atc gac ctc gtt tgc tac cgc    2776
Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg
        765                 770                 775
ctc cgc ggc cac aac gaa gct gat gat cct tcc atg acc cag cca aag    2824
Leu Arg Gly His Asn Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys
    780                 785                 790
atg tat gag ctc atc acc ggc cgc gag acc gtt cgt gct cag tac acc    2872
Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr
795                 800                 805                 810
gaa gac ctg ctc gga cgt gga gac ctc tcc aac gaa gatgca gaa gca     2920
Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala
                815                 820                 825
gtc gtc cgc gac ttc cac gac cag atg gaa tct gtg ttc aac gaa gtc    2968
Val Val Arg Asp Phe His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val
            830                 835                 840
aag gaa ggc ggc aag aag cag gct gag gca cag acc ggc atc acc ggc    3016
Lys Glu Gly Gly Lys Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly
        845                 850                 855
tcc cag aag ctt cca cac ggc ctt gag acc aac atc tcc cgt gaa gag    3064
Ser Gln Lys Leu Pro His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu
    860                 865                 870
ctc ctg gaa ctg gga cag gct ttc gcc aac acc cca gaa ggc ttc aac    3112
Leu Leu Glu Leu Gly Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn
875                 880                 885                 890
tac cac cca cgt gtg gct cca gtt gct aag aag cgc gtc tcc tct gtc    3160
Tyr His Pro Arg Val Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val
                895                 900                 905
acc gaa ggt ggc atc gac tgg gca tgg ggc gag ctc ctc gcc ttc ggt    3208
Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly
            910                 915                 920
tcc ctg gct aac tcc ggc cgc ttg gtt cgc ctt gca ggt gaa gat tcc    3256
Ser Leu Ala Asn Ser Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser
        925                 930                 935
cgc cgc ggt acc ttc acc cag cgc cac gca gtt gcc atc gac cca gcg    3304
Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala
    940                 945                 950
acc gct gaa gag ttc aac cca ctc cac gag ctt gca cag tcc aag ggc    3352
Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly
955                 960                 965                 970
aac aac ggt aag ttc ctg gtc tac aac tcc gca ctg acc gag tac gca    3400
Asn Asn Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala
                975                 980                 985
ggc atg ggc ttc gag tac ggc tac tcc gta gga aac gaa gac  tcc gtc   3448
Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp  Ser Val
            990                 995                 1000
gtt gca tgg gaa gca cag ttc ggc gac ttc gcc aac ggc gct cag        3493
Val Ala Trp Glu Ala Gln Phe Gly Asp Phe Ala Asn Gly Ala Gln
        1005                1010                1015
acc atc atc gat gag tac gtc tcc tca ggc gaa gct aag tgg ggc        3538
Thr Ile Ile Asp Glu Tyr Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp Gly
        1020                1025                1030
cag acc tcc aag ctg atc ctt ctg ctg cct cac ggc tac gaa ggc        3583
Gln Thr Ser Lys Leu Ile Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu Gly
        1035                l040                1045
cag ggc cca gac cac tct tcc gca cgt arc gag cgc ttc ctg cag        3628
Gln Gly Pro Asp His Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln
        1050                1055                1060
ctg tgc gct gag ggt tcc atg act gtt gct cag cca tcc acc cca        3673
Leu Cys Ala Glu Gly Ser Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro
        1065                1070                1075
gca aac cac ttc cac ctg ctg cgt cgt cac gct ctg tcc gac ctg        3718
Ala Asn His Phe His Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu
        1080                1085                1090
aag cgt cca ctg gtt arc ttc acc ccg aag tcc atg ctg cgt aac        3763
Lys Arg Pro Leu Val Ile Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn
        1095                1100                1105
aag gct gct gcc tcc gca cca gaa gac ttc act gag gtc acc aag        3808
Lys Ala Ala Ala Ser Ala Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr Lys
        1110                1115                1120
ttc caa tcc gtg atc gac gat cca aac gtt gca gat gca gcc aag        3853
Phe Gln Ser Val Ile Asp Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala Lys
        1125                1130                1135
gtg aag aag gtc atg ctg gtc tcc ggc aag ctg tac tac gaa ttg        3898
Val Lys Lys Val Met Leu Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu
        1140                1145                1150
gca aag cgc aag gag aag gac gga cgc gac gac atc gcg atc gtt        3943
Ala Lys Arg Lys Glu Lys Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val
        1155                1160                1165
cgt atc gaa atg ctc cac cca att ccg ttc aac cgc atc tcc gag        3988
Arg Ile Glu Met Leu His Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser Glu
        1170                1175                1180
gct ctt gcc ggc tac cct aac gct gag gaa gtc ctc ttc gtt cag        4033
Ala Leu Ala Gly Tyr Pro Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln
        1185                1190                1195
gat gag cca gca aac cag ggc cca tgg ccg ttc tac cag gag cac        4078
Asp Glu Pro Ala Asn Gln Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His
        1200                1205                1210
ctc cca gag ctg atc ccg aac atg cca aag atg cgc cgc gtt tcc        4123
Leu Pro Glu Leu Ile Pro Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser
        1215                1220                1225
cgc cgc gct cag tcc tcc acc gca act ggt gtt gct aag gtg cac        4168
Arg Arg Ala Gln Ser Ser Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His
        1230                1235                1240
cag ctg gag gag aag cag ctt atc gac gag gct ttc gag gct taa        4213
Gln Leu Glu Glu Lys Gln Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
        1245                1250                1255
gtctttatag tcctgcacta gcctagaggg ccttatgcag tgtgaatcac acagcataag  4273
gccctttttg ctgccgtggt tgcctaaggt ggaaggcatg aaacgaatct gtgcggtcac  4333
gatctcttca gtacttttgc taagtggctg ctcctccact tccaccacgc agctcgag    4391
<210>12
<211>1256
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>12
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Ash Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Ala
65                  70                  75                  80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90                  95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                 120                 125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr His Arg Arg Gln Ala Pro Thr
    210                 215                 220
Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro
225                 230                 235                 240
Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr
                245                 250                 255
Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile Val
            260                 265                 270
Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val
        275                 280                 285
Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser Val
    290                 295                 300
Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser Met
305                 310                 315                 320
Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu
                325                 330                 335
Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg
            340                 345                 350
Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser Arg
        355                 360                 365
Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met Asn
    370                 375                 380
Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr Gly
385                 390                 395                 400
Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser
                405                 410                 415
Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln Pro
            420                 425                 430
Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His Ser
        435                 440                 445
Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Ser Val Gly Gly Phe Gly
    450                 455                 460
Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala
465                 470                 475                 480
Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg
                485                 490                 495
Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys
            500                 505                 510
Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala
        515                 520                 525
Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg
    530                 535                 540
Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala
545                 550                 555                 560
Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly Met
                565                 570                 575
Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro
            580                 585                 590
Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln
        595                 600                 605
Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly Gln
    610                 615                 620
His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala
625                 630                 635                 640
Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile Val
                645                 650                 655
Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr Val
            660                 665                 670
Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile
        675                 680                 685
Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Leu Arg Gly Tyr Asp Val Gly
    690                 695                 700
Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr
705                 710                 715                 720
Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys Ala
                725                 730                 735
Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val
            740                 745                 750
Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys
        755                 760                 765
Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn Glu
    770                 775                 780
Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr
785                 790                 795                 800
Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg
                805                 810                 815
Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe His
            820                 825                 830
Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys Lys
        835                 840                 845
Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro His
    850                 855                 860
Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly Gln
865                 870                 875                 880
Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val Ala
                885                 890                 895
Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp
            900                 905                 910
Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser Gly
        915                 920                 925
Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr
    930                 935                 940
Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe Asn
945                 950                 955                 960
Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe Leu
                965                 970                 975
Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr
            980                 985                 990
Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val Val Ala Trp Glu Ala Gln
        995                 1000                1005
Phe Gly Asp Phe Ala Asn Gly Ala Gln Thr Ile Ile Asp Glu Tyr
    1010                1015            1020
Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp Gly Gln Thr Ser Lys Leu Ile
    1025                1030            1035
Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu Gly Gln Gly Pro Asp His Ser
    1040                1045            1050
Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln Leu Cys Ala Glu Gly Ser
    1055                1060            1065
Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro Ala Asn His Phe His Leu
    1070                1075            1080
Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu Lys Arg Pro Leu Val Ile
    1085                1090                1095
Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn Lys Ala Ala Ala Ser Ala
    1100                1105                1110
Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr Lys Phe Gln Ser Val Ile Asp
    1115                1120                1125
Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala Lys Val Lys Lys Val Met Leu
    1130                1135                1140
Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu Ala Lys Arg Lys Glu Lys
    1145                1150                1155
Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val Arg Ile Glu Met Leu His
    1160                1165                1170
Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser Glu Ala Leu Ala Gly Tyr Pro
    1175                1180                1185
Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Asn Gln
    1190                1195                1200
Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Glu Leu Ile Pro
    1205                1210                1215
Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser Arg Arg Ala Gln Ser Ser
    1220                1225                1230
Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His Gln Leu Glu Glu Lys Gln
    1235                1240                1245
Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
    1250                1255
<210>13
<211>4388
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(443)..(4213)
<223>
<400>13
gtcgacaagc aaaatcgaag cggcagcacg ccgcgtcgga gccttaaacg ccatcgccgc        60
catccctgat ggtttcaatc atcaagtcgg tgaacgcggg cgcaacctgt catccggaca       120
gcgccaactg atcgcgctgg cgcgcgccga actcatcgag ccttccatca tgcttctcga       180
cgaagccacc tccaccctcg accccgccac cgaagccgtt atcctcaacg cctccgatcg       240
agtcactaag ggacgcacca gcatcatcgt cgcgcaccgc ttggcaaccg ctaaaagggc       300
cgaccgtatt cttgttgttg aacaaggacg tatcattgag gacggatctc acgacgcgtt       360
gttgtctgct aacggcacct acgcccgcat gtggcattta atggcctgac acgttatttt       420
taggagaact gtcaacaaat ta atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag        472
                        Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg Hi s Asn Gln
                        1               5                    10
cca acg acc aac gtt aca gtg gat aaa ata aag ctc aat aaa ccc tca         520
Pro Thr Thr Asn Val Thr Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser
                15                20                    25
aga agc aag gaa aag agg cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act         568
Arg Ser Lys Glu Lys Arg Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr
            30                  35                  40
ttc ggc cag aat gcg tgg ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag         616
Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln
        45                  50                  55
aag gac ccc aag tcc gtg gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg         664
Lys Asp Pro Lys Ser Val Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala
    60                  65                  70
cag ggg gga cca aat gct acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca         712
Gln Gly Gly Pro Asn Ala Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser
75                  80                  85                  90
gcg ccc aag gag tct gcg aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc         760
Ala Pro Lys Glu Ser Ala Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala
                95                  100                 105
aag gca gca ccg cgc gta gaa acc aag ccg gcc gcc aag acc gcc cct    808
Lys Ala Ala Pro Arg Val Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro
            110                 115                 120
aag gcc aag gag tcc tca gtg cca cag caa cct aag ctt ccg gag cca    856
Lys Ala Lys Glu Ser Ser Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro
        125                 130                 135
gga caa acc cca atc agg ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg    904
Gly Gln Thr Pro Ile Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met
    140                 145                 150
gat atc tcc ctg gaa atc cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca    952
Asp Ile Ser Leu Glu Ile Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro
155                 160                 165                 170
gct cgc ctc atg ttc gaa aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag   1000
Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys
                175                 180                 185
cgc acc cgc ggt ggc aag atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc   1048
Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala
            190                 195                 200
atg gtg aag gca gtc atg gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac gac   1096
Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp
        205                 210                 215
gtc atc gac ggc aag cca acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg   1144
Val Ile Asp Gly Lys Pro Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu
    220                 225                 230
ggc ctt gcc atc gac ctt cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc   1192
Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val
235                 240                 245                 250
gta gca gcc atc aag gaa acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc   1240
Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu
                255                 260                 265
gca gca tac gaa gac atc gtg aca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc   1288
Ala Ala Tyr Glu Asp Ile Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr
            270                 275                 280
atg gat gac tac cag ggc gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc   1336
Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly
        285                 290                 295
atc ggt acc cgc cac tct gtc cca cgt ctg acc aag ggc cag ggc acc   1384
Ile Gly Thr Arg His Ser Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr
    300                 305                 310
atc atc ggt gtc ggt tcc atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct   1432
Ile Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala
315                 320                 325                 330
tcc gaa gac cgc ctt gca gag ctc ggc gtt gga aag cttgtc acc atc    1480
Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile
                335                 340                 345
cc tcc acc tac gat cac cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa    1528
Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu
            350                 355                 360
ttc ctg cgt acc atg tct cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gat   1576
Phe Leu Arg Thr Met Ser Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp
        365                 370                 375
gag atc ttc gac gca atg aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca   1624
Glu Ile Phe Asp Ala Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala
    380                 385                 390
cag gac gtt cca aac acc ggt gtt gat aag aac acc cgc gtc atg cag   1672
Gln Asp Val Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln
395                 400                 405                 410
ctc att gag gca tac cgc tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac   1720
Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn
                415                 420                 425
cca ctt tca tgg gtt cag cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac   1768
Pro Leu Ser Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp
            430                 435                 440
ctc gac atc gag acc cac agc ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc    1816
Leu Asp Ile Glu Thr His Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr
        445                 450                 455
ttc agc gtc ggt ggc ttc ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag    1864
Phe Ser Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu
    460                 465                 470
gta ctg tcc cgc ctg cgc gct gcc tac acc ttg aag gtc ggc tcc gaa    1912
Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu
475                 480                 485                 490
tac acc cac atc ctg gac cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc    1960
Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg
                495                 500                 505
ctc gaa gcc gga atg cca aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc    2008
Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile
            510                 515                 520
ctg cag aag ctg aac gcc gca gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc    2056
Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr
        525                 530                 535
aag tac gtc ggc cag aag cgc ttc tcc ctc gaa ggt gca gaa gct ctc    2104
Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu
    540                 545                 550
atc cca ctg atg gac tcc gcc atc gac acc gcc gca ggc cag ggc ctc    2152
Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu
555                 560                 565                 570
gac gaa gtt gtc atc ggt atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg    2200
Asp Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu
                575                 580                 585
ttc aac atc gtg ggc aag cca ctg gca tcc atc ttc aac gag ttt gaa    2248
Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu
            590                 595                 600
ggc caa atg gag cag ggc cag atc ggt ggc tcc ggt gac gtg aag tac    2296
Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr
        605                 610                 615
cac ctc ggt tcc gaa ggc cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag    2344
His Leu Gly Ser Glu Gly Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu
    620                 625                 630
atc aag gtc tcc ctg act gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac    2392
Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn
635                 640                 645                 650
cca gtg atg gaa ggt atc gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag    2440
Pro Val Met Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys
                655                 660                 665
ggc gta gac ggc aag act gtt gtg cca ctg ctg ctc cac ggt gac gct    2488
Gly Val Asp Gly Lys Thr Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala
            670                 675                 680
gca ttc gca ggc ctg ggc atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct aag    2536
Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys
        685                 690                 695
cgc gtc gac gtc gga ggc acc atc cac atc gtg gtg aac aac cag atc    2584
Arg Val Asp Val Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile
    700                 705                 710
ggc ttc acc acc acc cca gac tcc agc cgc tcc atg cac tac gca acc    2632
Gly Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr
715                 720                 725                 730
gac tac gcc aag gca ttc ggc tgc cca gtc ttc cac gtc aat ggt gat    2680
Asp Tyr Ala Lys Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp
                735                 740                 745
gac cca gag gca gtt gtc tgg gtt ggc cag ctg gca acc gag tac cgt    2728
Asp Pro Glu Ala Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg
            750                 755                 760
cgt cgc ttc ggc aag gac gtc ttc atc gac ctc gtt tgc tac cgc ctc    2776
Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu
        765                 770                 775
cgc ggc cac aac gaa gct gat gat cct tcc atg acc cag eca aag atg    2824
Arg Gly His Asn Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met
    780                 785                 790
tat gag ctc atc acc ggc cgc gag acc gtt cgt gct cag tac acc gaa    2872
Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu
795                 800                 805                 810
gac ctg ctc gga cgt gga gac ctc tcc aac gaa gat gca gaa gca gtc    2920
Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val
                815                 820                 825
gtc cgc gac ttc cac gac cag atg gaa tct gtg ttc aac gaa gtc aag    2968
Val Arg Asp Phe His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys
            830                 835                 840
gaa ggc ggc aag aag cag gct gag gca cag acc ggc atc acc ggc tcc    3016
Glu Gly Gly Lys Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser
        845                 850                 855
cag aag ctt cca cac ggc ctt gag acc aac atc tcc cgt gaa gag ctc    3064
Gln Lys Leu Pro His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu
    860                 865                 870
ctg gaa ctg gga cag gct ttc gcc aac acc cca gaa ggc ttc aac tac    3112
Leu Glu Leu Gly Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr
875                 880                 885                 890
cac cca cgt gtg gct cca gtt gct aag aag cgc gtc tcc tct gtc acc    3160
His Pro Arg Val Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr
                895                 900                 905
gaa ggt ggc atc gac tgg gca tgg ggc gag ctc ctc gcc ttc ggt tcc    3208
Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser
            910                 915                 920
ctg gct aac tcc ggc cgc ttg gtt cgc ctt gca ggt gaa gat tcc cgc    3256
Leu Ala Asn Ser Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg
        925                 930                 935
cgc ggt acc ttc acc cag cgc cac gca gtt gcc atc gac cca gcg acc    3304
Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr
    940                 945                 950
gct gaa gag ttc aac cca ctc cac gag ctt gca cag tcc aag ggc aac    3352
Ala Glu GluPhe Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn
955                 960                 965                 970
aac ggt aag ttc ctg gtc tac aac tcc gca ctg acc gag tac gca ggc    3400
Asn Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly
                975                 980                 985
atg ggc ttc gag tac ggc tac tcc gta gga aac gaa gac tcc gtc gtt    3448
Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val Val
            990                 995                 1000
gca tgg gaa gca cag ttc ggc gac ttc gcc aac ggc gct cag acc        3493
Ala Trp Glu Ala Gln Phe Gly Asp Phe Ala Asn Gly Ala Gln Thr
        1005                 1010                 1015
atc atc gat gag tac gtc tcc tca ggc gaa gct aag tgg ggc cag        3538
Ile Ile Asp Glu Tyr Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp Gly Gln
        1020                 1025                 1030
acc tcc aag ctg atc ctt ctg ctg cct cac ggc tac gaa ggc cag        3583
Thr Ser Lys Leu Ile Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu Gly Gln
        1035                 1040                 1045
ggc cca gac cac tct tcc gca cgt atc gag cgc ttc ctg cag ctg        3628
Gly Pro Asp His Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln Leu
        1050                 1055                 1060
tgc gct gag ggt tcc atg act gtt gct cag cca tcc acc cca gca        3673
Cys Ala Glu Gly Ser Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro Ala
         1065                 1070                 1075
aac cac ttc cac ctg ctg cgt cgt cac gct ctg tcc gac ctg aag        3718
Asn His Phe His Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu Lys
        1080                 1085                 1090
cgt cca ctg gtt atc ttc acc ccg aag tcc atg ctg cgt aac aag        3763
Arg Pro Leu  Val Ile Phe Thr  Pro Lys Ser Met Leu Arg  Asn Lys
        1095                  1100                1105
gct gct gcc  tcc gca cca gaa gac  ttc act gag gtc acc  aag ttc    3808
Ala Ala Ala  Ser Ala Pro Glu Asp  Phe Thr Glu Val Thr  Lys Phe
        1110                 1115                 1120
caa tcc gtg  atc gac gat cca aac  gtt gca gat gca gcc  aag gtg    3853
Gln Ser Val  Ile Asp Asp Pro Asn  Val Ala Asp Ala Ala  Lys Val
        1125                 1130                 1135
aag aag gtc  atg ctg gtc tcc ggc  aag ctg tac tac gaa  ttg gca    3898
Lys Lys Val  Met Leu Val Ser Gly  Lys Leu Tyr Tyr Glu  Leu Ala
        1140                 1145                 1150
aag cgc aag  gag aag gac gga cgc  gac gac atc gcg arc  gtt cgt    3943
Lys Arg Lys  Glu Lys Asp Gly Arg  Asp Asp Ile Ala Ile  Val Arg
        1155                 1160                 1165
atc gaa atg  ctc cac cca att ccg  ttc aac cgc atc tcc  gag gct    3988
Ile Glu Met  Leu His Pro Ile Pro  Phe Asn Arg Ile Ser  Glu Ala
        1170                 1175                 1180
ctt gcc ggc  tac cct aac gct gag  gaa gtc ctc ttc gtt  cag gat    4033
Leu Ala Gly  Tyr Pro Asn Ala Glu  Glu Val Leu Phe Val  Gln Asp
        1185                 1190                 1195
gag cca gca  aac cag ggc cca tgg  ccg ttc tac cag gag  cac ctc    4078
Glu Pro Ala  Asn Gln Gly Pro Trp  Pro Phe Tyr Gln Glu  His Leu
        1200                 1205                 1210
cca gag ctg  atc ccg aac atg cca  aag atg cgc cgc gtt  tcc cgc    4123
Pro Glu Leu  Ile Pro Asn Met Pro  Lys Met Arg Arg Val  Ser Arg
        1215                 1220                 1225
cgc gct cag  tcc tcc acc gca act  ggt gtt gct aag gtg  cac cag    4168
Arg Ala Gln  Ser Ser Thr Ala Thr  Gly Val Ala Lys Val  His Gln
        1230                 1235                 1240
ctg gag gag  aag cag ctt atc gac  gag gct ttc gag gct taa gtc     4213
Leu Glu Glu  Lys Gln Leu Ile Asp  Glu Ala Phe Glu Ala     Val
        1245                 1250                 1255
tttatagtcc tgcactagcc tagagggcct tatgcagtgt gaatcacaca gcataaggcc 4273
ctttttgctg ccgtggttgc ctaaggtgga aggcatgaaa cgaatctgtg cggtcacgat 4333
ctcttcagta cttttgctaa gtggctgctc ctccacttcc accacgcagc tcgag      4388
<210>14
<211>1255
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>14
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Ash Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Ala
65                  70                  75                  80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90                  95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                 120                 125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro
    210                 215                 220
Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu AlaIle Asp Leu
225                 230                 235                 240
Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu
                245                 250                 255
Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile
            260                 265                 270
Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly
        275                 280                 285
Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser
    290                 295                 300
Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser
305                 310                 315                 320
Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr SerThr Tyr Asp His
            340                 345                 350
Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser
        355                 360                 365
Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met
    370                 375                 380
Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr
385                 390                 395                 400
Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg
                405                 410                 415
Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln
            420                 425                 430
Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His
        435                 440                 445
Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Ser Val Gly Gly Phe
    450                 455                 460
Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg
465                 470                 475                 480
Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp
                485                 490                 495
Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro
            500                 505                 510
Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala
        515                 520                 525
Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys
    530                 535                 540
Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser
545                 550                 555                 560
Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly
                565                 570                 575
Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys
           580                 585                 590
Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly
        595                 600                 605
Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly
    610                 615                 620
Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr
625                 630                 635                 640
Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile
                645                 650                 655
Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr
            660                 665                 670
Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly
        675                 680                 685
Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Arg Val Asp Val Gly Gly
    690                 695                 700
Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr Pro
705                 710                 715                 720
Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys Ala Phe
                725                 730                 735
Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val Val
            740                 745                 750
Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp
        755                 760                 765
Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn Glu Ala
    770                 775                 780
Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly
785                 790                 795                 800
Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly
                805                 810                 815
Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe His Asp
            820                 825                 830
Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys Lys Gln
        835                 840                 845
Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro His Gly
    850                 855                 860
Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly Gln Ala
865                 870                 875                 880
Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val Ala Pro
                885                 890                 895
Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp
            900                 905                 910
Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser Gly Arg
        915                 920                 925
Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln
    930                 935                 940
Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro
945                 950                 955                 960
Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe Leu Val
                965                 970                 975
Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly
            980                 985                 990
Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val Val Ala Trp Glu Ala Gln Phe
        995                 1000                1005
Gly Asp  Phe Ala Asn Gly Ala  Gln Thr Ile Ile Asp  Glu Tyr Val
    1010                 1015                 1020
Ser Ser  Gly Glu Ala Lys Trp  Gly Gln Thr Ser Lys  Leu Ile Leu
    1025                 1030                 1035
Leu Leu  Pro His Gly Tyr Glu  Gly Gln Gly Pro Asp  His Ser Ser
    1040                 1045                 1050
Ala Arg  Ile Glu Arg Phe Leu  Gln Leu Cys Ala Glu  Gly Ser Met
    1055                 1060                 1065
Thr Val  Ala Gln Pro Ser Thr  Pro Ala Asn His Phe  His Leu Leu
    1070                 1075                 1080
Arg Arg  His Ala Leu Ser Asp  Leu Lys Arg Pro Leu  Val Ile Phe
    1085                 1090                 1095
Thr Pro  Lys Ser Met Leu Arg  Asn Lys Ala Ala Ala  Ser Ala Pro
    1100                 1105                 1110
Glu Asp  Phe Thr Glu Val Thr  Lys Phe Gln Ser Val  Ile Asp Asp
    1115                 1120                 1125
Pro Asn  Val Ala Asp Ala Ala  Lys Val Lys Lys Val  Met Leu Val
    1130                 1135                 1140
Ser Gly  Lys Leu Tyr Tyr Glu  Leu Ala Lys Arg Lys  Glu Lys Asp
    1145                 1150                 1155
Gly Arg  Asp Asp Ile Ala Ile  Val Arg Ile Glu Met  Leu His Pro
    1160                 1165                 1170
Ile Pro  Phe Asn Arg Ile Ser  Glu Ala Leu Ala Gly  Tyr Pro Asn
    1175                 1180                 1185
Ala Glu  Glu Val Leu Phe Val  Gln Asp Glu Pro Ala  Asn Gln Gly
    1190                 1195                 1200
Pro Trp  Pro Phe Tyr Gln Glu  His Leu Pro Glu Leu  Ile Pro Asn
    1205                 1210                 1215
Met Pro  Lys Met Arg Arg Val  Ser Arg Arg Ala Gln  Ser Ser Thr
    1220                 1225                 1230
Ala Thr  Gly Val Ala Lys Val  His Gln Leu Glu Glu  Lys Gln Leu
    1235                 1240                 1245
Ile Asp  Glu Ala Phe Glu Ala
    1250                 1255
<210>15
<211>4385
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(443)..(4213)
<223>
<400>15
gtcgacaagc aaaatcgaag cggcagcacg ccgcgtcgga gccttaaacg ccatcgccgc     60
catccctgat ggtttcaatc atcaagtcgg tgaacgcggg cgcaacctgt catccggaca    120
gcgccaactg atcgcgctgg cgcgcgccga actcatcgag ccttccatca tgcttctcga    180
cgaagccacc tccaccctcg accccgccac cgaagccgtt atcctcaacg cctccgatcg    240
agtcactaag ggacgcacca gcatcatcgt cgcgcaccgc ttggcaaccg ctaaaagggc    300
cgaccgtatt cttgttgttg aacaaggacg tatcattgag gacggatctc acgacgcgtt    360
gttgtctgct aacggcacct acgcccgcat gtggcattta atggcctgac acgttatttt    420
taggagaact gtcaacaaat ta atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag     472
                         Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln
                         1               5                   10
cca acg acc aac gtt aca gtg gat aaa ata aag ctc aat aaa ccc tca      520
Pro Thr Thr Ash Val Thr Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser
                15                  20                  25
aga agc aag gaa aag agg cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act      568
Arg Ser Lys Glu Lys Arg Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr
            30                  35                  40
ttc ggc cag aat gcg tgg ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag      616
Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln
        45                  50                  55
aag gac ccc aag tcc gtg gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg      664
Lys Asp Pro Lys Ser Val Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala
    60                  65                  70
cag ggg gga cca aat gct acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca      712
Gln Gly Gly Pro Asn Ala Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser
75                  80                  85                  90
gcg ccc aag gag tct gcg aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc      760
Ala Pro Lys Glu Ser Ala Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala
                95                  100                 105
aag gca gca ccg cgc gta gaa acc aag ccg gcc gcc aag acc gcc cct      808
Lys Ala Ala Pro Arg Val Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro
            110                 115                 120
aag gcc aag gag tcc tca gtg cca cag caa cct aag ctt ccg gag cca      856
Lys Ala Lys Glu Ser Ser Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro
        125                 130                 135
gga caa acc cca atc agg ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg      904
Gly Gln Thr Pro Ile Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met
    140                 145                 150
gat atc tcc ctg gaa atc cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca     952
Asp Ile Ser Leu Glu Ile Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro
155                 160                 165                 170
gct cgc ctc atg ttc gaa aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag    1000
Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys
                175                 180                 185
cgc acc cgc ggt ggc aag atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc    1048
Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala
            190                 195                 200
atg gtg aag gca gtc atg gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac cat    1096
Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr His
        205                 210                 215
cga cgg cag gcc cca acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg ggc    1144
Arg Arg Gln Ala Pro Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly
    220                 225                 230
ctt gcc atc gac ctt cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc gta    1192
Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val
235                 240                 245                 250
gca gcc atc aag gaa acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc gca    1240
Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala
                255                 260                 265
gca tac gaa gac atc gtg aca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc atg    1288
Ala Tyr Glu Asp Ile Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met
            270                 275                 280
gat gac tac cag ggc gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc atc    1336
Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile
        285                 290                 295
ggt acc cgc cac tct gtc cca cgt ctg acc aag ggc cag ggc acc atc    1384
Gly Thr Arg His Ser Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile
    300                 305                 310
atc ggt gtc ggt tcc atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct tcc    1432
Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser
315                 320                 325                 330
gaa gac cgc ctt gca gag ctc ggc gtt gga aag ctt gtc acc atc acc    1480
Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr
                335                 340                 345
tcc acc tac gat cac cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa ttc    1528
Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe
            350                 355                 360
ctg cgt acc atg tct cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gatgag    1576
Leu Arg Thr Met Ser Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu
        365                 370                 375
atc ttc gac gca atg aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca cag    1624
Ile Phe Asp Ala Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln
    380                 385                 390
gac gtt cca aac acc ggt gtt gat aag aac acc cgc gtc atg cag ctc    1672
Asp Val Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu
395                 400                 405                 410
att gag gca tac cgc tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac cca    1720
Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro
                415                 420                 425
ctt tca tgg gtt cag cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac ctc    1768
Leu Ser Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu
            430                 435                 440
gac atc gag acc cac agc ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc ttc    1816
Asp Ile Glu Thr His Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe
        445                 450                 455
agc gtc ggt ggc ttc ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag gta    1864
Ser Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val
    460                 465                 470
ctg tcc cgc ctg cgc gct gcc tac acc ttg aag gtc ggc tcc gaa tac    1912
Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr
475                 480                 485                 490
acc cac atc ctg gac cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc ctc    1960
Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu
                495                 500                 505
gaa gcc gga atg cca aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc ctg    2008
Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu
            510                 515                 520
cag aag ctg aac gcc gca gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc aag    2056
Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys
        525                 530                 535
tac gtc ggc cag aag cgc ttc tcc ctc gaa ggt gca gaa gct ctc atc    2104
Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile
    540                 545                 550
cca ctg atg gac tcc gcc atc gac acc gcc gca ggc cag ggc ctc gac    2152
Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp
555                 560                 565                 570
gaa gtt gtc atc ggt atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg ttc    2200
Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe
                575                 580                 585
aac atc gtg ggc aag cca ctg gca tcc atc ttc aac gag ttt gaa ggc    2248
Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly
            590                 595                 600
caa atg gag cag ggc cag atc ggt ggc tcc ggt gac gtg aag tac cac    2296
Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His
        605                 610                 615
ctc ggt tcc gaa ggc cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag atc    2344
Leu Gly Ser Glu Gly Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile
    620                 625                 630
aag gtc tcc ctg act gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac cca    2392
Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro
635                 640                 645                 650
gtg atg gaa ggt atc gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag ggc    2440
Val Met Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly
                655                 660                 665
gta gac ggc aag act gtt gtg cca ctg ctg ctc cac ggt gac gct gca    2488
Val Asp Gly Lys Thr Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala
            670                 675                 680
ttc gca ggc ctg ggc atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct aag cgc    2536
Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Arg
        685                 690                 695
gtc gac gtc gga ggc acc atc cac atc gtg gtg aac aac cag atc ggc    2584
Val Asp Val Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val AsnAsn Gln Ile Gly
    700                 705                 710
ttc acc acc acc cca gac tcc agc cgc tcc atg cac tac gca acc gac    2632
Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp
715                 720                 725                 730
tac gcc aag gca ttc ggc tgc cca gtc ttc cac gtc aat ggt gat gac    2680
Tyr Ala Lys Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp
                735                 740                 745
cca gag gca gtt gtc tgg gtt ggc cag ctg gca acc gag tac cgt cgt    2728
Pro Glu Ala Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg
            750                 755                 760
cgc ttc ggc aag gac gtc ttc atc gac ctc gtt tgc tac cgc ctc cgc    2776
Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg
        765                 770                 775
ggc cac aac gaa gct gat gat cct tcc atg acc cag cca aag atg tat    2824
Gly His Asn Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr
    780                 785                 790
gag ctc atc acc ggc cgc gag acc gtt cgt gct cag tac acc gaa gac    2872
Glu Leu Ile Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp
795                 800                 805                 810
ctg ctc gga cgt gga gac ctc tcc aac gaa gat gca gaa gca gtc gtc    2920
Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val
                815                 820                 825
cgc gac ttc cac gac cag atg gaa tct gtg ttc aac gaa gtc aag gaa    2968
Arg Asp Phe His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu
            830                 835                 840
ggc ggc aag aag cag gct gag gca cag acc ggc atc acc ggc tcc cag    3016
Gly Gly Lys Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln
        845                 850                 855
aag ctt cca cac ggc ctt gag acc aac atctcc cgt gaa gag ctc ctg     3064
Lys Leu Pro His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu
    860                 865                 870
gaa ctg gga cag gct ttc gcc aac acc cca gaa ggc ttc aac tac cac    3112
Glu Leu Gly Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His
875                 880                 885                 890
cca cgt gtg gct cca gtt gct aag aag cgc gtc tcc tct gtc acc gaa    3160
Pro Arg Val Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu
                895                 900                 905
ggt ggc atc gac tgg gca tgg ggc gag ctc ctc gcc ttc ggt tcc ctg    3208
Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu
            910                 915                 920
gct aac tcc ggc cgc ttg gtt cgc ctt gca ggt gaa gat tcc cgc cgc    3256
Ala Asn Ser Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg
        925                 930                 935
ggt acc ttc acc cag cgc cac gca gtt gcc atc gac cca gcg acc gct    3304
Gly Thr Phe Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala
    940                 945                 950
gaa gag ttc aac cca ctc cac gag ctt gca cag tcc aag ggc aac aac    3352
Glu Glu Phe Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn
955                 960                 965                 970
ggt aag ttc ctg gtc tac aac tcc gca ctg acc gag tac gca ggc atg    3400
Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met
                975                 980                 985
ggc ttc gag tac ggc tac tcc gta gga aac gaa gac tcc gtc gtt gca    3448
Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val Val Ala
            990                 995                 1000
tgg gaa gca  cag ttc ggc gac ttc  gcc aac ggc gct cag  acc atc     3493
Trp Glu Ala  Gln Phe Gly Asp Phe  Ala Asn Gly Ala Gln  Thr Ile
        1005                 1010                 1015
atc gat gag  tac gtc tcc tca ggc  gaa gct aag tgg ggc  cag acc     3538
Ile Asp Glu  Tyr Val Ser Ser Gly  Glu Ala Lys Trp Gly  Gln Thr
        1020                 1025                 1030
tcc aag ctg  atc ctt ctg ctg cct  cac ggc tac gaa ggc  cag ggc     3583
Ser Lys Leu  Ile Leu Leu Leu Pro  His Gly Tyr Glu Gly  Gln Gly
        1035                 1040                 1045
cca gac cac  tct tcc gca cgt atc  gag cgc ttc ctg cag  ctg tgc     3628
Pro Asp His  Ser Ser Ala Arg Ile  Glu Arg Phe Leu Gln  Leu Cys
        1050                 1055                 1060
gct gag ggt  tcc atg act gtt gct  cag cca tcc acc cca  gca aac     3673
Ala Glu Gly  Ser Met Thr Val Ala  Gln Pro Ser Thr Pro  Ala Asn
        1065                 1070                 1075
cac ttc cac  ctg ctg cgt cgt cac  gct ctg tcc gac ctg  aag cgt     3718
His Phe His  Leu Leu Arg Arg His  Ala Leu Ser Asp Leu  Lys Arg
        1080                 1085                 1090
cca ctg gtt  atc ttc acc ccg aag  tcc atg ctg cgt aac  aag gct     3763
Pro Leu Val  Ile Phe Thr Pro Lys  Ser Met Leu Arg Asn  Lys Ala
        1095                 1100                 1105
gct gcc tcc  gca cca gaa gac ttc  act gag gtc acc aag  ttc caa     3808
Ala Ala Ser  Ala Pro Glu Asp Phe  Thr Glu Val Thr Lys  Phe Gln
        1110                 1115                 1120
tcc gtg atc  gac gat cca aac gtt  gca gat gca gcc aag  gtg aag     3853
Ser Val Ile  Asp Asp Pro Asn Val  Ala Asp Ala Ala Lys  Val Lys
        1125                 1130                 1135
aag gtc atg  ctg gtc tcc ggc aag  ctg tac tac gaa ttg  gca aag     3898
Lys Val Met  Leu Val Ser Gly Lys  Leu Tyr Tyr Glu Leu  Ala Lys
        1140                 1145                 1150
cgc aag gag  aag gac gga cgc gac  gac atc gcg atc gtt  cgt atc     3943
Arg Lys Glu  Lys Asp Gly Arg Asp  Asp Ile Ala Ile Val  Arg Ile
        1155                 1160                 1165
gaa atg ctc  cac cca att ccg ttc  aac cgc atc tcc gag   gct ctt    3988
Glu Met Leu  His Pro Ile Pro Phe  Asn Arg Ile Ser Glu  Ala Leu
        1170                 1175                 1180
gcc ggc tac  cct aac gct gag gaa  gtc ctc ttc gtt cag  gat gag     4033
Ala Gly Tyr  Pro Asn Ala Glu Glu  Val Leu Phe Val Gln  Asp Glu
        1185                 1190                 1195
cca gca aac  cag ggc cca tgg ccg  ttc tac cag gag cac  ctc cca     4078
Pro Ala Asn  Gln Gly Pro Trp Pro  Phe Tyr Gln Glu His  Leu Pro
        1200                 1205                 1210
gag ctg atc  ccg aac atg cca aag  atg cgc cgc gtt tcc  cgc cgc     4123
Glu Leu Ile  Pro Asn Met Pro Lys  Met Arg Arg Val Ser  Arg Arg
        1215                 1220                 1225
gct cag tcc  tcc acc gca act ggt  gtt gct aag gtg cac  cag ctg     4168
Ala Gln Set  Ser Thr Ala Thr Gly  Val Ala Lys Val His  Gln Leu
        1230                 1235                 1240
gag gag aag  cag ctt atc gac gag  gct ttc gag gct taa  gtc ttt     4213
Glu Glu Lys  Gln Leu Ile Asp Glu  Ala Phe Glu Ala       Val Phe
        1245                 1250                       1255
atagtcctgc actagcctag agggccttat gcagtgtgaa tcacacagca taaggccctt  4273
tttgctgccg tggttgccta aggtggaagg catgaaacga atctgtgcgg tcacgatctc  4333
ttcagtactt ttgctaagtg gctgctcctc cacttccacc acgcagctcg   ag        4385
<210>16
<211>1254
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>16
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys lle Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                 55                 60
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Ala
65                  70                  75                  80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90                  95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                 120                 125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Ash Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr His Arg Arg Gln Ala Pro Thr
    210                 215                 220
Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro
225                 230                 235                 240
Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr
                245                 250                 255
Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile Val
            260                 265                 270
Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val
        275                 280                 285
Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser Val
    290                 295                 300
Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser Met
305                 310                 315                 320
Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu
                325                 330                 335
Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg
            340                 345                 350
Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser Arg
        355                 360                 365
Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met Asn
    370                 375                 380
Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr Gly
385                 390                 395                 400
Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser
                405                 410                 415
Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln Pro
            420                 425                 430
Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His Ser
        435                 440                 445
Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Ser Val Gly Gly Phe Gly
    450                 455                 460
Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala
465                 470                 475                 480
Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg
                485                 490                 495
Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys
            500                 505                 510
Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala
        515                 520                 525
Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg
    530                 535                 540
Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala
545                 550                 555                 560
Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly Met
                565                 570                 575
Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro
            580                 585                 590
Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln
        595                 600                 605
Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly Gln
    610                 615                 620
His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala
625                 630                 635                 640
Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile Val
                645                 650                 655
Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr Val
            660                 665                 670
Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile
        675                 680                 685
Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Arg Val Asp Val Gly Gly Thr
    690                 695                 700
Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr Pro Asp
705                 710                 715                 720
Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys Ala Phe Gly
                725                 730                 735
Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val Val Trp
            740                 745                 750
Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val
        755                 760                 765
Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn Glu Ala Asp
    770                 775                 780
Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg
785                 790                 795                 800
Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp
                805                 810                 815
Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe His Asp Gln
            820                 825                 830
Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys Lys Gln Ala
        835                 840                 845
Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro His Gly Leu
    850                 855                 860
Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly Gln Ala Phe
865                 870                 875                 880
Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val Ala Pro Val
                885                 890                 895
Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala
            900                 905                 910
Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser Gly Arg Leu
        915                 920                 925
Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg
    930                 935                 940
His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro Leu
945                 950                 955                 960
His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe Leu Val Tyr
                965                 970                 975
Asn Ser Ala Leu Thr GluTyr Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr
            980                 985                 990
Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val  Val Ala Trp Glu Ala  Gln Phe Gly
        995                 1000                 1005
Asp Phe  Ala Asn Gly Ala Gln  Thr Ile Ile Asp Glu  Tyr Val Ser
    1010                 1015                 1020
Ser Gly  Glu Ala Lys Trp Gly  Gln Thr Ser Lys Leu  Ile Leu Leu
    1025                 1030                 1035
Leu Pro  His Gly Tyr Glu Gly  Gln Gly Pro Asp His  Ser Ser Ala
    1040                 1045                 1050
Arg Ile  Glu Arg Phe Leu Gln  Leu Cys Ala Glu Gly  Ser MetThr
    1055                 1060                 1065
Val Ala  Gln Pro Ser Thr Pro  Ala Asn His Phe His  Leu Leu Arg
    1070                 1075                 1080
Arg His  Ala Leu Ser Asp Leu  Lys Arg Pro Leu Val  Ile Phe Thr
    1085                 1090                 1095
Pro Lys  Ser Met Leu ArgAsn  Lys Ala Ala Ala Ser  Ala Pro Glu
    1100                 1105                 1110
Asp Phe  Thr Glu Val Thr Lys  Phe Gln Ser Val Ile  Asp Asp Pro
    1115                 1120                 1125
Asn Val  Ala Asp Ala Ala Lys  Val Lys Lys Val Met  Leu Val Ser
    1130                 1135                 1140
Gly Lys  Leu Tyr Tyr Glu Leu  Ala Lys Arg Lys Glu  Lys Asp Gly
    1145                 1150                 1155
Arg Asp  Asp Ile Ala Ile Val  Arg Ile Glu Met Leu  Hi s Pro Ile
    1160                 1165                 1170
Pro Phe  Asn Arg Ile Ser Glu  Ala Leu Ala Gly Tyr  Pro Asn Ala
    1175                 1180                 1185
Glu Glu  Val Leu Phe Val Gln  Asp Glu Pro Ala Asn  Gln Gly Pro
    1190                 1195                 1200
Trp Pro  Phe Tyr Gln Glu His  Leu Pro Glu Leu Ile  Pro Asn Met
    1205                 1210                 1215
Pro Lys  Met Arg Arg Val Ser  Arg Arg Ala Gln Ser  Ser ThrAla
    1220                 1225                 1230
Thr Gly  Val Ala Lys Val His  Gln Leu Glu Glu Lys  Gln Leu Ile
    1235                 1240                 1245
Asp Glu Ala Phe Glu Ala
    1250
<210>17
<211>1800
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(211)..(1620)
<223>
<400>17
gatcctccgc attcagtaat ctttcccaca gcatcggctt gttctaaaac agcacggtgc     60
ttagaccgta cataaaacac ctgcatttct gtgcccattt gggcccggat gtgggtgttt    120
ttcattttct tccactctaa aattaagtat ggaaaaccaa ccgcacccgg atgcacgaca    180
atgacccact aaacacgtat ccttgaatgc gtg act gaa cat tat gac gta gta     234
                                 Met Thr Glu His Tyr Asp Val Val
                                 1               5
gta ctc gga gcc ggc ccc ggt ggc tat gtc tcc gcc atc cgt gca gcg      282
Val Leu Gly Ala Gly Pro Gly Gly Tyr Val Ser Ala Ile Arg Ala Ala
    10                  15                  20
cag ctt ggc aag aag gtt gct gta att gag aag cag tac tgg ggt ggt      330
Gln Leu Gly Lys Lys Val Ala Val Ile Glu Lys Gln Tyr Trp Gly Gly
25                  30                  35                  40
gtt tgc cta aac gtg ggc tgc att cct tcc aag tct ctg atc aaa aac      378
Val Cys Leu Asn Val Gly Cys Ile Pro Ser Lys Ser Leu Ile Lys Asn
                45                  50                  55
gct gaa gtt gcc cat acc ttt acc cat gag aag aag acc ttc ggc atc      426
Ala Glu Val Ala His Thr Phe Thr His Glu Lys Lys Thr Phe Gly Ile
            60                  65                  70
aat ggc gaa gtg acc ttc aac tat gag gat gct cac aag cgt tcc cgt      474
Asn Gly Glu Val Thr Phe Asn Tyr Glu Asp Ala His Lys Arg Ser Arg
        75                  80                  85
ggc gtt tcc gac aag atc gtt gga ggc gtt cat tac ttg atg aag aag      522
Gly Val Ser Asp Lys Ile Val Gly Gly Val His Tyr Leu Met Lys Lys
    90                  95                 100
aac aag atc atc gaa att cat ggt ctt gga aac ttc aag gat gct aag      570
Asn Lys Ile Ile Glu Ile His Gly Leu Gly Asn Phe Lys Asp Ala Lys
105                 110                 115                 120
act ctt gag gtc acc gac ggt aag gat gct ggc aag acc atc acc ttt      618
Thr Leu Glu Val Thr Asp Gly Lys Asp Ala Gly Lys Thr Ile Thr Phe
                125                 130                 135
gat gac tgc atc atc gca acc ggt tcg gta gtc aac acc ctc cgt ggc      666
Asp Asp Cys Ile lle Ala Thr Gly Ser Val Val Asn Thr Leu Arg Gly
            140                 145                 150
gtt gac ttc tca gag aac gtt gtg tct ttt gaa gag cag att ctt aac      714
Val Asp Phe Ser Glu Asn Val Val Ser Phe Glu Glu Gln Ile Leu Asn
        155                 160                 165
cct gtt gcg cca aag aag atg gtc att gtt ggt gca ggc gca att gga      762
Pro Val Ala Pro Lys Lys Met Val Ile Val Gly Ala Gly Ala Ile Gly
    170                 175                 180
atg gaa ttc gcc tac gtt ctt ggt aac tac ggt gta gat gta acc gtc      810
Met Glu Phe Ala Tyr Val Leu Gly Asn Tyr Gly Val Asp Val Thr Val
185                 190                 195                 200
atc gag ttc atg gat cgt gtg ctt cca aatgaa gat gct gaa gtc tcc       858
Ile Glu Phe Met Asp Arg Val Leu Pro Asn Glu Asp Ala Glu Val Ser
            205                 210                 215
aag gtt att gca aag gcc tac aag aag atg ggc gtt aag ctt ctt cct      906
Lys Val Ile Ala Lys Ala Tyr Lys Lys Met Gly Val Lys Leu Leu Pro
        220                 225                 230
ggc cat gca acc act gct gtt cgg gac aac ggt gac ttt gtc gag gtt      954
Gly His Ala Thr Thr Ala Val Arg Asp Asn Gly Asp Phe Val Glu Val
        235                 240                 245
gat tac cag aag aag ggc tct gac aag aca gag act ctt act gtt gat    1002
Asp Tyr Gln Lys Lys Gly Ser Asp Lys Thr Glu Thr Leu Thr Val Asp
    250                 255                 260
cga gtc atg gtt tcc gtt ggt ttc cgt cca cgc gtt gag gga ttt ggt    1050
Arg Val Met Val Ser Val Gly Phe Arg Pro Arg Val Glu Gly Phe Gly
265                 270                 275                 280
ctt gaa aac act ggc gtt aag ctc acc gag cgt ggc gca atc gag atc    1098
Leu Glu Asn Thr Gly Val Lys Leu Thr Glu Arg Gly Ala Ile Glu Ile
                285                 290                 295
gat gat tac atg cgt acc aac gtc gat ggc att tac gcc atc ggt gac    1146
Asp Asp Tyr Met Arg Thr Asn Val Asp Gly Ile Tyr Ala Ile Gly Asp
            300                 305                 310
gtg acc gcc aag ctt cag ctt gct cac gtc gca gaa gca cag ggc att    1194
Val Thr Ala Lys Leu Gln Leu Ala His Val Ala Glu Ala Gln Gly Ile
        315                 320                 325
gtt gcc gca gag act att gct ggt gca gaa act cag act ctt ggt gat    1242
Val Ala Ala Glu Thr Ile Ala Gly Ala Glu Thr Gln Thr Leu Gly Asp
    330                 335                 340
tac atg atg atg cca cgt gca acc ttc tgc aac cca cag gtt tct tcc    1290
Tyr Met Met Met Pro Arg Ala Thr Phe Cys Asn Pro Gln Val Ser Ser
345                 350                 355                 360
ttt ggt tac acc gaa gag cag gcc aag gag aag tgg cca gat cgt gag    1338
Phe Gly Tyr Thr Glu Glu Gln Ala Lys Glu Lys Trp Pro Asp Arg Glu
                365                 370                 375
atc aag gtt gct tcc ctc cca ttc tct gca aac ggt aaa gca gtt ggc    1386
Ile Lys Val Ala Ser Leu Pro Phe Ser Ala Asn Gly Lys Ala Val Gly
            380                 385                 390
ctg gca gaa act gat ggt ttc gca aag atc gtt gct gat gca gaa ttc    1434
Leu Ala Glu Thr Asp Gly Phe Ala Lys Ile Val Ala Asp Ala Glu Phe
        395                 400                 405
 ggt gag ctg ctc ggt gca cac ctg gtt gga gca aat gca tca gag ctc   1482
Gly Glu Leu Leu Gly Ala His Leu Val Gly Ala Asn Ala Ser Glu Leu
    410                 415                 420
atc aat gaa ttg gtg ctt gct cag aac tgg gat ctc acc act gaa gag    1530
Ile Asn Glu Leu Val Leu Ala Gln Asn Trp Asp Leu Thr Thr Glu Glu
425                 430                 435                 440
atc tct cgt agc gtc cat att cac cca acg cta tct gag gca gtt aag    1578
Ile Ser Arg Ser Val His Ile His Pro Thr Leu Ser Glu Ala Val Lys
                445                 450                 455
gaa gct gca cac ggt atc tct gga cac atg atc aac ttc tag    1620
Glu Ala Ala His Gly Ile Ser Gly His Met Ile Asn Phe
            460                 465
aatccacctc gttggccctg tttctgtatg gaaacagggc caaaaccgat tttcaatcca  1680
aaccgagtgc tggttagtgc tcatactcac acaaactttt cgattatcaa agagaattat  1740
ttctaaaatt cggtatcgtc taagaaatga gtttgccaat agctcagcat caaaatgctg  1800
<210>18
<211>469
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>18
Met Thr Glu His Tyr Asp Val Val Val Leu Gly Ala Gly Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Tyr Val Ser Ala Ile Arg Ala Ala Gln Leu Gly Lys Lys Val Ala Val
            20                  25                  30
Ile Glu Lys Gln Tyr Trp Gly Gly Val Cys Leu Asn Val Gly Cys Ile
        35                  40                  45
Pro Ser Lys Ser Leu Ile Lys Asn Ala Glu Val Ala His Thr Phe Thr
    50                  55                  60
His Glu Lys Lys Thr Phe Gly Ile Asn Gly Glu Val Thr Phe Asn Tyr
65                  70                  75                  80
Glu Asp Ala His Lys Arg Ser Arg Gly Val Ser Asp Lys Ile Val Gly
                85                  90                  95
Gly Val His Tyr Leu Met Lys Lys Asn Lys Ile Ile Glu Ile His Gly
            100                 105                 110
Leu Gly Asn Phe Lys Asp Ala Lys Thr Leu Glu Val Thr Asp Gly Lys
        115                 120                 125
Asp Ala Gly Lys Thr Ile Thr Phe Asp Asp Cys Ile Ile Ala Thr Gly
    130                 135                 140
Ser Val Val Asn Thr Leu Arg Gly Val Asp Phe Ser Glu Asn Val Val
145                 150                 155                 160
Ser Phe Glu Glu Gln Ile Leu Asn Pro Val Ala Pro Lys Lys Met Val
                165                 170                 175
Ile Val Gly Ala Gly Ala Ile Gly Met Glu Phe Ala Tyr Val Leu Gly
            180                 185                 190
Asn Tyr Gly Val Asp Val Thr Val Ile Glu Phe Met Asp Arg Val Leu
        195                 200                 205
Pro Asn Glu Asp Ala Glu Val Ser Lys Val Ile Ala Lys Ala Tyr Lys
    210                 215                 220
Lys Met Gly Val Lys Leu Leu Pro Gly His Ala Thr Thr Ala Val Arg
225                 230                 235                 240
Asp Asn Gly Asp Phe Val Glu Val Asp Tyr Gln Lys Lys Gly Ser Asp
                245                 250                 255
Lys Thr Glu Thr Leu Thr Val Asp Arg Val Met Val Ser Val Gly Phe
            260                 265                 270
Arg Pro Arg Val Glu Gly Phe Gly Leu Glu Ash Thr Gly Val Lys Leu
        275                 280                 285
Thr Glu Arg Gly Ala Ile Glu Ile Asp Asp Tyr Met Arg Thr Asn Val
    290                 295                 300
Asp Gly Ile Tyr Ala Ile Gly Asp Val Thr Ala Lys Leu Gln Leu Ala
305                 310                 315                 320
His Val Ala Glu Ala Gln Gly Ile Val Ala Ala Glu Thr Ile Ala Gly
                325                 330                 335
Ala Glu Thr Gln Thr Leu Gly Asp Tyr Met Met Met Pro Arg Ala Thr
            340                 345                 350
Phe Cys Asn Pro Gln Val Ser Ser Phe Gly Tyr Thr Glu Glu Gln Ala
        355                 360                 365
Lys Glu Lys Trp Pro Asp Arg Glu Ile Lys Val Ala Ser Leu Pro Phe
    370                 375                 380
Ser Ala Asn Gly Lys Ala Val Gly Leu Ala Glu Thr Asp Gly Phe Ala
385                 390                 395                 400
Lys Ile Val Ala Asp Ala Glu Phe Gly Glu Leu Leu Gly Ala His Leu
                405                 410                 415
Val Gly Ala Asn Ala Ser Glu Leu Ile Asn Glu Leu Val Leu Ala Gln
            420                 425                 430
Asn Tro Asp Leu Thr Thr Glu Glu Ile Ser Arg Ser Val His Ile His
        435                 440                 445
Pro Thr Leu Ser Glu Ala Val Lys Glu Ala Ala His Gly Ile Ser Gly
    450                 455                 460
His Met Ile Asn Phe
465
<210>19
<211>2014
<212>DNA
<213>枯草芽孢杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(464)..(1885)
<223>
<400>19
gatccttttt aacccatcac atatacctgc cgttcactat tatttagtga aatgagatat     60
tatgatattt tctgaattgt gattaaaaag gcaactttat gcccatgcaa cagaaactat    120
aaaaaataca gagaatgaaa agaaacagat agatttttta gttctttagg cccgtagtct    180
gcaaatcctt ttatgatttt ctatcaaaca aaagaggaaa atagaccagt tgcaatccaa    240
acgagagtct aatagaatga ggtcgaaaag taaatcgcgc gggtttgtta ctgataaagc    300
aggcaagacc taaaatgtgt aaagggcaaa gtgtatactt tggcgtcacc ccttacatat    360
tttaggtctt tttttattgt gcgtaactaa cttgccatct tcaaacagga gggctggaag    420
aagcagaccg ctaacacagt acataaaaaa ggagacatga acg atg aac atc aaa      475
                                                Met Asn Ile Lys
                                                1
aag ttt gca aaa caa gca aca gta tta acc ttt act acc gca ctg ctg      523
Lys Phe Ala Lys Gln Ala Thr Val Leu Thr Phe Thr Thr Ala Leu Leu
5                   10                  15                  20
gca gga ggc gca act caa gcg ttt gcg aaa gaa acg aac caa aag cca      571
Ala Gly Gly Ala Thr Gln Ala Phe Ala Lys Glu Thr Asn Gln Lys Pro
                25                  30                  35
tat aag gaa aca tac ggc att tcc cat att aca cgc cat gat atg ctg      619
Tyr Lys Glu Thr Tyr Gly Ile Ser His Ile Thr Arg His Asp Met Leu
            40                  45                  50
caa atc cct gaa cag caa aaa aat gaa aaa tat caa gtt cct gaa ttc      667
Gln Ile Pro Glu Gln Gln Lys Asn Glu Lys Tyr Gln Val Pro Glu Phe
        55                  60                  65
gat tcg tcc aca att aaa aat atc tct tct gca aaa ggc ctg gac gtt      715
Asp Ser Ser Thr Ile Lys Asn Ile Ser Ser Ala Lys Gly Leu Asp Val
    70                  75                  80
tgg gac agc tgg cca tta caa aac gct gac ggc act gtc gca aac tat      763
Trp Asp Ser Trp Pro Leu Gln Asn Ala Asp Gly Thr Val Ala Asn Tyr
85                  90                  95                  100
cac ggc tac cac atc gtc ttt gca tta gcc gga gat cct aaa aat gcg      811
His Gly Tyr His Ile Val Phe Ala Leu Ala Gly Asp Pro Lys Asn Ala
                105                 110                 115
gat gac aca tcg att tac atg ttc tat caa aaa gtc ggc gaa act tct      859
Asp Asp Thr Ser Ile Tyr Met Phe Tyr Gln Lys Val Gly Glu Thr Ser
            120                 125                 130
att gac agc tgg aaa aac gct ggc cgc gtc ttt aaa gac agc gac aaa      907
Ile Asp Ser Trp Lys Asn Ala Gly Arg Val Phe Lys Asp Ser Asp Lys
        135                 140                 145
ttc gat gca aat gat tct atc cta aaa gac caa aca caa gaa tgg tca      955
Phe Asp Ala Asn Asp Ser Ile Leu Lys Asp Gln Thr Gln Glu Trp Ser
    150                 155                 160
ggt tca gcc aca ttt aca tct gac gga aaa atc cgt tta ttc tac act     1003
Gly Ser Ala Thr Phe Thr Ser Asp Gly Lys Ile Arg Leu Phe Tyr Thr
165                 170                 175                 180
gat ttc tcc ggt aaa cat tac ggc aaa caa aca ctg aca act gca caa     1051
Asp Phe Ser Gly Lys His Tyr Gly Lys Gln Thr Leu Thr Thr Ala Gln
                185                 190                 195
gtt aac gta tca gca tca gac agc tct ttg aac atc aac ggt gta gag     1099
Val Asn Val Ser Ala Ser Asp Ser Ser Leu Asn Ile Asn Gly Val Glu
            200                 205                 210
gat tat aaa tca atc ttt gac ggt gac gga aaa acg tat caa aat gta     1147
Asp Tyr Lys Ser Ile Phe Asp Gly Asp Gly Lys Thr Tyr Gln Asn Val
        215                 220                 225
cag cag ttc atc gat gaa ggc aac tac agc tca ggc gac aac cat acg     1195
Gln Gln Phe Ile Asp Glu Gly Asn Tyr Ser Ser Gly Asp Asn His Thr
    230                 235                 240
ctg aga gat cct cac tac gta gaa gat aaa ggc cac aaa tac tta gta     1243
Leu Arg Asp Pro His Tyr Val Glu Asp Lys Gly His Lys Tyr Leu Val
245                 250                 255                 260
ttt gaa gca aac act gga act gaa gat ggc tac caa ggc gaa gaa tct     1291
Phe Glu Ala Asn Thr Gly Thr Glu Asp Gly Tyr Gln Gly Glu Glu Ser
                265                 270                 275
tta ttt aac aaa gca tac tat ggc aaa agc aca tca ttc ttc cgt caa     1339
Leu Phe Asn Lys Ala Tyr Tyr Gly Lys Ser Thr Ser Phe Phe Arg Gln
            280                 285                 290
gaa agt caa aaa ctt ctg caa agc gat aaa aaa cgc acg gct gag tta    1387
Glu Ser Gln Lys Leu Leu Gln Ser Asp Lys Lys Arg Thr Ala Glu Leu
        295                 300                 305
gca aac ggc gct ctc ggt atg att gag cta aac gat gat tac aca ctg    1435
Ala Asn Gly Ala Leu Gly Met Ile Glu Leu Asn Asp Asp Tyr Thr Leu
    310                 315                 320
aaa aaa gtg atg aaa ccg ctg att gca tct aac aca gta aca gat gaa    1483
Lys Lys Val Met Lys Pro Leu Ile Ala Ser Asn Thr Val Thr Asp Glu
325                 330                 335                 340
att gaa cgc gcg aac gtc ttt aaa atg aac ggc aaa tgg tac ctg ttc    1531
Ile Glu Arg Ala Asn Val Phe Lys Met Asn Gly Lys Trp Tyr Leu Phe
                345                 350                 355
act gac tcc cgc gga tca aaa atg acg att gac ggc att acg tct aac    1579
Thr Asp Ser Arg Gly Ser Lys Met Thr Ile Asp Gly Ile Thr Ser Asn
            360                 365                 370
gat att tac atg ctt ggt tat gtt tct aat tct tta act ggc cca tac    1627
Asp Ile Tyr Met Leu Gly Tyr Val Ser Asn Ser Leu Thr Gly Pro Tyr
        375                 380                 385
aag ccg ctg aac aaa act ggc ctt gtg tta aaa atg gat ctt gat cct    1675
Lys Pro Leu Asn Lys Thr Gly Leu Val Leu Lys Met Asp Leu Asp Pro
    390                 395                 400
aac gat gta acc ttt act tac tca cac ttc gct gta cct caa gcg aaa    1723
Asn Asp Val Thr Phe Thr Tyr Ser His Phe Ala Val Pro Gln Ala Lys
405                 410                 415                 420
gga aac aat gtc gtg att aca agc tat atg aca aac aga gga ttc tac    1771
Gly Asn Asn Val Val Ile Thr Ser Tyr Met Thr Asn Arg Gly Phe Tyr
                425                 430                 435
gca gac aaa caa tca acg ttt gcg cca agc ttc ctg ctg aac atc aaa    1819
Ala Asp Lys Gln Ser Thr Phe Ala Pro Ser Phe Leu Leu Asn Ile Lys
            440                 445                 450
ggc aag aaa aca tct gtt gtc aaa gac agc atc ctt gaa caa gga caa    1867
Gly Lys Lys Thr Ser Val Val Lys Asp Ser Ile Leu Glu Gln Gly Gln
        455                 460                 465
tta aca gtt aac aaa taa aaacgcaaaa gaaaatgccg atatcctatt           1915
Leu Thr Val Asn Lys
    470
ggcattttct tttatttctt atcaacataa aggtgaatcc catatgaact atataaaagc  1975
aggcaaatgg ctaaccgtat tcctaacctt tt gaagatc                        2014
<210>20
<211>473
<212>PRT
<213>枯草芽孢杆菌
<400>20
Met Asn Ile Lys Lys Phe Ala Lys Gln Ala Thr Val Leu Thr Phe Thr
1                   5                   10                  15
Thr Ala Leu Leu Ala Gly Gly Ala Thr Gln Ala Phe Ala Lys Glu Thr
            20                  25                  30
Asn Gln Lys Pro Tyr Lys Glu Thr Tyr Gly Ile Ser His Ile Thr Arg
        35                  40                  45
His Asp Met Leu Gln Ile Pro Glu Gln Gln Lys Asn Glu Lys Tyr Gln
    50                  55                  60
Val Pro Glu Phe Asp Ser Ser Thr Ile Lys Asn Ile Ser Ser Ala Lys
65                  70                  75                  80
Gly Leu Asp Val Trp Asp Ser Trp Pro Leu Gln Asn Ala Asp Gly Thr
                85                  90                  95
Val Ala Asn Tyr His Gly Tyr His Ile Val Phe Ala Leu Ala Gly Asp
            100                 105                 110
Pro Lys Asn Ala Asp Asp Thr Ser Ile Tyr Met Phe Tyr Gln Lys Val
        115                 120                 125
Gly Glu Thr Ser Ile Asp Ser Trp Lys Asn Ala Gly Arg Val Phe Lys
    130                 135                 140
Asp Ser Asp Lys Phe Asp Ala Asn Asp Ser Ile Leu Lys Asp Gln Thr
145                 150                 155                 160
Gln Glu Trp Ser Gly Ser Ala Thr Phe Thr Ser Asp Gly Lys Ile Arg
                165                 170                 175
Leu Phe Tyr Thr Asp Phe Ser Gly Lys His Tyr Gly Lys Gln Thr Leu
            180                 185                 190
Thr Thr Ala Gln Val Asn Val Ser Ala Ser Asp Ser Ser Leu Asn Ile
        195                 200                 205
Asn Gly Val Glu Asp Tyr Lys Ser Ile Phe Asp Gly Asp Gly Lys Thr
    210                 215                 220
Tyr Gln Asn Val Gln Gln Phe Ile Asp Glu Gly Asn Tyr Ser Ser Gly
225                 230                 235                 240
Asp Asn His Thr Leu Arg Asp Pro His Tyr Val Glu Asp Lys Gly His
                245                 250                 255
Lys Tyr Leu Val Phe Glu Ala Asn Thr Gly Thr Glu Asp Gly Tyr Gln
            260                 265                 270
Gly Glu Glu Ser Leu Phe Asn Lys Ala Tyr Tyr Gly Lys Ser Thr Ser
        275                 280                 285
Phe Phe Arg Gln Glu Ser Gln Lys Leu Leu Gln Ser Asp Lys Lys Arg
    290                 295                 300
Thr Ala Glu Leu Ala Asn Gly Ala Leu Gly Met Ile Glu Leu Asn Asp
305                 310                 315                 320
Asp Tyr Thr Leu Lys Lys Val Met Lys Pro Leu Ile Ala Ser Asn Thr
                325                 330                 335
Val Thr Asp Glu Ile Glu Arg Ala Asn Val Phe Lys Met Asn Gly Lys
            340                 345                 350
Trp Tyr Leu Phe Thr Asp Ser Arg Gly Ser Lys Met Thr Ile Asp Gly
        355                 360                 365
Ile Thr Ser Asn Asp Ile Tyr Met Leu Gly Tyr Val Ser Asn Ser Leu
    370                 375                 380
Thr Gly Pro Tyr Lys Pro Leu Asn Lys Thr Gly Leu Val Leu Lys Met
385                 390                 395                 400
Asp Leu Asp Pro Asn Asp Val Thr Phe Thr Tyr Ser His Phe Ala Val
                405                 410                 415
Pro Gln Ala Lys Gly Asn Asn Val Val Ile Thr Ser Tyr Met Thr Asn
            420                 425                 430
Arg Gly Phe Tyr Ala Asp Lys Gln Ser Thr Phe Ala Pro Ser Phe Leu
        435                 440                 445
Leu Asn Ile Lys Gly Lys Lys Thr Ser Val Val Lys Asp Ser Ile Leu
   450                 455                 460
Glu Gln Gly Gln Leu Thr Val Asn Lys
465                 470
<210>21
<211>24
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>21
cgggat cctttttaacccat caca                                            24
<210>22
<211>29
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>22
gaagatcttc aaaaggttag gaatacggt                                   29
<210>23
<211>23
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>23
ccttttgaag atcgaccagt tgg                                         23
<210>24
<211>44
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>24
tacctggaat gctgttttcc cagggatcgc agtggtgagt aacc                  44
<210>25
<211>28
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>25
cctgggaaaa cagcat tcca ggtattag                                   28
<210>26
<211>23
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>26
tgcaggtcga ctctagagga tcc                                         23
<210>27
<211>2028
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2028)
<223>
<400>27
atg gcg ttc tcc gta gag atg ccc gag ctg ggc gaa tca gta acc gaa     48
Met Ala Phe Ser Val Glu Met Pro Glu Leu Gly Glu Ser Val Thr Glu
1               5                   10                  15
ggc acg atc acc cag tgg ttg aag tct gtt ggt gac act gtt gag gta     96
Gly Thr Ile Thr Gln Trp Leu Lys Ser Val Gly Asp Thr Val Glu Val
            20                  25                  30
gat gag ccg ttg ctc gag gtc tca act gac aag gtc gac acc gag att    144
Asp Glu Pro Leu Leu Glu Val Ser Thr Asp Lys Val Asp Thr Glu Ile
        35                  40                  45
ccc tct cct gtc gcc ggt gtc atc cta gag att aag gct gaa gag gat    192
Pro Ser Pro Val Ala Gly Val Ile Leu Glu Ile Lys Ala Glu Glu Asp
    50                  55                  60
gac acc gtc gac gtc ggc ggt gtc att gca ata atc ggc gat gct gat    240
Asp Thr Val Asp Val Gly Gly Val Ile Ala Ile Ile Gly Asp Ala Asp
65                  70                  75                  80
gag act cct gcc aac gaa gct cct gcc gac gag gca cca gct cct gcc    288
Glu Thr Pro Ala Asn Glu Ala Pro Ala Asp Glu Ala Pro Ala Pro Ala
                85                  90                  95
gaa gag gaa gaa cca gtt aag gaa gag cca aag aag gag gca gct cct    336
Glu Glu Glu Glu Pro Val Lys Glu Glu Pro Lys Lys Glu Ala Ala Pro
            100                 105                 110
gaa gct cca gca gca act ggc gcc gca acc gat gtg gaa atg cca gaa    384
Glu Ala Pro Ala Ala Thr Gly Ala Ala Thr Asp Val Glu Met Pro Glu
        115                 120                 125
ctc ggc gaa tcc gtc acc gaa ggc acc att acc cag tgg ctc aag gct    432
Leu Gly Glu Ser Val Thr Glu Gly Thr Ile Thr Gln Trp Leu Lys Ala
    130                 135                 140
gtc ggc gac acc gtcgaa gta gac gaa cca ctt ctt gag gtc tcc acc     480
Val Gly Asp Thr Val Glu Val Asp Glu Pro Leu Leu Glu Val Ser Thr
145                 150                 155                 160
gac aag gtc gac acc gaa atc cca tcc cca gta gca ggc acc atc gtg    528
Asp Lys Val Asp Thr Glu Ile Pro Ser Pro Val Ala Gly Thr Ile Val
                165                 170                 175
gag atc ctt gca gac gaa gac gac acc gtc gac gtc ggc gca gtc atc    576
Glu Ile Leu Ala Asp Glu Asp Asp Thr Val Asp Val Gly Ala Val Ile
            180                 185                 190
gcc cgc atc ggt gac gca aac gca gct gca gca cct gcc gaa gag gaa    624
Ala Arg Ile Gly Asp Ala Asn Ala Ala Ala Ala Pro Ala Glu Glu Glu
        195                 200                 205
gca gct cct gcc gaa gag gaa gaa cca gtt aag gaa gag cca aag aag    672
Ala Ala Pro Ala Glu Glu Glu Glu Pro Val Lys Glu Glu Pro Lys Lys
    210                 215                 220
gag gca gct cct gaa gct cca gca gca act ggc gcc gca acc gat gtg    720
Glu Ala Ala Pro Glu Ala Pro Ala Ala Thr Gly Ala Ala Thr Asp Val
225                 230                 235                 240
gaa atg cca gaa ctc ggc gaa tcc gtc acc gaa ggc acc att acc cag    768
Glu Met Pro Glu Leu Gly Glu Ser Val Thr Glu Gly Thr Ile Thr Gln
                245                 250                 255
tgg ctc aag gct gtc ggc gac acc gtc gaa gta gac gaa cca ctt ctt    816
Trp Leu Lys Ala Val Gly Asp Thr Val Glu Val Asp Glu Pro Leu Leu
            260                 265                 270
gag gtc tcc acc gac aag gtc gac acc gaa atc cca tcc cca gta gca    864
Glu Val Ser Thr Asp Lys Val Asp Thr Glu Ile Pro Ser Pro Val Ala
        275                 280                 285
ggc acc atc gtg gag atc ctt gca gac gaa gac gac acc gtc gac gtc    912
Gly Thr Ile Val Glu Ile Leu Ala Asp Glu Asp Asp Thr Val Asp Val
    290                 295                 300
ggc gca gtc atc gcc cgc atc ggt gac gca aac gca gct gca gca cct    960
Gly Ala Val Ile Ala Arg Ile Gly Asp Ala Asn Ala Ala Ala Ala Pro
305                 310                 315                 320
gcc gaa gag gaa gca gct cct gcc gaa gag gag gaa cca gtt aag gaa   1008
Ala Glu Glu Glu Ala Ala Pro Ala Glu Glu Glu Glu Pro Val Lys Glu
                325                 330                 335
gag cca aag aag gaa gag ccc aag aag gaa gag ccc aag aag gaa gca    1056
Glu Pro Lys Lys Glu Glu Pro Lys Lys Glu Glu Pro Lys Lys Glu Ala
            340                 345                 350
gct act aca cct gct gcg gca tcc gca act gtg tcc gct tct ggc gac    1104
Ala Thr Thr Pro Ala Ala Ala Ser Ala Thr Val Ser Ala Ser Gly Asp
        355                 360                 365
aac gtt cca tac gtc acc cca ctg gtg cgc aag ctt gct gaa aag cac    1152
Asn Val Pro Tyr Val Thr Pro Leu Val Arg Lys Leu Ala Glu Lys His
    370                 375                 380
ggc gtt gac ttg aac acc gtg acc ggt acc ggt atc ggt ggc cgt atc    1200
Gly Val Asp Leu Asn Thr Val Thr Gly Thr Gly Ile Gly Gly Arg Ile
385                 390                 395                 400
cgc aag cag gat gtt ttg gct gct gcg aac ggc gag gct gca cct gct    1248
Arg Lys Gln Asp Val Leu Ala Ala Ala Asn Gly Glu Ala Ala Pro Ala
                405                 410                 415
gag gct gct gct cct gtt tcc gct tgg tcc act aag tct gtt gac cct    1296
Glu Ala Ala Ala Pro Val Ser Ala Trp Ser Thr Lys Ser Val Asp Pro
            420                 425                 430
gag aag gct aag ctc cgt ggt acc act cag aag gtc aac cgc atc cgt    1344
Glu Lys Ala Lys Leu Arg Gly Thr Thr Gln Lys Val Asn Arg Ile Arg
        435                 440                 445
gag atc acc gcg atg aag acc gtc gag gct ctg cag att tct gct cag    1392
Glu Ile Thr Ala Met Lys Thr Val Glu Ala Leu Gln Ile Ser Ala Gln
    450                 455                 460
ctc acc cag ctg cac gag gtc gat atg act cgc gtt gct gag ctg cgt    1440
Leu Thr Gln Leu His Glu Val Asp Met Thr Arg Val Ala Glu Leu Arg
465                 470                 475                 480
aag aag aac aag ccc gcg ttc atc gag aag cac ggt gtg aac ctc act    1488
Lys Lys Asn Lys Pro Ala Phe Ile Glu Lys His Gly Val Asn Leu Thr
            485                 490                 495
tac ctg cca ttc ttc gtg aag gca gtt gtc gag gct ttg gtt tcc cat    1536
Tyr Leu Pro Phe Phe Val Lys Ala Val Val Glu Ala Leu Val Ser His
            500                 505                 510
cca aac gtc aac gcg tct ttc aac gcg aag acc aag gag atg acc tac    1584
Pro Asn Val Asn Ala Ser Phe Asn Ala Lys Thr Lys Glu Met Thr Tyr
        515                 520                 525
cac tcc tcc gtt aac ctc tcc atc gct gtt gat acc cca gct ggt ctg    1632
His Ser Ser Val Asn Leu Ser Ile Ala Val Asp Thr Pro Ala Gly Leu
    530                 535                 540
ttg acc cca gtc att cac gat gct cag gat ctc tcc atc cca gag atc    1680
Leu Thr Pro Val Ile His Asp Ala Gln Asp Leu Ser Ile Pro Glu Ile
545                 550                 555                 560
gca aag gca att gtt gac ctg gct gat cgt tca cgc aac aac aag ctg    1728
Ala Lys Ala Ile Val Asp Leu Ala Asp Arg Ser Arg Asn Asn Lys Leu
                565                 570                 575
aag cca aac gat ctg tcc ggt ggc acc ttc acc atc acc aac att ggt    1776
Lys Pro Asn Asp Leu Ser Gly Gly Thr Phe Thr Ile Thr Asn Ile Gly
            580                 585                 590
tct gaa ggc gca ctg tct gat acc cca atc ctg gtt cca cca cag gct    1824
Ser Glu Gly Ala Leu Ser Asp Thr Pro Ile Leu Val Pro Pro Gln Ala
        595                 600                 605
ggc atc ttg ggc acc ggc gcg atc gtg aag cgt cca gtt gtc atc acc    1872
Gly Ile Leu Gly Thr Gly Ala Ile Val Lys Arg Pro Val Val Ile Thr
    610                 615                 620
gag gat gga att gat tcc atc gcg atc cgt cag atg gtc ttc cta cca    1920
Glu Asp Gly Ile Asp Ser Ile Ala Ile Arg Gln Met Val Phe Leu Pro
625                 630                 635                 640
ctg acc tac gac cac cag gtt gta gat ggc gca gat gct ggt cgc ttc    1968
Leu Thr Tyr Asp His Gln Val Val Asp Gly Ala Asp Ala Gly Arg Phe
                645                 650                 655
ctg acc acc atc aag gac cgc ctt gag acc gct aac ttc gaa ggc gat    2016
Leu Thr Thr Ile Lys Asp Arg Leu Glu Thr Ala Asn Phe Glu Gly Asp
            660    665    670
ctg cag ctc taa    2028
Leu Gln Leu
        675
<210>28
<211>675
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>28
Met Ala Phe Ser Val Glu Met Pro Glu Leu Gly Glu Ser Val Thr Glu
1               5                   10                  15
Gly Thr Ile Thr Gln Trp Leu Lys Ser Val Gly Asp Thr Val Glu Val
            20                  25                  30
Asp Glu Pro Leu Leu Glu Val Ser Thr Asp Lys Val Asp Thr Glu Ile
        35                  40                  45
Pro Ser Pro Val Ala Gly Val Ile Leu Glu Ile Lys Ala Glu Glu Asp
    50                  55                  60
Asp Thr Val Asp Val Gly Gly Val Ile Ala Ile Ile Gly Asp Ala Asp
65                  70                  75                  80
Glu Thr Pro Ala Asn Glu Ala Pro Ala Asp Glu Ala Pro Ala Pro Ala
                85                  90                  95
Glu Glu Glu Glu Pro Val Lys Glu Glu Pro Lys Lys Glu Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Glu Ala Pro Ala Ala Thr Gly Ala Ala ThrAsp Val Glu Met Pro Glu
        115                 120                 125
Leu Gly Glu Ser Val Thr Glu Gly Thr Ile Thr Gln Trp Leu Lys Ala
    130                 135                 140
Val Gly Asp Thr Val Glu Val Asp Glu Pro Leu Leu Glu Val Ser Thr
145                 150                 155                 160
Asp Lys Val Asp Thr Glu Ile Pro Ser Pro Val Ala Gly Thr Ile Val
                165                 170                 175
Glu Ile Leu Ala Asp Glu Asp Asp Thr Val Asp Val Gly Ala Val Ile
            180                 185                 190
Ala Arg Ile Gly Asp Ala Asn Ala Ala Ala Ala Pro Ala Glu Glu Glu
        195                 200                 205
Ala Ala Pro Ala Glu Glu Glu Glu Pro Val Lys Glu Glu Pro Lys Lys
    210                 215                 220
Glu Ala Ala Pro Glu Ala Pro Ala Ala Thr Gly Ala Ala Thr Asp Val
225                 230                 235                 240
Glu Met Pro Glu Leu Gly Glu Ser Val Thr Glu Gly Thr Ile Thr Gln
                245                 250                 255
Trp Leu Lys Ala Val Gly Asp Thr Val Glu Val Asp Glu Pro Leu Leu
            260                 265                 270
Glu Val Ser Thr Asp Lys Val Asp Thr Glu Ile Pro Ser Pro Val Ala
        275                 280                 285
Gly Thr Ile Val Glu Ile Leu Ala Asp Glu Asp Asp Thr Val Asp Val
    290                 295                 300
Gly Ala Val Ile Ala Arg Ile Gly Asp Ala Asn Ala Ala Ala Ala Pro
305                 310                 315                 320
Ala Glu Glu Glu Ala Ala Pro Ala Glu Glu Glu Glu Pro Val Lys Glu
                325                 330                 335
Glu Pro Lys Lys Glu Glu Pro Lys Lys Glu Glu Pro Lys Lys Glu Ala
            340                 345                 350
Ala Thr Thr Pro Ala Ala Ala Ser Ala Thr Val Ser Ala Ser Gly Asp
        355                 360                 365
Asn Val Pro Tyr Val Thr Pro Leu Val Arg Lys Leu Ala Glu Lys His
    370                 375                 380
Gly Val Asp Leu Asn Thr Val Thr Gly Thr Gly Ile Gly Gly Arg Ile
385                 390                 395                 400
Arg Lys Gln Asp Val Leu Ala Ala Ala Asn Gly Glu Ala Ala Pro Ala
                405                 410                 415
Glu Ala Ala Ala Pro Val Ser Ala Trp Ser Thr Lys Ser Val Asp Pro
            420                 425                 430
Glu Lys Ala Lys Leu Arg Gly Thr Thr Gln Lys Val Asn Arg Ile Arg
        435                 440                 445
Glu Ile Thr Ala Met Lys Thr Val Glu Ala Leu Gln Ile Ser Ala Gln
    450                 455                 460
Leu Thr Gln Leu His Glu Val Asp Met Thr Arg Val Ala Glu Leu Arg
465                 470                 475                 480
Lys Lys Asn Lys Pro Ala Phe Ile Glu Lys His Gly Val Asn Leu Thr
                485                 490                 495
Tyr Leu Pro Phe Phe Val Lys Ala Val Val Glu Ala Leu Val Ser His
            500                 505                 510
Pro Asn Val Asn Ala Ser Phe Asn Ala Lys Thr Lys Glu Met Thr Tyr
        515                 520                 525
His Ser Ser Val Asn Leu Ser Ile Ala Val Asp Thr Pro Ala Gly Leu
    530                 535                 540
Leu Thr Pro Val Ile His Asp Ala Gln Asp Leu Ser Ile Pro Glu Ile
545                 550                 555                 560
Ala Lys Ala Ile Val Asp Leu Ala Asp Arg Ser Arg Asn Asn Lys Leu
                565                 570                 575
Lys Pro Asn Asp Leu Ser Gly Gly Thr Phe Thr Ile Thr Asn Ile Gly
            580                 585                 590
Ser Glu Gly Ala Leu Ser Asp Thr Pro Ile Leu Val Pro Pro Gln Ala
        595                 600                 605
Gly Ile Leu Gly Thr Gly Ala Ile Val Lys Arg Pro Val Val Ile Thr
    610                 615                 620
Glu Asp Gly Ile Asp Ser Ile Ala Ile Arg Gln Met Val Phe Leu Pro
625                 630                 635                 640
Leu Thr Tyr Asp His Gln Val Val Asp Gly Ala Asp Ala Gly Arg Phe
            645                 650                 655
Leu Thr Thr Ile Lys Asp Arg Leu Glu Thr Ala Asn Phe Glu Gly Asp
            660                 665                 670
Leu Gln Leu
        675
<210>29
<211>3481
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(1437)..(3035)
<223>yggB
<400>29
gatcttgccg atttcggcag gatcaatgtc ggcgtgaatg atcttggcat caggtgcgaa     60
agtgtcaacg tcaccggtga cgcggtcatc aaagcgggag ccgatagcaa tcagcaggtc    120
gctgcgctgc agtgcaccaa cagcggacac agtgccatgc atgcctggca tacccatgtg    180
cagctcgtgg gactctggga aggttcccag cgccatcaat gtggtgacaa ctggaatgcc    240
ggtgtgctca gcgaacgcac gaagctcttc gtgggcatca gccttgataa cgccgccgcc    300
aacgtaaagg acaggcttct tagactcacc gatcagtttg acagcctgct caatctgtcg    360
agcatgcggt gttgaaactg ggcggtagcc tggcaggtcg atctttggtg gccagacgaa    420
atccaattca gcgttctgaa catccttggg gatatccact agaacaggac cagggcgacc    480
agtaatcgcg aggtggaatg cctcagccaa tgcctgtgga atgtcgttgg ggttggtgac    540
catgaagttg tgcttggtca ctggcatggt gatgccgcgg atatcggctt cctggaaagc    600
atcggtaccc agcaggctac ttccgacctg gccggtgatg gcaaccatgg gaacggagtc    660
caagtttgca tcagcgattg gggtaaccaa gttggttgcg cctgggccag aggttgcaat    720
gcagacgcca acgcgtccag taacctgcgc gtagccggtt gctgcgtggc ctgcgccctg    780
ctcgtggcgc actaggacgt ggcgcacctt tgtggaggaa tagagcgggt catacaccgg    840
tagcaccgca ccaccaggaa taccgaacac gatgtcggcg ttaagctcct cgagcgatcg    900
aacaattgcc tgtgcacctg tcatccgctc aggggcggcg gatcgaccac ggcttgcaac    960
cgtggcggga gtgggctgtt gagaagctgc cacattcacg actttctggc tcctttacta    1020
aataaggatt ttcacaggac ccgtccaagc caagccgatt tcaactcagc ctaaagacaa    1080
agccctcatt taaaattgtt ccgacgcgga tgcgtgtgca cgcagtgcga cagatgtctg    1140
ttgcaaagtt ggctacttgg gtcataacca acaagaaagc cctcgttcca acactgtggt    1200
gagtgttgtc gagggcgctt gacgagacga cttggaaggc cgttacggca ggcgccgcgc    1260
ggttactact acaagtcgaa taatggtcat ggtgtgtcat gctacacaca tcgagtttcc    1320
aattccacaa cgcacgaaaa ttcccacccc caaaactccc ccacttcggt taaggaatca    1380
ggattctcac aaagttcagg caggctcccg ctacttttca gcgctaatct tggctc atg    1439
                                                              Met
                                                              1
att tta ggc gta ccc att caa tat ttg ctc tat tca ttg tgg aat tgg      1487
Ile Leu Gly Val Pro Ile Gln Tyr Leu Leu Tyr Ser Leu Trp Asn Trp
            5                   10                  15
att gtc gat acc ggt ttt gat gta gca att atc ctg gtc ttg gcg ttt      1535
Ile Val Asp Thr Gly Phe Asp Val Ala Ile Ile Leu Val Leu Ala Phe
        20                  25                  30
ttg att cca cgt atc ggc cga ctg gcc atg cgt att atc aag cag cga      1583
Leu Ile Pro Arg Ile Gly Arg Leu Ala Met Arg Ile Ile Lys Gln Arg
    35                  40                  45
gtg gag tct gca gcc gat gcg gac acc act aag aac cag ctc gcg ttc      1631
Val Glu Ser Ala Ala Asp Ala Asp Thr Thr Lys Asn Gln Leu Ala Phe
50                  55                  60                  65
gct ggc gtt ggc gtt tat atc gcg caa att gtg gcg ttt ttc atg ctt      1679
Ala Gly Val Gly Val Tyr Ile Ala Gln Ile Val Ala Phe Phe Met Leu
                70                  75                  80
gcc gtc tcc gcg atg cag gct ttt ggt ttc tct ctc gcg ggc gct gcg      1727
Ala Val Ser Ala Met Gln Ala Phe Gly Phe Ser Leu Ala Gly Ala Ala
            85                  90                  95
att ccg gca acc att gcg tca gct gcc att ggt ctt ggt gcg cag tcg      1775
Ile Pro Ala Thr Ile Ala Ser Ala Ala Ile Gly Leu Gly Ala Gln Ser
        100                 105                 110
att gtt gcg gac ttc ttg gcc gga ttt ttc atc ctg acg gaa aag caa      1823
Ile Val Ala Asp Phe Leu Ala Gly Phe Phe Ile Leu Thr Glu Lys Gln
    115                 120                 125
ttc ggc gtg ggt gac tgg gtg cgc ttt gag ggc aac ggc atc gtt gtt      1871
Phe Gly Val Gly Asp Trp Val Arg Phe Glu Gly Asn Gly Ile Val Val
130                 135                 140                 145
gaa ggc acc gtc att gag atc acc atg cgc gcg acc aaa att cgc acg      1919
Glu Gly Thr Val Ile Glu Ile Thr Met Arg Ala Thr Lys Ile Arg Thr
                150                 155                 160
att gca caa gag acc gtg atc atc ccg aac tcc acg gcg aaa gtg tgc      1967
Ile Ala Gln Glu Thr Val Ile Ile Pro Asn Ser Thr Ala Lys Val Cys
            165                 170                 175
atc aac aat tct aat aac tgg tcg cgt gcg gtt gtc gtt att ccg atc      2015
Ile Asn Asn Ser Asn Asn Trp Ser Arg Ala Val Val Val Ile Pro Ile
        180                 185                 190
ccc atg ttg ggt tct  gaa aac atc aca gat gtc atc gcg cgc tct gaa     2063
Pro Met Leu Gly Ser Glu Asn Ile Thr Asp Val Ile Ala Arg Ser Glu
    195                 200                 205
gct gcg act cgt cgc gca ctt ggc cag gag aaa atc gca ccg gaa atc      2111
Ala Ala Thr Arg Arg Ala Leu Gly Gln Glu Lys Ile Ala Pro Glu lle
210                 215                 220                 225
ctc ggt gaa ctc gat gtg cac cca gcc acg gaa gtc aca ccg cca acg      2159
Leu Gly Glu Leu Asp Val His Pro Ala Thr Glu Val Thr Pro Pro Thr
                230                 235                 240
gtg gtc ggc atg ccg tgg atg gtc acc atg cgt ttc ctc gtg caa gtc      2207
Val Val Gly Met Pro Trp Met Val Thr Met Arg Phe Leu Val Gln Val
            245                 250                 255
acc gcc ggc aat caa tgg ctg gtc gaa cgc gcc atc cgc aca gaa atc      2255
Thr Ala Gly Asn Gln Trp Leu Val Glu Arg Ala Ile Arg Thr Glu Ile
        260                 265                 270
atc aac gaa ttc tgg gaa gaa tac ggc agc gca acc act aca tcg gga      2303
Ile Asn Glu Phe Trp Glu Glu Tyr Gly Ser Ala Thr Thr Thr Ser Gly
    275                 280                 285
acc ctc att gat tcc tta cac gtt gag cat gaa gag cca aag acc tcg    2351
Thr Leu Ile Asp Ser Leu His Val Glu His Glu Glu Pro Lys Thr Ser
290                 295                 300                 305
ctt atc gac gcc tcc ccc cag gct ctt aag gaa ccg aag ccg gag gct    2399
Leu Ile Asp Ala Ser Pro Gln Ala Leu Lys Glu Pro Lys Pro Glu Ala
                310                 315                 320
gcg gcg acg gtt gca tcg cta gct gca tcg tct aac gac gat gca gac    2447
Ala Ala Thr Val Ala Ser Leu Ala Ala Ser Ser Asn Asp Asp Ala Asp
            325                 330                 335
aat gca gac gcc tcg gcg atc aat gca ggc aat cca gag aag gaa ctt    2495
Asn Ala Asp Ala Ser Ala Ile Ash Ala Gly Asn Pro Glu Lys Glu Leu
        340                 345                 350
gat tcc gat gtg ctg gaa caa gaa ctc tcc agc gaa gaa ccg gaa gaa    2543
Asp Ser Asp Val Leu Glu Gln Glu Leu Ser Ser Glu Glu Pro Glu Glu
    355                 360                 365
aca gca aaa cca gat cac tct ctc cga ggc ttc ttc cgc act gat tac    2591
Thr Ala Lys Pro Asp His Ser Leu Arg Gly Phe Phe Arg Thr Asp Tyr
370                 375                 380                 385
tac cca aat cgg tgg cag aag atc ctg tcg ttt ggc gga cgt gtc cgc    2639
Tyr Pro Asn Arg Trp Gln Lys Ile Leu Ser Phe Gly Gly Arg Val Arg
                390                 395                 400
atg agc act tcc ctg ttg ttg ggt gcg ctg ctc ttg ctg tca cta ttt    2687
Met Ser Thr Ser Leu Leu Leu Gly Ala Leu Leu Leu Leu Ser Leu Phe
            405                 410                 415
aag gtc atg act gtg gaa cca agt gag aat tgg caa aac tcc agt gga    2735
Lys Val Met Thr Val Glu Pro Ser Glu Asn Trp Gln Asn Ser Ser Gly
        420                 425                 430
tgg ctg tca cca agc act gcc acc tca act gcg gtg acc acc tcc gaa    2783
Trp Leu Ser Pro 8er Thr Ala Thr Ser Thr Ala Val Thr Thr Ser Glu
    435                 440                 445
act tcc gcg cca gca agc acg cct tcg atg aca gtg ccc act acg gtg    2831
Thr Ser Ala Pro Ala Ser Thr Pro Ser Met Thr Val Pro Thr Thr Val
450                 455                 460                 465
gag gag acc cca acg atg gaa tct agc gtc gaa acg cag cag gaa acc    2879
Glu Glu Thr Pro Thr Met Glu Ser Ser Val Glu Thr Gln Gln Glu Thr
                470                 475                 480
tca acc cct gca acc gca acg ccc cag cga gcc gac acc atc gaa ccg    2927
Ser Thr Pro Ala Thr Ala Thr Pro Gln Arg Ala Asp Thr lle Glu Pro
            485                 490                 495
acc gag gaa gcc acg tcg cag gag gaa acg act gca tcg cag acg cag    2975
Thr Glu Glu Ala Thr Ser Gln Glu Glu Thr Thr Ala Ser Gln Thr Gln
        500                 505                 510
tct cca gca gtg gaa gca cca acc gcg gtc caa gaa aca gtt gcg ccg    3023
Ser Pro Ala Val Glu Ala Pro Thr Ala Val Gln Glu Thr Val Ala Pro
    515                 520                 525
acg tcc acc cct taggacgctg attacagacg tgtcccattt ctttactact        3075
Thr Ser Thr Pro
530
attggaaatt atgagttcag acgcagaaaa ggcatccgtg gagctttccg aaaaatttca  3135
cccagaacgc acccatattt tgggcgccgt tgtttttggc ctgatctcat tattagtcat  3195
cggcgcagcc cctcagtacc tgttttggct gctcgcgctc cctgtcatct tcggttactg  3255
ggttctaaaa tcatccacga tcgttgatga acagggcatc accgcaaact acgccttcaa  3315
gggcaaaaag gttgtggcct gggaagacct cgcaggaatc ggattcaagg gtgcccgcac  3375
tttcgctcgc accacctccg atgcagaagt caccctcccc ggcgtcacct tcaactccct  3435
tccccgcctt gaagctgctt cccacggccg catccccgat gcgatc                 3481
<210>30
<211>533
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>30
Met Ile Leu Gly Val Pro Ile Gln Tyr Leu Leu Tyr Ser Leu Trp Asn
1                   5                   10                  15
Trp Ile Val Asp Thr Gly Phe Asp Val Ala Ile Ile Leu Val Leu Ala
                20                  25                  30
Phe Leu Ile Pro Arg Ile Gly Arg Leu Ala Met Arg Ile Ile Lys Gln
            35                  40                  45
Arg Val Glu Ser Ala Ala Asp Ala Asp Thr Thr Lys Asn Gln Leu Ala
        50                  55                  60
Phe Ala Gly Val Gly Val Tyr Ile Ala Gln Ile Val Ala Phe Phe Met
65                  70                      75              80
Leu Ala Val Ser Ala Met Gln Ala Phe Gly Phe Ser Leu Ala Gly Ala
                85                      90              95
Ala Ile Pro Ala Thr Ile Ala Ser Ala Ala Ile Gly Leu Gly Ala Gln
            100                 105                 110
Ser Ile Val Ala Asp Phe Leu Ala Gly Phe Phe Ile Leu Thr Glu Lys
        115                 120                 125
Gln Phe Gly Val Gly Asp Trp Val Arg Phe Glu Gly Asn Gly Ile Val
    130                 135                 140
Val Glu Gly Thr Val Ile Glu Ile Thr Met Arg Ala Thr Lys Ile Arg
145                 150                 155                 160
Thr Ile Ala Gln Glu Thr Val Ile Ile Pro Asn Ser Thr Ala Lys Val
                165                 170                 175
Cys Ile Asn Asn Ser Asn Asn Trp Ser Arg Ala Val Val Val Ile Pro
            180                 185                 190
Ile Pro Met Leu Gly Ser Glu Asn Ile Thr Asp Val Ile Ala Arg Ser
        195                 200                 205
Glu Ala Ala Thr Arg Arg Ala Leu Gly Gln Glu Lys Ile Ala Pro Glu
    210                 215                 220
Ile Leu Gly Glu Leu Asp Val His Pro Ala Thr Glu Val Thr Pro Pro
225                 230                 235                 240
Thr Val Val Gly Met Pro Trp Met Val Thr Met Arg Phe Leu Val Gln
                245                 250                 255
Val Thr Ala Gly Asn Gln Trp Leu Val Glu Arg Ala Ile Arg Thr Glu
            260                 265                 270
Ile Ile Asn Glu Phe Trp Glu Glu Tyr Gly Ser Ala Thr Thr Thr Ser
        275                 280                 285
Gly Thr Leu Ile Asp Ser Leu His Val Glu His Glu Glu Pro Lys Thr
    290                 295                 300
Ser Leu Ile Asp Ala Ser Pro Gln Ala Leu Lys Glu Pro Lys Pro Glu
305                 310                 315                 320
Ala Ala Ala Thr Val Ala Ser Leu Ala Ala Ser Ser Asn Asp Asp Ala
                325                 330                 335
Asp Asn Ala Asp Ala Ser Ala Ile Asn Ala Gly Asn Pro Glu Lys Glu
            340                 345                 350
Leu Asp Ser Asp Val Leu Glu Gln Glu Leu Ser Ser Glu Glu Pro Glu
        355                 360                 365
Glu Thr Ala Lys Pro Asp His Ser Leu Arg Gly Phe Phe Arg Thr Asp
    370                 375                 380
Tyr Tyr Pro Asn Arg Trp Gln Lys Ile Leu Ser Phe Gly Gly Arg Val
385                 390                 395                 400
Arg Met Ser Thr Ser Leu Leu Leu Gly Ala Leu Leu Leu Leu Ser Leu
                405                 410                 415
Phe Lys Val Met Thr Val Glu Pro Ser Glu Asn Trp Gln Asn Ser Ser
            420                 425                 430
Gly Trp Leu Ser Pro Ser Thr Ala Thr Ser Thr Ala Val Thr Thr Ser
        435                 440                 445
Glu Thr Ser Ala Pro Ala Ser Thr Pro Ser Met Thr Val Pro Thr Thr
    450                 455                 460
Val Glu Glu Thr Pro Thr Met Glu Ser Ser Val Glu Thr Gln Gln Glu
465                 470                 475                 480
Thr Ser Thr Pro Ala Thr Ala Thr Pro Gln Arg Ala Asp Thr Ile Glu
                485                 490                 495
Pro Thr Glu Glu Ala Thr Ser Gln Glu Glu Thr Thr Ala Ser Gln Thr
            500                 505                 510
Gln Ser Pro Ala Val Glu Ala Pro Thr Ala Val Gln Glu Thr Val Ala
        515                 520                 525
Pro Thr Ser Thr Pro
    530
<210>31
<211>3481
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(1437)..(3035)
<223>
<400>31
gatcttgccg atttcggcag gatcaatgtc ggcgtgaatg atcttggcat caggtgcgaa    60
agtgtcaacg tcaccggtga cgcggtcatc aaagcgggag ccgatagcaa tcagcaggtc   120
gctgcgctgc agtgcaccaa cagcggacac agtgccatgc atgcctggca tacccatgtg   180
cagctcgtgg gactctggga aggttcccag cgccatcaat gtggtgacaa ctggaatgcc   240
ggtgtgctca gcgaacgcac gaagctcttc gtgggcatca gccttgataa cgccgccgcc   300
aacgtaaagg acaggcttct tagactcacc gatcagtttg acagcctgct caatctgtcg   360
agcatgcggt gttgaaactg ggcggtagcc tggcaggtcg atctttggtg gccagacgaa   420
atccaattca gcgttctgaa catccttggg gatatccact agaacaggac cagggcgacc   480
agtaatcgcg aggtggaatg cctcagccaa tgcctgtgga atgtcgttgg ggttggtgac   540
catgaagttg tgcttggtca ctggcatggt gatgccgcgg atatcggctt cctggaaagc   600
atcggtaccc agcaggctac ttccgacctg gccggtgatg gcaaccatgg gaacggagtc   660
caagtttgca tcagcgattg gggtaaccaa gttggttgcg cctgggccag aggttgcaat   720
gcagacgcca acgcgtccag taacctgcgc gtagccggtt gctgcgtggc ctgcgccctg   780
ctcgtggcgc actaggacgt ggcgcacctt tgtggaggaa tagagcgggt catacaccgg   840
tagcaccgca ccaccaggaa taccgaacac gatgtcggcg ttaagctcct cgagcgatcg   900
aacaattgcc tgtgcacctg tcatccgctc aggggcggcg gatcgaccac ggcttgcaac   960
cgtggcggga gtgggctgtt gagaagctgc cacattcacg actttctggc tcctttacta  1020
aataaggatt ttcacaggac ccgtccaagc caagccgatt tcaactcagc ctaaagacaa  1080
agccctcatt taaaattgtt ccgacgcgga tgcgtgtgca cgcagtgcga cagatgtctg  1140
ttgcaaagtt ggctacttgg gtcataacca acaagaaagc cctcgttcca acactgtggt  1200
gagtgttgtc gagggcgctt gacgagacga cttggaaggc cgttacggca ggcgccgcgc  1260
ggttactact acaagtcgaa taatggtcat ggtgtgtcat gctacacaca tcgagtttcc  1320
aattccacaa cgcacgaaaa ttcccacccc caaaactccc ccacttcggt taaggaatca  1380
ggattctcac aaagttcagg caggctcccg ctacttttca gcgctaatct tggctc atg  1439
                                                              Met
                                                              1
att tta ggc gta ccc att caa tat ttg ctc tat tca ttg tgg aat tgg    1487
Ile Leu Gly Val Pro Ile Gln Tyr Leu Leu Tyr Ser Leu Trp Ash Trp
            5                   10                  15
att gtc gat acc ggt ttt gat gta gca att atc ctg gtc ttg gcg ttt    1535
Ile Val Asp Thr Gly Phe Asp Val Ala Ile Ile Leu Val Leu Ala Phe
        20                  25                  30
ttg att cca cgt atc ggc cga ctg gcc atg cgt att atc aag cag cga    1583
Leu Ile Pro Arg Ile Gly Arg Leu Ala Met Arg Ile Ile Lys Gln Arg
    35                  40                  45
gtg gag tct gca gcc gat gcg gac acc act aag aac cag ctc gcg ttc    163l
Val Glu Ser Ala Ala Asp Ala Asp Thr Thr Lys Asn Gln Leu Ala Phe
50                  55                  60                  65
gct ggc gtt ggc gtt tat atc gcg caa att gtg gcg ttt ttc atg ctt    1679
Ala Gly Val Gly Val Tyr Ile Ala Gln Ile Val Ala Phe Phe Met Leu
                70                  75                  80
gcc gtc tcc gcg atg cag gct ttt ggt ttc tot ctc gcg ggc gct gcg    1727
Ala Val Ser Ala Met Gln Ala Phe Gly Phe Sar Leu Ala Gly Ala Ala
            85                  90                  95
att ccg gca acc att gcg tca gct gcc att ggt ctt ggt gtg cag tcg    1775
Ile Pro Ala Thr Ile Ala Ser Ala Ala Ile Gly Leu Gly Val Gln Ser
        100                 105                 110
att gtt gcg gac ttc ttg gcc gga ttt ttc atc ctg acg gaa aag caa    1823
Ile Val Ala Asp Phe Leu Ala Gly Phe Phe Ile Leu Thr Glu Lys Gln
    115                 120                 125
ttc ggc gtg ggt gac tgg gtg cgc ttt gag ggc aac ggc atc gtt gtt    1871
Phe Gly Val Gly Asp Trp Val Arg Phe Glu Gly Asn Gly Ile Val Val
130                 135                 140                 145
gaa ggc acc gtc att gag atc acc atg cgc gcg acc aaa att cgc acg    1919
Glu Gly Thr Val Ile Glu Ile Thr Met Arg Ala Thr Lys Ile Arg Thr
                150                 155                 160
att gca caa gag acc gtg atc atc ccg aac tcc acg gcg aaa gtg tgc    1967
Ile Ala Gln Glu Thr Val Ile Ile Pro Asn Ser Thr Ala Lys Val Cys
            165                 170                 175
atc aac aat tct aat aac tgg tcg cgt gcg gtt gtc gtt att ccg atc    2015
Ile Asn Asn Ser Asn Asn Trp Ser Arg Ala Val Val Val Ile Pro Ile
        180                 185                 190
ccc atg ttg ggt tct gaa aac atc aca gat gtc atc gcg cgc tct gaa    2063
Pro Met Leu Gly Ser Glu Asn Ile Thr Asp Val Ile Ala Arg Ser Glu
    195                 200                 205
gct gcg act cgt cgc gca ctt ggc cag gag aaa atc gca ccg gaa atc    2111
Ala Ala Thr Arg Arg Ala Leu Gly Gln Glu Lys Ile Ala Pro Glu Ile
210                 215                 220                 225
ctc ggt gaa ctc gat gtg cac cca gcc acg gaa gtc aca ccg cca acg    2159
Leu Gly Glu Leu Asp Val His Pro Ala Thr Glu Val Thr Pro Pro Thr
                230                 235                 240
gtg gtc ggc atg ccg tgg atg gtc acc atg cgt ttc ctc gtg caa gtc    2207
Val Val Gly Met Pro Trp Met Val Thr Met Arg Phe Leu Val Gln Val
            245                 250                 255
acc gcc ggc aat caa tgg ctg gtc gaa cgc gcc atc cgc aca gaa atc    2255
Thr Ala Gly Asn Gln Trp Leu Val Glu Arg Ala Ile Arg Thr Glu Ile
        260                 265                 270
atc aac gaa ttc tgg gaa gaa tac ggc agc gca acc act aca tcg gga    2303
Ile Asn Glu Phe Trp Glu Glu Tyr Gly Ser Ala Thr Thr Thr Ser Gly
    275                 280                 285
acc ctc att gat tcc tta cac gtt gag cat gaa gag cca aag acc tcg    2351
Thr Leu Ile Asp Ser Leu His Val Glu His Glu Glu Pro Lys Thr Ser
290                 295                 300                 305
ctt atc gac gcc tcc ccc cag gct ctt aag gaa ccg aag ccg gag gct    2399
Leu Ile Asp Ala Ser Pro Gln Ala Leu Lys Glu Pro Lys Pro Glu Ala
                310                 315                 320
gcg gcg acg gtt gca tcg cta gct gca tcg tct aac gac gat gca gac    2447
Ala Ala Thr Val Ala Ser Leu Ala Ala Ser Ser Asn Asp Asp Ala Asp
            325                 330                 335
aat gca gac gcc tcg gcg atc aat gca ggc aat cca gag aag gaa ctt    2495
Asn Ala Asp Ala Ser Ala Ile Asn Ala Gly Asn Pro Glu Lys Glu Leu
        340                 345                 350
gat tcc gat gtg ctg gaa caa gaa ctc tcc agc gaa gaa ccg gaa gaa    2543
Asp Ser Asp Val Leu Glu Gln Glu Leu Ser Ser Glu Glu Pro Glu Glu
    355                 360                 365
aca gca aaa cca gat cac tct ctc cga ggc ttc ttc cgc act gat tac    2591
Thr Ala Lys Pro Asp His Ser Leu Arg Gly Phe Phe Arg Thr Asp Tyr
370                 375                 380                 385
tac cca aat cgg tgg cag aag atc ctg tcg ttt ggc gga cgt gtc cgc    2639
Tyr Pro Asn Arg Trp Gln Lys Ile Leu Ser Phe Gly Gly Arg Val Arg
                390                 395                 400
atg agc act tcc ctg ttg ttg ggt gcg ctg ctc ttg ctg tca cta ttt    2687
Met Ser Thr Ser Leu Leu Leu Gly Ala Leu Leu Leu Leu Ser Leu Phe
            405                 410                 415
aag gtc atg act gtg gaa cca agt gag aat tgg caa aac tcc agt gga    2735
Lys Val Met Thr Val Glu Pro Ser Glu Asn Trp Gln Asn Ser Ser Gly
        420                 425                 430
tgg ctg tca cca agc act gcc acc tca act gcg gtg acc acc tcc gaa    2783
Trp Leu Ser Pro Ser Thr Ala Thr Ser Thr Ala Val Thr Thr Ser Glu
    435                 440                 445
act tcc gcg cca gca agc acg cct tcg atg aca gtg ccc act acg gtg    2831
Thr Ser Ala Pro Ala Ser Thr Pro Ser Met Thr Val Pro Thr Thr Val
450                 455                 460                 465
gag gag acc cca acg atg gaa tct agc gtc gaa acg cag cag gaa acc    2879
Glu Glu Thr Pro Thr Met Glu Ser Ser Val Glu Thr Gln Gln Glu Thr
                470                 475                 480
tca acc cct gca acc gca acg ccc cag cga gcc gac acc atc gaa ccg    2927
Ser Thr Pro Ala Thr Ala Thr Pro Gln Arg Ala Asp Thr Ile Glu Pro
            485                 490                 495
acc gag gaa gcc acg tcg cag gag gaa acg act gca tcg cag acg cag    2975
Thr Glu Glu Ala Thr Ser Gln Glu Glu Thr Thr Ala Ser Gln Thr Gln
        500                 505                 510
tct cca gca gtg gaa gca cca acc gcg gtc caa gaa aca gtt gcg ccg    3023
Ser Pro Ala Val Glu Ala Pro Thr Ala Val Gln Glu Thr Val Ala Pro
    515                 520                 525
acg tcc acc cct taggacgctg attacagacg tgtcccattt ctttactact        3075
Thr Ser Thr Pro
530
attggaaatt atgagttcag acgcagaaaa ggcatccgtg gagctttccg aaaaatttca  3135
cccagaacgc acccatattt tgggcgccgt tgtttttggc ctgatctcat tattagtcat  3195
cggcgcagcc cctcagtacc tgttttggct gctcgcgctc cctgtcatct tcggttactg  3255
ggttctaaaa tcatccacga tcgttgatga acagggcatc accgcaaact acgccttcaa  3315
gggcaaaaag gttgtggcct gggaagacct cgcaggaatc ggattcaagg gtgcccgcac  3375
tttcgctcgc accacctccg atgcagaagt caccctcccc ggcgtcacct tcaactccct  3435
tccccgcctt gaagctgctt cccacggccg catccccgat gcgatc    3481
<210>32
<211>533
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>32
Met Ile Leu Gly Val Pro Ile Gln Tyr Leu Leu Tyr Ser Leu Trp Asn
1               5                   10                  15
Trp Ile Val Asp Thr Gly Phe Asp Val Ala Ile Ile Leu Val Leu Ala
            20                  25                  30
Phe Leu Ile Pro Arg Ile Gly Arg Leu Ala Met Arg Ile Ile Lys Gln
        35                  40                  45
Arg Val Glu Ser Ala Ala Asp Ala Asp Thr Thr Lys Asn Gln Leu Ala
    50                  55                  60
Phe Ala Gly Val Gly Val Tyr Ile Ala Gln Ile Val Ala Phe Phe Met
65                  70                  75                  80
Leu Ala Val Ser Ala Met Gln Ala Phe Gly Phe Ser Leu Ala Gly Ala
                85                  90                  95
Ala Ile Pro Ala Thr Ile Ala Ser Ala Ala Ile Gly Leu Gly Val Gln
            100                 105                 110
Ser Ile Val Ala Asp Phe Leu Ala Gly Phe Phe Ile Leu Thr Glu Lys
        115                 120                 125
Gln Phe Gly Val Gly Asp Trp Val Arg Phe Glu Gly Asn Gly Ile Val
    130                 135                 140
Val Glu Gly Thr Val Ile Glu Ile Thr Met Arg Ala Thr Lys Ile Arg
145                 150                 155                 160
Thr Ile Ala Gln Glu Thr Val Ile Ile Pro Asn Ser Thr Ala Lys Val
                165                 170                 175
Cys Ile Asn Asn Ser Asn Asn Trp Ser Arg Ala Val Val Val Ile Pro
            180                 185                 190
Ile Pro Met Leu Gly Ser Glu Asn Ile Thr Asp Val Ile Ala Arg Ser
        195                 200                 205
Glu Ala Ala Thr Arg Arg Ala Leu Gly Gln Glu Lys Ile Ala Pro Glu
    210                 215                 220
Ile Leu Gly Glu Leu Asp Val His Pro Ala Thr Glu Val Thr Pro Pro
225                 230                 235                 240
Thr Val Val Gly Met Pro Trp Met Val Thr Met Arg Phe Leu Val Gln
                245                 250                 255
Val Thr Ala Gly Asn Gln Trp Leu Val Glu Arg Ala Ile Arg Thr Glu
            260                 265                 270
Ile Ile Asn Glu Phe Trp Glu Glu Tyr Gly Ser Ala Thr Thr Thr Ser
        275                 280                 285
Gly Thr Leu Ile Asp Ser Leu His Val Glu His Glu Glu Pro Lys Thr
    290                 295                 300
Ser Leu Ile Asp Ala Ser Pro Gln Ala Leu Lys Glu Pro Lys Pro Glu
305                 310                 315                 320
Ala Ala Ala Thr Val Ala Ser Leu Ala Ala Ser Ser Asn Asp Asp Ala
                325                 330                 335
Asp Asn Ala Asp Ala Ser Ala Ile Asn Ala Gly Asn Pro Glu Lys Glu
            340                 345                 350
Leu Asp Ser Asp Val Leu Glu Gln Glu Leu Ser Ser Glu Glu Pro Glu
        355                 360                 365
Glu Thr Ala Lys Pro Asp His Ser Leu Arg Gly Phe Phe Arg Thr Asp
    370                 375                 380
Tyr Tyr Pro Asn Arg Trp Gln Lys Ile Leu Ser Phe Gly Gly Arg Val
385                 390                 395                 400
Arg Met Ser Thr Ser Leu Leu Leu Gly Ala Leu Leu Leu Leu Ser Leu
                405                 410                 415
Phe Lys Val Met Thr Val Glu Pro Ser Glu Asn Trp Gln Asn Ser Ser
            420                 425                 430
Gly Trp Leu Ser Pro Ser Thr Ala Thr Ser Thr Ala Val Thr Thr Ser
        435                 440                 445
Glu Thr Ser Ala Pro Ala Ser Thr Pro Ser Met Thr Val Pro Thr Thr
    450                 455                 460
Val Glu Glu Thr Pro Thr Met Glu Ser Ser Val Glu Thr Gln Gln Glu
465                 470                 475                 480
Thr Ser Thr Pro Ala Thr Ala Thr Pro Gln Arg Ala Asp Thr Ile Glu
                485                 490                 495
Pro Thr Glu Glu Ala Thr Ser Gln Glu Glu Thr Thr Ala Ser Gln Thr
            500                 505                 510
Glu Ser Pro Ala Val Glu Ala Pro Thr Ala Val Gln Glu Thr Val Ala
        515                 520                 525
Pro Thr Ser Thr Pro
    530
<210>33
<211>20
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>yggB N-末端引物
<400>33
ggctgttgag aagctgccac                                           20
<210>34
<211>29
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>yggB N-末端引物2
<400>34
ccgcaacaat cgact gcaca coaagacca                                29
<210>35
<211>28
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>yggB C-末端引物1
<400>35
gggagctcca cggcatgccg accaccgt    28
<210>36
<211>29
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>yggB C-末端引物2
<400>36
tggtcttggt gtgcagtcga ttgttgcgg    29
<210>  37
<211>  28
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>yggB 2nd引物
<400>37
gggagctcga ctttctggct cctttact    28
<210>38
<211>28
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>sucA8引物
<400>38
 ctgcgtcgac gtcggaggca ccatccac    28
<210>39
<211>  30
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>sucA801引物
<400>39
ctgcgtctcg acgtcggagg caccatccac    30
<210>40
<211>36
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>sucA805引物
<400>40
gctaaaagct gcgtcgacgt cggaggcacc atccac                                36
<210>41
<211>36
<212>DNA
<213>人工的DNA
<220>
<223>sucA77
<400>41
gctataagct gcgtcgacgt cggaggcacc atccac                                36
<210>42
<211>4389
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(443)..(2542)
<223>
<400>42
gtcgacaagc aaaatcgaag cggcagcacg ccgcgtcgga gccttaaacg ccatcgccgc      60
catccctgat ggtttcaatc atcaagtcgg tgaacgcggg cgcaacctgt catccggaca     120
gcgccaactg atcgcgctgg cgcgcgccga actcat cgag ccttccatca tgcttctcga    180
cgaagccacc tccaccctcg accccgccac cgaagccgtt atcctcaacg cctccgatcg     240
agtcactaag ggacgcacca gcatcatcgt cgcgcaccgc tt ggcaaccg ctaaaagggc    300
cgaccgtatt cttgttgttg aacaaggacg tatcattgag gacggatctc acgacgcgtt     360
gttgtct gct aacggcacct acgcccgcat gtggcattta atggcctgac acgttatttt    420
taggagaact gtcaacaaat ta atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag      472
                     Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln0                         1               5                   10cca acg acc aac gtt aca gtg gat aaa ata aag ctc aat aaa ccc tca       520Pro Thr Thr Asn Val Thr Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser
            15                  20                  25aga agc aag gaa aag agg cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act       568Arg Ser Lys Glu Lys Arg Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr
        30                  35                  40ttc ggc cag aat gcg tgg ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag       616Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln
    45                  50                  55aag gac ccc aag tcc gtg gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg       664Lys Asp Pro Lys Ser Val Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala
60                  65                  70cag ggg gga cca aat gct acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca       712Gln Gly Gly Pro Asn Ala Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser75                  80                  85                  90gcg ccc aag gag tct gcg aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc      760Ala Pro Lys Glu Ser Ala Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala
            95                  100                 105aag gca gca ccg cgc gta gaa acc aag ccg gcc gcc aag acc gcc cct       808
Lys Ala Ala Pro Arg Val Glu Thr Lys ProAla Ala Lys Thr Ala Pro
    110                         115                120
aag gcc aag gag tcc tca gtg cca cag caa cct aag ctt ccg gag cca    856
Lys Ala Lys Glu Ser Ser Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro
        125                 130                 135
gga caa acc cca atc agg ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg    904
Gly Gln Thr Pro Ile Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met
    140                 145                 150
gat atc tcc ctg gaa atc cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca    952
Asp Ile Ser Leu Glu Ile Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro
155                 160                 165                 170
gct cgc ctc atg ttc gaa aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag   1000
Ala ArgLeu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys
               175                 180                 185
cgc acc cgc ggt ggc aag atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc   1048
Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His IleIle Gly Tyr Ala
            190                 195                 200
atg gtg aag gca gtc atg gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac gac   1096
Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp
        205                 210                 215
gtc atc gac ggc aag cca acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg   1144
Val Ile Asp Gly Lys Pro Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu
    220                 225                 230
ggc ctt gcc atc gac ctt cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc   1192
Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val
235                 240                 245                 250
gta gca gcc atc aag gaa acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc   1240
Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu
                255                 260                 265
gca gca tac gaa gac atc gtg aca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc   1288
Ala Ala Tyr Glu Asp Ile Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr
            270                 275                 280
atggat  gac tac cag ggc gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc   1336
Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly
        285                 290                 295
atc ggt acc cgc cac tct gtc cca cgt ctg acc aag ggc cag ggc acc   1384
Ile Gly Thr Arg His Ser Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr
    300                 305                 310
atc atc ggt gtc ggt tcc atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct   1432
Ile Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala
315                 320                 325                 330
tcc gaa gac cgc ctt gca gag ctc ggc gtt gga aag ctt gtc acc atc   1480
Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile
                335                 340                 345
acc tcc acc tac gat cac cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa   1528
Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu
            350                 355                 360
ttc ctg cgt acc atg tct cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gat   1576
Phe Leu Arg Thr Met Ser Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp
        365                 370                 375
gag atc ttc gac gca atg aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca   1624
Glu Ile Phe Asp Ala Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala
    380                 385                 390
cag gac gtt cca aac acc ggt gtt gat aag aacacc cgc gtc at g cag   1672
Gln Asp Val  Pro Asn Thr Gly Val Asp LysAsn Thr Arg Val Met Gln
395                 400                 405                 4l0
ctc att gag gca tac cgc tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac   1720
Leu Il e Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly Hi s Leu Ile Ala Asp Thr Asn
                 4l5                 420                 425
cca ctt tca tgg gtt cag cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac   1768
Pro Leu Ser Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp
            430                 435                 440
ctc gac atc gag acc cac agc ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc   1816
Leu Asp Ile Glu Thr His Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr
        445                 450                 455
ttc agc gtc ggt ggc ttc ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag    1864
Phe Ser Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu
    460                 465                 470
gta ctg tcc cgc ctg cgc gct gcc tac acc ttg aag gtc ggc tcc gaa    1912
Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu
475                 480                 485                 490
tac acc cac atc ctg gac cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc    1960
Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg
                495                 500                 505
ctc gaa gcc gga atg cca aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc    2008
Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile
            510                 515                 520
ctg cag aag ctg aac gcc gca gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc    2056
Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr
        525                 530                 535
aag tac gtc ggc cag aag cgc ttc tcc ctc gaa ggt gca gaa gct ctc    2104
Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu
    540                 545                 550
atc cca ctg atg gac tcc gcc atc gac acc gcc gca ggc cag ggc ctc    2152
Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu
555                 560                 565                 570
gac gaa gtt gtc atc ggt atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg    2200
Asp Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu
                 575                 580                585
ttc aac atc gtg ggc aag cca ctg gca tcc atc ttc aac gag ttt gaa    2248
Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu
            590                 595                 600
ggc caa atg gag cag ggc cag atc ggt ggc tcc ggt gac gtg aag tac    2296
Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr
        605                 610                 615
cac ctc ggt tcc gaa ggc cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag    2344
His Leu Gly Ser Glu Gly Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu
    620                 625                 630
atc aag gtc tcc ctg act gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac    2392
Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn
635                 640                 645                 650
cca gtg atg gaa ggt atc gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag    2440
Pro Val Met Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys
                655                 660                 665
ggc gta gac ggc aag act gtt gtg cca ctg ctg ctc cac ggt gac gct    2488
Gly Val Asp Gly Lys Thr Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala
            670                 675                 680
gca ttc gca ggc ctg ggc atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct aag    2536
Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys
        685                 690                 695
ctg cgt cgacgtcgga ggcaccatcc acatcgtggt gaacaaccag atcggcttca     2592
Leu Arg
    700
ccaccacccc agactccagc cgctccatgc actacgcaac cgactacgcc aaggcattcg  2652
gctgcccagt cttccacgtc aatggtgatg acccagaggc agttgtctgg gttggccagc  2712
tggcaaccga gtaccgtcgt cgcttcggca aggacgtctt catcgacctc gtttgctacc  2772
gcctccgcgg ccacaacgaa gctgatgatc cttccatgac ccagccaaag atgtatgagc  2832
tcatcaccgg ccgcgagacc gttcgtgctc agtacaccga agacctgctc ggacgtggag  2892
acctctccaa cgaagatgca gaagcagtcg tccgcgactt ccacgaccag atggaatctg  2952
tgttcaacga agtcaaggaa ggcggcaaga agcaggctga ggcacagacc ggcatcaccg  3012
gctcccagaa gcttccacac ggccttgaga ccaacatctc ccgtgaagag ctcctggaac  3072
tgggacaggc tttcgccaac accccagaag gcttcaacta ccacccacgt gtggctccag  3132
ttgctaagaa gcgcgtctcc tctgtcaccg aaggtggcat cgactgggca tggggcgagc  3192
tcctcgcctt cggttccctg gctaactccg gccgcttggt tcgccttgca ggtgaagatt  3252
cccgccgcgg taccttcacc cagcgccacg cagttgccat cgacccagcg accgctgaag  3312
agttcaaccc actccacgag cttgcacagt ccaagggcaa caacggtaag ttcctggtct  3372
acaactccgc actgaccgag tacgcaggca tgggcttcga gtacggctac tccgtaggaa  3432
acgaagactc cgtcgttgca tgggaagcac agttcggcga cttcgccaac ggcgctcaga  3492
ccatcatcga tgagtacgtc tcctcaggcg aagctaagtg gggccagacc tccaagctga  3552
tccttctgct gcctcacggc tacgaaggcc agggcccaga ccactcttcc gcacgtatcg  3612
agcgcttcct gcagctgtgc gctgagggtt ccatgactgt tgctcagcca tccaccccag  3672
caaaccactt ccacctgctg cgtcgtcacg ctctgtccga cctgaagcgt ccactggtta  3732
tcttcacccc gaagtccatg ctgcgtaaca aggctgctgc ctccgcacca gaagacttca  3792
ctgaggtcac caagttccaa tccgtgatcg acgatccaaa cgttgcagat gcagccaagg  3852
tgaagaaggt catgctggtc tccggcaagc tgtactacga attggcaaag cgcaaggaga  3912
aggacggacg cgacgacatc gcgatcgttc gtatcgaaat gctccaccca attccgttca  3972
accgcatctc cgaggctctt gccggctacc ctaacgctga ggaagtcctc ttcgttcagg  4032
atgagccagc aaaccagggc ccatggccgt tctaccagga gcacctccca gagctgatcc  4092
cgaacatgcc aaagatgcgc cgcgtttccc gccgcgctca gtcctccacc gcaactggtg  4152
ttgctaaggt gcaccagctg gaggagaagc agcttatcga cgaggctttc gaggcttaag  4212
tctttatagt cctgcactag cctagagggc cttatgcagt gtgaatcaca cagcataagg  4272
ccctttttgc tgccgtggtt gcctaaggtg gaaggcatga aacgaatctg tgcggtcacg  4332
atctcttcag tacttttgct aagtggctgc tcctccactt ccaccacgca gctcgag     4389
<210>43
<211>700
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>43
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
Asp Lys Glu Trp Ara Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Ala
65                  70                  75                  80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90                  95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                 120                 125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro
    210                 215                 220
Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu
225                 230                 235                 240
Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu
                245                 250                 255
Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile
            260                 265                 270
Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly
        275                 280                 285
Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser
    290                 295                 300
Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser
305                 310                 315                 320
Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His
            340                 345                 350
Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser
        355                 360                 365
Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met
    370                 375                 380
Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr
385                 390                 395                 400
Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg
                405                 410                 415
Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln
            420                 425                 430
Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His
        435                 440                 445
Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Ser Val Gly Gly Phe
    450                 455                 460
Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg
465                 470                 475                 480
Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp
                485                 490                 495
Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro
            500                 505                 510
Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala
        515                 520                 525
Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys
    530                 535                 540
Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser
545                 550                 555                 560
Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly
                565                 570                 575
Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys
            580                 585                 590
Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly
        595                 600                 605
Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly
    610                 615                 620
Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr
625                 630                 635                 640
Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile
                645                 650                 655
Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr
            660    6             65                 670
Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly
        675                 680                 685
Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Leu Arg
    690                 695                 700
<210>44
<211>4391
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(443)..(4210)
<223>sucA801
<400>44
gtcgacaagc aaaatcgaag cggcagcacg ccgcgtcgga gccttaaacg ccatcgccgc     60
catccctgat ggtttcaatc atcaagtcgg tgaacgcggg cgcaacctgt catccggaca    120
gcgccaactg atcgcgctgg cgcgcgccga actcatcgag ccttccatca tgcttctcga    180
cgaagccacc tccaccctcg accccgccac cgaagccgtt atcctcaacg cctccgatcg    240
agtcactaag ggacgcacca gcatcatcgt cgcgcaccgc ttggcaaccg ctaaaagggc    300
cgaccgtatt cttgttgttg aacaaggacg tatcattgag gacggatctc acgacgcgtt    360
gttgtctgct aacggcacct acgcccgcat gtggcattta atggcctgac acgttatttt    420
taggagaact gtcaacaaat ta atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag     472
                         Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln
                         1               5                   10
cca acg acc aac gtt aca gtg gat aaa ata aag ctc aat aaa ccc tca      520
Pro Thr Thr Asn Val Thr Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser
                15                  20                  25
aga agc aag gaa aag agg cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act      568
Arg Ser Lys Glu Lys Arg Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr
            30                  35                  40
ttc ggc cag aat gcg tgg ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag      616
Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln
        45                  50                  55
aag gac ccc aag tcc gtg gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg      664
Lys Asp Pro Lys Ser Val Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala
    60                  65                  70
cag ggg gga cca aat gct acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca      712
Gln Gly Gly Pro Asn Ala Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser
75                  80                  85                  90
gcg ccc aag gag tct gcg aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc      760
Ala Pro Lys Glu Ser Ala Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala
                95                  100                 105
aag gca gca ccg cgc gta gaa acc aag ccg gcc gcc aag acc gcc cct      808
Lys Ala Ala Pro Arg Val Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro
            110                 115                 120
aag gcc aag gag tcc tca gtg cca cag caa cct aag ctt ccg gag cca      856
Lys Ala Lys Glu Ser Ser Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro
        125                  130                  135
gga caa acc cca atc agg ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg      904
Gly Gln Thr Pro Ile Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met
    140                 145                 150
gat atc tcc ctg gaa atc cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca      952
Asp Ile Ser Leu Glu Ile Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro
155                 160                 165                 170
gct cgc ctc atg ttc gaa aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag     1000
Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys
                175                 180                 185
cgc acc cgc ggt ggc aag atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc     1048
Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala
            190                 195                 200
atg gtg aag gca gtc atg gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac gac     1096
Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp
        205                 210                 215
gtc atc gac ggc aag cca acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg     1144
Val Ile Asp Gly Lys Pro Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu
    220                 225                 230
ggc ctt gcc atc gac ctt cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc     1192
Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val
235                 240                 245                 250
gta gca gcc atc aag gaa acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc     1240
Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu
                255                 260                 265
gca gca tac gaa gac atc gtg aca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc     1288
Ala Ala Tyr Glu Asp Ile Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr
            270                 275                 280
atg gat gac tac cag ggc gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc     1336
Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly
        285                  290                295
atc ggt acc cgc cac tct gtc cca cgt ctg acc aag ggc cag ggc acc     1384
Ile Gly Thr Arg His Ser Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr
    300                 305                 310
atc atc ggt gtc ggt tcc atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct    1432
Ile Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala
315                 320                 325                 330
tcc gaa gac cgc ctt gca gag ctc ggc gtt gga aag ctt gtc acc atc    1480
Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile
                335                 340                 345
acc tcc acc tac gat cac cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa    1528
Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu
            350                 355                 360
ttc ctg cgt acc atg tct cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gat    1576
Phe Leu Arg Thr Met Ser Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp
        365                 370                 375
gag atc ttc gac gca atg aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca    1624
Glu Ile Phe Asp Ala Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala
    380                 385                 390
cag gac gtt cca aac acc ggt gtt gat aag aac acc cgc gtc atg cag    1672
Gln Asp Val Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln
395                 400                 405                 410
ctc att gag gca tac cgc tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac    1720
Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn
                415                 420                 425
cca ctt tca tgg gtt cag cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac    1768
Pro Leu Ser Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp
            430                 435                 440
ctc gac atc gag acc cac agc ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc    1816
Leu Asp Ile Glu Thr His Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr
        445                 450                 455
ttc agc gtc ggt ggc ttc ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag    1864
Phe Ser Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu
    460                 465                 470
gta ctg tcc cgc ctg cgc gct gcc tac acc ttg aag gtc ggc tcc gaa    1912
Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu
475                 480                 485                 490
tac acc cac atc ctg gac cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc    1960
Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg
                495                 500                 505
ctc gaa gcc gga atg cca aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc    2008
Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile
            510                 515                 520
ctg cag aag ctg aac gcc gca gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc    2056
Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr
        525                 530                 535
aag tac gtc ggc cag aag cgc ttc tcc ctc gaa ggt gca gaa gct ctc    2104
Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu
    540                 545                 550
atc cca ctg atg gac tcc gcc atc gac acc gcc gca ggc cag ggc ctc    2152
Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu
555                 560                 565                 570
gac gaa gtt gtc atc ggt atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg    2200
Asp Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu
                575                 580                 585
ttc aac atc gtg ggc aag cca ctg gca tcc atc ttc aac gag ttt gaa    2248
Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu
            590                 595                 600
ggc caa atg gag cag ggc cag atc ggt ggc tcc ggt gac gtg aag tac    2296
Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr
        605                 610                 615
cac ctc ggt tcc gaa ggc cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag    2344
His Leu Gly Ser Glu Gly Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu
    620                 625                 630
atc aag gtc tcc ctg act gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac    2392
Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn
635                 640                 645                 650
cca gtg atg gaa ggt atc gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag    2440
Pro Val Met Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys
                655                 660                 665
ggc gta gac ggc aag act gtt gtg cca ctg ctg ctc cac ggt gac gct    2488
Gly Val Asp Gly Lys Thr Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala
            670                 675                 680
gca ttc gca ggc ctg ggc atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct aag    2536
Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys
        685                 690                 695
ctg cgt ctc gac gtc gga ggc acc atc cac atc gtg gtg aac aac cag    2584
Leu Arg Leu Asp Val Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln
    700                 705                 710
atc ggc ttc acc acc acc cca gac tcc agc cgc tcc atg cac tac gca    2632
Ile G1y Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala
715                 720                 725                 730
acc gac tac gcc aag gca ttc ggc tgc cca gtc ttc cac gtc aat ggt    2680
Thr Asp Tyr Ala Lys Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly
                735                 740                 745
gat gac cca gag gca gtt gtc tgg gtt ggc cag ctg gca acc gag tac    2728
Asp Asp Pro Glu Ala Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr
            750                 755                 760
cgt cgt cgc ttc ggc aag gac gtc ttc atc gac ctc gtt tgc tac cgc    2776
Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg
        765                 770                 775
ctc cgc ggc cac aac gaa gct gat gat cct tcc atg acc cag cca aag    2824
Leu Arg Gly His Asn Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys
    780                 785                 790
atg tat gag ctc atc acc ggc cgc gag acc gtt cgt gct cag tac acc    2872
Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr
795                 800                 805                 810
gaa gac ctg ctc gga cgt gga gac ctc tcc aac gaa gat gca gaa gca    2920
Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala
                815                 820                 825
gtc gtc cgc gac ttc cac gac cag atg gaa tct gtg ttc aac gaa gtc    2968
Val Val Arg Asp Phe His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val
            830                 835                 840
aag gaa ggc ggc aag aag cag gct gag gca cag acc ggc atc acc ggc    3016
Lys Glu Gly Gly Lys Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly
        845                 850                 855
tcc cag aag ctt cca cac ggc ctt gag acc aac atc tcc cgt gaa gag    3064
Ser Gln Lys Leu Pro His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu
    860                 865                 870
ctc ctg gaa ctg gga cag gct ttc gcc aac acc cca gaa ggc ttc aac    3112
Leu Leu Glu Leu Gly Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn
875                 880                 885                 890
tac cac cca cgt gtg gct cca gtt gct aag aag cgc gtc tcc tct gtc    3160
Tyr His Pro Arg Val Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val
                895                 900                 905
acc gaa ggt ggc atc gac tgg gca tgg ggc gag ctc ctc gcc ttc ggt    3208
Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly
            910                 915                 920
tcc ctg gct aac tcc ggc cgc ttg gtt cgc ctt gca ggt gaa gat tcc    3256
Ser Leu Ala Asn Ser Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser
        925                 930                 935
cgc cgc ggt acc ttc acc cag cgc cac gca gtt gcc atc gac cca gcg    3304
Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala
    940                 945                 950
acc gct gaa gag ttc aac cca ctc cac gag ctt gca cag tcc aag ggc    3352
Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly
955                 960                 965                 970
aac aac ggt aag ttc ctg gtc tac aac tcc gca ctg acc gag tac gca    3400
Asn Asn Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala
                975                 980                 985
ggc atg ggc ttc gag tac ggc tac tcc gta gga aac gaa gac tcc gtc    3448
Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val
            990                 995                 1000
gtt gca tgg gaa gca cag ttc ggc gac ttc gcc aac ggc gct cag        3493
Val Ala Trp Glu Ala Gln Phe Gly Asp Phe Ala Asn Gly Ala Gln
        1005                1010                1015
acc atc atc gat gag tac gtc tcc tca ggc gaa gct aag tgg ggc        3538
Thr Ile Ile Asp Glu Tyr Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp Gly
        1020                1025                1030
cag acc tcc aag ctg atc ctt ctg ctg cct cac ggc tac gaa ggc        3583
Gln Thr Ser Lys Leu Ile Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu Gly
        1035                1040                1045
cag ggc cca gac cac tct tcc gca cgt atc gag cgc ttc ctg cag        3628
Gln Gly Pro Asp His Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln
        1050                1055                1060
ctg tgc gct gag ggt tcc atg act gtt gct cag cca tcc acc cca        3673
Leu Cys Ala Glu Gly Ser Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro
        1065                1070                1075
gca aac cac ttc cac ctg ctg cgt cgt cac gct ctg tcc gac ctg        3718
Ala Asn His Phe His Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu
        1080                1085                1090
aag cgt cca ctg gtt atc ttc acc ccg aag tcc atg ctg cgt aac        3763
Lys Arg Pro Leu Val Ile Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn
        1095                1100                1105
aag gct gct gcc tcc gca cca gaa gac ttc act gag gtc acc aag        3808
Lys Ala Ala Ala Ser Ala Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr Lys
        1110                1115                1120
ttc caa tcc gtg atc gac gat cca aac gtt gca gat gca gcc aag        3853
Phe Gln Ser Val Ile Asp Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala Lys
        1125                1130                1135
gtg aag aag gtc atg ctg gtc tcc ggc aag ctg tac tac gaa ttg        3898
Val Lys Lys Val Met Leu Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu
        1140                1145                1150
gca aag cgc aag gag aag gac gga cgc gac gac atc gcg atc gtt        3943
Ala Lys Arg Lys Glu Lys Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val
        1155                1160                1165
cgt atc gaa atg ctc cac cca att ccg ttc aac cgc atc tcc gag        3988
Arg Ile Glu Met Leu His Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser Glu
        1170                1175                1180
gct ctt gcc ggc tac cct aac gct gag gaa gtc ctc ttc gtt cag        4033
Ala Leu Ala Gly Tyr Pro Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln
        1185                1190                1195
gat gag cca gca aac cag ggc cca tgg ccg ttc tac cag gag cac        4078
Asp Glu Pro Ala Asn Gln Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His
        1200                1205                1210
ctc cca gag ctg atc ccg aac atg cca aag atg cgc cgc gtt tcc        4123
Leu Pro Glu Leu Ile Pro Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser
        1215                1220                1225
cgc cgc gct cag tcc tcc acc gca act ggt gtt gct aag gtg cac        4168
Arg Arg Ala Gln Ser Ser Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His
        1230                1235                1240
cag ctg gag gag aag cag ctt atc gac gag gct ttc gag gct            4210
Gln Leu Glu Glu Lys Gln Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
        1245                1250                1255
taagtcttta tagtcctgca ctagcctaga gggccttatg cagtgtgaat cacacagcat  4270
aaggcccttt ttgctgccgt ggttgcctaa ggtggaaggc atgaaacgaa tctgtgcggt  4330
cacgatctct tcagtacttt tgctaagtgg ctgctcctcc acttccacca cgcagctcga  4390
g                                                                  4391
<210>45
<211>1256
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>45
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Ala
65                  70                  75                  80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90                  95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                  105                  110
Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                  120                  125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                  135                  140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro
    210                 215                 220
Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu
225                 230                 235                 240
Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val AIa Ala Ile Lys Glu
                245                 250                 255
Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile
            260                 265                 270
Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly
        275                 280                 285
Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser
    290                 295                 300
Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser
305                 310                 315                 320
Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His
            340                 345                 350
Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser
        355                 360                 365
Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met
    370                 375                 380
Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr
385                 390                 395                 400
Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg
                405                 410                 415
Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln
            420                 425                 430
Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His
        435                 440                 445
Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Ser Val Gly Gly Phe
    450                 455                 460
Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg
465                 470                 475                 480
Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp
                485                 490                 495
Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro
            500                 505                 5l0
Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala
        515                 520                 525
Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys
    530                 535                 540
Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser
545                 550                 555                 560
Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly
                565                 570                 575
Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys
            580                 585                 590
Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly
        595                 600                 605
Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly
    610                 615                 620
Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr
625                 630                 635                 640
Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile
                645                 650                 655
Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr
            660                 665                 670
Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly
        675                 680                 685
Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Leu Arg Leu Asp Val Gly
    690                 695                 700
Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr
705                 710                 715                 720
Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys Ala
                725                 730                 735
Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val
            740                 745                 750
Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys
        755                 760                 765
Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn Glu
    770                 775                 780
Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr
785                 790                 795                 800
Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg
                805                 810                 815
Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Va1 Arg Asp Phe His
            820                 825                 830
Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys Lys
        835                 840                 845
Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro His
    850                 855                 860
Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly Gln
865                 870                 875                 880
Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val Ala
                885                 890                 895
Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp
            900                 905                 910
Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser Gly
        915                 920                 925
Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr
    930                 935                 940
Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe Asn
945                 950                 955                 960
Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe Leu
                965                 970                 975
Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr
            980                 985                 990
Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val Val Ala Trp Glu Ala Gln
        995                 1000                1005
Phe Gly Asp Phe Ala Asn Gly Ala Gln Thr Ile Ile Asp Glu Tyr
    1010                1015                1020
Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp Gly Gln Thr Ser Lys Leu Ile
    1025                1030                1035
Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu Gly Gln Gly Pro Asp His Ser
    1040                1045                1050
Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln Leu Cys Ala Glu Gly Ser
    1055                1060                1065
Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro Ala Asn His Phe His Leu
    1070                1075                1080
Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu Lys Arg Pro Leu Val Ile
    1085                1090                1095
Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn Lys Ala Ala Ala Ser Ala
    1100                1105                1110
Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr Lys Phe Gln Ser Val Ile Asp
    1115                1120                1125
Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala Lys Val Lys Lys Val Met Leu
    1130                1135                1140
Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu Ala Lys Arg Lys Glu Lys
    1145                1150                1155
Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val Arg Ile Glu Met Leu His
    1160                1165                1170
Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser Glu Ala Leu Ala Gly Tyr Pro
    1175                1180                1185
Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Aan Gln
    1190                1195                1200
Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Glu Leu Ile Pro
    1205                1210                1215
Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser Arg Arg Ala Gln Ser Ser
    1220                1225                1230
Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His Gln Leu Glu Glu Lys Gln
    1235                1240                1245
Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu  Ala
    1250                1255
<210>46
<211>4391
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(443)..(4210)
<223>sucA805
<400>46
gtcgacaagc aaaatcgaag cggcagcacg ccgcgtcgga gccttaaacg ccatcgccgc    60
catccctgat ggtttcaatc atcaagtcgg tgaacgcggg cgcaacctgt catccggaca   120
gcgccaactg atcgcgctgg cgcgcgccga actcatcgag ccttccatca tgcttctcga   180
cgaagccacc tccaccctcg accccgccac cgaagccgtt atcctcaacg cctccgatcg   240
agtcactaag ggacgcacca gcatcatcgt cgcgcaccgc ttggcaaccg ctaaaagggc   300
cgaccgtatt cttgttgttg aacaaggacg tatcattgag gacggatctc acgacgcgtt   360
gttgtctgct aacggcacct acgcccgcat gtggcattta atggcctgac acgttatttt   420
taggagaact gtcaacaaat ta atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag    472
                         Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln
                         1               5                   10
cca acg acc aac gtt aca gtg gat aaa ata aag ctc aat aaa ccc tca     520
Pro Thr Thr Asn Val Thr Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser
                15                  20                  25
aga agc aag gaa aag agg cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act     568
Arg Ser Lys Glu Lys Arg Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr
            30                  35                  40
ttc ggc cag aat gcg tgg ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag     616
Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln
        45                  50                  55
aag gac ccc aag tcc gtg gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg     664
Lys Asp Pro Lys Ser Val Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala
    60                  65                   70
cag ggg gga cca aat gct acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca     712
Gln Gly Gly Pro Asn Ala Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser
75                  80                   85                 90
gcg ccc aag gag tct gcg aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc     760
Ala Pro Lys Glu Ser Ala Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala
                95                  100                 105
aag gca gca ccg cgc gta gaa acc aag ccg gcc gcc aag acc gcc cct     808
Lys Ala Ala Pro Arg Val Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro
            110                115                  120
aag gcc aag gag tcc tca gtg cca cag caa cct aag ctt ccg gag cca     856
Lys Ala Lys Glu Ser Ser Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro
        125                 130                 135
gga caa acc cca atc agg ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg     904
Gly Gln Thr Pro Ile Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met
    140                 145                 150
gat atc tcc ctg gaa atc cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca     952
Asp Ile Ser Leu Glu Ile Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro
155                 160                 165                 170
gct cgc ctc atg ttc gaa aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag    1000
Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys
                175                 180                 185
cgc acc cgc ggt ggc aag atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc    1048
Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala
            190                 195                 200
atg gtg aag gca gtc atg gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac gac    1096
Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp
        205                 210                 215
gtc atc gac ggc aag cca acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg    1144
Val Ile Asp Gly Lys Pro Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu
    220                 225                  230
ggc ctt gcc atc gac ctt cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc    1192
Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val
235                 240                 245                 250
gta gca gcc atc aag gaa acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc    1240
Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu
                255                 260                 265
gca gca tac gaa gac atc gtg aca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc    1288
Ala Ala Tyr Glu Asp Ile Val ThT Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr
            270                 275                 280
atg gat gac tac cag ggc gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc    1336
Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly
        285                 290                 295
atc ggt acc cgc cac tct gtc cca cgt ctg acc aag ggc cag ggc acc    1384
Ile Gly Thr Arg His Ser Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr
    300                 305                 310
atc atc ggt gtc ggt tcc atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct    1432
Ile Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala
315                 320                 325                 330
tcc gaa gac cgc ctt gca gag ctc ggc gtt gga aag ctt gtc acc atc    1480
Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile
                335                 340                 345
acc tcc acc tac gat cac cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa    1528
Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu
            350                 355                 360
ttc ctg cgt acc atg tct cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gat    1576
Phe Leu Arg Thr Met Ser Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp
        365                 370                 375
gag atc ttc gac gca atg aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca    1624
Glu Ile Phe Asp Ala Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala
    380                 385                 390
cag gac gtt cca aac acc ggt gtt gat aag aac acc cgc gtc atg cag    1672
Gln Asp Val Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln
395                 400                 405                 410
ctc att gag gca tac cgc tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac    1720
Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn
                415                 420                 425
cca ctt tca tgg gtt cag cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac    1768
Pro Leu Ser Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp
            430                 435                 440
ctc gac atc gag acc cac agc ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc    1816
Leu Asp Ile Glu Thr Hi s Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr
        445                  450                 455
ttc agc gtc ggt ggc ttc ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag    1864
Phe Ser Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu
    460                 465                 470
gta ctg tcc cgc ctg cgc gct gcc tac acc ttg aag gtc ggc tcc gaa    1912
Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu
475                 480                 485                 490
tac acc cac atc ctg gac cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc    1960
Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg
                495                 500                 505
ctc gaa gcc gga atg cca aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc    2008
Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile
            510                 515                 520
ctg cag aag ctg aac gcc gca gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc    2056
Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr
        525                 530                 535
aag tac gtc ggc cag aag cgc ttc tcc ctc gaa ggt gca gaa gct ctc    2104
Lys Tyr Val Gly Gln Lys Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu
    540                 545                 550
atc cca ctg atg gac tcc gcc atc gac acc gcc gca ggc cag ggc ctc    2152
Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu
555                 560                 565                 570
gac gaa gtt gtc atc ggt atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg    2200
Asp Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu
                575                 580                 585
ttc aac atc gtg ggc aag cca ctg gca tcc atc ttc aac gag ttt gaa    2248
Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu
            590                 595                 600
ggc caa atg gag cag ggc cag atc ggt ggc tcc ggt gac gtg aag tac    2296
Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr
        605                 610                 615
cac ctc ggt tcc gaa ggc cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag    2344
His Leu Gly Ser Glu Gly Gln Hi s Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu
    620                 625                  630
atc aag gtctcc ct g act  gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac    2392
Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn
635                 640                 645                 650
cca gtg atg gaa ggt atc gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag    2440
Pro Val Met Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys
                655                 660                 665
ggc gta gac ggc aag act gtt gtg cca ctg ctg ctc cac ggt gac gct    2488
Gly Val Asp Gly Lys Thr Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala
            670                 675                 680
gca ttc gca ggc ctg ggc atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct aaa    2536
Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys
        685                 690                 695
agc tgc gtc gac gtc gga ggc acc atc cac atc gtg gtg aac aac cag    2584
Ser Cys Val Asp Val Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln
    700                 705                 710
atc ggc ttc acc acc acc cca gac tcc agc cgc tcc atg cac tac gca    2632
Ile Gly Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala
715                 720                 725                 730
acc gac tac gcc aag gca ttc ggc tgc cca gtc ttc cac gtc aat ggt    2680
Thr Asp Tyr Ala Lys Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly
                735                 740                 745
gat gac cca gag gca gtt gtc tgg gtt ggc cag ctg gca acc gag tac    2728
Asp Asp Pro Glu Ala Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr
            750                 755                 760
cgt cgt cgc ttc ggc aag gac gtc ttc atc gac ctc gtt tgc tac cgc    2776
Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg
        765                 770                 775
ctc cgc ggc cac aac gaa gct gat gat cct tcc atg acc cag cca aag    2824
Leu Arg Gly His Asn Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys
    780                 785                 790
atg tat gag ctc atc acc ggc cgc gag acc gtt cgt gct cag tac acc    2872
Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr
795                 800                 805                 810
gaa gac ctg ctc gga cgt gga gac ctc tcc aac gaa gat gca gaa gca    2920
Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala
                815                 820                 825
gtc gtc cgc gac ttc cac gac cag atg gaa tct gtg ttc aac gaa gtc    2968
Val Val Arg Asp Phe His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val
            830                 835                 840
aag gaa ggc ggc aag aag cag gct gag gca cag acc ggc atc acc ggc    3016
Lys Glu Gly Gly Lys Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly
        845                 850                 855
tcc cag aag ctt cca cac ggc ctt gag acc aac atc tcc cgt gaa gag    3064
Ser Gln Lys Leu Pro His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu
    860                 865                 870
ctc ctg gaa ctg gga cag gct ttc gcc aac acc cca gaa ggc ttc aac    3112
Leu Leu Glu Leu Gly Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn
875                 880                 885                 890
tac cac cca cgt gtg gct cca gtt gct aag aag cgc gtc tcc tct gtc    3160
Tyr His Pro Arg Val Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val
                895                 900                 905
acc gaa ggt ggc atc gac tgg gca tgg ggc gag ctc ctc gcc ttc ggt    3208
Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly
            910                 915                 920
tcc ctg gct aac tcc ggc cgc ttg gtt cgc ctt gca ggt gaa gat tcc    3256
Ser Leu Ala Asn Ser Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser
        925                 930                 935
 cgc cgc ggt acc ttc acc cag cgc cacgca gtt gcc atc gac cca gcg    3304
Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala
    940                 945                 950
acc gct gaa gag ttc aac cca ctc cac gag ctt gca cag tcc aag ggc    3352
Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly
955                 960                 965                 970
aac aac ggt aag ttc ctg gtc tac aac tcc gca ctg acc gag tac gca    3400
Asn Asn Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala
                975                 980                 985
ggc atg ggc ttc gag tac ggc tac tcc gta gga aac gaa gac tcc gtc    3448
Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Val
            990                 995                 1000
gtt gca tgg gaa gca cag ttc ggc  gac ttc gcc aac ggc gct cag       3493
Val Ala Trp Glu Ala Gln Phe Gly Asp Phe Ala Asn Gly Ala Gln
        1005                1010                1015
acc atc atc gat gag tac gtc tcc tca ggc gaa gct aag tgg ggc        3538
Thr Ile Ile Asp Glu Tyr Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp Gly
       1020                 1025                1030
cag acc tcc aag ctg atc ctt ctg ctg cct cac ggc tac gaa ggc    3583
Gln Thr Ser Lys Leu Ile Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu Gly
        1035                1040                1045
cag ggc cca gac cac tct tcc gca cgt atc gag cgc ttc ctg cag    3628
Gln Gly Pro Asp His Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln
        1050               1055                 1060
ctg tgc gct gag ggt tcc atg act gtt gct cag cca tcc acc cca    3673
Leu Cys Ala Glu Gly Ser Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro
        1065                1070                1075
gca aac cac ttc cac ctg ctg cgt cgt cac gct ctg tcc gac ctg    3718
Ala Asn His Phe His Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu
        1080                1085                1090
aag cgt cca ctg gtt atc ttc acc ccg aag tcc atg ctg cgt aac    3763
Lys Arg Pro Leu Val Ile Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn
        1095                1100               1105
aag gct gct gcc tcc gca cca gaa gac ttc act gag gtc acc aag    3808
Lys Ala Ala Ala Ser Ala Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr Lys
       1110                1115                 1120
ttc caa tcc gtg atc gac gat cca aac gtt gca gat gca gcc aag    3853
Phe Gln Set Val Ile Asp Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala Lys
        1125               1130                 1135
gtg aag aag gtc atg ctg gtc tcc ggc aag ctg tac tac gaa ttg    3898
Val Lys Lys Val Met Leu Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu
        1140                1145                1150
gca aag cgc aag gag aag gac gga cgc gac gac atc gcg atc gtt    3943
Ala Lys Arg Lys Glu Lys Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val
        1155                1160                1165
cgt atc gaa atg ctc cac cca att ccg ttc aac cgc atc tcc gag    3988
Arg Ile Glu Met Leu His Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser Glu
        1170                1175                1180
gct ctt gcc ggc tac cct aac gct gag gaa gtc ctc ttc gtt cag    4033
Ala Leu Ala Gly Tyr Pro Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln
        1185                1190                1195
gat gag cca gca aac cag ggc cca tgg ccg ttc tac cag gag cac    4078
Asp Glu Pro Ala Asn Gln Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His
        1200                1205                1210
ctc cca gag ctg atc ccg aac atg cca aag atg cgc cgc gtt tcc    4123
Leu Pro Glu Leu Ile Pro Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser
        1215                1220                1225
cgc cgc gct cag tcc tcc acc gca act ggt gtt gct aag gtg cac    4168
Arg Arg Ala Gln Ser Ser Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His
        1230                1235                1240
cag ctg gag gag aag cag ctt atc gac gag gct ttc gag gct        4210
Gln Leu Glu Glu Lys Gln Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
        1245                1250                1255
taagtcttta tagtcctgca ctagcctaga gggccttatg cagtgtgaat cacacagcat  4270
aaggcccttt ttgctgccgt ggttgcctaa ggtggaaggc atgaaacgaa tctgtgcggt  4330
cacgatctct tcagtacttt tgctaagtgg ctgctcctcc acttccacca cgcagctcga  4390
                                                                   4391
g
<210>47
<211>1256
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>47
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Ala
65                  70                  75                  80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90                   95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                 120                 125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro
    210                 215                 220
Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu
225                 230                 235                 240
Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu
                245                 250                 255
Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile
            260                 265                 270
Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly
        275                 280                 285
Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser
    290                 295                 300
Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser
305                 310                 315                 320
Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His
            340                 345                 350
Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser
        355                 360                 365
Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met
    370                 375                 380
Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr
385                 390                 395                 400
Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg
                405                 410                 415
Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln
            420                 425                430
Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His
        435                 440                 445
Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Ser Val Gly Gly Phe
    450                455                460
Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg
465                 470                 475                 480
Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp
                485                 490                 495
Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro
            500                 505                 5l0
Lys Pro Thr Gln Ala Gl uGln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala
        515                 520                 525
Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys
    530                 535                 540
Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser
545                 550                 555                 560
Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly
                565                 570                 575
Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys
            580                 585                 590
Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly
        595                 600                 605
Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly
    610                 615                 620
Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr
625                 630                 635                 640
Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile
                645                 650                 655
Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr
            660                 665                 670
Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly
        675                 680                 685
Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Ser Cys Val Asp Val Gly
    690                 695                 700
Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr
705                 710                 715                 720
Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys Ala
                725                 730                 735
Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val
            740                 745                 750
Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys
        755                 760                 765
Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn Glu
    770                 775                 780
Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr
785                 790                 795                 800
Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg
                805                 810                 815
Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe His
            820                 825                 830
Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys Lys
        835                 840                 845
Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro His
    850                 855                 860
Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly Gln
865                 870                 875                 880
Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val Ala
                885                 890                 895
Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp
            900                 905                 910
Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser Gly
         915                 920                 925
Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr
    930                 935                 940
Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe Asn
945                 950                 955                 960
Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe Leu
                965                 970                 975
Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr
            980                 985                 990
Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp  Ser Val Val Ala Trp Glu Ala Gln
        995                 1000                 1005
Phe Gly  Asp Phe Ala Asn Gly  Ala Gln Thr Ile Ile  Asp Glu Tyr
    1010                 1015                 1020
Val Ser  Ser Gly Glu Ala Lys  Trp Gly Gln Thr Ser  Lys Leu Ile
    1025                 1030                 1035
Leu Leu  Leu Pro His Gly Tyr  Glu Gly Gln Gly Pro  Asp His Ser
    1040                 1045                 1050
Ser Ala  Arg Ile Glu Arg Phe  Leu Gln Leu Cys Ala  Glu Gly Ser
    1055                1060                1065
Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro Ala Asn His Phe His Leu
    1070                1075                1080
Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu Lys Arg Pro Leu Val Ile
    1085                1090                1095
Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn Lys Ala Ala Ala Ser Ala
    1100                1105                1110
Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr Lys Phe Gln Ser Val Ile Asp
    1115                1120                1125
Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala Lys Val Lys Lys Val Met Leu
    1130                1135                1140
Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu Ala Lys Arg Lys Glu Lys
    1145                1150                1155
Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val Arg Ile Glu Met Leu His
    1160                1165                1170
Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser Glu Ala Leu Ala Gly Tyr Pro
    1175                1180                1185
Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Asn Gln
    1190                1195                1200
Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Glu Leu Ile Pro
    1205                1210                1215
Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser Arg Arg Ala Gln Ser Ser
    1220                1225                1230
Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His Gln Leu Glu Glu Lys Gln
    1235                1240                1245
Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
    1250                1255
<210>48
<211>4391
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(443)..(4210)
<223>
<400>48
gtcgacaagc aaaatcgaag cggcagcacg ccgcgtcgga gccttaaacg ccatcgccgc   60
catccctgat ggtttcaatc atcaagtcgg tgaacgcggg cgcaacctgt catccggaca  120
gcgccaactg atcgcgctgg cgcgcgccga actcatcgag ccttccatca tgcttctcga  180
cgaagccacc tccaccctcg accccgccac cgaagccgtt atcctcaacg cctccgatcg  240
agtcactaag ggacgcacca gcatcatcgt cgcgcaccgc ttggcaaccg ctaaaagggc  300
cgaccgtatt cttgttgttg aacaaggacg tatcattgag gacggatctc acgacgcgtt  360
gttgtctgct aacggcacct acgcccgcat gtggcattta atggcctgac acgttatttt  420
taggagaact gtcaacaaat ta atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag   472
                         Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln
                         1               5                   10
cca acg acc aac gtt aca gtg gat aaa ata aag ctc aat aaa ccc tca    520
Pro Thr Thr Asn Val Thr Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser
                15                  20                  25
aga agc aag gaa aag agg cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act    568
Arg Ser Lys Glu Lys Arg Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr
            30                  35                  40
ttc ggc cag aat gcg tgg ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag    616
Phe Gly Gln Asn Ala Trp Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln
        45                  50                  55
aag gac ccc aag tcc gtg gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg    664
Lys Asp Pro Lys Ser Val Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala
    60                 65                 70
cag ggg gga cca aat gct acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca    712
Gln Gly Gly Pro Asn Ala Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser
75                  80                  85                  90
gcg ccc aag gag tct gcg aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc     760
Ala Pro Lys Glu Ser Ala Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala
                95                  100                 105
aag gca gca ccg cgc gta gaa acc aag ccg gcc gcc aag acc gcc cct     808
Lys Ala Ala Pro Arg Val Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro
            110                 115                 120
aag gcc aag gag tcc tca gtg cca cag caa cct aag ctt ccg gag cca     856
Lys Ala Lys Glu Ser Ser Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro
        125                 130                 135
gga caa acc cca atc agg ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg     904
Gly Gln Thr Pro Ile Arg Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met
    140                 145                 150
gat atc tcc ctg gaa atc cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca     952
Asp Ile Ser Leu Glu Ile Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro
155                 160                 165                 170
gct cgc ctc atg ttc gaa aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag    1000
Ala Arg Leu Met Phe Glu Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys
                175                 180                 185
cgc acc cgc ggt ggc aag atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc    1048
Arg Thr Arg Gly Gly Lys Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala
            190                 195                 200
atg gtg aag gca gtc atg gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac gac    l096
Met Val Lys Ala Val Met Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp
        205                 210                 215
gtc atc gac ggc aag cca acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg    1144
Val Ile Asp Gly Lys Pro Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu
    220                 225                 230
ggc ctt gcc atc gac ctt cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc    1192
Gly Leu Ala Ile Asp Leu Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val
235                 240                 245                 250
gta gca gcc atc aag gaa acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc    1240
Val Ala Ala Ile Lys Glu Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu
                255                 260                 265
gca gca tac gaa gac atc gtg aca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc    1288
Ala Ala Tyr Glu Asp Ile Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr
            270                 275                 280
atg gat gac tac cag ggc gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc    1336
Met Asp Asp Tyr Gln Gly Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly
        285                 290                 295
atc ggt acc cgc cac tct gtc cca cgt ctg acc aag ggc cag ggc acc    1384
Ile Gly Thr Arg His Ser Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr
    300                 305                 3l0
atc atc ggt gtc ggt tcc atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct    1432
Ile Ile Gly Val Gly Ser Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala
315                 320                 325                 330
tcc gaa gac cgc ctt gca gag ctc ggc gtt gga aag ctt gtc acc atc    1480
Ser Glu Asp Arg Leu Ala Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile
                335                 340                 345
acc tcc acc tac gat cac cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa    1528
Thr Ser Thr Tyr Asp His Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu
            350                 355                 360
ttc ctg cgt acc atg tct cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gat    1576
Phe Leu Arg Thr Met Ser Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp
        365                 370                 375
gag atc ttc gac gca atg aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca    l624
Glu Ile Phe Asp Ala Met Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala
    380                 385                 390
cag gac gtt cca aac acc ggt gtt gat aag aac acc cgc gtc atg cag    1672
Gln Asp Val Pro Asn Thr Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln
395                 400                 405                 410
ctc att gag gca tac cgc tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac    l720
Leu Ile Glu Ala Tyr Arg Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn
                415                 420                 425
cca ctt tca tgg gtt cag cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac    1768
Pro Leu Ser Trp Val Gln Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp
            430                 435                 440
ctc gac atc gag acc cac agc ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc    1816
Leu Asp Ile Glu Thr His Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr
        445                 450                 455
ttc agc gtc ggt ggc ttc ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag    1864
Phe Ser Val Gly Gly Phe Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu
    460                 465                 470
gta ctg tcc cgc ctg cgc gct gcc tac acc ttg aag gtc ggc tcc gaa    1912
Val Leu Ser Arg Leu Arg Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu
475                 480                 485                 490
tac acc cac atc ctg gac cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc    1960
Tyr Thr His Ile Leu Asp Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg
                495                 500                 505
ctc gaa gcc gga atg cca aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc    2008
Leu Glu Ala Gly Met Pro Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile
            510                 515                 520
ctg cag aag ctg aac gcc gca gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc    2056
Leu Gln Lys Leu Asn Ala Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr
       525                 530                 535
aag tac gtc ggc cag aag cgc ttctcc ctc gaa ggt gca gaa gct ctc     2104
Lys Tyr Val Gly GlnLys Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu
    540                545                 550
atc cca ctg atg gac tcc gcc atc gac acc gcc gca ggc cag ggc ctc    2152
Ile Pro Leu Met Asp Ser Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu
555                 560                 565                 570
gac gaa gtt gtc atc ggt atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg    2200
Asp Glu Val Val Ile Gly Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu
                575                 580                 585
ttc aac atc gtg ggc aag cca ctg gca tcc atc ttc aac gag ttt gaa    2248
Phe Asn Ile Val Gly Lys Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu
            590                 595                 600
ggc caa atg gag cag ggc cagatc ggt  ggc tcc  ggt gac gtg aag tac    2296
Gly Gln Met Glu Gln Gly Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr
        605                 610                 615
cac ctc ggt tcc gaa ggc cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag    2344
His Leu Gly Ser Glu Gly Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu
    620                 625                 630
atc aag gtc tcc ctg act gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac   2392
Ile Lys Val Ser Leu Thr Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn
635                 640                 645                 650
cca gtg atg gaa ggt atc gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag    2440
Pro Val Met Glu Gly Ile Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys
                655                 660                 665
ggc gta gac ggc aag act gtt gtg cca ctg ctg ctc eac ggt gac gct    2488
Gly Val Asp Gly Lys Thr Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala
            670                 675                 680
gca ttc gca ggc ctg ggc atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct ata    2536
Ala Phe Ala Gly Leu Gly Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Ile
        685                 690                 695
agc tgc gtc gac gtc gga ggc acc atc cac atc gtg gtg aac aac cag    2584
Ser Cys Val Asp Val Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln
    700                 705                 710
atc ggc ttc acc acc acc cca gac tcc agc cgc tcc atg cac tac gca    2632
Ile Gly Phe Thr Thr Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala
715                 720                 725                 730
acc gac tac gcc aag gca ttc ggc tgc cca gtc ttc cac gtc aat ggt    2680
Thr Asp Tyr Ala Lys Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly
                735                 740                 745
gat gac cca gag gca gtt gtc tgg gtt ggc cag ctg gca acc gag tac    2728
Asp Asp Pro Glu Ala Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr
            750                 755                 760
cgt cgt cgc ttc ggc aag gac gtc ttc atc gac ctc gtt tgc tac cgc   2776
Arg Arg Arg Phe Gly Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg
        765                 770                 775
ctc cgc ggc cac aac gaa gct gat gat cct tcc atg acc cag cca aag   2824
Leu Arg Gly His Asn Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys
    780                 785                 790
atg tat gag ctc atc acc ggc cgc gag acc gtt cgt gct cag tac acc   2872
Met Tyr Glu Leu Ile Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr
795                 800                 805                 810
gaa gac ctg ctc gga cgt gga gac ctc tcc aac gaa gat gca gaa gca   2920
Glu Asp Leu Leu Gly Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala
                815                 820                 825
gtc gtc cgc gac ttc cac gac cag atg gaa tct gtg ttc aac gaa gtc   2968
Val Val Arg Asp Phe His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val
            830                 835                 840
aag gaa ggc ggc aag aag cag gct gag gca cag acc ggc atc acc ggc   3016
Lys Glu Gly Gly Lys Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly
        845                 850                 855
tcc cag aag ctt cca cac ggc ctt gag acc aac atc tcc cgt gaa gag   3064
Ser Gln Lys Leu Pro His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu
    860                 865                 870
ctc ctg gaa ctg gga cag gct ttc gcc aac acc cca gaa ggc ttc aac   3112
Leu Leu Glu Leu Gly Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly phe Asn
875                 880                 885                 890
tac cac cca cgt gtg gct cca gtt gct aag aag cgc gtc tcc tct gtc   3160
Tyr His Pro Arg Val Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val
                895                 900                 905
acc gaa ggt ggc atc gac tgg gca tgg ggc gag ctc ctc gcc ttc ggt   3208
Thr Glu Gly Gly Ile Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly
            910                 915                 920
tcc ctg gct aac tcc ggc cgc ttg gtt cgc ctt gca ggt gaa gat tcc   3256
Ser Leu Ala Asn Ser Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser
        925                 930                 935
cgc cgc ggt acc ttc acc cag cgc cac gca gtt gcc atc gac cca gcg   3304
Arg Arg Gly Thr Phe Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala
    940                 945                 950
acc gct gaa gag ttc aac cca ctc cac gag ctt gca cag tcc aag ggc   3352
Thr Ala Glu Glu Phe Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly
955                 960                 965                 970
aac aac ggt aag ttc ctg gtc tac aac tcc gca ctg acc gag tac gca   3400
Asn Asn Gly Lys Phe Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala
                975                 980                 985
ggc atg ggc ttc gag tac ggc tac tcc gta gga aac gaa gac  tcc gtc  3448
Gly Met Gly Phe Glu Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp  Ser Val
            990                 995                 1000
gtt gca tgg  gaa gca cag ttc ggc  gac ttc gcc aac ggc  gct cag    3493
Val Ala Trp  Glu Ala Gln Phe Gly  Asp Phe Ala Asn Gly  Ala Gln
        1005                 1010                 1015
acc atc atc  gat gag tac gtc tcc  tca ggc gaa gct aag  tgg ggc    3538
Thr Ile Ile  Asp Glu Tyr Val Ser  Ser Gly GLu Ala Lys  Trp Gly
        1020                 1025                 1030
cag acc tcc  aag ctg atc ctt ctg  ctg cct cac ggc tac  gaa ggc    3583
Gln Thr Ser  Lys Leu Ile Leu Leu  Leu Pro His Gly Tyr  Glu Gly
        1035                 1040                 1045
cag ggc cca  gac cac tct tcc gca  cgt atc gag cgc ttc  ctg cag    3628
Gln Gly Pro  Asp His Ser Ser Ala  Arg Ile Glu Arg Phe  Leu Gln
        1050                 1055                 1060
ctg tgc gct  gag ggt tcc atg act  gtt gct cag cca tcc  acc cca    3673
Leu Cys Ala  Glu Gly Ser Met Thr  Val Ala Gln Pro Ser  Thr Pro
        1065                 1070                 1075
gca aac cac  ttc cac ctg ctg cgt  cgt cac gct ctg tcc  gac ctg    3718
Ala Asn His  Phe His Leu Leu Arg  Arg His Ala Leu Ser  Asp Leu
        1080                 1085                 1090
aag cgt cca  ctg gtt atc ttc acc  ccg aag tcc atg ctg  cgt aac     3763
Lys Arg Pro  Leu Val Ile Phe Thr  Pro Lys Ser Met Leu  Arg Asn
        1095                 1100                 1105
aag gct gct  gcc tcc gca cca gaa  gac ttc act gag gtc  acc aag     3808
Lys Ala Ala  Ala Ser Ala Pro Glu  Asp Phe Thr Glu Val  Thr Lys
        1110                 1115                 1120
ttc caa tcc  gtg atc gac gat cca  aac gtt gca gat gca  gcc aag     3853
Phe Gln Ser  Val Ile Asp Asp Pro  Asn Val Ala Asp Ala  Ala Lys
        1125                 1130                 1135
gtg aag aag  gtc atg ctg gtc tcc  ggc aag ctg tac tac  gaa ttg     3898
Val Lys Lys  Val Met Leu Val Ser  Gly Lys Leu Tyr Tyr  Glu Leu
        1140                 1145                 1150
gca aag cgc  aag gag aag gac gga  cgc gac gac atc gcg  atc gtt     3943
Ala Lys Arg  Lys Glu Lys Asp Gly  Arg Asp Asp Ile Ala  Ile Val
        1155                 1160                 1165
cgt atc gaa  atg ctc cac cca att  ccg ttc aac cgc atc  tcc gag     3988
Arg Ile Glu  Met Leu His Pro Ile  Pro Phe Asn Arg Ile  Ser Glu
        1170                 1175                 1180
gct ctt gcc  ggc tac cct aac gct  gag gaa gtc ctc ttc  gtt cag     4033
Ala Leu Ala  Gly Tyr Pro Asn Ala  Glu Glu Val Leu Phe  Val Gln
        1185                 1190                 1195
gat gag cca  gca aac cag ggc cca  tgg ccg ttc tac cag  gag cac     4078
Asp Glu Pro  Ala Asn Gln Gly Pro  Trp Pro Phe Tyr Gln  Glu His
        1200                 1205                 1210
ctc cca gag  ctg atc ccg aac atg  cca aag atg cgc cgc  gtt tcc     4123
Leu Pro Glu  Leu Ile Pro Asn Met  Pro Lys Met Arg Arg  Val Ser
        1215                 1220                 1225
cgc cgc gct  cag tcc tcc acc gca  act ggt gtt gct aag  gtg cac     4168
Arg Arg Ala  Gln Ser Ser Thr Ala  Thr Gly Val Ala Lys  Val His
        1230                  1235                  1240
cag ctg gag  gag aag cag ctt atc  gac gag gct ttc gag  gct         4210
Gln Leu Glu  Glu Lys Gln Leu Ile  Asp Glu Ala Phe Glu  Ala
        1245                 1250                 1255
taagtcttta tagtcctgca ctagcctaga gggccttatg cagtgtgaat cacacagcat  4270
aaggcccttt ttgctgccgt ggttgcctaa ggtggaaggc atgaaacgaa tctgtgcggt  4330
cacgatctct tcagtacttt tgctaagtgg ctgctcctcc acttccacca cgcagctcga  4390
g                                                                  4391
<210>49
<211>1256
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>49
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys Ile Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Ala
65                  70                  75                  80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90                  95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Pro Ala Ala Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        155                 120                 125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro
    210                 215                 220
Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu
225                 230                 235                 240
Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu
                245                 250                 255
Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile
            260                 265                 270
Val Thr Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly
        275                 280                 285
Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser
    290                 295                 300
Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser
305                 310                 3l5                 320
Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His
            340                 345                 350
Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser
        355                 360                 365
Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met
    370                 375                 380
Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr
385                 390                 395                 400
Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg
                405                 410                 415
Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln
            420                 425                 430
Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His
        435                 440                 445
Ser Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Ser Val Gly Gly Phe
    450                 455                 460
Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg
465                 470                 475                 480
Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp
                485                 490                 495
Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro
            500                 505                 510
Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala
        515                 520                 525
Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys
    530                 535                 540
Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser
545                 550                 555                 560
Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly
               565                 570                 575
Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys
            580                 585                 590
Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly
        595                 600                 605
Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly
    610                 615                 620
Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr
625                 630                 635                 640
Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile
                645                 650                 655
Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr
            660                 665                 670
Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly
        675                 680                 685
Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Ile Ser Cys Val Asp Val Gly
    690                 695                 700
Gly Thr Ile HisIle Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr Thr
705                 7l0                 715                 720
Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys Ala
                725                 730                 735
Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala Val
            740                 745                 750
Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly Lys
        755                 760                 765
Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn Glu
    770                 775                 780
Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile Thr
785                 790                 795                 800
Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly Arg
                805                 810                 815
Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe His
            820                 825                 830
Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys Lys
        835                 840                 845
Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro His
    850                 855                 860
Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly Gln
865                 870                 875                 880
Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val Ala
                885                 890                 895
Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile Asp
            900                 905                 910
Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser Gly
        915                 920                 925
Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe Thr
    930                 935                 940
Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe Asn
945                950                 955                 960
Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe Leu
                965                 970                 975
Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu Tyr
            980                 985                 990
Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp  Ser Val Val Ala Trp  Glu Ala Gln
   995                      1000                 1005
Phe Gly  Asp Phe Ala Asn Gly  Ala Gln Thr Ile Ile  Asp Glu Tyr
    1010                 1015                 1020
Val Ser  Ser Gly Glu Ala Lys  Trp Gly Gln Thr Ser  Lys Leu Ile
    1025                 1030                 1035
Leu Leu  Leu Pro His Gly Tyr  Glu Gly Gln Gly Pro  Asp His Ser
    1040                 1045                 1050
Ser Ala  Arg Ile Glu Arg Phe  Leu Gln Leu Cys Ala  Glu Gly Ser
    1055                 1060                 1065
Met Thr  Val Ala Gln Pro Ser  Thr Pro Ala Asn His  Phe His Leu
    1070                 1075                 1080
Leu Arg  Arg His Ala Leu Ser  Asp Leu Lys Arg Pro  Leu Val Ile
    1085                 1090                 1095
Phe Thr  Pro Lys Ser Met Leu  Arg Asn Lys Ala Ala  Ala Ser Ala
    1100                 1105                 1110
Pro Glu  Asp Phe Thr Glu Val  Thr Lys Phe Gln Ser  Val Ile Asp
    1115                 1120                 1125
Asp Pro  Asn Val Ala Asp Ala  Ala Lys Val Lys Lys  Val Met Leu
    1130                 1135                 1140
Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu Ala Lys Arg Lys Glu Lys
    1145                1150                1155
Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val Arg Ile Glu Met Leu His
    1160                1165                1170
Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser G1u Ala Leu Ala Gly Tyr Pro
    1175                1180                1185
Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Asn Gln
    1190                1195                1200
Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Glu Leu Ile Pro
    1205                1210                1215
Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser Arg Arg Ala Gln Ser Ser
    1220                1225                1230
Thr Ala Thr Gly Mal Ala Lys Val His Gln Leu Glu Glu Lys Gln
    1235                1240                1245
Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
1250 1255
<210>50
<211>3774
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌
<220>
<221>CDS
<222>(1).(3774)
<223>
<400>50
atg cta caa ctg ggg ctt agg cat aat cag cca acg acc aac gtt aca     48
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
gtg gat aaa aca aag ctc aat aaa ccc tca aga agc aag gaa aag agg     96
Val Asp Lys Thr Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
cga gta cct gcc gtg agc agc gct agt act ttc ggc cag aat gcg tgg    144
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
ctg gta gac gag atg ttc cag cag ttc cag aag gac ccc aag tcc gtg    192
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
gac aag gaa tgg aga gaa ctc ttt gag gcg cag ggg gga cca aat act    240
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Thr
65                  70                  75                  80
acc ccc gct aca aca gaa gca cag cct tca gcg ccc aag gag tct gcg    288
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90                  95
aaa cca gca cca aag gct gcc cct gca gcc  aag  gca gca ccg cgc gta  336
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
gaa acc aag ccg gcc gac aag acc gcc cct aag gcc aag gag tcc tca    384
Glu Thr Lys Pro Ala Asp Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                  120                125
gtg cca cag caa cct aag ctt ccg gag cca gga cas acc cca atc agg    432
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
ggt att ttc aag tcc atc gcg aag aac atg gat atc tcc ctg gaa atc    480
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
cca acc gca acc tcg gtt cgc gat atg cca gct cgc ctc atg ttc gaa    528
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
aac cgc gcg atg gtc aac gat cag ctc aag cgc acc cgc ggt ggc aag    576
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
atc tcc ttc acc cac atc att ggc tac gcc atg gtg aag gca gtc atg     624
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
gct cac ccg gac atg aac aac tcc tac gac gtc atc gac ggc aag cca     672
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro
    210                 215                 220
acc ctg atc gtg cct gag cac atc aac ctg ggc ctt gct atc gac ctt     720
Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu
225                 230                 235                 240
cct cag aag gac ggc tcc cgc gca ctt gtc gta gca gcc atc aag gaa     768
Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu
                245                 250                 255
acc gag aag atg aac ttc tcc gag ttc ctc gca gcc tac gaa gac atc     8l6
Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile
            260                 265                 270
gtg gca cgc tcc cgc aag ggc aag ctc acc atg gat gac tac cag ggc     864
Val Ala Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly
        275                 280                 285
gtt acc gtt tcc ttg acc aac cca ggt ggc atc ggt acc cgc cac tct     912
Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly Ile Gly Thr Arg His Ser
    290                 295                 300
gtt cca cgt cta acc aag ggc cag ggc acc atc atc ggt gtc ggt tcc     960
Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser
305                 310                 315                 320
atg gat tac cca gca gag ttc cag ggc gct tca gaa gac cgc ctt gca    1008
Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
gag ctc ggc gtt ggc aaa ctt gtc acc atc acc tcc acc tac gat cac    1056
Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His
            340                 345                 350
cgc gtg atc cag ggt gct gtg tcc ggt gaa ttc ctg cgc acc atg tct    1104
Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser
        355                 360                 365
cgc ctg ctc acc gat gat tcc ttc tgg gat gag atc ttc gac gca atg    1152
Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met
    370                 375                 380
aac gtt cct tac acc cca atg cgt tgg gca cag gac gtt cca aac acc    1200
Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr
385                 390                 395                 400
ggt gtt gat aag aac acc cgc gtc atg cag ctc att gag gca tac cgc    1248
Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg
                405                 410                 415
tcc cgt gga cac ctc atc gct gac acc aac cca ctt tca tgg gtt cag    1296
Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln
            420                 425                 430
cct ggc atg cca gtt cca gac cac cgc gac ctc gac atc gag acc cac    1344
Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His
        435                 440                 445
aac ctg acc atc tgg gat ctg gac cgt acc ttc aac gtc ggt ggc ttc    1392
Asn Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Asn Val Gly Gly Phe
    450                 455                 460
ggc ggc aag gag acc atg acc ctg cgc gag gta ctg tcc cgc ctc cgc    1440
Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg
465                470                 475                 480
gct gcg tac acc ctc aag gtc ggc tcc gaa tac acc cac atc ctg gac    1488
Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp
                485                 490                 495
cgc gac gag cgc acc tgg ctg cag gac cgc ctc gag gcc gga atg cca    1536
Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro
            500                 505                 510
aag cca acc cag gca gag cag aag tac atc ctg cag aag ctg aac gcc    1584
Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala
        515                 520                 525
gcg gag gct ttc gag aac ttc ctg cag acc aag tac gtc ggc cag aag    1632
Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys
    530                 535                 540
cgc ttc tcc ctc gaa ggt gca gaa gca ctt atc cca ctg atg gac tcc    1680
Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser
545                 550                 555                 560
gcc atc gac acc gcc gca ggc caa ggc ctc gac gaa gtt gtc atc ggt    1728
Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly
                565                 570                 575
atg cca cac cgt ggt cgc ctc aac gtg ctg ttc aac atc gtg ggc aag    1776
Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys
            580                 585                 590
cca ctg gca tcc atc ttc aac gag ttt gaa ggc caa atg gag cag ggc    1824
Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly
        595                 600                 605
cag atc ggt ggc tcc ggt gac gtg aag tac cac ctc ggt tcc gaa ggc    1872
Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly
    610                 615                 620
cag cac ctg cag atg ttc ggc gac ggc gag atc aag gtc tcc ctg act    1920
Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr
625                 630                 635                 640
gct aac ccg tcc cac ctg gaa gct gtt aac cca gtg atg gaa ggt atc    1968
Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile
                645                 650                 655
gtc cgc gca aag cag gac tac ctg gac aag ggc gta gac ggc aag act    2016
Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr
            660                 665                 670
gtt gtg cca ctg ctg ctc cac ggt gac gct gca ttc gca ggc ctg ggc    2064
Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly
        675                 680                 685
atc gtg cca gaa acc atc aac ctg gct aag ctg cgt ggc tac gac gtc    2112
Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Leu Arg Gly Tyr Asp Val
    690                 695                 700
ggc ggc acc atc cac atc gtg gtg aac aac cag atc ggc ttc acc acc    2160
Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr
705                 710                 715                 720
acc cca gac tcc agc cgc tcc atg cac tac gca acc gac tac gcc aag    2208
Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys
                725                 730                 735
gca ttc ggc tgc cca gtc ttc cac gtc aac ggc gac gac cca gag gca    2256
Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala
            740                 745                 750
gtt gtc tgg gtt ggc cag ctg gcc acc gag tac cgt cgt cgc ttc ggc    2304
Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly
        755                 760                 765
aag gac gtc ttc atc gac ctc gtc tgc tac cgc ctc cgc ggc cac aac    2352
Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn
    770                 775                 780
gaa gct gat gat cct tcc atg acc cag cca aag atg tat gag ctc atc    2400
Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile
785                 790                 795                 800
acc ggc cgc gag acc gtt cgt gct cag tac acc gaa gac ctg ctc gga    2448
Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly
                805                 810                 815
cgt gga gac ctc tcc aac gaa gat gca gaa gca gtc gtc cgc gac ttc    2496
Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe
            820                 825                 830
cac gac cag atg gaa tct gtg ttc aac gaa gtc aag gaa ggc ggc aag    2544
His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys
        835                 840                 845
aag cag gct gag gca cag acc ggc atc acc ggc tcc cag aag ctt cca    2592
Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro
    850                 855                 860
cac ggc ctt gag acc aac atc tcc cgt gaa gag ctc ctg gaa ctg gga    2640
His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly
865                 870                 875                 880
cag gct ttc gcc aac acc cca gaa ggc ttc aac tac cac cca cgt gtg    2688
Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val
                885                 890                 895
gct ccc gtt gct aag aag cgc gtc tcc tct gtc acc gaa ggt ggc atc    2736
Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile
            900                 905                 910
gac tgg gca tgg ggc gag ctc ctc gcc ttc ggt tcc ctg gct aac tcc    2784
Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser
        915                 920                 925
ggc cgc ttg gtt cgc ctt gca ggt gaa gat tcc cgc cgc ggt acc ttc    2832
Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe
    930                 935                 940
acc cag cgc cac gca gtt gcc atc gac cca gcg acc gct gaa gag ttc    2880
Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe
945                 950                 955                 960
aac cca ctc cac gag ctt gca cag tcc aag ggc aac aac ggt aag ttc    2928
Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe
                965                 970                 975
ctg gtc tac aac t cc gca ctg acc gag tac gca ggc atg ggc ttc gag   2976
Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu
            980                 985                 990
tac ggc tac tcc gta gga aac gaa  gac tcc atc gtt gca  tgg gaa gca  3024
Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu  Asp Ser Ile Val Ala  Trp Glu Ala
        995                 1000                 1005
cag ttc  ggc gac ttc gcc aac  ggc gct cag acc atc  atc gat gag     3069
Gln Phe  Gly Asp Phe Ala Asn  Gly Ala Gln Thr Ile  Il e Asp Glu
    1010                 1015                 1020
tac gtc  tcc tca ggc gaa gct  aag tgg ggc cag acc  tcc aag ctg     3114
Tyr Val  Ser Ser Gly Glu Ala  Lys Trp Gly Gln Thr  Ser Lys Leu
    1025                 1030                 1035
atc ctt  ctg ctg cct cac ggc  tac gaa ggc cag ggc  cca gac cac     3159
Ile Leu  Leu Leu Pro His Gly  Tyr Glu Gly Gln Gly  Pro Asp His
    1040                 1045                 1050
tct tcc  gca cgt atc gag cgc  ttc ctg cag ctg tgc  gct gag ggt     3204
Ser Ser  Ala Arg Ile Glu Arg  Phe Leu Gln Leu Cys  Ala Glu Gly
     1055                1060                 1065
tcc atg  act gtt gct cag cca  tcc acc cca gca aac  cac ttc cac     3249
Ser Met  Thr Val Ala Gln Pro  Ser Thr Pro Ala Asn  His Phe His
    1070                 1075                 1080
cta ctg  cgt cgt cac gct ctg  tcc gac ctg aag cgt  cca ctg gtt     3294
Leu Leu  Arg Arg His Ala Leu  Ser Asp Leu Lys Arg  ProLeu Val
    1085                 1090                 1095
atc ttc  acc ccg aag tcc atg  ctg cgt aac aag gct  gct gcc tcc     3339
Ile Phe  Thr Pro Lys Ser Met  Leu Arg Asn Lys Ala  Ala Ala Ser
    1100                 1105                 1110
gca cca  gaa gac ttc act gag  gtc acc aag ttc cag  tcc gtg atc     3384
Ala Pro  Glu Asp Phe Thr Glu  Val Thr Lys Phe Gln  Ser Val Ile
    1115                 1120                 1125
aac gat  cca aac gtt gca gat  gca gcc aag gtg aag  aag gtc atg     3429
Asn Asp  Pro Asn Val Ala Asp  Ala Ala Lys Val Lys  Lys Val Met
    1130                 1135                 1140
ctg gtc  tcc ggc aag ctg tac  tac gaa ttg gca aag  cgc aag gag     3474
Leu Val  Ser Gly Lys Leu Tyr  Tyr Glu Leu Ala Lys  Arg Lys Glu
    1145                 1150                 1155
aag gac  gga cgc gac gac atc  gcg atc gtt cgt atc  gaa atg ctc     3519
Lys Asp  Gly Arg Asp Asp Ile  Ala Ile Val Arg Ile  Glu Met Leu
    1160                 1165                 1170
cac cca  att ccg ttc aac cgc  atc tcc gag gct ctt  gcc ggc tac     3564
His Pro  Ile Pro Phe Asn Arg  Ile Ser Glu Ala Leu  Ala Gly Tyr
    1175                1180                1185
cct aac gct gag gaa gtc ctc ttc gtt cag gat gag cca gca aac    3609
Pro Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Asn
    1190                1195                1200
cag ggc cca tgg ccg ttc tac cag gag cac ctc cca gag ctg atc    3654
Gln Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Glu Leu Ile
    1205                1210                1215
ccg aac atg cca aag atg cgc cgc gtt tcc cgc cgc gct cag tcc    3699
Pro Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser Arg Arg Ala Gln Ser
    1220                1225                1230
tcc acc gca act ggt gtt gcc aag gtg cac cag ctg gag gag aag    3744
Ser Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His Gln Leu Glu Glu Lys
    1235                1240                1245
cag ctt atc gac gag gct ttc  gag gct taa    3774
Gln Leu Ile Asp Glu Ala Phe  Glu Ala
    1250                1255
<210>51
<211>1257
<212>PRT
<213>谷氨酸棒杆菌
<400>51
Met Leu Gln Leu Gly Leu Arg His Asn Gln Pro Thr Thr Asn Val Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Lys Thr Lys Leu Asn Lys Pro Ser Arg Ser Lys Glu Lys Arg
            20                  25                  30
Arg Val Pro Ala Val Ser Ser Ala Ser Thr Phe Gly Gln Asn Ala Trp
        35                  40                  45
Leu Val Asp Glu Met Phe Gln Gln Phe Gln Lys Asp Pro Lys Ser Val
    50                  55                  60
Asp Lys Glu Trp Arg Glu Leu Phe Glu Ala Gln Gly Gly Pro Asn Thr
65                  70                  75               80
Thr Pro Ala Thr Thr Glu Ala Gln Pro Ser Ala Pro Lys Glu Ser Ala
                85                  90              95
Lys Pro Ala Pro Lys Ala Ala Pro Ala Ala Lys Ala Ala Pro Arg Val
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Pro Ala Asp Lys Thr Ala Pro Lys Ala Lys Glu Ser Ser
        115                 120                 125
Val Pro Gln Gln Pro Lys Leu Pro Glu Pro Gly Gln Thr Pro Ile Arg
    130                 135                 140
Gly Ile Phe Lys Ser Ile Ala Lys Asn Met Asp Ile Ser Leu Glu Ile
145                 150                 155                 160
Pro Thr Ala Thr Ser Val Arg Asp Met Pro Ala Arg Leu Met Phe Glu
                165                 170                 175
Asn Arg Ala Met Val Asn Asp Gln Leu Lys Arg Thr Arg Gly Gly Lys
            180                 185                 190
Ile Ser Phe Thr His Ile Ile Gly Tyr Ala Met Val Lys Ala Val Met
        195                 200                 205
Ala His Pro Asp Met Asn Asn Ser Tyr Asp Val Ile Asp Gly Lys Pro
    210                 215                 220
Thr Leu Ile Val Pro Glu His Ile Asn Leu Gly Leu Ala Ile Asp Leu
225                 230                 235                 240
Pro Gln Lys Asp Gly Ser Arg Ala Leu Val Val Ala Ala Ile Lys Glu
                245                 250                 255
Thr Glu Lys Met Asn Phe Ser Glu Phe Leu Ala Ala Tyr Glu Asp Ile
            260                 265                 270
Val Ala Arg Ser Arg Lys Gly Lys Leu Thr Met Asp Asp Tyr Gln Gly
        275                 280                 285
Val Thr Val Ser Leu Thr Asn Pro Gly Gly IIe Gly Thr Arg His Ser
    290                 295                 300
Val Pro Arg Leu Thr Lys Gly Gln Gly Thr Ile Ile Gly Val Gly Ser
305                 310                 315                 320
Met Asp Tyr Pro Ala Glu Phe Gln Gly Ala Ser Glu Asp Arg Leu Ala
                325                 330                 335
Glu Leu Gly Val Gly Lys Leu Val Thr Ile Thr Ser Thr Tyr Asp His
            340                 345                 350
Arg Val Ile Gln Gly Ala Val Ser Gly Glu Phe Leu Arg Thr Met Ser
        355                 360                 365
Arg Leu Leu Thr Asp Asp Ser Phe Trp Asp Glu Ile Phe Asp Ala Met
    370                 375                 380
Asn Val Pro Tyr Thr Pro Met Arg Trp Ala Gln Asp Val Pro Asn Thr
385                 390                 395                 400
Gly Val Asp Lys Asn Thr Arg Val Met Gln Leu Ile Glu Ala Tyr Arg
                405                 4l0                 415
Ser Arg Gly His Leu Ile Ala Asp Thr Asn Pro Leu Ser Trp Val Gln
            420                 425                 430
Pro Gly Met Pro Val Pro Asp His Arg Asp Leu Asp Ile Glu Thr His
        435                 440                 445
Asn Leu Thr Ile Trp Asp Leu Asp Arg Thr Phe Asn Val Gly Gly Phe
    450                 455                 460
Gly Gly Lys Glu Thr Met Thr Leu Arg Glu Val Leu Ser Arg Leu Arg
465                 470                 475                 480
Ala Ala Tyr Thr Leu Lys Val Gly Ser Glu Tyr Thr His Ile Leu Asp
                485                 490                 495
Arg Asp Glu Arg Thr Trp Leu Gln Asp Arg Leu Glu Ala Gly Met Pro
            500                 505                 5l0
Lys Pro Thr Gln Ala Glu Gln Lys Tyr Ile Leu Gln Lys Leu Asn Ala
        515                 520                 525
Ala Glu Ala Phe Glu Asn Phe Leu Gln Thr Lys Tyr Val Gly Gln Lys
    530                 535                 540
Arg Phe Ser Leu Glu Gly Ala Glu Ala Leu Ile Pro Leu Met Asp Ser
545                 550                 555                 560
Ala Ile Asp Thr Ala Ala Gly Gln Gly Leu Asp Glu Val Val Ile Gly
                565                 570                 575
Met Pro His Arg Gly Arg Leu Asn Val Leu Phe Asn Ile Val Gly Lys
            580                 585                 590
Pro Leu Ala Ser Ile Phe Asn Glu Phe Glu Gly Gln Met Glu Gln Gly
        595                 600                 605
Gln Ile Gly Gly Ser Gly Asp Val Lys Tyr His Leu Gly Ser Glu Gly
    610                 615                 620
Gln His Leu Gln Met Phe Gly Asp Gly Glu Ile Lys Val Ser Leu Thr
625                 630                 635                 640
Ala Asn Pro Ser His Leu Glu Ala Val Asn Pro Val Met Glu Gly Ile
                645                 650                 655
Val Arg Ala Lys Gln Asp Tyr Leu Asp Lys Gly Val Asp Gly Lys Thr
            660                 665                 670
Val Val Pro Leu Leu Leu His Gly Asp Ala Ala Phe Ala Gly Leu Gly
        675                 680                 685
Ile Val Pro Glu Thr Ile Asn Leu Ala Lys Leu Arg Gly Tyr Asp Val
    690                 695                 700
Gly Gly Thr Ile His Ile Val Val Asn Asn Gln Ile Gly Phe Thr Thr
705                 710                 7l5                 720
Thr Pro Asp Ser Ser Arg Ser Met His Tyr Ala Thr Asp Tyr Ala Lys
                725                 730                 735
Ala Phe Gly Cys Pro Val Phe His Val Asn Gly Asp Asp Pro Glu Ala
            740                 745                 750
Val Val Trp Val Gly Gln Leu Ala Thr Glu Tyr Arg Arg Arg Phe Gly
        755                 760                 765
Lys Asp Val Phe Ile Asp Leu Val Cys Tyr Arg Leu Arg Gly His Asn
    770                 775                 780
Glu Ala Asp Asp Pro Ser Met Thr Gln Pro Lys Met Tyr Glu Leu Ile
785                 790                 795                 80O
Thr Gly Arg Glu Thr Val Arg Ala Gln Tyr Thr Glu Asp Leu Leu Gly
                805                 810                 815
Arg Gly Asp Leu Ser Asn Glu Asp Ala Glu Ala Val Val Arg Asp Phe
            820                825                830
His Asp Gln Met Glu Ser Val Phe Asn Glu Val Lys Glu Gly Gly Lys
        835                840                845
Lys Gln Ala Glu Ala Gln Thr Gly Ile Thr Gly Ser Gln Lys Leu Pro
    850                855                860
His Gly Leu Glu Thr Asn Ile Ser Arg Glu Glu Leu Leu Glu Leu Gly
865                 870                 875                 880
Gln Ala Phe Ala Asn Thr Pro Glu Gly Phe Asn Tyr His Pro Arg Val
                885                 890                 895
Ala Pro Val Ala Lys Lys Arg Val Ser Ser Val Thr Glu Gly Gly Ile
            900                 905                 910
Asp Trp Ala Trp Gly Glu Leu Leu Ala Phe Gly Ser Leu Ala Asn Ser
        915                 920                 925
Gly Arg Leu Val Arg Leu Ala Gly Glu Asp Ser Arg Arg Gly Thr Phe
    930                 935                 940
Thr Gln Arg His Ala Val Ala Ile Asp Pro Ala Thr Ala Glu Glu Phe
945                 950                 955                 960
Asn Pro Leu His Glu Leu Ala Gln Ser Lys Gly Asn Asn Gly Lys Phe
                965                 970                 975
Leu Val Tyr Asn Ser Ala Leu Thr Glu Tyr Ala Gly Met Gly Phe Glu
            980                 985                 990
Tyr Gly Tyr Ser Val Gly Asn Glu Asp Ser Ile Val Ala Trp Glu Ala
        995                 1000                1005
Gln Phe Gly Asp Phe Ala Asn Gly Ala Gln Thr Ile Ile Asp Glu
    1010                1015                1020
Tyr Val Ser Ser Gly Glu Ala Lys Trp Gly Gln Thr Ser Lys Leu
    1025                1030                1035
Ile Leu Leu Leu Pro His Gly Tyr Glu Gly Gln Gly Pro Asp His
    1040                1045                1050
Ser Ser Ala Arg Ile Glu Arg Phe Leu Gln Leu Cys Ala Glu Gly
    1055                1060                1065
Ser Met Thr Val Ala Gln Pro Ser Thr Pro Ala Asn His Phe His
    1070                1075                1080
Leu Leu Arg Arg His Ala Leu Ser Asp Leu Lys Arg Pro Leu Val
    1085                1090                1095
Ile Phe Thr Pro Lys Ser Met Leu Arg Asn Lys Ala Ala Ala Ser
    1100                1105                1110
Ala Pro Glu Asp Phe Thr Glu Val Thr Lys Phe Gln Ser Val Ile
    1115                1120                1125
Asn Asp Pro Asn Val Ala Asp Ala Ala Lys Val Lys Lys Val Met
    1130                1135                1140
Leu Val Ser Gly Lys Leu Tyr Tyr Glu Leu Ala Lys Arg Lys Glu
    1145                1150                1155
Lys Asp Gly Arg Asp Asp Ile Ala Ile Val Arg Ile Glu Met Leu
    1160                1165                1170
His Pro Ile Pro Phe Asn Arg Ile Ser Glu Ala Leu Ala Gly Tyr
    1175                1180                1185
Pro Asn Ala Glu Glu Val Leu Phe Val Gln Asp Glu Pro Ala Asn
    1190                1195                1200
Gln Gly Pro Trp Pro Phe Tyr Gln Glu His Leu Pro Glu Leu Ile
    1205                12l0                1215
Pro Asn Met Pro Lys Met Arg Arg Val Ser Arg Arg Ala Gln Ser
    1220                1225                1230
Ser Thr Ala Thr Gly Val Ala Lys Val His Gln Leu Glu Glu Lys
    1235                1240                1245
Gln Leu Ile Asp Glu Ala Phe Glu Ala
    1250                1255

Claims (13)

1.生产L-谷氨酸的棒状杆菌型细菌,其包含
a)胞内α-酮戊二酸脱氢酶活性,所述活性小于非突变或野生型菌株的一半,和
b)在染色体odhA基因的编码区或表达控制区中的突变,所述染色体odhA基因编码α-酮戊二酸脱氢酶复合物的Elo亚基,
其中所述细菌几乎以与非突变或野生型菌株相同的生长速率生长。
2.根据权利要求1的棒状杆菌型细菌,其中所述odhA基因编码选自下组的蛋白质:
(A)包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的蛋白质,
(B)包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的蛋白质,其中在所述蛋白质中取代、缺失、插入、或添加了一个或几个氨基酸,并且其中所述蛋白质具有α-酮戊二酸脱氢酶复合物的Elo亚基的活性,
(C)包含SEQ ID NO:10的氨基酸37至1257的蛋白质,和
(D)包含SEQ ID NO:10的氨基酸37至1257的蛋白质,其中在所述蛋白质中取代、缺失、插入、或添加了一个或几个氨基酸,并且其中所述蛋白质具有α-酮戊二酸脱氢酶复合物的Elo亚基的活性。
3.根据权利要求2的棒状杆菌型细菌,其中所述几个氨基酸是2至20个氨基酸。
4.根据权利要求1的棒状杆菌型细菌,其中所述odhA基因选自下组:
(a)包含SEQ ID NO:9的核苷酸443至4213的基因,
(b)能够在严紧条件下与以下物质杂交的基因:包含SEQ ID NO:9的核苷酸443至4213的多核苷酸或由包含SEQ ID NO:9的核苷酸443至4213的多核苷酸制备的探针,并且其中所述基因编码蛋白质,该蛋白质具有α-酮戊二酸脱氢酶复合物的Elo亚基的活性,
(c)包含SEQ ID NO:9的核苷酸551至4213的基因,和
(d)能够在严紧条件下与以下物质杂交的基因:包含SEQ ID NO:9的核苷酸551至4213的多核苷酸或由包含SEQ ID NO:9的核苷酸551至4213的多核苷酸制备的探针,并且其中所述基因编码蛋白质,该蛋白质具有α-酮戊二酸脱氢酶复合物的Elo亚基的活性。
5.根据权利要求1至4中任一项的棒状杆菌型细菌,其中所述突变被引入到编码焦磷酸硫胺素结合区的区域。
6.根据权利要求5的棒状杆菌型细菌,其中所述突变被引入到包含SEQID NO:9的核苷酸2534至2548的区域。
7.根据权利要求5的棒状杆菌型细菌,其中所述突变包括在包含SEQ IDNO:10的氨基酸698至702的区域中缺失一个或多个氨基酸。
8.根据权利要求5的棒状杆菌型细菌,其中所述突变包括氨基酸的替换,所述氨基酸从下组选择:SEQ ID NO:10所示氨基酸序列中698位的Lys、699位的Leu、700位的Arg、702位的Tyr、及其组合。
9.根据权利要求1至4中任一项的棒状杆菌型细菌,其中所述突变被引入到包含SEQ ID NO:9的核苷酸1094至1111的区域。
10.根据权利要求9的棒状杆菌型细菌,其中所述突变包括在包含SEQID NO:10的氨基酸218至224的区域中缺失一个或多个氨基酸。
11.产生L-谷氨酸的方法,包括:
a)在培养基中培养根据权利要求1至10中任一项的棒状杆菌型细菌,和
b)从培养基和/或所述细菌收集L-谷氨酸。
12.编码突变α-酮戊二酸脱氢酶的基因,选自下组:
(a)包含从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4213的基因,或者包含从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4210的基因,
(b)能够在严紧条件下与以下物质杂交的基因:包含从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4213的多核苷酸、包含从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4210的多核苷酸、由从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4213制备的探针、或者由从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸443至4210制备的探针,并且其中所述基因编码具有α-酮戊二酸脱氢酶活性的蛋白质,通过与E2o和E3亚基形成复合物,该蛋白质的α-酮戊二酸脱氢酶活性小于野生型或非突变菌株的α-酮戊二酸脱氢酶活性的一半,
(c)包含从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4213的基因,或者包含从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4210的基因,
(d)能够在严紧条件下与以下物质杂交的基因:包含从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4213的多核苷酸、包含从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4210的多核苷酸、由从SEQ ID NO:11、13和15组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4213制备的探针、或者由从SEQ ID NO:44、46和48组成的组中选择的多核苷酸的核苷酸551至4210制备的探针,并且其中所述基因编码具有α-酮戊二酸脱氢酶活性的蛋白质,通过与E2o和E3亚基形成复合物,该蛋白质的α-酮戊二酸脱氢酶活性小于野生型或非突变菌株的α-酮戊二酸脱氢酶活性的一半。
13.突变α-酮戊二酸脱氢酶,选自下组:
(a)从SEQ ID NO:12、14、16、45、47和49组成的组中选择的蛋白质,
(b)从SEQ ID NO:12、14、16、45、47和49组成的组中选择的蛋白质,其中在所述蛋白质中取代、缺失或添加了一个或几个氨基酸,并且其中通过与E2o和E3亚基形成复合物,所述蛋白质显示的α-酮戊二酸脱氢酶活性小于野生型或非突变菌株的α-酮戊二酸脱氢酶活性的一半,
(c)包含从SEQ ID NO:12、45、47和49组成的组中选择的氨基酸序列的氨基酸37至1256的蛋白质,包含氨基酸序列SEQ ID NO:14的氨基酸37至1255的蛋白质,或者包含氨基酸序列SEQ ID NO:16的氨基酸37至1254的蛋白质,和
(d)包含从SEQ ID NO:12、45、47和49组成的组中选择的氨基酸序列的氨基酸37至1256的蛋白质,包含氨基酸序列SEQ ID NO:14的氨基酸37至1255的蛋白质,或者包含氨基酸序列SEQ ID NO:16的氨基酸37至1254的蛋白质,其中在所述蛋白质中取代、缺失、或添加了一个或几个氨基酸,并且其中通过与E2o和E3亚基形成复合物,所述蛋白质显示的α-酮戊二酸脱氢酶活性小于野生型或非突变菌株的α-酮戊二酸脱氢酶活性的一半。
CN2005800298560A 2004-09-10 2005-09-09 生产l-谷氨酸的微生物和生产l-谷氨酸的方法 Expired - Fee Related CN101010423B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP264458/2004 2004-09-10
JP2004264458 2004-09-10
PCT/JP2005/017098 WO2006028298A2 (en) 2004-09-10 2005-09-09 L-glutamic acid-producing microorganism and a method for producing l-glutamic acid

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101010423A true CN101010423A (zh) 2007-08-01
CN101010423B CN101010423B (zh) 2012-06-27

Family

ID=35734913

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2005800298560A Expired - Fee Related CN101010423B (zh) 2004-09-10 2005-09-09 生产l-谷氨酸的微生物和生产l-谷氨酸的方法

Country Status (6)

Country Link
EP (1) EP1786899B1 (zh)
JP (1) JP2006101875A (zh)
KR (1) KR100930842B1 (zh)
CN (1) CN101010423B (zh)
BR (1) BRPI0515035A (zh)
WO (1) WO2006028298A2 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108250278A (zh) * 2016-12-29 2018-07-06 廊坊梅花生物技术开发有限公司 生产l-谷氨酸的菌株和生产l-谷氨酸的方法
CN113637699A (zh) * 2020-04-27 2021-11-12 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 一种提高氨基酸产生菌生产能力的方法
TWI834985B (zh) * 2020-09-09 2024-03-11 南韓商Cj第一製糖股份有限公司 用於生產左旋麩胺酸的重組微生物及使用其生產左旋麩胺酸的方法

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100948246B1 (ko) * 2004-12-28 2010-03-18 아지노모토 가부시키가이샤 L-글루탐산 생산 미생물 및 l-글루탐산의 제조방법
JP2010041920A (ja) 2006-12-19 2010-02-25 Ajinomoto Co Inc L−アミノ酸の製造法
JP2010130899A (ja) 2007-03-14 2010-06-17 Ajinomoto Co Inc L−グルタミン酸系アミノ酸生産微生物及びアミノ酸の製造法
WO2009103547A1 (en) 2008-02-21 2009-08-27 Basf Se Process for the production of gamma-aminobutyric acid
KR20140091742A (ko) 2011-11-11 2014-07-22 아지노모토 가부시키가이샤 발효법에 의한 목적 물질의 제조법
JP2016165225A (ja) 2013-07-09 2016-09-15 味の素株式会社 有用物質の製造方法
JP2016192903A (ja) 2013-09-17 2016-11-17 味の素株式会社 海藻由来バイオマスからのl−アミノ酸の製造方法
KR101547651B1 (ko) * 2014-06-03 2015-08-26 씨제이제일제당 주식회사 O-숙시닐호모세린 또는 숙신산의 생산능을 갖는 미생물 및 이를 이용한 숙신산 또는 o-숙시닐호모세린의 생산 방법
KR102008673B1 (ko) * 2017-12-07 2019-08-09 대상 주식회사 락토바실러스 퍼멘텀 c-7a 균주 및 이의 용도
CN112646767B (zh) * 2020-12-30 2022-08-09 宁夏伊品生物科技股份有限公司 具有增强的l-谷氨酸生产力的菌株及其构建方法与应用
KR102665227B1 (ko) * 2021-06-30 2024-05-10 씨제이제일제당 주식회사 고농도 l-글루탐산을 생산하기 위한 균주 및 이를 이용한 l-글루탐산 생산방법

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1272437C (zh) * 1994-06-14 2006-08-30 味之素株式会社 α-酮戊二酸脱氢酶基因以及赖氨酸的生产方法

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108250278A (zh) * 2016-12-29 2018-07-06 廊坊梅花生物技术开发有限公司 生产l-谷氨酸的菌株和生产l-谷氨酸的方法
CN108250278B (zh) * 2016-12-29 2021-06-22 廊坊梅花生物技术开发有限公司 生产l-谷氨酸的菌株和生产l-谷氨酸的方法
CN113637699A (zh) * 2020-04-27 2021-11-12 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 一种提高氨基酸产生菌生产能力的方法
CN113637699B (zh) * 2020-04-27 2023-05-30 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 一种提高氨基酸产生菌生产能力的方法
TWI834985B (zh) * 2020-09-09 2024-03-11 南韓商Cj第一製糖股份有限公司 用於生產左旋麩胺酸的重組微生物及使用其生產左旋麩胺酸的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN101010423B (zh) 2012-06-27
JP2006101875A (ja) 2006-04-20
KR20070053321A (ko) 2007-05-23
WO2006028298A3 (en) 2006-04-27
BRPI0515035A (pt) 2008-07-01
WO2006028298A2 (en) 2006-03-16
EP1786899A2 (en) 2007-05-23
EP1786899B1 (en) 2012-06-27
KR100930842B1 (ko) 2009-12-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101010423B (zh) 生产l-谷氨酸的微生物和生产l-谷氨酸的方法
CN101090911B (zh) 产生l-谷氨酸的微生物和产生l-谷氨酸的方法
CN101065484B (zh) 产生l-氨基酸的细菌和产生l-氨基酸的方法
AU756507B2 (en) L-glutamic acid-producing bacterium and method for producing L-glutamic acid
JP4285582B2 (ja) L−グルタミン酸生産菌及びl−グルタミン酸の製造法
AU746542B2 (en) L-glutamic acid-producing bacterium and method for producing L-glutamic acid
CN100358999C (zh) 发酵生产l-谷氨酸的方法
US7205132B2 (en) L-glutamic acid-producing microorganism and a method for producing L-glutamic acid
CN102498216B (zh) L-氨基酸的产生方法
CN101248170B (zh) 产生l-谷氨酸的细菌和用于产生l-谷氨酸的方法
JP3937726B2 (ja) 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法
AU784207B2 (en) Bacterium producing L-glutamic acid and method for producing L-glutamic acid
JP4144131B2 (ja) L−グルタミン酸生産菌及びl−グルタミン酸の製造法
JP2000189169A (ja) L―グルタミン酸生産菌及びl―グルタミン酸の製造法
CN101248169B (zh) 产生l-谷氨酸的细菌和用于产生l-谷氨酸的方法
EP1038970B1 (en) Method for producing L-glutamic acid
JP2006340603A (ja) L−グルタミン酸の製造法
JP2000253879A (ja) L−リジンの製造法
JP2007175016A (ja) L−グルタミン酸生産菌及びl−グルタミン酸の製造方法
JP4239334B2 (ja) 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20120627

Termination date: 20150909

EXPY Termination of patent right or utility model