CN101007013A - 黄芪甲苷脂质体及其药物制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种黄芪甲苷脂质体及其制备方法。本发明的脂质体由黄芪甲苷和磷脂以及亲脂性添加剂制备成。磷脂与黄芪甲苷活性成分的重量比为：0.5∶1－100∶1，磷脂与亲脂性添加剂的重量比为1∶1－50∶1。本发明的脂质体可用于制备粉末吸入剂、气雾剂、喷雾剂和口腔粘膜等给药剂型，从而克服黄芪甲苷口服吸收差，生物利用度低的不足，增强黄芪甲苷治疗慢性心衰的疗效，提高患者的顺应性。

Description

黄芪甲苷脂质体及其药物制剂

技术领域

本发明属医药技术领域，涉及脂质体药物制剂，更具体的说，是一种黄芪甲苷脂质体和含有黄芪甲苷脂质体的药物制剂。

背景技术

黄芪是一种历史悠久、临床应用十分广泛、为历代中医最为常用的中药之一。中医认为，黄芪性温、味甘，有补气升阳、固表止汗、排毒生肌、消肿利尿的功能。黄芪甲苷是自中药黄芪中提取分离的单体化合物，近年来大量研究表明，黄芪甲苷可应用于心血管系统疾病的预防和治疗，尤其是在慢性心衰的治疗的治疗中具有独特的效果，较以往治疗心衰常用的洋地黄类药物在安全性方面有了很大改善。

然而，黄芪甲苷口服生物利用度极低(仅2.2％)，很难发挥药效，因而只能注射给药，近年来对黄芪甲苷剂型的研究也均集中在注射方向。又由于黄芪甲苷在水中的溶解度较小不能满足注射剂的配制要求，张卫东；张川等采用丙二醇、乙醇、甘油等助溶剂和助溶稀释剂制备了黄芪甲苷小针剂、粉针剂、葡萄糖输液及氯化钠输液(CN200310108914.1)。申请号200510038651.0公开了一种能使黄芪甲苷分散在油相中，再分散到水相中，形成脂肪乳的工艺，其特征是：主药黄芪甲苷加入辅料制成黄芪甲苷脂肪乳，辅料包括有油、表面活性剂、等渗调节剂及适宜的助溶剂等。以上制备注射液的方法均在不同程度上克服了黄芪甲苷在水中难溶的问题，但同时也不可避免地带来了一些问题。这些问题包括：1.为了制备成注射液，就必须解决黄芪甲苷的溶解问题，因此使用了注射有害的助溶剂、表面活性剂等2.慢性心衰病人病程较长，大多不用住院治疗，长时间输液会加重患者的心里负担和医疗负担3.静脉滴注给药，输入量一般都较大，会加重心衰病人的心脏负担，使心衰程度加重4.病人对注射给药时的注射疼痛存在恐惧感，如果用药周期较长，这一问题就显得更为突出5.注射给药过程存在不安全因素，如过敏反应、热原反应等。因此，需要探索、寻找一种安全的、有效的、患者乐于接受的黄芪甲苷的给药方式及质量可靠的药物剂型显得尤为必要。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足之处，提供一种黄芪甲苷的脂质体，经本发明制备的黄芪甲苷脂质体用于非注射给药，能减少药物刺激和毒性，提高药物生物利用度，改善患者用药的顺应性。

脂质体是一种类似生物膜结构的双分子层结构的微囊，其主要成分磷脂，普遍存在于动植物细胞的原生质和生物膜中，对生物膜的生理活性和机体的正常代谢有重要的调节功能。磷脂分子结构中的磷酸基团具有强烈极性，而两个长碳氢链具有非极性。由于这种典型的双亲分子特性，使脂质体具有亲油亲水性，因此，脂质体可作为很多药物的载体。又因磷脂是生物膜的组成部分，生物体内存在有分解酶，很容易代谢，因而脂质体具有生物降解性和生物相容性。研究表明，脂质体进入体内主要被网状内皮系统吞噬和激活机体的自身免疫功能并改变被包封药物的药代动力学性质和体内分布，使药物在组织器官中累积，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。磷脂本身无毒，对心脑血管疾病具有积极的预防作用，可降低血清胆固醇、甘油三酯的含量，预防动脉硬化并可清除血管使其柔软，能显著减轻动脉粥样硬化及心肌缺血一再灌注损伤程度，清除动脉硬化引发的心脑血管疾病等多种慢性病变的诱发因素。因而，可作为一些用于心血管疾病治疗，而又是生物利用度低的药物的优良载体。

本发明的目的通过下述技术方案予以实现：

本发明的黄芪甲苷脂质体，由黄芪甲苷活性成分、磷脂和亲脂性添加剂组成。其中所述的磷脂与黄芪甲苷活性成分的重量比为：0.5∶1-100∶1，磷脂与亲脂性添加剂的重量比为1∶1-50∶1，优选1∶1-10∶1，更优选5∶1。

其中所述的磷脂，可以是卵磷脂，包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、双肉豆蔻磷脂酰胆碱、双肉豆蔻磷脂酰甘油，二油酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂胆碱或二棕榈酰磷脂酰甘油等等，优选大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂。

本发明采用亲脂性添加剂选择性改善脂质体的特性，所述添加剂包括：硬脂酸、磷脂酸、生育酚、胆固醇、胆固醇半琥珀酸酯和羊毛酯提取物等等；优选胆固醇。

本发明所述的黄芪甲苷活性成分包括：黄芪甲苷或黄芪甲苷盐类，例如黄芪甲苷一价金属盐如钠盐、钾盐等，二价盐如镁盐、锌盐等，三价盐如铝盐等，矿酸盐如磷酸盐、硫酸盐等等，以及黄芪甲苷的酯类如黄芪甲苷琥珀酸酯等脂肪酸酯，磷酸酯等矿酸酯和苯甲酸等芳香酸酯。

本发明提供的黄芪甲苷脂质体，优选按重量份数比，黄芪甲苷活性成分5-30份，卵磷脂50-80份，胆固醇1-10份。

本发明黄芪甲苷脂质体的制备方法包括薄膜法、逆相蒸发法、熔融法、注入法、冷冻干燥法、表面活性剂法、复乳法、钙融合法，优选薄膜法、熔融法和冷冻干燥法制备。

本发明黄芪甲苷脂质体优选采用下述方法制备：

取适量的大豆卵磷脂、胆固醇，用一种或两种有机溶剂混合液溶解，惰性气体(如氮气或氦气等)保护下，加入黄芪甲苷无水乙醇溶液混匀，在旋转蒸发器上减压蒸去溶剂，使形成干燥的脂质膜，加磷酸盐缓冲液旋转水化得到黄芪甲苷脂质体。所述的有机溶剂为氯仿、甲醇、氯仿-甲醇混合液或乙醇、乙醚溶液、丙二醇、异丙醇家、二甲基乙酰胺等等。

本发明所述黄芪甲苷脂质体的包封率可采用下述方法进行检查：

取0.1ml脂质体样品(20mg磷脂/ml)加入到10ml离心管中，加入等量的鱼精蛋白溶液(20mg/ml)，混匀，静置5分钟。再加3ml生理盐水，在室温下离心20min沉淀脂质体。吸取上清液2ml，HPLC法测定游离药物含量。离心管中沉淀物以0.6ml Triton-X100重新混悬，破坏脂质体，释放包裹药物，补充生理盐水至3.2ml，测定包封药物的浓度，计算百分包封率＝[包封药物浓度/(游离药物浓度+包封药物浓度)]×100％。

本发明的黄芪甲苷脂质体可用于制备粉末吸入剂、气雾剂、喷雾剂和口腔粘膜给药等剂型，从而克服黄芪甲苷口服吸收差，生物利用度低的不足，增强黄芪甲苷治疗慢性心衰的疗效，提高患者的顺应性。

综上所述，本发明与现有技术相比具有以下积极效果：

1、黄芪甲苷包封于脂质体，可靶向到达组织器官，使药物在组织器官中累积，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。提高生物利用度，增强药理作用。脂质体本身对人体毒性小，并且脂质体对人体无免疫抑制作用。

2、脂质体制剂可延缓或控制药物的释放，降低药物的消除速率延长药物的作用时间，增加药物的体内外稳定性。

3、本发明的脂质体，显著改善了普通黄芪甲苷的溶出速度，稳定性好。本发明的脂质体制备工艺简单，制成脂质体后可以进一步加工成粉末吸入剂、气雾剂、喷雾剂、透皮制剂或口腔粘膜给药剂等多种剂型。

具体实施方式：

下面通过实施例对本说明做进一步的描述，但本发明的保护范围不局限于此。

本发明所述的活性成分黄芪甲苷可采用文献方法制备或购于市售品。

实施例1

取大豆卵磷脂1g，胆固醇0.3g，用50ml氯仿-甲醇(2∶1)混合液溶解于250ml茄型瓶中，再加入黄芪甲苷无水乙醇溶液20ml，混匀，在旋转蒸发器上减压蒸去溶剂，加磷酸盐缓冲液旋转水化得到黄芪甲苷脂质体。包封率为82％。

实施例2

取大豆卵磷脂1g，胆固醇0.3g，用50ml氯仿-甲醇(2∶1)混合液溶解于250ml茄型瓶中，再加入黄芪甲苷二甲基乙酰胺溶液1ml，混匀，在真空中冷冻干燥后，用生理盐水振摇进行分散，得到黄芪甲苷脂质体。包封率为67％。

实施例3

取大豆卵磷脂1g，胆固醇0.5g，用50ml氯仿-甲醇(2∶1)混合液溶解，再加入黄芪甲苷无水乙醇溶液30ml，混匀，将此药液经注射器缓缓注入搅拌下的磷酸盐缓冲液中，加完后，减压除去有机溶剂，得到黄芪甲苷脂质体。包封率为61％。

实施例4

将黄芪甲苷钠盐溶解于磷酸盐缓冲液中，加至大豆卵磷脂1g和胆固醇0.3g制成的50ml乙醚溶液中，搅拌蒸发除去有机溶剂，残液经超声处理，然后分离出脂质体，再混悬于磷酸盐缓冲液。包封率为43％。

实施例5

取大豆卵磷脂1g，胆固醇0.3g，用50ml氯仿-甲醇(2∶1)混合液溶解于250ml茄型瓶中，再加入黄芪甲苷无水乙醇溶液20ml，混匀，在旋转蒸发器上减压蒸去溶剂，加磷酸盐缓冲液旋转水化得到黄芪甲苷脂质体。包封率为72％。经冷冻干燥，以粒径在1～5μm的脂质体装入干粉吸入器即得。

实施例6

将黄芪甲苷脂质体5g与20g抛射剂一起装入气雾剂装置中，得到黄芪甲苷脂质体气雾剂。脂质体混悬液在抛射剂作用下，呈气雾状喷出。

实施例7

以1％卡波姆934P为亲水凝胶材料，以20％丙二醇为增溶剂，以溶血磷脂酰胆碱为吸收促进剂，以25％甘油为保湿剂。将上述处方中的卡波姆先用部分保湿剂研匀，加入溶有防腐剂和吸收促进剂的蒸馏水中搅拌约24h，使充分溶胀。另将药物用保湿剂或增溶剂溶解后，缓慢滴入到卡波姆溶液中，调解pH使成凝胶。

实施例8

将黄芪甲苷10.0g及辅助成分粉碎、过筛、称量处理。黄芪甲苷与分散剂pvp混合均匀，适量乙醇中，喷雾干燥除尽溶剂，制成含药粉末。含药粉末再与填充剂等混匀，用HPMC的50％乙醇溶液制软材，过24目筛制湿颗粒，40℃减压干燥；整粒后，加入润滑剂混合均匀，然后压片，制成1000片，每片含有效成分10mg。片剂包括舌下片和颊含片，可根据用药部位制成不同含量、不同形状的剂型。

实施例9

动物生物利用度试验：

实验方法：选用大白鼠为试验动物，分别经鼻腔和肺部给药后，于不同时间取血测定血药浓度(HPLC-MS法)，计算绝对生物利用度。结果显示：脂质体包封的黄芪甲苷生物利用度显著提高，从而减少了给药剂量，增强了药理作用。

实验的结果：

组别	给药途径	剂量(mg/kg)	绝对生物利用度(％)
				黄芪甲苷脂质体	鼻腔给药	0.4	79
黄芪甲苷	鼻腔给药	0.4	12
				黄芪甲苷脂质体	肺部给药	0.2	86
黄芪甲苷	肺部给药	0.2	17

Claims (6)

1、一种黄芪甲苷脂质体，其特征在于由黄芪甲苷活性成分、磷脂和亲脂性添加剂组成。

2、如权利要求1所述的黄芪甲苷脂质体，其特征是，所述的磷脂与黄芪甲苷活性成分的重量比为：0.5∶1-100∶1，磷脂与亲脂性添加剂的重量比为1∶1-50∶1。

3、如权利要求1所述的黄芪甲苷脂质体，其特征是所述的磷脂，包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、双肉豆蔻磷脂酰胆碱、双肉豆蔻磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂胆碱或二棕榈酰磷脂酰甘油。

4、如权利要求1所述的黄芪甲苷脂质体，其特征是所述的亲脂性添加剂包括硬脂酸、磷脂酸、生育酚、胆固醇、胆固醇半琥珀酸酯或羊毛酯提取物。

5、如权利要求1或2所述的黄芪甲苷脂质体，其特征是，所述的黄芪甲苷活性成分为黄芪甲苷、黄芪甲苷盐类或酯类。

6、如权利要求1或2所述的黄芪甲苷脂质体，其特征在于该脂质体可用于制备粉末吸入剂、气雾剂、喷雾剂、透皮制剂或口腔粘膜给药制剂。