CN101002857A - 一种中药组合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于治疗或辅助治疗脂肪肝尤其是酒精性脂肪肝，对化学性肝损伤有保护作用的中药组合物，其中包括：黄芪、枸杞、葛根、白术。该组合物还可以单独或组合加入制鸡内金、玫瑰花、青皮。本发明还提供了该中药组合物的口服制剂以及该组合物口服制剂的制备过程。本发明还提供了该中药组合物及其口服制剂在制备用于治疗或辅助治疗脂肪肝尤其是酒精性脂肪肝的药物以及制备对化学性肝损伤有保护作用的保健食品中的应用。本发明具有效果显著，安全性好的优点。
Description
技术领域
本发明属于中药领域。涉及中药组合物、中药组合物口服制剂及其制备方法以及该中药组合物及其口服制剂在治疗或辅助治疗脂肪肝特别是酒精性脂肪肝，化学性肝损伤的保护中的应用。
背景技术
本发明所述的中药组合物中各味中药的现代药理学研究显示，具有提高机体免疫功能、利胆、降低血脂、促进消化系统功能、抗脂质过氧化等作用。具体如下：
黄芪对正常机体的抗体生成有明显促进作用，能提高小鼠的血清IgG含量。临床应用黄芪及黄芪为主的复方治疗观察表明，可使脾虚患者的IgG水平升高，使慢性肝炎患者IgG由治疗前下降水平上升到正常范围，并可使感冒患者鼻腔分泌液中的分泌型免疫球蛋白含量升高。黄芪水煎剂口服后对腹腔游走巨噬细胞吞噬鸡红细胞的功能有较强促进作用，对腹腔巨噬细胞的功能有促进作用。
枸杞具有降血脂作用；枸杞多糖(LBP)可以有效地清除羟基自由基，从而抑制由羟基自由基所导致的脂质过氧化，具有防止生物膜脂质过氧化的作用，维持生物膜的流动性，减轻线粒体膨胀和减少红细胞溶血的发生，维护正常的生理功能。LBP还具有抗衰老的作用。
葛根中有效成分葛根异黄酮对动物组织中的脂质过氧化产物LPO含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性研究表明，葛根异黄酮可以明显降低血、脑组织中LPO含量，而且对提高血、脑组织中SOD活性有极显著作用。葛根总黄酮能显著降低大鼠血粘度、抑制血栓形成及ADP诱导的血小板聚集。
白术水煎剂有明显促进小鼠胃排空及小肠推进功能的作用，通过胆碱能受体介导与α受体有关。白术具有免疫调节作用以及明显的抗氧化作用，增强机体清除自由基的能力，具有减少自由基对机体的损伤，保肝、抗肿瘤等药理作用。
鸡内金对人及实验动物均有促进胃肠消化功能的作用，同时对胰液分泌也有促进作用，体外实验证实能增强胃蛋白酶、胰脂肪酶的活性。
玫瑰花所含挥发油(玫瑰油)成分对大鼠有促进其胆汁分泌的作用。
青皮可降低实验动物离体肠管的紧张性，对抗乙酰胆碱、毛果芸香碱和氯化钡引起的肠平滑肌痉挛性收缩。这种解痉作用可能与α受体、胆碱受体及对肠管平滑肌的直接抑制有关。青皮可以提高大鼠分泌胆汁的能力，使胆汁流量明显增加，并能增加胆汁中胆酸盐的含量。
目前尚没有资料显示上述中药单独或经简单组合在临床上用于治疗或辅助治疗脂肪肝特别是酒精性脂肪肝以及对化学性肝损伤的保护。
发明内容
目前无论是现代医学还是中医药对脂肪肝尤其是酒精性脂肪肝的治疗效果不理想，缺乏对化学性肝损伤有效保护的治疗方案。我们在传统中医学对本病认识的基础上，提供了一种治疗或辅助治疗脂肪肝的中药组合物，同时提供了该中药组合物在保护化学性肝损伤中应用。其中包括黄芪、枸杞、葛根、白术(以下简称组方1)。可以选用的重量比如下：
组方1重量比如下：
黄芪 150-450份
枸杞 100-300份
葛根 50-250份
白术 100-300份
其中优选黄芪300份，枸杞200份，葛根150份，白术200份。
最优选的组方1重量比为：
黄芪 300份
枸杞 200份
葛根 150份
白术 200份
本发明的另一目的在于提供上述中药组合物口服制剂，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液。胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等；片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
本发明提供了一种中药组合物及其口服制剂在制备用于治疗或辅助治疗脂肪肝尤其是酒精性脂肪肝药物中的应用。本发明还提供了这种中药组合物及其口服制剂在制备保护化学性肝损伤的保健食品中的应用。
脂肪肝患者特别是酒精性脂肪肝患者以及化学性肝损伤患者往往会出现食欲减退、恶心、呕吐、嗳气、有疲乏感、食后常腹胀等临床表现，据此本发明所提供的中药组合物组方1及其口服制剂中还可以单独或组合加入制鸡内金、玫瑰花、青皮(分别简称组方2、3、4、5、6、7、8)用以改善患者消化功能。其中重量比为制鸡内金50-150份，优选100份，玫瑰花50-150份，优选90份，青皮50-150份，优选90份。其中鸡内金采用常规鸡内金炮制方法炮制如砂烫鸡内金、焦鸡内金、醋制鸡内金等。
组方2重量比如下：
黄芪 150-450份
枸杞 100-300份
葛根 50-250份
白术 100-300份
制鸡内金 50-150份
最优选的组方2重量比为：
黄芪 300份
枸杞 200份
葛根 150份
白术 200份
制鸡内金 100份
组方3重量比如下：
黄芪 150-450份
枸杞 100-300份
葛根 50-250份
白术 100-300份
玫瑰花 50-150份
最优选的组方3重量比为：
黄芪 300份
枸杞 200份
葛根 150份
白术 200份
玫瑰花 90份
组方4重量比如下：
黄芪 150-450份
枸杞 100-300份
葛根 50-250份
白术 100-300份
青皮 50-150份
最优选的组方4重量比为：
黄芪 300份
枸杞 200份
葛根 150份
白术 200份
青皮 90份
组方5重量比如下：
黄芪 150-450份
枸杞 100-300份
葛根 50-250份
白术 100-300份
制鸡内金 50-150份
玫瑰花 50-150份
最优选的组方5重量比为：
黄芪 300份
枸杞 200份
葛根 150份
白术 200份
制鸡内金 100份
玫瑰花 90份
组方6重量比如下：
黄芪 150-450份
枸杞 100-300份
葛根 50-250份
白术 100-300份
制鸡内金 50-150份
青皮 50-150份
最优选的组方6重量比为：
黄芪 300份
枸杞 200份
葛根 150份
白术 200份
制鸡内金 100份
青皮 90份
组方7重量比如下：
黄芪 150-450份
枸杞 100-300份
葛根 50-250份
白术 100-300份
玫瑰花 50-150份
青皮 50-150份
最优选的组方7重量比为：
黄芪 300份
枸杞 200份
葛根 150份
白术 200份
玫瑰花 90份
青皮 90份
组方8重量比如下：
黄芪 150-450份
枸杞 100-300份
葛根 50-250份
白术 100-300份
制鸡内金 50-150份
玫瑰花 50-150份
青皮 50-150份
最优选的组方8重量比为：
黄芪 300份
枸杞 200份
葛根 150份
白术 200份
制鸡内金 100份
玫瑰花 90份
青皮 90份
本发明提供了一种中药组合物口服制剂的制备过程，通过该制备过程可以得到组方1及其优选组方的口服制剂，以下为该制备过程：
1、黄芪、枸杞、葛根加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。其中黄芪的用量为150份-450份，优选为300份；枸杞的用量为100份-300份优选为200份；葛根的用量为50份-250份优选为150份。
2、白术加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。其中白术的用量为100份-300份优选为200份。
3、将步骤1的药渣与步骤2的药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压同收乙醇，浓缩液与步骤1得到的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
4、将步骤2得到的白术挥发油环糊精包合物加入步骤3所得浸膏干燥细粉中，混匀，直接装入胶囊，制成胶囊剂。其中胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等。或按照制剂需要加入其他医药可接受的辅料以及保健食品可接受的辅料如糖粉、硬脂酸镁、乳糖、碳酸氢钠、淀粉、糊精等制成其他类型的口服制剂包括片剂、颗粒剂、口服液。其中片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
本发明还提供了一种中药组合物制备成口服制剂的制备过程，通过该制备过程可以得到组方2及其优选组方的口服制剂。
1、黄芪、枸杞、葛根加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。其中黄芪的用量为150份-450份，优选为300份；枸杞的用量为100份-300份优选为200份；葛根的用量为50份-250份优选为150份。
2、白术加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。其中白术的用量为100份-300份优选为200份。
3、将步骤1的药渣与步骤2的药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，浓缩液与步骤1得到的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏干燥，粉碎成细粉。
4、鸡内金(经炮制)50份-150份优选为100份粉碎成细粉，灭菌。
5、将步骤2所得的白术挥发油环糊精包合物和步骤3所得浸膏干燥细粉以及步骤4所得的鸡内金细粉混匀，制成胶囊剂。其中胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等。或按照制剂需要加入其他医药可接受的辅料以及保健食品可接受的辅料如糖粉、硬脂酸镁、乳糖、碳酸氢钠、淀粉、糊精等制成其他类型的口服制剂包括片剂、颗粒剂、口服液。其中片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
本发明还提供了一种中药组合物口服制剂的制备过程，通过该制备过程可以得到组方3及其优选组方的口服制剂。
1、黄芪、枸杞、葛根加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。其中黄芪的用量为150份-450份，优选为300份；枸杞的用量为100份-300份优选为200份；葛根的用量为50份-250份优选为150份。
2、白术和玫瑰花加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。其中白术的用量为100份-300份优选为200份；玫瑰花的用量为50份-150份优选为90份。
3、将步骤1的药渣与步骤2的药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，浓缩液与步骤1得到的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
4、将步骤2所得的挥发油环糊精包合物与步骤3所得浸膏干燥细粉混匀，直接装入胶囊，制成胶囊剂。其中胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等。或按照制剂需要加入其他医药可接受的辅料以及保健食品可接受的辅料如糖粉、硬脂酸镁、乳糖、碳酸氢钠、淀粉、糊精等制成其他类型的口服制剂包括片剂、颗粒剂、口服液。其中片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
本发明还提供了一种中药组合物口服制剂的制备过程，通过该制备过程可以得到组方4及其优选组方的口服制剂。
1、黄芪、枸杞、葛根加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。其中黄芪的用量为150份-450份优选为300份；枸杞的用量为100份-300份优选为200份；葛根的用量为50份-250份优选为150份。
2、白术和青皮加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。其中白术的用量为100份-300份优选为200份；青皮的用量为50份-150份优选为90份。
3、步骤1的药渣与步骤2的药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，浓缩液与步骤1得到的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
4、步骤2所得的挥发油环糊精包合物与步骤3所得浸膏干燥细粉，混匀，直接装入胶囊，制成胶囊剂。其中胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等。或按照制剂需要加入其他医药可接受的辅料以及保健食品可接受的辅料如糖粉、硬脂酸镁、乳糖、碳酸氢钠、淀粉、糊精等制成其他类型的口服制剂包括片剂、颗粒剂、口服液。其中片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
本发明还提供了一种中药组合物口服制剂的制备过程，通过该制备过程可以得到组方5及其优选组方的口服制剂。
1、黄芪、枸杞、葛根加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。其中黄芪的用量为150份-450份优选为300份；枸杞的用量为100份-300份优选为200份；葛根的用量为50份-250份优选为150份。
2、白术和玫瑰花加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。其中白术的用量为100份-300份优选为200份；玫瑰花的用量为50份-150份优选为90份。
3、步骤1的药渣与步骤2的药渣共同加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，浓缩液与步骤1得到的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
4、鸡内金(经炮制)50份-150份优选为100份粉碎成细粉，灭菌。
5、步骤2所得的挥发油环糊精包合物与步骤3所得浸膏干燥细粉以及步骤4所得的鸡内金细粉混匀，直接装入胶囊，制成胶囊剂。其中胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等。或按照制剂需要加入其他医药可接受的辅料以及保健食品可接受的辅料如糖粉、硬脂酸镁、乳糖、碳酸氢钠、淀粉、糊精等制成其他类型的口服制剂包括片剂、颗粒剂、口服液。其中片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
本发明还提供了一种中药组合物口服制剂的制备过程，通过该制备过程可以得到组方6及其优选组方的口服制剂。
1、黄芪、枸杞、葛根加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。其中黄芪的用量为150份-450份优选为300份；枸杞的用量为100份-300份优选为200份；葛根的用量为50份-250份优选为150份。
2、白术和青皮加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。其中白术的用量为100份-300份优选为200份；青皮的用量为50份-150份优选为90份。
3、步骤1的药渣与步骤2的药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，浓缩液与步骤1得到的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
4、鸡内金(经炮制)50份-150份优选为100份粉碎成细粉，灭菌。
5、步骤2所得的挥发油环糊精包合物与步骤3所得浸膏干燥细粉以及步骤4所得的鸡内金细粉混匀，制成胶囊剂。其中胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等。或按照制剂需要加入其他医药可接受的辅料以及保健食品可接受的辅料如糖粉、硬脂酸镁、乳糖、碳酸氢钠、淀粉、糊精等制成其他类型的口服制剂包括片剂、颗粒剂、口服液。其中片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
本发明还提供了一种中药组合物口服制剂的制备过程，通过该制备过程可以得到组方7及其优选组方的口服制剂。
1、黄芪、枸杞、葛根加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。其中黄芪的用量为150份-450份优选为300份；枸杞的用量为100份-300份优选为200份；葛根的用量为50份-250份优选为150份。
2、白术、青皮和玫瑰花加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。其中白术的用量为100份-300份优选为200份；青皮的用量为50份-150份优选为90份；玫瑰花的用量为50份-150份优选为90份。
3、步骤1的药渣与步骤2的药渣共同加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，浓缩液与步骤1得到的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
4、步骤2所得的挥发油环糊精包合物与步骤3所得浸膏干燥细粉混匀，直接装入胶囊，制成胶囊剂。其中胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等。或按照制剂需要加入其他医药可接受的辅料以及保健食品可接受的辅料如糖粉、硬脂酸镁、乳糖、碳酸氢钠、淀粉、糊精等制成其他类型的口服制剂包括片剂、颗粒剂、口服液。其中片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
本发明还提供了一种中药组合物口服制剂的制备过程，通过该制备过程可以得到组方8及其优选组方的口服制剂。
1、黄芪、枸杞、葛根加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。其中黄芪的用量为150份-450份优选为300份；枸杞的用量为100份-300份优选为200份；葛根的用量为50份-250份优选为150份。
2、白术、青皮和玫瑰花加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。其中白术的用量为100份-300份优选为200份；青皮的用量为50份-150份优选为90份；玫瑰花的用量为50份-150份优选为90份。
3、步骤1的药渣与步骤2的药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，浓缩液与步骤1得到的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉。
4、鸡内金(经炮制)50份-150份优选为100份粉碎成细粉，灭菌。
5、步骤2所得的挥发油环糊精包合物与步骤3所得浸膏干燥细粉以及步骤4所得的鸡内金细粉混匀，制成胶囊剂。其中胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等。或按照制剂需要加入其他医药可接受的辅料以及保健食品可接受的辅料如糖粉、硬脂酸镁、乳糖、碳酸氢钠、淀粉、糊精等制成其他类型的口服制剂包括片剂、颗粒剂、口服液。其中片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
我们通过考察本发明所述中药组合物口服制剂对酒精性肝损伤动物模型、高脂动物模型的影响，发现本医药组合物能显著降低酒精性脂肪肝大鼠的AST、ALT的活性并且可以有效地改善高脂饮食造成的实验动物脂质代谢紊乱，对CCL4导致的小鼠肝脏功能损伤具有明显的保护作用，降低实验小鼠ALT活性和肝内TG含量。出乎意料的是药理实验结果显示本发明所述的中药组合物口服制剂对于脂肪肝特别是洒精性脂肪肝的治疗效果与目前已知可以有效治疗肝损伤的药物以及治疗高脂血症的药物疗效相当，甚至部分生化指标改善优于目前常用药物。急性毒性实验结果显示本医药组合物毒性较低无法测出LD50，在最大给药量实验中本中药组合物剂量达到相当于人临床剂量的734.43倍以上时，连续观察7天，未观察到实验动物有明显的毒性反应，并且不影响动物的体重。
我们通过以下药理学实验来进一步说明本发明的有益效果。
一、本医药组合物口服制剂对肝损伤模型动物的肝脏功能的影响
1.实验仪器、实验药品及实验动物
1.1药物：
本中药组合物最优选的组方1：人日用生药量为18.3g。最优选的组方1浸膏：浓度为含生药量2.4g/ml，由大连大学药物研究所提供，批号：001002。蒸馏水配成所需浓度的混悬液。
洛伐他汀：华北制药有限责任公司生产，批号：990605。人日用量为40mg。作为阳性对照药。
联苯双酯滴丸：北京协和药厂生产，批号：991208。人日用量为45mg。作为阳性对照药。
葵花牌护肝片：黑龙江五常葵花药业有限公司，批号：000213。人日用量为4.2g。作为阳性对照药。
烟酸：天津力生制药厂生产，批号：980812。人日用量为300mg。作为阳性对照药。
1.2剂量设置：
根据成人临床日用量按体表面积比值折算，大鼠高、中、低剂量分别为3.29g/kg、1.65g/kg、0.82g/kg，相当于临床人日服量的12.6、6.3、3.15倍，按1ml/100g体重的体积灌胃给药。小鼠高、中、低剂量分别为4.76g/kg、2.38g/kg、1.19g/kg，相当于70kg人日服量的18.3、9.2、4.6倍，按0.25ml/10g体重的体积灌胃给药。水对照组和阳性对照药，均按同上体积灌胃给药。
洛伐他汀大鼠给药剂量3.6mg/kg，相当于临床人日服量的6.3倍。
葵花牌护肝片大鼠给药剂量0.38g/kg，相当于临床人日服量的6.3倍。葵花牌护肝片小鼠给药剂量0.55g/kg，相当于临床人日服量的9.2倍。
联苯双酯大鼠给药剂量4.05mg/kg，相当于临床人日服量的6.3倍。联苯双酯小鼠给药剂量5.85mg/kg，相当于临床人日服量的9.2倍。
烟酸小鼠给药剂量39.0mg/kg，分别相当于临床人日服量的9.2倍。
1.3受试动物：
昆明种小白鼠，购自山东大学实验动物中心，合格证号：鲁动质200001002号。Wistar种大鼠，购自山东大学实验动物中心，合格证号：鲁动质200001003号。
1.4试验仪器：
北京塞多利斯有限公司产万级电子天平，(中美合资)UNICO：紫外可见分光光度计UV-2100，日本岛津：紫外分光光度计UV-265；低温离心机，组织匀浆器、B303基本型电子天平等。
2.药效学实验
2.1对大鼠酒精性脂肪肝的影响
Wistar雄性大鼠90只，体重150-210g，取15只作为正常对照组正常饮食和饮水饲养，其余动物给予79.5％玉米粉、20％猪油、0.5％胆固醇做成的混合饲料，同时每日定量灌胃给予30％乙醇。饲养1个月，随机取正常对照组和造模动物，做病理组织学检查，确定是否已形成脂肪肝模型。
经病理组织学检查，确定大鼠酒精性脂肪肝模型已经造成。其余造模动物随机分为6组：模型对照组、护肝片对照组、联苯双酯对照组、本中药组合物浸膏高、中、低剂量组。各药物组按1ml/100g ig给药，每天一次，连续30天，正常对照组、模型对照组ig等量NS。末次药后禁食12小时，眶静脉取血，2500rpm低温离心15min，取血清，测定AST、ALT水平，结果进行组间t检验，见表1。
表1.本中药组合物对酒精性脂肪肝大鼠肝功能的影响(
)
| 组别 | 动物数(n) | AST(U/L) | ALT(U/L) |
| 正常对照组模型对照组高剂量组中剂量组低剂量组护肝片组联苯双酯组 | 10101010101010 | 162.76±11.99345.84±43.67###252.86±55.26###***271.29±56.61###**283.18±42.40###**295.25±41.89###*272.37±43.04###** | 101.62±3.38162.29±9.58###121.40±9.02###***138.73±13.42###***$$@@141.13±8.61###**$$@@138.13±11.56###***$$@@120.50±8.39###*** |
注：与正常对照组比#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001；与模型对照组比*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；与联苯双酯组比$P＜0.05；与护肝片组比&P＜0.05；与高剂量组比@P＜0.05。
由表1结果可见，酒精性脂肪肝大鼠血AST、ALT含量均显著升高。给予大鼠本发明所述的中药组合物浸膏后可使升高的血AST显著降低，其药物高、中、低剂量之间的药效作用强度有一定的剂量依赖关系，与模型对照组比较药物高、中剂量分别有极显著、非常显著、显著性差异；中、低剂量的作用强度与联苯双酯相当。
灌胃给予本中药组合物浸膏后，可使大鼠升高的血ALT显著降低，其药物高、中、低剂量之间的药效作用强度呈现明显的剂量依赖关系，与模型对照组比较药物高、中、低剂量均有极显著性差异；高剂量的作用强度优于护肝片，与联苯双酯相当。
2.2对CCl4所致肝损伤的影响
18-20g昆明种小鼠60只，雌雄各半，按体重随机分为六组：正常对照组、模型对照组、护肝片对照组、本医药组合物浸膏高、中、低剂量组。灌胃给药0.25ml/10g，连续7大。末次给药后2h，除正常对照组外其余各组ip 0.25％CCl4-橄榄油10ml/kg，24h后眶静脉取血，2500rpm离心15min，取血清测定ALT，取血后立即解剖小鼠取部分肝脏精称、匀浆测定肝组织内TG，结果进行组间t检验，见表2。
表2本中药组合物对CCl4所致肝损伤小鼠的影响(
)
| 组别 | 动物数(n) | ALT(U) | 肝内TG(mmo1/100g) |
| 正常对照组模型对照组高剂量组中剂量组低剂量细护肝片组 | l01010101010 | 50.5±21.8239.5士52.6###142.3±102.6#*176.3±97.4###243.1士80.3###&169.2士40.7###** | 0.694±0.2070.922±0.117#0.526±0.080***$0.628±0.101***0.642士0.136***0.677±0.129**&& |
注：与正常对照组比#P＜0.05，###P＜0.001；与模型对照组比*P＜0.05，**p＜0.01，***P＜0.001；与高剂量组比&P＜0.05；与护肝片组比$P＜0.05。
由表2结果可见，小鼠ip给予CCl4后血清ALT含量和肝内TG含量均显著升高。给予本中药组合物浸膏后，高剂量可使小鼠升高的血清ALT显著降低，作用强度与护肝片相当。
本中药组合物浸膏药物高、中、低剂量可使升高的肝内TG极显著降低，与模型对照组比较有极显著性差异，且高剂量作用强度优于护肝片。
2.3对高脂饮食所致大鼠高血脂的影响
2.3.1对高脂饮食所致大鼠高血脂的影响
Wistar雄性大鼠60只，体重120-140g，分为6组：正常对照组、模型对照组、洛伐他汀对照组、本中药组合物浸膏高、中、低剂量组。除正常对照组外各鼠ig脂肪乳1ml/100g，每天一次，连续7天。正常对照组ig等量NS。进行成模检测，然后随机分组，第8天开始给药，1ml/100g，每天一次，连续10天，正常对照组ig等量NS。末次给药后禁食12小时，取血前1小时灌胃，然后眼眶取血，2500rpm离心15min，取血清，测定CHO、TG、LDL、HDL结果进行组间t检验，见表3。
表3本中药组合物浸膏对脂肪乳高脂大鼠血脂代谢的影响(
)
| 组别 | 动物数(n) | 血CHO(mmol/L) | 血TG(mmol/L) | 血LDL(mmol/L) | 血HDL(mmol/L) |
| 正常组模型组洛伐他汀组高剂量组中剂量组低剂量组 | 101010101010 | 2.09±0.273.09+0.33###2.27±0.39***2.45±0.22##***2.55±0.32##**2.70±0.31###*$ | 1.33±0.212.16±0.31###1.68±0.19###*1.64±0.18###*1.85±0.35###*1.91±0.26### | 0.88±0.321.51±0.40##1.08±0.43*0.90±0.32**1.19±0.32#1.24±0.37#$ | 0.66±0.180.43±0.09##0.57±0.13*0.58±0.10**0.56±0.12*0.53±0.09#* |
注：与正常对照组比#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001；与模型对照组比*P＜0.05**P＜0.01，***P＜0.001；与高剂量组比$P＜0.05。
由表3结果可见，人鼠灌胃给予高脂饮食后血中CHO、TG、LDL均显著升高，血HDL显著降低，给予本中药组合物高、中、低剂量可使升高的CHO显著的降低，与模型对照组比较有极显著性差异；给予本中药组合物高、中剂量可使升高的TG显著的降低，与模型对照组比较有显著性差异。本中药组合物高剂量可以显著降低升高的血LDL的含量；本中药组合物可以高中剂量可升高降低的血清HDL。本中药组合物大剂量对上述四个指标的改善作用与阳性药洛伐他汀相当。
2.3.2对蛋黄乳剂所致小鼠高血脂的影响
昆明种雄性小鼠60只，体重18-22g，分为6组：正常对照组、模型对照组、烟酸对照组、本医药组合物高、中、低剂量组，预先给药，按0.25ml/10g体积ig，每天一次，连续5天，正常、模型对照组ig等量水。取1-2日新鲜鸡蛋黄用生理盐水配成75％蛋黄乳液备用。上述小鼠除正常对照组外，其余各组于实验前14小时禁食，灌胃2小时后腹腔注射蛋黄乳液0.5ml/只，20小时后眶静脉取血，放置30分钟，2500rpm离心15min，取血清，测定CHO水平，结果进行组间t检验，见表4。
表4.本中药组合物浸膏对蛋黄乳致小鼠血脂改变的影响(
)
| 组 别 | 动物只数(n) | 血CHO(mmol/L) |
| 正常对照组损伤对照组烟酸组高剂量组中剂量组低剂量组 | 101010101010 | 2.00±0.223.23±0.38###2.22±0.29***2.64±0.24###***$$2.74±0.36###**$$2.81±0.31###*$$$ |
注：与正常对照组比#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001；与模型对照组比*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；与烟酸对照组比$P＜0.05，$$P＜0.01，$$$P＜0.001。
由表4结果可见，蛋黄乳所致小鼠血CHO水平极显著升高，给予本中药组合物浸膏后可使升高的CHO显著降低，其药物高、中、低剂量之间的药效作用强度有一定的剂量依赖关系，与模型对照组比较药物高、中、低剂量分别有极显著、非常显著、显著性差异，但其作用强度不如烟酸。
3.毒理学实验
3.1急性毒性实验
按照急性毒性试验要求进行预试，发现受试药物无法测出LD50。故进行一日内最大给药量试验。取上述小鼠40只，禁食不禁水12小时后，按体重随机分为给药组和水对照组，每组20只，给药组给含生药量2.4g/ml浓度的药液0.4ml/10g，ig一天2次，使一日内给药剂量达合生药量192.0g/kg，水对照组给同等体积的水ig。各组动物给药后，每盒5只，正常饲养，密切观察，均连续观察七天，记录可能出现的毒性反应和死亡情况。
给药后，小鼠外观毛色光亮，行为活动正常，无异常病理性神经反射出现，七天中进食良好，末见其它异常表现，体重变化与水对照组相比无明显差异且无一动物死亡。(见表5)
肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等主要脏器，无明显的出血、组织变性、坏死等大体病理改变。
表5、本中药组合物浸膏对小鼠体重的影响(
)
| 组别 | 给药量(g/kg/d) | 动物数(只) | 实验前体重(g) | 实验后体重(g) |
| 对照组给药组 | 192.0 | 2020 | 19.28±0.5519.12±0.49 | 23.95士0.8223.66士0.67 |
受试药物临床70kg人日用量为18.3g/kg。一日内给小鼠灌胃受试药物合生药量192.0g/kg时，连续观察7天，仍无一死亡，相当于临床70kg人每公斤体重日用量的734.43倍以上，说明本品低毒、安全。
通过考察本中药组合物对酒精性脂肪肝大鼠肝功能的影响，发现本中药组合物能使模型大鼠升高的血清AST、ALT显著降低。并且药效强度与药物剂量之间有一定的依赖关系。本中药组合物在降低血清AST方面中、低剂量的作用强度与联苯双酯相当，在降低血清ALT方面高剂量的作用强度优于护肝片，与联苯双酯相当。在由CCL4引起的小鼠化学性肝损伤模型中，本中药组合物可以降低小鼠升高的血清ALT作用强度与护肝片相当，并且本中药组合物能显著降低动物肝脏TG含量，且高剂量组作用强度优于护肝片。这一结果表明本中药组合物能有效地保护肝脏细胞降低血清转氨酶活性，其对肝脏的保护作用强度与联苯双酯相当并且优于护肝片。
通过考察本中药组合物对高脂饮食造成的大鼠脂质代谢紊乱的影响，发现本中药组合物能有效地逆转大鼠高脂饮食后血清生化指标的异常。其中本中药组合物高剂量的药效强度与洛伐他汀相当。蛋黄乳导致的小鼠CHO升高，本中药组合物可以显著降低升高的血清CHO，但作用强度不如烟酸。
在急性毒性试验中，未能得出本中药组合物LD50。在最大给药量试验中，当给药量达到生药量192.0g/kg即相当于临床70kg人每公斤体重日用量的734.43倍以上时，末见实验动物有明显的毒性反应。说明本中药组合物安全性高。
由于脂肪肝特别是酒精性脂肪肝患者以及化学性肝损伤患者往往会出现食欲减退、恶心、呕吐、嗳气、有疲乏感、食后常腹胀等临床表现，所以在本发明所述的中药组合物或口服制剂中另可单独或是组合加入鸡内金(制)、玫瑰花、青皮。其目的是用于改善脂肪肝患者尤其是酒精性脂肪肝患者以及化学性肝损伤患者的消化功能。
本发明所述中药组合物在其口服制剂的制备过程中可以将其挥发油环糊精包合物、提取物浸膏干燥细粉和或鸡内金细粉经混合直接装入胶囊制成胶囊剂，也可以加入其它医药上可接受的辅料或保健食品可接受的辅料，以多种口服制剂方式实施。
以下列举的方式并不限制可以采用现有技术中任何已知的制剂类型和方法来实施这一应用：口服制剂包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液。胶囊剂包括硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等；片剂包括普通片、口含片、缓释片等。
以下通过实施例形式再对本发明的内容作进一步的详细说明，但不应就此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。在不脱离本发明上述技术措施前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本发明的范围内。
实施例1
黄芪300g、枸杞200g、葛根150g加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。白术200g加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量环糊精优选为β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集；白术药渣与黄芪等三味药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至滤液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压同收乙醇，上述浓缩液与黄芪等三味醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入白术挥发油环糊精包合物，混匀，装入胶囊制成1000粒胶囊，即得。
实施例2
制鸡内金100g粉碎成细粉，灭菌；黄芪300g、枸杞200g、葛根150g加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用。白术200g加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集；白术药渣与黄芪等三味药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，上述浓缩液与黄芪等三味药的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入白术挥发油β-环糊精包合物、制鸡内金细粉，混匀，装入胶囊制成1000粒胶囊，即得。
实施例3
黄芪300g、枸杞200g、葛根150g加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用；白术200g、玫瑰花90g加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集。提取挥发油后的药渣与黄芪等三味药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，与上述黄芪等醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入挥发油β-环糊精包合物，混匀，装入胶囊制成1000粒胶囊，即得。
实施例4
黄芪300g、枸杞200g、葛根150g加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用；白术200g、青皮90g加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集；提取挥发油后的药渣与黄芪等三味药渣共同加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，与上述黄芪等的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入挥发油β-环糊精包合物，混匀，装入胶囊制成1000粒胶囊，即得。
实施例5
制鸡内金100g粉碎成细粉，灭菌；黄芪200g、枸杞200g、葛根150g加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用；其余白术200g、青皮90g加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集；提取挥发油后的药渣与黄芪等三味药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，与上述黄芪等的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入挥发油β-环糊精包合物、制鸡内金细粉，混匀，装入胶囊制成1000粒胶囊，即得。
实施例6
制鸡内金100g粉碎成细粉，灭菌；黄芪200g、枸杞200g、葛根150g加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用；其余白术200g、玫瑰花90g加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集；提取挥发油后的药渣与黄芪等三味药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，与上述黄芪等的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入挥发油β-环糊精包合物、制鸡内金细粉，混匀，装入胶囊制成1000粒胶囊，即得。
实施例7
黄芪200g、枸杞200g、葛根150g加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用；其余白术200g、青皮90g、玫瑰花90g加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集；提取挥发油后的药渣与黄芪等三味药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，与上述黄芪等的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入挥发油β-环糊精包合物，混匀，装入胶囊制成1000粒胶囊，即得。
实施例8
制鸡内金100g粉碎成细粉，灭菌；黄芪200g、枸杞200g、葛根150g加8倍量70％乙醇回流提取二次，每次2小时，分次滤过，合并提取液，减压回收乙醇，备用；其余白术200g、青皮90g、玫瑰花90g加10倍量水浸泡4小时，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油用6倍量β-环糊精，40℃下包合1小时，蒸馏后的水溶液另器收集；提取挥发油后的药渣与黄芪等三味药渣合并加8倍量水煎煮三次，每次2小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10(60℃测)，加乙醇至浓缩液含醇量达50％，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，与上述黄芪等的醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.28～1.30(60℃测)的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入挥发油β-环糊精包合物、制鸡内金细粉，混匀，装入胶囊制成1000粒胶囊，即得。
Claims (12)
1、一种用于治疗或辅助治疗脂肪肝或对化学性肝损伤有保护作用的中药组合物，包括黄芪、枸杞、葛根、白术。
2、权利要求1所述的中药组合物，特征在于还可以单独或组合加入制鸡内金、玫瑰花、青皮。
3、权利要求1所述的中药组合物，特征是黄芪150-450份、枸杞100-300份、葛根50-250份、白术100-300份。
4、根据权利要求3所述的中药组合物，特征在于还可单独或组合加入制鸡内金50-150份、玫瑰花50-150份、青皮50-150份。
5、权利要求1、2或3的中药组合物，其特征是还包括医药上或保健食品上可接受的辅料。
6、权利要求5的中药组合物，特征是医药上或保健食品可接受的辅料为环糊精或者环糊精和其他医药上或保健食品可接受的辅料的组合。
7、根据权利要求6所述的中药组合物，特征是环糊精为β-环糊精。
8、根据权利要求6或7所述的中药组合物，特征是该组合物为口服制剂。
9、根据权利要求8所述的中药组合物，特征是口服制剂包括胶囊、片剂、颗粒剂或口服液。
10、根据权利要求9所述的中药组合物，特征是口服制剂包括硬胶囊、缓释胶囊、软胶囊、缓释片或口含片。
11、根据权利要求1、2或3所述的中药组合物在制备治疗或辅助治疗脂肪肝药物中的应用。
12、根据权利要求1、2或3所述的中药组合物在制备对化学性肝损伤有保护作用的保健食品中的应用。
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