CN115414458A - 一种治疗乙型肝炎的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种治疗乙型肝炎的中药组合物，所述中药组合物的配方和配比重量份用量为：柴胡12‑15份、郁金12‑15份、虎杖10‑14份、凤眼草10‑14份、扶桑花10‑14份、藏青果10‑14份、白术4‑8份、茯苓4‑8份、黄芪4‑8份、太子参4‑8份、灵芝4‑8份、三七4‑8份、丁公藤2‑4份、穿根藤2‑4份。该中药组合物配伍独特且合理、无毒副作用，治疗效果明显。

Description

一种治疗乙型肝炎的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药领域，具体涉及一种治疗乙型肝炎的中药组合物及其制备方法。

背景技术

肝炎是肝脏炎症的统称。通常是指由多种致病因素--如病毒、细菌、寄生虫、化学毒物、药物、酒精、自身免疫因素等使肝脏细胞受到破坏，肝脏的功能受到损害，引起身体一系列不适症状，以及肝功能指标的异常。由于引发肝炎的病因不同，虽然有类似的临床表现，但是在病原学、血清学、损伤机制、临床经过及预后、肝外损害、诊断及治疗等方面往往有明显的不同。需要注意的是，通常我们生活中所说的肝炎，多数指的是由甲型、乙型、丙型等肝炎病毒引起的病毒性肝炎。

在中医药学的历代文献中，并无肝炎的病名，根据其特点和表现，把肝炎与“胁痛”、“郁证”、“黄疸”、“肝着”等疾病相联系起来。肝脏五行属木，性喜条达，主疏泄，体阴而用阳。肝主藏血，血养肝，肝血充足，则阴血能柔养肝体，肝体得养后能发挥疏泄气血、调畅气机的功用。肝主疏泄，肝疏泄正常，则血行畅达，可使血归于肝，而后藏血充足，能发挥通脉、充筋等滋养脏腑的特性。所以疏泄可补肝体之阴，藏血可助肝“将军”之。肝脏病症常因疏泄不调为主，疏泄太过或疏泄不及，可伤及肝气，治疗当以疏达理气协助肝木。若因肝阴肝血不足，致使“肝体不足”，治当滋阴、养血以益肝体。脾属土，运纳水谷精微，胃为仓廪之官，收纳饮食水饮，两者为后天之本，气血生化之源。当湿热毒邪侵袭人体，肝体受邪而致阴亏，肝失疏泄，肝损及脾，脾失健运，运化失司，气血生降失调，可致气滞、脾虚、痰湿、血瘀等一系列证候的出现，可见病位始终不离肝脾。《金匮要略》云:“见肝之病，知肝传脾，当先实脾。”又有“故实脾，则肝自愈。此治肝补脾之要妙也。”病邪侵犯肝脏后，影响了肝之疏泄和脾之健运，气郁、湿停、痰聚三者作用于人体。而“初病在于经和气，久病在于络和血”，长期难愈而致血行阻滞，进而形成了毒恋、气滞、痰聚、血瘀的病理状态。因此在治疗中采用解毒、活血、化痰、消瘀的综合治疗法用于清除肝炎病毒病邪，取得了较显著的疗效。

现有技术中公开了很多种治疗慢性乙型肝炎的中药组合物，最接近的现有技术例如：CN201510246343.0公开了一种治疗慢性乙型肝炎的中药组合物，由如下重量份数的中药组成：柴胡5-18g，枳壳9-26g，元胡7-19g，郁金8-21g，木香3-9g，香附6-15g，黄芪15-40g，太子参5-18g，白术9-16g，扁豆11-27g，茯苓10-20g，虎杖8-45g，土茯苓18-40g。该专利申请文件虽然公开了与本申请配方中的几种成分，但是该专利申请文件简单粗糙，缺乏实验数据支撑，且配伍有待改善。

因此，研发一种配伍合理、无毒副作用，治疗效果明显的用于治疗乙型肝炎的中药组合物具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是研发一种治疗乙型肝炎的中药组合物及其制备方法，所述中药组合物配伍独特且合理、无毒副作用，治疗效果明显，制备方法简单合理。

本发明的技术方案是：

一种治疗乙型肝炎的中药组合物，包括柴胡，所述中药组合物的配方和配比重量份用量为：柴胡12-15份、郁金12-15份、虎杖10-14份、凤眼草10-14份、扶桑花10-14份、藏青果10-14份、白术4-8份、茯苓4-8份、黄芪4-8份、太子参4-8份、灵芝4-8份、三七4-8份、丁公藤2-4份、穿根藤2-4份。

优选的方案一：所述中药组合物的配方和配比重量份用量为：柴胡12份、郁金12份、虎杖10份、凤眼草10份、扶桑花10份、藏青果10份、白术6份、茯苓6份、黄芪6份、太子参6份、灵芝6份、三七6份、丁公藤4份、穿根藤2份。

优选的方案二：所述中药组合物的配方和配比重量份用量为：柴胡15份、郁金15份、虎杖14份、凤眼草10份、扶桑花10份、藏青果12份、白术8份、茯苓8份、黄芪8份、太子参4份、灵芝4份、三七4份、丁公藤2份、穿根藤4份。

优选的制备方法为：以上十四味按上述比例，先将柴胡、三七、太子参和郁金粉碎成第一细粉，灭菌备用；其余药物加水煎煮2-3次，每次次加8-10倍水煎煮1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.306，60℃的稠膏，干燥，粉碎成第二细粉，加入上述第一细粉，混合均匀，即得。

进一步的，所述灭菌是为湿热灭菌，具体是120℃-125℃下湿热灭菌15min-30min。

本发明的方解如下：

柴胡：辛、苦，微寒。归肝、胆、肺经。疏散退热，疏肝解郁，升举阳气。用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子宫脱垂，脱肛。现代药理研究明，其活性成分为皂苷类、多糖类、挥发油、甾醇类、黄酮类、香豆素类、多元醇、木护肝脂素类、色氨酸、腺苷、尿苷、油酸和微量元素。具有抗抑郁、抗炎、镇咳、抗肿瘤等作用。

郁金：辛、苦，寒。归肝、心、肺经。活血止痛，行气解郁，清心凉血，利胆退黄。用于胸胁刺痛，胸痹心痛，经闭痛经，乳房胀痛，热病神昏，癫痫发狂，血热吐鲍，黄疸尿赤。《本草经读》：“郁金，气味苦寒者，谓气寒而善降，味苦而善泄也。”现代药理研究表明郁金可有效改善转氨酶指标。

虎杖：微苦，微寒。归肝、胆、肺经。清热利湿，化瘀定痛，解毒。虎杖中主要含有蒽醌类、二苯乙烯类、黄酮类、香豆素类以及一些脂肪酸类化合物，具有多种药理作用，包括抗炎、抗病毒、抗菌、调血脂、抗血栓、改变血流变、扩张血管、保护心肌、抗氧化、抗肿瘤，改善阿尔茨海默病及预防艾滋病等。

苦参：苦，寒。归心、肝、胃、大肠、膀胱经。清热燥湿，杀虫，利尿。用于热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风；外治滴虫性阴道炎。现代药理研究表明，苦参碱、氧化苦参碱是苦参中最主要的生物碱类成分，抗炎、镇痛、抗肿瘤作用显著。

灵芝：甘，平。归心、肺、肝、肾经。补气安神，止咳平喘。用于心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，虚劳短气，不思饮食。现代药理研究表明，其主要成分为灵芝多糖、三萜类化合物、核苷、氨基酸、甾醇、生物碱，具有调节免疫、抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、抗氧化等作用。

三七：甘、微苦，温。归肝、胃经。散瘀止血，消肿定痛。用于咯血，吐血，细血，便血，崩漏，外伤出血，胸腹刺痛，跌扑肿痛。现代药理研究表明，其活性成分主要为皂苷类、黄酮类、三七多糖。具有镇痛、止血、抗血栓、促进造血、抗脑缺血、抗心律失常、抗炎、抗肿瘤、保肝等功效。

太子参：甘、微苦，平。归脾、肺经。益气健脾，生津润肺。用于脾虚体倦，食欲不振，病后虚弱，气阴不足，自汗口渴，肺燥干咳。现代药理研究表明，太子参中含有多种化学成分，包括微量元素、氨基酸、糖类、核苷类、磷脂类、环肽类、脂肪酸类、油脂类、挥发性成分等，药理活性主要有心肌保护、增加免疫、抗氧化、降血糖、抗应激、抗疲劳等。

黄芪：甘，微温。归肺、脾经。补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力，食少便澹，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，内热消渴，血虚萎黄，半身不遂，痹痛麻木，痈疽难溃，久溃不敛。现代药理研究表明，黄芪的主要化学成分包括多糖、皂苷类、黄酮类及氨基酸、微量元素、甾醇类物质等；具有抗肿瘤、保护心脑血管、提高免疫功能、保护肺功能、保护肾组织、保护肝损伤、保护肠功能等作用。

凤眼草：苦、涩，凉；归胃、大肠、小肠经。清利湿热，止痢止血，疏风止痒。现代药理研究表明，其化学成分为凤眼草酮，卡帕里酮、凤眼草内酯、2,6-二甲氧基对醌等。种子含油约35％及2,6-二甲氧基酸，臭椿苦酮，臭椿内酯，楂杷壬酮，苦木素等。抗菌作用显著。

穿根藤：苦辛，平；归肝，心经；祛风湿，壮筋骨，止痛，消肿。治风湿关节痛，咽喉肿痛，痈肿，疥疮。现代药理研究表明，穿根藤中含有熊果酸，豆甾醇，β-谷甾醇，高级脂肪酮，乌楠醌等。

丁公藤：辛,温。归肝、脾、胃经。祛风除湿，消肿止痛。用于风湿痹痛，半身不遂，跌扑肿痛。现代药理研究表明，其化学成分主要为包公藤甲素、包公藤丙素、包公藤乙素即东莨菪素、东莨菪甙及微量的咖啡酸及绿原酸。具有抗炎、促进细胞免疫和体液免疫功能、缩瞳、降低眼内压、减慢心率、增加心肌收缩力、降低心肌耗氧量、改善心功能、促进学习记忆功能及其他作用。

扶桑花：性寒，味甘。归心经、肺经、肝经、脾经。清肺、化痰、凉血、解毒。现代药理研究表明，其活性成分为矢车菊素-二葡萄糖甙、矢车菊素槐糖葡萄糖甙和槲皮素二葡萄糖甙。扶桑花提取物有降压作用，对平滑肌有致痉作用，还有抗生育作用。

藏青果：性平，味苦、微甘、涩。归肺经、大肠经。清热生津、利咽解毒。现代药理研究表明，其化学成分为甲酚、麝香草酚、维生素C、柠檬烯、对-聚伞花素、莰烯、橙花醇、龙牛儿醇、S-杜松烯、B-石竹烯、a-烯、橄榄醇。具有降血糖、雌激素样、抗菌、祛痰等作用。

白术：苦、甘，温。归脾、胃经。健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎。用于脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安。

茯苓：甘、淡，平。归心、肺、脾、肾经。利水渗湿，健脾，宁心。用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便澹泄泻，心神不安，惊悸失眠。

方中柴胡味苦性寒，归肝、胆、肺经。疏散退热，疏肝解郁，升举阳气。轻清升散，善疏散少阳半表半里之邪，又能疏肝解郁，且善升举阳气。郁金辛、苦，寒。归肝、心、肺经。活血止痛，行气解郁，清心凉血，利胆退黄。郁金既入气分，又入血分，功偏行气解郁，凉血散瘀。二药合用，一气一血，气血并治，行气解郁之力增强。故以柴胡、郁金为君药。

虎杖利湿退黄，清热解毒，散瘀止痛；凤眼草清热利湿；扶桑花凉血解毒，利水消肿；藏青果清热生津，四者共用，助君药利湿清热，解毒止痛之功；用为臣药。

白术、茯苓健脾祛湿，使运化有权，气血生化有源；黄芪、太子参同用具有益气升阳、健脾补肺之功。灵芝补气安神，止咳平喘；助君药行气止痛之功；三七散瘀止痛，丁公藤、穿根藤消肿止痛通络；三药合用助君药散瘀止痛通络之功；诸药合用，同为佐使，共凑疏肝理气、清热利湿、健脾益气、通络止痛之功。

与现有技术相比，本发明的优势是：

1、本发明的中药组合物以柴胡、郁金为君药，以虎杖、凤眼草、扶桑花和藏青果为臣药，四者共用辅助君药，再辅助其他佐使药物，使得配伍更合理，药效更好。

2、本发明的中药组合物制备方法简单，临床实验效果有效率高。

3、与相似配方相比，本发明中有几种独特的添加成分，这几种药物的加入与其他常规药物配方之间产生了协调增效作用，疗效更好。

以下结合附图和具体实施方式对本发明的详细结构作进一步描述。

附图说明

图1为本发明的中药组合物制备工艺流程图。

具体实施方式

实施例1

一种治疗乙型肝炎的中药组合物，所述中药组合物的配方和配比重量份用量为：柴胡12份、郁金12份、虎杖10份、凤眼草10份、扶桑花10份、藏青果10份、白术6份、茯苓6份、黄芪6份、太子参6份、灵芝6份、三七6份、丁公藤4份、穿根藤2份。

制备方法：以上十四味，柴胡、三七、太子参和郁金粉碎成第一细粉，灭菌备用(湿热灭菌，具体是121℃下湿热灭菌15min)；其余虎杖等十味，加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2.5小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(60℃)的稠膏，干燥，粉碎成第二细粉，加入上述饮片第一细粉，混合均匀，制丸，干燥，即得。

具体工艺控制参数如表1所示：

表1详细制备控制参数

对比例1

一种治疗乙型肝炎的中药组合物，所述中药组合物的配方和配比重量份用量为：柴胡12份、郁金12份、虎杖10份、白术6份、茯苓6份、黄芪6份、太子参6份、灵芝6份、三七6份；

制备方法与实施例1相同：将柴胡、三七、太子参和郁金粉碎成第一细粉，灭菌备用(湿热灭菌，具体是121℃下湿热灭菌15min)；其余虎杖等，加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2.5小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.30(60℃)的稠膏，干燥，粉碎成第二细粉，加入上述饮片第一细粉，混合均匀，制丸，干燥，即得。

小鼠经口灌服实施例1的中药组合物单次给药毒性试验

目的：本项研究按照国家GLP规范要求实施，观察ICR小鼠经口灌服实施例1的中药组合物后出现的急性毒性反应和死亡情况，为其重复给药毒性试验提供参考资料。

实验材料

受试物(供试品)：实施例1的中药组合物(谷医堂(湖南)健康科技有限公司)，

含量：1g浸膏含生药2.405g，临床拟用剂量：41.25g生药/日，

临床拟用途径：口服，一次5.5g，一日3次，临床拟用疗程：2个月；

试剂：异氟烷(21101001，深圳市瑞沃德生命科技有限公司)，规格：100mL/瓶；

实验动物：SPF级ICR小鼠40只，雌雄各半，给药时体重范围：17.0～21.8g。(湖南斯莱克景达实验动物有限公司，NO.430727211102461154)

试验方法：选用检疫合格的SPF级ICR小鼠40只，雌雄各半，体重17.0～21.8g，310mm×205mm×180mm笼里饲养，每笼5只。按照国际(GB14925-2010)SPF级实验动物环境条件要求进行饲养，动物检疫和适应环境饲养3天。按性别体重随机分为2组，分别为空白对照组(纯水)、实施例1的中药组合物组(77.0g生药/kg)，每组20只。实验前禁食不禁水12小时以上，然后按40mL/kg分别经口灌服纯水和实施例1的中药组合物，给药当日给药2次，在每次给药后0～4小时内密切仔细观察记录各组动物的中毒表现和特点、毒性反应出现及恢复时间以及死亡情况等，然后每天观察2次，上下午各观察一次，连续观察14天。分别于给药前(给药当天)及给药后第4天、第7天、第10天和第14天对动物进行称重，记录动物体重变化及死亡情况。本试验按照公司规定进行统计分析，数据有效数字修约按照四舍五入进行。用统计学软件分析，体重均采用均数±标准差

表示，两组间比较满足正态性和方差齐性时采用t检验，数据不满足正态性或方差齐性时采用Mann-Whitney Test，P＜0.05表示有统计学意义，P＜0.01表示所检验的差别有非常显著性意义。

试验结果：1)对一般活动状况的影响、动物中毒症状及死亡情况：灌胃给药结束后0～4小时内，空白对照组和实施例1的中药组合物组小鼠自主活动、精神状态和饮食情况均未见明显异常，未见相关毒性反应及动物死亡。给药后连续观察14天，空白对照组和实施例1的中药组合物组小鼠自主活动、精神状态和饮食情况均未见明显异常，未见相关毒性反应及动物死亡。2)对体重的影响：动物在给药前(给药当天)、给药后第4天、第7天、第10天和第14天称重，实施例1的中药组合物组与空白对照组动物体重未见明显差异。说明ICR小鼠经口灌服实施例1的中药组合物，对小鼠体重增长无明显影响。3)试验结束时对ICR小鼠大体解剖肉眼观察结果：各器官表面和切面均未见明显异常情况。

结论：在本试验条件下，小鼠经口灌服实施例1的中药组合物，给药体积为40mL/kg，给药当日给药2次，累积剂量为77.0g生药/kg，相当于成人临床拟用公斤体重给药量的131倍，动物未见相关毒性反应及死亡。

6.结果与分析

6.1对一般活动状况的影响：在两次灌胃给药结束后0～4小时内，空白对照组和实施例1的中药组合物组ICR小鼠自主活动、精神状态和饮食情况均未见明显异常。给药后继续观察14天，空白对照组和实施例1的中药组合物组ICR小鼠自主活动、精神状态和饮食情况均未见明显异常。

6.2动物中毒症状及死亡情况：整个试验期间未见动物死亡。

6.3体重：动物在给药前(给药当天)，给药后第4天、第7天、第10天和第14天称重，实施例1的中药组合物组与空白对照组比较动物体重未见明显差异。说明ICR小鼠经口灌服实施例1的中药组合物，对小鼠体重增长无明显影响。详见附表2、3、4。

6.4大体解剖检查结果：试验结束后采用异氟烷麻醉处死所有的试验动物，并对动物进行大体解剖检查，肉眼观察各脏器(肝脏、肾脏、脾脏、心脏、脑、皮肤等)的位置、大小、色泽、粘连等，并检查脏器表面和切面的质地、有无积液及肿瘤等异常改变，检查结果显示各器官表面和切面均未见明显异常情况。

7.结论与评价

在本试验条件下，小鼠经口灌服实施例1的中药组合物，给药体积为40mL/kg，给药当日给药2次，累积剂量为77.0g生药/kg，相当于成人临床拟用公斤体重给药量的131倍，动物未见相关毒性反应及死亡。

表2实施例1的中药组合物对ICR小鼠体重的影响

表3实施例1的中药组合物对雌性ICR小鼠体重的影响

表4实施例1的中药组合物对雄性ICR小鼠体重的影响

大鼠经口灌服实施例1的中药组合物6个月重复给药毒性试验

目的：本项目研究按照国家GLP规范要求实施，观察SD大鼠经口灌服不同剂量实施例1的中药组合物后的毒性反应，预测实施例1的中药组合物可能引起的临床不良反应，为临床试验中的毒性反应的监测及解救措施、临床试验和临床用药提供参考。

实验材料

受试物(供试品)：实施例1的中药组合物(谷医堂(湖南)健康科技有限公司)临床拟用剂量：41.25g生药/日；临床拟用途径：口服，一次5.5g，一日3次；临床拟用疗程：2个月；实验动物：SPF级SD大鼠120只，雌雄各半，使用时体重范围：180.1～224.7g。(湖南斯莱克景达实验动物有限公司，No.430727211102451612)

试验方法：选用合格SD大鼠120只，雌雄各半，体重180.1～224.7g，475×350×200mm³笼里饲养，每笼5只。按照国标(GB14925-2010)SPF级实验动物环境条件要求进行饲养，动物检疫和适应环境饲养6天。选用检疫合格的SD大鼠120只，雌雄各半，按性别体重随机分为4组，分别为空白对照组、实施例1的中药组合物低、中、高剂量组(3.6、7.2、14.4g生药/kg)，每组30只动物，各组均按15mL/kg体积灌胃给药，连续给药6个月，并经4周停药恢复期。给药中期末(第13周末)按计划解剖40只大鼠，给药末期末(第26周末)按计划解剖40只大鼠，恢复期末(第30周末)按计划解剖40只大鼠，雌雄各半。检查项目包括：一般临床观察；体重、摄食量测定；血液学常规、血液生化、凝血、尿液、脏器系数测定；组织病理学检查。

试验结果：

一般临床观察：给药期和恢复期观察期间，实施例1的中药组合物各剂量组与同期空白对照组比较，动物的外观体征、行为活动，各腔道分泌物及排泄物及动物的一般状况等未出现与药物毒性相关的异常。试验期间，所有动物均按计划实施安乐死，试验过程无动物异常死亡。

体重：与同期空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组体重未见有毒理学意义的异常。

摄食量：与同期空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组平均摄食量未见有毒理学意义的异常。

血液学常规检查：与同期空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组血液学指标未见有毒理学意义的异常。

血液生化检查：与同期空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组血液生化指标未见有毒理学意义的异常。

凝血检查：与同期空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组凝血指标未见有毒理学意义的异常。

脏器系数：与同期空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组脏器系数指标未见有毒理学意义的异常。

大体解剖：给药中期和恢复期末解剖的动物肉眼观察均未见明显病理改变。

病理检查：与空白对照组比较,显微镜下观察给药末期和恢复期解剖的实施例1的中药组合物高剂量组、实施例1的中药组合物高剂量组动物的病变类型及病变动物数量、病变程度未见明显差异，判定为大鼠背景性病理改变，与受试物无关。

结论：在本试验条件下，SD大鼠经口灌服实施例1的中药组合物6个月，实施例1的中药组合物未见明显毒性反应剂量(NOAEL)为14.4g生药/kg(约相当于70kg成人临床拟用剂量的3.9倍(按体表面积计)和24倍(按公斤体重计))。

表5实施例1的中药组合物对动物体重的影响

注：与空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组均无统计学差异。

表6实施例1的中药组合物对动物平均摄食量的影响

注：与空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组均无统计学差异。

表7实施例1的中药组合物对动物血液学的影响

注：与空白对照组比较，^*P<0.05

表8实施例1的中药组合物对动物血液生化指标的影响

注：与空白对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01。

表9实施例1的中药组合物对动物凝血的影响

注：与空白对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组均无统计学差异。

表10实施例1的中药组合物对动物脏器系数的影响

注：与空白对照组比较，^*P<0.05。

实施例1的中药组合物药效学试验

实验一对肝郁脾虚大鼠模型的影响

1.研究目的

本实验选用通过构建大鼠肝郁脾虚模型，并灌胃给予大鼠不同剂量的实施例1和对比例1的中药组合物药液，观察实施例1和对比例1的中药组合物对肝郁脾虚大鼠模型的影响，为临床应用提供实验依据。

2.实验材料

2.1受试物(供试品)：实施例1和对比例1的中药组合物(谷医堂(湖南)健康科技有限公司)，1g浸膏含生药2.405g，丸剂，临床拟用剂量：41.25g生药/日；临床拟用途径：口服，一次5.5g，一日3次；临床拟用疗程：2个月。

对照药品：逍遥丸(仲景宛西制药股份有限公司)，规格：每8丸相当于饮片3g

主要试剂：蔗糖(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)，规格：500g。

实验动物：SPF级SD雄性大鼠90只，体重范围：164.5～226.7g；(湖南斯莱克景达实验动物有限公司)

3试验方法

3.1受试品及对照品剂量设计

实施例1和对比例1的中药组合物临床拟用剂量为41.25g生药/日，根据魏伟编《药理实验方法学》，第四版，动物种属间等效剂量体表面积的折算表，大鼠等效剂量为41.25×0.018÷0.2＝3.71g生药/kg，本次试验选用最大临床拟用量0.5、1、2倍大鼠等效剂量作为低、中、高剂量组的给药量，分别为1.9、3.8、7.7g生药/kg。

逍遥丸(阳性对照)临床拟用剂量为9g/日，按体表面积法折算为大鼠等效剂量为9×0.018÷0.2＝0.81g/kg，本次试验选用最大临床拟用量2倍的大鼠等效剂量作为给药剂量，即1.62g/kg。见表11。

表11实施例1和对比例1的中药组合物给药剂量表

3.2药物配制

实施例1和对比例1的中药组合物：称取实施例1的中药组合物浸膏，加纯水搅拌混匀，分别配制成0.096g生药/mL、0.192g生药/mL、0.385g生药/mL的药液，每天1次，使用前搅拌均匀。

逍遥丸：取逍遥丸研磨成粉，并称取粉末，加纯水搅拌混匀，配制成0.08g/mL的药液，每天1次，使用前搅拌均匀。

3.3给药途径、方法

给药途径：经口灌服。给药体积：20mL/kg。给药频率与时间：1次/日。

给药期限：35天。

3.4分组与给药

检疫后，选取SD大鼠90只，雄性，按体重分层随机分为空白对照组、实施例1和对比例1低、中、高剂量组(1.9、3.8、7.7g生药/kg)、阳性对照组(逍遥丸，1.62g/kg)及模型对照组，每组10只，各组大鼠按20mL/kg灌胃给予相应剂量药液，1次/日，连续35天，空白对照组灌胃给予等体积纯水。采用饮食失节+过度疲劳+夹尾刺激联合造模，模型组动物隔日禁食和喂食、每日上午夹尾激怒大鼠30min、每日下午游泳10min，构建肝气郁结动物模型。于造模同时各组大鼠开始灌胃给药，每天1次，连续35d，空白对照组和模型对照组大鼠灌胃纯水。

3.5一般观察

给药前称动物体重，给药后密切观察并记录各组动物外观体征、行为活动、分泌物、排泄物、饮食情况、死亡情况等。

3.6检测指标

3.6.1每周对各组大鼠进行摄食量统计；

3.6.2给药期末进行糖水偏爱指数检测，糖水偏爱指数＝糖水消耗量/(糖水消耗量+纯水消耗量)。

3.6.3于给药结束前进行D-木糖排泄率检测。

3.7数据处理与统计分析

采用统计学软件进行数据统计，实验数据以

表示，多组间比较方差齐时进行正态性和方差齐性检验。如果满足正态性(P>0.05)，用单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并根据方差齐性情况选用LSD+Dunnet(方差齐)或Tamhane’s T2(方差不齐)进行比较分析。如果不满足正态性(P<0.05)，则用Kruskal-Wallis检验，并用Mann-Whitney检验进行两两比较分析。统计结果以α＝0.05为检验界限，其中P<0.05表示有统计学意义，P<0.01表示所检验的差别有非常显著性意义。

4实验结果

(1)对大鼠体重及摄食量的影响：与空白对照组比较，模型对照组第5周大鼠平均摄食量减少；与模型对照组比较，实施例1及对比例1的中药组合物低、中、高及逍遥丸组平均摄食量增加，但未见统计学差异。结果见表12。

(2)D-木糖测定值：与空白对照组比较，模型对照组的血清D-木糖含量明显降低(P<0.05)；与模型对照组比较，实施例1的中药组合物各剂量组的D-木糖含量明显升高(P<0.05)；对比例1的中药组合物低剂量组的D-木糖含量明显升高(P<0.05)；对比例1的中药组合物中、高剂量组及逍遥丸组D-木糖含量较模型对照组升高，但未见统计学差异。结果见表13。

(3)糖水偏爱指数结果：与空白对照组比较，模型对照组的糖水偏爱指数结果显著降低(P<0.01)；与模型对照组相比，实施例1的中药组合物各剂量组的糖水偏爱指数明显升高(P<0.05)，对比例1的中药组合物的高剂量组的糖水偏爱指数明显升高(P<0.05)；结果见表13。

表12肝郁脾虚大鼠模型对动物平均摄食量的影响

表13实施例1和对比例1的中药组合物对肝郁脾虚大鼠模型的影响

注：与空白对照组比较，“#”表示P<0.05，“##”表示P<0.01；与模型对照组比较，“*”表示P<0.05，“**”表示P<0.01。

5实验结论

在本试验条件下，SD大鼠灌胃不同剂量的中药组合物药液，实施例1和对比例1的中药组合物各剂量组均可增加大鼠的平均摄食量.。实施例1的中药组合物低、中、高各剂量组可明显增加肝郁脾虚大鼠的血清D-木糖含量，实施例1的中药组合物低、中、高各剂量组可明显提升肝郁脾虚大鼠糖水偏爱指数，表明实施例1的中药组合物低、中、高各剂量组对肝郁脾虚大鼠均具有较好的治疗作用，对比例1的中药组合物仅低剂量组可明显增加肝郁脾虚大鼠的血清D-木糖含量，对比例1的中药组合物仅高剂量组的糖水偏爱指数明显升高。实施例1血清D-木糖含量及糖水偏爱指数各剂量组明显优于对比例1组。

实验二对CCl₄致小鼠急性肝损伤模型的影响

1.研究目的

本实验通过CCl₄构建急性肝损伤模型，通过灌胃给予小鼠不同剂量的实施例1和对比例1的中药组合物药液，观察实施例1和对比例1的中药组合物对CCl₄致小鼠急性肝损伤模型的影响，为临床应用提供实验依据。

2.实验材料

2.1受试物(供试品)：实施例1和对比例1的中药组合物(谷医堂(湖南)健康科技有限公司)含量：1g浸膏含生药2.405g，临床拟用剂量：41.25g生药/日；临床拟用途径：口服，一次5.5g，一日3次；临床拟用疗程：2个月。

对照药品：护肝片(黑龙江葵花药业股份有限公司)；规格：糖衣片(片心重0.35g)主要试剂及仪器：CCl₄(广东光华科技股份有限公司)；规格：500mL/瓶实验动物：SPF级ICR小鼠90只，雌雄各半，体重范围：17.7～29.2g；(湖南斯莱克景达实验动物有限公司)

3.1受试品及对照品剂量设计

实施例1和对比例1的中药组合物临床拟用剂量为41.25g生药/日，根据魏伟编《药理实验方法学》，第四版，动物种属间等效剂量体表面积的折算表，小鼠等效剂量为41.25×0.0026÷0.02＝5.36g生药/kg，本次试验选用最大临床拟用量0.5、1、2倍小鼠等效剂量作为低、中、高剂量组的给药量，分别为2.9、5.8、10.6g生药/kg。

护肝片(阳性对照)的临床用量为4.2g/日，按体表面积法折算为小鼠等效剂量为4.2×0.0026÷0.02＝0.5g/kg，本次试验选用约2倍小鼠等效剂量作为阳性对照组的给药剂量，即1.09g/kg。见表14。

表14实施例1和对比例1的中药组合物给药剂量表

3.2药物配制

实施例1和对比例1的中药组合物：称取实施例1和对比例1的中药组合物浸膏，加纯水搅拌混匀，分别配制成0.144g生药/mL、0.289g生药/mL、0.529g生药/mL的药液，每天1次，使用前搅拌均匀。

护肝片：取护肝片研磨成粉，加纯水混匀，配制成0.05g/mL的药液，每天1次，使用前搅拌均匀。

3.3给药途径、方法

给药途径：经口灌服 给药体积：20mL/kg。

给药频率与时间：1次/日 给药期限：7天。

3.4造模分组与给药

检疫结束后，动物按性别体重随机分为9组，分别为空白对照组、模型对照组、实施例1和对比例1低剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性对照组(护肝片)。各剂量组每天按剂量给予相应的药液，每天1次，连续7天。于给药第6天给药1h后，模型组及各给药组按10mL/kg腹腔注射0.1％CCl₄橄榄油油溶液，空白对照组腹腔组设相同及剂量的橄榄油，末次给药前禁食12～16h，末次给药后1h，眼眶采血，并摘取小鼠肝脏。

3.5一般观察

给药前称动物体重，给药后密切观察并记录各组动物外观体征、行为活动、分泌物、排泄物、饮食情况、死亡情况等。

3.6检测指标

3.6.1分离血清检测血清中AST、ALT含量。

3.6.2对肝脏进行组织病理学检查。

3.7数据处理与统计分析

采用SPSS22.0软件进行数据统计，实验数据以

表示，多组间比较方差齐时进行正态性和方差齐性检验。如果满足正态性(P>0.05)，用单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并根据方差齐性情况选用LSD+Dunnet(方差齐)或Tamhane’s T2(方差不齐)进行比较分析。如果不满足正态性(P<0.05)，则用Kruskal-Wallis检验，并用Mann-Whitney检验进行两两比较分析。统计结果以α＝0.05为检验界限，其中P<0.05表示有统计学意义，P<0.01表示所检验的差别有非常显著性意义。

4.试验结果

(1)血清AST、ALT含量测定：与空白对照组相比，模型对照组血清中AST及ALT含量显著升高(P<0.01)；与模型对照组比较，实施例1的中药组合物低、中、高各剂量组血清中ALT及AST含量均显著降低(P<0.01)，对比例1的中药组合物低、中、高剂量组血清中ALT及AST含量均显著降低(P<0.01)，护肝片组血清ALT和AST含量显著降低(P<0.01)。实施例1组ALT及AST明显优于对比例1组。结果见表15。

表15对CCl₄致小鼠急性肝损伤模型的影响

注：与空白对照组比较，“#”表示P<0.05，“##”表示P<0.01；与模型对照组比较，“*”表示P<0.05，“**”表示P<0.01。

5.结论

在本试验条件下，给ICR小鼠灌胃不同剂量的实施例1和对比例1的中药组合物药液，实施例1、对比例1的中药组合物各剂量组及护肝片组的ALT和AST数值均显著或明显降低，表明实施例1和对比例1的中药组合物低、中、高剂量组对CCl4致小鼠急性肝损伤模型有良好的保护作用。实施例1组比对比例1组效果更加明显。

本发明的中药组合物临床分析数据

本发明的中药组合物由柴胡、郁金、虎杖、灵芝、三七粉、太子参、黄芪、白术、茯苓、丁公藤、穿根藤、凤眼草、扶桑花和藏青果组成，具有疏肝理气，清热利湿，健脾益气，通络止痛之效，临床上主要用于急、慢性乙肝，尤适用于有肝纤维化趋向患者。

通过对114例急慢性乙肝炎患者服用实施例1组和对比例1组中药组合物的效果进行收集观察整理，结果证明实施例1的中药组合物治疗急、慢性肝炎患者效果较好，总结如下。

选择急、慢性肝炎患者114例进行观察，其中实施例1中男性患者有31例，女性患者有26例，年龄21～62岁，平均年龄(42.5±2.3)岁，病程2个月～13年；对比例1中男性患者有29例，女性患者有28例，年龄20～59岁，平均年龄(40.8±2.7)岁，病程1个月～11年。二组无论年龄和病程均无统计学差异。诊断和疗效判断标准：急性乙型肝炎病例符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会和肝病学分会联合修订的《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准。慢性乙型肝炎病例符合2015年中华医学会肝病学分会和感染病学分会联合修订的《慢性乙型肝炎防治指南》的诊断标准。排除甲、丙、戊型病毒性肝炎，非酒精性脂肪性肝病，酒精性肝病，药物性肝损伤，胆源性肝损害，梗阻性黄疸，自身抗体阳性，EB病毒(EBV)、巨细胞病毒(CMV)非嗜肝病毒感染，妊娠，＜14岁的患者；《中药新药临床研究指导原则(试行)》中疗效判定标准。主要判断标准如下：临床痊愈(临床症状消失、肝功能恢复正常)；显效(临床主要症状基本消失、肝功能基本恢复正常)；有效(临床主要症状减轻甚至消失、肝功能各项指标下降达50％以上)；无效(肝功能和症状无明显改善)。总有效率＝(显效+有效)/总例数×100％。统计学方法：本次研究采取SPSS22.0的统计学软件进行整理和分析，计量资料用均数±标准差(x±s)表示，用t检验，组内存在统计学差异性(P<0.05，P<0.01)。观察指标主要于治疗前和治疗后检查肝功能，AFP(甲胎蛋白)和B超各1次,观察并记录其症状(乏力、纳呆、胁痛、恶心、腹胀、黄疸)和AFP、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(Alb)的变化。方法：口服，一次5.5g，一日3次；临床拟用疗程：2个月。

表16总有效率观察

注*P<0.05；表示具有统计学意义，表明实施例1总有效率优于对比例1，实施例1痊愈人数明显优于对比例1。

表17实施例1配方治疗前后各项血清学指标测定结果比较(n＝57，x±s)

表18对比例1配方治疗前后各项血清学指标测定结果比较(n＝57，x±s)

注：各项血清学指标治疗前后AFP,ALT及AST较治疗前均显著下降，差异有统计学意义(P<0.01)，TBIL治疗后也有显著变化，差异具有统计学意义(P<0.05)，Alb治疗前后变化没有统计学意义，见表17和表18中的结果。与治疗前比较，**P<0.01，*P<0.05，具有统计学意义；表明实施例1治疗后效果明显优于对比例1组。

不良反应：两组各57例肝炎患者未出现因不良事件而终止观察，全部完成全程观察，对治疗后的血常规、肝功能、心电图均无影响，未出现任何不良反应。

综上所述，临床观察表明实施例1的中药组合物治疗急、慢性肝炎具有良好的疗效，而且没有明显的不良反应，服药方便，适于临床推广。

实施例2

一种治疗肝炎的中药组合物，所述中药组合物的配方和配比重量份用量为：柴胡15份、郁金15份、虎杖14份、凤眼草10份、扶桑花10份、藏青果12份、白术8份、茯苓8份、黄芪8份、太子参4份、灵芝4份、三七4份、丁公藤2份、穿根藤4份。制备方法同实施例1。

实施例2的产品与实施例1的产品配方相同，只是某些成分的用量略有变化，不影响产品的整体效果，无毒副作用。

以上所述为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围不局限于此，任何熟悉技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种治疗乙型肝炎的中药组合物，包括柴胡，其特征是，所述中药组合物的配方和配比的重量份用量为：柴胡12-15份、郁金12-15份、虎杖10-14份 、凤眼草10-14份、扶桑花10-14份、藏青果10-14份、白术4-8份、茯苓4-8份、黄芪4-8份、太子参4-8份、灵芝4-8份、三七4-8份、丁公藤2-4份、穿根藤2-4份。

2.根据权利要求1所述治疗乙型肝炎的中药组合物，其特征是，所述中药组合物的配方和配比的重量份用量为：柴胡12份、郁金12份、虎杖10份、凤眼草10份、扶桑花10份、藏青果10份、白术6份、茯苓6份、黄芪6份、太子参6份、灵芝6份、三七6份、丁公藤4份、穿根藤2份。

3.根据权利要求1所述治疗乙型肝炎的中药组合物，其特征是，所述中药组合物的配方和配比重量份用量为：柴胡15份、郁金15份、虎杖14份、凤眼草10份、扶桑花10份、藏青果12份、白术8份、茯苓8份、黄芪8份、太子参4份、灵芝4份、三七4份、丁公藤2份、穿根藤4份。

4.权利要求1-3任意一项所述治疗乙型肝炎的中药组合物的制备方法，其特征是，以上十四味按上述比例，先将柴胡、三七、太子参和郁金粉碎成第一细粉，灭菌备用；其余药物加水煎煮2-3次，每次次加8-10倍水煎煮1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20~1.306，60℃的稠膏，干燥，粉碎成第二细粉，加入上述第一细粉，混合均匀，即得。

5.根据权利要求4所述所述治疗乙型肝炎的中药组合物的制备方法，其特征是，所述灭菌是为湿热灭菌，具体是120℃-125℃下湿热灭菌15min-30min。

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