CN101357136B - 用于防治脑缺血损伤相关疾病的中药有效成分的组合物 - Google Patents

Abstract

用于防治脑缺血损伤相关疾病的中药有效成分的组合物，具体涉及用中药的有效成分制备的制剂。它是由以下重量份的中药有效成分和药学上所允许的载体用常规的制剂工艺制成的制剂：人参皂苷Rb12-10份、人参皂苷Rg12-10份、人参皂苷Rd1-5份、人参皂苷Re1-5份、二苯乙烯苷2-10份、银杏内酯1-5份和由山柰酚与槲皮素质量比为1：1组成的黄酮混合物1-5份。本发明的优点是克服传统复方中药组成复杂，产品质量无法有效控制，导致疗效不稳定的缺点，本产品成分明了，作用明确、质量稳定，对缺血性中风及后遗症、脑动脉硬化、血管性痴呆具有显著防治效果，能改善病人的运动神经功能和学习记忆功能；毒性很低，没有明显副作用；制备方法简单，宜工业化批量生产。

Description

用于防治脑缺血损伤相关疾病的中药有效成分的组合物

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种用中药的有效成分制备用于防治脑缺血损伤病的组合物。

背景技术

脑缺血损伤相关疾病包括中风、中风后遗症、血管性痴呆和老年性痴呆病。缺血性中风是威胁人类健康的重要杀手，在中老年人群发病率很高，而且发病年龄是越趋年轻化。老年痴呆是老年常见病，有血管性痴呆(VascularDementia，VD)和老年性痴呆(AD)等不同类型。血管性痴呆是老年痴呆的一种重要类型，也是缺血性中风的后遗症之一，严重影响老年人生活质量。随着我国人口的逐渐老龄化，缺血性脑血管疾病患者在不断增加。脑中风和血管性痴呆这些疾病给家庭和社会带来沉重的经济和精神负担，迄今为止尚无特别有效的治疗和预防药物。

脑缺血损伤是一多因素致病的综合性脑血管疾病，多层次、多环节、多靶点全面调节才能有效地控制直至治愈这种疾病。因此，寻找多靶点、低毒、质量可控、体现中医药整体治疗作用的抗脑缺血损伤中药成为当前一个重要的研究课题。

中医药理论指导下的小复方新药将有望解决大复方中成药和中药单方制剂和单方有效部位制剂面对的困惑，而研究开发处方组成药味精简、有效成分明确、质量易于控制而且生产工艺稳定、安全有效的复方有效成分是现代中药制剂发展之趋势。

中药材中具有抗脑缺血损伤作用的单味中药约有近百余种，如：人参、三七、灯盏花、山楂、丹参、川芎、何首乌、黄芪等。其功效分别归属于补气益肾填精健脑、活血化瘀等类中药。

单方制剂和单方有效部位制剂，虽然成分明了，作用明确，质量可控，但单味药作用相对比较单一，在治疗脑缺血损伤这种病机复杂、需综合调节的疾病上，具有一定的局限性。对病因病机复杂的缺血性中风和血管性痴呆等难治性疾病难于获得满意疗效。

中药复方因其多成分、多功能、相对低毒的临床安全有效，对当今的心脑血管疾病、代谢综合征等常见多发的多因素复杂疾病显示独特的治疗优势。

但目前具有独特疗效的治疗缺血性中风疾病和血管性痴呆的中成药甚少，而经严格疗效评价、高效、安全、质量可控的有效治疗缺血性中风和老年痴呆的现代中成药更是欠缺。现有的防治缺血性中风疾病和血管性痴呆的中成药，如华佗再造丸、安宫牛黄丸、参乌胶囊等普遍存在大复方、组成药味多、有效成分复杂且不明确、生产工艺不稳定、质量得不得有效的控制、疗效难于保证等缺陷，不符合现代中药要求。

因此，在中医药理论指导下用中药有效成分制成现代中成药，成分明了，作用机理相对清楚、并可实现其质量的有效控制，确保疗效的正常发挥，而又有中药复方特色的现代中成药。

文献“参乌胶囊治疗老年轻度认知损害临床对照研究[J]”中国中药杂志，2007，(17)：1800-1803)报道了用人参首乌等中药材制成用于治疗缺血性中风疾病和血管性痴呆的复方参乌制剂如人参首乌胶囊和参乌胶囊，对认知损害有较好神经保护功能和临床疗效。

虽然复方参乌胶囊有较好的抗脑缺血损伤和抗动脉硬化功能和神经保护功能和临床疗效，但由于是中药复方制剂，其成分较复杂，实际应用中其产品质量难于获得有效控制，它们的质量控制方法主要是进行1～2个指标成分的HPLC含量测定和薄层检认，而对大多数活性成分置之不管，无法真正控制产品质量，最终将影响临床疗效的稳定性。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于防治脑缺血损伤病的中药有效成分的组合物。

本发明的技术方案是：用于脑缺血损伤相关疾病的中药有效成分的组合物

由以下重量份的中药有效成分和药学上所允许的载体用常规的制剂工艺制成的制剂，

人参皂苷Rb1   2-10份    人参皂苷Rg   12-10份    人参皂苷Rd   1-5份

人参皂苷Re    1-5份     二苯乙烯苷   2-10份     银杏内酯     1-5份

由山柰酚与槲皮素质量比为1：1组成的黄酮混合物        1-5份

本组方中的人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1)，是从人参提取分离得到的有效成分，其分子式为C54H92023，分子量为1109.29，含量≥95％。有延缓衰老及抗氧化作用，还有促进和增强记忆作用。

人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1)，也是从人参提取分离得到的有效成分，其分子式为C42H72014，分子量为801.01，含量≥95％。有促进和增强记忆作用，并有明显的强心作和抗应激作用，促进内分泌系统功能，还能促进代谢系统功能。

人参皂苷Rd(Ginsenoside Rd)，是从人参提取分离得到的有效成分，其分子式为C48H82018，分子量为947.15，含量≥95％。能促进核酸(DNA和RNA)和蛋白质合成，对免疫功能有明显促进作用。

人参皂苷Re(Ginsenos ide Re)，是从人参提取分离得到的有效成分，其分子式为C48H82018；分子量为947.15，含量≥95％。有延缓衰老作用及抗氧化作用，并能促进核酸(DNA和RNA)和蛋白质合成，对免疫功能有明显促进作用。

二苯乙烯苷(2，3，5，4′-tetrahydroxy-tilbene-2-0-β-D-glucoside)，是从首乌提取分离得到的有效成分，化学名为2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷，分子式为C20H24010，分子量：424.40；含量≥70％。可改善慢性脑缺血大鼠的学习记忆能力，保护超氧化物歧化酶、抗氧化、增强免疫作用、抗衰老的作用，还有降低总胆固醇、延缓动脉硬化，提高记忆力、对老年痴呆、脑老化有明显的治疗效果。

银杏总内酯(Ginkgolide)是用银杏的叶提取分离得到的有效成分，总内酯含量≥95；银杏内酯B≥40％，具有选择性的拮抗由PAF诱导的血小板聚集，可有效的防止血小板聚集和血栓的形成。对降低脑血管阻力、增加脑血流量、促进脑血循环有很好的功效，并能清除有害的氧化自由基，提高免疫功能，保护脑细胞免受缺血损伤。对预防和治疗脑血栓等脑血管疾病疗效独特。

黄酮混合物是山柰酚与槲皮素质量比为1：1组成，

槲皮素(Quercetin)，其分子式:C15H1007·xH2O；分子量：302.24，含量≥95％。可从银杏叶、柿叶等植物提取分离得到，具有抗氧化和清除自由基等功能。槲皮素还具有抗癌、抗氧化、抗血小板聚集、抗抑郁、抗心肌肥厚和降压等多种药理作用。

山柰素(Kaempferol)，可从银杏叶、柿叶等植物提取分离得到，其分子式:C15H1006；分子量：286.24，含量≥95％。它具有抗氧化和清除自由基等功能。

我们取人参、首乌、银杏中所含的主要抗脑缺血损伤和神经保护的有效成分，进行组方研究，采用均匀设计和高通量筛选法筛选出防治脑缺血损伤和神经退行性病变的相关疾病的中风、中风后遗症、老年痴呆的新配方，然后用最优配方再进行整体动物药效验证。

均匀设计试验

方法：用U₅(5⁸)均匀设计表来安排试验，选用7因素，代表7个组分、分别安排在不同列中，5个水平(1，2，3，4，5)代表配方中各组分质量份数，实验号各行分别安排各组方的不同组分的不同质量份数配伍。

用各实验号所得的不同配方组合物进行缺血损伤神经元保护作用和小鼠学习记忆增强作用筛选实验，观察各不同配方组合物神经元保护作用和学习记忆增强作用(详见下面实验例一、二)。实验结果进行数据处理，按作用强弱进行得分统计，筛选出神经元保护作用和学习记忆增强作用最佳配方。

结果：见表1。从实验结果看出组成的最低和最高、中间份都有较好神经元保护作用和学习记忆增强作用。

结论：不同配比的复方参乌醒脑有效成分组合物均有神经元保护作用和学习记忆增强作用。

表1 试验方案和结果(数字为组分质量份数，括号内的数字为各因素)

 

实验号	人参皂苷Rb1(X1)	人参皂苷Rb1(X2)	人参皂苷Rb1(X3)	人参皂苷Rb1(X4)	二苯乙烯苷(X5)	银杏内酯(X6)	黄酮混合物(X7)	抗缺血损伤作用得分	学习记忆增强作用得分
										1	2	2	3	8	10	2	4	8	9
2	4	4	5	6	2	5	2	10	7
										3	6	5	2	4	6	1	1	7	7
4	8	3	1	2	4	3	5	8	8
										5	10	1	4	1	8	4	3	9	10

由上结果筛选得到的最佳组方是：

人参皂苷Rb1 10份  人参皂苷Rg1 10份  人参皂苷Rd 1份

人参皂苷Re  4份   二苯乙烯苷  8份   银杏内酯   4份

由山柰酚与槲皮素质量比为1：1组成的黄酮混合物3份。

为了适应临床的需要，将上述有效成分按处方要求混合后添加辅料，如润滑剂、填充剂、粘合剂、崩解剂等，以常规的药物制剂工艺和制备食品的方法制备成颗粒剂、片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、粉末、颗粒、晶体、溶液、浸出物、混悬剂、汤、糖浆剂、酏剂、茶、油等的形式的药物和保健品等。为达到药物起效更快的目的，也可以以制成注射剂，最佳的是制成冻干粉针剂。

本复方中药有效成分组合物的制剂，可取市售中药有效成分提取物：人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、二苯乙烯苷、银杏内酯、山柰酚与槲皮素混合物、按比例和等量递增法混匀制成有效成分混合物(以下简称FSWXN)后，添加药学上所允许的载体用常规的制剂工艺制成，如添加淀粉和糊精适量，混匀，加75％酒精制粒，60℃干燥，整粒，装3号胶囊、每粒装0.15g，含FSWXN84mg/粒制成胶囊剂。

FSWXN添加淀粉和糊精适量，混匀，加75％酒精制粒，60℃干燥，整粒，添加硬脂酸镁适量压片或进一步包衣，包欧巴代或其它薄膜衣，制得片剂。每片重0.20g，含FSWXN80mg/片。

FSWXN添加淀粉、糊精和其它辅料适量，混匀，装入小包，制得散剂。每小包重0.20g，含FSWXN580mg/片。

FSWXN添加淀粉和糊精适量，混匀，再加蜂蜜适量，泛制小水蜜丸，60℃干燥，包装3号胶囊、得丸剂胶囊，每粒装0.30g，含FSWXN84mg/粒。

FSWXN添加淀粉和糊精适量，混匀，加75％酒精制粒，60℃干燥，整粒，包装小包装0.15g，含FSWXN84mg。即成颗粒剂。

FSWXN添加羧甲基纤维素钠等稳定剂，加蔗糖、蒸馏水制成合剂，装入瓶中，每瓶60ml，含FSWXN80mg/5ml。即成合剂

FSWXN添加羧甲基纤维素钠等稳定剂，加蔗糖、蒸馏水制成合剂，即混悬剂规格：装入瓶中，每瓶60ml，含FSWXN80mg/5ml。

FSWXN加蒸馏水，加热混匀，添加蔗糖糖浆，装入瓶中，即成糖浆剂。规格：每瓶60ml，含FSWXN80mg/5ml。

FSWXN或添加甘油和羧甲基纤维素钠等稳定剂，加蔗糖制成甘油酏剂，装入瓶中，即成酏剂规格：每瓶60ml，含FSWXN80mg/5ml。

当然，本发明不限于上述的剂型，也可以制成注射剂，但需进一步做毒性等药效试验。例FSWXN添加助溶剂，按粉针剂要求制成粉针剂。每瓶含FSWXN240mg。

本发明的优点在于克服传统复方中药组成复杂，产品质量无法得到有效控制，导致疗效不稳定的缺点，本发明提供了一种成分明了，作用明确、质量稳定可控的新产品。1)经现代中药药理研究证实本发明的产品具有抗缺血脑损伤、神经保护、学习记忆增强作用；2)临床研究结果表明，本发明的产品对缺血性中风及其后遗症、脑动脉硬化、血管性痴呆具有显著防治效果，能改善病人的运动神经功能和学习记忆功能，治疗临床疗效确切；3)毒性很低，临床没有观察到明显副作用；4)产品制备方法简单，宜工业化批量生产。

下面通过实验例证明本发明的有益效果

实验例1、药理活性检测

1.用神经元缺氧缺血清再灌注损伤模型筛选FSWXN的处方

试验方法：

培养原代大鼠皮质神经元，经缺氧缺糖缺血清→再给氧给糖和血清模型，检测指标：神经元凋亡水平；MTT法检测神经细胞活力，观察不同ESWXN组方对缺氧缺血清再给氧给血清氧化应激损伤神经元的保护作用。

材料和方法

样品及试剂

FSWXN样品：按均匀设计实验方案制成不同配比的5个实验组样品，用前用二甲基亚砜和双蒸水按1:1配成浓液，用培养基配成所需的浓度。

对照品：人参首乌提取物：按部标六册，人参首乌胶囊的处方工艺和质量要求，购进中药材红参和首乌，提取制备人参首乌提取物。每1g人参首乌提取物含药材红参2g，制何首乌3g。

参乌胶囊提取物：从华北制药集团制剂有限公司购得参乌胶囊

DMEM培养基(Gibco)，胰蛋白酶、胎牛血清、马血清(Gibco)、Hochest33342。

皮质神经细胞的原代培养和低氧低糖再复氧诱导的神经细胞凋亡模型按文献[WeiJian Bei，Wenlie Peng，AnLongXU.et al.Neuroprotective effectsof a standardized extract of Diospyros kaki leaveson MCAO transientfocal cerebral ischemic rats and cultured neurons injured byglutamateor hypoxia.Planta Medica2007；73：636-643]方法进行。SD大鼠皮质神经细胞培养至d12，换成低糖无血清DMEM培养基，在自制的低氧罐(通入含95％N2+5％CO2)中分别温孵16h，再复氧培养24h。

实验分组与药物处理(1)正常对照组：细胞在正常培养基培养14天，直接用MTT法检测96～多孔板上各培养孔中神经细胞存活率或Hochest33528染色，荧光显微镜镜法检测细胞凋亡。(2)模型对照组：细胞在正常培养基培养12天，换成低氧低糖无血清培养基培养16h后再复氧24h，检测原代培养的大鼠皮质神经细胞凋亡。(3)给药组：不同的FSWXN、和复方参乌提取物以1.0、5.0、25.0μg/ml终浓度加到各培养孔、即大鼠皮质神经细胞中。培养至第十一天，进行低氧无血清培养基培养前2小时，分别加入上述不同浓度的各种药物，低氧无血清培养模型组给予等容量生理盐水。细胞在低氧无血清培养基培养16h后进行，复氧和给予血清再培养24h，然后检测原代培养的大鼠皮质神经细胞活力活力和凋亡。正常对照组用95％空气和5％CO2和正常培养基培养。

MTT法检测细胞活力；用hochest33342进行荧光染色，显微镜法检测细胞凋亡，拍照，记录在电脑软件上，每组拍5张，细胞培养每孔至少拍一张，观察细胞凋亡率。

试验结果见表2，表3

从表2，3显示，不同的FSWXN在浓度为1，5，25μg/mL时均能提高低氧低糖再复氧诱导损伤皮质神经元的细胞活力，在25μg/mL时可使低氧低糖再复氧诱导皮质神经元凋亡率降低。人参首乌提取物和复方参乌提取物也有相似作用，但起效药物浓度在5μg/mL以上。

表2 FSWXN对低氧低糖再复氧诱导损伤神经细胞活力的影响(n＝3，x±s，％)

 

组别结果药物

正常组

空白组

1μg/mL组

5μg/mL组

25μg/mL组

实验得分

FSWXN1

100±3.7

66.2±4.0▲▲

80.4±5.9*

87.2±5.7**

92.0±6.0*

8.0

FSWXN2

100±7.2

66.3±5.1▲▲

88.4±6.4*

91.3±12.8

98.4±6.5**

10.0

FSWXN3

100±4.9

65.9±5.5▲▲

71.1±6.5

80.6±3.0**

90.2±4.7**

7.0

FSWXN4

100±2.6

65.3±2.7▲▲

70.5±5.7

81.6±3.0**

91.1±5.7**

8.0

FSWXN5

100±7.2

66.2±4.2▲▲

79.3±5.3*

89.8±6.7**

95.9±6.9**

9.0

 

人参首乌提取物

100±7.2

66.2±4.5▲▲

67.3±5.3

73.8±3.2*

89.7±5.5**

7.0

参乌胶囊提取物

100±7.2

66.0±4.3▲▲

68.3±5.8

77.6±3.0**

90.3±5.1**

8.0

注：与正常组比较，^▲▲P<0.01；与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01。

结论：不同的FSWXN、人参首乌提取物和复方参乌提取物对低氧低糖再复氧诱导损伤皮质神经元均有保护，保护作用强度以FSWXN2和FSWXN5作用较强。

表3 不同FSWXN对低氧低糖再复氧诱导的神经细胞凋亡率的影响(n＝3，x±s，％)

 

组别结果药物	正常组	空白组	25μg/L组	实验得分
					FSWXN1	5.5±3.7	36.6±4.2▲▲	15.5±6.2*	8.0
FSWXN2	5.8±7.2	36.1±5.3▲▲	11.0±5.1**	10
					FSWXN3	5.6±4.9	35.9±5.5▲▲	16.1±4.6**	7.0
FSWXN4	5.2±2.6	36.3±4.7▲▲	15.2±4.2**	8.0
					FSWXN5	5.8±7.3	36.8±4.7▲▲	13.5±6.5*	9.0
人参首乌提取物	5.8±6.2	36.2±4.5▲▲	16.7±4.9*	7.0
					复方参乌提取物	5.3±7.0	36.0±4.8▲▲	15.3±4.4*	8.0

注：与正常组比较，^▲▲P<0.01；与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01。

实验例2、急性毒性和长期毒性试验

小鼠急性毒性研究：将120只19～21g NIH小鼠(雌雄各半)分成6组，每组20只，分别以五种不同剂量的FSWXN5灌胃给药，生理盐水对照。观察小鼠的反应并记录每组小鼠的死亡数目，采用Microsoft Excel的线性回归软件，根据对数剂量与经验概率单位绘制直线，计算LD₅₀。FSWXN5对小白鼠灌胃给药的LD₅₀分别为11.23～12.86g/kg

大鼠长期毒性实验：取Wistar大鼠120只雌雄各半分成4组，每组30只，分别灌胃给药给予1.20g/kg、0.60g/kg、0.30g/kg FSWXN5，对照组灌胃给生理盐水。连续给药180天，三个剂量组大鼠均未见明显血象、心肺肝肾功能及神经系统功异常，也未心、肺、脾、胃、大脑、肠等重要器官有明显病理变化。

结论：本发明的产品毒性很低、安全性高。

实验例3、药效试验

SWXNF5对双侧颈总动脉结扎对大鼠记忆行为功能和海马组织形态学的影响

1.实验材料

SWXNF5，SWXNF1、SWXNF2，人参首乌胶囊，用生理盐水配成合适浓度的混悬液；

试验动物用健康雌性SD大鼠120只，体重210g～250g，大鼠随机分为正常组(N组)、模型组(M组)、FSWXN5小剂量组(2mg/kg)、FSWXN5中剂量组(10mg/kg)，FSWXN5高剂量组(20mg/kg)、FSWXN1高剂量组(20mg/kg)、FSWXN2高剂量组(20mg/kg)人参首乌胶囊对照组(60mg/kg)每组15只。给药：给药12天(缺血再灌注前4天，后7天)。腹腔灌胃给药，每日2次。

2.实验方法

方法按文献方法(Ni JW.，Matsumoto IK.，Matsumoto IK.Progressivecognitive impairmentfollowing chronic cerebral hypoperfusion inducedby permanentocclugion of bilateral carotid arteries in rats《BRAINRESEARCH》1994；653(1-2)：231-236；刘汇波 李斌 李斌 双侧颈总动脉结扎对大鼠记忆行为功能和海马组织形态学的影响《基础医学与临床》1998；18(4)：294-297)行大鼠结扎双侧颈总动脉缺血再灌手术建立动物模型。给药：缺血再灌注前4天开始，至后再灌注60天。每天腹腔灌胃给药，每日1次。采用水迷宫在给药后15天、30天、60天时，测定大鼠游出时间和距离，并用组织学的方法观察海马神经元组织形态

3、实验结果：

结果脑缺血模型大鼠到达站台游动时间比正常对照组增长113.6％(P<0.01)；FSWXN5和人参首乌胶囊均能降低永久性结扎双侧颈总动脉后24小时内大鼠的死亡率，有降低大鼠水迷宫游出时间和错误次数的趋势，其中在30d的时间点，给药组与对照组相比，水迷宫的错误次数显著降低(P<0.05)；而FSWXN小、中、大剂量组较模型组动物分别缩短58.0％(P<0.01)，78.2％(P<0.01)和82.8％(P<0.01)；见表4

表4 FSWXN各组大鼠水迷宫游出时间(x±s)

 

组别	剂量mg/kg	动物数n	游出时间(秒)
				N组M组SWXNF5SWXNF5SWXNF5SWXNF1SWXNF2人参首乌胶囊	0021020202060	99910109109	63.8±22.4136.3±23.9#94.2±23.1*79.5±22.5*76.3±21.6**81.8±23.4**83.9±23.6**86.4±21.5**

注：与N组比较:^##P<0.01；与M组比较：^*P<005，^**P<00012

海马神经元组织形态：正常大鼠脑海马组织CA1区有3～4层锥体细胞，排列整齐；高倍镜下，锥体细胞核大而园，有1～2个核仁，缺血再灌注7天，可见明显大鼠脑海马组织细胞损伤。CA1区锥体细胞已大部分死亡，细胞碎片散乱分布；不同剂量的复方参乌醒脑方(FSWXN5)，大鼠脑海马CA1区神经元损伤明显减轻，其活锥体细胞密度比对照组大鼠明显增加。动物整体状况改善，大鼠外观活动正常，皮毛光滑，体重减轻不明显。缺血再灌注后动物存活数比对照组明显多。表明(SWXN5对急性缺血有保护作用。这为SWXNF5治疗脑卒中及中风后遗症提供了实验依据。阳性对照药人参首乌胶囊也显示对缺血再灌注所致大鼠脑海马组织细胞损伤有明显保护作用。见表5

表5 FSWXN对前脑缺血再灌流引起大鼠海马CA1锥体神经细胞损伤的保护作用

 

组别	动物数	锥体神经细胞密度(/mm)
			正常对照	9	185.5±17.1
生理盐水	9	7.1±3.4**
			FSWXN52mg/kg	9	32.7±22.8##
FSWXN510mg/kg	9	74.7±17.7##
			FSWXN520mg/kg	9	89.7±19.7##
FSWXN120mg/kg	9	80.1±21.3##
			FSWXN220mg/kg	9	81.7±20.5##
人参首乌胶囊60mg/kg	9	57.7±16.0##

注：与正常对照组比较，^**p<0.01；与生理盐水组比较，^##p<0.01。

结论：研究表明本发明的FSWXN5能抑制缺血再灌注引起的脑组织细胞凋亡，对缺血再灌注引起的脑组织损伤有明显的保护作用，并能改善缺血再灌注引起的学习记忆障碍，提高受损伤大鼠的学习记忆能力。

实验例4、临床验证

一、对血管性痴呆的防治作用：

1资料与方法

病例情况：全部病例均系神经科住院病人，男性70例，女性20例；年龄58～76岁，平均64.9岁；病程最短1年，最长10年，平均3.9年。经临床检查、神经量表测试，并经头颅CT或MR证实者。

1.2诊断标准:采用DSM-IV中血管性痴呆的诊断标准。

1.3排除标准:有严重神经、血液、内分泌等原发性疾病及海金斯基缺血指数量表(HIS)，总分18分，得分<7分为老年性痴呆者。

1.4量表选择：1美国简易智能量表，总分30分，若得分<16分者为智能障碍；2日本长谷川痴呆量表，总分30分，若得分<16分者为痴呆成立；3海金斯基缺血指数量表(HIS)，总分18分，若得分>7分者为血管性痴呆，得分<7分者为老年性痴呆。

1.5中医主要症状：参考中药新药临床研究指导原则；中药新药治疗老年期痴呆的临床研究指导原则。

结合临床经验，将以下症状作为观察指标:神情呆滞，语言不利，或寡言少语或语言倒错，善忘，不寐，头晕，头痛，舌质瘀点。

1.6疗效标准：采用综合评定法，以患者治疗前后的智能状态、中医主要症状、体征等方面的改变作为综评内容，并以智能改变为重点。痊愈者长谷川痴呆量表测试得分增加到正常值，显效者得分增加5分以上，有效者得分增加不足5分，无效者得分不但无增加反而下降。

1.7用药方法：用FSWXN5处方制成胶囊，每天早中晚各服1粒，2个月为1疗程，均用药3个疗程，其间停用其它脑血管扩张药物、脑细胞代谢药物、神经功能调节药物。人参首乌胶囊由贵阳医学院制药有限公司生产，每粒装0.3克，口服，一次2粒，一日3次，饭前服用。

2 疗效与结果

2.1治疗前后量表积分变化：(见表6、7、8、9)

表6 治疗前后简易智能量表积分变化(x±s)

 

药物组	n	治疗前	治疗后	P
					实施例2的胶囊人参首乌胶囊	3030	13.45±5.4213.58±5.38	19.45±6.0918.30±5.06	<0.05<0.05

表7 治疗前后长谷川痴呆量表积分变化(x±s)

 

药物名	n	治疗前	治疗后	P
					FSWXN5人参首乌胶囊	3030	12.95±5.6212.98±5.78	18.83±6.1918.12±5.36	<0.05<0.05

2.2中医主要症状变化：(见表8)

表8 治疗前后主要症状评分变化(x±s)

 

主要症状	药物	n	治疗前	治疗后	P
						神情呆滞	FSWXN5人参首乌胶囊	30	3.35±0.543.28±0.51	2.31±0.802.39±0.81	<0.01<0.01
语言不利	FSWXN5人参首乌胶囊	28	3.31±0.653.31±0.65	2.28±0.932.36±0.95	<0.01<0.01
						善忘不寐	FSWXN5人参首乌胶囊	29	3.33±0.563.31±0.56	1.31±0.951.43±0.93	<0.01<0.01
头晕头痛	FSWXN5人参首乌胶囊	30	3.13±0.853.16±0.85	1.31±0.851.48±0.83	<0.01<0.01
						舌质瘀点	FSWXN5人参首乌胶囊	30	2.03±0.422.05±0.42	1.28±0.641.31±0.61	<0.01<0.01

2.3疗效分析：(见表9)

表9 二种药物对血管性痴呆疗效统计

3 结论

FSWXN5对血管性痴呆的智能改善作用：从表可以看到，60例病员经服FSWXN5和人参首乌胶囊3个疗程后，二药治疗的量表得分均明显增加(P<0.01)，说明都有恢复记忆力、改善智能作用。本有效成分组合物FSWXN5对本病的总有效率为76.7％，尽管痊愈者为零、显效仅5例，但有效率却占一半多(60.0％)。本有效成分组合物疗效比人参首乌胶囊好。

二、对老年性痴呆症的防治作用：

1 资料与方法

1.1病例情况：全部病例均系神经科住院病人，男性19例，女性11例；年龄58～76岁，平均64.9岁；病程最短1年，最长10年，平均3年。经临床检查、神经量表测试，并经头颅CT或MR证实者。

1.2诊断标准：按中药新药临床研究指导原则

1.3排除标准：(同前)

1.4量表选择：(同前)

1.5中医主要症状：(同前)

1.6疗效标准：(同前)以上1.3～1.6参照中药新药临床研究指导原则；中药新药治疗老年期痴呆的临床研究指导原则。

1.7用药方法：(同前)

2 疗效与结果

2.1治疗前后量表积分变化：(见表10、11)

表10 治疗前后简易智能量表积分变化(x±s)

 

药物组	n	治疗前	治疗后	P
					FSWXN5人参首乌胶囊	3231	13.45±5.4212.98±5.78	20.35±6.0919.32±6.86	<0.05<0.05

表11 治疗前后长谷川痴呆量表积分变化(x±s)

 

药物组	n	治疗前	治疗后	P
					FSWXN5人参首乌胶囊	3231	12.35±5.4212.18±5.78	19.65±6.1919.12±6.16	<0.05<0.05

2.2中医主要症状变化：见表12

从13表可以知道，复方参乌醒脑有效成分组合物对本病的总有效率为71.9％，显效15.6％，比目前常用药的70％的总有效率略高，而没观察到明显副作用。

2.3疗效分析：见表13

3 结论

本品对老年性痴呆的智能减退有改善作用，从12、13表可以看到，32例病员经服复方参乌醒脑有效成分组合物2个疗程后，量表得分明显增加(P<0.01)，说明有恢复记忆力、改善智能作用，且语言不利、失眠、烦躁、易怒、舌质瘀点等症状改善非常明显，对痰浊阻窍，气滞血瘀的老年性痴呆(AD症)32例有效率达71.9％。疗效与口服服用人参首乌胶囊相当，但对失眠、烦躁、易怒等症状疗效更显著。

表12 治疗前后主要症状变化(x±s)

 

主要症状	药物	n	治疗前	治疗后	P
						神情呆滞	FSWXN5人参首乌胶囊	3231	3.15±0.543.13±0.56	2.31±0.852.35±0.86	<0.01<0.01
语言不利	FSWXN5人参首乌胶囊	2726	3.33±0.663.32±0.63	2.28±0.912.39±0.92	<0.01<0.01
						思考力障碍	FSWXN5人参首乌胶囊	3231	3.58±0.643.56±0.62	2.75±0.882.84±0.86	<0.05<0.05

 

判断力障碍	FSWXN5人参首乌胶囊	3231	3.35±0.853.33±0.83	2.48±0.952.63±0.89	<0.05<0.05
						记忆力障碍	FSWXN5人参首乌胶囊	3231	3.46±0.853.47±0.87	2.58±0.952.66±0.98	<0.05<0.05
善忘不寐	FSWXN5人参首乌胶囊	3029	3.31±0.543.32±0.55	1.31±0.951.49±0.98	<0.01<0.01
						烦躁、易怒	FSWXN5人参首乌胶囊	2929	3.53±0.853.49±0.85	1.53±0.811.69±0.85	<0.01<0.01
舌质瘀点	FSWXN5人参首乌胶囊	3031	2.13±0.402.15±0.43	1.18±0.621.33±0.64	<0.01<0.01

表13 二种药物对老年性痴呆疗效统计

临床研究结果表明，本品具有显著的抗脑缺血损伤，改善学习记忆作用，治疗脑缺血损伤相关的中风后遗症和血管性痴呆临床疗效确切。

下面通过具体实施方案阐述本发明的技术方案

具体实施方案

实施例1、片剂

原料：

人参皂苷Rb₁(含量≥95％)、人参皂苷Rd(含量≥95％)、人参皂苷Re(含量≥95％)、人参皂苷Rg₁(含量≥95％)；以上四种人参皂苷从吉林省宏久生物科技股份有限公司购进。

二苯乙烯苷(含量≥70％)、天津汇绿科技有限公司提供。

银杏内酯(总内酯含量≥95；银杏内酯B≥40％)，上海傲拓信息科技有限公司提供。

槲皮素和山柰酚(含量≥95％)由陕西惠科植物开发有限公司购进。

取人参皂苷Rb₁10kg、人参皂苷Rd 1.0kg、人参皂苷Re 4kg、人参皂苷Rg₁10kg、二苯乙烯苷8kg、银杏内酯4kg、黄酮混合物3kg(槲皮素1.5Kg加山柰酚1.5Kg)，按等量递增法混匀制成有效成分混合物(FSWXN5)40Kg，加淀粉25kg，糊精35kg，混匀，加75％酒精制粒，80℃干燥，加硬脂酸镁适量，压片，包欧巴代薄膜衣，共制得50万片。每片重0.20g，含FSWXN₅80mg/片，用HPLC方法测定，每片中各有效成分含量结果如下

上述制得的有效成分混合物(FSWXN5)，用HPLC方法测定其含人参皂苷Rb₁24.3％、人参皂苷Rg₁24.8％、人参皂苷Rd2.5％、人参皂苷Re9.86％、苯二烯苷13.90％、银杏内酯9.91％、槲皮素3.70％、山柰酚3.72％。

实施例2、胶囊剂

原料来源同实施例1取人参皂苷Rb₁4kg、人参皂苷Rd 4.0kg、人参皂苷Re 5kg、人参皂苷Rg₁6kg、二苯乙烯苷2.0kg、银杏内酯5kg、黄酮混合物2kg，按等量递增法混匀制成有效成分混合物合物(FSWXN2)28Kg，加淀粉12kg，糊精10kg，混匀，制成胶囊粉50kg装3号胶囊、共制得胶囊33.33万粒，每粒0.15g，含FSWXN84mg/粒。

用HPLC方法测定复方参乌醒脑有效成分(SWXNF2)胶囊中各有效成分含量，结果如下表。

本发明所制得的复方参乌醒脑有效成分组合物2(FSWXN2)胶囊粉，HPLC方法测定其各有效成分含量为：人参皂苷Rb₁7.62％、人参皂苷Rg₁11.38％、人参皂苷Rd 7.69％、人参皂苷Re 9.62％、二苯乙烯苷2.76％、银杏内酯9.64％、槲皮素1.96％、山柰酚1.96％。用此胶囊进行临床试用治疗血管性痴呆，每天3次，每次1粒，连服90天，结果病人记忆力在治疗组治疗后有明显加强，总有效率为76.7％。

实施例3蜜丸

原料来源同实施例1

取人参皂苷Rb₁2.0kg、人参皂苷Rd 2.0kg、人参皂苷Re 3.0kg、人参皂苷Rg₁8.0kg、二苯乙烯苷10.0kg、银杏内酯2kg、黄酮混合物2kg，按等量递增法混匀制成复方参乌醒脑有效成分组合物1(FSWXN1)29.0kg，加淀粉20.5kg，糊精15.kg，混匀，加蜂蜜10kg制成小水蜜丸，60℃干燥得，成72.5kg干燥丸，装0号胶囊、共制得胶囊24.1万粒，每粒0.30g，含FSWXN₁120mg/粒。

口服剂量：一次1粒，一日2次。

用HPLC方法测定每小袋胶囊中小蜜丸中含各有效成分含量结果如下表。

试用于进行临床治疗中风后遗症，每天2次，每次1粒，连服60天，结果病人语言不利、神情呆滞、善忘不寐、烦躁、易怒等症状明显改善；记忆力在治疗组治疗后有明显加强，总有效率为70.5％。

实施例4、粉针剂

原料来源同实施例1

取人参皂苷Rb₁1kg、人参皂苷Rd 1.0kg、人参皂苷Re 1.25kg、人参皂苷Rg₁1.5kg、二苯乙烯苷0.50kg、银杏内酯1.25kg、黄酮混合物0.50kg，按等量递增法混匀制成有效成分混合物合物(FSWXN2)7Kg，添加碳酸氢钠0.50kg，按粉针剂要求制成粉针剂粉7.50kg，装针剂瓶、每瓶含FSWXN240mg。

本发明所制得的复方参乌醒脑有效成分组合物2(FSWXN2)粉针剂粉，HPLC方法测定其各有效成分含量为：人参皂苷Rb₁13.03％、人参皂苷Rg₁20.01％、、人参皂苷Rd 13.13％、人参皂苷Re 16.61％、二苯乙烯苷4.62％、银杏内酯16.59％、槲皮素3.30％。用此胶囊进行临床试用治疗血管性痴呆，每天1次，每次1瓶，用前用注射用水5ml溶解，肌肉注射，连续30天，结果病人记忆力在治疗组治疗后有明显加强，总有效率为72.5％。

实施例5、散剂

取2.0Kg实施例1所得FSWXN5，加淀粉1.25kg，糊精1.75kg，混匀，装入小包，制得散剂。每小包重0.20g，含FSWXN580mg/包。

实施例6、颗粒剂

取2.0Kg实施例1所得FSWXN5，加淀粉1.25kg，糊精1.75kg，混匀，加75％酒精制粒，60℃干燥，整粒，包装小包装0.20g，含FSWXN80mg。即成颗粒剂。

实施例7、合剂

取400g实施例1所得FSWXN5，羧甲基纤维素钠500g，加蔗糖5kg、蒸馏水20000ml制成合剂，装入瓶中，每瓶60ml，含FSWXN₅20mg/ml。即成合剂

实施例8、混悬剂

取500g实施例1所得FSWXN5，加羧甲基纤维素钠1000g稳定剂，加蔗糖10kg、蒸馏水25000ml，混匀、煮沸，即得混悬剂规格：装入瓶中，每瓶60ml，含FSWXN₅20mg/ml。

实施例9、糖浆剂

取500g实施例1所得FSWXN5加20kg蔗糖，蒸馏水25000ml，混匀，加热煮沸，装入瓶中，即成糖浆剂。规格：每瓶60ml，含FSWXN₅20mg/ml。

实施例10、甘油酏剂

取100g实施例1所得FSWXN5，甘油5000ml，加蔗糖1000g制成甘油酏剂，装入瓶中，即成酏剂。规格：每瓶60ml，含FSWXN₅20mg/ml。

Claims (3)

1.一种用于脑缺血损伤相关疾病的中药有效成分的组合物，其特征在于由以下重量份的中药有效成分和药学上所允许的载体用常规的制剂工艺制成的制剂：

人参皂苷Rb1    2-10份   人参皂苷Rg1  2-10份  人参皂苷Rd  1-5份

人参皂苷Re     1-5份    二苯乙烯苷   2-10份  银杏内酯    1-5份

由山柰酚与槲皮素质量比为1∶1组成的黄酮混合物    1-5份。

2.根据权利要求1所述的中药有效成分的组合物，其特征在于由以下重量份的中药有效成分和药学上所允许的载体用常规的制剂工艺制成的制剂：

人参皂苷Rb1    10份    人参皂苷Rg1    10份   人参皂苷Rd  1份

人参皂苷Re     4份     二苯乙烯苷     8份    银杏内酯    4份

由山柰酚与槲皮素质量比为1∶1组成的黄酮混合物    3份。

3.根据权利要求1所述的中药有效成分的组合物，其特征在于所说的制剂为片剂、散剂、丸剂、冻干针粉剂、颗粒、合剂、混悬剂、糖浆剂、酏剂中的任意一种。