CH677605A5

CH677605A5 -

Info

Publication number: CH677605A5
Application number: CH4018/88A
Authority: CH
Inventors: Makoto Sugiyama; Atsuhiko Okita; Junzo Seki
Original assignee: Nippon Shinyaku Co Ltd
Priority date: 1987-10-28
Filing date: 1988-10-28
Publication date: 1991-06-14
Also published as: GB8825024D0; EP0315079A1; DE3853191D1; AU623342B2; AU2447288A; KR890006225A; DE3853191T2; GB2211408B; NL8802657A; CN1048182C; IL88076A0; IT1224596B; ATE119031T1; NL193340B; EP0315079B1; KR960013281B1; IL88076A; NL193340C; FR2622442A1; IT8848502A0

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Description

La présente invention concerne un vecteur de médicament sous la forme d'une émulsion graisseuse comprenant des particules ayant un diamètre moyen de 5 à 100 nm et comprenant une substance constitutive du noyau des particules et une couche superficielle. Ce support de médicament est amélioré pour optimaliser la libération d'un médicament qui y est contenu du courant sanguin ou d'un site d'application dans un tissu lésionnel.

Diverses études ont été effectuées jusqu'à présent sur des supports de médicaments destinés à améliorer la libération d'un médicament qui y est contenu courant sanguin ou d'un site d'application dans un tissu lésionnel. Par exemple, il existe un procédé d'utilisation d'un liposome préparé par incorporation de phospholipide («Drug Carriers in Biology and Medicine» (1979), édité par G. Gregoriadis, Academic Press).

Cependant, ce procédé présente les inconvénients suivants; (1) le liposome enveloppant une phase aqueuse avec une bi-couche lipidique pose de nombreux problèmes de stabilité au stockage, (2) dans le cas d'une administration dans le sang la quasi-totalité des liposomes sont fixés dans un tissu ayant un système réticulo-endothélial (RES) développé tel que foie, raté, etc. de sorte qu'ils sont difficiles à répartir dans d'autres cellules ou tissus, etc. On pense que ceci provient de ce que le liposome a une structure dans laquelle les phases aqueuses interne et externe sont séparées l'une de l'autre par une bi-couche de phospholipide, et que le liposome est ainsi instable à diverses forces. Une augmentation du diamètre des particules due à une aggrégation est également connue comme un défaut au cours de son stockage.

Conformément à des études effectuées ces dernières années, on connaît une technique dans laquelle divers médicaments sont dissous dans une émulsion de graisse ayant un diamètre de particules de 0,2 nm, composée d'huile de soja et de lécithine jaune d'œuf, utilisé jusqu'à présent en clinique comme complément fluide en vue d'apporter un complément d'éléments nutritifs et la solution est utilisée; de bons résultats sont obtenus par ce moyen dans l'application décrite ci-dessus (SAISHIN IGAKU (Latest Medicine), 40,1806-1813 (1980)). Ce support est caractérisé en ce qu'il ne possède pas de phase aqueuse à l'intérieur et en ce qu'il peut être stocké d'une manière extrêmement stable par comparaison avec les liposomes.

Cependant, le support a la propriété d'être aisément fixé dans le système réticulo-endothélial précité tel que foie, etc. Un métabolisme aussi rapide était désiré comme complément de fluide à haute teneur en calorie, mais il posait des problèmes de mauvaise répartition du médicament dans d'autres tissus en tant que support de médicament convenant pour l'objectif décrit ci-dessus, etc. et n'était pas nécessairement approprié.

En outre, une technique d'utilisation d'une émulsion de graisse dans laquelle 90% de cette émulsion ont 100 ± 30 nm comme support pour des produits pharmaceutiques est décrite dans le JP-A 63 500 456. Cependant, cette technique est également caractérisée par l'accumulation dans un système réticulo-endothélial tel que le foie et la rate, et comme il a déjà été décrit, ceci pose un problème pour la libération du médicament dans d'autres tissus.

Comme moyens pour résoudre les problèmes qui précèdent, on connaît une technique d'application de lipoprotéines sériques composées d'un lipide simple (y compris des stérols, comme dans la présente description), d'un lipide complexe et d'une apolipoprotéine comme support de médicament (JP-A 60 163 824). Cependant, ce support introduit un médicament dans des cellules par reconnaissance physiologique et spécifique de la lipoprotéine. Par conséquent, le support est rapidement transféré dans le tissu en passant par son récepteur, de sorte que sa disparition du sang est relativement rapide. Pour cette raison, le transfert dans un tissu ayant une faible activité des récepteurs n'est pas toujours suffisant. En outre, Papolîpoprotéine est indispensable comme constituant de celui-ci de sorte que la technique présente un inconvénient comme technique industrielle qui conduit à des coûts de production élevée.

En outre, on connaît un essai de préparation d'une émulsion de graisse d'une taille de particules inférieure à 200 nm (voir JP-A 62/29 511). Cependant, dans cette technique, la lécithine de jaune d'oeuf est utilisée en petite quantité et en conséquence, les microparticules obtenues se recoagulent avec le temps de sorte qu'il existe un problème d'instabilité. En outre, il existe un inconvénient en ce qui concerne la stabilité in vivo, de sorte que cette technique ne convient pas pour la libération dans d'autres tissus.

Problèmes que l'invention permet de résoudre

En général, un médicament administré se déplace et se répartit dans l'organisme en raison des propriétés intrinsèques de sa molécule. Puis, le médicament atteint son site d'action où il présente ses effets pharmacologiques. Dans ce cas, il est souhaitable que le médicament ne soit concentré que sur l'emplacement nécessaire pour présenter ces effets pharmacologiques, mais le médicament est généralement réparti dans l'organisme entier, et le médicament se déplace également dans les emplacements qui n'exigent pas de médicament.

Ceci est parfois une cause d'effets secondaires. Par conséquent, il devient important et nécessaire d'améliorer la distribution des médicaments dans l'organisme.

Compte-tenu de ce qui précédé, la demanderesse a poursuivi l'étude de nouveaux vecteurs de

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médicaments (1) n'affectant pas les activités pharmacologiques intrinsèques des médicaments, (2) capables de libérer efficacement un médicament dans le tissu visé, (3) capables de réduire la fixation par le système réticulo-endothélial, (4) capables de maintenir la concentration d'un médicament dans le sang et (5) capables de réduire la dose de médicament nécessaire. A la suite de ces études, elle a finalement réussi à accomplir la présente invention.

Le vecteur de médicament selon l'invention est tel que défini dans la revendication 1.

Ainsi, le vecteur de médicament de la présente invention revêt la forme d'une émulsion de graisse stable dont le diamètre de particules est dans l'intervalle de 5 nm à 100 nm. Ceci permet d'éviter la fixation dans le système réticulo-endothélial. En divisant le support de médicament d'une manière superfine, sa concentration dans le sang peut être maintenue à un niveau plus élevé que pour une émulsion de graisse ayant un diamètre d'environ 0,2 (im. Le fait que le diamètre moyen des particules lipidiques soit ce 100 nm ou moins permet au vecteur de médicament d'exsuder aisément des vaisseaux sanguins dans une région dans laquelle la vasoperméabilité est accentuée.

Il est connu que diverses régions appelées systèmes de pores (comprenant un système de pores de petites dimensions ayant un diamètre jusqu'à 9 nm et un système de pores de grandes dimensions ayant un diamètre de 25 à 70 nm et il est connu que la vasoperméabilité est encore accrue dans diverses régions visées parmi lesquelles les vaisseaux néoformés) ou d'autres interstices entre les cellules sont présents dans les vaisseaux sanguins et que la vasoperméabilité est accentuée dans diverses régions visées, parmi lesquelles inflammation, tumeur et athérosclérose. Dans une telle région, le support de médicament de la présente invention exsude sélectivement du vaisseau sanguin en grandes quantités et est transféré dans le tissu visé. En même temps, le médicament contenu dans le support de médicament est également libéré dans la lésion. De ce fait, le médicament peut aisément être libéré de manière sélective dans la région visée, de telle sorte que la concentration du médicament dans la région visée augmente et que son effet peut être amélioré. En outre, en utilisant le support de médicament de la présente invention, on peut administrer un médicament en même temps que le lipide de telle sorte qu'on peut améliorer l'aptitude à la libération prolongée d'un médicament et les propriétés lymphotropes d'un médicament. Le support de médicament de la présente invention présente également des propriétés d'aptitude à la phagocytose.

Conformément à la présente invention, on utilise un lipide super-finement divisé comme support de médicament. Grâce aux particules divisées de manière superfine, les problèmes décrits ci-dessus, à savoir non seulement celui de la recherche de l'obtention des effets qui précèdent, mais également celui d'éviter la fixation par le système réticulo-endothélial, etc., peuvent être résolus simultanément. Ainsi on peut également obtenir un effet de maintien de la concentration des médicaments dans le sang.

Dans le support de médicament conforme à la présente invention, on utilise des quantités plus importantes de la couche de surface (par exemple, un lipide complexe) par rapport au noyau (par exemple un lipide simple), par comparaison avec le complément fluide riche en calories classique, comprenant de l'huile de soja et de la lécithine de jaune d'œuf, et on réalise des particules divisées de manière superfine.

Pour faciliter l'obtention de particules superfinement divisées dans le support de médicament de la présente invention, il est souhaitable que la teneur de la couche superficielle (par exemple du lipide complexe) soit dans l'intervalle de 35 à 70%. Ceci parce que la surface spécifique du noyau du support de médicament est augmentée par la division superfine de telle sorte qu'il est nécessaire d'augmenter la quantité du lipide complexe pour recouvrir le noyau en tant que couche de surface et stabiliser l'émul-sion. Dans le cas où on utilise moins de 15% de lipide complexe, il est inévitable d'entremêler des particules ayant un diamètre de 0,2 nm ou davantage; dans le cas où l'on utilise plus de 70% du lipide complexe, il est inévitable d'entremêler des particules de liposome. Grâce à cette constitution, on peut obtenir une émulsion stable d'ëmulsion lipide superfinement divisé et l'utiliser comme un excellent support de médicament, ce qui a été établi pour la première fois par la présente invention.

C'est-à-dire que l'on considère que le support de médicament de la présente invention serait sous la forme d'une émulsion de graisse composée d'une substance comme noyau et d'une substance comme couche superficielle, dans laquelle la substance constituant le noyau de l'émulsion de graisse est un limpide simple, un dérivé de lipide ou un mélange de ceux-ci, et la proportion de cette première substance dans le support de médicament est de 30 à 65%; la substance constituant la couche superficielle de l'émulsion de graisse est un lipide complexe, un dérivé de lipide ou un mélange de ceux-ci, et la proportion de cette deuxième substance dans le support de médicament est de 35 à 70%; la présence simultanée de ces deux caractéristiques (1) et (2) permettant d'obtenir un support de médicament ayant un diamètre moyen de particules inférieur à 200 nm.

Dans la présente invention, il est nécessaire que le médicament soit introduit par dispersion ou dissolution dans le support de médicament, formation d'une mîcelle mélangée avec un ou plusieurs constituants du support de médicament ou une liaison chimique avec un ou plusieurs constituant du support de médicament, de telle sorte que le médicament administré ne soit pas aisément libéré du support de médicament

Comme lipide utilisé dans le support de médicament de la présente invention, on peut citer un lipide simple, un lipide transformé en dérivé ou un lipide complexe d'origine animale, végétale ou minérale ou un mélange de ceux-ci. Des exemples comprennent un lipide simple, un lipide transformé en dérivé ou un lipide complexe obtenu à partir de jaune d'œuf, de soja, de coton, de lin, de maïs, de sésame, d'arachide,

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de carthame, de tissu de bovin, de tissu de porc, de tissu de mouton, etc. ou un lipide simple, un lipide transformé en dérivé ou un lipide complexe, préparé par voie purement synthétique.

Des exemples du lipide simple comprennent des lipides neutres tels que l'huile de soja raffinée, l'huile de graine de coton, l'huite de lin, l'huile de sésame, l'huile de maïs, l'huile d'arachide, l'huile de carthame, la trioléine, le trilinoléine, la tripalmitine, là tristéarine, la trimyristine, la triarachidonine, etc. Lé lipide simple comprend aussi des dérivés du cholestérol tels que Poléate de cholestéryle, le linoléate de cholestéryle, ie myristate de cholestéryle, le palmitate de cholestéryle, l'arachidonate de cholestéryle, etc. Ceci provient de ce que les lipides neutres sont décomposés de manière relativement aisée par diverses lipases présentes dans l'endothélium des vaisseaux sanguins, etc., tandis que les dérivés du cholestérol ne sont décomposés que difficilement par ces enzymes.

Comme lipide transformé en dérivé, on peut citer par exemple, le cholestérol, des acides gras tels que l'acide stéarique, l'acide palmitique, l'acide oléïque, l'acide linoléïque, l'acide linolénique, l'acide éicosa-pentaénoïque, etc. et des dérivés de ceux-ci, le squalène, etc. On peut aussi les utiliser comme adjuvants d'émulsification. En outre, on peut citer à titre d'exemples des composés huileux tels que l'azone, etc.

Comme lipide complexe, on peut citer par exemple, des phospholipides obtenus à partir du jaune d'œuf, du soja, du tissu de bovin, du tissu de porc, etc. ou des phospholipides et glycolipldes préparés de manière purement synthétique. Des exemples de phospholipides comprennent la phosphatidylcholine, la phosphatidyléthanolamine, la phosphatidylsérine, le phosphatidylinositoi, etc., tels que la phosphatidylcholine de jaune d'œuf, la phosphatidylcholine de soja, la dipalmitoylphosphatîdylcholine, la dimyristoyl-phosphatidylcholine, là distéaroylphosphatidylcholine, la dioléoylphosphatidylcholine, le dipalmitoylphos-phatidylinositol, etc. On peut également utiliser des produits obtenus par hydrogénation de ces phospholipides. Parmi ceux-ci, un exemple représentatif préféré est la phosphatidylcholine de jaune d'œuf. Comme glycolipide, on peut citer le cérébroside, etc. On peut également citer des stérylglucosides, par exemple le p-sitostéryl-p-D-glucoside, etc. En outre, on peut également utiliser des lipides ayant une charge telle que la stéarylamine, le phosphate de dicétyle, l'acide phosphatidique, etc., pour conférer au support de médicament une charge superficielle.

Le médicament auquel la présente invention est applicable peut être n'importe quel médicament pour autant qu'il est pharmaceutîquement acceptable, mais il n'est pas particulièrement limité. On peut également utiliser un médicament qui est insoluble ou peu soluble. Dans la présente invention, le médicament forme aisément un complexe avec le support.

Dans un médicament soluble dans l'eau, le support de médicament de la présente invention peut être formé en utilisant le médicament chimiquement lié aux constituants (par exemple le lipide, etc.) du support.

Même si un médicament est instabte dans l'organisme, et n'est par conséquent pas susceptible d'être administré jusqu'à présent, un tel médicament peut lui aussi être administré aisément en utilisant le support de médicament de la présente invention. Le médicament contenu dans le support de médicament de la présente invention est présent dans les gouttelettes d'huile de lipides dans un état tel qu'il est protégé de l'environnement de telle sorte qu'une décomposition enzymatique ou non enzymatîque peut être évitée.

Le médicament auquel le support de médicament de la présente invention est applicable n'est pas particulièrement limité, comme it a été décrit ci-dessus. Des exemples comprennent un agent anti-inflammatoire, un analgésique, un agent anti-allergique, un antibiotique, un agent chimiothérapique, un agent anti-cancéreux, un agent antiviral, un agent anti-athérosclérose, un agent normo-lipémiant, un agent anti-ulcère, un immunorégulateur, un vaccin, un fixateur de radicaux, un brochodilatateur, un hypnotique, un tranquillisant, un anesthésique local, un agent diagnostique etc. Des exemples particuliers de ces médicaments sont des agents anti-cancéreux tels que l'Ancitabine, le fluorouracîle, la mitomycine C, la mito-mycine C farnésylamine, la mitomycine C amide farnésylacétîque, le Carmofur, le palmitate de Futraful, le myristate de 5-fIuorouracÎle, l'Adriamycine, la Daunomycine, l'Aclarubicine, la Maclarubicine, la Vin-blastine, la Vincristine, les esters d'acides gras de la Cytarabine, le Mitotane, l'Estramustine, etc., des agents antiviraux tels que le Dichloroflavane, etc., des stéroïdes (par exemple le palmitate de Dexamé-thasone, le palmitate d'hydrocortisone, le palmitate de Prednisolons le stéarate de Dexaméthasone, la méthylprednisolone, la Paraméthasone, l'acétomide de Fluocinolone, le propîonate de Vectaméthasone, des esters d'acides gras de l'hydrocortisone, i'Aldostérone, la Spironolactone, etc.) et des agents non-stéroïdiens (par exemple i'Ibuprofène, l'acide Flufénamique, le Kétoprofène, la Phénacétine, l'Antipy-rine, l'Aminopyrine, l'indoléacétate de Phénylbutazone, les dérivés de l'acide biphénylylpropionique, l'Jn-dométacine, l'ester éthoxycarbonylméthylique de l'Indométacine, l'ester stéarylique de l'indométaGine, l'ester cétylique de l'aurothïomalate de sodium, le Diclofénac, l'acide acétylsalicylique et ses dérivés, etc.). Des agents anti-allergisants tels que le Tranylast, la Kétotifène, l'Azélastine, etc. peuvent également être utilisés. Comme antibiotiques et agents chimiothérapiques, on peut citer par exemple les tétra-cyclines, ('Erythromycine, la Midécamycine, l'Amphotéricine, l'acide Nalidixique, la Griséofulvine, la Minocycline, etc. Comme exemples de Prostaglandines, on peut utiliser la PGE1, la PGA1, les esters alkyli-ques de la PGA1, les esters alkyliques de la PGE1, les dérivés de la PGEt, les dérivés de la PGI2, les dérivés de la PGD2, etc. On peut citer des agents antihistaminiques tels que la Diphénhydramine, î'Or-phénadirine, la Chlorphénoxamine, la Chlorphéniramine, la Prométhazine, la Mécridine, la Cyprohep-tadine, l'acétate de Loxatidine, etc. En outre, comme anesthésiques locaux, on peut citer la Lidocaïne, la Benzocaïne, le Dantrolène, la cocaïn, la Tétracaïne, la Pipérocaïne, la Mépyracaïne, et leurs dérivés,

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etc. On peut également citer des agents correcteurs dés troubles hépatiques (par exemple le Maro-tirate, l'acide Glycyrrétinique, l'acétylglycyrrétinate d'éthyle, le glycyrrétinate de méthyle, etc.) des agents anti-ulcère (par exemple le Farnésol, le géraniol, le Géfarnate, la Téprenone, le Plaunotol, le So-farcon, etc.). On peut citer aussi des agents agissant sur le système nerveux central (par exempte le Phénobarbital, le Méthaqualon, l'héroïne, le Diazépam, le Médazépam, le Frazépam, le Clotiazépam, l'Eti-zolam, la Mécridine, le Bucridine, l'Adiphénine, la Méthamphétamine, l'Imipramine, la Chlorimlpramîne, l'Amitriptyline, la Miansérine, la Triméthadione, le Phénsuximide, le Tétrabenzamide, le Benzquinamîde, le camphre, la Dimorphoramine, la strychnine, la Chlorpromazine, la Prométhazine, la Prochlorpérazine, la Méquitazine, la Triflupromazine, la Lévomépromazine, le Difénidol, etc. et des dérivés de ceux-ci). On peut également citer des dilatateurs cérébrovasculaires (par exemple la Cinnarizine, etc.). Comme bronchodilatateurs, on peut citer la Vestphylline et d'autres dérivés de la théophylline, la méthyléphédrine, etc. Des agents anticholinergiques (par exemple la Benztropine, la Physostigmine, l'Atropine, la Scopolamine, etc.), des bloquants parasympathiques (par exemple, l'Oxyphénclimine, la Pirenzémine, l'Etomi-drine, etc.), des bloquants du calcium (par exemple le Diltiazem, la Nifédipine, le Vérapamil, etc.), des a-bloquants (par exemple la Dibenzamine, la Phénoxybenzamine, etc.), des agents anti-tussifs, (par exemple la Noscapine, le Dextrométhorphan, la Pentoxyvérine, la Benpropérine, etc.), des agents pour traiter l'hypertophie prostatique (par exemple le Gastron, l'Oxendelone, etc.), des agents pour traiter le glaucome (par exemple, le Pilocarpine, etc.), des agents agissant sur le muscle lisse (par exemple la Spar-téine, la Papavérine, etc.), des agents pour traiter l'hyperlipémie (par exemple le Chlorfibrate, le Cimfi-brate, le Probucol, etc.) etc. On peut citer en outre par exemple des aminoacides, des vitamines, le Dila-zep, l'Ubidécarénone, le Flavoxate, la Cyclosporine, des vaccins pour l'influenza, etc., la Dibenzthione, la Diphénylpyraiine, le Phénovalinium, la Métadione, le Tofisopam, le limonène, etc.).

Des anti-oxydants (par exemple le tocophérol, les dérivés de la flavone, les dérivés de l'acide gal-lique, les dérivés des acides du café, le Goshipol, le Sézamol, des oxyacides gras, le camphène, le Ci-néol, le Rosmanol, l'eugénol, la Filozurucine, etc., les catéchols, des homologues du lignane, l'acide p-coumarique, des stérols, des terpènes, le bromophénol, etc.) peuvent également être un des constituants du support de médicament de la présente invention.

En outre, le guaiazulène des médicaments bruts du type huile essentielle (par exemple l'essence de noyau d'abricot, l'essence du fenouil, l'essence de thym, l'essence de thérébentine, l'essence d'eucalyptus, l'essence de palme, l'essence de graine d'oeillette, l'essence de tsubaki, l'essence de menthe poivrée, l'essence de clou de girofle, l'essence de menthe, l'essence de sauge et d'autres constituants pour médicaments bruts parfumés, etc.) etc. peuvent également entrer dans la constitution du support de médicament de la présente invention.

pomme agents diagnostiques, on peut citer par exemple un composé marqué par un radioisotope, un médicament radioactif ou des esters d'acides gras de l'huile d'oeillette iodés comme agents de contraste pour les rayons X etc.

Le médicament auquel le support de médicament de la présente invention est applicable n'est pas particulièrement limité, comme il a été indiqué ci-dessus, mais, compte-tenu des caractéristiques intrinsèques du support de médicament, on souhaite en générai des médicaments agissant sur l'inflammation, les tumeurs, les vaisseaux sanguins ou le système immunitaire ou lymphoïde.

La concentration du médicament dans le support de médicament de la présente invention peut adéquatement varier dans un intervalle ne dépassant pas 85% du support de médicament, suivant l'activité biologique du médicament. En outre, on peut faire varier adéquatement la concentration du support de médicament de la présente invention dans les préparations médicales obtenues en utilisant le support de médicament de la présente invention, et celle-ci est facultative.

Pour la préparation du support de médicament de la présente invention et des préparations médicales l'utilisant, on peut faire appel à divers procédés de préparation des émulsions appliqués jusqu'à présent. Par exemple, on peut les préparer par un procédé qui comprend une division suffisamment fine de tous les constituants, y compris le médicament, au moyen d'un homogénéiseur du type Manton-Gaurin, d'un microfluidiseur, d'un homogénéiseur ultrasonore, etc. On peut aussi les préparer par un procédé qui comprend la solubilisation des constituants en utilisant un agent tensio-actif (par exemple un acide biliaire), un solvant soluble dans l'eau (par exemple l'éthanol, le polyéthylèneglycol), etc. puis l'élimination de l'agent tensio-actif ou du solvant soluble dans l'eau, etc. par dialyse ou filtration sur gel, etc. Des acides gras ou leurs dérivés, etc. peuvent aussi être ajoutés comme adjuvants d'émulsification. En outre, le support du médicament et ses préparations médicales peuvent aussi être obtenus en ajoutant un médicament à une émulsion de graisse exempte de particules ayant un diamètre de 200 nm ou davantage, préalablement préparée par les procédés précités.

La forme et le diamètre de particules du support de médicament de la présente invention peuvent aisément être confirmés au moyen d'un microscope électronique, d'un analyseur de diamètre de particules du type à dispersion de la lumière, par filtration à travers un filtre à membrane, etc. Comme constituants facultatifs pour les préparations médicales utilisant le support de médicament de la présente invention, on peut citer les additifs et les substances auxiliaires utilisés pour les injections ordinaires etc. Des exemples de ceux-ci sont un anti-oxydant, un conservateur, un stabilisant, un agent isotonique, un tampon, etc. Les quantités nécessaires et optimales de ces additifs, des substances auxiliaires etc. peuvent varier en fonction de leurs objectifs.

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Le support de médicament de la présente invention obtenu comme il a été décrit ci-dessus peut être stériiisé (par exemple par filtration ou avec de la vapeur sous haute pression dans un autoclave), si nécessaire, et scellé dans une ampoule avec de l'azote gazeux. Si nécessaire également, le support de médicament peut aussi être lyophilisé. Le support de médicament lyophilisé de la présente invention peut être reconstitué en lui ajoutant une solution appropriée.

Le support de médicament de la présente invention est généralement administré à l'homme et aux animaux par voie intraveineuse, mais si nécessaire, il peut aussi être administré par voie intra-artérielle, in-tra-musculaire, sous-cutanée, etc.

En outre, le support de médicament de la présente invention peut aussi être utilisé comme collyre, comme gouttes nasales, comme agent oral, suppositoire etc. Dans ce cas, des additifs tels que des bases, excipients etc. pharmaceutiquement acceptables peuvent être donnés comme exemples de constituants facultatifs.

Effets

Conformément à l'invention, la disponibilité du médicament peut être améliorée d'une manière marquée. Les effets du support de médicament de la présente invention peuvent être résumés en ce que les problèmes de la technique antérieure sont résolus (1) la libération d'un médicament dans la lésion visée est améliorée, (2) la fixation par le système réticulo-endothélial est évitée, (3) on peut maintenir la concentration dans le sang du médicament qui y est contenu, (4) la stabilité au cours du stockage est assurée, (5) les coûts de production sont réduits, etc. Ces effets ont été obtenus pour la première fois par la présente invention.

Il est également caractéristique que les constituants principaux du support de médicament de la présente invention sont des lipides thérapeutiquement acceptables, classiquement utilisés pour le traitement dans le domaine clinique, de telle sorte qu'ils peuvent être utilisés d'une manière extrêmement sûre.

EXEMPLES

La présente invention sera expliquée ci-après de manière plus détaillée en se référant à des exemples relatifs à la préparation du support de médicament de la présente invention, mais elle ne doit pas être considérée comme limitée à ceux-ci.

EXEMPLE 1

A 27 mg de trioléine, on ajoute 38 mg de lécithine de jaune d'œuf et 10 mg de guaiazulène (agent anti-inflammatoire), et on ajoute au mélange 10 ml de sérum physiologique. En utilisant un homogénéiseur ultrasonore du type à sonde (Branson Sonifier Modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes en refroidissant à la glace. Le support de médicament formé, contenant du guaiazulène, est bleu et limpide. Le diamètre moyen de particules du support de médicament est de 26,4 nm lorsqu'on le mesure au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre de particules par dispersion de la lumière. En outre, à l'examen au microscope électronique, le support de médicament s'avère constitué des particules uniformes, sphériques, divisées de manière ultrafine. On n'observe aucune membrane lipidique à deux couches comme dans le liposome. On observe aussi que le support de médicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

EXEMPLE 2

On mélange de la lécithine de jaune d'œuf, 2,5 mg et 10 mg de guaiazulène et on ajoute au mélange 10 ml de sérum physiologique. En utilisant un homogénéiseur ultrasonore du type à sonde (Branson Sonifier modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes en refroidissant à la glace. Le support de médicament formé, contenant du guaiazulène, a un diamètre de particules moyen, mesuré avec un appareil pour ia mesure des particules dispersant la lumière, de 48,4 nm. On constate également que le support de médicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 jim ou davantage.

EXEMPLE 3

A100 mg de trioléine, on ajoute 100 mg de lécithine de jaune d'œuf et 4 mg d'un composé (palmitate de dexaméthasone) obtenu en liant chimiquement un acide gras avec la Déxaméthasone (agent anti-inflammatoire), et on ajoute au mélange 10 ml d'une solution aqueuse de glycérol 0,24 M. En utilisant un homogénéiseur ultrasonore du type à sonde (Branson Sonifier modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes en refroidissant à la glace. Le support de médicament formé, contenant du palmitate de Dexaméthasone, est d'un blanc légèrement bleuâtre et limpide. Le diamètre moyen de particules du support de médicament mesuré au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre des particules par dispersion de la lumière, est de 29,9 nm.

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On constate aussi que le support de médicament traverse une membrane filtrante de 0,2 jim et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

EXEMPLE 4

A 80 mg de trioléine, on ajoute 20 mg de linoléate de cholestéryle, 100 mg de lécithine de jaune d'œuf et 4 mg de palmitate de Dexaméthasone. Puis on ajoute au mélange 10 mi de solution aqueuse de glycérol 0,24 M. En utilisant un homogénéiseur ultrasonore du type a sonde (Branson Sonifier modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes en refroidissant à la glace. Le support de médicament formé, contenant du palmitate de Dexaméthasone est d'un blanc légèrement bleuâtre et limpide. Le diamètre moyen de particules du support de médicament, mesuré au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre de particules par dispersion de la lumière, est de 30,6 nm. On constate aussi que le support de médicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

EXEMPLE 5

A100 mg de linoléate de cholestéryle on ajoute 100 mg de lécithine de jaune d'œuf et 4 mg de palmitate de Dexaméthasone. Puis on ajoute au mélange 10 ml d'une solution aqueuse de glycérol 0,24 M. En utilisant un homogénéiseur ultrasonore du type à sonde (Branson Sonifier modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes, en refroidissant à la glace. Le support de médicament formé, contenant du palmitate de Dexaméthasone, est d'un blanc légèrement bleuâtre et limpide. Le diamètre moyen de particules du support de médicament, mesuré au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre de particules par dispersion de la lumière, est de 22,7 nm. On constate également que le support de medicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

EXEMPLE 6

A100 mg de trioléine, on ajoute 100 mg de lécithine de jaune d'œuf et 10 mg de Diphénhydramine (agent antihistaminique). Puis on ajoute au mélange 10 ml d'une solution aqueuse de glycérol 0,24 M. En utilisant un homogénéiseur ultrasonore du type à sonde (Branson Sonifier modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes en refroidissant à la glace. Le support de médicament formé, contenant de la diphénhydramine, est d'un blanc légèrement bleuâtre et limpide. Le diamètre moyen de particules du support de médicament, mesuré au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre de particules par dispersion de la lumière, est de 31,6 nm. On constate aussi que le support de médicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

EXEMPLE 7

A 100 mg de trioléine, on ajoute 100 mg de lécithine de jaune d'œuf. Puis on ajoute au mélange 10 ml d'une solution aqueuse de glycérol 0,24 M. En utilisant un homogénéiseur ultrasonore du type à sonde (Branson Sonifier modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes en refroidissant à la glace. Le support de médicament, formé est d'un blanc légèrement bleuâtre et limpide. Le diamètre moyen de particules du support de médicament, mesuré au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre de particules par dispersion de la lumière, est de 47,2 nm. On constate aussi que ie support de médicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

Un composé (le palmitate de Vînblastine), 500 ng, obtenu en liant chimiquement un acide gras avec la Vinblastine (agent anti-cancéreux) est ajouté au support de médicament obtenu ci-dessus. On malaxe doucement le mélange et on l'agite pendant 7 heures pour fixer le médicament sur le support de médicament. On obtient ainsi le support de médicament contenant le médicament.

Un composé, (le palmitate de 5-fluorouraciIe), 500 ng» obtenu en liant chimiquement un acide gras avec du 5-fluorouracile (agent anti-cancéreux) est ajouté au support de médicament obtenu ci-dessus. On malaxe doucement le mélange et on l'agite pendant 6 heures pour fixer le médicament dans le support de médicament. On obtient ainsi un support de médicament contenant le médicament.

Un composé (le lévulinate de Cytarabine), 500 ng, obtenu en liant chimiquement un acide gras avec la Cytarabine (agent anti-cancéreux) est ajouté au support de médicament obtenu ci-dessus. On malaxe doucement le mélange et on l'agite pendant 6 heures pour fixer le médicament dans le support de médicament. On obtient ainsi un support de médicament contenant le médicament.

EXEMPLE 8

A 80 mg de trioléine, on ajoute 20 mg de linoléate de cholestéryle et 100 mg de lécithine de jaune d'œuf. Puis on ajoute au mélange 10 ml d'une solution aqueuse de glycérol 0,24 M. En utilisant un homogénéiseur

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ultrasonòre du type à sonde (Branson Sonifier modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes en refroidissant à la qlace. Le support de médicament formé est d'un blanc légèrement bleuâtre et limpide. Le diamètre de particules moyen du support de médicament, mesuré au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre de particules par dispersion de la lumière, est de 19,1 nm. Les résultats analytiques sont donnés dans la fig. 1. On constate également que le support de médicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

EXEMPLE 9

A 20 mg d'huile de soja raffinée, on ajoute 20 mg de lécithine de jaune d'œuf. Puis on ajoute au mélange 10 ml d'une solution aqueuse de glycérol 0,24 M. En utilisant un homogénéiseur ultrasonore du type à sonde (Branson Sonifier modèle 185), on soumet le mélange à un traitement ultrasonore pendant 60 minutes en refroidissant à la glace. Le support de médicament formé est d'un blanc légèrement bleuâtre et limpide. Le diamètre moyen de particules du support de médicament, mesuré au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre de particules par dispersion de la lumière, est de 16,1 nm. On constate aussi que le support de médicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage»

En outre, on prépare un support de médicament de la même manière que ci-dessus, excepté qu'on utilise 40 mg d'huile de soja raffinée. Le support de médicament formé est d'un blanc légèrement bleuâtre et limpide. Le diamètre de particules du support de médicament, mesuré au moyen d'un dispositif de mesure du diamètre de particules par dispersion de la lumière, est de 37,7 nm. On constate aussi que le support de médicament traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

EXEMPLE 10

A10 g d'huile de soja, on ajoute 10 g de lécithine de jaune d'œuf. Puis on ajoute au mélange 1 litre d'une solution aqueuse de glycérol 0,24 M. En utilisant un microfluidiseur, on émulsionne le mélange. On constate que le support de médicament formé traverse à 100% une membrane filtrante de 0,2 nm.et ne contient pas de particules de 0,2 nm ou davantage.

[Essai de stabilité du support de médicament de la présente invention]

EXEMPLE D'ESSA11-1

On scelle l'échantillon obtenu dans l'Exemple 1 dans une ampoule de verre ambré d'un volume de 1 ml en même temps que de l'azote gazeux. On effectue un essai de dégradation forcée à 60°C pendant 4 semaines de la manière classique. Le taux résiduel de guiazulène est de 98,3%, et il est confirmé que le support de médicament de la présente invention a des effets sur la stabilité du médicament.

EXEMPLE D'ESSA11-2

On scelle respectivement les échantillons obtenus dans les Exemples 1,3 et 4 ci-dessus dans une ampoule de verre ambré d'un volume de 1 ml, en même temps que de l'azote gazeux. Après un traitement de stérilisation des ampoules par la vapeur sous haute pression en autoclave, on mesure le diamètre de particules de chaque échantillon au moyen d'un dispositif de mesure des diamètres de particules par dispersion à la lumière. Il n'y a pas de différence significative entre le diamètre avant et après le traitement. On n'observe ni agrégation ni augmentation du diamètre desparticules. Puis on stocke les échantillons à 4°C pendant 6 mois mais on n'observe aucune modification telle qu'agrégation etc.

EXEMPLE D'ESSA11-3

On lyophilise de la manière classique l'échantillon obtenu dans l'Exemple 3 décrit ci-dessus. Puis on ajoute à l'échantillon de l'eau distillée pour injection, après quoi on agite pour le reconstituer. Puis on mesure le diamètre de particules de l'échantillon au moyen d'un dispositif de mesure des diamètres de particules par dispersion de la lumière. Le diamètre moyen de particules est de 28,3 nm. Il ne se produit ni agrégation significative ni augmentation du diamètre de particules mais l'échantillon est uniformément dispersé.

[Essai sur l'utilité de la présente invention]

EXEMPLE D'ESSAI 2-1

On utilise comme échantillon d'essai le support de médicament de la présente invention contenant du palmitate de Dexaméthasone préparé comme dans l'Exemple 3, marqué par du 3H. Comme échantillon comparatif, on utilise une émulsion de graisse ayant un diamètre de 0,2 nm comme dans la technique anté8

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rieure. Cet échantillon comparatif est obtenu en ajoutant 10 ml d'une solution aqueuse de glycérol 0,24 M à 4 mg de palmitate de Dexaméthasone marqué par du 3H, 100 mg d'huile de soja raffinée et 12 mg de lécithine de jaune d'œuf.

On administre à des rats, par voie intraveineuse, l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif. Puis on examine les modifications de la concentration dans le sang.

La modification de la radioactivité totale du plasma lorsque l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif sont administrés par voie intraveineuse dans la vaine caudale de rats mâles de souche SD (pesant environ 210 g) à une dose de 0,05 mg/kg, calculée en Dexaméthasone, est indiquée dans la fig. 2. L'échantillon comparatif disparaît rapidement du plasma, mais sa disparition de l'échantillon d'essai est modérée. Les durées de demi-vie dans les phases de répartition sont de 10,5 minutes et 5,5 minutes, respectivement.

EXEMPLES D'ESSAI 2-2

On compare la libération du médicament dans une région inflammatoire provoquée par un œdème à la carragénine entre l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif, en utilisant un support de médicament de la présente invention, le palmitate de Dexaméthasone marqué par du 3H, préparé d'une manière similaire à l'Exemple 4 comme échantillon d'essai, et le même échantillon comparatif que dans l'Exemple d'essai E-1.

Tableau 1

Libération de médicament dans la région enflammée par la carragénine

Echantillon d'essai

Echantillon témoin

Patte avec inflammation

(ng)

475 ±175

!54± 17

(ng/g)

204± 53

64+8

Patte témoin

(ng)

164± 19

89 ±24

(ng/g)

94 ±8

52 ±14

Région de l'œdème

(ng/g)

538 ±142

94 ±42

Plasma

(ng/g)

448 ±38

122 ±12 •

(moyenne ± écart-type)

L'œdème à la carragénine a été provoqué par administration sous-cutanée de 0,1 mi de X-carragénine à 0,5% à des rats mâles de souche SD (pesant environ 195 g) au talon d'une patte. Deux heures après l'administration de carragénine, on administre par voie intraveineuse l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif dans la veine caudale, à la dose de 0,5 mg/kg, calculée en Dexaméthasone. Soixante minutes après l'administration intraveineuse, on recueille du sang de l'aorte de l'abdomen pour obtenir du plasma. En même temps, on coupe la patte portant l'inflammation et la patte opposée (patte témoin) au joint de la cheville. La radio-activité de chacune est mesurée après traitement par un composé oxydant pour les échantillons.

Dans le Tableau 1, en ce qui concerne l'échantillon d'essai, des quantités importantes du médicament sont transférées dans la région inflammatoire (région de l'œdème) et l'on observe une forte accumulation sur la région inflammatoire par comparaison avec l'échantillon comparatif. On note une concentration de médicament 5,7 fois plus élevée que celle de l'échantillon comparatif dans la région de l'œdème provoquée par l'inflammation.

EXEMPLE D'ESSAI 2-3

Le Tableau 2 indique les résultats d'une comparaison de la libération d'un médicament dans l'hydrotho-rax et les principaux organes de rats souffrant d'une pleurésie expérimentale, en utilisant le même échantillon d'essai et le même échantillon comparatif que dans l'Exemple d'essai 2-2 décrit ci-dessus.

De la X-carragénine à 2%, 0,1 ml, est administrée à des rats mâles de souche SD (pesant environ 300 g) dans la cavité thoracique. Deux heures et demie après l'administration de la carragénine, on administre par voie intraveineuse l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif dans la veine caudale à la dose de 1,25 mg/kg, calculée en Dexaméthasone. Trente minutes après l'administration intraveineuse, on recueille du sang de l'aorte abdominale et on élimine par lavage le fluide présent dans la cavité thoracique avec une solution saline physiologique pour faire 10 ml. On détermine sa radio-activité. En même temps, on prélève les principaux organes. On mesure chaque radioactivité après traitement par un composé oxydant pour les échantillons.

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Tableau 2

Transfert dans ta région inflammatoire et les principaux tissus

Echantillon d'essai

Echantillon comparatif

Fluide de la cavité

(ng)

2,65

0,68.

thoracique

Diaphragme

(ng/g)

1,06

0,68

Rate

(ng/g)

3,05

27,34

Foie

(ng/g)

7,71

17,84

Cœur

(ng/g)

1,53

Poumon

(ng/g)

2,36

1,93

Rein

(ng/g)

2,66

1,37

Plasma

(ng/mi)

10,07

2,37

(Valeur moyenne convertie en Dexaméthasone)

Dans le Tableau 2, en ce qui concerne l'échantillon d'essai, de grandes quantités du médicament sont libérées dans la région inflammatoire (région hydrothoracique) et l'on observe une forte accumulation sur la région inflammatoire par comparaison avec l'échantillon comparatif. Une concentration en médicament 3,9 fois supérieure à celle de l'exemple comparatif est observée dans le fluide de la cavité thora-cique. En ce qui concerne la répartition dans les organes principaux, l'échantillon d'essai montre un transfert extrêmement faible dans les organes ayant un système réticulo-endothélial développé comme le foie et la rate.

EXEMPLE D'ESSAI 2-4

On administre par voie intraveineuse a des souris mâles BALB/C (pesant environ 25 g) le même échantillon d'essai et le même échantillon comparatif que dans l'Exemple d'essai 2-2 décrit ci-dessus. Trente minutes après l'administration, on détermine dans le plasma et le foie la concentration du médicament inchangé et la concentration de la Dexaméthasone en tant que métabolite de celui-ci. La dose est ajustée à 5 mg/kg, calculés en Dexaméthasone.

Le Tableau 3 montre la concentration du médicament inchangé (palmitate de Dexaméthasone, sa concentration est exprimée en Dexaméthasone) et de son métabolite (Dexaméthasone), déterminées séparément de manière quantitative.

Dans le cas de l'échantillon d'essai, la concentration dans le plasma est élevée et la répartition dans le foie est faible. En outre, l'échantillon d'essai est présent pour la plus grande partie dans le plasma sous la forme de médicament inchangé. Dans le cas de l'utilisation du support de médicament de la présente invention, on note de manière évidente le maintien de la concentration sanguine du médicament et un effet de prévention de la fixation dans le système réticulo-endothélial.

Tableau 3

Echantillon

Echantillon comparatif

d'essai

(ng/ml, g)

Médicament inchangé dans le plasma

36,3 ±2,2

7,7 ±1,6

Dexaméthasone dans le plasma

4,6 ± 0,5

5,2 ±0,9

Médicament inchangé dans le foie non détectable non détectable

Dexaméthasone dans le foie

24,0 ±1,2

41,0 ±1,3

Rapport foie/plasma en concentration

0,6 ±0,0

3,0 ±0,5

(quantité totale)

(Les valeurs indiquées sont des moyennes ± écart type)

EXEMPLE D'ESSAI 5

Pour le même échantillon d'essai et le même échantillon comparatif que dans l'Exemple d'essai 2-2 et une solution dans du sérum physiologique de phosphate de Dexaméthasone, on examine les effets pharmacologiques en utilisant l'inhibition de l'œdème à la carragénine comme indice.

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On administre de la X-carragénine (0,5%, 1 ml) par voie sous-cutanée à des rats mâles de souche SD (pesant environ 160 g) dans un talon d'une patte. Trente minutes après, on administre par voie intraveineuse dans la veine caudale, l'échantillon d'essai, l'échantillon comparatif et du phosphate de Dexaméthasone. Pour le groupe témoin, on administre du sérum physiologique. On mesure le volume de la patte avant l'administration de carragénine et 5 heures après l'administration de la manière classique, pour déterminer le rapport d'inhibition de l'œdème.

La fig. 3 montre la courbe dose-réponse (calculée sur la base de la Dexaméthasone). La fig. 4 montre la dose inhibitant l'œdème à 50% (DEso).

II est clair que l'échantillon d'essai a une activité anti-inflammatoire à peu près deux fois plus élevée que celle des deux autres échantillons, même dans une inflammation de ce type qui n'était pas améliorée par l'exemple comparatif de la technique antérieure. C'est-à-dire que l'effet du support de médicament de la présente invention est confirmé comme étant un effet d'amélioration de l'effet du médicament. Il est ainsi clair que ceci provient de ce que le médicament est libéré efficacement dans la légion visée en utilisant le support de médicament de la présente invention.

Tableau 4

Dose inhibant l'œdème à 50%

V

DE50 (mg/kg)

Echantillon d'essai

0,012

Echantillon comparatif

0,031

Phosphate de'Dexaméthasone

0,023

(Les valeurs indiquées sont obtenues par conversion en Dexaméthasone)

EXEMPLE D'ESSAI 2-6

Pour le même échantillon d'essai et le même échantillon comparatif que dans l'Exemple d'essai 2-2 et une solution dans le sérum physiologique de phosphate de Dexaméthasone, on examine les effets pharmacologiques par l'inhibition du granulome à la carragénine comme indice. En outre, on détermine les poids du thymus et des surrénales.

De la X-carragénine (2,0%, 4,0 ml) est administrée par voie sous-cutanée à des rats mâles de souche SD (pesant environ 160 g), dans le dos. A partir du cinquième jour, chaque échantillon est administré par voie intraveineuse dans la veine caudale, une fois par jour pendant 3 jours 3 fois au total. La dose du médicament administré est ajustée à 0,05 mg/kg/en une seule fois. Pour le groupe témoin, on administre du sérum physiologique. Huit jours après, on prélève le granulome, le thymus et la surrénale et on détermine leurs poids.

On observe dans la fig. 5 que l'échantillon d'essai présente manifestement une forte activité d'inhibition de la formation de granulome par comparaison avec l'échantillon comparatif et le phosphate de Dexaméthasone, et qu'il provoque aussi moins d'atrophie que dans le thymus et les surrénales. C'est-à-dire qu'il est démontré que l'échantillon d'essai possède un effet pharmacologique prononcé, mais moins d'effets secondaires.

Tableau 5

Poids du granulome, du thymus et de la surrénale

Granulome Thymus Surrénale

Témoin 20,5 ±5,4 g 416,0 ±63,3 mg 55,2 ±9,6 mg Echantillon d'essai 10,9 ±1,4 g 205,0 ±57,2 mg 44,5 ±7,2 mg Echantillon comparatif 15,5 ±2,6 g 149,8 ±31,3 mg 39,6 ± 2,7 mg (Les valeurs indiquées sont des moyennes ± écart-type)

EXEMPLE D'ESSAI 2-7

On effectue un essai pour confirmer l'aptitude à la libération dans la région de la tumeur.

Des cellules de la leucémie P388, au nombre de 10e, sont transplantées par voie sous-cutanée à des souris mâles CDF1 (pesant environ 25 g) sur le membre avant droit. Six jours après, on coupe le membre avant droit et on le soumet à l'expérience 5 jours après. Par ce traitement, on obtient un cancer métasta-tique expérimentât dans te haut du bras droit et tes ganglions lymphatiques axillaires droits. Comme

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échantillon d'essai, on utilise le support de médicament de la présente invention préparé dans l'Exemple 8 en utilisant du linoléate de cholestéryle marqué par du 3H. Comme échantillon comparatif, on utilise une émulsion de graisse ayant un diamètre de 0,2 nm, composé d'huile de soja raffinée et de lécithine de jaune d'œuf connue jusqu'à présent, dans laquelle on a incorporé du linoléate de cholestéryle marqué par du 3H. On administre par voie intraveineuse, dans la veine de la queue, l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif et 60 minutes plus tard, on prélève le haut du bras droit et les ganglions lymphatiques axillaires droits dans lesquels une métastase de la tumeur a été observée. On prélève simultanément un ganglion lymphatique non métastatique, le haut du bras gauche et les ganglions lymphatiques axillaires gauches. On mesure la radio-activité de chacun.

Comme le montre le Tableau 6, le support de médicament de la présente invention a été transféré dans la région de la tumeur à une concentration jusqu'à deux fois supérieure ou davantage. Dans l'échantillon comparatif, une telle libération sélective à une concentration élevée n'a pas été observée.

Tableau 6

Libération dans une tumeur de ganglion lymphatique métastatique j____

Echantillon Echantillon

. d'essai comparatif

Ganglions lymphatiques métastatiques 2,60 ±0,87 0,91 ±0,27

Ganglions lymphatiques non métastatiques 1,04 ± 0,27 0,86 ±0,39

(Les valeurs indiquées sont des % de la dose/g, moyennes ± écart-type)

EXEMPLE D'ESSAI 2-7a

On a effectué un essai confirmant un transfert dans la région d'une tumeur.

Des cellules tumorales S -180 (1 x 106) 0nt été inoculées par voie sous-cutanée dans la peau de l'abdomen de souris de souche ddY (poids corporel: environ 25 g). Au bout de 6 jours, le diamètre de la tumeur est devenu de 1 cm environ, et elle a été soumise à un essai.

Comme échantillon, on a utilisé le support pharmaceutique de l'invention, préparé dans l'Exemple 8 à partir de linoléate de cholestéryle marqué au 3H. Comme témoin, on a incorporé du linoléate de cholestéryle marqué au 3H à une émulsion de graisse comprenant de la lécithine de jaune d'œuf et de l'huile de soja, d'un diamètre de 0,2 micromètre, et on a utilisé le produit.

L'échantillon et le témoin ont été administrés tous deux dans la veine caudale, puis la tumeur a été prélevée au bout de 15 minutes, 1 heure et 24 heures, et la radioactivité a été déterminée.

Comme le montre le Tableau 6a, le support de la présente invention a été transféré, à chacun des temps essayés, dans la région de la tumeur, à une concentration à peu près 3 fois plus élevée que pour le témoin.

Tableau 6a

Transfert à une tumeur solide

Temps Echantillon essayé

Témoin

0,25 h 1,37 ±0,34

0,35 ±0,14

1 1,64±0,21

0,54 ±0,13

24 6,59 ±0,38

2,96 ±1,22

Les valeurs sont en % de la dose/g, moyenne ± écart-type

EXEMPLE D'ESSAI 2-8

En vue de confirmer la stabilité dans l'organisme du support de médicament de la présente invention dans lequel le linoléate de cholestéryle est Te noyau, le support de médicament de la présente invention obtenu dans l'Exemple 5 a été utilisé comme échantillon d'essai, et le support de médicament de la présente invention obtenu dans l'Exemple 4 comme échantillon comparatif. Ces échantillons ont été respectivement administrés à des rats par voie intraveineuse. On a déterminé la modification de la concentration sanguine. Des échantillons préparés en utilisant du palmitate de Dexaméthasone marqué par le 3H sont utilisés comme échantillons respectifs.

La modification de la radioactivité totale dans le plasma lorsque l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif sont administrés par voie intraveineuse à des rats mâles SD (pesant environ 250 g) dans la veine caudale, à la dose de 0,05 mg/kg, calculé en dexaméthasone, est indiquée dans la fig. 4. L'échan12

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tillon d'essai disparaît du plasma plus lentement que l'échantillon comparatif. Les demi-vies pour la disparition dans la phase de répartition sont de 21,6 minutes et de 11,5 minutes, respectivement.

EXEMPLE D'ESSAI 2-9

On mélange les échantillons d'essai obtenus dans les Exemples 3,4 et 5 et l'échantillon comparatif utilisé dans l'Essai 2-1 avec du plasma de rat, respectivement, pour examiner la stabilité. La concentration de l'échantillon dans le plasma est ajustée à 23 |ig/ml calculés en Dexaméthasone. Comme le montre le Tableau 7, la quantité du médicament inchangé (palmitate de Dexaméthasone) restant après incubation à 37°C pendant 90 minutes, c'est-à-dire la stabilité dans le plasma, est manifestement plus élevée pour le support de médicament de la présente invention que pour l'échantillon comparatif.

En outre, il est également confirmé que l'utilisation de linoléate de cholestéryle comme noyau du support de médicament de la présente invention augmente la stabilité en fonction de sa teneur.

Tableau 7 Stabilité dans le plasma

Quantité de médicament

inchangé restante

Echantillon d'essai obtenu dans l'Exemple 3

39,8%

Echantillon d'essai obtenu dans l'Exemple 4

'47,5%

Echantillon d'essai obtenu dans l'Exemple 5

68,1%

Echantillon comparatif de l'Exemple d'essai 2-1

20,1%

EXEMPLE D'ESSAI 2-10

Après avoir appliqué un collyre de la préparation d'essai dans l'œil de souris ddY (pesant environ 30 g), sous anesthésie au pentobarbital, on mesure la concentration du médicament dans le globe oculaire et l'aptitude à la libération du médicament dans le globe oculaire.

Les préparations d'essai sont les quatre décrites ci-dessous.

Echantillon d'essai - (1) Echantillon d'essai - (2) Echantillon comparatif-(1)

Exemple comparatif - (2)

support de médicament de la présente invention contenant un anti-in-ftammatoire, le guaiazulène obtenu dans l'Exemple 1

support de médicament de la présente invention contenant un anti-in-fiammâtoire, le guaiazulène obtenu dans l'Exemple 2 Emulsion de graisse ayant un diamètre de 0,2 jam, composé d'huile de soja et de lécithine de jaune d'œuf comme technique antérieure, dans laquelle du guaiazulène a été incorporé

Emulsion de graisse ayant un diamètre de 0,2 nm, composé d'huile de soja et de lécithine de jaune d'œuf comme technique antérieure, dans laquelle du guaiazulène-3-suifonate de sodium comme dérivé du guaia-zulène soluble dans l'eau a été mélangé et dissous.

La dose a été ajustée à 5 ng/œil, calculés en guaiazulène. Après application à l'œil, le globe oculaire a été prélevé au bout d'un temps défini. Après l'avoir lavé immédiatement avec du sérum physiologique, on homogénéise le globe oculaire et on dose le médicament par Chromatographie liquide à hautes performances.

La modification de la concentration du médicament dans le globe oculaire est indiquée dans la fig. 5. Les échantillons d'essai ont tous présenté une meilleure aptitude à la libération dans le globe oculaire que les échantillons comparatifs. Il est évident que la libération du médicament dans le globe oculaire est améliorée dans le cas de l'utilisation des supports de médicaments de la présente invention.

EXEMPLE D'ESSAI 2-11

En utilisant le support de médicament contenant du guaiazulène obtenu dans l'Exemple 1 comme échantillon d'essai et un dérivé du guaiazulène soluble dans l'eau, le guaiazuIène-3-sulfonate de sodium comme échantillon comparatif, on a administré ces échantillons dans l'œil de lapins blancs japonais (pesant environ 3 kg) pour examiner l'aptitude à la libération du médicament dans l'humeur aqueuse. Trente minutes

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après l'administration dans l'œil, l'humeur aqueuse a été recueillie et la concentration du médicament a été mesurée. Les résultats sont donnés dans le Tableau 8. C'est seulement dans le cas de l'utilisation du support de médicament de la présente invention que l'on a observé la libération du médicament dans l'humeur aqueuse.

Tableau 8

Libération d'un médicament dans l'humeur aqueuse après application à l'œil Echantillon d'essai 3,47 ± 3,31

Echantillon comparatif Non détectable

Résultat exprimé par la moyenne ± écart-type

EXEMPLE D'ESSAI 2-12

En utilisant le support de médicament de la présente invention contenant un antihistaminique, la diphénhydramine obtenue dans l'Exemple 6, comme échantillon d'essai et une solution de chlorhydrate de diphénhydramine dans du sérum physiologique comme échantillon comparatif, on a étudié l'action préventive contre l'accentuation de la vasoperméabilité provoquée par administration intracutanée d'hîstamine.

L'échantillon d'essai ou l'échantillon comparatif ont été administrés par voie intraveineuse à des rats mâles de souche SD (pesant environ 300 g). Après un temps déterminé, on a administré par voie intraveineuse 10 mg de Bieu Evans et en même temps on a injecté du chlorhydrate d'histamîne (1 jig/50 (il) par voie intracutanée dans la peau abdominale. Au bout de 30 minutes, on a arraché la peau pour déterminer quantitativement le Bleu Evans exsudé dans la peau. Apres avoir solubilisé la peau avec 3 ml d'acide chlorhydrique concentré, on a ajouté 3 ml de chlorure de benzalconium à 10% à la solution on a titré le Bleu Evans avec 5 ml de chloroforme. La quantité de Bleu Evans ayant exsudé dans la peau a été déterminée par l'absorbance à 620 nm dans la couche chloroformique.

La fig. 6 montre la modification en fonction du temps de l'inhibition de la vasoperméabilité provoquée par injection intracutanée d'hîstamine 15, 30 et 120 minutes après administration des deux échantillons, dont les doses ont été ajustées à 2 mg/kg, calculés en diphénhydramine. L'échantillon d'essai présentait déjà l'effet maximum 15 minutes après l'administration. L'effet se poursuivait jusqu'à 2 heures. D'autre part, dans l'échantillon comparatif, le taux d'inhibition était plus faible que pour l'échantillon d'essai. L'échantillon comparatif présentait l'effet maximum 30 minutes après l'administration, puis l'effet diminuait. L'échantillon d'essai présentait une inhibition de la vasoperméabilité trois fois plus élevée ou davantage que l'échantillon comparatif 2 heures après l'administration. Les résultats montrent que l'échantillon d'essai non seulement augmente les effets du médicament, mais également a un effet de prolongation de l'action du médicament.

La fig. 7 représente une courbe dose-réponse montrant l'inhibition de la vasoperméabilité obtenue 30 minutes après l'administration des échantillons. H est évident que les échantillons d'essai ont une excellente action d'inhibition de la vasoperméabilité par comparaison avec l'échantillon comparatif.

4. Brève description des Dessins.

La fig. 1 montre les résultats de la mesure du diamètre des particules du support de médicament de la présente invention préparé dans l'Exemple 8 avec un dispositif de mesure des diamètres des particules par dispersion de la lumière, l'axe vertical représentant le nombre des particules et l'axe des abscisses représentant le diamètre de particules sur une échelle logarithmique.

La fig. 2 représente ta modification de la radioactivité totale dans le plasma lorsque l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif examinés dans l'Exemple d'essai 2-1 sont administrés par voie intraveineuse à des rats, l'axe vertical représentant la concentration du médicament, calculée en Dexaméthasone (ng/ml) et l'axe des abscisses représentant le temps (en heures) écoulé après l'administration: la courbe dont les points sont représentés par o et la courbe dont les points sont représentés par o, représentent l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif, respectivement.

La fig. 3 est une courbe dose-réponse de l'activité anti-inflammatoire obtenue en utilisant létaux d'inhibition de l'œdème à la carragénine comme indice, lorsque l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif examinés dans l'Exemple d'essai 2-2 sont administrés à des rats, l'axe vertical représentant le taux d'inhibition de l'oedème à la carragénine en % et l'axe des abscisses représentant la dose du médicament calculée en Dexaméthasone sur une échelle logarithmique: la courbe dont les points sont représentés par«, la courbe dont les points sont représentés par A et la courbe dont les points sont représentés par o représentent respectivement l'échantillon d'essai, le phosphate de Dexaméthasone et l'échantillon comparatif.

La fig. 4 représente la modification de la radioactivité totale dans un plasma lorsque l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif examinés dans l'Exemple d'essai 2-8 sont administrés par voie intravei14

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neuse à des rats, l'axe verticale représentant la concentration (ng/ml) de la Dexaméthasone calculée par la radioactivité et l'axe des abscisses représentant le temps (en heures) écoulé après l'administration: la courbe dont les points sont représentés par ▲ et la courbe dont les points sont représentés par • représentent l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif respectivement.

La fig. 5 représente la quantité du médicament libérée dans le globe oculaire après application des deux échantillons d'essai et des deux échantillons comparatifs examinés dans l'Exemple d'essai 2-10, l'axe vertical représentant la concentration (ng/ml, calculée en guaiazulène) du médicament dans le globe oculaire et l'axe des abscisses représentant le temps (heures) écoulé après administration dans l'œil: la courbe dont les points sont représentés par A, la courbe dont les points sont représentés par A la courbe dont les points sont représentés par ■ et la courbe dont les points sont représentés par o représentent l'échantillon d'essai (1), l'échantillon d'essai (2), l'échantillon comparatif (1) et l'échantillon comparatif (2), respectivement.

La fig. 6 représente les évolutions dans le temps de l'inhibition de la vasoperméabilité lorsque l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif examinés dans l'Exemple 2-12 sont administrés par voie intraveineuse à des rats, l'axe vertical représentant l'inhibition de la vasoperméabilité en % et l'axe des abscisses représentant le temps (heures) écoulé après l'administration de l'échantillon.

La courbe dont les points sont représentés par • et la courbe dont les points sont représentés par o représentent respectivement l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif.

La fig. 7 représente la courbe dose-réponse dans l'inhibition de la vasoperméabilité lorsque l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif examinés dans l'Exemple d'essai 2-12 sont administrés par voie intraveineuse à des rats, l'axe vertical représentant l'inhibition de la vasoperméabilité en % et l'axe des abscisses représentant la dose du médicament calculée en chlorhydrate de diphénhydramine sur une échelle logarithmique.

La courbe dont les points sont représentés par «et la courbe sont les points sont représentés par o représentent respectivement l'échantillon d'essai et l'échantillon comparatif.

La présente invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation qui viennent d'être décrits, elle est au contraire susceptible de modifications et de variantes qui apparaîtront à l'homme de l'art.

Claims

Revendications

1. Vecteur de médicament sous la forme d'une émulsion graisseuse comprenant des particules lipidiques ayant un diamètre moyen de 5 à 100 nm et constituées d'un noyau et d'une couche superficielle, caractérisé en ce que la substance constituant le noyau des particules est un lipide simple, un dérivé de lipide choisi parmi les acides gras, les alcools supérieurs, les hydrocarbures ou un mélange d'au moins deux de ces composés, ou un mélange d'au moins un lipide simple-et d'au moins un tel dérivé de lipide, la proportion de cette substance dans le vecteur de médicament étant de 30 à 65%; et la substance constituant la couche superficielle des particules du vecteur de médicament est un lipide complexe, un dérivé de lipide choisi parmi les acides gras, les alcools supérieurs, les hydrocarbures ou un mélange d'au moins deux de ces composés, ou un mélange d'au moins un lipide complexe et d'au moins un tel dérivé de lipide et la proportion de cette substance dans le vecteur de médicament est de 35 à 70%.

2. Vecteur de médicament selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit lipide simple est un li-zepide neutre, un ester de stérol ou un mélange de ceux-ci.

3. Vecteur de médicament selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit lipide complexe est un phospholipide, un glycolipide ou un mélange ceux-ci.

4. Produit pharmaceutique constitué d'un vecteur de médicament selon la revendication 1, et d'au moins une substance pharmaceutiquement active, caractérisé en ce que ladite substance est dispersée ou en solution dans le vecteur ou fait partie d'une mîcelle mélangée avec au moins un constituant du vecteur de médicament, ou est liée chimiquement avec au moins un constituant du vecteur de médicament.

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