KR20100050443A - 핵산 나노입자 및 이의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 하나 또는 그 이상의 핵산을 포함하는 나노입자 조성물을 제공한다. 본 발명은 핵산의 변형 또는 피부의 화학적 또는 물리적 마찰 또는 파괴없이 이와 같은 핵산의 운반(특히 경피 운반)을 달성한다.

핵산 나노입자

Description

핵산 나노입자 및 이의 용도{NUCLEIC ACID NANOPARTICLES AND USES THEREFOR}

본 출원은 35 U.S.C. § 119(e) 조항에 근거하여 2007년 5월 31일자로 출원된 미국 가특허 출원 U.S.S.N. 60/941,187(이하 “187 출원”)을 우선권으로 청구한다. ‘187 출원은 여기에 참고문헌으로 첨부한다.

핵산은 피부에 유익한 미용 및 치료요법적 효과를 보여주었다. 실험 모델에서, 핵산, 가령, 켈틴 생성 세포 생장 인자-1(KGF-1)을 인코드하는 cDNA는 상처 치유를 개선시키는 것으로 나타났다(Lin etal.,2006, Wound Repair Regen.,14:618). 유사하게, 인터페론 감마를 인코드하는 핵산은 피부에서 콜라겐 합성을 저해시키고, 경피증(scleroderma), 결합조직병(tissue connective disease)을 치료하는데 잠재력을 가지는 인터페론 생산을 자극하는 것으로 확인되었다(Badea etal., 2005, J. Gene Med.,7:1200). 실험 모델에서 피부에서 케라틴 생산을 코드하는 siRNA 표적화 유전자는 이들 유전자를 저해시키고, 선천성 손발톱 비대증(pachyonychia congenita)을 치료하는데 이용되는 잠재력을 가지는 것으로 나타났다(Hickerson etal., 2006, Ann. N.Y. Acad. Sci.,1082:56).

그러나, 사람에서 이들 핵산의 잠재적 미용 및 치료요법적 효과를 얻는데 문 제점은 피부의 외피 층을 통과하여 생물학적 작용 부위, 예를 들면, 표피 및 진피, 조직 아래 더 깊은 부위 및/또는 신체내 멀리 떨어진 부위로 이들 분자를 경피 수송시키는데 있다(Choi et al.,In: Percutaneous Absorption, 4th Ed., Bronaugh and Maibach, ed.,Taylor & Francis, BocaRaton, FL, 2005). 각질층은 핵산과 같은 분자의 경피 침투를 저지시키는 효과적인 물리적 장벽이다. 피부 효소는 또한 효소적 분해를 통하여 핵산을 파괴시키는 작용을 할 수도 있다(Choi et al.,supra).

이와 같은 분해를 저지하기 위해 핵산을 화학적으로 변형시키는 시도가 있었으나, 이와 같은 변형은 일반적으로 물질의 생물학적 활성을 손상시키거나 또는 바람직하지 못한 면역계 반응을 유도한다. 화학적 변형은 또한 고가이고, 시간 소모적이기 때문에 바람직하지 못하다.

이와 같은 방법들을 이용하여 핵산의 경피 침투를 개선시키는 시도들이 있었는데, 피부의 외층을 테이프-벗겨내기, 피부의 전기 천공 또는 전리요법(iontophoresis), 반고형제제(가령, 크림 등)의 이용, 각질층을 분해시키는 화학적 침투 강화제, 비-이온성 리포좀의 이용 등이 포함된다(Choi et al.,supra). 이와 같은 각 방법들은 하나 또는 그 이상의 단점들을 가지고 있는데, 예를 들면, 피부의 외층을 손상(환자에 고통스럽거나 자극을 줄 수 있음), 의사 및/또는 환자에 의해 중단되는 치료의 복잡함, 제조의 복잡함 및 관련 비용의 증가, 및/또는 핵산의 생물학적 활성의 잠재적 손상 등이다.

따라서, 사용이 간단하고, 비용측면 효과적이며, 피부 외층을 손상시키지 않고, 면역 반응의 유도없이 효소 분해에 대해 보호되며, 운반될 핵산의 생물학적 활 성에 손상을 주지 않고 및/또는 표적 조직에 생물학적 작용 부위로의 운반을 강화시킬 수 있는 핵산(가령, 폴리뉴클레오티드 및 핵산 잔기들)의 경피 수송을 위한 방법이 당분야에 필요하다.

발명의 요약

본 발명에 따른 나노입자들(가령, 변형안된 및/또는 변형된 폴리뉴클레오티드가 통합된 나노입자)을 개체의 피부에 사용할 수 있다. 일구 구체예에서, 나노입자는 개체로 결합된 핵산(가령, 폴리뉴클레오티드 및/또는 핵산 잔기)을 운반(특히 경피 운반)시킨다.

본 발명에 따른 나노입자는 단순한 현탁액 또는 분산액으로 또는 하나 또는 그 이상의 부형제와 혼합되어, 피부 연화제, 영양 로션, 크린징 로션, 크린징 크림, 스킨 밀크, 에몰리언트 로션, 마사지 크림, 에몰리언트 크림, 메이크업 베이스, 립스틱, 안면 팩 또는 안면 겔, 크리너 제제(가령, 샴푸, 린스, 바디 크린져, 모발 토너, 비누 등) 및/또는 피부학적 조성물(가령, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 스프레이, 등)을 포함하나 이에 국한되지 않는 제형으로 만들어져 사용될 수 있다.

따라서, 본 발명은 핵산(가령, 폴리뉴클레오티드 및/또는 핵산 잔기 예를 들면, 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드)의 운반(가령, 경피 운반)을 위한 시스템 및 조성물을 제공한다. 본 발명의 많은 장점들 중에 주사 없이 그리고, 기계적 또는 화학적 마찰 없이 또는 피부의 변형없이 핵산(가령, 폴리뉴클레오티드 및/또는 핵산 잔기)를 운반하는 능력이다. 추가적 장점에는 변형안된 핵산을 이용하여, 미용 및/또는 약학 조제물의 생산을 단순화시키고, 비용을 감소시키고, 더 나아가 핵산의 생물학적 활성을 보존(또는 잠재적으로 강화)시키는 능력이 포함된다.

정의

마찰(Abrasion): 여기에서 사용된 바와 같이, “마찰”은 피부를 변형, 붕괴, 제거 또는 파괴시키는 임의 방법을 말한다. 일부 구체예에서, 마찰은 피부의 상층을 변경, 붕괴, 제거 또는 파괴시키는 기계적인 수단을 말한다. 일부 구체예에서, 마찰은 피부의 상층을 변경, 붕괴, 제거 또는 파괴시키는 화학적인 수단을 말한다. 예를 들면, 각질제거제(exfoliant), 미세 입자들(가령, 마그네슘 또는 알루미늄 입자들), 산(가령, 알파-하이드록시 산 또는 베타-하이드록시산) 및/또는 알코올과 같은 물질들이 마찰의 원인이 될 수 있다. 일반적으로 Donovan(가령, U.S. Patent Publications 2004/009180과 2005/175636; PCT Publication WO04/06954 참고), Graham(가령, U.S. Patent 6,939,852와 U.S. Patent Publication 2006/093624 참고) 등에서 설명된 것과 같은 침투 강화제도 마찰의 원인이 되는 것으로 예상된다. 물론, 당업자는 어느 농도에서 제공될 때 또는 하나 또는 그 이상의 다른 물질과 연합될 때 특정 물질이 마찰의 원인이 되나, 상이한 환경에서는 마찰을 일으키지 않을 수도 있다는 것을 인지할 것이다. 따라서, 특정 물질이 “마찰제”의 여부는 문맥에 따라 달라진다. 피부가 붉게 되는 것을 관찰하거나 자극을 관찰하여 및/또는 각질층의 변형, 붕괴, 파괴, 제거 또는 부식을 보여주는 피부의 조직학적 검사를 통하여 당업자가 마찰을 바로 평가할 수 있을 것이다.

아미노산: 여기에서 사용된 바와 같이, “아미노산”은 넓은 의미에서 폴리펩티드 쇄에 결합할 수 있는 임의 화합물 및/또는 물질을 말한다. 일부 구체예에서, 아미노산은 일반 구조 H₂N-C(H)(R)-COOH를 가진다. 일부 구체예에서, 아미노산은 자연-발생 아미노산이다. 일부 구체예에서, 아미노산은 합성 아미노산이다; 일부 구체예에서, 아미노산은 D-아미노산이다; 일부 구체예에서, 아미노산은 L-아미노산이다. “표준 아미노산”은 자연 생성 펩티드에서 흔히 볼 수 있는 20개 표준 L-아미노산 중의 임의의 것을 말한다. “비-표준 아미노산”은 자연 소스로부터 수득되거나 화학적으로 합성된 것에는 무관하게 표준 아미노산이외의 임의 아미노산을 말한다. 펩티드에서 카르복시 및/또는 아미노-말단 아미노산을 포함하는 아미노산은 메틸화, 아미드화, 아세틸화 및/또는 아미노산의 활성에 역효과 없이 펩티드의 순환 반감기를 변화시킬 수 있는 다른 화학기로 치환 등에 의해 변형될 수 있다. 아미노산이 이황화 결합에 참여할 수도 있다. “아미노산”은 “아미노산 잔기”와 호환되어 사용되는데, 이는 자유 아미노산 및/또는 펩티드의 아미노산 잔기를 말한다. 따라서 자유 아미노산 또는 펩티드의 잔기를 말하는지는 문맥으로부터 명확하게 알 수 있을 것이다.

동물: “동물”은 동물계 임의 구성원을 말한다. 일부 구체예에서, “동물”은 임의 발생 단계에 사람을 말한다. 일부 구체예에서, “동물”은 임의 발생 단계에서 사람이 아닌 동물을 말한다. 특정 구체예에서, 사람이 아닌 동물은 포유류(가령, 설치류, 생쥐, 쥐, 토끼, 원숭이, 개, 고양이, 양, 소, 영장류 및/또는 돼지)이다. 일부 구체예에서, 동물에는 포유류, 새, 파충류, 양서류, 물고기 및 벌레 등이 포함되나 이에 국한시키지는 않는다. 일부 구체예에서, 동물은 유전자 전이 동물, 유전적으로 조작된 동물 및/또는 클론이 될 수도 있다.

약(대략): 여기에서 사용된 바와 같이, 수치 관련하여 약(“대략” 또는“약”)은 다른 언급이 없는 한, 또는 내용으로부터 명백한(이와 같은 수치가 0%보다 적거나 또는 가망 수치의 100%를 초과하는 경우를 제외하고) 경우를 제외하고, 수치의 임의 방향(더 많거나 더 적거나) 5%, 10%, 15%, 또는 20% 범위 내에 속하는 수치를 포함한다.

생물학적 활성 물질: 여기에서 사용된 바와 같이, “생물학적 활성 물질(생물학적으로 활성 작용제)”는 생물계 및/또는 유기체에서 활성을 가지는 임의 물질을 말한다. 예를 들면, 유기체에 투여하였을 때, 유기체상에 생물학적 효과를 가지는 물질은 생물학적으로 활성이 있는 것으로 간주한다. 특정 구체예에서, 폴리뉴클레오티드가 생물학적으로 활성이 있는 경우, 폴리뉴클레오티드의 최소 한 가지 생물학적 활성을 공유하는 폴리뉴클레오티드의 일부분은 일반적으로 “생물학적으로 활성”부분으로 간주한다.

특징적 부분: 여기에서 사용된 바와 같이, 특징적 부분은 넓은 의미에서 물질의 특징적 부분(“특징적 부분”)은 관련 고유 물질의 최소 한 가지 기능적 특징 및/또는 구조적 상동성 및/또는 서열을 어느 정도 공유를 한다는 것을 말한다. 예를 들면, 폴리뉴클레오티드의 “특징적 부분”은 핵산 잔기의 연속 스트레취, 또는 핵산 잔기의 연속 스트레취의 집합을 포함하는 것으로, 이들은 함께 폴리뉴클레오티드의 특징이 된다. 일부 구체예에서, 각 연속 스트레취에는 일반적으로 최소 2개, 최소 5개, 최소 10개, 최소 15개, 최소 20개, 또는 그 이상의 핵산 잔기들을 포함할 것이다. 일반적으로, 특징적 부분은 상기 명시된 서열 상동성에 추가하여, 관련 고유 폴리뉴클레오티드와 최소 하나의 기능적 특징을 공유한다. 일부 구체예에서, 특징적 부분은 생물학적으로 활성이 있을 수 있다.

상동성: 여기에서 사용된 바와 같이, 상동성(“homology”)은 폴리머 분자 사이에 전반적인 관련성을 말하는데, 예를 들면, 폴리뉴클레오티드 분자 간에 (가령, DNA 분자 및/또는 RNA 분자) 및/또는 폴리펩티드 분자간의 관계를 말한다. 일부 구체예에서, 폴리머 분자는 이들 서열이 최소 25%, 최소 30%, 최소 35%, 최소 40%, 최소 45%, 최소 50%, 최소 55%, 최소 60%, 최소 65%, 최소 70%, 최소 75%, 최소 80%, 최소 85%, 최소 90%, 최소 95%, 또는 최소 99% 동일할 경우 서로에 대해 상동성인 것으로 간주한다. 일부 구체예에서, 폴리머 분자들은 이들 서열이 최소 25%, 최소 30%, 최소 35%, 최소 40%, 최소 45%, 최소 50%, 최소 55%, 최소 60%, 최소 65%, 최소 70%, 최소 75%, 최소 80%, 최소 85%, 최소 90%, 최소 95%, 또는 최소 99% 유사한 경우 서로에 대해 “상동성”인 것으로 간주한다.

친수성: 여기에서 사용된 바와 같이, “친수성(hydrophilic)”물질은 극성 용매에 용해가능한 물질이다. 일부 구체예에서, 친수성 물질은 극성 용매와 일과적으로 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 친수성 물질은 수소 결합을 통하여 극성 용매와 일과적으로 결합한다. 일부 구체예에서, 극성 용매는 물이다. 일부 구체예에서, 친수성 물질은 이온성일 수 있다. 일부 구체예에서, 친수성 물질은 비-이온성일 수 있다. 일부 구체예에서, 친수성 물질은 비-극성 용매 또는 소수성 용매에서보다 물, 극성 용매 또는 오일, 친수성 용매에 더 잘 용해될 수 있다. 일부 구체예에서, 친수성 물질은 물, 극성 용매 또는 친수성 용매보다 오일, 비-극성 용매 또는 소수성 용매에 덜 용해될 수 있다. 일부 구체예에서, 물질이 다른 물질보다 물, 극성 용매 또는 친수성 용매에 더 잘 용해되면 다른 물질에 비해 상대적으로 친수성일수 있다. 일부 구체예에서, 물질이 다른 물질보다 오일, 비-극성 용매 또는 소수성 용매에 덜 용해되면 다른 물질에 비해 상대적으로 친수성일수 있다.

소수성: 여기에서 사용된 바와 같이, “소수성(hydrophobic)” 물질은 비-극성 용매에 용해될 수 있는 물질이다. 일부 구체예에서, 소수성 물질은 극성 용매로부터 배척된다. 일부 구체예에서, 극성 용매는 물이다. 일부 구체예에서, 소수성 물질은 비-극성이다. 일부 구체예에서, 소수성 물질은 물, 극성 용매, 또는 친수성 용매보다는 오일, 비-극성 용매, 또는 소수성 용매에 더 잘 용해될 수 있다. 일부 구체예에서, 소수성 물질은 오일, 비-극성 용매, 또는 소수성 용매보다는 물, 극성 용매, 또는 친수성 용매에 덜 용해될 수 있다. 일부 구체예에서, 물질이 다른 물질에 비해 오일, 비-극성 용매, 또는 소수성 용매에 더 잘 용해되면 다른 물질에 대해 상대적인 소수성이다. 일부 구체예에서, 물질이 다른 물질보다 물, 극성 용매, 또는 친수성 용매에 덜 용해되면 다른 물질에 대해 상대적인 소수성이다.

동일성(identity): 여기에서 사용된 바와 같이, 동일성(“identity”)은 폴리머 분자간에 전반적인 관계를 말하는 것으로, 가령, 폴리뉴클레오티드 분자(가령, DNA 분자 및/또는 DNA 분자)간에 또는 폴리펩티드 분자 간에 상관관계를 말한다. 두 핵산 서열의 동일성 비율은 최적의 비교를 위해 두 서열을 배열함으로써 계산될 수 있다(가령, 최적의 배열을 위해 제1과 제2 핵산 서열의 한쪽 또는 모두에 갭을 도입시키고, 비-동일성 서열은 비교 목적을 위해 버릴 수 있다). 특정 구체예에서, 비교 목적으로 배열된 서열의 길이는 기준 서열 길이의 최소 30%, 최소 40%, 최소 50%, 최소 60%, 최소 70%, 최소 80%, 최소 90%, 최소 95% 또는 100%이다. 상응하는 뉴클레오티드 위치에 있는 뉴클레오티드들을 비교한다. 제1 서열의 한 위치가 제 2 서열의 상응하는 부위와 동일한 뉴클레오티드가 있는 경우, 이들 분자들은 그 위치에서 동일하다. 두 서열 간에 동일성 비율은 두 서열의 최적 배열을 위해 도입될 필요가 있는 갭의 수, 각 갭의 길이를 고려하여 서열이 공유하는 동일 위치의 수에 대한 함수이다. 서열의 비교 및 두 서열 간에 동일성 비율 결정은 수학적 알고리즘을 이용하여 실시할 수 있을 것이다. 예를 들면, 두 뉴클레오티드 서열 간에 동일성 비율은 Meyers 및 Miller(CABIOS, 1989, 4: 11-17)의 알고리즘을 이용하여 결정할 수 있는데, 이는 PAM120 weight residue table, 12의 갭 길이 페널티 및 4 갭 페널티를 이용한 ALIGN(Version 2.0)에 결합된 것이다. 두 뉴클레오티드 서열간에 동일성 비율은 NWSgapdna.CMP matrix를 이용한 GCG 소프트웨어 패키지에 있는 GAP 프로그램을 이용하여 결정될 수도 있다.

~와 함께: 여기에서 사용된 바와 같이, ~와 함께 운반되는(“delivered in conjunction with”)이란 두 개 또는 그 이상의 물질을 동시-운반한다는 것을 말한다. 특히, 본 발명에 따르면, 본 발명에 따른 나노입자 또는 나노입자 조성물과 생물학적 활성 물질의 운반을 말한다. 물질 또는 작용제(agent)는 물질 또는 작용제가 나노입자들 및/또는 나노입자 조성물과 복합되거나; 나노입자에 포집(encapsulated)되거나 완전하게 에워싸거나; 나노입자 미셀(micellar) 막내에 삽입되거나; 및/또는 나노입자 미셀 막의 외측 표면에 연합되는 경우, 나노입자와 함께 운반된다. 나노입자들 및/또는 나노입자 조성물과 함께 운반될 물질 또는 작용제는 나노입자들 및/또는 나노입자 조성물에 공유적으로 연결되거나 연결되지 않을 수도 있다. 나노입자들 및/또는 나노입자 조성물과 함께 운반될 물질 또는 작용제는 흡착력에 의해 나노입자들 및/또는 나노입자 조성물에 부착되거나 부착되지 않을 수도 있다.

분리된: 여기에서 사용된 바와 같이, 분리된(“분리된”)은 (1) 처음 만들어질 때(자연적이건 및/또는 실험적인 세팅에 의해서건) 및/또는 이들과 함께 연합된 성분들중 최소 일부로부터 분리된 및/또는 (2) 사람의 손에 의해 생산 및/또는 제조되는 경우에 물질 및/또는 엔터티(entity)를 말한다. 분리된 물질 및/또는 엔터티는 초기에 연합된 성분들로부터 최소 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 또는 그 이상의 성분들로부터 분리될 수 있다. 일부 구체예에서, 분리된 물질 및/또는 엔터티는 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%이상의 또는 99% 순도이다.

미세유체화된: 여기에서 사용된 바와 같이, “미세유체화된(microfluidized)”은 고전단력에 노출된 것을 의미한다. 일부 구체예에서, 고전단력에 노출은 고압에 노출시켜 이루어진다; 일부 구체예에서, 이와 같은 고압은 약 15,000 psi 내지 약 26,000 psi 범위이다. 일부 구체예에서, 고전단력에 노출은 캐비테이션(캐비테이션)에 의해 이루어진다. 일부 구체예에서, 고전단력에 이와 같은 노출은 Microfluidizer®(Microfluidics Corporation/MFIC Corporation) 또는 균질한 나노입자조성물을 만들어내는데 유용할 수 있는 다른 유사 장치에 샘플을 통과시켜 이루어진다. 본 발명의 일부 구체예에서, 샘플은 약 10분 미만의 시간 동안 고전단력에 노출시켜 미세유체화된다. 일부 구체예에서, 시간은 약 9분, 약 8분, 약 7분, 약 6분, 약 5분, 약 4분, 약 3분, 약 2분 또는 약 1분 미만이다. 일부 구체예에서, 시간은 약 1분 - 약 2분이다. 일부 구체예에서, 시간은 약 30초이다. 일부 구체예에서, 샘플은 고전단력에 1회 노출시켜 “미세유체화”된다; 이와 같은 구체예는 “일회 통과” 미세유체화라고 한다.

나노입자: 여기에서 사용된 바와 같이, “나노입자(nanoparticle)”는 직경이 1000 나노미터(nanometer, nm) 미만인 임의 입자들을 말한다. 일부 구체예에서, 나노입자는 National Science Foundation에서 정의한 바와 같이 300nm 미만의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자는 National Institutes of Health에서 정의한 바와 같은 100nm 미만의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 미셀 막에 의해 벌크 용액과 구별되는 단절된 격실을 구성한다. “미셀 막”은 공간 또는 격질(“관강(lumen)”으로 정의)을 에워싸고 단절시키기 위해 응집된 양쪽성 엔터티로 구성된다.

나노입자 조성물: 여기에서 사용된 바와 같이, “나노입자 조성물”은 최소 한 가지 나노입자를 포함하는 임의 물질을 말한다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 나노입자들의 균질한 집합이다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 분산액 또는 에멀젼이다. 일반적으로, 분산액 또는 에멀젼은 최소 두 가지 혼합되지 않은 물질이 복합될 때 형성된다. 수중유(“oil-in-water”) 분산액은 유성(또는 소수성 또는 비-극성) 입자가 수성 분산 매질에 분산된 것이다. 유중수(“water-in-oil”) 분산액은 수성(또는 친수성 또는 극성) 입자가 유성 분산 매질에 분산된 것이다. 당업자는 분산액이 임의 두 가지 혼합될 수 없는 매질에서 형성되나, 반드시 수성 매질 및 유성 매질의 혼합으로만 제한시키지 않는다는 것을 인지할 것이다. 분산 매질(“dispersion medium”)은 “수성” 및 “유성” 범주를 흔히 지칭하는 함에도 불구하고 광범위하게는 임의 분산 매질을 말한다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 나노에멀젼이다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 미셀을 포함한다. 일부 특정 구체예에서, 나노입자 조성물은 2007년 11월 30일자 출원된 공동 계류 PCT 출원 PCT/US07/86018, “Amphiphilic Entity Nanoparticle”에 설명된 것과 같은 양쪽성 엔터티 나노입자를 포함한다. 2006년 12월 1일자로 출원된 미국 특허 출원 11/607,436에서 설명된 것과 같이, 나노입자 조성물은 나노에멀젼을 포함한다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 안정적이다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에는 나노입자들과 함께 운반될 하나 또는 그 이상의 생물학적 활성 물질을 포함한다.

핵산: 여기에서 사용된 바와 같이, “핵산”은 넓은 의미에서 올리고뉴클레오티드이거나 올리고뉴클레오티드 쇄에 결합될 수 있는 임의 화합물 및/또는 물질을 말한다. 일부 구체예에서, 핵산은 올리고뉴클레오티드이거나 포스포디에스테르 결합을 통하여 올리고뉴클레오티드 쇄에 결합될 수 있는 화합물 및/또는 물질을 말한다. 일부 구체예에서, “핵산”은 개별 핵산 잔기들 (가령, 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드)이다. 일부 구체예에서, “핵산”은 개별 핵산 잔기들을 포함하는 올리고뉴클레오티드 쇄를 말한다. 여기에서 사용된 바와 같이, “올리고뉴클레오티드” 및 “폴리뉴클레오티드”는 호환될 수 있다. 일부 구체예에서, “핵산”에는 RNA 뿐만 아니라 단일 및/또는 이중 가닥 DNA 또는 cDNA가 포함된다. 추가적으로, 핵산,” “DNA,” “RNA”, 및/또는 유사한 용어에는 핵산 유사체 가령, 포스포디에스테르 골격 이외의 것을 가지는 유사체가 포함된다. 예를 들면, 당분야에 공지된 “펩티드 핵산”은 골격에 포스포디에스테르 결합대신 펩티드 결합을 가지는 것으로, 이 또한 본 발명의 범주에 포함된다. “아미노산 서열을 인코드하는 뉴클레오티드 서열”에는 동일한 아미노산 서열을 인코드하는 서로에 대해 축퇴 버전인 모든 뉴클레오티드 서열이 포함된다. 단백질 및/또는 RNA를 인코드하는 뉴클레오티드 서열에는 인트론이 포함될 수 있다. 핵산은 천연 소스로부터 정제되거나 재조합 발현 시스템을 통해 만들고, 선택적으로 정제시키거나, 화학적으로 합성할 수 있다. 적절한 경우, 가령, 화학적으로 합성된 분자의 경우, 핵산에는 화학적으로 변경된 염기 또는 당, 기본골격 변형 등을 가지는 뉴클레오시드 유사체를 포함할 수 있다. 핵산 서열은 다른 언급이 없는 한 5’에서 3’방향으로 제시된다. “핵산 단편”은 더 긴 핵산 서열의 일부인 핵산 서열을 말한다. 많은 구체예에서, 핵산 단편은 최소 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 또는 그 이상의 잔기들을 포함한다. 일부 구체예에서, 핵산은 자연 뉴클레오티드이거나 이를 포함하고(가령, 아데노신, 티미딘, 구아노신, 시티딘, 우리딘, 데옥시아데노신, 데옥시티미딘, 데옥시구아노신 및 데옥시시티딘); 뉴클레오시드 유사체(가령, 2-아미노아데노신, 2-티오티미딘, 이노신, 피롤-피리미딘, 3-메틸 아데노신, 5-메틸시티딘, C-5 프로피닐-시티딘, C-5 프로피닐-우리딘, 2-아미노아데노신, C5-브로모우리딘, C5-플로오르우리딘, C5-요오드우리딘, C5-프로피닐-우리딘, C5-프로피닐-시티딘, C5-메틸시티딘, 2-아미노아데노신, 7-데아자아데노신, 7-데아자구아노신, 8-옥소아데노신, 8-옥소구아노신, O(6)-메틸구아닌, 그리고 2-티오시티딘); 화학적으로 변경된 염기; 생물학적으로 변경된 염기(가령, 메틸화된 염기); 삽입된 염기(intercalated); 변형된 당(가령, 2’-플루오르리보스, 리보스, 2’-데옥시리보스, 아라비노즈, 및 헥소스); 및/또는 변형된 포스페이트 기(가령, 포스포티오에이트 및 5’-N-포스포라미디트 링키지)를 포함한다. 일부 구체예에서, 본 발명은 “변형안된 핵산”에 특이적으로 관계하는데, 이는 운반을 하기 위해(가령, 경피 운반) 화학적으로 변형되지 않는 핵산(가령, 뉴클레오티드 및 뉴클레오시드를 포함하는 폴리뉴클레오티드 및/또는 핵산 잔기)을 의미한다.

기능식품: 여기에서 사용된 바와 같이, 기능식품(“기능식품”)은 의학적, 건강 또는 생물학적 이점들을 제공하는 임의 물질을 말한다. 일부 구체예에서, 기능식품은 질병을 예방할 수도 있다. 일부 구체예에서, 기능식품은 기초 영양 가치를 제공할 수 있다. 일부 구체예에서, 기능식품은 식품 또는 식물의 일부이다. 일부 구체예에서, 기능식품 작용제는 분리된 영양분, 식이 보충제, 비타민, 미네랄, 허브, 강화 식품, 치료 식품, 유전자 조직 식품, 그리고 가공 식품 종류가 될 수 있다. 기능식품은 “식물화학(phytochemical) 식품” 또는 “기능(functional) 식품”이라고도 한다.

환자: 여기에서 사용된 바와 같이, 환자(“patient”) 또는 개체( “subject”)는 실험용, 진단, 예방 및/또는 치료 목적으로 본 발명의 조성물이 투여되는 임의 유기체를 말한다. 전형적인 환자는 동물(가령, 생쥐, 쥐, 토끼, 사람이 아닌 영장류와 같은 포유류 및 사람)이다. 일부 구체예에서, 환자는 사람이다.

프레믹스: 여기에서 사용된 바와 같이, 프레믹스(“premix”)는 본 발명에 따른 나노입자 조성물을 만드는데 순차적으로 이용되는 성분들의 임의 복합을 말한다. 예를 들면, 프레믹스는 고전단력을 받게 될 때 본 발명에 따른 나노입자를 생성하는 임의 성분들의 집합이다. 일부 구체예에서, 프레믹스에는 두 개 또는 그 이상의 혼합되지 않는 용매를 포함한다. 일부 구체예에서, 프레믹스에는 자체-어셈블리되어 나노입자가 되는 성분들이 포함된다. 일부 구체예에서, 프레믹스에는 자체 어셈블리되어 미셀을 형성하는 성분들이 포함된다. 일부 구체예에서, 프레믹스에는 2007년 11월 30일자 출원된 PCT 출원 PCT/US07/86018, “Amphiphilic Entity Nanoparticles”에서 설명된 것과 같은, 하나 또는 그 이상의 양쪽성 엔터티를 포함한다. 일부 구체예에서, 프레믹스에는 하나 또는 그 이상의 핵산(가령, 폴리뉴클레오티드 및/또는 핵산 잔기 가령, 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드)을 포함하고; 일부 구체예에서, 프레믹스에는 최소 한 가지 다른 생물학적 활성 작용제를 포함한다. 일부 구체예에서, 프레믹스는 교반되거나, 혼합되거나 및/또는 뒤섞인다; 일부 구체예에서, 프레믹스는 고전단력에 노출되기 전에 교반, 혼합 및/또는 뒤섞인다. 일부 구체예에서, 프레믹스는 최소 한 가지 용해된 성분(가령, 용액에 있는 최소 한 가지 성분)을 포함한다; 일부 구체예에서, 프레믹스는 고전단력이 가해진 후, 용해된다.

순수: 여기에서 사용된 바와 같이, 물질 및/또는 엔터티에 다른 성분들이 없는 경우 “순수(pure)”하다고 한다. 예를 들면, 약 90% 이상의 특정 물질 및/또는 엔터티를 포함하는 제제를 일반적으로 순수한 제제로 간주한다. 일부 구체예에서, 물질 및/또는 엔터티는 최소 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 순수하다.

전단력: 여기에서 사용된 바와 같이, “전단력(shear force)”은 물질 면에 수직인 힘과는 반대로 물질 면에 평행한 힘을 말한다. 일부 구체예에서, 균질한 나노입자 조성물을 만들기 위해 조성물은 고전단력에 노출된다. 당분야에 임의 공지된 방법을 이용하여 고전단력을 만들 수 있다. 일부 구체예에서, 캐비테이션을 이용하여 고전단력을 만든다. 일부 구체예에서, 고압 균질화를 이용하여 고전단력을 만든다. 대안으로 또는 추가적으로, 고전단력은 약 15,000 psi와 같은 고압에 노출되어 투여될 수 있다. 일부 구체예에서, 이와 같은 고압은 약 18,000 psi 내지 약 26,000 psi 범위 내에 있다; 일부 구체예에서, 고압은 약 20,000 psi 내지 약 25,000 psi 범위 내에 있다. 일부 구체예에서, Microfluidizer® Processor(Microfluidics Corporation/MFIC Corporation) 또는 이와 유사한 장치를 이용하여 고전단력를 만든다. Microfluidizer® Processor는 나노스케일 범위의 입자 감소를 위해 고속(일반적으로 50 m/s - 300 m/s)에서 미소채널(75미크론 크기의 직경을 가지는)을 통하여 조성물을 가속시켜 고압 및 생성 고전단력을 제공한다. 유체가 미소채널을 빠져나갈 때, 제트를 형성하고, 제트는 반대 미소채널의 제트와 충돌한다. 채널에서, 유체는 고전단을 겪는다(최대 10⁷ l/s)(통상적인 기술보다 더 높은). 제트의 충돌로 서브미크론 수준에서 혼합된다. 따라서, 이와 같은 장치에서, 고전단 및/또는 충격으로 입자 크기 감소와 다중상 혼합을 이룰 수 있을 것이다. 본 발명의 일부 구체예에서, 샘플은 약 10분 미만의 시간 동안 고전단력에 노출된다. 일부 구체예에서, 시간은 약 9 분, 약 8 분, 약 7 분, 약 6 분, 약 5 분, 약 4 분, 약 3 분, 약 2 분, 또는 약 1분이다. 일부 구체예에서, 시간은 약 1분 내지 약 2 분 범위이다; 일부 구체예에서, 시간은 약 1분 미만이다; 일부 구체예에서, 시간은 약 30초이다. 일부 구체예에서, 샘플은 고전단력에 1회 노출을 통하여“미세유체화”된다; 일부 구체예에서, “1회 통과” 미세유체화된다.

유사성: 여기에서 사용된 바와 같이, 유사성( “similarity”)은 폴리머 분자간에 전반적인 관계를 말하는데, 가령, 폴리뉴클레오티드 분자(가령, DNA 분자 및/또는 RNA 분자) 및/또는 폴리펩티드 분자 간에 전반적인 관계를 말한다. 폴리머 분자의 유사성 비율은 동일성 비율 계산과 동일하게 실시하나, 단, 유사성 비율은 당분야에 인지되는 바와 같은 보존성 치환도 고려한다.

소분자: 일반적으로, 소분자(“소분자”)는 크기가 약 5kd 미만인 유기 분자를 말한다. 일부 구체예에서, 소분자는 약 4 Kd, 약 3 Kd, 약 2 Kd, 또는 약 1 Kd 미만이다. 일부 구체예에서, 소분자는 약 800 달톤(dalton, (D), 약 600 D, 약 500 D, 약 400 D, 약 300 D, 약 200 D, 또는 약 100 D 미만이다. 일부 구체예에서, 소분자는 약 2000 g/mol 미만, 약 1500 g/mol 미만, 약 1000 g/mol 미만, 약 800 g/mol 미만, 또는 약 500 g/mol 미만이다. 일부 구체예에서, 소분자들은 비-폴리머이다. 일반적으로, 본 발명에 따르면, 소분자는 단백질, 폴리펩티드, 올리고펩티드, 펩티드, 폴리뉴클레오티드, 올리고뉴클레오티드, 폴리사카라이드, 글리코단백질, 프로테오글리칸 등이 아니다. 소분자의 유도체는 원래 소분자와 동일한 구조 핵을 공유하나 원래 소분자로부터 일련의 화학 반응에 의해 만들어질 수도 있는 분자를 말한다. 한 예로, 소분자의 프로-드러그는 소분자의 유도체이다. 소분자의 유사체는 원래 소분자와 동일한 또는 유사한 구조 핵을 공유하고, 유사한 또는 관련 경로에 의해 합성되거나, 당분야에 인지된 변이에 의해 합성되는 분자를 말한다.

안정한: 여기에서 사용된 나노입자 조성물에 사용할 경우, 안정적(“stable”)은 조성물은 일정 시간에 걸쳐 이의 물리적 구조(가령, 입자의 크기 범위 및/또는 분포)중 하나 이상의 측면을 유지한다는 것을 의미한다. 일부 구체예에서, 안정한 나노입자 조성물은 평균 입자 크기, 최대 입자 크기, 입자 크기 범위 및/또는 입자 크기 분포(가령, 지정된 크기 이상의 입자 비율 및/또는 지정된 크기 분포 밖의 입자 비율)가 일정시간에 걸쳐 유지되는 것을 말한다. 일부 구체예에서, 시간은 최소 약 1 시간이다; 일부 구체예에서, 약 5 시간, 10 시간, 1일, 일 주, 2주, 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 8개월, 10개월, 12개월, 24개월 또는 이보다 더 길 수 있다. 일부 구체예에서, 시간은 1일 내지 24개월, 2주 내지 12개월, 2개월 내지 5개월 등 범위 내에 있다. 예를 들면, 나노입자 조성물이 장시간 보관, 온도 변화 및/또는 pH의 변화를 겪게 되는 경우, 조성물내 대부분의 나노입자들이 명시된 범위(가령, 약 10nm 내지 120nm)에 직경을 유지한다면 나노입자 조성물은 안정하다. 이와 같은 경우에, 대부분은 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 약 99%, 약 99.5%, 약 99.6%, 약 99.7%, 약 99.8%, 약 99.9% 또는 그 이상을 말한다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물이 최소 한 가지 생물학적 활성 물질을 포함하는 경우, 생물학적 활성 물질 (가령, 핵산)의 농도가 설정된 조건하에 지정된 시간 동안 조성물에서 유지된다면 나노입자 조성물은 안정적인 것으로 간주한다.

실질적으로: 여기에서 사용된 바와 같이, 실질적으로(“실질적으로”)는 관심 성질 또는 특징의 정도 또는 전체 또는 거의 전체 함량을 나타내는 정량적인 조건을 말한다. 생물학 분야에 당업자는 생물학적 그리고 화학적 현성은 절대적 결과를 얻기거나 피하거나 완료되도록 처리될 수 없다는 것을 인지할 것이다. 따라서 “실질적”이란 많은 생물학적 그리고 화학적 현성에서 고유의 완벽함이 부족한 경우를 포함한다.

실질적으로 없는: 나노입자 조성물은 조성물에서 입자의 단지 50%가 해당 범위 밖의 직경을 가지는 경우, 명시된 범위 밖의 직경을 가진 입자가 “실질적으로 없다 ”라고 한다. 일부 구체예에서, 입자의 25%만이 이 범위 밖이다. 일부 구체예에서, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5% 또는 그 미만의 입자가 명시된 범위 밖의 직경을 가진다.

고통을 받는: 질병, 질환 또는 상태(가령, 상처, 비정상적인 피부 세포 증식, 연결조직 질환, 가령, 경피증, 선천성 손발톱 비대증, 피부 염증, 건선, 화상 또는 다른 형태의 피부 손상, 피부 암 등)로 고통을 받는(“suffering from”)을 가진 개체는 상기 질환, 질병 또는 상태로 진단을 받거나 이와 같은 증상을 보인다.

치료요법적 효과량: 여기에서 사용된 바와 같이, 치료요법적으로 효과량(“therapeutically effective amount”)은 질병, 질환, 및/또는 상태에 걸린 또는 걸릴 가능성이 있는 환자에 투여하였을 때 질병, 질환, 및/또는 상태를 치료하는데 충분한 나노입자 조성물의 양을 말한다.

치료요법적 작용제: 여기에서 사용된 바와 같이, 치료요법적 작용제( “therapeutic agent”)는 투여하였을 때 원하는 생물학적 및/또는 약리학적 효과를 유도하기 위한 또는 치료요법적 효과를 가지는 임의 작용제를 말한다.

치료: 여기에서 사용된 바와 같이, 치료(“treatment”)(또는 “치료하다” 또는 “치료하는”)은 특정 질병, 질환, 및/또는 상태의 특징 또는 증상중 하나 또는 그 이상이 발생을 감소시키거나 질병을 부분적으로 또는 완전하게 경감, 완화, 회복, 저해 또는 개시의 지연, 또는 심각성을 감소시키는 생물학적 활성 물질을 투여하는 것을 말한다. 이와 같은 치료는 관련 질병, 질환 및/또는 상태의 징후를 보이지 않는 개체이거나 및/또는 질병, 질환, 및/또는 상태의 초기 징후만을 보이는 개체가 될 수도 있다. 대안으로 또는 추가적으로, 이와 같은 치료는 관련 질병, 질환 및/또는 상태의 하나 또는 그 이상의 확립된 징후를 나타내는 개체가 될 수도 있다.

독성 용매: 여기에서 사용된 바와 같이, “독성 용매(toxic solvent)”는 동물 조직의 변경, 붕괴, 제거 또는 파괴시킬 수 있는 임의 물질을 말한다. 당업자는 동물 조직에는 살아있는 세포, 죽은 세포, 세포외 매트릭스, 세포졍션, 생물학적 분자가 포함될 수 있다는 것을 인지할 것이다. 몇 가지 예를 제공하면, 독성 용매에는 디메틸 설폭시드, 디메틸 아세트이미드, 디메틸 포름아미드, 클로로포름, 테트라메틸 포름아미드, 아세톤, 아세테이트 및 알칸 등이 포함된다.

균질함: 나노입자 조성물에서 사용되는 경우, “균질함(uniform)”은 개별 나노입자들이 특정 입자 직경 범위를 가지는 경우를 말한다. 예를 들면, 균질한 나노입자 조성물은 최소 직경과 최대 직경의 차이가 약 600 nm, 약 550 nm, 약 500 nm, 약 450 nm, 약 400 nm, 약 350 nm, 약 300 nm, 약 250 nm, 약 200 nm, 약 150 nm, 약 100 nm, 약 90 nm, 약 80 nm, 약 70 nm, 약 60 nm, 약 50 nm, 또는 이보다 작은 nm 범위를 넘지 않는다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따른 균질한 나노입자 조성물의 입자(가령, 핵산을 포함하는 입자) 약 600nm, 약 550nm, 약 500nm, 약 450nm, 약 400nm, 약 350nm, 약 300nm, 약 250nm, 약 200nm, 약 150nm, 약 130nm,약 120nm, 약 115nm, 약 110nm, 약 100nm, 약 90nm, 약 80nm, 또는 이보다 작은 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따른 균질한 나노입자 조성물내에 입자(가령, 핵산을 포함하는 입자)는 약 10 내지 약 600 나노미터 범위의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따른 균질한 나노입자 조성물내에 입자(가령, 핵산을 포함하는 입자)는 약 10nm - 약 300nm, 약 10nm - 약 200nm, 약 10nm - 약 150nm, 약 10nm - 약 130nm, 약 10nm - 약 120nm, 약 10nm - 약 115nm, 약 10nm - 약 110nm, 약 10nm - 약 100nm, 또는 약 10nm - 약 90nm 범위 내에 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따른 균질한 나노입자 조성물내에 입자(가령, 핵산을 포함하는 입자)는 약 300nm,약250nm, 약 200nm, 약 150nm, 약 130nm, 약 120nm, 약 115nm, 약 110nm, 약 100nm, 또는 약 90nm아래의 평균 입자 크기를 가진다. 일부 구체예에서, 평균 입자 크기는 약 10 nm - 약 300 nm, 약 50 nm - 약 250 nm, 약 60 nm - 약 200 nm, 약 65 nm - 약 150 nm, 약 70 nm - 약 130 nm이다. 일부 구체예에서, 평균 입자 크기는 약 80 nm - 약 110 nm이다. 일부 구체예에서, 평균 입자 크기는 약 90 nm - 약 100 nm이다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따른 균질한 나노입자 조성물내에 대부분의 입자(가령, 핵산을 포함하는 입자)는 명시된 입자 크기 아래 또는 명시된 범위 내에 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 대부분은 조성물에 입자의 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8%, 99.9% 또는 그 이상의 입자를 말한다. 일부 구체예에서, 균질한 나노입자 조성물은 샘플을 미세유동화시켜 수득한다. 일부 구체예에서, 균질한 나노입자 조성물은 미세유동화에 의해 고전단력에 노출시켜 준비한다.

변형안된 핵산: 여기에서 사용된 바와 같이, “변형안된 핵산(unmodified nucleic acid)”는 폴리뉴클레오티드, 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드를 운반(특히 경피 운반)시키기 위해 다른 공유적으로 결합된 기능기를 추가하여 화학적으로 변형시키지 않은 핵산(가령, 폴리뉴클레오티드, 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드)를 말한다. 일부 구체예에서, 핵산은 인산염기를 첨가시키기 위해 변형되지 않았다. 일부 구체예에서, 핵산은 임의 기능기 인산염기를 첨가하기 위해 화학적으로 변형되지 않았다.

특정 구체예의 설명

나노입자들

여기에서 논의된 바와 같이, 본 발명은 나노입자 조성물을 설명한다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 하나 또는 그 이상의 변형안된 또는 변형된 핵산 (가령, 폴리뉴클레오티드 및/또는 가령, 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드와 같은 핵산 잔기들)이 포함된다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에는 핵산에 추가하여 하나 또는 그 이상의 다른 생물학적 활성 물질들이 더 포함된다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 예를 들면, 약학 또는 미용 제제에 하나 또는 그 이상의 다른 성분들로 조제된다. 일부 구체예에서, 이와 같은 약학 또는 미용 제재는 핵산 (및/또는 하나 또는 그 이상의 다른 생물학적 활성 물질)의 운반(특히, 경피 운반)을 실행하기 위해 조제된다. 일부 구체예에서, 이와 같은 약학 또는 미용 제재는 생물학적 작용 부위에서 이들의 활성에 대해 선택된 핵산의 운반(특히, 경피 운반)을 실행하기 위해 조제된다. 일부 구체예에서, 핵산은 생물학적 작용 부위에서 이들 활성을 강화시키기 위해 변형되었다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 나노입자들 집단을 포함한다. 일부 구체예에서, 나노입자들에는 하나 또는 그 이상의 변형안된 또는 변형된 핵산 (가령, 폴리뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드와 같은 핵산 잔기들)이 혼합된다. 일부 구체예에서, 이와 같은 나노입자들에는 핵산에 추가하여 하나 또는 그 이상의 다른 생물학적 활성 물질들이 더 포함된다.

나노입자들의 특징

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 안정적이다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 균일하다.

일부 구체예에서, 균일한 나노입자 조성물은 최소 및 최대 직경의 차가 대략 600 nm, 대략 550 nm, 대략 500 nm, 대략 450 nm, 대략 400 nm, 대략 350 nm, 대략 300 nm, 대략 250 nm, 대략 200 nm, 대략 150 nm, 또는 대략 100 nm을 넘지 않는 입자들 집단을 포함한다.

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자들은 약 1000 nm, 약 600 nm, 약 550 nm, 약 500 nm, 약 450 nm, 약 400 nm, 약 350 nm, 약 300 nm, 약 250 nm, 약 200 nm, 약 150 nm, 약 130 nm, 약 120 nm, 약 115 nm, 약 110 nm, 약 100 nm, 약 90 nm, 약 80 nm, 약 50 nm, 또는 그 미만의 직경을 가진다.

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자들은 1 nm 내지 1000 nm, 1 nm 내지 600 nm, 1 nm 내지 500 nm, 1 nm 내지 400 nm, 1 nm 내지 300 nm, 1 nm 내지 200 nm, 1 nm 내지 150 nm, 1 nm 내지 120 nm, 1 nm 내지 100 nm, 1 nm 내지 75 nm, 1 nm 내지 50 nm, 또는 1 nm 내지 25 nm의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 1 nm 내지 15 nm, 15 nm 내지 200 nm, 25 nm 내지 200 nm, 50 nm 내지 200 nm, 또는 75 nm 내지 200 nm의 직경을 가진다.

일부 구체예에서, 총 입자 분포는 명시된 입자 직경 크기 범위 내에 포함된다. 일부 구체예에서, 전체 입자 분포의 50%, 25%, 10%, 5%, 또는 1% 미만이 명시된 입자 직경 크기 범위 밖에 있다 일부 구체예에서, 전체 입자 분포의 1% 미만이 명시된 입자 직경 크기 범위 밖에 있다. 특정 구체예에서, 나노입자 조성물은300 nm, 250 nm, 200 nm, 150 nm, 120 nm, 100 nm, 75 nm, 50 nm, 또는 25 nm 보다 큰 직경을 가지는 입자를 실질적으로 가지고 있지 않는다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물내 나노입자들은 평균 입자 크기가 약 300 nm, 약 250 nm, 약 200 nm, 약 150 nm, 약 130 nm, 약 120 nm, 약 115 nm, 약 110 nm, 약 100 nm, 약 90 nm, 또는 약 50 nm 미만이다. 일부 구체예에서, 평균 입자 크기는 약 10 nm - 약 300 nm, 약 50 nm - 약 250, 약 60 nm - 약 200 nm, 약 65 nm - 약 150 nm, 또는 약 70 nm - 약 130 nm 범위 내에 있다. 일부 구체예에서, 평균 입자 크기는 약 80 nm - 약 110 nm 범위 내에 있다. 일부 구체예에서, 평균 입자 크기는 약 90 nm - 약 100 nm 범위 내에 있다.

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 300 nm를 초과하는 직경을 가진 입자를 실질적으로 가지고 있지 않는다. 특히, 일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물에 나노입자의 50% 미만이 300 nm를 초과하는 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 입자의 25% 미만이 300 nm를 초과하는 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 입자의 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5% 또는 그 미만이 300 nm를 초과하는 직경을 가진다. 다른 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에 나노입자들은 10 nm - 300 nm 범위의 직경을 가진다.

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 직경이 200nm를 초과하는 입자를 실질적으로 포함하지 않는다. 특히, 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 나노입자의 50% 미만이 200 nm를 초과하는 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 입자의 25% 미만이 200 nm를 초과하는 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 입자의 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5% 또는 그 미만이 200 nm를 초과하는 직경을 가진다. 더욱이, 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에 나노입자들은 10 nm - 200 nm 범위의 직경을 가진다.

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 직경이 120 nm를 초과하는 입자를 실질적으로 포함하지 않는다. 특히, 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 나노입자의 50% 미만이 120 nm를 초과하는 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 입자의 25% 미만이 120 nm를 초과하는 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 입자의 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5% 또는 그 미만이 120 nm를 초과하는 직경을 가진다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물내에 나노입자의 대부분은 명시된 크기 이하의 또는 명시된 범위의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 대부분은 조성물에서 입자의 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8%, 99.9% 또는 그 이상이다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물에서 나노입자의 대부분은 직경이 10 nm 내지 120 nm의 범위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 120 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 110 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 100 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 90 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 80 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 70 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 60 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 50 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 40 nm 사이의 직경을 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 대부분 나노입자들은 20 nm 내지 30 nm 사이의 직경을 가진다.

특정 구체예에서, 나노입자 조성물의 약 50%의 나노입자들은 10 nm 내지 40 nm 사이의 직경을 가진다. 특정 구체예에서, 나노입자 조성물의 약 90%의 나노입자들은 10 nm 내지 80 nm 사이의 직경을 가진다. 특정 구체예에서, 나노입자 조성물의 약 90%의 나노입자들은 10 nm 내지 90 nm 사이의 직경을 가진다. 특정 구체예에서, 나노입자 조성물의 약 95%의 나노입자들은 10 nm 내지 110 nm 사이의 직경을 가진다. 특정 구체예에서, 나노입자 조성물의 약 95%의 나노입자들은 10 nm 내지 120 nm 사이의 직경을 가진다.

특정 구체예에서, 나노입자 조성물내 모든 나노입자의 응집 용적의 약 50%는 10 nm 내지 40 nm 사이의 직경을 가진 나노입자를 포함하거나 구성된다. 특정 구체예에서, 나노입자 조성물내 모든 나노입자의 응집 용적의 약 90%는 10 nm 내지 80 nm 사이의 직경을 가진 나노입자를 포함하거나 구성된다. 특정 구체예에서, 나노입자 조성물내 모든 나노입자의 응집 용적의 약 95%는 10 nm 내지 120 nm 사이의 직경을 가진 나노입자를 포함하거나 구성된다.

제타 전위(Zeta potential)는 전단면에서 전위의 단위이다. 전단면은 고형 표면(가령, 나노입자 표면)에 결합된 액상의 박층을 구별하는 가상 면으로, 정상적인 점성 거동을 보이는 나머지 액체(가령, 약상 분자 매질)로부터 탄성 거동을 보인다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 -80 mV 내지 +80 mV 범위의 제타 전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 -50 mV 내지 +50 mV 범위의 제타 전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 -25 mV 내지 +25 mV 범위의 제타 전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 -10 mV 내지 +10 mV 범위의 제타 전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -80 mV, 약 -70 mV, 약 -60 mV, 약 -50 mV, 약 -40 mV, 약 -30 mV, 약 -25 mV, 약 -20 mV, 약 -15 mV, 약 -10 mV, 또는 약 -5 mV의 제타 전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 +50 mV, 약 +40 mV, 약 +30 mV, 약 +25 mV, 약 +20 mV, 약 +15 mV, 약 +10 mV, 또는 약 +5 mV의 제타 전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 0 mV의 제타 전위를 가진다.

일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -5 mV 내지 약 -80 mV의 제타 전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -5 mV 내지 약 -70 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -5 mV 내지 약 -60 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -5 mV 내지 약 -50 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -5 mV 내지 약 -40 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -5 mV 내지 약 -30 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -5 mV 내지 약 -20 mV의 제타전위를 가진다.

일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 -15 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 -80 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 -70 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 -60 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 -50 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 -40 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 -30 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 -20 mV의 제타전위를 가진다.

일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -80 mV 내지 약 -70 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -70 mV 내지 약 -60 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -60 mV 내지 약 -50 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -50 mV 내지 약 -40 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -40 mV 내지 약 -30 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -30 mV 내지 약 -20 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -20 mV 내지 약 -10 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -10 mV 내지 약 0 mV의 제타전위를 가진다.

일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -15 mV 내지 약 -20 mV의 제타전위를 가진다. 일부 구체예에서, 나노입자들은 약 -5 mV, 약 -6 mV, 약 -7 mV, 약 -8 mV, 약 -9 mV, -10 mV, 약 -11 mV, 약 -12 mV, 약 -13 mV, 약 -14 mV, 약 -15 mV, 약 16 mV, 약 -17 mV, 약 -18 mV, 약 -19 mV, 또는 약 -20 mV의 제타 전위를 가진다.

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 에멀젼 또는 분산액이다. 일반적으로, 분산액 또는 에멀젼은 최소 두 가지 혼합되지 않은 물질이 복합될 때 형성되는데, 이중 하나는 분산 매질(가령, 입자(나노입자)가 분산된 액체 매질, 이는 “분산된 매질”)을 구성한다. 수중유(“oil-in-water”) 분산액은 유성(또는 소수성 또는 비-극성) 입자가 수용성 분산 매질에 분산된 것이다. 유중수(“water-in-oil”) 분산액은 수성(또는 친수성 또는 극성) 입자가 유성 분산 매질에 분산된 것이다. 수중유 및 유중수 분산액은 하기에서 더욱 상세하게 논의될 것이다. 당업자는 분산액이 임의 두 가지 혼합될 수 없는 매질에서 형성되나, 반드시 수성 매질 및 유성 매질의 혼합으로만 제한시키지 않는다는 것을 인지할 것이다. 분산 매질(“dispersion medium”)은 “수성” 및 “유성” 범주를 흔히 지칭하는 함에도 불구하고 광범위하게는 임의 분산 매질을 말한다. 예를 들면, 에멀젼 또는 분산액은 친수성/친수성 물질; 극성/비-극성 물질의 혼합되지 않는 세트에서 만들어 질 수 있는데, 이때 이와 같은 물질들이 엄밀히 “수성” 또는 “유성”인지에 무관하다.

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 미셀 구조를 포함한다(가령, 나노입자들이 미셀이다). 일부 구체예에서, 이와 같은 미셀 구조들이 교차연결된다. 일부 구체예에서, 이와 같은 미셀 구조들은 교차 연결되지 않는다.

나노입자들의 생산

일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 복합된 성분들의 집합으로부터 자가-어셈블리된다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 고전단력에 성분들의 복합물(가령, “프레믹스”)을 노출시켜 만들 수 있다. 일부 구체예에서, 고전단력은 고압, 캐비테이션, 균질화 및/또는 미세유체화에 의해 제공될 수 있다. 일부 구체예에서, 복합된 나노입자-형성 성분들을 교반, 휘젓기 또는 혼합한다. 이와 같은 일부 구체예에서, 성분들은 혼합된 후에 고전단력을 받게 된다. 일부 특정 구체예에서, 혼합은 일정 시간, 예를 들면, 1시간 미만 또는 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 또는 15 시간 이상이 될 수 있다. 일부 구체예에서, 용해(solubilization)가 이루어진다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물의 생산은 성분 집합을 투석 예를 들면, 조성물을 만들기 위해 임의 유기 용매를 제거하고, 및/또는 동결-건조시키는 것이 포함된다.

프레믹스를 이용하는 본 발명의 일부 구체예에서, 프레믹스 성분들은 고전단력 제공 전에 입자로 어셈블리될 수도 있다. 이와 같은 입자의 최소 일부는 마이크로입자 또는 나노입자들이 될 수 있다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물을 프레믹스로부터 만드는데, 이때 프레믹스는 현탁액 또는 마이크로에멀젼에서 선택된다. 그러나, 일부 구체예에서, 입자 구조는 고전단력 제공 이전에 프레믹스를 형성하지 않는다.

본 발명의 일부 구체예에서, 최종 나노입자 조성물에 존재하는 모든 성분은 프레믹스에 존재하고, 고전단력을 받아 나노입자 조성물을 만든다. 본 발명의 일부 구체예에서, 최종 나노입자 조성물에 존재하는 하나 또는 그 이상의 성분들이 프레믹스에서 빠지거나 또는 최종 나노입자 조성물보다는 소량으로 프레믹스에 존재한다. 즉, 본 발명의 일부 구체예에서, 하나 또는 그 이상의 물질은 프레믹스가 고전단력을 받은 후 나노입자 조성물에 첨가된다.

특정 구체예에서, 프레믹스는 고전단력을 받기 전에 용액으로 준비된다. 특히, 최소 한 가지 생물학적 활성 물질(가령, 핵산)을 포함하는 나노입자 조성물의 경우, 고전단력을 제공하기 전에 생물학적 활성 작용제를 프레믹스에 혼합시키는 것이 종종 바람직하다. 따라서, 많은 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 매질(또는 프레믹스에 이용되는 매질의 복합)중 최소 하나에 용해된다. 일부 구체예에서, 이와 같은 용해는 가열을 필요로 한다; 다른 구체예에서는 가열을 요구하지 않는다.

나노입자들의 조성물

일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 하나 또는 그 이상의 수용성, 극성, 또는 친수성 매질, 하나 또는 그 이상의 유성, 비-극성, 또는 소수성 매질, 하나 또는 그 이상의 미셀 성분들, 하나 또는 그 이상의 계면활성제 또는 유화제, 하나 또는 그 이상의 생물학적 활성 물질 및/또는 하나 또는 그 이상의 방출 지연 작용제 등을 포함하는 성분들로부터 만든다.

당업자는 본 발명에 따른 분산될 매질로써 또는 분산 매질로 이용될 수 있는 적절한 수용성 매질을 인지할 것이다. 이와 같은 대표적인 수용성 매질에는 물, 소금물(인산 완충된 소금물), 주사용 물, 단쇄 알코올, 5% 덱스트로즈, 링거 액(락테이트화된 링거 주사액, 락테이트화된 링거 주사액+ 5% 덱스트로즈 주사액, 아실화된 링거 주사액), NORMOSOL® M, ISOLYTE E, 그리고 이와 유사한 매질 및 이의 복합물이 포함된다.

당업자는 본 발명에 따른 분산될 매질로써 또는 분산 매질로 이용될 수 있는 적절한 유성 매질을 인지할 것이다. 일부 구체예에서, 오일은 하나 또는 그 이상의 지방산 또는 이의 염을 포함한다. 일부 구체예에서, 지방산 기는 분해되는, 긴 쇄(가령, C₈-C₅₀), 치환된 또는 치환안된 탄화수소를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 C₁₀-C₂₀ 지방산 또는 이의 염이다. 일부 구체예에서, 지방산기는 C₁₅-C₂₅ 지방산 또는 이의 염이다. 일부 구체예에서, 지방산기는 C₁₅-C₂₅ 지방산 또는 이의 염이다. 일부 구체예에서, 지방산기는 불포화될 수 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 단일불포화(monounsaturated)될 수 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 다중불포화(polyunsaturated)될 수 있다. 일부 구체예에서, 불포화 지방산기의 이중 결합은 cis 형이다. 일부 구체예에서, 불포화 지방산기의 이중 결합은 trans 형이다.

일부 구체예에서, 지방산기는 하나 또는 그 이상의 부틸산(butyric acid), 카프론산(caproic acid), 카프릴산(caprylic acid), 카프린산(capric acid), 라우린산(lauric acid), 미리스틱산(myristic acid), 팔미트산(palmitic acid), 스테아르산(stearic acid), 아라키돈산(arachidic acid), 베헤닌산(behenic acid) 또는 링고세린산(lignoceric acid)이 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 하나 또는 그 이상의 팔미톨레산(palmitoleic acid), 올레산(oleic acid), 바세닌산(vaccenic acid), 리놀레산(linoleic acid), 알파-리놀렌산(alpha-linolenic acid), 감마-리놀레산(linoleic acid), 아라키돈산(arachidonic acid), 가돌레산(gadoleic acid), 아라키돈산(arachidonic acid), 에코사펜타논산(eicosapentaenoic acid), 도코사헥사논산(docosahexaenoic acid), 또는 에루식산(erucic acid)이 될 수 있다.

일부 구체예에서, 오일은 액상 트리글리세리드이다. 일부 구체예에서, 오일은 중간 사슬 트리글리세리드이다. 일반적으로, 중간 사슬 트리글리세리드는 6-12개 탄소원자를 포함하는 지방산(가령, 카프릴산, 옥타논산, 카프릭산, 데카논산, 라우린산 등)이고, 그리고 코코넛 오일 또는 팜핵유로부터 수득할 수 있다. 일부 구체예에서, 1349 오일은 본 발명에 이용될 수 있는 중간 사슬 트리글리세리드이다.

본 발명에 이용되는 적절한 오일에는 아몬드, 살구 핵, 아보카도, 바바수야자, 베르가모트, 블랙 큐런트 오일, 지치, 캐이드(cade), 카모마일, 카놀라, 캐러웨이, 브라질납야자, 캐스터, 육계, 코코아 버터, 코코넛, 대구 간, 커피, 옥수수, 목화 씨, 에뮤, 유칼립투스, 달맞이꽃, 물고기, 아마씨, 게라니올, 조롱박, 포도씨, 헤이즐넛, 우슬초, 이소프로필 미리스테이트, 호호바, 쿠쿠이넛, 라반딘, 라벤더, 레몬, 리트세아 쿠베바, 마스카데미아 넛, 당아욱, 망고씨, 메도우폼씨드, 미네랄, 밍크, 육두구, 올리브, 오렌지, 오렌지 러피, 종려나무, 종려나무 핵, 복숭아 핵, 땅콩, 양귀비 씨, 호박씨, 평지씨, 라이스 브란, 로즈마리, 홍화, 백단, 사스쿠아나, 향신료(savoury), 바다 갈매나무, 참깨, 시어 버터, 실리콘, 콩, 해바라기, 차나무, 엉겅퀴, 슈바키, 베티버, 호두, 윗점, 및 이의 혼합물이 포함되나 이에 국한시키지는 않는다. 본 발명에 이용할 수 있는 적절한 합성 오일에는 카프릴/카프린 트리글리세리드, 사이클로메티콘, 디에틸 아세케이트, 디테미콘 360, 이소프로필 미리스테이트, 옥틸프로필 미리스테이트, 옥틸도데카놀, 올레일알코올, 1349 오일 및 이의 복합물이 포함되나 이에 국한시키지 않는다.

적절한 미셀 성분들에는 예를 들면, 하나 또는 그 이상의 양쪽성 엔터티를 포함할 수 있다. 유용한 양쪽성 엔터티에는 천연 엔터티, 합성 엔터티, 그리고 천연 및 합성 성분 모두를 포함하는 엔터티가 포함된다. 일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티는 하나 또는 그 이상의 폴리머, 및/또는 폴리머 성질을 가지는 하나 또는 그 이상의 화합물을 포함할 수도 있다.

일반적으로, 양쪽성 엔터티는 소수성 및 친수성 성질을 모두 가지는 것이다. 당업자가 인지하는 바와 같이, 양쪽성 엔터티는 여러 상이한 방식으로 구성될 수 있다. 일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티는 자체가 양쪽성인 하나 또는 그 이상의 개별 화합물 또는 분자들을 포함할 수도 있다. 몇 가지 예를 들면, 이와 같은 화합물 또는 분자에는 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 포스포리피드, 콜레스테롤, 글리코리피드 지방산, 담즙산, 그리고 사포닌 등이 포함된다. PEG는 미국 FDA에 의해 일반적으로 식품, 화장품 및 의약품에 사용하기에 안전한 것으로 인식된다. PEG는 물-용해성, 비-독성, 무색, 윤활성, 비-휘발성 그리고 비-자극성이다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티는 자체가 양쪽성이지는 않지만, 일부 친수성 또는 소수성 성질을 가지는 하나 또는 그 이상의 개별 성분들을 포함할 수 있다. 이와 같은 구체예에서, 이와 같은 비-양쪽성 성분 두 개 또는 그 이상이 일반적으로 서로 연합되어, 개별 성분들의 어셈블리가 양쪽성이 된다. 이와 같은 연합은 공유 연결이 관여하거나 관여하지 않을 수도 있다; 이와 같은 연합은 비-공유 결합(가령, 소수성 상호작용, 수소 결합, 반데르발스 상호작용, 이온 상호작용, 상극자-쌍극자 상호작용 등)이 관여할 수도 있다. 일반적으로, 이와 같은 연합은 임의 관련 힘, 결합 또는 흡착 수단이 관여할 수도 있다.

일부 구체예에서, 본 발명에 이용될 수 있는 양쪽성 엔터티는 상이한 친수성 또는 소수성 수준을 가지는 두 개 또는 그 이상의 개별 성분으로부터 만들어질 수 있다. 특정 구체예에서, 양쪽성 엔터티는 최소 한 가지 친수성 성분 및 최소 한 가지 소수성 성분을 포함한다. 특정 구체예에서, “친수성” 및 “소수성” 성분들은 서로에 대해 친수성 또는 소수성일 수 있다.

일부 구체예에서, 친수성 또는 소수성 정도가 상이한 두 개 또는 그 이상의 성분들은 공유 결합에 의해 서로 결합되어 동종폴리머 또는 코폴리머를 형성한다. 일부 구체예에서, 코폴리머는 블록 코폴리머일 수 있다. 일부 구체예에서, 코폴리머는 그라프트 코폴리머일 수 있다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티는 양쪽성 블록 코폴리머. 일부 구체예에서, 양쪽성 블록 코폴리머는 이블록 코폴리머일 수 있다. 특정 구체예에서, 양쪽성 이블록 코폴리머는 제1 폴리머 블록과 체인의 단부에서 공유적으로 연결된 제2 폴리머 블록을 포함할 수 있다. 특정 구체예에서, 제1 폴리머 블록은 친수성 성분의 반복 단위로 포함될 수 있고, 제2 폴리머 블록은 소수성 성분의 반복 단위로 구성될 수 있다. 특정 구체예에서, 제1폴리머 블록은 소수성 성분의 반복 단위로 포함될 수 있고, 제2 폴리머 블록은 친수성 성분의 반복 단위로 포함될 수 있다. 일부 구체예에서, 양쪽성 블록 코폴리머는 멀티블록 코폴리머일 수도 있다. 특정 구체예에서, 양쪽성 블록 코폴리머는 두 개 또는 그 이상의 폴리머가 체인의 단부에 연결된 교차 다중 블록으로 포함할 수도 있다. 특정 구체예에서, 양쪽성 블록 코폴리머는 체인의 단부에서 공유적으로 연결된 교대의 친수성 블록과 소수성 멀티블록들을 포함할 수 있다. 특정 구체예에서, 교차 블록의 각 블록들은 친수성 성분들 또는 소수성 성분들의 반복 단위를 포함할 수도 있다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티는 양쪽성 그라프트 코폴리머로 구성되거나 이를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 양쪽성 그라프트 코폴리머는 폴리머의 블록의 측쇄에 공유적으로 연결된 폴리머 블록으로 구성되거나 이를 포함할 수 있다. 특정 구체예에서, 각 폴리머 블록은 친수성 또는 소수성 성분들의 반복 단위로 구성되거나 이를 포함할 수 있다. 특정 구체예에서, 양쪽성 그라프트 코폴리머는 제1폴리머 블록과 제1 폴리머 블록에 공유적으로 연결된 제 2 폴리머 블록으로 구성되거나 이를 포함할 수 있다. 특정 구체예에서, 제 1 폴리머 블록은 친수성 성분의 반복 단위로 구성되거나 이를 포함할 수 있고, 제 2 블록은 소수성 성분의 반복단위를 포함할 수 있다. 특정 구체예에서, 제 1 폴리머 블록은 소수성 성분의 반복 단위로 구성되거나 이를 포함할 수 있고, 제 1 블록은 친수성 성분의 반복 단위를 포함할 수도 있다.

일부 구체예에서, 양쪽성 블록 또는 그라프트 코폴리머에는 폴리사카라이드 반복 단위를 포함하는 친수성 폴리머 블록이 포함될 수 있고, 폴리에스테르 또는 폴리사카라이드의 반복단위를 포함하는 소수성 폴리머 블록을 포함한다. 대안으로 또는 추가적으로, 양쪽성 블록 또는 그라프트 코폴리머에는 폴리사카라이드 반복 단위를 포함하는 소수성 폴리머 블록과 폴리에스테르 또는 폴리사카라이드의 반복단위를 포함하는 친수성 폴리머 블록을 포함할 수 있다. 이와 같은 친수성 폴리머 블록에는 임의 타입의 친수성 폴리머의 반복 단위가 포함될 수 있는데, 예를 들면, 폴리사카라이드(가령, 풀루란) 또는 폴리알켄옥시드(가령, 폴리에틸렌옥시드)가 된다. 소수성 폴리머 블록에는 폴리카프로락톤 또는 폴리아미드(가령, 폴리카르보락탐)과 같은 임의 타입의 소수성 폴리머의 반복 단위를 포함할 수 있다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 친수성 부분은 비-이온성일 수 있다. 일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 친수성 성분은 하나 또는 그 이상의 이온기일 수도 있다. 일반적으로, 이와 같은 이온기는 친수성이고, 양쪽성 엔터티에 친수성 성질을 부여할 수 있다.

일부 구체예에서, 이온기는 양이온기일 수 있다. 일부 구체예에서, 양이온 기는 암모늄(NH₄ ⁺), 니트로늄(NO₂ ⁺), 니트로실(NO⁺), 하이드로늄(H₃O⁺), 제1수은(Hg₂ ²⁺), 포스포늄(PH₄ ⁺), 바나딜(VO²⁺), 또는 이의 염이 될 수도 있다.

일부 구체예에서, 이온 기는 음이온일 수 있다. 일부 구체예에서, 음이온 기는 지방산, 아르세니드(As³), 아지드(N₃), 브롬화물(Br), 염소화물(Cl), 플루오르화물(F), 수소화물(H), 요오드화물(I), 질화물(N3), 산화물(O2), 인화물(P³), 셀레니드(Se²), 황화물(S²), 과산화물(O₂ ²), 비산(AsO₄ ³), 아비산(AsO₃ ³), 붕산(BO₃ ³), 과브롬산(BrO₄), 브롬산(BrO₃), 아브롬산(BrO₂), 차아브롬산(BrO), 탄산(CO₃ ²), 탄화수소(HCO₃), 염소산(ClO₃), 과염소산(ClO₄), 아염소산(ClO₂), 차아염소산(ClO), 크롬산(CrO₄ ²), 중크롬산(Cr₂O₇ ²), 과브롬산(BrO₄), 브롬산(BrO₃), 아브롬산(BrO₂), 차아브롬산(BrO), 과요오드산(IO₄), 요도드산(IO₃), 아요오드산(IO₂), 차아요오드산(IO), 질산(NO₃), 아질산(NO₂), 인산(PO₄ ^3-), 인산수소(HPO₄ ^2-), 인산이수소(H₂PO₄), 아인산(PO₃ ^3-), 규산(SiO₃ ^2-), 황산(SO₄ ^2-), 티오황산(S₂O₃ ²), 황산수소(HSO₄), 아황산(SO₃ ^2-), 아황산수소(HSO₃), 술폰산(-S(=O)₂-O), 아세테이트(C₂H₃O₂), 포름산(HCO₂), 수산(C₂O₄ ²), 하이드로젠옥살레이트(HC₂O₄), 구연산(C₆H₅O₇ ^3-), 숙신산염(C₄H₄O₄ ^2-), 푸마르산(C₄H₂O₄ ^2-), 말산(C₄H₅O₅ ^2-), 황화수소(HS), 텔루르(Te²), 아미드(NH₂), 시안산(OCN), 티오시안산(SCN), 시안화물(CN), 수산화물(OH), 과망간산(MnO₄), 또는 이의 염이 된다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 친수성 성분은 핵산으로 구성되거나 이를 포함할 수 있다. 예를 들면, 핵산에는 DNA, RNA, 또는 이의 복합물이 될 수 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 올리고뉴클레오티드 및/또는 폴리뉴클레오티드가 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 올리고뉴클레오티드 및/또는 변형된 올리고뉴클레오티드; RNAi-유도 작용제; 작은 간섭 RNA (siRNA), 짧은 헤어핀 RNA (shRNA), 및/또는 microRNA (miRNA); 안티센스 올리고뉴클레오티드 및/또는 변형된 안티센스 올리고뉴클레오티드; cDNA; 게놈 DNA; 바이러스 DNA 및/또는 RNA; DNA 및/또는 RNA 키메라; 플라스미드; 코스미드; 유전자 단편들; 인위적인 및/또는 천연 염색체 (가령, 효소 인위적인 염색체) 및/또는 이의 일부분; RNA(가령, mRNA, tRNA, rRNA 및/또는 리보자임); 펩티드 핵산(PNA); 합성된 핵산 유사체를 포함하는 폴리뉴클레오티드, 이는 변형되거나 변형안된 것일 수 있으며; 단일 가닥 DNA, 이중 가닥 DNA, 슈퍼코일 DNA 및/또는 트리플-나선 DNA을 포함하는 다양한 형태의 DNA; Z-DNA; 및/또는 이의 복합물이 될 수도 있다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 친수성 성분은 탄수화물로 구성되거나 이를 포함할 수도 있다. 일부 구체예에서, 탄수화물은 당분야에 공지된 바와 같이, 글리코시드 결합에 의해 연결된 단순 당(또는 이의 유도체)로 구성된 폴리사카라이드일 수도 있다. 이와 같은 당에는 글루코스, 푸락토즈, 갈락토즈, 리보스, 락토즈, 슈크로즈, 말토즈, 트레할로즈, 셀비오즈, 만노즈, 실로즈, 아라비노즈, 글루코로닌산, 갈락토론산, 만누론산, 글루코사민, 갈락토사민 및 뉴라민산이 포함되나 이에 국한시키지는 않는다. 일부 구체예에서, 폴리머는 아미노화된, 카르복실화된 그리고 설페이트화된 폴리사카라이드를 포함하는 친수성 탄수화물일 수도 있다. 일부 구체예에서, 친수성 탄수화물은 또는 그 이상의 풀루란, 셀룰로오즈, 미소결정 셀룰로오즈, 하이드록시프로필 메틸셀룰로오즈, 하이드록시셀룰로오즈, 메틸셀룰로오즈, 덱스트란, 사이클로덱스트란, 글리코겐, 전분, 하이드록시에틸전분, 카라지난, 글리콘, 아밀로즈, 치토산, N,O-카르복실메틸 치토산, 일긴 및 알지닌산, 전분, 치틴, 헤파린, 곤약, 글루코만만, 푸스투란, 헤파민, 히알루온산, 커드란, 그리고 산탄이 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 친수성 폴리사카라이드는 측쇄 소수성 기 다수를 도입시켜 소수성으로 변형될 수도 있다. 일부 구체예에서, 소수성 탄수화물에는 셀룰로오즈 아세테이트, 풀루란 아세테이트, 곤약 아세테이트, 아밀로즈 아세테이트, 그리고 덱스트란 아세테이트가 포함될 수도 있다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 친수성 성분은 산탄 검, 알긴산, 카라야 검, 알지네이트 나트륨 및/또는 로커스트 빈 검을 포함하나 이에 국한되지 않은 검으로 구성되거나 이를 포함할 수도 있다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 성분은 단백질로 구성되거나 이를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 단백질은 양쪽성 엔터티의 친수성 성분이다. 다른 구체예에서, 단백질은 양쪽성 엔터티의 소수성 성분이다. 본 발명에 따라 이용될 수 있는 예시적인 단백질에는 알부민, 콜라겐, 또는 폴리(아미노산) (가령, 폴리리신)이 포함되나 이에 국한되지는 않는다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 소수성 성분은 하나 또는 그 이상의 지방산 기 또는 이의 염으로 구성되거나 이를 포함할 수도 있다. 일반적으로, 이와 같은 기들은 전형적인 소수성이며, 소수성 특징을 양쪽성 엔터티에 부여할 수 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 분해되는, 긴 쇄(가령, C₈-C₅₀), 치환된 또는 치환안된 탄화수소를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 C₁₀-C₂₀ 지방산 또는 이의 염이다. 일부 구체예에서, 지방산기는 C₁₅-C₂₅ 지방산 또는 이의 염이다. 일부 구체예에서, 지방산기는 C₁₅-C₂₅ 지방산 또는 이의 염이다. 일부 구체예에서, 지방산기는 불포화될 수 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 단일불포화될 수 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 다중불포화될 수 있다. 일부 구체예에서, 불포화 지방산기의 이중 결합은 cis 형이다. 일부 구체예에서, 불포화 지방산기의 이중 결합은 trans 형이다.

일부 구체예에서, 지방산기는 하나 또는 그 이상의 부틸산, 카프론산, 카프릴산, 카프린산, 라우린산, 미리스틱산, 팔미트산, 스테아르산, 아라키돈산, 베헤닌산 또는 링고세린산이 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 지방산기는 하나 또는 그 이상의 팔미톨레산, 올레산, 바세닌산, 리놀레산, 알파-리놀렌산, 감마-리놀레산, 아라키돈산, 가돌레산, 아라키돈산, 에코사펜타논산, 도코사헥사논산, 또는 에루식산이 될 수 있다.

일부 구체예에서, 오일은 액상 트리글리세리드이다. 일부 구체예에서, 오일은 중간 사슬 트리글리세리드이다. 일반적으로, 매질 체인 트리글리세

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 소수성 성분은 하나 또는 그 이상의 생체적합한 및/또는 생분해가능한 합성 폴리머들, 예를 들면, 폴리카르보네이트(가령, 폴리(1,3-디옥산-2온)), 폴리안하이드리드(가령, 폴리(세박 안하이드리드)), 폴리하이드록시산(가령, 폴리(β-하이드록시알카토네이트)), 폴리프로필 퓨마레이트, 폴리카프로락톤, 폴리아미드(가령, 폴리카프로락탐), 폴리아세탈, 폴리에테르, 폴리에스테르(가령, 폴리락티드 및 폴리글리코리드), 생분해가능한 폴리사아노아크릴레이트, 폴리비닐알코올, 그리고 생분해가능한 폴리우레탄 등으로 구성되거나 이를 포함할 수 있다. 예를 들면, 양쪽성 엔터티는 다음의 생분해가능한 폴리머 하나 또는 그 이상을 포함한다; 폴리(락트산), 폴리(글리콜산), 폴리(카프로락톤), 폴리(락티드-co-카프로락톤), 폴리(글리코리드-co-카프로락톤), 그리고 폴리(D,L-락티드-co-글리코리드).

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 소수성 성분은 하나 또는 그 이상의 아크릴 폴리머. 특정 구체예에서, 아크릴 폴리머에는 예를 들면, 아크릴 산 및 메타아크릴 산 코폴리머, 메틸 메타아크릴레이트 코폴리머, 에톡시에틸 메타아크릴레이트, 시아노에틸 메타아크릴레이트, 아미노알킬 메타아크릴레이트 코폴리머, 폴리(아크릴 산), 폴리(메타아크릴 산), 메타아크릴 산 알킬아미드 코폴리머, 폴리(메틸 메타아크릴레이트), 폴리(메타아크릴 산 안하이드리드), 메틸 메타아크릴레이트, 폴리메타아크릴레이트, 폴리(메틸 메타아크릴레이트) 코폴리머, 폴리아크릴아미드, 아미노알킬 메타아크릴레이트 코폴리머, 글리시딜 메타아크릴레이트 코폴리머, 그리고 하나 또는 그 이상의 상기 언급된 폴리머를 포함하는 복합물로 구성되거나 이를 포함할 수 있다. 아크릴 폴리머는 4차 암모늄 그룹의 함량이 낮은 아크릴과 메타아크릴산 에스테르의 완전하게 폴리머화된 코폴리머를 포함할 수도 있다.

일부 구체예에서, 양쪽성 엔터티의 소수성 성분은 폴리에스테르로 구성되거나 이를 포함할 수도 있다. 예시적인 이와 같은 폴리에스테르에는 예를 들면, 폴리알킬렌 글리콜, 폴리(글리코리드-co-락티드), 폴리(락트-co-글리코릭 산)-PEG 코폴리머, 폴리(락트 산), 폴리(락트 산)-PEG 코폴리머, 폴리(글리코릭 산), 폴리(글리코릭 산)-PEG 코폴리머, 폴리락트와 폴리글리코릭 산의 코폴리머, 그리고 이의 유도체가 포함된다. 일부 구체예에서, 폴리에스테르에는 예를 들면, 폴리안하이드리드, 폴리(오르소 에스테르), 폴리(오르소 에스테르)-PEG 코폴리머, 폴리(카프로락톤), 폴리(카프로락톤)-PEG 코폴리머, 폴리리신, 폴리리신-PEG 코폴리머, 폴리(에틸렌 이민), 폴리(에틸렌 이민)-PEG 코폴리머, 및 이의 유도체가 포함된다. 일부 구체예에서, 폴리에스테르에는 예를 들면, 폴리카프로락톤, 폴리(L-락티드-co-L-리신), 폴리(세린 에스테르), 폴리(4-하이드록시-L-프로린 에스테르), 폴리[α-(4-아미노부틸)-L-글리코릭 산], 및 이의 유도체가 포함된다.

적절한 계면활성제 또는 에멀젼화 작용제에는 포스포글리세리드; 포스파티딜콜린스; 디팔리토일 포스파티딜콜린(DPPC); 디올레일포스파티딜 에탄올아민(DOPE); 디올레일옥시프로필트리에틸암모늄(DOTMA); 디올레오일포스파티딜콜린; 콜레스테롤; 콜레스테롤 에스테르; 디아실글리세롤; 디아실글리세롤숙시네이트; 디포스파티딜 글리세롤(DPPG); 헥산데칸올; 지방 알코올, 예를 들면, 폴리에틸렌 글리콜(PEG); 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에테르; 표면 활성 지방 산, 예를 들면, 팔미트 산 또는 올레산; 지방산; 지방산 아미드; 소르비탄 트리올레이트(SPAN®85) 글리코콜레이트; 소르비탄 모노라우레이트(SPAN®20); 폴리소르베이트20(TWEEN®20); 폴리소르베이트60(TWEEN®60); 폴리소르베이트65(TWEEN®65); 폴리소르베이트80(TWEEN®80); 폴리소르베이트85(TWEEN®85); 폴리옥시에틸렌 모노스테아레이트; 설팩틴; 폴록소머; 소르비탄 지방산 에스테르, 예를 들면, 소르비탄 트레올레이트; 레시틴; 콩 레시틴; 리소레시틴; 리포이드; 포스파티딜세린; 포스파티딜이노시톨; 스핑고미엘린; 포스파티딜에탄올아민(세팔린); 카르디올리핀; 포스파티드산; 세레브로시드; 디세틸포스페이트; 디팔미토일포스파티딜글리세롤; 스테아릴아민; 도데실아민; 헥사데실-아민; 아세틸팔미테이트; 글리세롤 리시놀레이트; 헥사데실 스테아레이트; 틸록사폴; 폴리(에틸렌글리콜)5000-포스파티딜에탄올아민; 폴리(에틸렌글리콜)400-모노스테아레이트; 그리고 포스포리피드가 포함되나 이에 국한시키지는 않는다. 계면활성제 성분은 상이한 계면활성제 혼합물일 수도 있다. 이와 같은 계면활성제는 천연 소스로부터 추출하거나 정제할 수 있고, 실험실에서 합성하여 준비할 수도 있다. 적절한 구체예에서, 계면활성제는 시판되는 것을 이용한다.

특정 구체예에서, 나노입자 조성물을 만드는데 이용되는 성분들의 상대적인 양은 원하는 성질을 가지는 나노입자를 만들기 위해 선택되거나 조절된다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 명시된 비율로 계면활성제, 오일, 및/또는 수용성 매질(가령, 물)을 포함한다. 일부 구체예에서, 오일 및 계면활성제는 0.5 - 10 범위의 비율로 이용된다. 일부 구체예에서, 오일과 계면활성제의 비율은 대략 0.5:1, 대략 1:1, 대략 2:1, 대략 3:1, 대략 4:1, 대략 5:1, 대략 6:1, 대략 7:1, 대략 8:1, 대략 9:1 또는 대략 10:1이다. 일부 구체예에서, 계면활성제와 오일의 비율은 대략 0.5:1, 대략 1:1, 대략 2:1, 대략 3:1, 대략 4:1, 대략 5:1, 대략 6:1, 대략 7:1, 대략 8:1, 대략 9:1 또는 대략 10:1이다.

일부 구체예에서, 오일과 계면활성제의 비율은 0.5 - 2의 비율 범위로 이용된다. 특정 구체예에서, 오일과 계면활성제의 비율은 대략 0.5:1, 대략 1:1, 또는 대략 2:1이다. 특정 구체예에서, 계면활성제와 오일의 비율은 대략 0.5:1, 대략 1:1, 또는 대략 2:1이다. 특정 구체예에서, 오일과 계면활성제의 비율은 대략 1:1이다.

일부 구체예에서, 이와 같은 계면활성제에 대한 오일의 비율을 이용하는 조성물은 수중유 에멀젼을 포함한다. 일부 구체예에서, 이와 같은 계면활성제에 대한 오일의 비율을 이용하는 조성물은 변형안된 및/또는 변형된 폴리뉴클레오티드가 결합된 나노입자를 포함한다.

일부 구체예에서, 물 및 계면활성제는 0.5 - 10 범위의 비율로 이용된다. 일부 구체예에서, 물과 계면활성제의 비율은 대략 0.5:1, 대략 1:1, 대략 2:1, 대략 3:1, 대략 4:1, 대략 5:1, 대략 6:1, 대략 7:1, 대략 8:1, 대략 9:1 또는 대략 10:1이다. 일부 구체예에서, 계면활성제와 물의 비율은 대략 0.5:1, 대략 1:1, 대략 2:1, 대략 3:1, 대략 4:1, 대략 5:1, 대략 6:1, 대략 7:1, 대략 8:1, 대략 9:1 또는 대략 10:1이다. 일부 구체예에서, 물과 계면활성제의 비율은 0.5 - 2 범위이다. 특정 구체예에서, 물과 계면활성제의 비율은 대략 0.5:1, 대략 1:1, 또는 대략 2:1이다. 특정 구체예에서, 계면활성제와 물의 비율은 대략 0.5:1, 대략 1:1, 또는 대략 2:1이다. 특정 구체예에서, 물과 계면활성제의 비율은 대략 1:1이다. 일부 구체예에서, 이와 같이 계면활성제에 대한 물의 비율을 이용하는 조성물은 유중수 에면젼을 포함한다.

일부 구체예에서, 나노입자를 준비하는 조성물(가령, 프레믹스)에서 오일의 비율은 0% 내지 30% 범위이다. 일부 구체예에서, 나노입자를 준비하는 조성물(가령, 프레믹스)에서 오일의 비율은 대략 1%, 대략 2%, 대략 3%, 대략 4%, 대략 5%, 대략 6%, 대략 7%, 대략 9%, 대략 10%, 대략 11%, 대략 12%, 대략 13%, 대략 14%, 대략 15%, 대략 16%, 대략 17%, 대략 18%, 대략 19%, 대략 20%, 대략 21%, 대략22%, 대략 23%, 대략 24%, 대략 25%, 대략 26%, 대략 27%, 대략 28%, 대략 29% 또는 대략 30%이다. 일부 구체예에서, 오일 비율은 대략 9%이다. 일부 구체예에서, 오일의 비율은 대략 5%이다.

프레믹스에서 물의 비율은 0% 내지99%, 10% 내지99%, 25% 내지99%, 50% 내지99%, 또는 75% 내지99%. 일부 구체예에서, 프레믹스에서 물의 비율은 0% 내지75%, 0% 내지 50%, 0% 내지 25%, 또는 0% 내지 10%이다. 일부 구체예에서, 나노입자를 준비하는 조성물(가령, 프레믹스)에서 물의 비율은 0% 내지 30% 범위이다. 일부 구체예에서, 물의 비율은 대략 1%, 대략 2%, 대략 3%, 대략 4%, 대략 5%, 대략 6%, 대략 7%, 대략 9%, 대략 10%, 대략 11%, 대략 12%, 대략 13%, 대략 14%, 대략 15%, 대략 16%, 대략 17%, 대략 18%, 대략 19%, 대략 20%, 대략 21%, 대략 22%, 대략 23%, 대략 24%, 대략 25%, 대략 26%, 대략 27%, 대략 28%, 대략 29% 또는 대략 30%이다. 일부 구체예에서, 물의 비율은 대략 9%이다. 일부 구체예에서, 물의 비율은 대략 5%이다.

일부 구체예에서, 하나 또는 그 이상의 양쪽성 엔터티가 이용될 때, 나노입자를 준비하는 조성물(가령, 프레믹스)에서 양쪽성 엔터티의 비율은 40% 내지 99%, 50% 내지 99%, 60% 내지 99%, 70% 내지 99%, 80% 내지 99%, 80% 내지 90%, 또는 90% 내지 99%이다. 일부 구체예에서, 나노입자를 준비하는 조성물(가령, 프레믹스)에서 양쪽성 엔터티의 비율은 대략 75%, 대략 76%, 대략 77%, 대략 78%, 대략 79%, 대략 80%, 대략 81%, 대략 82%, 대략 83%, 대략 84%, 대략 85%, 대략 86%, 대략 87%, 대략 88%, 대략 89%, 대략 90%, 대략 91%, 대략 92%, 대략 3%, 대략 94%, 대략 95%, 대략 96%, 대략 97%, 대략 98%, 또는 대략 99%이다.

프레믹스에서 계면활성제 활성을 가진 물질의 비율은 0% 내지 99%, 10% 내지 99%, 25% 내지 99%, 50% 내지 99%, 또는 75% 내지9 9%이다. 일부 구체예에서, 프레믹스에서 계면활성제 활성을 가진 물질의 비율은 0% 내지 75%, 0% 내지 50%, 0% 내지 25%, 또는 0% 내지 10%이다. 일부 구체예에서, 나노입자를 만드는 조성물(가령, 프레믹스)에서 계면활성제 활성을 가진 물질의 비율은 0% 내지 30% 범위이다. 일부 구체예에서, 계면활성제 활성을 가진 물질의 비율은 대략 1%, 대략 2%, 대략 3%, 대략 4%, 대략 5%, 대략 6%, 대략 7%, 대략 9%, 대략 10%, 대략 11%, 대략 12%, 대략 13%, 대략 14%, 대략 15%, 대략 16%, 대략 17%, 대략 18%, 대략 19%, 대략 20%, 대략 21%, 대략 22%, 대략 23%, 대략 24%, 대략 25%, 대략 26%, 대략 27%, 대략 28%, 대략 29% 또는 대략 30%이다. 일부 구체예에서, 계면활성제 활성을 가진 물질의 비율은 대략 9%이다. 일부 구체예에서, 계면활성제 활성을 가진 물질의 비율은 대략 5%이다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물에는 하나 이상의 오일을 포함하지 않는다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 두 개 또는 그 이상의 오일을 포함할 수도 있다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에는 하나 이상의 계면활성제를 포함하지 않는다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 두 개 또는 그 이상의 계면활성제를 포함할 수도 있다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 완전하게 또는 실질적으로 독성 성분들을 포함하지 않는다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 필수적으로 물, 오일, 계면활성제, 그리고 최소 한 가지 생물학적 활성 물질 (가령, 핵산)로 구성된다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 필수적으로 물, 오일, 계면활성제, 최소 한 가지 생물학적 활성 물질, 그리고 나노입자 조성물을 보존 또는 생산하는데 이용되는 최소 한 가지 물질로 구성된다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 물, 오일, 계면활성제, 그리고 핵산으로 구성된다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 물, 오일, 계면활성제, 최소 한 가지 생물학적 활성 물질, 그리고 나노입자 조성물을 보존 또는 생산하는데 이용되는 최소 한 가지 물질로 구성된다.

핵산

본 발명의 나노입자 조성물에는 다양한 임의 핵산이 결합될 수 있다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에 결합될 수 있는 핵산은 폴리뉴클레오티드이다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에 결합되는 핵산은 뉴클레오티드이다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에 결합되는 핵산은 뉴클레오시드이다.

일부 구체예에서, 핵산은 길이가 약 50개 뉴클레오티드 미만이다. 일부 구체예에서, 핵산은 길이가 약 90개, 약 80개, 약 70개, 약 65개, 약 60개, 약 55개, 약 50개, 약 45개, 약 40개, 약 35개, 약 30개, 약 25개, 약 20개, 약 15개, 약 13개, 약 12개, 약 10개, 약 9개, 약 8개, 약 7개, 약 6개, 약 5개, 약 4개, 약 3개, 또는 약 2개 뉴클레오티드 미만이다. 일부 특정 구체예에서, 핵산은 단일 핵산 잔기(가령, 단일 뉴클레오티드 또는 단일 뉴클레오시드)이다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물에 결합되는 핵산은 자연-발생 핵산 잔기들 (가령, 뉴클레오티드 또는 뉴클레오시드)이다. 일부 구체예에서, 핵산은 하나 또는 그 이상의 비-자연적으로 발생되는 핵산 잔기들을 포함한다.

일반적으로, 뉴클레오시드는 글리코시드 결합에 의해 공유적으로 연결된 오탄당(가령, 리보스 또는 데옥시리보스) 그리고 헤테로사이클 질소 염기(가령, 퓨린: 시토신, 티미딘, 그리고 우라실; 피리미딘:구아닌, 아데닌; 표 1 참고)를 포함한다. 일반적으로, 뉴클레오티드는 하나의 뉴클레오시드와 1 내지 3개의 5’ 인산염기를 포함한다.

일부 구체예에서, 핵산은 DNA, RNA 또는 이의 복합이 될 수 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 올리고뉴클레오티드 및/또는 폴리뉴클레오티드가 될 수도 있다. 여기에서 사용된 바와 같이, “올리고뉴클레오티드” 및 “폴리뉴클레오티드”는 호환적으로 이용된다. 일부 구체예에서, 핵산은 올리고뉴클레오티드 및/또는 변형된 올리고뉴클레오티드 (포스포릴화반응을 통하여 변형되는 것이 포함되나 이에 국한시키지는 않는다); 안티센스 올리고뉴클레오티드 및/또는 변형된 안티센스 올리고뉴클레오티드 (포스포릴화반응을 통하여 변형되는 것이 포함되나 이에 국한시키지는 않는다)이 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 cDNA 및/또는 게놈 DNA을 포함할 수도 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 사람이 아닌 동물 DNA 및/또는 RNA (가령, 바이러스, 세균 또는 곰팡이 핵산 서열)을 포함할 수도 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 플라스미드, 코스미드, 유전자 단편, 인공적인 및/또는 자연 염색체 (가령, 효모 인공 염색체), 및/또는 이의 단편이 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 기능을 가진 RNA (가령, mRNA, tRNA, rRNA 및/또는 리보자임)일 수도 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 올리고뉴클레오티드 및/또는 변형된 올리고뉴클레오티드; RNAi-유도 작용제; 작은 간섭 RNA (siRNA), 짧은 헤어핀 RNA (shRNA), 및/또는 microRNA (miRNA)일 수도 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 펩티드 핵산(PNA)일 수 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 합성된 핵산 유사체를 포함하는 폴리뉴클레오티드, 이는 변형되거나 변형안된 것일 수 있다. 일부 구체예에서, 핵산은 단일 가닥 DNA, 이중 가닥 DNA, 슈퍼코일 DNA 및/또는 트리플-나선 DNA을 포함하는 다양한 형태의 DNA; Z-DNA; 및/또는 이의 복합물을 포함할 수도 있다.

본 발명에 이용되는 핵산은 임의의 이용가능한 기술로 준비할 수 있는데, 예를 들면, 화학적 합성, 효소적 합성, 긴 선구물질의 효소적 또는 화학적 절단 등을 포함되나 이에 국한시키지는 않는 방법이 포함된다.

핵산 폴리머 (가령, 폴리뉴클레오티드)를 합성하는 방법들은 당분야에 공지되어 있다(Gait, M. J.(ed.) Oligonucleotide systhesis:a practical approach, Oxford [Oxfordshire], Washington, DC: IRL Press, 1984; Herdewijn, P. (ed.) Oligonucleotide systhesis: methods and applications, Methods in molecular biology, v. 288(Clifton,N.J.) Totowa, N.J.: Humana Press,2005).

본 발명에 이용되는 핵산은 자연-발생 핵산 잔기들을 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 자연-발생 핵산 잔기들에는 뉴클레오시드, 변형된 뉴클레오시드, 하나 또는 그 이상의 뉴클레오시드 사이에 삽입된 탄화수소 링커(가령, 알킬렌) 또는 폴리에테르 링커(가령, PEG 링커)를 가진 자연-발생 뉴클레오시드, 하나 또는 그 이상의 뉴클레오시드 사이에 삽입된 탄화수소 링커 또는 PEG 링커를 가진 변형된 뉴클레오시드 또는 이의 복합물이 포함된다. 일부 구체예에서, 핵산 잔기들 또는 변형된 핵산 잔기들은 핵산 잔기들의 결합 친화력, 선택성 및/또는 다른 기능적 특징이 치환에 의해 감소되지 않는 한, 탄화수소 링커 또는 폴리에테르 링커로 대체될 수 있다.

당업자는 본 발명의 핵산은 자연 생성 핵산에서 볼 수 있는 타입의 핵산 잔기를 포함하거나 또는 자연 생성 핵산과는 상이한 구조를 가진 하나 또는 그 이상의 핵산 잔기 유사체를 포함할 수도 있다. U.S. Patents 6,403,779; 6,399,754; 6,225,460; 6,127,533; 6,031,086; 6,005,087; 5,977,089; 여기에서 언급된 참고문헌에는 이용될 수 있는 다양한 특정 핵산 잔기 유사체 및 변형을 설명한다. Crooke, S. (ed.) Antisense Drug Technology: Principles, Strategies, and Applications (1^st ed), Marcel Dekker; ISBN: 0824705661; 1st edition (2001) and references therein. 예를 들면, 2’-변형에는 할로, 알콕시 그리고 아릴옥시기에서 선택된 기로 대체된다. 일부 구체예에서, 2’-OH기는 H, OR, R, halo, SH, SR₁, NH₂, NHR, NR₂ 또는 CN, 이때 R은 C₁-C₆알킬, 알케닐, 또는 알키닐이며, halo는 F, Cl, Br, 또는 I이다. 변형된 링키지의 예로는 포스포로티오에이트 및 5’-N-포스포아미디트 링키지가 포함된다.

본 발명에 따르면, 상이한 다양한 핵산 잔기(가령, 뉴클레오티드, 뉴클레오시드)를 포함하는 핵산 유사체, 변형된 기본골격 또는 비-자연 생성 인터뉴클레오시드 링키지가 이용될 수 있다. 본 발명의 핵산에는 자연 뉴클레오시드 (가령,아데노신, 티미딘, 구아노신, 시티딘, 우리딘, 데옥시아데노신, 데옥시티미딘, 데옥시구아노신, 그리고 데옥시시티딘) 또는 변형된 뉴클레오시드가 포함된다. 변형된 뉴클레오티드에는 염기 변형된 뉴클레오시드 (가령, 아라시티딘, 이노신, 이소구아노신, 네불라린, 슈도우리딘, 2,6-디아미노퓨린, 2-아미노퓨린, 2-티오티미딘, 3-데아자-5-아자시티딘, 2’-데옥시우리딘, 3-니트로피롤, 4-메틸인돌, 4-티오우리딘, 4-티오티미딘, 2-아미노아데노신, 2-티오티미딘, 2-티오우리딘, 5-브로모시티딘, 5-요오드우리딘, 이노신, 6-아자우리딘, 6-클로로퓨린, 7-데아자아데노신, 7-데아자구아노신, 8-아자아데노신, 8-아지도아데노신, 벤조이미다졸, M1-메틸아데노신, 피롤-피리미딘, 2-아미노-6-클로로퓨린, 3-메틸아데노신, 5-프로피닐시티딘, 5-프로피닐우리딘, 5-브로모우리딘, 5-플루오로우리딘, 5-메틸시티딘, 7-데아자아데노신, 7-데아자구아노신, 8-옥소아데노신,8-옥소구아노신, O(6)-메틸구아닌, 그리고 2-티오시티딘), 화학적으로 또는 생물학적으로 변형된 염기(가령,메틸화된 염기), 변형된 당(가령, 2’-플루오로리보스, 2’-아미노리보스, 2’-아지도리보스, 2’-O-메틸리보스, L-엔안디오머 뉴클레오시드 아라비노즈, 그리고 헥소스), 변형된 인산염 기(가령, 포스포오르소티오에이트 및 5’-N-포스포아미드트 링키지) 및 이의 복합이 포함될 수도 있다. 핵산의 화학적 합성을 위한 천연 및 변형된 핵산을 바로 이용가능하다. 일부 경우에, 이와 같은 변형을 가진 핵산 잔기는 자연 생성 잔기들만으로 구성된 핵산에 비해 개선된 성질을 보여준다. 일부 구체예에서, 여기에서 설명된 핵산 변형은 뉴클레아제(가령, 엑소뉴클레아제, 엔도뉴클레아제)에 의한 절단을 예방 또는 감소시키는데 이용된다. 예를 들면, 폴리뉴클레오티드의 구조는 절단을 감소시키기 위해 한 가닥의 3’ 단부 또는 양단의 3‘ 단부에 뉴클레오티드 유사체를 포함하여 안정화시킬 수도 있다.

변형된 핵산 (가령, 변형된 폴리뉴클레오티드)은 폴리뉴클레오티드의 전장을 따라 균질하게 변형될 필요는 없다. 폴리뉴클레오티드의 다양한 위치에 상이한 핵산 잔기 변형 및/또는 기본 골격 구조의 변형이 존재할 수도 있다. 당업자는 잔기 유사체 또는 다른 변형이 폴리뉴클레오티드의 임의 위치에 존재하고, 폴리뉴클레오티드의 기능에는 실질적인 영향을 받지 않는다는 것을 인지할 것이다. 변형된 부분은 한 가닥 또는 양쪽 가닥의 5’-말단 및/또는 3’-말단이 될 수도 있다. 예를 들면, 한 가닥 또는 양쪽 가닥의 5’- 및/또는 3’에 대략 1 내지 대략 5개 잔기들이 잔기 유사체이거나 및/또는 기본 골격 변형을 가지는 변형된 폴리뉴클레오티드를 이용하였다. 변형은 5’ 또는 3’말단 변형일 수도 있다. 한 가닥 또는 양 가닥은 최소 50% 변형안된 잔기들, 최소 80% 변형안된 잔기들, 최소 90% 변형안된 잔기들, 또는 100% 변형안된 잔기들을 포함할 수 있다.

본 발명의 핵산은 예를 들면, U.S. 특허 공개 2003/0175950, 2004/0192626, 2004/0092470, 2005/0020525, 및2005/0032733에서 설명하고 있는 당, 잔기 또는 인터뉴클레오시드 링키지에 변형된 것을 포함할 수도 있다. 본 발명에는 여기에서 설명하는 하나 또는 그 이상의 변형을 가지는 임의 핵산의 이용도 포함된다. 예를 들면, 세포 취입을 개선시키는 것으로 콜레스테롤, 리토콜린산, 아루린산 또는 긴 알킬 분지쇄와 같은 지질과 같은 다수의 말단 콘쥬게이트가 보고되어 있다. 유사체 및 변형은 당분야에 공지된 임의 적절한 방법을 이용하여 테스트할 수 있다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따른 핵산은 하나 또는 그 이상의 비-자연적 뉴클레오시드 링키지를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 핵산의 3’-말단, 5’-말단, 또는 3’- 및 5’에서 하나 또는 그 이상의 내부 뉴클레오티드를 역전시켜, 3’ - 3’ 링키지 또는 5’ - 5’ 링키지를 만든다.

일부 구체예에서, 본 발명의 핵산은 합성된 것이 아니라, 자연 환경으로부터 분리된 자연-발생 엔터티이다.

특정 구체예에서, 본 발명의 핵산은 자연-발생 핵산 잔기들 (가령, 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드)만을 포함한다. 특정 구체예에서, 본 발명의 핵산은 변형안된 잔기들만을 포함한다. 본 발명의 나노입자 조성물은 변형된 그리고 변형안된 핵산 모두를 운반(가령, 경피 운반)할 수 있다.

본 발명에 따라 이용할 수 있는 핵산은 피부(가령, 표피 및 진피), 피하 조직(가령, 지방 조직), 근접 근육 및 또는 멀리 있는 조직(가령, 폐, 간 등의 기관)에 생물학적 활성을 가지는 것이다.

일부 구체예에서, 핵산은 기능을 하는 RNA(가령, 안티센스 올리고뉴클레오티드, 리보자임, 트리플 나선 구조를 형성하는데 참여하는 RNA)이거나 이를 포함한다. 특정 구체예에서, 핵산은 전사 시작 부위, 해독 시작 부위 및/또는 스플라이스 졍션에 결합하는 안티센스 분자이거나 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 RNA의 해독 또는 해독 후 프로세싱을 방해한다. 대안으로 또는 추가로, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 조절 요소와 같은 표적 유전자의 DNA에 결합하여 표적 유전자의 전사를 변경시킬 수 있다.

일반적으로, 안티센스 RNA는 표적 전사체에 안티센스 RNA가 하이브리드되는 것을 허용하도록 표적 전사체에 충분한 상보성을 가진다. 표적에 하이브리드가 일어날 수 있는 한, 미스매취는 용인된다. 일반적으로, 안티센스 RNAs는 하이브리드가 일어날 수 있는 한, 임의 길이가 될 수 있다. 일부 구체예에서, 안티센스 RNA는 약 20 nt, 약 30 nt, 약 40 nt, 약 50 nt, 약 75 nt, 약 100 nt, 약 150 nt, 약 200 nt, 약 250 nt, 약 500 nt, 또는 이보다 더 길 수도 있다. 일부 구체예에서, 안티센스 RNA는 약 20 nt, 약 30 nt, 약 40 nt, 약 50 nt, 약 75 nt, 약 100 nt, 약 150 nt, 약 200 nt, 약 250 nt, 약 500 nt, 또는 이보다 더 긴 표적 전사체와 하이브리드되는 저해성 부분을 포함한다.

일부 구체예에서, 핵산은 RNA 간섭(RNAi)를 중재하는 작용제이거나 이를 포함할 수 있다. RNAi는 특정 유전자의 발현을 저해시키는 기전이다. RNAi는 일반적으로 해독 수준에서 유전자 발현을 저해하나, 전사 수준에서 유전자 발현을 저해하여 기능을 발휘할 수도 있다. RNAi 표적에는 세포에 존재하는 임의 RNA가 될 수 있는데, 예를 들면, 세포 전사체, 병인균 전사체(가령, 바이러스, 세균, 곰팡이 등으로부터), 트랜스포존, 벡터 등이 포함되나 이에 국한시키지는 않는다.

본 발명의 RNAi 작용제는 전사체의 임의 부분을 표적할 수도 있다. 일부 구체예에서, 표적 전사체는 유전자의 코딩 서열내에 위치한다. 일부 구체예에서, 표적 전사체는 넌-코딩 부분에 위치한다. 일부 구체예에서, 표적 전사체는 엑손 내에 위치한다. 일부 구체예에서, 표적 전사체는 인트론 내에 위치한다. 일부 구체예에서, 표적 전사체는 유전자의 5’ 비-해독 부분(UTR) 또는 3’ UTR에 위치한다. 일부 구체예에서, 표적 전사체는 프로모터 내에 위치한다.

임의 특정 유전자 표적을 위해, RNAi 작용제 및/또는 RNAi-유도 작용제는 특정 지침을 일반적으로 준수한다. 일반적으로, 다른 전사체와 공유될 수 있는, 분해가 바람직하지 않은 표적 전사체의 부분을 피하는 것이 바람직하다. 일부 구체예에서, RNAi 작용제 및/또는 RNAi-유도 엔터티 표적 전사체 및/또는 이의 일부는 매우 보존된다. 일부 구체예에서, RNAi 작용제 및/또는 RNAi-유도 엔터티 표적 전사체 및/또는 이의 일부분은 고도로 보존되어 있지 않는다.

여기에서 사용된 바와 같이, “작은 간섭 RNA” 또는 “siRNA”는 길이가 약 19bp이고 선택적으로 하나 또는 두 개의 단일 가닥 오버행을 추가로 포함하는 RNA 듀플렉스(이하 “듀플렉스 부분”)를 포함하는 RNAi 작용제를 말한다. 일부 구체예에서, siRNA 는 길이가 약 15bp 내지 29bp이고, 선택적으로 두 개의 단일 가닥 오버행을 추가로 포함하는 듀플렉스 부분을 포함한다. siRNA는 일반적으로 함께 하이브리드되는 두 개 RNA 분자(가령, 두 개 가닥)로 형성된다. siRNA의 한 가닥에는 표적 전사체와 하이브리드되는 부분이 포함된다. 일부 구체예에서, siRNAs는 표적 전사체를 분해시켜 유전자 발현 저해를 조정한다.

여기에서 사용된 바와 같이, “짧은 헤어핀 RNA” 또는 “shRNA”는 RNAi를 조정하는데 충분한 길이의 이중 가닥(듀플렉스) 구조(일반적으로 최소 약 19bp)를 형성하기 위해 하이브리드된 또는 하이브리드될 수 있는 최소 두 개 상보 부분을 가지는 RNA와 일반적으로 루프를 형성하는 약 1 nt 내지 10nt 범위의 최소 한 개 단일 가닥 부분을 선택적으로 포함하는 RNAi 작용제를 말한다. 일부 구체예에서, shRNA는 길이가 15 bp 내지 29 bp의 듀플렉스와 일반적으로 루프를 형성하는 약 1 nt 내지 10nt 범위의 최소 하나의 단일 가닥 부분을 포함한다. 일부 구체예에서, 단일-가닥 부분은 길이가 대략 1 nt, 대략 2 nt, 대략 3 nt, 대략 4 nt, 대략 5 nt, 대략 6 nt, 대략 7 nt, 대략 8 nt, 대략 9 nt, 또는 대략 10 nt이다. 일부 구체예에서, shRNA는 세포 RNAi 기전(가령, Dicer)에 의해 siRNA로 프로세스된다. 따라서, 일부 구체예에서, shRNA는 siRNA의 전구물질일 수도 있다. 그럼에도 불구하고, 일반적으로 siRNA는 siRNA와 유사하게 표적 RNA의 발현을 저해시킬 수 있다. 여기에서 사용된 바와 같이, “짧은 RNAi 작용제”는 집합적으로 siRNA 및 shRNA를 말한다.

짧은 RNAi 작용제는 일반적으로, 길이가 대략 15 nt 내지 대략 29 nt, 예를 들면, 대략 19 nt 길이인 염기쌍을 형성한 부위 (“듀플렉스 부위”)와 하나 또는 그 이상의 자유 또는 루프화된 말단을 선택적으로 가진다. RNAi-유도 작용제 및/또는 짧은 RNAi 작용제는 일반적으로, 부위(“듀플렉스 부위”)를 포함하는데, 이의 한 가닥에는 표적 전사체(“표적 부분”)에 충분히 상보적인 길이가 약 15nt 내지 19nt인 저해 부위를 포함하여, 이 가닥과 표적 전사체 사이에 in vivo 하이브리드(“코어 부위”)가 형성된다. 코어 부위는 오버행이 포함되지 않은 것으로 이해된다.

일부 구체예에서, siRNA는 듀플렉스 부위의 한 말단 또는 양 말단에 3’ 오버행을 포함한다. 일부 구체예에서, shRNA는 이의 자유 말단에 3’ 오버행을 포함한다. 일부 구체예에서, siRNA는 단일 뉴클레오티드 3’ 오버행을 포함한다. 일부 구체예에서, siRNA는 2nt의 3’ 오버행을 포함한다. 일부 구체예에서, siRNA는 1nt의 3’ 오버행을 포함한다. 오버행은 존재하는 경우, 반드시 표적 전사체에 상보적일 필요는 없다. 3’ 말단에 2nt 내지 3nt 오버행을 가진 siRNA는 블런트 말단을 가진 siRNA보다는 표적 전사체 수준을 감소시키는데 종종 효과적이다.

일부 구체예에서, 짧은 RNAi 작용제의 저해부위는 표적 전사체의 부위에 100% 상보적이다. 그러나, 일부 구체예에서, 짧은 RNAi 작용제의 저해부위는 표적 전사체의 부위에 100%미만의 상보성을 가진다. 저해 부위는 하이브리드반응이 세포에 생리학적 조건 및 또는 RNAi를 지원하는 in vitro 시스템(가령, 초파리((Drosophila) 추출 시스템)하에 일어날 수 있도록 표적 전사체에 충분히 상보적이면 된다.

당업자는 짧은 RNAi 작용제 듀플렉스는 미스매취 및/또는 벌지(bulges)를 용인하는데, 특히 여전히 효과적인 사일런스를 리더하면서 듀플렉스의 중앙 부위내에 미스매취를 용인할 수 있다. 당업자는 또한, 짧은 RNAi 작용제/표적 전사체 코어 부위(Elbashiretal., EMBO J. 20: 6877, 2001)의 중앙 부분에 미스매취를 피하는 것이 바람직할 수도 있다는 것을 인지할 것이다. 예를 들면, siRNA의 안티센스 가닥의 3’뉴클레오티드는 표적 인지의 특이성에 유의적으로 기여하지 않고, 표적 절단에 다소 덜 결정적이다.

micro RNA(miRNA)는 일반적으로 발생 동안 특히 유전자의 발현을 조절하는 것을 돕는 약 21-23 nt 뉴클레오티드의 넌 코딩 RNA로 인코드된다(참고: Bartel, 2004, Cell, 116:281; Novina and Sharp, 2004, Nature, 430:161; U.S. Patent Publication 2005/0059005; Wang and Li, 2007, Front. Biosci., 12:3975; Zhao, 2007, Trends Biochem. Sci., 32:189; 각 문헌을 참고문헌으로 첨부함). 광범위하게 정의하면, RNA 간섭 현상에는 miRNA의 내생적으로 유도된 유전자 사일런스 효과뿐만 아니라 외부 dsRNA에 의해 촉발되는 사일런스도 포함된다. 성숙 miRNA는 외생 dsRNA로부터 생성되는 siRNA와 구조적으로 유사하나 성숙되기 전에, miRNA는 우선 방대한 전사후 변형을 겪는다. miRNA는 일반적으로, pri-miRNA로서 공지된 1차 전사체로 훨씬 긴 RNA-코딩 유전자로부터 발현되고, 세포 핵에서 마이크로프로세서 복합체에 의해 pre-miRNA라고 불리는 70개 뉴클레오티드 스템-루프 구조로 프로세스된다. 이 복합체는 Drosha라고 불리는 RNase III 효소와 dsRNA-결합 단백질 Pasha로 구성된다. 이 pre-miRNA의 dsRNA 부분은 dicer에 결합되어 전달되어 성숙 miRNA 분자가 생성되고, 이는 RISC 복합체에 결합될 것이다; 따라서, miRNA 및 siRNA는 이들 초기 프로세싱의 하류 동일한 세포 기전을 공유한다(Gregory et al., 2006, Meth. Mol. Biol., 342:33; 참고문헌으로 첨부함). 일반적으로, miRNA는 이들 표적 전사체에 완벽하게 상보적이지는 않는다.

일부 구체예에서, miRNA는 길이가 18 nt - 26 nt 범위가 될 수 있다. 일반적으로, miRNA는 단일-가닥이다. 그러나, 일부 구체예에서, miRNA는 최소 부분적으로 이중가닥일 수도 있다. 특정 구체예에서, miRNA는 RNA 듀플렉스(“듀플렉스 부위”라고 칭함)를 포함하고, 선택적으로 하나 또는 두 개의 단일-가닥 오버행을 추가 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, RNAi 작용제는 15bp 내지 29bp 길이의 듀플렉스 부위를 포함하고, 하나 또는 두 개의 단일-가닥 오버행을 추가 포함할 수 있다. miRNA는 함께 하이브리드되는 두 개 RNA 분자로부터 형성되거나 또는 자가-하이브리드 부분을 포함하는 단일 RNA 분자로부터 생성될 수도 있다. miRNA의 듀플렉스 부분은 통상적으로, 그러나 반드시 필수적인 것은 아니지만, 하나 또는 그 이상의 쌍을 이루지 않은 뉴클레오티드로 구성된 하나 또는 그 이상의 벌지(bulges)를 포함한다. miRNA의 한 가닥에는 표적 RNA와 하이브리드되는 부분이 포함된다. 특정 구체예에서, miRNA의 한 가닥은 표적 RNA의 부위와 정확하게 상보적이지는 않는데, 그 의미는 miRNA는 하나 또는 그 이상의 미스매취를 가지면서 표적 RNA에 하이브리드된다는 것이다. 일부 구체예에서, miRNA의 한 가닥은 표적 RNA의 부위와 정확하게 상보적인데, 그 의미는 miRNA는 미스매취 없이 표적 RNA에 하이브리드된다는 것이다. 일반적으로, miRNA는 표적 전사체의 해독을 방해함으로써 유전자 발현의 저해를 조절하는 것으로 본다. 그러나, 일부 구체예에서, miRNA는 표적 전사체의 분해를 일으켜, 유전자 발현의 저해를 조절하는 것으로 보인다.

특정 구체예에서, 표적 mRNA를 촉매적으로 절단하도록 고안된 리보자임이거나 이를 포함하는 핵산을 이용하여 표적 mRNA의 해독 또는 표적의 발현을 저해시킬 수 있다(PCT publication WO90/11364; Sarver et al.,1990, Science 247:1222).

특정 구체예에서, 핵산은 트리플 헬릭스 구조를 형성하는데 참여하는 핵산이거나 이를 포함한다. 내생 표적 유전자 발현은 신체내 표적 근육 세포에 표적 유전자의 전사를 방해하는 트리플 헬릭스 구조를 만들기 위해, 표적 유전자의 조절 부분(가령, 표적 유전자의 프로모터 및/또는 인헨서)에 상보적인 데옥시리보뉴클레오티드 서열을 표적화시켜 감소시킬 수도 있다(Helene, 1991, Anticancer Drug Des. 6:569; Helene et al., 1992, Ann, N.Y. Acad. Sci. 660:27; Maher, 1992, Bioassays 14:807).

일부 경우에, 치료요법적 효과를 발휘하거나 또는 생물학적 활성에 영향을 끼지는 특정 핵산에 의한 기전은 공지되어 있다. 본 발명은 이와 같은 핵산의 사용도 고려한다. 일부 구체예에서, 본 발명의 방법은 아직 확인되거나 특징화되지 않은 생물학적으로 활성 핵산(가령, 폴리뉴클레오티드 및/또는 핵산 잔기)의 운반(가령, 경피 운반)에 이용될 수도 있다.

일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 상처 치류를 개선한다. 이와 같은 핵산에는 켈틴 생성 세포 생장 인자-1(KGF-1)(Lin et al., 2006, Wound Repair Regen., 14:618)을 인코드하는 DNA가 포함된다. 일부 구체예에서, KGF-1을 코딩하는 핵산은 GenBank 서열 NC_000015에서 제시하는 서열의 전부 또는 일부분으로 특징화된다.

일부 구체예에서, 본 발명에 이용되는 핵산은 피부 상처 치료를 촉진시킬 수 있다. 이와 같은 핵산에는 Connexin43(Cx43) 안티센스 올리고뉴클레오티드, RNAi 작용제, siRNA, shRNA, 및/또는 miRNA(Morietal., 2006, J. Cell Sci., 119:5193)가 포함된다. 일부 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드, RNAi 작용제, siRNA, shRNA, 및/또는 miRNA는 GenBank 서열 AK312324에서 제시하는 서열을 가지는 핵산의 하나 또는 그 이상의 부위 및/또는 특징적 부분을 표적할 수도 있다.

일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 비정상적인 피부 세포 증식을 억제하고, 피부 상처 치유를 강화시킬 수도 있다. 이와 같은 뉴클레오티드에는 뉴클레오티드, 모노포스페이트 뉴클레오시드, 디포스페이트 뉴클레오시드, 그리고 트리포스페이트 뉴클레오시드가 포함된다. 일부 구체예에서, 이와 같은 핵산에는 아데닌 뉴클레오티드 및 아데노신과 아데노신 트리포스페이트 뉴클레오시드가 포함된다(Brown et al., 2000, J. Invest. Dermatol., 115:849; Wang et al., 1990, Biochem. Biophys. Res. Commun., 166:251).

일부 구체예에서, 본 발명에 따른 핵산은 피부에서 콜라겐 합성을 저해하는 인터페론 생산을 자극하고, 경피증, 결합조직병을 치료하는 잠재력을 가진다. 이와 같은 핵산에는 인터페론 감마(IFNγ)를 인코드하는 것이 포함된다(Badea et al., 2005, J. Gene Med. ,7:1200; Gray and Goeddel, 1983, Proc. Natl. A cad. Sci., USA, 80:5842). 일부 구체예에서, IFNγ를 인코드하는 핵산은 GenBank 서열 NM_001127598, NM_000612, NM_001007139, 또는 NC_000076으로 제시하는 서열의 전부 또는 일부에 의해 특징화된다.

일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 피부 질환 선천성 손발톱 비대증을 치료한다. 이와 같은 핵산에는 피부에 케라틴을 표적 유전자가 인코드하는 siRNA가 포함된다(Hickerson et al., 2006, Ann. N.Y. Acad. Sci., 1082:56). 특정 구체예에서, 이와 같은 siRNA는 다음의 안티센서 서열중 임의 하나 또는 그 이상을 포함한다(Hickerson et al., 2006, Ann. N.Y. Acad. Sci., 1082:56):

AAACUUGUUUUUGAGGGUCU (SEQ ID NO.: 1);

UUUUUGAGGGUCUUGAUCU (SEQ ID NO.: 2);

UUUUGAGGGUCUUGAUCUGU (SEQ ID NO.: 3);

UUUGAGGGUCUUGAUCUGUU (SEQ ID NO.: 4);

AAGGAGGCAAACUUGUUUUU (SEQ ID NO.: 5);

AACUUGUUGAGGGUCUUGAU (SEQ ID NO.: 6);

AAACUUGUUGAGGGUCUUGU (SEQ ID NO.: 7); 그리고

CAAACUUGUUGAGGGUCUUU (SEQ ID NO.: 8).

일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 피부 염증의 원인이 되는 분자 경로들을 억제한다. 이와 같은 핵산에는 두 개 시티딘-포스페이트-구아노신 (CpG) 모티프(CpG-1-포스포로티오에이트(PTO)) 및 폴리-시티딘 모티프(Non-CpG-5-PTO)를 포함하는 시티딘-포스페이트-구아노신 올리고데옥시뉴클레오티드가 포함된다(Pivarcsi, 2007, J. Invest. Dermatol., 127:846; Dorn et al., 2007, J. Invest. Dermatol., 127:746). 일부 구체예에서, 이와 같은 핵산은 포스포티오에이트 링키지를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 이와 같은 핵산은 포스포디에스테르 링키지를 포함할 수 있다. 특정 구체예에서, 이와 같은 핵산은 다음의 뉴클레오티드 서열중 하나 또는 그 이상을 포함할 수 있다(Pivarcsi, 2007, J. Invest. Dermatol., 127:846; Dorn et al., 2007, J. Invest. Dermatol.,1 27:746).:

TCCATGACGTTCCTGACGTT (SEQ ID NO.: 9);

TCCATGACGTTCCTGACGTT (SEQ ID NO.: 10);

TCCATGACGTTCCTGACGT (SEQ ID NO.: 11);

TCCATGACGTTCCTGACG (SEQ ID NO.: 12);

TCCTCGACGTCCCTGA(SEQ ID NO.: 13);

CATGACGTTCCT (SEQ ID NO.: 14);

GACGTT (SEQ ID NO.: 15); 그리고

AACGTCAGGAACGTCATGGA (SEQ ID NO.: 16)

일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 피부에서 VEGF 생산을 감소시키는데, 이는 건선과 같은 상태에 항-신생혈관생성 치료요법적 효과를 가질 수 있다. 이와 같은 핵산에는 19-mer 안티센스 포스포로티오에이트 올리고데옥시뉴클레오티드(VEGF/VPF mRNA의 해독 개시 부위에 대해 6-24개 염기에 상보적)(Smyth etal.,1997, J. Invest. Dermatol., 108:523)가 포함된다. 특정 구체예에서, 이와 같은 핵산에는 다음의 안티센스 뉴클레오티드 서열중 하나 또는 그이상이 포함된다(Smyth etal.,1997, J. Invest. Dermatol., 108:523):

CACCCAAGACAGCAGAAAG (SEQ ID NO.: 17);

CTCCCAAGACAGCAGAAAG (SEQ ID NO.: 18);

CTGCCAAGACAGCAGAAAG (SEQ ID NO.: 19);

CACCCAACTCTCCAGAAAG (SEQ ID NO.: 20);

CACCCAAGACAGCAGAATG (SEQ ID NO.: 21); 그리고

CACCCAAGACAGCAGATTG (SEQ ID NO.: 22)

일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 UV 방사(태양에 노출에 의한 UV 방사 및/또는 햇볕에 타서)에 의해 손상된 피부의 DNA 재생 속도를 개선시킬 수도 있다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 피부 암 발생을 저해 또는 개시를 지연시킬 수도 있다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 멜라닌 세포 생산을 자극하여 피부 태닝을 결과시킬 수도 있다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산으로 피부 태닝 외양을 얻을 수 있다. 이와 같은 핵산에는 디피리미딘 서열(가령, TT, TC, CT, CC)이 포함된다. 일부 구체예에서, 이와 같은 핵산에는 티미딘 디뉴클레오티드(pTT), 텔로미어 3’ 오버행 서열에 실질적으로 상동성인 DNA 올리고뉴클레오티드, 그리고 5’-포스포릴화된 9 염기 올리고뉴클레오티드 (p9mer)가 포함된다. 일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 다양한 종류의 암(가령, 유방암, 췌장 암, 난소암, 흑색종, 신경교종 등)을 치료할 수 있다. 이와 같은 핵산에는 텔로미어 3’ 오버행 서열에 실질적으로 상동성인 올리고뉴클레오티드가 포함된다. 특정 구체예에서, 텔로미어 3’ 오버행 서열은 다음의 서열중 하나 또는 그 이상을 포함한다:

TTAGGG (SEQ ID NO.: 23);

GTTAGGGTTAG (SEQ ID NO.: 24);

GGTTAGGTGTAGGTTT (SEQ ID NO.: 25);

GTTAGGGTT (SEQ ID NO.: 26);

TTAGGGTTA (SEQ ID NO.: 27);

GTTAGGTTTAAGGTT (SEQ ID NO.: 28);

GGTAGGTGTAGGGTG (SEQ ID NO.: 29);

GGTCGGTGTCGGGTG (SEQ ID NO.: 30);

GGCAGGCGCAGGGCG (SEQ ID NO.: 31);

GTTAGGGTTAGGGTT (SEQ ID NO.: 32);

GATAAGGGATTGGGAT (SEQ ID NO.: 33);

GAGTATGAG (SEQ ID NO.: 34);

GGGTTAGGG (SEQ ID NO.: 35);

GTTAGGGTTAG (SEQ ID NO.: 36);

GGTAGGTGTAGGATT (SEQ ID NO.: 37);

GGTAGGTGTAGGATTT (SEQ ID NO.: 38);

GGTTAGGTGTAGGTTT (SEQ ID NO.: 39);

GGTTAGGTGGAGGTTT (SEQ ID NO.: 40);

GGTTAGGTTTAGGTTT (SEQ ID NO.: 41);

GGTTAGGTTAAGGTTA (SEQ ID NO.: 42);

GGTAGGTGTAGGGTG (SEQ ID NO.: 43);

GTTAGGGTTAGGGTTA (SEQ ID NO.: 44);

GGTTGGTTGGTTGGTT (SEQ ID NO.: 45);

CCTTGGTTGGTTGGTTGGTT (SEQ ID NO.: 46); 그리고

GGTTGGTTGGTTGGTTGGTT (SEQ ID NO.: 47).

특정 구체예에서, p9mer는 다음의 뉴클레오티드 서열을 포함한다: pGAGTATGAG (SEQ ID NO.: 34) (Goukassian et al., 2004, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 101:3933; Arad et al., 2006, FASEB J., 20:1895; Yaar et al., 2007, Breast Cancer Res., 9:R13; Goukassian et al., 2002, FASEB J., 16:754 ; Ohashi et al., 2007, J. Cell. Physiol., 210:582).

일부 구체예에서, 본 발명에 따라 이용되는 핵산은 흑색종 피부 암(가령, 전이성 흑색종 피부 암)을 치료할 수도 있다. 이와 같은 핵산에는 톨-형 수용체 9-활성화 올리고뉴클레오티드 (Pashenkov etal.,2006,, 24:5716)가 포함된다. 특정 구체예에서, 이와 같은 핵산은 다음의 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다: TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT (SEQ ID NO.: 48) (Pashenkov et al.,2006,, 24:5716).

일부 구체예에서, 여기에서 설명하는 임의 핵산에 상동하는 핵산 서열도 본 발명에 이용될 수 있다. 일부 구체예에서, 핵산 서열은 30개, 25개, 20개, 15개, 10개, 5개, 4개, 3개, 2개, 또는 1개 핵산 치환체보다 적은 것으로 구성된다면, 이들 서열은 서로 “상동”한 것으로 간주한다. 일부 구체예에서, 핵산 서열은 이들 서열이 최소 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 99% 동일하다면, 서로에 대해 “상동”한 것으로 간주한다. 일부 구체예에서, 핵산 서열은 이들 서열이 최소 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 99% 유사하다면, 서로에 대해 “상동”한 것으로 간주한다.

기타 성분들

여기에서 명시된 바와 같이, 본 발명의 나노입자 조성물은 하나 또는 그 이상의 다른 성분들을 포함하거나 이와 복합될 수도 있다. 이와 같은 기타 성분들의 특정 예시를 여기에서 논한다.

생물학적 활성 물질

본 발명의 나노입자 조성물은 치료법과 복합되어 이용될 수 있다는 것을 인지할 것이다. 복합 섭생에 이용하기 위한 특정 치료법의 복합(치료제 또는 과정)은 얻고자 하는 원하는 치료요법적 및/또는 과정 및 치료효과의 양립성을 고려해야 할 것이다. 이용되는 치료법은 동일한 목적에 대해 원하는 효과를 얻거나(가령, 종양을 치료하는데 유용한 나노입자 조성물을 종양을 치료하는데 이용되는 또 다른 작용제와 동시에 투여될 수도 있고) 또는 상이한 효과를 얻을 수도 있다(가령, 임의 부작용 효과의 제어).

복합하여(“in combination with”)는 이들 운반 방법이 비록 본 발명의 범위 내에 있다 할지라도 작용제를 동시에 또는 함께 운반될 수 있도록 조제하여야 한다는 의미는 아니다. 조성물은 원하는 치료요법적 또는 의료 과정과 동시에, 이 전에 또는 후속적으로 투여될 수 있다. 일반적으로, 각 작용제는 작용제에 맞는 약량 및/또는 시간 일정에 따라 투여될 것이다. 추가적으로, 본 발명에는 이들의 생체 이용성을 개선시키는, 이들 대사를 감소 및/또는 수정하는, 이의 방출을 저해하는, 및/또는 체내 분포를 변형시키는 작용제와 복합하여 약리 조성물의 운반이 포함된다.

복합 섭생에 이용하기 위한 치료법(치료제 및/또는 과정)의 특정 복합은 얻고자 하는 원하는 치료요법적 및/또는 과정 및 치료효과의 양립성을 고려해야 할 것이다. 이용되는 치료법은 동일한 질환에 원하는 효과를 얻을 수 있거나(가령, 나노입자 조성물은 동일한 질환 치료에 이용되는 또 다른 치료제와 동시에 투여될 수 있고), 및/또는 이들은 상이한 효과를 얻을 수도 있다(가령, 임의 부작용 효과의 조절)는 것을 인지할 것이다. 일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 U.S. FDA 승인된 제2 치료 작용제와 함께 투여한다.

“복합”에 이용되는 치료요법적으로 활성 작용제는 단일 조성물로 함께 투여되거나 상이한 조성물로 별도 투여될 수 있다는 것을 인지할 것이다. 예를 들면, 본 발명은 운반되는 핵산과 제2 생물학적 활성 물질을 포함하는 나노입자를 포함한 조성물을 제공한다. 본 발명은 또한 운반될 핵산을 포함하는 나노입자의 제1군과 운반될 또 다른 생물학적 활성 물질을 포함하는 제 2 군을 포함하는 조성물을 제공한다. 본 발명은 운반될 핵산을 포함하는 나노입자를 포함하는 제1조성물과 운반될 또 다른 생물학적 활성 물질을 포함하는 나노입자를 포함한 제 2조성물을 제공한다.

일반적으로, 복합에 이용되는 작용제는 개별적으로 이용되는 수준을 초과하지 않는 수준에서 이용된다. 일부 구체예에서, 복합에 이용되는 수준은 개별적으로 이용되는 수준보다는 낮을 것이다.

치료제, 진단제, 예방제, 영양제, 미용 및/또는 피부학적 작용제를 포함하는 임의 생물학적 활성 물질이 본 발명의 핵산과 복합하여 운반될 수 있다. 예를 들면, 이와 같은 생물학적 활성 물질은 소분자, 유기금속 화합물, 핵산, 단백질 (멀티머 단백질, 단백질 복합체 등), 펩티드, 지질, 탄수화물, 허브, 호르몬, 금속, 방사능활성 원소들, 그리고, 화합물, 약물, 백신, 면역학적 물질 및 이의 복합물이 될 수 있다. 이와 같은 생물학적 작용제는 하나 또는 그 이상의 나노입자들의 미셀막내에 존재하거나 사이면에 존재하거나 표면에 흡수되거나 포집될 수도 있다.

일부 구체예에서, 나노입자를 만들기 위해 이용되는 조성물(가령, 프레믹스)내 생물학적 활성 물질의 비율은 0.1%-25%이다. 일부 구체예에서, 생물학적 활성의 비율은 0.1% - 20%, 0.1% - 15%, 0.1% - 10%, 0.1% -5%, 또는 0.1% - 1% 범위다. 일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 1% - 20%, 5% - 20%, 10% - 20%, 15% - 20%, 또는 15% - 25% 범위이다. 일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질의 비율은 0.1% 미만이다. 일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질의 비율은 25%이상이다. 일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질의 비율은 대략 0.1%, 대략 0.5%, 대략 1%, 대략 2%, 대략 3%, 대략 4%, 대략 5%, 대략 6%, 대략 7%, 대략 8%, 대략 9%, 대략 10%, 대략 11%, 대략 12%, 대략 13%, 대략 14%, 대략 15%, 대략 16%, 대략 17%, 대략 18%, 대략 19%, 대략 20%, 대략 21%, 대략 22%, 대략 23%, 대략 24%, 대략 25%, 또는 그 이상이다.

관련 생물학적 활성 물질은 임의 이용가능한 방법 또는 방식에 따라 생산되거나 수득될 수 있다. 생물학적 활성 물질에는 본 발명에 따른 나노입자와 함께 운반 또는 이용하기 위한 용도의 하나 또는 그 이상의 모이어티를 포함하거나 포함하도록 변형될 수도 있다. 이와 같은 변형이 작용제의 생물학적 활성을 간섭해서는 안된다. 일부 구체예에서, 변형은 in vivo에서 선택적으로 제거될 수도 있다. 예를 들면, 생물학적 활성 물질은 감지가능하도록 라벨되거나 및/또는 “프로(pro)” 형태로 제공되어, 운반 후에 활성 형으로 전환될 수도 있다.

일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 약학 활성을 가진 소분자 및/또는 유기 화합물이다. 일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 임상적으로 이용되는 약물이다. 일부 구체예에서, 약물은 항생제, 항-바이러스 작용제, 마취제, 항응고제, 항-암 작용제, 효소 저해물질, 스테로이드성 작용제, 항-염증성 작용제, 항-신형성 작용제, 항원, 백신, 항체, 충혈완화제, 항고혈압제, 진정제, 피임 작용제, 프로게스테론 작용제, 항-콜린제, 진통제, 항-울제, 항-정신제, β-아드레날린 차단 작용제, 이노제, 심혈관 활성 작용제, 혈관활성 작용제, 비-스테로이드성 항-염증등이다. 특히 관심이 있는 것은 경피 투여에 적절한 생물학적 활성 물질이다.

운반되는 생물학적 활성 물질은 약학적으로 활성인 작용제 혼합물일 수 있다. 예를 들면, 국소 마취제는 스테로이드와 같은 항-염증 작용제와 복합하여 운반될 수 있다. 국소 마취제는 에피네프린과 같은 혈관 활성 작용제와 투여될 수도 있다. 또 다른 예를 들면, 항생제(페니실린 및 클라불란산)는 항생제를 비활성화시키기 위해 세균이 통상적으로 생산하는 효소의 저해물질과 복합될 수도 있다.

일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 진단 작용제일 수도 있다. 일부 구체예에서, 진단 작용제에는 가스; 양전자방출 단층촬영기(positron emissions tomography (PET)), 컴퓨터 단층 촬영(CAT), 단일 광자 방출 컴퓨터 단층 촬영기(single photon emission computerized tomography), x-ray, 형광투시진단(fluoroscopy), 및 자기공명영상(MRI)에 이용되는 시판되는 영상 작용제; 그리고 조영 작용제가 포함된다. MRI에 조영 작용제로 이용할 수 있는 적절한 물질의 예로는 가돌리늄 킬레이트뿐만 아니라, 철, 마그네슘, 구리 및 크로미늄이 포함된다. CAT 및 x-ray 영상에 사용되는 물질의 예로는 요오드계 물질이 포함된다.

일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 예방 작용제이다. 일부 구체예에서, 예방 작용제에는 백신이 포함된다. 백신은 분리된 단백질 또는 펩티드, 비활성화된 유기체 및 바실러스, 죽은 유기체 및 바실러스, 유전적으로 변경된 유기체 또는 바실러스 및 세포 추출물을 포함할 수 있다. 예방 작용제는 인터루킨, 인터페론, 사이토킨 및 어쥬번트 가령, 콜레라 독소, 알룸, Freund 어쥬번트 등과 복합될 수 있다. 예방 작용제에는 하기의 박테리아 유기체의 항원을 포함할 수도 있다; 스트렙토코코스 뉴모니에(Streptococccus pnuemoniae), 헤모필러스 인플루엔자(Haemophilus influenzae), 스타필로코코스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 스트렙토코코스 피로젠스(Streptococcus pyrogenes), 코리네박테리움 디프테리아(Corynebacterium diphtheriae), 리스테리아 모노사이토진(Listeria monocytogenes), 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis), 클로스트리디움 테타니(Clostridium tetani), 클로스트리디움 보툴리늄(Clostridium botulinum), 클로스트리디움 퍼프링젠(Clostridium perfringens), 나이제리아 메닝지티디스(Neisseria meningitidis), 나이제리아 고노리아(Neisseria gonorrhoeae), 스트렙토코코스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 슈도모나스 에어루지노사(Pseudomonas aeruginosa), 살로넬라 티피(Salmonella typhi), 헤모필러스 파라인플루엔자(Haemophilus parainfluenzae), 보르데텔라 퍼튜시스(Bordetella pertussis), 프란시세라 투라렌시스(Francisella tularensis), 에르시니아 페스티스(Yersinia pestis), 비브리오 콜레라(Vibrio cholerae), 레지오넬라 뉴모필리아(Legionella pneumophila), 미코박테리움 튜베르쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis), 미코박테리움 레프라(Mycobacterium leprae), 트레포니마 팔리둠(Treponema pallidum), 렙토스피로시스 인테로간스(Leptospirosis interrogans), 보레리아 부드고도르페리(Borrelia burgdorferi), 캄필로박터 에주니(Camphylobacter jejuni), 그리고 이와 유사한 것들; 바이러스 항원 예를 들면, 천연두, 인플루엔자 A 및 B, 호흡기 합체 바실러스, 파라인플루엔자, 홍역, HIV, 수두-대상포진, 허피스 심플렉스 1 및 2, 사이토메갈로 바실러스, 입스타인-바 바실러스, 로타바실러스, 리노바실러스, 아데노나노입자, 파필로마바실러스, 폴리오바실러스, 이하선염, 광견병, 풍진, 콕사키 바실러스, 말 뇌염, 일본 뇌염, 황색열, Rift Valley 열, 간염 A,B,C,D, E 바실러스, 및 이와 유사한 것들; 곰팡이, 프로토조아, 기생충 유기체의 항원, 기생충 유기체는 크립토코커스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans), 히스토플라즈마 캡술라툼(Histoplasma capsulatum), 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 칸디다 트로피칼리스(Candida tropicalis), 노카르디아 아스테로드스(Nocardia asteroides), 리케시아 리켓시(Rickettsia ricketsii), 리켓시아 티피(Rickettsia typhi), 미코플라스마 뉴모니에(Mycoplasma pneumoniae), 클라미디알 피스타시(Chlamydial psittaci), 클라미디알 트라코마티스(Chlamydial trachomatis), 플라스모디움 팔시파룸(Plasmodium falciparum), 트리파노조마 부루세이(Trypanosoma brucei), 엔타모에바 히스토리티카(Entamoeba histolytica), 톡소플라즈마 곤디(Toxoplasma gondii), 트리코모나스 바기날리스(Trichomonas vaginalis), 쉬스토조마 만소니(Schistosoma mansoni) 및 이와 유사한 것들이 포함될 수 있다. 이와 같은 항원들은 죽은 전체 유기체, 펩티드, 글로코단백질, 탄수화물 또는 이의 복합 형태가 될 수도 있다.

일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 단백질이 될 수도 있다. 여기에서 사용된 바와 같이, “단백질” 및 “펩티드”는 호환 사용될 수 있다. 특정 구체예에서, 펩티드는 크기가 약 5 내지 약 100개, 약 10 내지 약 75개, 약 10 내지 약 50개, 약 10 내지 약 40개, 약 10 내지 약 35개, 약 15 내지 약 30개, 또는 약 20 내지 약 25개 아미노산 범위이다. 무작위 서열 및/또는 일관되게 변화된 무작위 서열을 포함하는 펩티드 패널의 펩티드 또는 최대로 다양한 펩티드 패널의 펩티드를 이용할 수도 있다.

일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 항체일 수도 있다. 일부 구체예에서, 항체는 다클론, 단클론, 키메라(가령, “인화”), 단일 쇄(재조합) 항체를 포함되나 이에 국한시키지는 않는다. 일부 구체예에서, 항체는 감소된 효과물질 기능 및/또는 이특이적 분자를 가질 수 있다. 일부 구체예에서, 항체는 Fab 단편 및/또는 Fab 발현 라이브러리에 의해 만들어진 단편들이 포함될 수 있다.

일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 기능식품 작용제(nutraceutical agent)이다. 일부 구체예에서, 기능식품 작용제는 기본적인 영양가를 제공한다. 일부 구체예에서, 기능식품 작용제는 건강 또는 의료 장점을 제공한다. 일부 구체예에서, 기능식품 작용제는 식이 보조물이다.

일부 구체예에서, 기능식품 작용제는 비타민이다. 일부 구체예에서, 비타민은 하나 또는 그 이상의 비타민 A(레티노이드), 비타민 B1(티아민), 비타민 B2(리보플라빈), 비타민 B3(니아신), 비타민 B5(판토테닌산), 비타민 B6(피록시돈), 비타민 B7(바이오틴),비타민 B9(엽산), 비타민 B12(시아노코발아민), 비타민 C(아스코르브산), 비타민 D, 비타민 E, 또는 비타민 K이다.

일부 구체예에서, 기능식품 작용제는 미네랄이다. 일부 구체예에서, 미네랄은 하나 또는 그 이상의 비스무스, 보론, 칼슘, 염소, 크롬, 코발트, 구리, 플로린, 요오드, 철, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 니켈, 인, 칼륨, 루비듐, 셀레늄, 실리콘, 스트론티늄, 텔루리움, 티타늄, 텅스텐, 바나듐 또는 아연이다.

일부 구체예에서, 기능식품 작용제는 필수 아미노산을 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 아미노산은 하나 또는 그 이상의 아르기닌, 글루타민, 히스티딘, 이소루이신, 루이신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 트레오닌, 트립토판 또는 발린이 포함된다.

일부 구체예에서, 기능식품 작용제에는 지방산 및/또는 오메가-3 지방산 (가령, DHA 또는 ARA), 과일 및 야채 추출물, 루테인, 포스파티딜세린, 리포이드산, 멜라토닌, 글루코사민, 콘드로이틴, 알로에베라, 구굴(guggul), 녹차, 리코펜, 홀푸드(whole food), 식품 첨가물, 허브, 식물성 영양소(phytonutrient), 항산화제, 과일의 플라보노이드 구성분, 달맞이꽃 오일, 아마씨, 물고기 및 해양동물 오일(대구 간 오일) 및 프로바이오틱스가 포함될 수 있다. 일부 구체예에서, 기능식품 작용제에는 원하는 성질을 보유하도록 유전공학적으로 조작된 바이오조작된 식품(“약용 식품”으로도 공지된)이 포함될 수도 있다.

예시적인 기능식품 작용제 및 식이 보충제는 Roberts et al., Nutriceuticals: The Complete Encycloedia of Supplements, Herbs, Vitamins, and Healing Foods, American Nutriceutical Association, 2001에서 설명된다. 기능식품 작용제 및 식이 보충제는 Physicians' Desk Reference for Nutritional Supplements, 1stEd.(2001)와 The Physicians' Desk Reference for Herbal Medicines, 1stEd.(2001)에서도 설명된다.

일부 구체예에서, 기능식품 작용제가 로딩된 본 발명에 따른 나노입자들을 식품에 결합시킬 수 있다. 예를 들면, 기능식품-로딩된 나노입자들은 음료수와 같은 액체에 용해시킬 수 있다.

일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 미용 및/또는 피부학적 작용제이다. 일부 구체예에서, 미용 및/또는 피부학적 작용제에는 비타민과 이의 유도체(가령,비타민E 및 이의 에스테르, 비타민C 및 이의 에스테르, 비타민 B, 비타민A 알코올 또는 레티놀 및 이의 에스테르), 프로비타민(가령, 판테놀, 니아신아미드 또는 에르고칼시페롤), 항산화제, 페놀 화합물(가령, 벤질퍼옥시드), 필수 오일, 가습제, 태양 차단 작용제, 보습 작용제, 단백질, 세라미드 및 슈도세라미드가 포함될 수 있다.

일부 구체예에서, 본 발명의 핵산과 함께 운반될 생물학적 활성 물질은 하나 또는 그 이상의 보틀리늄 독소 펩티드 또는 단백질 복합체가 될 수도 있다. 일반적으로, 보틀리늄 독소는 클로스트리듐 보틀리늄(Clostridium botulinum)에 의해 만들어진 임의 신경독소를 말한다. 일부 구체예에서, 보틀리늄 독소는 하나 또는 그 이상의 보틀리늄 독소 혈청형 A, B, C₁, C₂, D, E, F, 또는 G가 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 보틀리늄 독소는 보틀리늄 독소 복합체(가령, 300 kD, 600 kD, 900 kD 복합체) 뿐만 아니라 정제된(가령, 분리된) 보틀리늄 독소 (가령, 약 150 kD)을 말한다. 일부 구체예에서, 보틀리늄 독소는 분리된 및/또는 정제된 보틀리늄 독소가 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 보틀리늄 독소는 부분적으로-분리된 및/또는 부분적으로-정제된 보틀리늄 독소가 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 보틀리늄 독소는 고유 보틀리늄 복합체가 될 수도 있다. 일부 구체예에서, 보틀리늄 독소는 비-독소 단백질과 연합될 수도 있다. 일부 구체예에서, 보틀리늄 독소는 재조합적으로 만들어진 보틀리늄 독소가 될 수도 있다.

일부 구체예에서, 생물학적 활성 물질은 암 치료에 이용되는 하나 또는 그 이상의 치료요법적 작용제(가령, 화학요법적 작용제))가 될 수도 있다. 특정 구체예에서, 본 발명의 핵산과 함께 운반될 생물학적으로 활성인 항-암 작용제는 세포독성 작용제가 될 수도 있다. 대부분의 항-암 작용제는 다음의 범주로 세분될 수 있다: 알킬화 작용제, 항대사물질, 천연 산물, 호르몬 및 길항제. 여기에서 논의된 임의의 항-암 작용제가 본 발명의 핵산과 복합되어 운반될 수 있다. 이와 같은 복합 요법을 이용하여 임의 타입의 암을 치료할 수도 있다.

항-암 작용제는 전형적으로 세포 분할 및/또는 DNA 합성에 영향을 준다. 그러나, 일부 화학요법적 작용제는 DNA를 직접적으로 간접하지 않는다. 예를 들면, 티로신 키나제 저해물질(imatinib mesylate/GLEEVEC®)은 특정 타입의 암(만성 골수성 백혈병, 위장 기질 종양 등)에서 분자 이상을 직접적으로 표적한다.

알킬화 작용제는 세포에 존재하는 조건하에 많은 전자 음성기에 알킬기를 추가시키는 능력으로 인하여 이렇게 명명된 것이다. 알킬화 작용제는 일반적으로, 화학적으로 변형된 세포 DNA에 의해 기능을 한다. 예시적인 알킬화 작용제에는 질소 무스타드(가령, 메클로로에타민, 사이클로포스파미드, 이포소파미드, 멜파란(l-살코리신), 클로라부실), 에틸렌이민, 및 메틸멜라민(가령, 알트레타만(헥사메틸멜라민:HMM), 티오테파(트리메틸렌 티오포스포라미드), 트리에틸렌밀라민(TEM), 알킬 술포네이트(가령, 부술판), 니트로스우레아(가령, 카르무스틴(BCNU), 루무스틴(CCMU), 세무스틴(메틸-CCNU), 스트렙토조신(스트렙토조신), 및 트리아젠(가령, 다카르바진(DTIC:디메틸트리아젠이미다졸카르복사미드))을 포함한다.

새로이 합성된 세포 DNA내로 결합되기 위해서 항대사물질은 작은 분자 대사물질(가령, 엽산, 피리미딘, 및 퓨린)을 모방하여 작용한다. 이와 같은 작용제는 RNA 합성에도 영향을 준다. 예시적인 엽산 유사체는 메토트렉세이트(아메토프테린)이다. 예시적인 피리미딘 유사체에는 플루오로우라실(5-플루오로우라실; 5-FU), 플옥스우리딘(플루오로데옥시우리딘; FUdR), 그리고 시타라빈(시토신 아라비노시드)가 포함된다. 예시적인 퓨린 유사체에는 멀캅토퓨린(6-멀캅토퓨린; 6-MP), 아자티오피린, 티오구아닌(6-티오구아닌; TG), 플루다라빈 포스페이트, 펜토스타틴(2’-데옥시코포르미신), 클라드리빈(2-클로로데옥시아데노신; 2-CdA), 그리고 에리트로하이드록시노닐아데닌(EHNA)이 포함된다.

항암 작용제로 이용될 수 있는 천연 소분자 산물에는 식물 알칼로이드 및 항생제가 포함된다. 식물 알칼로이드 및 테르페노이드(가령, 빈카 알카로이드, 포도필로톡신, 탁산 등)는 일반적으로 마이크로튜브 기능(microtubule function)을 저해함으로써 세포 분할을 차단한다. 빈카 알카로이드(가령, 빈크리스틴, 빈블라스틴(VLB), 빈오렐빈, 빈데신 등)는 튜블린에 결합하여 튜블린이 마이크로튜브로 어셈블리되는 것을 방해한다. 빈카 알카로이드는 마다가스카르 빙카(periwinkle), 캐트란투스 로세우스(Catharanthus roseus)(이전에는 빈카 로제아(Vinca rosea))로 알려짐). 포도필로톡신(Podophyllotoxin)은 두 가지 다른 세포 증식억제 치료 작용제, 에토포시드(etoposide) 및 테니포시드(teniposide)를 만드는데 이용되는 식물에서 유도된 화합물인데, 이들은 세포가 세포 사이클의 G1과 S 상으로 들어가는 적을 방해한다. 포도필로톡신은 주로 미국 Mayapple(Podophyllum peltatum) 및 히말라야 Mayapple(Podophyllum hexandrum)에서 수득된다. 탁산(가령, 파클리탁셀, 도세탁셀 등)은 주목(Yew Tree)으로부터 유도된다. 탁산은 마이크로뷰트의 안정성을 강화시켜, 핵분열후기(anaphase) 동안 염색체의 분리를 방해한다.

항암 작용제로 이용될 수 있는 항생제에는 닥티노마이신(악티노마이신 D), 다우노루비신(다우노마이신:루비도마이신), 독소부비신, 이다루비신, 블레오마이신, 플리카마이신(미트라마이신) 및 미토마이신(미토마이신 C)이 포함된다.

항암 작용제로 이용될 수 있는 기타 소분자에는 플라티늄 배위 복합체(가령, 시스플라틴((cis-DDP), 카르보플라틴), 안트라센디온(가령, 미톡산트론), 치환된 요소(가령, 하이드록시우레아), 메틸하이드라진 유도체(가령, 프로카르바진(N-메틸하이드라진, MIH) 및 아드레노코르리티칼 억제제(가령, 미토탄(o,p’-DDD), 아미노글루테티미드)가 포함된다.

항암제로 이용될 수 있는 호르몬에는 아드레노코르티코스테로이드(가령, 프레디니손), 아미노글루테티미드, 프로제스틴(가령, 하이드록시프로게스테론 르카프로에이트, 메드록시프로세그테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트), 에스트로겐(가령, 디에틸스틸베스트롤, 이티닐 에스트라디올), 항에스테로겐(가령, 타목시펜), 안드로겐(가령, 테스토스테론 프로피오네이트, 플루옥시메스테론), 항안드로겐(가령, 플루타미드) 및 고나도프로핀-방출 호르몬 유사체(가령, 루프로리드) 등이 포함된다.

토포이소메라제 저해물질은 DNA의 형상을 유지시키는 효소인 토포이소메라제의 기능을 저해하는 작용을 한다. 타입 I 또는 타입 II 토포이소메라제 저해로 적절한 DNA 슈퍼코일이 뒤엉켜 DNA의 전사 및 복제 모두 방해된다. 일부 예시적인 타입 I 토포이소메라제 저해물질에는 캄프토테신(가령, 이리노테칸, 토포테칸 등)이 포함된다. 일부 예시적인 타입 II 토포이소메라제 저해물질에는 암스크린, 에토포시드, 에토포시드 포스페이트, 테니포시드 등이 포함되는데, 이들은 여기에서 논의되는 에피포도필로톡신의 반합성 유도체들이다.

특정 구체예에서, 생물학적으로 활성있는 항-암 작용제는 면역치료요법적 작용제가 될 수도 있다. 면역요법은 다양한 형태의 암에 이용될 수 있는 종양에 대항한 면역 기전을 이용하는데, 예를 들면, 유방암 (가령, 트라스투쿰브/HERCEPTIN®), 백혈병(가령, 젬투주마 오조가미신/MYLOTARG®), 그리고 비-홉킨스 임파종(가령, 리투시마브/RITUXAN®) 등이 있다. 일부 구체예에서, 면역요법 작용제는 문제의 암 세포에 특징적인 단백질에 대항하여 바로 작용하는 단클론 항체들이다. 일부 구체예에서, 면역요법 작용제는 면역계 반응을 조절하는 사이토킨이다. 일부 구체예에서, 면역요법 작용제는 백신일 수도 있다(가령, 경부암을 예방하기 위해 이용되는 HPV 백신).

당업자는 이것이 포괄적이지는 않지만, 본 발명의 핵산과 복합하여 운반될 수 있는 생물학적 활성 물질 목록이라는 것을 인지할 것이다. 임의의 생물학적 활성 물질은 본 발명에 따른 나노입자내에 포집되거나 표면에 결합될 수도 있다. 본 발명에 이용할 수 있는 종류 및 적절한 약물의 좀더 완벽한 목록은 Pharmaceutical Drugs:Syntheses,Patents,Applications, Axel Kleemann and Jurgen Engel, Thieme Medical Publishing, 1999와 the MerckIndex:An Encyclopedia of Chemicals, Drugs and Biologicals, Ed., Budavari et al., CRC Press, 1996에서 기술되는데, 이들은 참고문헌으로 첨부된다.

방출 지연 작용제

일부 구체예에서, 하나 또는 그 이상의 생물학적 활성 물질 (가령, 핵산)을 포함하는, 나노입자조성물은 작용제의 조절된 방출을 허용하기 위해 하나 또는 그 이상의 방출-지연 성분을 추가 포함하거나 이와 함께 조제된다. 당분야에 공지된 임의의 방출-지연 성분들은 나노입자를 만드는데 이용하기에 적절하다. 일부 구체예에서, 방출-지연 성분은 친수성 및/또는 소수성 폴리머다. 방출-지연 성분에는 예를 들면, 셀룰로오즈 또는 이의 유도체, 아크릴 폴리머, 에스테르 폴리머, 비닐-피롤리돈계 폴리머, 검, 기타 천연 폴리머, 및/또는 이들의 복합이 포함된다.

일부 구체예에서, 방출-지연 성분은 셀룰로오즈 또는 이의 유도체다. 특정 구체예에서, 셀룰로오즈 또는 이의 유도체는 하나 또는 그 이상의 하이드록시프로필 메틸셀룰로오즈, 메틸셀룰로오즈, 카르복시메틸셀룰로오즈, 카르복시메틸셀룰로오즈 나트륨, 하이드록시프로필 에틸셀룰로오즈, 하이드록시에틸셀룰로오즈, 및 하이드록시프로필 셀룰로오즈를 포함한다. 특정 구체예에서, 셀룰로오즈 또는 이의 유도체는 메틸셀룰로오즈 또는 이의 유도체이다. 특정 구체예에서, 셀룰로오즈 또는 이의 유도체는 하이드록시프로필 메틸셀룰로오즈 (HPMC)이다. 당업자는 기타 알킬 셀룰로오즈를 포함하는 기타 셀룰로오즈 폴리머가 이용될 수 있다는 것도 인지할 것이다.

일부 구체예에서, 방출-지연 성분은 아크릴 폴리머다. 특정 구체예에서, 아크릴 폴리머에는 예를 들면, 아크릴 산 및 메타아크릴 산 코폴리머, 메틸 메타아크릴레이트 코폴리머, 에톡시에틸 메타아크릴레이트, 시아노에틸 메타아크릴레이트, 아미노알킬 메타아크릴레이트 코폴리머, 폴리(아크릴 산), 폴리(메타아크릴 산), 메타아크릴 산 알킬아미드 코폴리머, 폴리(메틸 메타아크릴레이트), 폴리(메타아크릴 산 안하이드리드), 메틸 메타아크릴레이트, 폴리메타아크릴레이트, 폴리(메틸 메타아크릴레이트) 코폴리머, 폴리아크릴아미드, 아미노알킬 메타아크릴레이트 코폴리머, 글리시딜 메타아크릴레이트 코폴리머, 그리고 상기 폴리머 하나 또는 그 이상을 포함하는 복합물이 포함된다. 아크릴 폴리머에는 낮은 함량의 4차 암모미움 기를 가지는 아크릴 및 메타아크릴 산 에스테르의 완전하게 중합된 폴리머를 포함될 수도 있다.

일부 구체예에서, 방출-지연 성분은 폴리에스테르이다. 일부 구체예에서, 폴리에스테르에는 폴리알킬렌 글리콜, 폴리(글리코리드-co-락티드), 폴리(락트-co-글리코릭 산)-PEG 코폴리머, 폴리(락트 산), 폴리(락트 산)-PEG 코폴리머, 폴리(글리코릭 산), 폴리(글리코릭 산)-PEG 코폴리머, 폴리락트 및 폴리글리코릭 산의 코폴리머, 및 이의 유도체를 포함한다. 일부 구체예에서, 폴리에스테르에는 예를 들면, 폴리안하이드리드, 폴리(오르소 에스테르), 폴리(오르소 에스테르)-PEG 코폴리머, 폴리(카프로락톤), 폴리(카프로락톤)-PEG 코폴리머, 폴리리신, 폴리리신-PEG 코폴리머, 폴리(에틸렌 이민), 폴리(에틸렌 이민)-PEG 코폴리머, 및 이의 유도체가 포함된다. 일부 구체예에서, 폴리에스테르에는 예를 들면, 폴리카프로락톤, 폴리(L-락티드-co-L-리신), 폴리(세린 에스테르), 폴리(4-하이드록시-L-프로린 에스테르), 폴리[α-(4-아미노부틸)-L-글리코릭 산], 및 이의 유도체를 포함한다.

일부 구체예에서, 방출-지연 성분은 폴리(비닐-피롤리돈)의 교차-연결된 폴리머다. 일부 구체예에서, 폴리머는 크로스포비돈이다. 일부 구체예에서, 폴리머는 교차-연결안된 폴리(비닐-피롤리돈)이다. 일부 구체예에서, 폴리머는 포비돈이다.

일부 구체예에서, 방출-지연 성분은 천연 폴리머다. 일부 구체예에서, 천연 폴리머는 산탄 검, 알긴산, 카라야 검, 알지네이트 나트륨 및/또는 로커스트 빈 검을 포함하는 검이다. 일부 구체예에서, 천연 폴리머는 단백질(가령, 알부민), 지질, 핵산 또는 탄수화물이고, 방출 지연 성분은 폴리에스테르가 될 수 있다.

일부 구체예에서, 방출-지연 성분은 폴리(비닐-피롤리돈)의 교차-연결된 폴리머다. 일부 구체예에서, 폴리머는 크로스포비돈이다. 일부 구체예에서, 폴리머는 교차-연결안된 폴리(비닐-피롤리돈)이다. 일부 구체예에서, 폴리머는 포비돈이다.

일부 구체예에서, 방출-지연 성분은 천연 폴리머. 일부 구체예에서, 천연 폴리머는 산탄 검, 알긴산, 카라야 검, 알지네이트 나트륨 및/또는 로커스트 빈 검을 포함하는 검이다. 일부 구체예에서, 천연 폴리머는 단백질(가령, 알부민), 지질, 핵산 또는 탄수화물이다.

제형 작용제

본 발명의 나노입자 조성물을 개체에 투여하기 위해 조제될 수 있다. 특정 구체예에서, 나노입자 조성물은 개체로 운반(가령, 경피 운반)을 시키기 위하여 피부에 사용하기 위해 조제될 수 있다. 예를 들면, 나노입자 조성물은 국소적으로 사용하기 위한 의도로 미용 또는 기타 제재로 조제될 수 있다.

사람 피부는 진피와 표피를 포함한다. 표피는 몇 개의 조직 층, 즉, 각질층, 투명층(stratum lucidum), 과립층(stratum granulosum), 유극층(stratum spinosum), 및 기저층(stratum basale)(피부의 외측부터 내측 방향으로 확인되는 순서)을 가진다. 각질층은 약물, 특히 핵산(가령, 변형된 또는 변형안된 폴리뉴클레오티드 및/또는 핵산 잔기들, 가령, 뉴클레오티드, 및/또는 뉴클레오시드)의 일반적인 경피 운반에 가장 심각한 장애물이다. 각질층은 일반적으로 두께가 약 10 μm 내지 약 15 μm이며, 몇 개의 층으로 배열된 편형한 각질화된 세포(각질세포)로 구성된다. 각질세포사이의 세포내 공간은 지질 구조로 채워져 있고, 이는 피부를 통하여 물질의 침투에 중요한 역할을 한다(Bauerova et al., 2001, European Journal of Drug Metabolism and Pharmacokinetics, 26:85).

각질층 아래 나머지 표피는 두께가 대략 150 μm 이다. 진피는 두께가 약 1 mm 내지 약 2 mm이며, 표피 아래 위치한다. 진피는 다양한 모세관뿐만 아니라 뉴우런 프로세스에 의해 신경이 통한다.

일반적으로, 약물의 경피 투여를 위한 시도에서는 각질층의 침투성을 증가시키는데 초점을 맞춰왔다. 일부 시도에서는 피부를 통한 분자의 침투성을 증가시키기 위한 화학적 강화 작용제의 사용도 포함된다. 일부 시도는 각질층의 일부를 통과 또는 제거하기 위한 기계적인 장치를 이용하는 것도 포함된다. 일부 시도에는 피부의 침투성을 증가시키기 위해 화학적 또는 기계적인 연마 작용제의 이용도 포함된다. 추가로, 피부를 통하여 약물 침투를 실행하기 위해 초음파 또는 이온요법의 사용도 포함된다. 대부분의 경우, 목적은 피부를 통한 약학 작용제, 주로, 소분자에 있는데, 작용제가 진피에 모세관을 통과하여, 작용제가 개체에 전신적으로 결합되어 치료요법적 효과를 얻는 것이다.

본 발명은 여러 가지 중에 변형안된 또는 변형된 핵산(가령, 폴리뉴클레오티드 및/또는 핵산잔기들, 가령, 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드)을 마찰제 또는 다른 파괴 물질(화학적, 전기적, 자석 등에 의해)의 사용을 요구하지 않고 경피를 통하여 투여하는 방법을 제공한다. 오히려, 본 발명의 발명자들은 각질층을 침투하거나 파괴하지 않고, 나노입자 조성물에 결합된 다소 큰 분자(가령, 보틀리늄 독소)를 효과적으로 경피 운반된다는 놀라운 발견을 하였다.

따라서, 본 발명은 본 발명의 나노입자 조성물의 국소 사용을 통하여 핵산을 투여하는 방법을 제공한다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 피부에 바로 제공되거나 상피 층을 통하여 흡수시킬 수 있다. 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 화학적 또는 기계적인 피부 침투 강화제 또는 마찰을 야기하는 기타 작용제의 사용 없이, 각질층, 피부 구멍 및/또는 피부 선을 포함하는 피부의 상부 층을 침투할 수 있다.

당업자는 국소 투여를 위해 나노입자 조성물을 피부 연화제, 영양 로션 타입 에멀젼, 크린징 로션, 크린징 크림, 스킨 밀크, 에몰리언트 로션, 마사지 크림, 에몰리언트 크림, 메이크업 베이스, 립스틱, 안면 팩 또는 안면 겔, 크리너 제제(가령, 샴푸, 린스, 바디 크린져, 모발 토너, 비누 등) 및/또는 피부학적 조성물(가령, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 스프레이 등으로 조제할 수 있다는 것을 인지할 것이다.

이와 같은 나노입자 조성물의 제형에는 충진제, 격리제, 연화제, 발색제(가령, 안료 및 염료) 및 향료와 같은 하나 또는 그 이상의 부형제가 일반적으로 포함된다.

일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 크림으로 조제될 수 있다. “크림”은 피부에 사용하기 위해 일반적으로 조제된 펼쳐 바를 수 있는 조성물을 말한다. 크림은 일반적으로 오일 및/또는 지방산 계 매트릭스를 포함한다. 본 발명의 따라 조제된 크림에는 나노입자가 포함되고, 실질적으로 국소 투여시에 피부를 통하여 완벽하게 침투(나노입자들의 침투)가 가능할 수 있다. 이와 같은 크림은 결합된 물질(가령, 핵산)의 캐리어로 작용할 수도 있다.

당업자는 나노입자 조성물이 패취와 같은 장치에 결합될 수 있다는 것을 인지할 것이다.

다양한 경피 패취 구조가 당분야에 공지되어 있다; 당업자는 나노입자 조성물을 이와 같은 다양한 구조중 임의의 것에 바로 결합시킬 수 있다는 것을 인지할 것이다. 일부 구체예에서, 경피 패취에는 피부에 제공되는 패취의 한 측면으로부터 뻗어 나온 다수의 바늘을 추가 포함할 수도 있는데, 이때 바늘은 패취로부터 피부의 각질층을 통하여 돌출된다. 일부 구체예에서, 바늘은 혈관을 파괴하지 않는다.

본 발명의 일부 구체예에서, 나노입자 조성물은 패취에 데포우를 제공하여, 패취에 제공되는 압력이 핵산을 패취 밖으로(선택적으로 바늘을 통하여) 나와 각질층을 통과하도록 한다.

본 발명의 일부 구체예에서, 경피 패취에는 접착제가 포함된다. 접착제 패취의 일부 예는 공지되어 있다(가령, U.S. Design Patent 296,006; U.S. Patent 6,010,715; 5,591,767; 5,008,110; 5,683,712; 5,948,433; 5,965,154). 접착제 패취는 일반적으로, 접착제 층(이 접착제 층이 사람 피부에 사용되며), 약학 작용제를 보지시키는 데포우 또는 저장기, 데포우로부터 약물의 누출을 방지하는 외부 표면으로 구성된다. 패취의 외측 표면은 일반적으로 비-접착성이다.

당업자는 경피 패취가 나노입자 조성물을 투여하는 한 가지 예일 뿐이라는 것을 인지할 것이다. 몇 가지 기타 예를 들면, 조성물이 먼저 사람의 손가락을 거치지 않고 사용할 수 있는 수단을 이용할 수도 있는데, 이로써 손가락 상에 바람직하지 못한 생물학적 효과를 줄 수도 있는 가능성이 없다. 적절한 수단에는 주걱, 면봉, 바늘없는 주사기 및 접착제 패취가 포함된다. 주걱, 면봉, 또는 이와 유사한 것을 이용에는 조성물을 포함하는 용기에 이와 같은 수단이 삽입되어야 할 수도 있다. 주사기의 이용시 주사기에 조성물을 채워서 사용될 것이다. 조성물을 주걱 또는 면봉으로 국소적으로 펴 바를 수도 있고, 주사기로부터 환자의 피부로 방출시킬 수도 있다.

일부 구체예에서, 핵산은 원하는 운반 부위로만 운반을 제한시키는 것이 바람직할 수 있다. 일부 구체예에서, 이와 같은 제한된 운반은 피부의 비-표적 부위로 조성물을 바르지 않고 표적 부위로 조성물이 제공되는 것을 허용하는 사용 수단내 나노입자 조성물을 이용함으로써 실시될 수도 있다. 분명한 것은, 이와 같은 목적으로 경피 패취가 이용될 수 있다는 것이다. 대안으로 또는 추가적으로, 선택된 부위에만 국소적으로 핵산을 제공한다면, 나머지 지역은 선-처리되거나 덮여있을 수도 있고, 그렇지 않으면 노출로부터 보호되어야 한다.

대안으로 또는 추가적으로, 본 발명의 나노입자는 가령, 정맥 주사, 근육내 주사, 피하 주사, 복막 주사 또는 주입을 포함한 임의 다른 적절한 수단에 의해 투여될 수도 있다. 일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 동맥내 주사, 심실내 주사 또는 척수내 주사에 의해 투여될 수도 있다. 일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 경구, 경피, 직장, 질, 점막, 비강, 볼, 내장 또는 설하를 통하여 투여될 수도 있다. 일부 구체예에서, 본 발명의 나노입자 조성물은 경기관지 주입(intratracheal instillation), 기관지 주입(bronchial instillation) 및/또는 흡입에 의해 투여되고 및/또는 구강 스프레이, 비강 스프레이 및/또는 에어로졸로 투여될 수도 있다.

다음의 실시예는 본 발명에서 고려하는 특정 구체예의 설명을 위해서만 제공된다. 어떠한 방식으로든 실시예로 제한되지 않는다.

실시예 1: 아데노신 나노입자 제형

아데노신은 피부 구조상에 생물학적 활성을 가지는 것으로 공지된 뉴클레오티드이다.(Brown etal.,2000, J. Investig. Dermatol.,115:849). 나노에멀젼을 만들어 아데노신 나노입자 조성물을 준비하였다. 간략하게 설명하면, 800 gm 1349 중쇄 트리글리세리드 오일과 800 gm의 TWEEN®80을 5분간 멸균 바이알에서 교반시켰다. 14 mg의 아데노신 (84 ㎖ 물)을 오일--TWEEN® 혼합물에 첨가하고 20분간 교반시켰다. 샘플을 1분간 균질화시키고, 20분간 교반시켰다. 샘플은 23,000psi에서 1회 미세유체화되었다.

생성된 아데노신 나노에멀젼은 약 0.6 nm - 6 μm 사이의 입자를 구별하는 Malvern Nano S particle sizer을 이용하여 특정 크기에 대해 평가하였다. 형성된 나노입자들은 직경이 평균 75.9 nm이다. 나노입자들은 -12.9 mV의 평균 제타 전위를 가진다.

생성된 나노에멀젼은 입자 집단을 포함하고, 입자 집단의 특징 및 집단내 개별 입자의 특징으로 측정하였다. 집단내 모든 나노입자의 응집 용적의 50%는 10 nm 내지 39.7 nm이다; 집단내 모든 나노입자의 응집 용적의 90%는 10 nm 내지 82.9 nm이다; 그리고 집단내 모든 나노입자의 응집 용적의 95%는 10 nm 내지 113.0 nm이다. 따라서, 집단내 입자의 대부분은 10 nm 내지 85 nm의 범위에 속한다.

실시예 2: 포스포릴화된 티미딘 이뉴클레오티드 (pTT) 나노입자 제형

포스포릴화된 티미딘 이뉴클레오티드(pTT)는 피부 구조상에 생물학적 활성을 가지는 것으로 알려져 있다(Goukassian et al., 2004, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 101:3933; Arad et al., 2006, FASEB J., 20:1895; Yaar et al., 2007, Breast Cancer Res., 9:R13; Goukassian et al., 2002, FASEB J., 16:754). 실시예로, pTT는 멜라닌 세포 생산을 자극하여, 피부 태닝을 결과하거나 또는 피부의 태닝 외양을 얻고, 생물학적 효과를 검사하거나 시각적으로 측정할 수 있다.

나노에멀젼을 만들어 pTT 나노입자 조성물을 준비하였다. 간략하게 설명하면, 800 gm 콩 오일 및/또는 1349 오일과, 800 gm의 TWEEN®80을 5분간 멸균 바이알에서 교반시켰다. 1 mg의 pTT (8.4 ㎖ 물)을 오일--TWEEN® 혼합물에 첨가하고 20분간 교반시켰다. 샘플을 1분간 균질화시키고, 20분간 교반시켰다. 샘플은 23,000psi에서 1회 미세유체화되었다.

생성된 pTT 나노에멀젼은 약 0.6 nm - 6 μm 사이의 입자를 구별하는 Malvern Nano S particle sizer을 이용하여 특정 크기에 대해 평가하였다. 형성된 나노입자들은 직경이 평균 50nm 내지 150 nm이다. 나노입자들은 -12.9 mV의 평균 제타 전위를 가진다.

실시예 3: 뉴클레오티드 나노입자의 경피 제공을 통하여 생쥐에서 피부를 어둡게 하는 효과

본 실시예는 뉴클레오티드 나노입자의 피부 경피 제공을 통하여 피부상에 생물학적 효과를 설명한다.

방법

실시예 2에 따라 준비된 뉴클레오티드 나노에멀젼을 동량의 피부 크림(가령, ase PCCA Vanishing Cream Light)과 혼합하고, 볼텍스하여 균질한 크림을 만들어 “치료 크림”을 만들었다.

“비-나노 치료 크림”은 실시예 2와 같이 동량의 물에 동량의 뉴클레오티드를 혼합하고, 치료 크림을 만들 때 사용한 동일한 피부 크림과 함께 볼텍스하여 만들었다. 비-나노 치료 크림은 치료 크림과 동일한 모든 성분들을 포함하나, 제형을 고전단력에 노출시키지 않아, 나노에멀젼을 만들지는 못한다. 특정 성분을 포함하는 나노에멀젼인 치료 크림과는 대조적으로, 비-나노 치료 크림은 동일한 성분의 단순한 복합물이며, 나노에멀젼으로 제형되지 않는다.

“대조군 크림”은 실시예 2와 같이 동량의 물과 치료 크림을 만들 때 사용한 동일한 피부 크림과 함께 볼텍스하여 만들었다. 대조군 크림은 나노에멀젼이 아니며, pTT 활성 성분을 포함하지 않는다.

30마리의 Swiss Webster 생쥐를 구입하였다(각 생쥐는 대략 20g 체중을 가진다). 도착시에, 모든 동물은 1주일간 우리에서 적응시키고(하기에서 정의된 바와 같이 그룹당 한 우리에 10마리씩 넣는다), 표준 우리 베드와 Purina 5001 먹이를 제공한다. 1주일 후, 다음의 치료 섭생을 적용시킨다:

치료 사례

Group 1 (대조군): 3주간 매일, 10마리 생쥐에 장갑을 낀 손가락으로 이들 등에 각 100 ㎕ 의 대조군 크림을 바르는데, 시각적으로 크림이 보이지 않을 때까지 바른다. 생쥐를 제1 치료가 시작전에 그리고, 각 후속 1주일 시작시에 전기면도기로 털을 깎았다.

Group 2 (비-나노 치료): 3주간 매일, 10마리 생쥐에 장갑을 낀 손가락으로 이들 등에 각 100 ㎕ 의 비-나노 치료 크림을 바르는데, 시각적으로 크림이 보이지 않을때까지 바른다. 생쥐를 제1 치료가 시작전에 그리고, 각 후속 1주일 시작시에 전기면도기로 털을 깎았다.

Group 3 (치료): 3주간 매일, 10마리 생쥐에 장갑을 낀 손가락으로 이들 등에 각 100 ㎕ 의 치료 크림을 바르는데, 시각적으로 크림이 보이지 않을 때까지 바른다. 생쥐를 제1 치료가 시작전에 그리고, 각 후속 1주일 시작시에 전기면도기로 털을 깎았다.

평가

1차 치료 시작전 그리고 그 후 매주, 치료 상태에 대해 모르는 관찰자가 생쥐 등에 있는 치료 부위의 피부 톤을 태우지 않음(0)부터 매우 태움(5)까지로 등급을 매긴다.

3주후에, 동물을 죽이고, 각 생쥐 등의 동일 부위에서 떼어낸 피부로부터 각 군의 평균 측정을 비교하여 잠재적인 치료 효과를 결정하기 위해, 이들 등의 피부를 조사하였다. 멜라닌 세포 자극은 유리 슬라이드상에 조직학적으로 착색된 미세하게 절단된 생쥐 등 피부의 조직학적 단편을 검사하여 평가한다. 멜라닌 세포의 수와 검은 정도는 생쥐의 치료 상태에 대해 모르는 병리학적에 의해 평가된다.

결과 및 결론

결과는 통계학적으로 처리 군이 대조군 및 비-나노 처리 군보다 더 태운 피부를 평균적으로 가지는 것으로 기대된다. 결과는 조직학적 착색 슬라이드의 병리학자 평가에 의해 측정하였을 때, 처리 군이 대조군 및 비-나노 처리군보다 통계적으로 멜라닌 세포 자극이 더 많은 것으로 기대된다.

요약하면, 이와 같은 조절된 데이터에서 국소 뉴클레오티드 나노에멀젼 제형은 뉴클레오티드 없이 사용된 대조군 크림과 비교하였을 때 피부상에 측정가능한 생물학적 효과를 가지는 것으로 기대된다. 데이터는 뉴클레오티드 나노에멀젼이 나노입자 제형에 없는 동일한 뉴클레오티드를 가진 단순 크림보다는 훨씬 더 많은 측정가능한 생물학적 효과를 가지는 것으로 기대된다.

등가 및 범위

당업자는 통상의 실험을 이용하여, 여기에서 설명하는 본 발명의 특정 구체예에 등가인 것을 인지할 것이다. 본 발명의 범위는 상기 설명에 한정시키는 의도가 없으며 다만 첨부된 청구범위로 한정된다.

당업자는 통상의 실험을 이용하여, 여기에서 설명하는 본 발명의 특정 구체예에 등가인 것을 인지할 것이다. 본 발명의 범위는 상기 설명에 한정시키는 의도 가 없으며 다만 첨부된 청구범위로 한정된다.

청구항에서 관사(“a”, “an”, “the”)는 반대되는 언급이 없는 한 하나 또는 그 이상을 의미한다. 따라서, 예를 들면, “나노입자”의 경우 이와 같은 나노입자 다수도 포함되고, “세포”를 언급할 때는 당분야에 공지된 하나 또는 그 이상의 세포가 포함된다. 청구범위 또는 명세서에서 군의 하나 또는 그 이상 사이에 “또는”이 포함되면, 내용으로부터 반대되는 명시 사항이 없다면 주어진 산물 또는 공정에서 하나, 하나이상 또는 그 군의 모든 구성요소가 존재하거나 이용된다는 것을 의미한다. 본 발명에는 구체예들이 포함되는데, 관련 산물 또는 공정에서 이들 군의 정확한 구성 요소가 존재하거나 이용된다. 본 발명은 관련 산물 또는 공정에서 하나이상 또는 모든 구성요소들이 존재하거나 이용되는 구체예를 포함한다. 또한, 본 발명은 모든 변이, 조합, 순열변화 등을 포함하는데, 이때, 열거된 청구항 하나 또는 그 이상에서 하나 또는 그 이상의 제한, 요소, 절, 설명 용어가 다른 청구항에 도입된다. 예를 들면, 다른 청구항에 종속항인 임의 청구항이 변형되어 동일한 기본 청구항에 종속항인 임의 다른 청구항에서 볼 수 있는 하나 또는 그 이상의 제한이 도입된다. 또한, 청구항에 조성물이 언급되면, 여기에서 명시한 임의 목적을 위해 조성물을 이용하는 방법도 포함되며, 여기에서 개시한 제조방법에 따라 또는 임의 공지된 방법에 따라 조성물을 조제하는 방법도 포함된다는 것을 인지해야 한다.

요소들이 목록에 있는 경우, 가령, Markush 군 포맷의 경우, 이들 요소의 각 하위 군도 포함되며, 임의 요소는 군으로부터 제거될 수도 있다는 것을 인지할 것 이다. 일반적으로, 본 발명 또는 발명의 측면이 특정 요소, 특징 등을 언급하는 경우, 본 발명의 특정 구체예 또는 본 발명의 특정 측면은 이와 같은 효소, 특징을 필수적으로 구성된다. 단순하게, 구체예가 이러한 말로써(in haec verba) 명시적으로 제시하지 않았다. “포함하는(comprising)”은 개방된 의도이며, 추가 요소 또는 단계의 포함을 허용한다.

범위가 제공되는 경우, 끝점이 포함된다. 또한, 다른 언급이 없는 한, 당업자는 범위로 표현된 수치는 특정 범위 또는 본 발명의 다른 구체예에 명시된 범위내 하위 범위를 명시된 범위의 하위 범위의 1/10까지 취할 수 있다는 것을 인지할 것이다.

또한, 선행 기술에 속하는 본 발명의 임의 특정 구체예는 하나 또는 그 이상의 청구항으로부터 명시적으로 배제될 수 있다는 것을 이해해야 한다. 이와 같은 구체예는 당분야에 당업자에 공지된 것으로 간주하고, 이와 같은 배제가 명시되지 않아도 배제될 수 있다. 본 발명의 조성물의 특정 구체예(가령, 임의 핵산, 임의 폴리뉴클레오티드, 임의 핵산 잔지, 임의 뉴클레오티드 변형, 임의 오일, 임의 계면활성제, 임의 양쪽성 엔터티, 임의 생물학적 활성 물질, 임의 치료 방법, 임의 치료요법적 이용 등)들도 선행기술의 존재 여부와 무관하게, 어떠한 이유로든 하나 또는 그 이상의 청구범위로부터 배제될 수 있다.

여기에서 언급된 공개 문헌은 본 출원 출원일 이전의 것만을 제공한다. 여기에서 어느 것도 발명자가 이와 같은 공개 내용에 의해 이와 같은 공개보다 선행하게 할 권한을 부여한 것으로 간주되는 것은 없다.

SEQUENCE LISTING <110> Edelson, Jonathan Kotyla, Timothy Zhang, Boke <120> NUCLEIC ACID NANOPARTICLES AND USES THEREFOR <130> 2007339-0029 <140> PCT/US08/65329 <141> 2008-05-30 <160> 48 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 20 <212> RNA <213> Artificial sequence <220> <223> siRNA antisense sequence <400> 1 aaacuuguuu uugagggucu 20 <210> 2 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial sequence <220> <223> siRNA antisense sequence <400> 2 uuuuugaggg ucuugaucu 19 <210> 3 <211> 20 <212> RNA <213> Artificial sequence <220> <223> siRNA antisense sequence <400> 3 uuuugagggu cuugaucugu 20 <210> 4 <211> 20 <212> RNA <213> Artificial sequence <220> <223> siRNA antisense sequence <400> 4 uuugaggguc uugaucuguu 20 <210> 5 <211> 20 <212> RNA <213> Artificial sequence <220> <223> siRNA antisense sequence <400> 5 aaggaggcaa acuuguuuuu 20 <210> 6 <211> 20 <212> RNA <213> Artificial sequence <220> <223> siRNA antisense sequence <400> 6 aacuuguuga gggucuugau 20 <210> 7 <211> 20 <212> RNA <213> Artificial sequence <220> <223> siRNA antisense sequence <400> 7 aaacuuguug agggucuugu 20 <210> 8 <211> 20 <212> RNA <213> Artificial sequence <220> <223> siRNA antisense sequence <400> 8 caaacuuguu gagggucuuu 20 <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> DNA with CpG motif <400> 9 tccatgacgt tcctgacgtt 20 <210> 10 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> DNA with CpG motif <400> 10 tccatgacgt tcctgacgtt 20 <210> 11 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> DNA with CpG motif <400> 11 tccatgacgt tcctgacgt 19 <210> 12 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> DNA with CpG motif <400> 12 tccatgacgt tcctgacg 18 <210> 13 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> DNA with CpG motif <400> 13 tcctcgacgt ccctga 16 <210> 14 <211> 12 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> DNA with CpG motif <400> 14 catgacgttc ct 12 <210> 15 <211> 6 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> DNA with CpG motif <400> 15 gacgtt 6 <210> 16 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> DNA with CpG motif <400> 16 aacgtcagga acgtcatgga 20 <210> 17 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> VEGF/VPF antisense <400> 17 cacccaagac agcagaaag 19 <210> 18 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> VEGF/VPF antisense <400> 18 ctcccaagac agcagaaag 19 <210> 19 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> VEGF/VPF antisense <400> 19 ctgccaagac agcagaaag 19 <210> 20 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> VEGF/VPF antisense <400> 20 cacccaactc tccagaaag 19 <210> 21 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> VEGF/VPF antisense <400> 21 cacccaagac agcagaatg 19 <210> 22 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> VEGF/VPF antisense <400> 22 cacccaagac agcagattg 19 <210> 23 <211> 6 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 23 ttaggg 6 <210> 24 <211> 11 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 24 gttagggtta g 11 <210> 25 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 25 ggttaggtgt aggttt 16 <210> 26 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 26 gttagggtt 9 <210> 27 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 27 ttagggtta 9 <210> 28 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 28 gttaggttta aggtt 15 <210> 29 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 29 ggtaggtgta gggtg 15 <210> 30 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 30 ggtcggtgtc gggtg 15 <210> 31 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 31 ggcaggcgca gggcg 15 <210> 32 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 32 gttagggtta gggtt 15 <210> 33 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 33 gataagggat tgggat 16 <210> 34 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 34 gagtatgag 9 <210> 35 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 35 gggttaggg 9 <210> 36 <211> 11 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 36 gttagggtta g 11 <210> 37 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 37 ggtaggtgta ggatt 15 <210> 38 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 38 ggtaggtgta ggattt 16 <210> 39 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 39 ggttaggtgt aggttt 16 <210> 40 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 40 ggttaggtgg aggttt 16 <210> 41 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 41 ggttaggttt aggttt 16 <210> 42 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 42 ggttaggtta aggtta 16 <210> 43 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 43 ggtaggtgta gggtg 15 <210> 44 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 44 gttagggtta gggtta 16 <210> 45 <211> 16 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 45 ggttggttgg ttggtt 16 <210> 46 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 46 ccttggttgg ttggttggtt 20 <210> 47 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> telomere 3' overhang sequence <400> 47 ggttggttgg ttggttggtt 20 <210> 48 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> toll-like receptor 9-activating oligonucleotide <400> 48 tcgtcgtttt gtcgttttgt cgtt 24

Claims (123)

1. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 피부, 피하 조직(subcutaneous tissue), 인접 근육(contiguous muscle), 또는 원위 조직(distant tissue)에서 생물학적 활성을 갖는 최대 30개 뉴클레오티드 길이의 최소 하나의 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
2. 청구항 1에 있어서, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 250 나노미터의 직경 범위를 갖는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
3. 청구항 1에 있어서, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 200 나노미터의 직경 범위를 갖는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
4. 청구항 1에 있어서, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 150 나노미터의 직경 범위를 갖는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
5. 청구항 1에 있어서, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 120 나노미터의 직경 범위를 갖는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
6. 청구항 1에 있어서, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 100 나노미터의 직경 범위를 갖는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
7. 청구항 1에 있어서, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 50 나노미터의 직경 범위를 갖는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
8. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 상처 치유(wound healing)를 촉진하거나 향상시키는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
9. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 켈틴 생성 세포 생장 인자-1(KGF-1)을 인코드하는 cDNA를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
10. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자 들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 Connexin43(Cx43) 안티센스 올리고데옥시뉴클레오티드를 인코드하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
11. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 비정상적인 피부 세포 증식을 억제하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
12. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 아데노신 뉴클레오시드를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
13. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 아데닌 뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
14. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 아데노신 트리포스페이트 뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
15. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 인터페론 생산을 촉진하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
16. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 피부에서 콜라겐 합성을 저해하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
17. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 결합조직병을 치료하는데 이용될 수 있는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
18. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 경피증을 치료하는데 이용될 수 있는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
19. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 인터페론 감마를 인코드하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
20. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 선천성 손발톱 비대증을 치료하는데 이용될 수 있는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
21. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 피부 내에서 케라 틴을 인코드하는 유전자를 표적하는 짧은 간섭(interfering) RNA를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
22. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 SEQ ID NO: 1 - 8 중에서 하나의 서열을 포함하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
23. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 피부 염증을 유발하는 분자 경로(molecular pathway)를 억제하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
24. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 시티딘-포스페이트-구아노신 올리고데옥시뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
25. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 시티딘-포스페이트-구아노신-1-포스포로티오에이트, 시티딘-포스페이트-구아노신-5-폴리-시티딘, 또는 이들의 조합을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
26. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 SEQ ID NO: 9 - 16 중에서 하나의 서열을 포함하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
27. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 피부 내에서 VEGF 생산을 감소시키는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
28. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노 미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 항-혈관신생 치료 효과(anti-angiogenesis therapeutic effect)를 갖는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
29. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 건선(psoriasis)을 치료하는데 이용될 수 있는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
30. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 19-mer 안티센스 포스포로티오에이트 올리고데옥시뉴클레오티드를 포함하고, 상기 올리고데옥시뉴클레오티드는 VEGF/VPF mRNA의 번역 개시 부위(translational start site)에 관련하여 염기 6 - 24에 상보적인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
31. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 SEQ ID NO: 17 - 22 중에서 하나의 서열을 포함하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
32. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 UV 방사에 의해 손상된 피부의 DNA 회복 속도(repair rate)를 향상시키는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
33. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 피부 암을 예방하거나 피부 암의 발병을 지연시키는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
34. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 멜라닌 세포(melanocyte) 생산을 촉진하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
35. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 티미딘 이뉴클레오티드(thymidine dinucleotide), 포스포릴화된 티미딘 이뉴클레오티드(pTT), 또는 이들의 조합을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
36. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 텔로미어 3' 오버행 서열에 실질적으로 상동한 DNA 올리고뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
37. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 SEQ ID NO: 23 - 48 중에서 하나의 서열을 포함하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
38. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자 들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 5'-포스포릴화된 9개 염기 올리고뉴클레오티드(p9mer)를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
39. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 SEQ ID NO.: 34의 서열을 포함하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
40. 입자 집단을 포함하는 나노입자들의 현탁액 또는 분산액에 있어서, 나노입자들의 현탁액 또는 분산액은 나노에멀젼을 포함하고, 대부분의 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 나노입자들은 암을 치료하는데 이용될 수 있는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
41. 청구항 40에 있어서, 암은 흑색종(melanoma)인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
42. 청구항 40에 있어서, 암은 전이성 흑색종(metastatic melanoma)인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
43. 청구항 1 내지 42중 어느 한 항에 있어서, 나노에멀젼은 최소한 오일, 계면활성제, 물, 그리고 핵산의 프레믹스(pre-mix)를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
44. 청구항 1 내지 42중 어느 한 항에 있어서, 나노에멀젼은 단일 오일, 단일 계면활성제, 물, 그리고 핵산의 프레믹스를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
45. 청구항 1 내지 42중 어느 한 항에 있어서, 나노에멀젼은 단일 오일, 단일 계면활성제, 물, 그리고 핵산의 프레믹스로 구성되고; 여기서

    오일은 포화된, 그리고 불포화된 아몬드(almond), 살구 핵(apricot kernel), 아보카도(avocado), 바바수야자(babassu), 베르가모트(bergamot), 블랙 큐런트 오일(black current seed), 지치(borage), 캐이드(cade), 카모마일(camomile), 카놀라(canola), 캐러웨이(caraway), 브라질납야자(carnauba), 캐스터(castor), 육계(cinnamon), 코코아 버터(cocoa butter), 코코넛(coconut), 대구 간(cod liver), 커피(coffee), 옥수수(corn), 목화 씨(cotton seed), 에뮤(emu), 유칼립투스(eucalyptus), 달맞이꽃(evening primrose), 물고기(fish), 아마씨(flaxseed), 게라니올(geraniol), 조롱박(gourd), 포도씨(grape seed), 헤이즐넛(hazel nut), 우슬초(hyssop), 호호바(jojoba), 쿠쿠이넛(kukui nut), 라반딘(lavandin), 라벤 더(lavender), 레몬(lemon), 리트세아 쿠베바(litsea cubeba), 마스카데미아 넛(macademia nut), 당아욱(mallow), 망고씨(mango seed), 메도우폼씨드(meadowfoam seed), 밍크(mink), 육두구(nutmeg), 올리브(olive), 오렌지(orange), 오렌지 러피(orange roughy), 종려나무(palm), 종려나무 핵(palm kernel), 복숭아 핵(peach kernel), 땅콩(peanut), 양귀비 씨(poppy seed), 호박씨(pumpkin seed), 평지씨(rapeseed), 라이스 브란(rice bran), 로즈마리(rosemary), 홍화(safflower), 백단(sandalwood), 사스쿠아나(sasquana), 향신료(savoury), 바다 갈매나무(sea buckthorn), 참깨(sesame), 시어 버터(shea butter), 실리콘(silicone), 콩(soybean), 해바라기(sunflower), 차나무(tea tree), 엉겅퀴(thistle), 슈바키(tsubaki), 베티버(vetiver), 호두(walnut), 윗점(wheat germ oil); 부틸 스테아레이트(butyl stearate); 카프릴 트리글리세리드(caprylic triglyceride); 카프린 트리글리세리드(capric triglyceride); 사이클로메티콘(cyclomethicone); 디에틸 아세케이트(diethyl sebacate); 디테미콘 360(dimethicone 360); 이소프로필 미리스테이트(isopropyl myristate); 중간 사슬 트리글리세리드(medium chain triglyceride); 미네랄 오일(mineral oil); 옥틸도데카놀(octyldodecanol); 올레일알코올(oleyl alcohol); 실리콘 오일(silicone oil)로 구성된 군에서 선택되고;

    계면활성제는 포스포글리세리드; 포스파티딜콜린스; 디팔미토일 포스파티딜콜린(DPPC); 디팔리토일 포스파티딜콜린(DP®PC); 디올레일포스파티딜 에탄올아민(DOPE); 디올레일옥시프로필트리에틸암모늄(DOTMA); 디올레오일포스파티딜콜린; 콜레스테롤; 콜레스테롤 에스테르; 디아실글리세롤; 디아실글리세롤숙시네이트; 디포스파티딜 글리세롤(DPPG); 헥산데칸올; 지방 알코올, 예를 들면, 폴리에틸렌 글리콜(PEG); 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에테르; 표면 활성 지방 산, 예를 들면, 팔미트 산 또는 올레산; 지방산; 지방산 모노글리세리드; 지방산 디글리세리드; 지방산 아미드; 소르비탄 트리올레이트(SPAN®85) 글리코콜레이트; 소르비탄 모노라우레이트(SPAN®20); 폴리소르베이트20(TWEEN®20); 폴리소르베이트60(TWEEN®60); 폴리소르베이트65(TWEEN®65); 폴리소르베이트80(TWEEN®80); 폴리소르베이트85(TWEEN®85); 폴리옥시에틸렌 모노스테아레이트; 설팩틴(surfactin); 폴록소머(poloxomer); 소르비탄 지방산 에스테르, 예를 들면, 소르비탄 트레올레이트; 레시틴; 리소레시틴; 포스파티딜세린; 포스파티딜이노시톨; 스핑고미엘린; 포스파티딜에탄올아민(세팔린); 카르디올리핀; 포스파티드산; 세레브로시드; 디세틸포스페이트; 디팔미토일포스파티딜글리세롤; 스테아릴아민; 도데실아민; 헥사데실-아민; 아세틸팔미테이트; 글리세롤 리시놀레이트; 헥사데실 스테아레이트; 이소프로필 미리스테이트; 틸록사폴(tyloxapol); 폴리(에틸렌글리콜)5000-포스파티딜에탄올아민; 폴리(에틸렌글리콜)400-모노스테아레이트; 포스포리피드; 높은 계면활성제 특성을 갖는 합성 및/또는 천연 계면활성제; 디옥시콜레이트; 사이클로덱스트린; 무질서 염(chaotropic salt); 또는 이온 짝짓기 작용제(ion pairing agent)로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
46. 청구항 1 내지 42중 어느 한 항에 있어서, 나노에멀젼은 중간 사슬 트리글리 세리드, Tween, 물, 그리고 핵산의 프레믹스를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
47. 청구항 1 내지 42중 어느 한 항에 있어서, 나노에멀젼은 콩 오일, Tween, 물, 그리고 핵산의 프레믹스를 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
48. 청구항 1 내지 42중 어느 한 항에 있어서, 나노에멀젼은 단일 오일, 단일 계면활성제, 물, 그리고 핵산의 프레믹스를 포함하고; 여기서

    오일은 포화된, 그리고 불포화된 아몬드(almond), 살구 핵(apricot kernel), 아보카도(avocado), 바바수야자(babassu), 베르가모트(bergamot), 블랙 큐런트 오일(black current seed), 지치(borage), 캐이드(cade), 카모마일(camomile), 카놀라(canola), 캐러웨이(caraway), 브라질납야자(carnauba), 캐스터(castor), 육계(cinnamon), 코코아 버터(cocoa butter), 코코넛(coconut), 대구 간(cod liver), 커피(coffee), 옥수수(corn), 목화 씨(cotton seed), 에뮤(emu), 유칼립투스(eucalyptus), 달맞이꽃(evening primrose), 물고기(fish), 아마씨(flaxseed), 게라니올(geraniol), 조롱박(gourd), 포도씨(grape seed), 헤이즐넛(hazel nut), 우슬초(hyssop), 호호바(jojoba), 쿠쿠이넛(kukui nut), 라반딘(lavandin), 라벤더(lavender), 레몬(lemon), 리트세아 쿠베바(litsea cubeba), 마스카데미아 넛(macademia nut), 당아욱(mallow), 망고씨(mango seed), 메도우폼씨드(meadowfoam seed), 밍크(mink), 육두구(nutmeg), 올리브(olive), 오렌 지(orange), 오렌지 러피(orange roughy), 종려나무(palm), 종려나무 핵(palm kernel), 복숭아 핵(peach kernel), 땅콩(peanut), 양귀비 씨(poppy seed), 호박씨(pumpkin seed), 평지씨(rapeseed), 라이스 브란(rice bran), 로즈마리(rosemary), 홍화(safflower), 백단(sandalwood), 사스쿠아나(sasquana), 향신료(savoury), 바다 갈매나무(sea buckthorn), 참깨(sesame), 시어 버터(shea butter), 실리콘(silicone), 콩(soybean), 해바라기(sunflower), 차나무(tea tree), 엉겅퀴(thistle), 슈바키(tsubaki), 베티버(vetiver), 호두(walnut), 윗점(wheat germ oil); 부틸 스테아레이트(butyl stearate); 카프릴 트리글리세리드(caprylic triglyceride); 카프린 트리글리세리드(capric triglyceride); 사이클로메티콘(cyclomethicone); 디에틸 아세케이트(diethyl sebacate); 디테미콘 360(dimethicone 360); 이소프로필 미리스테이트(isopropyl myristate); 중간 사슬 트리글리세리드(medium chain triglyceride); 미네랄 오일(mineral oil); 옥틸도데카놀(octyldodecanol); 올레일알코올(oleyl alcohol); 실리콘 오일(silicone oil)로 구성된 군에서 선택되고;

    계면활성제는 포스포글리세리드; 포스파티딜콜린스; 디팔미토일 포스파티딜콜린(DPPC); 디팔리토일 포스파티딜콜린(DPPC); 디올레일포스파티딜 에탄올아민(DOPE); 디올레일옥시프로필트리에틸암모늄(DOTMA); 디올레오일포스파티딜콜린; 콜레스테롤; 콜레스테롤 에스테르; 디아실글리세롤; 디아실글리세롤숙시네이트; 디포스파티딜 글리세롤(DPPG); 헥산데칸올; 지방 알코올, 예를 들면, 폴리에틸렌 글리콜(PEG); 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에테르; 표면 활성 지방 산, 예를 들면, 팔미 트 산 또는 올레산; 지방산; 지방산 모노글리세리드; 지방산 디글리세리드; 지방산 아미드; 소르비탄 트리올레이트(SPAN®85) 글리코콜레이트; 소르비탄 모노라우레이트(SPAN®20); 폴리소르베이트20(TWEEN®20); 폴리소르베이트60(TWEEN®60); 폴리소르베이트65(TWEEN®65); 폴리소르베이트80(TWEEN®80); 폴리소르베이트85(TWEEN®85); 폴리옥시에틸렌 모노스테아레이트; 설팩틴(surfactin); 폴록소머(poloxomer); 소르비탄 지방산 에스테르, 예를 들면, 소르비탄 트레올레이트; 레시틴; 리소레시틴; 포스파티딜세린; 포스파티딜이노시톨; 스핑고미엘린; 포스파티딜에탄올아민(세팔린); 카르디올리핀; 포스파티드산; 세레브로시드; 디세틸포스페이트; 디팔미토일포스파티딜글리세롤; 스테아릴아민; 도데실아민; 헥사데실-아민; 아세틸팔미테이트; 글리세롤 리시놀레이트; 헥사데실 스테아레이트; 이소프로필 미리스테이트; 틸록사폴(tyloxapol); 폴리(에틸렌글리콜)5000-포스파티딜에탄올아민; 폴리(에틸렌글리콜)400-모노스테아레이트; 포스포리피드; 높은 계면활성제 특성을 갖는 합성 및/또는 천연 계면활성제; 디옥시콜레이트; 사이클로덱스트린; 무질서 염(chaotropic salt); 또는 이온 짝짓기 작용제(ion pairing agent)로 구성된 군에서 선택되고;

    오일에 대한 계면활성제의 비율(중량으로)은 0.5:1 내지 2:1인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
49. 청구항 1 내지 48중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 또는 분산액은 고전단력(high shear force)에 노출에 의해 산출되는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분 산액.
50. 청구항 1 내지 49중 어느 한 항에 있어서, 안정한 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
51. 청구항 1 내지 50중 어느 한 항에 있어서, 핵산은 나노입자들 내에 캡슐화되는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
52. 청구항 1 내지 50중 어느 한 항에 있어서, 생물학적 활성 물질은 미셀 막(micellar membrane) 내에 파묻히는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
53. 청구항 1 내지 50중 어느 한 항에 있어서, 생물학적 활성 물질은 입자 표면과 연합되는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
54. 청구항 1 내지 53중 어느 한 항에 있어서, 피부를 변형 또는 변화시키지 않으면서 피부에 침투할 수 있는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
55. 청구항 1 내지 53중 어느 한 항에 있어서, 피부 침투 강화제(skin permeation enhancer) 또는 마찰제(abrasive)의 사용 없이 피부를 침투할 수 있는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
56. 청구항 1 내지 53중 어느 한 항에 있어서, 피부 침투 강화제(skin permeation enhancer) 또는 마찰제(abrasive)의 사용 없이 피부의 상층(top layer)을 침투할 수 있는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
57. 청구항 56에 있어서, 피부의 상층은 각질층의 표면인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
58. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 오일과 계면활성제는 0.5 - 2.0 범위의 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
59. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 오일과 계면활성제는 0.5 - 1.5 범위의 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
60. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 오일과 계면활성제는 대략 1.0의 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
61. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 또는 분산액 내에서 오일의 비율 범위는 1% - 30%인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
62. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 또는 분산액 내에서 오일의 비율 범위는 대략 5% 내지 대략 9%인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
63. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 또는 분산액 내에서 계면활성제의 비율 범위는 1% - 30%인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
64. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 또는 분산액 내에서 계면활성제의 비율 범위는 대략 5% 내지 대략 9%인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
65. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 물과 계면활성제는 0.5 - 2.0 범위의 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
66. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 물과 계면활성제는 0.5 - 1.5 범위의 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
67. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 물과 계면활성제는 대략 1.0의 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
68. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 또는 분산액 내에서 물의 비율 범위는 1% - 30%인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
69. 청구항 47 내지 57중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 또는 분산액 내에서 물의 비율 범위는 대략 5% 내지 대략 9%인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
70. 청구항 1 내지 69중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 또는 분산액은 독성 용매가 실질적으로 없는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
71. 청구항 1 내지 70중 어느 한 항에 있어서, 나노입자는 나노미셀인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
72. 청구항 1 내지 71중 어느 한 항에 있어서, 나노입자는 추가의 생물학적 활성 물질을 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
73. 청구항 72에 있어서, 추가의 생물학적 활성 물질은 화학치료제인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
74. 청구항 73에 있어서, 추가의 생물학적 활성 물질은 다카르바진(dacarbazine)인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
75. 청구항 1 내지 74중 어느 한 항에 있어서, 화학치료제를 포함하는 입자의 이차 집단을 포함하는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
76. 청구항 75에 있어서, 화학치료제는 다카르바진(dacarbazine)인 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
77. 청구항 77 또는 78에 있어서, 흑색종을 치료하는데 사용되는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
78. 청구항 77 또는 78에 있어서, 전이성 흑색종을 치료하는데 사용되는 것을 특징으로 하는 현탁액 또는 분산액.
79. 암을 치료하기 위한 입자에 있어서, 입자는 대략 10 나노미터 내지 대략 300 나노미터의 직경을 갖고, 이들 입자는 피부, 피하 조직(subcutaneous tissue), 인접 근육(contiguous muscle), 또는 원위 조직(distant tissue)에서 생물학적 활성을 갖는 최대 30개 뉴클레오티드 길이의 최소 하나의 핵산; 그리고 최소 하나의 화학치료제를 포함하는 것을 특징으로 하는 입자.
80. 청구항 79에 있어서, 핵산은 SEQ ID NO: 1 - 22 중에서 하나의 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 입자.
81. 청구항 79에 있어서, 핵산은 포스포릴화된 티미딘 이뉴클레오티드, SEQ ID NO.: 34에 열거된 서열을 포함하는 핵산, 텔로미어 3' 오버행 서열에 실질적으로 상동한 핵산, 톨-유사 수용체 9(toll-like receptor 9)-활성화 활성을 갖는 핵산, 그리고 이들의 조합으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 입자.
82. 청구항 79에 있어서, 핵산은 SEQ ID NO: 23 - 48 중에서 하나의 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 입자.
83. 청구항 79 내지 82중 어느 한 항에 있어서, 화학치료제는 다카르바진(dacarbazine)인 것을 특징으로 하는 입자.
84. 청구항 79 내지 83중 어느 한 항에 있어서, 암은 흑색종인 것을 특징으로 하는 입자.
85. 청구항 79 내지 83중 어느 한 항에 있어서, 암은 전이성 흑색종인 것을 특징으로 하는 입자.
86. 청구항 1 내지 85중 어느 한 항의 현탁액 또는 분산액과 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물.
87. 청구항 86에 있어서, 크림, 로션, 겔, 연고, 스프레이, 분말, 피부 연화제, 립스틱, 일광차단제(sunscreen), 그리고 이들의 조합으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
88. 청구항 1 내지 87중 어느 한 항의 현탁액, 분산액, 입자, 또는 약학 조성물을 제공하는 단계;

    상기 조성물을 개체의 피부에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
89. 청구항 89에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 접착제 패취를 이용하여 경피 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
90. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 주걱(spatula)을 이용하여 경피 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
91. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 면봉(swab)을 이용하여 경피 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
92. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 바늘없는 주사기를 이용하여 경피 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
93. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 장갑은 낀 손가락을 이용하여 경피 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
94. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 보호되지 않은 손가락을 이용하여 경피 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
95. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 피부의 비-표적 부위에 조성물을 적용하지 않으면서 피부 상에서 표적 부위에 조성물의 적용을 가능하게 하는 장치를 이용하여 경피 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
96. 청구항 88에 있어서, 모든 핵산이 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
97. 청구항 88에 있어서, 핵산 중에서 최소 99%가 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
98. 청구항 88에 있어서, 핵산 중에서 최소 95%가 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
99. 청구항 88에 있어서, 핵산 중에서 최소 90%가 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
100. 청구항 88에 있어서, 핵산 중에서 최소 75%가 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
101. 청구항 88에 있어서, 핵산 중에서 최소 50%가 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
102. 청구항 88에 있어서, 핵산 중에서 최소 25%가 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
103. 청구항 88에 있어서, 핵산 중에서 최소 10%가 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
104. 청구항 88에 있어서, 핵산 중에서 최소 1%가 피부를 침투하는 것을 특징으로 하는 방법.
105. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 정맥 주사, 근육내 주사, 피하 주사, 복막 주사, 또는 주입을 통하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
106. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 미용 효과를 달성하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
107. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 피부의 태닝(tanning) 외양을 달성하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
108. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 상처 치유를 촉진하거나 향상시키기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
109. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 비정상적 피부 세포 증식을 억제하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
110. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 인터페론 생산을 촉진하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
111. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 피부 내에서 콜라겐 합성을 저해하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
112. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 결합조직병을 치료하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
113. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 경피증을 치료하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
114. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 선천성 손발톱 비대증을 치료하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
115. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 피부 염증을 유발하는 분자 경로를 억제하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
116. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 피부 내에서 VEGF 생산을 감소시키기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
117. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 항-혈관신생 치료 효과를 달성하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
118. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 건선을 치료하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
119. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 UV 방사에 의해 손상된 피부의 DNA 회복 속도를 향상시키기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
120. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 피부 암을 예방하거나 피부 암의 발병을 지연시키기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
121. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 멜라닌 세포 생산을 촉진하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
122. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 흑색종 피부 암을 치료하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
123. 청구항 88에 있어서, 현탁액, 분산액, 입자, 또는 조성물은 전이성 흑색종 피부 암을 치료하기 위하여 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.