CH652410A5 - Herstellung von anti-t-lymphozyten-globulin. - Google Patents

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CH652410A5
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Fresenius Chem Pharm Ind
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652410
2

Claims (11)

PATENTANSPRÜCHE 1. Verfahren zur Herstellung von Anti-T-Lymphozyten-Globulin, aus dem Serum immunisierter Tiere, dadurch gekennzeichnet, dass zur Immunisierung Zellen der Zellinie JM mit der Hinterlegungsnummer CNCM 1147 verwendet werden. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Anti-T-Lymphozyten-Globulin aus dem Serum immunisierter Kaninchen gewonnen wird. Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Anti-T-Lymphozyten-Globulin aus dem Serum immunisierter Tiere. Hochwirksame Immunsuppressiva werden bei Organtransplantationen zur Unterdrückung einer Transplantat-Ab-stossung und bei Knochenmarktransplantationen zur Behandlung der Spender-gegen-Wirt-Erkrankungen eingesetzt. Ihre Herstellung erfolgte bislang so, dass lymphatische Zellen in den Körper eines Tieres, zum Beispiel Pferdes oder Kaninchens, eingesprizt werden und das Anti-Lymphozy-ten-Globulin aus dem Serum der immunisierten Tiere gewonnen wird. Nachteilig an diesem Herstellungsverfahren ist, dass lymphatische Zellen verwendet werden, deren Beschaffung ethische Probleme aufwirft und sie nur in begrenzter Menge zur Verfügung stehen. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, für die Herstellung von Anti-T-Lymphozyten-Globulin in vitro gezüchtete Zellen zu verwenden. Überraschend wurde nun gefunden, dass es bei Verwendung von Zellen der Zellinie JM zur Immunisierung möglich ist, Anti-T-Lymphozyten-Globulin herzustellen, das ein Immunsuppressivum mit ausgezeichneter Wirkung darstellt. Die Herstellung und die Eigenschaften der Zellinie JM sind in der Veröffentlichung von U. Schneider, H.U. Schwenk und G. Bornkamm in Int. J. Cancer 19, 621-626 (1977) beschrieben. Die Zellinie JM ist beim Institut Pasteur Collection Nationale de Culture de microorganismes, 128, rue du 5 Docteur Roux, 75724 Paris - FR (C.N.C.M.) unter der Nummer 1147 hinterlegt. Die Zellen sind in vitro beliebig vermehrbar, ohne dass sie ihre Eigenschaften verlieren. Nachstehend wird ein Ausführungsbeispiel zur Herstellung von Anti-Thymozytenglobulin unter Verwendung der io T-Lymphoblasten-Zell-Linie-JM beschrieben, das aus folgenden Schritten besteht:
1. Zentrifugieren der T-Lymphoblasten-Zellen.
2. Einstellung der Zellsuspension mit einem physiologischen Zellmedium (CL 15), auf eine Zellkonzentration
15 von 30 X 10® Zellen pro ml.
3. Immunisieren der Kaninchen durch intravenöse Applikation von 3 ml Zellsuspension in die Ohrvene.
4. Nach 4wöchiger Immunisierungszeit werden die Tiere entblutet.
20
5. Durch Zentrifugation des Blutes wird das Serum gewonnen.
6. Nach Bestimmung der Antikörper-Titer und der Sterilitätsprüfungen wird das Serum der Kaninchen gepoolt.
7. Absorption des Serums mit verschiedenen Human-25 Zellen.
8. Aufreinigung des Antiserums zur Globulinfraktion mittels Amoniumsulfat-Fällung und anschliessender Säulenchromatographie.
9. Immunglobulinfraktion wird auf einen bestimmten 30 Eiweissgehalt eingestellt (20 mg/ml).
10. Anschliessend wird das Anti-Thymozyten-Globulin ultra-zentrifugiert und steril filtriert.
11. Abfüllung des Immunglobulins in Ampullen und Durchführung der Endkontrollen (Qualitäts-, Steril- und
35 Pyrogentestung).
v
CH905/82A 1981-02-12 1982-02-12 Herstellung von anti-t-lymphozyten-globulin. CH652410A5 (de)

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