BRPI0806468A2

BRPI0806468A2 - agonistas de gpcr de piperidina

Info

Publication number: BRPI0806468A2
Application number: BRPI0806468-7A
Authority: BR
Inventors: Lisa Sarah Bertram; Matthew Colin Thor Fyfe; Revathy Perpetua Jeevaratnam; John Keily; Simon Andrew Swain
Original assignee: Prosidion Ltd
Priority date: 2007-01-04
Filing date: 2008-01-04
Publication date: 2011-09-27
Also published as: AR064736A1; PL2114931T3; DK2114931T3; EP2114931A1; ES2376015T3; EA015805B1; CA2674093A1; NZ578144A; EP2114931B1; IL199680A0; WO2008081205A1; EA015805B9; HRP20110964T1; CN101627036A; EA200900796A1; SA08280756B1; PT2114931E; SI2114931T1; CL2008000017A1; EP2383270A1

Abstract

AGONISTAS DE GPCR DE PIPERIDINA. A presente invenção refere-se a compostos de fórmula (I): ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, são agonistas de GPCR e são úteis para o tratamento de obesidade e diabetes.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "AGONISTAS DE GPCR DE PIPERIDINA".

Antecedentes a Invenção

A presente invenção refere-se a agonistas de receptor acoplado à proteína G (GPCR). Em particular, a presente invenção refere-se a agonis- tas de GPCR que são úteis para o tratamento de obesidade, por exemplo, como reguladores de saciedade, síndrome metabólica e para o tratamento de diabetes.

Obesidade é caracterizada por uma massa de tecido adiposo excessiva com relação ao tamanho do corpo. Clinicamente, a massa de gor- dura corporal é estimada pelo índice de massa corporal (BMI; pe- so(kg)/altura(m)2), ou circunferência da cintura. Indivíduos são considerados obesos quando o BMI é maior do que 30 e nesse sentido são conseqüências médicas estabelecidas de estarem em sobrepeso. Tem sido uma visão mé- dica aceita durante algum tempo que um peso corporal aumentado, especi- almente como um resultado de gordura corporal abdominal, é associado com um risco aumentado para diabetes, hipertensão, doença cardíaca, e numerosas outras complicações de saúde, tais como artrite, acidente vascu- lar cerebral, doença da vesícula biliar, problemas musculares e respiratórios, dor de dorso e até certos cânceres.

Metodologias farmacológicas ao tratamento de obesidade foram principalmente envolvidos com redução de massa de gordura por alteração do equilíbrio entre ingestão e gasto de energia. Muitos estudos claramente estabeleceram a ligação entre adiposidade e a circuição do cérebro envolvi- da na regulação de homeostasia de energia. Evidência direta e indireta su- gere que vias serotoninérgicas, dopaminérgicas, adrenérgicas, colinérgicas, de endocanabinóide, de opióide, e histaminérgicas além de muitas trilhas de neuropeptídeo (por exemplo, neuropeptídeo Y e melanocortinas) estão en- vovlidas no controle central de ingestão e gasto de energia. Centros hipota- lâmicos são também capazes de perceber hormônios periféricos envolvidos na manutenção de peso corporal e grau de adiposidade, tais como insulina e leptina, e peptídeos derivados de tecido de gordura. Fármacos direcionados à patofisiologia associada com diabetes Tipo I dependente de insulina e diabetes Tipo Il não dependente de insulina possuem muitos efeitos laterais potenciais e não tratam adequadamente a dislipidemia e hiperglicemia em uma alta proporção de pacientes. O trata- mento é freqüentemente focado em necessidades de pacientes individuais usando dieta, exercício, agentes hipoglicêmicos e insulina, mas há uma ne- cessidade contínua por novos agentes antidiabéticos, particularmente aque- les que podem ser melhor tolerados com menos efeitos adversos.

Similarmente, a síndrome metabólica (síndrome X) coloca a pessoa em alto risco de doença da artéria coronária, e é caracterizada por um grupo de fatores de risco incluindo obesidade central (tecido de gordura excessivo na região abdominal), intolerância à glicose, triglicerídeos altos e colesterol de HDL baixo, e pressão sangüínea alta. Isquemia miocárdica e doença microvascular é uma morbidez estabelecida associada com síndro- me metabólica não tratada ou pobremente controlada.

Existe uma necessidade contínua de novos agentes antiobesi- dade e antidiabéticos, particularmente aqueles que são bem tolerados com poucos efeitos adversos.

GPR119 (previamente referido como GPR116) é um GPCR i- dentificado como SNORF25 em W000/50562 que descreve tanto os recep- tores de humano quanto de rato, US 6.468.756 também descreve o receptor de camundongo (números de acessão: AAN95194 (humano), AAN95195 (rato) e ANN95196 (camundongo)).

Em humanos, GPR119 é expresso no pâncreas, intestino delga- do, cólon e tecido adiposo. O perfil de expressão do receptor GPR119 de humano indica sua utilidade potencial como um alvo para o tratamento de obesidade e diabetes.

Pedidos de patente internacional W02005/061489, W02006/070208, W02006/067531 e W02006/067532 descrevem derivados heterocíclicos como agonistas de receptor GPR119. Pedidos de patente in- ternacional PCT/GB2006/050176, PCT/GB2006/050177, PCT/GB2006/050178 e PCT/GB2006/050182 (publicados depois da data de prioridade do presente pedido) descrevem também agonistas de receptor GPR119.

A presente invenção refere-se a agonistas de GPR119 que são úteis para o tratamento de obesidade, por exemplo, como reguladores peri- féricos de saciedade, síndrome metabólica e para o tratamento de diabetes.

Sumário da Invenção

Compostos de fórmula (I):

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ou sais farmaceuticamente aceitáveis destes, são agonistas de GPR119 e são úteis para o tratamento profilático ou terapêutico de obesidade e diabe- tes.

Descrição Detalhada Da Invenção

A presente invenção é direcionada a um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste:

<formula>formula see original document page 4</formula>

em que um dentre X e Y é O e o outro é N;

R1 é -CONHR5;

R2 é hidrogênio, halo ou metila;

R3 é hidrogênio ou metila;

R4 é C2-5 alquila; e

R5 é hidrogênio, C1-3 alquila, ou C2-3alquila substituída por hidró- xi. Em uma modalidade da invenção X é O e em outra Y é O.

X é de preferência O.

Y é de preferência N.

R2 é de preferência hidrogênio, flúor, cloro ou metila, cada um dos quais representa uma modalidade separada da invenção. R2 é mais pre- ferivelmente metila ou flúor, especialmente metila.

Em uma modalidade da invenção, R3 é hidrogênio e em outra R3 é metila. R3 é de preferência hidrogênio. Quando R3 é metila, o estereocen- tro criado de preferência possui a (R)-configuração.

R4 é de preferência C3-4 alquila, particularmente n-propila, iso- propila, ou íerc-butila, mais preferível mente C3 alquila, particularmente iso- propila.

Quando R5 é C2-3 alquila substituída por hidróxi, ele pode ser substituído por um ou mais, por exemplo, 1 ou 2, de preferência 1, grupo de hidróxi.

R5 é de preferência C1-3 alquila ou C2-3 alquila substituída por hidróxi, mais preferivelmente C2-3 alquila substituída por hidróxi, por exem- plo, 2-hidroxietila, 2-hidróxi-1 -metiletila, 2,3-di-hidroxipropila ou 2-hidróxi-1- hidroximetiletila, de preferência 2-hidroxietila ou 2-hidróxi-1-metiletila, até mais preferivelmente 2-hidróxi-1-metiletila, especialmente (R)-2-hidróxi-1- metiletila.

Embora os grupos preferidos para cada variável tenham sido de modo geral listados acima separadamente para cada variável, compostos preferidos desta invenção incluem aqueles nos quais várias ou cada variável na fórmula (I) é selecionada dos grupos preferidos, mais preferidos ou parti- cularmente listados para cada variável. Por esse motivo, esta invenção pre- tende incluir todas as combinações de grupos preferidos, mais preferidos ou particularmente listados.

Compostos específicos da invenção que podem ser menciona- dos são aqueles incluídos nos Exemplos e sais farmaceuticamente aceitá- veis dos mesmos.

Tal como usado aqui, a não ser que estabelecido de outra forma, "alquila" quer dizer cadeias de carbono que podem ser lineares ou ramifica- das ou combinações dos mesmos. Exemplos de grupos de alquila incluem metila, etila, propila, isopropila, butila, sec- e ferc-butila e pentila.

O termo "halo" inclui átomos de flúor, cloro, bromo, e iodo, em particular flúor ou cloro, especialmente flúor.

Compostos descritos aqui podem conter um ou mais centros as- simétricos e podem desta forma dar origem a diastereômeros e isômeros ópticos. A presente invenção inclui todos os tais diastereômeros possíveis assim como suas misturas racêmicas, seus enantiômeros resolvidos subs- tancialmente puros, todos os isômeros geométricos possíveis, e sais farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos. A fórmula (I) acima é mostrada sem uma estereoquímica definitiva em certas posições. A presente invenção in- clui todos os estereoisômeros de fórmula (I) e sais farmaceuticamente acei- táveis dos mesmos. Além disso, misturas de estereoisômeros assim como estereoisômeros específicos isolados são também incluídas. Durante o cur- so dos procedimentos sintéticos usados para preparar tais compostos, ou em uso de procedimentos de racemização ou epimerização conhecidos à- queles versados na técnica, os produtos de tais procedimentos podem ser uma mistura de estereoisômeros.

Quando o composto de fórmula (I) e sais farmaceuticamente a- ceitáveis destes existem na forma de solvatos ou formas polimórficas, a pre- sente invenção inclui quaisquer possíveis solvatos e formas polimórficas. Um tipo de um solvente que forma o solvato não está particularmente limitado, contanto que o solvente seja farmacologicamente aceitável. Por exemplo, água, etanol, propanol, acetona ou outros mais podem ser usados.

O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se a sais preparados de bases ou ácidos não-tóxicos farmaceuticamente aceitáveis. Sais derivados de bases incluem aqueles derivados de bases tais como, por exemplo, sais de potássio e sódio e outros mais. Sais derivados de ácidos não-tóxicos farmaceuticamente aceitáveis, incluem aqueles derivados de ácidos inorgânicos e orgânicos tais como, por exemplo, ácido hidroclórico, metanosulfônico, sulfúrico, p-toluenosulfônico e outros mais. Uma vez que os compostos de fórmula (I) são pretendidos para uso farmacêutico, eles são de preferência fornecidos em forma substancial- mente pura, por exemplo pelo menos 60% puros, mais adequadamente pelo menos 75% puros, especialmente pelo menos 98% puros (% estão em um peso para base em peso).

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados tal como descrito abaixo. PG representa um grupo de proteção, G é um oxadiazol substituído tal como definido acima, e R1, R2, R3 e R4 são também tal como definido acima.

Compostos de fórmula (II), onde PG é um grupo de proteção adequado, podem ser facilmente preparados de compostos conhecidos (Es- quema 1). Por exemplo, o éster de etila do composto (II) onde PG é Boc foi previamente relatado (Patente US 6.518.423). Hidrogenação sob condições padrões produzirá o composto racêmico de fórmula (III). Redução quiral do alqueno sob condições adequadas tais como uma hidrogenação na presen- ça de um catalisador quiral produz compostos de fórmula (III) em excesso enantiomérico alto. Um exemplo de um catalisador adequado é [Rh(norbornadieno)2]BF4 e (S)-1-[(R)-2-(di-terc-butilfosfino)ferrocenil]- etilbis(2-metilfenil)fosfina. Compostos de fórmula (IV) podem então ser obti- dos por redução dos ácidos carboxílicos de fórmula (III) sob condições pa- drões, por exemplo borano em um solvente adequado tal como THF. Remo- ção do grupo de proteção é então alcançada sob condições bem-conhecidas daqueles versados na técnica.

Esquema 1

<formula>formula see original document page 7</formula>

O composto de fórmula (V) onde R3 = H é um composto conhe- cido (Esquema 2, Siegel, M. G. e outros Tetrahedron 1999, 55, 11619- 11639). Compostos de fórmula (VII) podem ser preparados de compostos de fórmula (V) sob condições padrões. Por exemplo, tratamento de compostos de fórmula (V) com brometo de cianogênio seguido por condensação da cia- namida (VI) resultante com um composto de fórmula (IX) sob condições pa- drões produz compostos de fórmula (VII) onde X é O. Compostos de fórmula (IX) são ou comercialmente disponíveis, ou facilmente preparados dos cor- respondentes ácidos carboxílicos usando técnicas bem conhecidas. Alterna- tivamente, síntese do oxadiazol regioisomérico, onde Y é O, pode ser alcan- çada por aquecimento de compostos de fórmula (VI) com hidroxilamina para produzir /V-hidroxiguanidinas de fórmula (VIII) que podem ser condensadas com um ácido carboxílico de fórmula (X) sob condições adequadas. Ácidos de fórmula (X) são comercialmente disponíveis.

Compostos da fórmula (VII) podem também ser preparados por condensação de amina (V) com um cloreto de oxadiazol de fórmula (XI), tal como ilustrado no Esquema 3 (Buscemi, S. e outros JCS Perkin I: Org. and Bioorg. Chem., 1988, 1313 e Adembri, G, e outros JCS Perkin I: Org. and Bioorg. Chem., 1981, 1703). Esquema 3

Esquema 2

<formula>formula see original document page 8</formula>

Compostos de fórmula (I) podem ser produzidos como delineado no Esquema 4. Compostos de fórmula (XII) são formados dos ácidos ben- zoicos comercialmente disponíveis sob condições padrões. Por exemplo, tratamento do correspondente ácido benzoico com trimetilsilildiazometano em um solvente adequado, por exemplo tolueno e metanol, em cerca de temperatura ambiente, produz os ésteres de fórmula (XII). Combinação de compostos de fórmula (XII) e fórmula (VII) usando Condições de Mitsunobu1 por exemplo, em um solvente adequado tal como THF, em entre 0°C e tem- peratura ambiente seguido pela adição de trifenilfosfina e di- isopropilazodicarboxilato produz compostos de fórmula (XIII). Hidrólise do éster de fórmula (XIII) sob condições padrões, por exemplo, usando hidróxi- do de lítio aquoso em cerca de temperatura ambiente, produz ácidos carbo- xílicos de fórmula (XIV). Formação de ligação de amida sob condições pa- drões, bem conhecida àqueles com versatilidade na técnica, produz os com- postos desejados de fórmula (I).

Esquema 4

<formula>formula see original document page 9</formula>

Outros compostos de fórmula (I) podem ser preparados por mé- todos análogos àqueles descritos acima ou por métodos conhecidos por si só. Detalhes adicionais para a preparação dos compostos de fórmula (I) são encontrados nos exemplos.

De acordo com um aspecto adicional da invenção, nesse sentido é fornecido um processo para a produção de um composto do mesmo (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tal como definido acima compreendendo acoplamento de um composto de fórmula (XIV): <formula>formula see original document page 10</formula>

com uma amina de fórmula R5NH2, em que R21 R31 R41 R51 X e Y são tal como definido para fórmula (I).

Neste aspecto da invenção é entendido que o processo pode empregar um derivado ativado do composto de fórmula (XIV), por exemplo, um haleto de ácido tal como um cloreto de ácido, um anidrido misto ou um éster ativado.

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados separada- mente ou como bibliotecas de composto compreendendo pelo menos 2, por exemplo, 5 a 1.000 compostos e mais preferivelmente 10 a 100 compostos de fórmula (I). Bibliotecas de composto podem ser preparadas através de um método combinatório de "divisão e mistura" ou através de síntese parale- la múltipla usando ou solução ou química de fase sólida, usando procedi- mentos conhecidos àqueles versados na técnica.

Durante a síntese dos compostos de fórmula (I), grupos funcio- nais labéis nos compostos intermediários, por exemplo, grupos hidróxi, car- bóxi e amino, podem ser protegidos. Os grupos de proteção podem ser re- movidos em qualquer estágio na síntese dos compostos de fórmula (I) ou podem estar presentes no composto final de fórmula (I). Uma discussão compreensiva dos modos nos quais vários grupos funcionais labéis podem ser protegidos e métodos para clivagem dos derivados protegidos resultan- tes é dada em, por exemplo, Protective Groups in Organic Chemistry1 T.W. Greene and P.G.M. Wuts, (1991) Wiley-lnterscience, Nova Iorque, 2a edição.

Quaisquer novos intermediários, tais como aqueles definidos acima, podem ser de uso na síntese de compostos de fórmula (I) e são por esse motivo também incluídos dentro do escopo da invenção, por exemplo, compostos de fórmulas (XIII) e (XIV) ou um sal ou derivado protegido do mesmo.

Tal como indicado acima, os compostos de fórmula (I) são úteis como agonistas de GPR119, por exemplo, para o tratamento e/ou profilaxia de obesidade e diabetes. Para tal uso, os compostos de fórmula (I) geral- mente serão administrados na forma de uma composição farmacêutica.

A invenção também fornece um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso como um farmacêuti- co.

A invenção também fornece uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), em combinação com um por- tador farmaceuticamente aceitável.

De preferência a composição é compreendida de um portador farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz não- tóxica de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitá- vel do mesmo.

Além do mais, a invenção também fornece uma composição farmacêutica para o tratamento de doença através de modulação de G- PR119, resultando no tratamento profilático ou terapêutico de obesidade, por exemplo, por regulação de saciedade, ou para o tratamento de diabetes, compreendendo um portador farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz não-tóxica de composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

As composições farmacêuticas podem opcionalmente compre- ender outros ingredientes ou adjuvantes terapêuticos. As composições in- cluem composições adequadas para administração oral, retal, tópica, e pa- renteral (incluindo subcutânea, intramuscular, e intravenosa), ainda que a rotina mais adequada em qualquer caso irá depender do hospedeiro particu- lar, e natureza e severidade das condições para as quais o ingrediente ativo está sendo administrado. As composições farmacêuticas podem ser conve- nientemente apresentadas em forma de dosagem unitária e preparadas por quaisquer dos métodos bem conhecidos na técnica de farmácia.

Na prática, os compostos de fórmula (I), ou sais farmacêutica- mente aceitáveis dos mesmos, podem ser combinados como o ingrediente ativo em mistura íntima com um portador farmacêutico de acordo com técni- cas de composição farmacêuticas convencionais. O portador pode tomar uma ampla variedade de formas dependendo da forma de preparação dese- jada para administração, por exemplo, oral ou parenteral (incluindo intrave- nosa).

Desta forma, as composições farmacêuticas podem ser apresen- tadas como unidades discretas adequadas para administração oral tais co- mo cápsulas, selos ou comprimidos cada um contendo uma quantidade pre- determinada do ingrediente ativo. Além disso, as composições podem ser apresentadas como um pó, como grânulos, como uma solução, como uma suspensão em um líquido aquoso, como um líquido não-aquoso, como uma emulsão de óleo em água, ou como uma emulsão líquida de água em óleo.

Além das formas de dosagem comuns apresentadas acima, o composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode também ser administrado através de mecanismos de liberação controlada e/ou dis- positivos de liberação. As composições podem ser preparadas por quaisquer dos métodos de farmácia. Em geral, tais métodos incluem uma etapa de co- locação em associação do ingrediente ativo com o portador que constitui um ou mais ingredientes necessários. Em geral, as composições são prepara- das por mistura uniformemente e intimamente do ingrediente ativo com por- tadores líquidos ou portadores sólidos finamente divididos ou ambos. O pro- duto pode então ser convenientemente moldado na apresentação desejada.

Os compostos de fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitá- veis dos mesmos, podem também ser incluídos em composições farmacêu- ticas em combinação com um ou mais outros compostos terapeuticamente ativos.

O portador farmacêutico empregado pode ser, por exemplo, um sólido, líquido, ou gás. Exemplos de portadores sólidos incluem lactose, terra alba, sacarose, talco, gelatina, ágar, pectina, acácia, estearato de magnésio, e ácido esteárico. Exemplos de portadores líquidos são xarope de açúcar, óleo de amendoim, azeite de oliva, e água. Exemplos de portadores gasosos incluem dióxido de carbono e nitrogênio.

No preparo das composições para forma de dosagem oral, quaisquer veículos farmacêuticos convenientes podem ser empregados. Por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois, agentes aromatizantes, preservativos, agentes corantes, e outros mais podem ser usados para formar preparações líquidas orais tais como suspensões, elixires e soluções; enquanto portado- res tais como amidos, açúcares, celulose microcristalina, diluentes, agentes de granulação, lubrificantes, aglutinantes, agentes desintegrantes, e outros mais podem ser usados para formar preparações sólidas orais tais como pós, cápsulas e comprimidos. Por causa de sua facilidade de administração, comprimidos e cápsulas são as unidades de dosagem oral preferidas por meio das quais portadores farmacêuticos sólidos são empregados. Opcio- nalmente, comprimidos podem ser revestidos por técnicas aquosas ou não- aquosas padrões.

Um comprimido contendo a composição desta invenção pode ser preparado por compressão ou modelagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes ou adjuvantes acessórios. Comprimidos prensados podem ser preparados através de compressão, em uma máquina adequada, do in- grediente ativo em uma forma de fluxo livre tal como pó ou grânulos, opcio- nalmente misturado com um aglutinante, lubrificante, diluente inerte, agente tensoativo ou dispersante. Comprimidos modelados podem ser produzidos por modelagem em uma máquina adequada, de uma mistura do composto em pó umedecido com um diluente líquido inerte. Cada comprimido de prefe- rência contém de cerca de 0,05 mg a cerca de 5 g do ingrediente ativo e ca- da selo ou cápsula de preferência contendo de cerca de 0,05 mg a cerca de 5 g do ingrediente ativo.

Por exemplo, uma formulação pretendida para a administração oral a humanos pode conter de cerca de 0,5 mg a cerca de 5 g de agente ativo, combinado com uma quantidade apropriada e conveniente de material portador que pode variar de cerca de 5 a cerca de 95 porcento da composi- ção total. Formas de dosagem unitária geralmente conterão entre cerca de 1 mg a cerca de 2 g do ingrediente ativo, tipicamente 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 800 mg, ou 1000 mg.

Composições farmacêuticas da presente invenção adequadas para administração parenteral podem ser preparadas como soluções ou suspensões dos compostos ativos em água. Um tensoativo adequado pode ser incluído tal como, por exemplo, hidroxipropilcelulose. Dispersões podem também ser preparadas em glicerol, polietileno glicóis líquidos, e misturas dos mesmos em óleos. Além disso, um preservativo pode ser incluído para prevenir o desenvolvimento prejudicial de micro-organismos.

Composições farmacêuticas da presente invenção adequadas para uso injetável incluem soluções ou dispersões aquosas estéreis. Além disso, as composições podem estar na forma de pós estéreis para a prepa- ração extemporânea de tais soluções ou dispersões injetáveis estéreis. Em todos os casos, a forma injetável final deve ser estéril e deve ser eficazmen- te fluida para fácil fluidez na seringa. As composições farmacêuticas devem ser estáveis sob as condições de fabricação e armazenagem; desta forma, de preferência deve ser preservadas contra a ação contaminadora de micro- organismos tais como bactérias e fungos. O portador pode ser um solvente ou veículo de dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (por e- xemplo, glicerol, propileno glicol e polietileno glicol líquido), óleos vegetais, e misturas adequadas dos mesmos.

Composições farmacêuticas da presente invenção podem estar em uma forma adequada para uso tópico tal como, por exemplo, um aerosol, creme, unguento, loção, pó de polvilhamento, ou similares. Além disso, as composições podem estar em uma forma adequada para uso em dispositi- vos transdérmicos. Estas formulações podem ser preparadas, usando um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, por meio de métodos de processamento convencionais. Como um exemplo, um creme ou unguento é preparado por mistura de material hidrofílico e á- gua, junto com cerca de 5% em peso a cerca de 10% em peso do composto, para produzir um creme ou unguento possuindo uma consistência desejada.

Composições farmacêuticas desta invenção podem estar em uma forma adequada para administração retal em que o portador é um sóli- do. É preferível que a mistura forme supositórios de dose unitária. Portado- res adequados incluem manteiga de cacau e outros materiais comumente usados na técnica. Os supositórios podem ser convenientemente formados por primeiramente mistura da composição com o(s) portador(es) amacia- do(s) ou fundido(s) seguido por esfriamento e moldagem em moldes.

Além dos ingredientes portadores acima mencionados, as formu- lações farmacêuticas descritas acima podem incluir, quando apropriado, um ou mais ingredientes portadores adicionais tais como diluentes, tampões, agentes aro matiza ntes, aglutinantes, agentes tensoativos, espessantes, Iu- brificantes, preservativos (incluindo antioxidantes) e similares. Além disso, outros adjuvantes podem ser incluídos para produzir a formulação isotônica com o sangue do recipiente pretendido. Composições contendo um compos- to de fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, podem também ser preparados em forma concentrada de pó ou líquido.

Geralmente, níveis de dosagem na ordem de 0,01 mg/kg a cerca de 150 mg/kg de peso corporal por dia são úteis no tratamento das condi- ções acima indicadas, ou alternativamente cerca de 0,5 mg a cerca de 7 g por paciente por dia. Por exemplo, obesidade pode ser eficazmente tratada pela administração de cerca de 0,01 a 50 mg do composto por quilograma de peso corporal por dia, ou alternativamente cerca de 0,5 mg a cerca de 3,5 g por paciente por dia.

É entendido, no entanto, que o nível de dose específico para qualquer paciente particular dependerá de uma variedade de fatores incluin- do a idade, peso corporal, saúde geral, sexo, dieta, tempo de administração, rotina de administração, taxa de excreção, combinação de fármaco e a seve- ridade da doença particular passando por terapia.

Os compostos de fórmula (I) podem ser usados no tratamento de doenças ou condições nas quais GPR119 desempenha um papel.

Desta forma a invenção também fornece um método para o tra- tamento de uma doença ou condição na qual GPR119 desempenha um pa- pel compreendendo uma etapa de administração a um subjeito em necessi- dade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Doenças ou condições nas quais GPR119 desempenha um papel incluem obesidade e diabetes. No contexto do presente pedido, o tratamento de obesidade pretende abranger o tratamento de doenças ou condições tais como obesidade e outros trans- tornos alimentares associados com ingestão alimentar excessiva, por exem- plo, por redução de apetite e peso corporal, manutenção de redução de peso e prevenção de ressalto e diabetes (incluindo diabetes Tipo 1 e Tipo 2, tole- rância de glicose melhorada, resistência a insulina e complicações diabéti- cas tais como neuropatia, nefropatia, retinopatia, cataratas, complicações cardiovasculares e dislipidemia). E o tratamento de pacientes que possuem uma sensibilidade anormal a gorduras ingeridas resultando em dispepsia funcional. Os compostos da invenção podem também ser usados para tra- tamento de doenças metabólicas tais como síndrome metabólica (síndrome X), tolerância de glicose melhorada, hiperlipidemia, hipertrigliceridemia, hi- percolesterolemia, níveis de HDL baixos e hipertensão.

Os compostos da invenção podem oferecer vantagens sobre compostos agindo por meio de diferentes mecanismos para o tratamento dos distúrbios acima mencionados pelo fato de que eles podem oferecer pro- teção de beta-célula, secreção de AMPc e insulina aumentada e também esvaziamento gástrico lento.

Os compostos da invenção podem também ser usados para tra- tamento de condições caracterizadas por baixa massa óssea tais asostope- nia, osteoporose, artrite reumatóide, osteoartrite, doença periodontal, perda óssea alveolar, perda óssea de osteotomia, perda óssea idiopática da infân- cia, doença de Paget, perda óssea devido a câncer metastático, lesões os- teolíticas, curvatura da espinha e perda de altura.

A invenção também fornece um método para a regulação de sa- ciedade compreendendo uma etapa de administração a um subjeito em ne- cessidade desta de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

A invenção também fornece um método para o tratamento de obesidade compreendendo uma etapa de administração a um subjeito em necessidade da mesma de uma quantidade eficaz de um composto de fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

A invenção também fornece um método para o tratamento de diabetes, incluindo Diabetes Tipo 1 e Tipo 2, particularmente diabetes tipo 2, compreendendo uma etapa de administração a um paciente em necessidade desta de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

A invenção também fornece um método para o tratamento de síndrome metabólica (síndrome X), tolerância de glicose melhorada, hiperli- pidemia, hipertrigliceridemia, hipercolesterolemia, níveis de HDL baixos ou hipertensão compreendendo uma etapa de administração a um paciente em necessidade desta de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

A invenção também fornece um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de uma condição tal como definido acima.

A invenção também fornece o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma condição tal como definido acima.

Nos métodos da invenção, o termo "tratamento" inclui tanto tra- tamento terapêutico quanto profilático.

Os compostos de fórmula (I) podem exibir propriedades vantajo- sas comparado a agonistas de GPR119 conhecidos, por exemplo, os com- postos podem exibir potência ou estabilidade melhorada, ou solubilidade melhorada desta forma melhorando propriedades de absorção e biodisponi- bilidade, ou outras propriedades vantajosas para compostos a serem usados como farmacêuticos.

Os compostos de fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitá- veis dos mesmos, podem ser administrados sozinhos ou em combinação com um ou mais outros compostos terapeuticamente ativos. Os outros com- postos terapeuticamente ativos podem ser para o tratamento da mesma do- ença ou condição como os compostos de fórmula (I) ou uma doença ou con- dição diferente. Os compostos terapeuticamente ativos podem ser adminis- trados simultaneamente, seqüencialmente ou separadamente.

Os compostos de fórmula (I) podem ser administrados com ou- tros compostos ativos para o tratamento de obesidade e/ou diabetes, por exemplo insulina e análogos de insulina, inibidores de Iipase gástrica, inibi- dores de Iipase pancreática, uréias e análogos de sulfonila, biguanidas, ago- nistas de a2, glitazonas, agonistas de PPAR-γ, agonistas de PPAR-α/γ mis- tos, agonistas de RXR, inibidores de oxidação de ácido graxo, inibidores de α-glucosidase, inibidores de dipeptidil peptidase IV, agonistas de GLP-1, por exemplo, análogos e miméticos de GLP-1, β-agonistas, inibidores de fosfo- diesterase, agentes de redução de lipídeo, inibidores de glicogênio fosforila- se, agentes antiobesidade, por exemplo, inibidores de Iipase pancreática, antagonistas de MCH-1 e antagonistas CB-1 (ou agonistas inversos), anta- gonistas de amilina, inibidores de lipoxigenase, análogos de somoestatina, ativadores de glicocinase, antagonistas de glucagon, agonistas de sinaliza- ção de insulina, inibidores de PTPIB, inibidores de gliconeogênese, agentes antilipolíticos, inibidores de GSK, agonistas de receptor de galanina, agentes anoréticos, agonistas de receptor de CCK, leptina, fármacos antiobesidade serotoninérgicos/dopaminérgicos, inibidores de re-captação, por exemplo, sibutramina, antagonistas de CRF, proteínas de ligação de CRF, compostos tiromiméticos, inibidores de aldose redutase, antagonistas de receptor de glicocorticóide, inibidores de NHE-1 ou inibidores de sorbitol desidrogenase.

Terapia de combinação compreendendo a administração de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente antiobesidade representa um aspecto adicio- nal da invenção.

A presente invenção também fornece um método para o trata- mento de obesidade em um mamífero, tal como um humano, cujo método compreende administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e outro agen- te antiobesidade, a um mamífero em necessidade do mesmo.

A invenção também fornece o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e outro agente antio- besidade para o tratamento de obesidade.

A invenção também fornece o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para uso em combinação com outro agente antiobesidade, para o tratamento de obesidade.

O composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitá- vel deste, e o(s) outro(s) agente(s) antiobesidade podem ser coadministra- dos ou administrados seqüencialmente ou separadamente.

Coadministração inclui administração de uma formulação que inclui tanto o composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitá- vel do mesmo, quanto o(s) outro(s) agente(s) antiobesidade, ou a adminis- tração simultânea ou separada de diferentes formulações de cada agente. Onde os perfis farmacológicos do composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, e o(s) outro(s) agente(s) antiobesidade a permite, coadministração dos dois agentes pode ser preferida.

A invenção também fornece o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e outro agente antio- besidade na fabricação de um medicamento para o tratamento de obesida- de.

A invenção também fornece uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e outro agente antiobesidade, e um portador farmaceu- ticamente aceitável. A invenção também abrange o uso de tais composições nos métodos descritos acima.

Agonistas de GPR119 são de uso particular em combinação com agentes antiobesidade de ação central.

O outro agente antiobesidade para uso nas terapias de combi- nação de acordo com este aspecto da invenção é de preferência um modu- lador de CB-1, por exemplo, um de antagonista CB-1 ou agonista inverso. Exemplos de moduladores de CB-1 incluem SR141716 (rimonabante) e SLV-319 ((4S)-(-)-3-(4-clorofenil)-N-metil-N-[(4-clorofenil)sulfonil]-4-fenil-4,5- di-hidro-1 H-pirazol-1-carboxamida); assim como aqueles compostos descri- tos em EP576357, EP656354, WO 03/018060, WO 03/020217, WO 03/020314, WO 03/026647, WO 03/026648, WO 03/027076, WO 03/040105, WO 03/051850, WO 03/051851, WO 03/053431, WO 03/063781, WO 03/075660, WO 03/077847, WO 03/078413, WO 03/082190, WO 03/082191, WO 03/082833, WO 03/084930, WO 03/084943, WO 03/086288, WO 03/087037, WO 03/088968, WO 04/012671, WO 04/013120, WO 04/026301, WO 04/029204, WO 04/034968, WO 04/035566, WO 04/037823 WO 04/052864, WO 04/058145, WO 04/058255, WO 04/060870, WO 04/060888, WO 04/069837, WO 04/069837, WO 04/072076, WO 04/072077, WO 04/078261 e WO 04/108728, e as referências descritas neste.

Outras doenças ou condições nas quais GPR119 foi sugerido para desempenhar um papel incluem aquelas descritas em WO 00/50562 e US 6.468.756, por exemplo, distúrbios cardiovasculares, hipertensão, distúr- bios respiratórios, anormalidades gestacionais, distúrbios gastrointestinais, distúrbios imunes, distúrbios musculo-esqueléticos, depressão, fobias, ansi- edade, distúrbios de humor e mal de Alzheimer.

Todas as publicações, incluindo, mas não limitado a, patentes e pedido de patente citados nesta especificação, são aqui incorporadas atra- vés de referência como se cada publicação individual fosse especificamente e individualmente indicada para ser incorporada através de referência aqui como completamente apresentado.

A invenção agora será descrita através de referência aos seguin- tes exemplos que são para propósitos ilustrativos e não devem ser interpre- tados como uma limitação do escopo da presente invenção.

Exemplos

Materiais e métodos

A cromatografia de coluna foi realizada em SiO2 (malha de 40 a 63) a não ser que especificado de outra forma. Dados de LCMS foram obti- dos como segue: coluna de Cie de 3μ de Atlantis (3,0 X 20,0 mm, taxa de fluxo = 0,85 mL/min) eluindo com uma solução de H2O-CH3CN contendo HCO2H a 0,1% durante 6 minutos com detecção de UV em 220 nm. Infor- mação de gradiente: 0,0 a 0,3 min: 100% de H2O; 0,3 a 4,25 min: Eleva-se até 10% de H2O-90% de CH3CN; 4,25 a 4,4 min: Eleva-se até 100% de CH3CN; 4,4 a 4,9 min: Mantém-se em 100% de CH3CN; 4,9 a 6,0 min: Re- torna a 100% de H2O. Os espectros de massa foram obtidos usando uma fonte de ionização por eletrovaporização nos modos de íon ou positivo (ES+) ou negativo (ES ).

Abreviações e acrônimos: Ac: Acetila; M-BU: π-Butila; f-Bu: terc- Butila; DIAD: Azodicarboxilato de di-isopropila; Dl ΡΕΑ: Ν,N- Di- isopropiletilamina; DMF: Dimetilformamida; EDCI: Hidrocloreto de 1-(3- dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida; Et: Etila; h: hora(s); HOBt: 1- Hidroxibenzotriazol; IH: Iso-hexano; /'Pr: Isopropila; Me: Metila; Ph: Fenila; RP-HPLC: Cromatografia líquida de alto desempenho de fase reversa; TR: Tempo de retenção; THF: Tetra-hidrofurano.

As sínteses dos seguintes compostos foram descritas em outra parte: 3-terc-Butil-5- cloro-[1,2,4]oxadiazol: WO 95/05368; 4-((E)-2- Etoxicarbonil-1-metil-vinil)-piperidina-1-carboxilato de ferc-butila: US Patent 6.518.423; A/-Hidróxi-isobutiramidina: J. Org. Chem. 2003, 68, 7316-7321; 2- flúor-4-hidroxibenzoato de metila: J. Comb. Chem. 2002, 3, 177-180; 3- Piperidin-4-il-propan-1-ol e 4-(3-hidroxipropil)piperidina-1-carboxilato de terc- butila: Tetrahedron 1999, 55, 11619-11639. Todos os outros compostos fo- ram disponíveis de fontes comerciais. Preparação 1: 4-(3-Hidroxipropil)piperidina-1 -carbonitrilo

Uma suspensão de NaHCO3 (35,2 g, 0,42 mol) em H2O (70 mL) foi adicionada a uma solução agitada de 3-piperidin-4-ilpropan-1-ol (20,0 g, 0,14 mol) em CH2CI2 em 0°C. Uma solução de BrCN (17,8 g, 0,17 mol) em CH2Cl2 (19 mL) foi adicionada à reação durante 1 min, em seguida agitação foi continuada em 0°C durante 0,5 hora. A reação foi em seguida agitada em 20°C durante 2 h, antes de ser lavada com NaHCO3 aquoso saturado e sal- moura. A solução de CH2CI2 foi secada (MgSO4), filtrada e concentrada a vácuo para fornecer um óleo que foi dissolvido em uma pequena quantidade de CH2CI2, antes de ser filtrada através de uma almofada de SiO2, eluindo com EtOAc. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título: m/z (ES+) = 169,1 [M + H]+.

Preparação 2: N-Hidróxi-4-(3-hidroxipropil)piperidina-1-carboxamidina

<formula>formula see original document page 22</formula>

Uma mistura de 4-(3-hidroxipropil)piperidina-1-carbonitrilo (Pre- paração 1, 3,00 g, 17,8 mmols), K2CO3 (2,46 g, 17,8 mmols), e H2NOH^HCI (2,48 g, 35,7 mmols) em EtOH (20 mL) e H2O (30 mL) foi aquecida sob re- fluxo durante 16 horas. O EtOH foi removido a vácuo, em seguida a fase aquosa foi extraída com EtOAc (5x). A fase aquosa foi em seguida saturado com NaCI, antes de ser extraída novamente com EtOAc (5x). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, antes de serem secos (MgS04), filtrados, e concentrados para fornecer o composto do título: m/z (ES+) = 202,1 [M + H]+. Preparação 3: 3-[1 -(5-lsopropil-[1,2,4]oxadiazol-3-il)piperidin-4-il]propan-1 -ol

<formula>formula see original document page 22</formula>

DIPEA (3,25 g, 25,2 mmols), N-hidróxi-4-(3- hidroxipropil)piperidina-1-carboxamidina (Preparação 2, 1,54 g, 7,6 mmols), e HOBt (1,29 g, 8,4 mmols) foram adicionados a uma solução agitada de ácido isobutírico (0,67 g, 7,6 mmols) em DMF anidrosa (10 mL). Depois de 10 min, EDCI (1,76 g, 9,2 mmols) foi adicionado, em seguida agitação foi continuada durante 16 horas. A reação foi diluída com H2O, em seguida a mistura foi extraída com EtOAc (2x). Os extratos orgânicos combinados fo- ram lavados com NaHCOa aquoso saturado, H2O, e salmoura, antes de se- rem secos (MgSO4). Filtragem e evaporação de solvente forneceram um ó- leo amarelo que foi tratado com PhMe. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 0,5 hora. No resfriamento, a reação foi purificada através de croma- tografia de coluna (1 H-EtOAc1 2:3) para produzir o composto do título: m/z (ES+) = 254.1 [M+ H]+.

Preparação 4: 3-[1-(5-Propil-[1,2,4]oxadiazol-3-il)piperidin-4-il]propan-1-ol

<formula>formula see original document page 23</formula>

Este composto foi preparado de N-hidróxi-4-(3- hidroxipropil)piperidina-1-carboxamidina (Preparação 2) e ácido butírico u- sando um procedimento similar àquele delineado na Preparação 3: m/z (ES+) = 254,1 [M + H]+.

Preparação 5: 3-[1 -(5-fere-Butil-[1,2,4]oxadiazol-3-il)piperidin-4-il]propan-1 -ol

<formula>formula see original document page 23</formula>

Este composto foi preparado de N-hidróxi-4-(3- hidroxipropil)piperidina-1-carboxamidina (Preparação 2) e ácido piválico u- sando um procedimento similar àquele delineado na Preparação 3: m/z (ES+) = 268,1 [M + H]+.

Preparação 6: 3-[1-(3-lsopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4-il]propan-1-ol

<formula>formula see original document page 23</formula>

ZnCb (1M em Et2O1 145 mL, 145 mmols) foi adicionado durante 20 min a uma solução agitada de 4-(3-hidroxipropil)piperidina-1-carbonitrilo (Preparação 1, 20,3 g, 121 mmols) e N-hidróxi-isobutiramidina (14,8 g, 145 mmols) em EtOAc (290 mL) e THF (270 mL). Depois de 2 h, o precipitado branco que formou-se foi coletado e lavado com THF-EtOAc (1:1, 50 mL). Este precipitado foi dissolvido em EtOH (550 mL) e HCI a 12M (70 mL), em seguida a solução foi agitada com aquecimento de a 70°C durante 16 horas. O EtOH foi removido a vácuo, o restante foi diluído com H2O, em seguida o pH foi ajustado a 7 com NaHCO3 sólido. A mistura foi extraída com EtOAc (3x), em seguida os extratos combinados foram lavados com salmoura, an- tes de serem secos (MgSO4). Filtragem e remoção de solvente forneceram o composto do título: m/z (ES+) = 254,1 [M + H]+.

Preparação 7: 3-[1 -(3-Propil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4-il]propan-1 -ol

<formula>formula see original document page 24</formula>

Este composto foi preparado por condensação de 4-(3- hidroxipropil)piperidina-1-carbonitrilo (Preparação 1) com N- hidroxibutiramidina usando um procedimento similar àquele delineado na Preparação 6: m/z (ES+) = 254,2 [M+ H]+.

Preparação 8: 4-((E)-2-Carbóxi-1-metilvinil)piperidina-1-carboxilato de terc- butila

<formula>formula see original document page 24</formula>

Uma solução de 4-((E)-2-etoxicarbonil-1-metilvinil)piperidina-1- carboxilato de terc-butila (18,7 g, 62,9 mmols) em MeOH (90 mL) e H2O (25 mL) foi tratada com NaOH a 2M (94,5 mL, 189,0 mmols). A reação foi agita- da durante 16 horas, o MeOH foi removido sob pressão reduzida, em segui- da o restante foi dividido entre EtOAc e H2O. A camada aquosa foi separada e acidificada a pH 2 com HCI a 12M, antes de ser extraída com EtOAc (2x). Os extratos orgânicos foram lavados com salmoura, secos (MgSO4)1 filtra- dos, e concentrados, em seguida o restante foi recristalizado de EtOAc-IH para fornecer o composto do título: m/z (ES") = 268,3 [M - H]".

Preparação 9: 4-((R)-2-Carbóxi-1-metiletil)piperidina-1-carboxilato de terc- butila

<formula>formula see original document page 24</formula>

4-((E)-2-Carbóxi-1-metilvinil)piperidina-1-carboxilato de terc- butila (Preparação 8, 130,0 g, 0,483 mol) foi colocado em um frasco de hi- drogenação sob uma atmosfera de Ar1 em seguida MeOH desgaseificado (400 ml_) foi adicionado. [Rh(norbornadieno)2]BF4 (1,80 g, 4,81 mmols) e (S)- 1-[(R)-2-(di-terc-butilfosfino)ferrocenil]etilbis(2-metilfenil)fosfina (2,90 g, 5,08 mmols) foram colocados em um frasco de Schlenk separado sob Ar, antes de serem tratados com MeOH desgaseificado (200 mL). Esta mistura de ca- talisador foi agitada durante 15 min em temperatura ambiente, antes de ser transferida por meio de cânula no frasco de hidrogenação. O Frasco de Sc- hlenk foi rinsado com mais MeOH desgaseificado (100 mL). Estas lavagens foram transferidas ao frasco de hidrogenação, em seguida mais MeOH des- gaseificado (300 mL) foi adicionado. O frasco de hidrogenação foi selado, o Ar recolocado por H2, e a pressão fixada a 105 kPa (1,05 bar). A mistura de reação foi aquecida a 35°C, e agitação/sacudida foi iniciada. Depois de 48 horas, a reação foi interrompida, e uma amostra representativa da mistura de reação foi analisada através de HPLC e 1H RMN. A conversão foi 100% e a pureza enantiomérica do (R)-ácido bruto foi 98,2%, tal como verificado pe- lo seguinte método de HPLC: Coluna: QUIRALPAK AD-H (previamente usa- do com solventes contendo CF3CO2H) 4,6 χ 250 mm; Solvente: C6Hi4- ZPrOH (97:3 isocrático); Temperatura: 20°C; Taxa de fluxo: 1 mL/min; de- tecção de UV (210, 230 nm); Amostra: 100 pL de solução de reação dissol- vido com 1 mL de MeOH. Tempos de retenção: (S)-ácido: 19,3 minutos, (R)- ácido: 20,6 min, ácido enóico de partida: 22,1 minutos. Procedimento de iso- lamento: O MeOH foi evaporado, em seguida o produto de hidrogenação bruto foi dissolvido em f-BuOMe e extraído com NaOH aquoso. A fase aquo- sa foi adicionada a uma mistura de HCI a 1M e EtOAc. A fase aquosa foi extraída também com EtOAc1 em seguida os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secos (MgSO4). O composto do título foi iso- lado em seguida à filtragem e remoção completa do solvente. Preparação 10: 4-((R)-3-Hidróxi-1-metilpropil)piperidina-1-carboxilato de terc- butila <formula>formula see original document page 26</formula>

BH3-THF (1Μ, 15,7 mL, 15,7 mmols) foi adicionado gota a gota durante 5 min a uma solução agitada de 4-((R)-2-carbóxi-1- metiletil)piperidina-1-carboxilato terc-butila de (Preparação 9, 1,70 g, 6,3 mmols) em THF anidroso em 0°C. Depois de 1 hora, a reação foi tratada com Et2O, em seguida com HCl a 2M. A camada orgânica foi lavada com salmoura, antes de ser secada (Na2SO4). Filtragem, evaporação de solvente, e cromatografia de coluna (EtOAc-CH2CI2, 1 :3) forneceram o composto do título: TR = 3,17 min; m/z (ES+) = 258,1 [M+ H]+.

Preparação 11: 4-((f?)-3-Hidróxi-1 -metilpropil)piperidina-1 -carbonitrilo

<formula>formula see original document page 26</formula>

Uma mistura de 4-((R)-3-hidróxi-1-metilpropil)piperidina-1- carboxilato de terc-butila (Preparação 10, 6,2 g, 14,9 mmols) e HCI a 4M em dioxano (10 mL) foi agitada em temperatura ambiente. Depois de 3 h, os sol- ventes foram removidos sob pressão reduzida para fornecer o sal de hidro- cloreto de (F?)-3-piperidin-4-il-butan-1-ol: δΗ ((CD3)2SO) 0,83 (d, 3H), 1,19 a 1,28 (m, 1H), 1,38 a 1,59 (m, 5H), 1,64 a 1,76 (m, 2H), 2,75 a 2,87 (m, 2H), 3,20 a 3,30 (m, 2H), 3,35 a 3,60 (m, 4H). Uma mistura agitada deste com- posto (0,93 g, 4,8 mmols) e NaHCO3 (1,61 g, 19,2 mmols) em CH2CI2-H2O (4:1, 15 mL) em 0°C foi tratada com uma solução de BrCN (0,61 g, 5,8 mmol) em CH2CI2 (2 mL). A reação foi agitada em 20°C durante 2 h, antes de ser dividida entre H2O e CH2Cl2. A fase orgânica foi separada e secada (MgSO4). Filtragem, evaporação de solvente, e cromatografia instantânea (EtOAc) forneceram o composto do título: TR = 2,45 min; m/z (ES+) = 183,1 [M + H]+.

Preparação 12: (R)-3-[1 -(3-lsopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4-il]butan-1-ol <formula>formula see original document page 27</formula>

Condensação de 4-((f?)-3-hidróxi-1-metilpropil)piperidina-1- carbonitrilo (Preparação 11, 0,53 g, 2,9 mmol) com N-hidroxiisobutiramidina (0,36 g, 3,5 mmol), empregando procedimentos similares àqueles delineados na Preparação 6, forneceu o composto do título: TR = 2,92 minutos; m/z (ES+) = 268,1 [M + H]+.

Preparação 13: (F?)-3-[1 -(5-lsopropil-[1,2,4]oxadiazol-3-il)piperidin-4-il]butan- 1 -ol

<formula>formula see original document page 27</formula>

Uma mistura de 4-((R)-3-hidróxi-1-metilpropil)piperidina-1- carbonitrilo (Preparação 11, 1,00 g, 5,2 mmol) e NH2OH (50 % em peso em H2O, 0,63 mL, 10,4 mmol) em EtOH (10 mL) foi agitada em temperatura am- biente durante 30 minutos. A reação foi concentrada, azeotropando com PhMe (3x), para fornecer um óleo amarelo pálido viscoso. Uma mistura des- te óleo, EDCI (1,20 g, 6,22 mmol), HOBt (0,77 g, 5,70 mmols), ácido isobutí- rico (0,50 mL, 5,44 mmols), e DIPEA (2,70 mL, 15,54 mmols) em DMF ani- drosa (10 mL) foi agitada durante 16 h, antes de ser dividida entre H2O e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 aquoso saturado e sal- moura, antes de serem secos (MgSO4), filtrados, e concentrados. O restante foi aquecido sob refluxo em PhMe durante 3 horas, em seguida os solventes foram removidos a vácuo e o resíduo purificado através de cromatografia instantânea (EtOAc-C^Ch, 2:3) para fornecer o composto do título: TR = 3,20 minutos; m/z (ES+) = 268,1 [M+ H]+.

Preparação 14: Ácido 2-flúor-4-{3-[1-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5- il)piperidin-4-il]propóxi}-benzoico. <formula>formula see original document page 28</formula>

DIAD (20,2 ml_, 102,8 mmols) foi adicionado a uma solução agi- tada de 2-flúor-4-hidroxibenzoato de metila (13,43 g, 79,1 mmols), 3-[1-(3- isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4-il]-propan-1-ol (Preparação 6, 20,00 g, 79,1 mmols), e PPh3 (24,85 g, 95,0 mmols) em THF anidroso. Depois de 30 min, o solvente foi removido a vácuo, em seguida o restante foi triturado com IH-Et2O. O sólido produzido foi filtrado e lavado com Et2O. As lavagens combinadas e filtrado foram concentrados sob pressão reduzida, em seguida o resíduo foi purificado através de cromatografia instantânea (EtOAc-IH, 1:4) para gerar 2-flúor-4-{3-[1-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4- il]propóxi}benzoato de metila. Este composto foi agitado com LiOH-H2O (33,2 g, 791 mmols) em MeOH (400 mL) e H2O (100 mL) durante 16 horas. O MeOH foi evaporado sob pressão reduzida, em seguida o restante foi divi- dido entre NaOH a 2M e Et2O. A fase aquosa foi acidificada a pH 2, antes de ser extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos foram secos (MgS04), filtra- dos, concentrados, e recristalizados de EtOAc para fornecer o composto do título: δΗ (CDCI3) 1,26 a 1,40 (m, 8H), 1,46 a 1,62 (m, 3H), 1,81 a 1,93 (m, 4H), 2,95 (sept, 1H), 3,02 a 3,12 (m, 2H), 4,03 (t, 2H), 4,16 a 4,22 (m, 2H), 6,67 (dd, 1H), 6,78 (dd, 1H), 8,01 (t, IH); m/z (ES+) = 392,0 [M + H]+.

Os ácidos listados na tabela 1 foram sintetizados por condensa- ção Mitsunobu do fenol apropriado com o álcool apropriado seguido por sa- ponificação, empregando procedimentos similares àqueles delineados na Preparação 14. Tabela 1

<table>table see original document page 29</column></row><table> <table>table see original document page 30</column></row><table>

Preparação 24: 4-[3-(3-flúor-4-metoxicarbonilfenoxi)propil]piperidina-1- carboxilato de terc-butila.

<formula>formula see original document page 30</formula>

Este composto foi preparado por condensação Mitsunobu de 2- flúor-4-hidroxibenzoato de metila com 4-(3-hidroxipropil)piperidina-1- carboxilato de terc-butila por um procedimento similar àquele delineado na Preparação 14: m/z (ES+) = 396,3 [M+ H]+.

Preparação 25: Ácido 4-{3-[1-(3-terc-butil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4- il]propóxi}-2-flúor-benzoico.

<formula>formula see original document page 30</formula>

Uma solucao de 4-[3-(3-fluor-4- metoxicarbonilfenoxi)propil]piperidina-1-carboxilato de terc-butila (Prepara- ção 24, 3,49 g, 8,83 mmols) foi agitada com HCI a 4M em dioxano (25 mL) durante 1 hora em 20°C. O solvente foi removido, em seguida o resíduo foi triturado com Et2O para produzir o sal de hidrocloreto de 2-flúor-4-(3- piperidin-4-il-propóxi)benzoato de metila: m/z (ES+) = 296,1 [M + H]+. Uma solução agitada deste composto (1,25 g, 3,8 mmols) e K2C03 (1,33 g, 9,5 mmols) em DMF anidrosa (15 mL) foi tratada com uma solução de 3-terc- butil-5-cloro-[1,2,4]oxadiazol (076 g, 475 mmols) em DMF anidrosa (10 mL). Depois de 1 hora, H2O foi adicionado, em seguida a mistura foi extraída com Et2O. Os extratos etéreos foram lavados com HCI a 1M, antes de serem se- cos (MgSO4). Filtragem e evaporação de solvente forneceram 4-{3-[1-(3- terc-butil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4-il]propóxi}-2-fluorobenzoato de meti- la: m/z (ES+) = 420,1 [M + H]+. Saponificação deste éster, empregando um método similar àquele delineado na Preparação 14, forneceu o composto do título: m/z (ES") = 404,5 [M - H]-.

Preparação 26: Ácido 4-{3-[1-(3-ferc-Butil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4- il]propóxi}-2-metil-benzoico.

<formula>formula see original document page 31</formula>

Este composto foi preparado de 4-hidróxi-2-metilbenzoato de metila e 4-(3-hidroxipropil)piperidina-1-carboxilato de terc-butila, empregando procedimentos similares àqueles delineados nas Preparações 24 e 25: m/z (ES-) = 400,5 [M - H]".

Os ácidos benzoicos catalogados na Tabela 2 foram também preparados empregando procedimentos similares àqueles delineado nas Preparações 24 e 25. Tabela 2

<table>table see original document page 32</column></row><table>

Exemplo 1: 2-flúor-N-(( R)-2-hidróxi-1-metiletil)-4-{3-[1-(3-isopropil- [1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4-il]propóxi}benzamida

<formula>formula see original document page 32</formula>

HOBt-H2O (8,76 g, 63,9 mmols) foi adicionado a uma solução agitada de ácido 2-flúor-4-{3-[1-(3-isopropil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)piperidin-4- il]propoxi}benzoico (Preparação 14, 20,00 g, 51,2 mmols) e EDCI (12,21 g, 63,9 mmols) em THF (400 mL). Depois de 1 h, (R)-2-amino-1-propanol (7,68 g, 102,4 mmols) foi adicionado, em seguida agitação foi continuada em tem- peratura ambiente durante 4 horas. O THF foi removido a vácuo, em seguida o resíduo foi dissolvido em CH2CI2. A solução de CH2Cl2 foi lavada com Na- OH a 1M (2x) e HCI a 1M, antes de serem secos (MgSO4). Filtragem, evapo- ração de solvente, e recristalização de EtOAc forneceram o composto do título: δΗ (CDCI3) 1,27 a 1,39 (m, HH), 1,47 a 1,61 (m, 3H), 1,80 a 1,92 (m, 4H), 2,81 (t, 1H), 2,93 (sept, 1H), 3,02 a 3,12 (m, 2H), 3,64 a 3,71 (m, 1H), 3,78 a 3,84 (m, 1H), 4,02 (t, 2H), 4,16 a 4,20 (m, 2H), 4,30 a 4,40 (m, 1H), 6,63 (dd, 1H), 6,77 a 6,83 (m, 2H), 8,06 (t, IH); m/z (ES+) = 449,1 [M + H]+.

As amidas listadas na tabela 3 foram sintetizadas por condensa- ção do ácido apropriado com a amina apropriada, empregando procedimen- tos similares àqueles delineados no Exemplo 1.

Tabela 3

<table>table see original document page 33</column></row><table> <table>table see original document page 34</column></row><table> <table>table see original document page 35</column></row><table> <table>table see original document page 36</column></row><table> <table>table see original document page 37</column></row><table> <table>table see original document page 38</column></row><table> <table>table see original document page 39</column></row><table> <table>table see original document page 40</column></row><table> <table>table see original document page 41</column></row><table> <table>table see original document page 42</column></row><table> <table>table see original document page 43</column></row><table> Os compostos da invenção podem também ser produzidos u- sando uma modificação do procedimento descrito no Exemplo 1 em que o solvente é diclorometano ao invés de THF1 o HOBt-H2O é reagido com o EDCI antes de adição do ácido carboxílico, e uma amina adicional tal como trietilamina é adicionada durante a formação de ligação de amida a fim de evitar a necessidade de usar um excesso do componente de amina, por e- xemplo, (R)-2-amino-1-propanol.

A atividade biológica dos compostos da invenção pode ser tes- tada nos seguintes sistemas de ensaio:

Ensaio de Repórter de Levedura

Os ensaios de repórter com base em célula de levedura foram previamente escritos na literatura (por exemplo, veja Miret J. J. e outros, 2002, J. Biol. Chem., 277:6881-6887; Campbell R.M. e outros, 1999, Bioorg. Med. Chem. Lett, 9:2413-2418; King K. e outros, 1990, Science, 250:121- 123); WO 99/14344; WO 00/12704; e US 6.100.042). Resumidamente, as células de levedura foram planejadas de modo que a G-alfa (GPA1) de leve- dura endógena fosse deletada e recolocada com quimeras de G-proteína construídas usando múltiplas técnicas. Adicionalmente, o GPCR de levedura endógena, Ste3 foi deletado para permitir expressão heteróloga de um GP- CR mamífero de escolha. Na levedura, elementos da trilha de transdução de sinalização de feromônio, que são conservados em células eucarióticas (por exemplo, a trilha de proteína cinase ativada por mitógeno), dirigem a expres- são de Fus1. Por colocação da β-galactosidase (LacZ) sob o controle do promotor Fusl (Fuslp), um sistema foi desenvolvido por meio do que a ati- vação de receptor resulta em uma leitura enzimática.

Células de levedura foram transformadas por uma adaptação do método de acetato de lítio descrito por Agatep e outros, (Agatep, R. e outros, 1998, Transformation of Saccharomyces cerevisiae by the lithium aceta- te/single-stranded carrier DNA/polyethylene glycol (LiAc/ss-DNA/PEG) proto- col. Technical Tips Online, Trends Journals, Elsevier). Resumidamente, célu- las de levedura foram desenvolvidas durante a noite em placas de triptona de levedura (YT). DNA de filamento único portador (10pg), 2pg de cada um dos dois plasmídeos repórteres Fuslp- LacZ (um com marcador de seleção URA e um com TRP), 2pg de GPR119 (receptor de humano ou camundon- go) em vetor de expressão de levedura (2pg de origem de replicação) e um de tampão acetato de litio/ polietileno glicol/ TE foi pipetado em um tubo de Eppendorf. O plasmídeo de expressão de levedura contendo o controle re- ceptor/ não-receptor possui um marcador de LEU. Células de levedura foram inoculadas dentro desta mistura e a reação prosseguiu em 30°C durante 60min. As células de levedura foram em seguida chocadas termicamente em 42°C durante 15min. As células foram em seguida lavadas e dispersadas em placas de seleção. As placas de seleção são veículos de levedura definidos sintéticos menos LEU, URA e TRP (SD-LUT). Depois de incubação em 30°C durante 2 a 3 dias, colônias que desenvolveram-se nas placas de seleção foram em seguida testadas no ensaio de LacZ.

A fim de desempenhar ensaios de enzima fluorimétricos para β- galactosidase, células de levedura portando o receptor GPR119 de humano ou camundongo foram desenvolvidas durante a noite em veículo SD-LUT líquido a uma concentração insaturada (isto é, as células foram ainda dividi- das e não tinham ainda alcançado a fase estacionária). Elas foram diluídas em veículo fresco a uma concentração de ensaio ideal e 90μΙ de células de levedura adicionados a placas de poliestireno pretas de 96 poços (Costar). Compostos, dissolvidos em DMSO e diluídos em uma solução de DMSO a 10% a concentração de 10X, foram adicionados às placas e as placas colo- cadas em 30 C durante 4 horas. Depois de 4 horas, o substrato para a β- galactosidase foi adicionado a cada poço. Nestes experimentos, Di (β-D- galactopiranosídeo) de fluoresceína foi usado (FDG), um substrato para a enzima que libera fluoresceína, permitindo uma leitura fluorimétrica. 20 μΙ por poço de FDG a 500pM/Triton X100 a 2,5% foram adicionados (o deter- gente foi necessário para produzir as células permeáveis). Depois de incu- bação das células com o substrato durante 60 minutos, 20 μΙ por poço de carbonato de sódio a 1M foram adicionados para concluir a reação e realçar o sinal fluorescente. As placas foram em seguida lidas em um fluorímetros em 485/535nm. Os compostos da invenção produzem um aumento no sinal fluo- rescente de pelo menos —1,5 vezes aquele do sinal de base (isto é, o sinal obtido na presença de DMSO a 1 % sem composto). Compostos da invenção que produzem um aumento de pelo menos 5 vezes podem ser preferidos.

Ensaio de AMPc

Uma linhagem de célula estável expressando GPR119 de hu- mano recombinante foi estabelecida e esta linhagem de célula foi usada pa- ra investigar o efeito de compostos da invenção em níveis intracelulares de AMP cíclico (AMPc). As monocamadas de célula foram lavadas com solução salina tamponada por fosfato e estimuladas em 37°C durante 30min com várias concentrações de composto em tampão de estimulação mais DMSO a 1%. Células foram em seguida Iisadas e conteúdo de AMPc determinado usando o kit de AMPc de Perkin Elmer AlfaScreen® (Ensaio Homogêneo de Proximidade Luminescente Amplificado). Tampões e condições de ensaio foram tal como descrito no protocolo do fabricante.

Compostos da invenção produziram um aumento dependente de concentração em nível de AMPc intracelular e geralmente tinham uma EC5O de <10μΜ. Compostos mostrando uma EC5O de menos do que 1 μΜ no en- saio de AMPc podem ser preferidos. Estudo de alimentação in vivo

O efeito de compostos da invenção sobre o peso corporal e in- gestão de alimento e água foi examinado em ratos de Sprague-Dawley ma- chos de alimentação livremente, mantidos em iluminação de fase reversa. Compostos de teste e compostos de referência foram dosados por rotinas apropriadas de administração (por exemplo, intraperitonealmente ou oral- mente) e medições produzidas durante as seguintes 24 horas. Ratos foram individualmente alojados em gaiolas de polipropileno com pisos de grade de metal em uma temperatura de 21 ± 4°C e 55 ± 20% de umidade. Bandejas de polipropileno com almofadas de gaiola foram colocadas debaixo de cada gaiola para detectar qualquer derramamento de alimento. Animais foram mantidos em um ciclo de claro-escuro de fase reversa (luzes durante 8 horas de 09:30 a 17:30 horas) durante cujo tempo o ambiente foi illuminado por luz vermelha. Animais tinham livre acesso a uma dieta de rato em pó-padrão e água de torneira durante um período de aclimatização de duas semanas. A dieta foi contida em jarros de alimentação de vidro com tampas de alumínio. Cada tampa tinha um buraco de 3 a 4 cm nela para permitir acesso ao ali- mento. Os animais, jarros de alimentação e água garrafas foram pesados (ao mais próximo de 0,1 g) no início do período escuro. Os jarros de alimen- tação e garrafas de água foram subseqüentemente medidos 1, 2, 4, 6 e 24 horas depois que os animais foram dosados com um composto da invenção e quaisquer significantes diferenças entre os grupos de tratamento em linha de base comparado a controles tratados por veículo.

Compostos selecionados da invenção mostraram um efeito hipo- fágico estatisticamente significante em um ou mais momentos em uma dose de <100 mg/kg.

Efeitos antidiabéticos de compostos da invenção em um modelo in vitro de células beta pancreáticas (HIT-T15)

Cultura de Célula

Células de HIT-T15 (inoculação 60) foram obtidas de ATCC, e foram cultivadas em veículo de RPMI 1640 suplementado com soro de be- zerro fetal a 10% e selenita de sódio a 30 nM. Todos os experimentos foram feitos com células em menos do que inoculação 70, de acordo com a litera- tura, que descrevem propriedades alteradas desta linhagem de célula em números de inoculação acima de 81 (Zhang HJ, Walseth TF, Robertson RP. Insulin secretion and cAMP metabolism in HIT cells. Reciprocai and serial passage-dependent relationships. Diabetes. 1989 Jan;38(l):44-8).

Ensaio de AMPc

Células de HIT-T15 foram plaqueadas em veículo de cultura- padrão em placas de 96 poços em 100.000 células/ 0,1 ml/ poço e cultivadas durante 24 horas e o veículo foi em seguida descartado. Células foram incu- badas durante 15 minutos em temperatura ambiente com 100 μΙ de tampão de estimulação (solução de sal tamponada de Hanks, HEPES a 5 mM, IBMX a 0,5 mM, BSA a 0,1%, pH 7,4). Este foi descartado e recolocado com dilui- ções de composto sobre a faixa 0,001, 0,003, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1, 3, 10, 30 μΜ em tampão de estimulação na presença de DMSO a 0,5%. As células foram incubadas em temperatura ambiente durante 30 minutos. Em seguida 75 ul de tampão de Iise (HEPES a 5mM, Tween-20 a 0,3%, BSA a 0,1%, pH 7,4) foram adicionados por poço e a placa foi agitada em 900 rpm durante 20 minutos. Matéria particulada foi removida por centrifugação em 3000 rpm durante 5 minutos, em seguida as amostras foram transferidas em duplicata a placas de 384 poços, e processadas seguindo as instruções de kit de en- saio de AMPc de Perkin Elmer AIfaScreen. Resumidamente, 25 μl de rea- ções foram fixados contendo 8 μl de amostra, 5 μl de mistura de conta acep- tora e 12 μl de mistura de detecção, de modo que a concentração dos com- ponentes de reação final seja a mesma tal como estabelecido nas instruções do kit. Reações foram incubadas em temperatura ambiente durante 150 mi- nutos, e a placa foi lida usando um instrumento de Fusão de Packard. Medi- ções para AMPc foram comparadas a uma curva-padrão de quantidades de AMPc conhecidas (0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1, 3, 10, 30, 100, 300, 1000 nM) para converter as leituras a quantidades de AMPc absolutas. Os dados foram a- nalisados usando software de XLfit 3.

Compostos representativos da invenção foram constatados au- mentar AMPc em uma EC50 de menos do que 10 μΜ. Compostos mostrando uma EC5O de menos do que 1 μΜ no ensaio de AMPc podem ser preferidos. Ensaio de secreção de insulina

Células de HIT-T 15 foram plaqueadas em veículo de cultura padrão em placas de 12 poços em 106 células/ 1 ml/ poço e cultivadas du- rante 3 dias e o veículo foi em seguida descartado. Células foram lavadas 2 x com tampão de Krebs-Ringer (KRB) suplementado contendo NaCl a 119 mM, KCl a 4,74 mM, CaCl2a 2,54 mM, MgS04a 1,19 mM, KH2P04a 1,19 mM, NaHCO3 a 25 mM, HEPES a 10 mM em pH 7,4 e albumina de soro bo- vino a 0,1%. Células foram incubadas com 1 ml de KRB em 37°C durante 30 minutos, que foi em seguida descartado. Isto foi seguido por uma segunda incubação com KRB durante 30 minutos, que foi coletado e usado para me- dir níveis de secreção de insulina basal para cada poço. Diluições de com- posto (0, 0,1, 0,3, 1, 3, 10 uM) foram em seguida adicionadas a poços em duplicata em 1ml de KRB, suplementado com glicose a 5,6 mM. Depois de incubação de 30 minutos em 37°C, amostras foram removidas para determi- nação de níveis de insulina. Medição de insulina foi feita usando o kit de E- LISA de insulina de Rato de Mercodia, seguindo as instruções dos fabrican- tes, com uma curva-padrão de concentrações de insulina conhecidas. Para cada poço, níveis de insulina foram corrigidos por subtração do nível de se- creção basal da pré-incubação na ausência de glicose. Os dados foram ana- lisados usando software de XLfit 3.

Constatou-se que os compostos representativos da invenção aumentam a secreção de insulina em uma EC5O de menos do que 10 μΜ. Compostos mostrando uma EC50 de menos do que 1 μΜ no ensaio de se- creção de insulina podem ser preferidos.

Testes de Tolerância de Glicose Oral

Os efeitos de compostos da invenção em tolerância de glicose (GIc) oral foram avaliados em ratos de Sprague-Dawley machos. Alimento foi retirado 16 h antes de administração de Glc e permaneceu retirado ao longo do estudo. Ratos tinham acesso livre a água durante o estudo. Um corte foi produzido às caldas de animais, em seguida sangue (1 gota) foi re- movido para medição de níveis de Glc basal 60 min antes de administração da carga de Glc. Em seguida, os ratos foram pesados e dosados oralmente com composto ou veículo de teste (hidroxipropil-3-ciclodextrina aquosa a 20%) 45 min antes da remoção de uma amostra de sangue adicional e tra- tamento com a carga de Glc (2 g kg"1 p.o.). Amostras de sangue foram em seguida tiradas da extremidade do corte da calda 5, 15, 30, 60, 120, e 180 min depois de administração de Glc. Níveis de glicose de sangue foram me- didos apenas depois de coleta usando um medidor de glicose comercialmen- te disponível (OneTouch® UItraTM de Lifescan). Compostos representativos da invenção estatisticamente reduziram a excursão de Glc em doses de <10 mg kg-1.

Os efeitos de compostos da invenção em tolerância de glicose (GIc) oral foram também avaliados em camundongos C57B1/6 machos ou ob/ob machos. Alimento foi retirado 5 h antes de administração de Glc e permaneceram retirados ao longo do estudo. Camundongos tinham livre a- cesso a água durante o estudo. Um corte foi produzido nas caldas dos ani- mais, em seguida sangue (20 pL) foi removido para medição de níveis de Glc basal 45 minutos antes da administração da carga de Glc. Em seguida, os camundongos foram pesados e dosados oralmente com composto ou veículo de teste (hidroxipropil^-ciclodextrina aquosa a 20% ou Gelucire 44/14 aquoso a 25%) 30 minutos antes da remoção de uma amostra de sangue adicional (20 pL) e tratamento com a carga de Glc (2 a 5 g kg"1 p.o.). Amostras de sangue (20 pL) foram em seguida tiradas 25, 50, 80, 120, e 180 min depois de administração de Glc. Os 20 pL de amostras de sangue para medição de níveis de Glc foram tirados da extremidade do corte da calda em micropipetas descartáveis (Dade Diagnostics Inc., Puerto Rico) e a amostra adicionada a 480 pL de reagente de hemólise. Alíquotas de 20 pL em dupli- cata do sangue hemolisado diluído foram em seguida adicionadas a 180 pL de reagente de glicose de Trinders (método colorimétrico enzimático (Trin- der) de Sigma) em uma placa de ensaio de 96 poços. Depois de mistura, as amostras foram deixadas em temperatura ambiente durante 30 minutos an- tes de serem lidas contra padrões de Glc (padrões combinados de glicose/ nitrogênio de uréia de Sigma fixados). Compostos representativos da inven- ção estatisticamente reduziram a excursão de Glc em doses <100 mg kg'1.

Claims

1. Composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste: em que um dentre X e Y é O e o outro é N; R1 é -CONHR5; R2 é hidrogênio, halo ou metila; R3 é hidrogênio ou metila; R4 é C2-5alquila; e R5 é hidrogênio, C1-3alquila, ou C2-3alquila substituída por hidróxi.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farma- ceuticamente aceitável destes, em que X é O.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farma- ceuticamente aceitável destes, em que Y é O.

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável destes, em que R2 é hidrogênio, flúor, cloro ou metila.

5. Composto de acordo com a reivindicação 4, ou um sal farma- ceuticamente aceitável destes, em que R é hidrogênio.

6. Composto de acordo com a reivindicação 4, ou um sal farma- ceuticamente aceitável destes, em que R2 é flúor.

7. Composto de acordo com a reivindicação 4, ou um sal farma- ceuticamente aceitável destes, em que R2 é cloro.

8. Composto de acordo com a reivindicação 4, ou um sal farma- ceuticamente aceitável destes, em que R2 é metila.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável destes, em que R3 é hidrogênio.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável destes, em que R3 é metila.

11. Composto de acordo com a reivindicação 10, ou um sal far- maceuticamente aceitável deste, em que R3 é metila e o estereocentro pro- duzido possui a configuração (R).

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que R4 é C3-4 alquila.

13. Composto de acordo com a reivindicação 12, ou um sal far- maceuticamente aceitável deste, em que R4 é n-propila, isopropila, ou terc- butila.

14. Composto de acordo com a reivindicação 13, ou um sal far- maceuticamente aceitável deste, em que R4 é C3 alquila.

15. Composto de acordo com a reivindicação 14, ou um sal far- maceuticamente aceitável deste, em que R4 é isopropila.

16. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que R5 é C1-3 alquila ou C2-3 alquila substituída por hidróxi.

17. Composto de acordo com a reivindicação 16, ou um sal far- maceuticamente aceitável deste, em que R5 é C2-3 alquila substituída por hidróxi.

18. Composto de acordo com a reivindicação 17, ou um sal far- maceuticamente aceitável deste, em que R5 é 2-hidroxietila, 2-hidróxi-1- metiletila, 2,3-di-hidroxipropila ou 2-hidróxi-1 -hidroximetiletila.

19. Composto de acordo com a reivindicação 18, ou um sal far- maceuticamente aceitável deste, em que R5 é 2-hidróxi-1 -metiletila.

20. Composto de fórmula (I) de acordo com qualquer um dos Exemplos 1 a 46, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

21. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 20, ou um sal farma- ceuticamente aceitável deste e um portador farmaceuticamente aceitável.

22. Método para o tratamento de uma doença ou condição na qual GPR119 desempenha um papel compreendendo uma etapa de admi- nistração a um sujeito em necessidade desta de uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

23. Método para a regulação de saciedade compreendendo uma etapa de administração a um sujeito em necessidade desta, de uma quanti- dade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindica- ções 1 a 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

24. Método para o tratamento de obesidade compreendendo uma etapa de administração a um sujeito em necessidade desta de uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das rei- vindicações 1 a 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

25. Método para o tratamento de diabetes compreendendo uma etapa de administração a um sujeito em necessidade desta, de uma quanti- dade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindica- ções 1 a 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

26. Método para o tratamento de síndrome metabólica (síndrome X), tolerância de glicose melhorada, hiperlipidemia, hipertrigliceridemia, hi- percolesterolemia, níveis de HDL baixos ou hipertensão compreendendo uma etapa de administração a um paciente em necessidade desta, de uma quantidade eficaz de um composto de acordo com qualquer uma das reivin- dicações 1 a 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

27. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, para uso como um me- dicamento.

28. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso na fabri- cação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de uma doença ou condição tal como definido em qualquer uma das reivindicações 22 a 26.

29. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no trata- mento ou prevenção de uma doença ou condição como definido em qual- quer uma das reivindicações 22 a 26.

30. Processo para a produção de um composto de fórmula (I) como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo acoplamento de um composto de fórmula (XIV): <formula>formula see original document page 54</formula> com uma amina de fórmula R5NH2, em que R2, R3, R4, R5, X e Y são tal co- mo definido na reivindicação 1.