BR112021012608A2 - Porção de ligação que se liga especificamente à claudina18.2, receptor de antígeno quimérico, ácido nucleico, célula imune manipulada, composição farmacêutica, e, método de tratamento de um tumor ou câncer que expressa claudina18.2 - Google Patents

Porção de ligação que se liga especificamente à claudina18.2, receptor de antígeno quimérico, ácido nucleico, célula imune manipulada, composição farmacêutica, e, método de tratamento de um tumor ou câncer que expressa claudina18.2 Download PDF

Info

Publication number
BR112021012608A2
BR112021012608A2 BR112021012608-2A BR112021012608A BR112021012608A2 BR 112021012608 A2 BR112021012608 A2 BR 112021012608A2 BR 112021012608 A BR112021012608 A BR 112021012608A BR 112021012608 A2 BR112021012608 A2 BR 112021012608A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
seq
nos
amino acid
acid sequences
cdr1
Prior art date
Application number
BR112021012608-2A
Other languages
English (en)
Inventor
Liusong Yin
Jie Mao
Tielin Zhou
Zhuo FANG
Yong Liu
Qiuchuan ZHUANG
Bo Wu
Xiaohu Fan
Qingshan Zhang
Dan Zhao
Original Assignee
Nanjing GenScript Biotech Co., Ltd.
Nanjing Legend Biotech Co., Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing GenScript Biotech Co., Ltd., Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. filed Critical Nanjing GenScript Biotech Co., Ltd.
Publication of BR112021012608A2 publication Critical patent/BR112021012608A2/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3046—Stomach, Intestines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

porção de ligação que se liga especificamente à claudina18.2, receptor de antígeno quimérico, ácido nucleico, célula imune manipulada, composição farmacêutica, e, método de tratamento de um tumor ou câncer que expressa claudina18.2. estão aqui descritos porções de ligação, tais como anticorpos, que se ligam especificamente à claudina18.2 e receptores de antígenos quiméricos consistindo nas tais porções de ligação. além disso, são fornecidas células imunes manipuladas (como células t) compreendendo receptores de antígeno quimérico anti-claudina 18.2. também são divulgados métodos de tratamento de tumores ou cânceres que expressam claudina18.2, usando as porções de ligação, receptores de antígenos quiméricos e células imunes.

Description

1 / 309
PORÇÃO DE LIGAÇÃO QUE SE LIGA ESPECIFICAMENTE À CLAUDINA18.2, RECEPTOR DE ANTÍGENO QUIMÉRICO, ÁCIDO NUCLEICO, CÉLULA IMUNE MANIPULADA, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E, MÉTODO DE TRATAMENTO DE UM TUMOR OU CÂNCER QUE EXPRESSA CLAUDINA18.2
[001] Este pedido reivindica benefícios de prioridade do Pedido de Patente Internacional Nº PCT/CN2018/125052 depositado em 28 de dezembro de 2018 e Pedido de Patente Internacional Nº PCT/CN2019/095827 depositado em 12 de julho de 2019, cujo conteúdo estão ora incorporados neste documento por referência na sua íntegra.
CAMPO DA INVENÇÃO
[002] A presente divulgação é relativa aos campos da biologia molecular, biologia celular e biologia do câncer, especialmente relacionada a anticorpos, receptores de antígeno quimérico e células imunológicas manipuladas direcionadas à Claudina18.2 e seus métodos de uso.
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO
[003] As Claudinas são uma família de proteínas de superfície celular e controlam o fluxo de moléculas entre as células, desempenhando papeis essenciais na sinalização celular e na manutenção da polaridade celular epitelial (Singh et al., (2010) J Oncol 2010: 541957). Cada molécula de claudina possui quatro segmentos transmembranar com duas alças extracelulares, além de um N-terminal e C-terminal no citoplasma. Em humanos, os 24 membros da família claudina foram descobertos e descritos. Esses membros são expressos em diferentes tecidos e suas funções alteradas têm sido relacionadas à formação de cânceres. Por exemplo, as alterações no nível de expressão das Claudina 1, Claudina 18 e Claudina 10 têm sido associadas com câncer de cólon, câncer gástrico e carcinoma hepatocelular, respectivamente, e as claudinas tornaram-se, portanto, alvos promissores nas estratégias terapêuticas (Swisshelm et al., (2005) Adv Drug Deliv Rev 57(6):
2 / 309 919-928).
[004] A Claudina18 (CLDN18) possui duas variantes de splice, a Claudina18.1 (CLDN18.1) e a Claudina18.2 (CLDN18.2) que se diferenciam na porção do N-terminal. Não há expressão detectável de Claudina18.2 nos tecidos normais com exceção do estômago onde a Claudina18.2 é expressa exclusivamente nas células epiteliais gástricas diferenciadas de vida curta. No entanto, ela é mantida durante a transformação da malignidade e, portanto, frequentemente apresentada na superfície das células do câncer gástrico humano. Além disso, esta proteína é ativada ectopicamente em níveis significativos nos adenocarcinomas esofágicos, pancreáticos e pulmonares (Niimi et al., (2001) Mol Cell Biol 21(21): 7380-7390; Tanaka et al. (2011) J Histochem Cytochem 59(10): 942-952; Micke et al., (2014) Int J Cancer 135(9): 2206-2214; Shimobaba et al. (2016) Biochim Biophys Acta 1863(6 Pt A): 1170-1178; Singh et al., (2017) J Hematol Oncol 10(1): 105; Tokumitsu et al., (2017) Cytopathology 28(2): 116-121).
[005] As alças extracelulares expostas da Claudina18.2 e o padrão de expressão restritivo fazem dela um alvo promissor na imunoterapia contra o câncer. Os anticorpos anti-Claudina18.2 e os CARs têm sido desenvolvidos e estudados há anos. Por exemplo, o IMAB362 (Claudiximabe, Zolbetuximabe), um anticorpo de IgG1 monoclonal quimérico, está sendo estudado em vários ensaios clínicos para o tratamento de pacientes com cânceres gastroesofágicos avançados (Sahin et al., (2017) Journal of Hematology & Oncology 10: 105). A terapia de célula T do receptor de antígeno quimérico anti-Claudina18.2 de CARs (células de CAR-T) entrou também nos estudos clínicos.
[006] Diferente das terapias com anticorpos, as terapias com células CAR-T dispensam a necessidade de imunização ativa e, portanto, têm eficácia potencial em pacientes com câncer imunologicamente comprometidos. Os CARs de nova geração consistem em cadeias leves e pesadas derivadas de
3 / 309 imunoglobulinas extracelulares, um domínio de ativação de célula T (normalmente incluindo cadeia zeta do complexo CD3) e um ou mais domínios quiméricos a partir de proteínas co-estimulatórias. Eles reconhecem antígenos de tumores independentemente do HLA e acionam a proliferação extensiva de células CAR-T após ligação ao antígeno (Carl H. June, (2018) N Engl J Med, 379:64-73).
[007] Embora a FDA tenha aprovado recentemente as células CD19 CAR-T para tratamento de cânceres de célula B, e existem centenas de estudos clínicos em andamento em todo o mundo envolvendo CAR-T, a maioria tem como alvo os cânceres hematológicos. Os estudos clínicos de tumores sólidos são menos dominados por CAR-T, com cerca da metade incluindo terapia celular com base em estudos envolvendo outras plataformas, como as células NK.
[008] Como um tumor sólido relevante de Claudina18.2, o câncer gástrico é a quarta (em homens) e a quinta (em mulheres) causas mais comuns de mortes relacionadas a câncer nos países desenvolvidos, e o câncer pancreático é geralmente diagnosticado em um estágio avançado quando os pacientes têm prognóstico extremamente ruim. Existe uma necessidade no setor por porções adicionais de ligação à Claudina18.2 e seus CARs com propriedades farmacêuticas mais desejáveis.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[009] Conforme fornecido neste documento, encontram-se porções de ligação à Claudina18.2, como os anticorpos anti-Claudina18.2 ou seus fragmentos de ligação.
[0010] Encontram-se fornecidas neste documento porções de ligação à Claudina18.2, compreendendo (a) uma região variável de cadeia pesada (VH) consistindo em uma CDR1 de cadeia pesada (VH CDR1) consistindo em X1X2X3X4X5, onde X1 é S ou N; X2 é H, Y ou F; X3 é N ou G; X4 é M, I ou L e X5 é H ou N (SEQ ID NO: 174); (2) uma CDR2 de cadeia pesada (VH
4 / 309 CDR2) consistindo em X6IX7PGX8GX9X10X11YNX12X13FX14X15, onde X6 é Y ou W; X7 é Y ou F; X8 é N ou D; X9 é G, R ou N; X10 é T, N ou S; X11 é K, N ou Y; X12 é Q ou E; X13 é K ou N; X14 é T ou K e X15 é G ou A (SEQ ID NO:175); e (3) uma CDR3 de cadeia pesada (VH CDR3) consistindo em X16YYGNSFX17X18, onde X16 é D ou F; X17 é A ou V e X18 é Y ou N (SEQ ID NO:176) e/ou (b) uma região variável de cadeia leve (VL) consistindo em (1) uma CDR1 de cadeia leve (VL CDR1) consistindo em KSSQSLX19NSGNQKNYLT, onde X19 é L ou F (SEQ ID NO:186); (2) uma CDR2 de cadeia leve (VL CDR2) consistindo em WAX20TRES, onde X20 é S ou A (SEQ ID NO:187) e (3) uma CDR3 de cadeia leve (VL CDR3) consistindo em QNX21X22X23X24PX25X26, onde X21 é D, G ou N; X22 é Y ou F; X23 é M, R, S, W, Y ou F; X24 é F ou Y; X25 é F ou L e X26 é T ou P (SEQ ID NO:188).
[0011] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 incluindo SHNMH (SEQ ID NO:69); (2) uma VH CDR2 consistindo em YIYPGNGGTNYNQKFKG (SEQ ID NO: 90) e (3) uma VH CDR3 incluindo DYYGNSFAY (SEQ ID NO:117) ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 consistindo em KSSQSLLNSGNQKNYLT (SEQ ID NO:136); (2) uma VL CDR2 incluindo WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNAYFYPFT (SEQ ID NO:151) ou sua variante incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[0012] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo uma VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 117, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 90 e 117, respectivamente; (4) as
5 / 309 sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 91 e 117, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 92 e 117, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 93 e 117, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 94 e 118, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 73, 95 e 117, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 119, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 130, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 202 e 118, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 90 e 117, respectivamente ou (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 390 e 118, respectivamente; ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 150, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 151, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 152, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 155, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 156, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 144 e 158, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 455, respectivamente ou (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 249, respectivamente; ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidosnas CDRs.
[0013] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo uma VH
6 / 309 CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 150, respectivamente.
[0014] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo uma VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 151, respectivamente.
[0015] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 90 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 152, respectivamente.
[0016] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 91 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente.
[0017] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 92 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente.
[0018] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam
7 / 309 especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 93 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 155, respectivamente.
[0019] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 94 e 118, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 156, respectivamente.
[0020] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 73, 95 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo os VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente.
[0021] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 119, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 144 e 158, respectivamente.
[0022] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 130, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 144 e 158, respectivamente.
8 / 309
[0023] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 202 e 118, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 455, respectivamente.
[0024] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 90 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente.
[0025] Em algumas modalidades, as porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistem em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 390 e 118, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 249, respectivamente.
[0026] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, estão porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 incluindo (a) uma VH consistindo em (1) uma VH CDR1 incluindo SYX27X28H, onde X27=é N ou Y; e X28 é M ou I (SEQ ID NO: 177); (2) uma VH CDR2 incluindo YIX29PX30NGGX31X32YX33X34KFX35X36, onde X29 é Y, S ou D; X30 é G ou F; X31 é T ou S; X32 é N, Y ou R; X33 é S ou N; X34 é Q ou L; X35 é K, R ou E; X36 é G ou D (SEQ ID NO:178) e (3) a VH CDR3 incluindo X37RX38X39X40Y, onde X37 é G ou L; X38 é G ou F; X39 é F ou L; X40 é A ou T (SEQ ID NO:179); e/ou (b) uma VL consistindo em (1) VL CDR1 incluindo KSSQSLX41NX42GNQX43NYLX44, onde X41 é F ou L; X42 é T ou S; X43 é K ou E; e X44 é T ou I (SEQ ID NO:189); (2) uma VL CDR2
9 / 309 incluindo RASTRX45S, onde X45 é E, D ou Q (SEQ ID NO:190) (3) um VL CDR3 incluindo QNDX46SYPLT, onde X46 é F ou Y (SEQ ID NO:191).
[0027] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 que inclui SYNIH (SEQ ID NO:75); (2) uma VH CDR2 que inclui YIYPGNGGTNYNQKFKG (SEQ ID NO: 90) e (3) uma VH CDR3 incluindo DRGFAY (SEQ ID NO:120) ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 consistindo em KSSQSLLNSGNQKNYLT (SEQ ID NO:137); (2) uma VL CDR2 incluindo RASTRES (SEQ ID NO:145) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNDYSYPLT (SEQ ID NO:160) ou sua variante incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[0028] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 97 e 120, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 98 e 120, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 99 e 120, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 100 e 120, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 90 e 121, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 101 e 122, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 101 e 123, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 201 e 120, respectivamente ou (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 202 e 120, respectivamente, ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3 que incluem (1) as sequências de aminoácidos
10 / 309 de SEQ ID NOs: 138, 145 e 159, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 139, 146 e 160, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente ou (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 147 e 160, respectivamente; ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[0029] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 97 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 138, 145 e 159, respectivamente.
[0030] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 98 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente.
[0031] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 99 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 139, 146 e 160, respectivamente.
[0032] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo
11 / 309 as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 100 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 139, 146 e 160, respectivamente.
[0033] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 90 e 121, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente.
[0034] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 101 e 122, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente.
[0035] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 101 e 123, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 147 e 160, respectivamente.
[0036] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 201 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3
12 / 309 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente.
[0037] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 202 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente.
[0038] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 incluindo (a) uma VH consistindo em (1) uma VH CDR1 incluindo X47YGVX48, onde X47 é T, S ou R e X48 é H ou S (SEQ ID NO: 180); (2) uma VH CDR2 incluindo VIWX49X50GX51TX52YX53X54X55X56X57S, onde X49 é A, G ou S; X50 é G ou D; X51 é S ou N; X52 é N ou D; X53 é N ou H; X54 é S ou A; X55 é A ou T; X56 é L ou F e X57 é M ou I (SEQ ID NO:181); e (3) uma VH CDR3 incluindo X58X59X60X61GNX62X63DY, onde X58 é A ou nulo; X59 é A, G ou V; X60 é Y ou R; X61 é Y, F ou nulo; X62 é A, G ou S; e X63 é L, F ou M (SEQ ID NO:182); e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 incluindo KSSQX64LLNSGNQKX65YLT, onde X64 é T ou S; e X65 é N ou S (SEQ ID NO:192); (2) um VL CDR2 incluindo WASTX66X67S, onde X66 é G ou R; e X67 é E ou D (SEQ ID NO:193); e (3) uma VL CDR3 incluindo QNX68YX69X70PX71T, onde X68 é A, D, N ou V; X69 é F, S, ou I e X70 é Y ou F e X71 é F ou L (SEQ ID NO:194).
[0039] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 que inclui SYGVS (SEQ ID NO:78); (2) uma VH CDR2 que inclui VIWAGGSTNYHSALMS (SEQ ID NO: 197); e (3) uma VH CDR3 incluindo AAYYGNALDY (SEQ
13 / 309 ID NO:198) ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs; e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 consistindo em KSSQSLLNSGNQKNYLT (SEQ ID NO:136); (2) uma VL CDR2 incluindo WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNAYFYPFT (SEQ ID NO:161) ou sua variante incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[0040] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 77, 102 e 124, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 78, 103 e 125, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 79, 104 e 126, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 78, 105 e 127, respectivamente ou (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 103 e 125, respectivamente; ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 148 e 161, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 149 e 163, respectivamente ou (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 142, 143 e 164, respectivamente; ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[0041] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 77, 102 e 124, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 148 e 161,
14 / 309 respectivamente.
[0042] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 78, 103 e 125, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente.
[0043] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 79, 104 e 126, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 149 e 163, respectivamente.
[0044] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 78, 105 e 127, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 142, 143 e 164, respectivamente.
[0045] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 103 e 125, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente.
15 / 309
[0046] Em algumas modalidades fornecidas neste documento estão porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 incluindo (a) uma VH consistindo em (1) uma VH CDR1 incluindo X72X73GMH, onde X72 é S, G ou T e X73 é F ou S (SEQ ID NO: 183); (2) uma VH CDR2 incluindo YIX74X75GSX76X77IX78YAX79X80X81X82G, onde X74 é S ou N; X75 é S, G ou T; X76 é S, R, T ou N; X77 é T ou P; X78 é Y ou F; X79 é D ou H; X80 é T ou S; X81 é V ou L e X82 é K ou Q (SEQ ID NO:184) e (3) uma VH CDR3 incluindo X83YYGNSFX84X85, onde X83 é F ou I; X84 é V, D ou A e X85 é Y, N ou H (SEQ ID NO:185); e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 incluindo SSQX86LLNSGNQKNYLT, onde X86 é S ou T (SEQ ID NO:195); (2) VL CDR2 abrangendo WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNX87YX88X89PX90T, onde X87 é A, D ou N; X88 é I, S, T ou Y; X89 é Y ou F; X90 é L ou V (SEQ ID NO:196).
[0047] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, estão porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 que inclui SGFTFSSFGMH (SEQ ID NO:80); (2) uma VH CDR2 que inclui YISSGSSTIYYADTVKG (SEQ ID NO: 199); e (3) uma VH CDR3 incluindo FYYGNSFAY (SEQ ID NO:130) ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs; e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 consistindo em KSSQSLLNSGNQKNYLT (SEQ ID NO:136); (2) uma VL CDR2 incluindo WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNAYFYPFT (SEQ ID NO:167) ou sua variante incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[0048] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 106 e 128, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 107 e
16 / 309 129, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 82, 108 e 130, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 83, 110 e 130, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 131, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 111 e 132, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 84, 112 e 132, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 110 e 130, respectivamente; ou (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID Nos:81, 391 e 129, respectivamente, ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs; e/ou (b) uma VL incluindo VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 165, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 167, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 168, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 169, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 170, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 160, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 171, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID Nos:136, 143 e 162, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID NOs: 141, 143, e 167, respectivamente; ou (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID Nos:141, 143 e 166, respectivamente, ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[0049] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo
17 / 309 as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 106 e 128, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 165, respectivamente.
[0050] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 107 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente.
[0051] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 82, 108 e 130, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 167, respectivamente.
[0052] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 168, respectivamente.
[0053] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 83, 110 e 130,
18 / 309 respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 169, respectivamente.
[0054] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 131, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 170, respectivamente.
[0055] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 111 e 132, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 160, respectivamente.
[0056] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 84, 112 e 132, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 171, respectivamente.
[0057] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3
19 / 309 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente.
[0058] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 131, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 167, respectivamente.
[0059] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 107 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 166, respectivamente.
[0060] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, incluindo (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 85, 113 e 133, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 86, 114 e 134, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 87, 115 e 131, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 116 e 135, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 203, 211 e 225, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 204, 212 e 226, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 213 e 227, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 206, 214 e 131, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 207, 215
20 / 309 e 228, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 208, 216 e 229, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 230, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 217 e 117, respectivamente; (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 218 e 231, respectivamente; (14) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 219 e 117, respectivamente; (15) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 220 e 120, respectivamente; (16) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 221 e 117, respectivamente; (17) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 222 e 118, respectivamente; (18) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 223 e 118, respectivamente; (19) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 210, 224 e 232, respectivamente; (20) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 217 e 118, respectivamente; (21) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; (22) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 393 e 394, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 395 e 396, respectivamente; (24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 397, 398 e 399, respectivamente; (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 400 e 120, respectivamente; (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 401 e 120, respectivamente; (27) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 402, 403 e 404, respectivamente; (28) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 117, respectivamente; (29) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 405 e 117, respectivamente; (30) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 406, 407 e 408, respectivamente; (31) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 409, 410 e 411, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 416, respectivamente; (33) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 412 e 411, respectivamente; (34) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 413, 414 e 415, respectivamente;
21 / 309
(35) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 416, respectivamente; (36) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 417, 418 e 232, respectivamente; (37) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 419 e 420, respectivamente; (38) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 421 e 422, respectivamente; (39) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 423 e 424, respectivamente; (40) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; (41) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 425 e 135, respectivamente; (42) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 426 e 129, respectivamente; (43) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; (44) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; (45) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 430, 391 e 431, respectivamente; (46) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 129, respectivamente; (47) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 432 e 129, respectivamente; (48) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 129, respectivamente; (49) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 434, 435 e 129, respectivamente; (50) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 436, 428 e 429, respectivamente; (51) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 437 e 129, respectivamente; (52) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 438 e 129, respectivamente; (53) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 439 e 441, respectivamente; (54) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 431, respectivamente; (55) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 442 e 443, respectivamente; (56) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 440 e 441, respectivamente; (57) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 444, 445 e 446, respectivamente; (58) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 447, 448 e 449, respectivamente; (59) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 450, 451 e 452, respectivamente; (60) as
22 / 309 sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 453 e 129, respectivamente ou (61) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 454, respectivamente; ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 167, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 173, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 223, 241 e 242, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 243, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 234, 143 e 244, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 235, 143 e 245, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 236, 143 e 246, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 237, 143 e 151, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 247, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 248, respectivamente; (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 238, 143 e 157, respectivamente; (14) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente; (15) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 150, respectivamente; (16) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 151, respectivamente; (17) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 239, 143 e 249, respectivamente; (18) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 245, respectivamente; (19) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 250, respectivamente; (20) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente; (21) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; (22) as sequências de aminoácidos de
23 / 309
SEQ ID NOs: 456, 457 e 250, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 458, 146 e 160, respectivamente; (24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente; (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 244, respectivamente; (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; (27) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 459, respectivamente; (28) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 460, 461 e 462, respectivamente; (29) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 463 e 464, respectivamente; (30) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 465, 466 e 162, respectivamente; (31) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 457, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 244, respectivamente; (33) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 468, respectivamente; (34) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 469, respectivamente; (35) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente; (36) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 166, respectivamente; (37) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 470, respectivamente; (38) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; (39) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 471, respectivamente; (40) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 472, 473 e 474, respectivamente; (41) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; (42) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 476, 143 e 166, respectivamente; (43) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 477, respectivamente; (44) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 478, 143 e 166, respectivamente; (45) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 479, 143 e 163, respectivamente; (46) as sequências de
24 / 309 aminoácidos de SEQ ID NOs: 480, 143 e 481, respectivamente; (47) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 483, respectivamente; (48) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 160, respectivamente; (49) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 484, respectivamente; (50) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 485, 486 e 487, respectivamente; (51) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 488, 489 e 490, respectivamente; (52) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 491, 492 e 493, respectivamente ou (53) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 494, respectivamente; ou sua variante, incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[0061] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 85, 113 e 133, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente.
[0062] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 86, 114 e 134, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente.
[0063] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 87, 115 e 131,
25 / 309 respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 167, respectivamente.
[0064] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 116 e 135, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 173, respectivamente.
[0065] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 203, 211 e 225, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 223, 241 e 242, respectivamente.
[0066] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 204, 212 e 226, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 243, respectivamente.
[0067] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 213 e 227, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3,
26 / 309 incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 234, 143 e 244, respectivamente.
[0068] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 206, 214 e 131, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 235, 143 e 245, respectivamente.
[0069] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 207, 215 e 228, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente.
[0070] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 208, 216 e 229, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 236, 143 e 246, respectivamente.
[0071] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 230, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 237, 143 e 151, respectivamente.
27 / 309
[0072] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 217 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 247, respectivamente.
[0073] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 218 e 231, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 248, respectivamente.
[0074] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 219 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 238, 143 e 157, respectivamente.
[0075] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 220 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente.
[0076] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento,
28 / 309 encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 221 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 150, respectivamente.
[0077] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 222 e 118, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 151, respectivamente.
[0078] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 223 e 118, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 239, 143 e 249, respectivamente.
[0079] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 210, 224 e 232, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 245, respectivamente.
[0080] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2
29 / 309 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 217 e 118, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 250, respectivamente.
[0081] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente.
[0082] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 85, 113 e 133, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente.
[0083] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 393 e 394, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente.
[0084] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 395 e 396,
30 / 309 respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente.
[0085] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 397, 398 e 399, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 456, 457 e 250, respectivamente.
[0086] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 400 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 458, 146 e 160, respectivamente.
[0087] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 401 e 120, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente.
[0088] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 402, 403 e 404, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3,
31 / 309 incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 244, respectivamente.
[0089] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente.
[0090] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 405 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 459, respectivamente.
[0091] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 406, 407 e 408, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 460, 461 e 462, respectivamente.
[0092] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 463 e 464, respectivamente.
32 / 309
[0093] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 409, 410 e 411, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 465, 466 e 162, respectivamente.
[0094] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 416, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente.
[0095] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 412 e 411, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente.
[0096] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 413, 414 e 415, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 467, respectivamente.
[0097] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento,
33 / 309 encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 417, 418 e 232, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 244, respectivamente.
[0098] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 419 e 420, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 468, respectivamente.
[0099] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 421 e 422, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 469, respectivamente.
[00100] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 423 e 424, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente.
[00101] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2
34 / 309 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 166, respectivamente.
[00102] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 425 e 135, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 470, respectivamente.
[00103] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 426 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente.
[00104] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 471, respectivamente.
[00105] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo
35 / 309 as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 427, 428 e 429, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 472, 473 e 474, respectivamente.
[00106] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente.
[00107] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 430, 391 e 431, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 476, 143 e 166, respectivamente.
[00108] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 477, respectivamente.
[00109] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 391 e 129,
36 / 309 respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 478, 143 e 166, respectivamente.
[00110] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 432 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente.
[00111] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente.
[00112] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 479, 143 e 163, respectivamente.
[00113] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 434, 435 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3,
37 / 309 incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 166, respectivamente.
[00114] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 436, 428 e 429, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 472, 473 e 474, respectivamente.
[00115] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 437 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 479, 143 e 163, respectivamente.
[00116] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 478, 143 e 166, respectivamente.
[00117] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 438 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166,
38 / 309 respectivamente.
[00118] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 480, 143 e 481, respectivamente.
[00119] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 439 e 441, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 483, respectivamente.
[00120] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 431, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente.
[00121] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 442 e 443, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 160, respectivamente.
39 / 309
[00122] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 440 e 441, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 484, respectivamente.
[00123] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 444, 445 e 446, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 485, 486 e 487, respectivamente.
[00124] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 447, 448 e 449, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 488, 489 e 490, respectivamente.
[00125] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 450, 451 e 452, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 491, 492 e 493, respectivamente.
[00126] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento,
40 / 309 encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 453 e 129, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente.
[00127] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo VH CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 454, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 494, respectivamente.
[00128] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se liga especificamente à Claudina18.2, incluindo: (i) uma VH que consiste em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% da identidade de sequência de uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo, consistindo em números ímpares de SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378-380 e 383-385; e/ou (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% da identidade de sequência de uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387.
[00129] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2, incluindo (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% ou pelo menos 98% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos
41 / 309 selecionada do grupo consistindo em números ímpares de SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378-380 e 383-385; e (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% ou pelo menos 98% da identidade de sequência de uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387.
[00130] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação à Claudina18.2 consistindo em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em números ímpares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378-380 e 383-385; e (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387.
[00131] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2, onde as VH e VL incluem: (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1 e 2, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 3 e 4, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 5 e 6, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 7 e 8, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 9 e 10, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 11 e 12, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 13 e 14, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 15 e 16, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 17 e 18, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de
42 / 309
SEQ ID NOs: 19 e 20, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 21 e 22, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 23 e 24, respectivamente; (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 25 e 26, respectivamente; (14) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 27 e 28, respectivamente; (15) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 29 e 30, respectivamente; (16) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 31 e 32, respectivamente; (17) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 33 e 34, respectivamente; (18) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 35 e 36, respectivamente; (19) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 37 e 38, respectivamente; (20) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 39 e 40, respectivamente; (21) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 41 e 42, respectivamente; (22) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 43 e 44, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 45 e 46, respectivamente; (24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 47 e 48, respectivamente; (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 49 e 50, respectivamente; (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 51 e 52, respectivamente; (27) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 53 e 54, respectivamente; (28) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 55 e 56, respectivamente; (29) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 57 e 58, respectivamente; (30) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 59 e 60, respectivamente; (31) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 61 e 62, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 63 e 64, respectivamente; (33) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 65 e 66, respectivamente; (34) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 67 e 68, respectivamente; (35) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 251 e 252, respectivamente; (36) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 253 e 254, respectivamente; (37) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 255 e 256, respectivamente; (38) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 257 e 258, respectivamente; (39) as
43 / 309 sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 259 e 260, respectivamente; (40) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 261 e 262, respectivamente; (41) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 263 e 264, respectivamente; (42) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 265 e 266, respectivamente; (43) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 267 e 268, respectivamente; (44) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 269 e 270, respectivamente; (45) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 271 e 272, respectivamente; (46) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 273 e 274, respectivamente; (47) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 275 e 276, respectivamente; (48) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 277 e 278, respectivamente; (49) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 279 e 280, respectivamente; (50) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 281 e 282, respectivamente; (51) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 283 e 284, respectivamente; (52) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 285 e 286, respectivamente; (53) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 287 e 288, respectivamente; (54) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 289 e 290, respectivamente; (55) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 337-345 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 346, respectivamente; (56) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 337- 345 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 347, respectivamente; (57) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 348-352 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 353, respectivamente; (58) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 348-352 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 354, respectivamente; (59) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 355-362 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 363, respectivamente; (60) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 355- 362 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 364, respectivamente; (61) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 365-369 e a sequência de
44 / 309 aminoácidos de SEQ ID NO: 370, respectivamente; (62) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 365-369 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 371, respectivamente; (63) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 372-374 e a sequência de aminoácidos com os SEQ ID NOs: 375-377, respectivamente; (64) as sequências de aminoácidos com quaisquer dos SEQ ID NOs: 378-380 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 381, respectivamente; (65) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 378- 380 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 382, respectivamente; (66) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 383-385 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 386, respectivamente; (67) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 383-385 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 387, respectivamente; (68) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 495 e 496, respectivamente; (69) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 497 e 498, respectivamente; (70) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 499 e 500, respectivamente; (71) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 501 e 502, respectivamente; (72) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 503 e 504, respectivamente; (73) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 505 e 506, respectivamente; (74) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 507 e 508, respectivamente; (75) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 509 e 510, respectivamente; (76) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 511 e 512, respectivamente; (77) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 513 e 514, respectivamente; (78) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 515 e 516, respectivamente; (79) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 517 e 518, respectivamente; (80) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 519 e 520, respectivamente; (81) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 521 e 522, respectivamente; (82) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 523 e 524, respectivamente; (83) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 525 e 526, respectivamente; (84) as sequências
45 / 309 de aminoácidos de SEQ ID NOs: 527 e 528, respectivamente; (85) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 529 e 530, respectivamente; (86) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 531 e 532, respectivamente; (87) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 533 e 534, respectivamente; (88) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 535 e 536, respectivamente; (89) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 537 e 538, respectivamente; (90) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 539 e 540, respectivamente; (91) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 541 e 542, respectivamente; (92) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 543 e 544, respectivamente; (93) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 545 e 546, respectivamente; (94) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 547 e 548, respectivamente; (95) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 549 e 550, respectivamente; (96) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 551 e 552, respectivamente; (97) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 553 e 554, respectivamente; (98) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 555 e 556, respectivamente; (99) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 557 e 558, respectivamente; (100) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 559 e 560, respectivamente; (101) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 561 e 562, respectivamente; (102) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 563 e 564, respectivamente; (103) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 565 e 566, respectivamente; (104) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 567 e 568, respectivamente; (105) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 569 e 570, respectivamente; (106) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 571 e 572, respectivamente; (107) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 573 e 574, respectivamente; (108) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 575 e 576, respectivamente; (109) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 577 e 578, respectivamente; (110) as sequências de
46 / 309 aminoácidos de SEQ ID NOs: 579 e 580, respectivamente; (111) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 581 e 582, respectivamente; (112) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 583 e 584, respectivamente; (113) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 585 e 586, respectivamente; (114) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 587 e 588, respectivamente; (115) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 589 e 590, respectivamente; (116) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 591 e 592, respectivamente; (117) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1593 e 594, respectivamente; (118) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 595 e 596, respectivamente; (119) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 597 e 598, respectivamente; (120) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 599 e 600, respectivamente; (121) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 601 e 602, respectivamente; (122) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 603 e 604, respectivamente; (123) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 605 e 606, respectivamente; (124) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 607 e 608, respectivamente; (125) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 609 e 610, respectivamente; (126) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 611 e 612, respectivamente; (127) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 613 e 614, respectivamente; (128) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 615 e 616, respectivamente; (129) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 617 e 618, respectivamente; (130) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 619 e 620, respectivamente; (131) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 621 e 622, respectivamente; (132) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 623 e 624, respectivamente; (133) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 625 e 626, respectivamente; (134) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 627 e 628, respectivamente; (135) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:
47 / 309
629 e 630, respectivamente; (136) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 631 e 632, respectivamente; (137) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 633 e 634, respectivamente; (138) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 635 e 636, respectivamente; (139) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 637 e 638, respectivamente; (140) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 639 e 640, respectivamente; (141) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 641 e 642, respectivamente; (142) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 643 e 644, respectivamente; (143) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 645 e 646, respectivamente; (144) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 647 e 648, respectivamente; (145) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 649 e 650, respectivamente; (155) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 651 e 652, respectivamente; (156) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 653 e 654, respectivamente; (157) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 655 e 656, respectivamente; (158) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 657 e 658, respectivamente; (159) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 659 e 660, respectivamente; (160) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 661 e 662, respectivamente; (167) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 663 e 664, respectivamente; (168) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 665 e 666, respectivamente; (169) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 667 e 668, respectivamente; (170) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 669 e 670, respectivamente; (171) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 671 e 672, respectivamente; (172) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 673 e 674, respectivamente; (173) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 675 e 676, respectivamente; (174) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID Nos:677 e 678, respectivamente; (175) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID NOs: 679 e 680, respectivamente; ou
48 / 309 uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas VH e/ou VL.
[00132] Em algumas modalidades fornecidas neste documento encontram-se porção de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2, incluindo uma VH que inclui um VH CDR1, CDR2 e CDR3 e uma VL que inclui um VL CDR1, CDR2 e CDR3 de um anticorpo que consiste em VH e uma VL tendo: (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1 e 2, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 3 e 4, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 5 e 6, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 7 e 8, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 9 e 10, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 11 e 12, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 13 e 14, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 15 e 16, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 17 e 18, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 19 e 20, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 21 e 22, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 23 e 24, respectivamente; (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 25 e 26, respectivamente; (14) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 27 e 28, respectivamente; (15) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 29 e 30, respectivamente; (16) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 31 e 32, respectivamente; (17) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 33 e 34, respectivamente; (18) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 35 e 36, respectivamente; (19) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 37 e 38, respectivamente; (20) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 39 e 40, respectivamente; (21) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 41 e 42, respectivamente; (22) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 43 e 44, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 45 e 46,
49 / 309 respectivamente; (24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 47 e 48, respectivamente; (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 49 e 50, respectivamente; (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 51 e 52, respectivamente; (27) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 53 e 54, respectivamente; (28) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 55 e 56, respectivamente; (29) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 57 e 58, respectivamente; (30) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 59 e 60, respectivamente; (31) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 61 e 62, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 63 e 64, respectivamente; (33) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 65 e 66, respectivamente; (34) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 67 e 68, respectivamente; (35) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 251 e 252, respectivamente; (36) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 253 e 254, respectivamente; (37) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 255 e 256, respectivamente; (38) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 257 e 258, respectivamente; (39) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 259 e 260, respectivamente; (40) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 261 e 262, respectivamente; (41) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 263 e 264, respectivamente; (42) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 265 e 266, respectivamente; (43) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 267 e 268, respectivamente; (44) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 269 e 270, respectivamente; (45) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 271 e 272, respectivamente; (46) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 273 e 274, respectivamente; (47) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 275 e 276, respectivamente; (48) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 277 e 278, respectivamente; (49) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 279 e 280, respectivamente; (50) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 281 e 282, respectivamente; (51) as sequências de aminoácidos
50 / 309 de SEQ ID NOs: 283 e 284, respectivamente; (52) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 285 e 286, respectivamente; (53) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 287 e 288, respectivamente; (54) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 289 e 290, respectivamente; (55) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 337-345 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 346, respectivamente; (56) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 337-345 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 347, respectivamente; (57) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 348-352 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 353, respectivamente; (58) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 348- 352 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 354, respectivamente; (59) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 355-362 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 363, respectivamente; (60) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 355-362 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 364, respectivamente; (61) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 365-369 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 370, respectivamente; (62) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 365- 369 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 371, respectivamente; (63) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 372-374 e a sequência de aminoácidos com os SEQ ID NOs: 375-377, respectivamente; (64) as sequências de aminoácidos com quaisquer dos SEQ ID NOs: 378-380 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 381, respectivamente; (65) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 378-380 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 382, respectivamente; (66) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 383-385 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 386, respectivamente; (67) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 383-385 e a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 387, respectivamente; (68) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 495 e 496, respectivamente; (69) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:
51 / 309
497 e 498, respectivamente; (70) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 499 e 500, respectivamente; (71) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 501 e 502, respectivamente; (72) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 503 e 504, respectivamente; (73) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 505 e 506, respectivamente; (74) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 507 e 508, respectivamente; (75) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 509 e 510, respectivamente; (76) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 511 e 512, respectivamente; (77) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 513 e 514, respectivamente; (78) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 515 e 516, respectivamente; (79) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 517 e 518, respectivamente; (80) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 519 e 520, respectivamente; (81) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 521 e 522, respectivamente; (82) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 523 e 524, respectivamente; (83) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 525 e 526, respectivamente; (84) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 527 e 528, respectivamente; (85) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 529 e 530, respectivamente; (86) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 531 e 532, respectivamente; (87) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 533 e 534, respectivamente; (88) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 535 e 536, respectivamente; (89) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 537 e 538, respectivamente; (90) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 539 e 540, respectivamente; (91) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 541 e 542, respectivamente; (92) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 543 e 544, respectivamente; (93) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 545 e 546, respectivamente; (94) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 547 e 548, respectivamente; (95) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 549 e 550, respectivamente; (96) as sequências de
52 / 309 aminoácidos de SEQ ID NOs: 551 e 552, respectivamente; (97) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 553 e 554, respectivamente; (98) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 555 e 556, respectivamente; (99) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 557 e 558, respectivamente; (100) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 559 e 560, respectivamente; (101) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 561 e 562, respectivamente; (102) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 563 e 564, respectivamente; (103) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 565 e 566, respectivamente; (104) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 567 e 568, respectivamente; (105) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 569 e 570, respectivamente; (106) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 571 e 572, respectivamente; (107) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 573 e 574, respectivamente; (108) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 575 e 576, respectivamente; (109) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 577 e 578, respectivamente; (110) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 579 e 580, respectivamente; (111) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 581 e 582, respectivamente; (112) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 583 e 584, respectivamente; (113) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 585 e 586, respectivamente; (114) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 587 e 588, respectivamente; (115) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 589 e 590, respectivamente; (116) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 591 e 592, respectivamente; (117) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1593 e 594, respectivamente; (118) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 595 e 596, respectivamente; (119) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 597 e 598, respectivamente; (120) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 599 e 600, respectivamente; (121) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 601 e 602,
53 / 309 respectivamente; (122) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 603 e 604, respectivamente; (123) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 605 e 606, respectivamente; (124) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 607 e 608, respectivamente; (125) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 609 e 610, respectivamente; (126) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 611 e 612, respectivamente; (127) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 613 e 614, respectivamente; (128) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 615 e 616, respectivamente; (129) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 617 e 618, respectivamente; (130) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 619 e 620, respectivamente; (131) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 621 e 622, respectivamente; (132) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 623 e 624, respectivamente; (133) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 625 e 626, respectivamente; (134) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 627 e 628, respectivamente; (135) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 629 e 630, respectivamente; (136) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 631 e 632, respectivamente; (137) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 633 e 634, respectivamente; (138) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 635 e 636, respectivamente; (139) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 637 e 638, respectivamente; (140) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 639 e 640, respectivamente; (141) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 641 e 642, respectivamente; (142) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 643 e 644, respectivamente; (143) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 645 e 646, respectivamente; (144) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 647 e 648, respectivamente; (145) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 649 e 650, respectivamente; (155) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 651 e 652, respectivamente; (156) as sequências de
54 / 309 aminoácidos de SEQ ID NOs: 653 e 654, respectivamente; (157) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 655 e 656, respectivamente; (158) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 657 e 658, respectivamente; (159) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 659 e 660, respectivamente; (160) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 661 e 662, respectivamente; (167) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 663 e 664, respectivamente; (168) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 665 e 666, respectivamente; (169) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 667 e 668, respectivamente; (170) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 669 e 670, respectivamente; (171) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 671 e 672, respectivamente; (172) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 673 e 674, respectivamente; (173) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 675 e 676, respectivamente; (174) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID Nos:677 e 678, respectivamente; (175) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID NOs: 679 e 680, respectivamente.
[00133] Também fornecidos neste documento, encontram-se porções de ligação que competem com as porções de ligação ora descritas para ligação à Claudina18.2.
[00134] Em algumas modalidades, as porções de ligação divulgadas neste documento não se ligam à Claudina18.1 em um nível detectável. Em algumas modalidades, as porções de ligação, divulgadas neste documento, ligam-se à Claudina18.2 com uma afinidade que é pelo menos 50 vezes maior que sua afinidade com a Claudina18.1.
[00135] Em algumas modalidades, uma porção de ligação, divulgada neste documento, consiste em ou é um anticorpo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação, divulgada neste documento, consiste em ou é um anticorpo monoclonal. Em algumas modalidades, uma porção de ligação, divulgada neste documento, consiste em ou é um anticorpo multiespecífico.
55 / 309 Em algumas modalidades, a porção de ligação, fornecida neste documento, é selecionada do grupos consistindo em um Fab, Fab’, F(ab’)2, Fv, scFv e (scFv)2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação, divulgada neste documento é um scFv. Em algumas modalidades, a porção de ligação, divulgada neste documento é um anticorpo IgG1, anticorpo IgG2, anticorpo IgG3 ou um anticorpo IgG4. Em algumas modalidades, a porção de ligação, divulgada neste documento é um anticorpo, anticorpo humanizado ou um anticorpo humano, ou seu fragmento de ligação ao antígeno. Em algumas modalidades, uma porção de ligação, divulgada neste documento, é um anticorpo humanizado.
[00136] Os anticorpos descritos neste documento podem conter uma região constante de cadeia pesada, ligada ao C-terminal da região variável de cadeia pesada, e/ou uma região constante de cadeia leve, ligada ao C-terminal da região variável de cadeia leve. A região constante de cadeia pesada pode ser uma região constante de cadeia pesada da IgG1 humana, tendo uma sequência de aminoácidos definida, por exemplo, no SEQ ID NO: 388. A região constante de cadeia leve pode ser uma região constante de cadeia leve kappa humana, tendo uma sequência de aminoácidos definida, por exemplo, no SEQ ID NO: 389.
[00137] Em algumas modalidades, descritas neste documento, encontram-se polinucleotídeos que codificam as porções de ligação descritas neste documento. Em algumas modalidades, descritas neste documento, encontram-se vetores que consistem em polinucleotídeos descritos neste documento.
[00138] Em algumas modalidades, descritas neste documento, encontram-se células isoladas incluindo polinucleotídeos descritos neste documento. Em algumas modalidades, descritas neste documento, encontram-se células isoladas incluindo vetores descritos neste documento.
[00139] Em outro aspecto, o presente pedido fornece um receptor de
56 / 309 antígeno quimérico (CAR) consistindo em um fragmento variável de cadeia única anti-Claudina18.2 (scFv), o scFv anti-Claudina18.2 incluindo CDRs ou regiões variáveis de cadeia pesada/leve, conforme descritas neste documento, para as porções de ligação à Claudina18.2.
[00140] Em algumas modalidades, o CAR anti-Claudina18.2 consiste em (a) um domínio de ligação de antígeno extracelular incluindo um fragmento variável de cadeia única anti-Claudina18.2 (scFv), o scFv anti- Claudina18.2 incluindo CDRs ou regiões variáveis de cadeia pesada/leve, conforme descritas acima, para as porções de ligação à Claudina18.2; (b) um domínio transmembrana e (c) um domínio de sinalização intracelular.
[00141] Em algumas modalidades, o CAR consiste em uma região variável de cadeia pesada tendo VH CDR1, CDR2 e CDR3 e uma região variável de cadeia leve tendo VL CDR1, CDR2 e CDR3, as VH CDR1, CDR2 e CDR3 e as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem sequência de aminoácidos conforme definidas nos (1) SEQ ID NOs: 69, 89, 117, 136, 143 e 150, respectivamente; (2) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 151, respectivamente; (3) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 151, respectivamente; (4) SEQ ID NOs: 70, 90, 117, 136, 143 e 152, respectivamente; (5) SEQ ID NOs: 69, 91, 117, 137, 143 e 153, respectivamente; (6) SEQ ID NOs: 71, 92, 117, 136, 143 e 154, respectivamente; (7) SEQ ID NOs: 71, 92, 117, 136, 143 e 154, respectivamente; (8) SEQ ID NOs: 72, 93, 117, 136, 143 e 155, respectivamente; (9) SEQ ID NOs: 69, 94, 118, 136, 143 e 156, respectivamente; (10) SEQ ID NOs: 73, 95, 117, 137, 143 e 157, respectivamente; (11) SEQ ID NOs: 74, 96, 119, 136, 144 e 158, respectivamente; (12) SEQ ID NOs: 74, 96, 119, 136, 144 e 158, respectivamente; (13) SEQ ID NOs: 70, 97, 120, 138, 145 e 159, respectivamente; (14) SEQ ID NOs: 70, 98, 120, 136, 145 e 160, respectivamente; (15) SEQ ID NOs: 75, 99, 120, 139, 146 e 160,
57 / 309 respectivamente; (16) SEQ ID NOs: 75, 100, 120, 139, 146 e 160, respectivamente; (17) SEQ ID NOs: 70, 90, 121, 137, 145 e 160, respectivamente; (18) SEQ ID NOs: 76, 101, 122, 140, 147 e 160, respectivamente; (19) SEQ ID NOs: 76, 101, 123, 136, 147 e 160, respectivamente; (20) SEQ ID NOs: 70, 201, 120, 137, 145 e 160, respectivamente; (21) SEQ ID NOs: 70, 202, 120, 136, 145 e 160, respectivamente; (22) SEQ ID NOs: 77, 102, 124, 141, 148 e 161, respectivamente; (23) SEQ ID NOs: 78, 103, 125, 136, 143 e 162, respectivamente; (24) SEQ ID NOs: 79, 104, 126, 136, 149 e 163, respectivamente; (25) SEQ ID NOs: 78, 105, 127, 142, 143 e 164, respectivamente; (26) SEQ ID NOs: 80, 106, 128, 136, 143 e 165, respectivamente; (27) SEQ ID NOs: 81, 107, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (28) SEQ ID NOs: 82, 108, 130, 136, 143 e 167, respectivamente; (29) SEQ ID NOs: 80, 109, 130, 141, 143 e 168, respectivamente; (30) SEQ ID NOs: 83, 110, 130, 136, 143 e 169, respectivamente; (31) SEQ ID NOs: 80, 109, 131, 141, 143 e 170, respectivamente; (32) SEQ ID NOs: 80, 111, 132, 136, 143 e 160, respectivamente; (33) SEQ ID NOs: 84, 112, 132, 136, 143 e 171, respectivamente; (34) SEQ ID NOs: 85, 113, 133, 136, 143 e 172, respectivamente; (35) SEQ ID NOs: 86, 114, 134, 136, 143 e 172, respectivamente; (36) SEQ ID NOs: 87, 115, 131, 136, 143 e 167, respectivamente; (37) SEQ ID NOs: 88, 116, 135, 136, 143 e 173, respectivamente; (38) SEQ ID NOs: 203, 211, 225, 233, 241 e 242, respectivamente; (39) SEQ ID NOs: 204, 212, 226, 136, 143 e 243, respectivamente; (40) SEQ ID NOs: 205, 213, 227, 234, 143 e 244, respectivamente; (41) SEQ ID NOs: 206, 214, 131, 235, 143 e 245, respectivamente; (42) SEQ ID NOs: 207, 215, 228, 136, 143 e 163, respectivamente; (43) SEQ ID NOs: 208, 216, 229, 236, 143 e 246, respectivamente; (44) SEQ ID NOs: 69, 90, 230, 237, 143 e 151,
58 / 309 respectivamente; (45) SEQ ID NOs: 69, 217, 117, 137, 143 e 247, respectivamente; (46) SEQ ID NOs: 209, 218, 231, 136, 143 e 248, respectivamente; (47) SEQ ID NOs: 72, 219, 117, 238, 143 e 157, respectivamente; (48) SEQ ID NOs: 75, 220, 120, 137, 145 e 160, respectivamente; (49) SEQ ID NOs: 69, 221, 117, 136, 143 e 150, respectivamente; (50) SEQ ID NOs: 72, 222, 118, 136, 143 e 151, respectivamente; (51) SEQ ID NOs: 69, 223, 118, 239, 143 e 249, respectivamente; (52) SEQ ID NOs: 210, 224, 232, 240, 143 e 245, respectivamente; (53) SEQ ID NOs: 72, 217, 118, 136, 143 e 250, respectivamente; (54) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 153, respectivamente; (55) SEQ ID NOs:74, 96, 130, 136, 144 e 158, respectivamente; (56) SEQ ID NOs: 69, 202, 118, 136, 143 e 455, respectivamente; (57) SEQ ID NOs: 72, 90, 117, 137, 143 e 153, respectivamente; (58) SEQ ID NOs: 69, 390, 118, 136, 143 e 249, respectivamente; (59) SEQ ID NOs: 209, 103, 125, 136, 143 e 162, respectivamente; (60) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 136, 143 e 162, respectivamente; (61) SEQ ID NOs: 80, 109, 131, 141, 143 e 167, respectivamente; (62) SEQ ID NOs: 81, 107, 129, 141, 143 e 166, respectivamente; (63) SEQ ID NOs: 85, 113, 133, 136, 143 e 172, respectivamente; (64) SEQ ID NOs: 392, 393, 394, 136, 143 e 163, respectivamente; (65) SEQ ID NOs: 392, 395, 396, 136, 143 e 163, respectivamente; (66) SEQ ID NOs: 397, 398, 399, 456, 457 e 250, respectivamente; (67) SEQ ID NOs: 75, 400, 120, 458, 146 e 160, respectivamente; (68) SEQ ID NOs: 70, 401, 120, 136, 145 e 160, respectivamente; (69) SEQ ID NOs: 402, 403, 404, 240, 143 e 244, respectivamente; (70) SEQ ID NOs: 69, 219, 117, 137, 143 e 157, respectivamente; (71) SEQ ID NOs: 71, 405, 117, 136, 143 e 459, respectivamente; (72) SEQ ID NOs: 406, 407, 408, 460, 461 e 462, respectivamente; (73) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 463 e 464,
59 / 309 respectivamente; (74) SEQ ID NOs: 409, 410, 411, 465, 466 e 162, respectivamente; (75) SEQ ID NOs: 69, 219, 416, 137, 143 e 157, respectivamente; (76) SEQ ID NOs: 76, 412, 411, 140, 147 e 160, respectivamente; (77) SEQ ID NOs: 413, 414, 415, 136, 143 e 467, respectivamente; (78) SEQ ID NOs: 417, 418, 232, 136, 143 e 244, respectivamente; (79) SEQ ID NOs: 69, 419, 420, 136, 143 e 468, respectivamente; (80) SEQ ID NOs: 205, 421, 422, 136, 143 e 469, respectivamente; (81) SEQ ID NOs: 205, 423, 424, 136, 143 e 154, respectivamente; (82) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 240, 143 e 166, respectivamente; (83) SEQ ID NOs: 88, 425, 135, 136, 143 e 470, respectivamente; (84) SEQ ID NOs: 81, 426, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (85) SEQ ID NOs: 80, 109, 130, 136, 143 e 471, respectivamente; (86) SEQ ID NOs: 427, 428, 429, 472, 473 e 474, respectivamente; (87) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (88) SEQ ID NOs: 430, 391, 431, 476, 143 e 166, respectivamente; (89) SEQ ID NOs: 80, 109, 129, 136, 143 e 477, respectivamente; (90) SEQ ID NOs: 80, 391, 129, 478, 143 e 166, respectivamente; (91) SEQ ID NOs: 81, 432, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (92) SEQ ID NOs: 433, 391, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (93) SEQ ID NOs: 80, 109, 129, 479, 143 e 163, respectivamente; (94) SEQ ID NOs: 434, 435, 129, 240, 143 e 166, respectivamente; (95) SEQ ID NOs: 436, 428, 429, 472, 473 e 474, respectivamente; (96) SEQ ID NOs: 80, 437, 129, 479, 143 e 163, respectivamente; (97) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 478, 143 e 166, respectivamente; (98) SEQ ID NOs: 81, 438, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (99) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 480, 143 e 481, respectivamente; (100) SEQ ID NOs: 80, 439, 441, 482, 143 e 483, respectivamente; (101) SEQ ID NOs: 433, 391, 431, 475, 143 e 166, respectivamente; (102) SEQ ID NOs: 80, 442, 443, 136, 143 e 160,
60 / 309 respectivamente; (103) SEQ ID NOs: 80, 440, 441, 482, 143 e 484, respectivamente; (104) SEQ ID NOs: 444, 445, 446, 485, 486 e 487, respectivamente; (105) SEQ ID NOs: 447, 448, 449, 488, 489 e 490, respectivamente; (106) SEQ ID NOs: 450, 451, 452, 491, 492 e 493, respectivamente; (107) SEQ ID NOs: 81, 453, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; ou (108) SEQ ID NOs: 69, 89, 454, 136, 143 e 494, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00142] Em algumas modalidades, o CAR consiste em uma região variável de cadeia pesada, tendo uma sequência de aminoácidos definida em quaisquer dos números ímpares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378-380 e 383-385 e uma região variável de cadeia leve tendo uma sequência de aminoácidos definida em quaisquer dos números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387. Em algumas modalidades, o CAR consiste em uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve tendo sequências de aminoácidos definidas em (1) SEQ ID NOs: 1 e 2, respectivamente; (2) SEQ ID NOs: 3 e 4, respectivamente; (3) SEQ ID NOs: 5 e 6, respectivamente; (4) SEQ ID NOs: 7 e 8, respectivamente; (5) SEQ ID NOs: 9 e 10, respectivamente; (6) SEQ ID NOs: 11 e 12, respectivamente; (7) SEQ ID NOs: 13 e 14, respectivamente; (8) SEQ ID NOs: 15 e 16, respectivamente; (9) SEQ ID NOs: 17 e 18, respectivamente; (10) SEQ ID NOs: 19 e 20, respectivamente; (11) SEQ ID NOs: 21 e 22, respectivamente; (12) SEQ ID NOs: 23 e 24, respectivamente; (13) SEQ ID NOs: 25 e 26, respectivamente; (14) SEQ ID NOs: 27 e 28, respectivamente; (15) SEQ ID NOs: 29 e 30, respectivamente; (16) SEQ ID NOs: 31 e 32, respectivamente; (17) SEQ ID NOs: 33 e 34, respectivamente; (18) SEQ ID NOs: 35 e 36, respectivamente; (19) SEQ ID
61 / 309
NOs: 37 e 38, respectivamente; (20) SEQ ID NOs: 39 e 40, respectivamente; (21) SEQ ID NOs: 41 e 42, respectivamente; (22) SEQ ID NOs: 43 e 44, respectivamente; (23) SEQ ID NOs: 45 e 46, respectivamente; (24) SEQ ID NOs: 47 e 48, respectivamente; (25) SEQ ID NOs: 49 e 50, respectivamente; (26) SEQ ID NOs: 51 e 52, respectivamente; (27) SEQ ID NOs: 53 e 54, respectivamente; (28) SEQ ID NOs: 55 e 56, respectivamente; (29) SEQ ID NOs: 57 e 58, respectivamente; (30) SEQ ID NOs: 59 e 60, respectivamente; (31) SEQ ID NOs: 61 e 62, respectivamente; (32) SEQ ID NOs: 63 e 64, respectivamente; (33) SEQ ID NOs: 65 e 66, respectivamente; (34) SEQ ID NOs: 67 e 68, respectivamente; (35) SEQ ID NOs: 251 e 252, respectivamente; (36) SEQ ID NOs: 253 e 254, respectivamente; (37) SEQ ID NOs: 255 e 256, respectivamente; (38) SEQ ID NOs: 257 e 258, respectivamente; (39) SEQ ID NOs: 259 e 260, respectivamente; (40) SEQ ID NOs: 261 e 262, respectivamente; (41) SEQ ID NOs: 263 e 264, respectivamente; (42) SEQ ID NOs: 265 e 266, respectivamente; (43) SEQ ID NOs: 267 e 268, respectivamente; (44) SEQ ID NOs: 269 e 270, respectivamente; (45) SEQ ID NOs: 271 e 272, respectivamente; (46) SEQ ID NOs: 273 e 274, respectivamente; (47) SEQ ID NOs: 275 e 276, respectivamente; (48) SEQ ID NOs: 277 e 278, respectivamente; (49) SEQ ID NOs: 279 e 280, respectivamente; (50) SEQ ID NOs: 281 e 282, respectivamente; (51) SEQ ID NOs: 283 e 284, respectivamente; (52) SEQ ID NOs: 285 e 286, respectivamente; (53) SEQ ID NOs: 287 e 288, respectivamente; (54) SEQ ID NOs: 289 e 290, respectivamente; (55) qualquer um dos SEQ ID NOs: 337-345, e SEQ ID NO.: 346, respectivamente; (56) qualquer um dos SEQ ID NOs: 337-345, e SEQ ID NO.: 347, respectivamente; (57) qualquer um dos SEQ ID NOs: 348-352, e SEQ ID NOs: 353, respectivamente; (58) qualquer um dos SEQ ID NOs: 348- 352, e SEQ ID NOs: 354, respectivamente; (59) qualquer um dos SEQ ID NOs: 355-362 e SEQ ID NO: 363, respectivamente; (60) qualquer um dos
62 / 309
SEQ ID NOs: 355-362 e SEQ ID NO: 364, respectivamente; (61) qualquer um dos SEQ ID NOs: 365-369 e SEQ ID NO: 370, respectivamente; (62) qualquer um dos SEQ ID NOs: 365-369 e SEQ ID NO: 371, respectivamente; (63) qualquer um dos SEQ ID NOs: 372-374 e quaisquer dos SEQ ID NOs: 375-377, respectivamente; (64) qualquer um dos SEQ ID NOs: 378-380 e SEQ ID NO: 381, respectivamente; (65) qualquer um dos SEQ ID NOs: 378- 380 e SEQ ID NO: 382, respectivamente; (66) qualquer um dos SEQ ID NOs: 383-385 e SEQ ID NO: 386, respectivamente; (67) qualquer um dos SEQ ID NOs: 383-385 e SEQ ID NO: 387, respectivamente; (68) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 495 e 496, respectivamente; (69) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 497 e 498, respectivamente; (70) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 499 e 500, respectivamente; (71) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 501 e 502, respectivamente; (72) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 503 e 504, respectivamente; (73) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 505 e 506, respectivamente; (74) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 507 e 508, respectivamente; (75) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 509 e 510, respectivamente; (76) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 511 e 512, respectivamente; (77) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 513 e 514, respectivamente; (78) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 515 e 516, respectivamente; (79) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 517 e 518, respectivamente; (80) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 519 e 520, respectivamente; (81) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 521 e 522, respectivamente; (82) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 523 e 524, respectivamente; (83) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 525 e 526, respectivamente; (84) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 527 e 528, respectivamente; (85) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 529 e 530, respectivamente; (86) as sequências de aminoácidos de SEQ ID
63 / 309
NOs: 531 e 532, respectivamente; (87) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 533 e 534, respectivamente; (88) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 535 e 536, respectivamente; (89) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 537 e 538, respectivamente; (90) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 539 e 540, respectivamente; (91) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 541 e 542, respectivamente; (92) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 543 e 544, respectivamente; (93) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 545 e 546, respectivamente; (94) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 547 e 548, respectivamente; (95) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 549 e 550, respectivamente; (96) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 551 e 552, respectivamente; (97) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 553 e 554, respectivamente; (98) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 555 e 556, respectivamente; (99) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 557 e 558, respectivamente; (100) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 559 e 560, respectivamente; (101) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 561 e 562, respectivamente; (102) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 563 e 564, respectivamente; (103) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 565 e 566, respectivamente; (104) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 567 e 568, respectivamente; (105) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 569 e 570, respectivamente; (106) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 571 e 572, respectivamente; (107) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 573 e 574, respectivamente; (108) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 575 e 576, respectivamente; (109) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 577 e 578, respectivamente; (110) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 579 e 580, respectivamente; (111) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 581 e 582, respectivamente; (112) as sequências de aminoácidos de SEQ ID
64 / 309
NOs: 583 e 584, respectivamente; (113) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 585 e 586, respectivamente; (114) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 587 e 588, respectivamente; (115) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 589 e 590, respectivamente; (116) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 591 e 592, respectivamente; (117) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1593 e 594, respectivamente; (118) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 595 e 596, respectivamente; (119) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 597 e 598, respectivamente; (120) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 599 e 600, respectivamente; (121) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 601 e 602, respectivamente; (122) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 603 e 604, respectivamente; (123) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 605 e 606, respectivamente; (124) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 607 e 608, respectivamente; (125) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 609 e 610, respectivamente; (126) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 611 e 612, respectivamente; (127) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 613 e 614, respectivamente; (128) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 615 e 616, respectivamente; (129) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 617 e 618, respectivamente; (130) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 619 e 620, respectivamente; (131) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 621 e 622, respectivamente; (132) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 623 e 624, respectivamente; (133) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 625 e 626, respectivamente; (134) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 627 e 628, respectivamente; (135) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 629 e 630, respectivamente; (136) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 631 e 632, respectivamente; (137) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 633 e 634,
65 / 309 respectivamente; (138) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 635 e 636, respectivamente; (139) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 637 e 638, respectivamente; (140) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 639 e 640, respectivamente; (141) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 641 e 642, respectivamente; (142) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 643 e 644, respectivamente; (143) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 645 e 646, respectivamente; (144) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 647 e 648, respectivamente; (145) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 649 e 650, respectivamente; (155) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 651 e 652, respectivamente; (156) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 653 e 654, respectivamente; (157) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 655 e 656, respectivamente; (158) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 657 e 658, respectivamente; (159) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 659 e 660, respectivamente; (160) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 661 e 662, respectivamente; (167) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 663 e 664, respectivamente; (168) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 665 e 666, respectivamente; (169) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 667 e 668, respectivamente; (170) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 669 e 670, respectivamente; (171) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 671 e 672, respectivamente; (172) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 673 e 674, respectivamente; (173) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 675 e 676, respectivamente; (174) as sequência de aminoácidos dos SEQ ID Nos:677 e 678, respectivamente; (175) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID NOs: 679 e 680, respectivamente.
[00143] Em algumas modalidades, o CAR consiste em uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve tendo
66 / 309 sequências de aminoácidos definidas em (1) SEQ ID NOs: 251 e 252, respectivamente; (2) SEQ ID NOs: 253 e 254, respectivamente; (3) SEQ ID NOs: 67 e 68, respectivamente; (4) SEQ ID NOs: 255 e 256, respectivamente; (5) SEQ ID NOs: 257 e 258, respectivamente; (6) SEQ ID NOs: 43 e 44, respectivamente; (7) SEQ ID NOs: 27 e 28, respectivamente; (8) SEQ ID NOs: 13 e 14, respectivamente; (9) SEQ ID NOs: 9 e 10, respectivamente; (10) SEQ ID NOs: 3 e 4, respectivamente; (11) SEQ ID NOs: 35 e 36, respectivamente; (12) SEQ ID NOs: 15 e 16, respectivamente; (13) SEQ ID NOs: 1 e 2, respectivamente; (14) SEQ ID NOs: 17 e 18, respectivamente; (15) SEQ ID NOs: 21 e 22, respectivamente; (16) SEQ ID NOs: 37 e 38, respectivamente; (17) SEQ ID NOs: 41 e 42, respectivamente; (18) SEQ ID NOs: 259 e 260, respectivamente; (19) SEQ ID NOs: 25 e 26, respectivamente; (20) SEQ ID NOs: 31 e 32, respectivamente; (21) SEQ ID NOs: 23 e 24, respectivamente; (22) SEQ ID NOs: 261 e 262, respectivamente; (23) SEQ ID NOs: 263 e 264, respectivamente; (24) SEQ ID NOs: 29 e 30, respectivamente; (25) SEQ ID NOs: 265 e 266, respectivamente; (26) SEQ ID NOs: 267 e 268, respectivamente; (27) SEQ ID NOs: 269 e 270, respectivamente; (28) SEQ ID NOs: 271 e 272, respectivamente; (29) SEQ ID NOs: 273 e 274, respectivamente; (30) SEQ ID NOs: 275 e 276, respectivamente; (31) SEQ ID NOs: 277 e 278, respectivamente; (32) SEQ ID NOs: 279 e 280, respectivamente; (33) SEQ ID NOs: 281 e 282, respectivamente; (34) SEQ ID NOs: 283 e 284, respectivamente; (35) SEQ ID NOs: 285 e 286, respectivamente; (36) SEQ ID NOs: 287 e 288, respectivamente; ou (37) SEQ ID NOs: 289 e 290, respectivamente.
[00144] Em algumas modalidades, o scFV anti-Claudina18.2 inclui uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve conectadas por um ligante. Em algumas modalidades, o ligante pode ser um peptídeo de ligante curto de cerca de 10 a 25 aminoácidos, rico em glicina,
67 / 309 serina ou teonina, como o que inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO: 297. Em algumas modalidades, o ligante está conectado ao N- terminal da região variável de cadeia pesada e ao C-terminal da região variável de cadeia leve, ou vice-versa. Em algumas modalidades, o CAR consiste em um ou mais scFvs direcionados para os mesmos ou diferentes antígenos. Dois scFvs em um CAR podem ser formados como di-scFvs ou diacorpos em tandem, e três scFvs podem ser formados como tri-scFvs ou tri(a)corpos em tandem.
[00145] Em algumas modalidades, o domínio de ligação a antígeno extracelular também pode incluir, em seu N-terminal, um peptídeo sinal. Em algumas modalidades, o peptídeo sinal pode ser derivado de uma molécula selecionada do grupo que consiste em CD8α, receptor GM-CSF α e cadeia pesada de IgG1. Em algumas modalidades, o peptídeo sinal é derivado de CD8α. Em algumas modalidades, o peptídeo sinal inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO: 291.
[00146] Em algumas modalidades, o domínio de ligação a antígeno extracelular pode também incluir, no C-terminal, um domínio de dobradiça. Em algumas modalidades, o domínio de dobradiça é derivado de CD8α. Em algumas modalidades, o domínio de dobradiça inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO: 292.
[00147] Em algumas modalidades, o domínio de transmembrana é derivado de uma molécula selecionada do grupo que consiste em CD8α, CD4, CD28, CD137, CD80, CD86, CD152 e PD1. Em algumas modalidades, o domínio de transmembrana é derivado de CD8α ou CD28. Em algumas modalidades, o domínio de transmembrana inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO: 293.
[00148] Em algumas modalidades, o domínio de sinalização intracelular inclui um domínio de sinalização intracelular primário e um domínio de sinalização co-estimulatório. Em algumas modalidades, o
68 / 309 domínio de sinalização intracelular primário é um domínio contendo motivo de ativação com base em tirosina do imunorreceptor (ITAM [immunoreceptor tyrosine-based activation motif]). Em algumas modalidades, o domínio contendo ITAM é o domínio citoplasmático de CD3-zeta que pode incluir uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 296. Em algumas modalidades, o domínio de sinalização co-estimulatório é derivado de uma molécula co-estimulatória selecionada do grupo que consiste em CD27, CD28, CD137, OX40, CD30, CD40, CD3, LFA-1, ICOS, CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, Ligandos de CD83 e suas combinações. Em algumas modalidades, o domínio de sinalização co-estimulatório inclui um domínio citoplasmático de CD28 e/ou um domínio citoplasmático de CD137. O domínio citoplasmático de CD28 e o domínio citoplasmático de CD137 podem incluir sequências de aminoácidos de SEQ ID NO: 294 e SEQ ID NO: 295, respectivamente.
[00149] Em algumas modalidades, o CAR consiste em, do N-terminal ao C-terminal, um peptídeo sinal de SEQ ID NO: 291, uma região variável de cadeia leve e uma região variável de cadeia pesada, descritas acima, para porções de ligação à Claudina18.2 conectadas a um ligante de SEQ ID NO: 297, um ligante de SEQ ID NO: 298, uma dobradiça de SEQ ID NO: 292, um domínio citoplasmático de CD137 de SEQ ID NO: 294, e um domínio citoplasmático de CD3-zeta de SEQ ID NO: 296.
[00150] Em algumas modalidades, um CAR consiste em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% ou pelo menos 98% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos de quaisquer dos SEQ ID NOs: 299-335. Em algumas modalidades, o CAR consiste em uma sequência de aminoácidos de quaisquer dos SEQ ID NOs: 299-335.
[00151] O presente pedido fornece ácidos nucleicos que codificam os CARs descritos neste documento. O presente pedido também fornece um
69 / 309 vetor que consiste em quaisquer dos ácidos nucleicos isolados e descritos acima. Em algumas modalidades, o vetor é um vetor de expressão. Em algumas modalidades, o vetor é um vetor viral, um vetor lentiviral ou um vetor não viral.
[00152] O presente pedido fornece uma célula imune manipulada, consistindo em quaisquer dos CARs fornecidos acima, ou quaisquer dos ácidos nucleicos descritos acima ou quaisquer dos vetores descritos acima. Em algumas modalidades, a célula imunológica é uma célula T, uma célula NK, uma célula mononuclear de sangue periférico (PBMC), uma célula- tronco hematopoiética, uma célula-tronco pluripotente ou uma célula-tronco embrionária. Em algumas modalidades, a célula imune é uma célula T , como uma célula citotóxica T , uma célula T auxiliar, uma célula T assassina natural ou uma célula γδT.
[00153] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se as composições farmacêuticas, consistindo em uma quantidade terapeuticamente eficaz das porções de ligação descritas neste documento ou os CARs fornecidos acima, além de um carreador farmaceuticamente aceitável.
[00154] Também fornecidos neste documento, encontram-se métodos de tratamento de um tumor ou câncer que expressa Claudina18.2 em um indivíduo que necessita do mesmo, por meio de administração no indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição farmacêutica descrita acima.
[00155] Em algumas modalidades, o tumor ou câncer que expressa Claudina18.2 é gástrico, esofágico, gastroesofágico, pancreático, ovariano ou pulmonar. Em algumas modalidades, o tumor ou câncer que expressa Claudina18.2 é um tumor ou câncer gástrico. Em algumas modalidades, o tumor ou câncer que expressa Claudina18.2 é um tumor ou câncer gastroesofágico.
70 / 309
[00156] Em algumas modalidades, o indivíduo é humano.
[00157] Em algumas modalidades, a célula imune manipulada para tratamento do tumor ou câncer é autóloga. Em algumas modalidades, a célula imunológica manipulada é alogênica.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[00158] FIGs. 1A-1O. Ensaio ELISA de anticorpo não humanizado de Claudina18.2. FIGs. 1A-1O apresentam capacidades de ligação dos anticorpos indicados à proteína Claudina18.2-His por ELISA indireto, cujas ilustrações foram plotadas com relação ao log de concentração de anticorpos (ng/ml).
[00159] FIGs. 2A-2P. Ensaio de Citotoxidade Dependente de Complemento (CDC) induzido por anticorpo não humanizado de Claudina18.2. FIGs. 2A-2P apresentam a lise de células-alvo de CHO-K1 superexpressando Claudina18.2 humana após incubação com os anticorpos indicados. O anticorpo IMAB362 (Claudiximabe) foi utilizado como controle positivo. Os resultados foram plotados como percentual de lise de célula-alvo em função do log de concentração de anticorpos (μg/ml).
[00160] FIGs. 3A-3Q. Ensaio ELISA baseado em células de anticorpo não humanizado de Claudina18.2. FIGs. 3A-3Q apresentam a ligação dos anticorpos indicados a uma linhagem celular estável HEK293T, expressando Claudina18.2, cujas ilustrações foram plotadas com relação ao log de concentração de anticorpos (nmol/L). IMAB362 (Claudiximabe), IgG de camundongo e IgG1Fc humana serviram como controles.
[00161] FIGs. 4A-4C. Ensaio de ligação FACS de anticorpo quimérico FIGs. 4A-4C apresentam a ligação de anticorpos quiméricos às células HEK293 que expressam Claudina18.2 como uma função do log de concentração de anticorpos (nM). IMAB362 (Claudiximabe) e IgG humana serviram como controles.
[00162] FIGs. 5A-5C. Ensaio de indução de CDC de anticorpo
71 / 309 quimérico FIGs. 5A-5C apresentam a lise de células-alvo de CHO-K1 superexpressando Claudina18.2 humana após incubação com os anticorpos quiméricos indicados. Os resultados foram plotados como percentual de lise de célula-alvo em função do log de concentração de anticorpos (μg/ml). IMAB362 (Claudiximabe) e IgG humana serviram como controles.
[00163] FIGs. 6A-6J. Ensaio de indução de Citotoxicidade Mediada por Células Dependente de Anticorpos (ADCC) Quiméricos. FIGs. 6A-6G apresentam o percentual de lise de células-alvo de CHO-K1 superexpressando Claudina18.2 humana após incubação com os anticorpos indicados e PBMCs humanos recém-isolados. Os resultados foram plotados como percentual de lise de célula-alvo em função do log de concentração de anticorpos (μg/ml). IMAB362 (Claudiximabe) e IgG humana serviram como controles.
[00164] Fig. 7A-7G. Ensaio de ligação FACS de anticorpo humanizado FIGs. 7A-7G apresentam a ligação de anticorpos humanizados indicados às células HEK293 que expressam Claudina18.2 como uma função do log de concentração de anticorpos (nM). IMAB362 (Claudiximabe) e IgG humana serviram como controles.
[00165] Fig. 8A-8H. Ensaio de indução de CDC de anticorpo humanizado. FIGs. 8A-8H apresentam a lise de células-alvo de CHO-K1 superexpressando Claudina18.2 humana após incubação com os anticorpos quiméricos indicados. Os resultados foram plotados como percentual de lise de célula-alvo em função do log de concentração de anticorpos (μg/ml). IMAB362 (Claudiximabe) e IgG humana serviram como controles.
[00166] FIGs. 9A-9H. Ensaio de indução de Citotoxicidade Mediada por Células Dependente de Anticorpos (ADCC) Humanizados. FIGs. 9A-9H apresentam o percentual de lise de células-alvo de CHO-K1 superexpressando Claudina18.2 humana após incubação com os anticorpos indicados e PBMCs humanas recém-isoladas. Os resultados foram plotados como percentual de lise de célula-alvo em função do log de concentração de anticorpos (μg/ml).
72 / 309 IMAB362 (Claudiximabe) e IgG humana serviram como controles.
[00167] A FIG.10 apresenta resultados de um ensaio in vitro de citotoxicidade de células T expressando CARs exemplares em relação às células CHO.18.2.Luc ou CHO.18.1.Luc.
[00168] A FIG.11 apresenta resultados de um ensaio in vitro de citotoxicidade de células T expressando CARs em relação às linhagens celulares positivas de Claudina18.2.
[00169] A FIG.12 apresenta resultados de um ensaio in vitro de citotoxicidade de células T expressando CARs em relação às células KATOIII.Luc, células KATOIII.18.1.Luc ou células KATOIII.18.2.Luc.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO Definições
[00170] Salvo definido em contrário neste documento, os termos técnicos e científicos usados na presente descrição têm os significados comumente entendidos pelos versados na técnica.
[00171] Os termos “um”, “uma”, "uns” e “umas”, conforme usados neste documento, referem-se a um ou mais de um (isto é, a pelo menos um) dos objetos gramaticais do artigo. Por exemplo, “um anticorpo” significa um anticorpo ou mais de um anticorpo.
[00172] O termo “porção de ligação”, conforme usado neste documento, refere-se a uma molécula ou uma porção de uma molécula que se liga à uma molécula-alvo (por exemplo, Claudina18.2). Uma porção de ligação pode consistir em uma proteína, peptídeo, ácido nucleico, carboidrato, lipídio ou composto de pequeno peso molecular. Em algumas modalidades, uma porção de ligação consiste em um anticorpo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação consiste em um fragmento de ligação a antígeno de um anticorpo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação consiste em um componente de pequeno peso molecular. A porção de ligação também pode ser um anticorpo ou seu fragmento de ligação a antígeno. Em algumas
73 / 309 modalidades, uma porção de ligação consiste em um domínio de ligação a ligando de um receptor. Em algumas modalidades, uma porção de ligação consiste em um domínio extracelular de um receptor transmembranar. A porção de ligação também pode ser o domínio de ligação a ligando de um receptor ou o domínio extracelular de um receptor transmembranar. Uma porção de ligação pode ser monovalente, o que significa dizer que ela contém um local de ligação que interage especificamente com a molécula-alvo. Uma porção de ligação pode ser bivalente, o que significa dizer que ela contém locais de ligação que interagem especificamente com a molécula-alvo. Uma porção de ligação pode ser multivalente, o que significa dizer que ela contém locais de ligação que interagem especificamente com a molécula-alvo. Uma porção de ligação bivalente ou porção de ligação multivalente pode interagir com um ou mais epítopos em uma única molécula-alvo. Uma porção de ligação bivalente ou porção de ligação multivalente também pode interagir com duas ou mais moléculas-alvo.
[00173] O termo “afinidade de ligação”, conforme usado neste documento, geralmente refere-se à potência da soma total de interações não covalentes entre uma porção de ligação e uma molécula-alvo. A ligação de uma porção de ligação e uma molécula-alvo é um processo reversível e a afinidade da ligação é normalmente relatada como uma constante de dissociação de equilíbrio (KD). A KD é a relação entre uma taxa de dissociação (koff ou kd) e a taxa de associação (kon ou ka). Quanto mais baixa a KD de um par de ligação, maior a afinidade. Vários métodos de medição da afinidade de ligação são conhecidos na técnica, todos os quais podem ser usados para os fins da presente divulgação. Modalidades ilustrativas específicas incluem os seguintes itens. Em uma modalidade, a “KD” ou “valor de KD” pode ser medido por meio de ensaios conhecidos na técnica, por exemplo, por ensaio de ligação. A KD pode ser medida em um ensaio de ligação do antígeno radiomarcado (RIA [radiolabebled antigen binding])
74 / 309 (Chen, et al., (1999) J. Mol Biol 293:865-881). A KD ou valor de KD também pode ser medido usando-se ensaios de ressonância de plasmon de superfície por Biacore, usando, por exemplo, um BIAcoreTM-2000 ou BIAcoreTM- 3000 (BIAcore, Inc., Piscataway, NJ), ou por interferometria de biolayer usando, por exemplo, o sistema OctetQK384 (ForteBio, Menlo Park, CA) Quando uma molécula-alvo, contendo vários epítopos, entra em contato com uma porção de ligação contendo vários locais de ligação que se ligam à molécula-alvo, a interação da molécula de ligação com a molécula-alvo em um local aumentará a probabilidade de uma reação em um segundo local. A potência de tais interações múltiplas entre o anticorpo multivalente e o antígeno é chamada de avidez. Por exemplo, a alta avidez pode compensar a baixa afinidade, como às vezes é encontrado em anticorpos IgM pentaméricos, que podem ter uma afinidade mais baixa do que IgG, mas a alta avidez de IgM, resultante de sua multivalência, permite que ele se ligue ao antígeno de forma eficaz.
[00174] O termo “liga-se especificamente”, conforme usado neste documento, significa que um polipeptídeo ou molécula interage com mais frequência, mais rapidez, com maior duração, com maior afinidade ou com alguma combinação dos termos acima com o epítopo, proteína ou molécula- alvo do que com as substâncias alternativas, incluindo as proteínas relacionadas e não relacionadas. Uma porção de ligação (por exemplo, anticorpo) que se liga especificamente a uma molécula-alvo (por exemplo, antígeno) pode ser identificada, por exemplo, por meio de imunoensaios, ELISAs, SPR (por exemplo, Biacore) ou por outras técnicas conhecidas pelos versados na técnica. Normalmente, uma reação específica terá pelo menos duas vezes o sinal ou ruído de fundo e pode ter mais de 10 vezes o fundo. Consultar, por exemplo, Paul, ed., 1989, Fundamental Immunology Second Edition, Raven Press, New York, nas páginas 332-336, para obter uma discussão em torno da especificidade do anticorpo. Uma porção de ligação
75 / 309 que se liga especificamente a uma molécula-alvo pode ligar-se a uma molécula-alvo em uma afinidade mais alta que sua afinidade para uma molécula diferente.
Em algumas modalidades, uma porção de ligação que se liga especificamente a uma molécula-alvo pode ligar-se à molécula-alvo com uma afinidade que é pelo menos 20 vezes maior, pelo menos 30 vezes maior, pelo menos 40 vezes maior, pelo menos 50 vezes maior, pelo menos 60 vezes maior, pelo menos 70 vezes maior, pelo menos 80 vezes maior, pelo menos 90 vezes maior ou pelo menos 100 vezes maior do que sua afinidade por uma molécula diferente.
Em algumas modalidades, uma porção de ligação que se liga especificamente a uma molécula-alvo específica, liga-se a uma molécula diferente em uma baixa afinidade de maneira que a ligação não pode ser detectada, usando-se um ensaio descrito neste documento, ou de outra forma conhecido na técnica.
Em algumas modalidades, “liga-se especificamente” significa, por exemplo, que uma porção de ligação liga-se a uma molécula- alvo com uma KD de cerca de 0,1 mM ou menos.
Em algumas modalidades, “liga-se especificamente” significa que um polipeptídeo ou molécula liga-se a um alvo com uma KD de cerca de 10 µM ou menos ou cerca e 1 µM ou menos.
Em algumas modalidades, “liga-se especificamente”” significa que um polipeptídeo ou molécula liga-se a um alvo com uma KD de cerca de 0,1 µM ou menos, cerca de 0,01 µM ou menos ou cerca e 1 nM ou menos.
Devido à identidade de sequência entre as proteínas homólogas em diferentes espécies, a ligação específica pode incluir um polipeptídeo ou molécula que reconhece uma proteína ou alvo em mais de uma espécie.
De mesma forma, por causa da homologia com algumas regiões das sequências de polipeptídeos de diferentes proteínas, a ligação específica pode incluir um polipeptídeo ou molécula que reconhece mais de uma proteína ou alvo.
Fica entendido que, em algumas modalidades, uma porção de ligação que se liga especificamente ao primeiro alvo pode ou não se ligar especificamente ao segundo alvo.
Como tal, “ligação específica” não necessariamente requer (embora possa incluir)
76 / 309 uma ligação exclusiva, ou seja, ligação a um alvo único. Portanto, uma porção de ligação pode, em algumas modalidades, ligar-se especificamente a mais de um alvo. Por exemplo, um anticorpo pode, em alguns casos, incluir dois locais idênticos de ligação a antígeno, cada qual ligando-se especificamente ao mesmo epítopo em duas ou mais proteínas. Em algumas modalidades alternativas, um anticorpo pode ser biespecífico e compreender pelo menos dois locais de ligação ao antígeno com especificidades diferentes.
[00175] O termo "anticorpo", conforme utilizado neste documento, refere-se a uma molécula de imunoglobulina que reconhece e se liga especificamente a um alvo, como uma proteína, polipeptídeo, peptídeo, carboidrato, polinucleotídeo, lipídeo ou uma combinação de qualquer um dos anteriores, através de pelo menos um local de ligação a antígeno, cujo local de ligação ao antígeno está geralmente dentro da região variável da molécula de imunoglobulina. Conforme utilizado neste documento, o termo abrange anticorpos policlonais intactos, anticorpos monoclonais intactos, anticorpos Fv de cadeia única (scFv), anticorpos de cadeia leve (LCAbs), anticorpos multiespecíficos, anticorpos biespecíficos, anticorpos monoespecíficos, anticorpos monovalentes, proteínas de fusão compreendendo um local de ligação ao antígeno de um anticorpo e qualquer outra molécula de imunoglobulina modificada incluindo um local de ligação ao antígeno (por exemplo, moléculas de imunoglobulina de domínio variável duplo), desde que os anticorpos exibam a atividade biológica desejada. Os anticorpos também podem incluir, entre outros, anticorpos de camundongos, anticorpos quiméricos, anticorpos humanizados e anticorpos humanos. Um anticorpo pode ser qualquer das cinco classes principais de imunoglobulinas: IgA, IgD, IgE, IgG e IgM, ou suas subclasses (isotipos) (por exemplo, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 e IgA2), com base na identidade de seus domínios constantes de cadeia pesada referidos como alfa, delta, épsilon, gama e mu, respectivamente. As diferentes classes de imunoglobulinas têm diferentes e
77 / 309 bem conhecidas estruturas de subunidades e configurações tridimensionais. Os anticorpos podem ser recombinantes ou conjugados com outras moléculas, incluindo, entre outros, toxinas e radioisótopos. Salvo indicado expressamente de outra forma, o termo “anticorpo”, conforme usado neste documento, inclui “fragmentos de ligação a antígeno” de anticorpos intactos.
[00176] O termo “fragmento de ligação a antígeno”, conforme utilizado neste documento, em relação a um anticorpo, refere-se a uma porção de um anticorpo intacto e refere-se às regiões variáveis determinantes antigênicas de um anticorpo intacto. Os exemplos de fragmentos de anticorpos incluem, entre outros, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, anticorpos lineares, moléculas de anticorpo de cadeia única (por exemplo, scFv), anticorpos de cadeia leve (LCAbs), scFv ligado por dissulfeto (dsscFv), diacorpos, tricorpos, tetracorpos, minicorpos, anticorpos de domínio variável duplo (DVD) e anticorpos multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticorpos.
[00177] O termo “região variável” de um anticorpo, conforme utilizado neste documento, refere-se a uma região variável de uma cadeia leve de anticorpo ou a região variável de uma cadeia pesada de anticorpo, única ou em combinação. Geralmente, a região variável das cadeias pesadas e leves consistem em quatro regiões estruturais (FRs [framework regions]) e três regiões determinantes da complementaridade (CDRs [complementarity determining regions]), também conhecidas como “regiões hipervariáveis”. As CDRs em cada cadeia são mantidas juntas em íntima proximidade pelas regiões estruturais e, com as CDRs da outra cadeia, contribuindo para a formação dos locais de ligação ao antígeno do anticorpo. Há pelo menos duas técnicas de determinação de CDRs: (1) uma abordagem com base na variabilidade de sequência de espécies cruzadas (Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest (5 ed.). Bethesda, MD: National Institutes of Health) e (2) uma abordagem com base em estudos
78 / 309 cristalográficos de complexos antígeno-anticorpo (Al-Lazikani et al., 1997, J. Mol. Biol., 273(4):927-48). Além disso, as combinações dessas duas abordagens são usadas na técnica e podem ser usadas para determinar as CDRs.
[00178] O termo “fragmento variável de cadeia única” ou “scFv” (single chain variable fragment), refere-se a uma proteína de fusão da região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve das imunoglobulinas, conectadas por um peptídeo de ligante curto de dez a vinte e cinco aminoácidos. O ligante é normalmente rico em glicina para flexibilidade, além de serina ou treonina para solubilidade. O scFV retém a especificidade da imunoglobulina original. Os scFvs podem ser conectados por ligantes de diferentes comprimentos para formar di-scFvs, diacorpos, tri- scFvs, triacorpos ou tetracorpos, que podem apresentar especificidade para um ou mais antígenos.
[00179] O termo "receptor de antígeno quimérico" ou "CAR” (chimeric antigen recetor) refere-se a um receptor manipulado que enxerta uma especificidade definida em uma célula efetora imune, normalmente uma célula T, aumentando sua função. O CAR de nova geração engloba um domínio de ligação extracelular que inclui um scFv, uma região de dobradiça, um domínio transmembranar e um domínio de sinalização intracelular (principalmente o domínio citoplasmático de CD3-zeta, que é o transmissor primário de sinais de ativação de células T, além de um ou mais domínios co- estimulatórios). Os CARs podem também adicionar fatores que intensificam a expansão, persistência e atividade anti-tumoral da célula T, como as citocinas e ligandos co-estimulatórios.
[00180] O termo “autólogo” refere-se a qualquer material derivado do mesmo indivíduo para quem, posteriormente, o material será reintroduzido.
[00181] O termo “alogênico” refere-se a um enxerto derivado de um indivíduo diferente da mesma espécie.
79 / 309
[00182] O termo "anticorpo humanizado", conforme utilizado neste documento, refere-se a formas de anticorpos não humanos (por exemplo, de murinos) que são cadeias de imunoglobulinas específicas, imunoglobulinas quiméricas ou seus fragmentos que contêm sequências não humanas mínimas. Normalmente, os anticorpos humanizados são imunoglobulinas humanas. Em alguns casos, os resíduos da região estrutural do Fv de uma imunoglobulina humana são substituídos pelos resíduos correspondentes em um anticorpo de espécies não humanas. Em alguns casos, os resíduos das CDRs são substituídos por resíduos de CDRs das espécies não humanas (por exemplo, camundongo, rato, hamster) que têm a especificidade, afinidade e/ou capacidade de ligação desejada. O anticorpo humanizado pode ser modificado também pela substituição de resíduos adicionais na região estrutural do Fv e/ou dentro dos resíduos não humanos substituídos para refinar e otimizar a especificidade, afinidade e/ou capacidade de ligação do anticorpo. O anticorpo humanizado pode englobar domínios variáveis contendo todos ou substancialmente todas as CDRs que correspondem à imunoglobulina não humana, enquanto todas ou substancialmente todas as regiões estruturais são aquelas de uma sequência de imunoglobulinas humanas. Em algumas modalidades, os domínios variáveis consistem em regiões estruturais de uma sequência de imunoglobulinas humanas. Em algumas modalidades, os domínios variáveis consistem em regiões estruturais de uma sequência consenso de imunoglobulinas humanas. O anticorpo humanizado também pode englobar pelo menos uma porção de uma região ou domínio (Fc) constante de imunoglobulinas, normalmente de uma imunoglobulina humana. Um anticorpo humanizado é normalmente considerado diferente de um anticorpo quimérico.
[00183] O termo "anticorpo quimérico", conforme utilizado neste documento, refere-se a um anticorpo em que a sequência de aminoácidos da molécula da imunoglobulina é derivada de duas ou mais espécies.
80 / 309 Normalmente, a região variável de ambas as cadeias leve e pesada corresponde à região variável de anticorpos derivados de uma espécie de mamífero (por exemplo, camundongo, rato, coelho, etc.) com a especificidade, afinidade e/ou capacidade de ligação desejada, enquanto que as regiões constantes são homólogas às sequências em anticorpos derivados de outra espécie (geralmente humana) para evitar o desencadeamento de uma resposta imunológica nessa espécie.
[00184] O termo "anticorpo humano", conforme utilizado neste documento, refere-se a um anticorpo produzido por um humano ou um anticorpo possuindo uma sequência de aminoácidos correspondente a um anticorpo, produzido por um humano, produzido por meio de quaisquer das técnicas conhecidas na técnica.
[00185] Os termos "epítopo" e "determinante antigênico" são utilizados intercambiavelmente neste documento, referindo-se ao local na superfície de uma molécula-alvo à qual uma porção de ligação se liga, como uma região localizada na superfície de um antígeno. A molécula-alvo pode incluir uma proteína, um peptídeo, ácido nucleico, carboidrato ou um lipídio. Um epítopo tendo atividade imunogênica é uma porção de uma molécula-alvo que induz uma resposta imunológica em um animal. Um epítopo de uma molécula-alvo com atividade antigênica é uma porção da molécula-alvo à qual um anticorpo se liga, conforme determinado por qualquer método bem conhecido na técnica, incluindo, por exemplo, por um imunoensaio. Os epítopos antigênicos não precisam ser, necessariamente, imunogênicos. Os epítopos geralmente consistem em agrupamentos de moléculas de superfície quimicamente ativos, como aminoácidos ou cadeias laterais de açúcar e têm características estruturais tridimensionais específicas, bem como características de carga específicas. O termo “epítopo” inclui epítopos lineares e epítopos conformacionais. Uma região de uma molécula-alvo (por exemplo, um polipeptídeo), que contribui para um epítopo, pode ser aminoácidos
81 / 309 contíguos do polipeptídeo ou o epítopo pode vir junto de duas ou mais regiões não contíguas da molécula-alvo. O epítopo pode ou não ter uma característica de superfície tridimensional da molécula-alvo. Os epítopos formados a partir de aminoácidos contíguos (também referidos como epítopos lineares) são normalmente retidos na desnaturação da proteína, enquanto os epítopos formados por enovelamento terciário (também referidos como epítopos conformacionais) são normalmente perdidos na desnaturação da proteína. Um epítopo normalmente inclui pelo menos 3 ou mais, pelo menos 5, 6, 7 ou 8-10 aminoácidos em uma conformação espacial única.
[00186] Os termos "polipeptídeo", "peptídeo" e "proteína", conforme usados intercambiavelmente neste documento, referem-se a polímeros de aminoácidos de qualquer comprimento, que podem ser lineares ou ramificados. Podendo incluir aminoácidos não naturais ou modificados, ou serem interrompidos por não aminoácidos. Um polipeptídeo, peptídeo ou proteína também pode ser modificado com, por exemplo, formação de ligação de dissulfeto, glicosilação, lipidação, acetilação, fosforilação ou qualquer outra manipulação ou modificação.
[00187] Os termos “polinucleotídeo” e “ácido nucleico”, conforme usados intercambiavelmente neste documento, referem-se a polímeros de nucleotídeos de qualquer comprimento e incluem DNA e RNA. Os nucleotídeos podem ser desoxirribonucleotídeos, ribonucleotídeos, nucleotídeos modificados ou bases e/ou seus análogos, ou qualquer substrato que possa ser incorporado a um polímero por polimerase de DNA ou RNA.
[00188] Um polipeptídeo, peptídeo, proteína, anticorpo, polinucleotídeo, vetor, célula ou composição que seja "isolado" é um polipeptídeo, peptídeo, proteína, anticorpo, polinucleotídeo, vetor, célula ou composição que está em uma forma não encontrada na natureza. Polipeptídeos, peptídeos, proteínas, anticorpos, polinucleotídeos, vetores, células ou composições isoladas incluem os que foram purificados a um grau
82 / 309 que não estão mais na forma em que são encontrados na natureza. Em algumas modalidades, um polipeptídeo, peptídeo, proteína, anticorpo, polinucleotídeo, vetor, célula ou composição que seja isolada é substancialmente pura.
[00189] Os termos "idêntico" ou porcentagem de "identidade", conforme usados neste documento, no contexto de dois ou mais ácidos nucleicos ou polipeptídeos, referem-se a duas ou mais sequências ou subsequências que são iguais ou têm uma porcentagem especificada de nucleotídeos ou resíduos de aminoácidos que são a mesma, quando comparado e alinhado (introduzindo lacunas, se necessário) para correspondência máxima, não considerando quaisquer substituições conservativas de aminoácidos como parte da identidade da sequência. A porcentagem de identidade pode ser medida usando-se software de comparação de sequência ou algoritmos ou através de inspeção visual. Vários algoritmos e software que podem ser usados para obter os alinhamentos das sequências de aminoácidos ou nucleotídeos são bem conhecidos na técnica. Estes incluem, entre outros, BLAST, ALIGN, Megalign, BestFit, GCG Wisconsin Package e suas variantes. Em algumas modalidades, dois ácidos nucleicos ou polipeptídeos da invenção são substancialmente idênticos, o que significa que eles têm pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90% e, em algumas modalidades, pelo menos 95%, 96%, 97%, 98%, 99% de identidade do nucleotídeo ou de resíduo de aminoácidos, quando comparado e alinhado para correspondência máxima, conforme medido usando-se um algoritmo de comparação de sequência ou por inspeção visual. Em algumas modalidades, a identidade existe sobre uma região das sequências de aminoácidos que têm pelo menos cerca de 10 resíduos, pelo menos cerca de 20, pelo menos cerca de 40-60 resíduos e pelo menos cerca de 60-80 resíduos de comprimento ou qualquer valor integral entre eles. Em algumas modalidades, a identidade existe em uma região mais
83 / 309 longa do que 60-80 resíduos, como pelo menos cerca de 80-100 resíduos, e em algumas modalidades as sequências são substancialmente idênticas ao longo de todo o comprimento das sequências sendo comparadas, como a região de codificação de uma proteína-alvo ou um anticorpo. Em algumas modalidades, a identidade existe em uma região das sequências de aminoácidos que têm pelo menos cerca de 10 bases, pelo menos cerca de 20 bases, pelo menos cerca de 40-60 bases, pelo menos cerca de 60-80 bases no comprimento ou qualquer valor integral entre eles. Em algumas modalidades, a identidade existe em uma região mais longa do que 60-80 bases, como pelo menos cerca de 80-1000 bases, e em algumas modalidades as sequências são substancialmente idênticas ao longo de todo o comprimento das sequências sendo comparadas, como a região de sequência de nucleotídeos que codifica uma proteína de interesse.
[00190] O termo “substituição de ácidos nucleicos”, conforme usado neste documento, refere-se à substituição de um resíduo de aminoácido por outro em uma sequência de polipeptídeos. Uma “substituição de aminoácido conservativa” é uma substituição em que um resíduo de aminoácido é substituído por outro resíduo de aminoácido tendo uma cadeia lateral com características químicas semelhantes. Famílias de resíduos de aminoácidos tendo cadeias laterais semelhantes foram em geral definidas na técnica, incluindo cadeias laterais básicas (por exemplo, lisina, arginina, histidina), cadeias laterais ácidas (por exemplo, ácido aspártico, ácido glutâmico), cadeias laterais polares sem carga (por exemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína), cadeias laterais não polares (por exemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptofano), cadeias laterais ramificadas em beta (por exemplo, treonina, valina, isoleucina) e cadeias laterais aromáticas (por exemplo, tirosina, fenilalanina, triptofano, histidina). Por exemplo, a substituição de uma fenilalanina por uma tirosina é uma substituição conservativa. Em geral,
84 / 309 as substituições conservativas nas sequências dos polipeptídeos, proteínas solúveis e/ou anticorpos da divulgação não anulam a ligação do polipeptídeo, proteína solúvel ou anticorpo contendo a sequência de aminoácidos, ao local- alvo de ligação. Os métodos de identificação das substituições conservativas de aminoácidos, que não eliminam a ligação, são bem conhecidos na técnica.
[00191] O termo "variante", conforme utilizado neste documento, em relação a uma porção de ligação (por exemplo, um anticorpo), tendo um polipeptídeo com características de sequência específica (a "porção de ligação de referência"), refere-se a uma porção de ligação diferente tendo um polipeptídeo incluindo uma ou mais (tal como, por exemplo, cerca de 1 a cerca de 25, cerca de 1 a cerca de 20, cerca de 1 a cerca de 15, cerca de 1 a cerca de 10 ou cerca de 1 a cerca de 5) substituições, deleções e/ou adições de sequência de aminoácidos em comparação com a porção de ligação de referência. Uma variante de porção de ligação anti-Claudina18.2 ou variante de anticorpo anti-Claudina18.2 retém pelo menos a ligação específica à Claudina18.2. Em algumas modalidades, uma variante de porção de ligação pode resultar de uma ou mais (por exemplo, cerca de 1 a cerca de 25, cerca de 1 a cerca de 20, cerca de 1 a cerca de 15, cerca de 1 a cerca de 10, ou cerca de 1 a cerca de 5) alterações na sequência de aminoácidos de uma porção de ligação de referência. Além disso, a título de exemplo, uma variante de um anticorpo anti-Claudina18.2 pode resultar de uma ou mais (por exemplo, cerca de 1 a cerca de 25, cerca de 1 a cerca de 20, cerca de 1 a cerca de 15, cerca de 1 a cerca de 10, ou cerca de 1 a cerca de 5) alterações em uma sequência de aminoácidos de um anticorpo anti-Claudina18.2 de referência. As alterações em uma sequência de aminoácidos podem ser substituições de aminoácidos. Em algumas modalidades, as alterações em uma sequência de aminoácidos podem ser substituições de aminoácidos conservativos. Em algumas modalidades, uma variante de porção de ligação anti-Claudina18.2 ou variante de um anticorpo anti-Claudina18.2 pode resultar de uma ou mais
85 / 309 (por exemplo, cerca de 1 a cerca de 25, cerca de 1 a cerca de 20, cerca de 1 a cerca de 15, cerca de 1 a cerca de 10, ou cerca de 1 a cerca de 5) substituições de aminoácidos nas regiões ou subregiões de VH ou VL, tais como uma ou mais CDRs. Em algumas modalidades, uma variante da porção de ligação anti-Claudina18.2 ou variante de anticorpo anti-Claudina18.2 pode resultar de um até dois, três, quatro ou até cinco substituições de aminoácidos em cada região de VH ou VL. Em algumas modalidades, uma variante da porção de ligação anti-Claudina18.2 ou variante de anticorpo anti-Claudina18.2 pode resultar de um até dois, três, quatro ou até cinco substituições de aminoácidos em cada região das CDRs.
[00192] O termo “vetor” refere-se a uma substância que é usada para transportar ou incluir uma sequência de ácidos nucleicos, incluindo, por exemplo, para introduzir uma sequência de ácidos nucleicos em uma célula hospedeira. Os vetores aplicáveis para uso incluem, por exemplo, vetores de expressão, plasmídeos, vetores fágicos, vetores virais, epissomas e cromossomos artificiais, que podem incluir sequências de seleção ou marcadores operáveis para integração estável no cromossomo de uma célula hospedeira. Além disso, os vetores podem incluir um ou mais genes marcadores selecionáveis e sequências de controle de expressão adequadas Os genes marcadores selecionáveis que podem ser incluídos, por exemplo, proporcionam resistência a antibióticos ou toxinas, deficiências auxotróficas de complemento ou não fornecem nutrientes essenciais nos meios de cultura. As sequências de controle de expressão podem incluir promotores constitutivos e induzíveis, intensificadores de transcrição, terminadores de transcrição e similares, que são bem conhecidos na técnica. Quando duas ou mais moléculas de ácido nucleico visam ser co-expressas (por exemplo, uma cadeia pesada e leve de anticorpo ou uma VH e VL de anticorpo), ambas as moléculas de ácido nucleico podem ser inseridas, por exemplo, em um único vetor de expressão ou em vetores de expressão separados. No caso de uma
86 / 309 única expressão de vetor, os ácidos nucleicos de codificação podem ser operacionalmente ligados a uma sequência de controle de expressão comum ou ligados a diferentes sequências de controle de expressão, tais como um promotor induzível e um promotor constitutivo. A introdução de moléculas de ácido nucleico em uma célula hospedeira pode ser confirmada usando-se métodos bem conhecidos na técnica. É entendido, pelos versados na técnica, que as moléculas de ácido nucleico são expressas em uma quantidade suficiente para produzir um produto desejado (por exemplo, um anticorpo anti-Claudina18.2, conforme descrito neste documento) e é também entendido que os níveis de expressão podem ser otimizados para se obter expressão suficiente, usando-se métodos bem conhecidos na técnica.
[00193] O termo “indivíduo” refere-se a qualquer animal (por exemplo, um mamífero), incluindo, entre outros, humanos, primatas não humanos, caninos, felinos, roedores e similares, que devem ser os recebedores de um tratamento específico. Em algumas modalidades, o indivíduo é um humano. Um “indivíduo” pode ser um paciente com uma doença específica. Em algumas modalidades, um indivíduo é um paciente com câncer ou tumor que expressa Claudina18.2.
[00194] O termo “tratar”, conforme usado neste documento, em relação a uma doença ou condição, ou a um indivíduo com uma doença ou uma condição, refere-se a uma ação que suprima, elimine, reduza e/ou melhore um sintoma, a gravidade do sintoma e/ou a frequência do sintoma associado à doença ou distúrbio sendo tratado. Quando usado em relação a um câncer ou tumor, o termo "tratar" refere-se a uma ação que reduza a gravidade do câncer ou tumor, ou retarde ou desacelere a progressão do câncer ou tumor, incluindo (a) inibir o crescimento ou interromper o desenvolvimento do câncer ou tumor ou (b) causar a regressão do câncer ou tumor, ou (c) retardar, melhorar ou minimizar um ou mais sintomas associados à presença do câncer ou tumor.
87 / 309
[00195] O termo “administrar”, “administrando” ou “administração”, conforme usado neste documento, refere-se ao ato de entregar, ou causar a entrega de, uma composição terapêutica ou farmacêutica no organismo de um indivíduo por meio de um método descrito neste documento, ou de outra forma conhecido na técnica. A composição terapêutica pode consistir em um composto, um polipeptídeo, uma célula ou uma população de células. Administrar uma composição terapêutica ou farmacêutica inclui prescrever uma composição terapêutica ou farmacêutica para ser entregue no corpo de um paciente. Os exemplos de formas de administração incluem formas de dosagem oral, tais como comprimidos, cápsulas, xaropes, suspensões; formas de dosagem injetáveis, tais como intravenosa (IV), intramuscular (IM) ou intraperitoneal (IP); formas de dosagem transdérmica, incluem cremes, geleias, pós ou adesivos; formas de dosagem bucal; pós para inalação, sprays, suspensões e supositórios retais.
[00196] O termo "quantidade terapeuticamente eficaz", conforme utilizado neste documento, refere-se a uma quantidade de um composto, polipeptídeo, célula, formulação, material ou composição, conforme descrito neste documento, suficiente para fornecer um benefício terapêutico no tratamento da doença ou distúrbio ou para desacelerar ou minimizar um ou mais sintomas associados à doença ou distúrbio. A doença ou distúrbio pode ser um câncer ou tumor que expressa Claudina18.2.
[00197] Conforme usado neste documento, o termo “carreador” inclui "carreadores farmaceuticamente aceitáveis", excipientes ou estabilizadores que não sejam tóxicos para a célula ou mamífero exposto a eles nas dosagens e concentrações empregadas. O termo “carreador” também refere-se a um diluente, adjuvante (por exemplo, adjuvante de Freund (completo ou incompleto)), excipiente ou veículo com o qual a composição terapêutica é administrada. Os exemplos de carreadores farmacêuticos adequados estão descritos em Remington’s Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing
88 / 309 Co., Easton, PA. As composições, incluindo compostos farmacêuticos, podem conter uma quantidade profilaticamente ou terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti-beta klotho, por exemplo, na forma isolada ou purificada, juntamente com uma quantidade adequada de carreador de modo a fornecer a forma de administração adequada ao indivíduo (por exemplo, um paciente). A formulação deve estar de acordo com o modo de administração. Porções de ligação à Claudina18.2
[00198] A Claudina18.2 é uma isoforma 2 de Claudina18, um membro da família Claudina de proteínas de superfície celular. As Claudinas são componentes importantes das junções celulares estreitas, formando uma barreira paracelular que controla o fluxo de moléculas entre as células. Claudinas diferentes são expressas em diferentes tecidos e suas funções alteradas têm sido relacionadas à formação dos cânceres nesses tecidos. No tecido normal, a expressão de Caudina18.2 é limitada às células epiteliais da mucosa gástrica. A expressão de Claudina18.2 é retida após a transformação maligna no câncer gástrico e suas metástases. A ativação ectópica de Claudina18.2 também foi encontrada em tumores pancreáticos, esofágicos, ovarianos e pulmonares.
[00199] A proteína humana Caudina18.2 possui 261 aminoácidos (NCBI, NP_001002026.1; SEQ ID NO: 200). A Claudina18.2 existe como uma proteína transmembranar tetraspan com um N-terminal e um C-terminal no citoplasma. A Claudina18.2 tem duas alças extracelulares, que têm sido associadas a funções como o estreitamento da fenda paracelular para solutos e a formação de poros de íons paracelulares.
MAVTACQGLG FVVSLIGIAG IIAATCMDQW STQDLYNNPV TAVFNYQGLW RSCVRESSGF TECRGYFTLL GLPAMLQAVR ALMIVGIVLG AIGLLVSIFA LKCIRIGSME DSAKANMTLT SGIMFIVSGL CAIAGVSVFA NMLVTNFWMS TANMYTGMGG MVQTVQTRYT FGAALFVGWV AGGLTLIGGV MMCIACRGLA
89 / 309
PEETNYKAVS YHASGHSVAY KPGGFKASTG FGSNTKNKKI YDGGARTEDE VQSYPSKHDY V (SEQ ID NO: 200)
[00200] A porção de ligação à Claudina18.2 liga-se especificamente à Claudina18.2, seu fragmento ou a uma variante da mesma. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se especificamente à Claudina18.2 humana. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se especificamente ao domínio extracelular de Claudina18.2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se especificamente á alça extracelular de Claudina18.2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se especificamente à segunda alça extracelular de Claudina18.2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se especificamente à primeira e segunda alça extracelular de Claudina18.2. Em algumas modalidades, a porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com uma afinidade que é pelo menos 20 vezes maior que a afinidade do anticorpo com a Claudina18.1. Em algumas modalidades, a porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com uma afinidade que é pelo menos 50 vezes maior que a afinidade do anticorpo com a Claudina18.1. Em algumas modalidades, a porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com uma afinidade que é pelo menos 100 vezes maior que a afinidade do anticorpo com a Claudina18.1. Em algumas modalidades, a porção de ligação à Claudina18.2 não se liga de forma detectável à Claudina18.1.
[00201] O anticorpo pode ser um Fab, um Fab’, um F(ab’)2, um Fv, um scFv, um (scFv)2, um anticorpo de IgG1, um anticorpo de IgG2, um anticorpo de IgG3 ou um anticorpo de IgG4.
[00202] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um fragmento de ligação ao antígeno de um anticorpo. Em algumas modalidades, o anticorpo é um
90 / 309 anticorpo de IgA, IgD, IgE, IgG ou IgM. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgA. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgD. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgE. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgG. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgM. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgG1. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgG2. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgG3. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo de IgG4.
[00203] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um Fab. Em algumas modalidades, o anticorpo é um Fab’. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um F(ab’)2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um Fv. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um scFv. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um scFv ligado a dissulfeto [(scFv)2]. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um diacorpo (dAb).
[00204] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo recombinante. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo monoclonal. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo policlonal. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo quimérico. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo humanizado. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo humano.
[00205] Em algumas modalidades, o anticorpo é isolado. Em algumas modalidades, o anticorpo é substancialmente puro.
91 / 309
[00206] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma porção de ligação biespecífica. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma porção de ligação multiespecífica.
[00207] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, anticorpo) consiste em uma porção de ligação monovalente. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, anticorpo) consiste em uma porção de ligação monoespecífica. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, anticorpo) consiste em uma porção de ligação bivalente. Em algumas modalidades, uma porção de ligação bivalente consiste em dois anticorpos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação bivalente consiste em um primeiro e segundo anticorpos. Em algumas modalidades, o primeiro anticorpo e o segundo anticorpo são conectados por um ligante. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, anticorpo) consiste em um primeiro anticorpo, um ligante e um segundo anticorpo, do N-terminal ao C-terminal. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo é uma repetição em tandem do primeiro anticorpo. Em algumas modalidades, o primeiro anticorpo e o segundo anticorpo reconhecem diferentes epítopos na Claudina18.2. Em algumas modalidades, o primeiro anticorpo e o segundo anticorpo reconhecem o mesmo epítopo na Claudina18.2.
[00208] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é um anticorpo monoclonal. Anticorpos monoclonais podem ser preparados por qualquer método conhecido na técnica. Um exemplo de abordagem é a triagem de bibliotecas de expressão de proteínas, por exemplo, bibliotecas de exibição de fagos ou ribossomos. A exibição de fagos está descrita, por exemplo, em Ladner et al., U.S. Patent No. 5,223,409; Smith (1985) Science 228:1315-1317 e WO 92/18619. Em algumas modalidades,
92 / 309 os anticorpos monoclonais recombinantes são isolados das bibliotecas de exibição de fagos que expressam domínios variáveis ou CDRs de uma espécie desejada. A triagem de bibliotecas de fagos pode ser obtida por meio de várias técnicas conhecidas na técnica.
[00209] Os métodos são bem conhecidos na técnica para a obtenção de ligação de alta afinidade com anticorpos humanizados. Um exemplo não limitante de tal método é a hipermutação de uma região variável e a seleção de células expressando tais anticorpos de alta afinidade (maturação de afinidade). Além do uso das bibliotecas de exibição, o antígeno específico (por exemplo, Claudina18.2 recombinante ou seu epítopo) pode ser usado para imunizar um animal não humano, por exemplo, um roedor. Em algumas modalidades, os fragmentos de ligação a antígeno de roedor (por exemplo, fragmentos de ligação a antígeno de camundongo) podem ser gerados e isolados, usando-se métodos conhecidos na técnica e/ou divulgados neste documento. Em algumas modalidades, um camundongo pode ser imunizado com um antígeno (por exemplo, Claudina18.2 recombinante ou seu epítopo).
[00210] Em algumas modalidades, os anticorpos monoclonais são preparados usando-se técnicas de hibridomas conhecidas por versados na técnica. Por exemplo, usando-se uma técnica de hibridomas, um camundongo, rato, coelho, hamster ou outro animal hospedeiro adequado, é imunizado conforme descrito acima. Em algumas modalidades, os linfócitos são imunizados in vitro. Em algumas modalidades, o antígeno imunizante é uma proteína humana ou um fragmento da mesma. Em algumas modalidades, o antígeno imunizante é uma proteína humana ou um fragmento da mesma.
[00211] Após a imunização, os linfócitos são isolados e fundidos com uma linhagem celular de mieloma adequada usando-se, por exemplo, polietilenoglicol.. As células de hibridoma são selecionadas usando-se meios especializados, conforme conhecidos na técnica, e os linfócitos e células de mieloma não fundidos não sobrevivem ao processo de seleção. Os
93 / 309 hibridomas que produzem anticorpos monoclonais direcionados a um antígeno escolhido podem ser identificados por vários métodos, incluindo, entre outros, imunoprecipitação, imunoblotting e ensaios de ligação in vitro (por exemplo, citometria de fluxo, FACS, ELISA, SPR [por exemplo, Biacore] e radioimunoensaio). Depois que as células de hibridoma que produzem anticorpos de especificidade, afinidade e/ou atividade desejada são identificadas, os clones podem ser subclonados por diluição limitada ou outras técnicas. Os hibridomas podem ser propagados em cultura in vitro usando métodos padrão ou in vivo como em tumores ascíticos em um animal. Os anticorpos monoclonais podem ser purificados a partir do meio de cultura ou fluido ascítico de acordo com métodos padrão na técnica, incluindo, entre outros, cromatografia de afinidade, cromatografia de troca iônica, eletroforese em gel e diálise.
[00212] Em algumas modalidades, os anticorpos monoclonais são preparados usando-se técnicas de DNA recombinante, conhecidas por versados na técnica. Por exemplo, os polinucleotídeos que codificam um anticorpo são isolados de células B maduras ou células de hibridoma, como por RT-PCR usando-se iniciadores de oligonucleotídeos que amplificam especificamente os genes que codificam as cadeias pesadas e leves do anticorpo, e sua sequência é determinada usando-se técnicas padrão. Os polinucleotídeos isolados que codificam as cadeias pesadas e leves são, então, clonados em vetores de expressão adequados, que produzem os anticorpos monoclonais quando transfectados em células hospedeiras, tais como E. coli, células COS de símio, células de ovário de hamster chinês (CHO) ou células de mieloma que de outra forma não produzem proteínas de imunoglobulina.
[00213] Em algumas modalidades, os anticorpos monoclonais recombinantes são isolados das bibliotecas de exibição de fagos que expressam domínios variáveis ou CDRs de uma espécie desejada. A triagem de bibliotecas de fagos pode ser obtida por meio de várias técnicas conhecidas
94 / 309 na técnica.
[00214] Em algumas modalidades, um anticorpo monoclonal é clonado usando-se tecnologia de DNA recombinante para produzir anticorpos alternativos. Em algumas modalidades, os domínios constantes das cadeias leve e pesada de um anticorpo monoclonal de camundongo são substituídos por regiões constantes de um anticorpo humano para gerar um anticorpo quimérico. Em algumas modalidades, as regiões constantes são truncadas ou removidas para gerar um fragmento de anticorpo desejado de um anticorpo monoclonal. Em algumas modalidades, a mutagênese dirigida ao local ou de alta densidade da(s) região(ões) variável(is) é usada para otimizar a especificidade e/ou afinidade de um anticorpo monoclonal.
[00215] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é um anticorpo humanizado. Vários métodos para gerar anticorpos humanizados são conhecidos na técnica. Em algumas modalidades, um anticorpo humanizado consiste em um ou mais resíduos de aminoácidos que foram introduzidos em sua sequência de uma fonte não humana. Em algumas modalidades, a humanização é realizada por substituição de uma ou mais sequências de CDR não humanas por sequências de CDR correspondentes de um anticorpo humano. Em algumas modalidades, os anticorpos humanizados são construídos substituindo-se todas as três CDRs de um anticorpo não humano (por exemplo, um anticorpo de cadeia pesada ou leve) por CDRs correspondentes de um anticorpo humano. Em algumas modalidades, os anticorpos humanizados são construídos substituindo-se todas as seis CDRs de um anticorpo não humano (por exemplo, um anticorpo de camundongo) por CDRs correspondentes de um anticorpo humano.
[00216] A escolha de qual região variável de cadeia pesada humana e/ou região variável de cadeia leve é usada, para gerar anticorpos humanizados, pode ser feita com base em vários fatores e por uma variedade
95 / 309 de métodos conhecidos na técnica. Em algumas modalidades, uma estrutura de região variável especial, derivada de uma sequência consenso de todos os anticorpos humanos de um subgrupo particular de cadeias leves ou pesadas, é selecionada como a estrutura de região variável. Em algumas modalidades, a sequência da estrutura da região variável é derivada das sequências consenso das subclasses humanas mais abundantes. Em algumas modalidades, os genes da linha germinal humana são usados como a fonte das sequências estruturais da região variável.
[00217] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é um anticorpo humano. Os anticorpos humanos podem ser preparados usando-se várias técnicas conhecidas na técnica. Em algumas modalidades, os anticorpos humanos são gerados a partir de linfócitos B humanos imortalizados e imunizados in vitro. Em algumas modalidades, os anticorpos humanos são gerados a partir de linfócitos isolados de um indivíduo imunizado. Em todos os casos, as células que produzem um anticorpo direcionado contra um antígeno-alvo podem ser geradas e isoladas. Em algumas modalidades, um anticorpo humano é selecionado a partir de uma biblioteca de fagos, na qual anticorpos humanos são expressos. Como alternativa, a tecnologia de exibição de fagos pode ser usada para produzir anticorpos humanos e fragmentos de anticorpos in vitro, a partir de repertórios genéticos da região variável de imunoglobulina de doadores não imunizados. As técnicas para geração e uso de bibliotecas de fagos de anticorpos são bem conhecidas na técnica. Depois que os anticorpos são identificados, as estratégias de maturação de afinidade conhecidas na técnica, incluindo, entre outras, o rearranjo de cadeias e a mutagênese dirigida ao local, podem ser empregadas para gerar anticorpos humanos de maior afinidade. Em algumas modalidades, os anticorpos humanos são produzidos em camundongos transgênicos que contêm loci de imunoglobulina humana. Após a imunização, esses camundongos são capazes de produzir todo o repertório de
96 / 309 anticorpos humanos na ausência de produção de imunoglobulina endógena.
[00218] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo que se liga à Claudina18.2. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 humana. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 liga-se ao epítopo de Claudina18.2. Em algumas modalidades, um anticorpo anti- Claudina18.2 liga-se ao domínio extracelular de Claudina18.2. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 liga-se à primeira alça extracelular de Claudina18.2. Em algumas modalidades, um anticorpo anti- Claudina18.2 liga-se à segunda alça extracelular de Claudina18.2. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com uma afinidade que é pelo menos 20 vezes maior que a afinidade do anticorpo com a Claudina18.1. Em algumas modalidades, um anticorpo anti- Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com uma afinidade que é pelo menos 50 vezes maior que a afinidade do anticorpo à Claudina18.1. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com uma afinidade que é pelo menos 100 vezes maior que a afinidade do anticorpo à Claudina18.1. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 não se liga de forma detectável à Claudina18.1.
[00219] As CDRs de um anticorpo são definidas pelos versados na técnica usando-se vários métodos/sistemas. Esses sistemas e/ou definições foram desenvolvidos e refinados durante muitos anos e incluem Kabat, Chothia, IMGT, AbM e Contact. A definição de Kabat é baseada na variabilidade da sequência e é comumente usada. A definição de Chothia é baseada no local de regiões estruturais de alça. O sistema IMGT é baseado na variabilidade e local da sequência dentro da estrutura do domínio variável. A definição de AbM é um meio-termo entre Kabat e Chothia. A definição de Contact é baseada em análises das estruturas de cristais de anticorpos disponíveis. Um exemplo de sistema é a combinação de Kabat e Chothia. Há
97 / 309 softwares (por exemplo, AbYsis) disponíveis e conhecidos por versados na técnica para análise de sequência de anticorpos e determinação de CDRs.
[00220] As sequências específicas de CDR definidas neste documento são geralmente baseadas em uma combinação de definições de Kabat e Chothia (sistema Exemplar). No entanto, fica entendido que a referência a uma CDR ou CDRs de cadeia pesada e/ou CDR ou CDRs de cadeia leve de um anticorpo específico incluirá todas as definições de CDR, conforme conhecidas pelos versados na técnica.
[00221] As porções de ligação à Claudina18.2, fornecidas neste documento, incluem anticorpos anti-Claudina18.2 também fornecidos neste documento e suas versões humanizadas. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-Claudina18.2 incluem 260G9E8, 252F1B10, 257B1G9, 265E6G2, 250F4G4, 262C7C10, 240F8G2, 232C5E3, 252E7C9, 257G7B9, 241H10A1, 273C10E5, 185F2G12, 194D3B2, 207F8G5, 222B6G5, 182D10F1, 234B9D4, 253E4F7, 198F10B8, 213B10A4, 370E2B12C3, 237D2A4, 203A6C9, 201F4H6, 429H6C5, 407D8G1, 419B5G9, 393C2C5, 412B6E4, 414A5F7, 418D2F9, 410H6H3; outros 59B6C4, 246B5F2 (IgM), 418G6A5, 417A6F11, 28C5B1, 35E8D2, 61H12G10, 69D5C1, 181C7B2, 196A12B10, 232D7C8, 233D5E5, 232F1E4, 231H4G11, 226A4B5, 235A10C9, 239H12G9, 248E6A7, 254A8D5, 259C6F4 e 280F3B6.
[00222] Com base nas similaridades da sequência da CDR, os anticorpos anti-Claudina18.2, fornecidos neste documento, podem ser divididos em cinco grupos conforme apresentados nas Tabelas 1 e 2.
[00223] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é um anticorpo anti-Claudina18.2 que consiste em uma, duas, três, quatro, cinco e/ou seis CDRs de quaisquer dos anticorpos descritos neste documento. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma, duas e/ou três VH CDRs ou a região variável da Tabela 1. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma,
98 / 309 duas e/ou três VL CDRs ou a região variável da Tabela 2. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma, duas e/ou três VH CDRs ou a região variável da Tabela 1 e uma, duas e/ou três VL CDRs ou a região variável da Tabela 2.
[00224] As CDRs da região variável de cadeia pesada e as CDRs da região variável de cadeia leve nas Tabelas 1 e 2 foram definidas pelo sistema numérico de Kabat. No entanto, conforme bem conhecido na técnica, as regiões de CDR também podem ser determinadas por outros sistemas, como os sistemas/métodos de numeração de Chothia, IMGT, AbM ou Contact, com base em sequências da região variável de cadeia leve/pesada. Tabela 1. Sequência de aminoácidos (ou número de ID da sequência) da região variável de cadeia pesada (VH) ou VH CDRs de anticorpos de Claudina18.2 Anticorpo VH CDR1 VH CDR2 VH CDR3 VH GRUPO 1 260G9E8 SHNMH YIYPGNGGTKYNQKFTG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 1 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:89) (SEQ ID NO:117) 252F1B10 SHNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 3 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:117) 257B1G9 SHNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 5 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:117) 265E6G2 SYNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 7 (SEQ ID NO:70) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:117) 250F4G4 SHNMH YIYPGNGRTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 9 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:91) (SEQ ID NO:117) 262C7C10 NYNIH YIYPGNGGNYYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 11 (SEQ ID NO:71) (SEQ ID NO:92) (SEQ ID NO:117) 240F8G2 NYNIH YIYPGNGGNYYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 281 (SEQ ID NO:71) (SEQ ID NO:92) (SEQ ID NO:117) 232C5E3 SHNIH YIYPGNGGTNYNQKFKA DYYGNSFAY SEQ ID NO: 13, (SEQ ID NO:72) (SEQ ID NO:93) (SEQ ID NO:117) 348-352 252E7C9 SHNMH YIYPGNGGSYYNQKFKG DYYGNSFVY SEQ ID NO: 15 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:94) (SEQ ID NO:118) 257G7B9 SHNLH YIYPGNGNTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 17 (SEQ ID NO:73) (SEQ ID NO:95) (SEQ ID NO:117) 241H10A1 SFGIN WIFPGDGNSKYNENFKG FYYGNSFAN SEQ ID NO: 19 (SEQ ID NO:74) (SEQ ID NO:96) (SEQ ID NO:119) 273C10E5 SFGIN WIFPGDGNSKYNENFKG FYYGNSFAN SEQ ID NO: 21 (SEQ ID NO:74) (SEQ ID NO:96) (SEQ ID NO:119) 234A10F7 SFGIN WIFPGDGNSKYNENFKG FYYGNSFAY SEQ ID NO:495 (SEQ ID NO:74) (SEQ ID NO:96) (SEQ ID NO:130) 240D6F5 SHNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:497 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:117) 242H12D6 SHNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:499 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:117) 243B4F2 SHNLH YIYPGNGNTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:501 (SEQ ID NO:73) (SEQ ID NO:95) (SEQ ID NO:117) 243B4F7 SHNLH YIYPGNGNTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:503
99 / 309 Anticorpo VH CDR1 VH CDR2 VH CDR3 VH (SEQ ID NO:73) (SEQ ID NO:95) (SEQ ID NO:117) 243F6D2 SHNMH YIYPGNGGTYYNQKFKG DYYGNSFVY SEQ ID NO:505 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:202) (SEQ ID NO:118) 250F4G1 SHNMH YIYPGNGRTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:507 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:91) (SEQ ID NO:117) 257F1E11 SHNIH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:509 (SEQ ID NO:72) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:117) 257G7F7 SHNLH YIYPGNGNTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:511 (SEQ ID NO:73) (SEQ ID NO:95) (SEQ ID NO:117) 260F8A6 SHNMH YIYPGNGNTYYNQKFKG DYYGNSFVY SEQ ID NO:513 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:390) (SEQ ID NO:118) 268D7H9 NYNIH YIYPGNGGNYYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:515 (SEQ ID NO:71) (SEQ ID NO:92) (SEQ ID NO:117) 271B1B6 NYNIH YIYPGNGGNYYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:517 (SEQ ID NO:71) (SEQ ID NO:92) (SEQ ID NO:117) 275H9A2 SHNMH YIYPGNGGSYYNQKFKG DYYGNSFVY SEQ ID NO:519 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:94) (SEQ ID NO:118) Consenso X1X2X3X4X5 X6IX7PGX8GX9X10X11 X16YYGNSFX17 X18 X1=S,N YNX12X13FX14X15 X16=D,F X2=H,Y,F X6=Y,W X17=A,V X3=N,G X7=Y,F X18=Y,N X4=M,I,L X8=N,D (SEQ ID NO: 176) X5=H,N X9=G,R,N (SEQ ID NO: 174) X10=T,N,S X11=K,N,Y X12=Q,E X13=K,N X14=T,K X15=G,A (SEQ ID NO: 175) Modelo SHNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO: 117) GRUPO 2 185F2G12 SYNMH YIYPGNGGTNYSQKFKG GRGFAY SEQ ID NO: 23 (SEQ ID NO:70) (SEQ ID NO:97) (SEQ ID NO:120) 194D3B2 SYNMH YIYPGNGGTNYNQKFRD GRGFAY SEQ ID NO: 25 (SEQ ID NO:70) (SEQ ID NO:98) (SEQ ID NO:120) 207F8G5 SYNIH YISPGNGGSNYNLKFKD GRGFAY SEQ ID NO: 27, (SEQ ID NO:75) (SEQ ID NO:99) (SEQ ID NO:120) 337-345 222B6G5 SYNIH YISPGNGGTYYNLKFKD GRGFAY SEQ ID NO: 29 (SEQ ID NO:75) (SEQ ID NO:100) (SEQ ID NO:120) 182D10F1 SYNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG GRGFTY SEQ ID NO: 31 (SEQ ID NO:70) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:121) 234B9D4 SYYIH YIDPFNGGTRYNQKFEG LRFFTY SEQ ID NO: 33 (SEQ ID NO:76) (SEQ ID NO:101) (SEQ ID NO:122) 253E4F7 SYYIH YIDPFNGGTRYNQKFEG LRFLAY SEQ ID NO: 35 (SEQ ID NO:76) (SEQ ID NO:101) (SEQ ID NO:123) 198F10B8 SYNMH YIYPGNGGTNYNQKFKD GRGFAY SEQ ID NO: 263 (SEQ ID NO:70) (SEQ ID NO:201) (SEQ ID NO:120) 213B10A4 SYNMH YIYPGNGGTYYNQKFKG GRGFAY SEQ ID NO: 265 (SEQ ID NO:70) (SEQ ID NO:202) (SEQ ID NO:120) Consenso SYX27X28H YIX29PX30NGGX31X32 YX33X34 X37RX38X39X40Y X27=N,Y KFX35X36 X37=G,L X28=M,I X29=Y,S,D X38=G,F (SEQ ID NO: 177) X30=G,F X39=F,L X31=T,S X40=A,T X32=N,Y,R (SEQ ID NO: 179) X33=S,N X34=Q,L X35=K,R,E X36= G,D (SEQ ID NO: 178) Modelo SYNIH YIYPGNGGTNYNQKFKG GRGFAY
100 / 309 Anticorpo VH CDR1 VH CDR2 VH CDR3 VH (SEQ ID NO: 75) (SEQ ID NO: 90) (SEQ ID NO: 120) GRUPO 3 370E2B12C3 TYGVH VIWAGGSTNYNSALMS AAYYGNGLDY SEQ ID NO: 37, (SEQ ID NO:77) (SEQ ID NO:102) (SEQ ID NO:124) 372-374 237D2A4 SYGVS VIWGDGSTNYHSTLIS AGRGNALDY SEQ ID NO: 39, (SEQ ID NO:78) (SEQ ID NO:103) (SEQ ID NO:125) 355-362 203A6C9 RYGVH VIWSGGNTDYNAAFIS AAYFGNSFDY SEQ ID NO: 41 (SEQ ID NO:79) (SEQ ID NO:104) (SEQ ID NO:126) 201F4H6 SYGVS VIWAGGNTNYNSALMS VYYGNAMDY SEQ ID NO: 43 (SEQ ID NO:78) (SEQ ID NO:105) (SEQ ID NO:127) 200A4H8 RYGVH VIWSGGNTDYNAAFIS AAYFGNSFDY SEQ ID NO:521 (SEQ ID NO:79) (SEQ ID NO:104) (SEQ ID NO:126) 203A6D5 RYGVH VIWSGGNTDYNAAFIS AAYFGNSFDY SEQ ID NO:523 (SEQ ID NO:79) (SEQ ID NO:104) (SEQ ID NO:126) 248G8E8 TYGVS VIWGDGSTNYHSTLIS AGRGNALDY SEQ ID NO:525 (SEQ ID NO:209) (SEQ ID NO:103) (SEQ ID NO:125) Consenso X47YGVX48 VIWX49X50GX51TX52 YX53X54 X58X59X60X61GNX62X6 X47=T,S,R X55X56X57S 3DY (SEQ ID NO: X48=H,S X49=A,G,S 182) (SEQ ID NO: 180) X50=G,D X58=A ou nulo X51=S,N X59=A,G,V X52=N,D X60=Y,R X53=N,H X61=Y,F ou nulo X54=S,A X62=A,G,S X55=A,T X63=L,F,M X56=L,F X57=M,I (SEQ ID NO: 181) Modelo SYGVS VIWAGGSTNYHSALMS AAYYGNALDY (SEQ ID NO: 78) (SEQ ID NO:197) (SEQ ID NO: 198) GRUPO 4 429H6C5 SFGMH YISSGSSTIYYAHTVKG FYYGNSFVN SEQ ID NO: 47 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:106) (SEQ ID NO:128) 407D8G1 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO: 49 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 419B5G9 TFGMH YISGGSTTIFYADTVKG FYYGNSFAY SEQ ID NO: 51 (SEQ ID NO:82) (SEQ ID NO:108) (SEQ ID NO:130) 393C2C5 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG FYYGNSFAY SEQ ID NO: 53 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:130) 412B6E4 SFGVH YISSGSSTIYYAHSVKG FYYGNSFAY SEQ ID NO: 55, (SEQ ID NO:83) (SEQ ID NO:110) (SEQ ID NO:130) 383-385 414A5F7 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG IYYGNSFAY SEQ ID NO: 57 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:131) 418D2F9 SFGMH YINTGSSTIYYADTVKG IYYGNSFVY SEQ ID NO: 59 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:111) (SEQ ID NO:132) 410H6H3 SSGMH YISSGSNTIYYADTLKG IYYGNSFVY SEQ ID NO: 61, (SEQ ID NO:84) (SEQ ID NO:112) (SEQ ID NO:132) 378-380 391F1G2 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG IYYGNSFAY SEQ ID NO:527 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:131) 406F11G8 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG IYYGNSFAY SEQ ID NO:529 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:131) 410A9A9 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG FYYGNSFAY SEQ ID NO:531 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:130) 410D9G2 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:533 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 416F12F3 SFGMH YISSGSSTIYYAHSVKG FYYGNSFAY SEQ ID NO:535 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:110) (SEQ ID NO:130) 420H3H9 SFGMH YISSGSSTIYYAHSVKG FYYGNSFAY SEQ ID NO:537 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:110) (SEQ ID NO:130) 411G12G1 GFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:539 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129) 429G4E9 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG FYYGNSFAY SEQ ID NO:541 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:130)
101 / 309 Anticorpo VH CDR1 VH CDR2 VH CDR3 VH 391H11H3 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:543 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 395B3C11 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:545 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 406E1H7 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:547 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 414H6G2 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:549 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 420G10G3 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:551 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 422E8F9 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:553 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 422F4B6 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG IYYGNSFAY SEQ ID NO:555 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:131) 425B3D5 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:557 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 425C6D3 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:559 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) 426H6E11 GFGMH YISSGSRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:561 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:107) (SEQ ID NO:129) Consenso X72X73GMH YIX74X75GSX76X77IX78 X83YYGNSFX84X85 X72=S, G, T YAX79X80X81X82G X83=F, I X73=F, S X74=S, N X84=V, D, A (SEQ ID NO: 183) X75=S,G,T X85=Y, N, H X76=S,R,T,N (SEQ ID NO: 185) X77=T,P X78=Y,F X79=D,H X80=T,S X81=V,L X82=K,Q (SEQ ID NO: 184) Modelo SGFTFSSFGMH YISSGSSTIYYADTVKG (SEQ FYYGNSFAY (SEQ ID NO: 80) ID NO:199 ) (SEQ ID NO: 130)
OUTROS 59B6C4 SSWMH ANYPGKSDTTYTQKFKG GAYYGNAMDY SEQ ID NO: 67 (SEQ ID NO:85) (SEQ ID NO:113) (SEQ ID NO: 133) 246B5F2 NYAMS TISSGRSSTYYPDSVKG LGRGNAMEY SEQ ID NO: 45, (IgM) (SEQ ID NO:86) (SEQ ID NO:114) (SEQ ID NO:134) 365-369 418G6A5 SFGMH YISSGSSPMYYADTVKG IYYGNSFAY SEQ ID NO: 63 (SEQ ID NO:87) (SEQ ID NO:115) (SEQ ID NO:131) 417A6F11 SGYSFTGYTMN LINPYNGGTSYNQKFKG GDY SEQ ID NO: 65 (SEQ ID NO:88) (SEQ ID NO:116) (SEQ ID NO:135) 28C5B1 SYWIE EILPGSGSTNYNEKFKG YGGLRRYFDY SEQ ID NO: 251 (SEQ ID NO:203) (SEQ ID NO: 211) (SEQ ID NO:225) 35E8D2 TAGMQ WINTHSRVPNFAEDFKG LGKGNTMDF SEQ ID NO: 253 (SEQ ID NO:204) (SEQ ID NO:212) (SEQ ID NO:226) 61H12G10 DYGVS VIWGGGSTYYNSALKS HHYGNACDY SEQ ID NO: 255 (SEQ ID NO:205) (SEQ ID NO:213) (SEQ ID NO:227) 69D5C1 DYGMA FISNLAYSIYYADTVTG IYYGNSFAY SEQ ID NO: 257 (SEQ ID NO:206) (SEQ ID NO:214) (SEQ ID NO:131) 181C7B2 YYGVH VIWRGGNTDYNAAFIS AAYYGNCFDY SEQ ID NO: 259 (SEQ ID NO:207) (SEQ ID NO:215) (SEQ ID NO:228) 196A12B10 DYSMH WINSETGEATYADDFRG FYYGNSFAS SEQ ID NO: 261 (SEQ ID NO:208) (SEQ ID NO:216) (SEQ ID NO:229) 232D7C8 SHNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYFGNSFAY SEQ ID NO: 267 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:230) 233D5E5 SHNMH YIYPGNGDTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 269 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:217) SEQ ID NO:117 232F1E4 TYGVS VIWGDGSTHYHSALIS PGRGNAMDY SEQ ID NO: 271 (SEQ ID NO:209) (SEQ ID NO:218) (SEQ ID NO:231) 231H4G11 SHNIH YISPGNGYTNYNQKFRG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 273 (SEQ ID NO:72) (SEQ ID NO:219) (SEQ ID NO:117)
102 / 309 Anticorpo VH CDR1 VH CDR2 VH CDR3 VH 226A4B5 SYNIH YIYPGSGGSNYNQKFMG GRGFAY SEQ ID NO: 275 (SEQ ID NO:75) (SEQ ID NO:220) (SEQ ID NO:120) 235A10C9 SHNMH YIYPGNSGTKYNQKFTG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 277 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:221) (SEQ ID NO:117) 239H12G9 SHNIH YIYPGNGAPNYNQKFRG DYYGNSFVY SEQ ID NO: 279 (SEQ ID NO:72) (SEQ ID NO:222) (SEQ ID NO:118) 248E6A7 SHNMH YIYPGNGNTYYNQKFKV DYYGNSFVY SEQ ID NO: 283 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:223) (SEQ ID NO:118) 254A8D5 SYTVS TSIVGSTYTYFPDSVKG LGRGNAMDY SEQ ID NO: 285 (SEQ ID NO:210) (SEQ ID NO:224) (SEQ ID NO:232) 259C6F4 SHNIH YIYPGNGDTNYNQKFKG DYYGNSFVY SEQ ID NO: 287 (SEQ ID NO:72) (SEQ ID NO:217) (SEQ ID NO:118) 280F3B6 SHNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO: 289 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:117) 59B6C9E8 SSWMH ANYPGKSDTTYTQKFKG GAYYGNAMDY SEQ ID NO:563 (SEQ ID NO:85) (SEQ ID NO:113) (SEQ ID NO: 133) 186F7E10 SYAMS TITSGVSHTYYFDSVKG LYYGNSLDY SEQ ID NO:565 (SEQ ID NO:392) (SEQ ID NO:393) (SEQ ID NO:394) 186G12H3 SYAMS TISSGGSYTYYFDSVKG LYYGNALDY SEQ ID NO:567 (SEQ ID NO:392) (SEQ ID NO:395) (SEQ ID NO:396) 194A2F7 DYLIH WINTETGEPTYADDFKG IYYGNSFDY SEQ ID NO:569 (SEQ ID NO:397) (SEQ ID NO:398) (SEQ ID NO:399) 217D9G2 SYNIH YISPGNGGSNYNLNFKD GRGFAY SEQ ID NO:571 (SEQ ID NO:75) (SEQ ID NO:400) (SEQ ID NO:120) 219F9B8 SYNMH YIYPGNGHTNYNQKFKG GRGFAY SEQ ID NO:573 (SEQ ID NO:70) (SEQ ID NO:401) (SEQ ID NO:120) 231C11E9 NYVMC TISSGNFYTYYPDSVKG LGRGNALDN SEQ ID NO:575 (SEQ ID NO:402) (SEQ ID NO:403) (SEQ ID NO:404) 234C9G5 SHNMH YISPGNGYTNYNQKFRG DYYGNSFAY SEQ ID NO:577 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:219) (SEQ ID NO:117) 234E1F12 SHNMH YIYPGNGDTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:579 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:217) (SEQ ID NO:117) 240A8E7 NYNIH YIYPGNGDNYYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:581 (SEQ ID NO:71) (SEQ ID NO:405) (SEQ ID NO:117) 242F5H2 SYTVS TSIVGSTYTYFPDSVKG LGRGNAMDY SEQ ID NO:583 (SEQ ID NO:210) (SEQ ID NO:224) (SEQ ID NO:232) 244A1B8 SHNIH YIYPGNGAPNYNQKFRG DYYGNSFVY SEQ ID NO:585 (SEQ ID NO:72) (SEQ ID NO:222) (SEQ ID NO:118) 252C10F6 NYGVH VIWSGGNTDYNTVFKA NLYGNYDYAMDY SEQ ID NO:587 (SEQ ID NO:406) (SEQ ID NO:407) (SEQ ID NO:408) 256C3D3 SHNMH YISPGNGYTNYNQKFRG DYYGNSFAY SEQ ID NO:589 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:219) (SEQ ID NO:117) 258D11C4 SHNMH YIYPGNGGTNYNQKFKG DYYGNSFAY SEQ ID NO:591 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:90) (SEQ ID NO:117) 259B4D4 SYYMH YIDPFNGNTRYNQKFKD LRFFAY SEQ ID NO:593 (SEQ ID NO:409) (SEQ ID NO:410) (SEQ ID NO:411) 259C6F7 SHNIH YIYPGNGDTNYNQKFKG DYYGNSFVY SEQ ID NO:595 (SEQ ID NO:72) (SEQ ID NO:217) (SEQ ID NO:118) 262H9H6 SHNMH YISPGNGYTNYNQKFRG DYYGNSFTY SEQ ID NO:597 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:219) (SEQ ID NO:416) 263E9F3 SYYIH YIDPFSGGTRYNQKFEG LRFFAY SEQ ID NO:599 (SEQ ID NO:76) (SEQ ID NO:412) (SEQ ID NO:411) 266B11F7 TYGVT VIWGDGSTNYHSALTS PGRGNALDY SEQ ID NO:601 (SEQ ID NO:413) (SEQ ID NO:414) (SEQ ID NO:415) 267B2C5 TYGVS VIWGDGSTHYHSALIS PGRGNAMDY SEQ ID NO:603 (SEQ ID NO:209) (SEQ ID NO:218) (SEQ ID NO:231) 267H5F12 SHNMH YISPGNGYTNYNQKFRG DYYGNSFTY SEQ ID NO:605 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:219) (SEQ ID NO:416) 273F3D4 TYGVS VIWGDGSTHYHSALIS PGRGNAMDY SEQ ID NO:607 (SEQ ID NO:209) (SEQ ID NO:218) (SEQ ID NO:231) 275B2G2 DYTMS TSIIGGTYTYYPDSVKG LGRGNAMDY SEQ ID NO:609 (SEQ ID NO:417) (SEQ ID NO:418 ) (SEQ ID NO:232)
103 / 309 Anticorpo VH CDR1 VH CDR2 VH CDR3 VH 277F1F8 SHNMH YINPGNGGNNYNQKFKG DYYGNSFAF SEQ ID NO:611 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:419 ) (SEQ ID NO:420) 286C7F11 DYGVS VIWNRGNTYYNSALKS HDFLRFLDY SEQ ID NO:613 (SEQ ID NO:205) (SEQ ID NO:421 ) (SEQ ID NO:422 ) 292D9C7 DYGVS VIWGGGNAYYNSALKS NGLLRYLDY SEQ ID NO:615 (SEQ ID NO:205) (SEQ ID NO:423 ) (SEQ ID NO:424 ) 392A11C8 GFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:617 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129) 392C2F10 GYTMN LINPFNGGTTYNQKFKG GDY SEQ ID NO:619 (SEQ ID NO:88) (SEQ ID NO:425 ) (SEQ ID NO:135) 394C2G5 GFGMH YVSSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:621 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:426 ) (SEQ ID NO:129) 405G8F11 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG FYYGNSFAY SEQ ID NO:623 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:130) 406G3C4 SYYIY YIDPFNGNTNYNQKFKG VNGYGRGAMDY SEQ ID NO:625 (SEQ ID NO:427 ) (SEQ ID NO:428 ) (SEQ ID NO:429 ) 407A8G10 GFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:627 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129) 407E11H8 DFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYFGNSFDH SEQ ID NO:629 (SEQ ID NO:430 ) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:431 ) 407H12E6 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:631 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:129) 409D1A7 GFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:633 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129) 409G10G6 GFGMH YISSDSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:635 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:432 ) (SEQ ID NO:129) 411A6E3 DFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYFGNSFDH SEQ ID NO:637 (SEQ ID NO:430 ) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:431 ) 411B4G4 GFGLH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:639 (SEQ ID NO:433 ) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129) 411G3E10 GFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:641 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129) 413B1C9 SFGMH YISSGSSPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:643 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:109) (SEQ ID NO:129) 413C12F8 GFGVH YIGSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:645 (SEQ ID NO:434 ) (SEQ ID NO:435 ) (SEQ ID NO:129) 413H4G12 GYTMN LINPFNGGTTYNQKFKG GDY SEQ ID NO:647 (SEQ ID NO:88) (SEQ ID NO:425 ) (SEQ ID NO:135) 418B11D3 SYYMY YIDPFNGNTNYNQKFKG VNGYGRGAMDY SEQ ID NO:649 (SEQ ID NO:436 ) (SEQ ID NO:428 ) (SEQ ID NO:429 ) 418B8B10 SFGMH YISSGSSPIYYTDTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:651 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:437 ) (SEQ ID NO:129) 419A10D4 GFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:653 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129) 419A5F3 GFGMH YISSDSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:655 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:432 ) (SEQ ID NO:129) 420D5H5 GFGMH YISSGSRPIYYVDTVEG FYYGNSFDH SEQ ID NO:657 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:438 ) (SEQ ID NO:129) 420F12G8 GFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:659 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129) 420H7E6 SFGMH FISGGGSPIFYADSVKG FYFGNSFAY SEQ ID NO:661 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:439 ) (SEQ ID NO:441 ) 421H4G3 GFGLH YISSGSRPIYYADTVKG FYFGNSFDH SEQ ID NO:663 (SEQ ID NO:433 ) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:431 ) 423B2B5 SFGMH YISSGSSPIYYSDTVKG IYYGNSFDH SEQ ID NO:665 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:442 ) (SEQ ID NO:443 ) 423C10E1 SFGMH FISGGGSPIFYADSVKG FYFGNSFAY SEQ ID NO:667 (SEQ ID NO:80) (SEQ ID NO:440 ) (SEQ ID NO:441 ) 424G9G3 NFWMH MIDTSNGETRLNQIFKD YGNFAD SEQ ID NO:669 (SEQ ID NO:444) (SEQ ID NO:445) (SEQ ID NO: 446) 426D9F6 GFGMH YISSGSRPIYYADTVKG FYYGNSFDH SEQ ID NO:671 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:391) (SEQ ID NO:129)
104 / 309 Anticorpo VH CDR1 VH CDR2 VH CDR3 VH 427C7H2 SYWMH NIYPGSGSTNYDEKFKS RITTATRDYFDY SEQ ID NO:673 (SEQ ID NO:447) (SEQ ID NO:448) (SEQ ID NO:449) 430A11H9 SYTMS TISSGGSYTYYPDSVKG DPGYFAY SEQ ID NO:675 (SEQ ID NO:450) (SEQ ID NO:451) (SEQ ID NO:452) 430B3F1 GFGMH YISSGGRPIYYADTVQG FYYGNSFDH SEQ ID NO:677 (SEQ ID NO:81) (SEQ ID NO:453) (SEQ ID NO:129) 279E8B8 SHNMH YIYPGNGGTKYNQKFTG DYFGNSFVY SEQ ID NO:679 (SEQ ID NO:69) (SEQ ID NO:89) (SEQ ID NO:454)
Tabela 2. A sequência de aminoácidos 9 (ou numero de ID da sequência) da região variável de cadeia leve (VL) ou VL CDRs de anticorpos de Claudina18.2 Anticorpo VL CDR1 VL CDR2 VL CDR3 VL GRUPO 1 260G9E8 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYMFPFT SEQ ID NO: 2 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:150) 252F1B10 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNDYRYPFT SEQ ID NO: 4 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:151) 257B1G9 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNDYRYPFT SEQ ID NO: 6 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:151) 265E6G2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSYPLP SEQ ID NO: 8 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:152) 250F4G4 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNDYWYPFT SEQ ID NO: 10 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:153) 262C7C10 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYYYPLT SEQ ID NO: 12 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:154) 240F8G2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYYYPLT SEQ ID NO: 282 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:154) 232C5E3 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNGYRFPFT SEQ ID NO: 14, (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:155) 353, 354 252E7C9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNFRYPFT SEQ ID NO: 16 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:156) 257G7B9 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO: 18 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 241H10A1 KSSQSLLNSGNQKNYLT WAATRES QNDYFYPFT SEQ ID NO: 20 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:144) (SEQ ID NO:158) 273C10E5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WAATRES QNDYFYPFT SEQ ID NO: 22 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:144) (SEQ ID NO:158) 234A10F7 KSSQSLLNSGNQKNYLT WAATRES QNDYFYPFT SEQ ID NO:496 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:144) (SEQ ID NO:158) 240D6F5 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNDYRYPFT SEQ ID NO:498 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:151) 242H12D6 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNDYRYPFT SEQ ID NO:500 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:151) 243B4F2 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO:502 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 243B4F7 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO:504 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 243F6D2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNYRYPFT SEQ ID NO:506 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:455) 250F4G1 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNDYWYPFT SEQ ID NO:508 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:153) 257F1E11 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNDYWYPFT SEQ ID NO:510 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:153) 257G7F7 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO:512 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 260F8A6 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNYMYPFT SEQ ID NO:514 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:249) 268D7H9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYYYPLT SEQ ID NO:516 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:154)
105 / 309 Anticorpo VL CDR1 VL CDR2 VL CDR3 VL 271B1B6 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYYYPLT SEQ ID NO:518 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:154) 275H9A2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNFRYPFT SEQ ID NO:520 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:156) Consenso KSSQSLX19NSGNQKNYLT WAX20TRES QNX21X22X23X24 X19=L,F X20=S,A PX25X26 (SEQ ID NO: 186) (SEQ ID NO: 187) X21=D,G,N X22=Y,F X23=M,R,S,W,Y,F X24=F,Y X25=F,L X26=T,P (SEQ ID NO: 188) Modelo KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYRYPFT (SEQ ID NO: 136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO: 151) GRUPO 2 185F2G12 KSSQSLFNTGNQKNYLT RASTRES QNDFSYPLT SEQ ID NO: 24 (SEQ ID NO:138) (SEQ ID NO:145) (SEQ ID NO:159) 194D3B2 KSSQSLLNSGNQKNYLT RASTRES QNDYSYPLT SEQ ID NO: 26 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:145) (SEQ ID NO:160) 207F8G5 KSSQSLFNSGNQKNYLI RASTRDS QNDYSYPLT SEQ ID NO: 28, (SEQ ID NO:139) (SEQ ID NO:146) (SEQ ID NO:160) 346, 347 222B6G5 KSSQSLFNSGNQKNYLI RASTRDS QNDYSYPLT SEQ ID NO: 30 (SEQ ID NO:139) (SEQ ID NO:146) (SEQ ID NO:160) 182D10F1 KSSQSLFNSGNQKNYLT RASTRES QNDYSYPLT SEQ ID NO: 32 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:145) (SEQ ID NO:160) 234B9D4 KSSQSLLNSGNQENYLT RASTRQS QNDYSYPLT SEQ ID NO: 34 (SEQ ID NO:140) (SEQ ID NO:147) (SEQ ID NO:160) 253E4F7 KSSQSLLNSGNQKNYLT RASTRQS QNDYSYPLT SEQ ID NO: 36 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:147) (SEQ ID NO:160) 198F10B8 KSSQSLFNSGNQKNYLT RASTRES QNDYSYPLT SEQ ID NO: 264 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:145) (SEQ ID NO:160) 213B10A4 KSSQSLLNSGNQKNYLT RASTRES QNDYSYPLT SEQ ID NO: 266 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:145) (SEQ ID NO:160) Consenso KSSQSLX41NX42GNQX43N RASTRX45S QNDX46SYPLT YLX44 X45=E,D,Q X46=F,Y X41=F,L (SEQ ID NO: 190) (SEQ ID NO: 191) X42=T,S X43=K,E X44= T,I (SEQ ID NO: 189) Modelo KSSQSLFNSGNQKNYLT RASTRES QNDYSYPLT (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 145) (SEQ ID NO: 160) GRUPO 3 370E2B12C3 KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTGES QNAYFYPFT SEQ ID NO: 38, (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:148) (SEQ ID NO:161) 375-377 237D2A4 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSFPLT SEQ ID NO: 40, (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:162) 363, 364 203A6C9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRDS QNNYIYPLT SEQ ID NO: 42 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:149) (SEQ ID NO:163) 201F4H6 KSSQSLLNSGNQKSYLT WASTRES QNVYFFPFT SEQ ID NO: 44 (SEQ ID NO:142) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:164) 200A4H8 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRDS QNNYIYPLT SEQ ID NO:522 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:149) (SEQ ID NO:163) 203A6D5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRDS QNNYIYPLT SEQ ID NO:524 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:149) (SEQ ID NO:163) 248G8E8 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSFPLT SEQ ID NO:536 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:162) Consenso KSSQX64LLNSGNQKX65 WASTX66X67S QNX68YX69X70 PX71T YLT X66=G, R X67=E, D X68=A, D, N, V X64=T, S (SEQ ID NO: 193) X69=F, S, I X65=N, S X70=Y, F (SEQ ID NO: 192) X71=F, L
106 / 309 Anticorpo VL CDR1 VL CDR2 VL CDR3 VL (SEQ ID NO: 194) Modelo KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYFYPFT (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO: 143) (SEQ ID NO: 161) GRUPO 4 429H6C5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYIYPLT SEQ ID NO: 48 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:165) 407D8G1 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO: 50 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 419B5G9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPLT SEQ ID NO: 52 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:167) 393C2C5 KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPVT SEQ ID NO: 54 (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:168) 412B6E4 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYTYPLT SEQ ID NO: 56, (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:169) 386, 387 414A5F7 KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYYYPLT SEQ ID NO: 58 (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:170) 418D2F9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSYPLT SEQ ID NO: 60 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:160) 410H6H3 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNYYYPLT SEQ ID NO: 62, (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:171) 381, 382 391F1G2 KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYYYPLT SEQ ID NO:528 (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:170) 406F11G8 KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYYYPLT SEQ ID NO:530 (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:170) 410A9A9 KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPVT SEQ ID NO:532 (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:168) 410D9G2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:534 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 416F12F3 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYTYPLT SEQ ID NO:536 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:169) 420H3H9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYTYPLT SEQ ID NO:538 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:169) 411G12G1 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSFPLT SEQ ID NO:540 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:162) KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPVT SEQ ID NO:542 (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:168) 391H11H3 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:544 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 395B3C11 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:546 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 406E1H7 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:548 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 414H6G2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:550 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 420G10G3 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:552 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 422E8F9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:554 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 422F4B6 KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPLT SEQ ID NO:556 (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:167) 425B3D5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:558 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 425C6D3 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:560 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 426H6E11 KSSQTLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:562 (SEQ ID NO:141) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) Consenso KSSQX86LLNSGNQKNYLT WASTRES QNX87YX88X89 PX90T X86=S, T (SEQ ID NO: 143) X87=A, D, N (SEQ ID NO: 195) X88=I, S, T, Y X89=Y, F X90=L, V (SEQ ID NO: 196)
107 / 309 Anticorpo VL CDR1 VL CDR2 VL CDR3 VL Modelo KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPLT (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO: 143) (SEQ ID NO: 167)
OUTROS 59B6C4 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPFT SEQ ID NO: 68 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:172) 246B5F2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPFT SEQ ID NO: 46, (IgM) (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:172) 370, 371 418G6A5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPLT SEQ ID NO: 64 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:167) 417A6F11 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSYPT SEQ ID NO: 66 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:173) 28C5B1 KASQDVSTAVA SASYRYT QQHYSTPRT SEQ ID NO: (SEQ ID NO:233) (SEQ ID NO:241) (SEQ ID NO:242) 337252 35E8D2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNSYSFPLT SEQ ID NO: 254 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:243) 61H12G10 KSSQSLFNSGNLKNYLT WASTRES QNDYSYPFT SEQ ID NO: 256 (SEQ ID NO:234) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:244) 69D5C1 KSSQSLLNSGNLRNYLT WASTRES QNGYSYPFT SEQ ID NO: 258 (SEQ ID NO:235) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:245) 181C7B2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNYIYPLT SEQ ID NO: 260 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:163) 196A12B10 KSSQSLLNGGNQKNYLT WASTRES QNNYYFPLT SEQ ID NO: 262 (SEQ ID NO:236) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:246) 232D7C8 KSSQSLFNSGNQRNYLT WASTRES QNDYRYPFT SEQ ID NO: 268 (SEQ ID NO:237) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:151) 233D5E5 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNAYWYPFT SEQ ID NO: 270 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:247) 232F1E4 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYIYPLT SEQ ID NO: 272 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:248) 231H4G11 KSSQSLFNSGSQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO: 274 (SEQ ID NO:238) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 226A4B5 KSSQSLFNSGNQKNYLT RASTRES QNDYSYPLT SEQ ID NO: 276 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:145) (SEQ ID NO:160) 235A10C9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYMFPFT SEQ ID NO: 278 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:150) 239H12G9 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYRYPFT SEQ ID NO: 280 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:151) 248E6A7 KSSQSLLNSGNQKNYLA WASTRES QNNYMYPFT SEQ ID NO: 284 (SEQ ID NO:239) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:249) 254A8D5 RSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNGYSYPFT SEQ ID NO: 286 (SEQ ID NO:240) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:245) 259C6F4 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYRFPFT SEQ ID NO: 288 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:250) 280F3B6 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNDYWYPFT SEQ ID NO: 290 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:153) 59B6C9E8 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSYPFT SEQ ID NO:564 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:172) 186F7E10 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNYIYPLT SEQ ID NO:566 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:163) 186G12H3 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNYIYPLT SEQ ID NO:568 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:163) 194A2F7 KSSQNLLNSGNQKSYLT WASTRET QNAYRFPFT SEQ ID NO:570 (SEQ ID NO:456) (SEQ ID NO:457) (SEQ ID NO:250) 217D9G2 RSSQSLFNSGNQKNYLI RASTRDS QNDYSYPLT SEQ ID NO:572 (SEQ ID NO:458) (SEQ ID NO:146) (SEQ ID NO:160) 219F9B8 KSSQSLLNSGNQKNYLT RASTRES QNDYSYPLT SEQ ID NO:574 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:145) (SEQ ID NO:160) 231C11E9 RSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSYPFT SEQ ID NO:576 (SEQ ID NO:240) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:244) 234C9G5 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO:578 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 234E1F12 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNAYWYPFT SEQ ID NO:580
108 / 309 Anticorpo VL CDR1 VL CDR2 VL CDR3 VL (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:247) 240A8E7 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYYYPFT SEQ ID NO:582 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:459) 242F5H2 RSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNGYSYPFT SEQ ID NO:584 (SEQ ID NO:240) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:245) 244A1B8 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYRYPFT SEQ ID NO:586 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:151) 252C10F6 RASQSISDYLH YASQSIS QNGHSFPFT SEQ ID NO:588 (SEQ ID NO:460) (SEQ ID NO:461) (SEQ ID NO:462) 256C3D3 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO:590 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 258D11C4 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRQS QNDYWFPFT SEQ ID NO:592 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:463) (SEQ ID NO:464) 259B4D4 NSSQSLLNSGNQKNYLT WASSRES QNDYSFPLT SEQ ID NO:594 (SEQ ID NO:465) (SEQ ID NO:466) (SEQ ID NO:162) 259C6F7 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYRFPFT SEQ ID NO:596 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:250) 262H9H6 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO:598 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 263E9F3 KSSQSLLNSGNQENYLT RASTRQS QNDYSYPLT SEQ ID NO:600 (SEQ ID NO:140) (SEQ ID NO:147) (SEQ ID NO:160) 266B11F7 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYIFPLT SEQ ID NO:602 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:467) 267B2C5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYIYPLT SEQ ID NO:604 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:248) 267H5F12 KSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QNNYWFPFT SEQ ID NO:606 (SEQ ID NO:137) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:157) 273F3D4 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYIYPLT SEQ ID NO:608 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:248) 275B2G2 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSYPFT SEQ ID NO:610 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:244) 277F1F8 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYRFPFT SEQ ID NO:612 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:468) 286C7F11 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES LNDYYYPLT SEQ ID NO:614 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:469) 292D9C7 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYYYPLT SEQ ID NO:616 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:154) 392A11C8 RSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:618 (SEQ ID NO:240) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 392C2F10 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QSDYSYPT SEQ ID NO:620 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:470) 394C2G5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:622 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 405G8F11 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QSAFSYPLT SEQ ID NO:624 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:471) 406G3C4 SASSSISYMH DTSKLAS QQWSSNPLT SEQ ID NO:626 (SEQ ID NO:472) (SEQ ID NO:473) (SEQ ID NO:474) 407A8G10 RSSQSLLNSGNQRNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:628 (SEQ ID NO:475) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 407E11H8 RSSQNLLNSGNLKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:630 (SEQ ID NO:476) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 407H12E6 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNNYFFPLT SEQ ID NO:632 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:477) 409D1A7 KSSQSLLNSGNQRNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:634 (SEQ ID NO:478) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 409G10G6 RSSQSLLNSGNQRNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:636 (SEQ ID NO:475) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 411A6E3 RSSQNLLNSGNLKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:638 (SEQ ID NO:476) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 411B4G4 RSSQSLLNSGNQRNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:640 (SEQ ID NO:475) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 411G3E10 RSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:642
109 / 309 Anticorpo VL CDR1 VL CDR2 VL CDR3 VL (SEQ ID NO:240) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 413B1C9 KSSQSLFNRGNQKSYLT WASTRES QNNYIYPLT SEQ ID NO:644 (SEQ ID NO:479) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:163) 413C12F8 RSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:646 (SEQ ID NO:240) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 413H4G12 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QSDYSYPT SEQ ID NO:648 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:470) 418B11D3 SASSSISYMH DTSKLAS QQWSSNPLT SEQ ID NO:650 (SEQ ID NO:472) (SEQ ID NO:473) (SEQ ID NO:474) 418B8B10 KSSQSLFNRGNQKSYLT WASTRES QNNYIYPLT SEQ ID NO:652 (SEQ ID NO:479) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:163) 419A10D4 KSSQSLLNSGNQRNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:654 (SEQ ID NO:478) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 419A5F3 RSSQSLLNSGNQRNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:656 (SEQ ID NO:475) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 420D5H5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:658 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 420F12G8 RSSQNLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPFT SEQ ID NO:660 (SEQ ID NO:480) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:481) 420H7E6 RSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QTGFSYPLT SEQ ID NO:662 (SEQ ID NO:482) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:483) 421H4G3 RSSQSLLNSGNQRNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:664 (SEQ ID NO:475) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 423B2B5 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYSYPLT SEQ ID NO:668 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:160) 423C10E1 RSSQSLFNSGNQKNYLT WASTRES QTSFNYPLT SEQ ID NO:670 (SEQ ID NO:482) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:484) 424G9G3 RSSQSIVYGNGNTYLE KVSSRFS FQGSHVPFT SEQ ID NO:672 (SEQ ID NO:485) (SEQ ID NO:486) (SEQ ID NO:487) 426D9F6 KSSQSLLNSGNQRNYLT WASTRES QNAYSFPLT SEQ ID NO:674 (SEQ ID NO:478) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 427C7H2 SVSSSISSSNLH GTSNLAS QQWSSYPLT SEQ ID NO:676 (SEQ ID NO:488) (SEQ ID NO:489) (SEQ ID NO:490) 430A11H9 RASENIYSYLA NAKTLAE QHHYGTPYT SEQ ID NO:678 (SEQ ID NO:491) (SEQ ID NO:492) (SEQ ID NO:493) 430B3F1 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNAYSFPLT (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:166) 279E8B8 KSSQSLLNSGNQKNYLT WASTRES QNDYMYPFT SEQ ID NO:680 (SEQ ID NO:136) (SEQ ID NO:143) (SEQ ID NO:494)
[00225] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo humanizado. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo tendo uma VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou uma VL CDR3 de um anticorpo descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma versão humanizada de um anticorpo descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma variante de um anticorpo anti-Claudina18.2 descrita neste documento. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma a
110 / 309 trinta substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma a vinte e cinco substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma a vinte substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma a quinze substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma a dez substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma a cinco substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em uma a três substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR (complementary determining region [região determinante da complementaridade]) do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma região estrutural do anticorpo.
[00226] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em: (a) uma região variável de cadeia pesada (VH) incluindo (1) uma VH CDR1 que consiste em uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo incluindo SEQ ID NOs:69-88, 203-210, 392, 397, 402, 406, 409, 413, 417, 427, 430, 433, 434, 436, 444, 447 e 450 ou sua variante consistindo em 1, 2, 3 ou 4 substituições de aminoácidos; (2) uma VH CDR2 que consiste na sequência de aminoácidos selecionada do grupo incluindo SEQ ID NOs:89-116, 201, 202, 211-224, 390, 391, 393, 395, 398, 400, 401, 403, 405, 407, 410, 412, 414, 418, 419, 421, 423, 425, 426, 428, 432, 435, 437, 438, 439, 440, 442, 445, 448, 451 e 453, ou sua variante consistindo em
111 / 309
1, 2, 3 ou 4 substituições de aminoácidos e (3) uma VH CDR3 que consiste na sequência de aminoácidos selecionada do grupo incluindo os SEQ ID NOs:117-135, 225-232, 394, 396, 399, 404, 408, 411, 415, 416, 420, 422, 424, 429, 431, 441, 443, 446, 449, 452 e 454, ou sua variante consistindo em 1, 2, 3 ou 4 substituições de aminoácidos e/ou uma região variável de cadeia leve (VL) consistindo em (1) uma VL CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo incluindo SEQ ID NOs: 136-142, 233-240, 456, 458, 460, 465, 472, 475, 476, 478, 479, 480, 482 , 485, 488 e 491, ou sua variante, compreendendo 1, 2, 3 ou 4 substituições de aminoácidos; (2) uma VL CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste nos SEQ ID NOs: 143-149, 241, 457, 461, 463, 466, 473, 486, 489 e 492, ou sua variante compreendendo 1, 2, 3 ou 4 substituições de aminoácidos; (3) uma VL CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste nos SEQ ID NOs: 150-173, 242-250, 455, 459, 462, 464, 467, 468, 469, 470, 471, 474, 477 , 470, 474, 481, 483, 484, 487, 490, 493 e 494, ou sua variante compreendendo 1, 2, 3 ou 4 substituições de aminoácidos.
Em algumas modalidades, uma CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3) consiste em uma substituição de aminoácido.
Em algumas modalidades, uma CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3) consiste em duas substituições de aminoácidos.
Em algumas modalidades, uma CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3) consiste em três substituições de aminoácidos.
Em algumas modalidades, uma CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3) consiste em quatro substituições de aminoácidos.
Em algumas modalidades, uma ou mais substituições de aminoácidos são substituições conservativas.
Em algumas modalidades, uma ou mais substituições são feitas como parte de um processo de humanização.
Em algumas modalidades, uma ou mais
112 / 309 substituições são feitas como parte de um processo de linha germinal. Em algumas modalidades, uma ou mais substituições são feitas como parte de um processo de maturação de afinidade. Em algumas modalidades, uma ou mais substituições são feitas como parte de um processo de otimização.
[00227] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo tendo uma VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3 a partir de um anticorpo descrito neste documento como anticorpo de Grupo 1, incluindo 260G9E8, 252F1B10, 257B1G9, 265E6G2, 250F4G4, 262C7C10, 240F8G2, 232C5E3, 252E7C9, 257G7B9, 241H10A1 e 273C10E5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2, e CDR3, e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 1 descrito neste documento, ou uma versão humanizada do mesmo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 1 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VL CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 1 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 1 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma versão humanizada de um anticorpo de Grupo 1 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma variante de um anticorpo de Grupo 1 descrito neste documento.
[00228] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma versão humanizada de um anticorpo de Grupo 1 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma variante de um anticorpo anti- Claudina18.2 do Grupo 1 descrita neste documento. Em algumas
113 / 309 modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em 1 a 30, 1 a 25, 1 a 20, 1 a 15, 1 a 10, 1 a 5 ou 1 a 3 substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR (complementary determining region [região determinante da complementaridade]) do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma região estrutural do anticorpo.
[00229] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, trata- se de uma porção de ligação que se liga especificamente à Claudina18.2, consistindo em (a) uma região variável de cadeia pesada (VH) incluindo (1) uma CDR1 de cadeia pesada (VH CDR1) incluindo X1X2X3X4X5, onde X1 é S ou N; X2 é H, Y ou F; X3 é N ou G; X4 é M, I ou L e X5 é H ou N (SEQ ID NO: 174); (2) uma CDR2 de cadeia pesada (VH CDR2) incluindo X6IX7PGX8GX9X10X11YNX12X13FX14X15, onde X6 é Y ou W; X7 é Y ou F; X8 é N ou D; X9 ou G, R ou N; X10 é T, N ou S; X11 é K, N ou Y; X12 é Q ou E; X13 é K ou N; X14 é T ou K; e X15 é G ou A (SEQ ID NO:175); e (3) uma CDR3 de cadeia pesada (VH CDR3) incluindo X16YYGNSFX17X18, onde X16 é D ou F; X17 é A ou V; e X18 é Y ou N (SEQ ID NO:176); e/ou (b) uma região variável de cadeia leve (VL) consistindo em (1) uma CDR1 e cadeia leve (VL CDR1) incluindo KSSQSLX19NSGNQKNYLT, onde X19 é L ou F (SEQ ID NO:186); (2) uma CDR2 de cadeia leve (VL CDR2) incluindo WAX20TRES, onde X20 é S ou A (SEQ ID NO:187) e (3) uma CDR3 e cadeia leve (VL CDR3) incluindo QNX21X22X23X24PX25X26, onde X21 é D, G ou N; X22 é Y ou F; X23 é M, R, S, W, Y ou F; X24 é F ou Y; X25 é F ou L e X26 é T ou P (SEQ ID NO:188).
[00230] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 que
114 / 309 inclui SHNMH (SEQ ID NO:69); (2) uma VH CDR2 que inclui YIYPGNGGTNYNQKFKG (SEQ ID NO: 90) e (3) DYYGNSFAY (SEQ ID NO:117); e/ou (b) a VL que consiste em (1) uma VL CDR1 incluindo KSSQSLLNSGNQKNYLT (SEQ ID NO:136); (2) uma VL CDR2 que inclui WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNDYRYPFT (SEQ ID NO:151).
[00231] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 compreende uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 89 e 117, respectivamente, ou uma variante desta abrangendo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL compreendendo uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 150, respectivamente, ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00232] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 compreende uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 90 e 117, respectivamente, ou uma variante desta abrangendo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL compreendendo uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:137, 143 e 151, respectivamente, ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00233] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 compreende uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:70, 90 e 117, respectivamente, ou uma variante desta abrangendo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL
115 / 309 compreendendo uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 152, respectivamente, ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00234] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 91 e 117, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:137, 143 e 153, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00235] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:71, 92 e 117, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 154, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00236] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:72, 93 e 117, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 155, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00237] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à
116 / 309 Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 94 e 118, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 156, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00238] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:73, 95 e 117, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:137, 143 e 157, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00239] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:74, 96 e 119, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 144 e 158, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00240] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 130, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 144 e 158, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de
117 / 309 aminoácidos nas CDRs.
[00241] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 202 e 118, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 455, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00242] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 90 e 117, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00243] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 390 e 118, respectivamente; e/ou (b) uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 249, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00244] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo tendo uma VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3 a partir de um anticorpo, descrito neste documento, como anticorpo de Grupo 2, incluindo 185F2G12, 194D3B2, 207F8G5, 222B6G5, 182D10F1, 234B9D4, 253E4F7, 241H10A1 ou 273C10E5.
[00245] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à
118 / 309 Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2, e CDR3, e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 2 descrito neste documento, ou uma versão humanizada do mesmo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 2 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VL CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 2 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 2 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma versão humanizada de um anticorpo de Grupo 2 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma variante de um anticorpo de Grupo 2 descrito neste documento.
[00246] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma versão humanizada de um anticorpo de Grupo 2 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma variante de um anticorpo anti- Claudina18.2 do Grupo 2 descrita neste documento. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em 1 a 30, 1 a 25, 1 a 20, 1 a 15, 1 a 10, 1 a 5 ou 1 a 3 substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR (complementary determining region [região determinante da complementaridade]) do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma região estrutural do anticorpo.
[00247] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, estão
119 / 309 porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 incluindo (a) uma VH consistindo em (1) uma VH CDR1 incluindo SYX27X28H, onde X27=é N ou Y; e X28 é M ou I (SEQ ID NO: 177); (2) uma VH CDR2 incluindo YIX29PX30NGGX31X32YX33X34KFX35X36, onde X29 é Y, S ou D; X30 é G ou F; X31 é T ou S; X32 é N, Y ou R; X33 é S ou N; X34 é Q ou L; X35 é K, R ou E; X36 é G ou D (SEQ ID NO:178) e (3) a VH CDR3 incluindo X37RX38X39X40Y, onde X37 é G ou L; X38 é G ou F; X39 é F ou L; X40 é A ou T (SEQ ID NO:179); e/ou (b) uma VL consistindo em (1) VL CDR1 incluindo KSSQSLX41NX42GNQX43NYLX44, onde X41 é F ou L; X42 é T ou S; X43 é K ou E; e X44 é T ou I (SEQ ID NO:189); (2) uma VL CDR2 incluindo RASTRX45S, onde X45 é E, D ou Q (SEQ ID NO:190) (3) uma VL CDR3 incluindo QNDX46SYPLT, onde X46 é F ou Y (SEQ ID NO:191).
[00248] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 que inclui SYNIH (SEQ ID NO:75); (2) uma VH CDR2 que inclui YIYPGNGGTNYNQKFKG (SEQ ID NO: 90) e (3) GRGFAY (SEQ ID NO:120) e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 consistindo em KSSQSLFNSGNQKNYLT (SEQ ID NO:137); (2) uma VL CDR2 incluindo RASTRES (SEQ ID NO:145) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNDYSYPLT (SEQ ID NO:160).
[00249] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:70, 97 e 120, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:138, 145 e 159, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00250] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à
120 / 309 Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:70, 98 e 120, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 145 e 160, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00251] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:75, 99 e 120, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:139, 146 e 160, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00252] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:75, 100 e 120, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:139, 146 e 160, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00253] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:70, 90 e 121, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos
121 / 309 de SEQ ID NOs:137, 145 e 160, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00254] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:76, 101 e 122, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:140, 147 e 160, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00255] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:76, 101 e 123, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 147 e 160, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00256] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo tendo uma VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3 a partir de um anticorpo descrito, neste documento, como anticorpo de Grupo 3, incluindo 370E2B12C3, 237D2A4, 203A6C9 e 201F4H6.
[00257] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2, e CDR3, e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 3 descrito neste documento, ou uma versão humanizada do mesmo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 3 descrito neste
122 / 309 documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VL CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 3 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 3 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma versão humanizada de um anticorpo de Grupo 3 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma variante de um anticorpo de Grupo 3 descrito neste documento.
[00258] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma versão humanizada de um anticorpo de Grupo 3 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma variante de um anticorpo anti- Claudina18.2 do Grupo 3 descrita neste documento. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em 1 a 30, 1 a 25, 1 a 20, 1 a 15, 1 a 10, 1 a 5 ou 1 a 3 substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR (complementary determining region [região determinante da complementaridade]) do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma região estrutural do anticorpo.
[00259] Em algumas modalidades fornecidas neste documento estão porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 incluindo (a) uma VH consistindo em (1) uma VH CDR1 incluindo X47YGVX48, onde X47 é T, S ou R e X48 é H ou S (SEQ ID NO: 180); (2) uma VH CDR2 consistindo em VIWX49X50GX51TX52YX53X54X55X56X57S, onde X49 é A, G ou S; X50 é G ou D; X51 é S ou N; X52 é N ou D; X53 é N ou H; X54 é S ou A; X55 é A ou T;
123 / 309 X56 é L ou F e X57 é M ou I (SEQ ID NO:181) e (3) uma VH CDR3 incluindo X58X59X60X61GNX62X63DY, onde X58 é A ou nulo; X59 é A, G ou V; X60 é Y ou R; X61 é Y, F ou nulo; X62 é A, G ou S; e X63 é L, F ou M (SEQ ID NO:182) e/ou (b) uma VL compreendendo (1) uma VL CDR1 incluindo KSSQX64LLNSGNQKX65YLT, onde X64 é T ou S e X65 é N ou S (SEQ ID NO:192); (2) uma VL CDR2 incluindo WASTX66X67S, onde X66 é G ou R e X67 é E ou D (SEQ ID NO:193) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNX68YX69X70PX71T, onde X68 é A, D, N ou V; X69 é F, S ou I; e X70 é Y ou F e X71 é F ou L (SEQ ID NO:194).
[00260] Em algumas modalidades fornecidas neste documento estão porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 que inclui SYGVS (SEQ ID NO:78); (2) uma VH CDR2 que inclui VIWAGGSTNYHSALMS (SEQ ID NO: 197) e (3) AAYYGNALDY (SEQ ID NO:198) e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 consistindo em KSSQSLLNSGNQKNYLT (SEQ ID NO:136); (2) uma VL CDR2 incluindo WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNAYFYPFT (SEQ ID NO:161).
[00261] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:77, 102 e 124, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:141, 148 e 161, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00262] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:78, 103 e 125, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3,
124 / 309 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 162, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00263] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:79, 104 e 126, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 149 e 163, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00264] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:78, 105 e 127, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:142, 143 e 164, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00265] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 103 e 125, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00266] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo tendo uma VH CDR1, VH CDR2,
125 / 309 VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3 a partir de um anticorpo descrito, neste documento, como anticorpo de Grupo 4, incluindo 429H6C5, 407D8G1, 419B5G9, 393C2C5, 412B6E4, 414A5F7, 418D2F9 e 410H6H3.
[00267] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2, e CDR3, e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 4 descrito neste documento, ou uma versão humanizada do mesmo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 4 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VL CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 4 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo de Grupo 4 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma versão humanizada de um anticorpo de Grupo 4 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma variante de um anticorpo de Grupo 4 descrito neste documento.
[00268] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma versão humanizada de um anticorpo de Grupo 4 descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma variante de um anticorpo anti- Claudina18.2 do Grupo 4 descrita neste documento. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em 1 a 30, 1 a 25, 1 a 20, 1 a 15, 1 a 10, 1 a 5 ou 1 a 3 substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR (complementary determining region [região determinante da complementaridade]) do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido
126 / 309 conservativa(s) fica(m) em uma CDR do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma região estrutural do anticorpo.
[00269] Em algumas modalidades fornecidas neste documento estão porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 incluindo (a) uma VH consistindo em (1) uma VH CDR1 incluindo X72X73GMH, onde X72 é S, G ou T e X73 é F ou S (SEQ ID NO: 183); (2) uma VH CDR2 incluindo YIX74X75GSX76X77IX78YAX79X80X81X82G, onde X74 é S ou N; X75 é S, G ou T; X76 é S, R, T ou N; X77 é T ou P; X78 é Y ou F; X79 é D ou H; X80 é T ou S; X81 é V ou L e X82 é K ou Q (SEQ ID NO:184) e (3) uma VH CDR3 incluindo X83YYGNSFX84X85, onde X83 é F ou I; X84 é V, D ou A e X85 é Y, N ou H (SEQ ID NO:185); e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 incluindo SSQX86LLNSGNQKNYLT, onde X86 é S ou T (SEQ ID NO:195); (2) VL CDR2 abrangendo WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNX87YX88X89PX90T, onde X87 é A, D ou N; X88 é I, S, T ou Y; X89 é Y ou F; X90 é L ou V (SEQ ID NO:196).
[00270] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, estão porções de ligação que se ligam especificamente à Claudina18.2 consistindo em (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 incluindo SGFTFSSFGMH (SEQ ID NO:80); (2) uma VH CDR2 incluindo YISSGSSTIYYADTVKG (SEQ ID NO: 199) e (3) FYYGNSFAY (SEQ ID NO:130) e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 consistindo em KSSQSLLNSGNQKNYLT (SEQ ID NO:136); (2) uma VL CDR2 incluindo WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNAYSYPLT (SEQ ID NO:167).
[00271] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:80, 106 e 128, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma
127 / 309 VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 165, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00272] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:81, 107 e 129, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 166, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00273] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:82, 108 e 130, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 167, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00274] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:80, 109 e 130, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:141, 143 e 168, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00275] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e
128 / 309 VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:83, 110 e 130, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 169, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00276] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:80, 109 e 131, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:141, 143 e 170, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00277] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:80, 111 e 132, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 160, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00278] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:84, 112 e 132, respectivamente, ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nos CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 171, respectivamente, ou sua variante, incluindo 1, 2,
129 / 309 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00279] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00280] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 131, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 167, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00281] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 107 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00282] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em um anticorpo tendo uma VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e/ou VL CDR3 a partir de um anticorpo descrito neste documento como anticorpo do Grupo “Outros”, incluindo 59B6C4, 246B5F2, 418G6A5, 417A6F11, 28C5B1, 35E8D2, 61H12G10, 69D5C1, 181C7B2, 196A12B10, 232D7C8, 233D5E5, 232F1E4, 231H4G11, 226A4B5, 235A10C9, 239H12G9, 248E6A7, 254A8D5, 259C6F4 ou
130 / 309 280F3B6.
[00283] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2, e CDR3 e/ou VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo do Grupo “Outros” descrito neste documento, ou sua versão humanizada. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo do Grupo “Outros” descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VL CDR1, CDR2 e CDR3 a partir de um anticorpo do Grupo “Outros” descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH CDR1, CDR2 e CDR3 e VL CDR1, CDR2, e CDR3 a partir de um anticorpo do Grupo “Outros” descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma versão humanizada de um anticorpo do Grupo “Outros” descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 é uma variante de um anticorpo do Grupo “Outros” descrito neste documento.
[00284] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma variante de um anticorpo do Grupo “Outros” descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma variante do anticorpo anti-Claudina18.2 consiste em 1 a 30, 1 a 25, 1 a 20, 1 a 15, 1 a 10, 1 a 5 ou 1 a 3 substituições de aminoácidos conservativas. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR (complementary determining region [região determinante da complementaridade]) do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma CDR do anticorpo. Em algumas modalidades, a(s) substituição(ões) de aminoácido conservativa(s) fica(m) em uma região estrutural do anticorpo.
[00285] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH
131 / 309 CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:85, 113 e 133, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 172, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00286] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:86, 114 e 134, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 172, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00287] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo uma VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:87, 115 e 131, respectivamente, ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 167, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00288] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:88, 116 e 135, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 173, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2,
132 / 309 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00289] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:203, 211 e 225, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:233, 241 e 242, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00290] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:204, 212 e 226, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 243, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00291] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:205, 213 e 227, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:234, 143 e 244, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00292] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:206, 214 e 131, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5
133 / 309 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:235, 143 e 245, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00293] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:207, 215 e 228, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 163, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00294] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:208, 216 e 229, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:236, 143 e 246, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00295] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 90 e 230, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:237, 143 e 151, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00296] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à
134 / 309 Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 217 e 117, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:137, 143 e 247, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00297] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:209, 218 e 231, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 248, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00298] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:72, 219 e 117, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:238, 143 e 157, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00299] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:75, 220 e 120, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de
135 / 309 SEQ ID NOs:137, 145 e 160, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00300] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 221 e 117, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 150, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00301] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:72, 222 e 118, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 151, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00302] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 223 e 118, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:239, 143 e 249, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00303] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:210,
136 / 309 224 e 232, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:240, 143 e 245, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00304] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:72, 217 e 118, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 250, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00305] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma VH incluindo um VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3, compreendendo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:69, 90 e 117, respectivamente, ou uma variante desta incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou uma VL englobando uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, incluindo as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:137, 143 e 153, respectivamente, ou sua variante incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00306] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 85, 113 e 133, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00307] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à
137 / 309 Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 393 e 394, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00308] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 395 e 396, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00309] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 397, 398 e 399, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 456, 457 e 250, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00310] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 400 e 120, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 458, 146 e 160, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00311] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que
138 / 309 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 401 e 120, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00312] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 402, 403 e 404, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 244, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00313] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 117, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00314] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 405 e 117, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 459, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00315] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 406, 407 e 408,
139 / 309 respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 460, 461 e 462, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00316] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 463 e 464, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00317] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 409, 410 e 411, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 465, 466 e 162, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00318] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 416, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00319] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 412 e 411, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que
140 / 309 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00320] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 413, 414 e 415, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 467, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00321] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 417, 418 e 232, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 244, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00322] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 419 e 420, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 468, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00323] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 421 e 422, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 469,
141 / 309 respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00324] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 423 e 424, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00325] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00326] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 425 e 135, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 470, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00327] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 426 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de
142 / 309 aminoácidos nas CDRs.
[00328] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 471, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00329] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 427, 428 e 429, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 472, 473 e 474, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00330] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00331] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 430, 391 e 431, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 476, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
143 / 309
[00332] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 477, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00333] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 391 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 478, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00334] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 432 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00335] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00336] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à
144 / 309 Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 479, 143 e 163, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00337] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 434, 435 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00338] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 436, 428 e 429, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 472, 473 e 474, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00339] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 437 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 479, 143 e 163, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00340] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que
145 / 309 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 478, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00341] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 438 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00342] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 480, 143 e 481, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00343] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 439 e 441, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 483, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00344] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 431,
146 / 309 respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00345] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 442 e 443, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 160, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00346] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 440 e 441, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 484, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00347] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 444, 445 e 446, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 485, 486 e 487, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00348] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 447, 448 e 449, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que
147 / 309 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 488, 489 e 490, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00349] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 450, 451 e 452, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 491, 492 e 493, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00350] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 453 e 129, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00351] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma VH consistindo em VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 454, respectivamente; e/ou uma VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 494, respectivamente; ou sua variante, incluindo 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
[00352] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma sequência de aminoácidos que tem pelo menos cerca de 80% de identidade de sequência com a sequência de aminoácidos do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma
148 / 309 sequência de aminoácidos que tem pelo menos cerca de 85%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 95%, pelo menos cerca de 97% ou pelo menos cerca de 99% de identidade de sequência com a sequência de aminoácidos do grupo que consiste em SEQ ID NOs:1-68, 251-290, 337-387 e 495-680. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma sequência de aminoácidos que tem pelo menos cerca de 85% de identidade de sequência com a sequência de aminoácidos do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma sequência de aminoácidos que tem pelo menos cerca de 90% de identidade de sequência com a sequência de aminoácidos do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma sequência de aminoácidos que tem pelo menos cerca de 95% de identidade de sequência com a sequência de aminoácidos do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma sequência de aminoácidos que tem pelo menos cerca de 97% de identidade de sequência com a sequência de aminoácidos do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma sequência de aminoácidos que tem pelo menos cerca de 99% de identidade de sequência com a sequência de aminoácidos do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma sequência de aminoácidos que é a sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680.
[00353] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma
149 / 309 sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números ímpares de SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378- 380 e 383-385; e/ou (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% da identidade de sequência de uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 85% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números ímpares de SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378-380 e 383-385; e/ou (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 85% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 90% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números ímpares de SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378- 380 e 383-385; e/ou (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 90% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387. Em
150 / 309 algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 95% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números ímpares de SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378-380 e 383-385; e/ou (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 95% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 98% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números ímpares de SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372-374, 378- 380 e 383-385; e/ou (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 98% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos do grupo consistindo em números ímpares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e numerações ímpares e pares dos SEQ ID NOs: 337-345, 348-352, 355-362, 365-369, 372- 374, 378-380 e 383-385; e/ou (ii) uma VL consistindo em uma sequência de aminoácidos do grupo consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290 e 495-680, e SEQ ID NOs. 346, 347, 353, 354, 363, 364, 370, 371, 375, 376, 377, 381, 382, 386 e 387.
151 / 309
[00354] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 1 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 1 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 2.
[00355] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 3 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 3 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 4.
[00356] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 5 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 6. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 5 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 6.
[00357] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de
152 / 309 aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 7 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 8. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 7 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 8.
[00358] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 9 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 10. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 9 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 10.
[00359] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 11 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 12. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 11 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 12.
[00360] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID
153 / 309 NO: 13 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 14. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 13 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 14.
[00361] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 15 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 16. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 15 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 16.
[00362] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 17 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 18. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 17 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 18.
[00363] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 19 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo
154 / 309 menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 20. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 19 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 20.
[00364] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 21 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 22. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 21 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 22.
[00365] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 23 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 24. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 23 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 24.
[00366] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 25 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 26. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH
155 / 309 incluindo o SEQ ID NO: 25 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 26.
[00367] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 compreende (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO:27; e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 28. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 27 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 28.
[00368] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 29 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 30. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 29 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 30.
[00369] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 31 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 32. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 31 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 32.
[00370] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à
156 / 309 Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 33 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 34. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 33 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 34.
[00371] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 35 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 36. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 35 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 36.
[00372] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 37 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 38. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 37 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 38.
[00373] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo
157 / 309 menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 39 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 40. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 39 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 40.
[00374] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 41 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 42. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 41 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 42.
[00375] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 43 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 44. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 43 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 44.
[00376] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 45 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo
158 / 309 menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 46. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 45 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 46.
[00377] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 47 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 48. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 47 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 48.
[00378] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 49 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 50. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 49 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 50.
[00379] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 51 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 52. Em algumas
159 / 309 modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 51 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 52.
[00380] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 53 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 54. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 53 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 54.
[00381] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 55 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 56. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 55 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 56.
[00382] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 57 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 58. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 57 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 58.
160 / 309
[00383] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 59 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 60. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 59 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 60.
[00384] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 61 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 62. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 61 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 62.
[00385] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 63 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 64. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 63 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 64.
[00386] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de
161 / 309 aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 65 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 66. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 65 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 66.
[00387] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 67 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 68. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 67 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 68.
[00388] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 251 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 252. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 251 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 252.
[00389] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID
162 / 309 NO: 253 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 254. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 253 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 254.
[00390] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 255 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 256. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 255 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 256.
[00391] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 257 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 258. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 257 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 258.
[00392] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 259 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo
163 / 309 menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 260. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 259 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 260.
[00393] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 261 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 262. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 261 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 262.
[00394] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 263 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 264. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 263 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 264.
[00395] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 265 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 266. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH
164 / 309 incluindo o SEQ ID NO: 265 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 266.
[00396] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 267 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 268. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 267 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 268.
[00397] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 269 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 270. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 269 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 270.
[00398] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 271 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 272. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 271 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 272.
[00399] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à
165 / 309 Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 273 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 274. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 273 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 274.
[00400] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 275 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 276. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 275 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 276.
[00401] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 277 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 278. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 277 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 278.
[00402] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo
166 / 309 menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 279 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 280. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 279 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 280.
[00403] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 281 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 282. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 281 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 282.
[00404] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 283 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 284. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 283 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 284.
[00405] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 285 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo
167 / 309 pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 286. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 285 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 286.
[00406] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 287 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 288. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 287 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 288.
[00407] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 289 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 290. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo o SEQ ID NO: 289 e/ou (ii) uma VL incluindo o SEQ ID NO: 290.
[00408] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com qualquer um dos SEQ ID NOs: 337 -345 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID
168 / 309 NO: 346 e 347. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 337-345 e/ou (ii) uma VL incluindo ambos os SEQ ID NOs: 346 e 347.
[00409] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com qualquer um dos SEQ ID NOs: 348 -352 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 353 e 354. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 348-352 e/ou (ii) uma VL incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 353 e 354.
[00410] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com qualquer um dos SEQ ID NOs: 355 -362 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 363 e 364. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 355-362 e/ou (ii) uma VL incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 363 e 364.
[00411] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com qualquer um dos SEQ ID NOs: 365 -369 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo
169 / 309 menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 370 e 371. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 365-369 e/ou (ii) uma VL incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 370 e 371.
[00412] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com qualquer um dos SEQ ID NOs: 372 -374 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com qualquer um dos SEQ ID NOs: 375-377. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 372-374 e/ou (ii) uma VL incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 375-
377.
[00413] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com qualquer um dos SEQ ID NOs: 378 -380 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 381 e 382. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 378-380 e/ou (ii) uma VL incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 381 e 382.
[00414] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com qualquer um
170 / 309 dos SEQ ID NOs: 383 -385 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com o SEQ ID NO: 386 e 387. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 383-385 e/ou (ii) uma VL incluindo quaisquer dos SEQ ID NOs: 386 e 387.
[00415] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com quaisquer dos SEQ ID NOs ímpares: 495-680 e/ou (ii) uma VL incluindo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% e pelo menos 98% de identidade de sequência com quaisquer dos SEQ ID NOs pares: 495-680 que combina com os SEQ ID NOs ímpares: 495- 680 conforme mostrado nas Tabelas 1 e 2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em (i) uma VH incluindo quaisquer dos SEQ ID Nos ímpares: 495-680 e/ou (ii) uma VL incluindo um dos números de SEQ ID NOs: 495-680 que combina com os SEQ ID NOs ímpares: 495-680 conforme mostrado nas Tabelas 1 e 2.
[00416] Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com um anticorpo anti-Claudina18.2 ora divulgado. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com um anticorpo listado nas Tabelas 1 e 2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 260G9E8. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 252F1B10. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 257B1G9. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 265E6G2. Em algumas modalidades, uma porção de
171 / 309 ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 250F4G4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 262C7C10. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 240F8G2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 232C5E3. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 252E7C9. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 257G7B9. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 241H10A1. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 273C10E5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 185F2G12. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 194D3B2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 207F8G5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 222B6G5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 182D10F1. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 234B9D4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 253E4F7. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 198F10B8. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 213B10A4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 370E2B12C3. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 237D2A4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 203A6C9. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 201F4H6. Em algumas modalidades, uma
172 / 309 porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 429H6C5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 407D8G1. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 419B5G9. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 393C2C5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 412B6E4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 414A5F7. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 418D2F9. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 410H6H3. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 59B6C4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 246B5F2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 418G6A5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 417A6F11. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 28C5B1. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 35E8D2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 61H12G10. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 69D5C1. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 181C7B2. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 196A12B10. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 232D7C8. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 233D5E5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 232F1E4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por
173 / 309 ligação à Claudina18.2 com 231H4G11. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 226A4B5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 235A10C9. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 239H12G9. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 248E6A7. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 254A8D5. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 259C6F4. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com 280F3B6. Em algumas modalidades, uma porção de ligação compete por ligação à Claudina18.2 com quaisquer dos outros anticorpos anti- Claudina18.2 descritos neste documento, incluindo anticorpos de camundongo, quiméricos e humanizados.
[00417] A presente divulgação também contempla outras variantes e equivalentes que são substancialmente homólogos aos anticorpos recombinantes, monoclonais, quiméricos, humanizados e humanos ou seus fragmentos de anticorpos, ora descritos. Em algumas modalidades, é desejável melhorar a afinidade de ligação do anticorpo. Em algumas modalidades, é desejável modular as propriedades biológicas do anticorpo, incluindo, entre outros, a especificidade, termoestabilidade, o nível de expressão, a(s) função(ões) efetora(s), glicosilação, imunogenicidade e/ou solubilidade. Os versados na técnica apreciarão o fato de que essas alterações do aminoácido possam mudar os processos pós-translacionais de um anticorpo, como, por exemplo, alterando o número de posição de áreas de glicosilação ou alterando as características de ancoragem da membrana.
[00418] As variações podem ser uma substituição, deleção ou inserção de um ou mais nucleotídeos que codificam o anticorpo ou polipeptídeo que resulta em uma alteração na sequência de aminoácidos em comparação com o
174 / 309 anticorpo nativo ou sequência polipeptídica. Em algumas modalidades, as substituições de aminoácidos são o resultado da substituição de um aminoácido por outro aminoácido com propriedades estruturais e/ou químicas semelhantes, como a substituição de uma leucina por uma serina, por exemplo, substituições conservativas de aminoácidos. As inserções ou deleções podem ficar na faixa de aproximadamente de 1 a 5 aminoácidos. Em algumas modalidades, a substituição, deleção ou inserção inclui (receptores de épsilon), IgA (receptores de alfa) e IgM (receptores de mu). A ligação do anticorpo aos receptores Fc nas superfícies celulares desencadeia uma série de respostas biológicas importantes e diferentes, incluindo engolfamento e destruição de partículas revestidas de anticorpo, eliminação de complexos imunológicos, lise de células-alvo revestidas de anticorpo por células assassinas (processo conhecido como citotoxicidade celular dependente de anticorpo ou ADCC [antibody-dependent cell cytotoxicity]), liberação de mediadores inflamatórios, transferência placentária e controle da produção de imunoglobulina.
[00419] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2, descrita neste documento, consiste em um anticorpo no qual pelo menos uma ou mais regiões constantes foram modificadas ou excluídas. Em algumas modalidades, os anticorpos incluem modificações de uma ou mais de três regiões constantes de cadeia pesada (CH1, CH2 ou CH3) e/ou da região constante de cadeia leve (CL). Em algumas modalidades, a região constante de cadeia pesada dos anticorpos modificados inclui pelo menos uma região constante humana. Em algumas modalidades, a região constante de cadeia pesada dos anticorpos modificados inclui mais de uma região constante humana. Em algumas modalidades, as modificações na região constante incluem adições, deleções ou substituições de um ou mais aminoácidos em uma ou mais regiões. Em algumas modalidades, uma ou mais regiões são parcialmente ou inteiramente deletadas das regiões constantes dos anticorpos
175 / 309 modificados. Em algumas modalidades, todo o domínio CH2 foi removido de um anticorpo (construtos de ΔCH2). Em algumas modalidades, uma região constante deletada é substituída por um espaçador curto de aminoácido que proporciona alguma flexibilidade molecular normalmente conferida pela região constante ausente. Em algumas modalidades, um anticorpo modificado consiste em um domínio CH3 diretamente fundido à região de dobradiça do anticorpo. Em algumas modalidades, um anticorpo modificado consiste em um espaçador de peptídeo inserido entre a região de dobradiça e os domínios modificados CH2 e/ou CH3.
[00420] É conhecido na técnica que a(s) região(ões) de um anticorpo medeia(m) várias funções efetoras e essas funções efetoras podem variar dependendo no isotipo do anticorpo. Por exemplo, a ligação do componente C1 do complemento à região Fc dos anticorpos de IgG ou IgM (ligação ao antígeno) ativa o sistema complemento. A ativação do complemento é importante na opsonização e lise de patógenos celulares. A ativação do complemento também estimula a resposta inflamatória e pode estar envolvida na hipersensibilidade autoimune. Além disso, a região Fc de um anticorpo pode ligar-se a uma célula expressando um receptor Fc (FcR). Há vários receptores Fc que são específicos de diferentes classes de anticorpos, incluindo IgG (receptores gama), IgE (receptores épsilon), IgA (receptores alfa) e IgM (receptores mu). A ligação do anticorpo aos receptores Fc nas superfícies celulares desencadeia uma série de respostas biológicas importantes e diferentes, incluindo engolfamento e destruição de partículas revestidas de anticorpo, eliminação de complexos imunológicos, lise de células-alvo revestidas de anticorpo por células assassinas (processo conhecido como citotoxicidade celular dependente de anticorpo ou ADCC [antibody-dependent cell cytotoxicity]), liberação de mediadores inflamatórios, transferência placentária e controle da produção de imunoglobulina.
176 / 309
[00421] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 inclui uma região Fc. As sequências de aminoácidos da região Fc de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4 humanas são conhecidas pelos versados na técnica. Em alguns casos, as regiões Fc com variações de aminoácidos foram identificadas em anticorpos nativos. Em algumas modalidades, os anticorpos modificados (por exemplo, região Fc modificada) proporcionam funções efetoras alteradas que, por sua vez, afetam o perfil biológico do anticorpo. Por exemplo, em algumas modalidades, a deleção ou inativação (através de mutações pontuais ou outros meios) de uma região constante reduz a ligação do receptor Fc do anticorpo modificado conforme ele circula. Em algumas modalidades, as modificações da região constante aumentam a meia-vida sérica do anticorpo. Em algumas modalidades, as modificações da região constante reduzem a meia-vida sérica do anticorpo. Em algumas modalidades, as modificações da região constante diminuem ou removem a ADCC e/ou a citotoxicidade dependente de complemento (CDC) do anticorpo. Em algumas modalidades, as substituições de aminoácidos específicos em uma região Fc de IgG1 humana com resíduos de IgG2 ou IgG4 correspondentes reduzem as funções efetoras (por exemplo, ADCC e CDC) no anticorpo modificado. Em algumas modalidades, um anticorpo não possui uma ou mais funções efetoras (por exemplo, anticorpos “não efetores”). Em algumas modalidades, o anticorpo não possui nenhuma atividade de ADCC e/ou atividade de CDC. Em algumas modalidades, o anticorpo não se liga a um receptor Fc e/ou fatores de complemento. Em algumas modalidades, o anticorpo não possui função(ões) efetora(s). Em algumas modalidades, as modificações da região constante aumentam ou intensificam a ADCC e/ou a CDC do anticorpo. Em algumas modalidades, a região constante é modificada para eliminar as ligações de dissulfeto ou porções de oligossacarídeos. Em algumas modalidades, a região constante é modificada para adicionar/substituir um ou mais aminoácidos para fornecer
177 / 309 uma ou mais locais de fixação de citotoxinas, oligossacarídeos ou carboidratos. Em algumas modalidades, a porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma região variante Fc, que é manipulada com substituições em posições específicas do aminoácido, conforme comparação com uma região Fc nativa. Em algumas modalidades, a região Fc é fundida via uma dobradiça. A dobradiça pode ser uma dobradiça de IgG1, IgG2 ou IgG3.
[00422] Em algumas modalidades, as variantes podem incluir adição de resíduos de aminoácidos na extremidade do amino e/ou carboxil-terminal do anticorpo ou polipeptídeo. A quantidade dos resíduos de aminoácidos adicionais pode variar desde um resíduo a cem ou mais resíduos. Em algumas modalidades, uma variante consiste em um resíduo de metionil do N-terminal. Em algumas modalidades, a variante consiste em um polipeptídeo/proteína adicional (por exemplo, região Fc) para criar uma proteína de fusão. Em algumas modalidades, uma variante é manipulada para ser detectável e pode incluir um marcador e/ou proteína detectável (por exemplo, uma etiqueta fluorescente ou uma enzima).
[00423] Os anticorpos ou polipetídeos variantes descritos neste documento podem ser gerados usando-se métodos conhecidos na técnica, incluindo, entre outros, mutagênese direcionada ao local, mutagênese por varredura de alanina e mutagênese de PCR.
[00424] Em algumas modalidades, uma variante de uma porção de ligação à Claudina18.2, divulgada neste documento, pode reter a capacidade de reconhecer um alvo (por exemplo, Claudina18.2) de forma semelhante, da mesma forma ou de uma forma superior que a porção de ligação parental. Em algumas modalidades, a variante pode ser pelo menos cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90%, cerca de 91%, cerca de 92%, cerca de 93%, cerca de 94%, cerca de 95%, cerca de 96%, cerca de 97%, cerca de 98%, cerca de 99% ou mais idêntica à porção de ligação parental na sequência de aminoácidos. Em algumas modalidades, a variante pode ter uma sequência de aminoácidos
178 / 309 que seja pelo menos cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90%, cerca de 91%, cerca de 92%, cerca de 93%, cerca de 94%, cerca de 95%, cerca de 96%, cerca de 97%, cerca de 98%, cerca de 99% ou mais idêntica aos anticorpos ora divulgados.
[00425] Em algumas modalidades, uma variante de uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma sequência de aminoácidos da porção de ligação parental à Claudina18.2 com uma ou mais substituições de aminoácidos conservativas. As substituições conservativas de aminoácidos são conhecidas na técnica e incluem substituições de aminoácidos em que um aminoácido com certas propriedades físicas e/ou químicas é trocado por outro aminoácido com propriedades químicas ou físicas iguais ou semelhantes.
[00426] Em algumas modalidades, uma variante de uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste em uma sequência de aminoácidos da porção de ligação parental com uma ou mais substituições de aminoácidos não conservativas. Em algumas modalidades, uma variante de uma porção de ligação à Claudina18.2 consiste na sequência de aminoácidos da porção de ligação parental com uma ou mais substituições de aminoácidos não conservativas, em que uma ou mais substituições de aminoácidos não conservativas não interferem ou inibem uma ou mais atividades biológicas da variante (por exemplo, ligação à Claudina18.2). Em algumas modalidades, uma ou mais substituições de aminoácidos conservativas e/ou uma ou mais substituições de aminoácidos não conservativas podem intensificar uma atividade biológica da variante, de modo que a atividade biológica da variante funcional seja aumentada em comparação com a porção de ligação parental.
[00427] Em algumas modalidades, a variante de função pode ter 1, 2, 3, 4 ou 5 substituições de aminoácidos nas CDRs (por exemplo, VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3) da porção de ligação.
[00428] Em algumas modalidades, as porções de ligação à
179 / 309 Claudina18.2 descritas neste documento são quimicamente modificadas naturalmente ou por intervenção. Em algumas modalidades, as porções de ligação à Claudina18.2 são anticorpos anti-Claudina18.2 que foram quimicamente modificados por glicosilação, acetilação, peguilação, fosforilação, amidação, derivatização por grupos de proteção/bloqueio conhecidos, clivagem proteolítica e/ou ligação a um ligando celular ou outra proteína. Quaisquer outras modificações químicas podem ser realizadas por técnicas conhecidas. Os fragmentos de ligação ao antígeno das modalidades da invenção podem consistir em um ou mais análogos de um aminoácido (incluindo, por exemplo, aminoácidos não naturais), além de outras modificações conhecidas na técnica.
[00429] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, um anticorpo) liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com uma dissociação constante (KD) de cerca de 1 μM ou menos, cerca de 100 nM ou menos, cerca de 40 nM ou menos, cerca de 20 nM ou menos, cerca de 10 nM ou menos, cerca de 1 nM ou menos, cerca de 0,1 nM ou menos, 50 pM ou menos, 10 pM ou menos ou 1 pM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 20 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 10 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 1 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 0,5 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 0,1 nM ou menos. Em
180 / 309 algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 50 pM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 25 pM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 10 pM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com um KD de cerca de 1 pM ou menos. Em algumas modalidades, a constante de dissociação do agente de ligação (por exemplo, um anticorpo) para Claudina18.2 é a constante de dissociação determinada usando uma proteína Claudina18.2 imobilizada em um chip Biacore e o agente de ligação fluiu sobre o chip. Em algumas modalidades, a constante de dissociação do agente de ligação (por exemplo, um anticorpo) à Claudina18.2 é a constante de dissociação determinada usando o agente de ligação capturado por um anticorpo de IgG anti-humano em um chip Biacore e a Claudina18.2 solúvel fluiu sobre o chip.
[00430] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, um anticorpo) liga-se à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 humana) com meia concentração efetiva máxima (EC50) de cerca de 1 μM ou menos, cerca de 100 nM ou menos, cerca de 40 nM ou menos, cerca de 20 nM ou menos, cerca de 10 nM ou menos, cerca de 1 nM ou menos ou cerca de 0,1 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 humana com um EC50 de cerca de 1 μM ou menos, cerca de 100 nM ou menos, cerca de 40 nM ou menos, cerca de 20 nM ou menos, cerca de 10 nM ou menos, cerca de 1 nM ou menos ou cerca de 0,1 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com um EC50 de cerca de 40 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de
181 / 309 ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com um EC50 de cerca de 20 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com um EC50 de cerca de 10 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com um EC50 de cerca de 1 nM ou menos. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 liga-se à Claudina18.2 com um EC50 de cerca de 0,1 nM ou menos.
[00431] Em algumas modalidades, fornecidas neste documento, encontram-se polinucleotídeos que codificam um polipeptídeo (ou seja, uma porção de ligação à Cllaudina18.2). O termo "polinucleotídeos que codificam um polipeptídeo" abrange um polinucleotídeo que inclui apenas sequências de codificação para o polipeptídeo, bem como um polinucleotídeo que inclui sequências adicionais codificadoras e/ou não codificadoras. Os polinucleotídeos da divulgação podem ser na forma de RNA ou DNA. O DNA inclui cDNA, DNA genômico e DNA sintético e pode ser de fita dupla ou de fita simples, e se for de fita simples pode ser a fita codificadora ou fita não codificadora (antissentido).
[00432] Em algumas modalidades, um polinucleotídeo consiste em um polinucleotídeo (por exemplo, uma sequência de nucleotídeo) que codifica um polipeptídeo incluindo uma sequência de aminoácidos selecionada dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680.
[00433] A presente divulgação também fornece variantes dos polinucleotídeos ora descritos, em que a variante codifica, por exemplo, fragmentos, análogos e/ou derivados de uma porção de ligação à Claudina18.2 descrita neste documento. Em algumas modalidades, a presente divulgação fornece um polinucleotídeo abrangendo um polinucleotídeo tendo uma sequência de nucleotídeos pelo menos com cerca de 80% de identidade, pelo menos cerca de 85% de identidade, pelo menos cerca de 90% de identidade, pelo menos cerca de 95% de identidade, pelo menos cerca de 96%
182 / 309 de identidade, pelo menos cerca de 97% de identidade, pelo menos cerca de 98% de identidade ou pelo menos cerca de 99% de identidade com uma sequência polinucleotídica que codifica um polipeptídeo ora descrito.
[00434] Tal como usado neste documento, a frase "um polinucleotídeo tendo uma sequência de nucleotídeos com pelo menos cerca de 95% de identidade com uma sequência de polinucleotídeo" significa que a sequência de nucleotídeos do polinucleotídeo é idêntica a uma sequência de referência, exceto que a sequência de polinucleotídeos pode incluir até cinco mutações pontuais por cada 100 nucleotídeos da sequência de nucleotídeos de referência. Em outras palavras, para obter-se um polinucleotídeo tendo uma sequência de nucleotídeos pelo menos 95% idêntica a uma sequência de nucleotídeos de referência, até 5% dos nucleotídeos na sequência de referência podem ser deletados ou substituídos por outro nucleotídeo, ou um número de nucleotídeos até 5% do total de nucleotídeos, na sequência de referência, podem ser inseridos na sequência de referência. Essas mutações da sequência de referência podem ocorrer nas posições 5’ ou 3' terminais da sequência de nucleotídeos de referência ou em qualquer lugar entre essas posições terminais, intercaladas individualmente entre os nucleotídeos na sequência de referência ou em um ou mais grupos contíguos dentro da sequência de referência.
[00435] As variantes de polinucleotídeos podem conter alterações nas regiões codificadoras, regiões não codificadoras ou ambas. Em algumas modalidades, uma variante de polinucleotídeo contém alterações que produzem substituições, adições ou deleções silenciosas, mas não altera as propriedades ou atividades do polipeptídeo codificado. Em algumas modalidades, uma variante de polinucleotídeo consiste em substituições silenciosas que resultam em nenhuma alteração na sequência de aminoácidos do polipeptídeo (devido à degenerescência do código genético). As variantes polinucleotídicas podem ser produzidas por várias razões, por exemplo, para
183 / 309 otimizar a expressão de códons para um hospedeiro particular (por exemplo, alterar códons no RNAm humano para aqueles preferidos por um hospedeiro bacteriano, como E. coli). Em algumas modalidades, uma variante de polinucleotídeo consiste em pelo menos uma mutação silenciosa em uma região codificadora ou não codificadora da sequência.
[00436] Em algumas modalidades, uma variante de polinucleotídeo é produzida para modular ou alterar a expressão (ou níveis de expressão) do polipeptídeo codificado. Em algumas modalidades, uma variante de polinucleotídeo é produzida para aumentar a expressão do polipeptídeo codificado. Em algumas modalidades, uma variante de polinucleotídeo é produzida para diminuir a expressão do polipeptídeo codificado. Em algumas modalidades, uma variante de polinucleotídeo aumentou a expressão do polipeptídeo codificado conforme comparação com a sequência de polipeptídeos parentais. Em algumas modalidades, uma variante de polinucleotídeo diminuiu a expressão do polipeptídeo codificado conforme comparação com a sequência de polinucleotídeos parentais.
[00437] Em algumas modalidades, um polinucleotídeo consiste em um polinucleotídeo tendo uma sequência de nucleotídeos pelo menos com cerca de 80% de identidade, pelo menos cerca de 85% de identidade, pelo menos cerca de 90% de identidade, pelo menos cerca de 95% de identidade, pelo menos cerca de 96% de identidade, pelo menos cerca de 97% de identidade, pelo menos cerca de 98% de identidade ou pelo menos cerca de 99% de identidade com uma sequência polinucleotídica que codifica uma sequência de aminoácidos dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-680. Também está apresentado um polinucleotídeo que consiste em um polinucleotídeo que se hibridiza com um polinucleotídeo que codifica uma sequência de aminoácidos dos SEQ ID NOs: 1-68, 251-290, 337-387 e 495-
680. Em algumas modalidades, a hibridização ocorre sob condições de alta estringência como é conhecida por versados na técnica.
184 / 309
[00438] Em algumas modalidades, um polinucleotídeo consiste na sequência codificadora para um polipeptídeo (por exemplo, um anticorpo) fundido no mesmo quadro de leitura a um polinucleotídeo, que auxilia na expressão e secreção de um polipeptídeo de uma célula hospedeira (por exemplo, uma sequência líder que funciona como uma sequência secretora para controlar o transporte de um polipeptídeo). O polipeptídeo pode ter a sequência líder clivada pela célula hospedeira para formar uma versão “madura” do polipeptídeo.
[00439] Em algumas modalidades, um polinucleotídeo consiste na sequência codificadora de um polipeptídeo (por exemplo, um anticorpo) fundido no mesmo quadro de leitura de um marcador ou sequência de etiquetas. Por exemplo, em algumas modalidades, uma sequência de marcadores é uma etiqueta hexa-histidina (HIS-tag) que permite purificação eficiente do polipeptídeo fundido no marcador. Em algumas modalidades, uma sequência de marcadores é uma etiqueta de hemaglutinina (HA) derivada da proteína hemaglutinina da influenza quando um hospedeiro mamífero (por exemplo, células COS-7) é utilizado. Em algumas modalidades, a sequência de marcadores é uma etiqueta FLAG™. Em algumas modalidades, um marcador pode ser usado em combinação com outras etiquetas.
[00440] Em algumas modalidades, um polinucleotídeo é isolado. Em algumas modalidades, um polinucleotídeo é substancialmente puro.
[00441] Também são apresentados vetores e células que consistem em polinucleotídeos também descritos neste documento. Em algumas modalidades, um vetor de expressão consiste em um polinucleotídeo que codifica uma porção de ligação à Claudina18.2 descrito neste documento. Em algumas modalidades, um vetor de expressão consiste em uma molécula de polinucleotídeo, que codifica um polipeptídeo que faz parte de uma porção de ligação à Claudina18.2, descrita neste documento. Em algumas modalidades, uma célula de hospedeiro consiste em um vetor de expressão, que inclui uma
185 / 309 molécula de polinucleotídeo que codifica uma porção de ligação à Claudina18.2, descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma célula de hospedeiro consiste em um vetor de expressão incluindo uma molécula de polinucleotídeo, que codifica um polipeptídeo que faz parte de uma porção de ligação à Claudina18.2, descrito neste documento. Em algumas modalidades, uma célula de hospedeiro consiste em um polinucleotídeo, que codifica uma porção de ligação à Claudina18.2, descrita neste documento.
[00442] As porções de ligação à Claudina18.2 descritas neste documento podem ser produzidas por qualquer método conhecido na técnica, incluindo síntese química e técnicas de expressão recombinante. A prática da invenção emprega, salvo indicação em contrário, técnicas convencionais de biologia molecular, microbiologia, análise genética, DNA recombinante, química orgânica, bioquímica, PCR, síntese e modificação de oligonucleotídeos, hibridização de ácido nucleico e campos relacionados na técnica. Essas técnicas são descritas nas referências ora citadas e são totalmente explicadas na literatura. Ver, por exemplo, Maniatis et al. (1982) Molecular Cloning:A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook et al. (1989), Molecular Cloning:A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook et al. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates); Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates) Gait (ed.) (1984) Oligonucleotide Synthesis:A Practical Approach, IRL Press; Eckstein (ed.) (1991) Oligonucleotides and Analogues:A Practical Approach, IRL Press; Birren et al. (eds.) (1999) Genome Analysis:A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Borrebaeck (ed.) (1995) Antibody Engineering, Second Edition, Oxford University Press; Lo (ed.)
186 / 309 (2006) Antibody Engineering:Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology); Vol. 248, Humana Press, Inc; cada um destes trabalhos está incorporado neste documento por referência na íntegra.
[00443] As porções de ligação à Claudina18.2 ora descritas podem ser produzidas e isoladas usando-se métodos conhecidos na técnica. Os peptídeos podem ser sintetizados, na íntegra ou em parte, usando métodos químicos (ver, por exemplo, Caruthers (1980). Nucleic Acids Res. Symp. Ser. 215; Horn (1980); and Banga, A.K., Therapeutic Peptides and Proteins, Formulation, Processing and Delivery Systems (1995) Technomic Publishing Co., Lancaster, PA). A síntese de peptídeos pode ser realizada usando-se várias técnicas da fase sólida (ver, por exemplo, Roberge Science 269:202 (1995); Merrifield, Methods. Enzymol. 289:3 (1997)) e a síntese automatizada pode ser obtida, por exemplo, usando o ABI 431A Peptide Synthesizer (Perkin Elmer), de acordo com as instruções do fabricante. Os peptídeos também podem ser sintetizados usando-se metodologias combinadas. Os resíduos sintéticos e polipeptídeos podem ser sintetizados usando vários procedimentos e metodologias conhecidos na técnica (ver, por exemplo, Organic Syntheses Collective Volumes, Gilman, et al. (Eds) John Wiley & Sons, Inc., NY). Os peptídeos modificados podem ser produzidos por métodos de modificação química (ver, por exemplo, Nucleic Acids Res. 25:3440 (1997); Frenkel, Free Radic. Biol. Med. 19:373 (1995); and Blommers, Biochemistry 33:7886 (1994)). As variações, derivados, substituições e modificações da sequência de peptídeos também podem ser feitos usando-se métodos tais como mutagênese mediada por oligonucleotídeo (direcionada ao local), varredura de alanina e mutagênese baseada em PCR. Mutagênese dirigida ao local (Carter et al., Nucl. Acids Res., 13:4331 (1986); Zoller et al., Nucl. Acids Res. 10:6487 (1987)), mutagênese de cassete (Wells et al., Gene 34:315 (1985)), mutagênese por seleção de restrição (Wells et al., Philos. Trans. R. Soc. London SerA 317:415 (1986)) e outras técnicas podem
187 / 309 ser realizadas em DNA clonado para produzir sequências, variantes, fusões e quimeras de peptídeos da invenção, e variações, derivados, substituições e modificações dos mesmos.
[00444] As porções de ligação à Claudina18.2, ora descritas, que incluem o anticorpo, podem ser preparadas usando-se uma ampla variedade de técnicas conhecidas na técnica, incluindo o uso de tecnologias de hibridoma e recombinantes, ou uma combinação das mesmas. Por exemplo, os anticorpos monoclonais podem ser produzidos utilizando-se técnicas de hibridoma incluindo as técnicas conhecidas na técnica e ensinadas, por exemplo, em Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual, (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2ª ed. 1988); Hammerling et al., em: Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas 563 681 (Elsevier, N.Y., 1981), cada um dos artigos está incorporado aqui por referência na íntegra. Outros métodos de produção de coaglutinantes também são conhecidos na técnica.
[00445] Em algumas modalidades, um vetor de expressão recombinante é utilizado para amplificar e expressar DNA que codifica uma porção de ligação à Claudina18.2. Por exemplo, um vetor de expressão recombinante pode ser um construto de DNA replicável que inclui fragmentos de DNA sintéticos ou derivados de DNAc que codificam uma cadeia de polipetídeo de uma porção de ligação à Claudina18.2, como um anticorpo anti-Claudina18.2 operacionalmente ligado a elementos regulatórios translacionais e/ou transcricionais adequados de genes de mamíferos, micróbios, vírus ou insetos. Em algumas modalidades, é usado um vetor viral. As regiões de DNA são “operacionalmente ligadas” quando são funcionalmente relacionadas entre si. Por exemplo, um promotor está operacionalmente ligado a uma sequência de codificação se o mesmo controlar a transcrição da sequência; ou se um local de ligação ao ribossoma estiver operacionalmente ligado a uma sequência de codificação e se estiver posicionado de forma a permitir a tradução. Em algumas modalidades, os
188 / 309 elementos estruturais destinados ao uso em sistemas de expressão de levedura incluem uma sequência líder que permite secreção extracelular de proteína traduzida por uma célula hospedeira. Em algumas modalidades, em situações quando a proteína recombinante é expressa sem uma sequência líder ou de transporte, um polipeptídeo pode incluir um resíduo de metionina de N- terminal.
[00446] Pode ser empegada uma ampla variedade de combinações de hospedeiro/vetor de expressão. Os vetores de expressão úteis para hospedeiros eucarióticos incluem, por exemplo, vetores consistindo em sequências de controle de expressão de SV40, vírus do papiloma bovino, adenovírus e citomegalovírus. Os vetores de expressão úteis para hospedeiros bacterianos incluem plasmídeos bacterianos conhecidos, tais como plasmídeos de E. coli, incluindo pCR1, pBR322, pMB9 e seus derivados, e plasmídeos de uma gama mais ampla de hospedeiros, tais como M13 e outros fagos filamentosos de DNA de cadeia simples.
[00447] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, um anticorpo) da presente divulgação é expressa a partir de um ou mais vetores. As células hospedeiras adequadas para a expressão de uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, um anticorpo) ou à proteína Claudina18.2 ou seu fragmento para usar como um antígeno ou imunógeno incluem procariotos, células de levedura, células de inseto ou células eucarióticas superiores sob o controle de promotores apropriados. Os vetores de clonagem e expressão adequados para uso com hospedeiros celulares de bactérias, fungos, leveduras e mamíferos, bem como métodos de produção proteica, incluindo produção de anticorpos, são bem conhecidos na técnica.
[00448] Exemplos de linhagens de células hospedeiras adequadas de mamíferos incluem, entre outros, COS-7 (derivada de rim de macaco), L-929 (derivada de fibroblasto de murino), C127 (derivada de tumor mamário de
189 / 309 murino), 3T3 (derivada de fibroblasto de murino), CHO (derivada de ovário de hamster chinês), HeLa (derivada de câncer cervical humano), BHK (derivada de fibroblasto de rim de hamster), linhagens celulares HEK-293 (derivadas de rim embrionário humano) e suas variantes. Os vetores de expressão de mamíferos podem englobar elementos não transcritos como uma origem de replicação, um promotor e intensificador adequados ligados ao gene a ser expresso e outras sequências não transcritas flanqueadoras 5’ ou 3' e sequências não traduzidas 5’ ou 3', tais como locais de ligação necessários ao ribossoma, um local de poliadenilação, locais de doadores e aceitadores de splice e sequências de terminação de transcrição. A expressão de proteínas recombinantes em sistemas de cultura de células de inseto (por exemplo, baculovírus) também proporciona um método robusto para a produção de proteínas corretamente enoveladas e biologicamente funcionais. Os sistemas de baculovírus para a produção de proteínas heterólogas em células de insetos são bem conhecidos na técnica.
[00449] Desta forma, a presente divulgação fornece células consistindo em porções de ligação à Claudina18.2 descritas neste documento. Em algumas modalidades, as células produzem as porções de ligação à Claudina18.2 descritas neste documento. Em algumas modalidades, as células produzem um anticorpo. Em algumas modalidades, as células produzem um anticorpo que liga-se especificamente à Claudina18.2 humana.
[00450] Em algumas modalidades, as células produzem o anticorpo ou uma variante do mesmo descritas neste documento. Em algumas modalidades, as células produzem a versão quimérica do anticorpo conforme descrito neste documento. Em algumas modalidades, as células produzem uma versão humanizada do anticorpo conforme descrito neste documento. Em algumas modalidades, a célula é uma procariótica (por exemplo, E. coli). Em algumas modalidades, a célula é uma célula eucariótica. Em algumas modalidades, a célula é uma célula de mamífero. Em algumas modalidades, a
190 / 309 célula é uma célula hibridoma.
[00451] As porções de ligação à Claudin18.2 (por exemplo, anticorpos) da presente divulgação podem ser analisadas quanto às suas propriedades físicas, químicas e/ou biológicas por vários métodos conhecidos na técnica. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 é testado quanto à sua capacidade de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, Claudina18.2 e/ou Claudina18.2 de macaco rhesus). Os ensaios de ligação incluem, entre outras, SPR (por exemplo, Biacore), ELISA e FACS. Além disso, os anticorpos podem ser avaliados quanto à solubilidade, estabilidade, termoestabilidade, viscosidade, níveis de expressão, qualidade de expressão e/ou eficiência de purificação.
[00452] O mapeamento de epítopo é um método de identificação do local, região ou epítopo de ligação em uma proteína-alvo onde um anticorpo (ou outra porção de ligação) se liga. Vários métodos são conhecidos na técnica para mapeamento de epítopos em proteínas-alvo. Esses métodos incluem mutagênese, incluindo, entre outros, mutagênese do tipo shotgun, mutagênese dirigida ao local e varredura de alanina; varredura de domínio ou fragmento; varredura de peptídeos (por exemplo, tecnologia Pepscan); métodos de exibição (por exemplo, exibição de fago, exibição microbiana e exibição de ribossomo/RNAm); métodos envolvendo proteólise e espectroscopia de massa; além de determinação estrutural (por exemplo, cristalografia de raios-X e NMR). Em algumas modalidades, as porções de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, anticorpos), ora descritas, são caracterizadas por ensaios incluindo, entre outros, sequenciamento de N- terminal, análise de aminoácidos, HPLC, espectrometria de massa, cromatografia de troca iônica e digestão de papaína.
[00453] Em algumas modalidades, a porção de ligação à Claudina18.2 consiste em conjugados que incluem um anticorpo anti-Claudina18.2 descritos neste documento. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-
191 / 309 Claudina18.2 é conjugado a um agente ou porção citotóxica. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 é conjugado a um agente citotóxico para formar um ADC (antibody-drug conjugate [conjugado anticorpo-medicamento]). Em algumas modalidades, a porção citotóxica é um agente quimioterápico incluindo, entre outros, metotrexato, adriamicina/doxorrubicina, melfalano, mitomicina C, clorambucil, duocarmicina, daunorrubicina, pirrolobenzodiazepinas (PBDs) ou outros agentes intercalantes. Em algumas modalidades, a porção citotóxica é um inibidor microtubular incluindo, entre outros, auristatinas, maitansinoides (por exemplo, DM1 e DM4) e tubulisinas. Em algumas modalidades, a porção citotóxica é uma toxina enzimaticamente ativa de origem bacteriana, fúngica, vegetal ou animal, ou seus fragmentos, incluindo, entre outros, a cadeia A de difteria, fragmentos ativos de não ligação da toxina da difteria, cadeia de exotoxina A , cadeia A de ricina, cadeia A de abrina, cadeia A de modeccina, alfa-sarcina, proteínas Aleurites fordii, proteínas diantinas, proteínas Phytolaca americana (PAPI, PAPII e PAP-S), inibidor de Momordica charantia, curcina, crotina, inibidor de Sapaonaria officinalis, gelonina, mitogelina, restrocina, fenomicina, enomicina e os tricotecenos. Em algumas modalidades, um anticorpo é conjugado a uma ou mais pequenas toxinas de moléculas, como caliqueamicinas, maitansinoides, tricotenos e CC1065.
[00454] Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, um anticorpo), ora descrita, é conjugada a uma substância ou molécula detectável que permite que o agente seja usado para diagnóstico e/ou detecção. Uma substância detectável pode incluir, entre outros, enzimas, como peroxidase de rábano, fosfatase alcalina, beta- galactosidase e acetilcolinesterase; grupos prostéticos, tais como biotina e flavina(s); materiais fluorescentes, como, umbeliferona, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína (FITC), rodamina, isotiocianato de
192 / 309 tetrametilrodamina (TRITC), diclorotriazinilamina fluoresceína, cloreto de dansil, cianina (Cy3) e ficoeritrina; materiais bioluminescentes, como 212 luciferase; materiais radioativos, como Bi, 14C, 57Co, 51Cr, 67Cu, 18 F, 68 Ga, 67 Ga, 153Gd, 159 Gd, 68 Ge, 3H, 166Ho, 131 I, 125 I, 123 I, 121 I, 115 In, 113 In, 112 In, 111 In, 140 La, 177Lu, 54 Mn, 99 Mo, 32P, 103Pd, 149Pm, 142Pr, 186Re, 188Re, 105Rh, 97Ru, 35S, 47 Sc, 75Se, 153 Sm, 113Sn, 117 Sn, 85Sr, 99m Tc, 201 Ti, 133Xe, 90Y, 69 Yb, 175Yb, 65Zn; metais que emitem pósitrons e metais que emitem íons de pósitrons de metais magnéticos e íons de metais magnéticos.
[00455] Uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, um anticorpo), ora descrita, pode ser ligada a um suporte sólido. Tais suportes sólidos incluem, entre outros, vidro, celulose, poliacrilamida, nylon, poliestireno, cloreto de polivinil ou polipropileno. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 imobilizado é usado em um imunoensaio. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-Claudina18.2 imobilizado é usado na purificação do antígeno-alvo (por exemplo, Claudina18.2 humana ou Claudina18.2 de camundongo). Receptor de antígeno quimérico
[00456] Também está apresentado neste documento os CARs contendo um scFv de anti-Claudina18.2. Os CARs podem conter um peptídeo sinal no N-terminal do domínio de ligação a antígeno extracelular, que é direcionado ao receptor nascente no retículo endoplasmático, e um peptídeo de dobradiça no N-terminal do domínio de ligação ao antígeno extracelular que faz com que o receptor se torne mais disponível para ligação.
[00457] Os CARs preferencialmente consistem em um domínio de sinalização intracelular primário e um ou mais domínios de sinalização co- estimulatórios. O domínio de sinalização intracelular primário mais utilizado e mais eficaz é o domínio citoplasmático CD3-zeta, que contém ITAMs, cuja fosforilação resulta na ativação de células T. O domínio de sinalização co- estimulatório pode ser derivado de proteínas co-estimulatórias, como CD28,
193 / 309 CD137 e OX40.
[00458] Em algumas modalidades, é fornecido um CAR direcionado à Claudina18.2 (também aqui referido como "Claudina18.2 CAR") incluindo um polipeptídeo que consiste em: (a) um domínio de ligação a antígeno extracelular incluindo um scFc de anti-Claudina18.2; (b) um domínio transmembranar e (c) um domínio de sinalização intracelular. Em algumas modalidades, o scFv de anti-Claudina18.2 é quimérico, humano ou humanizado.
[00459] Em algumas modalidades, é fornecido uma Claudina18.2 CAR consistindo em: (a) um domínio de ligação ao antígeno extracelular incluindo um scFv anti-Claudina18.2; (b) um domínio transmembranar e (c) um domínio de sinalização intracelular, em que o scFv anti-Claudina18.2 compreende uma região variável de cadeia pesada tendo VH CDR1, CDR2 e CDR3 e uma região variável de cadeia leve tendo VL CDR1, CDR2 e CDR3, as VH CDR1, CDR2, CDR3 e VL CDR1, CDR2, CDR3 incluem quaisquer das seguintes sequências de aminoácidos: (1) SEQ ID NOs: 69, 89, 117, 136, 143 e 150, respectivamente; (2) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 151, respectivamente; (3) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 151, respectivamente; (4) SEQ ID NOs: 70, 90, 117, 136, 143 e 152, respectivamente; (5) SEQ ID NOs: 69, 91, 117, 137, 143 e 153, respectivamente; (6) SEQ ID NOs: 71, 92, 117, 136, 143 e 154, respectivamente; (7) SEQ ID NOs: 71, 92, 117, 136, 143 e 154, respectivamente; (8) SEQ ID NOs: 72, 93, 117, 136, 143 e 155, respectivamente; (9) SEQ ID NOs: 69, 94, 118, 136, 143 e 156, respectivamente; (10) SEQ ID NOs: 73, 95, 117, 137, 143 e 157, respectivamente; (11) SEQ ID NOs: 74, 96, 119, 136, 144 e 158, respectivamente; (12) SEQ ID NOs: 74, 96, 119, 136, 144 e 158, respectivamente; (13) SEQ ID NOs: 70, 97, 120, 138, 145 e 159, respectivamente; (14) SEQ ID NOs: 70, 98, 120, 136, 145 e 160,
194 / 309 respectivamente; (15) SEQ ID NOs: 75, 99, 120, 139, 146 e 160, respectivamente; (16) SEQ ID NOs: 75, 100, 120, 139, 146 e 160, respectivamente; (17) SEQ ID NOs: 70, 90, 121, 137, 145 e 160, respectivamente; (18) SEQ ID NOs: 76, 101, 122, 140, 147 e 160, respectivamente; (19) SEQ ID NOs: 76, 101, 123, 136, 147 e 160, respectivamente; (20) SEQ ID NOs: 70, 201, 120, 137, 145 e 160, respectivamente; (21) SEQ ID NOs: 70, 202, 120, 136, 145 e 160, respectivamente; (22) SEQ ID NOs: 77, 102, 124, 141, 148 e 161, respectivamente; (23) SEQ ID NOs: 78, 103, 125, 136, 143 e 162, respectivamente; (24) SEQ ID NOs: 79, 104, 126, 136, 149 e 163, respectivamente; (25) SEQ ID NOs: 78, 105, 127, 142, 143 e 164, respectivamente; (26) SEQ ID NOs: 80, 106, 128, 136, 143 e 165, respectivamente; (27) SEQ ID NOs: 81, 107, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (28) SEQ ID NOs: 82, 108, 130, 136, 143 e 167, respectivamente; (29) SEQ ID NOs: 80, 109, 130, 141, 143 e 168, respectivamente; (30) SEQ ID NOs: 83, 110, 130, 136, 143 e 169, respectivamente; (31) SEQ ID NOs: 80, 109, 131, 141, 143 e 170, respectivamente; (32) SEQ ID NOs: 80, 111, 132, 136, 143 e 160, respectivamente; (33) SEQ ID NOs: 84, 112, 132, 136, 143 e 171, respectivamente; (34) SEQ ID NOs: 85, 113, 133, 136, 143 e 172, respectivamente; (35) SEQ ID NOs: 86, 114, 134, 136, 143 e 172, respectivamente; (36) SEQ ID NOs: 87, 115, 131, 136, 143 e 167, respectivamente; (37) SEQ ID NOs: 88, 116, 135, 136, 143 e 173, respectivamente; (38) SEQ ID NOs: 203, 211, 225, 233, 241 e 242, respectivamente; (39) SEQ ID NOs: 204, 212, 226, 136, 143 e 243, respectivamente; (40) SEQ ID NOs: 205, 213, 227, 234, 143 e 244, respectivamente; (41) SEQ ID NOs: 206, 214, 131, 235, 143 e 245, respectivamente; (42) SEQ ID NOs: 207, 215, 228, 136, 143 e 163, respectivamente; (43) SEQ ID NOs: 208, 216, 229, 236, 143 e 246,
195 / 309 respectivamente; (44) SEQ ID NOs: 69, 90, 230, 237, 143 e 151, respectivamente; (45) SEQ ID NOs: 69, 217, 117, 137, 143 e 247, respectivamente; (46) SEQ ID NOs: 209, 218, 231, 136, 143 e 248, respectivamente; (47) SEQ ID NOs: 72, 219, 117, 238, 143 e 157, respectivamente; (48) SEQ ID NOs: 75, 220, 120, 137, 145 e 160, respectivamente; (49) SEQ ID NOs: 69, 221, 117, 136, 143 e 150, respectivamente; (50) SEQ ID NOs: 72, 222, 118, 136, 143 e 151, respectivamente; (51) SEQ ID NOs: 69, 223, 118, 239, 143 e 249, respectivamente; (52) SEQ ID NOs: 210, 224, 232, 240, 143 e 245, respectivamente; (53) SEQ ID NOs: 72, 217, 118, 136, 143 e 250, respectivamente; (54) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 153, respectivamente; (55) SEQ ID NOs:74, 96, 130, 136, 144 e 158, respectivamente; (56) SEQ ID NOs: 69, 202, 118, 136, 143 e 455, respectivamente; (57) SEQ ID NOs: 72, 90, 117, 137, 143 e 153, respectivamente; (58) SEQ ID NOs: 69, 390, 118, 136, 143 e 249, respectivamente; (59) SEQ ID NOs: 209, 103, 125, 136, 143 e 162, respectivamente; (60) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 136, 143 e 162, respectivamente; (61) SEQ ID NOs: 80, 109, 131, 141, 143 e 167, respectivamente; (62) SEQ ID NOs: 81, 107, 129, 141, 143 e 166, respectivamente; (63) SEQ ID NOs: 85, 113, 133, 136, 143 e 172, respectivamente; (64) SEQ ID NOs: 392, 393, 394, 136, 143 e 163, respectivamente; (65) SEQ ID NOs: 392, 395, 396, 136, 143 e 163, respectivamente; (66) SEQ ID NOs: 397, 398, 399, 456, 457 e 250, respectivamente; (67) SEQ ID NOs: 75, 400, 120, 458, 146 e 160, respectivamente; (68) SEQ ID NOs: 70, 401, 120, 136, 145 e 160, respectivamente; (69) SEQ ID NOs: 402, 403, 404, 240, 143 e 244, respectivamente; (70) SEQ ID NOs: 69, 219, 117, 137, 143 e 157, respectivamente; (71) SEQ ID NOs: 71, 405, 117, 136, 143 e 459, respectivamente; (72) SEQ ID NOs: 406, 407, 408, 460, 461 e 462,
196 / 309 respectivamente; (73) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 463 e 464, respectivamente; (74) SEQ ID NOs: 409, 410, 411, 465, 466 e 162, respectivamente; (75) SEQ ID NOs: 69, 219, 416, 137, 143 e 157, respectivamente; (76) SEQ ID NOs: 76, 412, 411, 140, 147 e 160, respectivamente; (77) SEQ ID NOs: 413, 414, 415, 136, 143 e 467, respectivamente; (78) SEQ ID NOs: 417, 418, 232, 136, 143 e 244, respectivamente; (79) SEQ ID NOs: 69, 419, 420, 136, 143 e 468, respectivamente; (80) SEQ ID NOs: 205, 421, 422, 136, 143 e 469, respectivamente; (81) SEQ ID NOs: 205, 423, 424, 136, 143 e 154, respectivamente; (82) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 240, 143 e 166, respectivamente; (83) SEQ ID NOs: 88, 425, 135, 136, 143 e 470, respectivamente; (84) SEQ ID NOs: 81, 426, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (85) SEQ ID NOs: 80, 109, 130, 136, 143 e 471, respectivamente; (86) SEQ ID NOs: 427, 428, 429, 472, 473 e 474, respectivamente; (87) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (88) SEQ ID NOs: 430, 391, 431, 476, 143 e 166, respectivamente; (89) SEQ ID NOs: 80, 109, 129, 136, 143 e 477, respectivamente; (90) SEQ ID NOs: 80, 391, 129, 478, 143 e 166, respectivamente; (91) SEQ ID NOs: 81, 432, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (92) SEQ ID NOs: 433, 391, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (93) SEQ ID NOs: 80, 109, 129, 479, 143 e 163, respectivamente; (94) SEQ ID NOs: 434, 435, 129, 240, 143 e 166, respectivamente; (95) SEQ ID NOs: 436, 428, 429, 472, 473 e 474, respectivamente; (96) SEQ ID NOs: 80, 437, 129, 479, 143 e 163, respectivamente; (97) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 478, 143 e 166, respectivamente; (98) SEQ ID NOs: 81, 438, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (99) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 480, 143 e 481, respectivamente; (100) SEQ ID NOs: 80, 439, 441, 482, 143 e 483, respectivamente; (101) SEQ ID NOs: 433, 391, 431, 475, 143 e 166,
197 / 309 respectivamente; (102) SEQ ID NOs: 80, 442, 443, 136, 143 e 160, respectivamente; (103) SEQ ID NOs: 80, 440, 441, 482, 143 e 484, respectivamente; (104) SEQ ID NOs: 444, 445, 446, 485, 486 e 487, respectivamente; (105) SEQ ID NOs: 447, 448, 449, 488, 489 e 490, respectivamente; (106) SEQ ID NOs: 450, 451, 452, 491, 492 e 493, respectivamente; (107) SEQ ID NOs: 81, 453, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; ou (108) SEQ ID NOs: 69, 89, 454, 136, 143 e 494, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs. Em algumas modalidades, o scFv anti- Claudina18.2 é quimérico, humano ou humanizado.
[00460] Em algumas modalidades, é fornecido uma Claudina18.2 CAR consistindo em: (a) um domínio de ligação ao antígeno extracelular incluindo um scFv anti-Claudina18.2; (b) um domínio transmembranar e (c) um domínio de sinalização intracelular, em que o scFv anti-Claudina18.2 compreende uma região variável de cadeia pesada tendo VH CDR1, CDR2 e CDR3 e uma região variável de cadeia leve tendo VL CDR1, CDR2 e CDR3, as VH CDR1, CDR2, CDR3 e as VL CDR1, CDR2, CDR3 incluem quaisquer das seguintes sequências de aminoácidos: (1) SEQ ID NOs: 69, 89, 117, 136, 143 e 150, respectivamente; (2) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 151, respectivamente; (3) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 151, respectivamente; (4) SEQ ID NOs: 70, 90, 117, 136, 143 e 152, respectivamente; (5) SEQ ID NOs: 69, 91, 117, 137, 143 e 153, respectivamente; (6) SEQ ID NOs: 71, 92, 117, 136, 143 e 154, respectivamente; (7) SEQ ID NOs: 71, 92, 117, 136, 143 e 154, respectivamente; (8) SEQ ID NOs: 72, 93, 117, 136, 143 e 155, respectivamente; (9) SEQ ID NOs: 69, 94, 118, 136, 143 e 156, respectivamente; (10) SEQ ID NOs: 73, 95, 117, 137, 143 e 157, respectivamente; (11) SEQ ID NOs: 74, 96, 119, 136, 144 e 158, respectivamente; (12) SEQ ID NOs: 74, 96, 119, 136, 144 e 158,
198 / 309 respectivamente; (13) SEQ ID NOs: 70, 97, 120, 138, 145 e 159, respectivamente; (14) SEQ ID NOs: 70, 98, 120, 136, 145 e 160, respectivamente; (15) SEQ ID NOs: 75, 99, 120, 139, 146 e 160, respectivamente; (16) SEQ ID NOs: 75, 100, 120, 139, 146 e 160, respectivamente; (17) SEQ ID NOs: 70, 90, 121, 137, 145 e 160, respectivamente; (18) SEQ ID NOs: 76, 101, 122, 140, 147 e 160, respectivamente; (19) SEQ ID NOs: 76, 101, 123, 136, 147 e 160, respectivamente; (20) SEQ ID NOs: 70, 201, 120, 137, 145 e 160, respectivamente; (21) SEQ ID NOs: 70, 202, 120, 136, 145 e 160, respectivamente; (22) SEQ ID NOs: 77, 102, 124, 141, 148 e 161, respectivamente; (23) SEQ ID NOs: 78, 103, 125, 136, 143 e 162, respectivamente; (24) SEQ ID NOs: 79, 104, 126, 136, 149 e 163, respectivamente; (25) SEQ ID NOs: 78, 105, 127, 142, 143 e 164, respectivamente; (26) SEQ ID NOs: 80, 106, 128, 136, 143 e 165, respectivamente; (27) SEQ ID NOs: 81, 107, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (28) SEQ ID NOs: 82, 108, 130, 136, 143 e 167, respectivamente; (29) SEQ ID NOs: 80, 109, 130, 141, 143 e 168, respectivamente; (30) SEQ ID NOs: 83, 110, 130, 136, 143 e 169, respectivamente; (31) SEQ ID NOs: 80, 109, 131, 141, 143 e 170, respectivamente; (32) SEQ ID NOs: 80, 111, 132, 136, 143 e 160, respectivamente; (33) SEQ ID NOs: 84, 112, 132, 136, 143 e 171, respectivamente; (34) SEQ ID NOs: 85, 113, 133, 136, 143 e 172, respectivamente; (35) SEQ ID NOs: 86, 114, 134, 136, 143 e 172, respectivamente; (36) SEQ ID NOs: 87, 115, 131, 136, 143 e 167, respectivamente; (37) SEQ ID NOs: 88, 116, 135, 136, 143 e 173, respectivamente; (38) SEQ ID NOs: 203, 211, 225, 233, 241 e 242, respectivamente; (39) SEQ ID NOs: 204, 212, 226, 136, 143 e 243, respectivamente; (40) SEQ ID NOs: 205, 213, 227, 234, 143 e 244, respectivamente; (41) SEQ ID NOs: 206, 214, 131, 235, 143 e 245,
199 / 309 respectivamente; (42) SEQ ID NOs: 207, 215, 228, 136, 143 e 163, respectivamente; (43) SEQ ID NOs: 208, 216, 229, 236, 143 e 246, respectivamente; (44) SEQ ID NOs: 69, 90, 230, 237, 143 e 151, respectivamente; (45) SEQ ID NOs: 69, 217, 117, 137, 143 e 247, respectivamente; (46) SEQ ID NOs: 209, 218, 231, 136, 143 e 248, respectivamente; (47) SEQ ID NOs: 72, 219, 117, 238, 143 e 157, respectivamente; (48) SEQ ID NOs: 75, 220, 120, 137, 145 e 160, respectivamente; (49) SEQ ID NOs: 69, 221, 117, 136, 143 e 150, respectivamente; (50) SEQ ID NOs: 72, 222, 118, 136, 143 e 151, respectivamente; (51) SEQ ID NOs: 69, 223, 118, 239, 143 e 249, respectivamente; (52) SEQ ID NOs: 210, 224, 232, 240, 143 e 245, respectivamente; (53) SEQ ID NOs: 72, 217, 118, 136, 143 e 250, respectivamente; (54) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 143 e 153, respectivamente； (55) SEQ ID NOs:74, 96, 130, 136, 144 e 158, respectivamente; (56) SEQ ID NOs: 69, 202, 118, 136, 143 e 455, respectivamente; (57) SEQ ID NOs: 72, 90, 117, 137, 143 e 153, respectivamente; (58) SEQ ID NOs: 69, 390, 118, 136, 143 e 249, respectivamente; (59) SEQ ID NOs: 209, 103, 125, 136, 143 e 162, respectivamente; (60) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 136, 143 e 162, respectivamente; (61) SEQ ID NOs: 80, 109, 131, 141, 143 e 167, respectivamente; (62) SEQ ID NOs: 81, 107, 129, 141, 143 e 166, respectivamente; (63) SEQ ID NOs: 85, 113, 133, 136, 143 e 172, respectivamente; (64) SEQ ID NOs: 392, 393, 394, 136, 143 e 163, respectivamente; (65) SEQ ID NOs: 392, 395, 396, 136, 143 e 163, respectivamente; (66) SEQ ID NOs: 397, 398, 399, 456, 457 e 250, respectivamente; (67) SEQ ID NOs: 75, 400, 120, 458, 146 e 160, respectivamente; (68) SEQ ID NOs: 70, 401, 120, 136, 145 e 160, respectivamente; (69) SEQ ID NOs: 402, 403, 404, 240, 143 e 244, respectivamente; (70) SEQ ID NOs: 69, 219, 117, 137, 143 e 157,
200 / 309 respectivamente; (71) SEQ ID NOs: 71, 405, 117, 136, 143 e 459, respectivamente; (72) SEQ ID NOs: 406, 407, 408, 460, 461 e 462, respectivamente; (73) SEQ ID NOs: 69, 90, 117, 137, 463 e 464, respectivamente; (74) SEQ ID NOs: 409, 410, 411, 465, 466 e 162, respectivamente; (75) SEQ ID NOs: 69, 219, 416, 137, 143 e 157, respectivamente; (76) SEQ ID NOs: 76, 412, 411, 140, 147 e 160, respectivamente; (77) SEQ ID NOs: 413, 414, 415, 136, 143 e 467, respectivamente; (78) SEQ ID NOs: 417, 418, 232, 136, 143 e 244, respectivamente; (79) SEQ ID NOs: 69, 419, 420, 136, 143 e 468, respectivamente; (80) SEQ ID NOs: 205, 421, 422, 136, 143 e 469, respectivamente; (81) SEQ ID NOs: 205, 423, 424, 136, 143 e 154, respectivamente; (82) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 240, 143 e 166, respectivamente; (83) SEQ ID NOs: 88, 425, 135, 136, 143 e 470, respectivamente; (84) SEQ ID NOs: 81, 426, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (85) SEQ ID NOs: 80, 109, 130, 136, 143 e 471, respectivamente; (86) SEQ ID NOs: 427, 428, 429, 472, 473 e 474, respectivamente; (87) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (88) SEQ ID NOs: 430, 391, 431, 476, 143 e 166, respectivamente; (89) SEQ ID NOs: 80, 109, 129, 136, 143 e 477, respectivamente; (90) SEQ ID NOs: 80, 391, 129, 478, 143 e 166, respectivamente; (91) SEQ ID NOs: 81, 432, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (92) SEQ ID NOs: 433, 391, 129, 475, 143 e 166, respectivamente; (93) SEQ ID NOs: 80, 109, 129, 479, 143 e 163, respectivamente; (94) SEQ ID NOs: 434, 435, 129, 240, 143 e 166, respectivamente; (95) SEQ ID NOs: 436, 428, 429, 472, 473 e 474, respectivamente; (96) SEQ ID NOs: 80, 437, 129, 479, 143 e 163, respectivamente; (97) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 478, 143 e 166, respectivamente; (98) SEQ ID NOs: 81, 438, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; (99) SEQ ID NOs: 81, 391, 129, 480, 143 e 481,
201 / 309 respectivamente; (100) SEQ ID NOs: 80, 439, 441, 482, 143 e 483, respectivamente; (101) SEQ ID NOs: 433, 391, 431, 475, 143 e 166, respectivamente; (102) SEQ ID NOs: 80, 442, 443, 136, 143 e 160, respectivamente; (103) SEQ ID NOs: 80, 440, 441, 482, 143 e 484, respectivamente; (104) SEQ ID NOs: 444, 445, 446, 485, 486 e 487, respectivamente; (105) SEQ ID NOs: 447, 448, 449, 488, 489 e 490, respectivamente; (106) SEQ ID NOs: 450, 451, 452, 491, 492 e 493, respectivamente; (107) SEQ ID NOs: 81, 453, 129, 136, 143 e 166, respectivamente; ou (108) SEQ ID NOs: 69, 89, 454, 136, 143 e 494, respectivamente. Em algumas modalidades, o scFv de anti-Claudina18.2 é quimérico, humano ou humanizado.
[00461] Em algumas modalidades, é fornecido uma Claudina18.2 CAR consistindo em: (a) um domínio de ligação ao antígeno extracelular incluindo um scFv anti-Claudina18.2; (b) um domínio transmembranar e (c) um domínio de sinalização intracelular, em que o scFv anti-Claudina18.2 compreende uma região variável de cadeia pesada VH e uma região variável de cadeia leve VL. As VH e VL incluem as sequências de aminoácidos definidas nos: (1) SEQ ID NOs: 1 e 2, respectivamente; (2) SEQ ID NOs: 3 e 4, respectivamente; (3) SEQ ID NOs: 5 e 6, respectivamente; (4) SEQ ID NOs: 7 e 8, respectivamente; (5) SEQ ID NOs: 9 e 10, respectivamente; (6) SEQ ID NOs: 11 e 12, respectivamente; (7) SEQ ID NOs: 13 e 14, respectivamente; (8) SEQ ID NOs: 15 e 16, respectivamente; (9) SEQ ID NOs: 17 e 18, respectivamente; (10) SEQ ID NOs: 19 e 20, respectivamente; (11) SEQ ID NOs: 21 e 22, respectivamente; (12) SEQ ID NOs: 23 e 24, respectivamente; (13) SEQ ID NOs: 25 e 26, respectivamente; (14) SEQ ID NOs: 27 e 28, respectivamente; (15) SEQ ID NOs: 29 e 30, respectivamente; (16) SEQ ID NOs: 31 e 32, respectivamente; (17) SEQ ID NOs: 33 e 34, respectivamente; (18) SEQ ID NOs: 35 e 36, respectivamente; (19) SEQ ID NOs: 37 e 38, respectivamente; (20) SEQ ID NOs: 39 e 40, respectivamente;
202 / 309
(21) SEQ ID NOs: 41 e 42, respectivamente; (22) SEQ ID NOs: 43 e 44, respectivamente; (23) SEQ ID NOs: 45 e 46, respectivamente; (24) SEQ ID NOs: 47 e 48, respectivamente; (25) SEQ ID NOs: 49 e 50, respectivamente; (26) SEQ ID NOs: 51 e 52, respectivamente; (27) SEQ ID NOs: 53 e 54, respectivamente; (28) SEQ ID NOs: 55 e 56, respectivamente; (29) SEQ ID NOs: 57 e 58, respectivamente; (30) SEQ ID NOs: 59 e 60, respectivamente; (31) SEQ ID NOs: 61 e 62, respectivamente; (32) SEQ ID NOs: 63 e 64, respectivamente; (33) SEQ ID NOs: 65 e 66, respectivamente; (34) SEQ ID NOs: 67 e 68, respectivamente; (35) SEQ ID NOs: 251 e 252, respectivamente; (36) SEQ ID NOs: 253 e 254, respectivamente; (37) SEQ ID NOs: 255 e 256, respectivamente; (38) SEQ ID NOs: 257 e 258, respectivamente; (39) SEQ ID NOs: 259 e 260, respectivamente; (40) SEQ ID NOs: 261 e 262, respectivamente; (41) SEQ ID NOs: 263 e 264, respectivamente; (42) SEQ ID NOs: 265 e 266, respectivamente; (43) SEQ ID NOs: 267 e 268, respectivamente; (44) SEQ ID NOs: 269 e 270, respectivamente; (45) SEQ ID NOs: 271 e 272, respectivamente; (46) SEQ ID NOs: 273 e 274, respectivamente; (47) SEQ ID NOs: 275 e 276, respectivamente; (48) SEQ ID NOs: 277 e 278, respectivamente; (49) SEQ ID NOs: 279 e 280, respectivamente; (50) SEQ ID NOs: 281 e 282, respectivamente; (51) SEQ ID NOs: 283 e 284, respectivamente; (52) SEQ ID NOs: 285 e 286, respectivamente; (53) SEQ ID NOs: 287 e 288, respectivamente; (54) SEQ ID NOs: 289 e 290, respectivamente; (55) qualquer um dos SEQ ID NOs: 337-345, e SEQ ID NO.: 346, respectivamente; (56) qualquer um dos SEQ ID NOs: 337-345, e SEQ ID NO.: 347, respectivamente; (57) qualquer um dos SEQ ID NOs: 348-352, e SEQ ID NOs: 353, respectivamente; (58) qualquer um dos SEQ ID NOs: 348- 352, e SEQ ID NOs: 354, respectivamente; (59) qualquer um dos SEQ ID NOs: 355-362 e SEQ ID NO: 363, respectivamente; (60) qualquer um dos SEQ ID NOs: 355-362 e SEQ ID NO: 364, respectivamente; (61) qualquer
203 / 309 um dos SEQ ID NOs: 365-369 e SEQ ID NO: 370, respectivamente; (62) qualquer um dos SEQ ID NOs: 365-369 e SEQ ID NO: 371, respectivamente; (63) qualquer um dos SEQ ID NOs: 372-374 e quaisquer dos SEQ ID NOs: 375-377, respectivamente; (64) qualquer um dos SEQ ID NOs: 378-380 e SEQ ID NO: 381, respectivamente; (65) qualquer um dos SEQ ID NOs: 378- 380 e SEQ ID NO: 382, respectivamente; (66) qualquer um dos SEQ ID NOs: 383-385 e SEQ ID NO: 386, respectivamente; (67) qualquer um dos SEQ ID NOs: 383-385 e SEQ ID NO: 387, respectivamente; (68) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 495 e 496, respectivamente; (69) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 497 e 498, respectivamente; (70) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 499 e 500, respectivamente; (71) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 501 e 502, respectivamente; (72) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 503 e 504, respectivamente; (73) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 505 e 506, respectivamente; (74) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 507 e 508, respectivamente; (75) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 509 e 510, respectivamente; (76) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 511 e 512, respectivamente; (77) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 513 e 514, respectivamente; (78) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 515 e 516, respectivamente; (79) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 517 e 518, respectivamente; (80) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 519 e 520, respectivamente; (81) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 521 e 522, respectivamente; (82) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 523 e 524, respectivamente; (83) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 525 e 526, respectivamente; (84) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 527 e 528, respectivamente; (85) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 529 e 530, respectivamente; (86) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 531 e 532, respectivamente; (87) as sequências de aminoácidos de SEQ
204 / 309
ID NOs: 533 e 534, respectivamente; (88) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 535 e 536, respectivamente; (89) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 537 e 538, respectivamente; (90) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 539 e 540, respectivamente; (91) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 541 e 542, respectivamente; (92) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 543 e 544, respectivamente; (93) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 545 e 546, respectivamente; (94) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 547 e 548, respectivamente; (95) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 549 e 550, respectivamente; (96) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 551 e 552, respectivamente; (97) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 553 e 554, respectivamente; (98) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 555 e 556, respectivamente; (99) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 557 e 558, respectivamente; (100) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 559 e 560, respectivamente; (101) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 561 e 562, respectivamente; (102) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 563 e 564, respectivamente; (103) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 565 e 566, respectivamente; (104) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 567 e 568, respectivamente; (105) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 569 e 570, respectivamente; (106) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 571 e 572, respectivamente; (107) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 573 e 574, respectivamente; (108) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 575 e 576, respectivamente; (109) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 577 e 578, respectivamente; (110) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 579 e 580, respectivamente; (111) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 581 e 582, respectivamente; (112) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 583 e 584, respectivamente; (113) as sequências de aminoácidos de
205 / 309
SEQ ID NOs: 585 e 586, respectivamente; (114) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 587 e 588, respectivamente; (115) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 589 e 590, respectivamente; (116) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 591 e 592, respectivamente; (117) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1593 e 594, respectivamente; (118) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 595 e 596, respectivamente; (119) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 597 e 598, respectivamente; (120) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 599 e 600, respectivamente; (121) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 601 e 602, respectivamente; (122) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 603 e 604, respectivamente; (123) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 605 e 606, respectivamente; (124) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 607 e 608, respectivamente; (125) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 609 e 610, respectivamente; (126) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 611 e 612, respectivamente; (127) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 613 e 614, respectivamente; (128) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 615 e 616, respectivamente; (129) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 617 e 618, respectivamente; (130) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 619 e 620, respectivamente; (131) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 621 e 622, respectivamente; (132) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 623 e 624, respectivamente; (133) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 625 e 626, respectivamente; (134) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 627 e 628, respectivamente; (135) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 629 e 630, respectivamente; (136) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 631 e 632, respectivamente; (137) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 633 e 634, respectivamente; (138) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 635 e
206 / 309 636, respectivamente; (139) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 637 e 638, respectivamente; (140) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 639 e 640, respectivamente; (141) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 641 e 642, respectivamente; (142) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 643 e 644, respectivamente; (143) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 645 e 646, respectivamente; (144) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 647 e 648, respectivamente; (145) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 649 e 650, respectivamente; (155) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 651 e 652, respectivamente; (156) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 653 e 654, respectivamente; (157) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 655 e 656, respectivamente; (158) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 657 e 658, respectivamente; (159) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 659 e 660, respectivamente; (160) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 661 e 662, respectivamente; (167) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 663 e 664, respectivamente; (168) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 665 e 666, respectivamente; (169) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 667 e 668, respectivamente; (170) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 669 e 670, respectivamente; (171) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 671 e 672, respectivamente; (172) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 673 e 674, respectivamente; (173) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 675 e 676, respectivamente; (174) as sequência de aminoácidos dos SEQ ID Nos:677 e 678, respectivamente; (175) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID NOs: 679 e 680, respectivamente. Em algumas modalidades, o scFv anti- Claudina18.2 é quimérico, humano ou humanizado.
[00462] Em algumas modalidades, é fornecido uma Claudina18.2 CAR consistindo em: (a) um domínio de ligação ao antígeno extracelular incluindo
207 / 309 um scFv anti-Claudina18.2; (b) um domínio transmembranar e (c) um domínio de sinalização intracelular, em que o scFv anti-Claudina18.2 compreende uma região variável de cadeia pesada VH e uma região variável de cadeia leve VL.
As VH e VL incluem as sequências de aminoácidos definidas nos: (1) SEQ ID NOs: 251 e 252, respectivamente; (2) SEQ ID NOs: 253 e 254, respectivamente; (3) SEQ ID NOs: 67 e 68, respectivamente; (4) SEQ ID NOs: 255 e 256, respectivamente; (5) SEQ ID NOs: 257 e 258, respectivamente; (6) SEQ ID NOs: 43 e 44, respectivamente; (7) SEQ ID NOs: 27 e 28, respectivamente; (8) SEQ ID NOs: 13 e 14, respectivamente; (9) SEQ ID NOs: 9 e 10, respectivamente; (10) SEQ ID NOs: 3 e 4, respectivamente; (11) SEQ ID NOs: 35 e 36, respectivamente; (12) SEQ ID NOs: 15 e 16, respectivamente; (13) SEQ ID NOs: 1 e 2, respectivamente; (14) SEQ ID NOs: 17 e 18, respectivamente; (15) SEQ ID NOs: 21 e 22, respectivamente; (16) SEQ ID NOs: 37 e 38, respectivamente; (17) SEQ ID NOs: 41 e 42, respectivamente; (18) SEQ ID NOs: 259 e 260, respectivamente; (19) SEQ ID NOs: 25 e 26, respectivamente; (20) SEQ ID NOs: 31 e 32, respectivamente; (21) SEQ ID NOs: 23 e 24, respectivamente; (22) SEQ ID NOs: 261 e 262, respectivamente; (23) SEQ ID NOs: 263 e 264, respectivamente; (24) SEQ ID NOs: 29 e 30, respectivamente; (25) SEQ ID NOs: 265 e 266, respectivamente; (26) SEQ ID NOs: 267 e 268, respectivamente; (27) SEQ ID NOs: 269 e 270, respectivamente; (28) SEQ ID NOs: 271 e 272, respectivamente; (29) SEQ ID NOs: 273 e 274, respectivamente; (30) SEQ ID NOs: 275 e 276, respectivamente; (31) SEQ ID NOs: 277 e 278, respectivamente; (32) SEQ ID NOs: 279 e 280, respectivamente; (33) SEQ ID NOs: 281 e 282, respectivamente; (34) SEQ ID NOs: 283 e 284, respectivamente; (35) SEQ ID NOs: 285 e 286, respectivamente; (36) SEQ ID NOs: 287 e 288, respectivamente; ou (37) SEQ ID NOs: 289 e 290, respectivamente.
Em algumas modalidades, o scFv anti- Claudina18.2 é quimérico, humano ou humanizado.
208 / 309
[00463] Em algumas modalidades, o scFV anti-Claudina18.2 inclui uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve conectadas por um ligante. O ligante pode ser um peptídeo de ligante curto de cerca de 10 a 25 aminoácidos, rico em glicina, serina ou teonina, como o que inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO: 297. O ligante pode ser conectado ao N-terminal da região variável de cadeia pesada e ao C-terminal da região variável de cadeia leve, ou vice-versa. Em algumas modalidades, o domínio de ligação a antígeno extracelular pode também incluir, no C- terminal, um domínio de dobradiça. Em algumas modalidades, o domínio de dobradiça é derivado de CD8α. em algumas modalidades, o domínio de dobradiça inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO: 292. Em algumas modalidades, o domínio de ligação a antígeno extracelular pode também incluir, em seu N-terminal, um peptídeo sinal. O peptídeo sinal pode ser derivado de uma molécula selecionada do grupo consistindo em CD8α, receptor GM-CSF α e cadeia leve de IgG1. Em algumas modalidades, o peptídeo sinal é derivado de CD8α. Em algumas modalidades, o peptídeo sinal inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO: 291. Em algumas modalidades, o domínio transmembranar pode ser derivado de uma molécula selecionada do grupo consistindo em CD8α, CD4, CD28, CD137, CD80, CD86, CD152 e PD1. Em algumas modalidades, o domínio transmembranar é derivado de CD8α ou CD28. Em algumas modalidades, o domínio transmembranar inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO: 293. Em algumas modalidades, o domínio de sinalização intracelular pode incluir um domínio de sinalização intracelular primário e um domínio de sinalização co-estimulatório. O domínio de sinalização intracelular primário pode ser um domínio contendo motivo de ativação com base em tirosina do imunorreceptor (ITAM [immunoreceptor tyrosine-based activation motif]). Em algumas modalidades, o domínio de sinalização intracelular primário é derivado de CD3ζ. Em algumas modalidades, o domínio de sinalização
209 / 309 intracelular primário inclui uma sequência de aminoácidos do SEQ ID NO:296. Em algumas modalidades, o domínio de sinalização co-estimulatório é derivado de uma molécula co-estimulatória selecionada do grupo consistindo em CD27, CD28, CD137, OX40, CD30, CD40, CD3, LFA-1, ICOS, CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, Ligandos de CD83 e suas combinações. Em algumas modalidades, o domínio de sinalização co- estimulatória inclui um domínio citoplasmático de CD28 e/ou um domínio citoplasmático de CD137. Em algumas modalidades, o domínio citoplasmático de CD28 e o domínio citoplasmático de CD137 pode incluir sequências de aminoácidos de SEQ ID NO: 294 e SEQ ID NO: 295, respectivamente.
[00464] Em algumas modalidades, é fornecida uma Claudina18.2 CAR compreendendo: do N-terminal ao C-terminal, um peptídeo sinal de SEQ ID NO: 291, uma região variável de cadeia leve e uma região variável de cadeia pesada descritas acima para scFv anti-Claudina18.2 conectado a um ligante de SEQ ID NO: 297, um ligante de SEQ ID NO: 298, uma dobradiça de SEQ ID NO: 292, um domínio citoplasmático de CD137 de SEQ ID NO: 294, e um domínio citoplasmático de CD3-zeta de SEQ ID NO: 296.
[00465] Em algumas modalidades, é fornecido o CAR de Claudina18.2 incluindo um polipeptídeo tendo pelo menos cerca de 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% e 99% de identidade da sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nos SEQ ID NOs: 299-335. Em algumas modalidades, é fornecido um CAR de Claudina18.2 incluindo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo tendo os SEQ ID NOs: 299-335.
[00466] Os números de ID de sequência de aminoácidos de CAR e o scFv correspondente nela contido estão resumidos abaixo na Tabela 3.
210 / 309 Tabela 3. Números de ID da sequência de aminoácidos do CAR e scFv correspondente
CAR SCFV ID DO CLONE DO CÓDIGO REGIÃO VARIÁVEL DE REGIÃO VARIÁVEL ANTICORPO PARA
CAR CADEIA PESADA DE CADEIA LEVE HV/LV C182001 SEQ ID NO: 299 SEQ ID NO: 251 SEQ ID NO: 252 28C5B1 C182002 SEQ ID NO: 300 SEQ ID NO: 253 SEQ ID NO: 254 35E8D2 C182003 SEQ ID NO: 301 SEQ ID NO: 67 SEQ ID NO: 68 59B6C4 C182004 SEQ ID NO: 302 SEQ ID NO: 255 SEQ ID NO: 256 61H12G10 C182005 SEQ ID NO: 303 SEQ ID NO: 257 SEQ ID NO: 258 69D5C1 C182006 SEQ ID NO: 304 SEQ ID NO: 43 SEQ ID NO: 44 201F4H6 C182007 SEQ ID NO: 305 SEQ ID NO: 27 SEQ ID NO: 28 207F8G5 C182008 SEQ ID NO: 306 SEQ ID NO: 13 SEQ ID NO: 14 232C5E3 C182009 SEQ ID NO: 307 SEQ ID NO: 9 SEQ ID NO: 10 250F4G4 C182010 SEQ ID NO: 308 SEQ ID NO: 3 SEQ ID NO: 4 252F1B10 C182011 SEQ ID NO: 309 SEQ ID NO: 35 SEQ ID NO: 36 253E4F7 C182012 SEQ ID NO: 310 SEQ ID NO: 15 SEQ ID NO: 16 252E7C9 C182013 SEQ ID NO: 311 SEQ ID NO: 1 SEQ ID NO: 2 260G9E8 C182014 SEQ ID NO: 312 SEQ ID NO: 17 SEQ ID NO: 18 257G7B9 C182015 SEQ ID NO: 313 SEQ ID NO: 21 SEQ ID NO: 22 273C10E5 C182016 SEQ ID NO: 314 SEQ ID NO: 37 SEQ ID NO: 38 370E2B12C3 C182017 SEQ ID NO: 315 SEQ ID NO: 41 SEQ ID NO: 42 203A6C9 C182018 SEQ ID NO: 316 SEQ ID NO: 259 SEQ ID NO: 260 181C7B2 C182019 SEQ ID NO: 317 SEQ ID NO: 25 SEQ ID NO: 26 194D3B2 C182020 SEQ ID NO: 318 SEQ ID NO: 31 SEQ ID NO: 32 182D10F1 C182021 SEQ ID NO: 319 SEQ ID NO: 23 SEQ ID NO: 24 185F2G12 C182022 SEQ ID NO: 320 SEQ ID NO: 261 SEQ ID NO: 262 196A12B10 C182023 SEQ ID NO: 321 SEQ ID NO: 263 SEQ ID NO: 264 198F10B8 C182024 SEQ ID NO: 322 SEQ ID NO: 29 SEQ ID NO: 30 222B6G5 C182025 SEQ ID NO: 323 SEQ ID NO: 265 SEQ ID NO: 266 213B10A4 C182026 SEQ ID NO: 324 SEQ ID NO: 267 SEQ ID NO: 268 232D7C8 C182027 SEQ ID NO: 325 SEQ ID NO: 269 SEQ ID NO: 270 233D5E5 C182028 SEQ ID NO: 326 SEQ ID NO: 271 SEQ ID NO: 272 232F1E4 C182029 SEQ ID NO: 327 SEQ ID NO: 273 SEQ ID NO: 274 231H4G11 C182030 SEQ ID NO: 328 SEQ ID NO: 275 SEQ ID NO: 276 226A4B5 C182031 SEQ ID NO: 329 SEQ ID NO: 277 SEQ ID NO: 278 235A10C9 C182032 SEQ ID NO: 330 SEQ ID NO: 279 SEQ ID NO: 280 239H12G9 C182033 SEQ ID NO: 331 SEQ ID NO: 281 SEQ ID NO: 282 240F8G2 C182034 SEQ ID NO: 332 SEQ ID NO: 283 SEQ ID NO: 284 248E6A7 C182035 SEQ ID NO: 333 SEQ ID NO: 285 SEQ ID NO: 286 254A8D5 C182036 SEQ ID NO: 334 SEQ ID NO: 287 SEQ ID NO: 288 259C6F4 C182037 SEQ ID NO: 335 SEQ ID NO: 289 SEQ ID NO: 290 280F3B6
[00467] Em algumas modalidades, é fornecido um CAR de Claudina18.2 consistindo em: (a) um domínio de ligação a antígeno extracelular compreendendo uma pluralidade (como pelo menos cerca de qualquer um de 2, 3, 4 ou mais) de uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, um scFv anti-Claudina18.2); (b) um domínio transmembranar e (c) um domínio de sinalização intracelular. Quaisquer dos scFvs anti- Claudina18.2 podem ser usados para construir o CAR de Claudina18.2 multivalente.
[00468] Os CARs podem também adicionar fatores que intensificam a
211 / 309 expansão, persistência e atividade anti-tumoral da célula T, como as citocinas e ligandos co-estimulatórios.
[00469] Também são fornecidas células imunológicas manipuladas, consistindo em quaisquer dos CARs ora fornecidos. Em algumas modalidades, a célula imunológica é uma célula T, uma célula NK, uma célula mononuclear de sangue periférico (PBMC), uma célula-tronco hematopoiética, uma célula-tronco pluripotente ou uma célula-tronco embrionária. Em algumas modalidades, a célula imunológica é uma célula T, como uma célula T citotóxica, uma célula T auxiliar, uma célula T assassina natural ou uma célula T γδT. Em algumas modalidades, a célula imunológica manipulada é autóloga. Em algumas modalidades, a célula imunológica manipulada é alogênica. Em algumas modalidades, as células imunológicas manipulada são células CAR-T.
[00470] Em algumas modalidades, é fornecido neste documento um ácido nucleico isolado que codifica qualquer CAR de Claudina18.2. Em algumas modalidades, a presente solicitação fornece vetores para clonar e expressar quaisquer dos CARs de Claudina18.2 descritos neste documento. Em algumas modalidades, o vetor é adequado para replicação e integração em células eucarióticas, como células de mamíferos. Em algumas modalidades, o vetor é um vetor viral. Exemplos de vetores virais incluem, entre outros, vetores adenovirais, adeno-associados, vetor lentiviral, retrovirais, vetor vaccinia, vetor viral de herpes simplex e seus derivados. A tecnologia de vetor viral é bem conhecida na técnica e está descrita, por exemplo, em Sambrook et al. (2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York), e em outros manuais de virologia e biologia molecular. Vários sistemas com base viral foram desenvolvidos para transferência de genes para células de mamíferos. Por exemplo, os retrovírus proporcionam uma plataforma conveniente para sistemas de liberação de genes. O ácido nucleico heterólogo pode ser inserido em um vetor e
212 / 309 empacotado em partículas retrovirais usando-se técnicas conhecidas na técnica.
O vírus recombinante pode, então, ser isolado e transferido para célula de mamífero manipulada in vitro ou ex vivo.
Vários sistemas retrovirais são conhecidos na técnica.
Em algumas modalidades, são usados vetores adenovirais.
Vários vetores adenovirais são conhecidos na técnica.
Em algumas modalidades, são usados vetores lentivirais.
Em algumas modalidades, são usados vetores lentivirais auto-inativadores.
Por exemplo, os vetores lentivirais auto-inativadores, que transportam receptores quiméricos, podem ser empacotados com protocolos conhecidos na técnica.
Os vetores lentivirais resultantes podem ser usados para transduzir uma célula de mamífero (como células T primárias humanas), usando métodos conhecidos na técnica.
Os vetores derivados de retrovírus, como lentivírus, são ferramentas adequadas para se alcançar a transferência de genes de longo prazo, porque permitem a integração estável de longo prazo de um transgene e sua propagação em células descendentes. . Os vetores lentivirais também têm baixa imunogenicidade e podem transduzir células não proliferativas.
Em algumas modalidades, o vetor é um vetor não viral.
Em algumas modalidades, o vetor é um transposon, como um sistema transposon Sleeping Beauty (SB) ou um sistema transposon PiggyBac.
Em algumas modalidades, o vetor é um vetor não viral à base de polímero, incluindo, por exemplo, poli(ácido lático- co-glicólico) (PLGA) e ácido poli-láctico (PLA), poli(etileno imina) (PEI) e dendrímeros.
Em algumas modalidades, o vetor é um vetor não viral com base em lipídio catiônico, como o lipossoma catiônico, a neuroemulsão de lipídio e nanopartícula de lipídio sólido (SLN [solid lipid nanoparticle]). Em algumas modalidades, o vetor é um vetor não viral com base em peptídeo, como a poli- L-lisina.
Qualquer um dos vetores não virais conhecidos e adequados para edição de genoma pode ser usado para introduzir os ácidos nucleicos que codificam o receptor quimérico nas células imunológicas manipuladas.
Ver, por exemplo, Yin H. et al.
Nature Rev.
Genetics (2014) 15:521-555;
213 / 309 Aronovich EL et al. “The Sleeping Beauty transposon system: a non-viral vector for gene therapy”. Hum. Mol.Genet. (2011) R1: R14-20; e Zhao S. et al. “PiggyBac transposon vectors: the tools of the human gene editing.” Transl. Lung Cancer Res. (2016) 5(1): 120-125, que estão incorporados neste documento por referência. Em algumas modalidades, quaisquer dos ácidos nucleicos que codificam um receptor quimérico ou sistema de receptor quimérico são introduzidos nas células imunológicas manipuladas por um método físico, incluindo, entre outros, eletroporação, sonoporação, fotoporação, magnetofecção, hidroporação. Composições
[00471] Além disso, estão fornecidos neste documento as composições (por exemplo, composições farmacêuticas), consistindo em uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, um polipeptídeo, anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno) ora descrita, um CAR contendo um scFv anti-Claudina18.2 ora descrito ou uma célula imunológica manipulada tendo o CAR descrito neste documento. Em algumas modalidades, são fornecidas neste documento composições farmacêuticas que incluem a porção de ligação à Claudina18.2 ora descrita, um CAR contendo um scFv anti-Claudina18.2 aqui descrito ou uma célula imunológica manipulada tendo o CAR aqui descrito e um carreador ou veículo farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, as composições farmacêuticas são úteis na imunoterapia. Em algumas modalidades, as composições farmacêuticas são úteis na imuno- oncologia. Em algumas modalidades, as composições são úteis na inibição do crescimento tumoral. Em algumas modalidades, as composições farmacêuticas são úteis na inibição do crescimento tumoral em um indivíduo (por exemplo, um paciente humano). Em algumas modalidades, as composições são úteis para o tratamento do câncer. Em algumas modalidades, as composições farmacêuticas são úteis para tratar o câncer de um indivíduo (por exemplo, um paciente humano).
214 / 309
[00472] Em alguns aspectos, é fornecida, neste documento, uma formulação farmacêutica que inclui uma porção de ligação à Claudina18.2, um CAR contendo um scFv anti-Claudina18.2 ou uma célula imunológica manipulada tendo o CAR, em que a formulação é adequada para administração local. Em alguns aspectos, a administração local consiste em injeção intratumoral, injeção peritumoral, injeção justatumoral, injeção intralesional e/ou injeção em um linfonodo de drenagem do tumor ou essencialmente qualquer injeção direcionada ao tumor onde se espera que o agente antitumoral vaze para os linfonodos primários adjacentes ao tumor sólido direcionado.
[00473] As formulações são preparadas para armazenamento e uso, combinando-se uma porção de ligação à Claudina18.2 purificada, um CAR contendo um scFv anti-Claudina18.2 ou uma célula imunológica manipulada tendo o CAR da presente divulgação com um veículo farmaceuticamente aceitável (por exemplo, um carreador ou excipiente). Os versados na técnica geralmente consideram os carreadores, excipientes e/ou estabilizadores farmaceuticamente aceitáveis como ingredientes inativados de uma formulação ou composição farmacêutica (Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd Edition, 2012, Pharmaceutical Press, London.). Métodos e usos
[00474] A presente divulgação também fornece métodos de uso das porções de ligação à Claudina18.2, o CAR contendo um scFv anti- Claudina18.2, aqui descrito, a célula imunológica manipulada tendo o CAR, polinucleotídeos que codificam tais porções de ligação à Claudina18.2 ou CARs, vetores de expressão recombinantes compreendendo os tais polinucleotídeos, porções de ligação à Claudina18.2 ou células que expressam CARs ou composições farmacêuticas tendo tais células divulgadas neste documento no tratamento de câncer ou tumor que expressa Claudina18.2. Sem limitar-se pela teoria, as porções de ligação à Claudina18.2, aqui
215 / 309 divulgadas (por exemplo, anticorpo), os CARs ou as células imunológicas manipuladas podem ser direcionadas especificamente às células cancerosas que expressam Claudina18.2 in vivo, exercendo assim seu efeito terapêutico de eliminação, lise e/ou destruindo células cancerosas.
[00475] Em algumas modalidades, é fornecido neste documento um método de tratamento de um tumor ou câncer que expressa Claudina18.2 em um indivíduo necessitando do mesmo, incluindo a administração ao indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma porção de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, anticorpo), um CAR contendo um scFv anti- Claudina18.2, aqui descrito, ou uma célula imunológica manipulada tendo o CAR, ou composição farmacêutica divulgada neste documento. Em algumas modalidades, os cânceres ou tumores que expressam Claudina18.2, e que podem ser tratados, são tumores sólidos. Como um exemplo não limitante, em algumas modalidades, o câncer ou tumor expressando Claudina18.2 pode ser gástrico, esofágico, gastro-esofágico, hepático, pulmonar, colorretal, endometrial, de mama, pancreático, testicular, cervical, ovariano ou glioma.
[00476] Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode ser um câncer ou tumor gástrico. Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode ser um adenocarcinoma gástrico primário. Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode ser um câncer ou tumor esofágico. Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode ser um câncer ou tumor gastro-esofágico. Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode ser qualquer câncer ou tumor em que houver expressão de Claudina18.2. Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode ser qualquer câncer ou tumor em que houver ativação ectópica de Claudina18.2 (por exemplo, tumores pancreáticos, esofágicos, ovarianos e pulmonares). Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode ser um câncer ou tumor
216 / 309 primário (por exemplo, tumor gástrico). Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode ser metástase de um câncer ou tumor primário. Como um exemplo não limitante, em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode estar localizado em metástases de linfonodo de adenocarcinomas de câncer gástrico ou em metástases distantes. Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 pode estar no ovário (por exemplo, tumores Krukenberg). Em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 está correlacionado com um subtipo histológico. Como exemplos não limitantes, em algumas modalidades, o câncer ou tumor que expressa Claudina18.2 é um adenocarcinoma (mas não câncer de células escamosas) do esôfago, um câncer de ovário mucinoso (mas não seroso) ou um adenocarcinoma ductal pancreático (mas não câncer de ilhota pancreática).
[00477] Em algumas modalidades, os métodos divulgados neste documento podem diminuir o número de células tumorais positivas para Claudina18.2. Em algumas modalidades, os métodos divulgados neste documento podem diminuir a carga tumoral no indivíduo. Em algumas modalidades, uma porção de ligação à Claudin18.2, divulgada neste documento, pode ser usada para aproveitar os mecanismos de defesa naturais do indivíduo, incluindo CDC e ADCC para eliminar células malignas ou cancerosas.
[00478] Os métodos para monitorar a resposta do paciente quanto à administração de uma composição farmacêutica, divulgada neste documento, são conhecidos na técnica e podem ser empregados de acordo com os métodos divulgados neste documento. Em algumas modalidades, os métodos conhecidos na técnica podem ser empregados para monitorar o paciente quanto à resposta à administração de uma composição farmacêutica ora divulgada. Em algumas modalidades, os métodos conhecidos na técnica
217 / 309 podem ser utilizados para monitorar o tamanho das lesões e/ou tamanho dos linfonodos.
[00479] Como exemplo não limitante, em algumas modalidades, os exames de TC com intensificação de contraste podem detectar e/ou monitorar as lesões e/ou linfonodos de um paciente. Em algumas modalidades, a administração de uma composição farmacêutica, divulgada neste documento, pode reduzir o tamanho das lesões detectadas por exames de TC no paciente. Em algumas modalidades, a administração de uma composição farmacêutica, divulgada neste documento, pode causar o encolhimento de linfonodos anormais.
[00480] Em certas modalidades, os métodos fornecidos neste documento podem ser usados para tratar câncer ou reduzir a carga tumoral de um indivíduo, quando o câncer ou tumor for um câncer ou tumor expressando Claudina18.2. Em uma modalidade, os métodos fornecidos neste documento são usados para tratar câncer. É entendido que um método para tratar câncer pode incluir qualquer efeito que melhore um sinal ou sintoma associado ao câncer. Tais sinais ou sintomas incluem, entre outros, redução da carga tumoral, incluindo inibição do crescimento de um tumor, desaceleração da taxa de crescimento de um tumor, redução do tamanho de um tumor, redução do número de tumores, eliminação de um tumor, todos os quais podendo ser medidos usando-se técnicas de rotina de imagiologia tumoral bem conhecidas na técnica. Outros sinais e sintomas associados a câncer incluem, entre outros, fadiga, dor, perda de peso e outros sinais ou sintomas associados a vários cânceres. Em um exemplo não limitante, os métodos fornecidos neste documento podem reduzir a carga tumoral. Portanto, a administração de células da invenção pode reduzir o número de células tumorais, reduzir o tamanho do tumor e/ou erradicar o tumor do indivíduo. O tumor pode ser um tumor sólido. Os métodos da invenção podem também proporcionar aumento ou prolongamento de sobrevida de um indivíduo com câncer. Além disso, os
218 / 309 métodos da invenção podem proporcionar um aumento da resposta imunológica no indivíduo contra o câncer.
[00481] Nos métodos da invenção, uma quantidade terapeuticamente eficaz de porções de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, anticorpos), CARs contendo scFvs anti-Claudina18.2 ou células imunológicas manipuladas tendo os CARs descritos neste documento são administradas a um indivíduo que necessita de tratamento contra o câncer. O indivíduo pode ser um mamífero. Em algumas modalidades, o indivíduo pode ser um humano. Uma composição farmacêutica consistindo em porções de ligação à Claudina18.2 (por exemplo, anticorpos), CARs contendo scFvs anti-Claudina18.2 ou células imunológicas manipuladas tendo os CARs descritos neste documento são administradas a um indivíduo para provocar uma resposta anticâncer, com o objetivo de amenizar a condição do indivíduo. Pode ocorrer a eliminação de células cancerígenas ou tumorais em um indivíduo, mas qualquer melhora clínica representa um benefício. A melhora clínica inclui diminuição de risco ou da taxa de progressão ou redução nas consequências patológicas do câncer ou tumor.
[00482] Outro grupo de indivíduos adequados pode ser o de indivíduos que tenham um histórico de câncer, mas responderam a outro modo de terapia. A terapia anterior pode ter incluído, entre outros, ressecção cirúrgica, radioterapia e quimioterapia tradicional. Como resultado, esses indivíduos não têm tumor clinicamente mensurável. No entanto, eles têm suspeita de estar em risco de progressão da doença, com ocorrência tanto perto do local original do tumor quanto por metástase. Esse grupo também pode ser subdividido em indivíduos de alto risco e baixo risco. A subdivisão é feita com base nas características observadas antes ou depois do tratamento inicial. Essas características são conhecidas nas técnicas clínicas e são adequadamente definidas de acordo com os diferentes tipos de câncer. As típicas características dos subgrupos de alto risco são aquelas em que o tumor
219 / 309 possui tecidos vizinhos invadidos ou indivíduos que apresentam envolvimento de linfonodos. Como opção, uma célula da invenção pode ser administrada para tratamento profilático para prevenir a ocorrência de câncer em um indivíduo suspeito de ter uma predisposição para um câncer, por exemplo, com base no histórico familiar e/ou teste genético.
[00483] O indivíduo pode ter uma forma avançada da doença, caso em que o objetivo do tratamento pode incluir mitigação ou reversão da progressão da doença e/ou melhora dos efeitos colaterais. Os indivíduos podem ter histórico da doença, para a qual já foram tratados, caso em que o objetivo terapêutico pode ser diminuir ou retardar o risco de recidiva. Além disso, as malignidades refratárias ou recorrentes podem ser tratadas usando-se as células ou composições farmacêuticas divulgadas neste documento.
[00484] Para tratamento, a quantidade administrada é a quantidade eficaz para produzir o efeito desejado. Uma quantidade eficaz ou quantidade terapeuticamente eficaz é uma quantidade suficiente que proporcione um resultado clínico benéfico ou desejado mediante o tratamento. Uma quantidade eficaz pode ser fornecida com uma única administração ou várias administrações (uma ou mais doses). Uma quantidade eficaz pode ser fornecida na forma de bolus ou por meio de perfusão contínua. Em termos de tratamento, uma quantidade eficaz é aquela que é suficiente para amenizar, melhorar, estabilizar, reverter ou retardar a progressão da doença ou de outra forma reduzir as consequências patológicas da doença. A quantidade eficaz pode ser determinada por um médico para um indivíduo específico. Vários fatores são normalmente levados em consideração ao determinar uma dosagem apropriada para a obtenção da quantidade eficaz. Esses fatores incluem idade, sexo e peso do individuo, a condição a ser tratada, a gravidade da condição e a forma e concentração eficazes das células da invenção a serem administradas.
[00485] A terapia combinada usando agentes com diferentes
220 / 309 mecanismos de ação pode resultar em efeitos aditivos ou sinergéticos. A terapia combinada pode resultar em uma dose mais baixa de cada agente do que a usada em monoterapia, reduzindo assim os efeitos colaterais tóxicos e/ou aumentando o índice terapêutico do agente divulgado neste documento. A terapia combinada pode diminuir a probabilidade das células cancerígenas se desenvolverem. Em algumas modalidades, a terapia adicional resulta em um aumento do índice terapêutico das células ou composições farmacêuticas descritas neste documento. Em algumas modalidades, a terapia adicional resulta em uma diminuição da toxicidade e/ou efeitos colaterais oriundos de células ou composições farmacêuticas descritas neste documento.
[00486] A terapia adicional pode ser administrada antes, concomitantemente ou após a administração de células ou composições farmacêuticas descritas neste documento. A administração combinada pode incluir a coadministração, seja em uma formulação farmacêutica única ou usando formulações separadas, ou administração consecutiva em qualquer ordem, mas geralmente dentro de um período de tempo de maneira que todos os agentes ativos possam exercer suas atividades biológicas simultaneamente. Um profissional competente na técnica pode facilmente determinar os regimes apropriados para a administração de uma porção de ligação à Claudina18.2, aqui descrita, e uma terapia adicional combinada, incluindo o momento e a dosagem de um agente adicional a ser usado em uma terapia de combinação, com base nas necessidades do indivíduo a ser tratado.
[00487] É entendido que as modificações que não afetem substancialmente a atividade das várias modalidades desta invenção também são fornecidas na definição da invenção fornecida neste documento. Desta forma, os exemplos a seguir visam ilustrar, mas não limitar, a presente invenção. EXEMPLOS:
[00488] Os exemplos abaixo pretendem ser puramente exemplos da
221 / 309 invenção e, portanto, não devem ser considerados como limitando a invenção de forma alguma. Os exemplos a seguir e a descrição detalhada são oferecidos à guisa de ilustração e não de limitação. Exemplo 1. Geração de anticorpos monoclonais (mAbs) anti-Claudina18.2 de camundongo Imunização
[00489] Camundongos Balb/c foram imunizados com DNA codificador de Claudina18.2 humana (NCBI, NP_001002026.2)/Claudina18.2 (NCBI, NP_001002026.1) que superexpressam células CHO/primeiros peptídeos de alça extracelular de Claudina18.2/proteínas de Claudina18.2-his humana recombinante (GenScript) (coletivamente chamadas de "antígeno") de acordo com os regulamentos atuais de bem-estar animal. O antígeno foi preparado em solução de PBS ou formulado como uma emulsão com CFA (complete Freund’s adjuvante [adjuvante completo de Freund]) ou IFA (incomplete Freund’s adjuvante [adjuvante incompleto de Freund; para as imunizações de reforço]). Os camundongos receberam antígeno(s) intraperitoneal(is) no abdome ou subcutaneamente na pele dorsal por meio de uma pistola ou seringa de genes. Cada animal recebeu 3-5 doses. Amostras de sangue foram coletadas 7 dias após cada injeção para monitorar o título de anti-soro usando um ensaio baseado em ELISA com proteínas de Claudina18.2-his imobilizadas ou usando-se FACS com linhagem celular estável HEK293 expressando Claudina18.2 até que os critérios de fusão fossem atendidos. Seleção do hibridoma secretor de Claudina18.2
[00490] Três dias após o último reforço, os esplenócitos dos camundongos com bons títulos foram preparados de forma estéril e fundidos com células sp2/0 seguindo um protocolo padrão de geração de hibridoma. As células fundidas foram cultivadas em 1XHAT (hipoxantina-aminopterina- timidina) contendo meioDMEM, suplementados por 10% de FBS, durante 7
222 / 309 dias. Os sobrenadantes da cultura celular foram analisados quanto à capacidade do hibridoma de se ligar à linhagem celular estável HEK293, que expressa Claudina18.2 por meio de FACS, e a especificidade de ligação do hibridoma à Claudina18.2-alvo foi testada com a linhagem celular HEK293 que expressa Claudina18.1 por FACS. Os clones de hibridoma apresentando características desejadas foram subclonados por diluição limitante. Os anticorpos produzidos por cada clone especial foram purificados com esferas magnéticas de Proteína-A, eludidos por 0,5M de solução de citrato de sódio (pH3,5) e neutralizados com 0,5M de Tris-HCl (pH9,0). Em seguida, as proteínas foram preparadas em PBS para determinar a concentração por espectrofotometria (NanoDrop, Thermo Fisher Scientific). 0,5 mg de anticorpos purificados de cada clone foi submetido à caracterização adicional. Os isotipos de anticorpos foram determinados usando-se o Clonotyping System-HRP (SouthernBiotech). Exemplo 2. Caracterização in vitro de anticorpos de camundongo anti- Claudina18.2 Ligação do anticorpo de camundongo de Claudina18.2 à proteína de Claudina18.2-his
[00491] Os mAbs anti-Claudina18.2 foram analisados quanto à ligação de Claudina18.2 por ELISA, incluindo anticorpos de IgG e anticorpos de IgM (como 246B5F2). Em resumo, a proteína de Claudina18.2 produzida e purificada internamente em PBS (0,5 μg/ml, 100,0 μl, pH 7,4) foi pré- revestida em placas de ELISA durante a noite a 4°C. No dia seguinte, os poços foram incubados com anticorpos anti-Claudina18.2 diluídos em série, diluídos três vezes com uma concentração inicial de 1,0 μg/ml, por 1 hora a 37°C, seguido por IgG anti-camundongo de cabra conjugada com HRP (H+L) (1: 10.000, Rockland Immunochemicals, Inc., 610-103-121) e, em seguida, TMB (3,3′,5,5′-tetrametilbenzidina). A absorbância foi lida a 450 nm e plotada como na FIG. 1A-1O, e os dados foram analisados com GraphPad
223 / 309
Prism v6.02 para determinar os valores de EC50 . Os valores de EC50 dos anticorpos representativos foram resumidos na Tabela 4. Tabela 4. EC50 de ligação em ELISA de anticorpos monoclonais anti- Claudina18.2 de camundongo ID do anticorpo EC50 (ng/ml) ID do anticorpo EC50 (ng/ml) ID do anticorpo EC50 (ng/ml) 181C7B2 20,58 252C10F6 1664 407H12E6 126,1 182D10F1 23,59 252E7C9 8,69 409D1A7 7,75 185F2G12 19,31 252F1B10 7,23 409G10G6 9,52 186F7E10 10,88 253E4F7 11,21 410A9A9 20,75 186G12H3 11,12 254A8D5 25,23 410D9G2 23,07 194A2F7 43,76 256C3D3 13,32 410H6H3 2,93 194D3B2 16,65 257B1G9 7,93 411A6E3 6,74 196A12B10 19,23 257F1E11 26,22 411B4G4 9,45 198F10B8 31,51 257G7B9 9,78 411G12G1 742,7 200A4H8 10,5 257G7F7 19,83 411G3E10 5,43 201F4H6 119,2 258D11C4 15,27 412B6E4 6,31 203A6C9 65,38 259B4D4 19,72 413B1C9 3,46 203A6D5 27,05 259C6F4 55,17 413C12F8 6,82 207F8G5 33,48 259C6F7 43,92 414A5F7 8,05 213B10A4 7,79 260F8A6 15,09 414H6G2 11,56 217D9G2 27,97 260G9E8 35,77 416F12F3 11,53 219F9B8 24,78 262C7C10 13,68 417A6F11 42,83 222B6G5 20,13 262H9H6 13,96 418B11D3 / 226A4B5 8,13 263E9F3 11,27 418B8B10 8,87 231C11E9 41,26 265E6G2 18,28 418D2F9 28,87 231H4G11 39,4 266B11F7 16,82 418G6A5 26,17 232C5E3 25,88 267B2C5 11,31 419A10D4 6,53 232D7C8 30,53 267H5F12 8,22 419A5F3 5,51 232F1E4 50,91 268D7H9 10,32 419B5G9 23,2 233D5E5 94,3 271B1B6 10,36 420D5H5 23,93 234A10F7 26,85 273C10E5 20,12 420F12G8 17,62 234B9D4 40,46 273F3D4 23,31 420G10G3 11,34 234C9G5 38,66 275B2G2 27,96 420H3H9 7,22 234E1F12 104,7 275H9A2 24,48 420H7E6 54,51 235A10C9 35,55 277F1F8 15,78 421H4G3 7,53 235C3H11 1950 279E8B8 20,1 422E8F9 8,73 235G5E4 164,8 280F3B6 11,97 422F4B6 149,4 237D2A4 17,46 286C7F11 15,47 423B2B5 131,6 239H12G9 19,09 292D9C7 23,24 423C10E1 29,71 240A8E7 14,5 370E2B12C3 15,6 424G9G3 29,96 240D6F5 7,92 391F1G2 8,36 425B3D5 3,7 240F8G2 12,97 391H11H3 16,16 425C6D3 11,41 241H10A1 22,05 392A11C8 20,96 426D9F6 11,21 242F5H2 19,32 392C2F10 15,29 426H6E11 22,4 242H12D6 16,43 393C2C5 50,43 427C7H2 / 243B4F2 12,53 394C2G5 8,46 429H6C5 / 243F6D2 34,62 395B3C11 4,43 430A11H9 / 244A1B8 17,97 405G8F11 1,99 430B3F1 15,44 246B5F2 141,5 406E1H7 9,55 430E10B9F1 76,97 246C10H10 166,4 406F11G8 16,01 28C5B1 / 248E6A7 9,69 406G3C4 9,18 35E8D2 3,191 248G8E8 17,6 407A8G10 5,54 61H12G10 35,07 250F4G1 19,64 407D8G1 8,19 69D5C1 2,664 250F4G4 18,25 407E11H8 17,03 59B6C9E8 7,948
Citotoxicidade dependente do complemento (CDC) induzida por anticorpo
224 / 309 anti-Claudina18.2
[00492] A citotoxicidade dependente de complemento (CDC) e citotoxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC [Antibody-dependent cellular cytotoxicity]) são os principais mecanismos de ação dos anticorpos terapêuticos Claudina18.2 anti-humanos contra o carcinoma gástrico ou gastro-esofágico humano.
[00493] Os anticorpos terapêuticos anti-Claudina18.2 foram testados funcionalmente em um ensaio de CDC. Resumindo, as CHO-K1 superexpressando a Claudina18.2 humana ((GenScript, Cat. No. M00685) como células-alvo, foram cultivadas, colhidas e semeadas em uma placa de 96 poços, com densidade celular de 5*105 células/ml em tampão de ensaio (soro de feto bovino (Gibco, 10099-141) a 1%, MEM-α (Gibco, 41061-029) 99%). Foram adicionados anticorpos diluídos em série na placa e a mesma foi incubada a 37°C/5% de CO2 durante 30 minutos. O soro humano normal purificado (GenScript, Cat. Nº A01006, 20 μl por poço) foi, então, adicionado à placa e a placa foi incubada por mais 4 horas. A placa foi então retirada do incubador e o sobrenadante foi coletado e testado com o kit de ensaio Cell Titer-Glo® (Cat. No. G7570, Promega). Os dados de luminescência foram registrados pelo leitor de microplaca PheraStar (BMG Labtech) para análise de viabilidade celular. Foi utilizado o análogo IMAB362 preparado internamente (Claudiximab Ganymed Pharmaceuticals AG) como controle positivo.
[00494] Os resultados do ensaio de CDC foram apresentados na FIG. 2A-2P, em termos de percentual de lise de célula-alvo versus concentração de anticorpos candidatos. Os valores de EC50 e % de Atividade relativa (% de Atividade relativa = (EC50 de controle positivo / EC50 de anticorpo candidato) *100%) de anticorpos foram determinados e resumidos na Tabela 5 abaixo.
[00495] Os anticorpos de vários clones tiveram valores EC50 menores que o IMAB362. Vários mAbs exibindo uma atividade relativa de 200% ou
225 / 309 mais foram listados em negrito.
Tabela 5. Atividade de CDC de anticorpos monoclonais de anti-Claudina18.2 de camundongo ID do % de Atividade ID do % de Atividade EC50 (μg/ml) EC50 (μg/ml) anticorpo relativa anticorpo relativa 181C7B2 3,592 43,99 271B1B6 1,124 145,11 182D10F1 0,811 194,77 273C10E5 2,413 67,59 185F2G12 0,291 542,58 273F3D4 1,557 104,75 186F7E10 1,274 124,02 275B2G2 1,657 98,43 186G12H3 1,39 113,67 275H9A2 1,147 142,2 194A2F7 3,055 51,72 277F1F8 1,544 105,63 194D3B2 0,275 573,71 279E8B8 1,268 128,63 196A12B10 1,688 93,6 280F3B6 1,352 120,64 198F10B8 0,3 525,97 286C7F11 1,523 107,09 IMAB362 1,58 100 IMAB362 1,631 100 200A4H8 2,267 84,52 292D9C7 1,135 151,19 201F4H6 1,418 135,12 370E2B12C3 0,453 379,23 203A6C9 0,319 600,06 IMAB362 1,716 100 203A6D5 0,336 570,92 391F1G2 1,472 175,68 207F8G5 0,305 627,37 391H11H3 2,071 124,87 213B10A4 1,589 120,58 392A11C8 1,949 132,68 217D9G2 0,271 706,75 392C2F10 47,61 5,43 219F9B8 0,318 602,89 393C2C5 0,909 284,61 222B6G5 0,278 690,2 394C2G5 1,981 130,54 IMAB362 1,916 100 395B3C11 1,798 143,83 222B6G5 0,259 501,35 405G8F11 3225 0,08 226A4B5 1,78 73,03 406E1H7 2,071 124,87 231C11E9 1,554 83,66 406F11G8 2,572 100,54 231H4G11 1,477 88,02 IMAB362 2,586 100 232C5E3 0,575 226,05 406G3C4 1,925 135,64 232D7C8 1,463 88,86 407A8G10 10,91 23,93 232F1E4 1,735 74,93 407D8G1 0,308 848,83 233D5E5 1,489 87,31 407E11H8 4,322 60,41 234A10F7 2,098 61,96 407H12E6 1,828 142,83 IMAB362 1,3 100 409D1A7 7,782 33,55 234B9D4 0,287 485 409G10G6 4,696 55,6 234C9G5 0,794 175,04 410A9A9 0,872 299,5 234E1F12 1,105 125,79 410D9G2 2,971 87,88 235A10C9 1,011 137,49 410H6H3 0,346 755,28 237D2A4 0,221 628,67 IMAB362 2,611 100 239H12G9 1,363 101,98 411A6E3 2,497 109,05 240A8E7 1,157 120,14 411B4G4 3,984 68,35 240D6F5 1,167 119,11 411G12G1 9,56 28,48 240F8G2 1,103 126,02 411G3E10 3,311 82,24 IMAB362 1,39 100 412B6E4 0,472 576,78 241H10A1 0,225 625,33 413B1C9 26,29 10,36 242F5H2 0,944 149,06 413C12F8 3,839 70,93 242H12D6 1,26 111,67 414A5F7 0,458 594,15 243B4F2 1,047 134,38 414H6G2 0,402 678,04 243B4F7 0,941 149,47 IMAB362 2,723 100 243F6D2 1,997 70,46 244A1B8 1,385 101,59 416F12F3 0,784 219,78 246B5F2 0,179 787,35 417A6F11 0,392 439,51 248E6A7 0,876 160,54 418B8B10 5,596 30,77 IMAB362 1,407 100 418D2F9 0,73 236,02 248G8E8 1,61 113,85 418G6A5 0,83 207,49 250F4G1 1,642 111,63 419A10D4 1,883 91,45 250F4G4 1,451 126,33 419A5F3 2,791 61,7 252C10F6 53,63 3,42 419B5G9 0,494 348,79 252E7C9 1,19 154,03 420D5H5 2,2 78,27 252F1B10 1,763 103,97 420F12G8 3,271 52,64
226 / 309 ID do % de Atividade ID do % de Atividade EC50 (μg/ml) EC50 (μg/ml) anticorpo relativa anticorpo relativa 253E4F7 1,056 173,58 IMAB362 1,722 100 254A8D5 1,188 154,29 420G10G3 2,633 72,39 256C3D3 1,114 164,54 420H3H9 0,416 458,5 IMAB362 1,833 100 420H7E6 3,905 48,81 257B1G9 0,305 487,39 421H4G3 2,892 65,91 257F1E11 0,855 174,1 422E8F9 2,136 89,23 257G7B9 1,009 147,47 422F4B6 6,026 31,63 257G7F7 1,059 140,51 423B2B5 29,89 6,38 258D11C4 1,051 141,58 423C10E1 3,392 56,19 259B4D4 1,688 88,15 424G9G3 20,31 9,38 259C6F4 1,186 125,46 425B3D5 3,023 63,05 259C6F7 1,274 116,8 IMAB362 1,906 100 260F8A6 1,152 129,17 425C6D3 2,082 96,59 IMAB362 1,488 100 426D9F6 6,209 32,39 260G9E8 1,051 163,75 426H6E11 2,513 80,02 262C7C10 0,331 520,41 429G4E9 1,229 163,63 262H9H6 0,941 182,83 429H6C5 0,607 331,14 263E9F3 1,479 116,36 430B3F1 2,865 70,19 265E6G2 0,327 526,3 235C3H11 5,097 39,45 266B11F7 1,767 97,4 235G5E4 16,63 12,09 267B2C5 1,208 142,47 246C10H10 9,902 20,31 267H5F12 1,003 171,59 430E10B9F1 3,389 59,34 268D7H9 1,226 140,38 IMAB362 2,011 100 IMAB362 1,721 100 Ligação de anticorpo anti-Claudina18.2 de camundongo às células HEK293T que expressam Claudina18.2
[00496] Para determinar o EC50 de ligação de proteína por Cell ELISA, microplacas de fundo em U com 96 poços foram pré-bloqueadas com tampão de bloqueio (5% de MPBS, 1 x PBS com 5% de leite desnatado) de um dia para outro a 4°C. No dia seguinte, a linhagem celular estável de HEK293T expressando Claudina18.2 foi suspensa a 1,5x106 células/ml em tampão de bloqueio, adicionada à placa em 100 μl/poço e incubada em temperatura ambiente por 1 hora. Em seguida, os poços foram incubados com anticorpos anti-Claudina18.2 diluídos em série, em temperatura ambiente, por 1 hora, com diluição tripla e concentrações iniciais de 50,0 nM, seguido de IgG (H+L) anti-camundongo de cabra conjugada com HRP (1: 10.000, Rockland Immunochemicals, Inc., Cat.: 610-103-121) para a reação cromogênica do substrato de TMB. O análogo IMAB362 foi utilizado como controle positivo e foram usadas uma IgG de camundongo e IgG1Fc humana como controles de isotipo.
[00497] A linhagem celular HEK293T que superexpressa Claudina18.2
227 / 309 humana, como usada acima, foi gerada usando-se lentivírus baseado em HIV-
1. Lentivírus que superexpressam Claudina18.2 (NCBI, NP_001002026.1) foram empacotados, coletados por ultracentrifugação e usados para infectar células HEK293T. Os pools celulares infectados foram selecionados com antibióticos de seleção de puromicina por mais de uma semana e a expressão de Claudina18.2 for verificada por FACS. As células foram diluídas em placas de 96 poços para gerar clones celulares únicos.
[00498] As curvas de ligação anticorpo-Claudina18.2 foram gerados com leituras de densidade óptica a 450 nM e estão apresentadas nas FIGs. 3A- 3Q. Os dados brutos foram plotados com o software GraphPad Prism v6.02 com quatro parâmetros, programa de valor de melhor ajuste para analisar o EC50. Os valores de EC50 de ligação do ELISA foram resumidos na Tabela 6.
[00499] Os dados revelaram que vários anticorpos tiveram melhor eficácia e/ou potência de ligação à Claudina18.2 do que o IMAB362. Tabela 6. EC50 de ligação de Cell ELISA de Abs anti-Claudina18.2 de camundongos
ID DO ID DO ID DO EC50 (NM) EC50 (NM) EC50 (NM)
ANTICORPO ANTICORPO ANTICORPO 200A4H8 1,01 201F4H6 0,2827 232C5E3 0,6514 181C7B2 1,072 207F8G5 0,8218 232D7C8 0,7379 194D3B2 1,086 217D9G2 0,9081 233D5E5 0,8029 182D10F1 1,646 203A6C9 0,9163 234A10F7 0,857 185F2G12 1,725 222B6G5 1,126 232F1E4 0,9663 196A12B10 1,78 219F9B8 1,155 231H4G11 1,013 198F10B8 1,818 203A6D5 1,164 226A4B5 1,586 IMAB362 2,173 222B6G5-2 1,379 IMAB362 1,816 186G12H3 2,213 213B10A4 2,328 231C11E9 1,912 194A2F7 2,574 IMAB362 2,609 234B9D4 4,781 234C9G5 0,562 248E6A7 0,3959 250F4G4 0,1989 234E1F12 0,57 IMAB362 0,4895 250F4G1 0,4147 235A10C9 0,6297 248G8E8 0,5604 252F1B10 0,5297 240A8E7 0,6459 243B4F2 0,6839 253E4F7 0,6114 239H12G9 0,7324 242H12D6 0,7444 256C3D3 0,7285 240F8G2 0,8797 243F6D2 0,96 257B1G9 0,948 IMAB362 1,114 246B5F2 6,593 254A8D5 0,982 241H10A1 1,66 242F5H2 ~ 0,4027 IMAB362 1,729 240D6F5 1,769 243B4F7 ~ 0,4107 252E7C9 ~ 0,3702 237D2A4 1,902 244A1B8 ~ 0,4388 252C10F6 ~ 12,50 260G9E8 0,8209 IMAB362 0,6746 273C10E5 0,1811 257G7B9 1,022 262H9H6 0,8793 280F3B6 0,5823 260F8A6 1,797 267B2C5 0,8951 IMAB362 0,77 259C6F4 2,319 263E9F3 1,077 292D9C7 0,8746 IMAB362 3,35 262C7C10 1,767 273F3D4 1,131 257F1E11 57,84 266B11F7 ~ 0,3969 275H9A2 ~ 0,0 259B4D4 ~ 0,3780 268D7H9 ~ 0,4114 275B2G2 ~ 2,064 258D11C4 ~ 0,4058 271B1B6 ~ 0,4288 277F1F8 ~ 4411
228 / 309
ID DO ID DO ID DO EC50 (NM) EC50 (NM) EC50 (NM)
ANTICORPO ANTICORPO ANTICORPO 257G7F7 ~ 0,4128 267H5F12 ~ 0,5129 279E8B8 ~ 9,619 259C6F7 ~ 0,4429 265E6G2 ~ 14,00 286C7F11 ~ 0,08310 391F1G2 ~ 2,663 406F11G8 1,829 410D9G2 4,331 391H11H3 2,973 406G3C4 12,64 410H6H3 45,51 392A11C8 1,213 407A8G10 2,137 411A6E3 ~ 2,600 392C2F10 350 407D8G1 2,38 411B4G4 2,854 393C2C5 4,446 407E11H8 1,244 411G12G1 3,474 394C2G5 2,814 407H12E6 2,394 411G3E10 2,448 395B3C11 3,577 409D1A7 2,052 412B6E4 33,08 405G8F11 ~ 91,19 409G10G6 2,188 413B1C9 24,59 406E1H7 4,328 410A9A9 6,206 413C12F8 3,547 IMAB362 25,26 IMAB362 2,607 IMAB362 31,91 413H4G12 SEM LIGAÇÃO 419A10D4 2,331 422E8F9 1,88 414A5F7 15,49 419A5F3 2,612 422F4B6 2,531 414H6G2 12,01 419B5G9 22,51 423B2B5 12,71 416F12F3 14,66 420D5H5 7,026 423C10E1 2,462 BAIXA * 417A6F11 420F12G8 2,612 424G9G3
LIGAÇÃO
BAIXA 418B11D3 420G10G3 2,394 425B3D5 LIGAÇÃO 2,612 418B8B10 3,168 420H3H9 20,68 425C6D3 1,923
BAIXA 418D2F9 420H7E6 2,941 426D9F6 LIGAÇÃO 2,144
BAIXA 418G6A5 421H4G3 2,468 426H6E11 LIGAÇÃO 1,778 IMAB362 18,73 IMAB362 9,106 IMAB362 3,409
BAIXA 427C7H2 370E2B12C3 0,522
LIGAÇÃO 429H6C5 13,19 IMAB362 2,163 430A11H9 ~ 1,702 430B3F1 2,563 235C3H11 5,823 235G5E4 2,303
BAIXA 246C10H10
LIGAÇÃO 430E10B9F1 * IMAB362 3,846 *Nível de ligação máximo não alcançado
[00500] Os mAbs anti-Claudina18.2 mostrando boas propriedades foram sequenciados e sua região variável de cadeia leve/pesada e sequências de CDR ou os números de ID da sequência foram resumidos nas Tabela 1 e Tabela 2. Alguns desses anticorpos foram objeto de maior caracterização. Exemplo 3. Preparação e caracterização de anticorpo quimérico anti- Claudina18.2 Preparação de anticorpos quiméricos
[00501] A região variável de cadeia leve e pesada, codificando sequências para os mAbs selecionados, foram otimizados para a expressão polarizada de códon humano com GenScript OptimumGene™ - Otimização de códon. A região variável de cadeia leve e pesada codificando fragmentos
229 / 309 de DNA foi sintetizada e fundida em domínio de cadeia pesada de IgG1 humana codificando nucleotídeos (CH1-dobradiça-CH2-CH3, aminoácido definido no SEQ ID NO: 388) e a região constante kappa de cadeia leve (CL, aminoácido definido em SEQ ID NO: 389), respectivamente, para a expressão transitória em formatos quiméricos, onde o C-terminal da região variável de cadeia pesada foi ligado ao N-terminal da região constante de cadeia pesada da IgG1 humana e o C-terminal da região variável de cadeia leve foi ligado ao N-terminal da região constante kappa humana. Os construtos da expressão de cadeia leve e pesada foram clonados em plasmídeos individuais com base em pTT5 à jusante de um peptídeo sinal sintetizado para expressão secretora.
[00502] Os anticorpos quiméricos foram expressados em células HEK293-6E transfectadas com plasmídeos em pares de cadeia leve/pesada, usando-se o PEImax 40.000 (Cat No. 24765-1, Polysciences, Inc.). Vinte e quatro horas depois, a expressão/secreção foi potencializada com a adição do suplemento Triptona N-1. Depois de 5 dias de agitação da cultura a 37°C, a 5% de CO2, os sobrenadantes foram coletados e o teor de anticorpos foi purificado com as esferas de Proteína A. Os produtos de anticorpos quiméricos foram armazenados em PBS para análise. Análise de ligação FACS de anticorpo quimérico
[00503] A ligação de anticorpos quiméricos à Claudina18.2, expressada nas células HEK293, foi determinada por análise FACS. Em resumo, células HEK293 que expressam Claudina18.2 humana, conforme preparadas no exemplo anterior, foram colhidas e incubadas com mAbs anti- Claudina18.2 a 4°C, por 40 minutos, seguido por anticorpos secundários de IgG (H+L) anti-camundongo de cabra marcado com fluoróforo (iFluor 647) a 4°C, durante 0,5 hora. As amostras foram analisadas por citometria de fluxo. Os resultados foram resumidos nas FIGs. 4A-4C, Tabela 7 e Tabela 8.
230 / 309 Tabela 7. Capacidade de ligação de anticorpo quimérico à Claudina18.2- células HEK293 ID do anticorpo EC50 (nM) ID do anticorpo EC50 (nM) 182D10F1 1,304 250F4G4 1,017 185F2G12 0,634 252E7C9 0,331 194D3B2 0,796 252F1B10 0,798 201F4H6 1,364 253E4F7 0,561 203A6C9 0,551 257B1G9 1,165 207F8G5 0,554 257G7B9 0,742 222B6G5 0,610 260G9E8 1,047 232C5E3 1,054 262C7C10 1,174 234B9D4 2,601 265E6G2 1,047 237D2A4 0,596 273C10E5 1,011 241H10A1 1,530 370E2B12C3 0,792 246B5F2 1,237 IMAB 362 0,596 Tabela 8. Capacidade de ligação de anticorpo quimérico à Claudina18.2- células HEK293 ID do anticorpo EC50 (nM) 393C2C5A 0,687 407D8G1 0,533 410H6H3 0,778 412B6E4 0,677 417A6F11 2,477 418D2F9 0,650 418G6A5 0,595 419B5G9 1,230 429H6C5 0,908 IMAB362 0,517
[00504] Os anticorpos quiméricos apresentaram capacidade de ligação à superfície celular comparável ou maior expressando Claudina18.2 em relação à referência IMAB363 comparada. Vale ressaltar que 203A6C9, 207F8G5, 252E7C9 e 253E4F7 exibiram maior eficácia de ligação e capacidade específica de direcionamento em relação ao IMAB362.
[00505] A ligação Claudina18.1-células HEK293 deu negativo pela análise FACS para todos os anticorpos (dados não apresentados). CDC induzida por anticorpo anti-Claudina18.2
[00506] O ensaio de CDC foi realizado para os anticorpos quiméricos, de acordo com protocolo descrito no Exemplo 2.
[00507] Os resultados do ensaio de CDC foram apresentados nas FIGs. 5A a 5C e Tabela 9. Quase todos os anticorpos da divulgação apresentaram menor EC50 e maior % de atividade relativa do que a referência IMAB362.
231 / 309 Tabela 9. Atividade de CDC do anticorpo quimérico % de Atividade % de Atividade ID do anticorpo EC50 (μg/ml) ID do anticorpo EC50 (μg/ml) relativa relativa 194D3B2 0,3404 793,18 185F2G12 0,101 2100 203A6C9 0,2605 1036,47 232C5E3 0,09938 2134,23 207F8G5 0,2071 1303,72 393C2C5A 0,1046 2027,72 222B6G5 0,2047 1319,00 410H6H3 0,07559 2805,93 237D2A4 0,231 1168,83 412B6E4 0,1052 2016,16 246B5F2 0,2741 985,04 418D2F9 69,86 3,04 250F4G4 0,3087 874,64 419B5G9 0,1062 1997,18 252E7C9 0,2724 991,19 429H6C5 0,08738 2427,33 252F1B10 0,2882 936,85 IMAB362 2,121 100 253E4F7 0,205 1317,07 IMAB362 2,7 100,00 257B1G9 0,3579 642,36 257G7B9 0,3024 760,25 260G9E8 0,336 684,23 262C7C10 0,3451 666,18 265E6G2 0,4721 486,97 273C10E5 0,2693 853,69 370E2B12C3 0,1919 1198,02 IMAB362 2,3 100,00 IgG humana 69,44 3,31 ADCC induzida por anticorpo anti-Claudina18.2
[00508] Os anticorpos quiméricos foram também testados quanto às suas atividades de ADCC. Para o procedimento do ensaio, a linhagem celular-alvo, CHO-K1 superexpressando Claudina18.2 humana (GenScript, Cat.#. M00685), foi cultivada, colhida e semeada em placas de 96 poços,
10.000 células/poço. Foram adicionados às placas, anticorpos quiméricos diluídos em série ou análogo de IMAB362 preparado internamente como controle positivo, e as placas foram incubadas a 37°C/5% de CO2 por 30 minutos. Tabela 10. Atividade de ADCC do anticorpo quimérico % de Atividade % de Atividade ID do anticorpo EC50(μg/ml) ID do anticorpo EC50(μg/ml) relativa relativa 194D3B2 0,0291 83,64 273C10E5 0,02748 92,14 203A6C9 0,03667 66,38 370E2B12C3 0,03347 75,65 207F8G5 0,02137 113,90 IMAB362 0,02532 100,00 IMAB362 0,02434 100,00 185F2G12 0,008856 398,83 222B6G5 0,02763 130,91 232C5E3 0,007816 451,89 237D2A4 0,02138 169,18 393C2C5 0,01112 317,63 246B5F2 0,02297 157,47 IMAB362 0,03532 100,00 IMAB362 0,03617 100,00 410H6H3 0,003901 677,01 250F4G4 0,02813 108,96 412B6E4 0,004937 534,94 252E7C9 0,03107 98,65 418D2F9 0,1027 25,72 252F1B10 0,03569 85,88 IMAB362 0,02641 100,00 IMAB362 0,03065 100,00 260G9E8 0,02397 104,17 253E4F7 0,02249 137,75 262C7C10 0,02367 105,49 257B1G9 0,04545 68,16 265E6G2 0,03211 77,76 257G7B9 0,05555 55,77 IMAB362 0,02497 100,00 IMAB362 0,03098 100,00 IgG humana N/A N/A
232 / 309 % de Atividade % de Atividade ID do anticorpo EC50(μg/ml) ID do anticorpo EC50(μg/ml) relativa relativa 419B5G9 0,007943 332,37 429H6C5 0,01838 143,63 IMAB362 0,0264 100,00
[00509] Foi coletado o sangue total humano, 1:1 v/v diluído em PBS, adicionado a Limphoprep e centrifugado a 300 g, a 4 ºC, por 25 minutos para separar a camada de PBMC. Após a lavagem com PBS por duas vezes, as PBMCs (Células mononucleares de sangue periférico [Peripheral Blood Mononuclear Cells]) foram usadas como células efetoras e adicionadas às placas, ~50.000 células por poço e incubadas na mesma condição por 6 horas. As placas de ensaio foram retiradas e rapidamente centrifugadas. Os sobrenadantes foram coletados e transferidos para novas placas, para um ensaio de atividade LDH com o kit Cytotoxicity Detection (LDH) & 2000T (Roche 11644793001), de acordo com a instrução do fabricante (Roche). Os dados de absorbância foram registrados pelo FlexStation 3 e analisados pelo GraphPad Prism 6.0.
[00510] Os resultados do ensaio de ADCC foram plotados em termos de percentual de lise celular-alvo versus concentração de anticorpos candidatos (FIGs. 6A-6J). Os valores de EC50 e a % de Atividade relativa (% de Atividade relativa = (EC50 de controle positivo / EC50 de anticorpo candidato) *100%) de anticorpos quiméricos candidatos foram determinados e resumidos na Tabela 10. Os anticorpos do presente pedido mostraram atividades comparáveis ou maior de ADCC quando comparados ao IMAB362. Exemplo 4. Humanização e caracterização do anticorpo Projeto de humanização para os anticorpos candidatos
[00511] Sete anticorpos, 207F8G5, 232C5E3, 237D2A4, 246B5F2, 370E2B12C3, 410H6H3 e 412B6E4 foram selecionados para humanização.
[00512] Com base nas sequências de domínio variável de anticorpos, as CDRs, laços de HV e FRs foram analisados e a modelagem de homologia foi realizada para a obtenção da estrutura modelada do anticorpo de
233 / 309 camundongo. Foi calculada a área de superfície acessível ao solvente dos resíduos da estrutura e foram identificados os resíduos da estrutura que estão enterrados (ou seja, com área de superfície acessível ao solvente de < 15%). Até três (3) aceptores humanos foram selecionados para VH e VL que compartilham as principais identidades de sequência com as contrapartes do camundongo. E as CDRs do anticorpo do camundongo foram enxertadas nas estruturas do aceptor humano. Os resíduos canônicos na região estrutural e os resíduos na interface VH-VL, que se acredita serem importantes para a atividade de ligação, sofreram mutação reversa para o resíduo de murino.
[00513] Quanto ao 207F8G5 principal, 9 regiões variáveis de cadeia pesada (VH1, VH1.1, VH1.2, VH1.3, VH1.4, VH1.5, VH1.6, VH1.7 e VH1.8) e 2 regiões variáveis de cadeia leve (VL1 e VL1.1) foram pareadas entre si para classificação de afinidade. Os detalhes sobre a mutação reversa estão listados abaixo. VH1. Cadeia pesada enxertada com CDR; VH1.1: VH1 com R38K, R72S, Y95F, R98T; VH1.2: VH1 com R38K, M48I, V68A, Y95F, R98T; VH1.3: VH1 com M48I, V68A, R72S, Y95F, R98T; VH1.4: VH1 com R38K, M48I, V68A, R72S, Y95F, R98T; VH1.5: VH1 com R38K, M70L, R72S, Y95F, R98T; VH1.6: VH1 com R38K, M48I, V68A, R72S, I76S, Y95F, R98T; VH1.7: VH1 com R38K, M70L, R72S, R98T; VH1.8: VH1 com V20M, R38K, M48I, V68A, M70L, R72S, I76S, Y95F, R98T e VL1: Cadeia leve enxertada com CDR; VL1.1: VL1 com L15P, I21M, N22S.
[00514] Quanto ao 232C5E3 principal, 5 regiões variáveis de cadeia pesada (VH1, VH1.1, VH1.2, VH1.3 e VH1.4) e 2 regiões variáveis de cadeia leve (VL1 e VL1.1) foram pareadas entre si para classificação de afinidade. Os detalhes sobre a mutação reversa estão listados abaixo. VH1. Cadeia pesada enxertada com CDR; VH1.1: VH1 com M48I, V68A, R72A, Y95F; VH1.2: VH1 com V37I, R38K, R72A, Y95F; VH1.3: VH1 com M48I, R72A, Y95F; VH1.4: VH1 com V37I, R38K, M48I, V68A, R72A, Y95F; e VL1: Cadeia leve enxertada com CDR; VL1.1: VL1 com I21M, N22S.
234 / 309
[00515] Quanto ao 237D2A4 principal, 8 regiões variáveis de cadeia pesada (VH1, VH1.1, VH1.2, VH1.3, VH1.4, VH1.5, VH1.6 e VH1.7) e 2 regiões variáveis de cadeia leve (VL1 e VL1.1) foram pareadas entre si para classificação de afinidade. Os detalhes sobre a mutação reversa estão listados abaixo. VH1. Cadeia pesada enxertada com CDR; VH1.1: VH1 com V71K, N76S, R97K; VH1.2: VH1 com V71K, F78V, S79F, R97K; VH1.3: VH1 com V71K, N76S, F78V, S79F, R97K; VH1.4: VH1 com I37V, V71K, N76S, R97K; VH1.5: VH1 com I37V, I48L, V67L, V71K, R97K; VH1.6: VH1 com I37V, I48L, V67L, V71K, N76S, R97K; VH1.7: VH1 com I37V, I48L, V67L, V71K, N76S, F78V, S79F, R97K e VL1: Cadeia leve enxertada com CDR; VL1.1: VL1 com I21M, N22S.
[00516] Quanto ao 246B5F2 principal, 5 regiões variáveis de cadeia pesada (VH1, VH1.1, VH1.2, VH1.3 e VH1.4) e 2 regiões variáveis de cadeia leve (VL1 e VL1.1) foram pareadas entre si para classificação de afinidade. Os detalhes sobre a mutação reversa estão listados abaixo: VH1. Cadeia pesada enxertada com CDR; VH1.1: VH1 com G44R, S49A, K98G; VH1.2: VH1 com S49A, S75A, K98G; VH1.3: VH1 com G44R, S49A, S75A, K98G; VH1.4: VH1 com Q3M, G44R, S49A, S75A, K98G e VL1: Cadeia leve enxertada com CDR; VL1.1: VL1 com N22S, S69T.
[00517] Quanto ao 370E2B12C3 principal, 3 regiões variáveis de cadeia pesada (VH1, VH2 e VH3) e 3 regiões variáveis de cadeia leve (VL1, VL2 e VL3) foram pareadas entre si para classificação de afinidade.
[00518] Quanto ao 410H6H3 principal, 3 regiões variáveis de cadeia pesada (VH1, VH1.1 e VH1.2) e 2 regiões variáveis de cadeia leve (VL1 e VL1.1) foram pareadas entre si para classificação de afinidade. Os detalhes sobre a mutação reversa estão listados abaixo: VH1. Cadeia pesada enxertada com CDR; VH1.1: VH1 com S49A, Y80F, VH1.2: VH1 com L18R, S78T, Y80F e VL1: Cadeia leve enxertada com CDR; VL1.1: VL1 com I21M, N22S, L52M.
235 / 309
[00519] Quanto ao 412B6E4 principal, 3 regiões variáveis de cadeia pesada (VH1, VH1.1 e VH1.2) e 2 regiões variáveis de cadeia leve (VL1 e VL1.1) foram pareadas entre si para classificação de afinidade. Os detalhes sobre a mutação reversa estão listados abaixo: VH1. Cadeia pesada enxertada com CDR; VH1.1: VH1 com S49A, Y80F, VH1.2: VH1 com L18R, S78T, Y80F e VL1: Cadeia leve enxertada com CDR; VL1.1: VL1 com I21M, N22S, L52M.
[00520] Os números de ID de sequência de aminoácidos das regiões variáveis de cadeia leve/pesada humanizadas estão resumidos nas Tabelas 1 e
2. As sequências de DNA que codificam a região variável de cadeia pesada mais a região constante de cadeia pesada da IgG1 humana (aminoácido definido no SEQ ID NO: 388) e as sequências de DNA que codificam a região variável de cadeia leve mais a região constante kappa humana (aminoácido definido no SEQ ID NO: 389) foram pareadas para expressar anticorpos de comprimento total para caracterização, onde o C-terminal da região variável de cadeia pesada foi ligado ao N-terminal da região constante de cadeia pesada da IgG1 humana e o C-terminal da região variável de cadeia leve foi ligado ao N-terminal da região constante kappa humana.
[00521] Após triagem inicial da ligação celular com sobrenadantes transfectados, o padrão de ligação de anticorpos quiméricos e até 3 anticorpos humanizados em Claudina18.2, expressos em células HEK293, foram plotados com anticorpo em 3 diluições em série, concentração inicial de 45 μg/ml, seguindo o protocolo descrito no Exemplo 3. Os dados de ligação de alguns anticorpos representativos estão apresentados na Fig. 7A-7G e Tabela
11. A ligação negativa à Claudina18.1 foi confirmada por FACS (dados não apresentados). Tabela 11. Capacidade de ligação de anticorpos humanizados entre Claudina18.2-células HEK293 207F8G5- 207F8G5- 207F8G5- 207F8G5- IMAB362 Quimérico VH1.7+VL1 VH1.1+VL1.1 VH1.3+VL1.1 EC50 (μg/ml) 0,1699 0,1451 0,1678 0,1429 0,08646
236 / 309 Variação 11849 13833 14038 13815 6184 232C5E3- 232C5E3- 232C5E3- 232C5E3- IMAB362 Quimérico VL1.1+VH1 VL1.1+VH1.1 VL1.1+VH1.2 EC50 (μg/ml) 0,317 0,3036 0,2243 0,2124 5,859 Variação 69677 57959 54919 57896 38396 237D2A4- 237D2A4- 237D2A4- 237D2A4- IMAB362 Quimérico VH1.2+VL1 VH1.5+VL1 VH1.5+VL1.1 EC50 (μg/ml) 0,0923 0,2606 0,2492 0,2176 0,08646 Variação 14847 15731 15388 15515 6184 246B5F2- 246B5F2- 246B5F2- 246B5F2- IMAB362 Quimérico VH1+VL1 VH1.1+VL1 VH1.1+VL1.1 EC50 (μg/ml) 0,1918 0,1598 0,1037 0,2826 0,08646 Variação 12362 14192 10916 14691 6184 370E2B12C3- 370E2B12C3- 370E2B12C3- 370E2B12C3- IMAB362 quimérico VH3+VL1 VH3+VL2 VH3+VL3 EC50 (μg/ml) 0,7719 0,8263 0,794 1,171 0,6322 Variação 4570 4654 4300 5521 2562 410H6H3- 410H6H3- 410H6H3- 410H6H3- IMAB362 Quimérico VH1+VL1 VH1.2+VL1 VH1.2+VL1.1 EC50 (μg/ml) 0,8426 0,3301 0,3724 0,5553 5,859 Variação 79128 72092 72989 64530 38396 412B6E4- 412B6E4- 412B6E4- 412B6E4- IMAB362 Quimérico VH1+VL1.1 VH1.1+VL1.1 VH1.2+VL1.1 EC50 (μg/ml) 0,5551 0,3733 0,5714 0,512 5,859 Variação 87928 65871 71349 70339 38396
[00522] Esses anticorpos humanizados também foram testados quanto às atividades de ADCC e CDC. Quanto ao ensaio de ADCC, as células CHO- K1/CLDN18.2 (GenScript, Cat. No. M00685) foram semeadas em placas lisas de 96 poços, com densidade celular de ~10.000 células por poço em tampão de ensaio (Soro de Feto Bovino [Fetal Bovine Serum] (Gibco, 10099- 141) a 1%, MEM-α (Gibco, 41061-029) 99%). Em seguida, os anticorpos diluídos em série ou tampão de ensaio foram adicionados às placas e as mesmas foram incubadas em temperatura ambiente por 0,5 hora. Células NK92/CD16a-VV (NK92 (ATCC, Cat#CRL-2407) manipuladas para superexpressar CD16a (158V) com plasmídeo fornecido pela GenScript foram adicionadas às placas de ensaio em uma densidade de ~10.000 células por poço em tampão de ensaio com rhIL-2, na concentração de 200 UI/ml. Depois de cerca de 6 horas de incubação, a 37oC, em um incubador umidificado a 5% de CO2, as placas foram retiradas do incubador e deixadas descansar até atingir a temperatura ambiente. Em seguida, as placas de ensaio foram submetidas à centrifugação de 500 g por 3 minutos e os sobrenadantes foram transferidos para outra placa de ensaio de 96 poços. O kit LDH
237 / 309 Cytotoxity (Roche, CAt# 11644793001) foi utilizado para detectar a liberação de LDH e os dados de alguns anticorpos representativos estão mostrados na Fig. 8A-8H.
[00523] Quanto ao ensaio de CDC, as células CHO-K1 superexpressando a Claudina18.2 humana (GenScript, Cat. No. M00685), na fase logarítmica, foram tripsinizadas e semeadas em placas com 384 poços, na densidade de ~5.000 células por poço em tampão de ensaio (Soro de Feto Bovino ((Gibco 10099-141) a 1%, MEM-α (Gibco 41061-029) a 99%, Heparina ((Sangon Biotech A603251-0001) 100 μg/ml) e incubadas com anticorpos em diferentes concentrações. Depois de aproximadamente 0,5 hora de incubação, em temperatura ambiente, o soro humano normal agrupado (PNHS [pooled normal human serum]), em concentração de trabalho de 10%, de doadores saudáveis, foi diluído com tampão de ensaio e adicionado aos poços da placa. As placas de ensaio foram incubadas a 37 oC por cerca de 4 horas em um incubador umidificado a 5% de CO2 e, em seguida, as placas foram retiradas e testadas quanto à viabilidade celular usando o CellTiter-Glo Kit (Promega, Cat# G7573). Os dados de alguns anticorpos representativos estão apresentados na Fig. 9A-9H.
[00524] Esses anticorpos humanizados revelaram capacidades de ligação à Claudina18.2 comparáveis, atividades de ADCC e CDC em termos de potência e/ou eficácia em relação aos seus anticorpos quiméricos parentais. Exemplo 5. Preparação e caracterização de receptores do antígeno quimérico
[00525] Um nucleotídeo que codifica um polipeptídeo de esqueleto CAR consistindo, do N-terminal ao C-terminal, em um domínio de dobradiça da CD8α (SEQ ID NO: 292), um domínio transmembranar de CD8α (SEQ ID NO: 293), um domínio coestimulatório da CD137 (SEQ ID NO: 294) e um domínio de sinalização intercelular da CD3ζ (SEQ ID NO: 296) foi sintetizado e clonado em um vetor lentiviral pré-modificado (pLSINK- BBzBB), à jusante, e operacionalmente ligado a um promotor hEF1α
238 / 309 constitutivo, ou clonado em um vetor de clonagem (pT7-BBzBB) e ligado a um promotor T7 para transcrição in vitro. As áreas de multiclonagem (MCS [multi-cloning sites]) no vetor permitiram inserção de uma sequência de ácidos nucleicos, incluindo uma sequência Kozac operacionalmente ligada à sequência de ácido nucleico que codifica um peptídeo sinal de CD8α (SEQ IID NO: 291) fundido ao N-terminal de um fragmento variável de cadeia única (scFv) e um ligante (SEQ ID NO: 298) em um vetor de esqueleto CAR, à jusante, e operacionalmente ligado à sequência de esqueleto CAR. O scFv consiste em um ligante (SEQ ID NO: 297) conectado ao C-terminal de uma região variável de cadeia leve e N-terminal de uma região variável de cadeia pesada. A sequência de ácido nucleico, que codifica o scFv anti-Claudina
18.2, o peptídeo sinal e ligante, foi quimicamente sintetizada e clonada no pT7-BBzBB via MluI (5'-ACGCGT-3') e SpeI (5'-ACTAGT-3') ou esqueleto CAR do pLSINK-BBzBB através dos locais de restrição EcoRI (5'- GAATTC-3') e SpeI (5'-ACTAGT-3') por técnicas de clonagem molecular conhecidas na técnica. Os números de ID da sequência de aminoácidos do CAR, da região variável de cadeia pesada, região variável de cadeia leve e scfv foram resumidos na Tabela 3.
[00526] Os RNAs dos construtos de CAR foram preparados por transcrição in vitro usando o kit mMESSAGE/mMACHINE T7 (Thermo Fisher AM1344 e AM1350). Especificamente, os plasmídeos purificados foram submetidos às reações de transcrição in vitro e incubação, de acordo com as instruções do Kit. Os RNAs transcritos (IVT-RNAs) foram, então, purificados usando-se o RNeasy Mini kit (QIAGEN, Cat#75144). Finalmente, os IVT-RNAs foram liquefeitos a 10 μL/frasco, armazenados a - 80 ℃ imediatamente ou usados diretamente para a preparação de CAR-T.
[00527] A mistura de plasmídeo de empacotamento de lentivírus incluindo pMDLg.pRRE (Addgene#12251), pRSV-REV (Addgene#12253) e pMD2.G (Addgene#12259) foi pré-misturada com os vetores que expressam
239 / 309 construtos de CAR em uma razão pré-otimizada com polieterimida (PEI), em seguida, incubada a 25°C durante 5 minutos. Em seguida, as células HEK293 foram adicionadas à mistura de transfecção. Depois disso, as células foram incubadas de um dia para outro em um incubador celular com 5% de CO2, a 37°C. Os sobrenadantes foram coletados após centrifugação a 4°C e 500 g, por 10 minutos, e filtrados através de um filtro de PES com 0,45 μm, seguido de ultracentrifugação para concentração de lentivírus. Em seguida, os sobrenadantes foram cuidadosamente descartados e os pellets de lentivírus foram cuidadosamente lavados com DPBS pré-resfriado. Os lentivírus foram adequadamente liquefeitos e armazenados a -80°C. A titulação do lentivírus foi determinada por p24 com base no kit HTRF desenvolvido pela GenScript. Preparação do PBMC
[00528] Os leucócitos foram coletados de doadores saudáveis por aférese e a concentração celular foi ajustada em 5×106 células/ml em meio de R10. Os leucócitos foram, então, misturados com uma solução de NaCl a 0,9% na proporção de 1:1 (v/v). O meio de 3 ml de Lymphoprep foi adicionado ao tubo da centrífuga de 15 ml, e 6 ml de mistura de linfócitos diluídos foi lentamente disposto em camada na parte superior do meio de Lymphoprep. A mistura de linfócitos foi centrifugada a 800 g por 30 minutos sem pausas a 20°C. A camada leucocitária de linfócitos foi então coletada com uma pipeta de 200 μL. A fração colhida foi diluída pelo menos 6 vezes com NaCl a 0,9% ou R10 para reduzir a densidade da solução. A fração colhida foi, então, centrifugada a 250 g durante 10 minutos a 20°C. O sobrenadante foi aspirado completamente e 10 ml de R10 foram adicionados ao pellet celular para ressuspender o mesmo. A mistura foi novamente centrifugada a 250 g durante 10 minutos a 20°C. O sobrenadante foi aspirado novamente. 2 ml de R10 pré-aquecido a 37°C com 300 UI/ml de IL-2 foram adicionados ao pellet celular e este foi ressuspenso cuidadosamente. O número de células foi determinado após peneiragem com Trypan Bue e esta
240 / 309 amosta de PBMC estava pronta para experimentos posteriores. Purificação da célula T
[00529] As células T humanas foram purificadas a partir de PBMCs usando o kit de isolamento de células T Miltenyi Pan (Cat#130-096-535), seguindo o protocolo do fabricante, conforme descrito abaixo. O número de células foi primeiro determinado e a suspensão de células foi centrifugada a 300 g durante 10 minutos. O sobrenadante foi então aspirado completamente e os pellets celulares foram ressuspensos em tampão de 40 μL por 10⁷ de células totais. 10 μL de Pan T Cell Biotin-Antibody Cocktail foram adicionados por 10⁷ de células totais, bem misturados e incubados por cerca de 5 minutos no refrigerador (2~8°C). 30 μL de tampão foram então adicionados por 10⁷ de células. 20 μL de Pan T Cell MicroBead Cocktail foram adicionados por 10⁷ de células. A mistura de suspensão celular foi bem misturada e incubada por mais 10 minutos no refrigerador (2~8°C). Um mínimo de 500 μL é necessário para a separação magnética. Para a separação magnética, uma coluna de LS foi colocada no campo magnético de um separador adequado de MACS. A coluna foi preparada, lavando-se com 3 ml de tampão. A suspensão celular foi então aplicada na coluna, e o fluxo contínuo contendo as células não marcadas foi coletado, o que representou as frações de células T enriquecidas. Células T adicionais foram coletadas por lavagem da coluna com 3 ml de tampão e a coleta de células não marcadas que passaram foi realizada. Tais células não marcadas novamente representaram as células T enriquecidas e foram combinadas com o fluxo da etapa anterior. As células T enriquecidas agrupadas foram então centrifugadas e ressuspensas em R10+300 UI/ml de IL-2.
[00530] As células T preparadas foram posteriormente pré-ativadas por 48-96 horas com o kit de ativação/expansão de células T humanas (Miltenyi#130-091-441), de acordo com o protocolo do fabricante, em que partículas MACSiBead anti-CD3/CD28 foram adicionadas em uma razão de
241 / 309 esfera para célula de 1:2. Construção de linha celular-alvo
[00531] As células-alvo foram desenvolvidas internamente com base em linhagens celulares de câncer gástrico, incluindo KATOIII (ATCC#HTB- 103), NUGC4 (JCRB0834), MKN45 (JCRB0254) e uma linhagem celular de câncer pancreático PANC1 (ATCC#CRL-1469TM). A linhagem celular KatoIII.18.2.Luc foi desenvolvida para co-expressar a Claudina 18.2 ORF humana (NM_001002026.2) e a luciferase de pirilampo usando-se um peptídeo 2A. A linhagem celular KatoIII.18.1.Luc foi desenvolvida para co- expressar a Claudina 18.1 ORF humana (NM_016369.3) e a luciferase de pirilampo usando-se um peptídeo 2A. A linhagem celular KatoIII.Luc foi desenvolvida para superexpressar apenas a luciferase de pirilampo. A expressão do gene-alvo foi validada por PCR semi-quantitativo. Expressão de células CAR-T manipuladas
[00532] As células T pré-ativadas foram eletroporadas com CAR IVT- RNAs. As células T pré-ativadas foram colhidas por centrifugação a 300 g durante 10 minutos em temperatura ambiente. Depois de remover completamente o sobrenadante, os pellets celulares foram ressuspensos em tampão de Celetrix 103 e a concentração de células foi avaliada por coloração com azul de tripano e aliquotada em 4 ~ 6 milhões de células T humanas por 120 μL. A mistura de eletroporação foi preparada adicionando-se 10 μg de CAR-mRNA a cada alíquota de células T pré-ativadas. A eletroporação foi então realizada a uma voltagem e pulso pré-otimizados (820V/20ms) usando- se o aparelho para eletroporação Celetrix. Logo depois do processo de eletroporação, as células foram transferidas para um novo meio pré-aquecido e cultivadas de um dia para outro em um incubador a 37°C com 5% de CO2 até a análise.
[00533] No dia 6 até o dia 9 pós-transdução, as células T transduzidas foram colhidas. Os níveis de expressão de CAR foram avaliados por
242 / 309 citometria de fluxo. Resumindo, 1x106 de células T eletroporadas foram coletadas de cada grupo, em seguida, incubadas com anticorpos Fab anti- camundongo de cabra marcados com FITC (Abcam, cat No. #ab98658) por 0,5~1 hora a 4 ℃. Depois da conclusão da incubação, as células foram colhidas e lavadas com DPBS, em seguida, centrifugadas a 300 g por 10 minutos a 20°C. O nível de expressão de cada célula CAR-T preparada foi lido no Attune NxT Flow Cytometer (Thermo Fisher) e os dados foram mostrados na Tabela 12. UnT representaram células T não transduzidas com CAR e 175DX representaram CAR contendo scFv de IMAB362 (SEQ ID NO: 336) usados como controle positivo. Tabela 12. Nível de expressão CAR % DE % DE % DE CÓDIGO CAR-
EXPRESSÃO CÓDIGO CAR EXPRESSÃO CÓDIGO CAR EXPRESSÃO T/UNT
DE CAR DE CAR DE CAR UNT 2,71% UNT 1,63% UNT 1,65% C182001 20,30% C182003 88,30% C182003 95,60% C182002 97,30% C182006 76,60% C182014 57,60% C182003 98,10% C182007 72,90% C182015 94,90% C182004 96,30% C182008 39,10% C182016 94,20% C182005 97,40% C182009 15,70% C182017 5,33% 175DX 97% C182010 10,70% C182018 95,90% C182011 72,90% C182019 91,80% C182012 22,70% C182020 94,00% C182013 3,15% C182021 90,90% 175DX 63,10% 175DX 77,6% UNT 1,69% UNT 1,69% C182003 92,00% C182003 96,70% C182022 86% C182030 95,50% C182023 83,80% C182031 16,30% C182024 89,40% C182032 10,40% C182025 90,50% C182033 84,30% C182026 94,00% C182034 80,20% C182027 8,75% C182035 96,10% C182028 89,30% C182036 9,79% C182029 48,80% C182037 52,60% 175DX 81,80% 175DX 93% Ensaio de citotoxicidade
[00534] O ensaio de citotoxicidade foi realizado depois que as células CAR-T foram co-incubadas com células tumorais em razões de células efetoras (CAR-T) para células-alvo (E: T) 20:1, 5:1 e 1:1 durante 20-24 horas. Para testar a citotoxicidade de CAR-T em células tumorais, os reagentes de ensaio de luciferase One-glo luminescente (Promega#E6110) foram preparados de acordo com o protocolo do fabricante e adicionados às células
243 / 309 co-cultivadas, para detectar a atividade da luciferase no poço que foi correlacionada ao número de células-alvo viáveis no poço.
[00535] A citotoxicidade específica foi calculada pela fórmula: % de citotoxicidade específica = 100% ⅹ (1-(RLUamostra-RLUmin)/(RLUUnT- RLUmin)). A RLUamostra representou a atividade de luciferase conforme medida no poço com células CAR-T tendo CARs específicos da invenção. RLUmin representava a atividade de luciferase conforme determinada no poço adicionado com Triton X-100 no final da concentração de 1%, quando o ensaio de citotoxicidade foi iniciado, e RLUUnT está relacionado à atividade de luciferase conforme determinado no poço com células T não transduzidas com CARs.
[00536] Conforme mostrado na FIG.10, as células T com CARs de C182002 a C182005 induziram potente destruição de células CHO.18.2.Luc superexpressando Claudina18.2 humana, em níveis citotóxicos comparáveis conforme comparação de células T com 175DX. As células T com CAR C182001 induziram baixo nível de citotoxicidade em células CHO.18.2.Luc, talvez devido ao nível de expressão de CAR relativamente baixo (20,3% se comparado a mais de 90% por outros clones). As células T com esses CARs de anti-Claudina18.2 induziram quase nenhum efeito destruidor em células de super-expressão de Claudina 18.1 humana (CHO.18.1.Luc).
[00537] Além disso, conforme ilustrado na FIG.11, as células T com CARs C182006 a C182037 de anti-Claudina 18.2 mostraram potente citotoxicidade em células Katolll.18.2.Luc e efeitos mais robustos de citotoxicidade, em células Katolll.18.2.Luc, foram detectados em uma razão maior de E/T. Embora a razão de E/T em 20:1 parecesse ser uma condição saturada para os ensaios de citotoxicidade, as células T com vários CARs na razão E/T mais baixa (5:1) induziram níveis significativamente mais altos de citotoxicidade em KatoIII.18.2.Luc do que aquelas com 175DX, incluindo células T com CARs C182003, C182014 a C182021 e C182032 a C182034
244 / 309 (testados por ANOVA de duas vias). As células T com outros CARs induziram citotoxicidades em níveis comparáveis conforme comparação de células com 175DX.
[00538] A citotoxicidade de células CAR-T de anti-Claudina 18.2 também foi avaliada em linhagens celulares KATOIII.18.2.Luc, KATOIII.18.1.Luc e KATOIII.Luc, respectivamente, na razão E/T de 5:1. Conforme mostrado na FIG.12, as células T com os CARs anti-Claudina18.2 da invenção induziram níveis semelhantes de citotoxicidade em células KATOIII.18.2.Luc em comparação com aquelas com 175DX, mas induziram efeitos citotóxicos significativamente mais robustos em KATOIII.18.1.Luc e células KATOIII.Luc do que aquelas com 175DX. Os resultados sugeriram que os CARs da invenção podem ser sensíveis às células com baixos níveis de expressão de Claudina 18.2 humana. Mais importante, a citotoxicidade em KATOIII.Luc não foi mais forte do que em células KATOIII.18.1.Luc, sugerindo que os tais efeitos citotóxicos foram específicos para Claudina 18.2 humana.
SEQUÊNCIAS
[00539] Algumas sequências da divulgação estão listadas abaixo, com CDRs sublinhadas. GRUPO 1 260G9E8-VH (SEQ ID NO: 1)
QADLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFASHNMHWVKQTPGQGL
EWIGYIYPGNGGTKYNQKFTGKATLTADTSSSTAYMQITSLTSEDSAV YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA260G9E8-VL (SEQ ID NO: 2)
DIVMTQSPSSLTEKAGEKVSMRCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQADDLAVYYCQ
NDYMFPFTFGAGTKLELK 252F1B10-VH (SEQ ID NO: 3)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL
245 / 309
EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQINSLTSEDSA
VYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 252F1B10-VL (SEQ ID NO: 4)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYRYPFTFGAGTKLELK 257B1G9-VH (SEQ ID NO: 5)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 257B1G9-VL (SEQ ID NO: 6)
DIVMTQSPSSLTERAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYRYPFTFGAGTKLELK 265E6G2-VH (SEQ ID NO: 7)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSYNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 265E6G2-VL (SEQ ID NO: 8)
DLVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNIQAEDLAVYYC
QNDYSYPLPFGAGTKLELR 250F4G4-VH (SEQ ID NO: 9)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGRTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 250F4G4-VL (SEQ ID NO: 10)
DIVMTQSPSSLTEKVGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
246 / 309
NDYWYPFTFGAGTKLELK 262C7C10-VH (SEQ ID NO: 11)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTNYNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGGNYYNQKFKGKATLTADTSSITAYMQISSLTSEDSAVY
FCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 262C7C10-VL (SEQ ID NO: 12)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYCQ
NDYYYPLTFGAGTKLELK 232C5E3-VH (SEQ ID NO: 13)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNIHWIKQTPGKGLE WIGYIYPGNGGTNYNQKFKAKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 232C5E3-VL (SEQ ID NO: 14)
DIMMTQSPSSLTETAGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NGYRFPFTFGAGTKLELK 232C5E3-VH1 humanizado (SEQ ID NO: 348)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSHNIHWVRQAPGQRLE WMGYIYPGNGGTNYNQKFKARVTITRDTSASTAYMELSSLRSEDTAV
YYCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSS 232C5E3-VH1.1 humanizado (SEQ ID NO: 349)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSHNIHWVRQAPGQRLE WIGYIYPGNGGTNYNQKFKARATITADTSASTAYMELSSLRSEDTAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSS 232C5E3-VH1.2 humanizado (SEQ ID NO: 350)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSHNIHWIKQAPGQRLE WMGYIYPGNGGTNYNQKFKARVTITADTSASTAYMELSSLRSEDTAV YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSS
247 / 309 232C5E3-VH1.3 humanizado (SEQ ID NO: 351)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSHNIHWVRQAPGQRLE WIGYIYPGNGGTNYNQKFKARVTITADTSASTAYMELSSLRSEDTAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSS 232C5E3-VH1.4 humanizado (SEQ ID NO: 352)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSHNIHWIKQAPGQRLE WIGYIYPGNGGTNYNQKFKARATITADTSASTAYMELSSLRSEDTAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSS 232C5E3-VL1 humanizado (SEQ ID NO: 353)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NGYRFPFTFGQGTKLEIK 232C5E3-VL1.1 humanizado (SEQ ID NO: 354)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NGYRFPFTFGQGTKLEIK 252E7C9-VH (SEQ ID NO: 15)
QTYLQQSGAELVRSGASVKMSCRTSGYSFTSHNMHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGGSYYNQKFKGKAILTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAVY
FCTRDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 252E7C9-VL (SEQ ID NO: 16)
DVVMTQSPSSLTEKTGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSLQTEDLAIYYCQ
NNFRYPFTFGAGTKLELK 257G7B9-VH (SEQ ID NO: 17)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNLHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGNTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 257G7B9-VL (SEQ ID NO: 18)
248 / 309
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYWFPFTFGAGTKLELK 241H10A1-VH (SEQ ID NO: 19)
QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSFGINWLRQRPEQGLEW IGWIFPGDGNSKYNENFKGKATLTTDKSSSTAYMQVTRLTSEDSAVY
FCARFYYGNSFANWGQGTLVTVSA 241H10A1-VL (SEQ ID NO: 20)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWAATRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYFYPFTFGGGTKLELK 273C10E5-VH (SEQ ID NO: 21)
QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSFGINWLRQRPEQGLEW IGWIFPGDGNSKYNENFKGKATLTTDKSSSTAYMQVTRLTSEDSAVY
FCARFYYGNSFANWGQGTLVTVSA 273C10E5-VL (SEQ ID NO: 22)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWAATRESGVPDRFAGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYFYPFTFGAGTKLELK 240F8G2-VH (SEQ ID NO: 281)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTNYNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGGNYYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 240F8G2 –VL (SEQ ID NO: 282)
DIVVTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYCQN
DYYYPLTFGAGTKLELK 234A10F7-VH(SEQ ID NO:495)
QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSFGINWLRQRPEQGLEW
249 / 309
IGWIFPGDGNSKYNENFKGKATLTTDKSSSTAYMQLTRLTSEDSAVYF
CARFYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 234A10F7-VL (SEQ ID NO:496)
DIVMTQSPSSLTVTTGQKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWAATRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYFYPFTFGAGTKLELK 240D6F5-VH (SEQ ID NO:497)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADPSSSTAYMQINSLTSEDSA
VYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 240D6F5-VL (SEQ ID NO:498)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYRYPFTFGAGTKLELK 242H12D6-VH (SEQ ID NO:499)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQINSLTSEDSA
VYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 242H12D6-VL (SEQ ID NO:500)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYRYPFTFGAGTKLELK 243B4F2-VH (SEQ ID NO:501)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNLHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGNTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 243B4F2-VL (SEQ ID NO:502)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
250 / 309
NNYWFPFTFGAGTKLELK 243B4F7-VH (SEQ ID NO:503)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNLHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGNTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 243B4F7-VL (SEQ ID NO:504)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYWFPFTFGAGTKLELK 243F6D2-VH (SEQ ID NO:505)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCRASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTYYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 243F6D2-VL (SEQ ID NO:506)
DVVMTQSPSSLTEKTGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSLQTEDLAVYYC
QNNYRYPFTFGAGTKLELK 250F4G1-VH (SEQ ID NO:507)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGRTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 250F4G1-VL (SEQ ID NO:508)
DIVMTQSPSSLTEKVGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYWYPFTFGAGTKLELK 257F1E11-VH (SEQ ID NO:509)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNIHWVKQTPRQGLE WIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA
251 / 309 257F1E11-VL (SEQ ID NO:510)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYCQN
DYWYPFTFGAGTKLELK 257G7F7-VH (SEQ ID NO:511)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNLHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGNTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 257G7F7-VL (SEQ ID NO:512)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYWFPFTFGAGTKLELK 260F8A6-VH (SEQ ID NO:513)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCRASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGNTYYNQKFKGKATLTADTSSNTAYMQINSLTSEDSA
VYFCVRDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 260F8A6-VL (SEQ ID NO:514)
DVVMTQSPSSLTEKTGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSLQTEDLAVYYCQ
NNYMYPFTFGAGTKLELK 268D7H9-VH (SEQ ID NO:515)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTNYNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGGNYYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 268D7H9-VL (SEQ ID NO:516)
DIAMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYCQ
NDYYYPLTFGAGTTLELK 271B1B6-VH (SEQ ID NO:517)
252 / 309
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTNYNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGGNYYNQKFKGKATLTADTSSITAYMQISSLTSEDSAVY
FCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 271B1B6-VL (SEQ ID NO:518)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYCQ
NDYYYPLTFGAGTKLELK 275H9A2-VH (SEQ ID NO:519)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCRASGYSFTSHNMHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGGSYYNQKFKGKAILTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAVY
FCTRDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 275H9A2-VL (SEQ ID NO:520)
DVVMTQSPSSLTEKTGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSLQTEDLAVYYC
QNNFRYPFTFGAGTKLELK GRUPO 2 185F2G12-VH (SEQ ID NO: 23)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSYNMHWVRQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYSQKFKGKASLTADTSSTTAYMQISSLTSEDSAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSA 185F2G12-VL (SEQ ID NO: 24)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTLSCKSSQSLFNTGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIFRASTRESGVPDRFTGSGFGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQN
DFSYPLTFGAGTKLELK 194D3B2-VH (SEQ ID NO: 25)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYPFTSYNMHWVKQTPGQGL EWVGYIYPGNGGTNYNQKFRDKATLTADTSSSTAYMQISRLTSDDSA
VYFCLTGRGFAYWGQGTLVTVSA 194D3B2-VL (SEQ ID NO: 26)
253 / 309
DIVMTQSPSSLIVTPGERVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQN
DYSYPLTFGIGTKLELK 207F8G5-VH (SEQ ID NO: 27)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGFTFTSYNIHWVKQTPGQGLE WIGYISPGNGGSNYNLKFKDKATLTSATSSSTAYMQISSLTSEDSAVY
FCATGRGFAYWGQGTLVTVSA 207F8G5-VL (SEQ ID NO: 28)
DIVMTQSPSSLTVTPGEKVTMSCKSSQSLFNSGNQKNYLIWYQQKPG QPPKLLIYRASTRDSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQAEDLAIYYCQN
DYSYPLTFGAGTKLELK 207F8G5-VH1 humanizado (SEQ ID NO: 337)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFTSYNIHWVRQAPGQGLE WMGYISPGNGGSNYNLKFKDRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAV
YYCARGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VH1.1 humanizado (SEQ ID NO: 338)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFTSYNIHWVKQAPGQGLE WMGYISPGNGGSNYNLKFKDRVTMTSDTSISTAYMELSRLRSDDTAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VH1.2 humanizado (SEQ ID NO: 339)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFTSYNIHWVKQAPGQGLE WIGYISPGNGGSNYNLKFKDRATMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VH1.3 humanizado (SEQ ID NO: 340)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFTSYNIHWVRQAPGQGLE WIGYISPGNGGSNYNLKFKDRATMTSDTSISTAYMELSRLRSDDTAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VH1.4 humanizado (SEQ ID NO: 341)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFTSYNIHWVKQAPGQGLE
254 / 309
WIGYISPGNGGSNYNLKFKDRATMTSDTSISTAYMELSRLRSDDTAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VH1.5 humanizado (SEQ ID NO: 342)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFTSYNIHWVKQAPGQGLE WMGYISPGNGGSNYNLKFKDRVTLTSDTSISTAYMELSRLRSDDTAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VH1.6 humanizado (SEQ ID NO: 343)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFTSYNIHWVKQAPGQGLE WIGYISPGNGGSNYNLKFKDRATMTSDTSSSTAYMELSRLRSDDTAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VH1.7 humanizado (SEQ ID NO: 344)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFTSYNIHWVKQAPGQGLE WMGYISPGNGGSNYNLKFKDRVTLTSDTSISTAYMELSRLRSDDTAV
YYCATGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VH1.8 humanizado (SEQ ID NO: 345)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKMSCKASGFTFTSYNIHWVKQAPGQGLE WIGYISPGNGGSNYNLKFKDRATLTSDTSSSTAYMELSRLRSDDTAVY
FCATGRGFAYWGQGTLVTVSS 207F8G5-VL1 humanizado (SEQ ID NO: 346)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLFNSGNQKNYLIWYQQKPGQ PPKLLIYRASTRDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQN
DYSYPLTFGGGTKLEIK 207F8G5-VL1.1 humanizado (SEQ ID NO: 347)
DIVMTQSPDSLAVSPGERATMSCKSSQSLFNSGNQKNYLIWYQQKPG QPPKLLIYRASTRDSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NDYSYPLTFGGGTKLEIK 222B6G5-VH (SEQ ID NO: 29)
QTYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSYNIHWVKQTPGQGLE WIGYISPGNGGTYYNLKFKDKATLTTATSSSTAYMQISSLTSEDSAVY
255 / 309
FCATGRGFAYWGQGTLVTVSA 222B6G5-VL (SEQ ID NO: 30)
DIVMTQSPSSLTVTPGEKVTMSCKSSQSLFNSGNQKNYLIWYQQKPG QPPKLLIYRASTRDSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQAEDLAVYYCQ
NDYSYPLTFGAGTKLELK 182D10F1-VH (SEQ ID NO: 31)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFSSYNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCLTGRGFTYWGQGTLVTVSA 182D10F1-VL (SEQ ID NO: 32)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYSYPLTFGVGTKLELK 234B9D4-VH (SEQ ID NO: 33)
EIQLQQSGPDLMKPGSSVKISCTASGYSFTSYYIHWVKQSHGKTLEWI GYIDPFNGGTRYNQKFEGKAALTVDKSSTTAYMHLTSLTSDDSAVYY
CASLRFFTYWGQGTLVTVSA 234B9D4-VL (SEQ ID NO: 34)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMTCKSSQSLLNSGNQENYLTWYQQKPG QPPKLLISRASTRQSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQN
DYSYPLTFGAGTKLELK 253E4F7-VH (SEQ ID NO: 35)
EIQLQQSGPELMKPGASVKMSCKASGYSFTSYYIHWVKQSHGKSLEW IGYIDPFNGGTRYNQKFEGKATLTVDKSSTTAYMHLSSLTSEDSTVYY
CASLRFLAYWGQGTLVTVSA 253E4F7-VL (SEQ ID NO: 36)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMTCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKVLISRASTRQSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ NDYSYPLTFGAGTKLELK
256 / 309 198F10B8-VH (SEQ ID NO: 263)
QAYLQQSGAELVRSGASVRMSCKASGYTFSSYNMHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGGTNYNQKFKDKATLTADTSSSTAFIQISSLTSEDSAVYF
CLTGRGFAYWGQGTLVTVSA 198F10B8–VL (SEQ ID NO: 264)
DIVMTQSPSSLTVTAGERVTMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQN
DYSYPLTFGVGTKLELK 213B10A4-VH (SEQ ID NO: 265)
QAYVQQSGAELVRSGASVKMSCRASGYTFTSYNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTYYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSA 213B10A4-VL (SEQ ID NO: 266)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGFGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQN
DYSYPLTFGAGTKLELK GRUPO 3 370E2B12C3-VH (SEQ ID NO: 37)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTTYGVHWVRQPPGKGLEW LGVIWAGGSTNYNSALMSRVSINKDNSKSQVFIKMNSLQADDTALYY
CARAAYYGNGLDYWGQGTTLTVSS 370E2B12C3-VL (SEQ ID NO: 38)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTGESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYFCQ
NAYFYPFTFGGGTKLEIK 370E2B12C3-VH1 humanizado (SEQ ID NO: 372)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTTYGVHWIRQPPGKGLEWI GVIWAGGSTNYNSALMSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYC ARAAYYGNGLDYWGQGTMVTVSS
257 / 309 370E2B12C3-VH2 humanizado (SEQ ID NO: 373)
EVQLVESGGGLIQPGGSLRLSCAASGFSLTTYGVHWVRQAPGKGLEW VSVIWAGGSTNYNSALMSRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYY
CARAAYYGNGLDYWGQGTLVTVSS 370E2B12C3-VH3 humanizado (SEQ ID NO: 374)
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFSLTTYGVHWVRQAPGKGLE WVAVIWAGGSTNYNSALMSRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAV
YYCARAAYYGNGLDYWGQGTMVTVSS 370E2B12C3-VL1 humanizado (SEQ ID NO: 375)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTGESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NAYFYPFTFGGGTKLEIK 370E2B12C3-VL2 humanizado (SEQ ID NO: 376)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTGESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NAYFYPFTFGGGTKLEIK 370E2B12C3-VL3 humanizado (SEQ ID NO: 377)
DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKSSQTLLNSGNQKNYLTWFQQRPG QSPRRLIYWASTGESGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCQ
NAYFYPFTFGGGTKVEIK 237D2A4-VH (SEQ ID NO: 39)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTSYGVSWVRQPPGKGLEWL GVIWGDGSTNYHSTLISRLRISKDKSKSQVFLKLNSLQTDDTATYYCA
KAGRGNALDYWGQGTSVTVSS 237D2A4-VL (SEQ ID NO: 40)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYSFPLTFGAGTKLELK 237D2A4-VH1 humanizado (SEQ ID NO: 355)
258 / 309
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVSWIRQPPGKGLEWI GVIWGDGSTNYHSTLISRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCA
RAGRGNALDYWGQGTLVTVSS 237D2A4-VH1.1 humanizado (SEQ ID NO: 356)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVSWIRQPPGKGLEWI GVIWGDGSTNYHSTLISRVTISKDTSKSQFSLKLSSVTAADTAVYYCA
KAGRGNALDYWGQGTLVTVSS 237D2A4-VH1.2 humanizado (SEQ ID NO: 357)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVSWIRQPPGKGLEWI GVIWGDGSTNYHSTLISRVTISKDTSKNQVFLKLSSVTAADTAVYYCA
KAGRGNALDYWGQGTLVTVSS 237D2A4-VH1.3 humanizado (SEQ ID NO: 358)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVSWIRQPPGKGLEWI GVIWGDGSTNYHSTLISRVTISKDTSKSQVFLKLSSVTAADTAVYYCA
KAGRGNALDYWGQGTLVTVSS 237D2A4-VH1.4 humanizado (SEQ ID NO: 359)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVSWVRQPPGKGLEWI GVIWGDGSTNYHSTLISRVTISKDTSKSQFSLKLSSVTAADTAVYYCA
KAGRGNALDYWGQGTLVTVSS 237D2A4-VH1.5 humanizado (SEQ ID NO: 360)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVSWVRQPPGKGLEW LGVIWGDGSTNYHSTLISRLTISKDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYC
AKAGRGNALDYWGQGTLVTVSS 237D2A4-VH1.6 humanizado (SEQ ID NO: 361)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVSWVRQPPGKGLEW LGVIWGDGSTNYHSTLISRLTISKDTSKSQFSLKLSSVTAADTAVYYC
AKAGRGNALDYWGQGTLVTVSS 237D2A4-VH1.7 humanizado (SEQ ID NO: 362)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVSWVRQPPGKGLEW
259 / 309
LGVIWGDGSTNYHSTLISRLTISKDTSKSQVFLKLSSVTAADTAVYYC
AKAGRGNALDYWGQGTLVTVSS 237D2A4-VL1 humanizado (SEQ ID NO: 363)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NDYSFPLTFGGGTKLEIK 237D2A4-VL1.1 humanizado (SEQ ID NO: 364)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NDYSFPLTFGGGTKLEIK 203A6C9-VH (SEQ ID NO: 41)
QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTRYGVHWVRQSPGKGLEW LGVIWSGGNTDYNAAFISRLNIRKDNSKSQVFFKMNSLKPNDTAIYYC
ARAAYFGNSFDYWGQGTTLTVSS 203A6C9-VL (SEQ ID NO: 42)
DIVMTQSPSSLPVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRDSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYIYPLTFGAGTKLELK 201F4H6-VH (SEQ ID NO: 43)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTSYGVSWVRQPPGKGLECL GVIWAGGNTNYNSALMSRLSISKDKSKSQVFLKMNSLQTDDTAMYY
CARVYYGNAMDYWGQGTSVTVSS 201F4H6-VL (SEQ ID NO: 44)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKSYLTWYQQRPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYFCQ
NVYFFPFTFGSGTKLETK 200A4H8-VH (SEQ ID NO: 521)
QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTRYGVHWVRQSPGKGLEW LGVIWSGGNTDYNAAFISRLNIRKDNSKSQVFFKMNSLKPNDTAIYYC
260 / 309
ARAAYFGNSFDYWGQGTTLTVSS 200A4H8-VL (SEQ ID NO: 522)
DIVMTQSPSSLPVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRDSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYIYPLTFGAGTKLELK 203A6D5-VH (SEQ ID NO: 523)
QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTRYGVHWVRQSPGKGLEW LGVIWSGGNTDYNAAFISRLNIRKDNSKSQVFFKMNSLKPNDTAIYYC
ARAAYFGNSFDYWGQGTTLTVSS 203A6D5-VL (SEQ ID NO: 524)
DIVMTQSPSSLPVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRDSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYIYPLTFGAGTKLELK 248G8E8-VH (SEQ ID NO: 525)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTTYGVSWVRQPPGKGLEWL GVIWGDGSTNYHSTLISRLRISKDKSKSQVFLKLNSLQTDDTATYYCA
KAGRGNALDYWGQGTSVTVSS 248G8E8-VL (SEQ ID NO: 526)
DIVLTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYSFPLTFGAGTKLELK GRUPO 4 429H6C5-VH (SEQ ID NO: 47)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKELE WVAYISSGSSTIYYAHTVKGRFTISRDNPKNTLFLRMTSLGSEDTAMY
YCVRFYYGNSFVNWGQGTLVTVSA 429H6C5-VL (SEQ ID NO: 48)
DIVMTQSPSSLTATAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKMLIYWASTRESGVPDRFAGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
261 / 309
NAYIYPLTFGAGTRLELK 407D8G1-VH (SEQ ID NO: 49)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 407D8G1-VL (SEQ ID NO: 50)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 419B5G9-VH (SEQ ID NO: 51)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSTFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISGGSTTIFYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSVRSEDTAMY
YCARFYYGNSFAYWGPGTLVTVST 419B5G9-VL (SEQ ID NO: 52)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKMLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYSYPLTFGAGTKLELK 393C2C5-VH (SEQ ID NO: 53)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCATFYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 393C2C5-VL (SEQ ID NO: 54)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKSG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYSYPVTFGSGTKVELK 412B6E4-VH (SEQ ID NO: 55)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGVHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSTIYYAHSVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLGSEDTATY YCARFYYGNSFAYWGQGTLVTVSA
262 / 309 412B6E4-VL (SEQ ID NO: 56)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKMLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYTYPLTFGAGTRLELK 412B6E4-VH1 humanizado (SEQ ID NO: 383)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGVHWVRQAPGKGLE WVSYISSGSSTIYYAHSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVY
YCARFYYGNSFAYWGQGTLVTVSS 412B6E4-VH1.1 humanizado (SEQ ID NO: 384)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFGVHWVRQAPGKGLE WVAYISSGSSTIYYAHSVKGRFTISRDNAKNSLFLQMNSLRAEDTAVY
YCARFYYGNSFAYWGQGTLVTVSS 412B6E4-VH1.2 humanizado (SEQ ID NO: 385)
EVQLVESGGGLVQPGGSRRLSCAASGFTFSSFGVHWVRQAPGKGLE WVSYISSGSSTIYYAHSVKGRFTISRDNAKNTLFLQMNSLRAEDTAVY
YCARFYYGNSFAYWGQGTLVTVSS 412B6E4-VL1 humanizado (SEQ ID NO: 386)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NAYTYPLTFGQGTKLEIK 412B6E4-VL1.1 humanizado (SEQ ID NO: 387)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKMLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NAYTYPLTFGQGTKLEIK 414A5F7-VH (SEQ ID NO: 57)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARIYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 414A5F7-VL (SEQ ID NO: 58)
263 / 309
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVAMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLLYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYC
QNAYYYPLTFGSGTKLELK 418D2F9-VH (SEQ ID NO: 59)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYINTGSSTIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
YCARIYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 418D2F9-VL (SEQ ID NO: 60)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYSYPLTFGAGTKLELK 410H6H3-VH (SEQ ID NO: 61)
DVLLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSSGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSNTIYYADTLKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
YCARIYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 410H6H3-VL (SEQ ID NO: 62)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVIMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKMLIYWASTRESGVPDRFRGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYYYPLTFGTGTKLALK 410H6H3-VH1 humanizado (SEQ ID NO: 378)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSSGMHWVRQAPGKGLE WVSYISSGSNTIYYADTLKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAV
YYCARIYYGNSFVYWGQGTLVTVSS 410H6H3-VH1.1 humanizado (SEQ ID NO: 379)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSSGMHWVRQAPGKGLE WVAYISSGSNTIYYADTLKGRFTISRDNAKNSLFLQMNSLRAEDTAV
YYCARIYYGNSFVYWGQGTLVTVSS 410H6H3-VH1.2 humanizado (SEQ ID NO: 380)
EVQLVESGGGLVQPGGSRRLSCAASGFTFSSSGMHWVRQAPGKGLE
264 / 309
WVSYISSGSNTIYYADTLKGRFTISRDNAKNTLFLQMNSLRAEDTAVY
YCARIYYGNSFVYWGQGTLVTVSS 410H6H3-VL1 humanizado (SEQ ID NO: 381)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NNYYYPLTFGQGTKLEIK 410H6H3-VL1.1 humanizado (SEQ ID NO: 382)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKMLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NNYYYPLTFGQGTKLEIK 391F1G2-VH (SEQ ID NO:527)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARIYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 391F1G2-VL (SEQ ID NO:528)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVAMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLLYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYC
QNAYYYPLTFGSGTKLELK 406F11G8-VH (SEQ ID NO:529)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNSKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARIYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 406F11G8-VL (SEQ ID NO:530)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVAMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYC
QNAYYYPLTFGSGTKLELK 410A9A9-VH (SEQ ID NO:531)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
265 / 309
FCATFYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 410A9A9-VL (SEQ ID NO:532)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKSG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYSYPVTFGSGTKVELK 410D9G2-VH (SEQ ID NO:533)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 410D9G2-VL (SEQ ID NO:534)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 416F12F3-VH (SEQ ID NO:535)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSTIYYAHSVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLGSEDTAMY
YCARFYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 416F12F3-VL (SEQ ID NO:536)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTLSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKMLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYTYPLTFGAGTRLELK 420H3H9-VH (SEQ ID NO:537)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSTIYYAHSVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLGSEDTAMY
YCARFYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 420H3H9-VL (SEQ ID NO:538)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTLSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKMLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLADYYCQ NAYTYPLTFGAGTRLELK
266 / 309 411G12G1-VH (SEQ ID NO:539)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQAPEKGLE WVAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 411G12G1-VL (SEQ ID NO:540)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYSFPLTFGAGTKLELK 429G4E9-VH (SEQ ID NO:541)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCATFYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 429G4E9-VL (SEQ ID NO:542)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKSG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYSYPVTFGSGTKVELK 391H11H3-VH (SEQ ID NO:543)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 391H11H3-VL (SEQ ID NO:544)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 395B3C11-VH (SEQ ID NO:545)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 395B3C11-VL (SEQ ID NO:546)
267 / 309
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 406E1H7-VH (SEQ ID NO:547)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 406E1H7-VL (SEQ ID NO:548)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 414H6G2-VH (SEQ ID NO:549)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTAEKGLE WVAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 414H6G2-VL (SEQ ID NO:550)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 420G10G3-VH (SEQ ID NO:551)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTAEKGLE WVAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 420G10G3-VL (SEQ ID NO:552)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 422E8F9-VH (SEQ ID NO:553)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW
268 / 309
VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 422E8F9-VL (SEQ ID NO:554)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 422F4B6-VH (SEQ ID NO:555)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFSFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFIISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARIYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 422F4B6-VL (SEQ ID NO:556)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYSYPLTFGSGTKLELK 425B3D5-VH (SEQ ID NO:557)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 425B3D5-VL (SEQ ID NO:558)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 425C6D3-VH (SEQ ID NO:559)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 425C6D3-VL (SEQ ID NO:560)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
269 / 309
NAYSFPLTFGAGTKLELK 426H6E11-VH (SEQ ID NO:561)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 426H6E11-VL (SEQ ID NO:562)
DIVMTQFPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQTLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ NAYSFPLTFGAGTNLELK
OUTROS 246B5F2-VH (SEQ ID NO: 45)
EVMLVESGGGLMKPGGSLKLSCAASEFTFSNYAMSWVRQTPEKRLE WVATISSGRSSTYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRSEDTAM
YYCAGLGRGNAMEYWGQGTSVTVSS 246B5F2-VL (SEQ ID NO: 46)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTLSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFILTINSVQAEDLAVYYCQ
NAYSYPFTFGSGTKLEIK 246B5F2-VH1 humanizado (SEQ ID NO: 365)
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASEFTFSNYAMSWVRQAPGKGLE WVSTISSGRSSTYYPDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVY
YCAKLGRGNAMEYWGQGTLVTVSS 246B5F2-VH1.1 humanizado (SEQ ID NO: 366)
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASEFTFSNYAMSWVRQAPGKRLE WVATISSGRSSTYYPDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAV
YYCAGLGRGNAMEYWGQGTLVTVSS 246B5F2-VH1.2 humanizado (SEQ ID NO: 367)
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASEFTFSNYAMSWVRQAPGKGLE WVATISSGRSSTYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAV
270 / 309
YYCAGLGRGNAMEYWGQGTLVTVSS 246B5F2-VH1.3 humanizado (SEQ ID NO: 368)
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASEFTFSNYAMSWVRQAPGKRLE WVATISSGRSSTYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAV
YYCAGLGRGNAMEYWGQGTLVTVSS 246B5F2-VH1.4 humanizado (SEQ ID NO: 369)
EVMLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASEFTFSNYAMSWVRQAPGKRLE WVATISSGRSSTYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAV
YYCAGLGRGNAMEYWGQGTLVTVSS 246B5F2-VL1 humanizado (SEQ ID NO: 370)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NAYSYPFTFGGGTKLEIK 246B5F2-VL1.1 humanizado (SEQ ID NO: 371)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATISCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQ
NAYSYPFTFGGGTKLEIK 418G6A5-VH (SEQ ID NO: 63)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCVASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPMYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAM
YFCARIYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 418G6A5-VL (SEQ ID NO: 64)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYSYPLTFGAGTKLELK 417A6F11-VH (SEQ ID NO: 65)
EVQLQQSGPELVKPGASMKISCKASGYSFTGYTMNWVKQSHGKNLE WIGLINPYNGGTSYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMELLSLTSEDSAV YYCARGDYWGQGTTLTVSS
271 / 309 417A6F11-VL (SEQ ID NO: 66)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYSYPTFGAGTKLELK 59B6C4-VH (SEQ ID NO: 67)
EVQLQQSGTVLARPGTSVKMSCKASGYRFTSSWMHWVKQRPGQGL EWIGANYPGKSDTTYTQKFKGKARLTAVTSASTAYMELSSLTNEDSA
VYYCARGAYYGNAMDYWGQGTSVTVSS 59B6C4-VL (SEQ ID NO: 68)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYSCQ
NAYSYPFTFGAGTKLELK 28C5B1-VH (SEQ ID NO: 251)
QVQLQQSGAELMKPGASVKISCKATGYTFSSYWIEWVKQRPGHGLE WIGEILPGSGSTNYNEKFKGKATFTADTSSNTAYMQLSSLTSEDSAVY
YCARYGGLRRYFDYWGQGTTLTVSS 28C5B1-VL (SEQ ID NO: 252)
DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVSTAVAWYQQKPGQSPKLL IYSASYRYTGVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYCQQHYSTP
RTFGGGTKLEIK 35E8D2-VH (SEQ ID NO: 253)
QIQLVQSGPELKKPGETVRISCKASGYTFTTAGMQWVQKMPGKGLK WIGWINTHSRVPNFAEDFKGRFAFSLETSARIAYLQISNIKNEDMATYF
CARLGKGNTMDFWGQGTSVTVSS 35E8D2-VL (SEQ ID NO: 254)
DIVMTQSPSSLTVTVGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSETDFTLTISSLQAEDLAVYYCQ
NSYSFPLTFGGGTNLEIK 61H12G10-VH (SEQ ID NO: 255)
272 / 309
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTDYGVSWIRQPPGKGLEWL GVIWGGGSTYYNSALKSRLIISKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCA
KHHYGNACDYWGQGTTLTVSS 61H12G10-VL (SEQ ID NO: 256)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLFNSGNLKNYLTWYQQKPG QPPKLLICWASTRESGVPDRFTGSGSGTEFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYSYPFTFGSGTKLEIK 69D5C1-VH (SEQ ID NO: 257)
EVKLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFRDYGMAWVRQAPGKGPE WITFISNLAYSIYYADTVTGRFTISTENAKNTLYLEMSSLRSEDTAMYY
CAVIYYGNSFAYWGQGTLVTV 69D5C1-VL (SEQ ID NO: 258)
DIVLTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNLRNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSLQAEDLAIYYCQN
GYSYPFTFGSGTKLEIK 181C7B2-VH (SEQ ID NO: 259)
QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTYYGVHWVRQSPGKGLEW LGVIWRGGNTDYNAAFISRLSINKDNSKSQVFFKMNSLQPNDTAIYYC
ARAAYYGNCFDYWGQGTTLTVSS 181C7B2-VL (SEQ ID NO: 260)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYIYPLTFGAGTKLELK 196A12B10-VH (SEQ ID NO: 261)
QIQWVQSGPELKKPRETVKISCKASGYTFTDYSMHWVKQAPGKGLK WMGWINSETGEATYADDFRGRFALSLETSATTAFLQINSLKNEDTGT
YFCARFYYGNSFASWGQGTTLTVSS 196A12B10-VL (SEQ ID NO: 262)
DIVMTQFPSSLTVTAGEKVTMTCKSSQSLLNGGNQKNYLTWYQQKP
273 / 309
GLPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTEFTLTISSVQAEDLAVYYC
QNNYYFPLTFGAGTKLELK 232D7C8–VH (SEQ ID NO: 267)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYFGNSFAYWGQGTLVTVSA 232D7C8–VL (SEQ ID NO: 268)
DILMTQSPSSLTATAGEKVSMSCKSSQSLFNSGNQRNYLTWYQQRPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYRYPFTFGAGTKLELK 233D5E5-VH (SEQ ID NO: 269)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPRQGL EWIGYIYPGNGDTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 233D5E5-VL (SEQ ID NO: 270)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYWYPFTFGAGTKLELK 232F1E4-VH (SEQ ID NO: 271)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFALTTYGVSWVRQPPGKGLEW LGVIWGDGSTHYHSALISRLSIRKDNSKSQVFLKLNSLQTDDTATYYC
AKPGRGNAMDYWGQGTSVTVSS 232F1E4-VL (SEQ ID NO: 272)
DIVMSQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSMQAEDLAVYYCQ
NDYIYPLTFGAGTMLELK 231H4G11-VH (SEQ ID NO: 273)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNIHWVKQTPGQGLE WIGYISPGNGYTNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAVY
274 / 309
FCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 231H4G11-VL (SEQ ID NO: 274)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGSQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYWFPFTFGAGTKLELK 226A4B5-VH (SEQ ID NO: 275)
QAYLQQSGAELVRSGASVRMSCKASGFTFTSYNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGSGGSNYNQKFMGKATLTADTSSSTVYMQISSLTSEDSAVY
FCATGRGFAYWGQGTLVTVSA 226A4B5-VL (SEQ ID NO: 276)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQN
DYSYPLTFGTGTKLELK 235A10C9-VH (SEQ ID NO: 277)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFASHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNSGTKYNQKFTGKATLTADTSSSTAYMQITSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 235A10C9-VL (SEQ ID NO: 278)
DIVMTQSPSSLTEKAGEKVSMRCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQADDLAVYYCQ
NDYMFPFTFGAGTKLELK 239H12G9-VH (SEQ ID NO: 279)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGAPNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAVY
FCARDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 239H12G9-VL (SEQ ID NO: 280)
DIVMTQSPSSLTEKAGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ NDYRYPFTFGAGTKLELK
275 / 309 248E6A7-VH (SEQ ID NO: 283)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCRASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGNTYYNQKFKVKATLTADTSSNTAYMQINSLTSEDSA
VYFCVRDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 248E6A7-VL (SEQ ID NO: 284)
DVVMTQSPSSLTEKTGEKVTMTCKSSQSLLNSGNQKNYLAWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSLQTEDLAVYYCQ
NNYMYPFTFGAGTKLELK 254A8D5-VH (SEQ ID NO: 285)
EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSYTVSWVRQTPEKRLEW VATSIVGSTYTYFPDSVKGRFTISRDFAKNTLFLQMSSLRSEDTAMYY
CSRLGRGNAMDYWGQGTSVSVSS 254A8D5-VL (SEQ ID NO: 286)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTLNCRSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQADDLAVYYCQ
NGYSYPFTFGSGTKLEIK 259C6F4 -VH (SEQ ID NO: 287)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFSSHNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGDTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAVY
FCARDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 259C6F4-VL (SEQ ID NO: 288)
DIVMIQSPSSLTEKAGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYRFPFTFGAGTKLELK 280F3B6-VH (SEQ ID NO: 289)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 280F3B6-VL (SEQ ID NO: 290)
276 / 309
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYWYPFTFGAGTKLELK 59B6C9E8-VH (SEQ ID NO:563)
EVQLQQSGTVLARPGTSVKMSCKASGYRFTSSWMHWVKQRPGQGL EWIGANYPGKSDTTYTQKFKGKARLTAVTSASTAYMELSSLTNEDSA
VYYCARGAYYGNAMDYWGQGTSVTVSS 59B6C9E8-VL (SEQ ID NO:564)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYSCQ
NAYSYPFTFGAGTKLELK 186F7E10-VH (SEQ ID NO:565)
EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASRFTLNSYAMSWIRQTPEKKLEW VATITSGVSHTYYFDSVKGRFTISRDTAKNTLNLQMNSLRSEDTAVYY
CARLYYGNSLDYWGQGTSVTVSS 186F7E10-VL (SEQ ID NO:566)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTVSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQSEDLAVYYCQ
NNYIYPLTFGAGTTLELK 186G12H3-VH (SEQ ID NO:567)
EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASRFTLSSYAMSWVRQTPEKRLE WVATISSGGSYTYYFDSVKGRFTISRDTAKNTLNLQMSSLRSEDTAM
YYCARLYYGNALDYWGQGTSVTVSS 186G12H3-VL (SEQ ID NO:568)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTVSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYIYPLTFGAGTTLELK 194A2F7-VH (SEQ ID NO:569)
QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTDYLIHWVKQAPGKGLKW
277 / 309
MGWINTETGEPTYADDFKGRFALSLETSASTACLQINNLKNEDTATYF
CARIYYGNSFDYWGQGTTLTVSS 194A2F7-VL (SEQ ID NO:570)
DIVMTQSPSSLPVTAGEKVTMTCKSSQNLLNSGNQKSYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRETGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYRFPFTFGAGTRLELK 217D9G2-VH (SEQ ID NO:571)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGFTFTSYNIHWVKQTPGQGLE WIGYISPGNGGSNYNLNFKDKATLTAATSSTTAYMQISSLTSEDSAVY
FCATGRGFAYWGQGTLVTVSA 217D9G2-VL (SEQ ID NO:572)
DIVMTQSPSSLTVTPGEKVTMSCRSSQSLFNSGNQKNYLIWYQQKPG QPPKLLIYRASTRDSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQAEDLAVYYCQ
NDYSYPLTFGAGTKLELK 219F9B8-VH (SEQ ID NO:573)
QAYLQQSGAELVRSGASVRMSCKASGYTFTSYNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGHTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCATGRGFAYWGQGTLVTVSA 219F9B8-VL (SEQ ID NO:574)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQN
DYSYPLTFGVGTKLELK 231C11E9-VH (SEQ ID NO:575)
EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFNNYVMCWVRQTPEKRLE WVATISSGNFYTYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRSEDTAIY
YCASLGRGNALDNWGQGTSVTVSS 231C11E9-VL (SEQ ID NO:576)
DIVMTQSPASLTVTAKEKVTMSCRSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYC
278 / 309
QNDYSYPFTFGSGTKLEIK 234C9G5-VH (SEQ ID NO:577)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYAFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYISPGNGYTNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQIGSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 234C9G5-VL (SEQ ID NO:578)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYWFPFTFGAGTKLELK 234E1F12-VH (SEQ ID NO:579)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPRQGL EWIGYIYPGNGDTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 234E1F12-VL (SEQ ID NO:580)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYWYPFTFGAGTKLELK 240A8E7-VH (SEQ ID NO:581)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTNYNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGDNYYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 240A8E7-VL (SEQ ID NO:582)
DVVMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKMLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAIYYC
QNDYYYPFTFGAGTKLELK 242F5H2-VH (SEQ ID NO:583)
EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSYTVSWVRQTPEKRLEW VATSIVGSTYTYFPDSVKGRFTISRDFAKNTLFLQMSSLRSEDTAMYY CSRLGRGNAMDYWGQGTSVSVSS
279 / 309 242F5H2-VL (SEQ ID NO:584)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTLNCRSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQADDLAVYYCQ
NGYSYPFTFGSGTKLEIK 244A1B8-VH (SEQ ID NO:585)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGAPNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAVY
FCARDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 244A1B8-VL (SEQ ID NO:586)
DIVMTQSPSSLTEKAGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYRYPFTFGAGTKLELK 252C10F6-VH (SEQ ID NO:587)
QVHLKQSGRGLVQPSQSLSITCTVSGFSLPNYGVHWVRQPPGKGLEW LGVIWSGGNTDYNTVFKARLSITKDNSKSQVFFKMNSLQADDTAIYY
CARNLYGNYDYAMDYWGQGTSVTVSS 252C10F6-VL (SEQ ID NO:588)
DIVMTQSPATLSVTPGDRVSLSCRASQSISDYLHWYQQKSHESPRLLI KYASQSISGIPSRFSGSGSGSEFTLSINSVEPEDVGVYYCQNGHSFPFTF
GSGTKLEIK 256C3D3-VH (SEQ ID NO:589)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYAFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYISPGNGYTNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQIGSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 256C3D3-VL (SEQ ID NO:590)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYWFPFTFGAGTKLELK 258D11C4-VH (SEQ ID NO:591)
280 / 309
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFSSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 258D11C4-VL (SEQ ID NO:592)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRQSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYWFPFTFGAGTKLELK 259B4D4-VH (SEQ ID NO:593)
EIQLQQSGPELMKPGASVRISCKASGYSFTSYYMHWMKQSHVKSLE WIGYIDPFNGNTRYNQKFKDKATLTVDKSSTTAYMHLSSLTSEDSAV
YFCASLRFFAYWGQGTLVTVSA 259B4D4-VL (SEQ ID NO:594)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCNSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASSRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISTVQAEDLAVYYCQ
NDYSFPLTFGAGTRLELK 259C6F7-VH (SEQ ID NO:595)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFSSHNIHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGDTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFVYWGQGTLVTVSA 259C6F7-VL (SEQ ID NO:596)
DIVMIQSPSSLTEKAGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NAYRFPFTFGAGTKLELK 262H9H6-VH (SEQ ID NO:597)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYISPGNGYTNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCTRDYYGNSFTYWGQGTLVTVSA 262H9H6-VL (SEQ ID NO:598)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG
281 / 309
QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTEFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYWFPFTFGAGTKLELK 263E9F3-VH (SEQ ID NO:599)
EIQVQQSGPELMKPGASVKISCRSSGYSFTSYYIHWVKQSRGKSLEWI GYIDPFSGGTRYNQKFEGKATLTVDKSSTTAYMHLSSLTSEDSAVYY
CASLRFFAYWGQGTLVTVSA 263E9F3-VL (SEQ ID NO: 600)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMTCKSSQSLLNSGNQENYLTWYQQKPG QPPELLISRASTRQSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQTEDLAVYYCQN
DYSYPLTFGAGTKLELK 266B11F7-VH (SEQ ID NO: 601)
QVQMKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTTYGVTWVRQPPGKGLEW LGVIWGDGSTNYHSALTSRLRISKDKSKSQVFLKLSSLQTDDTATYYC
AKPGRGNALDYWGQGTSVTVSS 266B11F7-VL (SEQ ID NO: 602)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMRCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLVYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTVSSVQAEDLAVYY
CQNDYIFPLTFGAGTKLELK 267B2C5-VH (SEQ ID NO: 603)
QVQLKESGPGLVAPSQSLAITCTVSGFSLTTYGVSWVRQPPGKGLEW LGVIWGDGSTHYHSALISRLSIRKDNSKSQVFLKVNSLQTDDTATYYC
GKPGRGNAMDYWGQGTSVTVSS 267B2C5-VL (SEQ ID NO: 604)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYIYPLTFGGGTTLELK 267H5F12-VH (SEQ ID NO: 605)
QAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGL EWIGYISPGNGYTNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
282 / 309
YFCTRDYYGNSFTYWGQGTLVTVSA 267H5F12-VL (SEQ ID NO: 606)
DIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTEFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYWFPFTFGAGTKLELK 273F3D4-VH (SEQ ID NO: 607)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFALTTYGVSWVRQPPGKGLEW LGVIWGDGSTHYHSALISRLSIRKDNSKSQVFLKLNSLQTDDTATYYC
AKPGRGNAMDYWGQGTSVTVSS 273F3D4-VL (SEQ ID NO: 608)
DIVMSQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSMQAEDLAVYYCQ
NDYIYPLTFGAGTMLELK 275B2G2-VH (SEQ ID NO: 609)
EVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFRDYTMSWVRQTPEKRLE WVATSIIGGTYTYYPDSVKGRFTISRDNVKNTLYLQMSSLRSEDTAM
YYCSRLGRGNAMDYWGQGTSVTVSS 275B2G2-VL (SEQ ID NO: 610)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NDYSYPFTFGSGTKLEIK 277F1F8-VH (SEQ ID NO: 611)
QAYLQQSGPELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHWVKQTPGQGLE WIGYINPGNGGNNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQISSLTSEDSAV
YFCARDYYGNSFAFWGQGTLVTVSA 277F1F8-VL (SEQ ID NO: 612)
DIVMTQSPSSLTETAGEKVSMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ NDYRFPFTFGAGTKLELK
283 / 309 286C7F11-VH (SEQ ID NO: 613)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTDYGVSWIRQPPGKGLEWL GVIWNRGNTYYNSALKSRLSISKDNSKSQVFLRMNSLQTDDTAMYY
CAKHDFLRFLDYWGQGTTLTVSS 286C7F11-VL (SEQ ID NO: 614)
DVVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKILIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFSLTITSVQAEDLAVYYCL
NDYYYPLTFGAGTKLELK 292D9C7-VH (SEQ ID NO: 615)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTDYGVSWIRQPPGKGLEWL GVIWGGGNAYYNSALKSRLSISKDNSKSQVFLKMNSLRTDDTAMYY
CAKNGLLRYLDYWGQGSTLTVSS 292D9C7-VL (SEQ ID NO: 616)
DTVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGRDFTLTISSVQVEDLAIYYCQ
NDYYYPLTFGAGTKVELK 392A11C8-VH (SEQ ID NO: 617)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 392A11C8-VL (SEQ ID NO: 618)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCRSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 392C2F10-VH (SEQ ID NO: 619)
EVQLQQSGPELVKPGASMKISCKASGYSFTGYTMNWVKQSLGKNLE WIGLINPFNGGTTYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMELLSLTSDDSAV
YYCTRGDYWGQGTTLTVSS 392C2F10-VL (SEQ ID NO:620)
284 / 309
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFAGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
SDYSYPTFGAGTKLELK 394C2G5-VH (SEQ ID NO: 621)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYVSSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 394C2G5-VL (SEQ ID NO: 622)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTINNVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELT 405G8F11-VH (SEQ ID NO: 623)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCVTSGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMSSLRSEDTAMY
FCARFYYGNSFAYWGQGTLVTVSA 405G8F11-VL (SEQ ID NO: 624)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKL GQPPKLLMYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYFC
QSAFSYPLTFGAGTKLELK 406G3C4-VH (SEQ ID NO: 625)
EIQLQQSGPELMKPGASVRISCKASGYSFISYYIYWVKQSHGKGLEWI GYIDPFNGNTNYNQKFKGKATLTVDRSSSTAYIHLNSLTSEDSAVYYC
AIVNGYGRGAMDYWGQGTSVTVSS 406G3C4-VL (SEQ ID NO: 626)
QIVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSISYMHWYQQKSGTSPKRWIY DTSKLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCQQWSSNPLT
FGDGTKLELK 407A8G10-VH (SEQ ID NO: 627)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW
285 / 309
VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 407A8G10-VL (SEQ ID NO: 628)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCRSSQSLLNSGNQRNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFALTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 407E11H8-VH (SEQ ID NO: 629)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSDFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CVRFYFGNSFDHWGQGTLVTVSA 407E11H8-VL (SEQ ID NO: 630)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMTCRSSQNLLNSGNLKNYLTWYQQKPG QPPKLLISWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQPEDLALYYCQN
AYSFPLTFGAGTKLELK 407H12E6-VH (SEQ ID NO: 631)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTVSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAIYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 407H12E6-VL (SEQ ID NO: 632)
DIVMTQSPSSLTVTTGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQTEDLAVYFCQN
NYFFPLTFGAGTKLELK 409D1A7-VH (SEQ ID NO: 633)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLHMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 409D1A7-VL (SEQ ID NO: 634)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMNCKSSQSLLNSGNQRNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYC
286 / 309
QNAYSFPLTFGAGTKLELN 409G10G6-VH (SEQ ID NO: 635)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSDSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CGRFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 409G10G6-VL (SEQ ID NO: 636)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTLSCRSSQSLLNSGNQRNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDRALYYCQ
NAYSFPLTFGTGTKLELR 411A6E3-VH (SEQ ID NO:637)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSDFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CVRFYFGNSFDHWGQGTLVTVSA 411A6E3-VL (SEQ ID NO:638)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMTCRSSQNLLNSGNLKNYLTWYQQKPG QPPKLLISWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQPEDLALYYCQN
AYSFPLTFGAGTKLELK 411B4G4-VH (SEQ ID NO:639)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGLHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 411B4G4-VL (SEQ ID NO:640)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCRSSQSLLNSGNQRNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 411G3E10-VH (SEQ ID NO:641)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA
287 / 309 411G3E10-VL (SEQ ID NO:642)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMNCRSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYC
QNAYSFPLTFGAGTKLELK 413B1C9-VH (SEQ ID NO:643)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 413B1C9-VL (SEQ ID NO:644)
DIVMTQSPSSLTVTTGEKVSMSCKSSQSLFNRGNQKSYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYIYPLTFGAGTKLELK 413C12F8-VH (SEQ ID NO:645)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGVHWIRQTPEKGLEW VAYIGSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 413C12F8-VL (SEQ ID NO:646)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMNCRSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQRPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 413H4G12-VH (SEQ ID NO:647)
EVQLQQSGPELVKPGASMKISCKASGYSFTGYTMNWVKQSLGKNLE WIGLINPFNGGTTYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMELLSLTSDDSAV
YYCTRGDYWGQGTTLTVSS 413H4G12-VL (SEQ ID NO:648)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFAGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
SDYSYPTFGAGTKLELK 418B11D3-VH (SEQ ID NO:649)
288 / 309
EIQLQQSGPELMKPGASVRISCKASGYSFISYYMYWVKQSHGKGLEW IGYIDPFNGNTNYNQKFKGKATLTVDRSSSTAYIHLSSLTSEDSAVYY
CAIVNGYGRGAMDYWGQGTSVTVSS 418B11D3-VL (SEQ ID NO:650)
QIVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSISYMHWYQQKSGTSPKRWIY DTSKLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCQQWSSNPLT
FGDGTKLELK 418B8B10-VH (SEQ ID NO:651)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYTDTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 418B8B10-VL (SEQ ID NO:652)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVSMSCKSSQSLFNRGNQKSYLTWYQQRPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
NNYIYPLTFGAGTKLELK 419A10D4-VH (SEQ ID NO:653)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 419A10D4-VL (SEQ ID NO:654)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQRNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTVSSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 419A5F3-VH (SEQ ID NO:655)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSDSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CGRFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 419A5F3-VL (SEQ ID NO:656)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTLSCRSSQSLLNSGNQRNYLTWYQQKPG
289 / 309
QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDRALYYCQ
NAYSFPLTFGTGTKLELR 420D5H5-VH (SEQ ID NO:657)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTLSGFGMHWIRQTPEKGLE WVAYISSGSRPIYYVDTVEGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSS 420D5H5-VL (SEQ ID NO:658)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTIRGVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 420F12G8-VH (SEQ ID NO:659)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFAFSGFGMHWIRQTPEKGLE WVAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMY
FCVRFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 420F12G8-VL (SEQ ID NO:660)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMTCRSSQNLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLISWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQPEDLALYYCQ
NAYSFPFTFGAGTKLELK 420H7E6-VH (SEQ ID NO:661)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCVTSGFTFSSFGMHWIRQAPEKGLEW VAFISGGGSPIFYADSVKGRFTVSRDNPKNTLFLQMTGLRSEDTAMYF
CARFYFGNSFAYWGQGTLVTVSA 420H7E6-VL (SEQ ID NO:662)
DIVMAQSPSSLTVTAGEKVTMNCRSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPVRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYC
QTGFSYPLTFGPGTKLELK 421H4G3-VH (SEQ ID NO:663)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFSFSGFGLHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
290 / 309
CARFYFGNSFDHWGQGTLVTVST 421H4G3-VL (SEQ ID NO:664)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCRSSQSLLNSGNQRNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTINSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 423B2B5-VH (SEQ ID NO:665)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAYISSGSSPIYYSDTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMSSLRSEDTAMY
FCARIYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 423B2B5-VL (SEQ ID NO:666)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKP GQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYC
QNDYSYPLTFGAGTKLELK 423C10E1-VH (SEQ ID NO:667)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCVTSGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLE WVAFISGGGSPIFYADSVKGRFTVSRDNPKNTLFLQMTGLRSEDTAM
YFCARFYFGNSFAYWGQGTLVTVSA 423C10E1-VL (SEQ ID NO:668)
DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCRSSQSLFNSGNQKNYLTWYQQKPG QSPKLLIYWASTRESGVPVRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQ
TSFNYPLTFGPGTKLELK 424G9G3-VH (SEQ ID NO:669)
QVQLQQSGPEVVRPGASVKMSCKGSGYTLNNFWMHWVKQRPGQGL EWIGMIDTSNGETRLNQIFKDKATLTVDKSSKTAYMQLSSLTSEDSAV
YYCAPYGNFADWGQGTTLTVSS 424G9G3-VL (SEQ ID NO:670)
DVLLTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIVYGNGNTYLEWYLQKPGQS PKLLIYKVSSRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKITKVEAEDLGVYYCFQGS HVPFTFGSGTKLEIK
291 / 309 426D9F6-VH (SEQ ID NO:671)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGSRPIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTVSA 426D9F6-VL (SEQ ID NO:672)
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQRNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTVSSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 427C7H2-VH (SEQ ID NO:673)
QVQLQQPGSELVRPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLE WIGNIYPGSGSTNYDEKFKSKATLTVDTSSSTAYMQLSSLTSEDSAVY
YCTRRITTATRDYFDYWGQGTTLTVSS 427C7H2-VL (SEQ ID NO:674)
EIVLTQSPALMAASPGEKVTITCSVSSSISSSNLHWYQQKSETSPKPWI YGTSNLASGVPVRFSGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCQQWSSYPL
TFGGGTKLEIK 430A11H9-VH (SEQ ID NO:675)
DVKLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSYTMSWVRQTPEKRLEW VATISSGGSYTYYPDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLKSEDTAMY
YCTRDPGYFAYWGQGTLVTVSA 430A11H9-VL (SEQ ID NO:676)
DIQMTQSPASLSASVGETVTITCRASENIYSYLAWYQQKQGKSPQLLV YNAKTLAEGVPSRFSGSGSGTQFSLKINSLQPEDFGSYYCQHHYGTPY
TFGGGTKLEIK 430B3F1-VH (SEQ ID NO:677)
DVQLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSGFGMHWIRQTPEKGLEW VAYISSGGRPIYYADTVQGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYF
CARFYYGNSFDHWGQGTLVTISS 430B3F1-VL (SEQ ID NO:678)
292 / 309
DIVMTQSPSFLTVTAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLALYYCQ
NAYSFPLTFGAGTKLELK 279E8B8-VH (SEQ ID NO:679)
QAYLQQSGAELVRSGASVKISCKASGYTFASHNMHWVKQTPGQGLE WIGYIYPGNGGTKYNQKFTGKATLSADTSSSTAYLQISSLTSEDSAVY
FCARDYFGNSFVYWGQGTLVTVSA 279E8B8-VL (SEQ ID NO:680)
DIVMTQSPSSLTEKAGEKVSMRCKSSQSLLNSGNQKNYLTWYQQKPG QPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQADDLAVYYCQ
NDYMYPFTFGAGTKLELK SEQ ID NO: 291 Peptídeo sinal da CD8α
MALPVTALLLPLALLLHAARP SEQ ID NO: 292 Dobradiça CD8α
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACD SEQ ID NO: 293 Domínio da transmembrana da CD8α
IYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC SEQ ID NO: 294 4-1BB (CD137) domínio do citoplasma
KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL SEQ ID NO: 295 Domínio do citoplasma da CD28
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS SEQ ID NO: 296 Domínio do citoplasma da CD3ζ (CD3z)
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQ
GLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 297 Ligante 1
GSTSGSGKPGSGEGSTKG SEQ ID NO: 298 Ligante 2
TS
293 / 309 Sequência de aminoácidos de CAR anti-claudina18.2 SEQ ID NO: 299 Sequência de aminoácidos C182001
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKAS QDVSTAVAWYQQKPGQSPKLLIYSASYRYTGVPDRFTGSGSGTDFTF TISSVQAEDLAVYYCQQHYSTPRTFGGGTKLEIKGSTSGSGKPGSGEG STKGQVQLQQSGAELMKPGASVKISCKATGYTFSSYWIEWVKQRPG HGLEWIGEILPGSGSTNYNEKFKGKATFTADTSSNTAYMQLSSLTSED SAVYYCARYGGLRRYFDYWGQGTTLTVSSTSTTTPAPRPPTPAPTIAS QPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVI TLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRV KFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGK PRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLS
TATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 300 Sequência de aminoácidos C182002
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTVGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSE TDFTLTISSLQAEDLAVYYCQNSYSFPLTFGGGTNLEIKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQIQLVQSGPELKKPGETVRISCKASGYTFTTAGMQWVQK MPGKGLKWIGWINTHSRVPNFAEDFKGRFAFSLETSARIAYLQISNIK NEDMATYFCARLGKGNTMDFWGQGTSVTVSSTSTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQ
GLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 301 Sequência de aminoácidos C182003
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYSCQNAYSYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP
294 / 309
GSGEGSTKGEVQLQQSGTVLARPGTSVKMSCKASGYRFTSSWMHWV KQRPGQGLEWIGANYPGKSDTTYTQKFKGKARLTAVTSASTAYMEL SSLTNEDSAVYYCARGAYYGNAMDYWGQGTSVTVSSTSTTTPAPRPP TPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCG VLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEE GGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGR DPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGH
DGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 302 Sequência de aminoácidos C182004
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLFNSGNLKNYLTWYQQKPGQPPKLLICWASTRESGVPDRFTGSGSG TEFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYSYPFTFGSGTKLEIKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTDYGVSWIRQPP GKGLEWLGVIWGGGSTYYNSALKSRLIISKDNSKSQVFLKMNSLQTD DTAIYYCAKHHYGNACDYWGQGTTLTVSSTSTTTPAPRPPTPAPTIAS QPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVI TLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRV KFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGK PRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLS
TATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 303 Sequência de aminoácidos C182005
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVLTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNLRNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSLQAEDLAIYYCQNGYSYPFTFGSGTKLEIKGSTSGSGKPG SGEGSTKGEVKLVESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFRDYGMAWVR QAPGKGPEWITFISNLAYSIYYADTVTGRFTISTENAKNTLYLEMSSLR SEDTAMYYCAVIYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL
295 / 309
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQ
GLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 304 Sequência de aminoácidos C182006
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKSYLTWYQQRPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYFCQNVYFFPFTFGSGTKLETKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTSYGVSWVRQP PGKGLECLGVIWAGGNTNYNSALMSRLSISKDKSKSQVFLKMNSLQT DDTAMYYCARVYYGNAMDYWGQGTSVTVSSTSTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQ
GLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 305 Sequência de aminoácidos C182007
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTPGEKVTMSCKSSQ SLFNSGNQKNYLIWYQQKPGQPPKLLIYRASTRDSGVPDRFTGSGSGT DFTLTISNVQAEDLAIYYCQNDYSYPLTFGAGTKLELKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGFTFTSYNIHWVK QTPGQGLEWIGYISPGNGGSNYNLKFKDKATLTSATSSSTAYMQISSL TSEDSAVYFCATGRGFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTIAS QPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVI TLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRV KFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGK PRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLS
TATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 306 Sequência de aminoácidos C182008
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIMMTQSPSSLTETAGEKVSMSCKSSQ
296 / 309
SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNGYRFPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNIHWIK QTPGKGLEWIGYIYPGNGGTNYNQKFKAKATLTADTSSSTAYMQISS LTSEDSAVYFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGC ELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPE MGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGL
YQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 307 Sequência de aminoácidos C182009
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKVGERVSMSCKSSQ SLFNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYWYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGK PGSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHW VKQTPGQGLEWIGYIYPGNGRTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQI SSLTSEDSAVYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTP APTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVL LLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEG GCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRD PEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHD
GLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 308 Sequência de aminoácidos C182010
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQ SLFNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYRYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHW VKQTPGQGLEWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQI NSLTSEDSAVYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTP
297 / 309
APTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVL LLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEG GCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRD PEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHD
GLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 309 Sequência de aminoácidos C182011
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMTCKSS QSLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKVLISRASTRQSGVPDRFTGSGS GTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYSYPLTFGAGTKLELKGSTSGSGK PGSGEGSTKGEIQLQQSGPELMKPGASVKMSCKASGYSFTSYYIHWV KQSHGKSLEWIGYIDPFNGGTRYNQKFEGKATLTVDKSSTTAYMHLS SLTSEDSTVYYCASLRFLAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTIA SQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLV ITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELR VKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGG KPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQG
LSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 310 Sequência de aminoácidos C182012
MALPVTALLLPLALLLHAARPDVVMTQSPSSLTEKTGEKVSMSCKSS QSLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGS GTDFTLTISSLQTEDLAIYYCQNNFRYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQTYLQQSGAELVRSGASVKMSCRTSGYSFTSHNMHWV KQTPGQGLEWIGYIYPGNGGSYYNQKFKGKAILTADTSSSTAYMQISS LTSEDSAVYFCTRDYYGNSFVYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGC ELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPE MGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGL YQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
298 / 309 SEQ ID NO: 311 Sequência de aminoácidos C182013
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKAGEKVSMRCKSS QSLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGS GTDFTLTISSVQADDLAVYYCQNDYMFPFTFGAGTKLELKGSTSGSG KPGSGEGSTKGQADLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFASHNMH WVKQTPGQGLEWIGYIYPGNGGTKYNQKFTGKATLTADTSSSTAYM QITSLTSEDSAVYFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPP TPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCG VLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEE GGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGR DPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGH
DGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 312 Sequência de aminoácidos C182014
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQ SLFNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNNYWFPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNLHWV KQTPGQGLEWIGYIYPGNGNTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQIS SLTSEDSAVYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPA PTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLL LSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGG CELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDG
LYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 313 Sequência de aminoácidos C182015
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWAATRESGVPDRFAGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYFYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSFGINWLR
299 / 309
QRPEQGLEWIGWIFPGDGNSKYNENFKGKATLTTDKSSSTAYMQVTR LTSEDSAVYFCARFYYGNSFANWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGC ELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPE MGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGL
YQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 314 Sequência de aminoácidos C182016
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ TLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTGESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYFCQNAYFYPFTFGGGTKLEIKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTTYGVHWVRQP PGKGLEWLGVIWAGGSTNYNSALMSRVSINKDNSKSQVFIKMNSLQA DDTALYYCARAAYYGNGLDYWGQGTTLTVSSTSTTTPAPRPPTPAPT IASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLS LVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCE LRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLY
QGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 315 Sequência de aminoácidos C182017
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLPVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRDSGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNNYIYPLTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTRYGVHWVR QSPGKGLEWLGVIWSGGNTDYNAAFISRLNIRKDNSKSQVFFKMNSL KPNDTAIYYCARAAYFGNSFDYWGQGTTLTVSSTSTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGC ELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPE
300 / 309
MGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGL
YQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 316 Sequência de aminoácidos C182018
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNNYIYPLTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTYYGVHWVR QSPGKGLEWLGVIWRGGNTDYNAAFISRLSINKDNSKSQVFFKMNSL QPNDTAIYYCARAAYYGNCFDYWGQGTTLTVSSTSTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGC ELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPE MGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGL
YQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 317 Sequência de aminoácidos C182019
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLIVTPGERVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYSYPLTFGIGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYPFTSYNMHWV KQTPGQGLEWVGYIYPGNGGTNYNQKFRDKATLTADTSSSTAYMQIS RLTSDDSAVYFCLTGRGFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQ
GLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 318 Sequência de aminoácidos C182020
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSS QSLFNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGS
301 / 309
GTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYSYPLTFGVGTKLELKGSTSGSGK PGSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFSSYNMHW VKQTPGQGLEWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQI SSLTSEDSAVYFCLTGRGFTYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQ
GLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 319 Sequência de aminoácidos C182021
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTLSCKSSQ SLFNTGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIFRASTRESGVPDRFTGSGFGT DFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDFSYPLTFGAGTKLELKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSYNMHWVR QTPGQGLEWIGYIYPGNGGTNYSQKFKGKASLTADTSSTTAYMQISSL TSEDSAVYFCATGRGFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTIAS QPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVI TLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRV KFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGK PRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLS
TATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 320 Sequência de aminoácidos C182022
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQFPSSLTVTAGEKVTMTCKSS QSLLNGGNQKNYLTWYQQKPGLPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGS GTEFTLTISSVQAEDLAVYYCQNNYYFPLTFGAGTKLELKGSTSGSGK PGSGEGSTKGQIQWVQSGPELKKPRETVKISCKASGYTFTDYSMHWV KQAPGKGLKWMGWINSETGEATYADDFRGRFALSLETSATTAFLQIN SLKNEDTGTYFCARFYYGNSFASWGQGTTLTVSSTSTTTPAPRPPTPA PTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLL
302 / 309
LSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGG CELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDG
LYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 321 Sequência de aminoácidos C182023
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGERVTMSCKSSQ SLFNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGSGT DFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYSYPLTFGVGTKLELKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVRMSCKASGYTFSSYNMHWVK QTPGQGLEWIGYIYPGNGGTNYNQKFKDKATLTADTSSSTAFIQISSLT SEDSAVYFCLTGRGFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTIASQ PLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVIT LYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVK FSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKP RRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLST
ATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 322 Sequência de aminoácidos C182024
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTPGEKVTMSCKSSQ SLFNSGNQKNYLIWYQQKPGQPPKLLIYRASTRDSGVPDRFTGSGSGT DFTLTISNVQAEDLAVYYCQNDYSYPLTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQTYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSYNIHWV KQTPGQGLEWIGYISPGNGGTYYNLKFKDKATLTTATSSSTAYMQISS LTSEDSAVYFCATGRGFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTIA SQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLV ITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELR VKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGG KPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQG
LSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 323 Sequência de aminoácidos C182025
303 / 309
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGFG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYSYPLTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYVQQSGAELVRSGASVKMSCRASGYTFTSYNMHW VKQTPGQGLEWIGYIYPGNGGTYYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQI SSLTSEDSAVYFCATGRGFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQ
GLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 324 Sequência de aminoácidos C182026
MALPVTALLLPLALLLHAARPDILMTQSPSSLTATAGEKVSMSCKSSQ SLFNSGNQRNYLTWYQQRPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYRYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHW VKQTPGQGLEWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQI SSLTSEDSAVYFCARDYFGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTP APTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVL LLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEG GCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRD PEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHD
GLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 325 Sequência de aminoácidos C182027
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQ SLFNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNAYWYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGK PGSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHW VKQTPRQGLEWIGYIYPGNGDTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQI
304 / 309
SSLTSEDSAVYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTP APTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVL LLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEG GCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRD PEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHD
GLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 326 Sequência de aminoácidos C182028
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMSQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSMQAEDLAVYYCQNDYIYPLTFGAGTMLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFALTTYGVSWVRQ PPGKGLEWLGVIWGDGSTHYHSALISRLSIRKDNSKSQVFLKLNSLQT DDTATYYCAKPGRGNAMDYWGQGTSVTVSSTSTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQ
GLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 327 Sequência de aminoácidos C182029
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQ SLFNSGSQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNNYWFPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNIHWV KQTPGQGLEWIGYISPGNGYTNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQISS LTSEDSAVYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGC ELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPE MGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGL
305 / 309
YQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 328 Sequência de aminoácidos C182030
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLFNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYRASTRESGVPDRFTGSGSGT DFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYSYPLTFGTGTKLELKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVRMSCKASGFTFTSYNIHWVKQ TPGQGLEWIGYIYPGSGGSNYNQKFMGKATLTADTSSSTVYMQISSLT SEDSAVYFCATGRGFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPAPTIASQ PLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVIT LYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVK FSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKP RRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLST
ATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 329 Sequência de aminoácidos C182031
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKAGEKVSMRCKSS QSLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGS GTDFTLTISSVQADDLAVYYCQNDYMFPFTFGAGTKLELKGSTSGSG KPGSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFASHNMH WVKQTPGQGLEWIGYIYPGNSGTKYNQKFTGKATLTADTSSSTAYM QITSLTSEDSAVYFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPP TPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCG VLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEE GGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGR DPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGH
DGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 330 Sequência de aminoácidos C182032
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKAGEKVSMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYRYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP
306 / 309
GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNIHWV KQTPGQGLEWIGYIYPGNGAPNYNQKFRGKATLTADTSSSTAYMQIS SLTSEDSAVYFCARDYYGNSFVYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPA PTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLL LSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGG CELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDG
LYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 331 Sequência de aminoácidos C182033
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVVTQSPSSLTVTAGEKVTMNCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAIYYCQNDYYYPLTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTNYNIHWV KQTPGQGLEWIGYIYPGNGGNYYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQIS SLTSEDSAVYFCARDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPA PTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLL LSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGG CELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDG
LYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 332 Sequência de aminoácidos C182034
MALPVTALLLPLALLLHAARPDVVMTQSPSSLTEKTGEKVTMTCKSS QSLLNSGNQKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFIGSGS GTDFTLTISSLQTEDLAVYYCQNNYMYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGK PGSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCRASGYTFTSHNMHW VKQTPGQGLEWIGYIYPGNGNTYYNQKFKVKATLTADTSSNTAYMQI NSLTSEDSAVYFCVRDYYGNSFVYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTP APTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVL LLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEG
307 / 309
GCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRD PEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHD
GLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 333 Sequência de aminoácidos C182035
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTLNCRSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQADDLAVYYCQNGYSYPFTFGSGTKLEIKGSTSGSGKP GSGEGSTKGEVMLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSYTVSWVR QTPEKRLEWVATSIVGSTYTYFPDSVKGRFTISRDFAKNTLFLQMSSL RSEDTAMYYCSRLGRGNAMDYWGQGTSVSVSSTSTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGC ELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPE MGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGL
YQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 334 Sequência de aminoácidos C182036
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMIQSPSSLTEKAGEKVSMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNAYRFPFTFGAGTKLELKGSTSGSGKP GSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFSSHNIHWV KQTPGQGLEWIGYIYPGNGDTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQIS SLTSEDSAVYFCARDYYGNSFVYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTPA PTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLL LSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGG CELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDG
LYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 335 Sequência de aminoácidos C182037
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTEKAGERVSMSCKSSQ
308 / 309
SLFNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYWYPFTFGAGTKLELKGSTSGSGK PGSGEGSTKGQAYLQQSGAELVRSGASVKMSCKASGYTFTSHNMHW VKQTPGQGLEWIGYIYPGNGGTNYNQKFKGKATLTADTSSSTAYMQI SSLTSEDSAVYFCTRDYYGNSFAYWGQGTLVTVSATSTTTPAPRPPTP APTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVL LLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEG GCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRD PEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHD
GLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 336 Sequência de aminoácidos 175DX
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSSQ SLLNSGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSG TDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYSYPFTFGSGTKLEIKGSTSGSGKPG SGEGSTKGQVQLQQPGAELVRPGASVKLSCKASGYTFTSYWINWVK QRPGQGLEWIGNIYPSDSYTNYNQKFKDKATLTVDKSSSTAYMQLSS PTSEDSAVYYCTRSWRGNSFDYWGQGTTLTVSSTSTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGC ELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPE MGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGL
YQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 388 domínio de cadeias pesadas de IgG1 humana
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDK RVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCV VVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTV LHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSR DELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDG
309 / 309
SFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 389 região constante de cadeias leves kappa
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNAL QSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGL SSPVTKSFNRGEC

Claims (35)

1 / 43 REIVINDICAÇÕES
1. Porção de ligação que se liga especificamente à Claudina18.2, caracterizada pelo fato de que compreende (a) uma região variável de cadeia pesada (VH), incluindo (1) uma CDR1 de cadeia pesada (VH CDR1) incluindo X1X2X3X4X5, onde X1 é S ou N; X2 é H,Y ou F; X3 é N ou G; X4 é M, I ou L e X5 é H ou N (SEQ ID NO: 174); (2) uma CDR2 de cadeia pesada (VH CDR2) incluindo X6IX7PGX8GX9X10X11YNX12X13FX14X15, onde X6 é Y ou W; X7 é Y ou F; X8 é N ou D; X9 é G, R ou N; X10 é T, N ou S; X11 é K, N ou Y; X12 é Q ou E; X13 é K ou N; X14 é T ou K e X15 é G ou A (SEQ ID NO:175); e (3) uma CDR3 de cadeia pesada (VH CDR3) incluindo X16YYGNSFX17X18, onde X16 é D ou F; X17 é A ou V; e X18 é Y ou N (SEQ ID NO:176); e/ou (b) uma região variável de cadeia leve (VL) incluindo (1) uma CDR1 de cadeia leve (VL CDR1), incluindo KSSQSLX19NSGNQKNYLT, onde X19 é L ou F (SEQ ID NO:186); (2) uma CDR2 de cadeia leve (VL CDR2) incluindo WAX20TRES, onde X20 é S ou A (SEQ ID NO:187) e (3) uma CDR3 de cadeia leve (VL CDR3) incluindo QNX21X22X23X24PX25X26, onde X21 é D, G ou N; X22 é Y ou F; X23 é M, R, S, W, Y ou F; X24 é F ou Y; X25 é F ou L e X26 é T ou P (SEQ ID NO:188).
2. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que (a) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 93 e 117, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 117, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 90 e
2 / 43
117, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 91 e 117, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 92 e 117, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 94 e 118, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 73, 95 e 117, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 119, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 130, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 202 e 118, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 90 e 117, respectivamente; ou (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 390 e 118, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 155, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 150, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 151, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e
3 / 43 152, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 156, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 144 e 158, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 455, respectivamente; ou (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 249, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
3. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que (1) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 93 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 155, respectivamente; (2) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 150, respectivamente; (3) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; e/ou as VL
4 / 43
CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 151, respectivamente; (4) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 90 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 152, respectivamente; (5) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 91 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente; (6) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 92 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente; (7) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 94 e 118, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 156, respectivamente; (8) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 73, 95 e 117, respectivamente e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; (9) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 119, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 144 e 158, respectivamente; (10) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 74, 96 e 130, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID
5 / 43 NOs: 136, 144 e 158, respectivamente; (11) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 202 e 118, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 455, respectivamente; (12) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 90 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente; ou (13) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 390 e 118, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 249, respectivamente.
4. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a VH inclui uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo, consistindo em números ímpares dos SEQ ID NOs: 1–22 e 495-520 e SEQ ID NOs: 281, 348-352, e/ou a VL consiste em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo, consistindo em números pares dos SEQ ID NOs: 1–22 e 495-520 e SEQ ID NOs: 282, 353 e 354.
5. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que a VH e VL incluem: (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 13 e 14, respectivamente; (2) a sequência de aminoácidos de quaisquer dos SEQ ID NOs: 348-352 e a sequência de aminoácidos com os SEQ ID NOs: 353 e 354, respectivamente;
6 / 43
(3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1 e 2, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 3 e 4, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 5 e 6, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 7 e 8, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 9 e 10, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 11 e 12, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 15 e 16, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 17 e 18, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 19 e 20, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 21 e 22, respectivamente; (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 281 e 282, respectivamente; (14) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:495 e 496, respectivamente; (15) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 497 e 498, respectivamente; (16) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 499 e 500, respectivamente; (17) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 501 e 502,
7 / 43 respectivamente; (18) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 503 e 504, respectivamente; (19) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 505 e 506, respectivamente; (20) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 507 e 508, respectivamente; (21) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 509 e 510, respectivamente; (22) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 511 e 512, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 513 e 514, respectivamente; (24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 515 e 516, respectivamente; (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 517 e 518, respectivamente, ou (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 519 e 520, respectivamente.
6. Porção de ligação que se liga especificamente à Claudina18.2, caracterizada pelo fato de que compreende (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 consistindo em SYX27X28H, onde X27=é N ou Y; e X28 é M ou I (SEQ ID NO: 177); (2) uma VH CDR2 incluindo YIX29PX30NGGX31X32YX33X34KFX35X36, onde X29 é Y, S ou D; X30 é G ou F; X31 é T ou S; X32 é N, Y ou R; X33 é S ou N; X34 é Q ou L; X35 é K, R ou E; X36 é G ou D (SEQ ID NO:178) e (3) uma VH CDR3 incluindo X37RX38X39X40Y, onde X37 é G ou L; X38 é G ou F; X39 é F ou L; X40 é A ou T (SEQ ID NO:179) e/ou (b) uma VL incluindo (1) VL CDR1, consistindo em
8 / 43 KSSQSLX41NX42GNQX43NYLX44, onde X41 é F ou L; X42 é T ou S; X43 é K ou E e X44 é T ou I (SEQ ID NO:189); (2) uma VL CDR2 incluindo RASTRX45S, onde X45 é E, D ou Q (SEQ ID NO:190); e (3) uma VL CDR3 incluindo QNDX46SYPLT, onde X46 é F ou Y (SEQ ID NO:191).
7. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que (a) as VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 99 e 120, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 97 e 120, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 98 e 120, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 100 e 120, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 90 e 121, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 101 e 122, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 101 e 123, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 201 e 120, respectivamente; ou (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 202 e 120, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) as VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3 incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 139, 146 e
9 / 43 160, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 138, 145 e 159, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente; ou (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 147 e 160, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
8. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que (1) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 99 e 120, e/ou a VL incluindo as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 139, 146 e 160, respectivamente; (2) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 97 e 120, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 138, 145 e 159, respectivamente; (3) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 98 e 120, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente; (4) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 100 e 120, respectivamente; e/ou as VL
10 / 43 CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 139, 146 e 160, respectivamente; (5) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 90 e 121, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente; (6) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 101 e 122, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente; (7) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 101 e 123, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 147 e 160, respectivamente; (8) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 201 e 120, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente; ou (9) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 202 e 120, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente.
9. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a VH inclui uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo, consistindo em números ímpares dos SEQ ID NOs: 23-36 e 263-266 e SEQ ID NOs: 337-345, e/ou a VL inclui uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em
11 / 43 números pares de SEQ ID NOs: 23-36 e 263-266 e SEQ ID NOs: 346 e 347.
10. Porção de ligação de acordo com reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que as VH e VL incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 27 e 28, respectivamente; (2) a sequência de aminoácidos de quaisquer dos SEQ ID NOs: 337-345 e a sequência de aminoácidos com os SEQ ID NOs: 346 e 347, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 23 e 24, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 25 e 26, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 29 e 30, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 31 e 32, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 33 e 34, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 35 e 36, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 263 e 264, respectivamente, ou (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 265 e 266, respectivamente.
11. Porção de ligação que se liga especificamente à Claudina18.2, caracterizada pelo fato de que compreende (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 que consiste em X47YGVX48, onde X47 é T, S ou R e X48, H ou S (SEQ ID NO: 180); (2) uma VH CDR2 incluindo VIWX49X50GX51TX52YX53X54X55X56X57S, onde X49 é
12 / 43 A, G ou S; X50 é G ou D; X51 é S ou N; X52 é N ou D; X53 é N ou H; X54 é S ou A; X55 é A ou T; X56 é L ou F e X57 é M ou I (SEQ ID NO:181) e (3) uma VH CDR3 incluindo X58X59X60X61GNX62X63DY, onde X58 é A ou nulo; X59 é A, G ou V; X60 é Y ou R; X61 é Y, F ou nulo; X62 é A, G ou S e X63 é L, F ou M (SEQ ID NO:182) e/ou (b) uma VL incluindo (1) uma VL CDR1 consistindo em KSSQX64LLNSGNQKX65YLT, onde X64 é T ou S e X65 é N ou S (SEQ ID NO:192); (2) uma VL CDR2 incluindo WASTX66X67S, onde X66 é G ou R e X67 é E ou D (SEQ ID NO:193) e (3) uma VL CDR3 incluindo QNX68YX69X70PX71T, onde X68 é A, D, N ou V; X69 é F, S, ou I e X70 é Y ou F; e X71 é F ou L (SEQ ID NO:194).
12. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 11, caracterizada pelo fato de que (a) as VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 77, 102 e 124, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 78, 103 e 125, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 79, 104 e 126, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 78, 105 e 127, respectivamente; ou (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 103 e 125, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) as VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3 incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 148 e 161, respectivamente;
13 / 43 (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 149 e 163, respectivamente; ou (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 142, 143 e 164, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
13. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que (1) as VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 77, 102 e 124, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 148 e 161, respectivamente; (2) as VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 78, 103 e 125, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente; (3) as VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 79, 104 e 126, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 149 e 163, respectivamente; (4) as VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 78, 105 e 127, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 142, 143 e 164, respectivamente; ou (5) as VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 103 e 125, respectivamente e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de
14 / 43 SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente.
14. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 11, caracterizada pelo fato de que a VH inclui uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo, consistindo em números ímpares dos SEQ ID NOs: 37-44 e 521-526 e SEQ ID NOs: 355-362 e 372-374, e/ou a VL inclui uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares de SEQ ID NOs: 37-44 e 521-526 e SEQ ID NOs: 363, 364 e 375-377, respectivamente.
15. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 15, caracterizada pelo fato de que as VH e VL incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 37 e 38, respectivamente; (2) a sequência de aminoácidos de quaisquer dos SEQ ID NOs: 372-374 e a sequência de aminoácidos com os SEQ ID NOs: 375-377, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 39 e 40, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 41 e 42, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 43 e 44, respectivamente; (6) a sequência de aminoácidos de quaisquer dos SEQ ID NOs: 355-362 e a sequência de aminoácidos com os SEQ ID NOs: 363 e 364, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 521 e 522, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 523 e 524,
15 / 43 respectivamente, ou (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 525 e 526, respectivamente.
16. Porção de ligação que se liga especificamente à Claudina18.2, caracterizada pelo fato de que compreende (a) uma VH incluindo (1) uma VH CDR1 que consiste em X72X73GMH, onde X72 é S, G ou T e X73 é F ou S (SEQ ID NO: 183); (2) uma VH CDR2 incluindo YIX74X75GSX76X77IX78YAX79X80X81X82G, onde X74 é S ou N; X75 é S, G ou T; X76 é S, R, T ou N; X77 é T ou P; X78 é Y ou F; X79 é D ou H; X80 é T ou S; X81 é V ou L e X82 é K ou Q (Nº de ID de SEQ:184), e (3) uma VH CDR3 consistindo em X83YYGNSFX84X85, onde X83 é F ou I; X84 é V, D ou A e X85 é Y, N, ou H (Nº de ID de SEQ:185) e/ou (b) uma VL consistindo em (1) uma VL CDR1 incluindo SSQX86LLNSGNQKNYLT, onde X86 é S ou T (SEQ ID NO:195); (2) VL CDR2 incluindo WASTRES (SEQ ID NO:143) e (3) uma VL CDR3 consistindo em QNX87YX88X89PX90T, onde X87 é A, D ou N; X88 é I, S, T ou Y; X89 é Y ou F; X90 é L ou V (SEQ ID NO:196).
17. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 16, caracterizada pelo fato de que (a) as VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 83, 110 e 130, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 84, 112 e 132, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 106 e 128, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 107 e 129, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 82, 108 e
16 / 43
130, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 131, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 111 e 132, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 110 e 130, respectivamente; ou (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:81, 391 e 129, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) as VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3 incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 169, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 171, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 165, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 167, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 168, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 170, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e
17 / 43 160, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:136, 143 e 162, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 167, respectivamente; ou (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs:141, 143 e 166, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
18. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que (1) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 83, 110 e 130, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 169, respectivamente; (2) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 84, 112 e 132, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 171, respectivamente; (3) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 106 e 128, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 165, respectivamente; (4) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 107 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; (5) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 82, 108 e 130, respectivamente; e/ou as VL
18 / 43 CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 167, respectivamente; (6) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 168, respectivamente; (7) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 131, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 170, respectivamente; (8) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 111 e 132, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 160, respectivamente; (9) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 162, respectivamente; (10) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 131, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 167, respectivamente; ou (11) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 107 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 141, 143 e 166, respectivamente.
19. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 16, caracterizada pelo fato de que a VH inclui uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de
19 / 43 aminoácidos selecionada do grupo, consistindo em números ímpares dos SEQ ID NOs: 47-62 e 527-562 e SEQ ID NOs: 378-380 e 383-385, e/ou a VL inclui uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% deidentidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em números pares de SEQ ID NOs: 47-62 e 527-562 e SEQ ID NOs: 381; 382; 386 e 387.
20. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 19, caracterizada pelo fato de que as VH e VL incluem (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 55 e 56, respectivamente; (2) a sequência de aminoácidos de quaisquer dos SEQ ID NOs: 383-385 e a sequência de aminoácidos com os SEQ ID NOs: 386 e 387, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 61 e 62, respectivamente; (4) a sequência de aminoácidos de quaisquer dos SEQ ID NOs: 378-380 e a sequência de aminoácidos com os SEQ ID NOs: 381 e 382, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 47 e 48, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 49 e 50, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 51 e 52, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 53 e 54, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 57 e 58, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 59 e 60,
20 / 43 respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 527 e 528, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 529 e 530, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 531 e 532, respectivamente; (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 533 e 534, respectivamente; (14) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 535 e 536, respectivamente; (15) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 537 e 538, respectivamente; (16) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 539 e 540, respectivamente; (18) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 541 e 542, respectivamente; (19) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 543 e 544, respectivamente; (20) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 545 e 546, respectivamente; (21) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 547 e 548, respectivamente; (22) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 549 e 550, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 551 e 552, respectivamente; (24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 553 e 554, respectivamente;
21 / 43 (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 555 e 556, respectivamente; (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 557 e 558, respectivamente; (27) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 559 e 560, respectivamente, ou (28) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 561 e 562, respectivamente.
21. Porção de ligação que se liga especificamente à Claudina18.2, caracterizada pelo fato de que compreende (a) uma VH consistindo em VH CDR1, VH CDR2 e VH CDR3 incluindo (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 86, 114 e 134, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 85, 113 e 133, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 87, 115 e 131, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 116 e 135, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 203, 211 e 225, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 204, 212 e 226, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 213 e 227, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 206, 214 e 131, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 207, 215 e
22 / 43
228, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 208, 216 e 229, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 230, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 217 e 117, respectivamente; (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 218 e 231, respectivamente; (14) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 219 e 117, respectivamente; (15) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 220 e 120, respectivamente; (16) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 221 e 117, respectivamente; (17) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 222 e 118, respectivamente; (18) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 223 e 118, respectivamente; (19) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 210, 224 e 232, respectivamente; (20) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 217 e 118, respectivamente; (21) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; (22) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 393 e 394, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 395 e 396, respectivamente;
23 / 43
(24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 397, 398 e 399, respectivamente; (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 400 e 120, respectivamente; (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 401 e 120, respectivamente; (27) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 402, 403 e 404, respectivamente; (28) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 117, respectivamente; (29) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 405 e 117, respectivamente; (30) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 406, 407 e 408, respectivamente; (31) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 409, 410 e 411, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 416, respectivamente; (33) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 412 e 411, respectivamente; (34) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 413, 414 e 415, respectivamente; (35) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 416, respectivamente; (36) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 417, 418 e 232, respectivamente; (37) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 419 e 420, respectivamente; (38) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 421 e
24 / 43
422, respectivamente; (39) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 423 e 424, respectivamente; (40) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; (41) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 425 e 135, respectivamente; (42) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 426 e 129, respectivamente; (43) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; (44) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; (45) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 430, 391 e 431, respectivamente; (46) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 129, respectivamente; (47) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 432 e 129, respectivamente; (48) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 129, respectivamente; (49) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 434, 435 e 129, respectivamente; (50) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 436, 428 e 429, respectivamente; (51) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 437 e 129, respectivamente; (52) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 438 e 129, respectivamente;
25 / 43
(53) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 439 e 441, respectivamente; (54) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 431, respectivamente; (55) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 442 e 443, respectivamente; (56) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 440 e 441, respectivamente; (57) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 444, 445 e 446, respectivamente; (58) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 447, 448 e 449, respectivamente; (59) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 450, 451 e 452, respectivamente; (60) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 453 e 129, respectivamente; ou (61) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 454, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs e/ou (b) uma VL incluindo uma VL CDR1, VL CDR2 e VL CDR3, englobando (1) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente; (2) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 167, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 173, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 223, 241 e
26 / 43
242, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 243, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 234, 143 e 244, respectivamente; (7) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 235, 143 e 245, respectivamente; (8) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; (9) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 236, 143 e 246, respectivamente; (10) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 237, 143 e 151, respectivamente; (11) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 247, respectivamente; (12) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 248, respectivamente; (13) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 238, 143 e 157, respectivamente; (14) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente; (15) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 150, respectivamente; (16) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 151, respectivamente; (17) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 239, 143 e 249, respectivamente; (18) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 245, respectivamente;
27 / 43
(19) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 250, respectivamente; (20) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente; (21) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; (22) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 456, 457 e 250, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 458, 146 e 160, respectivamente; (24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente; (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 244, respectivamente; (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; (27) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 459, respectivamente; (28) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 460, 461 e 462, respectivamente; (29) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 463 e 464, respectivamente; (30) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 465, 466 e 162, respectivamente; (31) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 457, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e
28 / 43
244, respectivamente; (33) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 468, respectivamente; (34) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 469, respectivamente; (35) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente; (36) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 166, respectivamente; (37) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 470, respectivamente; (38) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; (39) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 471, respectivamente; (40) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 472, 473 e 474, respectivamente; (41) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; (42) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 476, 143 e 166, respectivamente; (43) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 477, respectivamente; (44) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 478, 143 e 166, respectivamente; (45) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 479, 143 e 163, respectivamente; (46) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 480, 143 e 481, respectivamente;
29 / 43 (47) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 483, respectivamente; (48) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 160, respectivamente; (49) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 484, respectivamente; (50) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 485, 486 e 487, respectivamente; (51) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 488, 489 e 490, respectivamente; (52) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 491, 492 e 493, respectivamente; ou (53) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 494, respectivamente; ou uma variante desta incluindo até cerca de 5 substituições de aminoácidos nas CDRs.
22. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 21, caracterizada pelo fato de que (1) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 86, 114 e 134, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente; (2) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 85, 113 e 133, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente; (3) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 87, 115 e 131, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID
30 / 43
NOs: 136, 143 e 167, respectivamente; (4) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 116 e 135, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 173, respectivamente; (5) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 203, 211 e 225, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 223, 241 e 242, respectivamente; (6) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 204, 212 e 226, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 243, respectivamente; (7) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 213 e 227, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 234, 143 e 244, respectivamente; (8) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 206, 214 e 131, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 235, 143 e 245, respectivamente; (9) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 207, 215 e 228, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; (10) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 208, 216 e 229, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 236, 143 e 246, respectivamente;
31 / 43
(11) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 230, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 237, 143 e 151, respectivamente; (12) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 217 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 247, respectivamente; (13) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 209, 218 e 231, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 248, respectivamente; (14) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 219 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 238, 143 e 157, respectivamente; (15) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 220 e 120, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 145 e 160, respectivamente; (16) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 221 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 150, respectivamente; (17) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 222 e 118, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 151, respectivamente; (18) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de
32 / 43 aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 223 e 118, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 239, 143 e 249, respectivamente; (19) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 210, 224 e 232, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 245, respectivamente; (20) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 72, 217 e 118, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 250, respectivamente; ou (21) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 153, respectivamente; (22) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 85, 113 e 133, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 172, respectivamente; (23) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 393 e 394, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; (24) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 392, 395 e 396, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 163, respectivamente; (25) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 397, 398 e 399, respectivamente; e/ou as VL
33 / 43
CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 456, 457 e 250, respectivamente; (26) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 75, 400 e 120, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 458, 146 e 160, respectivamente; (27) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 70, 401 e 120, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 145 e 160, respectivamente; (28) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 402, 403 e 404, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 244, respectivamente; (29) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; (30) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 71, 405 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 459, respectivamente; (31) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 406, 407 e 408, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 460, 461 e 462, respectivamente; (32) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 90 e 117, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID
34 / 43
NOs: 137, 463 e 464, respectivamente; (33) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 409, 410 e 411, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 465, 466 e 162, respectivamente; (34) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 219 e 416, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 137, 143 e 157, respectivamente; (35) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 76, 412 e 411, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 140, 147 e 160, respectivamente; (36) a VH CDR1, CDR2 e CDR3 que incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 413, 414 e 415, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 467, respectivamente; (37) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 417, 418 e 232, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 244, respectivamente; (38) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 419 e 420, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 468, respectivamente; (39) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 421 e 422, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 469, respectivamente;
35 / 43
(40) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 205, 423 e 424, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 154, respectivamente; (41) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 166, respectivamente; (42) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 88, 425 e 135, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 470, respectivamente; (43) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 426 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; (44) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 130, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 471; (45) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 427, 428 e 429, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 472, 473 e 474, respectivamente; (46) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; (47) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de
36 / 43 aminoácidos de SEQ ID NOs: 430, 391 e 431, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 476, 143 e 166, respectivamente; (48) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 477, respectivamente; (49) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 391 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 478, 143 e 166, respectivamente; (50) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 432 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; (51) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; (52) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 109 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 479, 143 e 163, respectivamente; (53) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 434, 435 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 240, 143 e 166, respectivamente; (54) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 436, 428 e 429, respectivamente; e/ou as VL
37 / 43
CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 472, 473 e 474, respectivamente; (55) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 437 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 479, 143 e 163, respectivamente; (56) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 478, 143 e 166, respectivamente; (57) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 438 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; (58) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 391 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 480, 143 e 481, respectivamente; (59) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 439 e 441, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 483, respectivamente; (60) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 433, 391 e 431, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 475, 143 e 166, respectivamente; (61) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 442 e 443, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID
38 / 43 NOs: 136, 143 e 160, respectivamente; (62) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 80, 440 e 441, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 482, 143 e 484, respectivamente; (63) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 444, 445 e 446, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 485, 486 e 487, respectivamente; (64) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 447, 448 e 449, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 488, 489 e 490, respectivamente; (65) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 450, 451 e 452, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 491, 492 e 493, respectivamente; (66) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 81, 453 e 129, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 166, respectivamente; ou (67) as VH CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 69, 89 e 454, respectivamente; e/ou as VL CDR1, CDR2 e CDR3 incluem as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 136, 143 e 494, respectivamente.
23. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 21 ou 22, caracterizada pelo fato de que a VH inclui uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em SEQ ID NO: 45, de SEQ
39 / 43 ID NOs ímpares: 63-68, 251-262, 267-280 e 283-290 e 563-680 e SEQ ID NOs: 365-369, e/ou a VL que consiste em uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo incluindo o SEQ ID NO: 46, de SEQ ID NOs pares: 63-68, 251-262, 267-280 e 283-290 e 563-680 e SEQ ID NOs: 370 e 371.
24. Porção de ligação de acordo com a reivindicação 23, caracterizada pelo fato de que a VH e VL incluem sequências de aminoácidos de (1) SEQ ID NOs: 45 e 46, respectivamente; (2) qualquer um dos SEQ ID NOs: 365-369 e quaisquer dos SEQ ID NOs: 370 e 371, respectivamente; (3) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 63 e 64, respectivamente; (4) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 65 e 66, respectivamente; (5) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 67 e 68, respectivamente; (6) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 251 e 252, respectivamente; (7) SEQ ID NOs: 253 e 254, respectivamente; (8) SEQ ID NOs: 255 e 256, respectivamente; (9) SEQ ID NOs: 257 e 258, respectivamente; (10) SEQ ID NOs: 259 e 260, respectivamente; (11) SEQ ID NOs: 261 e 262, respectivamente; (12) SEQ ID NOs: 267 e 268, respectivamente; (13) SEQ ID NOs: 269 e 270, respectivamente; (14) SEQ ID NOs: 271 e 272, respectivamente; (15) SEQ ID NOs: 273 e 274, respectivamente; (16) SEQ ID NOs: 275 e 276, respectivamente; (17) SEQ ID NOs: 277 e 278, respectivamente; (18) SEQ ID NOs: 279 e 280, respectivamente; (19) SEQ ID NOs: 283 e 284, respectivamente; (20) SEQ ID NOs: 285 e 286, respectivamente; (21) SEQ ID NOs: 287 e 288, respectivamente; (22) SEQ ID NOs: 289 e 290, respectivamente; (23) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 563 e 564, respectivamente; (24) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 565 e 566, respectivamente; (25) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 567 e 568,
40 / 43 respectivamente; (26) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 569 e 570, respectivamente; (27) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 571 e 572, respectivamente; (28) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 573 e 574, respectivamente; (29) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 575 e 576, respectivamente; (30) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 577 e 578, respectivamente; (31) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 579 e 580, respectivamente; (32) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 581 e 582, respectivamente; (33) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 583 e 584, respectivamente; (34) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 585 e 586, respectivamente; (35) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 587 e 588, respectivamente; (36) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 589 e 590, respectivamente; (37) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 591 e 592, respectivamente; (38) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1593 e 594, respectivamente; (39) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 595 e 596, respectivamente; (40) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 597 e 598, respectivamente; (41) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 599 e 600, respectivamente; (42) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 601 e 602, respectivamente; (43) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 603 e 604, respectivamente; (44) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 605 e 606, respectivamente; (45) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 607 e 608, respectivamente; (46) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 609 e 610, respectivamente; (47) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 611 e 612, respectivamente; (48) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 613 e 614, respectivamente; (49) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 615 e 616, respectivamente; (50) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 617 e 618, respectivamente; (51) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 619 e 620, respectivamente; (52) as sequências de aminoácidos de
41 / 43
SEQ ID NOs: 621 e 622, respectivamente; (53) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 623 e 624, respectivamente; (54) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 625 e 626, respectivamente; (55) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 627 e 628, respectivamente; (56) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 629 e 630, respectivamente; (57) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 631 e 632, respectivamente; (58) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 633 e 634, respectivamente; (59) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 635 e 636, respectivamente; (60) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 637 e 638, respectivamente; (61) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 639 e 640, respectivamente; (62) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 641 e 642, respectivamente; (63) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 643 e 644, respectivamente; (64) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 645 e 646, respectivamente; (65) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 647 e 648, respectivamente; (66) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 649 e 650, respectivamente; (67) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 651 e 652, respectivamente; (68) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 653 e 654, respectivamente; (69) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 655 e 656, respectivamente; (70) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 657 e 658, respectivamente; (71) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 659 e 660, respectivamente; (72) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 661 e 662, respectivamente; (73) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 663 e 664, respectivamente; (74) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 665 e 666, respectivamente; (75) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 667 e 668, respectivamente; (76) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 669 e 670, respectivamente; (77) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 671 e 672, respectivamente; (78) as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 673 e 674, respectivamente; (79)
42 / 43 as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 675 e 676, respectivamente; (80) as sequência de aminoácidos dos SEQ ID Nos:677 e 678, respectivamente ou (81) as sequências de aminoácidos dos SEQ ID NOs: 679 e 680, respectivamente.
25. Porção de ligação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 24, caracterizada pelo fato de que é um Fab, Fab’, F(ab’)2, um Fv, scFv, (scFv)2 ou um anticorpo de comprimento total.
26. Porção de ligação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, caracterizada pelo fato de que é uma porção de ligação de camundongo, quimérica, humanizada ou humana.
27. Receptor de antígeno quimérico, caracterizado pelo fato de que compreende: (a) um domínio de ligação ao antígeno extracelular incluindo a porção de ligação como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 26, em que a porção de ligação é um fragmento variável de cadeia única (scFv [single chain variable fragment]); (b) um domínio transmembranar e (c) um domínio de sinalização intracelular.
28. Receptor de antígeno quimérico de acordo com a reivindicação 27, caracterizado pelo fato de que compreende uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência com uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 299-335.
29. Receptor do antígeno quimérico de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que compreende uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo incluindo os SEQ ID NOs: 299-335.
30. Ácido nucleico caracterizado pelo fato de que codifica as porções de ligação como definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a 26 ou receptor do antígeno quimérico como definido em qualquer uma das
43 / 43 reivindicações 27 a 29.
31. Célula imune manipulada, caracterizada pelo fato de que compreende as porções de ligação como definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a 26, o receptor de antígeno quimérico como definido em qualquer uma das reivindicações de 27 a 29 ou o ácido nucleico como definido na reivindicação 30.
32. Célula imune manipulada de acordo com a reivindicação 31, caracterizada pelo fato de que a célula imune é a célula T.
33. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz da porção de ligação como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 26, o receptor de antígeno quimérico como definido em qualquer uma das reivindicações de 27 a 29 ou a célula imune manipulada como definida na reivindicação 31 ou 32 e um carreador farmaceuticamente aceitável.
34. Método de tratamento de um tumor ou câncer que expressa Claudina18.2 em um indivíduo que necessita do mesmo, caracterizada pelo fato de que compreende a administração no indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição farmacêutica como definida na reivindicação 33.
35. Método de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que o tumor ou câncer expressando Claudina18.2 é gástrico, esofágico, gastroesofágico, pancreático, ovariano ou tumor ou câncer pulmonar.
BR112021012608-2A 2018-12-28 2019-12-27 Porção de ligação que se liga especificamente à claudina18.2, receptor de antígeno quimérico, ácido nucleico, célula imune manipulada, composição farmacêutica, e, método de tratamento de um tumor ou câncer que expressa claudina18.2 BR112021012608A2 (pt)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNPCT/CN2018/125052 2018-12-28
CN2018125052 2018-12-28
CN2019095827 2019-07-12
CNPCT/CN2019/095827 2019-07-12
PCT/CN2019/129017 WO2020135674A1 (en) 2018-12-28 2019-12-27 Claudin18.2 binding moieties and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BR112021012608A2 true BR112021012608A2 (pt) 2021-09-08

Family

ID=71127698

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112021012608-2A BR112021012608A2 (pt) 2018-12-28 2019-12-27 Porção de ligação que se liga especificamente à claudina18.2, receptor de antígeno quimérico, ácido nucleico, célula imune manipulada, composição farmacêutica, e, método de tratamento de um tumor ou câncer que expressa claudina18.2

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20220073643A1 (pt)
EP (1) EP3902839A4 (pt)
JP (1) JP2022515487A (pt)
KR (1) KR20210110339A (pt)
CN (1) CN113227146B (pt)
AU (1) AU2019415848A1 (pt)
BR (1) BR112021012608A2 (pt)
CA (1) CA3125193A1 (pt)
IL (1) IL284393A (pt)
MX (1) MX2021007939A (pt)
SG (1) SG11202106534RA (pt)
WO (1) WO2020135674A1 (pt)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113637082A (zh) * 2020-04-27 2021-11-12 启愈生物技术(上海)有限公司 一种靶向人claudin和人PDL1蛋白的双特异抗体及其应用
CN113929780A (zh) * 2020-07-13 2022-01-14 北京凯因科技股份有限公司 一种结合密蛋白的用于治疗癌症的人源化抗体
EP4217396A1 (en) * 2020-09-28 2023-08-02 Elpiscience (Suzhou) Biopharma, Ltd. Novel anti-claudin18 antibodies
KR20230104659A (ko) 2020-11-08 2023-07-10 씨젠 인크. 면역 세포 억제제를 이용한 조합-요법 항체 약물 접합체
CN114539402A (zh) * 2020-11-27 2022-05-27 南京北恒生物科技有限公司 靶向Claudin18.2的抗体及其用途
AU2021388650A1 (en) * 2020-11-27 2023-06-22 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Cldn18.2 antibody and use thereof
WO2022122709A1 (en) 2020-12-07 2022-06-16 Sotio Biotech A.S. Antibody-drug conjugates based on humanized cldn18.2 antibodies
MX2023007644A (es) 2020-12-23 2023-07-07 Sotio Biotech A S Conjugados anticuerpo-farmaco especificos para tumores con claudina 18.2.
CN113321730B (zh) * 2021-01-11 2023-10-10 上海莱馥医疗科技有限公司 Cldn18.2抗体及其应用
CN116940598A (zh) * 2021-02-08 2023-10-24 山东博安生物技术股份有限公司 用于治疗表达cldn18.2的实体瘤的cldn18.2/cd3双特异性抗体
CN115109154A (zh) * 2021-03-17 2022-09-27 三优生物医药(上海)有限公司 一种靶向cldn18.2的抗体或其抗原结合片段及其应用
WO2024096577A1 (ko) * 2022-11-01 2024-05-10 앱티스 주식회사 Fc 결합성 유닛을 포함하는 화합물 및 이를 이용하여 제조된 컨쥬게이트
CN116284224B (zh) * 2023-05-12 2023-07-25 中国农业大学 一种结合Claudin 18.2的环肽及其应用

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1790664A1 (en) * 2005-11-24 2007-05-30 Ganymed Pharmaceuticals AG Monoclonal antibodies against claudin-18 for treatment of cancer
EP1997832A1 (en) * 2007-05-29 2008-12-03 Ganymed Pharmaceuticals AG Monoclonal antibodies against Claudin-18 for treatment of cancer
WO2013174403A1 (en) * 2012-05-23 2013-11-28 Ganymed Pharmaceuticals Ag Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 for treatment of cancer
WO2013174404A1 (en) * 2012-05-23 2013-11-28 Ganymed Pharmaceuticals Ag Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 for treatment of cancer
WO2014127785A1 (en) * 2013-02-20 2014-08-28 Ganymed Pharmaceuticals Ag Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 for treatment of cancer
CN112979828A (zh) * 2014-07-17 2021-06-18 恺兴生命科技(上海)有限公司 靶向cld18a2的t淋巴细胞及其制备方法和应用
WO2016165762A1 (en) * 2015-04-15 2016-10-20 Ganymed Pharmaceuticals Ag Drug conjugates comprising antibodies against claudin 18.2
WO2016180468A1 (en) * 2015-05-11 2016-11-17 Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh Claudin-18.2-specific immunoreceptors and t cell epitopes
CA3030257A1 (en) * 2016-07-08 2018-01-11 Carsgen Therapeutics Co., Ltd. Antibody for anti-claudin 18a2 and use thereof
CN116178555A (zh) * 2018-05-18 2023-05-30 礼新医药科技(上海)有限公司 抗密蛋白18.2抗体及其用途
CN113645996B (zh) * 2019-02-01 2024-04-02 新石生物制药有限公司 抗claudin 18抗体及其使用方法
JP2022545660A (ja) * 2019-08-20 2022-10-28 スーチョウ トランセンタ セラピューティクス カンパニー，リミテッド 新規抗ｃｌｄｎ１８．２抗体

Also Published As

Publication number Publication date
CN113227146B (zh) 2024-03-01
JP2022515487A (ja) 2022-02-18
IL284393A (en) 2021-08-31
WO2020135674A1 (en) 2020-07-02
EP3902839A4 (en) 2022-12-14
US20220073643A1 (en) 2022-03-10
MX2021007939A (es) 2021-10-22
CN113227146A (zh) 2021-08-06
AU2019415848A8 (en) 2021-09-02
AU2019415848A1 (en) 2021-08-19
KR20210110339A (ko) 2021-09-07
CA3125193A1 (en) 2020-07-02
SG11202106534RA (en) 2021-07-29
EP3902839A1 (en) 2021-11-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BR112021012608A2 (pt) Porção de ligação que se liga especificamente à claudina18.2, receptor de antígeno quimérico, ácido nucleico, célula imune manipulada, composição farmacêutica, e, método de tratamento de um tumor ou câncer que expressa claudina18.2
ES2616355T3 (es) Anticuerpos para el receptor humano de muerte programada PD-1
BR112021003559A2 (pt) anticorpo biespecífico, molécula de ácido nucleico isolada, vetor, célula hospedeira, método para preparar o anticorpo biespecífico, conjugado, kit, uso do anticorpo biespecífico e composição farmacêutica
JP2020504627A (ja) 抗ｐｄ−１抗体及びその使用
BR112020022898A2 (pt) anticorpos biespecíficos dll3-cd3
BR112020022595A2 (pt) anticorpos específicos para gucy2c e usos dos mesmos
ES2960311T3 (es) Nueva proteína de fusión bifuncional recombinante, procedimiento de preparación y uso de la misma
EP3041868A2 (en) Cd70-binding peptides and method, process and use relating thereto
KR20220031738A (ko) 암 치료를 위한 항-fam19a5 항체의 용도
BR112021003089A2 (pt) anticorpos biespecíficos anti-pd-l1/anti-lag3 e seus usos
CN114181310B (zh) 抗tigit抗体、其药物组合物及用途
BR112020010767A2 (pt) antagonistas de ildr2 e combinações dos mesmos
US20230340119A1 (en) Composition of triax antibodies and method of making and using thereof
CN113195542A (zh) Cd30-结合部分、嵌合抗原受体及其用途
BR112021008204A2 (pt) novas composições de proteínas racionalmente projetadas
JP6847434B2 (ja) 抗ポドプラニン抗体
WO2022057061A1 (en) Pd-l1 antibodies, fusion proteins, and uses thereof
WO2023186113A1 (zh) 靶向pd-l1和cd40的抗原结合蛋白及其制备和应用
WO2023176881A1 (ja) 多重特異的分子と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせ
CN116496398B (zh) 一种特异性结合CD44的v5外显子的抗体及其用途
WO2022268168A1 (zh) 靶向lag-3和pd-l1的新型双特异抗体及其应用
WO2023138579A1 (zh) 抗b7-h7抗体或其抗原结合片段及制备方法和应用
WO2023001303A1 (zh) 药物组合物及用途
WO2022262749A1 (zh) 靶向pd1和/或ox40的特异性结合蛋白
WO2021244552A1 (zh) 抗pdl1×kdr的双特异性抗体