BR112020007740A2 - síntese de análogos de aminoglicosídeos antibacterianos - Google Patents

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Abstract

A presente divulgação refere-se a métodos para preparar compostos amino-glicosídeos antibacterianos, bem como a intermediários relacionados e formas cris-talinas dos mesmos, úteis em tais métodos.

Description

“SÍNTESE DE ANÁLOGOS DE AMINOGLICOSÍDEOS ANTIBACTERIANOS” REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS
[001]Este pedido reivindica o benefício do Pedido Provisório dos EUA de nº 62/574.544, depositado em 19 de outubro de 2017; cujo conteúdo é incorporado no presente documento por referência em sua totalidade.
DECLARAÇÃO DE INTERESSE PÚBLICO
[002]Esta invenção foi feita com o apoio do governo com fundos federais da Autoridade Biomédica de Pesquisa e Desenvolvimento Avançado, Gabinete do Secretário Assistente de Preparação e Resposta, Gabinete do Secretário, Departamento de Saúde e Serviços Humanos, sob o Contrato de nº HHSO100201000046C. O governo tem certos direitos nesta invenção.
CAMPO DA INVENÇÃO
[003]A presente divulgação refere-se a métodos para preparar compostos aminoglicosídeos antibacterianos, bem como a intermediários relacionados e formas cristalinas dos intermediários, úteis em tais métodos.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[004]Pelo menos 30% de todos os pacientes hospitalizados atualmente recebem um ou mais procedimentos de terapia com antibióticos, e milhões de infecções potencialmente fatais foram curadas. Esses agentes farmacêuticos se tornaram os mais usados indevidamente dentre os disponíveis para o clínico praticante. No entanto, um resultado do uso generalizado de agentes antimicrobianos foi o surgimento de patógenos resistentes a antibióticos que, por sua vez, criou uma necessidade cada vez maior de novos fármacos.
[005]Quando a atividade antimicrobiana de um novo agente é testada pela primeira vez, geralmente é definido um padrão de sensibilidade e resistência. Infelizmente, esse espectro de atividade pode subsequentemente mudar em um grau notável, porque os microorganismos desenvolveram uma série de alterações engenhosas que lhes permitem sobreviver na presença de antibióticos. O mecanismo de resistência ao medicamento varia de micro- organismo para micro-organismo e de fármaco para fármaco.
[006]Os esforços para desenvolver novos antibióticos aminoglicosídeos tendo atividade contra bactérias gram-negativas multirresistentes levaram a análogos de sisomicina e neomicina modificados nas posições 6' e N-1. Certas técnicas sintéticas para a funcionalização seletiva da posição 1-N são conhecidas. A modificação seletiva da posição 1-N é normalmente realizada em um procedimento de várias etapas usando grupos protetores. Primeiro, as posições 1-N e 3”N da estrutura aminoglicosídea são bloqueadas através da formação de um complexo de metal de transição com um íon metálico divalente (geralmente zinco, níquel, cobre ou cobalto). Em seguida, todas as outras posições (6'- 2'- e 3-N) são protegidas usando grupos protetores padrão de nitrogênio (normalmente essas aminas serão protegidas como carbamatos ou acetatos). Com as posições 6'- 2'- e 3-N protegidas, os complexos de metais de transição são removidos e a posição 1-N é modificada em alta seletividade.
Nesse ponto, as posições 6'- 2'- e 3-N são normalmente protegidas e a única amina livre restante é a amina 3”N secundária que reage mais lentamente que a amina 1-N em reações típicas de acilação ou alquilação.
[007]Por outro lado, a funcionalização seletiva da posição 6'-N continua sendo um problema formidável. A posição 6'-N é a posição mais reativa a uma variedade de condições de reação e os métodos anteriores se basearam nessa reatividade comparativamente alta para funcionalizar ou proteger a amina 6'-N.
No entanto, a diferença de reatividade entre o 6'-N e as outras posições (em particular as 2'-, 3- e 1-N) não é grande. Como um resultado, as tentativas de funcionalizar diretamente a posição 6'-N são complicadas pela formação de subprodutos isoméricos e subprodutos de reação exagerada (derivados de aminoglicosídeos difuncionalizados ou trifuncionalizados). A formação de subprodutos em grandes quantidades requer a implementação de procedimentos de purificação que adicionam tempo e custo significativos à produção de derivados de aminoglicosídeos funcionalizados em 6’-N, tais como os descritos nas Patentes dos EUA de nº 8.383.596; 8.822.424; 9.266.919,
9.688.711; e Publicação dos EUA de nº 2012-0214759.
[008]Para acelerar o processo de descoberta e desenvolvimento de fármacos, são necessários métodos para sintetizar antibióticos aminoglicosídeos para fornecer uma variedade de compostos que são potencialmente fármacos para o tratamento de infecções bacterianas. A presente divulgação pode atender a essas necessidades e fornecer outras vantagens relacionadas.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[009]Em suma, a presente divulgação refere-se a métodos para preparar compostos aminoglicosídeos antibacterianos e novos intermediários e formas cristalinas de certos intermediários usados nos novos métodos.
[010]A presente divulgação fornece processos para preparar compostos da Fórmula (9), que incluem plazomicina, que são escaláveis, reproduzíveis em escala comercial e com bons rendimentos. Esses processos compreendem reações que podem fornecer compostos intermediários obtidos por experimentação e desenvolvimento de novas combinações de condições de reação. Os processos também podem compreender a cristalização de certos intermediários. A cristalização destes intermediários particulares contribui inesperadamente para aprimoramentos na purificação (por exemplo, impurezas inferiores) e pode simplificar a purificação em comparação com métodos anteriores de purificação.
[011]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo para preparar um composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, compreendendo: (a) colocar em contato um composto da Fórmula (1): (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com 1-{[(p-nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H-benzotriazol (PNZ-Bt) para formar o composto da Fórmula (2): (2), um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla; R1 é H ou C1-C3 alquila; R2 é H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila. Em certas modalidades, a etapa (a) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em diclorometano, metanol e uma combinação dos mesmos. Em algumas modalidades, o PNZ-Bt está presente em cerca de 1,0 a 1,2 equivalentes molares ao composto da Fórmula (1), ou enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[012]Em algumas modalidades precedentes ou seguintes, é uma ligação simples ou uma ligação dupla. Em certas modalidades precedentes ou seguintes, é uma ligação simples. Em outras modalidades precedentes ou seguintes, é uma ligação dupla. Em algumas modalidades precedentes ou seguintes, R1, R2, ou R3 são H.
[013]Outro aspecto da divulgação refere-se a um processo que compreende ainda a etapa (b1) ou (b2): (b1) em que quando R1, R2, e R3 são H, colocar em contato o composto da Fórmula (2) com um reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; ou (b2) em que quando um ou mais de R1, R2, ou R3 são independentemente uma C1-C3 alquila, primeiro remover a referida C1-C3 alquila e então colocar em contato o composto da Fórmula (2) ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, o reagente do grupo protetor Boc é Boc 2O ou Boc-ONb.
Em algumas modalidades, a etapa (b1) ou (b2) é realizada na presença de um ácido de Lewis. Em certas modalidades, o ácido de Lewis é Zn(OAc)2, ZnCl2, ou Zn(OPiv)2. Em algumas modalidades, o ácido de Lewis compreende um íon de cobre ou um íon de níquel. Em algumas modalidades, as etapas (b1) ou (b2) são realizadas na presença de trietilamina. Em certas modalidades, as etapas (b1) ou (b2) são realizadas na presença de metanol.
[014]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo que compreende ainda: (c) colocar em contato o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com para obter um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, a etapa (c) é realizada na presença de um reagente de ativação e um reagente de acoplamento de peptídeo. Em certas modalidades, o reagente de ativação é HOBt. Em certas modalidades, o reagente de ativação está presente em cerca de 0,05 a 1,0 equivalentes molares para . Em algumas modalidades, o reagente de acoplamento de peptídeo é EDAC ou PyBOP. Em certas modalidades, o reagente de acoplamento de peptídeo está presente em cerca de 1,0 a 1,4 equivalentes molares para .
[015]Em algumas modalidades, a etapa (c) é realizada em uma condição ácida. Em certas modalidades, a condição ácida é pH entre cerca de 4 e 7. Em certas modalidades, a condição ácida é pH em torno de 5.
[016]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo que inclui ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (4), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. Em algumas modalidades, o processo compreende ainda isolar o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[017]Outro aspecto da divulgação refere-se a um processo compreendendo ainda: (d) colocar em contato o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com o reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (5): (5),
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, o reagente do Grupo protetor Boc é o Boc2O. Em algumas modalidades, a etapa (d) é realizada na presença de um álcool. Em certas tais modalidades, o álcool é metanol. Em algumas modalidades, a etapa (d) é realizada a uma temperatura de até cerca de 60 °C.
[018]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo que compreende ainda: (e) colocar em contato o composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente de desproteção PNZ para obter um composto da Fórmula (6): (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certa tal modalidade, o reagente de desproteção PNZ é ditionito de sódio.
[019]Outro aspecto da divulgação refere-se a um processo que compreende ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (6), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. Em algumas modalidades, o processo compreende ainda isolar o composto da Fórmula (6), ou um um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[020]Em algumas modalidades, o processo compreende ainda (f) colocar em contato o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com , em que LG1 é um um grupo lábil, para obter um composto da Fórmula (7): (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, o grupo lábil é iodo. Em algumas modalidades, está presente em cerca de 1,0 a 1,5 equivalentes molares para o composto da Fórmula (6). Em algumas modalidades, a etapa (f) é realizada em condições substancialmente livres de água. Em certas modalidades, a etapa (f) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em acetonitrila, acetona e uma combinação das mesmas. Em algumas modalidades, a etapa (f) é realizada na presença de NaHCO3. Em certas modalidades, a etapa (f) é realizada a uma temperatura de cerca de 30 °C a 40 °C. Em algumas modalidades, a etapa (f) compreende ainda adicionar 1,4- diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) a uma mistura de reação.
[021]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo que compreende ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (7), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. Outro aspecto da divulgação refere-se a um processo que compreende ainda isolar o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[022]Outro aspecto da divulgação refere-se a um processo que compreende ainda: (g) colocar em contato o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente de remoção Boc para obter um composto da Fórmula (8): (8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em algumas modalidades da etapa (g), o reagente de remoção Boc é TFA, produzindo assim um sal de TFA do composto da Fórmula (8), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesmo, ou um diastereômero da mesma. Em algumas modalidades, o processo compreende ainda remover o sal de TFA para proporcionar um composto da Fórmula (8), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[023]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo compreendendo ainda: (h) a realizar uma formação de sal, com um ácido para obter um sal de um composto da Fórmula (8), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em algumas modalidades, o ácido na etapa (h) é ácido sulfúrico, obtendo assim um sal de sulfato de um composto da Fórmula (9):  x H2SO4(9), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, em que x é de 1 a 5.
[024]Em algumas modalidades de qualquer um dos seguintes ou anteriores, a estereoquímica em átomos de carbono 1, 3, 4, 5, 6, 1', 2', 1", 2", 3", e 4 " nas Fórmulas (1) a (3) é indicada conforme na Fórmula (X), em que indica um ponto de ligação ao hidrogênio ou a uma fração: (X).
[025]Em algumas modalidades de qualquer um dos seguintes ou anteriores, a estereoquímica em átomos de carbono 1, 3, 4, 5, 6, 1', 2', 1", 2", 3", 4", e 1-z nas Fórmulas (4) a (9) é indicada conforme na Fórmula (Y), em que indica um ponto de ligação ao hidrogênio ou um grupo:
(Y).
[026]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo para preparar um composto da Fórmula (5): (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, o processo compreendendo: (a) colocar em contato um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla. Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com .
[027]Em outras modalidades, o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por (b1) colocar em contato um composto da Fórmula (2a): (2a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc; ou (b2) remover C1-C3 alquila em um composto da Fórmula (2): (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; em que R1 é H ou C1-C3 alquila; R2 é
H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila, e em que um ou mais de R1, R2, ou R3 são independentemente uma C1-C3 alquila; e, em seguida, colocar em contato o composto da Fórmula (2) com um reagente do grupo protetor Boc.
[028]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (1): (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; com 1-{[(p-nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H-benzotriazol (PNZ-Bt). Em certas modalidades, o reagente do grupo protetor Boc nas etapas (a), (b1) ou (b2) é Boc2O. Em algumas modalidades, as etapas (a), (b1), ou (b2) são realizadas na presença de um álcool. Em certas tais modalidades, o álcool é metanol.
Em algumas modalidades, as etapas (a), (b1), ou (b2) são realizadas a uma temperatura de até cerca de 60 °C.
[029]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo parar preparar um composto da Fórmula (7): (7),
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, o processo compreendendo: (f) colocar em contato um composto da Fórmula (6), (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com , em que LG1 é um grupo lábil, e em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla. Em certas modalidades, o grupo lábil é iodo.
Em algumas modalidades, está presente em cerca de 1,0 a 1,5 equivalentes molares para o composto da Fórmula (6). Em algumas modalidades, a etapa (f) é realizada em condições substancialmente livres de água. Em certas modalidades, a etapa (f) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em acetonitrila, acetona e uma combinação das mesmas. Em algumas modalidades, a etapa (f) é realizada na presença de NaHCO3. Em algumas modalidades, a etapa (f) é realizada a uma temperatura de cerca de 30 °C a 40 °C. Em algumas modalidades, a etapa (f) compreende ainda adicionar 1,4- diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) a uma mistura de reação.
[030]Outro aspecto da divulgação refere-se a um processo em que um composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (5):
(5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente de desproteção PNZ.
[031]Um aspecto da divulgação refere-se a um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em algumas dessas modalidades, o composto da Fórmula (4) é da seguinte Fórmula: (4a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma.
[032]Outro aspecto da divulgação refere-se a terc-butil ((2S,3R)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6-
(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, da Fórmula (4a), ou um solvato do mesma.
[033]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo para preparar terc-butil ((2S,3R)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidróxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-6-(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3- il)carbamato cristalino, da Fórmula (4a), ou um solvato do mesma, compreendendo: (a)tratar a Fórmula (4a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
(b)aquecer a solução da etapa (a); (c)adicionar água à solução aquecida da etapa (b); (d)resfriar a solução da etapa (c); (e)carregar a solução da etapa (d) com um cristal de semente; e (f)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (4a) cristalina, ou um solvato da mesma.
[034]Outro aspecto da divulgação refere-se a terc-butil ((2R,3R,4R,5R)- 2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a), ou um solvato da mesma.
[035]Um aspecto da divulgação refere-se a um processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-
((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a), ou um solvato da mesma, compreendendo: (a)tratar a Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com acetato de isopropila (IPAc) para produzir uma solução; (b)adicionar água à solução da etapa (a) para produzir uma mistura; (c)adicionar diclorometano à mistura da etapa (b) para produzir uma mistura; (d)carregar a mistura da etapa (c) com um cristal de semente; (e)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (6a) cristalina, ou um solvato da mesma.
Em certas modalidades, a etapa (d) é realizada a uma temperatura baixa.
[036]Outro aspecto da divulgação refere-se a um composto da Fórmula (7): , ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, o composto da Fórmula (7) é o da seguinte Fórmula:
(7a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma.
[037]Um aspecto da divulgação refere-se a terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (7a), ou um solvato da mesma.
[038]Outro aspecto da divulgação refere-se a um processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-(((2- hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)- 3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (7a), ou um solvato da mesma, compreendendo: (a)tratar a Fórmula (7a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com acetato de isopropila (IPAc) para produzir uma solução; (b)adicionar acetonitrila à solução da etapa (a) para produzir uma mistura; (c)carregar a mistura da etapa (b) com um cristal de semente; (d)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (7a) cristalina, ou um solvato da mesma.
[039]Os detalhes da divulgação estão estabelecidos na descrição a seguir. Embora métodos e materiais semelhantes ou equivalentes aos descritos no presente documento possam ser usados na prática ou no teste da presente divulgação, métodos e materiais ilustrativos são agora descritos.
Outras características, objetivos e vantagens da divulgação serão evidentes a partir da descrição e das reivindicações. No relatório descritivo e nas reivindicações anexas, as formas singulares também incluem o plural, a menos que o contexto indique claramente o contrário. A menos que definido de outra forma, todos os termos técnicos e científicos usados neste documento têm o mesmo significado que geralmente é entendido por um técnico no assunto ao qual essa divulgação pertence. Todas as patentes e publicações citadas neste relatório descritivo são incorporadas neste documento por referência em sua totalidade.
[040]Cada modalidade descrita neste documento pode ser tomada sozinha ou em combinação com qualquer uma ou mais outras modalidades.
BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
[041]Vários aspectos do presente divulgação são ilustrados por referência às figuras que a acompanham.
[042]A Figura 1 mostra o espectro de XRPD do Composto 4a.
[043]A Figura 2 mostra o perfil de TGA do Composto 4a.
[044]A Figura 3 mostra o perfil de DSC do Composto 4a.
[045]A Figura 4 mostra o espectro de XRPD do Composto 6a.
[046]A Figura 5 mostra o perfil de TGA do Composto 6a.
[047]A Figura 6 mostra o perfil de DSC do Composto 6a.
[048]A Figura 7 mostra o espectro de XRPD do Composto 7a.
[049]A Figura 8 mostra o perfil de TGA do Composto 7a.
[050]A Figura 9 mostra o perfil de DSC do Composto 7a.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
[051]A presente divulgação refere-se a métodos para preparar compostos aminoglicosídeos antibacterianos, bem como a intermediários relacionados úteis em tais métodos e certas formas cristalinas de intermediários específicos.
[052]Conforme discutido acima, a presente divulgação fornece processos para preparar compostos da Fórmula (9), que incluem sulfato de plazomicina, que é escalável e reproduzível em escala comercial com um bom rendimento. Os processos compreendem combinações de reações e condições que podem fornecer certos compostos intermediários. Os processos também incluem, em modalidades particulares, a cristalização de certos intermediários, nos quais a cristalização surpreendentemente auxilia no processo de purificação (por exemplo, purgando impurezas e, portanto, diminuindo os níveis de impureza), fornecendo, assim, maior facilidade de purificação em comparação com os processos de purificação anteriores.
[053]Em um aspecto, a divulgação refere-se a um processo para preparar compostos da Fórmula (2): (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla; R1 é H ou C1-C3 alquila; R2 é H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila.
[054]Em um outro aspecto, a divulgação refere-se a um processo para preparar compostos da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[055]Em um aspecto, a divulgação refere-se a um processo para preparar compostos da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[056]Em um outro aspecto, a divulgação refere-se a um processo para preparar compostos da Fórmula (5): (5),
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[057]Em um aspecto, a divulgação refere-se a um processo para preparar compostos da Fórmula (6): (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[058]Em um outro aspecto, a divulgação refere-se a um processo para preparar compostos da Fórmula (7): (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[059]Em alguns aspectos, a divulgação refere-se a um processo para preparar compostos da Fórmula (8):
(8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[060]Em outro aspecto, a divulgação refere-se a um processo parar preparar um sal de sulfato de um composto da Fórmula (9):  x H2SO4(9), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que x é 1 a 5 e em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[061]Em algumas modalidades, a estereoquímica nos átomos de carbono 1, 3, 4, 5, 6, 1', 2', 1", 2", 3", e 4" nas Fórmulas (1) a (3) é indicada conforme na Fórmula (X), em que indica um ponto de ligação ao hidrogênio ou a uma fração: (X).
[062]Em algumas modalidades, a estereoquímica nos átomos de carbono 1, 3, 4, 5, 6, 1', 2', 1", 2", 3", 4", e 1-z nas Fórmulas (4) a (9) é indicada conforme na Fórmula (Y), em que indica um ponto de ligação ao hidrogênio ou a uma fração: (Y).
[063]Em um aspecto, a divulgação refere-se a um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[064]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (4) é da seguinte Fórmula: (4a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma.
[065]Em algumas modalidades, a divulgação também refere-se a terc- butil ((2S,3R)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidróxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-6-(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino) metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3- il)carbamato cristalino, da Fórmula (4a), ou um solvato da mesma.
[066]Em algumas modalidades, a divulgação também refere-se a terc- butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a): (6a), ou um solvato da mesma.
[067]Em um aspecto, a divulgação refere-se a um composto da Fórmula (7): ,
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[068]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (7) é da seguinte Fórmula:
OH NHBoc
O H OH
N HO O O O NBoc
OH BocHN NH NHBoc
O OH (7a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma.
[069]Em algumas modalidades, a divulgação refere-se a terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, Fórmula (7a), ou um solvato da mesma.
TERMOS E ABREVIAÇÕES
[070]Os artigos "um" e "uma", conforme usados nesta divulgação, podem referir-se a um ou mais de um (ou seja, a pelo menos um) do objeto gramatical do artigo. A título de exemplo, "um elemento" significa um elemento ou mais de um elemento.
[071]Conforme usado nesta divulgação, "e/ou" pode significar "e" ou "ou", salvo indicação em contrário.
[072]Como usado no presente documento, pode referir-se a uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[073]"Alquila" pode se referir a um hidrocarboneto saturado de cadeia linear ou ramificada. Os grupos C1-C3alquila contêm 1 a 3 átomos de carbono.
Exemplos de um grupo C1-C3alquila incluem, mas não estão limitados a, metila, etila e propila.
[074]"Reagente do grupo protetor Boc" pode referir-se a um reagente que pode ser usado para instalar um grupo protetor Boc em um grupo amina.
Exemplos de reagentes do grupo protetor Boc incluem, mas não estão limitados a, anidrido Boc (Boc2O), N-terc-butoxicarbonilimidazol, 2-(terc- butoxicarboniloxi-imino)-2-fenilacetonitrila, 2-(terc-butoxicarboniltio)-4,6- dimetilpirimidina, 1-terc-butoxicarbonil-1,2,4-triazol, carbonato de terc-butilfenil, N-(terc-butoxicarbonilóxi)ftalimida, carbonato de terc-butil 2,4,5-triclorofenil e carbonato (Boc-ONb) de terc-butil ((4R,7S)-1,3-dioxo-1,3,3a,4,7,7a-hexa-hidro- 2H-4,7-metanoisoindol-2-il).
[075]"Reagente de remoção Boc" pode referir-se a um reagente que pode ser usado para separar um grupo protetor Boc em um grupo amina.
Exemplos de reagentes de remoção Boc incluem, mas não estão limitados a, TFA, ácido fosfórico aquoso, ácido metanossulfônico (MSA ou MsOH), SnCl4, HCl/dioxano, e HCl/MeOH. Outros exemplos de reagentes de remoção Boc incluem HCl, H2SO4 e PTSA (ácido p-toluenossulfônico ou ácido tosílico).
[076]Um "ácido de Lewis" pode referir-se a um composto ou espécie iônica que pode aceitar um par de elétrons de um composto doador. Exemplos de ácidos de Lewis incluem, mas não estão limitados a, Zn(OAc)2, ZnCl2, Zn(OPiv)2. Além disso, outros cátions metálicos, tais como cátions de cobre e níquel, podem atuar como ácidos de Lewis.
[077]"Reagente do grupo protetor PNZ" pode referir-se a um reagente que pode ser usado para instalar um grupo protetor p-nitrobenziloxicarbonila em um grupo amina. Exemplos de reagentes do grupo protetor PNZ podem incluir, mas não estão limitados a, 1-{[(p-nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H- benzotriazol e 4-nitrobenzil 1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato.
[078]Os termos "1-{[(p-nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H-benzotriazol" ou "PNZ-Bt" podem referir-se a compostos da Fórmula: .
[079]O termo "4-nitrobenzil 1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato" pode referir-se a compostos da Fórmula: .
[080]“Reagente de desproteção PNZ” pode referir-se a um reagente que pode ser usado para clivar um grupo protetor p-nitrobenziloxicarbonila ou um grupo amina. Exemplos de agentes de desproteção PNZ podem incluir, mas não estão limitados a, ditionito de sódio e hidrogenação com H2 e Pd/C ou PtO2.
[081]O termo "grupo protetor", conforme usado no presente documento, pode referir-se a uma fração química lábil que é conhecida na técnica para proteger grupos reativos, incluindo, sem limitação, grupos hidroxila e amino, contra reações indesejadas durante procedimentos sintéticos. Grupos hidroxila e amino que protegeram com um grupo protetor são referidos no presente documento como "grupos protetores hidroxila" e "grupos protetores amino", respectivamente. Grupos protetores são normalmente usados seletivamente e/ou ortogonalmente para proteger locais durante reações em outros locais reativos e podem ser removidos para deixar o grupo desprotegido como está ou disponível para reações adicionais.
Grupos protetores conforme conhecidos na técnica são descritos geralmente em Greene e Wuts, Protective
Groups in Organic Synthesis, 3a edição, John Wiley & Sons, Nova Iorque
(1999). Os grupos podem ser incorporados seletivamente nos aminoglicosídeos descritos no presente documento como precursores.
Por exemplo, um grupo amino pode ser colocado em um composto descrito no presente documento como um grupo azido que pode ser quimicamente convertido no grupo amino em um ponto desejado na síntese.
Geralmente, os grupos são protegidos ou presentes como um precursor que será inerte a reações que modificam outras áreas da molécula progenitora para conversão em seus grupos finais em um período apropriado.
Além disso, grupos protetores representativos ou precursores são discutidos em Agrawal et al.,
Protocols for Oligonucleotide Conjugatess, Eds, Humana Press; Nova Jersey,
1994; Vol. 26 págs. 1-72. Exemplos de "grupos protetores hidroxila" incluem,
mas não estão limitados a, t-butila, t-butoximetila, metoximetila, tetra-
hidropiranila, 1-etoxietila, 1-(2-cloroetóxi)etila, 2-trimetilsililetila, p-clorofenila,
2,4-dinitrofenila, benzila, 2,6-diclorobenzila, difenilmetila, p-nitrobenzila,
trifenilmetila, trimetilsilila, trietilsilila, t-butildimetilsilila, t-butildifenilsilila (TBDPS),
trifenilsilila, benzoílformato, acetato, cloroacetato, tricloroacetato, trifluoro-
acetato, pivaloato, benzoato, p-fenilbenzoato, carbonato de 9-fluorenilmetila,
mesilato e tosilato.
Exemplos de "grupos protetores amino" incluem, mas não estão limitados a, 2-trimetilsililetoxicarbonila (Teoc), 1-metil-1-(4-bifenilil)etóxi-
carbonila (Bpoc), t-butoxicarbonila (Boc), alliloxicarbonila (Alloc), 9-
fluorenilmetiloxicarbonila (Fmoc), benziloxicarbonila (Cbz),
p-nitrobenziloxicarbonila (PNZ), formila, acetila, tri-haloacetila (e.g., trifluoroacetila), benzoíla, nitrofenilacetila, 2-nitrobenzenesulfonila, ftalimido, e ditiasuccinoíla.
PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (9) E INTERMEDIÁRIOS DA MESMA:
[082]A presente divulgação inclui processos, métodos, reagentes e intermediários para a síntese de um composto da Fórmula (9), que tem a estrutura:  x H2SO4(9), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla e em que x é 1 a 5.
[083]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (9) é sulfato de plazomicina, que tem a estrutura: , ou um solvato da mesma, em que x é 1 a 5.
[084]O sulfato de plazomicina também pode ser referido como sulfato de (2"R,3"R,4"R,5"R)-2"-[(1S,2S,3R,4S,6R)-4-amino-6-[(2'”S)-4'”-amino-2'”-
hidroxibutanamido)amino]-3-[(2'S,3'R)-3'-amino-6'-((2-hidroxietilamino)metil)-
3’,4’-di-hidro-2H-piran-2’-ilóxi]-2-hidroxiciclo-hexilóxi]-5”-metil-4”-
(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-3”,5”-diol.
A plazomicina também pode ser referida como:
6'-(hidroxiletil)-1-(HABA)-sisomicina;
6'-(2-hidróxi-etil)-1-(4-amino-2 (S)-hidróxi-butiril)-sisomicina;
(2S)-4-Amino-N-[(1R,2S,3S,4R,5S)-5-amino-4-[[(2S,3R)-3-amino-6-[(2-
hidroxietilamino)metil]-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il]oxi]-2-[(2R,3R,4R,5R)-3,5-di-
hidroxi-5-metil-4-(metilamino)oxan-2-il]oxi-3-hidroxiciclo-hexil]-2-
hidroxibutanamida;
Butanamida, 4-amino-N-[(1R,2S,3S,4R,5S)-5-amino-4-[[(2S,3R)-3-
amino-3,4-di-hidro-6-[[(2-hidroxietil)amino]metil]-2H-piran-2-il]oxi]-2-[[3-deóxi-4-
C-metil-3-(metilamino)-β-L-arabinopiranosil]oxi] -3-hidroxiciclo-hexil]-2-hidróxi-,
(2S)-;
D-Estreptamina, O-2-amino-2,3,4,6-tetradeóxi-6-[(2-hidroxietil)amino]-
a-D-glicero-hex-4-enopiranosil-(1→4)-N-[3-desóxi-4-C-metil-3- (metilamino)-b-
L-arabinopiranosil-(1→6)]-N1-[(2S)-4-amino-2-hidróxi-1-oxobutil]-2-desóxi-;
O-2-Amino-2,3,4,6-tetradeóxi-6-[(2-hidroxietil)amino]-a-D-glicero-hex-4-
enopiranosil-(1→4)-O-[3-deóxi-4-C-metil-3-(metilamino)-b-L-arabinopiranosil-
(1→6)]-N1-[(2S)-4-amino-2-hidróxi-1-oxobutil]-2-deóxi-D-estreptamina; e
(2S)-4-amino-N-[(1R,2S,3S,4R,5S)-5-amino-4-{[(2S,3R)-3-amino-6-{[(2-
hidroxietil)amino]metil}-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il]oxi}-2-{[3-deóxi-4-C-metil-3-
(metilamino)-β-L-arabinopiranosil]óxi}-3-hidroxiciclo-hexil]-2-hidroxibutanamida.
[085]A numeração de átomos convencional para plazomicina é mostrada abaixo: .
[086]Um processo para a preparação de um composto da Fórmula (9) e certos intermediários obtidos na preparação de um composto da Fórmula (9) é ilustrado no Esquema 1 abaixo e é discutido em mais detalhes no presente documento.
ESQUEMA 1
[087]Conforme observado acima, a presente divulgação fornece processos para preparar compostos da Fórmula (9), que incluem sulfato de plazomicina, que não é apenas escalável para quantidades comerciais, mas que também é reproduzível de forma confiável lote a lote nessa escala comercial e que também possui um bom rendimento.
Assim, os métodos sintéticos e os processos de purificação descritos no presente documento descrevem um processo escalonável e economicamente favorável para a preparação de compostos da Fórmula (9) e intermediários da mesma, que não dependem de etapas caras e/ou elaboradas durante a preparação, tornando essa metodologia especialmente favorável à produção em larga escala de antibióticos.
[088]Os processos compreendem reações que podem obter compostos intermediários através de uma combinação de condições e etapas de reação.
Por exemplo, a funcionalização seletiva da posição 6'-N foi um desafio. No entanto, como descrito na presente divulgação, a reação do composto da Fórmula (6) ao composto da Fórmula (7), conforme descrito no presente documento, produziu inesperadamente produtos de monoalquilação, enquanto que em circunstâncias normais, há a expectativa de que tais reações levem a alquilação.
[089]Os processos também podem compreender a cristalização de certos intermediários. Conforme descrito no presente documento, a cristalização de certos intermediários auxilia no processo de purificação (por exemplo, reduz impurezas) e simplifica o processo de purificação em comparação com os processos de purificação anteriores. Por exemplo, os processos de purificação anteriores incluíam precipitação, que pode fornecer pureza e/ou propriedades mais pobres do composto isolado. As etapas de precipitação também podem diminuir o rendimento e levar a uma maior variabilidade de lote para lote no nível de impurezas. A cristalização, conforme descrito no presente documento, pode atuar para purgar impurezas. Além disso, embora seja necessário um esforço significativo para determinar inicialmente as condições de cristalização apropriadas, uma vez que as condições de cristalização são determinadas, o processo é direto e reproduzível. Por exemplo, amostras de cristais podem ser coletadas de uma rodada anterior de cristalização para serem usadas como cristais de sementes para futuras cristalizações. Conforme discutido abaixo, os compostos das Fórmula (4), (6) e (7) podem ser cristalizados.
[090]Os compostos descritos no presente documento e o processo de produção dos compostos podem incluir sais dos compostos descritos neste documento. Os sais representativos incluem, mas não estão limitados a, por exemplo, sais solúveis em água e insolúveis em água, tais como o acetato, amsonato (4,4-diaminostilbeno-2,2-dissulfonato), benzenossulfonato, benzonato, bicarbonato, bisulfato, bitartarato, borato, brometo, butirato, cálcio, edetato de cálcio, camsilato, carbonato, cloreto, citrato, clavulariado, dihidrocloreto, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gluceptado, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexafluorofosfato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromidrato, cloridrato, hidroxinaftoato, iodeto, setionato, lactato, lactobionato, laurato, magnésio, malato, maleato, mandelato, mesilato, brometo de metila, nitrato de metila, sulfato de metila, mucato, napsilato, nitrato, sal de N-metilglucamina e amônio, 3-hidroxi-2-naftoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato (1,1-meteno-bis-2-hidróxi-3-naftoato, einbonato), pantotenato, fosfato/difosfato, picrato, poligalacturonato, propionato, p-toluenossulfonato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, sulfossalicilato, suramato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato, trietiodeto e sais de valerato.
[091]Um sal também pode incluir sais de adição de ácido. Um "sal de adição de ácido" pode referir-se aos sais que retêm a eficácia biológica e as propriedades das bases livres, que não são biológicos ou de outro modo indesejáveis e que são formados com ácidos inorgânicos, tais como, mas não limitados a, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico,
ácido fosfórico e similares, e ácidos orgânicos, tais como, mas não limitados a, ácido acético, ácido 2,2-dicloroacético, ácido adípico, ácido algínico, ácido ascórbico, ácido aspártico, ácido benzenosulfônico, ácido benzóico, ácido 4- acetamidobenzóico, ácido canfórico, ácido cânfora-10-sulfônico, ácido caprico, ácido capróico, ácido caprílico, ácido carbônico, ácido cinâmico, ácido cítrico, ácido ciclâmico, ácido dodecilsulfúrico, ácido etano-1,2-dissulfônico, ácido etanossulfônico, ácido 2-hidroxietanossulfônico, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido galactárico, ácido gentísico, ácido glucoheptônico, ácido glucônico, ácido glucurônico, ácido glutâmico, ácido glutárico, ácido 2-oxo-glutárico, ácido glicerofosfórico, ácido glicólico, ácido hipúrico, ácido isobutírico, ácido lático, ácido lactobiônico, ácido láurico, ácido maleico, ácido málico, ácido malônico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido mucico, ácido naftaleno-l, 5- dissulfônico, ácido naftaleno-2-sulfônico, ácido l-hidróxi-2-naftóico, ácido nicotínico, ácido oleico, ácido orótico, ácido oxálico, ácido palmítico, ácido pamóico, ácido propiônico, ácido piroglutâmico, ácido pirúvico, ácido salicílico, ácido 4-aminossalicílico, ácido sebácico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido tiociânico, ácido p-toluenossulfônico, ácido trifluoroacético, ácido undecilênico e similares.
[092]Os compostos descritos no documento e o processo de produção dos compostos podem incluir solvatos dos compostos descritos no presente documento. O termo "solvato" pode referir-se a um complexo de estequiometria variável formado por um soluto e solvente. Tais solventes para os propósitos da divulgação não podem interferir com a atividade biológica do soluto. Exemplos de solventes adequados podem incluir, mas não estão limitados a, água, MeOH, EtOH e AcOH. Os solvatos em que a água é a molécula do solvente são normalmente referidos como hidratos. Os hidratos podem incluir composições contendo quantidades estequiométricas de água, bem como composições contendo quantidades variáveis de água.
[093]Os técnicos no assunto reconhecerão se existe um estereocentro em qualquer um dos compostos descritos neste documento e no processo de produção dos compostos. Por conseguinte, a presente divulgação inclui ambos os estereoisômeros possíveis (a menos que a estereoquímica seja especificada no presente documento) e inclui não apenas compostos racêmicos, mas também os enantiômeros individuais e/ou diastereômeros.
Além disso, os técnicos no assunto reconhecerão se existe um isômero posicional ou geométrico para um composto descrito no presente documento.
Por conseguinte, a presente divulgação inclui todos os possíveis isômeros posicionais ou geométricos (a menos que o isômero seja especificado neste documento). Nas estruturas mostradas no presente documento, onde a estereoquímica de qualquer átomo quiral em particular não é especificada ou o isômero geométrico ou posicional não é especificado, todos os estereoisômeros e isômeros geométricos ou posicionais são contemplados e incluídos nos compostos aqui descritos e no processo de produção do compostos. Onde a estereoquímica ou isômero geométrico ou posicional são especificados, então essa estereoquímica ou isômero geométrico ou posicional são especificados e definidos.
[094]O termo "estereoisômeros" pode se referir ao conjunto de compostos que têm o mesmo número e tipo de átomos e compartilham a mesma conectividade de ligação entre esses átomos, mas que diferem na estrutura tridimensional. O termo "estereoisômero" pode se referir a qualquer membro deste conjunto de compostos. Por exemplo, um estereoisômero pode ser um enantiômero ou um diastereômero. Os compostos descritos no presente documento e o processo de produção dos compostos podem incluir estereoisômeros.
[095]O termo "enantiômeros" pode se referir a um par de estereoisômeros que são imagens espelhadas não sobrepostas entre si. O termo "enantiômero" pode se referir a um único membro desse par de estereoisômeros. O termo "racêmico" pode se referir a uma mistura 1:1 de um par de enantiômeros. Os compostos descritos no presente documento e o processo de produção dos compostos podem incluir enantiômeros. Cada composto divulgado no presente documento pode incluir todos os enantiômeros que estão de acordo com a estrutura geral do composto (a menos que o enantiômero seja aqui especificado). Os compostos podem estar numa forma racêmica ou enantiomericamente pura, ou qualquer outra forma em termos de estereoquímica (a menos que a estereoquímica seja especificada no presente documento). Em algumas modalidades, os compostos são o enantiômero-(S). Noutras formas de realização, os compostos são o enantiómero-(R). Em ainda outras modalidades, os compostos são os enantiômeros (+) ou (-). Em algumas modalidades, os compostos descritos no presente documento podem ser enriquecidos para fornecer predominantemente um enantiômero de um composto aqui descrito.
Uma mistura enriquecida enantiomericamente pode compreender, por exemplo, pelo menos 60% em mol de um enantiômero, ou, mais preferencialmente, pelo menos 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5 ou mesmo 100% em mol. Em algumas modalidades, o composto descrito no presente documento enriquecido em um enantiômero pode estar substancialmente livre do outro enantiômero, em que substancialmente livre significa que a substância em questão representa menos que 10%, ou menos que 5%, ou menos que 4%, ou menos que 3% ou menos que 2% ou menos que 1% em comparação com a quantidade do outro enantiômero, por exemplo, na mistura de composto. Por exemplo, se uma mistura de composto contiver 98 gramas de um primeiro enantiômero e 2 gramas de um segundo enantiômero, seria dito que continha 98% em mol do primeiro enantiômero e apenas 2% em mol do segundo enantiômero.
[096]O termo "diastereômeros" pode se referir ao conjunto de estereoisômeros que não podem ser sobrepostos pela rotação em torno de ligações simples. Por exemplo, ligações duplas cis- e trans-, endo- e exo- substituições em sistemas de anéis bicíclicos e compostos contendo múltiplos centros estereogênicos com diferentes configurações relativas são considerados diastereômeros. O termo "diastereômero" pode se referir a qualquer membro deste conjunto de compostos. Em alguns exemplos apresentados, a via sintética pode produzir um único diastereômero ou uma mistura de diastereômeros. Os compostos descritos no presente documento e o processo de produção dos compostos podem incluir diastereômeros. Em algumas modalidades, os compostos descritos aqui podem ser enriquecidos para fornecer predominantemente um diastereômero de um composto divulgado no presente documento. Uma mistura diastereomericamente enriquecida pode compreender, por exemplo, pelo menos 60% em mol de um diastereômero, ou mais preferencialmente pelo menos 75, 99, 95, 96, 97, 98, 99 ou mesmo 100% em mol.
[097]Além disso, os compostos descritos no presente documento e o processo de produção dos compostos incluem todos os isômeros geométricos e posicionais. Por exemplo, se um composto descrito no presente documento incorporar uma ligação dupla ou um anel fundido, ambas as formas cis e trans, bem como as misturas, podem ser adotadas dentro do escopo da divulgação.
Se o composto contiver uma ligação dupla, o substituinte pode estar na configuração E ou Z (a menos que a configuração seja especificada no presente documento). Se o composto contiver uma cicloalquila dissubstituída, o substituinte cicloalquila pode ter uma configuração cis ou trans (a menos que a configuração seja especificada no presente documento).
[098]Os compostos descritos no presente documento podem ainda incluir todos os compostos marcados isotopicamente. Um composto "isotopicamente marcado" ou "radiomarcado" é um composto em que um ou mais átomos são substituídos ou substituídos por um átomo tendo uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa atômica normalmente encontrado na natureza (isto é, que ocorre naturalmente). Por exemplo, em algumas modalidades, nos compostos descritos no presente documento, os átomos de hidrogênio podem ser trocados ou substituídos por um ou mais deutério ou trítio. Certos compostos isotopicamente marcados desta divulgação, por exemplo, aqueles que incorporam um isótopo radioativo, podem ser úteis em estudos de distribuição de fármaco e/ou substrato tecidual. Os isótopos radioativos trítio, isto é, 3H e carbono 14, isto é, 14C, são particularmente úteis para este propósito, tendo em vista sua facilidade de incorporação e meios de detecção prontos. A substituição por isótopos mais pesados, tais como o deutério, isto é, 2H, pode proporcionar certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, por exemplo, aumento da meia-vida in vivo ou necessidade de dosagem reduzida e, portanto, pode ser preferido em algumas circunstâncias.
Isótopos adequados que podem ser incorporados nos compostos descritos neste documento podem incluir, mas não estão limitados a, 2H (também escrito como D para deutério), 3H (também escrito como T para trítio), 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 35S, 36Cl , 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I, e 131I. A substituição por isótopos emissores de positrões, tais como 11C, 18F, 15O, e 13N, pode ser útil em estudos de Topografia por Emissão de Positrões (PET).
[099]Os compostos de qualquer uma das Fórmulas descritas no presente documento podem ser preparados por métodos conhecidos na técnica da síntese orgânica, conforme estabelecido em parte pelos seguintes esquemas sintéticos e exemplos em conjunto com as orientações aqui fornecidas. Nos esquemas descritos abaixo, entende-se que grupos protetores para grupos sensíveis ou reativos podem ser empregados quando necessário, de acordo com princípios gerais ou química de acordo com as orientações aqui fornecidas. Os grupos de proteção podem ser manipulados de acordo com métodos padrão de síntese orgânica (T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Terceira edição, Wiley, Nova York 1999). Esses grupos podem ser removidos em um estágio conveniente da síntese de compostos usando métodos que são prontamente aparentes aos técnicos no assunto com base nos ensinamentos detalhados fornecidos no presente documento. Os processos de seleção, bem como as condições da reação e a ordem de sua execução, devem ser consistentes com a presente divulgação.
[0100]Os Esquemas 2 a 5 seguintes também ilustram a síntese de um composto da Fórmula (9) e seus intermediários.
ESQUEMA 2: SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (4)
[0101]O Esquema 2 mostra a síntese de um composto da Fórmula (4), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma No Esquema 2, R1 é H ou C1- C3 alquila; R2 é H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila; e é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (2)
[0102]Com referência contínua ao Esquema 2, em algumas modalidades, as reações detalhadas no Esquema 2 são realizadas a uma temperatura de até 60 °C. Um composto da Fórmula (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser colocado em contato com um reagente do grupo protetor PNZ para formar um composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em algumas modalidades, o reagente do grupo protetor PNZ é selecionado a partir de 1-{[(p-nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H- benzotriazol (PNZ-Bt) e 4-nitrobenzil 1H-benzo [d]imidazol-1-carboxilato. Em algumas modalidades, o reagente do grupo protetor PNZ é PNZ-Bt.
[0103]Em algumas dessas modalidades, o reagente do grupo protetor PNZ pode estar presente na reação em cerca de 1,0 a 1,2 equivalentes molares ao composto da Fórmula (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em algumas modalidades, a reação entre um composto da Fórmula (1), ou um enantiômero, ou um diastereômero, e um reagente do grupo protetor PNZ pode ser realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em diclorometano, um álcool e uma combinação do mesmos. Em certas tais modalidades, o álcool é metanol. A presença de metanol pode aumentar a seletividade da reação, quando R1, R2, e/ou R3 são H. Em outras modalidades, a reação entre um composto da Fórmula (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e um reagente do grupo protetor PNZ pode ser realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em diclorometano, etanol, e uma combinação dos mesmos.
[0104]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (2) pode ser usado na reação seguinte sem purificação substancial.
[0105]Em certas modalidades, R1, R2, e R3 em um composto da Fórmula (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, são H. Em certas modalidades, o composto da Fórmula (2) é um composto da Fórmula (2a): (2a);
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, é uma ligação dupla.
[0106] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (1) colocado em contato com um reagente do grupo protetor PNZ pode ser sisomicina de base livre (mostrada abaixo): .
Em certas modalidades, o composto da Fórmula (2) é um composto da Fórmula (2b): , ou um sal da mesma ou um solvato da mesma.
SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (3)
[0107]Com referência contínua ao Esquema 2, um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, podem ser sintetizados a partir de um composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, é uma ligação dupla.
[0108]Quando R1, R2, e R3 são H, o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, podem ser colocados em contato com um reagente do grupo protetor Boc (terc-butiloxicarbonil) para obter um composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em outras modalidades, quando um ou mais de R1, R2, ou R3 são independentemente uma C1-C3 alquila, um ou mais grupos C1-C3 alquila são removidos e o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser colocado em contato com um reagente do grupo protetor Boc para obter o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma
[0109]Em algumas modalidades, o reagente do grupo protetor Boc é dicarbonato de di-terc-butil, N-(t-butoxicarbonilóxi)-5-norbornene-endo-2,3- dicarboximida, N-terc-butoxicarbonilimidazol, 2-(terc-butoxicarboniloxi-imino)-2- fenilacetonitrila, 2-(terc-butoxicarboniltio)-4,6-dimetilpirimidina, 1-terc- butoxicarbonil-1,2,4-triazol, carbonato de terc-butil fenila, N-(terc- butoxicarbonilóxi)ftalimida, ou carbonato de terc-butil 2,4,5-triclorofenila. Em algumas modalidades, o reagente do grupo protetor Boc é Boc2O (anidrido Boc; dicarbonato de di-terc-butil) ou Boc-ONb (N-(t-butoxicarbonilóxi)-5- norborneno-endo-2,3-dicarboximida). Em certas modalidades, o reagente do
Grupo protetor Boc é o Boc2O. Em certas modalidades, o reagente do grupo protetor Boc é Boc-ONb.
[0110]A reação entre o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e o reagente do grupo protetor Boc pode ser realizada na presença de um ácido de Lewis. Em certas modalidades, o ácido de Lewis é Zn(OAc)2, ZnCl2, ou Zn(OPiv)2. Em alternativa, a reação entre o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e o reagente do grupo protetor Boc pode também ser realizada na presença de um ácido de Lewis compreendendo um íon de cobre ou um íon de níquel.
[0111]Além disso, a reação entre o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e o reagente do grupo protetor Boc pode ser realizada na presença de uma amina. Em algumas modalidades, a amina é 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU), piridina, piperidina, 4- dimetilaminopiridina (DMAP), 2,6-lutidina, dimetilanilina, N-metilpirrilidona, N-di- isopropiletilamina, N-metilimidazol, N-etildimetilamina, trimetilamina ou trietilamina. Em algumas modalidades, a amina é trietilamina.
[0112]Além disso, a reação entre o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e o reagente do grupo protetor Boc pode ser realizada na presença de um álcool. Em certas tais modalidades, o álcool é metanol.
[0113]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (3) pode ser usado na reação seguinte sem purificação substancial.
[0114]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (3), um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser um composto da Fórmula (3a): , ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, sintetizado por colocar em contato com o composto da Fórmula (2b), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc.
SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (4)
[0115]Com referência contínua ao Esquema 2, um composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser colocado em contato com para obter um composto da Fórmula (4): (4),
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, é uma ligação dupla.
[0116]A reação entre o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode ser realizada na presença de um reagente de ativação e de um reagente de acoplamento de peptídeo.
[0117]Um reagente de ativação refere-se a um reagente que converte a carbonila de um grupo ácido carboxílico em um que é mais suscetível ao ataque nucleofílico. Em algumas modalidades, a reagente de ativação é HATU, HOOBt, HOSu, HOAt, DMAP, BOP, PyBOP, PyBrOP, PyAOP, PyOxim, DEPBT, TBTU, HBTU, HCTU, HDMC, COMU, CDI, ou HOBt. Em certas modalidades, o reagente de ativação é HOBt. Em algumas modalidades, o reagente de ativação está presente em cerca de 0,05 a 1,0 equivalentes molares para .
[0118]Em algumas modalidades, o reagente de acoplamento de peptídeo é DCC, EDC, DIC, WSC, EDAC ou PyBOP. Em algumas modalidades, o reagente de acoplamento de peptídeo é EDAC ou PyBOP. Em certas modalidades, o reagente de acoplamento de peptídeo é EDAC. Em algumas modalidades, o reagente de acoplamento de peptídeo está presente em cerca de 1,0 a 1,4 equivalentes molares para . Em algumas modalidades, o reagente de acoplamento de peptídeo está presente em cerca de 1,0; 1,1; 1,2; 1.3; ou 1,4 equivalentes molares para .
[0119]A reação entre o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode ser realizada em uma condição ácida.
Em certas modalidades, a condição ácida é pH entre cerca de 4 e 7. Em certas modalidades, a condição ácida é pH em torno de 5.
[0120]A reação entre o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode ser realizada na presença de um álcool.
Em certas tais modalidades, o álcool é metanol.
[0121]O composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser um composto da Fórmula (4a): ,
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, sintetizado por colocar em contato o composto da Fórmula (3a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com .
[0122]A divulgação fornece ainda um processo que compreende preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (4), de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. A divulgação também forncece um processo que compreende isolar o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, por exemplo, conforme descrito no Exemplo 1.
[0123]Como observado no presente documento, certas etapas de cristalização sob condições particulares podem auxiliar na purificação pela purga de impurezas. E, uma vez estabelecidas as condições de cristalização, o uso da cristalização como um meio de purificação pode levar a bons rendimentos e menor variabilidade de lote para lote em impurezas, em comparação com os métodos anteriores de purificação.
ESQUEMA 3: SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (6)
[0124]O Esquema 3 mostra a síntese de um composto da Fórmula (6), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
Síntese de um Composto da Fórmula (5)
[0125]Com referência contínua ao Esquema de 3, um composto da Fórmula (4), ou um um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, podem ser colocado em contato com reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, é uma ligação dupla.
[0126]Um reagente de grupo protetor Boc padrão pode ser usado para esta transformação, incluindo, mas não limitado a, N-terc- butoxicarbonilimidazol, 2-(terc-butoxicarboniloxi-imino)-2-fenilacetonitrila, 2- (terc-butoxicarboniltio)-4,6-dimetilpirimidina, 1-terc-butoxicarbonil-1,2,4-triazol, carbonato de terc-butilfenil, N-(terc-butoxicarbonilóxi)ftalimida, carbonato de terc-butil 2,4,5-triclorofenil, Boc2O, e Boc-ONb. Em algumas modalidades, o reagente do grupo protetor Boc é Boc2O.
[0127]Em algumas modalidades, a reação entre o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e um reagente do grupo protetor Boc pode ser realizada a uma temperatura de até 60°C. Em algumas modalidades, a reação entre o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e um reagente do grupo protetor Boc pode ser realizada na presença de um álcool. Em certas modalidades, o álcool é metanol ou etanol. Em certas tais modalidades, o álcool é metanol. O uso de um álcool na reação entre o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e um reagente do grupo protetor Boc pode auxiliar na telescopia com a próxima reação.
[0128]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (5) pode ser usado na reação seguinte sem purificação substancial.
[0129]O composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser um composto da Fórmula (5a): ,
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, sintetizado por colocar em contato o composto de fórmula (4a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com um reagente do grupo de proteção Boc.
SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (6)
[0130]Com referência contínua ao Esquema 3, um composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser colocado em contato com um reagente de desproteção PNZ para obter um composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, é uma ligação dupla.
[0131]Em algumas modalidades, o reagente de desproteção PNZ é ditionito de sódio. Em outras modalidades, a reação de desproteção PNZ pode ser hidrogenação com H2 e um catalisador, tal como Pd/C ou PtO2. O ditionito de sódio pode ser vantajoso em relação às reações de desproteção que requerem hidrogenação, pois pode ser mais fácil de usar em uma escala maior, pode ser quimioeletivo e menos perigoso e pode não exigir equipamento especial para uso.
[0132]O composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser um composto da Fórmula (6a):
, ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, sintetizados por colocar em contato o composto da Fórmula (5a), ou u um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com um reagente de desproteção PNZ.
[0133]A divulgação fornece ainda um processo parar preparar uma forma cristalina de composto da Fórmula (6), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. A divulgação também fornece um processo que compreende isolar o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, por exemplo, conforme descrito no Exemplo 2.
[0134]Assim, conforme observado anteriormente, esta cristalização pode auxiliar no processo de purificação (por exemplo, redução de impurezas) e simplificar o processo de purificação em comparação com métodos anteriores de purificação, potencialmente levando a uma maior reprodutibilidade para o processo como um todo.
ESQUEMA 4: SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (7)
[0135]O Esquema 4 mostra a síntese de um composto da Fórmula (7), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. é uma ligação simples ou uma ligação dupla. Em algumas modalidades, é uma ligação dupla.
[0136]A reação do composto da Fórmula (6) ao composto da Fórmula (7) é surpreendente no que diz respeito à alquilação. Em circunstâncias normais, uma amina primária, tal como o grupo no composto da Fórmula (6), tem uma tendência a alquilar mais de uma vez. Assim, é surpreendente que o composto da Fórmula (7) compreende uma amina secundária (por exemplo, alquilada uma vez com -CH2CH2OH). Como discutido abaixo, as condições da reação, incluindo a escolha do solvente e o uso de um reagente para evitar superalquilação, podem fornecer monoalquilação no local apropriado.
SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (7)
[0137]Com referência contínua ao Esquema 4, um composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser colocado em contato com , onde LG1 é um grupo lábil, para obter um composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, o grupo lábil é iodo, bromo, ou cloro. Em certas modalidades, o grupo lábil é iodo. Em algumas modalidades, está presente em cerca de 1,0 a 1,5 equivalentes molares para o composto da Fórmula (6).
[0138]A reação entre o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode ser realizada em condições substancialmente livres de água. Em algumas modalidades, a reação entre o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode ser realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em acetonitrila, acetona e uma combinação das mesmas. A acetona pode axuiliar na selectividade da reação, promovendo monoalquilação. A acetonitrila pode ser usada para remover água por azeótropo.
[0139]Em algumas modalidades, a reação entre o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode ser realizada na presença de NaHCO3, carbonato de lítio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio, sulfato de sódio, DIPEA, fosfato de sódio, ortoformato de trimetila e hexametildisilano. Em certas modalidades, a reação é realizada na presença de NaHCO3. Em algumas modalidades, a reação entre o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode ser realizada a uma temperatura de cerca de 30 °C a 40 °C.
Em certas tais modalidades, a temperatura é de cerca de 35 °C. Temperaturas superiores a 50 °C podem levar à formação de um subproduto dialquilado.
[0140]A reação entre o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode ser temperada adicionando 1,4- diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) à mistura de reação. O DABCO pode ser usado para interromper substancialmente a reação e prevenir superalquilação.
De forma alternativa, a reação entre o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, e pode também ser temperada adicionando 1-propilamina, piperidina, dietilamina, N-etildimetilamina, trietilamina, DBU, MeOH, tampão de carbonato, dimetilamina, cisteína, dietanolamina, ou NaOH.
[0141]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser um composto da Fórmula (7a): , um sal da mesma, ou um solvato da mesma, sintetizado por colocar em contato o composto da Fórmula (6a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com .
[0142]A divulgação fornece ainda um processo parar preparar uma forma cristalina de um composto da Fórmula (7), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. A divulgação também fornece um processo que compreende isolar o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, por exemplo, conforme descrito no Exemplo 3.
[0143]Esta cristalização pode auxiliar no processo de purificação (por exemplo, reduzindo impurezas) e simplifica a purificação em comparação com métodos anteriores de purificação. A cristalização também pode atuar para purgar impurezas.
ESQUEMA 5: SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (9)
[0144]O Esquema 5 mostra a síntese de um composto da Fórmula (9), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. é uma ligação simples ou uma ligação dupla e x é 1 a 5. Em algumas modalidades, é uma ligação dupla. Em algumas modalidades, x é 2 a 3.
SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (8)
[0145]Com referência contínua ao Esquema 5, um composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser colocado em contato com um reagente de remoção Boc para obter um composto da Fórmula (8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em algumas modalidades, o reagente de remoção Boc é TFA, MsOH (ácido metanossulfônico ou CH3SO3H), PTSA (ácido p-toluenossulfônico ou ácido tosílico), H2SO4, ou HCl. Em algumas modalidades, o reagente de remoção Boc é TFA ou MsOH. Em algumas modalidades, o reagente de remoção Boc é TFA, H2SO4, ou HCl.
[0146]Em algumas modalidades, o reagente de remoção Boc é TFA, obtendo assim um sal de TFA do composto da Fórmula (8), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. Conforme a reação de desproteção necessita ser anidra, o TFA é normalmente usado para esta transformação.
[0147]A etapa de remover o grupo Boc pode resultar na hidrólise do substrato e na presença do composto (IMP-1) imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação).
(IMP-1) Em certas modalidades, a etapa de remover o grupo Boc não resulta em hidrólise substancial e a presença do composto (IMP-1) imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação) é minimizada. Em certas modalidades, a presença ou quantidade de composto (IMP-1) pode ser determinada por HPLC. Em certas modalidades, o composto IMP-1 pode estar presente em uma quantidade de 0 a 7%, tal como cerca de 0, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, ou 7%, imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação). Quando a quantidade de IMP-1 é 0%, essa quantidade indica que a impureza especificada pode estar presente em níveis abaixo do nível de detecção de métodos analíticos típicos conhecidos e rotineiramente usados por técnicos no assunto (por exemplo, HPLC).
[0148]Em alguns casos, o ácido é TFA ou MsOH e a quantidade do composto IMP-1 pode ser de cerca de 0 a 2,5% imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação). Em alguns casos, o ácido é TFA ou MsOH e a quantidade do composto IMP-1 pode ser de cerca de 0 a 2,5% imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação).
Em alguns casos, o ácido é TFA e a quantidade do composto IMP-1 pode ser de cerca de 0 a 2,5%, tal como cerca de 0, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1, 1,5, 2 ou 2,5%, imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação).
Em alguns casos, o ácido é MsOH e a quantidade do composto IMP-1 pode ser de cerca de 0,2 a 2,5%, tal como cerca de 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1, 1,5, 2 ou 2,5%, imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação).
[0149]Em alguns casos, o ácido é HCl e a quantidade do composto IMP-1 pode ser de cerca de 0 a 1%, tal como cerca de 0, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 ou 1%, imediatamente após a reação (por exemplo, antes qualquer purificação).
[0150]Em alguns casos, o ácido é H2SO4 e a quantidade do composto IMP-1 pode ser de cerca de 0 a 7%, tal como cerca de 0, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5 ou 7%, imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação).
[0151]Quando um composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é colocado em contato com vários reagentes de remoção Boc, as quantidades de IMP-1 podem variar, dependendo da identidade do reagente de remoção Boc. A tabela abaixo mostra a quantidade de IMP-1 da reação do composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com vários reagentes de remoção Boc. HCl TFA MsOH H2SO4 Quantidade de 0% 0% 0% 0% IMP-1 0,81% 0,80% 2,50% 4,61% 6,61% 3,80% 5,52% 0,74% (de várias condições de reação)
[0152]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (8) pode ser usado na reação seguinte sem purificação substancial.
[0153]Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser um composto da Fórmula (8a):
, ou um solvato da mesma, sintetizado por colocar em contato o composto da Fórmula (7a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com um reagente de remoção Boc.
SÍNTESE DE UM COMPOSTO DA FÓRMULA (9)
[0154]A formação de sal com um ácido pode ser realizada para obter um sal de um composto da Fórmula (8), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma. Se o composto da Fórmula (8) já é um sal, tal como um sal de TFA, o sal pode ser removido para proporcionar um composto da Fórmula (8), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, antes da formação de um sal diferente.
[0155]Em algumas modalidades, o ácido na etapa de formação de sal é ácido sulfúrico, obtendo assim um sal de sulfato de um composto da Fórmula (9),  x H2SO4(9), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, em que x é de 1 a 5. Em algumas modalidades,
x é 2 a 3. O sal de sulfato de um composto da Fórmula (9) pode ter aprimorado a estabilidade em comparação com outros sais. Em algumas modalidades, o composto da Fórmula (9), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, pode ser sulfato de plazomicina: , ou um solvato do mesmo, sintetizado fazendo uma formação de sal com o composto da Fórmula (8a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, em que x é 1 a 5. Em algumas modalidades, x é 2 a 3.
COMPOSTOS CRISTALINOS E PREPARAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DOS MESMOS:
[0156]Em um aspecto, a divulgação refere-se a intermediários em um processo sintético que pode ser usado para sintetizar o composto da Fórmula (9), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Estes intermediários podem estar em uma forma cristalina. A divulgação fornece métodos para produzir intermediários cristalinos no processo sintético que podem ser usado para sintetizar o composto da Fórmula (9), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Os intermediários cristalinos da divulgação podem ser caracterizados por difração de raios X em pó (XRPD), Calorimetria de varredura diferencial (DSC) e análise termogravimétrica (TGA). Os métodos de coleta de dados de XRPD, DSC e TGA e as propriedades dos intermediários cristalinos da divulgação são ainda ilustrados nos Exemplos abaixo.
COMPOSTOS 4 E 4A
[0157]Em algumas modalidades, o intermediário na síntese de um composto da Fórmula (9), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, é um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em algumas dessas modalidades, o composto da Fórmula (4) é da seguinte Fórmula: (4a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma. Em certas tais modalidades, o composto da Fórmula (4a) é terc-butil ((2S,3R)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6-
(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, ou um solvato da mesma.
[0158]Em algumas modalidades, terc-butil ((2S,3R)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6- (((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, ou um solvato do mesmo, é caracterizado pelo padrão XRPD no qual as posições de pico estão substancialmente de acordo com as mostradas na Figura 1.
[0159]Em algumas modalidades, terc-butil ((2S,3R)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6- (((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, ou um solvato do mesmo, é caracterizado pelo traço de TGA mostrado na Figura 2. Em algumas modalidades, terc-butil ((2S,3R)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6- (((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, ou um solvato do mesmo, é caracterizado pelo perfil DSC na Figura
3.
[0160]A divulgação fornece um processo para preparar terc-butil ((2S,3R)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6- (((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, da Fórmula (4a), ou um solvato da mesma, compreendendo: (a)tratar a Fórmula (4a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
(b)aquecer a solução da etapa (a); (c)adicionar água à solução aquecida da etapa (b); (d)resfriar a solução da etapa (c); (e)carregar a solução da etapa (d) com um cristal de semente; e (f)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (4a) cristalina, ou um solvato da mesma.
[0161]Em algumas modalidades do processo para preparar terc-butil ((2S,3R)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6- (((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato, acetonitrila com água desionizada (DI) a 1,5% a 75 ± 3 °C com semeadura seguida de resfriamento pode ser usada para cristalização. Adicionalmente, a cristalização pode ser realizada a 65 ± 3 °C ou 70 ± 3 °C, seguida de resfriamento. Em algumas modalidades, 1-propanol, com ou sem água desionizada (DI), pode ser usado em vez de acetonitrila para a cristalização de terc-butil ((2S,3R)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidróxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-
hexil)oxi)-6-(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3- il)carbamato. As condições de cristalização rastreadas estão em suma no Exemplo 1 e na Tabela 5.
COMPOSTO 6A
[0162]Em algumas modalidades, o intermediário na síntese de um composto da Fórmula (9), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é um composto da Fórmula (6a): , ou um sal da mesma ou um solvato da mesma. Em certas tais modalidades, a divulgação fornece terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a), ou um solvato da mesma.
[0163]Em algumas modalidades, terc-butil((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, ou um solvato do mesmo, é caracterizado pelo padrão de XRPD no qual as posições de pico estão substancialmente de acordo com os mostrados na Figura 4 e Tabela 1. Em algumas modalidades, há uma variabilidade de cerca de + 0,2 o2θ aos ângulos de difração em padrões de XRPD, por exemplo, conforme representado na Tabela 1.
TABELA 1: DADOS DE XRPD PARA O COMPOSTO CRISTALINO DA FÓRMULA (6A) 2-Teta 5,37 6,10 10,66 12,17 13,08 14,00 15,00 16,65 17,65 18,31 18,55 20,06 20,61 21,41 22,99 24,21
[0164]Em certas modalidades, terc-butil((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, ou um solvato do mesmo, é caracterizado por um ou mais valores de 2θ a cerca de 6,10, 10,66, 12,17, 17,65; e 18,55 graus na difração de raios X em pó, onde há uma variabilidade de cerca de + 0,2 o2θ aos ângulos de difração nos padrões de XRPD.
[0165]Em algumas modalidades, terc-butil((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, ou um solvato do mesmo, é caracterizado pelo traço de TGA mostrado na Figura 5. O principal evento exotérmico no DSC do terc-butil((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, ou de um solvato do mesmo, mesmo ocorreu com uma temperatura limite esquerda de 231,8 °C e energia de -52,9 kJ/kg (Figura 6).
[0166]A divulgação fornece um processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a), ou um solvato da mesma, compreendendo: (a)tratar a Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com acetato de isopropila (IPAc) para produzir uma solução; (b)adicionar água à solução da etapa (a) para produzir uma mistura;
(c)adicionar diclorometano à mistura da etapa (b) para produzir uma mistura; (d)carregar a mistura da etapa (c) com um cristal de semente; (e)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (6a) cristalina, ou um solvato da mesma.
[0167]Em algumas modalidades, a etapa (d) é realizada em uma temperatura baixa. Em algumas modalidades, a etapa (d) é realizada a cerca de 15 a 25 °C, tal como cerca de 15 a 20 °C ou cerca de 20 a 25 °C.
[0168]Em algumas modalidades do processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) com 1% de água, acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com 2% de água ou acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com 8% de água podem ser usados. Em certas modalidades, diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) podem ser usados com água a 1%. O acetato de isopropila não é necessário para a cristalização, mas pode estar presente como um solvente de extração. A filtragem pode ser mais fácil ao isolar sólidos de diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) com água a 1% como sólidos pegajosos e alguma deliquescência foi observada em sólidos isolados de acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) ambos com água a 2% e a 8%.
Além disso, o material isolado de diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) com 1% de água era cristalino. Entretanto, o material isolado de acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com água a 2% foi desordenado, e o material isolado de acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com água a 8% pode conter uma pequena quantidade de material amorfo de raio-x. As condições de cristalização rastreadas estão em suma no Exemplo 2.
COMPOSTOS 7 E 7A
[0169]Em algumas modalidades, o intermediário na síntese de um composto da Fórmula (9), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, é um composto da Fórmula (7): , ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma. Em certas modalidades, o composto da Fórmula (7) é o da seguinte Fórmula:
OH NHBoc
O H OH
N HO O O O NBoc
OH BocHN NH NHBoc
O OH (7a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma. Em determinadas tais modalidades, o composto da Fórmula (7a) é terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-
il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino ou um solvato da mesma.
[0170]Em algumas modalidades, terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, Fórmula (7a) ou um solvato da mesma, é caracterizado pelo padrão XRPD no qual as posições de pico estão substancialmente de acordo com as mostradas na Figura 7 e na Tabela 2. Em algumas modalidades, há uma variabilidade de cerca de + 0,2 o2θ aos ângulos de difração em padrões de XRPD, por exemplo, conforme representado na Tabela 2.
TABELA 2: DADOS DE XRPD PARA O COMPOSTO CRISTALINO DA FÓRMULA (7A)
2-Teta 5,17 5,45 7,39 10,28 10,85 11,87 12,17 13,58 13,97 14,76 16,28 17,22 17,79 18,51 19,08 20,58 20,98 21,75 22,18 23,02 23,91 25,90 27,85 31,75 36,00 37,78
[0171]Em certas modalidades, terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, Fórmula (7a) ou um solvato da mesma, é caracterizado por um ou mais valores de 2θ a cerca de 5,17, 7,39, 10,85 e
12,17 graus em difração de raios X em pó, onde há uma variabilidade de cerca de + 0,2 o2θ aos ângulos de difração nos padrões de XRPD.
[0172]Em algumas modalidades, terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, Fórmula (7a), ou um solvato da mesma, é caracterizado pelo traço de TGA mostrado na Figura 8) O perfil DSC do terc- butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6- ((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, Fórmula (7a) ou um solvato da mesma, é mostrado na Figura 9.
[0173]A divulgação fornece um processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (7a), ou um solvato da mesma, compreendendo: (a)tratar a Fórmula (7a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com acetato de isopropila (IPAc) para produzir uma solução;
(b)adicionar acetonitrila à solução da etapa (a) para produzir uma mistura; (c)carregar a mistura da etapa (b) com um cristal de semente; (d)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (7a) cristalina, ou um solvato da mesma.
[0174]Em algumas modalidades do processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, 10% v/v de IPAc/ACN dopado com 0,75 a 2% p/p de água com semeadura pode ser usado. Além disso, um longo tempo de espera na temperatura de semeadura (por exemplo,> 2 horas entre 60 °C e 65 °C) e uma rampa de resfriamento lenta (por exemplo, 60 °C a 0 °C a 5 a 10 °C/h) podem ser usados para obter uma suspensão móvel. O teor de água pode ser usado no controle da robustez da cristalização. As cristalizações com 0,5 a 2% de água adicionada podem ser mais reproduzíveis com uma recuperação consistente (por exemplo, geralmente maior que 80%) e podem ter uma melhoria na pureza. Este procedimento pode purgar substancialmente o composto não reagido da Fórmula (6a), uma impureza penta-Boc (por exemplo, 63% de purga combinada) e o subproduto dialquilado (por exemplo, 36% de purga) e pode proporcionar produtos sólidos facilmente filtráveis e laváveis. As condições de cristalização rastreadas estão em suma no Exemplo 3 e nas Tabelas 7 a 11.
MODALIDADES EXEMPLARES
[0175]Algumas modalidades desta divulgação são Modalidade I, como segue:
[0176]Modalidade I-1.Processo para preparar um composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, caracterizado pelo fato de que compreende: (a)colocar em contato um composto da Fórmula (1): (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com 1-{[(p-nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H-benzotriazol (PNZ-Bt) para formar o composto da Fórmula (2): (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; em que é uma ligação simples ou ligação dupla; R1 é H ou C1-C3 alquila; R2 é H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila.
[0177]Modalidade I-2.Processo de acordo com a modalidade I-1, caracterizado pelo fato de que a etapa (a) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em diclorometano, metanol e uma combinação dos mesmos.
[0178]Modalidade I-3.Processo de acordo com a modalidade I-1 ou I-2, caracterizado pelo fato de que PNZ-Bt está presente em cerca de 1,0 a 1,2 equivalentes molares ao composto da Fórmula (1), ou a um enantiômero da mesma, ou a um diastereômero da mesma.
[0179]Modalidade I-4.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-1 a I-3, caracterizado pelo fato de que compreende ainda as etapas (b1) ou (b2): (b1)em que, quando R1, R2, e R3 são H, colocar em contato o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; ou (b2)em que, quando um ou mais de R1, R2, ou R3 é independentemente uma C1-C3 alquila, primeiramente remover a referida C1-C3 alquila e, em seguida, colocar em contato o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0180]Modalidade I-5.Processo de acordo com a modalidade I-4, caracterizado pelo fato de que o reagente do grupo protetor Boc é Boc2O ou Boc-ONb.
[0181]Modalidade I-6.Processo de acordo com a modalidade I-4 ou I-5, caracterizado pelo fato de que as etapas (b1) ou (b2) são realizadas na presença de um ácido de Lewis.
[0182]Modalidade I-7.Processo de acordo com a modalidade I-6, caracterizado pelo fato de que o ácido Lewis é Zn(OAc)2, ZnCl2, ou Zn(OPiv)2.
[0183]Modalidade I-8.Processo de acordo com a modalidade I-6, caracterizado pelo fato de que o ácido de Lewis compreende um íon de cobre ou um íon de níquel.
[0184]Modalidade I-9.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-4 a I-8, caracterizado pelo fato de que as etapas (b1) ou (b2) são realizadas na presença de trietilamina.
[0185]Modalidade I-10.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-4 a I-8, caracterizado pelo fato de que as etapas (b1) ou (b2) são realizadas na presença de metanol.
[0186]Modalidade I-11.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-4 a I-10, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (c)colocar em contato o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com para obter um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0187]Modalidade I-12.Processo de acordo com a modalidade I-11, caracterizado pelo fato de que a etapa (c) é realizada na presença de um reagente de ativação e de um reagente de acoplamento de peptídeo.
[0188]Modalidade I-13.Processo de acordo com a modalidade I-12, caracterizado pelo fato de que o reagente de ativação é HOBt.
[0189]Modalidade I-14.Processo de acordo com a modalidade I-13, caracterizado pelo fato de que o reagente de ativação está presente em cerca de 0,05 a 1,0 equivalentes molares para .
[0190]Modalidade I-15.Processo de acordo com a modalidade I-12, caracterizado pelo fato de que o reagente de acoplamento de peptídeo é EDAC ou PyBOP.
[0191]Modalidade I-16.Processo de acordo com a modalidade I-15, caracterizado pelo fato de que o reagente de acoplamento de peptídeo está presente em cerca de 1,0 a 1,4 equivalentes molares para .
[0192]Modalidade I-17.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-11 a I-16, caracterizado pelo fato de que a etapa (c) é realizada em uma condição ácida.
[0193]Modalidade I-18.Processo de acordo com a modalidade I-17, caracterizado pelo fato de que a condição ácida é pH em torno de 4 e 7.
[0194]Modalidade I-19.Processo de acordo com a modalidade I-17, caracterizado pelo fato de que a condição ácida é pH em torno de 5.
[0195]Modalidade I-20.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-11 a I-19, caracterizado pelo fato de que compreende ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (4), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0196]Modalidade I-21.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-11 a I-20, caracterizado pelo fato de que compreende ainda isolar o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0197]Modalidade I-22.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-11 a I-21, caracterizado pelo fato de que compreende ainda:
(d)colocar em contato o compostos da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (5): (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0198]Modalidade I-23.Processo de acordo com a modalidade I-22, caracterizado pelo fato de que o reagente do grupo protetor Boc é Boc 2O.
[0199]Modalidade I-24.Processo de acordo com a modalidade I-22 ou I- 23, caracterizado pelo fato de que a etapa (d) é realizada na presença de um álcool.
[0200]Modalidade I-25.Processo de acordo com a modalidade I-24, caracterizado pelo fato de que o álcool é metanol.
[0201]Modalidade I-26.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-22 a I-25, caracterizado pelo fato de que a etapa (d) é realizada a uma temperatura de até cerca de 60 °C.
[0202]Modalidade I-27.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-22 a I-26, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (e)colocar em contato o composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma com um reagente de desproteção PNZ para obter um composto da Fórmula (6): (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0203]Modalidade I-28.Processo de acordo com a modalidade I-27, caracterizado pelo fato de que o reagente de desproteção PNZ é ditionito de sódio.
[0204]Modalidade I-29.Processo de acordo com a modalidade I-27 ou I- 28, caracterizado pelo fato de que compreende ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (6), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0205]Modalidade I-30.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-27 a I-29, caracterizado pelo fato de que compreende ainda isolar o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0206]Modalidade I-31.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-27 a I-30, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (f)colocar em contato o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com , em que LG1 é um um grupo lábil, para obter um composto da Fórmula (7): (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0207]Modalidade I-32.Processo de acordo com a modalidade I-31, caracterizado pelo fato de que o grupo lábil é iodo.
[0208]Modalidade I-33.Processo de acordo com a modalidade I-31, caracterizado pelo fato de que está presente em cerca de 1,0 a 1,5 equivalentes molares ao composto da Fórmula (6).
[0209]Modalidade I-34.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-31 a I-33, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada em condições substancialmente livres de água.
[0210]Modalidade I-35.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-31 a I-34, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em acetonitrila, acetona e uma combinação das mesmas.
[0211]Modalidade I-36.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-31 a I-35, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada na presença de NaHCO3.
[0212]Modalidade I-37.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-31 a I-36, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada a uma temperatura de cerca de 30 °C a 40 °C.
[0213]Modalidade I-38.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-31 a I-37, caracterizado pelo fato de que compreende ainda adicionar 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) a uma mistura de reação.
[0214]Modalidade I-39.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-31 a I-38, caracterizado pelo fato de que compreende ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (7), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0215]Modalidade I-40.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-31 a I-39, caracterizado pelo fato de que compreende ainda isolar o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0216]Modalidade I-41.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-31 a I-40, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (g)colocar em contato o composto da Fórmula (7) com um reagente de remoção Boc para obter um composto da Fórmula (8): (8),
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0217]Modalidade I-42.Processo de acordo com a modalidade I-41, caracterizado pelo fato de que o reagente de remoção Boc é TFA, obtendo assim um sal de TFA do composto da Fórmula (8), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0218]Modalidade I-42a. Processo de acordo com a modalidade I-41 ou I-42, caracterizado pelo fato de que composto (IMP-1) (IMP-1) está presente imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação) em uma quantidade menor que 7%.
[0219]Modalidade I-42b. Processo de acordo com a modalidade I-41 ou I-42, caracterizado pelo fato de que composto (IMP-1) (IMP-1) está presente imediatamente após a reação (por exemplo, antes de qualquer purificação) em uma quantidade menor que 2,5%.
[0220]Modalidade I-43.Processo de acordo com a modalidade I-42, caracterizado pelo fato de que compreende ainda remover o sal de TFA para proporcionar um composto da Fórmula (8), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0221]Modalidade I-44.O processo de acordo com a modalidade I-41 ou I-43, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (h) realizar uma formação de sal com um ácido para obter um sal de um composto da Fórmula (8), ou um de solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0222]Modalidade I-45.Processo de acordo com a modalidade I-44, caracterizado pelo fato de que o ácido na etapa (h) é ácido sulfúrico, obtendo assim um sal de sulfato de um composto da Fórmula (9):  x H2SO4(9), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, em que x é de 1 a 5.
[0223]Modalidade I-46.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-1 a I-3, caracterizado pelo fato de que R1, R2, ou R3 são H.
[0224]Modalidade I-47.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-1 a I-46, caracterizado pelo fato de que é uma ligação dupla.
[0225]Modalidade I-48.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-1 a I-10, caracterizado pelo fato de que a estereoquímica em átomos de carbono 1, 3, 4, 5, 6, 1', 2', 1", 2", 3", e 4" nas Fórmulas (1) a (3) é indicada conforme na Fórmula (X), em que indica um ponto de ligação ao hidrogênio ou a uma fração: (X).
[0226]Modalidade I-49.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-11 a I-47, caracterizado pelo fato de que a estereoquímica em átomos de carbono 1, 3, 4, 5, 6, 1', 2', 1", 2", 3", 4", e 1-z nas Fórmulas (4) a (9) é indicada conforme na Fórmula (Y), em que indica um ponto de ligação ao hidrogênio ou a um fração: (Y).
[0227]Modalidade I-50.Processo para preparar um composto da Fórmula (5): (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma,
o processo caracterizado pelo fato de que compreende: (a)colocar em contato um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[0228]Modalidade I-51.Processo de acordo com a modalidade I-50, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com .
[0229]Modalidade I-52.Processo de acordo com a modalidade I-51, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por:
(b1)colocar em contato um composto da Fórmula (2a): (2a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc; ou (b2)remover C1-C3 alquila em um composto da Fórmula (2): (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; em que R1 é H ou C1-C3 alquila; R2 é H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila, e em que um ou mais de R1, R2, ou R3 são independentemente uma C1-C3 alquila; e, em seguida, colocar em contato o composto da Fórmula (2), ou um um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc.
[0230]Modalidade I-53.Processo de acordo com a modalidade I-52, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (2), um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (1):
(1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; com 1-{[(p-nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H-benzotriazol (PNZ-Bt).
[0231]Modalidade I-54.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-50 a I-53, caracterizado pelo fato de que o reagente do grupo protetor Boc é Boc2O.
[0232]Modalidade I-55.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-50 a I-54, caracterizado pelo fato de que as etapas (a), (b1) ou (b2) são realizadas na presença de um álcool.
[0233]Modalidade I-56.Processo de acordo com a modalidade I-55, caracterizado pelo fato de que o álcool é metanol.
[0234]Modalidade I-57.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-50 a I-56, caracterizado pelo fato de que as etapas (a), (b1), ou (b2) são realizadas a uma temperatura de até cerca de 60 °C.
[0235]Modalidade I-58.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-50 a I-57, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (e)colocar em contato o composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma com um reagente de desproteção PNZ para obter um composto da Fórmula (6):
(6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0236]Modalidade I-59.Processo de acordo com a modalidade I-58, caracterizado pelo fato de que o reagente de desproteção PNZ é ditionito de sódio.
[0237]Modalidade I-60.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-50 a I-59, caracterizado pelo fato de que compreende ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (6), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0238]Modalidade I-61.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-50 a I-60, caracterizado pelo fato de que compreende ainda isolar o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0239]Modalidade I-62.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-50 a I-61, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (f)colocar em contato o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com , em que LG1 é um um grupo lábil, para obter um composto da Fórmula (7):
(7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0240]Modalidade I-63.Processo de acordo com a modalidade I-62, caracterizado pelo fato de que o grupo lábil é iodo.
[0241]Modalidade I-64.Processo de acordo com a modalidade I-62, caracterizado pelo fato de que está presente em cerca de 1,0 a 1,5 equivalentes molares ao composto da Fórmula (6).
[0242]Modalidade I-65.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-62 a I-64, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada em condições substancialmente livres de água.
[0243]Modalidade I-66.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-62 a I-65, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em acetonitrila, acetona e uma combinação das mesmas.
[0244]Modalidade I-67.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-62 a I-66, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada na presença de NaHCO3.
[0245]Modalidade I-68.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-62 a I-67, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada a uma temperatura de cerca de 30 °C a 40 °C.
[0246]Modalidade I-69.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-62 a I-68, caracterizado pelo fato de que compreende ainda adicionar 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) a uma mistura de reação.
[0247]Modalidade I-70.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-62 a I-69, caracterizado pelo fato de que compreende ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (7), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0248]Modalidade I-71.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-62 a I-70, caracterizado pelo fato de que compreende ainda isolar o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0249]Modalidade I-72.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-62 a I-71, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (g)colocar em contato o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente de remoção Boc para obter um composto da Fórmula (8): (8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0250]Modalidade I-73.Processo de acordo com a modalidade I-72, caracterizado pelo fato de que o reagente de remoção Boc é TFA, obtendo assim um sal de TFA do composto da Fórmula (8), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0251]Modalidade I-74.Processo de acordo com a modalidade I-73, caracterizado pelo fato de que compreende ainda remover o sal de TFA para proporcionar um composto da Fórmula (8), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0252]Modalidade I-75.Processo de acordo com a modalidade I-72 ou I- 74, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (h)realizar uma formação de sal com um ácido para obter um sal de um composto da Fórmula (8), ou um de solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0253]Modalidade I-76.Processo de acordo com a modalidade I-75, caracterizado pelo fato de que o ácido na etapa (h) é ácido sulfúrico, obtendo assim um sal de sulfato de um composto da Fórmula (9):  x H2SO4(9), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, em que x é de 1 a 5.
[0254]Modalidade I-77.Processo para preparar um composto da Fórmula (7):
(7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, caracterizado pelo fato de que compreende: (f)colocar em contato um composto da Fórmula (6), (6), ou um sal, ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com , em que LG1 é um grupo lábil, e em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla.
[0255]Modalidade I-78.Processo de acordo com a modalidade I-77, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (5):
(5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente de desproteção PNZ.
[0256]Modalidade I-79.Processo de acordo com a modalidade I-78, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc.
[0257]Modalidade I-80.Processo de acordo com a modalidade I-79, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (3):
(3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com .
[0258]Modalidade I-81.Processo de acordo com a modalidade I-80, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por: (b1)colocar em contato um composto da Fórmula (2a): (2a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; com um reagente do grupo protetor Boc; ou (b2)remover C1-C3 alquila em um composto da Fórmula (2): (2),
ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; em que R1 é H ou C1-C3 alquila; R2 é H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila, e em que um ou mais de R1, R2, ou R3 são independentemente uma C1-C3 alquila; e, em seguida, colocar em contato o composto da Fórmula (2) com um reagente do grupo protetor Boc.
[0259]Modalidade I-82.Processo de acordo com a modalidade I-81, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (1): (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; com 1-{[(p-nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H-benzotriazol (PNZ-Bt).
[0260]Modalidade I-83.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 a I-82, caracterizado pelo fato de que o grupo lábil é iodo.
[0261]Modalidade I-84.Processo de acordo com a modalidade I-83, caracterizado pelo fato de que está presente em cerca de 1,0 a 1,5 equivalentes molares ao composto da Fórmula (6).
[0262]Modalidade I-85.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 a I-84, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada em condições substancialmente livres de água.
[0263]Modalidade I-86.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 a I-85, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em acetonitrila, acetona e uma combinação das mesmas.
[0264]Modalidade I-87.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 a I-86, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada na presença de NaHCO3.
[0265]Modalidade I-88.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 a I-87, caracterizado pelo fato de que a etapa (f) é realizada a uma temperatura de cerca de 30 °C a 40 °C.
[0266]Modalidade I-89.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 a I-88, caracterizado pelo fato de que compreende ainda adicionar 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) a uma mistura de reação.
[0267]Modalidade I-90.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 a I-89, caracterizado pelo fato de que compreende ainda preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (7), de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0268]Modalidade I-91.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 a I-90, caracterizado pelo fato de que compreende ainda isolar o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0269]Modalidade I-92.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-77 A I-91, caracterizado pelo fato de que compreende ainda: (g)colocar em contato o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente de remoção Boc para obter um composto da Fórmula (8): (8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0270]Modalidade I-93.Processo de acordo com a modalidade I-92, caracterizado pelo fato de que o reagente de remoção Boc é TFA, obtendo assim um sal de TFA do composto da Fórmula (8), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0271]Modalidade I-94.Processo de acordo com a modalidade I-93, caracterizado pelo fato de que compreende ainda remover o sal de TFA para proporcionar um composto da Fórmula (8), ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0272]Modalidade I-95.Processo de acordo com a modalidade I-92 ou I- 94, caracterizado pelo fato de que compreende ainda:
(h)realizar uma formação de sal com um ácido para obter um sal de um composto da Fórmula (8), ou um de solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
[0273]Modalidade I-96.Processo de acordo com a modalidade I-95, caracterizado pelo fato de que o ácido na etapa (h) é ácido sulfúrico, obtendo assim um sal de sulfato de um composto da Fórmula (9):  x H2SO4(9), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, em que x é de 1 a 5.
[0274]Modalidade I-97.Processo de acordo com qualquer uma das modalidades I-50 a I-96, caracterizado pelo fato de que é uma ligação dupla.
[0275]Modalidade I-98.Composto caracterizado pelo fato de que é apresentado na Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0276]Modalidade I-99.Composto da Modalidade I-98, em que o composto da Fórmula (4) é da seguinte Fórmula:
(4a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma.
[0277]Modalidade I-100.Composto caracterizado por terc-butil ((2S,3R)- 2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6- (((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, da Fórmula (4a), ou um solvato da mesma.
[0278]Modalidade I-101.Processo para preparar terc-butil ((2S,3R)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6- (((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, da Fórmula (4a), ou um solvato da mesma, caracterizado pelo fato de que compreende: (a)tratar a Fórmula (4a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
(b)aquecer a solução da etapa (a); (c)adicionar água à solução aquecida da etapa (b); (d)resfriar a solução da etapa (c); (e)carregar a solução da etapa (d) com um cristal de semente; e
(f)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (4a) cristalina, ou um solvato da mesma.
[0279]Modalidade I-102.Composto caracterizado por terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a), ou um solvato da mesma.
[0280]Modalidade I-103.Processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a), ou um solvato da mesma, caracterizado pelo fato de que compreende: (a)tratar a Fórmula (6a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com acetato de isopropila (IPAc) para produzir uma solução; (b)adicionar água à solução da etapa (a) para produzir uma mistura; (c)adicionar diclorometano à mistura da etapa (b) para produzir uma mistura; (d)carregar a mistura da etapa (c) com um cristal de semente; (e)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (6a) cristalina, ou um solvato da mesma.
[0281]Modalidade I-104.Processo de acordo com a modalidade I-103, caracterizado pelo fato de que a etapa (d) é realizada a uma temperatura baixa.
[0282]Modalidade I-105.Composto caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (7): , ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
[0283]Modalidade I-106.Composto de acordo com a modalidade I-105, caracterizado pelo fato de que o composto da Fórmula (7) é da seguinte Fórmula: (7a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma.
[0284]Modalidade I-107.Composto caracterizado por terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (7a), ou um solvato da mesma.
[0285]Modalidade I-108.Processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-
((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (7a), ou um solvato da mesma, caracterizado pelo fato de que compreende: (a)tratar a Fórmula (7a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, com acetato de isopropila (IPAc) para produzir uma solução; (b)adicionar acetonitrila à solução da etapa (a) para produzir uma mistura; (c)carregar a mistura da etapa (b) com um cristal de semente; (d)isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (7a) cristalina, ou um solvato da mesma.
EXEMPLOS
[0286]A divulgação é ainda ilustrada pelos exemplos a seguir, que não devem ser interpretados como limitando essa divulgação em escopo ou espírito aos procedimentos específicos descritos. Deve ser entendido que os exemplos são fornecidos para ilustrar certas modalidades e que nenhuma limitação ao escopo da divulgação se destina a isso. Deve ser entendido ainda que se pode recorrer a várias outras modalidades, modificações e equivalentes das mesmas que podem sugerir-se aos técnicos no assunto sem se afastar do espírito da presente divulgação e/ou escopo das reivindicações anexas.
[0287]Salvo indicação em contrário, os componentes de partida podem ser obtidos de fontes como Sigma Aldrich, Lancaster Synthesis, Inc., Maybridge, Matrix Scientific, TCI e Fluorochem USA, etc., ou sintetizados de acordo com fontes conhecidas pelos técnicos no assunto (vide, por exemplo,
Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure, 5ª edição (Wiley, dezembro de 2000)) ou preparados conforme descrito no presente documento.
[0288]A sisomicina de base livre é um glicosídeo fermentado e foi obtida de Zhejiang Zhenyuan Pharmaceutical Co. Ltd. Boc-(S)-HABA foi obtido de Senn Chemicals AG ou Porton Fine Chemicals Inc. PNZ-Bt foi obtido de Luxembourg BioTechnologies LTD (KINSY S.L.) ou Porton Fine Chemicals Inc.
2-iodoetanol foi obtido de Dona Chemicals, Polônia.
[0289]As seguintes abreviações têm os seguintes significados, a menos que indicado de outra forma, e quaisquer outras abreviações usadas no presente documento e não definidas têm seu significado padrão geralmente aceito: % a/a: porcentagem normalizada de área Ac: acetato ACN: acetonitrila Boc: terc-butoxicarbonil BocO2: dicarbonato de di-terc-butil ou anidrido Boc Boc-ONb: carbonato de terc-butil ((4R,7S)-1,3-dioxo-1,3,3a,4,7,7a- hexahidro-2H-4,7-metanoisoindol-2-il) DABCO: 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano DBU: 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno DCM: diclorometano DI: água desionizada DIPE: éter di-isoproílico DIPEA: N, N-di-isopropiletilamina
DMF: dimetilformamida,
DSC: calorimetria de varredura diferencial
EDAC: cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N′-etilcarboxi-imida
EtOH: etanol
GC: cromatografia gasosa h ou hr: hora(s)
HABA: ácido 4-amino-2-hidróxi-butanóico
HCl: ácido clorídrico
HOBt: hidrato de 1-hidroxibenzotriazol
HPLC: cromatografia líquida de alta eficiência
IPA: álcool isopropílico
IPAc: acetato de isopropila
CL/MS: cromatografia líquida/espectrometria de massa
MeCN: acetonitrila
MeOH: metanol min: minuto(s)
MTBE: éter terc-butil de metila
NaOH: hidróxido de sódio
PNZ-Bt: 1-{[(p-nitrobenzil)óxi]carbonil}-1H-benzotriazol ppm: partes por milhão
PrOH: propanol
PyBOP: hexafluorofosfato (benzotriazol-1-ilóxi)tripirrolidinofosfônio
TA ou ta: temperatura ambiente
TBDMS: terc-butildimetilsilil
TEA: trietilamina
TFA: ácido trifluoroacético TGA: análise termogravimétrica THF: tetra-hidrofurano UPLC: cromatografia líquida de ultra eficiência UV: ultravioleta v/v: volume por volume vol ou vols: volume(s) % p/p: porcentagem peso em peso p: peso XRPD: difração de raios X em pó Zn (OPiv)2: pivalato de zinco
DIFRAÇÃO DE RAIOS X EM PÓ
[0290]Os padrões de XRPD foram coletados com um difratômetro PANalytical X’Pert PRO MPD usando um feixe incidente de radiação de Cu produzido usando uma fonte Optix de foco preciso e longo. Um espelho de múltiplas camadas elipticamente graduado foi usado para focalizar os raios X de Cu Kα através do espécime e no detector. Antes da análise, um espécime de silício (NIST SRM 640d) foi analisado para verificar se a posição observada do pico de Si 111 é consistente com a posição certificada pelo NIST. Um espécime da amostra foi ensanduichado entre filmes de 3 μm de espessura e analisado em geometria de transmissão. Um despejo de feixe, extensão curta de antiaderente e borda da faca antiaderente foram usados para minimizar o fundo gerado pelo ar. Fendas Soller para o incidente e feixes difratados foram usados para minimizar o alargamento da divergência axial. Os padrões de difração foram coletados usando um detector sensível à posição de varredura
(X’Celerator) localizado a 240 mm do espécime e do software Data Collector v.
2.2b.
ANÁLISE TÉRMICA
[0291]A calorimetria de varredura diferencial (DSC) foi realizada usando um TA Instruments DSC com uma rampa de temperatura de 0 C a 300 C a uma taxa de 10°C/min. Foram usadas panelas de alumínio padrão.
[0292]A análise termogravimétrica (TGA) foi realizada usando um analisador termogravimétrico TA Instruments 2950. A calibração da temperatura foi realizada usando níquel e AlumeI™. Cada amostra foi colocada em uma panela de platina e inserida no forno TG. O forno foi aquecido sob uma purga de nitrogênio.
EXEMPLO 1 - PROTOCOLO SINTÉTICO PARA O COMPOSTO 4A
[0293]A seguir é descrito um protocolo sintético geral para o Composto 4a.
PARTE 1: SÍNTESE DO COMPOSTO 2B
[0294]Sisomicina de base livre (1,0 kg ± 1%, 2,23 mol) é carregada em um reator, seguida por MeOH (3,96 kg ± 5% ou 5 L ± 5%) e depois DCM (6,64 kg ± 5% ou 5 L ± 5%) . A temperatura é então estabilizada a 15°C ± 5 °C e a mistura é agitada para atingir a dissolução completa. A temperatura pode ser aumentada para cerca de 30 °C, a fim de auxiliar a dissolução. Após dissolução, a mistura é resfriada a uma temperatura de 15 ± 5°C. Em um tanque de mistura separado, PNZ-Bt [(0,696 kg) ± 1%, 2,33 mol)] é dissolvido em DCM (18,59 kg ± 5% ou 14 L ± 5%). A solução PNZ-Bt é carregada ao reator por um período de cerca de 1 a cerca de 4 horas, mantendo uma temperatura de lote de 15 ± 5 ºC. Ao preparar a solução PNZ-Bt, o revestimento do tanque de carregamento não é aquecido a mais ou igual a cerca de 35 ºC para facilitar a dissolução de PNZ-Bt. Não é necessária a dissolução completa de PNZ-Bt.
[0295]O sistema de carregamento usado para a carga da solução PNZ- Bt é enxaguado com DCM (1,33 kg ± 5% ou 1 L ± 5%) e o enxágue é alimentado no reator (LoteT = 15 ± 5 °C). O lote é agitado a 15°C ± 5 °C e os teores recolhidos para completar a reação. A reação é considerada completa quando o teor de sisomicina não é maior que ou igual a cerca de 2, 0% de área, conforme avaliado pela análise HPLC (vide Tabela 3 para o método HPLC usado). A primeira amostra é coletada aproximadamente de 15 minutos a 12 horas após a conclusão da carga PNZ-Bt. Em algumas modalidades, a primeira amostra é coletada aproximadamente 30 minutos após a conclusão da carga PNZ-Bt. PNZ-Bt adicional em uma solução de DCM é carregado conforme necessário para completar a reação. A quantidade adicional de PNZ- Bt carregada é calculada com a seguinte Fórmula: Carga = P1 * D1/(100-D1 ± 1%, em que P1 = quantidade de PNZ-Bt em kg inicialmente carregada e D1 = quantidade de sisomicina não consumida em % de área por HPLC). Uma vez que a reação está completa, o lote é concentrado sob vácuo com uma temperatura de revestimento não maior que ou igual a cerca de 40 °C (por exemplo, 10 a 40 °C) até o volume residual ser de 5 L ± 5%.
[0296]O reator que contém o Composto 2b é então carregado com MeOH (5, 54 kg ± 5% ou 7, 00 L ± 5%). A mistura pode ser mantida a uma temperatura não maior que ou igual a cerca de 25°C (por exemplo, 0 a 25°C) por um período não maior que ou igual a 48 horas (por exemplo, 0 a 48 horas) antes da reação seguinte (Parte 2).
TABELA 3: MÉTODO DE HPLC PARA A PARTE 1 DO EXEMPLO 1
Coluna Waters X-Bridge C18, 3,5 m 150 mm x 4,6 mm Temperatura da 40 °C Coluna Taxa de Fluxo 1 mL/min Detecção de 210 nm Comprimento de Onda Fases Móveis 0,25 M NH4OH em água 0,25 M NH4OH em metanol Gradiente Tempo % de Fase % de Fase (min) 0,00 Móvel 85 A Móvel 15 B 28,0 15 85 30,0 15 85 30,1 85 15 40,0 85 15 Tempo de execução 40 min Volume de Injeção 10 L PARTE 2: SÍNTESE DO COMPOSTO 3A
[0297]Trietilamina [(1,48 L) ± 2% ou (1,08 kg ± 2%)] é carregada ao reator contendo o Composto 2b referido no final da Parte 1, mantendo uma temperatura de lote de cerca de 27 °C a cerca de 35 °C (alvo a cerca de 33 °C). O sistema de carregamento usado para a carga de trietilamina é enxaguado com MeOH (2,38 kg ± 5% ou 3,00 L ± 5%) e o enxágue é adicionado à mistura de reação. A temperatura do lote é estabilizada para cerca de 27 °C a cerca de 35 °C (alvo a cerca de 33 °C). Zn(OAc)2•2H2O (1,63 kg ± 2%) é carregado ao lote e o sistema de carregamento usado para a carga de di-hidrato de acetato de zinco é enxaguado com MeOH (2,38 kg ± 5% ou 3,00 L ± 5%) e o enxágue é adicionado à mistura de reação. A mistura é agitada de cerca de 30 minutos a 12 horas a cerca de 27 °C a cerca de 35 °C (alvo a cerca de 33 °C). Em certas modalidades, a mistura é agitada não mais do que ou igual a cerca de 60 minutos a cerca de 27°C a cerca de 35°C (alvo a cerca de 33°C).
[0298]Em um tanque de mistura separado, uma solução Boc2O [(2, 55 kg) ± 2%, 11,7 mol] em MeOH (1,58 kg ± 5% ou 2,00 L ± 5%) é preparada. A solução Boc2O preparada é carregada ao reator por cerca de 15 minutos a 12 horas, mantendo uma temperatura de lote de cerca de 27 °C a cerca de 35°C (alvo a cerca de 33°C). Em certas modalidades, a solução Boc2O preparada é carregada ao reator por um período não mais que ou igual a cerca de 1 hora, mantendo uma temperatura de lote de cerca de 27°C a cerca de 35°C (alvo a cerca de 33°C). O sistema de carregamento usado para a solução Boc 2O é enxaguado com metanol (0,16 kg ± 5% ou 0,20 L ± 5%) e o enxágue é adicionado ao reator.
[0299]O lote é mantido a uma temperatura alvo de cerca de 20 a 40 °C por cerca de 3 a 24 horas e a os teores da amostra recolhidos para completar a reação. Em certas modalidades, o lote é mantido a uma temperatura alvo de cerca de 33 °C por um período não maior que ou igual a cerca de 5 horas e os teores da amostra recolhidos para completar a reação. A reação é considerada completa quando o teor de um intermediário de Composto mono-Boc-2b:
em relação ao Composto 3a não é maior que ou igual a cerca de 2,0% em área pela análise por HPLC (vide Tabela 4 para o método de HPLC usado). A primeira amostra coletada para verificar a conclusão da reação é coletada após cerca de 15 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, a primeira amostra coletada para verificar a conclusão da reação é coletada após não menos do que ou igual a cerca de 5 horas e as amostras subsequentes (se necessário) são coletadas em intervalos de aproximadamente 3 horas. A temperatura do lote durante essa retenção não desvia fora da faixa de cerca de 27 a 35 °C. Em certos casos, Boc2O adicional é carregado para completar a reação. A carga é feita com a mesma concentração Boc2O usada na solução Boc2O preparada acima. A quantidade de Boc2O a ser carregada é calculada de acordo com a seguinte fórmula: Carga = P2 ∗ 2 ∗ D2/[100 - (2 ∗ D20] ± 2%, em que: P2 = a quantidade de Boc2O em kg inicialmente carregada e D2 = a quantidade de composto mono- Boc-2b restante em % de área por HPLC.
[0300]Uma vez que a reação está completa, a mistura de reação é concentrada sob vácuo a uma temperatura de revestimento não maior que ou igual a cerca de 40 °C (por exemplo, 20 a 40 °C) até o volume residual ser de 12 L ± 5%. A amônia a cerca de 25% p/p (5,46 kg ± 5% ou 6,00 L ± 5%) é carregada, enquanto se mantém uma temperatura de lote de cerca de 20 °C a cerca de 30 °C e mantida por cerca de 15 minutos a 12 horas nessa faixa de temperatura. Em certas modalidades, a amônia a cerca de 25% p/p (5,46 kg ± 5% ou 6,00 L ± 5%) é carregada enquanto se mantém uma temperatura de lote de cerca de 20 °C a cerca de 30 °C e mantida por não mais que ou igual a cerca de 1 hora nesta faixa de temperatura. A adição é exotérmica.
[0301]DCM (13,28 kg ± 5% ou 10,00 L ± 5%) é carregado ao lote e o teores são agitados por cerca de 12 minutos a 12 horas a 25 ± 5 °C. Em certas modalidades, DCM (13,28 kg ± 5% ou 10,00 L ± 5%) é carregado ao lote e os teores são agitados por não mais que ou igual a cerca de 30 minutos a 25 ± 5 °C. Os teores são deixados para assentamento e separação por cerca de 30 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, os teores são deixados para se assentar e separar por pelo menos ou igual a cerca de 45 minutos. A fase orgânica (fase inferior) é transferida para um receptor e a fase aquosa é descarregada para descarte. O produto está na fase orgânica.
[0302]A fase orgânica é carregada de volta para o reator. Amônia a cerca de 25% p/p (2,28 kg ± 5% ou 2,50 L ± 5%) e água desionizada (2,5 kg ± 5% ou 2,5 L ± 5%) misturadas em um tanque de mistura são carregadas à fase orgânica e agitadas por cerca de 15 minutos a 12 horas a 25 ± 5 °C. Em certas modalidades, amônia a cerca de 25% p/p (2,28 kg ± 5% ou 2,50 L ± 5%) e água DI (2,5 kg ± 5% ou 2,5 L ± 5%) misturadas em um tanque de mistura são carregadas à fase orgânica e agitadas por um período não maior que ou igual a cerca de 30 minutos a 25 ± 5 °C. Os teores são deixados se assentar e separar por cerca de 30 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, os teores são deixados para se assentar e separar por pelo menos ou igual a cerca de 45 minutos. A fase orgânica (fase inferior) é transferida para um receptor e a fase aquosa é descarregada para descarte. O produto está na fase orgânica.
[0303]A fase orgânica é carregada de volta ao reator e MeOH (0,79 kg ± 5% ou 1,00 L ± 5%) é carregado à fase orgânica e agitado por cerca de 15 a cerca de 30 minutos a 25 ± 5 °C. Água DI (5,0 kg ± 5% ou 5,0 L ± 5%) é carregada à mistura e agitada por cerca de 15 minutos a 12 horas a 25 ± 5 °C.
Em certas modalidades, água DI (5,0 kg ± 5% ou 5,0 L ± 5%) é carregada à mistura e agitada por não mais que ou igual a cerca de 30 minutos a 25 ± 5 °C.
Os teores são deixados se assentar e separar por cerca de 30 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, os teores são deixados para se assentar e separar por pelo menos ou igual a cerca de 1 hora. A fase orgânica (fase inferior) é transferida para um receptor e a fase aquosa é descarregada para descarte. O produto está na fase orgânica.
[0304]A fase orgânica é carregada de volta para o reator. MeOH (1,98 kg ± 5% ou 2,50 L ± 5%) é carregado à fase orgânica e agitado por cerca de 15 a cerca de 30 minutos a 25 ± 5 °C. A água DI (5,0 kg ± 5% ou 5,0 L ± 5%) é carregada na mistura e agitada por cerca de 15 minutos a 12 horas a 25 ± 5 °C.
Em certas modalidades, a água DI (5,0 kg ± 5% ou 5,0 L ± 5%) é carregada na mistura e agitada por não mais que ou igual a cerca de 30 minutos a 25 ± 5 °C.
Os teores são deixados se assentar e separar por cerca de 30 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, os teores são deixados para se assentar e separar por pelo menos ou igual a cerca de 2 horas. A fase orgânica (fase inferior) é transferida para um receptor e a fase aquosa é descarregada para descarte. O produto está na fase orgânica. O lote está sob vácuo a uma temperatura de revestimento não maior que ou igual a cerca de 40 °C (por exemplo, 20 a 40 °C) até o volume residual ser de aproximadamente 9 L ± 5%.
A mistura pode ser mantida a uma temperatura não maior que ou igual a cerca de 25 °C (por exemplo, 0 a 25 °C) por não mais que ou igual a cerca de 48 horas (por exemplo, 0 a 48 horas).
TABELA 4: MÉTODO DE HPLC PARA AS PARTES 2 E 3 DO EXEMPLO 1 Coluna Waters X-Bridge C18, 3,5 m 150 mm x 4,6 mm Temperatura da Coluna 40 °C Taxa de Fluxo 1 mL/min Detecção de 274 nm Comprimento de Onda Fases Móveis 0,25 M NH4OH em água 0,25 M NH4OH em metanol Gradiente Tempo % de Fase % de Fase (min) Móvel A Móvel B 0 90 10 5,0 50 50 35,0 10 90 40,0 10 90 40,1 90 10 45,0 90 10 Tempo de execução 45 min Volume de Injeção 10 L PARTE 3: SÍNTESE DO COMPOSTO 4A
[0305]Água DI (0,5 kg ± 5% ou 0,5 L ± 5%) é carregada à mistura da Parte 2 compreendendo o Composto 3a enquanto se mantém uma temperatura de reação de 20 ± 5 °C. Boc-(S)-HABA [(0,512 kg) ± 2%, 2,34 mol] é carregado à mistura de reação e a temperatura é mantida dentro da faixa de 20 ± 5 °C. O sistema de carregamento usado para a carga do Boc-(S)-HABA é enxaguado com DCM (0,27 kg ± 5% ou 0,20 L ± 5%) e o enxágue é adicionado à mistura de reação. A mistura é agitada a uma temperatura de lote de 20 ± 5 °C.
[0306]1-Hidroxibenzotriazol monohidratado (HOBt•H2O, 0,057 kg ± 2%, 0,42 mol) é carregado enquanto se mantém uma temperatura de reação de 20 ± 5 °C. O sistema de carregamento usado para a carga do HOBt•H2O é enxaguado com DCM (0,27 kg ± 5% ou 0,2 L ± 5%) e o enxágue é adicionado à mistura de reação.
[0307]O pH do lote é ajustado para 5,0 ± 0,2, enquanto se mantém uma faixa de temperatura de 20 ± 5 °C. O pH do lote é ajustado pela adição de solução de HCl de 2 M (conforme necessário). A solução ácida necessária é preparada em um recipiente adequado separado por adição de HCl concentrado (1,392 kg ± 5% ou 1,18 L ± 5%) à água DI (6,00 kg ± 5% ou 6,00 L ± 5%). O ajuste do pH normalmente requer uma carga de cerca de 3,5 a cerca de 4,5 L/kg. Em certos casos, se o pH cair abaixo de cerca de 4,8 (por exemplo, cerca de 5,0 +/- 0,2), uma solução de NaOH de 2 M é adicionada (conforme necessário) para trazer o pH do lote para a faixa especificada de 5,0 ± 0,2. Em certos casos, se necessário, a solução básica é preparada em um recipiente adequado a partir de NaOH (0,56 kg ± 5%) e água desionizada (7,0 kg ± 5% ou 7,0 L ± 5%).
[0308]EDAC [(0,447 kg) ± 2%, 2,33 mol] é carregado ao lote enquanto se mantém uma faixa de temperatura de 20 ± 5 °C. O sistema de carregamento usado para a carga do EDAC é enxaguado com DCM (0,27 kg ± 5% ou 0,20 L ± 5%) e o enxágue é adicionado à mistura de reação. A mistura é agitada a uma temperatura de reação de 20 ± 5 °C por cerca de 15 minutos a 6 horas e amostrada para o completamento da reação. Em certas modalidades, a mistura é agitada a uma temperatura de reação de 20 ± 5 °C por não mais que ou igual a cerca de 1 hora e amostrada para completamento da reação. A reação pode ser considerada completa quando o teor do Composto 3a em relação ao Composto 4a não for maior que ou igual a cerca de 1,0% em área pela análise por HPLC (método em suma na Tabela 4). O pH é verificado em cada amostragem e ajustado conforme necessário, mantendo um pH entre cerca de 4,8 e cerca de 6,0. Em certos casos, se necessário, soluções de HCl ou NaOH são adicionadas conforme descrito acima. A primeira amostra é coletada após cerca de 15 minutos a 6 horas em tempo de espera. Em certas modalidades, a primeira amostra é coletada após aproximadamente 1 hora em tempo de espera. Em certas modalidades, amostras adicionais são coletadas em intervalos de aproximadamente 3 horas. Se a reação não estiver completa após a coleta de duas amostras, EDAC e Boc-(S)-HABA adicionais serão carregados para completar a reação de acordo com a seguinte fórmula: Carga = P3*D3/(100-D3), onde: P3 = a quantidade de EDAC ou Boc-(S)-HABA em kg inicialmente carregada e D3 = a quantidade de Composto 3a não consumido em a/a%.
[0309]Uma vez completo, MeOH (1,58 kg ± 5% ou 2,00 L ± 5%) é carregado à reação, enquanto se mantém uma temperatura de reação de 20 ± 5 °C. DCM (15,94 kg ± 5% ou 12,00 L ± 5%) é então carregado à reação enquanto se mantém uma temperatura de lote de 20 ± 5 °C. Água DI (5,0 kg ± 5% ou 5,0 L ± 5%) é então carregada à reação enquanto se mantém uma temperatura de lote de 20 ± 5 °C. O pH do lote é ajustado entre cerca de 9,0 e cerca de 10,0 adicionando uma solução de NaOH de 2 M (conforme necessário) enquanto se mantém uma temperatura de 25 ± 5 °C.
O ajuste do pH normalmente requer uma carga de NaOH de 2 M de cerca de 3,5 a cerca de 4,5 L/kg.
Se o pH do lote for superior a 10,0, uma solução HCl de 2 M é carregada para alcançar a faixa especificada.
A mistura é agitada a uma temperatura de cerca de 20 °C a cerca de 38°C por cerca de 15 minutos a 12 horas.
Em certas modalidades, a mistura agita-se a uma temperatura de cerca de 20°C a cerca de 38°C por um período não maior que ou igual a cerca de 30 minutos.
Os teores são então são deixados para se assentar e separar por cerca de 30 minutos a 12 horas.
Em certas modalidades, os teores são então são deixados para se assentar e separar por pelo menos ou igual a cerca de 1 hora.
A fase orgânica (fase inferior) é transferida para um receptor e a fase aquosa é descarregada para descarte.
O produto está na fase orgânica.
A fase orgânica é carregada de volta ao reator seguida por MeOH (2,38 kg ± 5% ou
3,00 L ± 5%) enquanto se mantém a temperatura de lote entre cerca de 20 °C e cerca de 38 °C.
Água DI (7,0 kg ± 5% ou 7,0 L ± 5%) é então carregada à mistura e é agitada a uma temperatura entre cerca de 20 °C e cerca de 38 °C por cerca de 15 minutos a 12 horas.
Em certas modalidades, água DI (7,0 kg ±
5% ou 7,0 L ± 5%) é então carregada à mistura e é agitada a uma temperatura entre cerca de 20 °C e cerca de 38 °C por não mais que ou igual a cerca de 30 minutos.
Os teores são então são deixados para se assentar e separar por cerca de 30 minutos a 12 horas.
Em certas modalidades, os teores são deixados para se assentar e separar por pelo menos ou igual a cerca de 1 hora.
A fase orgânica (fase inferior) é transferida para um receptor e a fase aquosa é descarregada para descarte.
O produto está na fase orgânica.
O lote é concentrado sob vácuo a uma temperatura de revestimento não maior que ou igual a cerca de 40°C (por exemplo, 20 a 40°C) até o volume residual ser de aproximadamente 10 L ± 5%.
PARTE 4: CRISTALIZAÇÃO DO COMPOSTO 4A
[0310]Acetonitrila (7,87 kg ± 5% ou 10,00 L ± 5%) é carregada ao lote a partir da Parte 3 por cerca de 5 minutos a 4 horas. Em certas modalidades, acetonitrila (7,87 kg ± 5% ou 10,00 L ± 5%) é carregada ao lote a partir da Parte 3 por não menos que ou igual a cerca de 10 minutos. A mistura é concentrada sob vácuo a uma temperatura de revestimento não maior que ou igual a cerca de 40°C (por exemplo, 20 a 40°C), de modo a obter um volume residual final de aproximadamente 10 L ± 5%. Acetonitrila (7,87 kg ± 5% ou 10,00 L ± 5%) é carregada ao lote e é concentrada sob vácuo a uma temperatura de revestimento não maior que ou igual a 40°C (por exemplo, 20 a 40°C) para obter um volume residual final de aproximadamente 10 L ± 5%.
Acetonitrila (quantidade variável) é então carregada para alcançar um volume final de lote de aproximadamente 25 L ± 5%. Os teores do reator são uma suspensão espessa e opaca de sólidos brancos.
[0311]O lote é então aquecido ao refluxo (~82 °C) e mantido por cerca de 5 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, o lote é então aquecido ao refluxo (~82 °C) e mantido por não mais que ou igual a cerca de 15 minutos.
Durante o período de retenção, espera-se que nem todos os sólidos se dissolvam. A mistura é carregada com água DI (0,375 kg ± 5% ou 0,375 L ± 5%) enquanto se mantém o refluxo. O lote é agitado por cerca de 30 a cerca de 60 minutos para alcançar uma solução homogênea. Se uma solução homogênea não for obtida em cerca de 30 a 60 minutos, porções adicionais de água DI (0,125 kg ± 5% ou 0,125 L ± 5%) são carregadas para dissolver os sólidos restantes. Adicionar mais água normalmente tem um efeito benéfico menor sobre a qualidade, mas pode proporcionar um menor rendimento. Uma vez obtida uma solução homogênea, o lote é resfriado a uma temperatura de 75 ± 3 °C por cerca de 15 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, uma vez obtida uma solução homogênea, o lote é resfriado a uma temperatura de 75 ± 3 °C por um período não maior que ou igual a cerca de 1 hora.
[0312]O lote é carregado com a semente do Composto 4a (0,01 kg ± 2%) enquanto se mantém uma temperatura de 75 ± 3 °C. O recipiente e as fileiras de carga da suspensão de semente são enxaguados com acetonitrila (0,08 kg ± 5% ou 0,10 L ± 5%) e o enxágue é adicionado ao lote. O lote é então agitado por cerca de 15 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, o lote é então agitado por não menos que ou igual a cerca de 30 minutos. O lote é resfriado a uma temperatura de 50 ± 5 °C por 30 minutos a 12 horas e mantido por adicionais 2 a 12 horas, com agitação moderada para obter uma suspensão espessa. Em certas modalidades, o lote é resfriado a uma temperatura de 50 ± 5 °C por não menos que 2 horas ou igual a cerca de 2 horas e mantido por adicionais 2 a 12 horas com agitação moderada para obter uma suspensão espessa. O lote é resfriado a uma faixa de temperatura entre cerca de -5 e cerca de 5 °C por cerca de 1 a 24 horas e mantido por mais cerca de 4 a 12 horas. Em certas modalidades, o llote é resfriado a uma faixa de temperatura entre cerca de -5 e cerca de 5 °C por não menos que ou igual a cerca de 1 hora e mantido por um adicional de cerca de 4 a 12 horas. O lote é filtrado e deliquorado e o bolo do filtro é lavado com 0 ± 5 °C de acetonitrila (0,79 kg ± 5% ou 1,00 L ± 5%) e deliquorado.
[0313]O produto é seco sob vácuo a uma temperatura não maior que ou igual a cerca de 55°C (por exemplo, de 0 a 55°C). A secagem é considerada completa quando a perda por secagem não é maior que ou igual a cerca de 1% p/p. O produto é seco sob uma varredura de nitrogênio seco.
Após a secagem, o produto pode ser desamontoado com uma operação de peneiração adequada. O rendimento nass três etapas a partir da sisomicina de base livre para o Composto 4a é de cerca de 65%.
[0314]Uma cristalização semeada em acetonitrila com 1,5% de água DI a 75 ± 3 °C seguida de resfriamento pode ser selecionada devido ao alto rendimento de ~70%, alta pureza de pelo menos ou igual a cerca de 88,08% (a pureza do material antes da cristalização foi de cerca de 77,75%) e facilidade de filtrar a mistura. No entanto, vários procedimentos de cristalização foram testados antes da seleção de acetonitrila com 1,5% de água DI a 75 ± 3 °C.
Estes dados são detalhados na Tabela 5. O uso de água (cerca de 1,5%) como um cossolvente com acetonitrila pode reduzir o volume de processamento necessário para a cristalização.
TABELA 5: CONDIÇÕES DE CRISTALIZAÇÃO TESTADAS PARA O COMPOSTO 4A
Solvente Condições a, b Observação (v/v) EtOH 20 vols (solução limpída a 69 °C). Finos e agregados Filtrado.
Resfriado a 55 °C e opacos sem mantido por 1h (solução límpida morfologia distinta. com sólidos acima da linha de líquido). Sólidos raspados. 1h de espera (suspensão fina). Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por5 dias. 59% de rendimento.
IPA 20 vols (suspensão fina a 82°C). Finos e agregados Filtrado.
Resfriado a 55 °C e opacos sem mantido por 1h (suspensão morfologia distinta. branca). 1h em espera.
Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 5 dias. 56% de rendimento. 2:1 MeOH: água 15 vols (solução límpida com Filtração lenta; finos e névoa ligeira a 61°C). Filtrado agregados opacos (solução límpida). Resfriado a 55 sem morfologia °C e mantido por 1h (solução distinta. límpida com sólidos acima da linha de líquido). Sólidos raspados Resfriado a 40 °C e mantido por 1h (suspensão turva). Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 1 dia. 52% de rendimento, 89,07% de pureza. 1-PrOH 20 vols (solução límpida a 75°C). Finos e agregados Filtrado.
Resfriado a 55 °C e opacos sem mantido por 1h (solução límpida morfologia distinta. com sólidos acima da linha de líquido). Sólidos raspados. 1h de espera (suspensão fina). Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 5 dias. 71% de rendimento, 92,31% de pureza.
Solvente Condições a, b Observação (v/v) 1-PrOH 10 vols (solução límpida a 89°C). Filtração lenta; finos e Filtrado.
Resfriado a 82 °C e agregados opacos mantido por 1 h (solução límpida sem morfologia com sólidos acima da linha de distinta. líquido). Sólidos raspados Semeada com ~1% em peso do Composto 4A. 1h em espera (suspensão branca espessa). Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 1 dia. 81% de rendimento, 91,22% de pureza.
THF 20 vols de 2% de THF aquoso Filtração lenta; finos e (solução límpida a 35°C). Filtrado. agregados opacos Destilado a ~10 vols.
Adicionado sem morfologia 10 vols adicionais de THF. distinta.
Destilado a ~10 vols (solução límpida com sólidos acima da linha de líquido). Sólidos raspados e mantidos a ~63 °C (suspensão fina). Agitado por 30 minutos.
Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 1 dia. 60% de rendimento, 90,36% de rendimento. 1: 1 THF:ACN 20 vols (solução límpida com Finos e agregados névoa ligeiraa 65° C). Filtrado opacos sem (solução límpida). Resfriado a 55 morfologia distinta. °C e mantido por 1h (solução límpida com sólidos acima da linha de líquido). Sólidos raspados Resfriado a 40 °C e mantido por 1h (suspensão turva). Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 1 dia. 64% de rendimento.
Solvente Condições a, b Observação (v/v) 1:1 THF:heptano 20 vols de THF (solução límpida a Finos e agregados ~65°C). Filtrado.
Destilado a ~10 opacos sem vols (solução límpida, com sólidos morfologia distinta. acima da linha de líquido). Sólidos raspados Semeada com ~1% em peso do Composto 4A. 0,5h em espera (suspensão fina). Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 2 dias (suspensão branca). Adicionado 10 vols de heptano (suspensão branca). Agitado por 1 hora. 87% de rendimento, 90,81% de pureza. 1:1 THF:IPAc 20 vols de THF (solução límpida a Finos e agregados ~65°C). Filtrado.
Destilado a ~7 opacos sem vols (solução límpida com sólidos morfologia distinta. acima da linha de líquido). Sólidos raspados Semeada com ~1% em peso do Composto 4A. 0,5h em espera (suspensão fina). Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 2 dias (suspensão branca). Adicionado 7 vols de IPAc (suspensão branca). Agitado por 1 hora. 76% de rendimento, 92,03% de pureza. 1:1 THF:IPAc 10 vols de 1% de THF aquoso Filtração lenta; finos e (solução límpida a ~54 °C). agregados opacos Filtrado.
Destilado a ~5 vols sem morfologia (solução límpida com sólidos distinta. acima da linha de líquido). Sólidos raspados a ~63 °C. 0,5h em espera (suspensão branca espessa). Adicionado 5 vols de IPAc.
Agitado por 1hr.
Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 1 dia (suspensão branca). 78% de rendimento.
Solvente Condições a, b Observação (v/v) 2:3 THF:água 20 vols (suspensão fina a 65°C). Pegajoso, massa em Filtrado (oleamento). Resfriado a gomas 55 °C e mantido por 1h (suspensão leitosa). Agitado a 40 °C e mantido por 1h.
Solução leitosa (formada por 2 camadas em repouso). Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 1 dia (gel pegajoso e solução turva). Sonicado.
Agitado por 5h. 5% de 1-PrOH 20 vols de 5% 1-PrOH aquoso Filtração lenta.
Finos aquoso (solução límpida a 54 °C). e agregados.
Filtrado.
Destilado a ~10 vols.
Resfriado a 85 °C e semeado (dissolvido). Resfriado a 79 °C e semeado (dissolvido). Resfriado a 71 °C e semeado com o Composto 4a (suspensão fina). Agitado por 30 minutos.
Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 1 dia (suspensão branca). 50% de rendimento, 85,81% de pureza. 10 vols de 1-PrOH 10 vols de 1-PrOH (solução Filtração lenta.
Finos ligeiramente turva a 90°C). e agregados sem Filtrado.
Resfriado a 85 °C e morfologia distinta. semeado (dissolvido). Resfriado a 79 °C e semeado com o Composto 4a (suspensão fina). Agitado por 30 minutos.
Resfriado a 71 °C e mantido por 30 min.
Resfriado lentamente até à TA.
Agitado por 1 dia (suspensão branca). 53% de rendimento.
Solvente Condições a, b Observação (v/v) ACN aquosa 20 vols de 1% de ACN aquosa Finos e agregados semeada a 75 °C.
A mistura foi opacos sem filtrada e resfriada até à morfologia distinta. temperatura de semeadura especificada após ser aquecida a ~ 80 °C. 1% em peso do Composto 4a foi usado para semeadura.
A mistura foi deixada para resfriar lentamente até a TA e agitada durante a noite antes dos sólidos serem isolados. 70% de rendimento, 88,08% de pureza.
ACN aquosa 20 vols de 1% de ACN aquosa Finos e agregados semeada a 70 °C.
A mistura foi opacos sem filtrada e arrefecida até à morfologia distinta. temperatura de semeadura especificada após ser aquecida a ~80°C. ~1% em peso do Composto 4a foi usado para semeadura.
A mistura foi deixada para resfriar lentamente até a TA e agitada durante a noite antes dos sólidos serem isolados. -69% de rendimento.
ACN aquosa 20 vols de 1% de ACN aquosa Finos e agregados semeada a 65°C.
A mistura foi opacos sem filtrada e arrefecida até à morfologia distinta. temperatura de semeadura especificada após ser aquecida a ~80°C. ~1% em peso do Composto 4a foi usado para semeadura.
A mistura foi deixada para resfriar lentamente até a TA e agitada durante a noite antes dos sólidos serem isolados. -67% de rendimento.
Solvente Condições a, b Observação (v/v) ACN aquosa 20 vols de 1% de ACN aquosa Finos e agregados aquecida a 75 °C (não semeada). opacos sem A mistura foi filtrada e arrefecida morfologia distinta. até à temperatura de semeadura especificada após ser aquecida a ~80°C. A mistura foi deixada para resfriar lentamente a TA e agitada durante a noite. A precipitação foi observada a ~ 54 °C e a suspensão produzida a partir da precipitação inicial não era muito móvel. ~ 67% de rendimento, 88,96% de pureza. aA pureza do material antes da cristalização era de 77,75%. bTodas as concentrações, temperaturas, rendimentos (por massa total) e tempos relatados são aproximados.
PARTE 5: DADOS DE CARACTERIZAÇÃO DO COMPOSTO 4A
[0315]O espectro de XRPD do Composto 4a é mostrado na Figura 1. A TGA do Composto 4a foi consistente com um material anidro/não solvatado, uma vez que houve apenas uma variação de 0,1% em peso de 25 a 189 °C, sugerindo um baixo teor volátil (Figura 2). O perfil de DSC do Composto 4a é mostrado na Figura 3.
EXEMPLO 2 - PROTOCOLO SINTÉTICO PARA O COMPOSTO 6A
[0316]Detalhado abaixo é um protocolo sintético geral para o Composto 6a.
PARTE 1: SÍNTESE DO COMPOSTO 5A
[0317]O Composto 4a (1,0 kg ± 1%) e MeOH (7,92 kg  5% ou 10,00 L ± 5%) são carregados em um reator. A mistura é aquecida a uma temperatura de 50  5°C. Uma solução Boc2O (0,255 kg ± 2%) em metanol (0,20  kg 5% ou 0,25 L ± 5%) é adicionada ao reator enquanto se mantém a temperatura de 50 5°C. O sistema de carregamento usado para a carga da solução de Boc2O com metanol (0,20 kg  5% ou 0,25 L ± 5%) é enxaguado e o enxágue é adicionado à mistura de reação enquanto se mantém a temperatura entre 50  5°C. O lote é mantido em 50  5°C até que a reação seja completada. A reação pode ser considerada completa quando o teor do Composto 4a é menor que ou igual a cerca de 3,0% em área por HPLC (vide Tabela 6 para o método de HPLC usado). A primeira amostra para análise é coletada após cerca de 15 minutos a 12 horas de tempo de reação. Em certas modalidades, a primeira amostra para análise é coletada após 3 horas de tempo de reação e as amostras subsequentes, se necessário, são coletadas com intervalos de cerca de 3 horas. Se necessário para completar a reação, Boc2O adicional em solução de metanol é adicionado à mistura de reação. A quantidade de adição é calculada de acordo com a seguinte Fórmula: carga = P1 (A2/[100-A2]) 1 %, onde: P1 = a quantidade de Boc2O (kg) carregada anteriormente na reação e A2 = a quantidade do Composto 4a não consumido em a/a% na última amostra.
[0318]Quando a reação está completa, o lote é estabilizado para 20  5 °C. O lote pode ser mantido nessa faixa de temperatura por até cerca de 55 horas (por exemplo, 0 a 55 horas).
TABELA 6: MÉTODO DE HPLC PARA AS PARTES 1 E 2 DO EXEMPLO 2 Coluna Waters X-Bridge C18, 3,5 m 150 mm x 4,6 mm Temperatura da 40 °C Coluna Taxa de Fluxo 1,2 mL/min Detecção de 210 nm Comprimento de Onda Fases Móveis 0,25 M NH4OH em água 0,25 M NH4OH em acetonitrila Gradiente Tempo (min) % de Fase % de Fase Móvel A Móvel B 0,00 70 30 28,0 35 65 30,0 35 65 30,1 70 30 40,0 70 30 Tempo de execução 40 min Volume de Injeção 20 L
PARTE 2: SÍNTESE DO COMPOSTO 6A
[0319]água desionizada (7,78 kg  5% ou 7,78 L ± 5%) é carregada em um reator e o hidróxido de sódio sólido (0,39 kg ± 1%) é adicionado seguido de agitação até à sua dissolução visual. Parte da água desionizada pode ser carregada após a carga de hidróxido de sódio e/ou após a carga do ditionito de sódio e usada para enxaguar o dispositivo de carregamento usado para a carga desses materiais. A temperatura é estabilizada para cerca de 0 a 5 °C.
Ditionito de sódio (1,196 kg ± 1%) é adicionado à solução aquosa básica enquanto se mantém a temperatura da solução entre cerca de 0 °C e cerca de 5 °C. Temperaturas mais altas durante a adição podem proporcionar menor pureza do produto. A mistura é agitada por cerca de 5 minutos a 12 horas a cerca de 0 a 5 °C. Em certas modalidades, a mistura é agitada por não mais que ou igual a cerca de 15 minutos a cerca de 0 a 5 °C. A solução de ditionito deve ser usada dentro de 0 a 4 horas da carga de Na2S2O4. Em certas modalidades, a solução de ditionito deve ser usada dentro de cerca de 90 minutos da carga de Na2S2O4.
[0320]A mistura de reação da Parte 1 é adicionada à solução básica de ditionito de sódio por cerca de 1 a 8 horas (por exemplo, 1-4 horas) enquanto se mantém a temperatura da mistura abaixo de cerca de -5 °C a abaixo de cerca de 15 °C. Em certas modalidades, a mistura de reação da Parte 1 é adicionada à solução básica de ditionito de sódio por cerca de 1-4 horas enquanto se mantém a temperatura da mistura abaixo de cerca de 10 °C. A adição é exotérmica e as adições mais rápidas fornecem sólidos em goma. O sistema de carregamento usado para a carga da mistura de reação é enxaguado com metanol (0,40 kg  5% ou 0,50 L ± 5%) e o enxágue é adicionado ao lote. O lote é aquecido a uma temperatura entre cerca de 25 °C e cerca de 30°C por um período de cerca de 1 a 4 horas. Em certas modalidades, o lote é aquecido a uma temperatura entre cerca de 25 °C e cerca de 30°C por um período de cerca de 2 horas. Normalmente, a temperatura máxima de revestimento é de cerca de 25 a 35°C e a ΔT entre o revestimento e a temperatura de lote de não menos que ou igual a 10 °C (por exemplo, 0 a 10 °C) é mantida. Em certas modalidades, mantém-se a temperatura máxima de revestimento a cerca de 30 ºC e a ΔT entre o revestimento e a temperatura de lote de não menos que ou igual a cerca de 10°C. O lote é agitado a uma temperatura de cerca de 25 a 30 °C até completar a reação. Temperaturas de reação mais elevadas podem levar a quantidades mais elevadas de impurezas.
[0321]A reação é considerada completa quando o teor do pico com tempo de retenção relativo de 0,43: é menor que ou igual a cerca de 3,0% a/a por HPLC (mesmo método que o detalhado na Tabela 6). Em certas modalidades, a primeira amostra é coletada no final do período de aquecimento e as amostras subsequentes são coletadas em intervalos de cerca de 3 horas.
[0322]Quando a reação está completa, a mistura é destilada sob vácuo a uma temperatura de revestimento de cerca de 20 a 40 °C até um volume final de 13 L 5%. Em certas modalidades, uma vez que a reação está completa, a mistura é destilada sob vácuo a uma temperatura do revestimento de não menos que ou igual a cerca de 35 °C até um volume final de 13 L  5%. IPAc (3,49 kg  5% ou 4,00 L ± 5%) é carregado ao lote enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 25-40 °C. Água desionizada (7,0 kg  5% ou 7,0 L ± 5%) é então carregada ao lote enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 25-40 °C. A mistura é agitada por cerca de 15 minutos a 12 horas a uma temperatura de cerca de 30 a 40 °C. Em certas modalidades, a mistura é agitada por não menos que ou igual a cerca de 20 minutos a uma temperatura de cerca de 30 a 40 °C. Não é necessária a dissolução completa dos sais, desde que a separação de fases possa prosseguir sem problemas com a presença de alguns sais não dissolvidos.
[0323]A agitação é interrompida e as camadas são deixadas para se separar por cerca de 30 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, a agitação é interrompida e as camadas são deixadas para se separar por não menos que ou igual a cerca de 1 hora. A fase aquosa (fase aquosa 1) é transferida em um receptor. A fase orgânica rica em produto (fase orgânica 1) é transferida em outro receptor. IPAc (1,74 kg  5% ou 2,00 L ± 5%) é carregado à fase aquosa 1, enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 25 a 40 °C. A mistura é agitada por cerca de 15 minutos a 12 horas a uma temperatura de 35 mm 5 °C. Em certas modalidades, a mistura é agitada por não menos que ou igual a cerca de 20 minutos a uma temperatura de 35  5 °C. Os sais podem precipitar abaixo de cerca de 30 °C. A agitação é interrompida e as camadas deixadas se assentar e separar por cerca de 30 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, a agitação é interrompida e as camadas são deixadas para se separar por não menos que ou igual a cerca de 1 hora. A fase aquosa inferior (fase aquosa 2) é enviada para despejo.
[0324]As fases orgânicas 1 e 2 são combinadas em um receptor adequado. Uma solução aquosa de aproximadamente 6,5% p/p de bicarbonato de sódio é preparada pela dissolução de NaHCO 3 (0,42 kg ± 5%) em água desionizada (6,00 kg ± 5% ou 6,00 L ± 5%). A temperatura desta solução é estabilizada para 25  5 °C. Aproximadamente 2 a 6 L da solução de NaHCO3 a 6,5% p/p são carregados às fases orgânicas combinadas. Em certas modalidades, aproximadamente 3 L da solução de NaHCO 3 a 6,5% p/p são carregados às fases orgânicas combinadas. A solução é agitada por cerca de 15 minutos a 12 horas a uma temperatura de 25  5 °C. Em certas modalidades, a solução é agitada por não menos que ou igual a cerca de 20 minutos a uma temperatura de 25  5 °C. A agitação é então interrompida e as camadas são deixadas para se separar por cerca de 0 a 48 horas. Em certas modalidades, a agitação é então interrompida e as camadas são deixadas para se separar por não menos que ou igual a cerca de 1 hora. A fase aquosa inferior é enviada para despejo. A fase orgânica (fase orgânica 3) pode ser mantida a não mais que ou igual a cerca de 25 °C (por exemplo, 0 a 25 °C) por cerca de 0 a 48 horas. Em certas modalidades, a fase aquosa inferior é enviada para despejo. A fase orgânica (fase orgânica 3) pode ser mantida a não mais que ou igual a cerca de 25 °C por até cerca de 24 horas.
[0325]Aproximadamente 2 a 6 L da solução de NaHCO3 a 6,5% p/p são carregados à fase orgânica 3. Em certas modalidades, aproximadamente 3 L da solução de NaHCO3 a 6,5% p/p são carregados à fase orgânica 3. A mistura é agitada por cerca de 30 minutos a 12 horas a uma temperatura de 25  5 °C. Em certas modalidades, a mistura é agitada por não menos que ou igual a cerca de 20 minutos a uma temperatura de 25  5 °C. A agitação é então interrompida e as camadas são deixadas para se separar por não menos que ou igual a cerca de 1 hora. A fase aquosa inferior é descarregada para despejo. A fase orgânica (fase orgânica 4) pode ser mantida a não mais que ou igual a cerca de 20 a 25 °C por até cerca de 24 horas. Em certas modalidades, a fase orgânica (fase orgânica 4) pode ser mantida a não mais que ou igual a cerca de 25 °C por até cerca de 24 horas.
[0326]A fase orgânica 4 é destilada sob vácuo a uma temperatura de revestimento de não mais que ou igual a cerca de 50 °C (por exemplo, 20 a 50 °C) até um volume final de 3 L  5%. IPAc (2,62 kg  5% ou 3,00 L ± 5%) é carregado ao lote. A mistura é destilada sob vácuo a uma temperatura de revestimento de não mais que ou igual a cerca de 50 °C (por exemplo, 20 a 50 °C) até um volume final de 3 L  5%. IPAc (2,62 kg  5% ou 3,00 L ± 5%) é carregado ao lote. A mistura é então destilada sob vácuo a uma temperatura de revestimento de não mais que ou igual a cerca de 50 °C (por exemplo, 20 a 50 °C) até um volume final de 4,5 L  5%. Água desionizada (0,135 kg  5% ou 0,135 L ± 5%) é então carregada ao lote enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 35-40 °C. A temperatura do lote é ajustada para entre cerca de 15 e cerca de 30 °C. DCM (5,98 kg  5% ou 4,50 L ± 5%) é carregado ao lote enquanto se mantém uma temperatura de cerca de 15-30 °C. Em alguns casos, a mistura é turva, embora a dissolução completa do Composto 6a tenha sido alcançada.
[0327]A semente do Composto 6a (0,02 kg  2%) é carregada à solução do lote enquanto se mantém uma temperatura de cerca de 20-25 °C. A cristalização é observada, no entanto, a taxa de cristalização pode ser lenta. A mistura é agitada a uma temperatura entre cerca de 20 a 25 C por cerca de 1 a 2 horas e uma suspensão surge. Se nenhuma suspensão for observada, a mistura é resfriada a uma temperatura entre cerca de 15 a 20 C e uma semente adicional do Composto 6a (0,02 kg  2%) é adicionada à solução do lote, mantendo uma temperatura de cerca de 15 a 20 C, por cerca de 1 a cerca de 2 horas. Uma suspensão então surge. Temperaturas inferiores durante e após a semeadura podem obter purezas inferiores, mas rendimentos superiores.
[0328]O lote é resfriado a cerca de 15-25 °C e agitado a esta temperatura por aproximadamente 18 a 24 horas. O lote é resfriado a uma temperatura entre cerca de 5 °C e cerca de -5 °C por cerca de 1 a 12 horas e mantido nessa faixa de temperatura com agitação por cerca de 6 a 12 horas.
Em certas modalidades, o lote é resfriado a uma temperatura entre cerca de 5 °C e cerca de -5 °C por cerca de 2 horas e mantido nessa faixa de temperatura com agitação por cerca de 6 a 12 horas. Este tempo de estágio é importante para o rendimento. O lote é descarregado para um filtro adequado e deliquorado. O bolo húmido é lavado com uma solução de DCM a aproximadamente 5 °C a -5 °C (1,33 kg  5% ou 1,00 L ± 5%) e subsequentemente deliquorado. O produto é seco sob vácuo a uma temperatura a não menos que ou igual a cerca de 45°C (por exemplo, de 0 a
45°C). A secagem é completa quando a perda na secagem não é maior que ou igual a cerca de 1% p/p. O produto pode ser seco sob vácuo com uma varredura de nitrogênio. O produto pode ser peneirado após a operação de secagem. O rendimento sobre as duas etapas do Composto 4a para o Composto 6a é de cerca de 85%. O aperto de algumas das variáveis, tais como o volume final de destilação, quantidade de DCM, teor de água, temperatura de semeadura e tempo de estágio após a semeadura, pode fornecer uma cristalização típica com resultados típicos de pureza. A água pode ter um impacto no rendimento, mas parece não ter relação com a qualidade do produto.
PARTE 3: OPTIMIZAÇÃO DAS CONDIÇÕES DE CRISTALIZAÇÃO PARA O COMPOSTO 6A
[0329]A solubilidade do Composto 6a em diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) com cerca de 1% de água, acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com cerca de 2% de água e acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com cerca de 8% de água exibe uma forte dependência de temperatura. Em temperaturas elevadas, pode-se observar solubilidade limitada em diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) com cerca de 1% de água, e solubilidade intermediária pode ser observada em acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com cerca de 2 % de água e acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com 8% de água. Todos os pontos de turvação ocorrem quando o reator atinge as temperaturas mais baixas de aproximadamente 6 a 8 °C, possivelmente indicativas de uma grande largura de zona metaestável em todas as condições. A cerca de 7,9 mg/mL em diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) com cerca de 1% de água, os pontos de turvação não ocorrem até aproximadamente 3 e 8 horas a cerca de 6 a 8 °C. Esses resultados podem indicar que, sem o uso de semeadura, podem ser esperadas inconsistências em termos do tempo do principal evento de nucleação (nucleação espontânea). Além disso, a nucleação ocorre consistentemente em altos níveis de supersaturação, algumas vezes resultando em baixa cristalinidade, defeitos no cristal, tais como inclusões de solvente e/ou formação de pequenas partículas.
[0330]Amostras selecionadas a partir de cada sistema de solvente das experiências de determinação de solubilidade e largura de zona metaestável são isoladas por filtração a vácuo. Não são observados problemas de filtração ao isolar sólidos de diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) com cerca de 1% de água. No entanto, sólidos pegajosos e alguma deliquescência são observados a partir de sólidos isolados de acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com cerca de 2% e cerca de 8% de água. O material isolado de diclorometano/acetato de isopropila (50/50 v/v) com cerca de 1% de água é cristalino. O material isolado de acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com cerca de 2% de água é desordenado, e o material isolado de acetato de isopropila/diclorometano (71/29 v/v) com cerca de 8% de água pode conter uma quantidade pequena de material amorfo de raio-x.
PARTE 4: DADOS DE CARACTERIZAÇÃO DO COMPOSTO 6A
[0331]O espectro de XRPD do Composto 6a é mostrado na Figura 4 e as posições de pico estão substancialmente de acordo com as listadas na Tabela 1. A TGA do Composto 6a indicou uma perda de 4,5% em peso entre 24,1–78,6 °C (Figura 5). O principal evento exotérmico no DSC do Composto
6a ocorreu com uma temperatura limite esquerda de 231,8 °C e energia de - 52,9 kJ/kg (Figura 6).
EXEMPLO 3: PROTOCOLO SINTÉTICO PARA O COMPOSTO 7A
[0332]Detalhado abaixo é um protocolo sintético geral para o Composto 7a.
PARTE 1: SÍNTESE DO COMPOSTO 7A
[0333]O Composto 6a (1,0 kg ± 1%) e acetonitrila (3,94 kg ± 5% <> 5,00 L ± 5%) são carregados ao reator. A temperatura é estabilizada entre cerca de 15 °C e cerca de 30°C com agitação. A solução pode ser turva. A mistura é destilada sob vácuo a uma temperatura máxima de cerca de 45 °C (por exemplo, 20 a 45 °C) até um volume final de 2 L ± 5%.
[0334]Uma amostra é coletada para determinação do teor de água por Karl Fischer. Se o teor de água for menor ou igual a cerca de 0,30% p/p, a reação prosseguirá para a próxima etapa. Caso contrário, a acetonitrila (2,36 kg ± 5% <> 3,00 L ± 5%) é carregada ao reator e a destilação é repetida até que o teor de água na solução após a destilação seja menor ou igual a cerca de 0,30% p/p por Karl Fischer.
[0335]A mistura de reação é resfriada a uma temperatura entre cerca de 30 °C e cerca de 15 °C e a acetona (3,94 kg ± 5% <> 5,00 L ± 5%) é carregada ao reator. Observe que parte da acetona pode ser carregada após as cargas de bicarbonato de sódio e/ou 2-iodoetanol e usada para enxaguar o sistema de carga usado para essas cargas.
[0336]A mistura de reação é aquecida a uma temperatura entre cerca de 33 °C e cerca de 37 °C, com um alvo de cerca de 35 °C. O bicarbonato de sódio (0,177 kg ± 2%) é carregado ao reator enquanto mantém a temperatura da mistura de reação entre cerca de 33 °C e cerca de 37 °C, com um alvo de cerca de 35 °C. O 2-iodoetanol (0,226 kg ± 2% <> 0,102 L ± 2%) é carregado à mistura de reação, mantendo a temperatura da mistura de reação entre cerca de 33 °C e cerca de 37 °C, com um alvo de cerca de 35 °C. A mistura de reação é agitada a uma temperatura entre cerca de 33 °C e cerca de 37 °C, com um alvo de cerca de 35 °C, até que o teor do Composto 6a em relação ao Composto 7a seja menor ou igual a cerca de 2,5% em área por HPLC. Se necessário para completar a reação, 2-iodoetanol adicional é adicionado à mistura de reação. A quantidade de 2-iodoetanol adicional em kg é calculada usando a seguinte fórmula: [P2 x D/(100-D)] ± 2%, onde: P2 é a quantidade de 2-iodoetanol em kg carregada inicialmente na reação e D é o teor do Composto 6a não consumido em % de área por HPLC na última -amostra de controle em processo. A percentagem de área é determinada por HPLC-UV: Zorbax SB- CN, 3,5 m, 150x4,6 mm, A: K2HPO4; B: acetonitrila. Gradiente: 5 a 80% de B em 25 minutos, manter por 5 minutos; reequilibrar por 5 minutos, taxa de fluxo: 1,0 mL/min, UV: 210 nm, temperatura da coluna: 30 °C.
[0337]Depois de concluída, a mistura de reação é resfriada a uma temperatura entre cerca de 25 °C e cerca de 20 °C. 1,4- diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO, 0,24 kg ± 2%) é carregado à mistura de reação enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 20 °C e cerca de 25
°C e é agitado nessa faixa de temperatura até o teor de 2-iodoetanol por GC for menor que a perda na secagem do método (<0,003% p/p). O método de GC usa uma coluna DB-1 de 50 cm com uma I.D. de 0,32 mm. A temperatura inicial do forno é de cerca de 70 C com uma espera de cerca de 1 minuto, seguida de uma rampa de cerca de 10 C /minuto a cerca de 250 C). Água desionizada (5,00 kg ± 5% <> 5,00 L ± 5%) é adicionada à mistura, enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. Esta adição é exotérmica. É adicionado acetato de isopropila (4,36 kg ± 5% <> 5,00 L ± 5%) enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C e a mistura é agitada por cerca de 5 minutos a 12 horas a uma temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. Em certas modalidades, é adicionado acetato de isopropila (4,36 kg ± 5% <> 5,00 L ± 5%) enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C e a mistura é agitada por não menos que ou igual a cerca de 20 minutos a uma temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. A agitação é então interrompida e as camadas são deixadas para se separar por cerca de 30 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, a agitação é então interrompida e as camadas deixadas para se separar por pelo menos ou igual a cerca de 30 minutos. A fase aquosa 1 (fase inferior) é descarregada e a fase orgânica 1 é descarregada em um receptor. O produto está na fase orgânica.
[0338]Acetato de isopropila (2,62 kg ± 5% <> 3,00 L ± 5%) à fase aquosa 1 e a mistura é agitada por cerca de 15 minutos ou 12 horas a uma temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. Em certas modalidades, o acetato de isopropila (2,62 kg ± 5% <> 3,00 L ± 5%) é adicionado à fase aquosa 1 e a mistura é agitada não menos que ou igual a cerca de 20 minutos a uma temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. A agitação é interrompida e as camadas são deixadas para se separar por pelo menos ou igual a cerca de 30 minutos (por exemplo, 30 minutos a 12 horas). A fase aquosa 2 (fase inferior) é descarregada para descarte. A fase 2 orgânica é descarregada em um receptor. O produto está na fase orgânica e as fases orgânicas 1 e 2 são combinadas.
[0339]Uma solução aquosa de cloreto de sódio é preparada pela dissolução do cloreto de sódio (técnico) (2,00 kg ± 1%) em água desionizada (5,80 kg ± 5% <> 5,80 L ± 5%). Cerca de 2 a 6 L da solução aquosa de cloreto de sódio são carregados nas fases orgânicas combinadas e a mistura é agitada durante cerca de 15 minutos a 12 horas a uma temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. Em certas modalidades, cerca de 3 L da solução aquosa de cloreto de sódio são carregados nas fases orgânicas combinadas e a mistura é agitada não menos que ou igual a cerca de 20 minutos a uma temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. A agitação é interrompida e as camadas deixadas se assentar e separar por cerca de 15 minutos a 12 horas. Em certas modalidades, a agitação é interrompida e as camadas deixadas para se separar por pelo menor ou igual a cerca de 30 minutos. A fase aquosa 3 (fase inferior) é descarregada para descarte. A fase 3 orgânica que contém o produto é descarregada em um receptor.
[0340]Cerca de 2 a 6 L da solução aquosa de cloreto de sódio são carregados nas fases orgânicas combinadas e a mistura é agitada durante cerca de 15 minutos a 12 horas a uma temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. Em certas modalidades, cerca de 3 L da solução aquosa de cloreto de sódio são carregados nas fases orgânicas combinadas e a mistura é agitada não menos que ou igual a cerca de 20 minutos a uma temperatura entre cerca de 15 °C e cerca de 30 °C. A agitação é interrompida e as camadas são deixadas se assentar e separar por pelo menos ou igual a cerca de 30 minutos (por exemplo, 30 minutos a 12 horas). A fase aquosa 4 (fase inferior) é descarregada para descarte. A fase 4 orgânica que contém o produto é descarregada em um receptor.
[0341]A fase orgânica é destilada sob vácuo a uma temperatura máxima de revestimento de cerca de 20 a 50 °C (por exemplo, 50 °C) até um volume final de 2 L ± 5%. Acetonitrila (8,03 kg ± 5% <> 10,20 L ± 5%) é carregada na mistura e a mistura é destilada sob vácuo a uma temperatura máxima de revestimento de cerca de 20 a 50 °C (por exemplo, 50 °C) até um volume final de 7,2 L ± 5%. Acetato de isopropila (0,70 kg ± 5% <> 0,80 L ± 5%) e água desionizada (0,095 kg ± 2% <> 0,095 L ± 2%) são carregados na solução e a solução é aquecida a uma temperatura entre cerca de 70 °C e cerca de 80 °C para garantir a dissolução total do Composto 7a.
[0342]A solução do Composto 7a é resfriada a uma temperatura entre cerca de 65 °C e cerca de 60 °C. Se ocorrer cristalização antes da adição das sementes, a mistura pode ser aquecida novamente a uma temperatura entre cerca de 70 °C e cerca de 80 °C até a dissolução completa. Antes da adição de semente, a mistura é resfriada a uma temperatura entre cerca de 65 °C e cerca de 60 °C. As sementes do Composto 7a (0,02 kg ± 5% kg) são carregadas na solução do Composto 7a enquanto se mantém a temperatura entre cerca de 60 °C e cerca de 65 °C. O sistema de carregamento usado para a carga da semente do Composto 7a é enxaguado com acetonitrila (0,04 kg ± 5% <> 0,05 L ± 5%) e o enxágue é adicionado à mistura de reação. A mistura é agitada a uma temperatura entre cerca de 60 °C e cerca de 65°C por cerca de 4 a cerca de 6 horas. Uma suspensão muito espessa se formou.
[0343]A mistura é resfriada a uma temperatura entre cerca de 5 °C e cerca de 0 °C durante cerca de 12 horas e é agitada a este intervalo de temperatura por cerca de 1 a cerca de 2 horas. A taxa de resfriamento alvo é de cerca de 5 a 10°C/hora. O produto é filtrado e lavado com acetonitrila (2,83 kg ± 5% <> 3,60 L ± 5%) previamente resfriada a uma temperatura entre cerca de 0 °C e cerca de 5 °C. O produto é então seco, sob vácuo, a uma temperatura menor ou igual a cerca de 45 °C (por exemplo, 0 a 45 °C) até que a perda por secagem seja menor ou igual a cerca de 1% p/p. O produto é seco com uma varredura de nitrogênio. O produto pode ser peneirado durante ou após a secagem. O rendimento do Composto 7a é de cerca de 90%.
PARTE 2: OTIMIZAÇÃO DA ALQUILAÇÃO DE AMINA 6' COM
HALOETANOL
[0344]Várias condições para a alquilação de amina 6' foram testadas antes de selecionar a destilação azeotrópica de ACN seguida pela adição de acetona, 2-iodoetanol e bicarbonato de sódio e uso de DABCO para temperar a reação.
[0345]Duas abordagens foram inicialmente investigadas para alquilar a amina 6' com haloetanol. Na primeira abordagem, a amina 6' foi ativada usando cloreto de o-nitro benzeno sulfonil (nosil-Cl) para fornecer a correspondente o nosilato de amino 6'. A alquilação subsequente do nosilato usando 2-iodo ou 2- bromoetanol, com ou sem proteção de hidroxila TBDMS, não foi ideal e foi pouco aprimorada por alterações no solvente (por exemplo, THF, ACN ou DMF), base (por exemplo, DIPEA ou K2CO3) e temperatura (por exemplo,
ambiente a cerca de 80 °C). A segunda abordagem, alquilação direta de amina 6' usando 2-bromoetanol na presença de NaI e Na2CO3 à temperatura ambiente possivelmente forneceu uma conversão mais completa e um produto bruto mais límpido. As condições de 2-bromoetanol, iodeto de sódio e carbonato de sódio foram selecionadas para posterior avaliação e desenvolvimento.
[0346]Verificou-se que cerca de 2 e cerca de 3 equivalentes molares de 2-bromoetanol aprimoram as condições de reação, com um subproduto ligeiramente menos dialquilado formado a cerca de 2 equivalentes. O intervalo de conversão foi de cerca de 51 a 68%, sendo necessários cerca de 1-2 equivalentes de NaI para alcançar > 65% de conversão. No entanto, bromoetanol e iodeto de sódio foram identificados como possíveis contribuintes significativos de água para a mistura de reação. A água na mistura de reação não foi ideal para o resultado e possivelmente foi correlacionada com níveis mais altos do subproduto dialquilado. O Composto 6a também contribuiu potencialmente com água significativa para o lote, mas isso poderia ser removido por destilação azeotrópica usando acetonitrila. Outros solventes azeotrópicos foram potencialmente menos eficazes, tais como o etanol, ou posteriormente impactaram a precipitação do produto (isopropanol). A acetona foi identificada como um possível solvente preferido para a reação de alquilação. A intermediação de uma espécie potencial de acetona-imínio, que, embora não seja limitada pela teoria, pode ter impedido a alquilação, foi postulada com base em evidências de LC/MS. Embora não seja limitado pela teoria, é possível que a água no lote tenha inibido a formação ou desestabilizou essa imina postulada, o que permitiu a formação do subproduto dialquilado.
Embora não seja limitado pela teoria, o papel do carbonato de sódio como agente de secagem pode ser significativo, pois proporcionou rendimentos maiores que o carbonato de lítio, carbonato de potássio, carbonato de césio, bicarbonato de sódio, sulfato de sódio, fosfato de sódio e DIPEA. Uma temperatura de reação de cerca de 35 °C, em comparação com cerca de -10 °C, cerca de 0 °C e cerca de 23 °C, proporcionou a maior extensão relativa de conversão com a menor quantidade relativa de subproduto dialquilado.
Temperaturas de reação mais altas (por exemplo, cerca de 50 °C) podem levar à formação de mais subproduto dialquilado.
[0347]No entanto, como o bromoetanol e o iodeto de sódio foram os principais contribuintes da água na mistura de reação, levando à formação de subprodutos e usados para gerar 2-iodoetanol in situ, 2-iodoetanol também foi testado. Bromoetanol também proporcionou uma reação muito mais lenta que o 2-iodoetanol. O uso de cerca de 1,2 equivalentes molares de 2-iodoetanol em acetona foi suficiente para proporcionar um rendimento de aproximadamente 86% do Composto 7a em cerca de 24 horas a cerca de 35 °C, com apenas cerca de 2% do Composto 6a e cerca de 2,6% da impureza dialquilada. O uso de cerca de 1,1 equivalentes molares de 2-iodoetanol proporcionou um rendimento de aproximadamente 83% do Composto 7a, com cerca de 6,9% do Composto 6a e cerca de 1,5% de impureza dialquilada e o uso de cerca de 1,5 equivalentes molares de 2-iodoetanol proporcionou um rendimento de aproximadamente 87% do Composto 7a, com cerca de 1,9% do Composto 6a e cerca de 2,3% de impureza dialquilada. Tempos de reação mais longos (cerca de 41 ou cerca de 48 horas) podem causar uma diminuição do Composto 7a sem consumo adicional do Composto 6a. NaHCO 3 foi testado como base para a reação e pode ser preferido sobre Na2CO3, Na2SO4, trimetilamina, ortoformato de trimetila e hexametildisilazano. Na 2CO3 resultou em um pH terminal relativamente mais alto e em quantidades mais altas de subproduto dialquilado no final da reação em comparação com NaHCO 3 e Na2SO4, e Na2SO4 resultou no aparecimento de uma nova impureza no produto isolado. DABCO pode ser o agente de têmpera preferido para o excesso de 2- iodoetanol, conforme os outros eliminadores testados, tais como dimetilamina, trimetilamina, dietanolamina, hidróxido de sódio aquoso, DBU, cisteína e MeOH, mostraram um aumento no subproduto dialquilado de cerca de 63 a 1030% entre os níveis de produto em processo e isolado, sugerindo que o 2- iodoetanol residual pode não ter sido destruído.
[0348]Verificou-se que a secagem azeotrópica do Composto 6a em cerca de 5 volumes de ACN funcionou bem para a reação de alquilação de amina usando acetona, 2-iodoetanol e bicarbonato de sódio, seguidos por DABCO para temperar a reação. A condição combinada de cerca de 5 volumes de acetona, NaHCO3 e os cerca de 1,2 equivalentes molares de 2-iodoetanol com uma temperatura de reação de aproximadamente 20 a 40 °C alcançou < 2% do Composto 6a com níveis baixos de subproduto dialquilado. Em certas modalidades, a condição combinada de cerca de 5 volumes de acetona, NaHCO3 e os cerca de 1,2 equivalentes molares de 2-iodoetanol com uma temperatura de reação de aproximadamente 35 °C alcançou < 2% do Composto 6a com baixos níveis de subproduto dialquilado. Além disso, verificou-se que a qualidade do Composto 7a preparado usando uma análise simplificada com salmoura e sem extrações de ácido e base pode ser superior a uma análise mais longa com extrações de ácido e base. Além disso, a substituição de lavagens com água por lavagens com salmoura foi correlacionada com um aumento de aproximadamente 15 pontos percentuais no rendimento molar, sem perda da qualidade do produto.
PARTE 3: OPTIMIZAÇÃO DAS CONDIÇÕES DE CRISTALIZAÇÃO PARA O COMPOSTO 7A
[0349]Vários procedimentos de cristalização que foram testados antes da cristalização do Composto 7a bruto a partir de cerca de 8 volumes de 10% v/v de IPAc/ACN dopados com cerca de 0,75 a 2% p/p de água com semeadura foram selecionados (vide Tabelas 7 a 11). Além disso, um longo tempo de espera na temperatura de semeadura (> 2 horas entre cerca de 60 °C e cerca de 65 °C) e uma rampa de resfriamento lenta (cerca de 60 °C a cerca de 0 °C a cerca de 5 a 10 °C/h ) podem ser melhores obter uma suspensão móvel. Este procedimento substancialmente purga o Composto 6a não reagido, uma impureza penta-Boc (cerca de 63% de purga combinada) e o subproduto dialquilado (cerca de 36% de purga) e pode proporcionar produtos sólidos facilmente filtráveis e laváveis . As propriedades de deliquagem do Composto 7a cristalino do IPAc/ACN podem aprimorar a remoção de impurezas nos licores-mãe, uma vez que o produto proporcionou cristais do tipo agulha ou do tipo bastonete. Por outro lado, experimentos com IPAc e n- heptano produziram um material amorfo que filtrou e deliquorou lentamente, deixando impurezas no produto.
TABELA 7: TENTATIVAS PRECOCES DE CRISTALIZAÇÃO PARA O COMPOSTO 7A (NÃO SEMEADO)
Escala Sistema Vol Temperatura Hora de % de % de Pureza (g) de °C iniciação recuperação do Composto solvente total 7aa (Composto 6a) 1 ACN 2a TA 0,4h/1h 83 91 (88) 1 ACN 5a TA 0,5h/2h 80 93 (88) 0,5 ACN 10a TA 1h/18h 77 94 (88) 5 ACN 10a TA 1,5 h/22h 76 92,5 (87) 1 ACN 10a TA 0,5 h/17 87 98 (92) h 1 ACN 10a TA 1 h/18 h 64 91 (76) 1 ACN 20 TA 2 h/17 h 68 95 (87) (a) Suspensão espessa e não agitável. Adicionado solvente adicional (geralmente 5 volumes) para permitir a filtragem.
TABELA 8: CRISTALIZAÇÕES COM DIFERENTES COMBINAÇÕES DE SOLVENTE/ANTISSOLVENTE Mass Solvente(s) Vol Temp Hora Semea Recuperação % de Pureza a (mL) eratur de do(a) (%) do Composto (g) a iniciaç sim/nã 7a (Composto °C ão o 6a) total 1 ACN 20 TA 2h/4h/ sime 68 96 (87) 15h 1 5:95 20 60 48 h suspen 78 91 (87) IPA/H2Oa são 1 10:1 11 TA 2/72 sim 64 ---- (87) ACN/IPAC 1 1:1 20a 60 à 18 h não 67 95 (87) ACN/heptan TA ob 58 ACN 20 TA 6,5/72 sim/nã 67 96+ (85) od 1 3:1 10 TA ----- sim sem sólidos ---- ACN/H2O 1 1:1 10a TA >2h/72 sim 71% 95 (87) ACN/DIPE h 1 1:1 10 TA 18 h não 54% 96 (87) ACN/MTBE 1 10:4 14 TA 1,5 não 69 96 (87) ACN/IPAc h/24 h 1 3:1 12 TA 2 h/24 não 62 ---- (87) ACN/MTBEc h
(a) Suspensão (b) acetonitrila e o heptano são imiscíveis na TA. (c) Suspensão espessa e não agitável. Adicionado solvente adicional (geralmente 5 volumes) para permitir a filtragem. (d) Composto 7a sólido foi adicionado, mas não serviu como sementes. (e) Cristalização foi deixada para formar cristais por 4 h, depois aquecida próxima ao refluxo para dissolver os sólidos. A solução foi resfriada até a TA e agitada por 15 h antes da coletagem dos sólidos. Quando o processo de cristalização foi resfriado lentamente, o produto obtido apresentava uma morfologia fina em forma de agulha.
TABELA 9: CRISTALIZAÇÕES SEMEADAS EM MAIOR ESCALA USANDO VÁRIOS SISTEMAS DE SOLVENTES ACN/IPAC Esca Sistema Vo Temperat Hora de Semeado Recupera % de la (g) de l ura iniciação (a) ção Pureza Solvent (°C) total sim/não (%) do es % de Compos carga to 7a (Compo sto 6a) 53 3:1 11 TA 4 h/72 h sim 65 >96 (85) ACN/IP Ac 1 3:1 20 40 1 h/24 h sim 61 >96 (86) ACN/IP Ac 10,7 3:1 7,5 55 2 h/24 h sim 75+ >94 (85) 5 ACN/IP (5) Ac 100 3:1 8 55 3h sim 47 95,8 ACN/IP (1 (84) Ac 0) 2 ACN 25 65 a TA 24 h formar ---- ---- semente 52 3:1 10 40-0 1/26 4% 71,5 95 (84) ACN/IP Ac
Esca Sistema Vo Temperat Hora de Semeado Recupera % de la (g) de l ura iniciação (a) ção Pureza Solvent (°C) total sim/não (%) do es % de Compos carga to 7a (Compo sto 6a) 52 100% 10 40-0 1,5/26 4% 75 95,8 de ACN (85) 1 DCM 10 TA-0 24/72 não 50 93 (87) ---- ACN ---- 65-TA 3d não na 90 2 ACN 10 65-TA 3h/96 formar ---- ---- - semente 25 52,7 9:1 10 40-0 2/26 4% 73,2 95,9 ACN/IP (84,6) Ac 1 ACN 25 TA 3d formar ---- ---- semente 13,2 ACN 10 40-0 2/24 ~4% 76,8 95,5 (84,6) 1,25 ACN 10 65-30 3/24 formar ---- ---- - semente 25 1,25 ACN 25 TA suspens formar ---- ---- ão semente (a) massa sólida no reator de 1L.
TABELA 10: CRISTALIZAÇÕES SEMEADAS COM O TEOR DE ÁGUA AJUSTADO PARA 0,5 A 1% Esc Razão Vol Te Hora Carga de Recupe % de Pureza do ala ACN/IP mpe de Semente ração Composto 7a (g) Ac v/v ratu iniciaç (%) (%) (Composto 6a) ra ão °C total 8,2 9:1a 8 55- 0,5/26 2% 94,3 97,5 (94,8) 0 63 9:1a 8 55- 0,5/26 1,6% 81,1 93,1 (84,3) 0 51 9:1a 9 55- 0,5/26 2%d 82,3 93,9 (85,1) 0 5 9:1b 8 50- 0,5 não semeado(a) 79 94 (87,2) 0
Esc Razão Vol Te Hora Carga de Recupe % de Pureza do ala ACN/IP mpe de Semente ração Composto 7a (g) Ac v/v ratu iniciaç (%) (%) (Composto 6a) ra ão °C total 48 9:1a 9 70- 0,25 1%e 94,3 97,1 (95,4) 0d 57 9:1a 9 65- 0,5 2%e 82,5 93,2 (83,6) 0 56 9:1a 9 65- 1 2%f 81,8 93,4 (83,7) 0 52 9:1c 9 65- 1/26 5% 85,8 95,1 (88,6) 0 (a) Teor de água ajustado para 0,5% (b) Teor de água ajustado para 1% (c) Teor de água ajustado para 2,7% (d) Três ciclos de temperatura 65-40, 70-40, 70-0; os cristais formados eram do tipo “haste” (e) sementes secas usadas (f) Semeadas com “hastes” do Composto 7a, em vez de agulhas.
TABELA 11: PROCESSO DO COMPOSTO 6A AO COMPOSTO 7A COM UMA CRISTALIZAÇÃO DE ACN-IPAC Escala Razã Vol Temp Hora de Seme Recup % de Pureza do (g) o, eratur iniciaçã ado(a eração Composto 7a v/v a o ) (%) (Composto 6a) °C total sim/n ão 5 ~2:1 ~15 TA 1,5 não 64 92,3 (83) h/16 h 6 10:4 14 TA ~4 h/44 não 49 94 (82) h 4 9:1 8 40-0 6h/98h sim vários 94 (81) 6,6 9:1a 8 40-0 2,5 2x 48,5 94,8 (72) h/20 h 2% 8,2 9:1a 8 40-TA 0,5 3% 63 93,6 (67) h/22 h 12 9:1b ~9 50-0 0,25 2% 75 95,2 (81) h/24 h 30 9:1b ~9 55-0 0,5 2% 65 94,0 (81) h/26 h 36 9:1b 9 55-0 0,5 2% 71 94,2 (81,5) h/26 h 10 9:1c 9 60-5 1 h/26 2% 58 95,7 (88,0) h 41,6 9:1c ~9 ~62-2 < 2% 82 94,5 (97,5) 0,5/20 h 30,0 9:1 ~9 ~62-2 < 2% 78 96,0 (98,3) 0,5/20 h
Escala Razã Vol Temp Hora de Seme Recup % de Pureza do (g) o, eratur iniciaçã ado(a eração Composto 7a v/v a o ) (%) (Composto 6a) °C total sim/n ão 44,2 9:1d ~9 ~62-2 < 2% 85 95.4(98,4) 0,5/22 h (a) Teor de água ajustado para ca. 0,3% (b) Teor de água ajustado para ca. 0,5% (c) Baixa recuperação, presumivelmente devido ao ajuste inadequado do teor de água. (d) Teor de água ajustado para 3,5%. Estes item usou o procedimento de lavagem com salmoura em vez de um "work-up" de ácido/base para rastrear a perda de produto e a remoção de reagentes. Os outros itens da Tabela usaram somente um procedimento de lavagem com água em vez de um "work-up" de ácido/base.
[0350]O teor de água pode ser importante no controle da robustez da cristalização. Houve uma determinação variável da zona metaestável com cerca de 0 a 2% de água adicionada. Uma série de “anidra” com cerca de 0% de água adicionada (aproximadamente 0,2 a 0,3% de teor de água) produziu uma ampla zona metaestável com o ponto límpido a cerca de 55 a 60 °C, e o ponto de turvação abaixo da temperatura ambiente (cerca de 8 a 15 °C). Com a adição de cerca de 0,5 a 2% de água, a zona metaestável se apertou consideravelmente com o ponto límpido a uma temperatura mais alta. A observação sugeriu que algum nível de água na mistura (inicialmente cerca de 0,5 a 1%) pode tornar a cristalização mais reproduzível e robusta. A determinação da água por Karl-Fischer após a troca do solvente de secagem azeotrópico do IPAc ao ACN durante o "work-up" do Composto 6a ao Composto 7a mostrou que a solução estava quase seca (~ 200 ppm de água),
de modo que as cristalizações realizadas após a secagem azeotrópica estavam operando no modo anidro com uma zona metaestável muito ampla. Isso pode resultar em dessaturação muito lenta e maior chance de nucleação espontânea. As cristalizações com cerca de 0,5 a 2% de água adicionada podem ser mais reproduzíveis com uma recuperação consistente (geralmente superior a cerca de 80%) e uma melhoria na pureza.
PARTE 4: DADOS DE CARACTERIZAÇÃO PARA O COMPOSTO 7A
[0351]O espectro de XRPD do Composto 7a é mostrado na Figura 7 e as posições de pico estão substancialmente de acordo com as listadas na Tabela 2. O perfil de TGA do Composto 7a é mostrado na Figura 8. O perfil de DSC do Composto 7a é mostrado na Figura 9.
EXEMPLO 4: SÍNTESE DE SULFATO DE PLAZOMICINA PARTE 1: SÍNTESE DO COMPOSTO 8A
OH OH NHBoc NH2
O O H OH H OH
N N HO O O O NBoc TFA/DCM HO O O O NH
OH OH BocHN NH H 2N NH 5 TFA NHBoc NH2
O O
OH OH 7a 8a
[0352]O Composto 7a (1,0 kg 1%, 1,00 mol) é carregado em um reator. Diclorometano (5,0 L 5%) é carregado e a mistura é resfriada a cerca de 0 a 5 C. Ácido trifluoroacético (TFA, 3,0 L 5%, 39,5 mol) é carregado à mistura a uma taxa para manter a temperatura entre cerca de 0 a 5 C. A mistura é então aquecida a cerca de 20-25 C e agitada por cerca de 1 a 2 horas. A mistura é então destilada sob vácuo, mantendo uma temperatura de revestimento de reator de cerca de 20 a 40 C até um volume final de 3 L  5%.
Em certas modalidades, a mistura é então destilada sob vácuo, mantendo uma de revestimento de reator de cerca de 30 C até um volume final de 3 L  5%.
A mistura é então resfriada a cerca de 20 a 25 C e depois agitada por cerca de 1 a 4 horas antes de resfriar a cerca de 0 a 10 C. A solução resultante é então carregada em um reator carregado com água (cerca de 2,5 L, anteriormente resfriado até cerca de 0-5 C) mantendo uma temperatura entre cerca de 0 a 10 C.
[0353]O reator é carregado com acetato de isopropila (IPAc, 3,0 L 5%) e a mistura é agitada por cerca de 20 a 30 minutos antes da agitação ser interrompida e as camadas são deixadas se assentar e separar. A camada aquosa inferior (fase aquosa 1) é descarregada e a fase orgânica é extraída duas vezes carregando com água (cerca de 0,5 L 5%) e a mistura é agitada por cerca de 15 minutos a 12 horas antes da agitação ser interrompida e as camadas são deixadas para se assentar e separar. Em certas modalidades, a camada aquosa inferior (fase aquosa 1) é descarregada e a fase orgânica é extraída duas vezes carregando com água (cerca de 0,5 L 5%) e a mistura é agitada por cerca de 30 minutos antes da agitação ser interrompida e as camadas são deixadas para se assentar e separar. Cada camada aquosa inferior (fase aquosa 2 e 3) é coletada e combinada com a fase aquosa 1. As fases aquosas combinadas são então lavadas com IPAc três vezes para remover TFA, carregando com IPAc (3,0 L 5%) e agitando por cerca de 20 a 30 minutos antes da agitação ser interrompida e as camadas são deixadas para se assentar e separar. A camada de fase aquosa inferior é descarregada e o pH é medido para garantir o pH > 2,0. Se o pH for  2,0, a lavagem com IPAc será repetida até que o pH seja maior que cerca de 2,0.
PARTE 2: SÍNTESE DE SULFATO DE PLAZOMICINA
[0354]A fase aquosa da Parte 1 é então diluída com água até um volume final de 9,0 L  5% e tratada com uma solução aquosa de amônia (preparada diluindo cerca de 25% de amônia (4 kg  5%) em água (96 kg  5%)) até o pH estar entre 5,8 e 6,2. A condutividade é medida para garantir que a condutividade seja menor ou igual a cerca de 20 mS/cm (por exemplo, 0 a 20 mS/cm). Se a condutividade estiver acima de 20 mS/cm, é adicionada água adicional para obter uma condutividade menor que ou igual a cerca de 20 mS/cm (por exemplo, 0 a 20 mS/cm).
[0355]A solução bruta de sal de TFA do Composto 8a é purificada por cromatografia de troca iónica carregando a solução em uma coluna de troca iónica contendo resina Amberlite CG-50 (Tipo 1) (2,17 kg) previamente convertida na forma de amônia. A coluna é eluída com água (1 volume de coluna  5%) para eluir o trifluoroacetato de amônio e depois eluída com uma solução aquosa de amônia (preparada diluindo cerca de 25% de amônia (2,0 kg  5%) em água (96,0 kg  5%)). A cromatografia é monitorizada por absorção UV. As frações são coletadas e analisadas por UPLC, agrupando as frações com mais que cerca de 95% (por área) do Composto 8a de base livre (o composto sem o sal de TFA).
[0356]As frações de cromatografia combinadas são passadas através de um filtro (porosidade  5 microns) e o filtro é enxaguado com água (1 L  5%). A solução resultante é concentrada por nanofiltração através da membrana Dow Filmtec XLE até um volume final de 16 L  5%, mantendo a temperatura entre cerca de 0 a 10 C. A amônia é então removida por diafiltração através de uma membrana Dow Filmtec XLE.
[0357]A solução do Composto 8a de base livre é resfriada a cerca de 0 a 5 C e tratada com uma solução aquosa de ácido sulfúrico (preparada dissolvendo ácido sulfúrico puro (0,51 kg  5%) em água DI (0,72 L  5%)) até o pH estar entre cerca de 6,0 a 6,5. A solução resultante de sulfato de plazomicina é passada através de um filtro de carvão ativado (R55SP) e o filtro é lavado com água.
[0358]A solução é concentrada por nanofiltração usando uma membrana Dow Filmtec XLE e depois filtrada através de um filtro de 0,22 mícron. A solução resultante é então alimentada a um secador pulverizador, mantendo a temperatura de saída do secador pulverizador entre cerca de 60 a 100 C para coletar o sulfato de plazomicina como um sólido amorfo.
EXEMPLO 5: EXEMPLO DE PROCEDIMENTOS PARA A PREPARAÇÃO DE 4-NITROBENZIL (((2S,3R)-3-((TERC- BUTOXICARBONIL)AMINO)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((TERC-
BUTOXICARBONIL)AMINO)-4-((S)-4-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-2- HIDROXIBUTANAMIDO)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-DI-HIDRÓXI-5-METIL-4- (METILAMINO)TETRA-HIDRO-2H-PIRAN-2-IL)OXI)-2-HIDROXICICLO- HEXIL)OXI)-3,4-DI-HIDRO-2H-PIRAN-6-IL)METIL)CARBAMATO, FÓRMULA (4A), A PARTIR DE SISOMICINA.
EXEMPLO 5A
[0359]Para um reator de vidro revestido equipado com agitação aérea, foi carregada sisomicina na forma de base livre (300,0 g, 0,670 mol, KF = 5,65) seguida de metanol (1500 mL) e diclorometano (1500 mL). Após dissolução, a temperatura de reação foi estabilizada a 15 C. Uma solução de carbamato de p-nitrobenzil benzotriazol (207 g, 0,694 mol, 1,04 equiv) em diclorometano (4200 mL) foi adicionada ao reator por três horas, mantendo a temperatura de reação a ca 15 C. A adição foi completada com um exanguamento de diclorometano (300 mL). Após 30 minutos, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de sisomicina). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 1500 mL. Metanol (4500 mL) foi carregado à mistura de reação e uma segunda concentração sob vácuo foi realizada para um volume alvo de 4500 mL.
[0360]Metanol (900 mL) foi carregado à mistura de reação e a temperatura foi estabilizada a 27,5 C. Trietilamina (442 mL, 3,189 mol, 4,76 equiv) e acetato de zinco di-hidratado (487 g, 2,219 mol, 3,31 equiv) foram carregados sucessivamente e a mistura foi agitada por 1h. Uma solução previamente preparada de di-terc-butil-dicarbonato (759 g, 3,478 mol, 5,19 equiv) em metanol (600 mL) foi adicionada à solução de reação por 70 minutos.
A transferência foi concluída com um enxágue de metanol (60 mL). Após a adição, a reação foi agitada por 9,5h a 27,5 C, quando foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-amino-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidroxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato e intermediário protegido mono-Boc =4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 3600 mL. A temperatura foi estabilizada entre 20 e 30 C e a reação foi temperada com a adição de amônia a 25% (1800 mL) por 1,5h (Atenção: adição exotérmica, taxa de adição controlada para manter a temperatura de reação entre 20 e 30 C). Foi adicionado diclorometano (3000 mL) e a mistura bifásica foi agitada por 20 minutos após o qual a agitação foi interrompida e as camadas foram deixadas para se assentar e separar. A camada orgânica rica em produto inferior (OP1) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa depletada superior (AQ1) foi transferida para despejo. A OP1 foi transferida de volta ao reator ao qual foi carregada água
(750 mL) e amônia a 25% (750 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP2) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ2) foi transferida para despejo. A OP2 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (300 mL) e água (1500 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP3) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ3) foi transferida para despejo. A OP3 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (300 mL) e água (1500 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (O4) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ4) foi transferida para despejo. A fase orgânica exaguada final (OP4) foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume de 2700 mL.
[0361]Água (150 mL), Boc-(S)-HABA (153 g, 0,698 mol, 1,04 equiv) e 1-hidroxibenzotriazol (17 g, 0,125 mol, 0,19 equiv) foram adicionados ao reator.
Após cada carga sólida (Boc-(S)-HABA e 1-hidroxibenzotriazol), diclorometano (60 mL) foi usado para enxaguar o sistema de carregamento. O pH da mistura de reação foi ajustado para 5,5 usando ácido clorídrico de 2 M (1250 mL). Após o ajuste do pH, o ácido clorídrico 1-etil-3--(3’-dimetilaminopropil)carboxi-imida (133 g, 0,694 mol, 1,03 equiv) foi carregado à mistura de reação.
Diclorometano (60 mL) foi usado para enxaguar a carga sólida. Após 70min, a reação foi amostrada e considerada completa por HPLC (consumo de 4-
nitrobenzil (((2S,3R)-2-(((1R,2R,3S,4R,6S)-4-amino-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)met). Metanol (600 mL) foi carregado à mistura de reação seguido por diclorometano (3600 mL) e água (1500 mL). O pH foi ajustado para 9,5 usando hidróxido de sódio (1200 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP5) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ5) foi transferida para despejo. A OP5 foi retornada ao reator seguida por água (2100 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP6) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ6) foi transferida para despejo. A OP6 foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume final de 3000 mL. Acetonitrila (3000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 3000 mL. Acetonitrila (3000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 3000 mL. Acetonitrila (ca. 4500 mL) foi carregada na mistura de reação a um alvo final de volume de 7500 mL.
[0362]A mistura foi aquecida ao refluxo (83 C) e duas porções de água (75 mL e 38 mL) foram adicionadas sucessivamente para produzir uma solução. A solução foi resfriada a 75 C após o qual 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5-metil-4-
(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), sementes (3 g, 0,0029 mol, 0,004 equiv) foram carregados na mistura de reação. A lama recém-formada foi resfriada a 3 C por 5h e agitada entre 0-5 C por mais 4h. A mistura foi filtrada, lavada com acetonitrila (duas porções de 300 mL) e seca sob vácuo para proporcionar 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (345,19 g, 50% de rendimento molar).
EXEMPLO 5B
[0363]Para um reator de vidro revestido equipado com agitação aérea, foi carregada sisomicina na forma de base livre (300,0 g, 0,670 mol, 1 equiv, KF = 5,65) seguida de metanol (1500 mL) e diclorometano (1500 mL). Após dissolução, a temperatura de reação foi estabilizada a 15 C. Uma solução de carbamato de p-nitrobenzil benzotriazol (207 g, 0,694 mol, 1,04 equiv) em diclorometano (4200 mL) foi adicionada ao reator por três horas, mantendo a temperatura de reação a ca 15 C. A adição foi completada com um exanguamento de diclorometano (300 mL). Após 30 minutos, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de sisomicina). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 1500 mL.
[0364]Metanol (4500 mL) foi carregado à mistura de reação e a temperatura foi estabilizada a 20 C. Trietilamina (498 mL, 3,593 mol, 5,36 equiv) e acetato de zinco di-hidratado (425 g, 1,935 mol, 2,89 equiv) foram carregados sucessivamente e os a mistura foi agitada por 1 h. Uma solução previamente preparada de di-terc-butil-dicarbonato (894 g, 4,096 mol, 6,11 equiv) em metanol (600 mL) foi adicionada à solução de reação por 80 minutos.
A transferência foi concluída com um enxágue de metanol (60 mL). Após a adição, a reação foi agitada por 5h a 20 C, quando foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-amino-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidroxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato e intermediário protegido mono-Boc =4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 3000 mL. A temperatura foi estabilizada entre 20 e 30 C e a reação foi temperada com a adição de amônia a 25% (1500 mL) por 1,5h (Atenção: adição exotérmica, taxa de adição controlada para manter a temperatura de reação entre 20 e 30 C). Foi adicionado diclorometano (3000 mL) e a mistura bifásica foi agitada por 20 minutos após o qual a agitação foi interrompida e as camadas foram foram deixadas para para se separar. A camada orgânica rica em produto inferior (OP1) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa depletada superior (AQ1) foi transferida para despejo. A OP1 foi transferida de volta ao reator ao qual foi carregada água (750 mL) e amônia a 25% (750 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP2) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ2) foi transferida para despejo. A OP2 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (225 mL) e água (1500 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP3) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ3) foi transferida para despejo. A OP3 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (225 mL) e água (1500 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (O4) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ4) foi transferida para despejo. A fase orgânica exaguada final (OP4) foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume de 2700 mL.
[0365]Água (150 mL), Boc-(S)-HABA (153 g, 0,698 mol, 1,04 equiv) e 1-hidroxibenzotriazol (17 g, 0,126 mol, 0,19 equiv) foram adicionados ao reator.
Após cada carga sólida (Boc-(S)-HABA e 1-hidroxibenzotriazol), diclorometano (60 mL) foi usado para enxaguar o sistema de carregamento. O pH da mistura de reação foi ajustado para 6,2 usando ácido clorídrico de 2 M (1098 mL). Após o ajuste do pH, o ácido clorídrico 1-etil-3--(3’-dimetilaminopropil)carboxi-imida (133 g, 0,694 mol, 1,03 equiv) foi carregado à mistura de reação.
Diclorometano (60 mL) foi usado para enxaguar a carga sólida. Após 2h, a reação foi amostrada e considerada completa por HPLC (consumo de 4- nitrobenzil (((2S,3R)-2-(((1R,2R,3S,4R,6S)-4-amino-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4-
(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)met). Metanol (525 mL) foi carregado à mistura de reação seguido por diclorometano (3600 mL) e água (1500 mL). O pH foi ajustado para 8,5 usando hidróxido de sódio (365 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP5) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ5) foi transferida para despejo. A OP5 foi retornada ao reator seguida por água (2100 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP6) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ6) foi transferida para despejo. A OP6 foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume final de 3000 mL. Acetonitrila (3000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 3000 mL. Acetonitrila (3000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 3000 mL. Acetonitrila (ca. 6000 mL) foi carregada na mistura de reação a um volume alvo final de 9000 mL.
[0366]A mistura foi aquecida ao refluxo (83 C) e duas porções de água (75 mL e 38 mL) foram adicionadas sucessivamente para produzir uma solução. A solução foi resfriada a 75 C após o qual 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), sementes (3 g, 0,0029 mol, 0,004 equiv) foram carregados na mistura de reação. A lama recém-formada foi resfriada a 3 C por 5h e agitada entre 0-5 C por mais 4h. A mistura foi filtrada, lavada com acetonitrila (duas porções de 300 mL) e seca sob vácuo para proporcionar 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (340,68 g, 49% de rendimento molar).
EXEMPLO 5C
[0367]Para um reator de vidro revestido equipado com agitação aérea, foi carregada sisomicina na forma de base livre (300,0 g, 0,670 mol, 1 equiv, KF = 5,65) seguida de metanol (1500 mL) e diclorometano (1500 mL). Após dissolução, a temperatura de reação foi estabilizada a 15 C. Uma solução de carbamato de p-nitrobenzil benzotriazol (189 g, 0,664 mol, 0,99 equiv) em diclorometano (4200 mL) foi adicionada ao reator por três horas, mantendo a temperatura de reação a ca 15 C. A adição foi completada com um exanguamento de diclorometano (300 mL). Após 29 minutos, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de sisomicina). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 1500 mL. Metanol (4500 mL) foi carregado à mistura de reação e uma segunda concentração sob vácuo foi realizada para um volume alvo de 4500 mL.
[0368]Metanol (900 mL) foi carregado à mistura de reação e a temperatura foi estabilizada em 35 C. Trietilamina (385 mL, 2,777 mol, 4,14 equiv) e acetato de zinco di-hidratado (549 g, 2,501 mol, 3,73 equiv) foram carregados sucessivamente e os a mistura foi agitada por 1 h. Uma solução previamente preparada de di-terc-butil-dicarbonato (620 g, 2,841 mol, 4,24 equiv) em metanol (600 mL) foi adicionada à solução de reação por 60 minutos.
A transferência foi concluída com um enxágue de metanol (60 mL). Após a adição, a reação foi agitada por 5h a 35 C, quando foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-amino-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidroxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato e intermediário protegido mono-Boc =4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 4200 mL. A temperatura foi estabilizada entre 20 e 30 C e a reação foi temperada com a adição de amônia a 25% (2100 mL) por 1h e 27min (Atenção: adição exotérmica, taxa de adição controlada para manter a temperatura de reação entre 20 e 30 C). Foi adicionado diclorometano (3000 mL) e a mistura bifásica foi agitada por 20 minutos após o qual a agitação foi interrompida e as camadas foram deixadas para se assentar e separar. A camada orgânica rica em produto inferior (OP1) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa depletada superior (AQ1) foi transferida para despejo. A OP1 foi transferida de volta ao reator ao qual foi carregada água (750 mL) e amônia a 25% (750 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP2) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ2) foi transferida para despejo. A OP2 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (375 mL) e água (1500 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP3) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ3) foi transferida para despejo. A OP3 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (375 mL) e água (1500 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (O4) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ4) foi transferida para despejo. A fase orgânica exaguada final (OP4) foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume de 2700 mL.
[0369]Água (150 mL), Boc-(S)-HABA (153 g, 0,698 mol, 1,04 equiv) e 1-hidroxibenzotriazol (17 g, 0,126 mol, 0,19 equiv) foram adicionados ao reator.
Após cada carga sólida (Boc-(S)-HABA e 1-hidroxibenzotriazol), diclorometano (60 mL) foi usado para enxaguar o sistema de carregamento. O pH da mistura de reação foi ajustado para 4,8 usando ácido clorídrico de 2 M (1250 mL). Após o ajuste do pH, o ácido clorídrico 1-etil-3--(3’-dimetilaminopropil)carboxi-imida (133 g, 0,694 mol, 1,03 equiv) foi carregado à mistura de reação.
Diclorometano (60 mL) foi usado para enxaguar a carga sólida. Após 70min, a reação foi amostrada e considerada completa por HPLC (consumo de 4- nitrobenzil (((2S,3R)-2-(((1R,2R,3S,4R,6S)-4-amino-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4-
(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)met). Metanol (675 mL) foi carregado à mistura de reação seguido por diclorometano (3600 mL) e água 1500 mL). O pH foi ajustado para 10,5 usando hidróxido de sódio (1264 mL).
As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP5) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ5) foi transferida para despejo. A OP5 foi retornada ao reator seguida por água (2100 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP6) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ6) foi transferida para despejo. A OP6 foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume final de 3000 mL. Acetonitrila (3000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 3000 mL. Acetonitrila (3000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 3000 mL. Acetonitrila (ca. 3000 mL) foi carregada na mistura de reação a um volume alvo final de 6000 mL.
[0370]A mistura foi aquecida ao refluxo (83 C) e duas porções de água (75 mL e 38 mL) foram adicionadas sucessivamente para produzir uma solução. A solução foi resfriada a 75 C após o qual 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), sementes (3 g, 0,0029 mmol,
0,004 equiv) foram carregados na mistura de reação. A lama recém-formada foi resfriada a 3 C por 5h e agitada entre 0-5 C por mais 4h. A mistura foi filtrada, lavada com acetonitrila (duas porções de 300 mL) e seca sob vácuo para proporcionar 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (347,03 g, 50% de rendimento molar).
EXEMPLO 5D
[0371]Para um reator de vidro revestido equipado com agitação aérea, foi carregada sisomicina na forma de base livre (90,0 g, KF = 5,65) seguida de metanol (450 mL) e diclorometano (450 mL). Após dissolução, a temperatura de reação foi estabilizada a 15 C. Uma solução de carbamato de p-nitrobenzil benzotriazol (62 g) em diclorometano (1260 mL) foi adicionada ao reator por três horas, mantendo a temperatura de reação a ca 15 C. A adição foi completada com um exanguamento de diclorometano (90 mL). Após 32 minutos, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de sisomicina). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de final de 450 mL.
[0372]Metanol (1350 mL) foi carregado à mistura de reação e a reação foi ainda concentrada sob vácuo até um volume alvo final de 1350 mL. Uma segunda porção de metanol (270 mL) foi carregada na mistura de reação e a temperatura foi estabilizada a 27,5 C. Trietilamina (132 mL, 0,952 mol, 4,74 equiv) e acetato de zinco di-hidratado (146 g, 0,665 mol, 3,31 equiv) foram carregado sucessivamente e a mistura foi agitada por 1h. Uma solução previamente preparada de di-terc-butil-dicarbonato (228 g, 1,045 mol, 5,19 equiv) em metanol (180 mL) foi adicionada à solução de reação por 70 minutos.
A transferência foi concluída com um enxágue de metanol (18 mL). Após a adição, a reação foi agitada por 13h a 27,5 C, quando foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-amino-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidroxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato e intermediário protegido mono-Boc =4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 1080 mL. A temperatura foi estabilizada entre 20 e 30 C e a reação foi temperada com a adição de amônia a 25% (540 mL) por 37min (Atenção: adição exotérmica, taxa de adição controlada para manter a temperatura de reação entre 20 e 30 C). Foi adicionado diclorometano (9000 mL) e a mistura bifásica foi agitada por 20 minutos após o qual a agitação foi interrompida e as camadas foram deixadas para para se separar. A camada orgânica rica em produto inferior (OP1) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa depletada superior (AQ1) foi transferida para despejo. A OP1 foi transferida de volta ao reator ao qual foi carregada água (225 mL) e amônia a 25% (225 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP2) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ2) foi transferida para despejo. A OP2 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (90 mL) e água (450 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP3) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ3) foi transferida para despejo. A OP3 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (90 mL) e água (450 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (O4) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ4) foi transferida para despejo. A fase orgânica exaguada final (OP4) foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume de 810 mL.
[0373]Água (45 mL), Boc-(S)-HABA (46 g, 0,210 mol, 1,04 equiv) e 1- hidroxibenzotriazol (5 g, 0,037 mol, 0,18 equiv) foram adicionados ao reator.
Após cada carga sólida (Boc-(S)-HABA e 1-hidroxibenzotriazol), diclorometano (18 mL) foi usado para enxaguar o sistema de carregamento. O pH da mistura de reação foi ajustado para 5,5 usando ácido clorídrico de 2 M (380 mL). Após o ajuste do pH, o ácido clorídrico 1-etil-3--(3’-dimetilaminopropil)carboxi-imida (40 g, 0,209 mol, 1,04 equiv) foi carregado à mistura de reação. Diclorometano (18 mL) foi usado para enxaguar a carga sólida. Após 2h e 40min, a reação foi amostrada e considerada completa por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-2-(((1R,2R,3S,4R,6S)-4-amino-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-3- (((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H- piran-6-il)met). Metanol (180 mL) foi carregado à mistura de reação seguido por diclorometano (1080 mL) e água (450 mL). O pH foi ajustado para 9,5 usando hidróxido de sódio (400 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP5) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ5) foi transferida para despejo. A OP5 foi retornada ao reator seguida por água (630 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP6) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ6) foi transferida para despejo. A OP6 foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume final de 3000 mL. Acetonitrila (9000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 900 mL. Acetonitrila (9000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 900 mL.
Acetonitrila (ca. 6000 mL) foi carregada na mistura de reação a um alvo final de volume de 2250 mL.
[0374]A mistura foi aquecida ao refluxo (ca. 80 C) e duas porções de água (23 mL e 11 mL) foram adicionadas sucessivamente para produzir uma solução. A solução foi resfriada a 75 C após o qual 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), sementes (1 g, 0,0010 mol, 0,005 equiv) foram carregados na mistura de reação. A lama recém-formada foi resfriada a 3 C por 5h e agitada entre 0-5 C por mais 4h. A mistura foi filtrada,
lavada com acetonitrila (duas porções de 300 mL) e seca sob vácuo para proporcionar 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (105,43 g, 51% de rendimento molar).
EXEMPLO 5E
[0375]Para um reator de vidro revestido equipado com agitação aérea, foi carregada sisomicina na forma de base livre (300,0 g, 0,670 mol, 1 equiv, KF = 5,65) seguida de metanol (1500 mL) e diclorometano (1500 mL). Após dissolução, a temperatura de reação foi estabilizada a 15 C. Uma solução de carbamato de p-nitrobenzil benzotriazol (226 g, 0,758 mol, 1,13 equiv) em diclorometano (4200 mL) foi adicionada ao reator por três horas, mantendo a temperatura de reação a ca. 15 C. A adição foi completada com um exanguamento de diclorometano (300 mL). Após 30 minutos, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de sisomicina). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 1500 mL. Metanol (4500 mL) foi carregado à mistura de reação e uma segunda concentração sob vácuo foi realizada para um volume alvo de 4500 mL.
[0376]Metanol (900 mL) foi carregado à mistura de reação e a temperatura foi estabilizada a 20 C. Trietilamina (498 mL, 3,593 mol, 5,36 equiv) e acetato de zinco di-hidratado (425 g, 1,936 mol, 2,89 equiv) foram carregados sucessivamente e a mistura foi agitada por 1h. Uma solução previamente preparada de di-terc-butil-dicarbonato (7894 g, 4,096 mol, 6,11 equiv) em metanol (600 mL) foi adicionada à solução de reação por 60 minutos.
A transferência foi concluída com um enxágue de metanol (60 mL). Após a adição, a reação foi agitada por 9h a 20 C, quando foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-amino-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidroxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato e intermediário protegido mono-Boc =4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato). A mistura de reação bruta foi concentrada sob vácuo até um volume final de 3000 mL. A temperatura foi estabilizada entre 20 e 30 C e a reação foi temperada com a adição de amônia a 25% (1500 mL) por 109min (Atenção: adição exotérmica, taxa de adição controlada para manter a temperatura de reação entre 20 e 30 C). Foi adicionado diclorometano (3000 mL) e a mistura bifásica foi agitada por 20 minutos após o qual a agitação foi interrompida e as camadas foram deixadas para se assentar e separar. A camada orgânica rica em produto inferior (OP1) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa depletada superior (AQ1) foi transferida para despejo. A OP1 foi transferida de volta ao reator ao qual foi carregada água (750 mL) e amônia a 25% (750 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP2) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ2) foi transferida para despejo. A OP2 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (225 mL) e água (1500 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP3) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ3) foi transferida para despejo. A OP3 foi transferida de volta para o reator para o qual foram carregados metanol (225 mL) e água (1500 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (O4) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ4) foi transferida para despejo. A fase orgânica exaguada final (OP4) foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume de 2700 mL.
[0377]Água (150 mL), Boc-(S)-HABA (153 g, 0,698 mol, 1,04 equiv) e 1-hidroxibenzotriazol (17 g, 0,126 mol, 0,19 equiv) foram adicionados ao reator.
Após cada carga sólida (Boc-(S)-HABA e 1-hidroxibenzotriazol), diclorometano (60 mL) foi usado para enxaguar o sistema de carregamento. O pH da mistura de reação foi ajustado para 6,2 usando ácido clorídrico de 2 M (1122 mL). Após o ajuste do pH, o ácido clorídrico 1-etil-3--(3’-dimetilaminopropil)carboxi-imida (133 g, 0,694 mol, 1,03 equiv) foi carregado à mistura de reação.
Diclorometano (60 mL) foi usado para enxaguar a carga sólida. Após 4h, a reação foi amostrada e considerada completa por HPLC (consumo de 4- nitrobenzil (((2S,3R)-2-(((1R,2R,3S,4R,6S)-4-amino-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidroxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)met). Metanol (525 mL) foi carregado à mistura de reação seguido por diclorometano (3600 mL) e água 1500 mL). O pH foi ajustado para 8,5 usando hidróxido de sódio (430 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP5) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ5) foi transferida para despejo. A OP5 foi retornada ao reator seguida por água (2100 mL). As camadas foram misturadas por agitação e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada orgânica rica em produto inferior (OP6) foi transferida para um receptor enquanto a camada aquosa superior (AQ6) foi transferida para despejo. A OP6 foi retornada ao reator e concentrada sob vácuo a um volume final de 3000 mL. Acetonitrila (3000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 3000 mL. Acetonitrila (3000 mL) foi carregada ao reator e a mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 3000 mL. Acetonitrila (ca. 6000 mL) foi carregada na mistura de reação a um volume alvo final de 9000 mL.
[0378]A mistura foi aquecida ao refluxo (83 C) e duas porções de água (75 mL e 38 mL) foram adicionadas sucessivamente para produzir uma solução. A solução foi resfriada a 80 C aoós o qual 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), sementes (3 g, 0,0029 mol, 0,004 equiv) foram carregados na mistura de reação. A lama recém-formada foi resfriada a 3 C por 5h e agitada entre 0-5 C por mais 4h. A mistura foi filtrada,
lavada com acetonitrila (duas porções de 300 mL) e seca sob vácuo para proporcionar 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (364,8 g, 53% de rendimento molar).
EXEMPLO 6: EXEMPLO DE PROCEDIMENTOS PARA A PREPARAÇÃO DE TERC-BUTIL ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3- (((2S,3R)-6-(AMINOMETIL)-3-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-3,4-DI- HIDRO-2H-PIRAN-2-IL)OXI)-4-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-6-((S)-4- ((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-2-HIDROXIBUTANAMIDO)-2- HIDROXICICLO-HEXIL)OXI)-3,5-DI-HIDROXI-5-METILTETRA-HIDRO-2H- PIRAN-4-IL)(METIL)CARBAMATO, FÓRMULA (6A) A PARTIR DE 4- NITROBENZIL (((2S,3R)-3-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-4-((S)-4-((TERC- BUTOXICARBONIL)AMINO)-2-HIDROXIBUTANAMIDO)-3-(((2R,3R,4R,5R)- 3,5-DI-HIDRÓXI-5-METIL-4-(METILAMINO)TETRA-HIDRO-2H-PIRAN-2- IL)OXI)-2-HIDROXICICLO-HEXIL)OXI)-3,4-DI-HIDRO-2H-PIRAN-6- IL)METIL)CARBAMATO, FÓRMULA (4A).
EXEMPLO 6A
[0379]A um reator de vidro revestido (reator A) equipado com agitação aérea, foi carregado 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (320 g, 0,311 mol, 1 equiv).
Metanol (3200 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada entre 45 e 55 C (47 C). Uma solução previamente preparada de di-terc-butil- dicarbonato (81,60 g, 0,374 mol, 1,20 equiv) em metanol (80 mL) foi adicionada à solução de reação por 3 minutos. A carga foi concluída com um enxágue de metanol (80 mL). Após 3h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4- ((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5- di-hidróxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4)).
[0380]Para um segundo reator de vidro revestido (reator B) equipado com agitação aérea, foram carregados água (2810 g) e hidróxido de sódio (131 g, 3,275 mol, 10,52 equiv). Esta solução básica foi resfriada a 10 C. Ditionito de sódio (402 g) foi carregado à solução e a temperatura foi estabilizada a 12,5 C.
[0381]A mistura de reação contendo o intermediário terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro- 2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato (reator A) foi transferida para a mistura de ditionito de sódio (reator B) durante um período de 1 h, mantendo a temperatura da mistura de reação de ditionito a 12,5 °C. A transferência foi concluída com uma carga de metanol (160 mL). Na conclusão da adição, a mistura de reação foi aquecida a 20 C por um período de 3h. Após 14 h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(((((4- aminobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di- hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato). A reação foi concentrada sob vácuo com uma temperatura máxima de revestimento de 35 C a um volume final de 4160 mL. Acetato de isopropila (1280 mL) e água (1920 mL) foram carregados à mistura de reação. As camadas foram misturadas por agitação a 35 C e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada aquosa inferior (AP1) e a camada orgânica superior (OP1)
foram transferidas para receptores.
A AP1 foi retornada ao reator e ainda extraída com outra porção de acetato de isopropila (640 mL) para gerar a camada aquosa 2 (AP2) e a camada orgânica (OP2). A AP2 foi enviada para despejo enquanto a OP2 foi combinada com a OP1 no reator.
Esta solução orgânica rica em produto combinada foi lavada com duas porções de solução de bicarbonato de sódio a 6,5% (2 porções de 960 mL). As fases orgânicas lavadas foram concentradas sob vácuo a um volume alvo de 960 mL.
Acetato de isopropila (960 mL) foi carregado ao reator e uma segunda destilação azeotrópica foi realizada com um volume alvo de 960 mL.
Outra porção de acetato de isopropila (960 mL) foi carregada ao reator e uma terceira destilação azeotrópica foi realizada a um volume alvo de 1120 mL.
A temperatura foi estabilizada a 37,5 C e a água (17 mL) foi carregada à mistura para alcançar um KF de 1,5% p/p.
Diclorometano (1120 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada a 10,7 C.
A mistura foi semeada com terc-butil
((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-
butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-
hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-
piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (6,4 g, 0,0067 mol, 0,02 equiv). Uma porção de diclorometano (32 mL) foi usada para enxaguar as sementes.
A mistura semeada foi agitada por 2 h a 10 C e resfriada a 0 C por um período de 2 h.
A suspensão foi ainda agitada por um período de 3,5 h após o qual foi filtrada e lavada com diclorometano (320 mL). O matorial isolado foi seco em um forno a vácuo para proporcionar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-
(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (259,66 g, 88% de rendimento molar).
EXEMPLO 6B
[0382]A um reator de vidro revestido (reator A) equipado com agitação aérea, foi carregado 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (320 g, 0,311 mol, 1 equiv).
reator Metanol (3200 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada entre 45 e 55 C (50 C). Uma solução previamente preparada de di-terc-butil-dicarbonato (81,60 g, 0,374 mol, 1,20 equiv) em metanol (80 mL) foi adicionada à solução de reação por 5 minutos. A carga foi concluída com um enxágue de metanol (80 mL). Após 5 h, uma porção adicional de uma solução previamente preparada de di-terc-butil-dicarbonato (1,92 g) em metanol (1,9 mL) foi adicionada à solução de reação. Após 1h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4- nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6- ((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a)).
[0383]Para um segundo reator de vidro revestido (reator B) equipado com agitação aérea, foram carregados água (2490 g) e hidróxido de sódio (125 g, 3,125 mol, 10,04 equiv). Esta solução básica foi resfriada a 5 C. Ditionito de sódio (383 g, 2,200 mol, 7,07 equiv) foi carregado à solução e a temperatura foi estabilizada a 7,5 C.
[0384]A mistura de reação contendo o intermediário terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro- 2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato (reator A) foi transferida para a mistura de ditionito de sódio (reator B) durante um período de 1 h, mantendo a temperatura da mistura de reação de ditionito a 7,5 C. A transferência foi concluída com uma carga de metanol (160 mL). Na conclusão da adição, a mistura de reação foi aquecida a 27,5 C por um período de 2h. Após 7 h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(((((4- aminobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di- hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato). A reação foi concentrada sob vácuo com uma temperatura máxima de revestimento de 35 C a um volume final de 4160 mL. Acetato de isopropila (1280 mL) e água (1920 mL) foram carregados à mistura de reação. As camadas foram misturadas por agitação a 35 C e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada aquosa inferior (AP1) e a camada orgânica superior (OP1)
foram transferidas para receptores.
A AP1 foi retornada ao reator e ainda extraída com outra porção de acetato de isopropila (640 mL) para gerar a camada aquosa 2 (AP2) e a camada orgânica (OP2). A AP2 foi enviada para despejo enquanto a OP2 foi combinada com a OP1 no reator.
Esta solução orgânica rica em produto combinada foi lavada com duas porções de solução de bicarbonato de sódio a 6,5% (2 porções de 960 mL). As fases orgânicas lavadas foram concentradas sob vácuo a um volume alvo de 960 mL.
Acetato de isopropila (960 mL) foi carregado ao reator e uma segunda destilação azeotrópica foi realizada com um volume alvo de 960 mL.
Outra porção de acetato de isopropila (960 mL) foi carregada ao reator e uma terceira destilação azeotrópica foi realizada a um volume alvo de 1440 mL.
A temperatura foi estabilizada a 37,5 C e água (42 mL) foi carregada À mistura para atingir um
KF de 2,9% p/p.
Diclorometano (1440 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada a 22,5 C.
A mistura foi semeada com terc-butil
((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-
butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-
hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-
piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (6,4 g, 0,0067 mol, 0,02 equiv). Uma porção de diclorometano (32 mL) foi usada para enxaguar as sementes.
A mistura semeada foi agitada por 2h a 22,5 C e resfriada a 0 C por um período de 2h.
A suspensão foi ainda agitada por um período de 3,5 h após o qual foi filtrada e lavada com diclorometano (320 mL). O matorial isolado foi seco em um forno a vácuo para proporcionar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-
(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (257,77 g, 87% de rendimento molar).
EXEMPLO 6C
[0385]A um reator de vidro revestido (reator A) equipado com agitação aérea, foi carregado 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (320 g, 0,311 mol, 1 equiv).
reator Metanol (3200 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada entre 45 e 55 C (50 C). Uma solução previamente preparada de di-terc-butil-dicarbonato (81,60 g, 0,'394 mol, 1,20 equiv) em metanol (80 mL) foi adicionada à solução de reação por 3 minutos. A carga foi concluída com um enxágue de metanol (80 mL). Após 3h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc- butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5-metil-4- (metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di-hidro- 2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a)).
[0386]Para um segundo reator de vidro revestido (reator B) equipado com agitação aérea, foram carregados água (2170 g) e hidróxido de sódio (118 g, 2,950 mol, 9,48 equiv). Esta solução básica foi resfriada a 0 C. Ditionito de sódio (364 g, 2,091 mol, 6,72 equiv) foi carregado à solução e a temperatura foi estabilizada a 2,5 C.
[0387]A mistura de reação contendo o intermediário terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro- 2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato (reator A) foi transferida para a mistura de ditionito de sódio (reator B) durante um período de 5 h, mantendo a temperatura da mistura de reação de ditionito a 2,5 C. A transferência foi concluída com uma carga de metanol (160 mL). Na conclusão da adição, a mistura de reação foi aquecida a 35 C por um período de 1h. Após 3 h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(((((4- aminobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di- hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato). A reação foi concentrada sob vácuo com uma temperatura máxima de revestimento de 35 C a um volume final de 4160 mL. Acetato de isopropila (1280 mL) e água (1920 mL) foram carregados à mistura de reação. As camadas foram misturadas por agitação a 35 C e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada aquosa inferior (AP1) e a camada orgânica superior (OP1) foram transferidas para receptores. A AP1 foi retornada ao reator e ainda extraída com outra porção de acetato de isopropila (640 mL) para gerar a camada aquosa 2 (AP2) e a camada orgânica (OP2). A AP2 foi enviada para despejo enquanto a OP2 foi combinada com a OP1 no reator.
Esta solução orgânica rica em produto combinada foi lavada com duas porções de solução de bicarbonato de sódio a 6,5% (2 porções de 960 mL). As fases orgânicas lavadas foram concentradas sob vácuo a um volume alvo de 960 mL.
Acetato de isopropila (960 mL) foi carregado ao reator e uma segunda destilação azeotrópica foi realizada com um volume alvo de 960 mL.
Outra porção de acetato de isopropila (960 mL) foi carregada ao reator e uma terceira destilação azeotrópica foi realizada a um volume alvo de 1760 mL.
A temperatura foi estabilizada a 37,5 C e água (71,2 mL) foi carregada à mistura para atingir um
KF de 3,9% p/p.
Diclorometano (1760 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada a 35 C.
A mistura foi semeada com terc-butil
((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-
butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-
hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-
piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (6,4 g, 0,0067 mol, 0,02 equiv). Uma porção de diclorometano (32 mL) foi usada para enxaguar as sementes.
A mistura semeada foi agitada por 2h a 35 C e resfriada a 0 C por um período de 2h.
A suspensão foi ainda agitada por um período de 3,5 h após o qual foi filtrada e lavada com diclorometano (320 mL). O matorial isolado foi seco em um forno a vácuo para proporcionar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-
(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-
3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (103,5 g, 0,109 mol, 35% de rendimento molar).
EXEMPLO 6D
[0388]A um reator de vidro revestido (reator A) equipado com agitação aérea, foi carregado 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (320 g, 0,311 mol, 1 equiv).
Metanol (3200 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada entre 45 e 55 C (47 C). Uma solução previamente preparada de di-terc-butil- dicarbonato (81,60 g, 0,374 mol, 1,20 equiv) em metanol (80 mL) foi adicionada à solução de reação por 3 minutos. A carga foi concluída com um enxágue de metanol (80 mL). Após 6h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4- ((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5- di-hidroxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4)).
[0389]Para um segundo reator de vidro revestido (reator B) equipado com agitação aérea, foram carregados água (2810 g) e hidróxido de sódio (131,2 g, 3,280 mol, 10,54 equiv). Esta solução básica foi resfriada a 10 C.
Ditionito de sódio (401,9 g, 2,308 mol, 7,42 equiv) foi carregado à solução e a temperatura foi estabilizada a 12,5 C.
[0390]A mistura de reação contendo o intermediário terc-butil
((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-
((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-
2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-
piran-4-il)(metil)carbamato (reator A) foi transferida para a mistura de ditionito de sódio (reator B) durante um período de 1 h, mantendo a temperatura da mistura de reação de ditionito a 12,5 C.
A transferência foi concluída com uma carga de metanol (160 mL). Na conclusão da adição, a mistura de reação foi aquecida a 20 C por um período de 3h.
Após 18 h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de terc-butil
((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(((((4-
aminobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-
hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-
hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato). A reação foi concentrada sob vácuo com uma temperatura máxima de revestimento de 35 C a um volume final de 4160 mL.
Acetato de isopropila (1280 mL) e água
(1920 mL) foram carregados à mistura de reação.
As camadas foram misturadas por agitação a 35 C e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada aquosa inferior (AP1) e a camada orgânica superior (OP1)
foram transferidas para receptores.
A AP1 foi retornada ao reator e ainda extraída com outra porção de acetato de isopropila (640 mL) para gerar a camada aquosa 2 (AP2) e a camada orgânica (OP2). A AP2 foi enviada para despejo enquanto a OP2 foi combinada com a OP1 no reator.
Esta solução orgânica rica em produto combinada foi lavada com duas porções de solução de bicarbonato de sódio a 6,5% (2 porções de 960 mL). As fases orgânicas lavadas foram concentradas sob vácuo a um volume alvo de 960 mL.
Acetato de isopropila (960 mL) foi carregado ao reator e uma segunda destilação azeotrópica foi realizada com um volume alvo de 960 mL.
Outra porção de acetato de isopropila (960 mL) foi carregada ao reator e uma terceira destilação azeotrópica foi realizada a um volume alvo de 1280 mL.
A temperatura foi estabilizada a 37,5 C e água (26 mL) foi carregada À mistura para atingir um
KF de 2,1% p/p.
Diclorometano (1280 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada a 15,1 C.
A mistura foi semeada com terc-butil
((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-
butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-
hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-
piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (6,4 g, 0,0067 mol, 0,02 equiv). Uma porção de diclorometano (32 mL) foi usada para enxaguar as sementes.
A mistura semeada foi agitada por 2h a 15 C e resfriada a 0 C por um período de 2h.
A suspensão foi ainda agitada por um período de 3,5 h após o qual foi filtrada e lavada com diclorometano (320 mL). O matorial isolado foi seco em um forno a vácuo para proporcionar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-
(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-
3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-
hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (257,5 g,
0,271 mol, 87% de rendimento molar).
EXEMPLO 6E
[0391]A um reator de vidro revestido (reator A) equipado com agitação aérea, foi carregado 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- (((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5- metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,4-di- hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a), (320 g, 0,311 mol, equiv).
Metanol (3200 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada entre 45 e 55 C (47 C). Uma solução previamente preparada de di-terc-butil- dicarbonato (81,60 g, 0,374 mol, 1,20 equiv) em metanol (80 mL) foi adicionada à solução de reação por 3 minutos. A carga foi concluída com um enxágue de metanol (80 mL). Após 8h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de 4-nitrobenzil (((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4- ((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5- di-hidróxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo- hexil)oxi)-3,4-di-hidro-2H-piran-6-il)metil)carbamato, Fórmula (4a)).
[0392]Para um segundo reator de vidro revestido (reator B) equipado com agitação aérea, foram carregados água (2170 g) e hidróxido de sódio (118,4 g, 2,960 mol, 9,51 equiv). Esta solução básica foi resfriada a 0 C.
Ditionito de sódio (363,5 g, 2,088 mol, 6,71 equiv) foi carregado à solução e a temperatura foi estabilizada a 2,5 C.
[0393]A mistura de reação contendo o intermediário terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-(((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-
2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-
piran-4-il)(metil)carbamato (reator A) foi transferida para a mistura de ditionito de sódio (reator B) durante um período de 5 h, mantendo a temperatura da mistura de reação de ditionito a 2,5 C.
A transferência foi concluída com uma carga de metanol (160 mL). Na conclusão da adição, a mistura de reação foi aquecida a 35 C por um período de 1h.
Após 4 h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de terc-butil
((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(((((4-
aminobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-
hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-
hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato). A reação foi concentrada sob vácuo com uma temperatura máxima de revestimento de 35 C a um volume final de 4160 mL.
Acetato de isopropila (1280 mL) e água
(1920 mL) foram carregados à mistura de reação.
As camadas foram misturadas por agitação a 35 C e depois foram deixadas para se separar após o qual a camada aquosa inferior (AP1) e a camada orgânica superior (OP1)
foram transferidas para receptores.
A AP1 foi retornada ao reator e ainda extraída com outra porção de acetato de isopropila (640 mL) para gerar a camada aquosa 2 (AP2) e a camada orgânica (OP2). A AP2 foi enviada para despejo enquanto a OP2 foi combinada com a OP1 no reator.
Esta solução orgânica rica em produto combinada foi lavada com duas porções de solução de bicarbonato de sódio a 6,5% (2 porções de 960 mL). As fases orgânicas lavadas foram concentradas sob vácuo a um volume alvo de 960 mL.
Acetato de isopropila (960 mL) foi carregado ao reator e uma segunda destilação azeotrópica foi realizada com um volume alvo de 960 mL. Outra porção de acetato de isopropila (960 mL) foi carregada ao reator e uma terceira destilação azeotrópica foi realizada a um volume alvo de 1600 mL. A temperatura foi estabilizada a 37,5 C e água (29 mL) foi carregada à mistura para atingir um KF de 3,5% p/p. Diclorometano (1600 mL) foi carregado ao reator e a temperatura foi estabilizada a 30 C. A mistura foi semeada com terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (6,4 g, 0,0067 mol, 0,02 equiv). Uma porção de diclorometano (32 mL) foi usada para enxaguar as sementes. A mistura semeada foi agitada por 2h a 30 C e resfriada a 0 C por um período de 2h. A suspensão foi ainda agitada por um período de 3,5 h após o qual foi filtrada e lavada com diclorometano (320 mL). O matorial isolado foi seco em um forno a vácuo para proporcionar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (259,50 g, 0,273 mol, 88% de rendimento molar).
EXEMPLO 7: EXEMPLO DE PROCEDIMENTOS PARA A PREPARAÇÃO DE TERC-BUTIL ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4- ((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-6-((S)-4-((TERC-
BUTOXICARBONIL)AMINO)-2-HIDROXIBUTANAMIDO)-3-(((2S,3R)-3- ((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-6-(((2-HIDROXIETIL)AMINO)METIL)-3,4- DI-HIDRO-2H-PIRAN-2-IL)OXI)-2-HIDROXICICLO-HEXIL)OXI)-3,5-DI- HIDROXI-5-METILTETRA-HIDRO-2H-PIRAN-4-IL)(METIL)CARBAMATO, FÓRMULA (7), A PARTIR DE TERC-BUTIL ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(AMINOMETIL)-3-((TERC- BUTOXICARBONIL)AMINO)-3,4-DI-HIDRO-2H-PIRAN-2-IL)OXI)-4-((TERC- BUTOXICARBONIL)AMINO)-6-((S)-4-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-2- HIDROXIBUTANAMIDO)-2-HIDROXICICLO-HEXIL)OXI)-3,5-DI-HIDRÓXI-5- METILTETRA-HIDRO-2H-PIRAN-4-IL)(METIL)CARBAMATO, FÓRMULA (6A).
EXEMPLO 7A
[0394]Para um reator de vidro revestido equipado com agitação aérea, foi carregado terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6- (aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (250 g, 0,263 mol, 1 equiv).
Acetonitrila (1250 mL) foi carregada ao reator e a temperatura foi estabilizada entre 15 e 30 C (27,4 C). A mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 500 mL. A solução foi amostrada quanto ao teor de água por KF, o que forneceu um resultado de 0,27% p/p. Uma porção adicional de acetonitrila
(750 mL) foi carregada ao reator e uma segunda destilação azeotrópica foi realizada para um volume alvo de 500 mL.
A mistura foi amostrada para KF e foi obtido um resultado de 0,08% p/p.
A temperatura de reação foi estabilizada a 29,9 C e acetona (1250 mL) foi carregada à mistura.
A reação foi aquecida e a temperatura estabilizada a 40 C.
Bicarbonato de sódio (44,25 g, 0,527 mol, 2 equiv) foi carregado à mistura de reação seguido por 2-iodoetanol (65,2 g, 29,6 mL, 0,379 mol, 1,44 equiv). Após 23h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-
(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-
3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-
hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a)). A reação foi resfriada para 22,7 C e 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (60,0 g, 0,535 mol, 2,03 equiv) foi carregado como um sólido.
A destruição do 2-iodoetanol foi monitorada por um método de CG e após 18h a têmpera deste reagente foi considerada completa.
Água (1250 mL) e acetato de isopropila (1250 mL)
foram carregados à mistura de reação.
Os teores do reator foram agitados por
25 minutos e as camadas foram deixadas para se separar.
A camada aquosa inferior (AP1) e a camada orgânica superior (OP1) foram coletadas em receptores.
A AP1 foi retornada ao reator e uma segunda porção de acetato de isopropila (750 mL) foi carregada.
Os teores do reator foram agitados por 30 minutos e as camadas foram deixadas para para se separar.
A camada aquosa inferior (AP2) e a camada orgânica superior (OP2) foram coletadas em receptores.
OP1 e OP2 foram combinadas no reator e extraídas com duas porções de solução saturada de cloreto de sódio (750 mL, preparada dissolvendo 100 g de NaCl/290 mL de água). A fase orgânica lavada (OP4) foi concentrada sob vácuo a um volume alvo de 500 mL. Acetonitrila (2550 mL) foi carregada ao reator. Uma segunda destilação azeotrópica a vácuo foi realizada para um volume alvo de 2050 mL. O acetato de isopropila (200 mL) foi carregado à mistura. Água (35,4 mL) foi carregada à mistura até se obter um KF de 2,0%. Os teores do reator foram aquecido a 75 C sobre o qual foi obtida uma solução. A mistura de reação foi resfriada a 65 C e semeada com terc- butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6- ((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato, Fórmula (7a), (5 g, 0,0050 mol, 0,02 equiv). A agitação foi mantida a 65 C por 8h, durante a qual uma suspensão espessa se formou. A mistura foi resfriada de 65 C a 2,5 C por um período de 12h. A suspensão foi filtrada e lavada com acetonitrila (900 mL) e seca em um forno a vácuo para proporcionar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-(((2- hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)- 3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (7a), (203,8 g, 0,205 mol, 78% de rendimento molar).
EXEMPLO 7B
[0395]Para um reator de vidro revestido equipado com agitação aérea, foi carregado terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6- (aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-
((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (250 g, 0,263 mol, 1 equiv).
Acetonitrila (1250 mL) foi carregada ao reator e a temperatura foi estabilizada entre 15 e 30 C (30 C). A mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 500 mL. A solução foi amostrada quanto ao teor de água por KF, o que forneceu um resultado de 0,18% p/p. Uma porção adicional de acetonitrila (750 mL) foi carregada ao reator e uma segunda destilação azeotrópica foi realizada para um volume alvo de 500 mL. A mistura foi amostrada para KF e foi obtido um resultado de 0,075% p/p. A temperatura de reação foi estabilizada a 29,9 C e acetona (1250 mL) foi carregada à mistura. A reação foi aquecida e a temperatura estabilizada a 40 C. Bicarbonato de sódio (44,25 g, 0,527 mol, 2 equiv) foi carregado à mistura de reação seguido por 2-iodoetanol (56,6 g, 25,7 mL, 0,329 mol, 1,25 equiv). Após 56h, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2- (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)- 3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di- hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a)). A reação foi resfriada para 22,7 C e 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (60,0 g, 0,535 mol, 2,0 equiv) foi carregado como um sólido. A destruição do 2-iodoetanol foi monitorada por um método de CG e após 18h a têmpera deste reagente foi considerada completa. Água (1250 mL) e acetato de isopropila (1250 mL) foram carregados à mistura de reação. Os teores do reator foram agitados por 25 minutos e as camadas foram deixadas para se separar. A camada aquosa inferior (AP1) e a camada orgânica superior (OP1) foram coletadas em receptores.
A AP1 foi retornada ao reator e uma segunda porção de acetato de isopropila (750 mL) foi carregada.
Os teores do reator foram agitados por 30 minutos e as camadas foram deixadas para para se separar.
A camada aquosa inferior (AP2) e a camada orgânica superior (OP2) foram coletadas em receptores.
OP1 e OP2 foram combinadas no reator e extraídas com duas porções de solução saturada de cloreto de sódio (750 mL, preparada dissolvendo 100 g de NaCl/290 mL de água). A fase orgânica lavada (OP4) foi concentrada sob vácuo a um volume alvo de 500 mL.
Acetonitrila (2550 mL) foi carregada ao reator.
Uma segunda destilação azeotrópica a vácuo foi realizada para um volume alvo de 1800 mL.
O acetato de isopropila (200 mL) foi carregado à mistura.
Água (22,8 mL) foi carregada à mistura até se obter um KF de 1,46%. Os teores do reator foram aquecido a 75 C sobre o qual foi obtida uma solução.
A mistura de reação foi resfriada a 62,5 C e semeada com terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-
hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-(((2-
hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-
3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (7a), (5 g, 0,0050 mol, 0,02 equiv). A agitação foi mantida a 62,5 C por 5h, durante a qual uma suspensão espessa se formou.
A mistura foi resfriada de 65 C a 2,5
C por um período de 12h.
A suspensão foi filtrada e lavada com acetonitrila
(900 mL) e seca em um forno a vácuo para proporcionar terc-butil
((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-
((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato, Fórmula (7a), (208,1 g, 0,220 mol, 83% de rendimento molar).
EXEMPLO 7C
[0396]Para um reator de vidro revestido equipado com agitação aérea, foi carregado terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6- (aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a), (250 g, 0,263 mol, 1 equiv).
Acetonitrila (1250 mL) foi carregada ao reator e a temperatura foi estabilizada entre 15 e 30 C (24,3 C). A mistura foi concentrada sob vácuo a um volume alvo final de 500 mL. A solução foi amostrada quanto ao teor de água por KF, o que forneceu um resultado de 0,22% p/p. Uma porção adicional de acetonitrila (750 mL) foi carregada ao reator e uma segunda destilação azeotrópica foi realizada para um volume alvo de 500 mL. A mistura foi amostrada para KF e foi obtido um resultado de 0,097% p/p. A temperatura de reação foi estabilizada a 29,9 C e acetona (1250 mL) foi carregada à mistura. A reação foi aquecida e a temperatura estabilizada a 29,9 C. Bicarbonato de sódio (44,25 g, 0,527 mol, 2 equiv) foi carregado à mistura de reação seguido por 2-iodoetanol (44,4 g, 20,14 mL, 0,258 mol, 0,98 equiv). Após 43h, uma porção adicional de 2- iodoetanol (0,25 mL) foi adicionada à mistura de reação. Após 9,5h, uma terceira porção de 2-iodoetanol (0,3 mL) foi adicionada à mistura de reação.
Após 2h adicionais, a reação foi amostrada e considerada completa por análise por HPLC (consumo de terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3- (((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H- piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (6a)). A reação foi resfriada para 22,7 C e 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (60,0 g, 0,535 mol, 2,03 equiv) foi carregado como um sólido. A destruição do 2-iodoetanol foi monitorada por um método de CG e após 10h a têmpera deste reagente foi considerada completa. Água (1250 mL) e acetato de isopropila (1250 mL) foram carregados à mistura de reação. Os teores do reator foram agitados por 25 minutos e as camadas foram deixadas para se separar. A camada aquosa inferior (AP1) e a camada orgânica superior (OP1) foram coletadas em receptores. A AP1 foi retornada ao reator e uma segunda porção de acetato de isopropila (750 mL) foi carregada. Os teores do reator foram agitados por 30 minutos e as camadas foram deixadas para para se separar. A camada aquosa inferior (AP2) e a camada orgânica superior (OP2) foram coletadas em receptores. OP1 e OP2 foram combinadas no reator e extraídas com duas porções de solução saturada de cloreto de sódio (750 mL, preparada dissolvendo 100 g de NaCl/290 mL de água). A fase orgânica lavada (OP4) foi concentrada sob vácuo a um volume alvo de 500 mL.
Acetonitrila (2550 mL) foi carregada ao reator. Uma segunda destilação azeotrópica a vácuo foi realizada para um volume alvo de 1550 mL. O acetato de isopropila (200 mL) foi carregado à mistura. Água (10,7 mL) foi carregada à mistura até se obter um KF de 0,85%. Os teores do reator foram aquecido a 75 C sobre o qual foi obtida uma solução. A mistura de reação foi resfriada a 57 C e semeada com terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-
butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-(((2- hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)- 3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (7a), (5 g, 0,0050 mol, 0,02 equiv). A agitação foi mantida a 57 C por 2h, durante a qual uma suspensão espessa se formou. A mistura foi resfriada de 65 C a 2,5 C por um período de 12h. A suspensão foi filtrada e lavada com acetonitrila (900 mL) e seca em um forno a vácuo para proporcionar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2- il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato, Fórmula (7a), (218,1 g, 0,220 mol, 83% de rendimento molar).
EXEMPLO 8: EXEMPLO DE PROCEDIMENTOS PARA A PREPARAÇÃO DE PLAZOMICINA A PARTIR DE TERC-BUTIL ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)- 6-((S)-4-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-2-HIDROXIBUTANAMIDO)-3- (((2S,3R)-3-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)-6-(((2- HIDROXIETIL)AMINO)METIL)-3,4-DI-HIDRO-2H-PIRAN-2-IL)OXI)-2- HIDROXICICLO-HEXIL)OXI)-3,5-DI-HIDROXI-5-METILTETRA-HIDRO-2H- PIRAN-4-IL)(METIL)CARBAMATO, FÓRMULA (7A) E A REGENERAÇÃO DA BASE DE RESINA CG-50.
EXEMPLO 8A
[0397]Para um reator de vidro revestido (reator A) equipado com agitação aérea, foi carregado terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)- 4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-(((2- hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)- 3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (7a), (150 g, 0,151 mol, 1 equiv) e diclorometano (750 mL). A mistura foi agitada entre 0 e 5 C (0,6 C). Adicionou-se lentamente ácido trifluoroacético à mistura de reação, mantendo a temperatura entre 0 e 5 C [vide adição exotérmica]. Na conclusão da adição, a solução de reação foi aquecida a 22,5 C e mantida a essa temperatura por 2h. A mistura de reação foi concentrada por destilação sob vácuo até um volume alvo final de 450 mL. A mistura de reação concentrada foi mantida a 22,5 C por 2h adicionais após a qual a temperatura foi estabilizada entre 0 e 10 C (3,0 C).
[0398]Para um segundo reator de vidro revestido (reator B) equipado com agitação aérea, foi carregada água (375 mL) que foi resfriada a uma temperatura entre 0 e 5 C (2,5 C). Os teores do reator A foram transferidos para os teores do reator B por 45 minutos, mantendo a temperatura entre 0 e 10 C [vide adição exotérmica]. Acetato de isopropila foi carregado à mistura de reação para produzir uma mistura bifásica. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP1) e a camada orgânica superior foram separadas (OP1). A OP1 foi transferida de volta para o reator e água (75 mL) foi carregada à mistura. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP2) e a camada orgânica superior (OP2) foram coletadas. A OP2 foi retornada ao reator e carregada com água (75 mL). Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem.
A camada aquosa rica em produtos inferior (AP3) e a camada orgânica superior (OP3) foram coletadas. As três camadas aquosas ricas em produto (AP1, AP2 e AP3) foram retornadas ao reator e combinadas. O pH da camada orgânica combinada foi medido como 0,15. Acetato de isopropila (450) foi carregado às fases aquosas combinadas. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP4) e a camada orgânica superior (OP4) foram coletadas. O pH da AP4 combinada foi medido como 0, 73. A AP4 foi retornada ao reator. Acetato de isopropila (450) foi carregado ao reator. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP5) e a camada orgânica superior (OP5) foram coletadas. O pH da AP5 foi medido como 1,78. A AP5 foi retornada ao reator. Acetato de isopropila (450) foi carregado ao reator. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produtos inferior (AP6) e a camada orgânica superior (OP6) foram coletadas. O pH da AP6 foi medido como 2,95.
A AP6 foi retornada ao reator e o pH ajustado para entre 5,8 e 6,2 (pH final 6,01) usando uma solução de amônia a 1% (34,7 mL). A temperatura foi mantida entre 0 e 10 C durante o ajuste do pH. Água (ca. 820 mL) foi carregada à mistura de reação até um volume final de 1350 mL. O pH foi medido novamente (5,67) e ajustado para entre 5,8 e 6,2 (6,01), usando solução de amônia a 1% (11,7 mL). A condutividade da solução foi medida como 15,36 mS/cm.
[0399]Esta solução de plazomicina bruta foi carregada a uma coluna XK-50/100 empacotada com resina CG-50 (325,5 g) na forma de amônio com um "headspace" cheio de água. A temperatura da coluna foi estabilizada a 13 C. A solução bruta foi carregada em modo de fluxo descendente a uma taxa de fluxo linear entre 10 e 20 cm/h (ca. 9,2 mL/min). Após a solução bruta ter sido carregada à base de resina, água (1 coluna de volume, 1620 mL) foi carregada em modo de fluxo descendente a uma taxa de fluxo linear entre 10 e 20 cm/h (9,2 mL/min). Na conclusão da carga de água, uma solução de amônia a 0,43% (preparada a partir de 86,7 g de amônia a 25% em 5 L de água) foi carregada à coluna em modo de fluxo descendente até a plazomicina ter eluído da coluna conforme julgado a partir do traço de absorção UV a 210 nm. Após a eluição da plazomicina ter sido considerada completa, a coluna foi ainda lavada com uma solução de amônia a 5% em modo de fluxo descendente. As frações ricas em produto (#36-58) foram combinadas para proporcionar 6520 mL de uma solução na forma de base livre de plazomicina purificada. O teor de amônia da solução foi medido por cromatografia iônica como 2720 g/mL e a concentração na forma de base livre de plazomicina foi medida por UPLC como 1,17% p/v. A solução foi processada por osmose reversa usando uma membrana XLE em modo de diafiltração até que o amônia (g/mL) para plazomicina (% p/v) estivesse abaixo de 20. Foram processados 6 diavolumes de água para atingir esse critério. A temperatura foi mantida abaixo de 10 C durante a remoção de amônia pelo processo de diafiltração. Após o processo de remoção de amônia, o pH da solução purificada de plazomicina foi ajustado para 6,0 usando solução de ácido sulfúrico 6 M (57,5). A temperatura durante o ajuste do pH foi mantida entre 0 e 5 C. A solução neutralizada foi passada através de um cartucho de carvão Zetacarbon R55 pré-lavado a uma taxa de fluxo de 72 L/h.m2 (18 mL/min). Após a filtração, o cartucho foi lavado com água (1068 mL) e a lavagem foi combinada com a solução de plazomicina filtrada. O filtrado e a lavagem combinados foram concentrados a 540 mL usando osmose reversa com uma membrana XLE em modo de nanofiltração. A solução concentrada foi passada através de um filtro de 0,22 mícrons e isolada por meio de secagem por pulverização usando um secador pulverizador de laboratório Buchi (89,05 g, 0,106 mol, 70% de rendimento molar).
EXEMPLO 8B- REGENERAÇÃO DE RESINA
[0400]Uma coluna XK-50/100 contendo resina CG-50 (326 g) foi regenerada pelas etapas seguintes. A solução de hidróxido de sódio a 4% (0,49 kg de NaOH em 11,8 L de água) foi carregada em modo de fluxo ascendente até que uma condutividade de 110 mS/cm fosse alcançada no efluente. Em seguida, água foi carregada em modo ascendente até que fosse alcançada uma condutividade de 1,5 mS/cm no efluente. A solução de ácido sulfúrico a 2% (preparada a partir de 0,10 kg de ácido sulfúrico concentrado em 4,9 L de água) foi carregada em modo de fluxo ascendente até que uma condutividade de mS/cm fosse alcançada no efluente. água (4782 mL) foi carregada em modo de fluxo ascendente até uma condutividade final de 4,8 mS/cm. A solução de amônia a 2% (preparada a partir de 400 g de amônia a 25% em 9,6 L de água) foi carregada em modo de fluxo ascendente. A condutividade final do efluente foi de 970 S/cm (pH 12,04). A resina foi deixada assentar sem fluxo por 1h. Água (3419 mL) foi carregada em modo de fluxo descendente (13,1 mL/min).
[0401]O empacotamento da base de resina foi testado pela aplicação de um pulso de trifluoroacetato de amônia. Uma solução de trifluoroacetato de amônia foi preparada dissolvendo trifluoroacetato de amônio (1,397 g) em água (106 mL). Esta solução de trifluoroacetato de amônio 0,1 M (27,5 mL) foi carregada diretamente acima da superfície da base de resina CG-50 no modo de pistão líquido. A água foi carregada no modo de fluxo descendente até que a absorção UV do pulso de trifluoroacetato de amônio pudesse ser observada a 210 nm. A base de resina foi considerada empacotada e adequada para uso na purificação de plazomicina bruta.
EXEMPLO 8C
[0402]Para um reator de vidro revestido (reator A) equipado com agitação aérea, foi carregado terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)- 4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-(((2- hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)- 3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (7a),
(150 g, 0,151 mol, 1 equiv) e diclorometano (750 mL). A mistura foi agitada entre 0 e 5 C (0,0 C). Adicionou-se lentamente ácido trifluoroacético à mistura de reação, mantendo a temperatura entre 0 e 5 C [vide adição exotérmica]. Na conclusão da adição, a solução de reação foi aquecida a 22,5 C e mantida a essa temperatura por 1,5h. A mistura de reação foi concentrada por destilação sob vácuo até um volume alvo final de 450 mL. A mistura de reação concentrada foi mantida a 22,5 C por 8h adicionais após a qual a temperatura foi estabilizada entre 0 e 10 C (5,0 C).
[0403]Para um segundo reator de vidro revestido (reator B) equipado com agitação aérea, foi carregada água (375 mL) que foi resfriada a uma temperatura entre 0 e 5 C (0,3 C). Os teores do reator A foram transferidos para os teores do reator B por 19 minutos, mantendo a temperatura entre 0 e 10 C [vide adição exotérmica]. Acetato de isopropila foi carregado à mistura de reação para produzir uma mistura bifásica. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP1) e a camada orgânica superior foram separadas (OP1). A OP1 foi transferida de volta para o reator e água (75 mL) foi carregada à mistura. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP2) e a camada orgânica superior (OP2) foram coletadas. A OP2 foi retornada ao reator e carregada com água (75 mL). Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem.
A camada aquosa rica em produtos inferior (AP3) e a camada orgânica superior (OP3) foram coletadas. As três camadas aquosas ricas em produto (AP1, AP2 e AP3) foram retornadas ao reator e combinadas. O pH da camada orgânica combinada foi medido como 0,49. Acetato de isopropila (450) foi carregado às fases aquosas combinadas. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP4) e a camada orgânica superior (OP4) foram coletadas. O pH da AP4 combinada foi medido como 0,85. A AP4 foi retornada ao reator. Acetato de isopropila (450) foi carregado ao reator. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP5) e a camada orgânica superior (OP5) foram coletadas. O pH da AP5 foi medido como 1,72. A AP5 foi retornada ao reator. Acetato de isopropila (450) foi carregado ao reator. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produtos inferior (AP6) e a camada orgânica superior (OP6) foram coletadas. O pH da AP6 foi medido como 2,86.
A AP6 foi retornada ao reator e o pH ajustado para entre 5,8 e 6,2 (pH final 5,99) usando uma solução de amônia a 1% (21 mL). A temperatura foi mantida entre 0 e 10 C durante o ajuste do pH. Água (ca. 820 mL) foi carregada à mistura de reação até um volume final de 1350 mL. O pH foi medido novamente (5,54) e ajustado para entre 5,8 e 6,2 (6,01) usando solução de amônia a 1% (10 mL). A condutividade da solução foi medida como 14,92 mS/cm.
[0404]Esta solução de plazomicina bruta foi carregada a uma coluna
XK-50/100 empacotada com resina CG-50 (325,5 g) na forma de amônio com um "headspace" cheio de água.
A temperatura da coluna foi estabilizada a 20 C.
A solução bruta foi carregada no modo de fluxo descendente a uma taxa de fluxo linear entre 10 e 20 cm/h (ca. 9,2 mL/min). Após a solução bruta ter sido carregada à base de resina, água (1 coluna de volume, 1620 mL) foi carregada em modo de fluxo descendente a uma taxa de fluxo linear entre 10 e 20 cm/h
(9,2 mL/min). Na conclusão da carga de água, uma solução de amônia a 0,50%
(preparada a partir de 102 g de amônia a 25% em 5 L de água) foi carregada à coluna em modo de fluxo descendente até a plazomicina ter eluído da coluna conforme julgado a partir do traço de absorção UV a 210 nm.
A solução de amônia foi carregada a uma taxa de fluxo linear de 38 cm/h (12,4 mL/min). As frações ricas em produto (#34-5o) foram combinadas para proporcionar 4800 mL de uma solução na forma de base livre de plazomicina purificada.
O teor de amônia da solução foi medido por cromatografia iônica como 3200 g/mL e a concentração na forma de base livre de plazomicina foi medida por UPLC como
1,52% p/v.
A solução foi processada por osmose reversa usando uma membrana XLE em modo de diafiltração até que o amônia (g/mL) para plazomicina (% p/v) estivesse abaixo de 20. Foram processados 9 diavolumes de água para atingir esse critério.
A temperatura foi mantida abaixo de 10 C durante a remoção de amônia pelo processo de diafiltração.
Após o processo de remoção de amônia, o pH da solução purificada de plazomicina foi ajustado para 6,47 usando solução de ácido sulfúrico 6 M (52,5). A temperatura durante o ajuste do pH foi mantida entre 0 e 5 C.
A solução neutralizada foi passada através de um cartucho de carvão Zetacarbon R55 pré-lavado a uma taxa de fluxo de 72 L/h.m2 (15 mL/min). Após a filtração, o cartucho foi lavado com água (1068 mL) e a lavagem foi combinada com a solução de plazomicina filtrada. O filtrado e a lavagem combinados foram concentrados a 540 mL usando osmose reversa com uma membrana XLE em modo de nanofiltração. A solução concentrada foi passada através de um filtro de 0,22 mícrons e isolada por secagem por pulverização usando um secador de spray de laboratório Buchi (88,42 g, 0,106 mol, rendimento molar de 70%).
EXEMPLO 8D
[0405]Para um reator de vidro revestido (reator A) equipado com agitação aérea, foi carregado terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)- 4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-(((2- hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)- 3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato, Fórmula (7a), (150 g, 0,151 mol, 1 equiv) e diclorometano (750 mL). A mistura foi agitada entre 0 e 5 C (0,9 C). Adicionou-se lentamente ácido trifluoroacético à mistura de reação, mantendo a temperatura entre 0 e 5 C [vide adição exotérmica]. Na conclusão da adição, a solução de reação foi aquecida a 22,5 C e mantida a essa temperatura por 1,5h. A mistura de reação foi concentrada por destilação sob vácuo até um volume alvo final de 450 mL. A mistura de reação concentrada foi mantida a 22,5 C por 6h adicionais após a qual a temperatura foi estabilizada entre 0 e 10 C (6,5 C).
[0406]Para um segundo reator de vidro revestido (reator B) equipado com agitação aérea, foi carregada água (375 mL) que foi resfriada a uma temperatura entre 0 e 5 C (3,5 C). Os teores do reator A foram transferidos para os teores do reator B por 7 minutos, mantendo a temperatura entre 0 e 10 C [vide adição exotérmica]. Acetato de isopropila foi carregado à mistura de reação para produzir uma mistura bifásica. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP1) e a camada orgânica superior foram separadas (OP1). A OP1 foi transferida de volta para o reator e água (75 mL) foi carregada à mistura. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP2) e a camada orgânica superior (OP2) foram coletadas. A OP2 foi retornada ao reator e carregada com água (75 mL). Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem.
A camada aquosa rica em produtos inferior (AP3) e a camada orgânica superior (OP3) foram coletadas. As três camadas aquosas ricas em produto (AP1, AP2 e AP3) foram retornadas ao reator e combinadas. O pH da camada orgânica combinada foi medido como 0,47. Acetato de isopropila (450) foi carregado às fases aquosas combinadas. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP4) e a camada orgânica superior (OP4) foram coletadas. O pH da AP4 combinada foi medido como 0,83. A AP4 foi retornada ao reator. Acetato de isopropila (450) foi carregado ao reator. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produto inferior (AP5) e a camada orgânica superior (OP5) foram coletadas. O pH da AP5 foi medido como 1,90. A AP5 foi retornada ao reator. Acetato de isopropila (450) foi carregado ao reator. Os teores do reator foram misturados por meio de agitação área e depois a agitação foi interrompida para deixar que as camadas se separassem. A camada aquosa rica em produtos inferior (AP6) e a camada orgânica superior (OP6) foram coletadas. O pH da AP6 foi medido como 3,1. A AP6 foi retornada ao reator e o pH ajustado para entre 5,8 e 6,2 (pH final 6,04) usando uma solução de amônia a 1% (35 mL). A temperatura foi mantida entre 0 e 10 C durante o ajuste do pH. Água (ca. 820 mL) foi carregada à mistura de reação até um volume final de 1350 mL. O pH foi medido novamente (5, 83) e ajustado para entre 5,8 e 6,2 (6,01) usando uma solução de amônia a 1% (5 mL). A condutividade da solução foi medida como 15,29 mS/cm.
[0407] Esta solução de plazomicina bruta foi carregada a uma coluna XK-50/100 empacotada com resina CG-50 (325,5 g) na forma de amônio com um "headspace" cheio de água. A temperatura da coluna foi estabilizada a 27 C. A solução bruta foi carregada no modo de fluxo descendente a uma taxa de fluxo linear entre 10 e 20 cm/h (ca. 9,2 mL/min). Após a solução bruta ter sido carregada à base de resina, água (1 coluna de volume, 1620 mL) foi carregada em modo de fluxo descendente a uma taxa de fluxo linear entre 10 e 20 cm/h (9,2 mL/min). Na conclusão da carga de água, uma solução de amônia a 0,50% (preparada a partir de 102 g de amônia a 25% em 5 L de água) foi carregada à coluna em modo de fluxo descendente até a plazomicina ter eluído da coluna conforme julgado a partir do traço de absorção UV a 210 nm. A solução de amônia foi carregada a uma taxa de fluxo linear de 38 cm/h (12,4 mL/min). As frações ricas em produto (#31-45) foram combinadas para proporcionar 4072 mL de uma solução na forma de base livre de plazomicina purificada.
O teor de amônia da solução foi medido por cromatografia iônica como 4060 g/mL e a concentração na forma de base livre de plazomicina foi medida por UPLC como
1,52% p/v.
A solução foi processada por osmose reversa usando uma membrana XLE em modo de diafiltração até que o amônia (g/mL) para plazomicina (% p/v) estivesse abaixo de 20. Foram processados 5 diavolumes de água para atingir esse critério.
A temperatura foi mantida abaixo de 10 C durante a remoção de amônia pelo processo de diafiltração.
Após o processo de remoção de amônia, o pH da solução purificada de plazomicina foi ajustado para 6,74 usando solução de ácido sulfúrico 6 M (56). A temperatura durante o ajuste do pH foi mantida entre 0 e 5 C.
A solução neutralizada foi passada através de um cartucho de carvão Zetacarbon R55 pré-lavado a uma taxa de fluxo de 72 L/h.m2 (15 mL/min). Após a filtração, o cartucho foi lavado com água (1068 mL) e a lavagem foi combinada com a solução de plazomicina filtrada.
O filtrado e a lavagem combinados foram concentrados a 540 mL usando osmose reversa com uma membrana XLE em modo de nanofiltração.
A solução concentrada foi passada através de um filtro de 0,22 mícrons e isolada por secagem por pulverização usando um secador de spray de laboratório
Buchi (95,86 g, 0,114 mol, rendimento molar de 76%).

Claims (1)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Processo para preparar um composto da Fórmula (2), ou um sal da mes- ma, ou solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende: (a) colocar em contato um composto da Fórmula (1): (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com 1-{[(p- nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H-benzotriazol (PNZ-Bt) para formar o composto da Fórmu- la (2): (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; em que é uma ligação simples ou ligação dupla; R1 é H ou C1-C3 alquila; R2 é H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila.
    2. Processo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a etapa (a) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em diclorometano, metanol e uma combinação dos mesmos; e/ou em que o PNZ-Bt está presente em cerca de 1,0 a 1,2 equivalentes molares ao composto da Fórmula (1), ou em um enantiômero da mesma, ou em um diaste- reômero da mesma; e/ou em que R1, R2, ou R3 são H.
    3. Processo, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda as etapas (b1) ou (b2): (b1) em que R1, R2, e R3 são H, colocar em contato o composto da Fórmula (2) com um reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; ou (b2) em que, quando um ou mais de R1, R2, ou R3 é independentemente uma C1-C3 alquila, primeiramente remover a referida C1-C3 alquila e, em seguida, colocar em contato o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
    opcionalmente em que o reagente do grupo protetor Boc é Boc2O ou Boc- ONb; e/ou em que as etapas (b1) ou (b2) são realizadas na presença de trimetilami- na ou na presença de metanol.
    4. Processo, de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADO pelo fato de que as etapas (b1) ou (b2) são realizadas na presença de um ácido de Lewis;
    opcionalmente em que: (i) o ácido de Lewis é Zn(OAc)2, ZnCl2 ou Zn(OPiv)2; ou (ii) o ácido de Lewis compreende um íon de cobre ou um íon de níquel.
    5. Processo, de acordo a reivindicação 3 ou 4, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda: (c)colocar em contato o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com para obter um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
    6. Processo, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que a etapa (c) é realizada na presença de um reagente de ativação e de um re- agente de acoplamento de peptídeo; opcionalmente em que: (i) o reagente de ativação é HOBt, opcionalmente em que o reagente de ati- vação está presente em cerca de 0,05 a 1,0 equivalentes molares para ; ou (ii) o reagente de acoplamento de peptídeo é EDAC ou PyBOP, opcional- mente em que o reagente de acoplamento de peptídeo está presente em cerca de
    1,0 a 1,4 equivalentes molares para .
    7. Processo, de acordo com a reivindicação 5 ou 6, CARACTERIZADO pelo fato de que a etapa (c) é realizada em uma condição ácida; opcionalmente, em que a condição ácida é pH entre cerca de 4 e 7 ou é pH em torno de 5.
    8. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 7, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda preparar uma forma cristali- na do composto da Fórmula (4), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mes- ma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma; e/ou compreende ainda isolar o composto da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereô- mero da mesma.
    9. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 8, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda: (d) colocar em contato o compostos da Fórmula (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc para obter um composto da Fórmu- la (5): (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; opcionalmente em que o reagente do grupo protetor Boc é Boc 2O.
    10. Processo, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADO pelo fato de que a etapa (d) é realizada na presença de um álcool, opcionalmente em que o álcool é metanol; e/ou em que a etapa (d) é realizada a uma temperatura de até cerca de 60° C.
    11. Processo para preparar um composto da Fórmula (5): (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, CARACTERIZADO pelo fato de que com- preende: (a) colocar em contato um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc, em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla, e, opcionalmente, em que o reagente do grupo protetor Boc é Boc2O.
    12. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda: (e) colocar em contato o composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma com um reagente de desproteção PNZ para obter um composto da Fórmula (6):
    (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, opcionalmente em que o reagente de desproteção PNZ é ditionito de sódio; em que o processo compreende ainda opcionalmente preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (6), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, e/ou isolar o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
    13. Processo, de acordo com a reivindicação 12, CARACTERIZADO pelo fa- to de que compreende ainda: (f) colocar em contato o composto da Fórmula (6) com , em que LG1 é um grupo lábil, para obter um composto da Fórmula (7): (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
    14. Processo para preparar um composto da Fórmula (7):
    (7),
    ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, CARACTERIZADO pelo fato de que com-
    preende:
    (f) colocar em contato um composto da Fórmula (6),
    (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com
    , em que LG1 é um grupo lábil, e em que é uma ligação simples ou uma ligação dupla;
    opcionalmente em que o composto da Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (5):
    (5),
    ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma,
    com um reagente de desproteção PNZ;
    opcionalmente em que o composto da Fórmula (5), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc.
    15. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 a 14, CARACTERIZADO pelo fato de que o composto da Fórmula (4), ou um sal da mes- ma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (3): (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com ; opcionalmente em que o composto da Fórmula (3), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por: (b1) colocar em contato um composto da Fórmula (2a): (2a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente do grupo protetor Boc, opcionalmente em que o reagente do grupo protetor Boc é Boc2O; ou (b2) remover C1-C3 alquila em um composto da Fórmula (2): (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; em que R1 é H ou C1-C3 alquila; R2 é H ou C1-C3 alquila; e R3 é H ou C1-C3 alquila, e em que um ou mais de R1, R2, ou R3 são independentemente uma C1-C3 alquila; e, em seguida, colocar em contato o composto da Fórmula (2) com um rea- gente do grupo protetor Boc, opcionalmente em que o reagente do grupo protetor Boc é Boc2O, opcionalmente em que o composto da Fórmula (2), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, é preparado por colocar em contato um composto da Fórmula (1): (1), ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; com 1-{[(p- nitrobenzil)oxi]carbonil}-1H-benzotriazol (PNZ-Bt).
    16. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 a 15, CARACTERIZADO pelo fato de que as etapas (a), (b1) ou (b2) são realizadas na presença de álcool,
    opcionalmente em que o álcool é metanol, e/ou em que as etapas (a), (b1) ou (b2) são realizadas a uma temperatura de até cerca de 60° C
    17. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 16, CARACTERIZADO pelo fato de que o grupo lábil é iodo; opcionalmente em que está presente em cerca de 1,0 a 1,5 equivalentes molares para o composto da Fórmula (6).
    18. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, CARACTERIZADO pelo fato de que: (i) a etapa (f) é realizada em condições substancialmente livres de água; e/ou (ii) a etapa (f) é realizada na presença de um solvente selecionado a partir do grupo que consiste em acetonitrila, acetona e combinação das mesmas; e/ou (iii) a etapa (f) é realizada na presença de NaHCO 3; e/ou (iv) a etapa (f) é realizada a uma temperatura de cerca de 30 °C a 40 °C.
    19. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 18, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda: (i) adicionar 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) a uma mistura de rea- ção; e/ou (ii) preparar uma forma cristalina do composto da Fórmula (7), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma; e/ou (iii) isolar o composto da Fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
    20. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 19, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda: (g) colocar em contato o composto da fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente de remoção Boc para obter um composto da Fórmula (8): (8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; e, opcionalmente, compreende ainda (h) realizar uma formação de sal com um ácido para obter um sal de um composto da Fórmula (8), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, opcionalmente em que o ácido na etapa (h) é ácido sulfúrico, assim, obtendo um sal de sulfato de um composto da Fórmula (9):  x H2SO4 (9), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, em que x é de 1 a 5.
    21. Processo, de acordo a reivindicação 20, CARACTERIZADO pelo fato de que o reagente de remoção Boc é TFA, assim, obtendo um sal de TFA do composto da Fórmula (8), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma; opcionalmente em que o processo compreende ainda remover o sal de TFA para proporcionar um composto da Fórmula (8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; e em que o processo opcionalmente compreende ainda:
    (h) realizar uma formação de sal com um ácido para obter um sal de um composto da Fórmula (8), ou um de solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
    opcionalmente em que o ácido na etapa (h) é ácido sulfúrico, assim, obtendo um sal de sulfato de um composto da Fórmula (9):  x H2SO4 (9), ou de um solvato da mesma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma, em que x é de 1 a 5.
    22. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, CARACTERIZADO pelo fato de que é uma ligação dupla.
    23. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, CARACTERIZADO pelo fato de que: (i) a estereoquímica nos átomos de carbono 1, 3, 4, 5, 6, 1’, 2’, 1”, 2”, 3”, e 4” nas Fórmulas (1) a (3) é indicada como na Fórmula (X), em que indica um ponto de ligação ao hidrogênio ou a uma fração: (X); e/ou (ii) a estereoquímica nos átomos de carbono 1, 3, 4, 5, 6, 1’, 2’, 1”, 2”, 3”, 4”, e 1-z nas Fórmulas (4) a (9) é indicada como na Fórmula (Y), em que indica um ponto de ligação ao hidrogênio ou a uma fração:
    (Y).
    24. Composto CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado a partir de: (i) um composto da Fórmula (4): (4), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; (ii) um composto da Fórmula (4a): (4a), ou um sal da mesma ou um solvato da mesma; (iii) terc-butil ((2S,3R)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6-((terc-butoxicarbonil)amino)-4- ((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di- hidróxi-5-metil-4-(metilamino)tetra-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6- (((((4-nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato crista- lino, da Fórmula (4a), ou um solvato da mesma.
    (iv) terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6- (aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2- hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a), ou um solvato da mesma; (v) um composto da Fórmula (7): , ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma; (vi) um composto da Fórmula (7a): (7a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma; e (vii) terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-(((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3- (((2S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro- 2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4- il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (7a), ou um solvato da mesma.
    25. Processo caracaterizado pelo fato de que é selecionado a partir de: (i) um processo para preparar terc-butil ((2S,3R)-2-(((1R,2S,3S,4R,6S)-6- ((terc-butoxicarbonil)amino)-4-((S)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxibutanamido)-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-di-hidróxi-5-metil-4-(metilamino)tetra- hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-6-(((((4- nitrobenzil)oxi)carbonil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-3-il)carbamato cristalino, da Fórmula (4a), ou um solvato da mesma, que compreende: (a) tratar a Fórmula (4a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
    (b) aquecer a solução da etapa (a);
    (c)adicionar água à solução aquecida da etapa (b);
    (d) resfriar a solução da etapa (c);
    (e) carregar a solução da etapa (d) com um cristal de semente; e
    (f) isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (4a) cristalina, ou um solvato da mesma;
    (ii) um processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-
    (((1S,2S,3R,4S,6R)-3-(((2S,3R)-6-(aminometil)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-3,4-di-
    hidro-2H-piran-2-il)oxi)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-
    butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-2-hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidróxi-5-
    metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (6a), ou um sol-
    vato da mesma, compreendendo:
    (a) tratar a Fórmula (6), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma,
    com acetato de isopropila (IPAc) para produzir uma solução;
    (b) adicionar água à solução da etapa (a) para produzir uma mistura;
    (c)adicionar diclorometano à mistura da etapa (b) para produzir uma mistura;
    (d) carregar a mistura da etapa (c) com um cristal de semente;
    (e) isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (6a) cristalina (6a), ou um solvato da mesma;
    opcionalmente em que a etapa (d) é realizada a uma temperatura baixa;
    e
    (iii) um processo para preparar terc-butil ((2R,3R,4R,5R)-2-
    (((1S,2S,3R,4S,6R)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-6-((S)-4-((terc-
    butoxicarbonil)amino)-2-hidroxibutanamido)-3-(((2S,3R)-3-((terc-
    butoxicarbonil)amino)-6-(((2-hidroxietil)amino)metil)-3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)oxi)-2-
    hidroxiciclo-hexil)oxi)-3,5-di-hidroxi-5-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)(metil)carbamato cristalino, da Fórmula (7a), ou um solvato da mesma, compreendendo:
    (a) tratar a Fórmula (7a), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma,
    com acetato de isopropila (IPAc) para produzir uma solução;
    (b) adicionar acetonitrila à solução da etapa (a) para produzir uma mistura;
    (c)carregar a mistura da etapa (b) com um cristal de semente;
    (d) isolar os sólidos resultantes para obter a Fórmula (7a) cristalina, ou um solvato da mesma.
    88. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 77 a 87, CARACTERIZADO pelo fato de que a etapa (f) é realizada a uma temperatura de cerca de 30° C a 40° C.
    89. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 77 a 88, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda adicionar 1,4- diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) a uma mistura de reação.
    90. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 77 a 89, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda preparar uma forma cristali- na do composto da Fórmula (7), ou de um sal da mesma, ou de um solvato da mes- ma, ou de um enantiômero da mesma, ou de um diastereômero da mesma.
    91. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 77 a 90, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda isolar o composto da Fórmu- la (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mes- ma, ou um diastereômero da mesma.
    92. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 77 a 91, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende ainda: (g) colocar em contato o composto da fórmula (7), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma, com um reagente de remoção Boc para obter um composto da Fórmula (8): (8), ou um sal da mesma, ou um solvato da mesma, ou um enantiômero da mesma, ou um diastereômero da mesma.
    93. Processo, de acordo com a reivindicação 92, CARACTERIZADO pelo fa- to de que o reagente de remoção Boc é TFA, assim, obtendo um sal de TFA do
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