BR112020000034B1 - Composto, combinação, composição farmacêutica, processo para a preparação de um composto, e, uso do composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou combinação - Google Patents

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Abstract

a presente invenção refere-se a compostos de fórmula (i) ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que r1 significa um átomo de flúor ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono; r2 significa um átomo de cloro, um radical alquila linear contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, e r significa um átomo de hidrogênio ou um radical de fórmula (ia). a presente invenção também se refere a processos para a preparação, bem como usos terapêuticos dos mesmos, em particular, tal como para uso no tratamento de malária.

Description

Campo da invenção
[001] A presente invenção refere-se a novos compostos e ao uso terapêutico dos mesmos, tal como para uso no tratamento de malária.
Fundamentos da invenção
[002] A malária ainda permanece como um desafio importante à saúde em países em desenvolvimento. De acordo com o Relatório Mundial sobre a malária de 2016 da OMS (Organização Mundial da Saúde), e apesar de progresso no campo, o número estimado foi 212 milhões de pessoas afetadas e 429.000 pacientes mortos pela malária em 2015. Aproximadamente, 70% dos óbitos ocorreram em crianças com menos de cinco anos de idade que viviam na África Subsaariana. A malária é causada por parasitas protozoários do gênero Plasmodium que são transmitidos para os humanos pela picada da fêmea infectada do mosquito Anopheles. O Plasmodium infecta e destrói eritrócitos, levando à febre, anemia grave, malária cerebral e, se não tratada, à morte. Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale e Plasmodium malariae são as quatro espécies principais de Plasmodium responsáveis pela transmissão de malária. Plasmodium falciparum é a espécie dominante na África Subsariana e a mais mortal.
[003] Desde meados do século XX, foi desenvolvida uma grande variedade de fármacos que revelaram eficácia clínica para o tratamento de malária não complicada causada pelo P. falciparum. Para retardar o desenvolvimento de resistência, a OMS recomenda, desde 2006, tratamentos à base de artemisinina ou derivados de meia-vida curta (dihidroartemisinina, arteméter, artesunato) com um fármaco parceiro de meia-vida longa, incluindo, entre outros, lumefantrina, mefloquina, amiodiaquina, sulfadoxina, pirimetamina ou piperaquina. Essas terapias combinadas aliam início de ação rápido com a capacidade para atingir o ciclo eritrocítico de vida do parasita, o qual é responsável pelos sintomas da malária. Infelizmente, apesar da efetividade dessas Terapias Combinadas à base de Artemisinina (ACTs), a emergência de resistência foi observada em cinco países da Sub-região do Grande Mekong, resultando em atraso na eliminação do parasita, vinculado ao polimorfismo no domínio hélice (propeller) do gene Kelch 13. No Camboja, foram detectadas taxas elevadas de falha após o tratamento para quatro ACTs diferentes.
[004] Assim, a verificação de agentes antimaláricos eficazes e acessíveis com novo mecanismo de ação é uma necessidade imperiosa para enfrentar a resistência da malária. Além disso, as ACTs atuais são administradas oralmente uma vezes ou duas vezes ao dia, mas devido a uma baixa adesão dos pacientes, uma eficácia menor das ACTs é observada e acredita-se que seja um fator de risco importante para o desenvolvimento de resistência aos fármacos. O tratamento com uma dose única para malária não complicada teria o potencial para abordar múltiplos desafios operacionais das atuais terapias de tratamento. Compostos com propriedades farmacocinéticas que apoiam o uso em uma combinação de dose única seriam valiosos na luta contra a malária.
[005] Deste modo, esta invenção provê novos agentes antimaláricos potentes que podem comprovar ser antimaláricos eficazes para cura em dose única a dose múltipla.
Sumário da invenção
[006] A presente invenção refere-se a novos compostos que são úteis no tratamento e/ou na profilaxia da malária não complicada causada por Plasmodium falciparum e/ou Plasmodium vivax.
[007] Assim, a invenção é direcionada a um composto de Fórmula (I) como tal ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido abaixo na descrição detalhada:
[008] A invenção refere-se ainda a uma composição farmacêutica que compreende ao menos um composto de Fórmula (I) de acordo com a invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[009] As composições farmacêuticas da invenção podem conter um ou mais compostos da invenção em qualquer forma aqui descrita.
[0010] As composições farmacêuticas desta invenção podem compreender ainda uma ou mais ingredientes adicionais farmaceuticamente aceitáveis, tais como alúmen, estabilizantes agentes antimicrobianos, tampões, agentes corantes, agentes aromatizantes, adjuvantes e ingredientes semelhantes.
[0011] A invenção refere-se ainda a processos para a preparação de um composto de Fórmula (I) de acordo com a invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, sendo os ditos processos explicados detalhadamente abaixo.
[0012] A invenção refere-se ainda a um composto de Fórmula (I) de acordo com a invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso como medicamento, tal como para uso na prevenção e/ou no tratamento de malária.
[0013] A invenção refere-se ainda a um composto de Fórmula (I) de acordo com a invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento e/ou na prevenção de infecções de células sanguíneas infectadas pelo Plasmodium falciparum e/ou Plasmodium vivax.
[0014] De acordo com uma modalidade em particular, a infecção é malária.
[0015] Assim, a invenção refere-se ainda a um método para prevenir e/ou tratar malária em um paciente com necessidade do mesmo que compreende pelo menos a administração de um composto de Fórmula (I) de acordo com a invenção ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um paciente que o necessita.
[0016] Outras características e vantagens da invenção ficarão evidentes a partir da descrição detalhada a seguir.
[0017] No contexto da invenção, as definições seguintes aplicam-se: O termo “malária” inclui a doença e condições relacionadas a uma infecção por Plasmodium. Neste relatório descritivo, os termos “tratamento” e “tratar”, e termos semelhantes significam em geral significam obter um efeito farmacológico e fisiológico desejado. O efeito pode ser profilático, em termos de prevenir total ou parcialmente a malária ou uma condição da mesma, e/ou pode ser terapêutico em termos de uma cura parcial ou completa de uma doença, condição, sintoma ou efeito adverso atribuído à doença. O termo “tratamento”, neste relatório descritivo, abrange qualquer tratamento da malária em um mamífero, especialmente um humano, e inclui: (a) prevenir a ocorrência de malária em um indivíduo que pode ser predisposto à malária, mas que não foi ainda diagnosticado como seu portador; (b) inibir a doença, ou seja, interromper seu desenvolvimento; ou aliviar a doença, ou seja, fazer com que regridam a doença e/ou seus sintomas ou condições. O termo “quantidade eficaz” inclui “quantidade profilaticamente eficaz” bem como “quantidade terapeuticamente eficaz”. O termo “quantidade profilaticamente eficaz” refere-se a uma concentração do composto desta invenção é eficaz em inibir, diminuir a probabilidade da doença por parasitas da malária, ou prevenir a infecção de malária ou impedir o início tardio da doença por parasitas da malária, quando administrada antes da infecção, ou seja, antes, durante e/ou ligeiramente depois do período de exposição a parasitas da malária. O termo “profilaxia” inclui profilaxia causal, ou seja, atividade antimalárica compreendendo prevenir o desenvolvimento pré-eritrocítico do parasita, profilaxia supressiva, ou seja, atividade antimalárica compreendendo suprimir o desenvolvimento de infecção no estágio sanguíneo e profilaxia terminal, ou seja, atividade antimalárica compreendendo suprimir o desenvolvimento de infecção no estágio intra-hepático. Esse termo inclui profilaxia primária (ou seja, prevenir infecção inicial), em que o composto antimalárico é administrado antes, durante e/ou depois do período de exposição a parasitas da malária, e profilaxia terminal (ou seja, para prevenir recidivas ou o início tardio de sintomas clínicos da malária) quando o composto antimalárico é administrado no final e/ou ligeiramente depois do período de exposição a parasitas da malária, mas antes dos sintomas clínicos. Tipicamente, contra infecções por P. falciparum, é utilizada profilaxia supressiva enquanto que, contra P. vivax, é utilizada profilaxia terminal. Do mesmo modo, o termo “quantidade terapeuticamente eficaz” refere-se a uma concentração do composto que é eficaz em tratar infecção de malária, p. ex., leva a uma redução no número de parasitas no sangue após exame microscópio, quando administrada após ter ocorrido a infecção. O termo “indivíduo”, neste relatório descritivo, refere-se a mamíferos. Para exemplos, os mamíferos contemplados pela presente invenção incluem humanos e semelhantes.
Descrição detalhada da presente invenção Compostos da invenção
[0018] A presente invenção refere-se a novos compostos de Fórmula (I) como tal: em que: - R1 significa um átomo de flúor ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, como um radical trifluorometila, - R2 significa um átomo de cloro; um radical alquila linear contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono opcionalmente substituído com pelo menos um átomo de flúor, como um radical metila; ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono como um radical trifluorometila, e - R significa um átomo de hidrogênio ou um radical de Fórmula (Ia): em que R3 significa um átomo de hidrogênio; um radical hidroxila; ou um radical alquila linear ou ramificado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, como um radical metila, e R3 está na posição 5 ou na posição 6 do dito radical de Fórmula (Ia), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
[0019] No contexto da invenção, as definições seguintes aplicam-se: “sal farmaceuticamente aceitável do mesmo” refere-se a sais que são formados a partir de sais de adição de ácido com um sal (também mencionado como AH na presente invenção), em que o dito ácido pode ser um ácido inorgânico (p. ex., ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico e os semelhantes) ou um ácido orgânico, como ácido acético, ácido fumárico, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido málico, ácido malônico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido ascórbico, ácido láctico, ácido mandélico, ácido benzoico, ácido tânico, ácido pamoico, ácido algínico, ácido poliglutâmico, ácido para- toluenossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido metanossulfônico, ácido naftalenossulfônico, ácido naftalenodissulfônico e ácido poli-galacturônico. Os sais farmaceuticamente aceitáveis para a presente invenção podem ser selecionados dentre os sais formados com ácidos como ácido clorídrico, ácido fumárico, ácido succínico e ácido malônico. “um átomo de halogênio” refere-se a um átomo de flúor, cloro, bromo ou iodo. O átomo de flúor ou cloro pode ser selecionado como um átomo de halogênio. - “um radical alquila” refere-se a uma cadeia à base de carbono de 1 a 3 átomos de carbono, tais como os radicais metila, etila, propila, isopropila. - a expressão “R3 está na posição 5 ou na posição 6 do dito radical de Fórmula (Ia)” (ou seja, na posição 5 ou na posição 6 do anel piridina-2-ila) significa que R3 é ligado ao anel piridina-2-ila de acordo com as duas alternativas mostradas abaixo:
[0020] De acordo com uma modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R1 significa um átomo de flúor ou um radical trifluorometila.
[0021] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles são aqueles de Fórmula (I) em que R2 significa um átomo de cloro, um radical metila ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, tal como um radical trifluorometila.
[0022] De acordo com uma modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima.
[0023] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R significa um átomo de hidrogênio.
[0024] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima e R3 está na posição 5 ou 6 do dito radical de Fórmula (Ia).
[0025] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima e R3 significa um átomo de hidrogênio, um radical hidroxila ou um radical alquila linear ou ramificado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono.
[0026] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima e R3 significa um átomo de hidrogênio, um radical hidroxila ou um radical metila.
[0027] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima e R3 significa um radical hidroxila na posição 5 do dito radical de Fórmula (Ia).
[0028] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima e R3 significa um radical alquila linear ou ramificado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono na posição 6 do dito radical de Fórmula (Ia).
[0029] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima e R3 significa um radical metila na posição 6 do dito radical de Fórmula (Ia).
[0030] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que pelo menos um dentre R1 e R2 significa um radical perfluorometila.
[0031] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) nos quais pelo menos um dentre R1 e R2 significa um radical perfluorometila e R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima.
[0032] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que pelo menos um dentre R1 e R2 significa um radical perfluorometila, R significa um radical de Fórmula (Ia) e R3 está na posição 5 ou 6 do dito radical de Fórmula (Ia).
[0033] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R1 e R2 significam ambos um radical perfluorometila.
[0034] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R1 e R2 significam ambos um radical perfluorometila e R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima.
[0035] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R1 e R2 significam ambos um radical perfluorometila, R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido acima e R3 está na posição 5 ou 6 do dito radical de Fórmula (Ia).
[0036] De acordo com outra modalidade, os compostos destacados são aqueles de Fórmula (I) em que R1 significa um átomo de flúor ou um radical trifluorometila, R2 significa um radical trifluorometila, um radical metila ou um átomo de cloro, R significa um átomo de hidrogênio ou um radical de Fórmula (Ia) como definido acima e R3 está na posição 5 ou 6 do dito radical de Fórmula (Ia) e é um átomo de hidrogênio, um radical metila ou um radical hidroxila.
[0037] As modalidades e as várias combinações emergentes das mesmas são ilustradas claramente pelos compostos e exemplos abaixo.
[0038] Entre os compostos de Fórmula (I) e a forma salificada (II) que são matérias da presente invenção, pode ser feita menção aos compostos selecionados a partir da lista seguinte: • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • 5-((3-((diaminometileno)carbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-2-metil-N-(6-metilpiridin-2-il)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-fluorofenil)etinil)-N-(6- metilpiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-trifluorometil)fenil)etinil)- 2-metil-N-(piridin-2-il)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(5-hidroxipiridin-2-il)-2- (trifluorometil)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-2-cloro-N-(piridin-2-il)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-fluorofenil)etinil)-N- (piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • N-carbamimidoil-3-((3-carbamoil-4- (trifluorometil)fenil)etinil)-5-trifluorometil)benzamida e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
[0039] Na presente invenção, o sal farmaceuticamente aceitável pode ser formado a partir de um sal de adição de sal que é formado com um ácido, o dito ácido sendo um ácido inorgânico, preferivelmente escolhido entre ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico e ácido nítrico, mais preferivelmente ácido clorídrico, ou ácido orgânico, preferivelmente escolhido entre ácido acético, ácido fumárico, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido málico, ácido malônico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido ascórbico, ácido láctico, ácido mandélico, ácido benzoico, ácido tânico, ácido pamoico, ácido algínico, ácido poliglutâmico, ácido para- toluenossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido metanossulfônico, ácido naftalenossulfônico, ácido naftalenodissulfônico e ácido poli-galacturônico, mais preferivelmente escolhido entre ácido fumárico, ácido succínico e ácido malônico.
[0040] Entre os seus sais, pode ser feita menção especialmente aos sais selecionados a partir da lista seguinte: • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • ácido malônico de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • cloridrato de 5-((3-((diaminometileno)carbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-2-metil-N-(6-metilpiridin-2-il)benzamida, • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- fluorofenil)etinil)-N-(6-metilpiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- trifluorometil)fenil)etinil)-2-metil-N-(piridin-2-il)benzamida, • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(5-hidroxipiridin-2-il)-2- (trifluorometil)benzamida, • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-2-cloro-N-(piridin-2-il)benzamida e • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- fluorofenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida.
[0041] Os compostos detalhados anteriormente estão listados na Tabela 1 abaixo. Cabe ressaltar que os compostos acima foram nomeados de acordo com a nomenclatura IUPAC utilizando o software ChemLabNoteBook da Perkin Elmer.Tabela 1
[0042] Entre os compostos anteriores da Tabela 1, pode ser feita menção aos compostos no 1a, 1b, 1c, 2, 3, 4, 5, 6, 7 e 8.
[0043] Entre os compostos anteriores da Tabela 1, pode ser feita menção aos compostos no 1a, 1b, 1c e 4. Método de preparação
[0044] Os compostos de Fórmula (I) podem ser preparados com materiais de partida facilmente disponíveis, utilizando métodos e procedimentos conhecidos pelo técnico no assunto. Será reconhecido que, quando condições experimentais típicas ou preferidas (ou seja, temperaturas de reação, tempo, moles de reagentes, solventes etc.) são fornecidas, outras condições experimentais podem também ser utilizadas a menos que mencionado de outra forma.
[0045] As condições ótimas de reação podem variar com os reagentes em particular ou solventes utilizados, mas tais condições podem ser determinadas pelo técnico no assunto, utilizando procedimentos rotineiros para otimização.
[0046] Conforme detalhado abaixo, os compostos de Fórmula (I) podem ser obtidos a partir de um composto de Fórmula (V), como definido abaixo, que pode ser preparado de acordo com duas vias diferentes.
[0047] As duas abordagens sintéticas gerais para obter compostos de Fórmula (I) e forma salificada (II) são apresentadas no Esquema 1 e Esquema 4 abaixo.
[0048] Em relação ao anterior, os compostos iniciais e os reagentes, quando o método para os preparar não for descrito, estão disponíveis comercialmente ou descritos na literatura, ou então podem ser preparados de acordo com métodos que são ali descritos ou que são conhecidos pelos técnicos no assunto.
[0049] Esquema 1.
[0050] Assim, a presente invenção é também dirigida a um processo para a preparação de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, compreendendo pelo menos a etapa seguinte que consiste em: um acoplamento catalítico, em particular com um catalisador de paládio, entre um composto intermediário de Fórmula (III): em que: - PG1 é um grupo protetor de amina convencional, em particular como definido a seguir, e R1 significa um átomo de flúor ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, tal como um radical trifluorometila; e um composto intermediário de Fórmula (IV) em que: - R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I) e X é um átomo de bromo ou um átomo de iodo; de modo a obter um composto de Fórmula (V) em que R1, R2, R3 e PG1 são como definidos acima, o dito composto de Fórmula (V) sendo ainda desprotegido e opcionalmente salificado para formar o composto previsto de Fórmula (I) de acordo com a invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0051] Em relação à etapa de acoplamento entre compostos de Fórmulas (III) e (IV), este é também conhecida como acoplamento de Sonogashira. Ele geralmente envolve como catalisador, um catalisador de paládio tal como dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II), [1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloro-paládio (II), bis(dibenzilidenoacetona)paládio, diacetato de paládio(II) ou tetraquis- trifenilfosfina paládio, opcionalmente na presença de um cocatalisador de cobre (I), tal como iodeto ou brometo cuproso, na presença de um catalisador de paládio tal como dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) ou tetraquis- trifenilfosfina paládio, um cocatalisador de cobre (I) tal como iodeto ou brometo cuproso. Especificamente, tal acoplamento catalítico pode ser realizado em um solvente orgânico anidro, tal como dimetilformamida, acetato de etila, dimetilacetamida, tolueno, tetrahidrofurano ou acetonitrila, e na presença de uma base amina, tal como trietilamina, diisopropilamina, morfolina ou piperidina, e um ligante adicional como trifenilfosfina ou tri- terc-butilfosfina. A reação pode ser realizada, por exemplo, em um tubo fechado. A assim formada mistura de reação pode ser desgaseificada e aquecida de 40 °C a 70 °C até a realização da reação. A finalização da reação pode ser controlada por TLC (cromatografia em camada fina). Para a recuperação do composto (V), a mistura de reação pode ser vantajosamente deixada resfriar até a temperatura ambiente, diluída e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado assim obtido pode então ser concentrado em vácuo e, se necessário, purificado antes de realizar as etapas seguintes. O composto (V) pôde também ser cristalizado diretamente da mistura de reação e recuperado por filtração.
[0052] O grupo PG1 do composto de Fórmula (III) e do composto de Fórmula (V) assim obtido é um grupo protetor de amina convencional que, em primeiro lugar, protege a função de amina reativa, a qual é então, em segundo lugar, regenerada na função de amina reativa em outra etapa da síntese química dos compostos (I).
[0053] Exemplos de grupos protetores e também de métodos de proteção e desproteção são fornecidos em Protective Groups in Organic Synthesis, Greene et al., 4a edição (John Wiley & Sons, Inc., New York), 2007. Por exemplo, PG1 corresponde a um radical terc-butoxi carbonila (Boc) ou um radical benzil carbonila (Cbz).
[0054] A etapa de desproteção do composto de Fórmula (V) assim obtido pode ser realizada por uma via conveniente conhecida pelo técnico no assunto. Por exemplo, pode ser realizada na presença de um ácido como cloridrato concentrado ou cloridrato em éter dietílico e resfriamento com gelo, ou na presença de um ácido como ácido trifluoroacético ou ácido para- toluenossulfônico em um solvente como acetato de etila (AcOet) ou diclorometano a fim de obter um composto de Fórmula (I), como definido anteriormente, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo que é um composto de Fórmula (II): em que: - R1 e R2 são como definidos acima; - R significa um átomo de hidrogênio ou um radical de Fórmula (Ia): R3 sendo como definido acima; e - AH é um ácido.
[0055] Quando PG1 é um grupo protetor convencional como definido acima, tal como um radical terc-butoxi carbonila (Boc), a etapa de desproteção da acil-guanidina do derivado de Fórmula (V) pode ser realizada na presença de um ácido como cloridrato concentrado ou cloridrato em éter dietílico e resfriamento com gelo. O sólido precipitado pode ser então isolado, lavado com água e seco para obter o composto (II) como um sal cloridrato do composto (I).
[0056] A etapa de desproteção da acil-guanidina do derivado de Fórmula (V) pode ser realizada com ácido trifluoroacético ou ácido para- toluenossulfônico em um solvente como acetato de etila (AcOEt) ou diclorometano com aquecimento até 70 °C. Uma vez realizada a etapa de desproteção, o meio pode então ser basificado com uma base, tal como hidróxido de amônio ou hidróxido de sódio, sob resfriamento e até pH=9-10. Após lavagem da fase orgânica com, por exemplo, água, depois com, por exemplo, solução aquosa de metabissulfito de sódio e tratamento com carvão ativado, a solução orgânica do composto é parcialmente concentrada.
[0057] Quando o composto obtido no final da etapa de desproteção é um composto de Fórmula (I), se necessário, pode-se realizar uma salificação adicionando uma solução de um ácido, tal como ácido malônico, ácido fumárico ou ácido succínico em um solvente orgânico, tal como acetato de etila ou tetrahidrofurano, do assim obtido composto (I) na etapa (2) para obter o sal farmaceuticamente aceitável de Fórmula (II) em que R1, R2, R3, R e AH são como definidos acima.
[0058] A salificação pode ser realizada adicionando uma solução de um ácido em um solvente orgânico, tal como acetato de etila ou tetrahidrofurano, tal como ácido malônico ou ácido succínico, para formar um composto (II) como um sal malonato do composto (I).
[0059] Em relação aos materiais de partida (III) e (IV), eles podem ser facilmente produzidos pelo técnico no assunto, em particular de acordo com os métodos de preparação apresentados nos exemplos seguintes.
[0060] Especificamente, o material de partida (III), com R1 como definido anteriormente, pode ser preparado de acordo com o Esquema 2 seguinte.Esquema 2.
[0061] Em uma primeira etapa, é realizado um acoplamento de Sonogashira entre os compostos (IX) e um acetileno protegido (PG2- acetileno), em que R1 é como definido anteriormente e PG2 é um grupo protetor convencional diferente do grupo protetor PG1. Por exemplo, PG2 corresponde a um radical trimetilsilila (TMS) ou um radical trietilsilila (TES). Essa reação de acoplamento pode ser realizada como detalhada para o acoplamento anterior entre os compostos (III) e (IV).
[0062] Quando PG2 é TMS, a etapa de desproteção do acetileno do derivado de Fórmula (X) é realizada na presença de uma base, tal como carbonato de potássio, hidróxido de lítio ou hidróxido de potássio, em um solvente, tal como metanol ou fluoreto de tetra-n-butilamônio em diclorometano, de 0 °C à temperatura ambiente. Se um PG2 diferente de TMS for utilizado, a etapa de desproteção é adaptada de acordo (ver: Protective Groups in Organic Synthesis, Greene et al., 4a edição (John Wiley & Sons, Inc., New York), 2007. Após concentração e work-up (rotina de trabalho em laboratório de química visando isolar e purificar), o composto (VI) bruto pode ser utilizado diretamente para obter o composto (XI).
[0063] A formação do composto (VI) é conseguida com uma base, tal como hidróxido de lítio ou hidróxido de sódio, em um solvente como metanol ou tetrahidrofurano em água. Após concentração e acidificação com um ácido tal como cloridrato 1N em água ou solução de ácido cítrico em água, o precipitado obtido é coletado, lavado com água e seco para fornecer o composto (XI).
[0064] A ativação do grupo ácido do composto (XI) pode ser conseguida utilizando um reagente de acoplamento, tal como diciclo- hexilcarbodi-imida ou hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il- oxitripirrolidinofosfônio, na presença de pentafluorofenol em um solvente como tetrahidrofurano ou dimetilformamida de 0 °C a 50 °C. Após resfriamento e remoção da ureia precipitada, o filtrado é concentrado e purificado para fornecer o composto (XII).
[0065] A etapa final para obter o composto (III) pode ser realizada adicionando guanidina protegida com, por exemplo, o grupo terc- butoxicarbonila, ao composto (XII) em um solvente, como tetrahidrofurano ou dimetilformamida de 0 °C a 50 °C. Após finalização da reação e work-up, o resíduo bruto é purificado para fornecer o composto (III).
[0066] A invenção descreve ainda um composto intermediário de Fórmula (III), como tal em que: - PG1 é um grupo protetor de amina convencional que primeiramente protege a função de amina reativa, a qual é então, em segundo lugar, regenerada na função de amina reativa em outra etapa da síntese química dos compostos (I). Tal como mencionado acima, exemplos de grupos protetores e também de métodos de proteção e desproteção são fornecidos em Protective Groups in Organic Synthesis, Greene et al., 4a edição (John Wiley & Sons, Inc., New York), 2007. PG1 corresponde a um radical terc-butoxi carbonila (Boc) ou um radical benzil carbonila (Cbz); e - R1 significa um átomo de flúor ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono tal como um radical trifluorometila.
[0067] Entre os compostos de Fórmula (III), podem ser citados os compostos específicos seguintes: - N-[N-[3-etinil-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato e - N-[N-(3-etinil-5-fluoro-benzoil)carbamimidoil]carbamato de terc-butila.
[0068] Em relação ao material de partida (IV), diferentes maneiras de preparação podem ser consideradas de acordo com as possíveis definições para R2, R3 e X.
[0069] Assim, quando R2 = CF3 ou Cl e X=Br, este material de partida (IV) pôde ser sintetizado com o esquema 3 a seguir.Esquema 3
[0070] A formação do composto (XIII) é conseguida como descrito anteriormente para o composto (XI), fornecendo o composto (XIV).
[0071] O grupo ácido do composto (XIV) é convertido em cloreto de acila com cloreto de tionila, oxicloreto de fósforo ou cloreto de oxalila em um solvente inerte, tal como tolueno ou diclorometano de 0 °C a 50 °C. Após finalização da reação e concentração, o composto bruto (XIV) é diluído com um solvente, tal como acetato de etila ou diclorometano, e 2-aminopiridina (XV) é adicionada na presença de uma base como trimetilamina, piridina ou diisopropiletilamina de 0 °C à temperatura ambiente. A mistura de reação pode ser mantida sob agitação até que conseguida a reação. Depois do work-up, o resíduo bruto é purificado para fornecer o composto (IV).
[0072] A invenção descreve ainda um composto intermediário de Fórmula (IV), como tal em que: - R2 significa um átomo de cloro; um radical alquila linear contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono opcionalmente substituído com pelo menos um átomo de flúor, tal como um radical metila; ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono como um radical trifluorometila, - R3 significa um átomo de hidrogênio; um radical hidroxila; ou um radical alquila linear ou ramificado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, tal como um radical metila, R3 estando na posição 5 ou na posição 6 do anel piridina-2-ila, e - X é um átomo de bromo ou um átomo de iodo.
[0073] Entre os compostos de Fórmula (IV), podem ser citados os compostos específicos seguintes: - 5-bromo-N-piridin-2-il-2-trifluorometil-benzamida, - 5-bromo-2-metil-N-(6-metilpiridin-2-il)benzamida, - 5-bromo-N-(6-metilpiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, - 5-iodo-2-metil-N-(piridin-2-il)benzamida, - 5-bromo-N-(5-hidroxi-piridin-2-il)-2-trifluorometil- benzamida e - 5-bromo-2-cloro-N-(piridin-2-il)benzamida.
[0074] Especificamente, o material de partida (XIII), em que R2 significa um radical CF3, é sintetizado de acordo com o esquema a seguinte.Esquema a
[0075] A esterificação do ácido 5-bromo-2-iodobenzoico pode ser realizada utilizando um ácido, como ácido sulfúrico, na presença de metanol.
[0076] Depois, a etapa seguinte pode consistir na introdução de um grupo trifluorometila, utilizando 2,2-difluoro-2-(fluorossulfonil)acetato de metila, na presença de iodeto de cobre ou brometo de cobre em N- metilpirrolidinona ou dimetilformamida. A mistura de reação pode ser aquecida de 80 °C até 120 °C. Uma vez conseguida a finalização e depois do work-up, o resíduo bruto é purificado para fornecer o composto (XIIIa).
[0077] Em relação ao material de partida (IV) com R3 = OH na posição 5 do grupo piridina-2-ila e X=Br, ele pôde ser sintetizar de acordo com o esquema b seguinte. Esquema b
[0078] O composto (XVb), em que R2 é como definido anteriormente, é formado utilizando o mesmo procedimento que para o composto (IV).
[0079] O composto (IVb), em que R2 é como definido anteriormente, é formado utilizando o mesmo procedimento que para o composto (XI).
[0080] Quando R2 = Me e X= I, esse material de partida (IV) pôde ser sintetizado com o esquema c seguinte.Esquema c
[0081] A iodação do ácido 2-metilbenzoico é conseguida utilizando, por exemplo, N-iodossuccinimida ou iodo em ácido sulfúrico concentrado à temperatura de 0 °C à temperatura ambiente para fornecer ácido 5-iodo-2- metilbenzoico.
[0082] A etapa seguinte é realizada utilizando o mesmo procedimento que para o composto (IV).
[0083] A segunda abordagem sintética para obter compostos de Fórmula (I) e/ou em forma salificada (II) dos mesmos é representada no Esquema 4 seguinte. Esquema 4
[0084] Assim, a presente invenção é também dirigida a outro processo para a preparação de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo pelo menos as etapas seguintes que consistem em: (1) realizar um acoplamento catalítico, em particular com um catalisador de paládio, entre um composto intermediário de Fórmula (IV): em que: - R2 e R3 são como definidos na formula(I) e - X é um átomo de bromo ou um átomo de iodo, e um composto intermediário de Fórmula (VI) em que: - R1 significa um átomo de flúor ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono tal como um radical trifluorometila; de modo a obter um composto de Fórmula (VII) em que R1, R2 e R3 são como definidos acima; (2) colocar o dito composto de Fórmula (VII) em contato com uma base, como hidróxido de lítio ou hidróxido de sódio. para obter a composto de Fórmula (VIII) em que R1, R2 e R3 são como definidos acima; (3) colocar o assim obtido composto de Fórmula (VIII) da etapa (2) com pelo menos um reagente para formação de amida, tal como diciclo-hexilcarbodi-imida ou hexafluorofosfato de benzotriazol-1- iloxitripirrolidinofosfônio e pentafluorofenol, na presença de PG1-guanidina, como N-Boc-guanidina ou N-Cbz-guanidina, para obter um composto de Fórmula (V) em que R1, R2, R3 e PG1 são como definidos acima; o dito composto de Fórmula (V) sendo ainda desprotegido e opcionalmente salificado para obter o composto previsto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0085] De acordo com essa segunda via, materiais de partida diferentes são considerados para servir como o produto intermediário (V), em que R2 e R3 são como definidos anteriormente e X significa um átomo de iodo ou um átomo de bromo. Mais especificamente, o composto (IV) em que R1 é como definido anteriormente é, neste caso, acoplado com o composto (VI) em condições semelhantes àquelas detalhadas com respeito ao esquema 1.
[0086] Depois, uma base, como hidróxido de lítio ou hidróxido de sódio, pode ser adicionada a uma solução resfriada com gelo do composto intermediário (VII) em um solvente orgânico aquoso, e a mistura pode ser mantida sob agitação à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação pode ser, a seguir, concentrada e acidificada para precipitar o composto (VIII). O composto (III) pode ser recuperado e purificado antes da etapa seguinte.
[0087] Além disso, uma solução do dito composto (III) com reagentes para formação de amida, tais como diciclo-hexilcarbodi-imida ou hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfônio e pentafluorofenol, pode ser agitada à temperatura ambiente por 3 horas em um solvente como tetrahidrofurano ou dimetilformamida. Depois de finalizada a reação e de removidos os precipitados, por exemplo, por filtração, o filtrado pode ser recuperado e purificado para recuperar o composto (V) sob um material sólido.
[0088] O composto (V) pode ser solubilizado, a seguir, em um solvente como tetrahidrofurano ou diclorometano na presença de PG1- guanidina, tal como N-Boc-guanidina ou N-Cbz-guanidina, e agitado à temperatura ambiente. Após finalizada a reação, o composto (I) previsto é recuperado. Como revelado no esquema 1 anterior, outros compostos de Fórmula (I), como compostos de Fórmula (II), que correspondem a formas salificadas dos compostos (I) podem ser sintetizados a partir dos mesmos.
[0089] Os dois métodos detalhados, respectivamente, nos esquemas 1 e 4 podem vantajosamente compreender etapas subsequentes de purificação e/ou isolamento dos produtos intermediários ou finais obtidos. Métodos convenientes de purificação são detalhados nos exemplos a seguir. Especificamente, a purificação dos compostos pode ser realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) preparativa.
[0090] A presente invenção será entendida melhor a partir dos exemplos que se seguem, todos os quais apresentados para fins ilustrativos somente e sem a intenção de limitar o âmbito da presente invenção de maneira alguma.
[0091] Os exemplos que se seguem ilustram a preparação de certos compostos em conformidade com a invenção, sem que, contudo, a limitem. Os números dos compostos ilustrados referem-se àqueles fornecidos na Tabela 1 acima, que ilustra as estruturas químicas e propriedades físicas de vários compostos de acordo com a invenção. Exemplos - compostos Materiais e métodos
[0092] Os dados de RMN 1H e RMN 13C foram registrados em um espectrômetro Bruker 400 MHz série AVANCE ou Bruker 300 MHz DPX com CDCl3 ou DMSO-d6 ou CD3OD como solvente. Os deslocamentos químicos de 1H tiveram como referência CDCl3 a 7,26 ppm, DMSO-d6 a 2,5 e CD3OD a 3,3 ppm. Os deslocamentos químicos de 13C tiveram como referência CDCl3 a 77 ppm, DMSO-d6 a 39 ppm for DMSO-d6 e CD3OD a 44 ppm, e foram obtidos com desacoplamento de 1H. As multiplicidades são abreviadas como segue: singleto (s), dupleto (d), tripleto (t), quarteto (q), duplo dupleto (dd), quinteto (quint), sexteto (sextet), septeto (septet), multipleto (m), e largo (br).
[0093] MS foi medida em um espectrômetro de massa LC/MSD Agilent Série 1200/1260. Coluna: Zorbax XDB C18 (50 X 4,6) mm, 5 μm ou Acquity BEH C18 (50 x 2,1 mm; 1,7 μm). Fase móvel: Solvente A: Ácido fórmico 0,1% em água Milli-Q (ou) Ácido trifluoroacético 0,1% em água Milli-Q. Solvente B: Acetonitrila. Vazão: 1,5 mL/min. Volume de injeção: 2 μL. Comprimento de onda: Cromatograma máximo (210-400nm). Tempo de corrida: 6,0 min. Fonte de ionização: Multi-modo (ESI e APCI).
[0094] A pureza foi medida em um espectrômetro HPLC Agilent Série 1200/1260. Coluna: C18 (250 X 4,6) mm, 5 μm (ou) C18 (150 X 4,6) mm, 5 μm. Fase móvel: Solvente A: Acetato de amônio 10 mM em água Milli-Q (ou) Ácido trifluoroacético 0,1% em água Milli-Q. Solvente B: Acetonitrila. Vazão: 1,0 mL/min. Volume de injeção: 2 μL. Comprimento de onda: Cromatograma máximo (210-400 nm). Tempo de corrida: 30 min.
[0095] Para o composto 1c, a MS foi medida com UPLC-SQD (Simple Quad, da Waters). Coluna: Acquity BEH C18 (50 x 2,1 mm; 1,7 μm). Fase móvel: Solvente A: H2O + TFA 0,05%. Solvente B: CH3CN+TFA 0,035%. Vazão; 1 mL/min. Detecção UV: l = 220 nm. Detecção MS (Quadrupolo simples); Ionização: em primeiro lugar, ESI + Electrospray / em último lugar, Massa (uma); FS: 160 / 1200 uma; Voltagem do capilar (KV): 3,5. Cone (V): 20. Temperatura da fonte (°C): 150. Temperatura de dessolvatação (°C): 500. Vazão do gás de dessolvatação (L/h): 1200. Vazão do gás no cone (L/h): 100. Resolução LM 1: 13,00. Resolução HM1: 13,00. Energia iônica 1: 0,20.
[0096] Para o composto obtido no final da etapa 1 na preparação do Intermediário 2, a LC-MS foi medida pelo Método seguinte: Coluna: XBridge C18, 4,6*50 mm, 3,5 μm; Fase móvel: H2O (NH4HCO3 10 mmol) (A)/CAN (B); Programa de eluição: Gradiente de 5 para 95% de B em 1,6 min. A 1,8 mL/min.; Temperatura: 50 °C; Detecção: UV (214,4 nm) e MS (ESI, modo Pos., 110 a 1000 amu).
[0097] As reações que requeriam condições anidras foram realizadas sob atmosfera inerte (nitrogênio ou argônio) com solventes anidros (com ou sem peneiras moleculares).
[0098] Todos R1, R2, R3 nos esquemas a seguir são como definidos acima quando não especificados. EXEMPLO 1
[0099] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de 5-bromo-N-piridin- 2-il-2-trifluorometil-benzamida, intermediário 2 (25,0 g, 72,46 mmol) e N- [N-[3-etinil-5-(trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila, intermediário 1 (28,29 g, 79,71 mmol) em acetato de etila seco (250 mL) em um tubo fechado, foram adicionados iodeto cuproso (0,68 g, 3,62 mmol), trietilamina (31,41 mL, 217,35 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (5,08 g, 7,24 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente por 10 minutos e aquecida a 65 °C por 4 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado em vácuo e purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer N-[N-[3-[2-[3-(2- piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (18,0 g, 40%) como sólido esbranquiçado.
[00100] Etapa 2: A uma solução gelada de N-[N-[3-[2-[3-(2- piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (18,0 g, 29,07 mmol) em diclorometano seco (150 mL), ácido trifluoroacético (66,3 g, 581,58 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 12 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi evaporada sob pressão reduzida. O material bruto foi triturado com éter dietílico e o sólido formado foi filtrado para fornecer o sal como sólido esbranquiçado. Este foi misturado com gelo e basificado com solução de NaHCO3 10%. O sólido formado foi filtrado, lavado com água, hexano e seco sob vácuo para fornecer 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, composto 1a (14,6 g, 96%) como sólido branco. LC-MS APCI: Calculado para C24H15F6N5O2: 519,41; Observado m/z [M+H] +: 520,41. Pureza por LC-MS: 98,04%. RT: 3,09. Pureza por HPLC: 99,38%. RT: 12,79. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,21 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,38-8,40 (m, 2H), 8,17 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 8,11 (s, 2H), 7,99 (s, 1H), 7,867,92 (m, 3H), 7,20 (t, J = 6,40 Hz, 1H), 6,88 (bs, 2H). Composto 1b (em sal cloridrato)
[00101] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de 5-bromo-N-piridin- 2-il-2-trifluorometil-benzamida, intermediário 2 (9,0 g, 26,09 mmol) e N-[N- [3-etinil-5-(trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de ter-butila, intermediário 1 (11,11 g, 31,30 mmol) em acetato de etila seco (100 mL) em um tubo fechado, foram adicionados iodeto cuproso (0,25 g, 1,30 mmol), trietilamina (10,90 mL, 78,26 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (1,83 g, 2,61 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente por 10 minutos e aquecida a 65 °C por 5 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi deixada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado em vácuo e purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer N-[N-[3-[2-[3-(2-piridilcarbamoil)-4- (trifluorometil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (8,5 g, 53%) como sólido amarelo.
[00102] Etapa 2: HCl concentrado (200 mL) foi lentamente adicionado a N-[N-[3-[2-[3-(2-piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]- 5-(trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (8,5 g, 13,73 mmol) e resfriado com gelo. A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente por 6 horas. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco. Esse material foi mais seco ainda com um liofilizador por 36 horas para produzir cloridrato de5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, composto 1b (6,1 g, 80%) como sólido esbranquiçado. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 12,39 (s, 1H), 11,29 (s, 1H), 8,66 (s, 4H), 8,61 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,38 (s, 2H), 8,15 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,88-7,96 (m, 3H), 7,20-7,88 (m, 1H) LC-MS APCI: Calculado para C24H15F6N5O2: 519,41; Observado m/z [M+H] +: 520,41. Pureza por LC-MS: 99,81%. RT: 2,55. Pureza por HPLC: 98,57%. RT: 11,99. Composto 1c (em sal malonato)
[00103] Etapa 1: Em um reator sob nitrogênio, foram carregados a o 5-Bromo-N-piridin-2-il-2-trifluorometil-benzamida, intermediário 2 (0,690 kg, 2 mol, 1 eq.), iodeto cuproso (0,019 kg, 0,1 mol, 0,05 eq.), Pd(PPh3)2Cl2 (0,140 kg, 0,2 mol, 0,1 eq.) e acetonitrila (6,6 L, 9,5 vol.). O composto N-[N- [3-etinil-5-(trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila, intermediário 1 (0,924 kg, 2,6 mol, 1,3 eq.) foi adicionado à suspensão em 5 minutos sob agitação a 25 °C. Essa adição é ligeiramente endotérmica. A suspensão foi desgaseificada sob borbulhamento de nitrogênio durante 30 minutos sob agitação. Em seguida, trietilamina (0,605 kg, 5,98 mol, 3 eq.) foi adicionada à massa em 17 minutos a 25 °C. Uma exoterma de +6 °C é observado. O funil de gotejamento foi lavado com acetonitrila (0,5 L, 0,7 vol.). A mistura de reação foi aquecida a 45 °C e mantida por 2 horas até que menos de 1% (ou seja, até que menos de 9,24 g, até que menos de 0,026 moles) do intermediário 1 estivesse presente. A suspensão foi então resfriada para 10 °C (a -20 °C/hora) e mantida por 1 hora. O intermediário N-[N-[3-[2- [3-(2-piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila foi filtrado e o bolo, lavado com acetonitrila (1,4 L, 2 vol.), depois com água (0,7 L, 1 vol.). Após secagem por fluxo de nitrogênio (1 noite, 0,3 bar), foram isolados 0,745 kg de N-[N-[3-[2-[3-(2-piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila com 60% de rendimento.
[00104] Etapa 2: Uma suspensão de N-[N-[3-[2-[3-(2- piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]-5- trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (1,5 kg, 2,42 mol) em acetato de etila (14,5 L) foi aquecida a 70 °C sob agitação. Ácido trifluoroacético (2,2 kg, 8 eq.) foi adicionado em 30 minutos a 70 °C. O funil de gotejamento foi lavado com acetato de etila (0,75 L, 0,5 vol.). A mistura de reação foi mantida 22 horas a 70 °C até menos de 1% (ou seja, até menos de 15 g, até menos de 0,0242 mol) de N-[N-[3-[2-[3-(2-piridilcarbamoil)-4- (trifluorometil)fenil]etinil]-5-trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila. Após resfriamento a 20 °C, a mistura foi basificada pela adição de uma solução de NH4OH 28% em 1 hora até pH = 9-10. Depois de agitação por 15 minutos adicionais, água (11,3 L, 7,5 vol.) foi adicionada. As fases foram separadas. A camada orgânica foi diluída com acetato de etila (45 L, 30 vol.) e lavada sucessivamente com uma solução aquosa de metabissulfito de sódio (Na2S2O5, 0,15 kg em 15 L de água) e água (15 L, 10 vol.). Realizou-se um tratamento adicional com carvão (Darco S51). A solução de acetato de etila (56,37 kg) foi utilizada na etapa seguinte de salificação.
[00105] Uma parte da solução anterior de 5-((3- (carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2- (trifluorometil)benzamida (0,958 kg, estimado puro, 1,844 mol, 1 eq.) foi concentrada sob pressão reduzida (100 mbars, 50 °C) até 10 volumes de acetato de etila. Uma secagem azeotrópica adicional foi realizada com 15 volumes de acetato de etila. A solução obtida de 10 volumes foi aquecida a 50 °C e, então, uma semeadura com 2% de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, ácido malônico foi realizada. Uma solução de ácido malônico (0,192 kg, 1,144 mol, 1 eq.) em acetato de etila (2,8 L, 2,9 vol.) foi adicionada em 30 minutos a 50 °C. O funil de gotejamento é lavado com 0,4 L de acetato de etila. A cristalização foi observada durante a adição do ácido. A agitação foi mantida por 1 hora a 50 °C e resfriada a 10 °C (-20 °C/hora). 5-((3- (carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2- (trifluorometil)benzamida, ácido malônico foi isolado por uma filtração rápida e o bolo foi lavado duas vezes com 1 L de acetato de etila. O produto foi seco sob fluxo de nitrogênio durante 1 noite para fornecer 1,096 kg de 5- ((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2- (trifluorometil)benzamida, ácido malônico, composto 1c com 95,3% de rendimento. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 12,82 (bs, 1H), 11,19 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,38 (m, 1H), 8,17 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,91 (s, 2H), 7,87 (ddd, J = 8,0; 7,8). LC-MS APCI: Calculado para C24H15F6N5O2: 519,41; Observado m/z [M+H] +: 520,02. Pureza por LC-MS: 99,1%. RT: 2,67. Pureza por HPLC: 98,5%. RT: 9,57. Intermediário 1
[00106] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de 3-bromo-5- (trifluorometil)benzoato de metila (20,0 g, 70,67 mmol) e trimetilsililacetileno (17,4 g, 176,67 mmol) em acetonitrila (100 mL) em um tubo fechado, adicionou-se Pd(PPh3)2Cl2 (4,96 g, 7,07 mmol) e iodeto cuproso (1,34 g, 7,06 mmol). O tubo desgaseificado novamente e aquecido a 70 °C por 2 horas. A mistura de reação foi resfriada e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado em vácuo e o resíduo purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando éter de petróleo, para fornecer éster metílico do ácido 3-trifluorometil-5- trimetilsilanyletinil-benzoico (14 g, 66%) como líquido amarelo.
[00107] Etapa 2: A uma solução de éster metílico do ácido 3- trifluorometil-5-trimetilsilanyletinil-benzoico (14,0 g, 46,60 mmol) em metanol (50 mL), carbonato de potássio (0,58 g, 4,2 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 20 minutos. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com acetato de etila (100 mL), lavado com água, salmoura, seco com sulfato de sódio anidro e concentrado para produzir éster metílico do ácido 3-etinil-5-trifluorometil- benzoico, intermediário 1-1 (11 g, 61%) como um líquido marrom.
[00108] Etapa 3: A uma solução gelada de éster metílico do ácido 3- etinil-5-trifluorometil-benzoico (11,0 g, 48,03 mmol) em tetrahidrofurano (50 mL) e água (25 mL), hidróxido de lítio (6,0 g, 144,10 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada e acidificada com solução aquosa de ácido cítrico. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco para fornecer ácido 3-etinil-5- trifluorometil-benzoico (9,2 g, 78%) como sólido marrom claro.
[00109] Etapa 4: Uma solução de ácido 3-etinil-5-trifluorometil- benzoico (9,2 g, 42,99 mmol), diciclo-hexilcarbodi-imida (13,28 g, 64,48 mmol) e pentafluorofenol (11,8 g, 64,48 mmol) em tetrahidrofurano (50 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Após finalizada a reação, a mistura foi resfriada com banho de gelo e a diciclo-hexilureia precipitada foi removida por filtração. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer o éster pentafluorfenílico do ácido 3- etinil-5-trifluorometil-benzoico (13,6 g, 83%) como um sólido esbranquiçado.
[00110] Etapa 5: A uma solução de éster pentafluorfenílico do ácido 3-etinil-5-trifluorometil-benzoico (13,6 g, 35,78 mmol) em tetrahidrofurano, monoboc-guanidina (6,82 g, 42,94 mmol) foi adicionada e agitada à temperatura ambiente por 4 horas. Após finalizada a reação, a mistura de reação foi evaporada e purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer N-[N-[3-etinil-5-(trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila, intermediário 1 (8,2 g, 64%) como um sólido esbranquiçado. Intermediário 2
[00111] Etapa 1: H2SO4 concentrado (10 mL) foi adicionado gota a gota à solução de ácido 5-bromo-2-iodobenzoic (100 g, 305,89 mmol) em MeOH (800 mL). A mistura foi submetida ao refluxo por 16 horas e então concentrada. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (1 L). A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 saturado e salmoura (3 x 200 mL), seco com Na2SO4, filtrado e concentrada para fornecer o produto pretendido éster metílico do ácido 5-bromo-2-iodo-benzoico (101,4 g, 90% de rendimento) como sólido amarelo. LC pureza: 98,91% (254 nm); Massa: pico encontrado 341 (M + H)+ em 2,214 min.
[00112] Etapa 2: A uma solução de éster metílico do ácido 5-bromo-2- iodo-benzoico (24 g, 70,4 mmol) e 2,2-difluoro-2-(fluorossulfonil)acetato de metila (13,5 mL, 105,6 mmol) em N-metil-2-pirrolidinona (80 mL), adicionou-se brometo de cobre (I) (1,21 g, 8,45 mmol). A mistura de reação foi agitada a 100 °C por 5 horas. A reação foi filtrada e repartida entre acetato de etila e salmoura. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila, e as camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4. Após filtração, o solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi purificado por coluna de sílica gel (Acetato de etila 0-4%em éter de petróleo,) fornecendo éster metílico do ácido 5-bromo-2-trifluorometil-benzoico (1 19,2 g, 96% de rendimento) como óleo amarelo.
[00113] Etapa 3: A uma solução gelada de éster metílico do ácido 5- bromo-2-trifluorometil-benzoico (9,1 g, 35,68 mmol) em tetrahidrofurano (20 mL) e água (10 mL), hidróxido de lítio (4,4 g, 104,76 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada e acidificada com solução aquosa de ácido cítrico. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco para fornecer ácido 5-bromo- 2-trifluorometil-benzoico (8 g, 95%) como sólido amarelo claro.
[00114] Etapa 4: Uma solução de ácido 5-bromo-2-trifluorometil- benzoico (8,0 g, 29,74 mmol) em cloreto de tionila (40 mL) foi aquecida ao refluxo por 3 horas. A finalização da reação foi observada por TLC (pela conversão de cloreto ácido em éster metílico). O cloreto de tionila foi evaporado e o resíduo foi carregado na mistura de reação que continha 2- amino-piridina (3,2 g, 32,71 mmol), trietilamina (12,44 mL, 89,21 mmol) em acetato de etila seco (80 mL) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a RT (temperatura ambiente) por 12 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi coletada em água (200 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 200 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (2 x 100 mL), salmoura, seca com sulfato de sódio e evaporada. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna, utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer 5-bromo-N-piridin-2-il-2- trifluorometil-benzamida, Intermediário 2 (5,1 g, 49%) como sólido esbranquiçado.
[00115] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de N-[N-[3-etinil-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila, intermediário 1 (1,5 g, 4,22 mmol) e 5-bromo-2-metil-N-(6-metilpiridin-2- il)benzamida, intermediário 3 (0,89 g, 2,92 mmol) em acetato de etila seco (20 mL) em um balão de fundo redondo, foram adicionados iodeto cuproso (0,04 g, 0,211 mmol), trietilamina (1,42 g, 14,08 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (0,3 g, 0,42 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente por 10 minutos e aquecida a 60 °C por 3 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi resfriada, diluída com acetato de etila e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado sob vácuo e o material bruto, purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer 5-[2-[3- (carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil]etinil]-2-metil-N-(2- piridil)benzamida (0,93 g, 37%) como sólido marrom claro.
[00116] Etapa 2: Uma solução gelada de 5-[2-[3- (carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil]etinil]-2-metil-N-(2- piridil)benzamida (0,93 g, 1,60 mmol), em HCl em dioxano (10 mL), foi agitada por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e o sólido foi lavado com hexano e seco sob vácuo. O produto foi ainda purificado pelo método de HPLC preparativa. O sólido obtido foi agitado com HCl in éter dietílico por 1 hora para fornecer cloridrato de 5-((3-((diaminometileno)carbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-2-metil-N-(6-metilpiridin-2-il)benzamida, composto 2 (0,075 g, 9%) como sólido esbranquiçado. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 12,38 (s, 1H), 11,03 (s, 1H), 8,67 (m, 4H), 8,54 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,00 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,83 (t, J = 8,00 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,63 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,46 (s, 3H). LC-MS APCI: Calculado para C25H20F3N5O2: 479,46; Observado m/z [M+H] +: 480,4. Pureza por LC-MS: 99,38%. Pureza por HPLC: 98,64%. . Intermediário 3:
[00117] Uma solução de ácido 5-bromo-2-metilbenzoico (5,0 g, 23,25 mmol) em cloreto de tionila (15 mL) foi aquecida ao refluxo por 3 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. O cloreto de tionila foi evaporado e o resíduo foi carregado na mistura de reação que continha 6- metilpiridin-2-amina (2,5 g, 23,14 mmol), trietilamina (5,8 g, 57,34 mmol) em acetato de etila seco (50 mL) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a RT (temperatura ambiente) por 12 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi coletada em água (200 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (2 x 100 mL), salmoura, seca com sulfato de sódio e evaporada. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna, utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer 5-bromo-2-metil-N-(6-metil-2- piridil)benzamida, intermediário 3 (4 g, 57%) como um sólido esbranquiçado.Exemplo 3
[00118] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de N-[N-(3-etinil-5- fluoro-benzoil)carbamimidoil]carbamato de terc-butila, intermediário 4 (2 g, 6,55 mmol) e 5-bromo-N-(6-metilpiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, intermediário 5 (1,6 g, 4,45 mmol) em acetato de etila seco (15 mL) em um balão de fundo redondo, foram adicionados iodeto cuproso (0,05 g, 0,26 mmol), trietilamina (1,4 g, 13,83 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (0,46 g, 0,65 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente por 10 minutos e aquecida a 60 °C por 3 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi resfriada, diluída com acetato de etila e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado sob vácuo e o material bruto foi purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer N-[N-[3-fluoro-5-[2-[3-[(6- metil-2-piridil)carbamoil]-4- (trifluorometil)fenil]etinil]benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (0,8 g, 21%) como sólido amarelo.
[00119] Etapa 2: A uma solução gelada de N-[N-[3-fluoro-5-[2-[3-[(6- metil-2-piridil)carbamoil]-4- (trifluorometil)fenil]etinil]benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (0,8 g, 1,37 mmol) em dioxano, HCl em dioxano (10 mL) foi adicionado e agitado por 4 horas. A mistura de reação foi filtrada e o sólido foi lavado com hexano e seco sob vácuo. O produto foi ainda purificado mais pelo método de HPLC preparativa. O sólido obtido foi agitado com HCl em éter dietílico por 1 hora para fornecer cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- fluorofenil)etinil)-N-(6-metilpiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, composto 3 (0,14 g, 25%) como sólido esbranquiçado. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 12,31 (s, 1H), 11,21 (s, 1H), 8,67-8,72 (m, 4H), 8,22 (s, 1H), 8,11 (dd, J = 1,60; 9,20 Hz, 1H), 7,867,97 (m, 5H), 7,76-7,79 (m, 1H), 7,08 (d, J = 7,20 Hz, 1H), 2,43 (s, 3H). LC-MS APCI: Calculado para C24H17F4N5O2: 483,43; Observado m/z [M+H]: 484,0. Pureza por LC-MS: 98,13%. Pureza por HPLC: 98,62%. Intermediário 4 Intermediário 4
[00120] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de 3-bromo-5- fluorobenzoato de metila (14 g, 60,0 mmol), trimetilsililacetileno (14,7 g, 150,21 mmol) e trietilamina (14,7 g, 145,27 mmol) em acetonitrila (100 mL) em um tubo fechado, foram adicionados Pd(PPh3)2Cl2 (4,2 g, 5,98 mmol) e iodeto cuproso (1,14 g, 5,97 mmol). O tubo fechado foi desgaseificado novamente e aquecido a 60 °C por 2 horas. A mistura de reação foi resfriada e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado em vácuo e o resíduo purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (60120 mesh), utilizando éter de petróleo, para fornecer 3-fluoro-5-(2- trimetilsililetinil)benzoato de metila (14,4 g, 96%) como líquido amarelo.
[00121] Etapa 2: A uma solução de 3-fluoro-5-(2- trimetilsililetinil)benzoato de metila (14,4 g, 57,53 mmol) em metanol (50 mL), carbonato de potássio (0,7 g 5,14 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 20 minutos. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com acetato de etila (100 mL), lavado com água, salmoura, seco com sulfato de sódio anidro e concentrado para produzir 3-etinil-5-fluoro-benzoato de metila, intermediário 4-1 (8,9 g, 87%) como um líquido marrom.
[00122] Etapa 3: A uma solução de 3-etinil-5-fluoro-benzoato de metila (8,9 g, 50 mmol) em tetrahidrofurano (30 mL) e água (15 mL), hidróxido de lítio (3,1 g, 73,8 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada e acidificada com solução aquosa de ácido cítrico. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco para fornecer ácido 3-etinil-5-fluoro-benzoico (7,66 g, 92%) como sólido esbranquiçado.
[00123] Etapa 4: A uma solução de ácido 3-etinil-5-fluoro-benzoico (7,6 g, 46,34 mmol), diciclo-hexilcarbodi-imida (14,4 g, 69,9 mmol) e pentafluorofenol (12,9 g, 70,49 mmol) em tetrahidrofurano (50 mL) foram adicionados agitado à temperatura ambiente por 3 horas. Após finalizada a reação, a mistura foi resfriada com banho de gelo e a diciclo-hexilureia precipitada foi removida por filtração. O filtrado foi concentrado e coletado para etapa seguinte sem purificação.
[00124] Etapa 5: A uma solução de éster PFP (13,9 g, 42,31 mmol) em tetrahidrofurano, monoboc-guanidina (16,3 g, 102,51 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 4 horas. Após finalizada a reação, a mistura de reação foi evaporada e purificada através de cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer N-[N-(3-etinil-5-fluoro- terc-butila, intermediário 4 (9,5 g, 75%) como um sólido esbranquiçado.
[00125] Uma solução de ácido 5-bromo-2-(trifluorometil)benzoico (1,5 g, 7,01 mmol) em cloreto de tionila (10 mL) foi aquecida ao refluxo por 3 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. O cloreto de tionila foi evaporado e o resíduo, carregado na mistura de reação que continha 6- metilpiridin-2-amina (0,75 g, 6,93 mmol), trietilamina (1,7 g, 16,83 mmol) em acetato de etila seco (25 mL) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a RT (temperatura ambiente) por 12 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi coletada em água (200 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (2 x 100 mL), salmoura, seca com sulfato de sódio e evaporada. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna, utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer 5-bromo-N-(6-metilpiridin-2-il)-2- (trifluorometil)benzamida, intermediário 5 (1,1 g, 44%) como sólido amarelo. Exemplo 4
[00126] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de N-[N-[3-etinil-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila, intermediário 1 (25 g, 82,84 mmol) e 5-iodo-2-metil-N-(piridin-2- il)benzamida, intermediário 6 (32,34 g, 91,12 mmol) em acetato de etila seco (500 mL) em um tubo fechado, foram adicionados iodeto cuproso (0,78 g, 4,14 mmol), trietilamina (35,92 mL, 248,52 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (5,81 g, 8,284 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente por 10 minutos e aquecida a 65 °C por 5 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado em vácuo e purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer 5-[2-[3- (carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil]etinil]-2-cloro-N-(2- piridil)benzamida (20,0 g, 49%) como sólido amarelo claro.
[00127] Etapa 2: HCl concentrado (200 mL) foi lentamente adicionado a -[2-[3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil]etinil]- 2-cloro-N-(2-piridil)benzamida (19,0 g, 75,39 mmol) e resfriado com gelo. A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente por 6 horas. O sólido precipitado foi filtrado e lavado sucessivamente com água, acetonitrila e acetato de etila. Esse material foi mais seco ainda com um liofilizador por 36 horas para produzir cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- trifluorometil)fenil)etinil)-2-metil-N-(piridin-2-il)benzamida, composto 4 (15,0 g, 89%) como sólido esbranquiçado. RMN 1H: 400 MHz, DMSO-d6: δ 12,32 (s, 1H), 11,12 (s, 1H), 8,65-0,00 (m, 4H), 8,53 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,40 (d, J = 4,20 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,16 (d, J = 8,36 Hz, 1H), 7,91-7,95 (m, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,66 (d, J = 7,80 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,16 Hz, 1H), 7,25-7,22 (m, 1H), 2,45 (s, 3H). LC-MS APCI: Calculado para C24H18F3N5O2: 465,44; Observado m/z [M+H] +: 466,0. Pureza por LC-MS: 99,92%. Pureza por HPLC: 96,58%. Intermediário 6
[00128] Etapa 1: À solução agitada de ácido 2-metilbenzoico (50,0 g, 367,6 mmol) em H2SO4 concentrado (500 mL), adicionou-se N- iodossuccinimida (78,6 g, 349,2 mmol) lentamente a 0 °C. A reação foi agitada a 0°C por 5 horas. Após finalizada, a reação foi interrompida com gelo. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo para produzir ácido 5-iodo-2-metilbenzoico (70,0 g, 74%) como sólido marrom claro.
[00129] Etapa 2: Uma solução de ácido 5-iodo-2-metilbenzoico (50,0 g, 190,0 mmol) em cloreto de tionila (250 mL) foi aquecida ao refluxo por 3 horas. A finalização da reação foi observada por TLC (pela conversão de cloreto ácido em éster metílico). O cloreto de tionila foi evaporado e o resíduo, carregado na mistura de reação que continha 2-amino piridina (19,72 g, 209,8 mmol), trietilamina (82,75 mL, 572,5 mmol) em acetato de etila seco (500 mL) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a RT (temperatura ambiente) por 12 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi coletada em água (2000 mL), extraída com acetato de etila (2 x 1000 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (2 x 1000 mL), salmoura, seca com sulfato de sódio e evaporada. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna, utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer 5-iodo-2-metil-N-(piridin-2-il)benzamida, intermediário 6 (30,0 g, 48%) como sólido amarelo claro. Exemplo 5
[00130] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de 5-bromo-N-(5- hidroxi-piridin-2-il)-2-trifluorometil-benzamida, intermediário 7 (1,0 g, 2,77 mmol) e N-[N-[3-etinil-5-(trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila, intermediário 1 (0,93 g, 3,04 mmol) em acetato de etila seco (15 mL) em um balão de fundo redondo, foram adicionados iodeto cuproso (26 mg, 0,14 mmol), trietilamina (1,2 mL, 8,31 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (194 mg, 0,27 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente por 10 minutos e aquecida a 65 °C por 5 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi resfriada, diluída com acetato de etila e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrada sob vácuo e o material bruto foi purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila 70-80% em éter de petróleo, para fornecer 5-[2-[3- (carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil]etinil]-N-(5-hidroxi-2- piridil)-2-(trifluorometil)benzamida (600,0 mg, 36%) como um sólido esbranquiçado.
[00131] Etapa 2: O composto sólido cloridrato de 5-[2-[3- (carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil]etinil]-N-(5-hidroxi-2- piridil)-2-(trifluorometil)benzamida (600,0 mg, 0,79 mmol) foi coletado em HCl concentrado (5 mL) e agitado durante a noite à temperatura ambiente. Os sólidos formados foram filtrados, lavados com água, hexano e secos sob vácuo para fornecer cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(5-hidroxipiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, composto 5 (450 mg, 83%) como um sólido esbranquiçado. RMN 1H 400 MHz, DMSO-d6: δ 12,44 (s, 1H), 11,09 (s, 1H), 8,68 (s, 5H), 8,51 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,89-7,96 (m, 5H), 7,34 (dd, J = 2,40; 8,80 Hz, 1H). LC-MS APCI: Calculado para C24H15F6N5O3: 535,41; Observado m/z [M+H] +: 536. Pureza por LC-MS: 95,65%. Pureza por HPLC: 93,96%. Intermediário 7
[00132] Etapa 1: A uma solução de ácido 5-bromo-2-trifluorometil- benzoico (10,0 g, 37,17 mmol) em diclorometano seco, adicionou-se cloreto de tionila (22,11 g, 185,85 mmol) a 0 °C. A mistura foi então aquecida a 80 °C por 3 horas. Após finalizada, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. À solução resfriada de cloreto ácido em acetato de etila sob atmosfera de nitrogênio, adicionou-se trietilamina (16,11 ml, 111,51 mmol) e 2-amino-5-hidroxipiridina (2,04 g, 18,58 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura de reação foi concentrada, diluída com acetato de etila, lavado com água, seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila 8-12% em éter de petróleo, para fornecer 6-(5-bromo-2-trifluorometil-benzoilamino)- piridin-3-il éster do ácido 5-bromo-2-trifluorometil-benzoico (6,0 g, 26%).
[00133] Etapa 2: A uma solução gelada de 6-(5-bromo-2- trifluorometil-benzoilamino)-piridin-3-il éster do ácido 5-bromo-2- trifluorometil-benzoico (6,0 g, 9,85 mmol) em tetrahidrofurano (25 mL) e água (12,5 mL), hidróxido de lítio (0,5 g, 11,82 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi separada, lavada com água, seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila 70-80% em éter de petróleo, para fornecer 5- bromo-N-(5-hidroxi-piridin-2-il)-2-trifluorometil-benzamida, intermediário 7 (3,0 g, 88%) como sólido branco. Exemplo 6
[00134] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de 3-etinil-5- (trifluorometil)benzoato de metila, intermediário 1-1 (0,8 g, 3,53 mmol), 5- bromo-2-cloro-N-(piridin-2-il)benzamida, intermediário 8 (1,1 g, 3,53 mmol) e trietilamina (1,5 mL, 10,6 mmol) em acetato de etila (20 mL) em um tubo fechado, adicionou-se Pd(PPh3)2Cl2 (0,25 g, 0,35 mmol) e iodeto cuproso (0,033 g, 0,18 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente e aquecida a 60 °C por 5 horas. A mistura de reação foi resfriada, diluída com acetato de etila e filtrada através de celite. O filtrado foi concentrado no vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila 20-35% em éter de petróleo, para fornecer 3-[2-[4-cloro-3-(2-piridilcarbamoil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoato de metila (0,55 g, 31%).
[00135] Etapa 2: A uma solução gelada de 3-[2-[4-cloro-3-(2- piridilcarbamoil)fenil]etinil]-5-(trifluorometil)benzoato de metila (0,55 g, 1,2 mmol) em tetrahidrofurano (8 mL) e água (4 mL), hidróxido de lítio monoidratado (0,15 g, 3,6 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 4 horas. A mistura de reação foi concentrada e acidificada com solução aquosa de ácido cítrico. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco para fornecer ácido 3-[2-[4-cloro-3-(2- piridilcarbamoil)fenil]etinil]-5-(trifluorometil)benzoico (0,4 g, 75%) como sólido esbranquiçado.
[00136] Etapa 3: Uma mistura de ácido 3-[2-[4-cloro-3-(2- piridilcarbamoil)fenil]etinil]-5-(trifluorometil)benzoico (0,4 g, 0,79 mmol), diciclo-hexilcarbodimida (0,24 g, 1,18 mmol) e pentafluorofenol (0,21 g, 1,18 mmol) em tetrahidrofurano anidro (5 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Após finalizada a reação, a mistura foi resfriada com banho de gelo e a diociclo-hexilureia precipitada foi removida por filtração. O filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila 20-35% em éter de petróleo, para fornecer 3-[2-[4-cloro-3-(2-piridilcarbamoil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoato de 2,3,4,5,6-pentafluorofenila (0,4 g, 72%).
[00137] Etapa 4: A uma solução de 3-[2-[4-cloro-3-(2- piridilcarbamoil)fenil]etinil]-5-(trifluorometil)benzoato de 2,3,4,5,6- pentafluorofenila (0,4 g, 0,65 mmol) em tetrahidrofurano anidro (5 mL) monoboc-guanidina (0,16 g, 0,98 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 8 horas. Após finalizada a reação, a mistura de reação foi evaporada e purificada através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila 30-40% em éter de petróleo, para fornecer N-[N-[3-[2-[4-cloro-3-(2-piridilcarbamoil)fenil]etinil]- 5-(trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (0,2 g, 52%) como sólido branco.
[00138] Etapa 5: Ácido trifluoroacético (0,8 g, 6,83 mmol) foi adicionado a uma solução resfriada de N-[N-[3-[2-[4-cloro-3-(2- piridilcarbamoil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (0,2 g, 0,34 mmol) em diclorometano (5 mL) e agitado à temperatura ambiente por 6 horas. Após finalizada a reação, a mistura de reação foi evaporada. O resíduo foi agitado em solução de NaHCO3 10% até que o pH do meio mudasse em básico. O sólido filtrado foi lavado com água e hexano e seco sob vácuo. O sólido foi coletado em éter dietílico (5 mL), HCl em éter dietílico (3 mL) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi evaporada sob vácuo. O sólido formado foi triturado com éter dietílico e filtrado para produzir cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-2-cloro-N-(piridin-2-il)benzamida, composto 6 (0,11 g, 67%) como sólido esbranquiçado (Sal cloridrato). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 12,30 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 11,20 (s, 1H), 8,63 (s, 4H), 8,54 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,38 (d, J = 3,60 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,17 (d, J = 6,80 Hz, 1H), 7,87-7,91 (m, 2H), 7,71-7,74 (m, 1H), 7,56-7,67 (m, 1H), 7,21 (t, J = 7,20 Hz, 1H). LC-MS APCI: Calculado para C23H15ClF3N5O2: 485,85; Observado m/z [M+H]+: 486. Pureza por LC-MS: 95,22%. Pureza por HPLC: 97,05%. RT: 12,60. Intermediário 8
[00139] Uma solução de ácido 5-bromo-2-clorobenzoico (5,0 g, 21,23 mmol) em cloreto de tionila (15 mL) foi aquecida ao refluxo por 3 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. O cloreto de tionila foi evaporado e o resíduo, carregado na mistura de reação contendo 2-amino piridina (2,20 g, 23,35 mmol), trietilamina (9,2 mL, 63,69 mmol) em acetato de etila seco (30 mL) a 0° C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 12 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi coletada em água (100 mL), extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (2x100 mL), salmoura, seca com sulfato de sódio e evaporada. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna, utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer a 5-bromo-2-cloro-N-(piridin-2- il)benzamida, intermediário 8 (3,0g, 46%) como sólido marrom.Exemplo 7
[00140] Etapa 1: A uma solução desgaseificada de 3-etinil-5- fluorobenzoato de metila, intermediário 4-1 (0,4 g, 1,159 mmol) e 4-bromo- N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, intermediário 2 (0,2 g, 1,122 mmol) em acetato de etila seco (15 mL) em um tubo fechado, foram adicionados iodeto cuproso (0,01 g, 0,057 mmol), trietilamina (0,29 mL, 2,87 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (0,084 g, 0,116 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente por 10 minutos e aquecida a 60 °C por 2 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado no vácuo e purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer éster metílico do ácido 3-fluoro-5-[3-(piridin-2-ilcarbamoil)-4-trifluorometil- feniletinil]-benzoico (0,4 g, 74%) como sólido esbranquiçado.
[00141] Etapa 2: A uma solução gelada de éster metílico do ácido 3- fluoro-5-[3-(piridin-2-ilcarbamoil)-4-trifluorometil-feniletinil]-benzoico (0,4 g, 0,904 mmol) em tetrahidrofurano (10 mL) e água (5 mL), hidróxido de lítio (0,11 g, 2,738 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada e acidificada com solução aquosa de ácido cítrico e extraída com acetato de etila (50 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água, salmoura, seco com sulfato de sódio anidro e concentrada para produzir ácido 3-Fluoro-5-[3-(piridin-2-ilcarbamoil)-4- trifluorometil-feniletinil]-benzoico (0,19 g, 50%) como sólido marrom claro.
[00142] Etapa 3: Uma solução de ácido 3-fluoro-5-[3-(piridin-2- ilcarbamoil)-4-trifluorometil-feniletinil]-benzoico (0,19 g, 0,445 mmol), diciclo-hexilcarbodi-imida (0,14 g, 0,68 mmol) e pentafluorofenol (0,12 g, 0,68 mmol) em tetrahidrofurano (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. Após finalizada a reação, a mistura foi resfriada com banho de gelo e a diciclo-hexilureia precipitada foi removida por filtração. O filtrado obtido foi concentrado e coletado para etapa seguinte sem purificação adicional para fornecer 3-fluoro-5-[2-[3-(2-piridilcarbamoil)-4- (trifluorometil)fenil]etinil]benzoato de 2,3,4,5,6-pentafluorofenila.
[00143] Etapa 4: A uma solução de 3-fluoro-5-[2-[3-(2- piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]benzoato de 2,3,4,5,6- pentafluorofenila (0,13 g, 0,218 mmol) em tetrahidrofurano, monoboc- guanidina (0,053 g, 0,33 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 6 horas. Após finalizada a reação, a mistura de reação foi evaporada e o resíduo foi purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer N-[N-[3-[2-[3-(2-piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]-5- fluorobenzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (0,05 g, 41%) como sólido esbranquiçado.
[00144] Etapa 5: A uma solução gelada de N-[N-[3-[2-[3-(2- piridilcarbamoil)-4-(trifluorometil)fenil]etinil]-5- fluorobenzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (0,05 g, 0,23 mmol) em diclorometano seco (10 mL), ácido trifluoroacético (0,25 g, 2,196 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 6 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi evaporada e triturada com éter dietílico e o sólido obtido foi filtrado e lavado com éter dietílico para fornecer o sal como sólido esbranquiçado. Este foi coletado em solução de NaHCO3 10% e agitado à temperatura ambiente até que o pH mudasse para básico. O sólido foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo. O sólido foi coletado em éter dietílico (10 mL) e HCl em éter dietílico (5 mL) foi adicionado e agitado por 1 hora. O sólido foi filtrado, lavado com hexano e seco sob vácuo para fornecer cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- fluorofenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, composto 7 (0,04 g, 75%) como um sólido esbranquiçado. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,99 (s, 1H), 11,22 (s, 1H), 8,52 (m, 4H), 8,38 (s, 1H), 8,14-8,17 (m, 2H), 7,99-7,86 (m, 5H), 7,21 (t, J = 6,00 Hz, 1H). LC-MS APCI: Calculado para C23H15F4N5O2: 469,40; Observado m/z [M+H] +: 470,0. Pureza por LC-MS: 98,90%. Pureza por HPLC: 97,9%. Exemplo 8
[00145] Etapa 1: Uma solução de ácido 5-bromo-2- (trifluorometil)benzoico (2,0 g, 7,43 mmol) em cloreto de tionila (4,42 g, 37,17 mmol) foi aquecida ao refluxo por 3 horas. A finalização da reação foi observada por TLC (pela conversão de cloreto ácido em éster metílico). Cloreto de tionila foi evaporado e o resíduo foi coletado em acetato de etila e purgado com gás amônia por 15 minutos a 0 °C. Depois, a reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi coletada em água (50 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (2 x 50 mL), salmoura, seca com sulfato de sódio e evaporada para obter o produto bruto. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (60-120 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer 5-bromo-2-(trifluorometil)benzamida (1,5 g, 75%) como sólido branco.
[00146] Etapa 2: A uma solução desgaseificada de 5-bromo-2- (trifluorometil)benzamida (0,5 g, 1,86 mmol) e N-[N-[3-etinil-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamatdo de terc-butila, intermediário 1 (0,65 g, 1,86 mmol) em acetato de etila seco (10 mL), foram adicionados iodeto cuproso (0,018 g, 0,09 mmol), trietilamina (0,78 mL, 5,59 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (0,06 g, 0,09 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada novamente por 10 minutos e aquecida a 65°C por 5 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e filtrada através de uma camada de celite. O filtrado foi concentrado em vácuo e purificado através de cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, para fornecer N-[N-[3- [2-[3-carbamoil-4-(trifluorometil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (0,3 g, 30%) como sólido esbranquiçado.
[00147] Etapa 3: A uma solução gelada de N-[N-[3-[2-[3-carbamoil-4- (trifluorometil)fenil]etinil]-5- (trifluorometil)benzoil]carbamimidoil]carbamato de terc-butila (0,3 g, 0,55 mmol) em diclorometano seco (5 mL), ácido trifluoroacético (1,26 g, 11,07 mmol) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 16 horas. A finalização da reação foi observada por TLC. A mistura de reação foi evaporada e basificada com solução gelada de NaHCO3 10%. O composto foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica combinada foi lavada com água, salmoura, seca com sulfato de sódio e evaporada para obter o produto bruto. A purificação do material por cromatografia em coluna de sílica gel (230-400 mesh), utilizando acetato de etila em éter de petróleo, produziu a N- carbamimidoil-3-((3-carbamoil-4-(trifluorometil)fenil)etinil)-5- trifluorometil)benzamida pura, composto 8 (0,09 g, 37%) como sólido branco. NMR: 400 MHz, DMSO-d6: δ 8,51 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,86 (s, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 6,88 (s, 1H). LC-MS APCI: Calculado para C19H12F6N4O2: 442,32; Observado m/z [M+H]+: 443,0. Pureza por LC-MS: 95,93%. Pureza por HPLC: 98,41%. Ensaios de atividade biológica de compostos da invenção 1) Atividades in vitro dos compostos N° 1 (incluindo compostos 1a, 1b e 1c) a 8 (P. falciparum)
[00148] A atividade biológica de compostos de Fórmula (I) de acordo com a invenção foi testada tendo por base uma avaliação de IC50 contra a cepa NF54 de P. Falciparum. a) Cultura parasitológica:
[00149] Para o ensaio com hipoxantina, culturas do parasita foram cultivadas em placas de Petri de 100 mm em meio de cultura com 5% de hematócrito em incubadora Trigás (Cat. no 3131, Thermo Scientific Forma Série II, incubadora de CO2 com jaqueta de água, vendida pela Thermofisher) com mistura gasosa controlada de CO2 4% e O2 3% na temperatura de 37 °C.
[00150] O crescimento e a morfologia dos parasitas foram observados diariamente utilizando esfregados finos com 100X (imersão em óleo) de ampliação após coloração com corante Giemsa.
[00151] Os parasitas fazem uso de hipoxantina, incluída no meio de crescimento, como um precursor na síntese de ácido nucleico. Assim, substituindo a hipoxantina no meio por uma hipoxantina radioativa, como 3H- hipoxantina como indicador, a taxa de replicação de DNA e a taxa de crescimento dos parasitas podem ser medidas, especialmente na presença dos compostos testados da invenção. b) Materiais e métodos: (i) Meio de crescimento
[00152] O meio de crescimento utilizado para os parasitas indicados acima contém 1 L de RPMI-1640 (vendido pela Invitrogen), 5 mg de Albumax II (vendido pela Invitrogen), 5 mg de hipoxantina (vendida pela Sigma), Hepes 25 mM (vendido pela Invitrogen) e 2,5 mg de gentamicina (vendida pela Sigma). (ii) Meio de rastreamento
[00153] O meio de rastreamento utilizado contém 1 L de RPMI-1640 (vendido pela Invitrogen), 5 mg de Albumax II (vendido pela Invitrogen), Hepes 25 mM (vendido pela Invitrogen) e 2,5 mg de gentamicina (vendida pela Sigma). (iii) Reagentes do ensaio
[00154] Para esse ensaio, o meio de rastreamento descrito acima foi utilizado, bem como 20 Ci/mmol de uma hipoxantina reativa (o ligante 3H- hipoxantina (20 Ci/mmol, 1 mCi/mL) vendida pela American Radiolabeled Chemicals (ARC) de St Louis, MO.), algum Top Seal A (vendido pela Perkin Elmer), placas de cultura celular de 96 cavidades (CellStar® vendida pela Greiner Bio-One GmbH), placas MicroScint® 20 (vendidas pela Perkin Elmer) e GFB (vendidas pela Perkin Elmer).
[00155] Em cada placa de 96 cavidades, foram testados 3 compostos de Fórmula (I) de acordo com a invenção, bem como um composto padrão (controle positivo) em 12 cavidades em duplicata.
[00156] O dito composto padrão é uma mistura de Artesunato e Cloroquina, dois compostos antimaláricos bem conhecidos.
[00157] O valor máximo de atividade dos parasitas é determinado no controle positivo, observando os parasitas na presença de eritrócitos, enquanto o valor mínimo de atividade dos parasitas é determinado em um controle negativo observando os eritrócitos na ausência de parasitas.
[00158] Os compostos testados da invenção foram analisados a uma concentração final de 10 μM.
[00159] Para tanto, soluções estoque a uma concentração de 40 μM do composto a ser testados foram disponibilizadas em frascos de alta recuperação a uma concentração de 10 mM. A partir destas, é preparado um estoque a 20 μM em meio de Rastreamento (0,4 μL do composto 10 mM + 996 μL de meio de rastreamento) para manter o % de DMSO em 0,4.
[00160] Partindo da solução estoque 20 μM, 100 μL são adicionados na placa de ensaio já contendo 100 μL de meio de rastreamento, e 12 pontos de diluição em uma série de 1:2 são feitos na placa e (10 μM a 4,8 nM) (100 μL do composto são misturados com 100 μL de meio de rastreamento já presentes nas placas, e assim por diante). c) Procedimento do ensaio
[00161] A cultura de P. falciparum diluída até 0,3% p e 1,25% h sincronizados para o estágio anel. O ensaio foi realizado na placa estéril de 96 cavidades.
[00162] Os compostos foram diluídos até a concentração final requerida de modo que a concentração de DMSO concentração na cavidade não exceda 0,1%.
[00163] 100 μL de cultura de P. falciparum foram adicionados por cavidade e, então, incubados a 37 °C por 48 horas. Esfregaços foram preparados, a seguir, para verificar o crescimento da cultura controle após 48 horas de incubação.
[00164] Uma vez assegurado que a cultura cresceu em % p, 50 μL de 3H-Hipoxantina (0,5 μCi/cavidade) são adicionados a cada cavidade, e a placa é incubada por mais 24 horas.
[00165] Depois de 72 horas, as placas de ensaio são colhidas em placas GFB. A fim de remover ligação não específica, as placas são lavadas com 2,5 mL de água destilada resfriada, e as placas GFB foram mantidas, para secagem, a 37 °C durante a noite ou a 60 °C por 1 hora.
[00166] 50 μL de Microscint®-20 foram adicionados a cada cavidade.
[00167] Foi então efetuada a leitura das placas no Top Count (45 segundos/cavidade).
[00168] Os dados do ensaio foram analisados utilizando o software GraphPad Prism ver. 5. Uma curva de dose-resposta das variáveis no padrão sigmoide é representada, mantendo as concentrações em log no eixo X e o % de inibição no eixo Y. d) Resultados Tabela 2
[00169] O valor de IC50 indica a concentração do composto que causa cinquenta por cento de inibição do crescimento do parasito em comparação ao controle positivo.
[00170] Todos os compostos testados de Fórmula (I) de acordo com a invenção são de fato capazes de inibir a atividade dos parasitas e mostram uma atividade inibidora contra P. falciparum.
[00171] Bons resultados são obtidos, em particular, com os compostos n° 1-7, especialmente com os compostos n° 1 (1a, 1b, 1c), 4, 5 e 6. Os compostos mais preferidos são 1 (1a, 1b, 1c) e 4. 2) Atividade in vitro em isolados clínicos de campo (P. vivax e P. falciparum)
[00172] A atividade biológica do composto 1b de acordo com a invenção foi testada tendo por base uma avaliação de IC50 contra a cepa P. vivax. a) Cultura parasitológica: Localização de campo e coleta de amostras
[00173] Isolados de Plasmodium foram coletados de pacientes atendidos na clínica de malária em Timika (Papua, Indonésia), uma região endêmica para cepas resistentes a múltiplos fármacos de P. vivax e P. falciparum. Pacientes com malária sintomática que compareceram a um ambulatório eram recrutados para o estudo se infectados isoladamente por P. falciparum ou P. vivax, com parasitemia entre 2.000 μL e 80.000 μL e a maioria dos parasitas (>60%) no estágio anel de desenvolvimento. Sangue venoso (5 mL) foi coletado por punção venosa e, após remoção dos leucócitos do hospedeiro utilizando filtros Plasmodipur (EuroProxima B.V., Países Baixos), concentrados de hemácias infectadas (iRBCs) foram utilizados para o ensaio de susceptibilidade aos fármacos ex vivo. b) Ensaio de susceptibilidade aos fármacos ex vivo (i) Materiais e métodos:
[00174] Os fármacos antimaláricos padrão cloroquina (CQ), piperaquina (PIP), mefloquina (MFQ) e artesunato (AS) (Programa de Material de Referência WWARN QA/QC) e o composto experimental 1b foram preparados como soluções estoque 1 mg/mL em H2O ou dimetilsulfóxido (DMSO) de acordo com as instruções dos fabricantes. As placas de fármacos foram preenchidas pelos compostos, diluídos em metanol 50% seguido por liofilização, e armazenadas a 4 °C. (ii) Procedimento do ensaio
[00175] A susceptibilidade aos fármacos de isolados de P. vivax e P. falciparum foi medida utilizando um protocolo modificado do microteste da OMS (ver, por exemplo, em Marfurt J. et al., Antimicrob Agents Chemother. 2011 Sep;55(9):4461).
[00176] Duzentos μL de uma mistura de meios de sangue com 2% de hematócrito (BMM), que consiste em meio RPMI 1640 mais soro humano AB+ 10% (P. falciparum) ou meio 5A de McCoy mais soro humano AB+ 20% (P. vivax), foram adicionados a cada cavidade de placas de fármacos preenchidos contendo 11 concentrações em série (diluições duplas) dos antimaláricos (concentração máxima mostrada em parênteses) CQ (2.993 nM), PIP (1.029 nM), MFQ (338 nM), AS (49 nM) e composto 1b (237 nM). Usou-se o método de candle jar para o amadurecimento dos parasitas a 37 °C por 35-56 horas. A incubação foi interrompida quando >40% de parasitas no estágio anel haviam atingido o estágio de esquizonte maduro nas cavidades controle sem fármacos conforme determinado por microscopia de luz.
[00177] O crescimento dos parasitas foi quantificado por coloração de ácido nucleico e aquisição de dados utilizando citometria de luxo conforme descrito detalhadamente em outro lugar6. O crescimento dos parasitas foi quantificado para cada concentração do fármaco e normalizado para a cavidade controle.
[00178] Os dados de dose-resposta foram examinados por análise de regressão não linear, e o valor da metade da inibição máxima (IC50) do crescimento derivado utilizando um modelo sigmoide de Emax inibitório (In Vitro Analysis e Reporting Tool; IVART7). Os dados de IC50 ex vivo, previstos pelas curvas, somente foram usados quando o valor de Emax e E0 se situaram em 15% de 100 e 1, respectivamente. (iii) Procedimentos de controle de qualidade
[00179] A qualidade da placa de fármacos foi assegurada por ensaios de maturação de esquizontes, realizados com a cepa K1 resistente à cloroquina e a cepa FC27 sensível à cloroquina. (iv) Os resultados estão resumidos na Tabela 3.Tabela 3
[00180] A susceptibilidade aos fármacos não diferiu significativamente entre as espécies para os antimaláricos padrão piperaquina, mefloquina e artesunato e o composto 1b. Portanto, o composto 1b parece ser um candidato eficiente para o tratamento de malária. Indicações
[00181] Como ilustrado nos exemplos, os compostos de Fórmula (I) de acordo com a invenção são capazes de inibir significativamente a atividade de Plasmodium falciparum e/ou Plasmodium vivax.
[00182] Os compostos de acordo com a invenção podem, portanto, ser utilizados para preparar medicamentos, especialmente medicamentos que inibem a atividade de Plasmodium falciparum e/ou Plasmodium vivax.
[00183] Assim, em outro de seus aspectos, a invenção provê medicamentos que compreendem um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00184] Esses medicamentos são empregados terapeuticamente, de modo especial no tratamento e/ou na profilaxia de malária. Composições farmacêuticas.
[00185] De acordo com outro de seus aspectos, a presente invenção refere-se a composições farmacêuticas compreendendo, como princípio ativo, um composto de Fórmula (I) de acordo com a invenção. Mais especificamente, essas composições farmacêuticas contêm uma dose eficaz de pelo menos um composto de Fórmula (I) de acordo com a invenção e também pelo menos um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
[00186] Assim, de acordo com uma modalidade, a presente invenção refere-se a composições farmacêuticas compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, e pelo menos um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00187] De acordo com outra modalidade, a presente invenção refere- se a composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, e pelo menos um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00188] Os ditos excipientes são selecionados, de acordo com a forma farmacêutica e o modo de administração desejado, dentre os excipientes habituais, os quais são conhecidos pelo técnico no assunto.
[00189] Nas composições farmacêuticas da presente invenção para administração oral, sublingual, subcutânea, intramuscular, intravenosa, tópica, local, intratraqueal, intranasal, transdérmica ou retal, o princípio ativo de Fórmula (I) acima, ou seu sal, pode ser administrado em uma forma de administração unitária, em uma mistura com excipientes farmacêuticos convencionais, a animais e a seres humanos para a profilaxia ou o ou tratamento de malária. Administração unitária
[00190] As formas adequadas de administração unitária incluem formas orais tais como comprimidos, cápsulas moles ou duras de gel, pós, grânulos e soluções ou suspensões orais, formas de administração sublingual, bucal, intratraqueal, intraocular e intranasal, formas de administração por inalação, tópica, transdérmica, subcutânea, intramuscular ou intravenosa, formas para administração retal e implantes. Para aplicação tópica, é possível utilizar os compostos de acordo com a invenção em cremes, géis, pomadas ou loções.
[00191] Como exemplo, uma forma de administração unitária de um composto de acordo com a invenção na forma de comprimido pode compreender os componentes seguintes:
[00192] Pode haver casos em particular nos quais doses altas ou baixas sejam adequadas; tais doses não se afastam do âmbito da invenção. De acordo com a prática habitual, a dose que é adequada para cada paciente é determinada pelo médico de acordo com o modo de administração e o peso e resposta do dito paciente.
[00193] Por exemplo, a dose administrada - em dose única ou múltiplas - a um indivíduo variará dependendo de uma variedade de fatores, incluindo propriedades farmacocinéticas, condições e características do paciente (sexo, idade, peso corporal, saúde, tamanho), extensão de sintomas, tratamentos simultâneos, frequência de tratamento e o efeito desejado. Combinação
[00194] Para o tratamento de malária e prevenir a resistência - a Organização Mundial da Saúde recomenda - conforme declarado nas “Diretrizes para o tratamento de malária”, terceira edição, ISBN 978 92 4 154912 7- combinar pelo menos dois compostos antimaláricos eficazes com diferentes mecanismos de ação.
[00195] Assim, em outro de seus aspectos, os compostos de Fórmula (I) de acordo com a invenção farão parte de tratamentos combinados compreendendo a administração de dois ou mais compostos antimaláricos com mecanismos de ação não relacionados. Tal combinação de pelo menos um composto (I) de acordo com a invenção e pelo menos um ou mais princípios ativos antimaláricos (diferentes de um composto de Fórmula (I)) pode estar compreendida na mesma formulação galênica, for exemplo, tal como aquela descrita anteriormente, ou em formulações galênicas diferentes.
[00196] De acordo com uma modalidade, quando essa combinação está compreendida na mesma formulação galênica, a combinação é preferivelmente uma combinação em dose fixa na qual pelo menos um composto (I) e pelo menos outro princípio ativo antimalárico (distinto de um composto (I)) podem ser formulados juntos, por exemplo, no mesmo comprimido, cápsula, pó, suspensão ou grânulo.
[00197] De acordo com outra modalidade, quando essa combinação está compreendida em formulações galênicas diferentes, a administração de cada um desses princípios ativos pode ser simultânea ou sequencial.
[00198] Assim, de acordo com outro aspecto, a invenção refere-se ainda a uma combinação de pelo menos um composto de Fórmula (I) de acordo com a invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e de pelo menos outro princípio ativo antimalárico diferente de um composto de Fórmula (I) conforme definido na presente invenção.
[00199] A invenção refere-se ainda a uma composição farmacêutica que compreende pelo menos um combinação de acordo com a invenção e pelo menos um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00200] A invenção refere-se ainda a uma combinação de acordo com a invenção para uso como um medicamento, tal como para uso na prevenção e/ou no tratamento de malária.
[00201] A invenção refere-se ainda a uma combinação de acordo com a invenção para uso no tratamento e/ou na prevenção de infecções de células sanguíneas por Plasmodium falciparum e/ou Plasmodium vivax. De acordo com uma modalidade em particular, a infecção é malária.
[00202] Assim, a invenção refere-se ainda a um método para prevenir e/ou tratar malária em um paciente com necessidade do mesmo, o qual compreende a administração de pelo menos uma combinação de acordo com a invenção em um paciente com necessidade do mesmo. Método de tratamento
[00203] A presente invenção, de acordo com outro de seus aspectos, também provê um método de tratamento das patologias indicadas acima, o qual compreende administrar a um paciente uma dose eficaz de um composto de acordo com a invenção, ou de um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis ou de uma combinação de acordo com a invenção.

Claims (19)

1. Composto, caracterizado por ter a Fórmula (I): em que: - R1 significa um átomo de flúor ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, - R2 significa um átomo de cloro; um radical alquila linear contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono opcionalmente substituído com pelo menos um átomo de flúor; ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, e - R significa um átomo de hidrogênio ou um radical de Fórmula (Ia): em que R3 significa um átomo de hidrogênio; um radical hidroxila; ou um radical alquila linear ou ramificado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, e R3 está na posição 5 ou na posição 6 do dito radical de Fórmula (Ia), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
2. Composto de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Ri significa um átomo de flúor ou um radical trifluorometila.
3. Composto de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que R2 significa um átomo de cloro, um radical metila ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono tal como um radical trifluorometila.
4. Composto de Fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores 1 a 3, caracterizado pelo fato de que R significa um radical de Fórmula (Ia) como definido na reivindicação 1.
5. Composto de Fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que R significa um radical de Fórmula (Ia), como definido na reivindicação 1, e R3 está na posição 5 ou 6 do dito radical de Fórmula (Ia).
6. Composto de Fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que R significa um radical de Fórmula (Ia), como definido na reivindicação 1, e R3 significa um átomo de hidrogênio, um radical hidroxila ou um radical metila.
7. Composto de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que R significa um radical de Fórmula (Ia), como definido na reivindicação 1, e R3 significa um radical hidroxila na posição 5 do dito radical de Fórmula (Ia).
8. Composto de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que R significa um radical de Fórmula (Ia), como definido na reivindicação 1, e R3 significa um radical alquila linear ou ramificado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono tal como um radical metila na posição 6 do dito radical de Fórmula (Ia).
9. Composto de Fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que pelo menos um dentre R1 e R2 significa um radical perfluorometila.
10. Composto de Fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que Ri e R2 significam ambos um radical perfluorometila.
11. Composto de Fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir da lista seguinte: • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil)etinil)-N- (piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • 5-((3-((diaminometileno)carbamoil)-5-(trifluorometil)fenil)etinil)- 2-metil-N-(6-metilpiridin-2-il)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-fluorofenil)etinil)-N-(6- metilpiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-trifluorometil)fenil)etinil)-2- metil-N-(piridin-2-il)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil)etinil)-N- (5-hidroxipiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil)fenil)etinil)-2- cloro-N-(piridin-2-il)benzamida, • 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-fluorofenil)etinil)-N-(piridin-2- il)-2-(trifluorometil)benzamida, • N-carbamimidoil-3-((3-carbamoil-4-(trifluorometil)fenil)etinil)-5- trifluorometil)benzamida e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
12. Composto de Fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir da lista seguinte: • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil) fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • ácido malônico de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • cloridrato de 5-((3-((diaminometileno)carbamoil)-5- (trifluorometil)fenil)etinil)-2-metil-N-(6-metilpiridin-2-il)benzamida, • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-fluorofenil)etinil)- N-(6-metilpiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-trifluorometil) fenil)etinil)-2-metil-N-(piridin-2-il)benzamida, • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil) fenil)etinil)-N-(5-hidroxipiridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida, • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-(trifluorometil) fenil)etinil)-2-cloro-N-(piridin-2-il)benzamida e • cloridrato de 5-((3-(carbamimidoilcarbamoil)-5-fluorofenil)etinil)- N-(piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzamida.
13. Combinação, caracterizada pelo fato de ser de pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 12 e de pelo menos outro princípio ativo antimalárico diferente de um composto de Fórmula (I) como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 12.
14. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definidos mesmo qualquer uma das reivindicações 1 a 12, ou pelo menos uma combinação como definida na reivindicação 13, e pelo menos um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável do mesmo.
15. Processo para a preparação de um composto de Fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que compreende pelo menos a etapa seguinte que consiste em: um acoplamento catalítico, em particular com um catalisador de paládio, entre um composto intermediário de Fórmula (III): em que: - PG1 é um grupo protetor de amina convencional e R1 significa um átomo de flúor ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono tal como um radical trifluorometila; e um composto intermediário de Fórmula (IV): em que: - R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I) das reivindicações 1, 3, 5 a 10 e X é um átomo de bromo ou um átomo de iodo; de modo a obter um composto de Fórmula (V): em que R1, R2, R3 e PG1 são como definidos acima, o dito composto de Fórmula (V) sendo ainda desprotegido e opcionalmente salificado para formar o composto previsto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
16. Processo para a preparação de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que compreende pelo menos as etapas seguintes que consistem em: (1) realizar um acoplamento catalítico, em particular com um catalisador de paládio, entre um composto intermediário de Fórmula (IV) em que: - R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I) das reivindicações 1, 3, 5 a 10 e - X é um átomo de bromo ou um átomo de iodo, e um composto intermediário de Fórmula (VI) em que: - R1 significa um átomo de flúor ou um radical alquila linear perhalogenado contendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono tal como um radical trifluorometila; (2) colocar o dito composto de Fórmula (VII) em contato com uma base, tal como hidróxido de lítio ou hidróxido de sódio, para obter um composto de Fórmula (VIII): em que R1, R2, e R3 são como definidos acima; (3) colocar o assim obtido composto de Fórmula (VIII) da etapa (2) em contato com pelo menos um reagente para formação de amida, tal como diciclo-hexilcarbodi-imida ou hexafluorofosfato de benzotriazol-1- iloxitripirrolidinofosfônio e pentafluorofenol, na presença de PG1 de guanidina, tal como N-Boc-guanidina ou N-Cbz-guanidina, para obter um composto de Fórmula (V): em que R1, R2, e R3 são como definidos acima e PG1 é um grupo protetor de amina convencional; o dito composto de Fórmula (V) sendo ainda desprotegido e opcionalmente salificado para obter o composto previsto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
17. Uso do composto de Fórmula (I) como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 12 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou combinação como definida na reivindicação 13, caracterizado pelo fato de ser para a manufatura de um medicamento.
18. Uso do composto de Fórmula (I) como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 12 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou combinação como definida na reivindicação 13, caracterizado pelo fato de ser para a manufatura de um medicamento para o tratamento e/ou prevenção de infecções de células sanguíneas por Plasmodium falciparum e/ou Plasmodium vivax.
19. Uso do composto de acordo com a reivindicação 18 ou combinação de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que a infecção é malária.
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