BR112017017043B1

BR112017017043B1 - Composição injetável para reduzir a aparência de depressões superficiais na pele e método não terapêutico para aprimorar pelo menos uma dentre textura, hidratação e elasticidade de pele

Info

Publication number: BR112017017043B1
Application number: BR112017017043-4A
Authority: BR
Inventors: Pierre Lebreton; Olivier GUETTA
Original assignee: Allergan Industrie, Sas
Priority date: 2015-02-09
Filing date: 2016-02-09
Publication date: 2021-09-28
Also published as: CN117599246A; CA2972561A1; AU2021202089B2; AU2016217963A1; KR20170113660A; WO2016128374A1; HK1248134A1; US20200345612A1; US11260015B2; JP2024008963A; JP2021091694A; WO2016128783A1; HK1244443A1; EP3256097A1; AU2023241303A1; AU2016217963B2; US20220257495A1; AU2021202089A1; KR20240027881A; RU2718873C2

Abstract

composições e métodos para aprimorar aparência de pele. trata-se de composições injetáveis e métodos para tratar pele a fim de aprimorar hidratação, elasticidade e/ou textura. as composições têm como base matrizes de ácido hialurônico reticuladas feitas com ácidos hialurônicos de baixo peso molecular.

Description

[0001] A presente invenção refere-se, em geral, a composições injetáveis e mais especificamente se refere a composições à base de ácido hialurônico para tratamento de linhas finas na pele.

[0002] As opções atuais de tratamento injetável para aprimorar a qualidade de pele em toda a face ou outra área de superfície significativa de pele exigem múltiplas sessões de tratamento (tipicamente 3 a 4 tratamentos, a cada três a quatro semanas) e têm um efeito de duração relativamente curto.

[0003] A pele é composta da epiderme e da derme. A epiderme mais externa é feita de epitélio escamoso estratificado com uma membrana de base subjacente. A mesma não contém vasos sanguíneos, e é nutrida por difusão da derme. O tipo principal de células que compõem a epiderme são queratinócitos, sendo que melanócitos e células de langerhans também estão presentes. Essa camada de pele é responsável por manter água no corpo e manter fora compostos químicos e patógenos danosos.

[0004] Uma derme está abaixo da epiderme e contém inúmeras estruturas que incluem vasos sanguíneos, nervos, folículos capilares, músculo liso, glândulas e tecido linfático. A derme (ou corium) tem tipicamente de 3 a 5 mm de espessura e é o componente principal de pele humana. A mesma é composta de uma rede de tecido conectivo, predominantemente fibrilas de colágeno que fornecem suporte e tecido elástico que fornece flexibilidade. Os tipos principais de célula são fibroblastos, adipócitos (armazenamento de gordura) e macrófagos. O ácido hialurônico (HA) é uma parte da composição de derme e é um componente principal da matriz celular adicional.

[0005] O envelhecimento facial ocorre como o resultado de muitos fatores: mudanças inerentes na pele, efeitos da gravidade, músculos faciais que atuam na pele (linhas dinâmicas), perda de tecido mole ou deslocamento e perda óssea e perda de elasticidade de tecido. A pele envelhece quando a epiderme começa a afinar, fazendo com que a junção com a derme fique achatada. O colágeno diminui conforme uma pessoa envelhece e os feixes de colágeno, que levam turgor à pele, se tornam mais soltos e perdem resistência. Quando a pele perde elasticidade, a mesma é menos apta a resistir a um alongamento. Juntamente com gravidade, tração muscular e mudanças de tecido, a pele começa a enrugar. A perda de água e a quebra de ligações entre células também reduz a função de barreira da pele, o que pode fazer com que o tamanho de poro da pele aumente.

[0006] É bem conhecido que os olhos são frequentemente o primeiro recurso facial a mostrar sinais de envelhecimento. Mudanças de pele ao redor dos olhos ocorrem mais cedo do que o resto da face visto que a pele é mais fina ao redor dos olhos. A pele aqui contém menos glândulas e é submetida a piscadas constantes, aperto dos olhos (squinting), atritos e puxões. O meio da face envelhece quando as bochechas começam a cair, causando dobras nasolabiais. As dobras nasolabiais são as linhas que correm dos lados do nariz até os cantos da boca. Na área de face inferior, conforme a face envelhece, os tecidos faciais descem. Isso resulta nas assim chamadas "linhas de sorriso". Essas e outras dobras e rugas são agora comumente tratadas com injeções subdérmicas e dérmicas de cargas faciais estéticas que adicionam o volume perdido à pele e através disso reduz a aparência das dobras e das rugas.

[0007] O ácido hialurônico (HA), também conhecido como hialuronano, é agora um dos componentes mais comumente usados de cargas dérmicas. O ácido hialurônico é um polissacarídeo solúvel em água que ocorre naturalmente, especificamente um glicosaminoglicano, que é um componente principal da matriz extracelular e é amplamente distribuído em tecidos animais. A estrutura idêntica do ácido hialurônico em todas as espécies e todos os tecidos faz desse polissacarídeo uma substância ideal para uso como um biomaterial na saúde e na medicina.

[0008] HA tem excelente biocompatibilidade e, diferente do colágeno, não exige nenhum teste de pele antes da implantação. Além disso, HA tem a habilidade de ligar a grandes quantidades de água, tornando o mesmo um excelente volumizador de tecidos moles.

[0009] Para melhorar sua longevidade in vivo, o HA em cargas dérmicas é comumente reticulado. O HA quimicamente reticulado é formado reagindo-se HA não reticulado com um agente de reticulação sob condições adequadas de reação.

[0010] É geralmente aceito que cargas dérmicas com base em HA que tenham uma alta viscosidade, por exemplo, os mesmos que são altamente reticulados e/ou feitos de HA de alto peso molecular e/ou que têm uma alta concentração de HA tendem a durar mais no corpo. Por outro lado, é geralmente aceito que cargas dérmicas com base em HA que têm uma baixa viscosidade, por exemplo, os mesmos que são mais levemente reticulados e/ou feitos de HA de baixo peso molecular e/ou têm uma baixa concentração de HA, podem ter uma duração mais curta no corpo. Naturalmente, uma injeção de um material de alta viscosidade através de uma agulha é relativamente mais difícil, e geralmente exige uma agulha de calibre menor (por exemplo, 21 G ou 23 G em comparação com 27 G ou 30 G) do que uma injeção um material de viscosidade relativamente baixa. Foi provado ser difícil desenvolver uma composição com base em HA que seja tanto fácil de injetar através de uma agulha de calibre alto (isto é, agulha fina) e que tem duração estendida no corpo.

SUMÁRIO

[0011] A presente invenção se refere a composições injetáveis, e mais especificamente, a composições injetáveis para injeção intradérmica na pele. As composições e os métodos fornecem aparência e qualidade de pele aprimoradas pelo preenchimento de depressões de pele superficiais e/ou pelo aprimoramento da qualidade e da aparência de pele. Em um aspecto, as composições e os métodos fornecem pelo menos um dentre textura de pele aprimorada, hidratação de pele aprimorada e elasticidade aumentada.

[0012] Em um aspecto, as presentes composições têm como base ácido hialurônico (HA) e sais farmaceuticamente aceitáveis de HA, por exemplo, hialuronato de sódio (NaHA). Muitas das composições altamente injetáveis de longa duração da presente invenção incluem uma matriz de HA reticulado feita com HA de peso molecular relativamente baixo. Em algumas modalidades, as composições têm uma concentração relativamente baixa de HA. Vantajosamente, muitas das composições fornecidas no presente documento têm um efeito de duração estendido. Por exemplo, ao invés de exigir múltiplos tratamentos repetidos a cada três a quatro semanas, como é comum com métodos de tratamento de injeção intradérmica convencionais, muitas das presentes composições e dos presentes métodos fornecidos no presente documento têm uma duração de efeito de três meses, quatro meses, seis meses a um ano ou mais.

[0013] Em um aspecto amplo da invenção, uma composição é fornecida que geralmente compreende um gel de HA que contém, ou consiste essencialmente em, um material de HA de baixo peso molecular. O componente de HA inclui mais do que 50%, por exemplo, pelo menos 70%, por exemplo, cerca de 90% em peso do HA de baixo peso molecular. O material de HA de baixo peso molecular tem um peso molecular médio em peso de não mais do que cerca de 0,20 MDa e cerca de 0,99 MDa tal como cerca de 0, 4 MDa a cerca de 0, 8 MDa.

[0014] Em algumas modalidades, o gel de HA pode adicionalmente conter um HA de alto peso molecular, ou seja, um material de HA que tem um peso molecular de pelo menos cerca de 1,0 MDa a cerca de 4, 0 MDa. Geralmente, em modalidades da invenção que incluem um material de HA de alto peso molecular, o peso molecular médio em peso do material de HA de alto peso molecular é pelo menos duas vezes o mesmo do material de HA de baixo peso molecular.

[0015] O HA do gel de HA pode ser reticulado. Por exemplo, o HA pode ser quimicamente reticulado por um agente de reticulação adequado. Em algumas modalidades, o agente de reticulação é selecionado dentre o grupo que consiste em 1,4-butanediol diglicidil éter (BDDE), ou 1,4- bis(2,3-epoxipropoxi)butano, ou 1,4-bisglicidiloxibutano (todos os quais são comumente conhecidos como BDDE), 1,2- bis(2,3-epoxipropoxi)etileno e 1-(2,3-epoxipropil)-2,3- epoxiciclohexano.

[0016] Em algumas modalidades, a composição tem uma concentração de HA de cerca de 10,0 mg/g até cerca de 17,0 mg/g. Em algumas modalidades, a concentração de HA é menor do que cerca de 17,0 mg/g, por exemplo, menos do que cerca de 15, 0 mg/g. Em algumas modalidades, a concentração de HA é entre cerca de 10,0 mg/g e cerca de 14,0 mg/g. Em algumas modalidades, a concentração de HA é cerca de 10,0 mg/g, cerca de 11,0 mg/g, cerca de 12,0 mg/g, cerca de 13, 0 mg/g ou cerca de 14,0 mg/g.

[0017] Em outro aspecto da invenção, os métodos para tratar a pele usando as presentes composições são fornecidos. Por exemplo, os métodos para aprimorar uma ou mais qualidades de pele, ou aprimorar aparência ou textura de pele, são fornecidos.

[0018] Em um aspecto, os métodos para tratar secura, textura ou aspereza e/ou elasticidade em pele são fornecidos. Os métodos geralmente compreendem tratar uma área de pele introduzindo-se, na área, múltiplas injeções separadas de uma composição que compreende um gel de ácido hialurônico (HA) que contém HA reticulado, em que a pele tratada mantém uma hidratação aprimorada, uma textura mais suave ou elasticidade aumentada, devido ao tratamento por uma duração estendida, por exemplo, por pelo menos cerca de 3 meses a cerca de um ano ou mais. Em uma modalidade particularmente vantajosa, a etapa de introduzir é realizada em apenas uma única sessão de tratamento, e através disso elimina a necessidade por tratamentos repetidos para manter a duração de efeito.

[0019] Em algumas modalidades, a etapa de introduzir compreende introduzir a composição em injeções separadas por uma distância de entre cerca de 2 mm a cerca de 30 mm. Por exemplo, a etapa de introduzir compreende introduzir a composição em injeções separadas por uma distância de entre cerca de 5 mm a cerca de 20 mm, ou cerca de 10 mm a cerca de 15 mm. Em algumas modalidades, as composições são introduzidas em uma profundidade de injeção de entre cerca de 500 mícrons e cerca de 2.000 mícrons, por exemplo, uma profundidade de cerca de 1.000 mícrons. Em modalidades preferenciais, as composições são introduzidas em uma profundidade de injeção de entre cerca de 0,5 mm a cerca de 5,0 mm, preferencialmente cerca de 1,0 mm a cerca de 4,0 mm, mais preferencialmente de cerca de 1,5 mm a cerca de 3,0 mm. Em geral, uma injeção mais profunda fornece resultados de hidratação aprimorados.

[0020] Em outro aspecto, a invenção fornece um método para tratar aspereza em pele que compreende tratar uma área de pele introduzindo-se, na área, múltiplas injeções separadas de uma composição que compreende um gel de ácido hialurônico (HA) que contém HA reticulado, em que a pele tratada mantém a uma textura mais suave devido ao tratamento por pelo menos cerca de 3 meses, pelo menos cerca de 4 meses, pelo menos cerca de 6 meses, ou pelo menos cerca de 12 meses.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0021] O termo “cerca de” no contexto de valores numéricos será prontamente entendido por uma pessoa versada na técnica, e preferencialmente significa que valores específicos podem ser modificados em +/- 10%. No que diz respeito a pontos de extremidade de faixas, o modificador "cerca de" preferencialmente significa que o ponto de extremidade inferior pode ser reduzido em 10% e o ponto de extremidade superior aumentado em 10%. É também contemplado que cada valor numérico ou faixa numérica revelado nesse pedido de patente pode ser absoluto, isto é, Que o modificador "cerca de" pode ser excluído.

[0022] Todos os números no presente documento que expressam “peso molecular” de HA devem ser entendidos de modo a indicar o peso molecular médio em peso (Mw) em Daltons.

[0023] O peso molecular de HA é calculado de uma medição de viscosidade intrínseca usando a relação de Mark Houwink a seguir:

[0024] Viscosidade Intrínseca (m3/kg) = 9,78 x 10-5 x Mw0,690

[0025] A viscosidade intrínseca é medida de acordo com o procedimento definido como Farmacopeia Europeia (monográfico de HA No1.472, 01/2009).

[0026] O HA de alto peso molecular conforme usado no presente documento descreve um material de HA que tem um peso molecular de pelo menos cerca de 1,0 milhão de Daltons (Mw ^ 106 Da ou 1 MDa) a cerca de 5,0 MDa. Por exemplo, o HA de alto peso molecular nas presentes composições pode ter um peso molecular na faixa de cerca de 1,5 MDa a cerca de 3,0 MDa, ou o HA de alto peso molecular pode ter um peso molecular médio em peso de cerca de 2,0 MDa. Em outro exemplo, o HA de alto peso molecular pode ter um peso molecular de cerca de 3,0 MDa. Em outro exemplo, o HA de alto peso molecular pode ter um peso molecular de cerca de 1 MDa que corresponde a uma viscosidade intrínseca de 1,35 m3/kg quando calculada de acordo com a relação de Mark Houwink conforme indicado acima, 1,5 MDa (1,35 m3/kg), 2 MDa (2,18 m3/kg), 3 MDa (2,88 m3/kg), 5 MDa (4,10 m3/kg), 0,2 MDa (0,44 m3/kg), 0,4 MDa (0,72 m3/kg), 0,8 MDa (1,1 m3/kg), 0,99 MDa (1,34 m3/kg).

[0027] O HA de baixo peso molecular conforme usado no presente documento descreve um material de HA que tem um peso molecular de menos do que cerca de 1,0 MDa. O HA de baixo peso molecular pode ter um peso molecular de entre cerca de 200,000 Da (0,2 MDa) a menos do que 1,0 MDa, por exemplo, entre cerca de 400.000 Da e cerca de 800.000 Da, por exemplo, cerca de 386.000 Da (0,386 MDa) a cerca de 740,000 Da (0,74 MDa). Em algumas modalidades o HA de baixo peso molecular usado para fazer a matriz de HA reticulado não excede 0,99 MDa.

[0028] Preferencialmente, a mistura do HA de baixo peso molecular e do HA de alto peso molecular tem uma distribuição de peso molecular bimodal. A mistura pode também ter uma distribuição multimodal.

[0029] Em um aspecto da invenção, as composições compreendem HA que tem um componente de alto peso molecular e um componente de baixo peso molecular, e o componente de alto peso molecular tem um peso molecular médio em peso de pelo menos duas vezes o peso molecular médio em peso do componente de baixo peso molecular.

[0030] Por exemplo, uma composição de acordo com esse aspecto da invenção pode incluir um componente de baixo peso molecular que tem um peso molecular médio em peso de cerca de 500,000 Da, e um componente de alto peso molecular que tem um peso molecular médio em peso de cerca de, ou pelo menos cerca de, 1,0 MDa.

[0031] Em outro exemplo, uma composição de acordo com a invenção pode incluir um componente de baixo peso molecular que tem um peso molecular médio em peso de cerca de 800.000 Da, e um componente de alto peso molecular que tem um peso molecular médio em peso de cerca de, ou pelo menos cerca de, 1,6 MDa.

[0032] O grau de reticulação é medido pela razão de peso final de reticulador para unidades de dissacarídeo de HA.

[0033] O HA não reticulado conforme usado no presente documento se refere a moléculas de polímero de HA individual que não são reticuladas uma a outra. O HA não reticulado geralmente permanece solúvel em água.

[0034] São fornecidas no presente documento composições para tratar a pele, por exemplo, composições injetáveis que podem ser introduzidas de modo intradérmico a fim de aprimorar a aparência ou a qualidade de pele, por exemplo, a fim de aprimorar hidratação, textura e/ou elasticidade. As composições podem também ser eficazes para tratamento de linhas finas na pele e para reduzir depressões cutâneas superficiais. Os métodos para fazer essas composições são também fornecidas, assim como métodos de tratamento usando essas composições. As composições têm como base os ácidos hialurônicos (HA) e sais farmaceuticamente aceitáveis de HA, por exemplo, hialuronato de sódio (NaHA).

[0035] Conforme usado no presente documento, ácido hialurônico (HA) pode ser referir a qualquer um de seus sais de hialuronato, e inclui, mas não limitadamente, hialuronato de sódio (NaHA), hialuronato de potássio, hialuronato de magnésio, hialuronato de cálcio e combinações dos mesmos. Tanto HA quanto sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo podem ser usados nessa invenção.

[0036] Geralmente, a concentração de HA em algumas das presentes composições é cerca de 10,0 mg/g até cerca de 17,0 mg/g. Em algumas modalidades, a concentração de HA é menor do que cerca de 17,0 mg/g, por exemplo, menos do que cerca de 15,0 mg/g. Em algumas modalidades, a concentração de HA é entre cerca de 10,0 mg/g e cerca de 14,0 mg/g. Em algumas modalidades, a concentração de HA é cerca de 10,0 mg/g, cerca de 11,0 mg/g, cerca de 12,0 mg/g, cerca de 13,0 mg/g ou cerca de 14,0 mg/g.

[0037] Algumas das composições da invenção incluem agentes adicionais, por exemplo, agentes anestésicos em uma quantidade eficaz para mitigar dor experimentada mediante a injeção da composição. O agente anestésico pode ser selecionado dentre o grupo de ambucaína, amolanona, amilocaína, benoxinato, benzocaína, betoxicaína, bifenamina, bupivacaína, butacaína, butambeno, butanilicaína, butetamina, butoxicaína, carticaína, cloroprocaína, cocaetileno, cocaína, ciclometicaína, dibucaína, dimetisoquina, dimetocaína, diperodon, diciclomina, ecgonidina, ecgonina, cloreto de etila, etidocaína, beta- eucaína, euprocina, fenalcomina, formocaína, hexilcaína, hidroxitetracaína, p-aminobenzoato de isobutila, mesilato de leucinocaína, levoxadrol, lidocaína, mepivacaína, meprilcaína, metabutoxicaína, cloreto de metila, mirtecaína, naepaína, octocaína, ortocaína, oxetazaína, paretoxicaína, fenacaína, fenol, piperocaína, piridocaína, polidocanol, pramoxina, prilocaína, procaína, propanocaína, proparacaína, propipocaína, propoxicaína, pseudococaína, pirrocaína, ropivacaína, álcool salicílico, tetracaína, tolicaína, trimecaína, zolamina e sais dos mesmos. Em uma modalidade, pelo menos um agente anestésico é lidocaína, tal como na forma de HCl de lidocaína. As composições descritas no presente documento podem ter uma concentração de lidocaína de entre cerca de 0,1% e cerca de 5% em peso da composição, por exemplo, cerca de 0,2% a cerca de 1,0% em peso da composição. Em uma modalidade, a composição tem uma concentração de lidocaína de cerca de 0,3% em peso (% em p/p) da composição.

[0038] Em algumas modalidades, as composições adicionalmente compreendem um aditivo benéfico, por exemplo, um antioxidante. Em algumas modalidades, as composições incluem, por exemplo, manitol. O manitol pode estar presente em uma quantidade de entre cerca de 0,1% em p/p a cerca de 2,0% em p/p, ou entre cerca de 0,3% a cerca de 0,9% em p/p. Em algumas modalidades, o manitol está presente em uma quantidade de menos do que, não mais do que, ou cerca de 1,0% em p/p. Em algumas modalidades, o manitol está presente em uma quantidade de cerca de 0,9% em p/p. Em outras modalidades, o manitol está presente em uma quantidade de cerca de 0,1% em p/p, ou cerca de 0,2% em p/p, ou cerca de 0,3% em p/p, ou cerca de 0,4% em p/p, ou cerca de 0,5% em p/p, ou cerca de 0,6% em p/p, ou cerca de 0,7% em p/p, ou cerca de 0,8% em p/p, ou cerca de 0,9% em p/p, ou cerca de 1,0% em p/p. Em outras modalidades, o manitol está presente em uma quantidade maior do que cerca de 1,0% em p/p. Em algumas modalidades, o manitol está presente em uma quantidade de entre cerca de 1,0% em p/p a cerca de 5,0% em p/p.

[0039] Em algumas modalidades, as composições adicionalmente compreendem uma vitamina, por exemplo, Vitamina C. Em uma modalidade mais preferencial, a vitamina é um derivado ou uma forma estabilizada de Vitamina C, por exemplo, ácido ascórbico 2-glucosídeo. A vitamina pode estar presente em uma quantidade de entre cerca de 0,1% a cerca de 2,0% em p/p, ou entre cerca de 0,2% e cerca de 1,0% em p/p, ou entre cerca de 0,3% a cerca de 0,6% em p/p. Em algumas modalidades, a Vitamina C está presente em uma quantidade de cerca de 0,6% em p/p. Em outras modalidades, o derivado de vitamina C está presente em uma quantidade de cerca de 0,1% em p/p, ou cerca de 0,2% em p/p, ou cerca de 0,3% em p/p, ou cerca de 0,4% em p/p, ou cerca de 0,5% em p/p, ou cerca de 0,6% em p/p, ou cerca de 0,7% em p/p, ou cerca de 0,8% em p/p, ou cerca de 0,9% em p/p, ou cerca de 1,0% em p/p. Em outras modalidades, o derivado de vitamina C está presente em uma quantidade maior do que 1,0%. Em algumas modalidades, o derivado de vitamina C está presente em uma quantidade de entre cerca de 1,0% em p/p a cerca de 5,0% em p/p.

[0040] Em algumas modalidades, as composições adicionalmente compreendem uma combinação de manitol e ácido ascórbico 2-glucosídeo. Em algumas dessas modalidades, o manitol está presente em uma quantidade não maior do que 1,0% em p/p, por exemplo, 0,9% em p/p e o ácido ascórbico 2- glucosídeo está presente em uma quantidade de cerca de 0,6% em p/p.

[0041] Em algumas modalidades, as composições não incluem um antioxidante ou uma vitamina. Por exemplo, em algumas modalidades, as composições compreendem ou consistem essencialmente em ácido hialurônico reticulado com um agente de reticulação e água. Essas composições podem ou não incluir um agente anestésico tal como lidocaína.

[0042] Os presentes produtos e composições são preferencialmente fornecidos em uma forma estéril. As composições podem ser esterilizadas usando métodos convencionais, por exemplo, autoclavagem. Por exemplo, as composições podem ser esterilizadas expondo-se as composições a temperaturas de pelo menos cerca de 120 °C a cerca de 130 °C e/ou pressões de pelo menos cerca de 82,74 kPa (12 libras por polegada quadrada(PSI)) a cerca de 137,9 kPa (20 PSI)por um período de pelo menos cerca de 1 minuto a cerca de 15 minutos.

[0043] O método para fazer a composição compreende as etapas de fornecer material de HA bruto na forma de fibras ou pó de HA seco. O material de HA bruto pode ser HA, seus sais e/ou misturas dos mesmos. Em uma modalidade preferencial, o material de HA compreende fibras ou pó de NaHA, por exemplo, fibras de NaHA de origem bacteriana. Em alguns aspectos da presente descrição, o material de HA pode ser derivado de animal. O material de HA pode ser uma combinação de materiais brutos que incluem HA e pelo menos um outro polissacarídeo, por exemplo, glicosaminoglicano (GAG).

[0044] Em um aspecto amplo da invenção, o material de HA das composições pode compreender uma matriz de HA reticulado feita com entre cerca de 5% a cerca de 95% de HA de baixo peso molecular com o saldo do material de HA incluindo o HA de alto peso molecular.

[0045] Em algumas modalidades da invenção, o material de HA usado para fazer as presentes composições quase completamente compreende ou consiste em HA de baixo peso molecular. Em algumas modalidades, quase 100% do material de HA usado para fazer as presentes composições pode ser HA de baixo peso molecular conforme definido acima. Em outras modalidades, o material de HA usado para fazer as composições compreende uma combinação do HA de peso molecular relativamente alto e do HA de peso molecular relativamente baixo, conforme definido acima. Em certas modalidades, pelo menos cerca de 50% em p/p, por exemplo, pelo menos cerca de 70% em p/p, por exemplo, pelo menos cerca de 90% em p/p ou mais do material de HA nas composições é um HA de baixo peso molecular conforme definido acima, sendo que a porção restante de HA é o HA de alto peso molecular. Em uma modalidade, as composições são feitas usando uma razão de 90:10 de HA de baixo peso molecular para o HA de alto peso molecular. Ou seja, as composições dessas modalidades são feitas com uma combinação de HA de alto e baixo peso molecular, sendo que cerca de 90% em p/p do HA é o HA de baixo peso molecular.

[0046] Em uma modalidade, as fibras de NaHA secas e puras são hidratadas em uma solução alcalina para produzir um gel de NaHA não reticulado. Qualquer solução alcalina adequada pode ser usada para hidratar o NaHA nessa etapa, por exemplo, mas não limitado a soluções aquosas que contêm hidróxido de sódio (NaOH), hidróxido de potássio (KOH), bicarbonato de sódio (NaHCO3), hidróxido de lítio (LiOH) e semelhantes. Em outra modalidade, a solução alcalina adequada são soluções aquosas que contêm NaOH. O gel alcalino resultante terá um pH acima de 7,5. O pH do gel alcalino resultante pode ter um pH maior do que 9, ou um pH maior do que 10, ou um pH maior do que 11, ou um pH maior do que 12, ou um pH maior do que 13.

[0047] A próxima etapa no processo de fabricação envolve a etapa de reticular o gel de NaHA alcalino hidratado com um agente de reticulação adequado. O agente de reticulação pode ser qualquer agente conhecido como sendo adequado para reticular polissacarídeos e seus derivados por meio de seus grupos hidroxila. Os agentes de reticulação adequados incluem, mas não limitadamente, 1,4- butanediol diglicidil éter (ou 1,4-bis(2,3- epoxipropoxi)butano ou 1,4-bisglicidiloxibutano, todos os quais são comumente conhecidos como BDDE), 1,2-bis(2,3- epoxipropoxi)etileno e 1-(2,3-epoxipropil)-2,3- epoxiciclohexano. O uso de mais do que um agente de reticulação ou um agente de reticulação diferente não é excluído do escopo da presente revelação. Em uma modalidade, os géis de HA descritos no presente documento são reticulados usando BDDE.

[0048] A etapa de reticulação pode ser realizada usando qualquer meio conhecido por pessoas de habilidade comum na técnica. As pessoas versadas na técnica apreciam como otimizar as condições de reticulação de acordo com a natureza do HA, e como realizar uma reticulação em um grau otimizado.

[0049] Em outra modalidade, a reticulação do HA é cumprida durante a hidratação das fibras de HA, hidratando- se as fibras de alto e baixo peso molecular combinadas em uma solução alcalina que contém um agente de reticulação, por exemplo, BDDE.

[0050] O grau de reticulação no componente de HA das presentes composições é pelo menos cerca de 1% e é até cerca de 20% de BDDE/HA, peso em peso, por exemplo, entre cerca de 4% e cerca de 12% em p/p, por exemplo, cerca de 10% em p/p, por exemplo, cerca de 8% em p/p, por exemplo, cerca de 6% em p/p, por exemplo, cerca de 5% em p/p, por exemplo, cerca de 4% em p/p.

[0051] Os géis de HA reticulados hidratados pode ser inchado para obter a concentração de HA desejada. Essa etapa pode ser cumprida neutralizando-se o gel de HA hidratado reticulado, por exemplo, adicionando-se uma solução aquosa que contém um ácido, tal como HCl. Os géis são então inchados em uma solução de salmoura tamponada de fosfato (PBS).

[0052] Os géis podem ser purificados por meios convencionais tais como, diálise contra um tampão de fosfato, ou precipitação de álcool, para recuperar o material reticulado, a fim de estabilizar o pH do material e a fim de remover qualquer agente de reticulação não reagido. As composições são misturadas para alcançar homogeneidade. Preferencialmente, a etapa de homogeneização compreende misturar, agitar ou bater os géis com uma força de cisalhamento controlada obtendo misturas substancialmente homogêneas. Em algumas modalidades, durante ou após a misturação, um tampão de fosfato é adicionado para alcançar a concentração desejada de HA na composição final.

[0053] Em algumas modalidades, lidocaína (por exemplo, na forma de HCl de lidocaína), ou outro anestésico adequado, é adicionado às composições. Por exemplo, o pH do gel de pH substancialmente neutro purificado é ajustado para fazer com que o gel se torne levemente alcalino de maneira que os géis têm um pH maior do que cerca de 7,2, por exemplo, cerca de 7,5 a cerca de 8,0. Alternativamente, o gel é ajustado para fazer com que o gel se torne alcalino de maneira que os géis têm um pH maior do que cerca de 9, por exemplo, cerca de 10,0 a cerca de 11,0. Essa etapa pode ser cumprida por qualquer meio adequado, por exemplo, adicionando-se aos géis uma quantidade adequada de NaOH, KOH, NaHCO3 ou LiOH diluídos, ou qualquer outra molécula, solução e/ou composição de tamponamento alcalina conhecida por uma pessoa versada na técnica. Por exemplo, em algumas modalidades, o HCl de lidocaína é fornecido em uma forma de pó que é solubilizado usando água para injeção (WFI). A lidocaína é então adicionada ao gel (levemente) alcalino. O HA não reticulado pode então ser adicionado ao gel que contém lidocaína, se desejado. Por exemplo, em uma modalidade, a concentração de HA desejada é cerca de 12,0 mg/g. As composições que incluem lidocaína podem ter uma concentração de lidocaína de entre cerca de 0,1% e cerca de 5% em peso da composição, por exemplo, cerca de 0,3% em peso (ou peso em peso), com base no peso total da composição. As composições que incluem HA não reticulado podem ter uma concentração de HA não reticulado de menos do que 10% em p/p ou menos do que 5% em p/p tal como preferencialmente entre cerca de 0,5% e cerca de 1,5% em peso da composição, por exemplo, cerca de 0,9 a 1,0%, com base no peso total da composição. O HA não reticulado tem preferencialmente um alto peso molecular.

[0054] As composições são introduzidas em dispositivos de entrega, por exemplo, seringas. As seringas úteis de acordo com a presente descrição incluem qualquer seringa conhecida na técnica capaz de entregar composições de carga dérmica viscosas. As seringas podem ter um volume interno de cerca de 0,4 ml a cerca de 3 ml, entre cerca de 0,5 ml e cerca de 1,5 ml ou entre cerca de 0,8 ml e cerca de 1,0 ml.

[0055] Em outras modalidades, as composições são introduzidas em dispositivos de injeção adequados para entregar as composições usando múltiplas injeções de microdeposição, em superfícies superficiais relativamente rasas da pele.

[0056] Os calibres de agulhas usadas para entregar as presentes composições incluem calibres de entre cerca de 18G e cerca de 40G. Em algumas modalidades, as agulhas para entregar as composições têm entre cerca de 25 G a cerca de 33 G tal como entre cerca de 31 G a cerca de 33 G ou cerca de 32 G a cerca de 33 G. Em algumas modalidades, as composições são entregues usando uma agulha que tem um calibre de 28 G, 29 G, 30 G, 32 G ou 33 G.

[0057] Em outro aspecto da invenção, os métodos para tratar a pele usando as presentes composições são fornecidos. Por exemplo, os métodos para aprimorar uma ou mais qualidades de pele, ou aprimorar aparência ou textura de pele, são fornecidos.

[0058] Em um aspecto, os métodos para tratar secura, textura ou aspereza e/ou elasticidade em pele são fornecidos. Os métodos geralmente compreendem tratar uma área de pele introduzindo-se, na área, múltiplas injeções separadas de uma composição que compreende um gel de ácido hialurônico (HA) que contém HA reticulado, em que a pele tratada mantém uma hidratação aprimorada, uma textura mais suave ou elasticidade aumentada, devido ao tratamento por uma duração estendida, por exemplo, por pelo menos cerca de 3 meses a cerca de um ano ou mais.

[0059] Em uma modalidade particularmente vantajosa, a etapa de introduzir é realizada em apenas uma única sessão de tratamento, e através disso elimina a necessidade por tratamentos repetidos para manter a duração de efeito.

[0060] Em um aspecto da invenção, um método para tratar a pele é fornecido que compreende introduzir a composição na pele durante uma sessão de tratamento que compreende múltiplas injeções da composição em uma região da pele.

[0061] Em uma modalidade, uma sessão de tratamento compreende uma única visita pelo paciente a um praticante. Durante a sessão de tratamento, múltiplas injeções na pele, por exemplo, em uma região de pele em particular, podem ser administradas.

[0062] As múltiplas injeções de uma única sessão de tratamento podem compreender, por exemplo, de 2 a cerca de 500 injeções, de cerca de 50 a cerca de 200 injeções. Em algumas modalidades, uma sessão de tratamento compreende, por exemplo, pelo menos 2 injeções, pelo menos 10 injeções, pelo menos 20 injeções, pelo menos 40 injeções, pelo menos 60 injeções, pelo menos 80 injeções, pelo menos 100 injeções, pelo menos 140 injeções, pelo menos 180 injeções, pelo menos 200 injeções, pelo menos 300 injeções, pelo menos 400 injeções pelo menos 500 injeções, ou mais, na região da pele.

[0063] Em algumas modalidades, a sessão de tratamento não leva mais do que 45 minutos, não mais do que cerca de 30 minutos, não mais do que cerca de 15 minutos ou não mais do que cerca de 10 minutos por área de tratamento. A área de tratamento é definida como uma região de pele que é tratada com as presentes composições e os presentes métodos. A área de tratamento pode compreender ou consistir em uma região de pele de pelo menos um dentre uma face, um pescoço ou um decote. A área de tratamento pode também compreender ou consistir em uma região de pele que não seja uma face, um pescoço ou um decote, por exemplo, uma região de pele no topo da mão, um joelho, um cotovelo, um antebraço, uma panturrilha, uma coxa, costas ou qualquer outra região de pele que pode ser tratada usando as presentes composições e os presentes métodos e pode ser beneficiada ou aprimorada através do mesmo.

[0064] Em algumas modalidades, a etapa de introduzir compreende introduzir a composição em injeções separadas por uma distância de entre cerca de 2 mm a cerca de 30 mm. Por exemplo, a etapa de introduzir compreende introduzir a composição em injeções separadas por uma distância de entre cerca de 5 mm a cerca de 20 mm. Em algumas modalidades, a etapa de introduzir compreende introduzir a composição em injeções separadas por uma distância de entre cerca de 10 mm a cerca de 15 mm.

[0065] Em algumas modalidades, as injeções são fornecidas em uma profundidade muito superficial na pele. Por exemplo, em algumas modalidades, as composições são introduzidas em uma profundidade de não mais do que cerca de 2.000 mícrons. Por exemplo, as injeções podem ser fornecidas em uma profundidade de cerca de 500 mícrons a cerca de 2.000 mícrons, cerca de 800 mícrons a cerca de 1.600 mícrons, cerca de 1.000 mícrons a cerca de 1.200 mícrons. Em modalidades preferenciais, as composições são introduzidas em uma profundidade de injeção de entre cerca de 0,5 mm a cerca de 5,0 mm, preferencialmente cerca de 1,0 mm a cerca de 4,0 mm, mais preferencialmente de cerca de 1,5 mm a cerca de 3,0 mm. Em uma modalidade, as injeções são introduzidas em uma quantidade de cerca de 1 μl a cerca de 200 μl, por exemplo, cerca de 5 μl a cerca de 100 μl por injeção, por exemplo, entre cerca de 20 μl a cerca de 80 μl, por exemplo, cerca de 40 μl a cerca de 60 μl por injeção. Em algumas modalidades, as injeções são introduzidas em uma quantidade de cerca de 5 μl a cerca de 500 μl por injeção, cerca de 10 μl a cerca de 400 μl, cerca de 50 μl a cerca de 200 μl, ou cerca de 100 μl por injeção.

[0066] Em algumas modalidades, as injeções são entregues através de uma agulha que tem um calibre de pelo menos 27 G, por exemplo, 28 G, 30 G ou 32 G.

[0067] Vantajosamente, o método de tratamento pode compreender ou consistir em uma única sessão de tratamento que dura uma quantidade relativamente curta de tempo. Em algumas modalidades, a sessão de tratamento que cobre a região de pele que é tratada, compreende múltiplas injeções intradérmicas na região da pele e não leva mais do que 45 minutos. Em algumas modalidades, a sessão de tratamento não leva mais do que cerca de 30 minutos. Em ainda outras modalidades, a sessão de tratamento não leva mais do que cerca de 20 minutos, ou não mais do que cerca de 15 minutos, ou não mais do que cerca de 10 minutos.

[0068] Um método para tratar aspereza em pele é também fornecido, em que o método compreende tratar uma área de pele introduzindo-se, na área, múltiplas injeções separadas de uma composição que compreende um gel de ácido hialurônico (HA) que contém HA reticulado em que a pele tratada mantém a uma textura mais suave devido ao tratamento por pelo menos cerca de 3 meses, por pelo menos cerca de 4 meses, por pelo menos cerca de 6 meses, por pelo menos cerca de 9 meses, ou por pelo menos cerca de 12 meses.

[0069] Em uma modalidade em particular, as composições da invenção compreendem uma solução fisiológica estéril do gel de ácido hialurônico (HA) de origem não animal reticulado com 1,4-Butanediol Diglicidil Éter (BDDE) a uma concentração de 12 mg/ml. As composições são úteis para tratamento de depressões superficiais de pele conforme medido através de aprimoramento de textura de pele e aprimoramento da qualidade de pele, tal como suavidade, hidratação e elasticidade, em comparação com depressões de pele superficiais não tratadas. Em uma modalidade em particular, os métodos de tratamento incluem injeções, por exemplo, injeções de depósito, na derme usando uma agulha de 32 G através da região anatômica (ou das regiões anatômicas) alvo. As regiões anatômicas alvo incluem regiões de pele da face, e regiões de pele do pescoço. O aprimoramento de aparência de pele, por exemplo, aparência reduzida de depressões, linhas finas e texturas desiguais ou ásperas em comparação com pele não tratada, pode ser nitidamente perceptível pelo paciente, e o aprimoramento pode durar por uma duração de pelo menos 4 meses, 6 meses, 9 meses ou até mesmo 12 meses, após uma única sessão de tratamento que dura apenas 45 minutos, ou apenas 30 minutos, ou apenas 20 minutos, ou apenas 15 minutos, ou menos. O aprimoramento de textura de pele pode ser avaliado usando escalas apropriadas. As medições de qualidade de pele de hidratação e elasticidade podem ser realizadas, usando instrumentação apropriada e em comparação com a referência, isto é, pele não tratada. Outros métodos de avaliação, por exemplo, FACE Q e GAIS, podem ser utilizados para avaliar a satisfação do indivíduo e do investigador, respectivamente. Em uma modalidade específica, a duração de ação do produto após o tratamento é pelo menos cerca de 4 meses, por exemplo, cerca de 6 meses.

[0070] A adição de lidocaína nas composições, em algumas modalidades, reduz dor na área de tratamento. No entanto, em algumas modalidades, as composições não incluem lidocaína, a fim de endereçar a necessidade do paciente em relação a alergia à lidocaína e sensibilidade à dor.

[0071] Outra modalidade fornece um método para aumentar pelo menos um dentre suavidade, hidratação e elasticidade em pele que compreende introduzir, em uma região da pele em uma profundidade de entre cerca de 500 mícrons e cerca de 5.000 mícrons, em uma única sessão de tratamento, múltiplas injeções separadas de uma composição que compreende um gel de ácido hialurônico (HA) que contém HA reticulado por BDDE e HA não reticulado, em que as injeções são introduzidas em uma quantidade de cerca de 5 μl a cerca de 100 μl por injeção, em que as injeções são entregues através de uma agulha que tem um calibre de 28 G a 33 G, em que as injeções são separadas por uma distância de entre cerca de 5 mm a cerca de 20 mm.

[0072] Em algumas modalidades, a região da pele mantém uma suavidade, hidratação e/ou elasticidade aumentadas devido ao tratamento por pelo menos cerca de 3 meses, cerca de 4 meses, cerca de 5 meses, cerca de 6 meses, 9 meses, 12 meses ou mais.

[0073] Em outra modalidade, é fornecida uma composição para aumentar pelo menos um dentre suavidade, hidratação e elasticidade em pele que compreende um gel de ácido hialurônico (HA) que compreende uma matriz de HA reticulado feita com um material de HA de baixo peso molecular que tem um peso molecular médio em peso de entre cerca de 400.000 Da e cerca de 800.000 Da; em que a concentração de HA da composição é de cerca de 10,0 mg/g a cerca de 14,0 mg/g; e em que a composição mantém a suavidade, hidratação e/ou elasticidade aumentadas devido ao tratamento por pelo menos cerca de 6 meses após ser introduzida na pele em uma única sessão de tratamento que compreende múltiplas injeções separadas da composição na qual as injeções são introduzidas em uma quantidade de cerca de 5 μl a cerca de 100 μl por injeção, entregues através de uma agulha que tem um calibre de 28 G a 33 G e são separadas por uma distância de entre cerca de 5 mm a cerca de 20 mm. A região de pele pode manter uma suavidade, hidratação e/ou elasticidade aumentadas devido ao tratamento por pelo menos cerca de 3 meses, cerca de 4 meses, cerca de 5 meses, cerca de 6 meses, 9 meses, 12 meses ou mais. As composições podem adicionalmente incluir pelo menos um dentre um manitol e uma Vitamina C. Em algumas modalidades, tanto manitol quanto um derivado de vitamina C estão presentes nas composições.

[0074] As composições são associadas a uma dureza de gel G’ de entre cerca de 50 a 200 Pa, tal como 100 a 150 Pa ou 120 Pa, quando medida a 0,1 Hz ou entre cerca de 100 a 300 Pa, tal como 150 a 200 Pa ou 175 Pa, quando medida a 5 Hz. O método para medir a dureza de gel é conhecido na técnica. A dureza de gel é indicativa para a maciez da carga dérmica.

[0075] As composições são adicionalmente associadas a uma viscosidade de gel G’’ de entre cerca de 10 a 100 Pa, tal como 15 a 40 Pa ou 20 Pa, quando medida a 0, 1 Hz ou entre cerca de 10 a 100 Pa, tal como 20 a 40 Pa ou 30 Pa, quando medida a 5 Hz. O método para medir a viscosidade é conhecido na técnica.

[0076] As composições também estão associadas a uma compressão de entre cerca de 5 a 20 N, tal como 10 a 15 N ou 12 N. O método para medir a compressão é conhecido na técnica. A compressão é indicativa para a resistência a deformação da carga dérmica. Geralmente, quanto menor a compressão, menor a capacidade de espalhamento da carga, isto é, a carga é então mais adequada para tratar linhas superficiais e dobras na face ou no pescoço em comparação com cargas que têm uma compressão maior que são mais adequadas para injeções mais profundas e restaurações de volume. EXEMPLO 1

[0077] O teste de degradação de radical livre permite avaliar a resistência de uma amostra de gel no sentido da degradação das cadeias de HA pelos radicais livres (uma das vias de degradação principal de HA). Os testes de degradação de radical livre foram realizados em 3 bateladas diferentes das presentes composições. Os resultados obtidos são apresentados na Tabela 1. Foi constatado que todas as medidas conformam (CVr<10%).

TABELA 1 RESULTADOS DE DEGRADAÇÃO DE RADICAL LIVRE PARA AS PRESENTES COMPOSIÇÕES

[0078] A variabilidade entre bateladas é de cerca de 3% nos 3 bateladas diferentes e o valor médio de tempo de degradação é 4985 s (Tabela 2).

TABELA 2 VARIABILIDADE ENTRE BATELADAS PARA OS TEMPOS DE DEGRADAÇÃO DAS PRESENTES COMPOSIÇÕES EXEMPLO 2

[0079] Uma mulher de 37 anos de idade se apresenta com pele facial seca e áspera devido a envelhecimento, clima seco e/ou exposição ao Sol/vento no decorrer de sua vida. O clínico administra, por microinjeções de depósito intradérmicas, as composições descritas no presente documento. O tratamento consiste em de 10 a cerca de 100 injeções rasas por região de pele, com uma agulha de 32 G/4 mm. As regiões de pele tratadas são a face, o pescoço e o decote. A sessão de tratamento, no total de todas as regiões de pele do paciente, dura cerca de 40 minutos da injeção inicial até a injeção final. Cada região de tratamento recebe uma quantidade apropriada da composição em injeções separadas. A região facial, por exemplo, recebe cerca de 2 ml a cerca de 3 ml da composição, administrada por injeções únicas rasas separadas aproximadamente a cada 10 mm até cerca de 15 mm. O pescoço é tratado com cerca de 1 ml a 2 ml da composição, as injeções separadas aproximadamente a cada 15 mm até cerca de 20 mm. Após o tratamento, as áreas da pele tratada são examinadas pelos sentidos de visão, tato e pressão. Uma avaliação fotográfica é realizada no início e no fim do tratamento. A paciente relata ao clínico que o tratamento causou apenas um desconforto mínimo. A paciente retorna para suas atividades cotidianas imediatamente após o tratamento. Em uma área pequena na pele de sua mão direita tratada, é constatado equimose, mas isso é resolvido poucos dias após a aplicação de um creme anti-inflamatório. A paciente retorna para o clínico 4 meses após o tratamento para uma avaliação de acompanhamento. Antes da visita de avaliação de acompanhamento, nenhuma injeção de cargas adicional ou nenhum tratamento de mesoterapia é realizado na paciente. Em examinação objetiva na visita de acompanhamento, o tratamento resultou em um aprimoramento na textura epidérmica, secura diminuída e brilho aprimorado da pele. Esses aprimoramentos são evidenciados em parte pela documentação fotográfica. As regiões de pele tratadas são gentilmente apalpadas e parecem ter um aumento de hidratação, flexibilidade, elasticidade e tônus. A paciente expressa um alto grau de satisfação com o tratamento por meio do término de um questionário de autoavaliação. A paciente reivindica que as áreas tratadas aprimoraram e a mesma está muito feliz com os resultados. Curiosamente, esses bons resultados são alcançados com base apenas na única sessão de tratamento, sem injeções repetidas, “complementos”, ou um tratamento de injeção adicional entre o momento da sessão de tratamento e a visita de acompanhamento. EXEMPLO 3

[0080] A hidratação das composições injetáveis nas estruturas epidérmicas e dérmicas de explantes de pele viva humana foi avaliada por medições de corneometria: Usando um Corneômetro® CM825 (COURAGE & KHAZAKA) o nível de umidade das camadas cutâneas mais externas do estrato córneo foi determinado. O princípio de ação do Corneômetro® tem como base a modificação das capacidades elétricas do detector que é projetado na forma de um condensador. A superfície da cabeça de medição, em contato com a pele, modifica sua capacidade elétrica de acordo com o nível de umidade da pele. Em D0 (=dia 0), a capacitância elétrica epidérmica expressa em AU (unidade arbitrária) é um índice da hidratação de pele. A composição a seguir de acordo com a presente revelação foi determinada:

TABELA 3

[0081] O produto foi armazenado em temperatura ambiente na duração do estudo.

[0082] O produto foi do estudo. Preparação de armazenado explante: em temperatura Em uma plastia abdominal oriunda de uma mulher caucasiana de 45 anos de idade, 9 explantes foram preparados. Os explantes foram mantidos em sobrevivência em meio de BEM (Meio de Explantes da BIO-EC) a 37°C em uma atmosfera úmida de 5% de CO2. Os explantes foram distribuídos em 3 bateladas (Nb=Número):

TABELA 4

[0083] Aplicação do produto: Os explantes da batelada C1 usados para corneometria foram tratados com 4x10 μl do produto injetável (injeção quadrada) com cada ponto de injeção separado por 0,5 cm (consulte a Figura 1). Os explantes da batelada C2 usados para corneometria foram tratados com 4x10 μl do produto injetável (injeção quadrada) com cada ponto de injeção separado por 1 cm (consulte a Figura 1). Os controles não tratados não receberam nenhum tratamento.

[0084] Corneometria: Um índice de hidratação de pele, capacitância epidérmica, foi avaliado usando o Corneômetro® CM825 (COURAGE & KHAZAKA) nos explantes em D0, D2, D7 e D9. As medições foram realizadas no centro dos explantes quadrados usando uma sonda de 1 cm de diâmetro. Dez medições são realizadas e o valor médio é calculado pelo corneômetro.

[0085] Amostragem: Em D0, três explantes da batelada T0 foram coletados e cortados em 2 partes: metade foi congelada a -80 °C e metade foi fixada em formol. Em D2, D7 e D9, 3 explantes de cada batelada foram coletados e processados da mesma maneira.

[0086] Análise estatística: A análise estatística é realizada de acordo com o teste t de estudante. O teste t de estudante dá a probabilidade “p” para duas lotes serem significativamente diferentes. A diferença entre duas bateladas é significativa se p<0,05(*), então há uma probabilidade de 95% para duas bateladas serem significativamente diferentes; ou se p<0,01(**), então há uma probabilidade de 99% para duas bateladas serem significativamente diferentes.

[0087] RESULTADOS: Medição de corneometria para cada lote (consulte também as Figuras 2 e 3):

TABELA 5: Dados de corneometria

[0088] A corneometria mostra que com o produto Pc1, os valores de corneometria são maiores em 44,0%** contra T em D2, 34,9%** contra T em D7, e 43,6%** contra T em D9. Com o produto Pc2, os valores de corneometria são maiores em 30,7%* contra T em D2, 38,6%** contra T em D7, e 41,9%** contra T em D9. (De acordo com o teste t de estudante: * significativo com p<0,05 (95%); ** significativo com p<0,01 (99%)). As composições de acordo com a presente revelação mostram uma boa atividade de hidratação independente da condição testada (4 injeções de 10 μl cada uma separada por 0,5 cm ou 1 cm para Pc1 e Pc2 respectivamente), a mesma induz um forte incremento de valores de capacitância epidérmica que aumenta a hidratação de pele. EXEMPLO 3

[0089] A hidratação de pele das composições injetáveis de acordo com a presente revelação nas estruturas epidérmicas e dérmicas de explantes de pele viva humana foi avaliada através de medições de corneometria adicionais. As composições a seguir foram determinadas:

[0090] Os produtos foram armazenados em temperatura ambiente na duração do estudo.

[0091] Preparação de explante: Para o primeiro doador, 9 explantes de 1,5 cm x 2 cm de tamanho foram preparados em uma plastia abdominal oriunda de uma mulher caucasiana de 59 anos de idade. Para o segundo doador, 9 explantes de 1,5 cm x 2 cm de tamanho foram preparados em uma plastia abdominal oriunda de uma mulher caucasiana de 42 anos de idade. Para o terceiro doador, 9 explantes de 1,5 cm x 2 cm de tamanho foram preparados em uma plastia abdominal oriunda de uma mulher caucasiana de 52 anos de idade. Para cada doador, 9 explantes foram distribuídos em 3 lotes

TABELA 7

[0092] Aplicação do produto: Em D0, 3 x 50 μl dos produtos P1 ou P2 foram injetados com uma agulha na derme dos explantes retangulares (1,5 x 2 cm). Os controles não tratados não receberam nenhum tratamento.

[0093] Metade do meio de cultura (1 ml) foi atualizado em D1, D2, D5 e D7.

[0094] Corneometria: Um índice de hidratação de pele, capacitância epidérmica, foi avaliado usando o Corneômetro® CM825 (COURAGE & KHAZAKA) nos explantes em D0, D1, D2 e D8.

[0095] RESULTADOS: Os resultados das medições de corneometria para os três doadores e expressos como uma média de três valores (consulte também as Figuras 4 e 5):

TABELA 8

[0096] Para os 3 doadores, a corneometria mostra que o produto P1 induz um aumento de 15% em D1 de valor de corneometria em comparação com D0, continua a aumentar até 18% em D2 e aumenta até % em D8. O produto P2 induz um aumento rápido de 37% de aumento de D0 para D1 e continua a aumentar de D2 a D8 para alcançar 49%. De acordo com essas condições experimentais e em comparação com a batelada em branco em D8 (TJ8), o que é posto a seguir pode ser concluído:

TABELA 9

[0097] No geral, sob as condições experimentais desse estudo, os resultados mostram que o produto de acordo com a presente revelação (P2) mostra uma hidratação de pele aprimorada no estrato córneo no dia 8 (D8) em comparação com o produto P1 e o controle não tratado T.

[0098] Embora a invenção tenha sido descrita e ilustrada com um certo grau de particularidade, é entendido que a presente revelação foi feita apenas a título de exemplo, e que inúmeras mudanças na combinação e disposição de partes, etapas e elementos podem ser reconduzidas por aqueles versados na técnica sem fugir do escopo da invenção, conforme reivindicado doravante no presente documento.

[0099] A invenção pode ser adicionalmente ilustrada pelas modalidades a seguir:

[0100] 1. Uma composição injetável útil para reduzir a aparência de depressões superficiais na pele, sendo que a composição compreende:

[0101] um gel de ácido hialurônico (HA) que compreende uma matriz de HA reticulado feita com um material de HA de baixo peso molecular que tem um peso molecular médio em peso de entre cerca de 0,20 MDa e cerca de 0,99 MDa;

[0102] em que a concentração de HA da composição é menor do que cerca de 17,0 mg/g;

[0103] em que a composição mantém a aparência reduzida de depressões superficiais na pele por pelo menos cerca de 3 meses após ser introduzida na pele.

[0104] 2. A composição do item 1 em que a composição mantém a aparência reduzida de depressões superficiais na pele por pelo menos cerca de 6 meses após ser introduzida na pele.

[0105] 3. A composição do item 1 em que a composição mantém a aparência reduzida de depressões superficiais na pele por pelo menos cerca de 9 meses após ser introduzida na pele.

[0106] 4. A composição do item 1 que adicionalmente compreende pelo menos um dentre manitol e um derivado de vitamina C.

[0107] 5. A composição do item 4 em que o manitol está presente em uma quantidade de entre cerca de 0,3% a cerca de 0,9% em p/p.

[0108] 6. A composição do item 4 em que o derivado de vitamina C é ácido ascórbico 2-glucosídeo.

[0109] 7. A composição do item 6 em que o ácido ascórbico 2-glucosídeo está presente em uma quantidade de entre cerca de 0,3% a cerca de 0,6% em p/p.

[0110] 8. A composição do item 1 que adicionalmente compreende cerca de 0,9% em p/p de manitol e cerca de 0,6% em p/p de ácido ascórbico 2-glucosídeo.

[0111] 9. A composição do item 1 em que o peso molecular médio em peso do material de HA de baixo peso molecular é entre cerca de 400.000 Da e cerca de 800.000 Da.

[0112] 10. A composição do item 1 em que a matriz de HA reticulado é reticulada com um agente de reticulação selecionado dentre o grupo que consiste em 1,4- butanediol diglicidil éter (BDDE), 1,4-bis(2,3- epoxipropoxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, 1,2-bis(2,3- epoxipropoxi)etileno e 1-(2,3-epoxipropil)-2,3- epoxiciclohexano.

[0113] 11. A composição do item 1 em que a concentração de HA é cerca de 10,0 mg/g a cerca de 14,0 mg/g.

[0114] 12. A composição do item 1 em que a concentração de HA é cerca de 12,0 mg/g.

[0115] 13. Uma composição injetável útil para reduzir a aparência de depressões superficiais na pele ou para aprimorar a qualidade de pele, sendo que a composição compreende:

[0116] um gel de ácido hialurônico (HA) que compreende uma matriz de HA reticulada;

[0117] pelo menos um dentre um manitol e um derivado de vitamina C;

[0118] em que a concentração de HA da composição é menor do que cerca de 17,0 mg/g;

[0119] em que a composição mantém a aparência reduzida de depressões superficiais na pele ou a qualidade de pele aprimorada por pelo menos cerca de 3 meses após ser introduzida na pele.

[0120] 14. A composição do item 13 em que a composição mantém a aparência reduzida de depressões superficiais na pele ou a qualidade de pele aprimorada por pelo menos cerca de 6 meses após ser introduzida na pele.

[0121] 15. A composição do item 13 em que a composição mantém a aparência reduzida de depressões superficiais na pele ou a qualidade de pele aprimorada por pelo menos cerca de 9 meses após ser introduzida na pele.

[0122] 16. A composição do item 13 em que o manitol está presente em uma quantidade de entre cerca de 0,3% a cerca de 0,9% em p/p.

[0123] 17. A composição do item 13 em que o derivado de vitamina C é ácido ascórbico 2-glucosídeo.

[0124] 18. A composição do item 17 em que o ácido ascórbico 2-glucosídeo está presente em uma quantidade de entre cerca de 0,3% a cerca de 0,6% em p/p.

[0125] 19. A composição do item 13 em que o pelo menos um dentre um manitol e um derivado de vitamina C compreende tanto manitol presente em cerca de 0,9% em p/p e um derivado de vitamina C presente em cerca de 0,6% em p/p.

[0126] 20. A composição do item 19 em que o derivado de vitamina C é ácido ascórbico 2-glucosídeo.

[0127] 21. A composição do item 13 em que a concentração de HA é cerca de 10,0 mg/g a cerca de 14,0 mg/g.

[0128] 22. A composição do item 13 em que a concentração de HA é cerca de 12,0 mg/g.

[0129] 23. Um método para aprimorar pelo menos uma dentre textura, hidratação e elasticidade de pele, sendo que o método compreende;

[0130] tratar uma área de pele introduzindo-se em uma região da pele, em uma única sessão de tratamento, múltiplas injeções separadas de uma composição que compreende um gel de ácido hialurônico (HA) que contém HA reticulado;

[0131] em que a concentração de HA da composição é menor do que cerca de 17,0 mg/g;

[0132] em que a pele tratada mantém pelo menos uma dentre uma textura, hidratação e elasticidade aprimorada devido ao tratamento por pelo menos cerca de 3 meses.

[0133] 24. O método do item 23 em que a pele tratada mantém a pelo menos uma dentre uma textura, hidratação e elasticidade aprimorada devido ao tratamento por pelo menos cerca de 6 meses.

[0134] 25. O método do item 23 em que a pele tratada mantém a pelo menos uma dentre uma textura, hidratação e elasticidade aprimorada devido ao tratamento por pelo menos cerca de 12 meses.

[0135] 26. O método do item 23 em que a concentração de HA é cerca de 10,0 mg/g a cerca de 14,0 mg/g.

[0136] 27. O método do item 23 em que a concentração de HA é cerca de 12,0 mg/g.

[0137] 28. O método do item 23 em que as injeções são separadas por uma distância de entre cerca de 5 mm a cerca de 20 mm.

[0138] 29. O método do item 23 em que as injeções são introduzidas em uma quantidade de cerca de 5 μl a cerca de 100 μl por injeção.

[0139] 30. O método do item 23 em que o tratamento não leva mais do que 45 minutos.

[0140] 31. O método do item 23 em que as injeções são entregues através de uma agulha que tem um calibre de 28 G a 33 G.

[0141] 32. O método do item 23 em que a composição que adicionalmente compreende pelo menos um dentre manitol e um derivado de vitamina C.

[0142] 33. O método do item 23 em que o manitol está presente em uma quantidade de entre cerca de 0,3% e cerca de 0,9% em p/p.

[0143] 34. O método do item 23 em que o derivado de vitamina C é ácido ascórbico 2-glucosídeo.

[0144] 35. O método do item 34 em que o ácido ascórbico 2-glucosídeo está presente em uma quantidade de entre cerca de 0,3% e cerca de 0,6% % em p/p.

[0145] 36. Um método para aumentar pelo menos um dentre suavidade, hidratação e elasticidade em pele que compreende;

[0146] introduzir, em uma região da pele em uma profundidade de entre cerca de 0,5 a cerca de 4,0 mm ou cerca de 0,5 a cerca de 5,0 mm, em uma única sessão de tratamento, múltiplas injeções separadas de uma composição que compreende um gel de ácido hialurônico (HA) que contém HA reticulado por BDDE e HA não reticulado;

[0147] em que as injeções são introduzidas em uma quantidade de cerca de 5 μl a cerca de 100 μl por injeção;

[0148] em que as injeções são entregues através de uma agulha que tem um calibre de 28 G a 33 G;

[0149] em que as injeções são separadas por uma distância de entre cerca de 5 mm a cerca de 20 mm; e

[0150] em que a região de pele mantém uma suavidade, hidratação e/ou elasticidade aumentadas devido ao tratamento por pelo menos cerca de 6 meses.

[0151] 37. O método do item 36 em que a composição adicionalmente compreende pelo menos um dentre manitol e um derivado de vitamina C.

[0152] 38. Uma composição para aumentar pelo menos um dentre suavidade, hidratação e elasticidade em pele que compreende:

[0153] um gel de ácido hialurônico (HA) que compreende uma matriz de HA reticulado feita com um material de HA de baixo peso molecular que tem um peso molecular médio em peso de entre cerca de 400.000 Da e cerca de 800.000 Da;

[0154] em que a concentração de HA da composição é de cerca de 10,0 mg/g a cerca de 14,0 mg/g; e

[0155] em que a composição mantém a suavidade, hidratação e/ou elasticidade aumentadas devido ao tratamento por pelo menos cerca de 6 meses após ser introduzida na pele em uma única sessão de tratamento que compreende múltiplas injeções separadas da composição na qual as injeções são introduzidas em uma quantidade de cerca de 5 μl a cerca de 100 μl por injeção, entregues através de uma agulha que tem um calibre de 28 G a 33 G e são separadas por uma distância de entre cerca de 5 mm a cerca de 20 mm.

[0156] 39. Composição, de acordo com a reivindicação 38, caracterizada por a composição adicionalmente compreender pelo menos um dentre manitol e um derivado de vitamina C.

Claims

1. Composição injetável para reduzir a aparência de depressões superficiais na pele CARACTERIZADA por compreender: um gel de ácido hialurônico (HA) que compreende uma matriz de HA reticulado feita com mais do que 50% em peso, pelo menos 70% em peso ou pelo menos 90% em peso de um material de HA de baixo peso molecular que tem um peso molecular médio em peso de entre 400.000 Da e 800.000 Da, com base no peso total do material de HA; em que a concentração de HA da composição é 10,0 mg/g a 12 mg/g; em que a matriz de HA reticulado é reticulada com um agente de reticulação selecionado dentre o grupo que consiste em 1,4-butanediol diglicidil éter (BDDE), 1,2- bis(2,3-epoxipropoxi)etileno e 1-(2,3- epoxipropil)-2,3- epoxiciclohexano; e em que a composição mantém a aparência reduzida de depressões superficiais na pele por pelo menos 3 meses após ser introduzida na pele.

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA por manter a aparência reduzida de depressões superficiais na pele por pelo menos 4 meses após ser introduzida na pele, preferencialmente por pelo menos 6 meses, 9 meses ou 12 meses.

3. Composição, de acordo com as reivindicações 1 ou 2, CARACTERIZADA por incluir HA não reticulado, preferencialmente em uma quantidade de menos do que 10% em p/p ou menos do que 5% em p/p, com base no peso total da composição.

4. Composição, de acordo com as reivindicações 1 a 3, CARACTERIZADA por adicionalmente compreender pelo menos um dentre manitol e um derivado de vitamina C ou adicionalmente compreender lidocaína, preferencialmente em uma quantidade de entre 0,1% e 5% em peso da composição tal como 0,3% em peso.

5. Composição, de acordo com a reivindicação 4, CARACTERIZADA por o manitol estar presente em uma quantidade de entre 0,3% a 0,9% em p/p, com base no peso total da composição.

6. Composição, de acordo com a reivindicação 4, CARACTERIZADA por o derivado de vitamina C ser ácido ascórbico 2-glucosídeo.

7. Composição, de acordo com a reivindicação 6, CARACTERIZADA por o ácido ascórbico 2-glucosídeo estar presente em uma quantidade de entre 0,3% a 0,6% em p/p, com base no peso total da composição.

8. Composição, de acordo com as reivindicações 1 a 4, CARACTERIZADA por adicionalmente compreender 0,9% em p/p de manitol e 0,6% em p/p de ácido ascórbico 2- glucosídeo, com base no peso total da composição.

9. Composição, de acordo com as reivindicações 1 a 8, CARACTERIZADA por a matriz de HA ser feita com uma combinação de HA com alto e baixo peso molecular sendo que 90% em p/p do HA é o HA de baixo peso molecular.

10. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA por o uso em um método para aprimorar pelo menos uma dentre textura, hidratação e elasticidade de pele, sendo que o método compreende: tratar uma área de pele introduzindo-se em uma região da pele, em uma única sessão de tratamento, múltiplas injeções separadas da dita composição; em que as injeções são separadas por uma distância de entre 5 mm a 20 mm tal como 5 mm ou 10 mm; em que a pele tratada mantém pelo menos uma dentre uma textura, hidratação e elasticidade aprimorada devido ao tratamento por pelo menos 3 meses.

11. Método não terapêutico para aprimorar pelo menos uma dentre textura, hidratação e elasticidade de pele CARACTERIZADO por o método compreender tratar uma área de pele introduzindo-se em uma região da pele, em uma única sessão de tratamento, múltiplas injeções separadas, da composição, conforme definido na reivindicação 1, em que as injeções são separadas por uma distância de entre 5 mm a 20 mm tal como 5 mm ou 10 mm; e em que a pele tratada mantém pelo menos uma dentre uma textura, hidratação e elasticidade aprimorada devido ao tratamento por pelo menos 3 meses.