BR112013011282B1

BR112013011282B1 - Composição de material de enchimento de tecido mole e método de preparação da mesma

Info

Publication number: BR112013011282B1
Application number: BR112013011282-4A
Authority: BR
Inventors: Pierre Lebreton
Original assignee: Allergan Industrie Sas
Priority date: 2010-11-08
Filing date: 2011-11-08
Publication date: 2019-05-14
Also published as: EP2637710B1; EP3138586A1; PT2637710T; ES2867153T3; BR112013011282A2; KR20130139305A; EP3138586B1; NZ708247A; JP2013544583A; SI2637710T1; ES2637202T3; AU2011328219B2; KR101848957B1; WO2012062775A1; HUE034824T2; NZ610346A; CA2816927C; CA2816927A1; PL2637710T3; DK3138586T3

Abstract

formulações baseadas em ácido hialurônico. são revelados aqui materiais de enchimento de tecido mole, por exemplo, materiais de enchimento dérmico e subdérmico, com base em ácidos hialurônicos com baixo peso molecular e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, e métodos de fabricação dos mesmos.

Description

DE MATERIAL DE ENCHIMENTO DE TECIDO MOLE E MÉTODO DE

PREPARAÇÃO DA MESMA [00001] A presente invenção refere-se em geral a materiais de enchimento de tecido mole injetáveis e mais especificamente se refere a materiais de enchimento dérmico e subdérmico baseados em ácido hialurônico tendo propriedades aperfeiçoadas.

[00002] A pele é composta da epiderme e da derme.

Abaixo dessas camadas situa-se a hipoderme, que não é normalmente classificada como uma camada de pele.

A hipoderme é também comumente mencionada como camada de gordura subcutânea, ou tecido subcutâneo.

A epiderme mais externa é composta de epitélio escamoso estratificado com uma membrana basal subjacente. Ela não contém vasos de sangue e é nutrida por difusão a partir da derme. O tipo principal de células que compõem a epiderme são ceratinócitos, com melanócitos e células Langherans também presentes. Esta camada de pele é responsável por manter a água no corpo e manter outros produtos químicos e patógenos prejudiciais fora.

[00003] A derme situa-se abaixo da epiderme contém diversas estruturas incluindo vasos sanguíneos, nervos, folículos de cabelo, músculo liso, glândulas tecido linfático.

derme (ou córion) tem tipicamente 3 mm de espessura é o principal componente de pele humana. É composta de uma rede de tecido conectivo, predominantemente fibrilas de colágeno que fornecem suporte e tecido elástico fornecendo flexibilidade.

Os tipos principais de células são fibroblastos, adipócitos (armazenagem de gordura) macrófagos.

A hipoderme situa-se abaixo da derme.

Sua finalidade é ligar a pele ao osso e músculo subjacentes bem

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2/34 como fornecer a mesma com vasos sanguíneos e nervos. É composta de tecido conectivo solto e elastina. Os tipos de células principais são fibroblastos, macrófagos e adipócitos. A hipoderme contém 50% de gordura do corpo. Gordura serve como enchimento e isolamento para o corpo. Ácido hialurônico (HA) é uma parte da composição da derme e é um componente principal da matriz extracelular.

[00004] Envelhecimento facial ocorre como o resultado de vários fatores: alterações inerentes na pele, efeitos de gravidade, músculos faciais atuando sobre a pele (linhas dinâmicas), perda ou deslocamento de tecido mole e perda de osso e perda de elasticidade de tecido. A pele envelhece quando a epiderme começa a afinar, fazendo com que a junção com a derme achate. O colágeno diminui quando uma pessoa envelhece e os feixes de colágenos, que fornecem turgor a pele, se tornam mais soltos e perdem a resistência. Quando a pele perde a elasticidade, é menos capaz de resistir a esticamento. Acoplado à gravidade, tração de músculo e alterações de tecido, a pele começa a enrugar. Perda de água e quebra de ligações entre as células também reduzem a função de barreira da pele, o que pode fazer com que o tamanho do poro da pele aumente.

[00005] À medida que uma pessoa envelhece, o rosto perde volume, tecido mole e gordura. A aparição de papadas e dobras é normalmente causada pela queda de tecidos faciais e dobra de áreas onde os músculos abaixo são ligados à pele. Como parte da redução em tecido mole, o rosto em envelhecimento parece mais oco.

[00006] Mais especificamente, em várias áreas faciais, como fronte, olhos, nariz, rosto médio e rosto inferior, alterações referentes a envelhecimento têm sido bem

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documentadas.	Na área	de	fronte, a	fronte e sobrancelha caem
com	o passar	do tempo,	o	que abaixa	as sobrancelhas	e	faz com
que	a pele	superior	da	pálpebra	junte. Linhas	de	fronte

aparecem quando se tenta manter as sobrancelhas e pálpebras para cima para neutralizar essas alterações. É bem sabido que os olhos são frequentemente a primeira característica facial a mostrar sinais de envelhecimento. Alterações na pele em volta dos olhos ocorrem mais cedo do que no resto do rosto uma vez que a pele é mais fina em volta dos olhos. A pele aqui contém menos glândulas e é submetida a piscar constante, estrabismo, fricção e puxão. O rosto médio envelhece quando as maçãs começam a cair, causando dobras nasolabiais. Dobras nasolabiais são as linhas que estendem a partir dos lados do nariz até os cantos da boca. Essas dobras foram tratadas com materiais de enchimento facial. Na área do nariz, à medida que uma pessoa envelhece, o nariz alonga. Causas comuns de alongamento são afinamento do tecido mole e perda de elasticidade, o que causa queda da ponta e revelação do osso, criando um novo montículo. Na área inferior do rosto, à medida que o rosto envelhece, os tecidos faciais descem. Isso resulta nas chamadas linhas de riso.

[00007] Dobras e linhas nessa área têm sido tratadas com materiais de enchimento fácil. Mais para baixo no rosto, os cantos da boca podem cair e descida das bochechas pode criar dobras frequentemente mencionadas como linhas de marionete. Além disso, papadas se formam quando as maçãs caem em volta de um ponto fixo ao longo da mandíbula onde os músculos faciais se ligam ao osso da mandíbula. Os músculos faciais continuam para baixo para dentro do pescoço como uma folha chamada o músculo platisma. Este músculo frequentemente tem aberturas no centro do pescoço, criando duas bandas.

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4/34 [00008] Vários injetáveis têm sido utilizados para recuperar a perda de tecido no rosto. No passado, colágeno injetável foi utilizado como um material de enchimento de tecido mole para preencher rugas, linhas e cicatrizes no rosto. Colágeno é uma proteína de ocorrência natural que sustenta várias partes do corpo incluindo, pele, tendões e ligamentos. Injeções de gordura têm sido utilizadas há anos para adicionar volume, preencher rugas, linhas e aumentar os lábios. Injeções de gordura envolvem tirar gordura de uma parte do corpo do paciente (abdômen, coxas ou nádegas) e injetar a mesma embaixo da pele facial.

[00009] Ácido hialurônico (HA), agora um dos componentes mais comumente utilizados de materiais de enchimento dérmico cosméticos, é introduzido em pele em envelhecimento para adicionar volume e minimizar rugas e linhas. Ácido hialurônico é um polissacarídeo solúvel em água de ocorrência natural, especificamente um glicosaminoglicano, que é um componente principal da matriz extracelular e é amplamente distribuído em tecidos de animais. A estrutura idêntica de ácido hialurônico em todas as espécies e tecidos torna esse polissacarídeo uma substância ideal para uso como um bio-material em saúde e medicina. Ácido hialurônico está presente em muitos lugares no corpo humano. Fornece volume à pele, formato aos olhos e elasticidade às articulações.

[00010] Diferente de ácido hialurônico derivado de animal, ácido hialurônico não derivado de animal é livre de proteínas de animais. Isso limita o risco de transmissões de doença baseada em animais ou desenvolvimento de reações alérgicas a proteínas de animais.

[00011] HA, também conhecido como hialuronano, tem excelente biocompatibilidade e, ao contrário de colágeno, não

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5/34 requer qualquer teste na pele antes de implantação. Além disso, HA tem a capacidade de se ligar a grandes quantidades de água, tornando o mesmo um excelente avolumador de tecidos moles.

[00012] O desenvolvimento de materiais de enchimento baseados em HA que apresenta propriedades in vivo ideais bem como capacidade de uso cirúrgico ideal provou ser difícil. Por exemplo, materiais de enchimento baseados em HA que apresentam propriedades de estabilidade desejáveis in vivo, podem ser tão altamente viscosas que injeção através de agulhas de calibre fino é difícil. Inversamente, materiais de enchimento baseados em HA que são relativamente facilmente injetados através de agulhas de calibre fino têm frequentemente propriedades de estabilidade relativamente inferiores in vivo.

[00013]		Um método de superar esse	problema é	ter
um projeto	adequado	de materiais de enchimento	baseados em	HA
reticulado.	HA	re	ticulado é formado por	reagir HA	não
reticulado	com	um	agente de reticulação sob condições	de

reação apropriadas.

[00014] É genericamente aceito que materiais de enchimento dérmicos baseado em HA tendo uma viscosidade elevada, por exemplo, aqueles que são altamente reticulados e/ou feitos de HA com elevado peso molecular e/ou tendo uma concentração elevada de HA tendem a durar mais tempo no corpo. Inversamente, é genericamente aceito que materiais de enchimento dérmico à base de HA tendo uma viscosidade baixa, por exemplo, aqueles que são mais levemente reticulados e/ou compostos de HA com baixo peso molecular e/ou têm uma concentração de HA baixa, podem ter uma duração mais curta no corpo. Naturalmente, a injeção de um material com elevada

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6/34 viscosidade através de uma agulha é relativamente mais difícil, e genericamente requer uma agulha de calibre menor (por exemplo, 21G, 23G vs 27G, 30G) do que injeção de um material de viscosidade relativamente baixa. Provou ser difícil desenvolver uma composição à base de HA que seja tanto fácil de injetar através de uma agulha de calibre alto (isto é, agulha fina) e que tem duração estendida no corpo. Surpreendentemente, muitas das composições altamente injetáveis de longa duração da presente invenção incluem uma percentagem elevada de HA de peso molecular relativamente baixo em concentrações relativamente baixas.

[00015] A presente invenção trata dessas e de outras questões por fornecer um material de enchimento dérmico à base de HA injetável que tem longevidade aumenta e é extrusável através de uma agulha fina, desse modo sendo mais confortável para o paciente durante injeção e exigindo menos visitas repetidas ao médico.

Sumário [00016] A presente invenção refere-se a materiais de enchimento de tecido molde, por exemplo, materiais de enchimento dérmico e subdérmico, com base em ácido hialurônico (HA) e sais farmaceuticamente aceitáveis de

HA, por exemplo, hialuronato de sódio (NaHA). Em algumas modalidades da invenção, composições baseadas em HA são fornecidas que incluem uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anestésico, por exemplo, porém não limitado a, lidocaína.

[00017]

As presentes composições baseadas em

HA são relativamente altamente viscosas em descanso, porém com baixa viscosidade sob taxa de cisalhamento elevada, desse modo facilitando injeção mesmo através de uma agulha fina (isto é,

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7/34 calibre elevado, por exemplo, 27G, 30G, 31G, 33G), e tem longevidade aumentada no corpo. As composições podem durar até quatro meses, seis meses, 12 meses ou mais tempo, dependendo de vários fatores como onde as composições são introduzidas no corpo. Os métodos para preparar tais composições à base de HA são também fornecidos, assim como produtos feitos por tais métodos.

[00018] Em um aspecto amplo da invenção, uma composição de material de enchimento de tecido mole é fornecida que genericamente compreende um componente de ácido hialurônico reticulado (HA) e um componente de ácido hialurônico não reticulado. O próprio componente de HA reticulado compreende uma mistura de um primeiro material de HA com baixo peso molecular e um segundo material de HA com peso molecular mais elevado. O primeiro material de HA com peso molecular tem um peso molecular relativamente baixo e o segundo material de HA com peso molecular tem um peso molecular relativamente elevado.

[00019] Genericamente, o componente de HA reticulado inclui mais de 50%, por exemplo, pelo menos 70%, por exemplo, aproximadamente 90% em peso do primeiro HA com baixo peso molecular.

[00020] O componente de HA não reticulado é um material de HA com peso molecular relativamente elevado, por exemplo, um HA tendo um peso molecular de pelo menos aproximadamente 1,0 MDa, e pode estar presente na composição

em uma	quantidade	menor	do	que aproximadamente	10%,	por
exemplo,	menor do	que	5,0%,	por exemplo, menor	do	que
aproximadamente 2,	0%,	por	exemplo, menor	do	que

aproximadamente 1,0%, por exemplo, aproximadamente 0,95 peso/peso.

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8/34 [00021] O agente de reticulação pode ser qualquer agente de reticulação apropriado, porém em uma modalidade específica, o agente de reticulação é selecionado do grupo que consiste em 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE), 1,4bis(2,3-epoxipropóxi) butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, 1,2bis(2,3-epoxipropóxi)etileno e 1-(2,3-epoxipropil)-2,3epoxiciclo-hexano e 1,4-butanodiol diglicidil éter.

[00022] Em algumas modalidades, as composições compreendem ainda pelo menos agente ativo, por exemplo, um agente anestésico combinado com o componente de HA reticulado.

[00023] O componente de HA reticulado tem uma concentração de HA total de pelo menos 10,0 mg/g. Em certas modalidades específicas, o componente de HA reticulado tem uma concentração de HA total de pelo menos aproximadamente 10,0 mg/g, por exemplo, aproximadamente 15,0 mg/g, aproximadamente 17,0 mg/g, aproximadamente 17,5 mg/g ou aproximadamente 20,0 mg/g, ou aproximadamente 25,0 mg/g.

[00024] Métodos de fazer composições de material de enchimento de tecido mole são também fornecidos. Em uma modalidade, um método de fazer uma composição de material de enchimento de tecido mole compreende genericamente as etapas de fornecer um gel de ácido hialurônico reticulado (HA) compreendendo uma mistura de um primeiro material de HA de peso molecular e um segundo material de HA diferente, por exemplo, com peso molecular mais elevado, preparar uma solução separada de um ácido hialurônico não reticulado de um peso molecular relativamente elevado e combinar o gel reticulado com uma pequena quantidade da solução não reticulada. As composições podem incluir pelo menos um agente anestésico combinado com o componente de HA reticulado. O componente de

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HA reticulado tem uma concentração de HA total de pelo menos 10 mg/g.

[00025] Em modalidades da invenção incluindo um agente anestésico, o agente pode compreender lidocaína. Em uma modalidade adicional, a quantidade do agente anestésico está presente em uma concentração entre aproximadamente 0,1% e aproximadamente 5,0% em peso da composição. Ainda em outra modalidade, o agente anestésico está presente em uma concentração entre aproximadamente 0,2% e aproximadamente 1,0% em peso da composição. Em uma modalidade, o agente anestésico é lidocaína e está presente em uma concentração de aproximadamente 0,3% em peso da composição.

[00026] Ainda em outra modalidade, a composição tem uma viscosidade complexa entre aproximadamente 50 Pa*s e aproximadamente 450 Pa*s, por exemplo, quando medido em aproximadamente 5 Hz com um reômetro utilizando uma geometria de placa/cone (4 cm/2°) a 25°C.

[00027] Em uma modalidade, o componente de HA é um gel, por exemplo, um gel hidratado, coeso. Em uma modalidade, o componente de HA é um gel de HA reticulado tendo não mais do que aproximadamente 1% a aproximadamente 10% de HA não reticulado.

[00028] Ainda em outras modalidades, o componente de HA compreende mais do que aproximadamente 10%, por exemplo, mais do que aproximadamente 15%, por exemplo, até ou maior do que aproximadamente 20% de HA não reticulado.

[00029] É adicionalmente descrito aqui uma composição de material de enchimento de tecido mole compreendendo: um componente de HA reticulado com 1,4butanodiol diglicidil éter (BDDE), o componente de HA tendo um grau de reticulação menor do que aproximadamente 5%, por

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10/34 exemplo, aproximadamente 2%, e um componente anestésico tendo uma concentração entre aproximadamente 0,1% e aproximadamente 5,0% em peso da composição de material de enchimento de tecido mole, em que o anestésico é lidocaína.

[00030] São adicionalmente descritos aqui métodos de preparar composições de material de enchimento de tecido mole, os métodos compreendendo as etapas de: fornecer um componente de HA reticulado com pelo menos um agente de reticulação selecionado do grupo que consiste em 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE), 1,4-bis(2,3-epoxipropóxi) butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, 1,2-bis(2,3-epoxipropóxi)etileno e 1-(2,3epoxipropil)-2,3-epoxiciclo-hexano e 1,4-butanodiol diglicidil éter ou combinações dos mesmos; ajustar o pH do componente de HA em um pH ajustado acima de aproximadamente 7,2; e adicionar uma solução contendo pelo menos um agente anestésico ao componente de HA tendo o pH ajustado para obter uma composição de material de enchimento baseada em HA.

[00031] Em outra modalidade, a composição é esterilizada, por exemplo, por autoclave, para formar uma composição esterilizada e em que a composição esterilizada é estável em temperatura ambiente por pelo menos aproximadamente 12 meses, por exemplo, pelo menos 18 meses, pelo menos aproximadamente 24 meses ou mais.

[00032] Ainda em outra modalidade, o pH ajustado está acima de aproximadamente 7,5. Em outra modalidade, o método compreende ainda a etapa de homogeneizar o componente de HA durante ou após a etapa de adicionar a solução contendo pelo menos um agente anestésico. Em uma modalidade adicional, a etapa de homogeneizar compreende submeter a composição à mistura com cisalhamento controlado.

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11/34 [00033] Em outra modalidade, a etapa de fornecer um componente de HA compreende fornecer material de NaHA seco e hidratar o material de NaHA seco em uma solução alcalina para obter um gel de NaHA não reticulado, alcalino. Ainda em outra modalidade, o gel de NaHA alcalino tem um pH maior do que aproximadamente 8,0. Ainda em outra modalidade o pH é maior do que aproximadamente 10.

[00034] Em uma modalidade adicional, o componente de HA compreende menos do que aproximadamente 2 0% de HA não reticulado e a porção reticulada do componente de HA tem um grau de reticulação menor do que aproximadamente 6% ou menor do que aproximadamente 5%.

[00035] É adicionalmente descrita aqui uma composição de material de enchimento de tecido mole compreendendo: um componente de ácido hialurônico reticulado (HA) compreendendo até 90% peso/peso de HA com baixo peso molecular e não mais do que aproximadamente 10% peso/peso de HA com alto peso molecular reticulado com 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE), o componente de HA reticulado tendo um grau de reticulação menor do que aproximadamente 5%, um componente anestésico como lidocaína tendo uma concentração entre aproximadamente 0,1% e aproximadamente 5,0% em peso, e menos do que 5,0% peso/peso de um componente não reticulado de HA com elevado peso molecular.

[00036] A presente invenção provê ainda métodos de preparar uma composição de material de enchimento de tecido mole. Em algumas modalidades, um método é fornecido compreendendo as etapas de: fornecer material de NaHA seco e hidratar o material de NaHA seco em uma solução alcalina para obter um gel de NaHA não reticulado, alcalino; reticular o gel de NaHA com BDDE para formar uma composição de HA alcalina

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12/34 reticulada com um grau de reticulação menor do que aproximadamente 5% e um pH acima de aproximadamente 7,2; adicionar uma solução contendo 0,3% de lidocaína HC1 ao componente de HA tendo o pH ajustado para obter a composição de material de enchimento baseado em HA; homogeneizar a composição de material de enchimento baseada em HA desse modo formando uma composição de material de enchimento baseada em HA homogeneizada; adicionar uma quantidade de um gel não reticulado HA com peso molecular elevado à composição, e esterilizar a composição de material de enchimento baseado em HA homogeneizada desse modo formando uma composição de material de enchimento baseado em HA esterilizado.

Definições [00037] Certos termos como utilizados no relatório descritivo pretendem se referir as seguintes definições, como detalhado abaixo. Onde a definição de termos se afasta do significado comumente utilizado do termo, o requerente pretende utilizar as definições fornecidas abaixo, a menos que especificamente indicado.

[00038] Autoclave estável ou estável em autoclave como utilizado aqui descreve um produto ou composição que é resistente à degradação de tal modo que o produto ou composição mantenha pelo menos um, e preferivelmente todos os seguintes aspectos após esterilização efetiva de autoclave: aparência transparente, pH, força de extrusão e/ou características reológicas, concentração de ácido hialurônico (HA), esterilidade, osmolaridade e concentração de lidocaína.

[00039] O termo aproximadamente no contexto de valores numéricos será prontamente entendido por uma pessoa versada na técnica, e preferivelmente significa que valores específicos podem ser modificados por +/- 10%. Com relação a

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13/34 pontos finais de faixas, o modificador aproximadamente significa preferivelmente que o ponto final mais baixo pode ser reduzido em 10% e o ponto final superior aumentado em 10%. Também se considera que cada valor ou faixa numérica revelada nesse pedido pode ser absoluto, isto é, que o modificador aproximadamente pode ser eliminado.

[00040] Todos os números aqui expressando peso molecular de HA devem ser entendidos como indicando o peso molecular médio ponderal (Mw) em Daltons.

[00041] O peso molecular de HA é calculado de uma medição de viscosidade intrínseca utilizando a seguinte relação Mark Houwink:

Viscosidade intrínseca (m³/kg) = 9,78 x 10^-5 x Mw^0,690 [00042] A viscosidade intrínseca é medida de acordo com o procedimento definido em European Pharmacopoeia (HA monógrafo N.° 1472, 01/2009).

[00043] HA com peso molecular elevado como utilizado aqui descreve um material de HA tendo um peso molecular de pelo menos aproximadamente 1,0 milhão de Daltons

(mw > 10⁶	Da ou 1	MDa)	até aproximadamente	4,0	MDa.	Por
exemplo, o	HA com	peso	molecular elevado	nas	presentes
composições	podem	ter	um peso molecular	na	faixa	de

aproximadamente 1,5 MDa até aproximadamente 3,0 MDa, ou o HA com elevado peso molecular pode ter um peso molecular médio ponderal de aproximadamente 2,0 MDa. Em outro exemplo, o HA com elevado peso molecular pode ter um peso molecular de aproximadamente 3,0 MDa.

[00044] HA com baixo peso molecular como utilizado aqui descreve um material de HA tendo um peso molecular menor do que aproximadamente 1,0 MDa. HA com baixo peso molecular pode ter um peso molecular entre aproximadamente 200.00 Da

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14/34 (0,2 MDa) a menos do que 1,0 MDa, por exemplo, entre aproximadamente 300.000 Da (0,3 M Da) a aproximadamente 750.000 Da (0,75 MDa), até porém não excedendo 0,99 MDa.

[00045] Preferivelmente, não há sobreposição entre a distribuição de peso molecular dos materiais de HA com baixo e elevado peso molecular.

[00046] Preferivelmente, a mistura do HA com baixo peso molecular e HA com alto peso molecular tem uma distribuição de peso molecular bimodal. A mistura também pode ter uma distribuição multimodal.

[00047] Em um aspecto da invenção, as composições compreendem HA tendo um componente com elevado peso molecular e um componente com baixo peso molecular, e o componente com elevado peso molecular tem um peso molecular médio ponderal pelo menos duas vezes o peso molecular médio ponderal do componente com baixo peso molecular.

[00048] Por exemplo, a razão de peso molecular do HA com elevado peso molecular para o HA com baixo peso molecular na composição é pelo menos 2:1.

[00049] Por exemplo, a composição de acordo com esse aspecto da invenção pode incluir um componente com baixo peso molecular tendo um peso molecular médio ponderal de aproximadamente 500.000 Da, e um componente com elevado peso molecular tendo um peso molecular médio ponderal de aproximadamente, [00050] ou pelo menos, aproximadamente 1,0 MDa.

Em outro exemplo, uma composição de acordo com a invenção pode incluir um componente com baixo peso molecular tendo um peso molecular médio ponderal de aproximadamente 800.000 Da, e um componente de elevado peso molecular tendo um peso molecular médio ponderal de aproximadamente, ou pelo menos aproximadamente, 1.6 MDa.

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Em um aspecto similar da invenção, os métodos para fazer uma composição baseada em HA são fornecidos que incluem genericamente as etapas de selecionar um material de HA com baixo peso molecular e selecionar um material de HA com elevado peso molecular tendo um peso molecular pelo menos duas vezes tão elevado quanto o peso molecular do material com baixo peso molecular, combinar esses materiais com peso molecular elevado baixo, e reticular esses materiais combinados com uma gente de reticulação apropriado.

[00052]

Grau de reticulação como utilizado aqui se refere às junções intermoleculares unindo as moléculas de polímero de HA individuais, ou correntes de monômeros, em uma estrutura permanente, ou como revelado aqui a composição de material de enchimento de tecido mole. Além disso, o grau de reticulação para fins da presente revelação é adicionalmente definido como a percentagem de razão em peso do agente de reticulação para unidades monoméricas-HA na porção reticulada da composição baseada em HA. É medido pela razão em peso de reticulador para monômeros HA (reticulador : monômeros de HA).

[00053]

HA não reticulado como utilizado aqui se refere a moléculas de polímero de HA individuais que não são reticuladas, ou são muito levemente reticuladas (grau de reticulação muito baixo). HA não reticulado permanece genericamente solúvel em água.

[00054]

Coeso como utilizado aqui é a capacidade de uma composição baseada em HA de reter seu formato e resistir à compressão. Em algumas modalidades da invenção, capacidade de coesão inclui a capacidade do gel de absorver pelo menos uma vez seu peso de água sem quebrar em pequenos pedaços de gel. A capacidade de coesão é afetada, entre outros fatores, pelo razão de peso molecular do HA não reticulado

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16/34 inicial, o grau de reticulação, a quantidade de HA não reticulado residual após reticulação ou adicionado à composição.

Descrição detalhada [00055] A presente revelação se refere genericamente a materiais de enchimento de tecido mole, por exemplo, materiais de enchimento dérmico e subdérmico injetáveis, com base em ácidos hialurônicos (HA) e sais de HA farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, hialuronato de sódio (NaHA). Em um aspecto, composições baseadas em HA descritas aqui incluem uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anestésico, por exemplo, lidocaína. As presentes composições baseadas em HA podem incluir pelo menos um agente anestésico, por exemplo, lidocaína. Os métodos de fazer essas composições são também fornecidos.

[00056] Em um aspecto da invenção, as composições mantêm pelo menos um de, ou todos dos seguintes aspectos após esterilização eficaz de autoclave e/ou armazenagem prolongada: aparência transparente, pH para uso em um paciente, força de extrusão e/ou características reológicas, concentração de HA, esterilidade, osmolaridade, e concentração de lidocaína. Os métodos ou processos de preparar tais composições baseadas em HA são também fornecidos bem como produtos feitos por tais métodos ou processos.

[00057] Como utilizado aqui, ácido hialurônico (HA) pode se referir a quaisquer dos seus ácidos de hialuronato e inclui, porém não é limitado a, hialuronato de sódio (NaHA), hialuronato de potássio, hialuronato de magnésio, hialuronato de cálcio, e combinações dos mesmos. Tanto HA como sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser utilizados na presente invenção.

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17/34 [00058] Genericamente, a concentração de HA nas composições descritas aqui é preferivelmente pelo menos 10 mg/mL, e até aproximadamente 40 mg/mL.

[00059] Em certas modalidades, a concentração de HA no componente reticulado das presentes composições não é maior do que aproximadamente 25 mg/g, por exemplo, aproximadamente 20,0 mg/g, por exemplo aproximadamente mg/g, aproximadamente

17,0 mg/g, aproximadamente 16,0 mg/g, aproximadamente

15,0 mg/g, aproximadamente

13,0 mg/g, aproximadamente

12,0 mg/g, aproximadamente

11,0 mg/g ou aproximadamente

10,0 mg/g. em uma modalidade, a concentração de HA no componente reticulado é aproximadamente 17,5 mg/g. em outra modalidade a concentração de HA no componente reticulado é 15,0 mg/g. em outra modalidade, a concentração de HA no componente reticulado é aproximadamente 25,5 mg/g.

[00060] Além disso, em modalidades com anestésicos, a concentração de um ou mais anestésicos está em uma quantidade eficaz para diminuir a dor experimentada após injeção da composição. Pelo menos um anestésico local pode ser selecionado do grupo de ambucaína, amolanona, amilocaína, benoxinato, benzocaína, bentoxicaína, bifenamina, bupivacaína, butacaína, butamben, butanilicaína, butetamina, butoxicaína, carticaína, cloroprocaína, cocaetielno, cocaína, ciclometicaína, dibucaína, dimetilsoquin, dimetocaína, diperodon, diciclonina, ecgonidina, ecgonina, cloreto de etila, etidocaína, beta-eucaína, euprocina, fenalcomina, formocaína, hexilcaína, hidroxitetracaína, p-aminobenozato de isobutila, mesilato de leucinocaína, levoxadrol, lidocaína, mepivacaína, meprilcaína, metabutoxicaína, cloreto de metila, mirtecaína, naepaína, octacaína, ortocaína, oxetazaína, paretoxicaína, fenacaína, fenol, piperocaína, piridocaína,

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18/34 polidocanol, promaxoina, prilocaína, procaína, propanocaína, proparacaína, propipocaína, propoxicaína, psuedococaína, pirrocaína, ropivacaína, propipocaína, propoxicaína, psuedococaína, pirrocaína, ropivacaína, álcool de salicila, tetracaína, tolicaína, trimecaína, zolamina, e sais dos mesmos. Em uma modalidade, pelo menos um agente anestésico é lidocaína, como na forma de lidocaína HCl . As composições descritas aqui podem ter uma concentração de lidocaína entre aproximadamente 0,1% e aproximadamente 5% em peso da composição, por exemplo, aproximadamente 0,2% a aproximadamente 1,0% em peso da composição. Em uma modalidade, a composição tem uma concentração de lidocaína de aproximadamente 0,3% em peso (% peso/peso) da composição. A concentração de lidocaína nas composições descritas aqui pode ser terapeuticamente eficaz significando que a concentração é adequada para fornecer um benefício terapêutico sem infligir dano ao paciente.

[00061]

Além disso, um método de preparar uma composição baseada em HA é fornecida em que o método compreende fornecer uma composição de precursor incluindo um gel baseado em HA reticulado, de pH substancialmente neutro, e ajustar o pH do gel para um pH maior do que aproximadamente 7,2, por exemplo, aproximadamente 7,5 a aproximadamente 8,0. O método compreende ainda a etapa de combinar uma solução contendo lidocaína, por exemplo, na forma de lidocaína HCl, com o gel levemente alcalino após o pH ter sido assim ajustado e obter uma composição baseada em HA incluindo lidocaína que é estável para autoclave.

[00062] Outro método de preparar uma composição baseada em HA contendo uma quantidade eficaz de lidocaína, genericamente compreende as etapas de: fornecer material de

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19/34

NaHA purificado, por exemplo, na forma de fibras; hidratar o material; e reticular o material hidratado com um agente de reticulação apropriado para formar um gel baseado em HA reticulado.

O método compreende ainda as etapas de neutralizar e intumescer o gel, e adicionar ao gel uma solução contendo lidocaína, preferivelmente um sal ácido de cloridrato de lidocaína, para formar um gel de lidocaína/HA.

Ainda adicionalmente, método compreende homogeneizar o gel de lidocaína/HA, adicionar uma pequena quantidade de uma solução de HA não reticulada. A composição é então embalada em seringas para dispensar. As seringas são então esterilizadas por autoclave em uma temperatura e pressão eficazes. De acordo com a presente descrição, os géis de lidocaína/HA esterilizados e embalados apresentam estabilidade aumentada em relação a composições baseadas em HA incluindo lidocaína que são feitos utilizando métodos convencionais.

[00063]	Os presentes	produtos	e composições	são
considerados como	sendo estéreis quando expostos	a
temperaturas de	pelo menos	aproximadamente 120°C	a
aproximadamente 130°C e/ou	pressões	de pelo menos
aproximadamente 12	libras por	polegada	quadrada (PSI)	a
aproximadamente 20	PSI durante	autoclave	por um período	de
pelo menos aproximadamente 1	minuto a	aproximadamente	15
minutos.
[00064]	Os presentes	produtos e	composições também
permanecem estáveis	quando armaz	enados por	longos períodos	de

tempo em temperatura ambiente. Preferivelmente, as presentes composições permanecem estáveis por um período de pelo menos aproximadamente meses, ou pelo aproximadamente dois meses, ou pelo menos aproximadamente seis menos aproximadamente 9 meses, ou pelo menos meses, ou pelo menos aproximadamente 24

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20/34 meses ou pelo menos aproximadamente 36 meses, em temperaturas de pelo menos aproximadamente 25°C. em uma modalidade específica, as composições são estáveis em uma temperatura até aproximadamente 45°C por um período de pelo menos dois meses.

[00065] O processo de fabricação inclui, em uma modalidade, a etapa inicial de fornecer material HA bruto na forma de fibras de HA ou pó. O material de HA bruto pode ser HA, seus sais e/ou misturas dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o material de HA compreende fibras ou pó de NaHA, por exemplo, fibras de NaHA de fonte bacteriana. Em alguns aspectos da presente descrição, o material de HA pode ser derivado de animal. O material de HA pode ser uma combinação de matérias primas incluindo HA e pelo menos outro polissacarídeo, por exemplo, glicosaminoglicano (GAG).

[00066] Em um aspecto amplo da invenção, o material de HA das composições pode compreender entre aproximadamente 5% e aproximadamente 95% de HA com baixo peso molecular com o restante do material de HA incluindo HA com elevado peso molecular.

[00067] Em um aspecto da invenção, o material de HA nas composições quase totalmente compreende ou consiste em HA de baixo peso molecular. Em algumas modalidades, quase 100% do material de HA nas presentes composições pode ser HA com baixo peso molecular como definido acima. Em outras modalidades, o material de HA nas composições compreende uma combinação de HA com peso molecular relativamente elevado e HA com peso molecular relativamente baixo, como definido acima. Em certas modalidades, pelo menos 50%, por exemplo, pelo menos aproximadamente 70%, por exemplo, aproximadamente 90% ou mais do material de HA nas composições é HA com baixo peso

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21/34 molecular como definido acima, com a porção restante de HA sendo HA com elevado peso molecular.

Em um aspecto da invenção, a razão de peso molecular baixo para peso molecular alto do HA nas composições é pelo menos aproximadamente 2 (peso/peso > 2), com o HA com baixo peso molecular tendo um peso molecular entre aproximadamente 0,20 MDa e não maior do que aproximadamente

0,99 MDa.

[00069]

Será reconhecido por aqueles com conhecimentos comuns na técnica que a seleção de material de HA com elevado e baixo peso molecular e suas percentagens relativas ou razões depende das características desejadas, por exemplo, força de extrusão, módulo elástico, módulo viscoso e ângulo de fase expresso como a razão de módulo viscoso para módulo elástico, coesão, etc., do produto baseado em HA final. Para informações adicionais que podem ser úteis em compreender esse e outros aspectos da presente revelação, vide Lebrton, publicação do pedido de patente US 2006/0194758, cuja revelação integral é incorporada aqui a título de referência.

[00070]

Em uma modalidade, as fibras de NaHA secas, puras são hidratadas em uma solução alcalina para produzir um gel de NaHA não reticulado. Qualquer solução alcalina apropriada pode ser utilizada para hidratar o NaHA nessa etapa, por exemplo, porém não limitado a soluções aquosas contendo hidróxido de sódio (NaOH), hidróxido de potássio (KOH), bicarbonato de sódio (NaHCO₃) , hidróxido de lítio (LiOH) e similar. Em outra modalidade, a solução alcalina apropriada é solução aquosa contendo

NaoH.

O gel alcalino resultante terá um pH acima de 7,5.

O pH do gel alcalino resultante pode ter um pH maior do que

9, ou um pH

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22/34 maior do que 10, ou um pH maior do que 12, ou um pH maior do que 13.

A próxima etapa no processo de fabricação envolve a etapa de reticular o gel de NaHA alcalino, hidratado com um agente de reticulação apropriado. O agente de reticulação pode ser qualquer gente conhecido como sendo apropriado para reticular polissacarídeos e seus derivados através de seus grupos de hidroxila. Agentes de reticulação apropriados incluem, porém não são limitados a, 1,4butadnodiol diglicidil éter (ou 1,4-bis(2,3-epoxipropóxi) butano ou

1,4-bisglicidiloxibutano, todos os quais são comumente conhecidos como BDDE), 1,2-bis(2,3-epoxipropóxi) etileno e 1-(2,3-epoxipropila)-2,3-epoxiciclo-hexano. O uso de mais de um agente de reticulação ou um agente de reticulação diferente não é excluído do escopo da presente revelação. Em um aspecto da presente revelação, os géis de HA descritos aqui são reticulados utilizando BDDE.

[00072] A etapa de reticulação pode ser realizada utilizando qualquer meio conhecido por aqueles versados na técnica. Aqueles versados na técnica reconhecem como otimizar condições de reticulação de acordo com a natureza do HA, e como realizar reticulação até um grau otimizado.

[00073] Em outra modalidade, a reticulação do HA é realizada durante hidratação das fibras de HA, por hidratar as fibras com elevado e baixo peso molecular combinadas em uma solução alcalina contendo um agente de reticulação, por exemplo, BDDE.

[00074] O grau de reticulação no componente de HA das presentes composições é pelo menos aproximadamente 1% e é até aproximadamente 20% de BDDE/HA peso/peso, por exemplo, entre aproximadamente 4% e aproximadamente 12%, por exemplo,

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23/34 aproximadamente 10%, por exemplo, aproximadamente 8%, por exemplo, aproximadamente 6%, por exemplo, aproximadamente 5%, por exemplo, aproximadamente 4%.

[00075] Os géis de HA reticulados hidratados podem ser intumescidos para obter a concentração de HA desejada. Essa etapa pode ser realizada por neutralizar o gel de HA hidratado reticulado, por exemplo, por adicionar uma solução aquosa contendo um ácido, como HCI. Os géis são então intumescidos em uma solução salina tamponada de fosfato (PBS) por um tempo suficiente e em uma baixa temperatura.

[00076] Os géis podem ser agora purificados por meio convencional como diálise contra um tampão de fosfato, ou precipitação de álcool, para recuperar o material reticulado, estabilizar o pH do material e remover qualquer agente de reticulação não reagido. Água adicional ou uma solução aquosa levemente alcalina pode ser adicionada para levar a concentração do HA na composição até uma concentração desejada. Em algumas modalidades, a concentração de HA do componente reticulado das composições é ajustado entre aproximadamente 15 mg/g e aproximadamente 20 mg/g. por exemplo, a concentração de HA da porção reticulada das composições pode ser ajustada para fornecer uma concentração de HA de aproximadamente 15 mg/g, aproximadamente 17 mg/g ou aproximadamente 20 mg/g.

[00077] O pH dos géis de HA reticulados, substancialmente de pH neutro, purificados é preferivelmente ajustado para fazer com que o gel se torne levemente alcalino de tal modo que os géis tenham um pH maior do que aproximadamente 7,2, por exemplo, aproximadamente 7,5 a aproximadamente 8,0. Essa etapa pode ser realizada por qualquer meio apropriado, por exemplo, por adicionar uma

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24/34 quantidade apropriada de NaOH diluído, KOH, NaHCO₃, ou LiOH, aos géis ou qualquer outra molécula alcalina, solução e/ou composição de tamponamento conhecida por uma pessoa versada na técnica.

[00078]

Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um anestésico local, por exemplo, lidocaína, como lidocaína HCl, é então adicionada aos géis de NaHA purificados. Por exemplo, em algumas modalidades, a lidocaína HCl é fornecida em uma forma de pó que é solubilizada utilizando água para injeção (WFI). Os géis são mantidos neutros com um tampão ou por ajuste com NaOH diluído para que a composição de lidocaína/HA final tenha um pH substancialmente neutro, desejado. Preferivelmente, as composições de material de enchimento baseadas em HA finais incluindo lidocaína terão uma concentração de lidocaína entre pelo menos aproximadamente 0,1% e aproximadamente 5%, por exemplo, aproximadamente 2% em peso da composição, ou em outro exemplo aproximadamente 0,3%.

[00079] Após a adição da lidocaína HCl, ou alternativamente, durante a adição da lidocaína HCl, os géis de HA/lidocaína, ou composições, são homogeneizados para criar géis de lidocaína/HA altamente homogêneas tendo uma consistência e estabilidade desejadas. Preferivelmente, a etapa de homogeneização compreende misturar, agitar ou bater os géis com uma força de cisalhamento controlada obtendo misturas substancialmente homogêneas.

[00080] As composições de lidocaína/HA descritas aqui exibem uma viscosidade que é dependente das propriedades da composição e a presença de pelo menos um agente anestésico. A viscosidade da composição de lidocaína/HA pode ser de aproximadamente 50 Pa*s a aproximadamente 450 Pa*s. em outras

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25/34 modalidades, a viscosidade pode ser de aproximadamente 100 Pa*s a aproximadamente 400 Pa*s, ou aproximadamente de 150 Pa*s a aproximadamente 350 Pa*s.

[00081] Em uma modalidade, após homogeneizar a composição de HA, uma quantidade de solução de HA não reticulada ou gel é adicionada à composição.

[00082] Nesse aspecto da invenção, a solução de HA não reticulada adicionada tem uma concentração de HA entre aproximadamente 10 mg/g e aproximadamente 50 mg/g, por exemplo, aproximadamente 10 mg/g, aproximadamente 20 mg/g,

aproximadamente	30	mg/g,	aproximadamente	40 mg/g,
aproximadamente	50 mg/g	. O HA	na solução não reticulada	é um
HA com elevado	peso molecular,	tendo um peso molecular de	pelo
menos aproximadamente 1,	0 MDa	até aproximadamente 4	,0 MDa,	por
exemplo, um peso molecular	de aproximadamente	1,2	MDa,
aproximadamente	1,4	MDa,	aproximadamente	1,6	MDa,
aproximadamente	1,8	MDa,	aproximadamente	2,0	MDa,
aproximadamente	2,2	MDa,	aproximadamente	2,4	MDa,
aproximadamente	2, 6	MDa,	aproximadamente	2,8	MDa,
aproximadamente	3,0	MDa,	aproximadamente	3,2	MDa,
aproximadamente	3,4	MD	aproximadamente	3,6	MDa,
aproximadamente	3,8. A solução de HA não reticulada é
adicionada ao componente de HA reticulado, para produzir	uma
composição de	material de	enchimento dérmico	tendo	uma
percentagem final em	peso	entre 0,5% e 10%	de HA	não
reticulado.
[00083;	] Por	exempl	o, fibras de HA tendo um	peso

molecular de aproximadamente 2,0 MDa são intumescidas em uma solução de tampão de fosfato para obter um gel de HA não reticulado tendo uma concentração de HA de aproximadamente 20 mg/g. Esse gel de HA não reticulado é então adicionado à

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26/34

composição de	gel	de HA reticulado	durante	uma etapa	de
mistura final	para	obter uma composição de	material	de
enchimento dérmico	tendo um gel de	HA não	reticulado	de
aproximadamente	1,0%	peso/peso.

[00084] Após adicionar o gel de HA não reticulado ao gel de HA reticulado, as composições são introduzidas em seringas e esterilizadas.

Seringas úteis de acordo com a presente descrição incluem qualquer seringa conhecida na técnica capaz de fornecer composições de material de enchimento dérmico viscoso. As seringas têm genericamente um volume interno de aproximadamente 04, mL a aproximadamente 3 mL, mais preferivelmente entre aproximadamente 0,5 mL e aproximadamente 1,5 mL ou entre aproximadamente 0,8 mL e aproximadamente 2,5 mL. Esse volume interno é associado a um diâmetro interno da seringa que desempenha um papel chave na força de extrusão necessária para injetar composições de material de enchimento dérmico de alta viscosidade. Os diâmetros internos têm genericamente aproximadamente 4 mm e aproximadamente 9 mm, mais preferivelmente de aproximadamente

4,5 mm a aproximadamente 6,5 mm ou de aproximadamente 4,5 mm a aproximadamente 8,8 mm. Além disso, a força de extrusão necessária para fornecer as composições de HA da seringa depende do calibre da agulha. Os calibres de agulhas utilizados incluem genericamente calibres entre aproximadamente 18G e aproximadamente 40G, mais preferivelmente aproximadamente 25G e aproximadamente 33G, ou de aproximadamente 2 5G a aproximadamente 30G. Uma pessoa com conhecimentos comuns na técnica pode determinar as dimensões corretas da seringa e calibre de agulha exigido para chegar a uma exigência de força de extrusão específica.

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27/34 [00085] As forças de extrusão exibidas pelas composições de HA descritas aqui utilizando as dimensões de agulha descritas acima estão em uma velocidade de injeção que é confortável para um paciente. Confortável para um paciente é utilizado para definir uma taxa de injeção que não lesione ou cause dor em excesso para um paciente após injeção no tecido mole. Uma pessoa versada na técnica reconhecerá que confortável como utilizado aqui inclui não somente conforto para o paciente, como também conforto e capacidade do médico ou técnico injetar as composições de HA. Embora certas forças de extrusão possam ser obteníveis com as composições de HA da presente descrição, uma pessoa versada na técnica entende que forças de extrusão elevada podem levar a falta de controle durante injeção e que tal falta de controle pode resultar em dor adicional para o paciente.

Forças de extrusão das presentes composições de lidocaína/HA podem ser de aproximadamente 5 N a aproximadamente

N, ou mais preferivelmente de aproximadamente 8 N a aproximadamente 15 N, quando extrusado em 13,5 mm/min. em uma seringa de 1,0 mL com uma agulha padrão de 30G^1/2.

[00086] Esterilização, como utilizado aqui compreende qualquer método conhecido na técnica para matar eficazmente ou eliminar agentes transmissíveis, preferivelmente sem alterar substancialmente ou degradar as composições de lidocaína/HA.

[00087] Um método preferível de esterilização das seringas cheias é por autoclave. Autoclave pode ser realizada por aplicar uma mistura de calor, pressão e umidade a uma amostra necessitando de esterilização. Muitas temperaturas, pressões e tempos de ciclo de esterilização, diferentes, podem ser utilizados para essa etapa. Por exemplo, as seringas

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28/34 cheias podem ser esterilizadas em uma temperatura de pelo menos aproximadamente 120°C a aproximadamente 130°C ou maior.

Umidade pode ou não ser utilizada.

A pressão aplicada está em algumas modalidades dependendo da temperatura utilizada no processo de esterilização. O ciclo de esterilização pode ser pelo menos aproximadamente 1 minuto a aproximadamente minutos ou mais.

Outro método de esterilização incorpora uso de uma espécie gasosa que é conhecida por matar ou eliminar agentes transmissíveis.

Preferivelmente, óxido de etileno é utilizado como o gás de esterilização e é conhecido na técnica como sendo útil em esterilizar dispositivos e produtos médicos.

[00089]

Um método adicional de esterilização incorpora o uso de uma fonte de irradiação que é conhecida na técnica para matar ou eliminar agentes transmissíveis .

Um feixe de irradiação é alvejado na seringa contendo composição de HA, e o comprimento de onda de energia mata ou elimina os agentes transmissíveis indesejáveis.

Energia preferível útil inclui, porém não é limitada a luz ultravioleta (UV) , irradiação gama, luz visível, microondas, ou qualquer outro comprimento de onda ou faixa de comprimentos de onda que mata ou elimina os agentes transmissíveis indesejados, preferivelmente sem alterar substancialmente ou degradar a composição de HA.

EXEMPLO 1

Fabricação de um material de enchimento macio de baixo peso molecular da invenção incluindo lidocaína molecular baixo e molecular elevado

90% das fibras de NaHA

10% de fibras de NaHA ou (razão de peso molecular ou pó tendo pó tendo um elevado para peso peso peso

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29/34 molecular baixo de 2:1) são hidratados em uma solução alcalina, por exemplo, uma solução aquosa contendo NaOH. A mistura é misturada em temperatura ambiente, aproximadamente 23°C, para formar um gel de HA alcalino substancialmente homogêneo.

[00091] Um agente de reticulação, BDDE, é diluído em uma solução aquosa e adicionado ao gel de HA alcalino. A mistura é homogeneizada por vários minutos.

[00092] A mistura de gel de HA reticulado resultante é então aquecido a aproximadamente 50°C por aproximadamente 3 horas. O material é agora um gel BDDE/HA altamente reticulado (aspecto = gel sólido). Esse gel reticulado é então neutralizado com uma solução ácida apropriada. O gel de HA neutralizado é então intumescido em um tampão de fosfato em uma temperatura fria, por exemplo, uma temperatura de aproximadamente 5°C, para obter um gel de HA altamente coeso. Nesse exemplo específico, a solução salina tamponada com fosfato contém água para injeção (WFI), fosfato de hidrogênio dissódico, e fosfato diidrogênio de sódio. Quando neutralizado e intumescido, a água absorvida pelo componente de HA reticulado está em uma razão de peso de pelo menos 1:1, e sem o gel quebrar em pedaços.

[00093] O gel de HA intumescido é então mecanicamente agitado e cheio em membranas de diálise e dialisado contra um tampão de fosfato. O gel de HA é cheio em membranas de diálise e dialisado contra um tampão de fosfato por até vários dias com alterações regulares do banho, para remover o reticulador não reagido, para estabilizar o pH próximo à neutralidade (pH = 7,2) e assegurar osmolaridade adequada do gel de HA. A osmolaridade do gel de HA resultante

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30/34 está entre aproximadamente 200 mOsmol e aproximadamente 400 mOsmol, mais preferivelmente aproximadamente 300 mOsmol.

[00094] Após diálise, o gel de HA resultante tem um pH substancialmente neutro,

7,2.

[00095] Cloridrato forma de pó é primeiramente através de um filtro de 0,2 adicionada ao gel de HA para (por exemplo, um pH entre aproximadamente 8).

A solução adicionada ao gel levemente concentração desejada final, por aproximadamente 0,3% (peso/peso).

de HA/lidocaína é então aproximadamente 7 HA é aproximadamente 24 mg/mL. Mistura para obter uma homogeneidade adequada preferivelmente aproximadamente de lidocaína (lidocaína HCl) em solubilizado em WFI e filtrado pm. Solução de NaOH diluída é atingir um pH levemente básico aproximadamente 7,5 e de lidocaína HCl é então básico para atingir uma exemplo, uma concentração de o pH resultante da mistura e a concentração de mecânica é realizada em um reator padrão equipado com um mecanismo misturador apropriado.

[00096] Uma quantidade de gel HA não reticulado é adicionada à mistura de gel de lidocaína/HA. Especificamente, fibras de HA com peso molecular elevado são intumescidas em uma solução de tampão de fosfato, para obter um gel viscoelástico homogêneo. Esse gel de HA não reticulado é então adicionado ao gel de lidocaína/HA reticulado (por exemplo, em aproximadamente 1%, peso/peso). O gel resultante é então cheio em seringas estéreis Prontas para enchimento e submetido à autoclave em temperaturas e pressões suficientes para esterilização por pelo menos aproximadamente 1 minuto.

[00097] Após autoclave, o produto de lidocaína/HA final é embalado e distribuído para médicos. O produto de lidocaína/HA submetido à autoclave tem uma viscosidade,

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31/34 capacidade de coesão, e força de extrusão que são aceitáveis. Nenhuma degradação do produto de gel de lidocaína/HA é encontrada durante teste do produto após o produto ter passado vários meses em armazenagem.

EXEMPLO 2

Fabricação de um material de enchimento macio com baixo peso molecular da invenção (sem lidocaína) [00098] 0,8 g de fibras pré-secas de hialuronato de sódio (NaHA) tendo um peso molecular de aproximadamente 0,2

MDa é pesado em um primeiro receptáculo.

[00099] 0,2 g de fibras pré-secas de NaHA, tendo um peso molecular de aproximadamente 2,4 MDa é pesado em outro receptáculo.

[00100] Os dois tipos diferentes de NaHA são combinados.

[00101] Em um receptáculo separado o agente de reticulação escolhido, 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE), é diluído em 1% de solução de hidróxido de sódio.

[00102] 6,8 g da solução de BDDE anteriormente preparada diluída até 1/100 são então adicionados às fibras de NaHA misturadas, ainda no estado sólido, e a mistura é homogeneizada mecanicamente com uma espátula. A mistura é misturada por duas horas a aproximadamente 20°C para um gel de HA alcalino substancialmente homogêneo.

[00103] A mistura é então colocada em um banho de água quente a 50°C por 2 a 3 horas, com homogeneização adicional após 15 minutos de imersão.

[00104] O polímero de HA reticulado resultante é então imerso em um tampão de fosfato (PB) para estabilizar o pH.

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32/34 [00105] O polímero de NaHA reticulado intumescido é então purificado por imersão em banhos diferentes de tampão de fosfato para remover agente de reticulação não reagido e HA.

[00106] Material de HA seco tendo um peso molecular elevado é hidratado em 1 litro de água para obter um gel de HA não reticulado. 1% desse gel de HA correspondendo à quantidade na composição final é misturado no gel de HA reticulado para fornecer uma composição de material de enchimento dérmico de acordo com a presente invenção.

[00107] O hidrogel obtido é então homogeneizado mecanicamente para assegurar a homogeneidade final, e embalado em seringas que são esterilizadas em uma autoclave.

[00108] O gel obtido é uma composição injetável de longa duração utilizando uma agulha de calibre fino (por exemplo, calibre 30 ou calibre 33) para melhorar as linhas de dobra nasolabiais no rosto.

[00109] Embora a invenção tenha sido descrita e ilustrada com certo grau de particularidade, entende-se que a presente revelação foi feita somente como exemplo, e que inúmeras alterações na combinação e arranjo de partes podem ser recorridas por aqueles versados na técnica sem se afastar do escopo da invenção, como reivindicado a seguir.

[00110] A menos que de outro modo indicado, todos os números que expressam quantidades de ingredientes, propriedades como peso molecular, condições de reação, e assim por diante utilizados no relatório descritivo e reivindicações devem ser entendidos como sendo modificados em todos os casos pelo termo aproximadamente. Por conseguinte, a menos que indicado ao contrário, os parâmetros numéricos expostos no relatório descritivo e reivindicações em anexo são

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33/34 aproximações que podem variar dependendo das propriedades desejadas que se procuram obter pela presente invenção. No mínimo, e não como tentativa para limitar a aplicação da doutrina de equivalentes ao escopo das reivindicações, cada parâmetro numérico deve pelo menos ser interpretado à luz do número de dígitos significativos reportados e por aplicar técnicas de arredondamento comuns.

[00111]

Não obstante que as faixas numéricas e parâmetros expondo o escopo amplo da invenção sejam aproximações, os valores numéricos expostos nos exemplos específicos são relatados tão precisamente quanto possível.

Qualquer valor numérico, entretanto, contém inerentemente certos erros necessariamente resultando do desvio padrão encontrado em suas medições de teste respectivas. Não obstante que as faixas numéricas e parâmetros expondo o escopo amplo da invenção sejam aproximações, os valores numéricos expostos nos exemplos específicos são reportados tão precisamente quanto possível.

Qualquer valor numérico, entretanto, inerentemente contém certos erros necessariamente resultando do desvio padrão encontrado em suas respectivas medições de teste.

Modalidades específicas reveladas aqui podem ser adicionalmente limitadas nas reivindicações usando a linguagem consistindo em ou consistindo essencialmente em.

quando utilizado nas reivindicações como depositadas ou adicionadas por emenda, o termo de transição consistindo em exclui qualquer elemento, etapa ou ingrediente não especificado nas reivindicações. O termo de transição consistindo essencialmente em limita o escopo de uma reivindicação aos materiais ou etapas especificados e aqueles que não afetam materialmente a(s) característica(s)

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34/34 e nova(s). As modalidades da invenção assim reivindicadas são inerentemente ou expressamente descritas e permitidas aqui.

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Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composição de material de enchimento de tecido mole, caracterizada por compreender:

(1) um componente de ácido hialurônico (HA) reticulado compreendendo uma mistura reticulada de (i) um primeiro material de HA com baixo peso molecular tendo um peso molecular médio ponderal entre aproximadamente 0,20 MDa e aproximadamente 0,99 MDa e (ii) um segundo material de HA com peso molecular elevado tendo um peso molecular médio ponderal entre aproximadamente 1,0 MDa e aproximadamente 4,0 MDa;

em que o peso molecular médio ponderal do segundo material de HA com peso molecular elevado é pelo menos duas vezes aquele do primeiro material de HA com baixo peso molecular;

em que os materiais de HA são ácido hialurônico ou um ou mais sais do mesmo;

em que o componente de HA reticulado tem uma concentração de HA entre aproximadamente 15,0 mg/g e aproximadamente 20,0 mg/g;

em que a mistura reticulada contém mais de 50% p/p do primeiro material de HA de baixo peso molecular; e em que a reticulação é obtida pelo uso de um agente de reticulação; e (2) uma solução de HA não reticulada que compreende entre 27 mg/g e 33 mg/g de HA não reticulado ou um sal do mesmo tendo um peso molecular médio entre 1,0 MDa e 4,0 MDa, e que está presente na composição numa quantidade de pelo menos 0,5% p/p e menos de 5,0% p/p; em que cada peso molecular médio (MW) é calculado utilizando a seguinte equação:

MW = [η/ (9.78 x 10^-5) J¹’⁴⁵

Petição 870190017028, de 19/02/2019, pág. 4/12
2/4 em que η é a viscosidade intrínseca em m³/kg do material de HA, medida de acordo com o procedimento definido em European Pharmacopoeia (HA monógrafo N.° 1472, 01/2009) .

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o HA não reticulado ou um sal do mesmo ter um peso molecular médio entre 2,0 MDa e 4,0 MDa.
3. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o peso molecular médio do primeiro material de HA de baixo peso molecular estar entre 0,5 MDa e 0,99 MDa.
4. Composição, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada por o peso molecular médio ponderal do primeiro material de HA com baixo peso molecular estar na faixa de 720 kDa a 880 kDa.
5. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por a mistura reticulada conter pelo menos 70% em peso do primeiro material de HA com baixo peso molecular.
6. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o agente de reticulação ser selecionado do grupo que consiste em 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE),

1,4-bis(2,3-epoxipropóxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, 1,2-bis(2,3-epoxipropóxi)etileno, 1-(2,3-epoxipropil)-2,3epoxiciclo-hexano e 1,4-butanodiol diglicidil éter.
7. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o componente de HA reticulado ter uma concentração na faixa de 13,5 mg/g a 16,5 mg/g.
8. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o componente de HA não reticulado estar presente em uma quantidade de pelo menos 0,5% p/p e menos de 1,0% p/p.
9. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por compreende ainda pelo menos um agente anestésico combinado com o componente de HA reticulado.

Petição 870190017028, de 19/02/2019, pág. 5/12

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10. Método de fazer uma composição de material de enchimento de tecido mole conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1-9, caracterizado por compreender as etapas de:

preparar um gel de ácido hialurônico (HA) reticulado compreendendo uma mistura reticulada de (i) um primeiro material de HA com baixo peso molecular tendo um peso molecular médio ponderal de pelo menos 0,20 MDa e menos que 1.0 MDa, e (ii) um segundo material de HA com peso molecular elevado tendo um peso molecular médio ponderal entre aproximadamente 1.0 MDa e 4.0 MDa, em que o segundo material de HA com peso molecular elevado tem um peso molecular médio ponderal de pelo menos duas vezes aquele do primeiro material com baixo peso molecular, a mistura compreendendo mais que 50% (p/p) em peso do primeiro material de HA com baixo peso molecular em que os materiais de HA são ácido hialurônico ou um ou mais sais do mesmo;

ajustar a concentração do material HA no gel de HA reticulado para uma concentração de HA entre aproximadamente 15,0 mg/g e aproximadamente 20,0 mg/g;

preparar uma solução compreendendo um material de HA não reticulado ou um sal do mesmo tendo um peso molecular médio ponderal entre 1,0 MDa e 4,0 MDa, o material de HA não reticulado ou um sal do mesmo sendo contido na solução numa concentração entre 27 mg/g e 33 mg/g; e combinar o gel com a solução para formar um composição contendo a solução em uma quantidade de pelo menos 0,5% p/p e menor que 5,0% p/p;

em que cada peso molecular médio (MW) é calculado utilizando a seguinte equação:

MW = [η/ (9.78 x 10^-5) J¹’⁴⁵

Petição 870190017028, de 19/02/2019, pág. 6/12

4/4 em que η é a viscosidade intrínseca em m³/kg do material de HA, medida de acordo com o procedimento definido em European Pharmacopoeia (HA monógrafo N.° 1472, 01/2009).
11. Método, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por a mistura reticulada compreender mais que 70% (p/p) do primeiro material de HA com baixo peso molecular.
12. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado por a mistura reticulada compreender mais que 90% (p/p) do primeiro material de HA com baixo peso molecular.
13. Método, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por compreender adicionalmente a etapa de combinar pelo menos um agente anestésico com o gel.
14. Método, de acordo com a reivindicação 13, caracterizada por a etapa de combinar pelo menos um agente anestésico com o gel ser realizada antes da etapa de combinar o gel com a solução.