BR112017011258B1 - Suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás e kit farmacêutico - Google Patents
Suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás e kit farmacêutico Download PDFInfo
- Publication number
- BR112017011258B1 BR112017011258B1 BR112017011258-2A BR112017011258A BR112017011258B1 BR 112017011258 B1 BR112017011258 B1 BR 112017011258B1 BR 112017011258 A BR112017011258 A BR 112017011258A BR 112017011258 B1 BR112017011258 B1 BR 112017011258B1
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- phosphatidyl
- microvesicles
- acid
- aqueous suspension
- histidine
- Prior art date
Links
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 title claims description 21
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 104
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 60
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 59
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 28
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims abstract description 28
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims abstract description 14
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 55
- -1 alkali metal salts Chemical class 0.000 claims description 54
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 46
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 45
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 44
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 36
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 20
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 20
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 20
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 18
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 claims description 14
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 claims description 11
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 claims description 10
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims description 10
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 claims description 9
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 8
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 8
- SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine zwitterion Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 0.000 claims description 7
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 claims description 7
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 claims description 6
- YFWHNAWEOZTIPI-DIPNUNPCSA-N 1,2-dioctadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC YFWHNAWEOZTIPI-DIPNUNPCSA-N 0.000 claims description 6
- LVNGJLRDBYCPGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-distearoylphosphatidylethanolamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP([O-])(=O)OCC[NH3+])OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC LVNGJLRDBYCPGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 1,2-palmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-sn-glycerol) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 0.000 claims description 6
- KLFKZIQAIPDJCW-HTIIIDOHSA-N Dipalmitoylphosphatidylserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KLFKZIQAIPDJCW-HTIIIDOHSA-N 0.000 claims description 6
- FVJZSBGHRPJMMA-IOLBBIBUSA-N PG(18:0/18:0) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC FVJZSBGHRPJMMA-IOLBBIBUSA-N 0.000 claims description 6
- UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N docosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WKJDWDLHIOUPPL-JSOSNVBQSA-N (2s)-2-amino-3-({[(2r)-2,3-bis(tetradecanoyloxy)propoxy](hydroxy)phosphoryl}oxy)propanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC WKJDWDLHIOUPPL-JSOSNVBQSA-N 0.000 claims description 5
- YKIOPDIXYAUOFN-UHFFFAOYSA-N 2,3-di(icosanoyloxy)propyl 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCC YKIOPDIXYAUOFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- NEZDNQCXEZDCBI-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumylethyl 2,3-di(tetradecanoyloxy)propyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC NEZDNQCXEZDCBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 229960005160 dimyristoylphosphatidylglycerol Drugs 0.000 claims description 5
- BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N ditetradecanoyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N 0.000 claims description 5
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 claims description 5
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 claims description 5
- OKLASJZQBDJAPH-UHFFFAOYSA-N (2-dodecanoyloxy-3-phosphonooxypropyl) dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCC OKLASJZQBDJAPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 1,2-di-O-myristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 0.000 claims description 4
- IBUKXRINTKQBRQ-KCKFLZCVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phospho-D-myo-inositol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O IBUKXRINTKQBRQ-KCKFLZCVSA-N 0.000 claims description 4
- IJFVSSZAOYLHEE-SSEXGKCCSA-N 1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCC IJFVSSZAOYLHEE-SSEXGKCCSA-N 0.000 claims description 4
- RHODCGQMKYNKED-SXOMAYOGSA-N 1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCC RHODCGQMKYNKED-SXOMAYOGSA-N 0.000 claims description 4
- WTBFLCSPLLEDEM-JIDRGYQWSA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC WTBFLCSPLLEDEM-JIDRGYQWSA-N 0.000 claims description 4
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 claims description 4
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 claims description 4
- RFVFQQWKPSOBED-PSXMRANNSA-N 1-myristoyl-2-palmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCC RFVFQQWKPSOBED-PSXMRANNSA-N 0.000 claims description 4
- LJARBVLDSOWRJT-UHFFFAOYSA-O 2-[2,3-di(pentadecanoyloxy)propoxy-hydroxyphosphoryl]oxyethyl-trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCC LJARBVLDSOWRJT-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 4
- ZLGYVWRJIZPQMM-HHHXNRCGSA-N 2-azaniumylethyl [(2r)-2,3-di(dodecanoyloxy)propyl] phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCC ZLGYVWRJIZPQMM-HHHXNRCGSA-N 0.000 claims description 4
- DSNRWDQKZIEDDB-GCMPNPAFSA-N [(2r)-3-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC DSNRWDQKZIEDDB-GCMPNPAFSA-N 0.000 claims description 4
- FQZQXPXKJFOAGE-KICCZPNWSA-N [(2r)-3-[hydroxy-[(5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl]oxyphosphoryl]oxy-2-octadecanoyloxypropyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)OC1C(O)C(O)C(O)[C@@H](O)C1O FQZQXPXKJFOAGE-KICCZPNWSA-N 0.000 claims description 4
- LYBDVVBIMGTZMB-HVIJGSDCSA-N [3-[hydroxy-[(2s,3r,5s,6s)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl]oxyphosphoryl]oxy-2-tetradecanoyloxypropyl] tetradecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)OC1[C@@H](O)[C@@H](O)C(O)[C@@H](O)[C@@H]1O LYBDVVBIMGTZMB-HVIJGSDCSA-N 0.000 claims description 4
- LHCZDUCPSRJDJT-UHFFFAOYSA-N dilauroyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCC LHCZDUCPSRJDJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960003724 dimyristoylphosphatidylcholine Drugs 0.000 claims description 4
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 claims description 3
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- OZSITQMWYBNPMW-GDLZYMKVSA-N 1,2-ditetradecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC OZSITQMWYBNPMW-GDLZYMKVSA-N 0.000 claims description 3
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000021357 Behenic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 claims description 3
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 claims description 3
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 claims description 3
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 claims description 3
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940116226 behenic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 3
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 claims description 3
- KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N linolenic acid Natural products CC=CCCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims description 3
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960002969 oleic acid Drugs 0.000 claims description 3
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 2
- LZLVZIFMYXDKCN-QJWFYWCHSA-N 1,2-di-O-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC LZLVZIFMYXDKCN-QJWFYWCHSA-N 0.000 claims 1
- 125000001095 phosphatidyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 abstract description 4
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 85
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 63
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 55
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 52
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 42
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 27
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 23
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 22
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 19
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 18
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 17
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 16
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 15
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 11
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 11
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 11
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 11
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 11
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 7
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 229930182480 glucuronide Natural products 0.000 description 7
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 7
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 7
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 6
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 6
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 6
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N n-pentane Natural products CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 5
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 4
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 4
- LNQHREYHFRFJAU-UHFFFAOYSA-N bis(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) pentanedioate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O LNQHREYHFRFJAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N (10S)-3c-Acetoxy-4.4.10r.13c.14t-pentamethyl-17c-((R)-1.5-dimethyl-hexen-(4)-yl)-(5tH)-Delta8-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren Natural products CC12CCC(OC(C)=O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910018503 SF6 Inorganic materials 0.000 description 3
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000003570 air Substances 0.000 description 3
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N dimethylmethane Natural products CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 3
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 3
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical class FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229940067605 phosphatidylethanolamines Drugs 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- SFZCNBIFKDRMGX-UHFFFAOYSA-N sulfur hexafluoride Chemical compound FS(F)(F)(F)(F)F SFZCNBIFKDRMGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- TXEYQDLBPFQVAA-UHFFFAOYSA-N tetrafluoromethane Chemical compound FC(F)(F)F TXEYQDLBPFQVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMBQZIIUCVWOCD-UQHLGXRBSA-N (25R)-5beta-spirostan-3beta-ol Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 GMBQZIIUCVWOCD-UQHLGXRBSA-N 0.000 description 2
- CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N (3beta,5alpha)-4,4-Dimethylcholesta-8,24-dien-3-ol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21 CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 14alpha-methylzymosterol Natural products CC12CCC(O)CC1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-lanostan Natural products C1CC2C(C)(C)C(O)CCC2(C)C2C1C1(C)CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 description 2
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N Gluanol Natural products CC(C)CC=CC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(O)C(C)(C)C4CC3 BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 2
- VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N Isobutene Chemical compound CC(C)=C VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N Lanosterol Natural products CC(CCC=C(C)C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N Nerifoliol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N Nitrous Oxide Chemical compound [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N Propene Chemical compound CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMBQZIIUCVWOCD-WWASVFFGSA-N Sarsapogenine Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@H](C)CO1 GMBQZIIUCVWOCD-WWASVFFGSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- RTMWIZOXNKJHRE-UHFFFAOYSA-N Tigogenin Natural products CC1COC2CC(C)(OC12)C3CCC4C5CCC6CC(O)CCC6(C)C5CCC34C RTMWIZOXNKJHRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 230000003113 alkalizing effect Effects 0.000 description 2
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000001273 butane Substances 0.000 description 2
- 235000013844 butane Nutrition 0.000 description 2
- MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N decan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCO MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N dihydrolanosterol Natural products CC(C)CCCC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WMIYKQLTONQJES-UHFFFAOYSA-N hexafluoroethane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)F WMIYKQLTONQJES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N isobutane Chemical compound CC(C)C NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N isopentane Chemical compound CCC(C)C QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940058690 lanosterol Drugs 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- PSGAAPLEWMOORI-PEINSRQWSA-N medroxyprogesterone acetate Chemical compound C([C@@]12C)CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@](OC(C)=O)(C(C)=O)CC[C@H]21 PSGAAPLEWMOORI-PEINSRQWSA-N 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 2
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N n-butane Chemical compound CCCC IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019407 octafluorocyclobutane Nutrition 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- KAVGMUDTWQVPDF-UHFFFAOYSA-N perflubutane Chemical class FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F KAVGMUDTWQVPDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZJIJAJXFLBMLCK-UHFFFAOYSA-N perfluorohexane Chemical class FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F ZJIJAJXFLBMLCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NJCBUSHGCBERSK-UHFFFAOYSA-N perfluoropentane Chemical class FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F NJCBUSHGCBERSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008105 phosphatidylcholines Chemical class 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 2
- 235000013849 propane Nutrition 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 229960000909 sulfur hexafluoride Drugs 0.000 description 2
- HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N tetradecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCO HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N trilaurin Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DUXYWXYOBMKGIN-UHFFFAOYSA-N trimyristin Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCC DUXYWXYOBMKGIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVNIQBQSYATKKL-UHFFFAOYSA-N tripalmitin Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PVNIQBQSYATKKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQQOAWVKVDAJOI-UHFFFAOYSA-N (2-dodecanoyloxy-3-hydroxypropyl) dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCC OQQOAWVKVDAJOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Polymers OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- HCTYOHVVRRHDTQ-SKIDARPTSA-N (2s)-2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propan-1-ol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOC[C@H](CO)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC HCTYOHVVRRHDTQ-SKIDARPTSA-N 0.000 description 1
- WPWJFABXGZAMQI-SFHVURJKSA-N (2s)-2-(hexadecanoylamino)-4-sulfanylbutanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCS WPWJFABXGZAMQI-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- NTWLPZMPTFQYQI-UHFFFAOYSA-N (3alpha)-olean-12-ene-3,23-diol Natural products C1CC(O)C(C)(CO)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C)(C)CC5C4=CCC3C21C NTWLPZMPTFQYQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSJULBMCKQTTIG-OWOJBTEDSA-N (e)-1,1,1,2,3,4,4,4-octafluorobut-2-ene Chemical compound FC(F)(F)C(/F)=C(\F)C(F)(F)F WSJULBMCKQTTIG-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- COQIQRBKEGPRSG-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-2-(trifluoromethyl)propane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F COQIQRBKEGPRSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FNVLGCVAWPSVSK-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7-tetradecafluorocycloheptane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F FNVLGCVAWPSVSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKIMETXDACNTIE-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-dodecafluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F RKIMETXDACNTIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIROQPWSJUXOJC-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6-undecafluoro-6-(trifluoromethyl)cyclohexane Chemical compound FC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F QIROQPWSJUXOJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWMJXZJISGDARB-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,5,5-decafluorocyclopentane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F PWMJXZJISGDARB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BCNXQFASJTYKDJ-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,5-nonafluoro-5-(trifluoromethyl)cyclopentane Chemical compound FC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F BCNXQFASJTYKDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CIWUYWQUYMZILR-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4-octafluoro-5,5-bis(trifluoromethyl)cyclopentane Chemical class FC(F)(F)C1(C(F)(F)F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F CIWUYWQUYMZILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZVXOHSHODRJTCP-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4-heptafluoro-4-(trifluoromethyl)cyclobutane Chemical compound FC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F ZVXOHSHODRJTCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TXGPGHBYAPBDAG-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3-hexafluoro-4,4-bis(trifluoromethyl)cyclobutane Chemical class FC(F)(F)C1(C(F)(F)F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F TXGPGHBYAPBDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YUFJLVUCHXMKKM-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3-pentafluoro-3,4,4-tris(trifluoromethyl)cyclobutane Chemical class FC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(C(F)(F)F)C(F)(F)F YUFJLVUCHXMKKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZVJOQYFQSQJDDX-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,3,3,4,4,4-octafluorobut-1-ene Chemical class FC(F)=C(F)C(F)(F)C(F)(F)F ZVJOQYFQSQJDDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LGPPATCNSOSOQH-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,3,4,4-hexafluorobuta-1,3-diene Chemical compound FC(F)=C(F)C(F)=C(F)F LGPPATCNSOSOQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JFBCSFJKETUREV-UHFFFAOYSA-N 1,2 ditetradecanoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC JFBCSFJKETUREV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GFAZGHREJPXDMH-UHFFFAOYSA-N 1,3-dipalmitoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC GFAZGHREJPXDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VXNZUUAINFGPBY-UHFFFAOYSA-N 1-Butene Chemical compound CCC=C VXNZUUAINFGPBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJLUATLTXUNBOT-UHFFFAOYSA-N 1-Hexadecylamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCN FJLUATLTXUNBOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-UHFFFAOYSA-N 2-(1,2-dihydroxyethyl)oxolane-3,4-diol Polymers OCC(O)C1OCC(O)C1O JNYAEWCLZODPBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XQPYRJIMPDBGRW-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)ethoxy]ethoxy]acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCCOCCOCC(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 XQPYRJIMPDBGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRYZPFWEZHSTHD-HEFFAWAOSA-O 2-[[(e,2s,3r)-2-formamido-3-hydroxyoctadec-4-enoxy]-hydroxyphosphoryl]oxyethyl-trimethylazanium Chemical class CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](NC=O)COP(O)(=O)OCC[N+](C)(C)C LRYZPFWEZHSTHD-HEFFAWAOSA-O 0.000 description 1
- NINCFRRECKAMLC-UHFFFAOYSA-N 24alpha-methylzymosterol acetate Natural products CC12CCC(OC(C)=O)CC1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C NINCFRRECKAMLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XIIQDZOQBSLDBF-UHFFFAOYSA-N 4-[1,3-di(hexadecanoyloxy)propan-2-yloxy]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCC(O)=O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC XIIQDZOQBSLDBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- CKDZWMVGDHGMFR-UHFFFAOYSA-N Buttersaeure-cholesterylester Natural products C12CCC3(C)C(C(C)CCCC(C)C)CCC3C2CC=C2C1(C)CCC(OC(=O)CCC)C2 CKDZWMVGDHGMFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- BHYOQNUELFTYRT-UHFFFAOYSA-N Cholesterol sulfate Natural products C1C=C2CC(OS(O)(=O)=O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 BHYOQNUELFTYRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHZGKXUYDGKKIU-UHFFFAOYSA-N Decylamine Chemical compound CCCCCCCCCCN MHZGKXUYDGKKIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N Dehydrocholesterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical compound CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- XYZZKVRWGOWVGO-UHFFFAOYSA-N Glycerol-phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.OCC(O)CO XYZZKVRWGOWVGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GCGBHJLBFAPRDB-UHFFFAOYSA-N Hederagenin Natural products CC1(C)CCC2(CCC3(C)C4CCC5C(C)(CO)C(O)CCC5(C)C4CC=C3C2C1)C(=O)O GCGBHJLBFAPRDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- REYJJPSVUYRZGE-UHFFFAOYSA-N Octadecylamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN REYJJPSVUYRZGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BBJQPKLGPMQWBU-UHFFFAOYSA-N Palmitinsaeurecholesterylester Natural products C12CCC3(C)C(C(C)CCCC(C)C)CCC3C2CC=C2C1(C)CCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C2 BBJQPKLGPMQWBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 229920000362 Polyethylene-block-poly(ethylene glycol) Polymers 0.000 description 1
- GCGBHJLBFAPRDB-KCVAUKQGSA-N Scutellaric acid Natural products CC1(C)CC[C@@]2(CC[C@@]3(C)[C@@H]4CC[C@H]5[C@@](C)(CO)[C@H](O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC=C3[C@@H]2C1)C(=O)O GCGBHJLBFAPRDB-KCVAUKQGSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- XZTUSOXSLKTKJQ-UHFFFAOYSA-N Uzarigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C1(O)CCC2C1=CC(=O)OC1 XZTUSOXSLKTKJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- GCSPRLPXTPMSTL-IBDNADADSA-N [(2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@]1([C@]2(CO)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GCSPRLPXTPMSTL-IBDNADADSA-N 0.000 description 1
- ZPVGIKNDGJGLCO-VGAMQAOUSA-N [(2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@]1([C@]2(CO)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O ZPVGIKNDGJGLCO-VGAMQAOUSA-N 0.000 description 1
- SZYSLWCAWVWFLT-UTGHZIEOSA-N [(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxolan-2-yl]methyl octadecanoate Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@]1(COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O SZYSLWCAWVWFLT-UTGHZIEOSA-N 0.000 description 1
- BQPPJGMMIYJVBR-VBGFMNGASA-N [(3s,5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-pentamethyl-17-[(2r)-6-methylhept-5-en-2-yl]-2,3,5,6,7,11,12,15,16,17-decahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] acetate Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](OC(C)=O)C(C)(C)[C@@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@]21C BQPPJGMMIYJVBR-VBGFMNGASA-N 0.000 description 1
- PUUPGXQPWDWTPH-GTPODGLVSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] 2-methylpropanoate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OC(=O)C(C)C)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 PUUPGXQPWDWTPH-GTPODGLVSA-N 0.000 description 1
- CKDZWMVGDHGMFR-GTPODGLVSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] butanoate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CCC)C1 CKDZWMVGDHGMFR-GTPODGLVSA-N 0.000 description 1
- XLLNINGEDIOQGQ-UHFFFAOYSA-N [acetyloxy(hydroxy)phosphoryl] acetate Chemical compound CC(=O)OP(O)(=O)OC(C)=O XLLNINGEDIOQGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- IAQRGUVFOMOMEM-UHFFFAOYSA-N butene Natural products CC=CC IAQRGUVFOMOMEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 1
- 125000001549 ceramide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001783 ceramides Chemical class 0.000 description 1
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 1
- 150000001784 cerebrosides Chemical class 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- XHRPOTDGOASDJS-UHFFFAOYSA-N cholesterol n-octadecanoate Natural products C12CCC3(C)C(C(C)CCCC(C)C)CCC3C2CC=C2C1(C)CCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)C2 XHRPOTDGOASDJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHYOQNUELFTYRT-DPAQBDIFSA-N cholesterol sulfate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OS(O)(=O)=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 BHYOQNUELFTYRT-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 1
- WLNARFZDISHUGS-MIXBDBMTSA-N cholesteryl hemisuccinate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OC(=O)CCC(O)=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 WLNARFZDISHUGS-MIXBDBMTSA-N 0.000 description 1
- BBJQPKLGPMQWBU-JADYGXMDSA-N cholesteryl palmitate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C1 BBJQPKLGPMQWBU-JADYGXMDSA-N 0.000 description 1
- XHRPOTDGOASDJS-XNTGVSEISA-N cholesteryl stearate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)C1 XHRPOTDGOASDJS-XNTGVSEISA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002607 contrast-enhanced ultrasound Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001924 cycloalkanes Chemical class 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 1
- RNPXCFINMKSQPQ-UHFFFAOYSA-N dicetyl hydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOP(O)(=O)OCCCCCCCCCCCCCCCC RNPXCFINMKSQPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093541 dicetylphosphate Drugs 0.000 description 1
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 1
- XZTUSOXSLKTKJQ-CESUGQOBSA-N digitoxigenin Chemical compound C1([C@H]2CC[C@]3(O)[C@H]4[C@@H]([C@]5(CC[C@H](O)C[C@H]5CC4)C)CC[C@@]32C)=CC(=O)OC1 XZTUSOXSLKTKJQ-CESUGQOBSA-N 0.000 description 1
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N dimethyl butane Natural products CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M dimethyl(dioctadecyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N dodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCO LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 description 1
- OJDWINNMESMCGK-UHFFFAOYSA-N ergosterol palmitate Natural products C12CCC3(C)C(C(C)C=CC(C)C(C)C)CCC3C2=CC=C2C1(C)CCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C2 OJDWINNMESMCGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OJDWINNMESMCGK-NXCSPJMSSA-N ergosteryl palmitate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)\C=C\[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]3C1=CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C1 OJDWINNMESMCGK-NXCSPJMSSA-N 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000005677 ethinylene group Chemical group [*:2]C#C[*:1] 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- UHUSDOQQWJGJQS-UHFFFAOYSA-N glycerol 1,2-dioctadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC UHUSDOQQWJGJQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JEJLGIQLPYYGEE-UHFFFAOYSA-N glycerol dipalmitate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC JEJLGIQLPYYGEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 150000002314 glycerols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002321 glycerophosphoglycerophosphoglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002339 glycosphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- PGOYMURMZNDHNS-MYPRUECHSA-N hederagenin Chemical compound C1C[C@H](O)[C@@](C)(CO)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C PGOYMURMZNDHNS-MYPRUECHSA-N 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- KYYWBEYKBLQSFW-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O KYYWBEYKBLQSFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWGTVKDEOPDFGW-UHFFFAOYSA-N hexadecylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[NH3+] ZWGTVKDEOPDFGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBCLXFIDEDJGCC-UHFFFAOYSA-N hexafluoro-2-butyne Chemical compound FC(F)(F)C#CC(F)(F)F WBCLXFIDEDJGCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VBZWSGALLODQNC-UHFFFAOYSA-N hexafluoroacetone Chemical compound FC(F)(F)C(=O)C(F)(F)F VBZWSGALLODQNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCDGVLDPFQMKDK-UHFFFAOYSA-N hexafluoropropylene Chemical compound FC(F)=C(F)C(F)(F)F HCDGVLDPFQMKDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEXCMMPRRBSCRG-UHFFFAOYSA-N hexasulfur Chemical compound S1SSSSS1 FEXCMMPRRBSCRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009775 high-speed stirring Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- RNYJXPUAFDFIQJ-UHFFFAOYSA-N hydron;octadecan-1-amine;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[NH3+] RNYJXPUAFDFIQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000001282 iso-butane Substances 0.000 description 1
- 235000013847 iso-butane Nutrition 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 229910052743 krypton Inorganic materials 0.000 description 1
- DNNSSWSSYDEUBZ-UHFFFAOYSA-N krypton atom Chemical compound [Kr] DNNSSWSSYDEUBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N lanosterol Chemical compound C([C@]12C)C[C@@H](O)C(C)(C)[C@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@H]([C@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@@]21C CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- KRTSDMXIXPKRQR-AATRIKPKSA-N monocrotophos Chemical compound CNC(=O)\C=C(/C)OP(=O)(OC)OC KRTSDMXIXPKRQR-AATRIKPKSA-N 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940043348 myristyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- ZLDPNFYTUDQDMJ-UHFFFAOYSA-N n-octadecyloctadecan-1-amine;hydrobromide Chemical compound Br.CCCCCCCCCCCCCCCCCCNCCCCCCCCCCCCCCCCCC ZLDPNFYTUDQDMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 239000001272 nitrous oxide Substances 0.000 description 1
- BCCOBQSFUDVTJQ-UHFFFAOYSA-N octafluorocyclobutane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F BCCOBQSFUDVTJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004692 perflenapent Drugs 0.000 description 1
- 229960004624 perflexane Drugs 0.000 description 1
- LGUZHRODIJCVOC-UHFFFAOYSA-N perfluoroheptane Chemical class FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F LGUZHRODIJCVOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 150000008103 phosphatidic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000008106 phosphatidylserines Chemical class 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- RYVMUASDIZQXAA-UHFFFAOYSA-N pyranoside Natural products O1C2(OCC(C)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C2)C(C)C(C2(CCC3C4(C)CC5O)C)C1CC2C3CC=C4CC5OC(C(C1O)O)OC(CO)C1OC(C1OC2C(C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OCC(O)C(O)C1O RYVMUASDIZQXAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- WBHHMMIMDMUBKC-QJWNTBNXSA-M ricinoleate Chemical compound CCCCCC[C@@H](O)C\C=C/CCCCCCCC([O-])=O WBHHMMIMDMUBKC-QJWNTBNXSA-M 0.000 description 1
- 229940066675 ricinoleate Drugs 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 1
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 1
- 229950002323 smilagenin Drugs 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- POECFFCNUXZPJT-UHFFFAOYSA-M sodium;carbonic acid;hydrogen carbonate Chemical compound [Na+].OC(O)=O.OC([O-])=O POECFFCNUXZPJT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-CTQIIAAMSA-N sorbitan Polymers OCC(O)C1OCC(O)[C@@H]1O JNYAEWCLZODPBN-CTQIIAAMSA-N 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 1
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 238000012285 ultrasound imaging Methods 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 1
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/223—Microbubbles, hollow microspheres, free gas bubbles, gas microspheres
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B8/00—Diagnosis using ultrasonic, sonic or infrasonic waves
- A61B8/48—Diagnostic techniques
- A61B8/481—Diagnostic techniques involving the use of contrast agent, e.g. microbubbles introduced into the bloodstream
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/226—Solutes, emulsions, suspensions, dispersions, semi-solid forms, e.g. hydrogels
Abstract
formulação de microvesículas enchidas com gás alvejado. a presente invenção refere-se a uma suspensão de microvesículas enchidas com gás compreendendo um ligante-alvo para ligação a kdr ou complexo vegf/kdr. a suspensão é obtida através de reconstituição de um resíduo secado - congelado com uma solução contendo carboidrato na presença de um gás fisiologicamente aceitável e é estabilizada pela presença de histidina.
Description
[0001] A presente invenção refere-se a uma suspensão de microvesículas enchidas com gás alvo, a uma formulação para sua preparação e a seu uso como agente diagnóstico.
[0002] Rápido desenvolvimento de agentes de contraste nos anos recentes gerou um número de diferentes composições e formulações, que são úteis em formação de imagem de contraste aperfeiçoado de órgãos e tecidos de corpo humano ou animal assim como em seus tratamentos terapêuticos.
[0003] Uma classe de agentes de contraste, particularmente útil para formação de imagem de contraste de ultrassom, inclui suspensões de bolhas de gás de tamanho nono- e/ou micrométrico dispersas em um meio aquoso. O gás é inicialmente arrastado ou encapsulado em uma camada de filme estabilizante compreendendo, por exemplo, emulsificantes, óleos, espessantes ou açúcares. Estas bolhas de gás estabilizadas (dispersas em uma apropriada solução fisiológica) são genericamente referidas na técnica com várias terminologias, dependendo tipicamente do material estabilizante empregado para sua preparação; estes termos incluem, por exemplo, "microesferas", "microbolhas", "microcápsulas" ou "microbalões", aqui globalmente referidos como "microvesículas enchidas com gás" (ou "microvesículas").
[0004] De particular interesse são suspensões aquosas de microvesículas enchidas com gás onde as bolhas de gás estão ligadas na interface de gás / líquido por um envelope (filme) muito fino envolvendo um material anfifílico estabilizante (tipicamente um fosfolipídeo) disposto na interface de gás para líquido. Exemplos de suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás e sua preparação são mostrados, por exemplo, em US 5 271 928, US 5 445 813, US 5,413,774, US 5,556,610, 5,597,549, US 5,827,504, WO 97/29783 e WO2004/069284.
[0005] Mais recentemente, foi dada atenção para a assim chamada "formação de imagem molecular", onde apropriados componentes específicos alvo são usados na formulação dos agentes de contraste para permitir seletiva formação de imagem de aperfeiçoado contraste de órgãos ou tecidos. Exemplos de ligantes alvos incluem, por exemplo, peptídeos, proteínas, anticorpos, aptâmeros ou carboidratos capazes de ligação a específicos receptores expressos por órgãos ou tecidos durante processos patogênicos, tais como, por exemplo, angiogênese, inflamação ou formação de trombo.
[0006] Por exemplo, pedidos de patente internacionais WO 03/74005, WO 03/084574 e WO 2007/067979 descrevem peptídeos apropriados que alvejam seletivamente receptores em placas vulneráveis e receptores específicos de tumor, tais como região de domínio cinase (KDR) e complex KDR/VEGF (fator de crescimento endotelial vascular). Como descrito nestes pedidos de patente, tais peptídeos são usados para formulação de microvesículas enchidas com gás específico alvo apropriadas para ligação a KDR ou complex de KDR/VEGF.
[0007] Microvesículas enchidas com gás são tipicamente preparadas através de suspensão de uma formulação sólida (por exemplo, na forma de um resíduo pulverizado, preparado, por exemplo, por secagem - congelamento) em uma solução aquosa fisiologicamente aceitável, na presence de um gás fisiologicamente aceitável. A suspensão obtida de microvesículas enchidas com gás então pode ser administrada tipicamente através de injeção (intravenosa).
[0008] Como observado pelo requerente, a suspensão da formulação sólida na solução aquosa (também referida na técnica como "reconstituição do resíduo seco) pode representar uma etapa crítica do processo de preparação das microvesículas, e muitos parâmetros da etapa de suspensão (incluindo, por exemplo, o tipo de agente isotônico e seu pH) podem afetar as características das microvesículas nas suspensões finais.
[0009] O requerente verificou que histidina é particularmente útil como agente de ajuste de pH para preparação de suspensões de microvesículas enchidas com gás contendo peptídeo em em uma solução aquosa fisiologicamente aceitável contendo carboidrato.
[0010] Um aspecto da invenção se refere a uma suspensão de microvesículas enchidas com gás, as referidas microvesículas compreendendo um fosfolipídeo e um ligante-alvo compreendendo um peptídeo tendo uma sequência de aminoácidos selecionada de AGPTWCEDDWYYCWLFGTGGGK (SEQ ID NO. 01), VCWEDSWGGEVCFRYDPGGGK (SEQ ID NO. 02) ou uma combinação das mesmas, a referida suspensão ainda compreendendo um carboidrato e histidina.
[0011] Preferivelmente a referida microvesícula ainda compreende um ácido graxo.
[0012] Preferivelmente, o ligante-alvo está na forma de um peptídeo dimérico compreendendo uma combinação de ambas, SEQ ID NO: 01 e SEQ ID NO: 02.
[0013] Mais preferivelmente, o referido peptídeo dimérico tem a seguinte fórmula I:
[0014] Em uma modalidade preferida, o ligante-alvo está covalentemente ligado a um fosfolipídeo, preferivelmente, um fosfolipídeo peguilado.
[0015] Particularmente preferido é um ligante-alvo na forma de um lipopeptídeo de fórmula (II):
[0016] Preferivelmente o carboidrato é glicose, sucrose ou manitol, mais preferivelmente, glicose.
[0017] Um outro aspecto da invenção se refere a uma formulação precursora secada por congelamento para preparação de uma suspensão de microvesículas enchidas com gás compreendendo:
[0018] um fosfolipídeo, um ligante-alvo, histidina, opcionalmente um ácido graxo, opcionalmente um fosfolipídeo peguilado e um agente de liofilização.
[0019] Um outro aspecto da invenção se refere a um kit farmacêutico compreendendo: (a) uma formulação precursora secada com congelamento como definida acima; e (b) uma solução aquosa contendo carboidrato, para reconstituição do referido precursor.
[0020] Uma suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás tipicamente pode ser preparada através de suspensão de uma formulação precursora secada com congelamento (contendo o componente relevante para formação de microvesícula enchida com gás) em um veículo fisiologicamente aceitável na presença de um gás apropriado. Em geral, é preferível para a solução injetada seja isoosmolar, de modo que sua osmolalidade esteja dentro de faixa fisiológica de osmolalidade de sangue, tipicamente entre 285 e 310 mOsmol por kg. Como conhecido na técnica, a osmolalidade de uma solução real corresponde à molalidade de uma solução ideal contendo solutos não dissociando e é expressa em osmoles ou miliosmoles por quilograma de solvente (Osmol por kg ou mOsmol por kg, respectivamente).
[0021] Tipicamente, soluções salinas isoosmolares (por exemplo, NaCl) são a primeira escolha de veículo aquoso para reconstituição de formulação seca para obter a desejada suspensão de microvesículas para injeção. Como observado pelo requerente, veículos salinos (ou mais em geral veículos contendo eletrólito) devem, entretanto, preferivelmente ser evitados para a preparação de microvesículas contendo certos peptídeos alvos, em particular aqueles compreendendo sequências de aminoácidos ilustradas acima. Tais microvesículas enchidas com gás contendo peptídeo, formadas com suspensão com um veículo salino, de fato podem tender a agregarem-se umas às outras para formação de agregados mais ou menos estáveis que podem então reduzir a eficácia da preparação e possivelmente causarem questões de segurança, por exemplo, se o tamanho dos agregados for muito grande.
[0022] Para limitar tais fenômenos de agregação, líquidos alternativos podem ser assim usados para suspensão de formulações secas, tais como soluções de carboidrato comercialmente disponíveis.
[0023] Soluções de carboidrato aquosas comerciais para injeção (por exemplo, soluções de manitol, sucrose ou glicose) podem, entretanto, mostrar valores de pH variáveis. Por exemplo, soluções de glicose 5% comerciais para injeção podem ter valores de pH variando de cerca de 3,2 a cerca de 6,5. Na presente descrição e reivindicações, onde não especificado de modo diferente, o termo "glicose" se refere ao enantiômero de ocorrência natural "D-glicose", também conhecido como "dextrose".
[0024] O requerente agora observou que formulações contendo peptídeos-alvo, e, em particular, os peptídeos de ligação de KDR listados acima, mostram uma substancial variabilidade nas características finais da suspensão de microvesículas quando dispersas em soluções de carboidratos (em particular glicose) em diferentes valores de pH. Em particular foi observado que enquanto a reconstituição de formulações secas com soluções em um pH de cerca de 6,5 provê suspensões com um número relativamente alto de microvesículas, quando a mesma formulação seca é reconstituída com soluções em pH menor, o número de microvesículas na suspensão pode ser reduzido.
[0025] Para evitar os efeitos negativos desses baixos valores de pH na suspensão final, podem ser usados agentes de ajuste de pH, de modo a permitir a reconstituição do resíduo seco ocorrer em um pH apropriado (tipicamente de cerca de 6 a cerca de 8,5, preferivelmente de cerca de 7 a cerca de 8). O requerente, entretanto, observou que maior parte dos agentes de ajuste de pH convencionais mostra um certo número de desvantagens dentro das usuais faixas de pH das soluções de carboidratos para injeção.
[0026] Por exemplo, agentes alcalinizantes, como bicarbonato de sódio, devem ser adicionados em concentração relativamente alta à suspensão quando a solução dispersante tem um pH relativamente baixo, de modo a permitir uma ótima redispersão das microvesículas formadas. Por outro lado, se o valor de pH da solução dispersante é relativamente alto, tais altas concentrações de agente alcalinizante podem resultar em valores de pH muito altos na suspensão final que são incompatíveis com injeção intravenosa da suspensão.
[0027] Agentes tamponantes convencionais, como tampão Tris/HCl ou tampão fosfato devem ser adicionados em concentrações relativamente altas para obtenção de desejado efeito de ajuste de pH na inteira faixa de preparações de microvesículas; entretanto foi observado que tais altas concentrações podem determinar indesejáveis desvantagens no processo de preparação das microvesículas, com consequentes possíveis efeitos negativos sobre as características das microvesículas na suspensão final.
[0028] Contrário aos efeitos negativos dos agentes de ajuste de pH acima, o requerente agora verificou que histidina provê suspensões aceitáveis de microvesículas enchidas com gás com redispersão de diferentes resíduos secos tendo formulações variáveis (em particular com diferentes quantidades de peptídeos-alvo) dentro de uma típica faixa de valores de pH de soluções de dispersão de carboidratos comercial mente disponíveis. Em adição, foi observado que histidina pode ser usada dentro de uma faixa de concentração relativamente grande sem afetar negativamente as propriedades da suspensão final de microvesículas.
[0029] A suspensão líquida de microvesículas enchidas com gás de acordo com a invenção pode ser tipicamente preparada através de dissolução de uma formulação contendo fosfolipídeo em um carreador aquoso. A formulação assim compreende um fosfolipídeo opcional mente em combinação comadicionais materiais anfifílicos (por exemplo, ácidos graxos); o peptídeo-alvo está preferivelmente presente na formulação como um lipopeptídeo (isto é, um peptídeo ligado covalentemente a um fosfolipídeo). A formulação está tipicamente na forma de uma formulação secada com congelamento (liofilizada), preferivelmente compreendendo aditivos de liofilização. As microvesículas enchidas com gás da invenção podem ser preparadas através de mistura (ou reconstituição) de referida formulação com o carreador líquido fisiologicamente aceitável na presença de um gás fisiologicamente aceitável.
[0030] Como aqui usado, o termo "fosfolipídeo" é pretendido abranger compostos anfifílicos contendo pelo menos um grupo fosfato e pelo menos uma, preferivelmente duas, cadeias hidrocarboneto C12C24, capazes de formar uma camada de filme estabilizante (tipicamente na forma de uma camada monomolecular) na interface de fronteira de gás - água na suspensão final de microbolhas. Da mesma maneira, estes materiais também são referidos na técnica como "fosfolipídeos de formação de filme".
[0031] O termo fosfolipídeos inclui produtos ocorrendo naturalmente, sintéticos ou semissintéticos, que podem ser empregados singularmente ou como misturas.
[0032] Exemplos de fosfolipídeos apropriados incluem ésteres de glicerol com um ou preferivelmente dois (iguais ou diferentes) resíduos de ácidos graxos e com ácido fosfórico, onde oresíduo de ácido fosfórico está por sua vez ligado a um grupo hidrofílico tal como, por exemplo, colina (fosfatidil colinas - PC), serina (fosfatidil serinas - OS), glicerol (fosfatidil gliceróis - PG), etanolamina (fosfatidil etanolaminas - PE), inositol (fosfatidil inositol). Ésteres de fosfolipídeos com somente um resíduo de ácido graxo são genericamente referidos na técnica como as formas "liso" do fosfolipídeo ou "lisofosfolipídeos". Resíduos de ácidos graxos presentes nos fosfolipídeos são em geral ácidos alifáticos de cadeia longa, contendo tipicamente de 12 a 24 átomos de carbono, preferivelmente de 14 a 22; a cadeia alifática pode conter uma ou mais insaturações ou é preferivelmente completamente saturada. Exemplos de apropriados ácidos graxos incluídos nos fosfolipídeos são, por exemplo, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido araquídico, ácido behênico, ácido oleico, ácido linoleico, e ácido linolênico. Preferivelmente, ácidos graxos saturados, tais como ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, e ácido araquídico são empregados.
[0033] Exemplos adicionais de fosfolipídeo são ácidos fosfatídicos, isto é, os diésteres de ácido glicerol fosfórico com ácidos graxos; esfingolipídeos como esfingomielinas, isto é, aqueles análogos de fosfatidil colina onde o resíduo de glicerol diéster com ácidos graxos é substituído por uma cadeia ceramida; cardiolipinas, isto é, os ésteres de 1,3-difosfatidil glicerol com um ácido graxo; glicolipídeos como gangliosídeos GM1 (ou GM2) ou cerebrosídeos; glicolipídeos; sulfatídeos e glicoesfingolipídeos.
[0034] Exemplos de fosfolipídeos ocorrendo naturalmente são lecitinas naturais (derivados de fosfatidil colina (PC)) tais como, tipicamente, lecitinas de soja ou de gema de ovo.
[0035] Exemplos de fosfolipídeos semissintéticos são os derivados parcial ou inteiramente hidrogenados das lecitinas ocorrendo naturalmente. Fosfolipídeos preferidos são diésteres de ácidos graxos de fosfatidil colina, etil fosfatidil colina, fosfatidil glicerol, ácido fosfatídico, fosfatidil etanolamina, fosfatidil serina, fosfatidil inositol ou de esfingomielina.
[0036] Específicos exemplos de fosfolipídeos são, por exemplo, dilauroil fosfatidil colina (DLPC), dimiristoil fasofatidil colina (DMPC), dipalmitoil fosfatidil colina (DPPC), diaraquidoil fosfatidil colina (DAPC), diestaeroil fosfatidil colina (DSPC), dioleoil fosfatidil colina (DOPC), 1,2- diestearoil-sn-glicero-3-etil fosfo colina (Etil-DSPC), dipentadecanoil fosfatidil colina (DPDPC), 1-miristoil-2-palmitoil fosfatidil colina (MPPC), 1-palmitoil-2-miristoil fosfatidil colina (PMPC), 1-palmitoil-2-estearoil fosfatidil colina (PSPC), 1-estearoil-2-palmitoil fosfatidil colina (SPPC), 1-palmitoil-2-oleil fosfatidil colina (POPC), 1-oleil-2-palmitoil fosfatidil colina (OPPC), dilauroil fosfatidil glicerol (DLPG) e seus sais de metais alcalinos, diaraquidoil fosfatidil glicerol (DPAG) e seus sais de metais alcalinos, dimiristoil fosfatidil glicerol (DMPG) e seus sais de metais alcalinos, dipalmitoil fosfatidil glicerol (DPPG) e seus sais de metais alcalinos, diestearoil fosfatidil glicerol (DSPG) e seus sais de metais alcalinos, dioleoil fosfatidil glicerol (DOPG) e seus sais de metais alcalinos, ácido dilauroil fosfatídico (DLPA), ácido dimiristoil fosfatídico (DMPA) e seus sais de metais alcalinos, ácido dipalmitoil fosfatídico (DPPA) e seus sais de metais alcalinos, ácido diestearoil fosfatídico (DSPA), ácido diaraquidoil fosfatídico (DAPA) e seus sais de metais alcalinos, dilauroil fosfatidil etanolamina (DLPE), dimiristoil fosfatidil etanolamina (DMPE), dipalmitoil fosfatidil etanolamina (DPPE), diestearoil fosfatidil etanolamina (DSPE), dioleil fosfatidil etanolamina (DOPE), diaraquidoil fosfatidil etanolamina (DAPE), dilinoleil fosfatidil etanolamina, dilauroil fosfatidil serina (DLPS), dimiristoil fosfatidil serina (DMPS), diaraquidoil fosfatidil serina (DAPS), dipalmitoil fosfatidil serina (DPPS), diestearoil fosfatidil serina (DSPS), dioleoil fosfatidil serina (DOPS), dipalmitoil esfingomielina (DPSP), diestearoil esfingomielina (DSSP), dilauroil fosfatidil inositol (DLPI), diaraquidoil fosfatidil inositol (DAPI), dimiristoil fosfatidil inositol (DMPI), dipalmitoil fosfatidil inositol (DPPI), diestearoil fosfatidil inositol (DSPI), dioleoíl fosfatidil inositol (DOPI).
[0037] Apropriados fosfolipídeos ainda incluem fosfolipídeos modificados através de ligação de um polímero hidrofílico, tal como polietileno glicol (PEG) ou polipropileno glicol (PPG), aos mesmos. Fosfolipídeos modificados com polímero preferidos incluem "fosfolipídeos peguilados", isto é, fosfolipídeos ligados a um polímero PEG. Exemplos de fosfolipídeos peguilados são fosfatidil etanolaminas pegiladas ("PE-PEGs" abreviado) isto é, fosfatidil etanolaminas onde a metade etanolamina hidrofílica está ligada a uma molécula PEG de peso molecular variável (por exemplo, de 300 a 20.000 Dáltons, preferivelmente de 500 a 5000 Dáltons), tais como DPPE-PEG (ou DSPE-PEG, DMPE-PEG, DAPE-PEG ou DOPE-PEG). Por exemplo, DPPE-PEG2000 se refere a DPPE tendo ligado ao mesmo um polímero PEG tendo um peso molecular ponderal médio de cerca de 2000.
[0038] Fosfolipídeos particularmente preferidos são DAPC, DSPC, DPPC, DMPA, DPPA, DSPA, DMPG, DPPG, DSPG, DMPS, DPPS, DSPS, DPPE, DSPE, DMPE, DAPE, Etil-DSPC e suas misturas. Misturas de fosfolipídeos também podem ser usadas, tais como, por exemplo, misturas de DPPE e/ou DSPE (incluindo derivados peguilados), DPPC, DSPC e/ou DAPC com DSPS, DPPS, DSPA, DPPA, DSPG, DPPG, Etil-DSPC e/ou Etil-DPPC.
[0039] De acordo com uma modalidade preferida, a formulação compreende pelo menos DSPC, preferivelmente em combinação com DSPE-PEG2000 ou DPPE-PEG5000.
[0040] A composição formando a camada estabilizante das microvesículas enchidas com gás ainda compreende componentes anfifílicos que também podem contribuir para a formação da camada estabilizante tal como, por exemplo, ácidos graxos tais como ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido araquídico, ácido behênico, ácido oleico, ácido linoleico, e ácido linolênico, preferivelmente ácidos graxos saturados tais como ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico e ácido araquídico; polímeros transportando lipídeos, tais como quitina, ácido hialurônico, polivinil pirrolidona ou polietileno glycol (PEG), também referidos como "lipídeos peguilados"; lipídeos transportando mono- di-, ou oligo- ou polissacarídeos; cholesterol, sulfato de cholesterol ou hemissuccinato de cholesterol; hemissucinato de tocoferol; lipídeos com aminoácidos ligados com éter ou ester; lipídeos polimerizados; fosfato de diacetila; fosfato de dicetila; ceramidas; ésteres de ácido graxo de polioxietileno (como estearatos de ácido graxo de polioxietileno), álcoois graxos de polioxietileno (tais como estearatos de ácido graxo de polioxietileno), álcoois graxos de polioxietileno, éteres de álcool graxo de polioxietileno, ésteres de ácido graxo de sorbitano polioxietilado, polietileno glycol ricinoleato de glicerol, esteróis de soja etoxilados, óleo de mamona etoxilado ou copolímeros de bloco de óxido de propileno (PO) e óxido de etileno (EO); esterol ésteres de ácido alifático incluindo, butirato de colesterol, isobutirato de colesterol, palmitato de colesterol, estearato de colesterol, acetate de lanosterol, palmitato de ergosterol, ou n-butirato de fitosterol; esteróis ésteres de ácidos de açúcar incluindo colesterol glicuronídeos, lanosterol glicuronídeos, 7-desidro colesterol glicuronídeo, ergosterol glicuronídeo, gliconato de colesterol, gliconato de lanosterol, ou gliconato de ergosterol; ésteres de ácidos e álcoois de açúcar incluindo lauril glicuronídeo, estearoil glicuronídeo, miristoil glicuronídeo, gliconato de laurila, gliconato de miristoíla, ou gliconato de estearoíla; ésteres de açúcares com ácidos alifáticos incluindo laurato de sucrose, laurato de fructose, palmitato de sucrose, estearato de sucrose; saponinas incluindo sarsasapogenina, smilagenina, hederagenina, ou digitoxigenina; éster glicerol ou glicerol incluindo tripalmitato de glicerol, diestearato de glicerol, triestearato de glicerol, dimiristato de glicerol, trimiristato de glicerol, dilaurato de glicerol, trilaurato de gtlicerol, dipalmitato de glicerol; álcoois de cadeia longa incluindoálcool n-decílico, álcool laurílico, álcool miristílico, álcool cetílico, ou álcool n-octadecílico; 6-(5-colesten-3β-il0xi) hexil-6-amino-6- desoxi-1-tio-β-D-galacto piranosídeo; 6-(5-colesten-3β-il0xi) hexil-6- amino-6-desoxil-1-tio-β-D-mano piranosídeo; 1,2-dioleil-sn-glicerol; 1,2- dipalmitoil-sn-3-succinil glicerol; 1,3-dipalmitoil-2-succinil glicerol; palmitoil homocisteína; alquil aminas ou sais de alquil amônio, compreendendo pelo menos uma cadeia alquila C10-C20, preferivelmente C14-C18, tal como, por exemplo, N-estearil amina, N,N’- diestearil amina, N-hexadecil amina, N,N’-diexa decil amina, cloreto de N-estearil amônio, cloreto de N,N’-diestearil amônio, cloreto de N-hexa decil amônio, cloreto de N,N’-diexadecil amônio, brometo de dimetil dioctadecil amônio (DDAB), brometo de hexadecil trimetil amônio (CTAB); sais de amônio tericários ou quaternparios compreendendo pelo menos umaou preferivelmente duas cadeias acila C10-C20, preferivelmente C14-C18 ligadas ao átomo de N através de uma ponte alquileno C3-C6, tal como, por exemplo, 1,2-diestearoil-3-trimetil amônio propano (DSTAP), 1,2-dipalmitoil-3-trimetil amônio (DPTAP), 1,2-oleoil- 3-tri metil amônio propano (DOTAP), 1,2-diestearoil-3-di metil amônio propano (DSDAP); e suas misturas ou combinações.
[0041] Ainda estes compostos anfifílicos, se presentes, podem estar presentes em quantidades variáveis, por exemplo, até 25% em moles da composição formando a camada estabilizante, preferivelmente até 20%.
[0042] De acordo com uma realização preferida, a formulação para preparação de microvesículas enchidas com gás compreende pelo menos um ácido graxo, preferivelmente ácido palmítico, em combinação com um fosfolipídeo como definido acima, preferivelmente DSPC e DPPE-PEG5000, mais preferivelmente em uma razão respectica de 5% (razão molar) a 20%. Ligante-alvo
[0043] O ligante-alvo é um peptídeo compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada de AGPTWCEDDWYYCWLFGTGGGK (SEQ ID NO. 01) ou VCWEDSWGGEVCFRYDPGGGK (SEQ ID NO. 02).
[0044] Mais preferivelmente, o referido peptídeo é um peptídeo dímero de fórmula I.
[0045] O peptídeo-alvo é preferivelmente conjugado com um fosfolipídeo, preferivelmente um fosfolipídeo peguilado e mesmo mais preferivelmente DSPE-PEG. Preferivelmente, o referido peptídeo-alvo é um lipopeptídeo de fórmula II. A quantidade de lipopeptídeo na formulação é preferivelmente de 0,1%a 5% em razão molar com relação a todos os lipídeos (fosfolipídeo + ácido graxo), mais preferivelmente de 0,2% a 1%.
[0046] Detalhes sobre a preparação dos peptídeos monoméricos, do peptídeo dimérico e do lipopeptídeo são ilustrados em WO 2007/067979, aqui incorporado por referência. Histidina
[0047] Histidina, preferivelmente L-histidina, pode ser adicionada tanto à formulação seca a ser reconstituída ou à solução de carboidratos para reconstituição. Preferivelmente histidina é adicionada à formulação a ser liofilizada; isto permite o uso de convencional redispersão de soluções de carboidratos.
[0048] A quantidade de histidina preferivelmente deve ser tal que a concentração de histidina na suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás para injeção seja de 1,5 mM a 20 mM, preferivelmente de 2,5 mM a 10 mM e mesmo mais preferivelmente de 3 mM a 8 mM.
[0049] O veículo aquoso para preparação de suspensão de microvesículas enchidas com gás é uma solução aquosa contendo carboidrato, preferivelmente isoosmolar. Preferivelmente, o carboidrato é glicose. A concentração do carboidrato na suspensão é preferivelmente de 2% a 20% (peso / peso), mais preferivelmente de 3% a 15%. Partticularmente para glicose, a concentração da suspensão final é preferivelmente de 3% a 8%, mais preferivelmente de 4 a 6%.
[0050] As microvesículas de acordo com a invenção podem ser fabricadas de acordo com qualquer processo conhecido na técnica. Tipicamente, o processo de fabricação envolve a preparação de um material pulverizado secado compreendendo a composição da invenção, preferivelmente através de liofilização (secagem de congelamento) de uma suspensão aquosa ou orgânica compreendendo a referida composição. As microvesículas então podem ser obtidas através de reconstituição da preparação liofilizada em um carreador aquoso, com agitação suave na presença de um gás.
[0051] Preferivelmente, como descrito, por exemplo, no pedido de patente internacional WO2004/069284, uma composição compreendendo a mistura de fosfolipídeos e ácidos graxos pode ser dispersa em uma emulsão de água com um solvente orgânico imiscível em água (por exemplo, alcanos, alquenos, ciclo alcanos, hidrocarbonetos aromáticos, alquil éteres, cetonas, hidrocarbonetos halogenados, hidrocarbonetos perfluorados lineares opu ramificados ou misturas dos mesmos) sob agitação, preferivelmente em mistura com um agente lioprotetor (tais como aqueles previamente listados, em particular carboidratos, álcoois de açúcares, poliglicóis, polioxialquileno glicóis e suas misturas). A emulsão pode ser obtida submetendo o meio aquoso e o solvente na presença de fosfolipídeos e ácidos graxos a qualquer técnica de geração de emulsão apropriada conhecida na técnica, tal como, por exemplo, sonificação, agitação, homogeneização de alta pressão, micromistura, emulslficação com membrana, emulsificação focalizando fluxo, agitação de alta velocidade ou mistura de alto cisalhamento. Preferivelmente, uma solução orgânica contendo um fosfolipídeo e um ácido graxo é primeiro preparada; separadamente, um lipopeptídeo-alvo e opcionalmente um fosfolipídeo peguilado são dissolvidos em uma solução aquosa contendo um agente lioprotetor e opcionalmente histidina; as fases orgânica e aquosa são então misturadas e emulsificadas como descrito acima. A microemulsão assim obtida pode ser opcionalmente diluída com uma solução contendo um agente lioprotetor e opcionalmente histidina. A microemulsão, que contém microgotículas de solvente circundadas e estabilizadas por fosfolipídeos e ácidos graxos, é então liofilizada de acordo com técnicas convencionais para obtenção de um material liofilizado.
[0052] O produto secado com congelamento (ou liofilizado) está genericamente na forma de um pulverizado ou uma torta, e pode ser estocado (tipicamente em um frasco) em contato com o desejado gás. O produto é facilmente reconstituível em um apropriado carreador líquido aquoso fisiologicamernte aceitável, tal como uma solução aquoas contendo carboidrato como discutido acima.
[0053] Qualquer gás biocompatível, precursor de gás ou suas misturas podem ser empregados para formação de microvesículas da invenção (daqui por diante também identificado como "gás de formação de microvesículas").
[0054] O gás pode compreender, por exemplo, ar; nitrogênio; oxigênio; dióxido de carbono; hidrogênio; óxido nitroso; um gás nobre ou inerte tal como hélio, argônio, xenônio ou kriptônio; um hidrocarboneto de baixo peso molecular (por exemplo, contendo até 7 átomos carbono), por exemplo, um alcano tal como metano, etano, propano, butano, isobutano, pentano ou isopentano, ou ciclo alcano tal como ciclo butano ou ciclo pentano, um alqueno tal como propeno, buteno, ou isobuteno, ou um alquino tal como acetileno; um éter; uma cetona; um éster; gases halogenados, preferivelmente gases fluorados, tais como ou hidrocarbonetos de baixo peso molecular halogenados, fluorados ou perfluorados (por exemplo, contendo até 7 átomos de carbono); ou uma mistura de quaisquer dos anteriores. Onde um hidrocarboneto halogenado é usado, preferivelmente pelo menos alguns, mais preferivelmente todos, os átomos de halogênio no referido composto são átomos de flúor.
[0055] Gases fluorados são preferidos, em particular, gases perfluorados. Gases fluorados incluem materiais que contêm pelo menos um átomo de flúor tais como, por exemplo, hidrocarbonetos fluorados (compostos orgânicos contendo um ou mais átomos de carbono e flúor); hexa fluoreto de enxofre; cetonas fluoradas, preferivelmente perfluoradas como perflúor acetona; e éteres fluorados, preferivelmente perfluorados como perflúor dietil éter. Compostos preferidos são gases perfluorados, como SF6 ou perflúor carbonetos (hidrocarbonetos perfluorados), isto é, hidrocarbonetos onde todos os átomos de hidrogênio estão substituídos por átomos de flúor, que são conhecidos formarem suspensões de microbolhas particularmente estáveis, como mostrado, por exemplo, em EP 0554 213, que é aqui incorporada por referência.
[0056] O termo perflúor carbono inclui perflúor carbonetos saturados, insaturados e cíclicos. Exemplos de perflúor carbonos fisiologicamente aceitáveis, biocompatíveis são: perflúor alcanos, como perflúor metano, perflúor etano, perflúor propanos, perflúor butanos (por exemplo, perflúor-n-butano, opcionalmente em mistura com outros isômeros como perflúor isobutano), perflúor pentanos, perflúor hexanos ou perflúor heptanos; perflúor alquenos, como perflúor propeno, perflúor butenos (por exemplo, perflúor but-2-eno) ou perflúor butadieno; perflúor alquinos (por exemplo, perflúor but-2-ino); e perflúor cicloalcanos (por exemplo, perflúor ciclobutano, perflúor metil ciclo butano, perflúor dimetil ciclobutanos, perflúor trimetil ciclobutanos, perflúor ciclopentano, perflúor metil ciclo pentano, perflúor dimetil ciclopentanos, perflúor ciclo-hexano, perflúor metil ciclo hexano, e perflúor ciclo heptano). Perflúor carbonetos saturados preferidos incluem, por exemplo, CF4, C2F6, C3F8, C4F8, C4F10, C5F12 e C6F12.
[0057] Também pode ser vantajoso usar uma mistura de qualquer um dos gases acima em qualquer razão. Por exemplo, a mistura pode compreender um gás convencional, tal como nitrogênio, ar ou dióxido de carbono e um gás formando uma suspensão de microbolhas estável, tal como hexafluoreto de enxofre ou um perflúor carboneto como indicado acima. Exemplos de apropriadas misturas gasosas podem ser encontrados, por exemplo, em WO 94/09829, que é aqui incorporada por referência. As seguintes combinações são particularmente preferidas: uma mistura de gases (A) e (B) onde o gás (B) é um gás fluorado, selecionado de entre aqueles previamente ilustrados, incluindo suas misturas. A quantidade de gás (B) pode representar de cerca de 0,5% a cerca de 95% v/v da mistura total, preferivelmente de cerca de 5% a 80%.
[0058] Gases particularmente preferidos são SF6, C3F8, C4F10 ou misturas dos mesmos, opcionalmente em mistura com ar, oxigênio, nitrogênio, dióxido de carbono ou suas misturas. Particularmente preferido é C4F10, e mesmo mais preferido, é uma mistura de nitrogênio com C4F10, preferivelmente em uma razão 35/65 v/v.
[0059] Em certas circunstâncias pode ser desejável incluir um precursor para uma substância gasosa (isto é, um material que seja capaz de ser convertida a um gás in vivo). Preferivelmente o precursor gasoso e o gás derivado do mesmo são fisiologicamente aceitáveis. O precursor gasoso pode ser ativado com pH, foto ativado, ativado com temperatura, etc. Por exemplo, certos perflúor carbonetos podem ser usados como precursores gasosos ativados com temperatura. Estes perflúor carbonetos, como perflúor pentano ou perflúor hexano, têm uma temperatura de transição de fase líquido / gás acima de temperatura ambiente (ou a temperatura na qual os agentes são produzidos e/ou estocados), mas abaixo de temperatura do corpo; assim, eles sofrem uma transição de fase líquido / gás e são convertidos a um gás dentro de corpo humano.
[0060] Suspensões de microvesículas de acordo com a invenção podem ser estocadas como tais ou preferivelmente em forma de precursor secado com congelamento, o qual pode ser reconstituído com um carreador aquoso. De acordo com a invenção, o precursor da suspensão de microvesículas assim é preferivelmente estocado em uma forma pulverizada seca e como tal pode ser vantajosamente embalado em um kit terapêutico e/ou diagnóstico de dois componentes, preferivelmente para administração através de injeção. O kit preferivelmente compreende um primeiro recipiente, contendo a composição precursora liofilizada em contato com um gás de formação de microvesículas selecionado e um segundo recipiente, contendo um carreador aquoso fisiologicamente aceitável para reconstituição de suspensão de microvesículas, em particular uma solução de carboidrato como discutido acima, preferivelmente uma solução de glicose 5% (peso / peso). O referido kit de dois componentes pode incluir dois recipientes separados ou um recipiente de câmara dual. No caso anterior o recipiente é preferivelmente um frasco selado com septo convencional, onde o frasco contendo o resíduo liofilizado é selado com um septo através do qual o líquido carreador pode ser injetado usando uma seringa opcionalmente pré-enchida. Em um tal caso a seringa usada como o recipiente do segundo componente também é usada então para injeção de agente de contraste. No último caso, o recipiente de câmara dual é preferivelmente uma seringa de câmara dual e uma vez o liofilizado tenha sido reconstituído e então apropriadamente misturado ou suavemente agitado, o recipiente pode ser usado diretamente para injeção de agente de contraste.
[0061] De acordo com uma modalidade preferida, uma quantidade efetiva de microvesículas alvos é administrada a um paciente, tipicamente através de injeção de uma sua suspensão. A formação de imagem da região de interesse (alegadamente compreendendo um tecido expressando receptores de KDR) será assim aperfeiçoada pela presença das microvesículas ligadas ao receptor (se algum) na região de interesse.
[0062] A suspensão de microvesículas da presente invenção pode ser usada em uma variedade de técnicas diagnósticas e/ou terapêuticas, incluindo em particular formação de imagem com ultrassom de contraste aperfeiçoado.
[0063] Exemplos de técnicas de formação de imagem que podem ser empregadas em aplicações de ultrassom incluem, por exemplo, formação de imagem modo-B fundamental e não linear (por exemplo, harmônica), formação de imagem de inversão de fase ou pulso e formação de imagem Doppler não linear e fundamental; se desejado, técnicas de formação de imagem de três ou quatro dimensões podem ser usadas. Além disso, técnicas diagnósticas vinculando a destruição das microvesículas enchidas com gás (por exemplo, por meio de ondas de ultrassom em alta pressão acústica) que são processos de detecção altamente sensíveis também são contempladas.
[0064] Tipicamente, uma vez o sujeito (por exemplo, um mamífero) sofrendo a desejada técnica de formação de imagem com ultrassom tenha sido administrado com uma quantidade efetiva da suspensão de microvesículas, uma região selecionada de interesse é submetida à irradiação de ultrassom e o resultante sinal eco é coletado. O sinal coletado assim pode ser usado, por exemplo, para mostrar uma imagem de contraste aperfeiçoado da região de interesse; alternativamente o sinal pode ser usado para mapas paramétricos de computação da região de interesse.
[0065] A suspensão de microvesículas de acordo com a invenção pode ser tipicamente administrada, preferivelmente via injeção iv, em uma concentração de cerca de 0,01 a cerca de 1,0 microlitro de gás por kg de paciente, dependendo, por exemplo, de sua respectiva composição, o tecido ou órgão a ser feito imagem e/ou a técnica de formação de imagem escolhida. Esta faixa de concentração genérica é claro pode variar dependendo de específicas aplicações de formação de imagem, por exemplo, onde sinais podem ser observados em doses muito baixas como em Doppler de cor ou inversão de pulso de energia.
[0066] Os exemplos que se seguem ainda auxiliarão na ilustração da invenção.
[0067] Os seguintes materiais são empregados nos exemplos subsequentes: sr. digitador tabela (formatar cf. original): DSPC 1,2-diestearoil-SN-glicero-3-fosfo colina (Genzyme Pharmaceuticals) ácido palmítico ácido hexadecanoico (Fluka) DSPE-PEG 2000 1,2-diestearoil-SN-glicero-3-fosfo etanolamina-N- [metóxi (polietileno glicol)-2000)] (Genzyme Pharmaceuticals) DPPE-PEG 5000 1,2-dipalmitoil-SN-glicero-3-fosfo etanolamina-N- [metóxi (polietileno glicol)-5000)] (Genzyme Pharmaceuticals) PEG4000 polietileno glicol (PM = 4000) (Fluka) Ciclo octano (Fluka) Bicarbonato hidrogeno carbonato de sódio (Fluka) Na2HPO4 dodecaidrato de hidrogeno fosfato de di-sódio (Fluka) NaH=2PO4 di-hidrogeno fosfato de sódio (Fluka) Tris base Trizma (Fluka) Histidina L-histidina (Fluka)
[0068] Concentrações de distribuições de tamanhos de microvesículas na suspensão foram medidas por meio de um contador Coulter (Multisizer 3) adaptado com uma abertura de 30 micrometros (diluição: 50 μL em 100 mL de solução 0,9% de NaCl); valores de pH foram medidos usando um medidor de pH MP230 (Mettler Toledo) adaptado com um eletrodo Inlab 410 (Mettler Toledo).
[0069] O lipopeptídeo de fórmula II foi preparado como descrito em detalhes nos exemplos de trabalho de pedido de patente PCT WO 2007/067979, aqui incorporado por referência. Em resumo, como explicado em mais detalhes no pedido de patente PCT acima, peptídeo AGPTWCEDDWYYCWLFGTGGGK (SEQ ID NO. 01) foi sintetizado através de síntese de peptídeo de fase sólida (SPPS) usando aminoácidos peotegidos com Fmoc. O terminus-N foi acetilado e Fmoc- Lys (ivDde)-OH (Na-Fmoc-N£-[1-(4,4-dimetil-2,6-dioxo ciclo hex-1- ilideno)-3-metil butyl]-L-lisina) foi acoplada à cadeia lateral de Lys22. Apósd desproteção Fmoc, clivagem a partir de resina e clivagem dos outros grupos protetores (com a exceção de grupo ivDde), peptídeo foi ciclizado (formação de ponte dissulfeto). O peptídeo ciclizado foi purificado por HPLC prteparativa e liofilizado.
[0070] Peptídeo VCWEDSWGGEVCFRYDPGGGK (SEQ ID NO. 02) também foi sintetizado através de SPPS usando aminoácidos protegidos com Fmoc. O terminus-N foi acetilado e dois acoplamentos sequenciais de Fmoc-Adoa-OH (ácido 8-(Fmoc-amino)-3,6-dioxa octanóico) foram realizados para a cadeia lateral de Lys21. Após desproteção Fmoc, clivagem a partir da resina e clivagem dos outros grupos protetores, peptídeo foi ciclizado (formação de ponte de dissulfeto). O peptídeo ciclizado foi purificado por HPLC preparativo e liofilizado.
[0071] Preparação do peptídeo dimérico (Fórmula I): Glutarato de di-succinimidila (DSG) foi acoplado à função α-amino da lisina ligada à função S-amino de Lys22 do peptídeo (SEQ ID NO: 01). Após purificação, O produto foi então reagido com a função amino da metade Adoa ligada à Lys21 do peptídeo (SEQ ID NO: 02). O heterodímero bruto foi purificado por HPLC preparativo e liofilizado. O grupo protetor ivDde restante foi então clivado e o produto final foi novamente purificado por HPLC preparativo e o sal acetate foi formado através de troca de íons. A solução produto foi liofilizada para render peptídeo dimérico (formula I).
[0072] Preparação do lipopeptídeo (formula II): glutarato de dissuccinimidila (DSG) foi acoplado com o peptídeo dimérico previamente sintetizado (formula I). Após purificação, o produto foi reagido com DSPE-PEG2000-amina. O produto foi purificado por HPLC preparativo e liofilizado. Prep-01
[0073] Um precursor liofilizado para preparação de uma suspensão de microvesículas enchidas com gás foi preparado como se segue: (i) 60 mg de uma mistura de lipídeos (DSPC e ácido palmítico, em uma razão molar de 80/20) foram dissolvidos em ciclo octano (4,8 mL) a 70oC. (ii) separadamente, DSPE-PEG 2000 (3% peso/peso) e o lipopeptídeo de fórmula (II) (0,2% peso / peso) foram dispersos em 1 mL de um tampão Tris 20 mM (pH 7,6); a dispersão foi então misturada com 60 mL de uma solução PEG4000 10%. (iii) A preparação de ciclo octano (i) foi emulsificada na solução aquosa de PEG4000 (ii) usando um homogeneizador de alta velocidade em linha (Megatron MT3000) por 5 minutos em 12.000 rpm. (iv) A resultante emulsão foi aquecida a 80oC por 1 hora sob agitação. Após resfriamento para temperatura ambiente (~1 hora), (v) a emulsão foi diluída quatro vezes com solução aquoas de PEG4000 10% e amostrada em volumes de 1 mL em frascos DIN8R. (vi) os frascos foram inseridos em um liofilizador (secador congelador TELSTAR Lyobeta-35), resfriado para -50oC por 2 horas e então secados - congelados a -25oC e 0,2 mBar durante 12 horas, com uma etapa de secagem final a 30oC e 0,1 mBar por ainda 6 horas.
[0074] Uma mistura 35/65 (em volume) de C4F10/N2 foi adicionada ao espaço superior dos frascos, que foram então tampados e selados. Prep-02 a Prep-05
[0075] A preparação de Prep-01 acima foi repetida com várias razões molares de DSPC/ácido palmítico na fase orgânica (ver Tabela 1) e com a diferença de que as quantidades de DSPE-PEG 2000 ou DPPE-PEG 5000 e do lipopeptídeo de fórmula II foram modificadas na preparação da solução aquosa de etapa (ii), como ilustrado na Tabela 1. Além disso, Prep-03 e Prep-05 foram diluídas duas vezes (ao invés de quatro vezes) na etapa (v) e então amostradas em volumes de 1,5 mL em frascos DIN8R.
[0076] A Tabela 1 abaixo resume as diferenças nas várias preparações de precursores liofilizados. TABELA 1 Preparação de precursores liofilizados
[0077] Preparações obtidas de acordo com o Exemplo 1 foram redispersas em 1 mL de água ou de várias soluções de glicose 5% (peso / peso) em diferentes valores de pH, por exemplo, 3,5, 3,8 e 6,5.
[0078] Para obter uma solução 5% de glicose com um pH de 6,5, 30 a 34 μL de NaOH 0,1 N foram adicionados a 20 mL de solução 5% de glicose (-> 0,15 a 0,17 mM NaOH). Para obter uma solução 5% de glicose com um pH de 3,5, 32 a 40 μL de HCl 0,1 N foram adicionados em 20 mL de solução 5% de glicose.
[0079] As suspensões obtidas são identificadas como Susp-01 a Susp-05 (a partir de respectiva preparações Prep-01 a Prep-05, com os sufixos a até d identificando a reconstituição com (a) água destilada (controle), (b) solução de glicose pH 3,5, (c) solução de glicose pH 3,8 e (d) solução de glicose pH 6,5, respectivamente. Assim, por exemplo, Susp.02c identifica uma suspensão de microvesículas obtida através de dispersão de Prep.02 acima em 1 mL de glicose 5% em pH 3,8.
[0080] As suspensões de microvesículas enchidas com gás obtidas foram caracterizadas com contador Coulter para determinar a concentração de microvesículas e o tamanho de partícula médio através de número (DN) de microvesículas nas suspensões. Os resultados são ilustrados na Tabela 2 e Tabela 3, respectivamente (nestas e nas tabelas seguintes, os valores indicam tanto o valor real referido para uma suspensão simples ou a um valor médio no caso de múltiplas preparações da mesma suspensão). O pH da suspensão preparada também foi medido e é reportado na seguinte tabela 4. TABELA 2: Concentração de microvesículas com reconstituição com diferentes soluções * = controle TABELA 3: DN de suspensões de microvesículas com reconstituição com diferentes soluções *=controle TABELA 4: pH de suspensões de microvesículas na reconstituição com diferentes soluções *=controle
[0081] Como inferível a partir de valores na tabela 2, a concentração de microvesículas na suspensão obtida diminui substancialmente com relação a controle quando solução de glicose em pH de 3,5 ou 3,9 (colunas b e c) são empregadas para a reconstituição das preparações secadas - congeladas, enquanto quando solução de glicose em pH 6,5 (col. D) é usada a concentração é substancialmente similar a controle (col. a).
[0082] Como inferível a partir de tabela 3, reconstituição das preparações liofilizadas com soluções de glicose de baixo pH prove um indesejável aumento no valor DN das microvesículas. Exemplo 3 Efeito de agregação de microvesículas de vários agentes de ajuste de pH na reconstituição de Prep-01 com soluções de sacarídeo em diferentes valores de pH
[0083] A preparação de precursor liofilizado de Prep-01 foi repetida de acordo com o procedimento de Exemplo 1, com a diferença de que várias quantidades de bicarbonato de sódio foram adicionadas à solução de PEG4000 10% usada para diluição de emulsão em etapa (v), para obter respectivas preparações precursoras liofilizadas com diferentes quantidades de bicarbonato de sódio ali incorporadas. As quantidades de bicarbonato adicionadas à solução de PEG4000 foram tais para obtenção de uma concentração de bicarbonato na emulsão de etapa (v) de 0,125, 0,31, 0,38, 0,80, 1,20 e 2,0 mM, respectivamente.
[0084] As preparações obtidas foram então redispersas em 1 mL de água ou de várias soluções de glicose 5% (peso / peso) em diferentes valores de pH de acordo com o procedimento de Exemplo 2.
[0085] A Tabela 5 mostra a concentração de microvesículas medida nas várias suspensões obtidas a partir das respectivas preparações contend diferentes quantidades de bicarbonato de sódio. TABELA 5 - concentração de microvesículas em suspensões com bicarbonato de sódio *=controle
[0086] Como inferível a partir dos dados ilustrados na tabela acima, concentrações de bicarbonato de sódio de pelo menos 0,38 mM na emulsão diluída são imagináveis, de modo a obter uma aceitável concentração de microbolhas sobre a inteira faixa de pH da solução de glicose usada para a reconstituição. Por outro lado, menores concentrações de bicarbonato podem prover suspensões com concentração indesejavelmente baixa de microvesículas, particularmente quando o precursor secado - congelado é reconstituído com uma solução de glicose em pH de 3,5.
[0087] A Tabela 6 mostra os valores de pH medidos sobre as suspensões de tabela 5. TABELA 6 - valores de pH de suspensões de microvesículas com bicarbonato de sódio *=controle
[0088] Como conhecido na técnica, o pH de soluções de pH ajustado injetáveis intravenosamente preferivelmente deve estar dentro de uma faixa de pH de cerca de 6 a cerca de 8,5, preferivelmente entre cerca de 7 e cerca de 8. Como inferível a partir de tabela 6, quando a solução de glicose para reconstituição está na extremidade superior da faixa de pH (solução d, pH = 6,5), concentrações relativamente baixas de bicarbonato já poidem aumentar o pH da suspensão final de microvesículas acima de valores aceitáveis para injeção. Assim, através de leitura de tabelas 5 e 6 em combinação, parece que concentrações relativamente altas de bicarbonato de sódio (que são necessárias para provimento de desejada concentração de microvesículas em solução de glicose em pH relativamente baixo) podem aumentar excessivamente o pH da solução injetável. Por outro lado, concentrações relativamente baixas de bicarbonato podem não prover a desejada concentração de microvesículas na suspensão reconstituída (particularmente quando usando soluções de glicose de baixo pH).
[0089] Exemplo 3a foi repetido com a diferença de que o bicarbonato de sódio foi substituído por solução tampão Tris/HCl (pH = 8,0), preparada através de dissolução de base Tris (121,1 g - 1 mol) em água destilada (750 mL), adicionando HCl (cerca de 40 mL) e então completando o volume para 1 L com água destilada. Os volumes da solução tampão Tris/HCl adicionados à solução de PEG4000 foram tais de modo a obter uma concentração de Tris/HCl na emulsão de etapa (v) de 0,125, 2,5, 5,0, 10,0 mM, respectivamente.
[0090] A Tabela 7 mostra a concentração de microvesículas medida nas várias suspensões obtidas a partir de respectivas preparações contendo diferentes quantidades de tampão Tris/HCl. TABELA 7 - concentração de microvesículas em suspensões com tampão Tris/HCl (pH = 8,0) *=controle
[0091] Como inferível a partir dos dados na tabela acima, a reconstituição de preparações contendo tampão Tris/HCl proporciona concentrações relativamente menores de microvesículas na suspensão (como comparado com controle), em particular quando a preparação é reconstituída com soluções de glicose de baixo pH. Uma importante diminuição em concentração de microbolhas foi observada em particular quando altas concentrações de tampão Trsi/HCl foram usadas, particularmente 5,0 mM ou maior. Por esta razão, o tampão Tris/HCl 2,5 mM foi selecionado com agente de ajuste de pH comparative em experimentos subsequentes.
[0092] Exemplo 3a foi repetido com a diferença de que o bicarbonato de sódio foi substituído por tampão fosfato (pH = 7,6) preparado através de mistura de 43,5 mL de uma solução de Na2HPO4 (0,2 M) com 6,5 mL de solução de NaH2PO4 (0,2 M). Os volumes da solução de tampão fosfato adicionados à solução de PEG4000 foram tais de modo a obter-se uma concentração de fosfato na emulsão de etapa (v) de 2,5, 5,0 e 10,0 mM, respectivamente.
[0093] Tabela 8 e Tabela 9 mostram a concentração de microvesículas e os valores DN, respectivamente, medidos nas várias suspensões obtidas de respectivas preparações contend diferentes quantidades de tampão fosfato. TABELA 8 - concentração de microvesículas em suspensões com tampão fosfato (pH = 7,6) *=controle
[0094] Como para exemplo 3b, reconstituição de preparações contendo tampão fosfato provê concentrações relativamente menores de microvesículas na suspensão (como comparadas com controle), em particular quando a preparação é reconstituída com soluções de glicose de baixo pH. Uma diminuição importante de concentração de microbolhas foi em particular observada quando maiores concentrações de tampão fosfato foram usadas. Por esta razão, o tampão fosfato 2,5 mM foi selecionado como agente de ajuste de pH comparativoem experimentos subsequentes. TABELA 9 - Valores DN de microvesículas em suspensões com tampão fosfato (pH = 7,6) *=controle
[0095] Como observável a partir da tabela acima, valores DN das suspensões de microvesículas são levemente maiores que aqueles do controle, particularmente para preparações reconstituídas com soluções de glicose de baixo pH e em maiores concentrações de fosfato.
[0096] Exemplo 3a foi repetido com a diferença de que bicarbonato de sódio foi substituído por histidina. As quantidades de histidina adicionadas à solução de PEG4000 foram tais para obter uma concentração de histidina na emulsão de etapa (v) de 2,5, 5,0 e 10,0 mM, respectivamente.
[0097] A Tabela 10 mostra a concentração de microvesículas, e a Tabela 11, os valores DN medidos nas várias suspensões obtidas de respectivas preparações contendo diferentes quantidades de histidina. A concentração de histidina na suspensão final de microvesículas foi de 2,5, 5,0 e 10,0 mM, respectivamente. TABELA 10 - concentração de microvesículas em suspensões com histidina em diferentes concentrações *=controle TABELA 11 - DN de microvesículas com histidina em diferentes Concentrações *=controle
[0098] Como observável a partir da tabela acima, valores de DN das suspensões de microvesículas com histidina comparáveis ou levemente menores que aqueles do controle, indicando que microvesículas nas suspensões contend histidina têm tamanhos comparáveis com aqueles no controle qualquer que seja o pH da solução de glicose e a concentração da histidina. Exemplo 4 Efeito sobre agregação de microvesículas de vários agentes de ajuste de pH na reconstituição de Prep-02 com soluções de sacarídeo em diferentes valores de pH Exemplo 4a: suspensão de microvesículas com agentes de ajuste de pH comparativos
[0099] A preparação de precursor liofilizado de Prep-02 foi repetida de acordo com o procedimentode Exemplo 1, com a diferença de que bicarbonato de sódio, tampão Tris/HCl ou tampão fosfato foram adicionados à solução de PEG4000 10% usada para diluição da emulsão na etapa v, para obter respectivas preparações precursoras liofilizadas. As quantidades de agente de ajuste de pH adicionadas à solução de PEG4000 foram tais para obtenção de uma concentração otimizada (como determinada em exemplo 3) do respective agente de ajuste de pH na emulsão diluída como indicado em tabelas 12 e 13.
[00100] As preparações obtidas foram então redispersas em 1 mL de água ou das várias soluções de glicose 5% (peso / peso) em diferentes valores de pH de acordo com o procedimento de Exemplo 2.
[00101] Tabelas 12 e 13 mostram a concentração de microvesículas e os valores DN medidos nas várias suspensões obtidas de respectivas preparações contendo o selecionado agente de ajuste de pH. TABELA 12 - Concentração de microvesículas em suspensões com diferentes agentes de ajuste de pH *=controle TABELA 13 - valor DN de microvesículas em suspensões com diferentes agentes de ajuste de pH *=controle
[00102] Como inferível dos dados ilustrados em tabelas 12 e 13, o número de partículas em suspensões com diferentes agentes de ajuste de pH convencionais é genericamente menor que ocontrole, particularmente para reconstituição com soluções de glicose de baixo pH - 02(b) - enquanto o valor DN é genericamente maior. Exemplo 4b: suspensão de microvesículas com histidina
[00103] Exemplo 4a foi repetido com a diferença de que os agentes de ajuste de pH comparativos foram substituídos por histidina em diferentes concentrações, como ilustrado em tabelas 14 e 15. Também neste caso a concentração de histidina na suspensão final de microvesículas foi de 2,5 mM, 5,0 mM e 10 mM, respectivamente. TABELA 14 - concentração de microvesículas em suspensões com histidina *=controle TABELA 15 - valor DN de microvesículas em suspensões com histidina *=controle
[00104] Como inferível a partir dos dados ilustrados em tabelas 14 e 15, o número de partículas e os valores DN de microvesículas medidos em suspensões com histidina são genericamente comparáveis àqueles medidos sobre a solução controle em qualquer pH da solução de reconstituição de glicose e em qualquer concentração de histidina.
[00105] Efeito sobre agregação de microvesículas de tampão de fosfato e de histidina na reconstituição de Prep-03 com soluções de sacarídeos em diferentes valores de pH
[00106] A preparação de precursor liofilizado Prep-03 foi repetida de acordo com o procedimento de Exemplo 1, com a diferença de que tampão fosfato ou histidina foram adicionados à solução de PEG4000 10% usada para diluição de emulsão (etapa v) para obter respectivas preparações precusoras liofilizadas. As quantidades de fosfato ou de histidina adicionadas à solução de PEG4000 foram tais para obtenção de uma concentração de 2,5 mM de fosfato e concentrações de 5 mM, 10 mM e 20 mM de histidina na emulsão diluída de etapa (v), como indicado em tabelas 16 e 17, correspondendo a uma concentração de histidina na suspensão final de microvesículas de cerca de 3,75 mM, 7,5 mM e 15 mM.
[00107] As preparações obtidas foram então redispersas em 2 mL das várias soluções de glicose 5% (peso / peso) em diferentes valores de pH de acordo com o procedimento de Exemplo 2.
[00108] As Tabelas 16 e 17 mostram a concentração e os valores de DN nas várias suspensões com respectivas preparações contendo o agente de ajuste de pH selecionado. TABELA 16 - concentração de microvesículas em suspensões TABELA 17 - valor DN de microvesículas em suspensões com diferentes ajustadores de pH
[00109] Como inferível a partir dos dados na tabela 16, o número de partículas de microvesículas medido em suspensões com histidina em diferentes concentrações são genericamente maiores que o número medido na preparação tamponada com fosfato comparativa, particularmente em altos valores de pH da solução de glicose e em altas concentrações de histidina. Como inferível a partir dos dados na Tabela 17, os valores DN de microvesículas medidos em suspensões com histidina em diferentes concentrações são genericamente menores que os valores DN medidos na preparação tamponada com fosfato comparativa. Exemplo 5 Efeito sobre agregação de microvesículas de tampão fosfato e histidina na reconstituição de Prep-04 com soluções de sacarídeo em diferentes valores de pH
[00110] A preparação de precursor liofilizado de Prep-04 foi repetida de acordo com o procedimento de Exemplo 1, com a diferença de que agentes de ajuste de pH (isto é, bicarbonato, Tris/HCl ou fosfato) ou histidina foram adicionados à solução de PEG4000 10% usada para diluição de emulsão (etapa v), para obter respectivas preparações precursoras liofilizadas. As quantidades de agentes de ajuste de pH adicionadas foram tais de modo a se obter as seguintes concentrações da emulsão diluída, como indicado em tabelas 18 e 19: bicarbonato 0,38 mM, Tris/HCl 2,5 mM, fosfato 2,5 mM ou histidina 2,5 mM.
[00111] As preparações obtidas foram então redispersas em 1 mL das várias soluções de glicose 5% (peso / peso) em diferentes valores de pH de acordo com o procedimento de Exemplo 2.
[00112] As Tabelas 18 e 19 mostram a concentração de microvesículas e os valores DN medidos nas várias suspensões obtidas de respectivas preparações contendo o agente de ajuste de pH selecionado. TABELA 18 - concentração de microvesículas em suspensões *=contro e TABELA 19 - valor DN de microvesículas em suspensões com diferentes ajustadores de pH
[00113] Como inferível a partir dos dados na tabela 18, o número de partículas em suspensões com diferentes agentes de ajuste de pH convencionais é genericamente menor que o número medido na suspensão com histidina, particularmente em soluções de glicose de baixo pH. Como inferível a partir dos dados na tabela 19, os valores DN de microvesículas em suspensões com diferentes agentes de ajuste de pH convencionaissão genericamente maiores do que o valor DN medido na suspensão com histidina, particularmente em soluções de glicose de baixo pH. Exemplo 7 Efeito sobre agregação de microvesículas de tampão de fosfato e histidina na reconstituição de Prep-05 com soluções de sacarídeos em diferentes valores de pH
[00114] A preparação de precursor liofilizado de Prep-05 foi repetida de acordo com o procedimento de Exemplo 1, com a diferença de que tampão fosfato ou histidina foram adicionados à solução de PEG4000 10% usada para diluição de emulsão (etapa v), para obter respectivas preparações precusoras liofilizadas. As quantidades de fosfato ou de histidina adicionadas à solução de PEG4000 foram tais de modo a obter-se uma concentração de 2,5 mM de fosfato e concentrações de 2,5 mM, 5 mM ou 10 mM de histidina na emulsão diluída como indicado em tabelas 20 e 21.
[00115] As preparações obtidas foram então redispersas em 2 mL de água ou das várias soluções de glicose 5% em diferentes valores de pH de acordo com o procedimento de Exemplo 2.
[00116] As Tabelas 20 e 21 mostram a concentração de microvesículas e os valores DN medidos nas várias suspensões obtidas das respectivas preparações contendo o agente de ajuste de pH selecionado. TABELA 20 - concentração de microvesículas em suspensões
TABELA 21 - valor DN de microvesículas em suspensões
[00117] Como inferível dos dados ilustrados na tabela 20, o número de partículas em suspensões com tampão fosfato é genericamente menor que o número medido na suspensão com histidina em diferentes concentrações, particularmente em soluções de glicose de baixo pH. Como inferível dos dados ilustrados na tabela 21, os valores DN de microvesículas em suspensões com tampão fosfato é genericamente maior que o valor DN medido nas suspensões com histidina em diferentes concentrações, particularmente em soluções de glicose de baixo pH.
Claims (19)
1. Suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás, caracterizada por as referidas microvesículas compreenderem um fosfolipídeo e um ligante-alvo compreendendo um peptídeo tendo uma sequência de aminoácidos selecionada de AGPTWCEDDWYYCWLFGTGGGK (SEQ ID NO. 01), VCWEDSWGGEVCFRYDPGGGK (SEQ ID NO. 02) ou uma combinação das mesmas, a referida suspensão ainda compreendendo um carboidrato e histidina.
2. Suspensão aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por referido ligante-alvo estar na forma de um peptídeo dimérico compreendendo uma combinação de SEQ ID NO: 01 e SEQ ID NO: 02.
3. Suspensão aquosa de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por referido carboidrato ser glicose.
4. Suspensão aquosa de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por referidas microvesículas compreenderem um fosfolipídeo selecionado do grupo consistindo em dilauroil fosfatidil colina (DLPC), dimiristoil fasofatidil colina (DMPC), dipalmitoil fosfatidil colina (DPPC), diaraquidoil fosfatidil colina (DAPC), diestaeroil fosfatidil colina (DSPC), dioleoil fosfatidil colina (DOPC), 1,2-diestearoil-sn-glicero-3-etil fosfo colina (Etil-DSPC), dipentadecanoil fosfatidil colina (DPDPC), 1-miristoil-2- palmitoil fosfatidil colina (MPPC), 1-palmitoil-2-miristoil fosfatidil colina (PMPC), 1-palmitoil-2-estearoil fosfatidil colina (PSPC), 1-estearoil-2-palmitoil fosfatidil colina (SPPC), 1-palmitoil-2-oleil fosfatidil colina (POPC), 1-oleil-2-palmitoil fosfatidil colina (OPPC), dilauroil fosfatidil glicerol (DLPG) e seus sais de metais alcalinos, diaraquidoil fosfatidil glicerol (DPAG) e seus sais de metais alcalinos, dimiristoil fosfatidil glicerol (DMPG) e seus sais de metais alcalinos, dipalmitoil fosfatidil glicerol (DPPG) e seus sais de metais alcalinos, diestearoil fosfatidil glicerol (DSPG) e seus sais de metais alcalinos, dioleoil fosfatidil glicerol (DOPG) e seus sais de metais alcalinos, ácido dilauroil fosfatídico (DLPA), ácido dimiristoil fosfatídico (DMPA) e seus sais de metais alcalinos, ácido dipalmitoil fosfatídico (DPPA) e seus sais de metais alcalinos, ácido diestearoil fosfatídico (DSPA), ácido diaraquidoil fosfatídico (DAPA) e seus sais de metais alcalinos, dilauroil fosfatidil etanolamina (DLPE), dimiristoil fosfatidil etanolaamina (DMPE), dipalmitoil fosfatidil etanolamina (DPPE), diestearoil fosfatidil etanolamina (DSPE), dioleil fosfatidil etanolamina (DOPE), diaraquidoil fosfatidil etanolamina (DAPE), dilinoleil fosfatidil etanolamina, dilauroil fosfatidil serina (DLPS), dimiristoil fosfatidil serina (DMPS), diaraquidoil fosfatidil serina (DAPS), dipalmitoil fosfatidil serina (DPPS), diestearoil fosfatidil serina (DSPS), dioleoil fosfatidil serina (DOPS), dipalmitoil esfingomielina (DPSP), diestearoil esfingomielina (DSSP), dilauroil fosfatidil inositol (DLPI), diaraquidoil fosfatidil inositol (DAPI), dimiristoil fosfatidil inositol (DMPI), dipalmitoil fosfatidil inositol (DPPI), diestearoil fosfatidil inositol (DSPI), dioleoil fosfatidil innositol (DOPI).
5. Suspensão aquosa de acordo com a reivindicação 4, caracterizada por referidas microvesículas ainda compreenderem um fosfolipídeo peguilado.
6. Suspensão aquosa de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracterizada por referidas microvesículas ainda compreenderem um ácido graxo selecionado do grupo consistindo em ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido araquídico, ácido behênico, ácido oleico, ácido linoleico, e ácido linolênico.
7. Suspensão aquosa de acordo com a reivindicação 6, caracterizada por referidas microvesículas compreenderem uma mistura de DSPC, ácido palmítico e DSPE-PEG2000 ou DPPE-PEG5000.
8. Suspensão aquosa de acordo com a reivindicação 7, caracterizada por ácido palmítico estar presente em uma quantidade molar de 5% a 20%.
9. Suspensão aquosa de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por peptídeo ser conjugado com um fosfolipídeo para formar um lipopeptídeo.
10. Suspensão aquosa de acordo com a reivindicação 9, caracterizada por referido lipopeptídeo estar presente em uma quantidade molar de 0,1% a 5% em razão molar com relação aos outros componentes das microvesículas.
11. Suspensão aquosa de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por referido ligante-alvo ser um lipopeptídeo de fórmula II:
12. Suspensão aquosa de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por referidas microvesículas enchidas com gás compreenderem um gás fisiologicamente aceitável fluorado.
13. Suspensão aquosa de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por concentração de histidina na suspensão ser de 1,5 mM a 20 mM.
14. Suspensão aquosa de acordo com a reivindicação 13, caracterizada por concentração de histidina na suspensão ser de 2,5 mM a 10 mM.
15. Kit farmacêutico caracterizado por compreender: (a) um primeiro recipiente compreendendo um gás fisiologicamente aceitável em contato com uma formulação secada - congelada compreendendo (i) um fosfolipídeo, (ii) um ligante de alvo compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada de AGPTWCEDDWYYCWLFGTGGGK (SEQ ID NO. 01), VCWEDSWGGEVCFRYDPGGGK (SEQ ID NO. 02) ou uma combinação das mesmas, e (iii) histidina; e (b) um segundo recipiente compreendendo uma solução fisiologicamente aceitável contendo carboidrato para reconstituição de formulação secada - congelada em uma suspensão de microvesículas enchidas com gás.
16. Kit farmacêutico de acordo com a reivindicação 15, caracterizado por referido ligante-alvo estar na forma de um peptídeo dimérico compreendendo uma combinação de SEQ ID NO. 01 e SEQ ID NO. 02.
17. Kit farmacêutico de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 ou 16, caracterizado por referido segundo recipiente compreender uma solução de glicose.
18. Kit farmacêutico de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 a 17, caracterizado por quantidade de histidina no primeiro recipiente ser tal que a concentração de histidina na suspensão aquosa reconstituída de microvesículas enchidas com gás é de 1,5 mM a 20 mM.
19. Kit farmacêutico de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por quantidade de histidina ser tal que a concentração de histidina na suspensão aquosa reconstituída de microvesículas enchidas com gás é de 2,5 mM a 10 mM.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP14199057 | 2014-12-18 | ||
EP14199057.2 | 2014-12-18 | ||
PCT/EP2015/080199 WO2016097130A1 (en) | 2014-12-18 | 2015-12-17 | Targeted gas-filled microvesicles formulation |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
BR112017011258A2 BR112017011258A2 (pt) | 2018-04-03 |
BR112017011258B1 true BR112017011258B1 (pt) | 2024-02-06 |
Family
ID=52292644
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
BR112017011258-2A BR112017011258B1 (pt) | 2014-12-18 | 2015-12-17 | Suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás e kit farmacêutico |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US10682429B2 (pt) |
EP (1) | EP3233136B8 (pt) |
JP (1) | JP6803839B2 (pt) |
KR (1) | KR102190157B1 (pt) |
CN (2) | CN107206110B (pt) |
BR (1) | BR112017011258B1 (pt) |
CA (1) | CA2968478C (pt) |
DK (1) | DK3233136T3 (pt) |
ES (1) | ES2726924T3 (pt) |
HU (1) | HUE043680T2 (pt) |
IL (1) | IL252960A0 (pt) |
RU (1) | RU2725808C2 (pt) |
SG (1) | SG11201704165VA (pt) |
SI (1) | SI3233136T1 (pt) |
WO (1) | WO2016097130A1 (pt) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BR112018012618A2 (pt) * | 2015-12-21 | 2018-12-04 | C Unger Evan | composições da nano emulsão de fluorocarbonos e métodos de preparação e uso dos mesmos |
WO2018140425A1 (en) * | 2017-01-24 | 2018-08-02 | Nuvox Pharma Llc | Iso-osmotic and near iso-osmotic oxygen therapeutic formulations and methods thereof |
JP2022513886A (ja) * | 2018-12-21 | 2022-02-09 | ブラッコ・スイス・ソシエテ・アノニム | リガンドを含むガス充填微小胞 |
US20200360289A1 (en) | 2019-05-15 | 2020-11-19 | Bracco Suisse Sa | Freeze-dried product and gas-filled microvesicles suspension |
US11717570B2 (en) | 2019-05-15 | 2023-08-08 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles |
EP4103152A1 (en) * | 2020-02-11 | 2022-12-21 | Bracco Suisse SA | Gas-filled microvesicles for therapeutic use |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5445813A (en) | 1992-11-02 | 1995-08-29 | Bracco International B.V. | Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography |
IN172208B (pt) | 1990-04-02 | 1993-05-01 | Sint Sa | |
US5556610A (en) | 1992-01-24 | 1996-09-17 | Bracco Research S.A. | Gas mixtures useful as ultrasound contrast media, contrast agents containing the media and method |
IL104084A (en) | 1992-01-24 | 1996-09-12 | Bracco Int Bv | Sustainable aqueous suspensions of pressure-resistant and gas-filled blisters, their preparation, and contrast agents containing them |
IL116328A (en) | 1994-12-16 | 1999-09-22 | Bracco Research Sa | Frozen suspension of gas microbubbles in frozen aqueous carrier for use as contrast agent in ultrasonic imaging |
WO1997029783A1 (en) | 1996-02-19 | 1997-08-21 | Nycomed Imaging A/S | Improvements in or relating to contrast agents |
US7794693B2 (en) | 2002-03-01 | 2010-09-14 | Bracco International B.V. | Targeting vector-phospholipid conjugates |
CA2666005C (en) | 2002-03-01 | 2016-01-19 | Dyax Corp. | Kdr and vegf/kdr binding peptides and their use in diagnosis and therapy |
SI1482987T1 (sl) | 2002-03-01 | 2014-12-31 | Bracco Suisse Sa | Večvalentni konstrukti za terapevtske in diagnostične aplikacije |
US9364569B2 (en) | 2003-02-04 | 2016-06-14 | Bracco Suisse S.A. | Ultrasound contrast agents and process for the preparation thereof |
KR101323849B1 (ko) * | 2005-12-09 | 2013-11-07 | 브라코 스위스 에스.에이. | 표적화 벡터-포스포리피드 컨쥬게이트 |
CN101528197B (zh) * | 2006-10-06 | 2013-02-13 | Scil技术股份有限公司 | 药物应用的干燥重建囊泡制剂 |
KR101893423B1 (ko) * | 2010-08-09 | 2018-08-31 | 브라코 스위스 에스.에이. | 표적화 기체-충전 미세소포 |
-
2015
- 2015-12-17 CN CN201580068643.2A patent/CN107206110B/zh active Active
- 2015-12-17 SG SG11201704165VA patent/SG11201704165VA/en unknown
- 2015-12-17 CN CN202110508526.0A patent/CN113209316A/zh active Pending
- 2015-12-17 CA CA2968478A patent/CA2968478C/en active Active
- 2015-12-17 ES ES15816144T patent/ES2726924T3/es active Active
- 2015-12-17 SI SI201530750T patent/SI3233136T1/sl unknown
- 2015-12-17 EP EP15816144.8A patent/EP3233136B8/en active Active
- 2015-12-17 HU HUE15816144A patent/HUE043680T2/hu unknown
- 2015-12-17 BR BR112017011258-2A patent/BR112017011258B1/pt active IP Right Grant
- 2015-12-17 WO PCT/EP2015/080199 patent/WO2016097130A1/en active Application Filing
- 2015-12-17 KR KR1020177018608A patent/KR102190157B1/ko active IP Right Grant
- 2015-12-17 DK DK15816144.8T patent/DK3233136T3/da active
- 2015-12-17 RU RU2017125459A patent/RU2725808C2/ru active
- 2015-12-17 JP JP2017527580A patent/JP6803839B2/ja active Active
- 2015-12-17 US US15/536,393 patent/US10682429B2/en active Active
-
2017
- 2017-06-15 IL IL252960A patent/IL252960A0/en active IP Right Grant
-
2020
- 2020-05-06 US US16/867,685 patent/US11071792B2/en active Active
-
2021
- 2021-06-21 US US17/352,773 patent/US20210386872A1/en active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
SG11201704165VA (en) | 2017-07-28 |
DK3233136T3 (da) | 2019-05-20 |
US20210386872A1 (en) | 2021-12-16 |
EP3233136B8 (en) | 2019-04-10 |
CN113209316A (zh) | 2021-08-06 |
US10682429B2 (en) | 2020-06-16 |
KR20170097672A (ko) | 2017-08-28 |
ES2726924T3 (es) | 2019-10-10 |
IL252960A0 (en) | 2017-08-31 |
WO2016097130A1 (en) | 2016-06-23 |
RU2017125459A (ru) | 2019-01-21 |
RU2017125459A3 (pt) | 2019-06-19 |
US20200330620A1 (en) | 2020-10-22 |
EP3233136A1 (en) | 2017-10-25 |
US20180008731A1 (en) | 2018-01-11 |
CA2968478A1 (en) | 2016-06-23 |
KR102190157B1 (ko) | 2020-12-14 |
CN107206110A (zh) | 2017-09-26 |
EP3233136B1 (en) | 2019-02-20 |
HUE043680T2 (hu) | 2019-09-30 |
SI3233136T1 (sl) | 2019-08-30 |
RU2725808C2 (ru) | 2020-07-06 |
CA2968478C (en) | 2021-10-12 |
JP6803839B2 (ja) | 2020-12-23 |
US11071792B2 (en) | 2021-07-27 |
CN107206110B (zh) | 2021-07-20 |
JP2018500294A (ja) | 2018-01-11 |
BR112017011258A2 (pt) | 2018-04-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4670083B2 (ja) | 超音波造影剤およびその製造方法 | |
AU2007293888B2 (en) | Gas-filled microvesicles with polymer-modified lipids | |
BR112017011258B1 (pt) | Suspensão aquosa de microvesículas enchidas com gás e kit farmacêutico | |
CN103079599B (zh) | 靶向气体填充微囊 | |
ES2965028T3 (es) | Producto liofilizado y suspensión de microvesículas llenas de gas | |
CN105026030B (zh) | 充气微泡 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
B07D | Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette] |
Free format text: DE ACORDO COM O ARTIGO 229-C DA LEI NO 10196/2001, QUE MODIFICOU A LEI NO 9279/96, A CONCESSAO DA PATENTE ESTA CONDICIONADA A ANUENCIA PREVIA DA ANVISA. CONSIDERANDO A APROVACAO DOS TERMOS DO PARECER NO 337/PGF/EA/2010, BEM COMO A PORTARIA INTERMINISTERIAL NO 1065 DE 24/05/2012, ENCAMINHA-SE O PRESENTE PEDIDO PARA AS PROVIDENCIAS CABIVEIS. |
|
B07G | Grant request does not fulfill article 229-c lpi (prior consent of anvisa) [chapter 7.7 patent gazette] | ||
B06U | Preliminary requirement: requests with searches performed by other patent offices: procedure suspended [chapter 6.21 patent gazette] | ||
B06A | Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette] | ||
B09A | Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette] | ||
B16A | Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 17/12/2015, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS |