BR112013002764B1

BR112013002764B1 - Formulações estabilizadas contendo anticorpos anti-ngf e uso das mesmas

Info

Publication number: BR112013002764B1
Application number: BR112013002764-9A
Authority: BR
Inventors: Terra Potocky; Daniel Dix; Renuka Sivendran; Scott M. Walsh
Original assignee: Regeneron Pharmaceuticals, Inc.
Priority date: 2010-07-14
Filing date: 2011-07-11
Publication date: 2022-08-23
Also published as: KR20130079486A; AU2016204515B2; RU2013106275A; JOP20190250A1; RU2700174C2; UA111825C2; US20210107974A1; RU2728575C1; TW201216983A; CA2805388A1; AU2015202886B2; SG187128A1; RU2020123963A3; RU2017109249A; UY33515A; US20160017029A1; WO2012009254A1; US20120014968A1; CN103108656B; BR112013002764A8

Abstract

FORMULAÇÕES ESTABILIZADAS CONTENDO ANTICORPOS ANTI-NGF. A presente invenção provê formulações farmacêuticas compreendendo um anticorpo humano que especificamente se liga ao fator de crescimento do nervo humano (hNGF). As formulações podem conter, além do anticorpo anti-hNGF, pelo menos um tensoativo, pelo menos um açúcar e acetato. As formulações farmacêuticas da presente invenção exibem um grau substancial de estabilidade do anticorpo após armazenamento por vários meses.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção se refere ao campo das formulações de anticorpos terapêuticos. Mais especificamente, a presente invenção se refere ao campo das formulações farmacêuticas compreendendo um anticorpo humano que se liga especificamente ao fator de crescimento do nervo humano (NGF).

ANTECEDENTES

[002] As macromoléculas terapêuticas (por exemplo, anticorpos) devem ser formuladas de um modo que não só faz com que as moléculas sejam adequadas para a administração a pacientes, mas também mantém diz respeiro à sua estabilidade durante a armazenagem. Por exemplo, os anticorpos terapêuticos em uma solução líquida são propensos à agregação, à degradação, e//ou a modificações químicas indesejáveis a menos que a solução seja formulada de uma maneira adequada. A estabilidade de um anticorpo na formulação líquida depende não só do tipo de Excipientees utilizados na formulação, mas também sobre as quantidades e proporções relativas dos Excipientees uns com os outros. Além disso, outras considerações importantes quanto à estabilidade devem ser tidas em conta quando se prepara uma formulação líquida de anticorpo. Exemplos de tais considerações adicionais incluem a viscosidade da solução e a concentração de anticorpo que pode ser acomodado por meio de uma dada formulação. Dessa maneira, quando formulando um anticorpo terapêutico, todo cuidado deve ser tomado para se chegar a uma formulação que é estável, contendo uma concentração adequada de anticorpos, e possui uma viscosidade adequada, bem como outras propriedades que permitem que a formulação venha a ser administrada de uma maneira conveniente ao paciente.

[003] Os anticorpos contra o fator de crescimento do nervo humano (hNGF)são um exemplo de uma macromolécula terapeuticamente relevante que necessita de formulação adequada. Os anticorpos anti-NGF são clinicamente úteis para o tratamento e//ou para a prevenção de doenças, tais como a osteoartrite, dor ciática, e outras condições, tais como dor inflamatória, dor neuropática, dor e câncer.

[004] Apesar de os anticorpos anti-NGF serem conhecidos, continua a haver uma necessidade na técnica para as novas formulações farmacêuticas compreendendo os anticorpos anti-hNGF, que são suficientemente estáveis e também adequados para administração a pacientes.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[005] A presente invenção satisfaz a necessidade mencionada acima, proporcionando as formulações farmacêuticas compreendendo um anticorpo humano que se liga especificamente ao fator de crescimento do nervo humano (hNGF). As formulações da presente invenção podem compreender Excipientees, para além do anticorpo anti-hNGF. Por exemplo, em certas modalidades, a formulação pode compreender (i) um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF, (ii) um tensoativo não iônico, e (iii)pelo menos, um carboidrato. O tensoativo não iônico pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em polissorbato 20, polissorbato 80, oleato de polióxietileno- sorbitano e o polietilenoglicol. Em uma modalidade, o agente tensoativo não iônico é o polissorbato 20. O carboidrato pode ser um açúcar, tal como, por exemplo, sacarose, glucose, manitol, sorbitol, latose ou trealose. Em uma modalidade, o açúcar é a sacarose.

[006] Em uma modalidade, a formulação farmacêutica compreende: (i) cerca de 0,1 a 100 mg /mL de um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF, (ii) cerca de 0,01 a 1,0 % de polissorbato 20, e (iii) cerca de 1 a 20 % de sacarose.

[007] Em uma modalidade, a formulação farmacêutica compreende: (i) cerca de 0,2 a 75 mg /mL de um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF, (ii) cerca de 0,02 a 0,5% de polissorbato 20, e (iii) cerca de 5 a 10% de sacarose.

[008] Em uma modalidade, a formulação farmacêutica compreende: (i) cerca de 0,6 a 60 mg /mL de um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF, (ii) cerca de 0,05% de polissorbato 20 e (iii) cerca de 8% de sacarose.

[009] Em certas modalidades, a formulação farmacêutica compreende ainda cerca de 1,0 mM a cerca de 50 mM de acetato.

[010] Em uma modalidade, a formulação farmacêutica compreende: (i) cerca de 1 a 100 mg /mL de um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF, (ii) cerca de 0,01 a 1.0% de polissorbato 20, e (iii) cerca de 1 a 20% de sacarose. Em certas modalidades, a formulação farmacêutica compreende ainda cerca de 1,0 mM a cerca de 50 mM de acetato.

[011] Em uma modalidade, a formulação farmacêutica compreende: (i) cerca de 5 a 75 mg /mL de um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF, (ii) cerca de 0,02 a 0,5% de polissobarto 20, (iii) de 5 a 10 % de sacarose, e (iv) cerca de 5 a 20 mM de acetato.

[012] Em uma modalidade, a formulação farmacêutica compreende: (i) cerca de 6 a 60 mg /mL de um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF, (ii) cerca de 0,05% de polissorbato 20; (iii) cerca de 8% de sacarose, e (iv) cerca de 10 mM de acetato.

[013] Em certas modalidades, a formulação pode também conter pelo menos um aminoácido, por exemplo, histidina ou de arginina. Em certas modalidades, a concentração de histidina ou de arginina pode variar de cerca de 25 mM a cerca de 100 mM.

[014] De acordo com certas modalidades da presente invenção, a formulação é preparada de um tampão que seja capaz de manter um pH variando entre cerca de pH 4,5 a cerca de pH 5,6, por exemplo, um tampão de acetato.

[015] Em certas modalidades da presente invenção, a formulação farmacêutica apresenta uma viscosidade inferior a cerca de 15 cPoise (1,5 Pa^s), ou menos do que cerca de 12 cPoise (1,2 Pa^s), ou menos do que cerca de 9 cPoise (1,5 Pa^s).

[016] O anticorpo contido dentro das formulações farmacêuticas da presente invenção pode ser qualquer anticorpo, ou uma proteína ou armadilha de fusão, a qual se liga especificamente a hNGF. Exemplos de anticorpos que podem estar contidos dentro das formulações da presente invenção são os anticorpos que compreendem uma região variável da cadeia pesada (HCVR)e uma região variável da cadeia leve (LCVR), em que a HCVR compreende a região de complementaridade determinante da cadeia pesada (HCDR)1 tendo a sequência de aminoácido de SEQ ID NO: 6, a HCDR2 tem a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, e um HCDR3 tem a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 10, e em que a LCVR compreende uma região de complementaridade determinante da cadeia leve ( LCDR)1 que possui a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 14, uma LCDR2 que tem a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 16, e uma LCDR3 que tem a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 18,

[017] Em certas modalidades, o anticorpo contido dentro das formulações da presente invenção é um anticorpo que compreende uma HCVR tendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 20 e uma LCVR tendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 22.

[018] Em certas modalidades, o anticorpo contido dentro das formulações da presente invenção é um anticorpo que compreende uma HCVR tendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO:4 e uma LCVR tendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 12.

[019] Em certas modalidades, as formulações farmacêuticas podem ser administradas por via intravenosa ou por via subcutânea a um paciente em necessidade do mesmo. Por conseguinte, em determinadas modalidades, a formulação farmacêutica, tal como descrita na presente invenção, pode ser utilizada com o objetivo de tratar, prevenir, ou melhorar pelo menos um sintoma de uma doença ou distúrbio associado com a atividade de NGF ou ativação de NGF. Como exemplos não limitativos, as doenças e os distúrbios que podem ser tratados e /ou prevenidos através da administração das formulações farmacêuticas da presente invenção incluem, dor resultante de qualquer condição associada com dor neurogênica, neuropática ou nociceptica. Em certas modalidades da dor neuropática, a referida neuralgia trigeminal, nevralgia pós-herpética, dor de membro fantasma, fibromialgia, distrofia simpática reflexa e as condições de dor de origem neural são tratadas. Em outras modalidades, a dor do câncer, particularmente, câncer de dor óssea, osteoartrite ou dor da artrite reumatóide, dor lombar, dor de incisão pós-operatória, dor de fratura, dor de fratura osteoporótica, osteoporose, dores articulares, neuropatia diabética, dor associada à ciática, dores associadas a crises de células falciformes, enxaqueca, e outras dores neuropáticas e /ou nocicepticas são tratadas com as formulações decsritas na presebte invenção.

[020] As formulações de anticorpo da presente invenção podem estar contidas dentro de qualquer recipiente adequado, útil para o armazenamento de formulações farmacêuticas. Exemplos de tais recipientes adequados incluem, por exemplo, vidro ou frascos de plástico, as seringas e cartuchos. O recipiente pode ser transparente ou opaco (por exemplo, âmbar). Em certas modalidades, os frascos ou seringas são revestidos com silicone, tais como o dióxido de silicone. Em certas modalidades, o espaço da cabeça dos frascos são cheios com um gás inerte para deslocar o óxigênio eventualmente presente, que pode ter um efeito adverso sobre a estabilidade do anticorpo. O gás inerte pode ser selecionado a partir de nitrogênio ou argônio.

[021] De acordo com certos aspectos da presente invenção, as formulações farmacêuticas permanecem relativamente estáveis, após armazenamento durante vários dias, meses ou anos, a uma dada temperatura. Por exemplo, em certas modalidades exemplificativas da presente invenção, uma porcentagem elevada do anticorpo (por exemplo, 90% , 95% , 96% ou mais), é mantida na sua forma nativa após, pelo menos, 3, 6, 9 ou mais meses de armazenamento. A porcentagem de forma nativa do anticorpo pode ser medida, por exemplo, por SE-HPLC, ou por meio de qualquer outro método conhecido na técnica. A temperatura de armazenamento em que a estabilidade do anticorpo é mantida pode ser, por exemplo, -80°C, - 40°C, -30°C, -20°C, 0°C, 5°C, 25°C, 37°C, 45°C, ou superior.

[022] Outras modalidades da presente invenção serão evidentes a partir de uma revisão da descrição que se segue detalhada.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[023] Antes da presente invenção ser descrita, é para ser entendido que a presente invenção não está limitada aos métodos específicos e as condições experimentais descritas, em que esses métodos e condições podem variar. É também para ser compreendido que a terminologia utilizada na presente invenção é para o propósito de descrever apenas as modalidades particulares, e não se destina a ser limitativa, uma vez que o âmbito da presente invenção será limitado apenas por meio das reivindicações em anexo.

[024] A menos que definido de uma outra maneira, todos os termos técnicos e científicos usados na presente invenção têm o mesmo significado que normalmente entendido por aquele que é versado na técnica à qual a presente invenção pertence. Tal como usado na presente invenção, o termo "cerca de", quando utilizado em referência a um determinado valor numérico recitado, significa que o valor pode variar desde o valor recitado por não mais do que 1%. Por exemplo, tal como usado na presente invenção, a expressão "cerca de 100" inclui 99 e 101, e todos os valores entre (por exemplo, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4, etc.)

[025] Apesar de quaisquer métodos e materiais similares ou equivalentes aos descritos na presente invenção possam ser utilizados na prática ou teste da presente invenção, os métodos e materiais preferidos são agora descritos. Todas as publicações mencionadas na presente invenção são incorporadas na presente invenção como referência para descrever na íntegra.

[026] Antes da presente invenção ser descrita, é para ser entendido que a presente invenção não está limitada aos métodos específicos e as condições experimentais descritas, em que esses métodos e condições podem variar. É também para ser compreendido que a terminologia utilizada na presente invenção é para o propósito de descrever apenas as modalidades particulares, e não se destina a ser limitativa, uma vez que o âmbito da presente invenção será limitado apenas por meio das reivindicações em anexo.

[027] A menos que definido de uma outra maneira, todos os termos técnicos e científicos usados na presente invenção têm o mesmo significado que normalmente entendido por aquele que é versado na técnica à qual a presente invenção pertence. Tal como usado na presente invenção, o termo "cerca de", quando utilizado em referência a um determinado valor numérico recitado, significa que o valor pode variar desde o valor recitado por não mais do que 1%. Por exemplo, tal como usado na presente invenção, a expressão "cerca de 100" inclui 99 e 101, e todos os valores entre (por exemplo, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4, etc.).

[028] Apesar de quaisquer métodos e materiais similares ou equivalentes aos descritos na presente invenção possam ser utilizados na prática ou teste da presente invenção, os métodos e materiais preferidos são agora descritos. Todas as publicações mencionadas na presente invenção são incorporadas na presente invenção como referência para descrever na íntegra.

FORMULAÇÕES FARMACÊUTICAS

[029] Tal como usado na presente invenção, o termo "formulação farmacêutica" significa uma combinação de pelo menos um ingrediente ativo (por exemplo, uma molécula pequena, macromolécula, composto, etc, que é capaz de exercer um efeito biológico em um animal humano ou não humano), e pelo menos um ingrediente inativo, que, quando combinado com o ingrediente ativo e /ou um ou mais outros ingredientes inativos, é adequado para administração terapêutica a um animal humano ou não humano. A "formulação", tal como se utiliza na presente invenção, significa "formulação farmacêutica", a menos que seja indicado, de uma maneira específica, de uma outra maneira. A presente invenção proporciona as formulações farmacêuticas que compreendem pelo menos um polipeptídeo terapêutico. De acordo com certas modalidades da presente invenção, o polipeptídeo terapêutico é um anticorpo que se liga especificamente ao fator de crescimento do nervo humano (hNGF) ou um fragmento de ligação ao antigênio deste. Mais especificamente, a presente invenção inclui as composições farmacêuticas que compreendem: (i) um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF, (ii) um tensoativo não iônico, e (iii) pelo menos, um carboidrato. Os Componentees específicos exemplares e as formulações incluídas no âmbito da presente invenção são descritos em detalhe abaixo.

[030] Em certas modalidades da presente invenção, o "tensoativo" pode ser um agente tensoativo não iônico que é selecionado a partir do grupo que consiste em polissorbato 20, polissorbato 80, oleato de polióxietileno-sorbitano e o polietilenoglicol.

[031] As formulações farmacêuticas da presente invenção podem, em certas modalidades, ser formulações fluidas. Tal como usado na presente invenção, a expressão "formulação de fluido" significa uma mistura de pelo menos dois Componentees que existe predominantemente no estado fluido a cerca de 5°C a cerca de 45°C. As formulações de fluidos incluem, inter alia, as formulações líquidas. As formulações de fluidos podem ser de viscosidade baixa, moderada ou elevada, dependendo dos seus constituintes particulares.

ANTICORPOS QUE SE LIGAM ESPECIFICAMENTE A hNGF

[032] As formulações farmacêuticas da presente invenção podem compreender um anticorpo humano, ou um fragmento de ligação ao antigênio do mesmo, que se liga especificamente a hNGF. Tal como usado na presente invenção, o termo "hNGF" significa um fator de crescimento do nervo humano com a sequência de aminoácidos tal como mostrada em SEQ ID NO: 2, que é codificada por meio da sequência de ácido nucleico apresentada na SEQ ID NO: 1.

[033] O termo "anticorpo", tal como usado na presente invenção, destina-se geralmente para se referir a moléculas de imunoglobulina que compreendem quatro cadeias polipeptídicas, duas cadeias pesadas (H)e duas cadeias leves (L)inter- ligadas por meio das pontes de dissulfureto, assim como multímeros do mesmo (por exemplo, IgM), no entanto, as moléculas de imunoglobulina que consistem em apenas cadeias pesadas (ou seja, sem as cadeias leves)são também abrangidas no âmbito da definição do termo "anticorpo". Cada cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada (na presente invenção abreviada como HCVR ou VH)e uma região constante de cadeia pesada. A região constante da cadeia pesada compreende três domínios, CH1, CH2 e CH3. Cada cadeia leve compreende uma região variável da cadeia leve (na presente invenção abreviada como LCVR ou VL)e uma região constante de cadeia leve. A região constante da cadeia leve compreende um domínio (CL1). As regiões VH e VL podem ser ainda subdivididas em regiões de hipervariabilidade, denominadas como regiões de determinação complementares (CDRs), intercaladas com regiões que são mais conservadas, designadas por meio das regiões de estrutura (FR). Cada VH e VL é composto por meio das três CDRs e quatra FRs, dispostas a partir do terminal amino para o terminal carbóxila, na seguinte ordem: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4,

[034] A menos que seja indicado, de uma maneira específica, de uma outra maneira, o "anticorpo", tal como utilizado no presente documento, deve ser entendido para abranger as moléculas de anticorpo completas, bem como fragmentos de ligação ao antigênio dos mesmos. Os termos "porção de ligação ao antigênio" de um anticorpo, "fragmento de ligação ao antigênio" de um anticorpo, e outros similares, tal como usado na presente invenção, inclui qualquer polipeptídeo ou glicoproteína de ocorrência natural, obtido enzimática, sintética ou geneticamente modificado que se liga especificamente a um antígeno para formar um complexo. Os termos "porção de ligação ao antigênio" de um anticorpo, ou "fragmento de anticorpo", como usado na presente invenção, se refere a um ou mais fragmentos de um anticorpo que retêm a capacidade de se ligar especificamente a hNGF.

[035] Um "anticorpo isolado", tal como usado na presente invenção, pretende referir-se a um anticorpo que é substancialmente isento de outros anticorpos que possuem as especificidades antigênicas diferentes (por exemplo, um anticorpo isolado que se liga especificamente a hNGF é substancialmente isento de anticorpos que se ligam especificamente aos antígenos excepto hNGF).

[036] O termo "liga especificamente", ou similar, significa que um anticorpo ou fragmento de ligação ao antigênio da mesma forma um complexo com um antigênio que seja relativamente estável em condições fisiológicas. A ligação específica pode ser caraterizada por meio de uma constante de dissociação de pelo menos cerca 1x10-6 M ou mais. Os métodos para determinar se as duas moléculas se ligam especificamente são bem conhecidos na técnica e incluem, por exemplo, a diálise de equilíbrio, ressonância de superfície plasmônica, e similares. Um anticorpo isolado que se liga especificamente a hNGF poderá, no entanto, ter uma reatividade cruzada a outros antigênios, tais como moléculas de NGF de outras espécies. No contexto da presente invenção, os anticorpos multi-específicos (por exemplo, bi- específicos)que se ligam a hNGF, bem como um ou mais antigênios adicionais, são consideradas como "se ligam especificamente" a hNGF. Além disso, um anticorpo isolado pode ser substancialmente isento de outro material celular e /ou produtos químicos.

[037] Exemplos de anticorpos anti-hNGF que podem ser incluídos nas formulações farmacêuticas da presente invenção estão definidos nas EUA 20090041717, cuja divulgação é incorporada na presente invenção por meio da referência na sua totalidade.

[038] De acordo com certas modalidades da presente invenção, o anticorpo anti-hNGF, ou fragmento de ligação ao antigênio do mesmo, compreende a região determinante de complementaridade da cadeia pesada (HCDR)1 que possui a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO:6, a HCDR2 tendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 8, e um HCDR3 que tem a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 10.

[039] De acordo com certas modalidades da presente invenção, o anticorpo anti-hNGF, ou fragmento de ligação ao antigênio do mesmo, compreende uma região determinante de complementaridade da cadeia leve (LCDR)1 que possui a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO:14, uma LCDR2 tendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 16, e uma LCDR3 que tem a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 18,

[040] Em certas modalidades, o anticorpo anti-hNGF, ou fragmento de ligação ao antigênio da mesma, compreende -=HCDR1 HCDR2 HCDR3-/LCDR1-LCDR2 LCDR3-domínios, respectivamente, selecionados a partir do grupo que consiste nas SEQ ID NOs:6-8 - 10 /SEQ ID Nos : 14 - 16 - 18,

[041] Em certas modalidades, o anticorpo anti-hNGF, ou fragmento de ligação ao antigênio do mesmo, compreende uma região variável de cadeia pesada (HCVR)com uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste na SEQ ID NO:4, e 20. Em certas modalidades, o anticorpo anti-hNGF ou de ligação ao antigênio dos fragmentos da mesma, compreende uma região variável da cadeia leve (LCVR)com uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste na SEQ ID NO: 12 e 22. Em certas modalidades, o anticorpo anti-hNGF ou de ligação ao antigênio dos fragmentos da mesma, compreende um par de sequência de aminoácidos HCVR/LCVR selecionado a partir do grupo que consiste na SEQ ID NO: 4/12 e 20/22.

[042] O anticorpo não limitativo exemplar utilizado no presente contexto é referido como "mAb1". Este anticorpo também é referido nos EUA 20090041717 e como descrito na presente invenção, compreende uma par de sequência de aminoácidos HCVR/LCVR com SEQ ID NOs: 20/22, e domínios HCDR1 HCDR2--HCDR3 /LCDR1- LCDR2 LCDR3 representados por meio das SEQ ID NOs : 6 - 8 - 10 /SEQ ID Nos: 14 - 16 - 18.

[043] A quantidade de anticorpo, ou fragmento de ligação ao antigênio do mesmo, contida dentro das formulações farmacêuticas da presente invenção podem variar dependendo das propriedades específicas desejadas das formulações, bem como as circunstâncias particulares e as finalidades para as quais as formulações se destinam para serem usadas. Em certas modalidades, as formulações farmacêuticas podem conter cerca de 0,01 mg /mL até cerca de 500 mg /mL de anticorpo, cerca de 1 mg /mL a cerca de 500 mg /mL de anticorpo, cerca de 5 mg /mL a cerca de 400 mg /mL de anticorpo , cerca de 5 mg /mL até cerca de 200 mg /mL de anticorpo, cerca de 25 mg /mL a cerca de 180 mg /mL de anticorpo, cerca de 25 mg /mL a cerca de 150 mg /mL de anticorpo, ou cerca de 50 mg /mL para cerca de 180 mg /mL de anticorpo. Em certas modalidades, as formulações farmacêuticas podem conter cerca de 0,1 mg /mL a cerca de 100 mg /mL de anticorpo, cerca de 0,2 mg /mL a cerca de 75 mg /mL de anticorpo, cerca de 0,6 mg /mL até cerca de 60 mg /mL de anticorpo. Por exemplo, as formulações da presente invenção podem compreender de cerca de 0,1 mg /mL, cerca de 0,2 mg /mL, cerca de 0,6 mg /mL, cerca de 1 mg /mL, cerca de 2 mg /mL, cerca de 5 mg /mL, cerca de 10 mg /mL, cerca de 15 mg /mL, cerca de 20 mg /mL, cerca de 25 mg /mL, cerca de 30 mg /mL, cerca de 35 mg /mL, cerca de 40 mg /mL, cerca de 45 mg /mL, cerca de 50 mg /mL , cerca de 55 mg /mL, cerca de 60 mg /mL, cerca de 65 mg /mL, cerca de 70 mg /mL, cerca de 75 mg /mL, cerca de 80 mg /mL, cerca de 85 mg /mL, cerca de 86 mg /mL, cerca 87 mg /mL, cerca de 88 mg /mL, cerca de 89 mg /mL, cerca de 90 mg /mL, cerca de 95 mg /mL, cerca de 100 mg /mL, cerca de 105 mg /mL, cerca /mL, cerca de 120 mg /mL, cerca /mL, cerca de 131 mg /mL, cerca de 110 mg /mL, cerca de 115 mg de 125 mg /mL, cerca de 130 mg de 132 mg /mL, cerca de 133 mg /mL, cerca de 134 mg /mL, cerca de 135 mg /mL , cerca de 140 mg /mL, cerca de 145 mg /mL, cerca de 150 mg /mL, cerca de 155 mg /mL, cerca de 160 mg /mL, cerca de 165 mg /mL, cerca de 170 mg /mL, cerca de 175 mg /mL, cerca 180 mg /mL, cerca de 185 mg /mL, cerca de 190 mg /mL, cerca de 195 mg /mL, ou cerca de 200 mg /mL de um anticorpo ou um fragmento de ligação ao antigênio dos mesmos, que se liga especificamente a hNGF.

EXCIPIENTES E pH

[044] As formulações farmacêuticas da presente invenção compreendem um ou mais Excipientees. O "Excipientee", tal como se utiliza na presente invenção, significa qualquer agente não terapêutico adicionado à formulação com a finalidade de proporcionar uma consistência de viscosidade desejada, ou efeito estabilizante.

[045] Em certas modalidades, a formulação farmacêutica da presente invenção compreende um tampão apropriado para manter um pH que varia de cerca de 4,5 a cerca de 5,6. Um tampão exemplar apropriado para o uso nas formulações da presente invenção inclui, por exemplo, um tampão de acetato. Em uma modalidade, o tampão de acetato é preparado a uma concentração de 10 mM.

[046] A quantidade de acetato contida dentro das formulações farmacêuticas da presente invenção pode variar de cerca de 1 mM a cerca de 50 mM, cerca de 2 mM a cerca de 20 mM, cerca de 3 mM a cerca de 12 mM, ou cerca de 10 mM.

[047] As formulações farmacêuticas da presente invenção podem também compreender um ou mais carboidratos, por exemplo, um ou mais açúcares. O açúcar pode ser um açúcar redutor ou um açúcar não redutor. Os termos "açúcares redutores" incluem, por exemplo, açúcares com um grupo cetona ou aldeído e contendo um grupo reativo, hemiacetal, que permite que o açúcar venha a agir como um agente redutor. Exemplos específicos de açúcares redutores incluem frutose, glucose, gliceraldeído, lactose, arabinose, manose, xilase, ribose, ramnose, galatose e maltose. Os açúcares não redutores podem compreender um átomo de carbono anomérico, que é um acetal e que não é substancialmente reativa com aminoácidos ou polipeptídeos de iniciar uma reação de Maillard. Exemplos específicos de açúcares não redutores incluem sacarose, trealose, sorbose, sucralose, melezitose, rafinose e sorbitol. Ácidos de açúcares incluem, por exemplo, ácidos sacárico, gluconato e outros açúcares poli-hidróxi e os sais dos mesmos.

[048] A quantidade de açúcar contida dentro das formulações farmacêuticas da presente invenção irá variar, dependendo das circunstâncias e dos propósitos específicos pretendidos para que as formulações sejam utilizadas. Em certas modalidades, as formulações podem conter cerca de 0,1% a cerca de 20% de açúcar, cerca de 0,5% até cerca de 20% de açúcar, cerca de 1% a cerca de 20% de açúcar, cerca de 2% a cerca de 15% de açúcar, cerca de 3% a cerca de 10 % de açúcar, cerca de 4% a cerca de 10% de açúcar, ou de cerca de 5% a cerca de 10% de açúcar. Por exemplo, as formulações farmacêuticas da presente invenção podem compreender de cerca de 0,5% , cerca de 1,0% , cerca de 1,5% , cerca de 2,0% , cerca de 2,5% , cerca de 3,0% , cerca de 3,5% , cerca de 4,0% , cerca de 4,5% , cerca de 5,0 % ; cerca de 5,5% , cerca de 6,0% e 6,5% , cerca de 7,0% , cerca de 7,5% , cerca de 8,0% , cerca de 8,5% , cerca de 9,0% , cerca de 9,5% , cerca de 10,0% , cerca de 10,5% , cerca de 11,0% , cerca de 11,5% , cerca de 12,0% , cerca de 12,5% , cerca de 13,0% , cerca de 13,5% , cerca de 14,0% , cerca de 14,5% , cerca de 15,0% , cerca de 15,5% , cerca de 16,0% ; 16,5% , cerca de 17,0% , cerca de 17,5% ; açúcar cerca de 18,0% , cerca de 18,5% , cerca de 19,0% , cerca de 19,5% ou cerca de 20,0% (por exemplo, sacarose), .

[049] As formulações farmacêuticas da presente invenção podem também compreender um ou mais agentes tensoativos. Como usado na presente invenção, o "agente tensoativo" significa uma substância que reduz a tensão superficial de um líquido em que está dissolvido e/ou reduz a tensão interfacial entre óleo e água. Os tensoativos podem ser iônicos ou não iônicos. Exemplos de tensoativos não iônicos que podem ser incluídos nas formulações da presente invenção incluem, por exemplo, poli (óxido de etileno)alquila , alquilpoliglucosídeos (por exemplo, octilglucosídeo e maltósido de decila), álcoois graxos tais como álcool cetílico e álcool oleílico, cocamida MEA, cocamida DEA e cocamida TEA. Os tensoativos não iônicos específicos que podem ser incluídos nas formulações da presente invenção incluem, por exemplo, polissorbatos, tais como polissorbato 20, polissorbato 28, polissorbato 40, polissorbato 60, polissorbato 65, polissorbato 80, polissorbato 81 e polissorbato 85; poloxâmeros tais como poloxâmero 188, poloxâmero 407, polietileno- polipropileno-glicol, ou o polietileno glicol (PEG). Polissorbato 20 é também conhecido como Tween 20, monolaurato de sorbitano e monolaurato de polioxietileno.

[050] A quantidade de tensoativo contida dentro das formulações farmacêuticas da presente invenção pode variar dependendo das propriedades específicas desejadas das formulações, bem como as circunstâncias particulares e as finalidades para as quais as formulações se destinam a ser utilizadas. Em certas modalidades, as formulações podem conter cerca de 0,01% a cerca de 10% de agente tensoativo, cerca de 0,05% a cerca de 5% de tensoativo, ou cerca de 0,1% até cerca de 1% de tensoativo. Por exemplo, as formulações da presente invenção podem compreender cerca de 0,01% , cerca de 0,02% , cerca de 0,03% , cerca de 0,04% , cerca de 0,05% , cerca de 0,06% , cerca de 0,07% , cerca de 0,08% , cerca de 0,09% , cerca de 0,10% , cerca de 0,11% , cerca de 0,12% , cerca de 0,13% , cerca de 0,14% , cerca de 0,15% , cerca de 0,16% , cerca de 0,17% , cerca de 0,18% , cerca de 0,19% , cerca de 0,20% , cerca de 0,21% , cerca de 0,22%, cerca de 0,23% , cerca de 0,24% , cerca de 0,25% , cerca de 0,26% , cerca de 0,27% , cerca de 0,28% , cerca de 0,29%ou cerca de 0,30% de tensoativo (por exemplo, polissorbato 20)..

[051] As formulações farmacêuticas da presente invenção podem ter um pH de cerca de 4,0 a cerca de 6,0. Por exemplo, as formulações da presente invenção podem ter um pH de cerca de 4,2, cerca de 4,4, cerca de 4,6, cerca de 4,8, cerca de 5,0, cerca de 5,2, cerca de 5,4, cerca de 5,6, cerca de 5,8, ou cerca de 6,0.

FORMULAÇÕES EXEMPLARES

[052] De acordo com um aspecto da presente invenção, a formulação farmacêutica compreende: (i)um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF (por exemplo, mAb1), (ii)acetato de etila, e (iii)um açúcar (por exemplo, sacarose). As modalidades exemplares específicas, não limitativas, englobadas por meio deste aspecto da presente invenção são apresentadas na Tabela 1. Tabela 1

[053] De acordo com um outro aspecto da presente invenção, a formulação farmacêutica compreende: (i)um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF (por exemplo, mAb1), (ii)acetato de metila, (iii)um açúcar (por exemplo, sacarose); e (iv)um agente tensoativo (por exemplo, polissorbato 20). As modalidades exemplares específicas, não limitativas, englobadas por meio deste aspecto da presente invenção são apresentadas nas Tabelas 2A e 2B.

[054] De acordo com um outro aspecto da presente invenção, a formulação farmacêutica compreende: (i)um anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF (por exemplo, mAb1), (ii)acetato de metila, (iii)um açúcar (por exemplo, sacarose); (iv)um agente tensoativo (por exemplo, polissorbato 20), (v)um primeiro aminoácido (por exemplo, histidina), e (v)um segundo aminoácido (por exemplo, arginina). As modalidades exemplares específicas, não limitativas englobadas por meio deste aspecto da presente invenção estão definidas nas Tabelas 3A, 3B, 3C, 3D, 3E e 3F.

[055] De acordo com certos aspectos da presente invenção, a formulação de anticorpo pode compreender um anticorpo anti-hNGF a uma concentração de cerca de 20 mg /mL em cerca de 10 mM de acetato, mais cerca de 1,0% de polietileno-glicol 3350 (PEG 3350), e cerca de 20% de sacarose a a um pH de cerca de 5,0. Em uma modalidade, a formulação de anticorpo é administrada por via intravenosa. Em uma modalidade, a formulação de anticorpo é administrada por via subcutânea.

[056] Outros exemplos não limitativos de formulações farmacêuticas englobadas por meio da presente invenção estão indicados em outras partes deste documento, incluindo os exemplos de trabalho apresentados adiante.

ESTABILIDADE E VISCOSIDADE DAS FORMULAÇÕES FARMACÊUTICAS

[057] As formulações farmacêuticas da presente invenção geralmente apresentam os níveis elevados de estabilidade. O termo "estável", tal como usado na presente invenção em referência às formulações farmacêuticas, significa que os anticorpos dentro das formulações farmacêuticas retêm um grau aceitável de estrutura e/ou a função e /ou a atividade biológica após armazenamento por um período de tempo definido. A formulação pode ser estável, embora o anticorpo nela contido não mantém 100% de sua estrutura e /ou função e /ou atividade biológica após armazenamento por um período de tempo definido. Em determinadas circunstâncias, a manutenção de cerca de 80% , cerca de 85% , cerca de 90% , cerca de 95% , cerca de 96% , cerca de 97% , cerca de 98% ou cerca de 99% da estrutura de um anticorpo e /ou a função e /ou a atividade biológica após o armazenamento por um período de tempo definido, podem ser considerados como "estáveis".

[058] A estabilidade pode ser medida, inter alia, através da determinação da porcentagem de anticorpo nativo que permanece na formulação após armazenamento por um período definido de tempo a uma dada temperatura. A porcentagem de anticorpo nativo pode ser determinada por, entre outros, cromatografia de exclusão de tamanho (por exemplo, exclusão de tamanho de cromatografia líquida de alta eficiência [SE-HPLC]). Um "grau aceitável de estabilidade" tal como o termo é usado na presente invenção, significa que pelo menos 90% da forma nativa do anticorpo pode ser detectado na formulação após armazenamento por um período definido de tempo a uma dada temperatura. Em certas modalidades, pelo menos, cerca de 90%, 91% , 92% , 93% , 94% , 95% , 96% , 97% , 98% , 99% ou 100% da forma nativa do anticorpo pode ser detectado em uma formulação após armazenamento por meio de um período definido de tempo a uma dada temperatura. A quantidade de tempo definido, após o qual a estabilidade é medida pode ser de pelo menos 1 mês, pelo menos 2 meses, pelo menos 3 meses, pelo menos 4 meses, pelo menos 5 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 7 meses, pelo menos, 8 meses, pelo menos 9 meses, pelo menos, 10 meses, pelo menos, 11 meses, pelo menos, 12 meses, pelo menos, 18 meses, pelo menos, 24 meses, ou mais. A temperatura a que a formulação farmacêutica pode ser armazenada na avaliação da estabilidade pode ser qualquer temperatura entre cerca de -80°C até cerca de 45°C, por exemplo, o armazenamento a cerca de -30°C, a cerca de -20°C, a cerca de 0°C, a cerca de 5°C, a cerca de 25°C, a cerca de 37°C, ou cerca de 45°C. Por exemplo, uma formulação farmacêutica que pode ser considerada estável se, após 3 meses de armazenamento a 5°C, superior a cerca de 90% , 95% , 96% ou 97% de anticorpo nativo é detectada por SE- HPLC. A formulação farmacêutica pode também ser considerada estável se, após 6 meses de armazenamento a 5°C, superior a cerca de 90% , 95% , 96% ou 97% de anticorpo nativo é detectada por SE- HPLC. A formulação farmacêutica pode também ser considerada estável se, após 9 meses de armazenamento a 5°C, superior a cerca de 90%, 95% , 96% ou 97% de anticorpo nativo é detectado por SE-HPLC. A formulação farmacêutica pode também ser considerada estável se, após 3 meses de armazenamento a 25°C, superior a cerca de 90%, 95% , 96% ou 97% de anticorpo nativo é detectado por SE-HPLC. A formulação farmacêutica pode também ser considerada estável se, após 6 meses de armazenamento a 25°C, superior a cerca de 90% , 95% , 96% ou 97% de anticorpo nativo é detectado por SE-HPLC. A formulação farmacêutica pode também ser considerada estável se, após 9 meses de armazenamento a 25°C, superior a cerca de 90%, 95% , 96% ou 97% de anticorpo nativo é detectado por SE-HPLC.

[059] Outros métodos podem ser usados para avaliar a estabilidade das formulações da presente invenção, tais como, por exemplo, a calorimetria diferencial de varrimento (DSC) para determinar a estabilidade térmica, agitação controlada para determinar a estabilidade mecânica, e a absorvência a cerca de 350 nm, ou cerca 405 nm para determinar a turvação da solução. Por exemplo, uma formulação da presente invenção pode ser considerada estável se, depois de 6 meses ou mais de armazenamento a cerca de 5°C a cerca de 25°C, a mudança na DO405 da formulação é inferior a cerca de 0,05 (por exemplo, 0,04, 0,03, 0,02, 0,01, ou menos) a partir do DO405 da formulação em t = 0.

[060] A estabilidade pode também ser avaliada medindo a atividade biológica e/ou afinidade de ligação do anticorpo para o seu alvo. Por exemplo, uma formulação da presente invenção pode ser considerada estável se, após armazenamento a, por exemplo, a 5°C, 25°C, 37°C, 45°C, etc, para uma quantidade de tempo definido (por exemplo, 1 a 12 ou 18 meses), o anticorpo anti -hNGF contido na formulação se liga a hNGF com uma afinidade que é pelo menos 50%, 60% , 70% , 80% , 90% , 95% , ou mais da afinidade de ligação do anticorpo antes da dita armazenagem. Os métodos adicionais para a avaliação da estabilidade de um anticorpo na formulação são demonstrados nos Exemplos apresentados abaixo.

[061] Na forma de líquidos, as formulações farmacêuticas da presente invenção podem, em certas modalidades, exibir os níveis baixos a moderados de viscosidade. "Viscosidade", tal como usado na presente invenção pode ser "viscosidade cinamática" ou "viscosidade absoluta". "Viscosidade cinamática" é uma medida do fluxo resistente de um fluido sob a influência da gravidade. Quando dois fluidos de volume iguais são colocados em viscosímetros capilares idênticos e deixados fluir por gravidade, um fluido viscoso demora mais do que um fluido menos viscoso para fluir através do capilar. Por exemplo, se um fluido leva 200 segundos para completar o seu fluxo e outro fluido leva 400 segundos, o segundo fluido é duas vezes mais viscoso que o primeiro em uma escala de viscosidade cinamática. "Viscosidade absoluta", por vezes, chamado de viscosidade dinâmica ou simples, é o produto da densidade e viscosidade cinamática do fluido (viscosidade absoluta = Viscosidade cinamática x Densidade). A dimensão da viscosidade cinamática é L2 /T em que L é um comprimento e T um tempo. Comumente, uma viscosidade cinamática expressa em centistokes (cSt). A unidade SI de viscosidade cinamática é mm2 /s, que é 1 cSt. Viscosidade absoluta expressa em unidades de centipoise (cP). A unidade SI de viscosidade absoluta é a milliPascal por segundo (mPa-s), onde 1 cP = 1 mPa-s.

[062] Tal como usado na presente invenção, um baixo nível de viscosidade, em referência a uma formulação de fluido da presente invenção, irá apresentar uma viscosidade absoluta inferior a cerca de 20 cPoise (cP). Por exemplo, uma formulação de fluido da presente invenção será considerada como tendo "baixa viscosidade", se, quando medido utilizar as técnicas de medição padrão, a formulação de viscosidade apresenta uma viscosidade absoluta de cerca de 19 cP, a cerca de 18 cP, de cerca de 17 cP, cerca de 16 cP, a cerca de 15 cP, a cerca de 14 cP, a cerca de 13 cP, a cerca de 12 cP, a cerca de 11 cP, a cerca de 10 cP, cerca de 9 cP a cerca de 8 cP, cerca de 7 cP, cerca de 6 cP, de cerca de 5 cP a cerca de 4 cP, ou menos. Como usado na presente invenção, um nível moderado de viscosidade, em referência a uma formulação de fluido da presente invenção, irá apresentar uma viscosidade absoluta de entre cerca de 30 cP e cerca de 20 cP. Por exemplo, uma formulação de fluido da presente invenção será considerada como tendo "viscosidade moderada," se, quando medido utiliza as técnicas de medição de viscosidade normalizadas, a formulação exibe uma viscosidade absoluta de cerca de 30 cP, a cerca de 29 cP, de cerca de 28 cP, a cerca de 27 cP , cerca de 26 cP, a cerca de 25 cP, a cerca de 24 cP, a cerca de 23 cP, a cerca de 22 cP, de cerca de 21 cP, ou cerca de 20 cP.

[063] Tal como ilustrado no Exemplo 5 a seguir, os presentes inventores fizeram a surpreendente constatação de que as formulações de baixa a moderada de viscosidade de fluido compreendendo as concentrações elevadas de um anticorpo anti- hNGF (por exemplo, até pelo menos 125 a 150 mg /mL) pode ser obtida por meio da formulação do anticorpo com 25 mM de histidina e 25 mM a 100 mM de arginina. Além disso, foi ainda verificado que a viscosidade da formulação pode ser diminuída para uma extensão ainda maior, diminuindo o teor de sacarose.

RECIPIENTES PARA AS FORMULAÇÕES FARMACÊUTICAS E MÉTODOS DE ADMINISTRAÇÃO

[064] As formulações farmacêuticas da presente invenção podem estar contidas dentro de qualquer recipiente adequado, para armazenamento de medicamentos e outras composições terapêuticas. Por exemplo, as formulações farmacêuticas podem estar contidas dentro de um plástico selado e esterilizado ou recipiente de vidro tendo um volume definido, tal como um frasco, ampola, seringa, cartucho ou frasco. Os diferentes tipos de frascos podem ser utilizados para conter as formulações da presente invenção, incluindo, por exemplo, os frascos claros e opacos de vidro (por exemplo, âmbar) ou frascos de plástico. Do mesmo modo, qualquer tipo de seringa pode ser utilizado para conter e /ou administrar as formulações farmacêuticas da presente invenção. A formulação farmacêutica dentro do recipiente pode ser tratada utilizando qualquer método conhecido na técnica para a remoção do óxigênio para melhorar a estabilidade do anticorpo, se necessário. O óxigênio no espaço superior (o espaço gasoso acima de um líquido em um recipiente fechado) pode ser substituído por um gás inerte, tal como nitrogênio ou argônio.

[065] As formulações farmacêuticas da presente invenção podem estar contidas dentro de seringas "de tungstênio normais" ou seringas "de tungstênio baixo". Tal como será entendido por pessoas que são versadas na técnica, o processo de tomada de seringas de vidro em geral, envolve o uso de uma haste de tungstênio quente que funciona para perfurar o vidro, criando, dessa maneira, um buraco a partir do qual os líquidos podem ser desenhados e expelidos da seringa. Este processo resulta na deposição de quantidades vestigiais de tungstênio sobre a superfície interior da seringa. A lavagem subsequente e outras etapas de processamento podem ser usadas para reduzir a quantidade de tungstênio na seringa. Como usado na presente invenção, o "tungstênio normal" entende-se que a seringa contém mais do que 500 partes por bilião (ppb) de tungstênio. O "baixo teor de tungstênio" significa que a seringa que contém menos de 500 ppb de tungstênio. Por exemplo, uma seringa de tungstênio baixo, de acordo com a presente invenção, pode conter menos de cerca de 490, 480, 470, 460, 450, 440, 430, 420, 410, 390, 350, 300, 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 ou menos ppb de tungstênio.

[066] Os êmbolos de borracha usados em seringas, e as rolhas de borracha utilizadas para fechar as aberturas dos frascos, podem ser revestidos com a finalidade de prevenir a contaminação do conteúdo medicinais da seringa ou frasco e /ou para conservar a sua estabilidade. Dessa maneira, as formulações farmacêuticas da presente invenção, de acordo com certas modalidades, podem ser contidas dentro de uma seringa, que compreende um êmbolo revestido, ou dentro de um frasco que está fechado com uma rolha revestido de borracha. Por exemplo, o êmbolo ou a tampa pode ser revestido com uma película de fluorocarboneto. Exemplos de rolhas revestidas e /ou êmbolos adequados para uso com frascos e seringas contendo as formulações farmacêuticas da presente invenção são mencionados em, por exemplo, na Patente U.S. N ° s 4.997.423; 5.908.686; 6.286.699; 6.645.635 e 7.226.554, cujo conteúdo é incorporado no presente documento por referência na sua totalidade. As rolhas revestidas de borracha exemplares particulares e êmbolos que podem ser utilizados no contexto da presente invenção estão comercialmente disponíveis sob o nome comercial "FluroTec ®", disponível a partir de West Pharmaceutical Services, Inc. (Lionville, PA).

[067] De acordo com certas modalidades da presente invenção, as formulações farmacêuticas podem estar contidas dentro de uma seringa de tungstênio baixo que compreende um êmbolo revestido de fluorocarbono. No entanto, tal como demonstrado na seção de Exemplos a seguir, o anticorpo anti-NGF da presente invenção parece ser estável em qualquer uma das combinações de êmbolo da seringa e testado.

[068] As formulações farmacêuticas podem ser administradas a um paciente por vias parenterais tais como a injeção (por exemplo, subcutânea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, etc.), ou percutânea, a administração mucosal, nasal, pulmonar e /ou oral. A caneta reutilizável numerosa e /ou dispositivos de distribuição auto- injetores podem ser utilizados com a finalidade de entregar por via subcutânea, as formulações farmacêuticas da presente invenção. Os exemplos incluem, mas não estão limitados a Autopen ™ (Owen Mumford, Inc., Woodstock, UK), caneta Disetronic ™ (Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Suíça), HUMALOG MIX 75/25 pen ™, ™ HUMALOG caneta, caneta Humalin 70 /30 ™ (Eli Lilly e Co., Indianapolis, IN), NovoPen ™ I, II e III (Novo Nordisk, Copenhaga, Dinamarca), NovoPen JUNIOR ™ (Novo Nordisk, Copenhaga, Dinamarca), BD ™ caneta (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), OptiPen ™, OptiPen PRO ™, OptiPen STARLET ™ e OptiClick ™ (Sanofi-Aventis, Frankfurt, Alemanha), para citar apenas alguns. Exemplos de caneta descartáveis e /ou dispositivos de distribuição auto-injetor com aplicações em subcutâneo de entrega de uma composição farmacêutica da presente invenção incluem, mas não estão limitados a caneta SoloStar™ (Sanofi- Aventis), FLEXPEN™ (Novo Nordisk), e a KwikPen ™ (Eli Lilly), autoinjector SURECLICKTM (Amgen, Thousand Oaks, CA), PUSHCLICKTM (Scandinavian Health Ltd. (SS)Group), PENLETTM (Haselmeier, Estugarda, Alemanha), EpiPen (Dey, LP), e a Caneta HUMIRATM (Abbott Labs, Abbott Park, IL), para citar apenas alguns.

[069] A utilização de um microinfusor para fornecer as formulações farmacêuticas da presente invenção é também contemplada na presente invenção. Tal como usado na presente invenção, o termo "microinfusor" significa um dispositivo de administração por via subcutânea concebido para lentamente administrar grandes volumes (por exemplo, até cerca de 2,5 mL ou mais) de uma formulação terapêutica, durante um período de tempo prolongado (por exemplo, cerca de 10, 15, 20 , 25, 30 ou mais minutos). Vide, por exemplo, Patente U.S. 6.629.949; U.S. 6.659.982, e Meehan et al, J. Controlled Release 46: 107 a 116 (1996). Os microinfusores são particularmente úteis para a administração de doses elevadas de proteínas terapêuticas contidas em concentração elevada (por exemplo, cerca de 100, 125, 150, 175, 200 ou mais mg /mL)e /ou soluções viscosas.

USOS TERAPÊUTICOS DAS FORMULAÇÕES FARMACÊUTICAS

[070] As formulações farmacêuticas da presente invenção são úteis, inter alia, para o tratamento, a prevenção e /ou a melhoria de qualquer doença ou distúrbio associado com a atividade de NGF. Como exemplos não limitativos, as doenças e distúrbios que podem ser tratados e /ou prevenidos através da administração das formulações farmacêuticas da presente invenção incluem, dor resultante de qualquer condição associada com dor neurogênica, neuropáticas ou nocicepticas. Em certas modalidades da dor neuropática, a referida neuralgia trigeminal, nevralgia pós-herpética, dor de membro fantasma, a fibromialgia, distrofia simpática reflexa e condições de dor de origem neural são preferencialmente tratadas. Em outras modalidades, a dor do câncer, particularmente, câncer de dor óssea, osteoartrite ou dor da artrite reumatóide, dor lombar, dor pós- operatória incisão, dor de fratura, dor de fratura osteoporótica, osteoporose, dores articulares, neuropatia diabética, dor ciática, dores associadas com crises de células falciformes, enxaqueca, dor neuropática, e /ou outros nocicepticos são preferencialmente tratados. Dessa maneira, a presente invenção inclui os métodos para o tratamento, prevenção e /ou melhorar uma doença ou distúrbio associada com a atividade de NGF ou a ativação de NGF (incluindo qualquer uma das doenças acima mencionadas , distúrbios e condições exemplares) através da utilização das formulações farmacêuticas da presente invenção. Os métodos terapêuticos da presente invenção compreendem a administração a um sujeito de qualquer formulação que compreende um anticorpo anti-hNGF, como descrito na presente invenção. O indivíduo ao qual a formulação farmacêutica é administrada pode ser, por exemplo, um animal humano ou não humano que esteja em necessidade de tal tratamento, prevenção e /ou melhoria, ou que de outra forma se beneficiaria da inibição ou atenuação de NGF e /ou NGF mediada por atividade. Por exemplo, o sujeito pode ser um indivíduo que é diagnosticado com, ou que é considerado em risco de serem afetados por meio de qualquer uma das doenças ou distúrbios mencionados acima. A presente invenção também inclui a utilização de qualquer uma das formulações farmacêuticas decsritas na presente invenção para a fabricação de um medicamento para o tratamento, prevenção e /ou melhoria de qualquer doença ou distúrbio associado com a atividade do NGF ou a ativação de NGF (incluindo qualquer uma das doenças, distúrbios e condições exemplares mencionadas acima).

EXEMPLOS

[071] Os exemplos seguintes são postos adiante de modo a proporcionar aos que são versados na técnica, com uma descrição completa e uma descrição de como fazer e usar os métodos e composições da presente invenção, e não se destinam a limitar o âmbito do que os inventores consideram como sua invenção. Têm sido feitos esforços para assegurar a exatidão em relação aos números utilizados (por exemplo, as quantidades, temperatura, etc), mas alguns erros experimentais e desvios devem ser considerados. A menos que indicado de uma outra maneira, as partes são partes em peso, peso molecular é o peso molecular médio, a temperatura é em graus centígrados, e pressão é a atmosférica ou próximo.

Exemplo 1. Estabilidade de um anticorpo anti-fator de crescimento do nervo humano (NGF) ("mAb1") totalmente humano após armazenamento em baixas temperaturas

[072] Neste exemplo, várias formulações foram criadas contendo um anticorpo anti-NGF humano sem Excipientees. O anticorpo utilizado neste exemplo e os exemplos subsequentes descritos abaixo é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia pesada (HCVR) com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 20, e uma região variável da cadeia leve (LCVR)com a sequência de aminoácido de SEQ ID NO: 22. Este anticorpo é referido na presente invenção como "mAb1".

[073] Como uma experiência preliminar, a estabilidade da mAb1 em solução líquida foi determinada após várias quantidades de tempo de armazenamento congelado a -30°C e -80°C. A concentração de mAb1 utilizada neste Exemplo foi de 130 mg /mL. Em vários pontos de tempo, a estabilidade das mAb1 foi determinada por meio da cromatografia líquida de exclusão de tamanho de elevado desempenho (SE-HPLC)e por meio da cromatografia líquida de troca catiônica de alta eficiência (CEX-HPLC). A estabilidade foi determinada com base na porcentagem de mAb1 nativos remanescentes na amostra (por SE-HPLC, Tabela 4), e por meio da porcentagem de espécies acídicas observadas na amostra (por CEX- HPLC, Tabela 5). Um aumento da porcentagem de espécies acídicas é consistente com a desaminação do anticorpo e é, portanto, considerado um fenômeno indesejável no que diz respeito às formulações farmacêuticas da presente invenção.

[074] Estes resultados mostram que mAb1 pode permanecer estável a uma concentração de 130 mg /mL durante pelo menos 12 meses quando armazenada à temperatura de -80°C.

Exemplo 2. Estabilidade de Formulações mAb1 Contendo Excipientes Mínimos

[075] Seis diferentes formulações contendo mAb1 foram preparadas a uma concentração de 40 mg /mL com Excipientees mínimos (tal como mostrado na Tabela 6, vide também Exemplo 2), e foram armazenadas a -20°C ou a -30°C durante vários períodos de tempo. Todas as formulações contêm acetato a 10 mM, pH 5,0. Tabela 7 (-30°C)e na Tabela 8 (-20°C)mostram a porcentagem de mAb1 nativos remanescentes em formulações de vários Excipientees mínimos, tal como medido por meio de SE-HPLC.

[076] Como notado acima, as Formulações foram testadas para estabilidade por meio de SE-HPLC após várias quantidades de tempo a - 30°C e -20°C. Os resultados, expressos na porcentagem de mAbl nativos, foram mostrados nas Tabelas 7 (-30 °C de armazenamento)e 8 (-20°C).

[077] Como se mostra neste exemplo, a estabilidade do mAb1 foi mantida a um grau significativo em formulações 1, 2, 3, 4, e 5, depois de vários meses de armazenamento a -20°C e -30°C. Estes resultados indicam que a estabilidade da mAb1 a -30°C, pode ser melhorada através da adição de pelo menos 1,0% de sacarose ou polietileno glicol, pelo menos, 0,5% de 3350. Estes resultados indicam ainda que a estabilidade do mAb1 a -20°C, pode ser melhorada através da adição de pelo menos 1,0% de sacarose ou polietileno glicol, pelo menos, 1,0% de 3350.

Exemplo 3. Formulação estabilizada de mAb1

[078] A formulação estabilizada contendo várias concentrações de mAb1 foi preparada para ser usada nos Exemplos 4 e 5 abaixo. Esta formulação, denominada "Formulação A", é mostrada na Tabela 9.

Exemplo 4. Estabilidade de Formulação A Após armazenamento a 5°C

[079] Formulação A (vide Exemplo 3) que contém 6, 20 ou 100 mg /mL mAb1 foi testada para a estabilidade depois de vários meses de armazenamento a 5°C em frascos de vidro transparente. A estabilidade foi avaliada através dos seguintes parâmetros: (a)a aparência visual, (b)a turbidez (DO 405 nm), (c)pH, (d)porcentagem total mAb1 recuperada como medido por RP-HPLC, (e)porcentagem de mAb1 nativo recuperado (como medido por SE-HPLC), (f)porcentagem do pico principal mAb1 recuperado (tal como medido por CEX-HPLC), e (g)porcentagem de espécies acídicas de mAb1 recuperado (tal como medido por CEX-HPLC). Os resultados de estabilidade para a Formulação A contendo 6, 20 e 100 mg /mL de mAb1 estão resumidos nas Tabelas 10, 11 e 12, respectivamente.

[080] Os resultados deste exemplo demonstram que a Formulação A contendo 6 mg /mL mAb1 manteve-se estável durante pelo menos 12 meses de armazenamento, a 5°C em frascos de vidro transparente, com cerca de 98,7% ou mais de mAb1 nativo remanescente nas amostras após 12 meses de armazenamento sob tais condições. Os resultados deste Exemplo mostram, adicionalmente, que a Formulação A contendo 20 mg /mL mAb1 manteve-se estável durante pelo menos 18 meses de armazenamento, a 5°C em frascos de vidro transparente, com cerca de 98,2% de mAb1 nativo remanescente nas amostras após 18 meses de armazenamento sob tais condições. Além disso, a formulação A, contendo 100 mg /mL mAb1 manteve-se estável durante pelo menos 18 meses de armazenamento, a 5°C em frascos de vidro transparente, com cerca de 97,6% de mAb1 nativos remanescentes nas amostras após 18 meses de armazenamento em tais condições. Além disso, as porcentagens de espécies acídicas não se alteraram de forma significativa a partir do tempo 0, após 12 ou 18 meses de armazenamento sob as condições testadas, confirmando assim a estabilidade das formulações.

Exemplo 5. Efeito de concentrações de Arginina, Histidina e Sacarose na Viscosidade e Estabilidade de Formulações Contendo mAb1

[081] Várias formulações foram preparadas contendo 100 mg /mL, 125 mg /mL e 150 mg /mL mAb1 e várias quantidades de arginina, histidina e sacarose. Viscosidade e osmolalidade foram medidas para cada formulação a 25 ° C. Os resultados estão resumidos na Tabela 13. Tabela 13 Efeito de Arginina, Histidina e Sacarose na viscosidade de Formulações mAb1 (todas as Formulações contêm Acetato a 10 mM, pH 5,0, e 0,2% de polissorbato 20)

[082] Os resultados apresentados na Tabela 13 indicam que a adição de histidina ou arginina, em uma concentração de 25 mM para mAb1 (a uma concentração de 100 mg /mL), reduziu significativamente a viscosidade da formulação, em comparação com uma formulação de anticorpo contendo nenhuma histidina e nenhuma arginina. Além disso, a adição de arginina a 25 mM para mAb1 (a uma concentração de 100 mg /mL), enquanto que a redução da concentração de sacarose de 10% a 5% , resultou em uma maior redução da viscosidade. Quando a concentração de anticorpo mAb1 foi aumentada para 125 mg /mL, tanto histidina e arginina a 25 mM resultou em uma redução significativa na viscosidade quando utilizado isoladamente ou em conjunto. Além disso, a redução da concentração de sacarose de 5% a 2%, com a histidina e arginina adicionado diminuiu a viscosidade da formulação para uma extensão maior. Quando a concentração de mAb1 foi aumentada para 150 mg /mL, a combinação de histidina e arginina, cada um a 25 mM, resultou em uma redução significativa da viscosidade. Reduzindo a sacarose a partir de 5% a 2%, resultou em uma diminuição adicional na viscosidade.

[083] Com base pelo menos em parte, no que precede, a seguinte formulação "B", como apresentada na Tabela 14 foi preparada. Tabela 14

Exemplo 6. Estabilidade da Formulação A, contendo 100 mg /mL mAb1 quando fabricado em um frasco e seringas

[084] A Formulação A (vide Tabela 9), contendo 100 mg /mL mAb1 foi preparada em um frasco de vidro de 2 mL e, em duas seringas diferentes: tungstênio regular e baixo. As preparações foram armazenadas a 5, 25 e 37°C durante várias quantidades de tempo. A estabilidade de armazenamento mAb1 seguinte foi medida por SE- HPLC e de CEX-HPLC. Os resultados são mostrados na Tabela 15. (Um aumento de porcentagem de espécies acídicas é consistente com a desaminação do anticorpo e é, portanto, considerado um fenómeno indesejável no que diz respeito às formulações farmacêuticas da presente invenção). Como mostrado na tabela, a Formulação A contendo 100 mg /mL mAb1, armazenado a 5°C em um frasco de vidro ou de uma seringa, manteve-se relativamente estável durante pelo menos 18 meses, e foi ligeiramente menos estáveis a 25 ° ou 37 °, nos momentos posteriores testados.

Exemplo 7. Estabilidade da Formulação B contendo 100 mg /mL de mAb1 quando fabricada em um frasco e seringas

[085] Formulação B (vide Tabela 14), contendo 100 mg /mL mAb1 foi preparada em um frasco de vidro de 2 mL e, em duas seringas diferentes: tungstênio regular e baixo. As preparações foram armazenadas a 5, 25 e 37°C durante várias quantidades de tempo. A estabilidade de armazenamento mAb1 seguinte foi medida por SE- HPLC e de CEX-HPLC. Os resultados são mostrados na Tabela 16, (Tal como referido anteriormente, o aumento da porcentagem de espécies acídicas é consistente com a desaminação do anticorpo e é, portanto, considerado um fenómeno indesejável no que diz respeito às formulações farmacêuticas da presente invenção). Como mostrado na tabela, a Formulação B continha 100 mg/mL mAb1, armazenado a 5°C em um frasco de vidro ou de uma seringa, manteve-se relativamente estável durante pelo menos 12 meses, e foi ligeiramente menos estáveis a 25 ° ou 37 ° em todos os pontos temporais testados.

Exemplo 8: Estabilidade de Formulações de mAb1 em seringas preenchidas

[086] Uma série de experiências foi realizada para avaliar a estabilidade de formulações diferentes mAb1 em seringas preenchidas. Para estes experimentos, várias agulhas luer e prontas pra uso, seringas de tungstênio regular e de tungstênio baixo foram usadas em combinação com os diferentes tipos de êmbolos (revestido e não revestido)e ponta-tampões. As formulações foram testadas quanto à estabilidade após armazenagem em seringas pré-carregadas a 37°C, 25°C e 5°C durante várias quantidades de tempo (variando entre 7 dias e 6 meses, dependendo das condições testadas).

[087] As seguintes formulações de mAb1 foram testadas quanto à estabilidade em seringas pré-carregadas, neste exemplo: (1)A formulação A (vide Tabela 9), contendo 100 mg /mL em mAb1 apostado seringa preenchida como 1 descrita na Tabela 17; Formulação (2)A, contendo 100 mg /mL em mAb1 seringa pronta pra uso preenchida como 2 descrito na Tabela 18, (3)Formulação A contendo 20 mg /mL em mAb1 seringa pronta pra uso preenchida como 1 descrita na Tabela 19, (4)Formulação A contendo 20 mg /mL mAb1 apostado em seringa preenchida como 2 descrito na Tabela 20, (5)Formulação A contendo 100 mg /mL de mAb1 apostado em seringa preenchida como 3 descrito na Tabela 21 e (6)Formulação A contendo 6 mg /mL de mAb1 em seringa pronta pra uso pré-carregada no. 3 descrito na Tabela 22.

[088] Seringa no. 1 é um BD de 1mL 29 longa x ^ polegadas Physiolis seringa de tungstênio baixa; seringa no. 2 é um Schott 1 mL longa SN CF 29 x ^ polegadas seringa e seringa no. 3 é uma seringa Daikyo Seiko CZ ® (cristal Zenith)de 1 mL std calibre 30 x ^ polegadas.

[089] A estabilidade foi determinada pelos parâmetros seguintes: (a)análise visual, (b)a turbidez (OD405nm), (c)recuperação porcentagem por RP-HPLC, (d)porcentagem de mAb1 nativo por SE- HPLC, (e)porcentagem do pico principal mAb1 por CEX-HPLC, e (f)as porcentagens de espécies acídicas por CEX-HPLC.

[090] Os resultados de uma experiência representativa avaliam a estabilidade da formulação A, que continha 100 mg /mL em seringa mAb1 no. 1 é mostrada na Tabela 17 abaixo.

[091] Os resultados a partir do experimento representativo garantiram a estabilidade de Formulação A, contendo 100 mg/mL mAb1 na Seringa no.2 é mostrado na Tabela 18 abaixo.

[092] Os resultados a partir dos experimentos representativos garantiram a estabilidade de Formulação A, contendo 20 mg/mL mAb1 na seringa no.1 é mostrado na Tabela 19 abaixo.

[093] Os resultados a partir dos experimentos representativos garantiram a estabilidade de Formulação A, contendo 20 mg/mL mAb1 na seringa no.2 é mostrado na Tabela 20 abaixo. Tabela 20

[094] Os resultados a partir dos experimentos representativos garantiram a estabilidade de Formulação A, contendo 100 mg/mL de mAb1 na seringa no.3 é mostrado na Tabela 21 abaixo. Tabela 21

[095] Os resultados a partir dos experimentos representativos garantiram a estabilidade de Formulação A, contendo 6 mg/mL mAb1 na seringa no.3 é mostrado na Tabela 22 abaixo. Tabela 22

[096] Os resultados deste conjunto de experiências demonstram que as diferentes formulações permanecem relativamente estáveis em seringas pré-carregadas, especialmente quando armazenado a temperaturas de 25°C e abaixo, durante um mês ou mais.

Exemplo 9: Estabilidade de Formulações contendo baixas concentrações de mAb1 em frascos de vidro

[097] A estabilidade em tempo real e acelerada de 0,2, 0,5, 1 e 2 mg /mL mAb1 é avaliada em frascos de vidro, os resultados até à data os quais são apresentados nas Tabelas 23 a 27. Para estas experiências, a estabilidade do mAb1 está a ser examinada em Tipo 1, os frascos de vidro de borossilicato fabricados pela Schott. A formulação do mAb1 utilizado nos Exemplos 9 a 12 é semelhante ao descrito na Tabela 9, exceto que as concentrações de anticorpos utilizados foram menores do que as previamente testadas e variam ao longo dos períodos de ensaio. As concentrações exatas de mAb1 utilizados em cada experiência são indicadas em cada tabela abaixo. As formulações foram testadas quanto à estabilidade em condições de armazenagem em ampolas de vidro a 45°C, 25°C e 5°C durante várias quantidades de tempo (variando entre 7 dias e 6 meses, dependendo das condições testadas).

[098] Os resultados até agora demonstram a degradação aumentada (precipitação, agregação de clivagem, e as variantes de carga)de formulações de 0,2 e os 0,5 mg /mL após incubação a 45°C durante 7 a 14 dias. Além disso, verificou-se um aumento de agregação para as formulações em todas as concentrações < 2 mg /mL quando incubadas a 45°C durante 28 dias (> 15% versus ~ 2% para as formulações de > 6 mg /mL). A precipitação foi observada quando a formulação 0,2 mg /mL foi armazenada a 5°C durante 6 meses. Não houve diferença significativa de degradação /precipitação observada quando formulações de 0,5, 1 e 2 mg /mL foram armazenadas a 5°C durante 6 meses.

Exemplo 10: Estabilidade de Formulação contendo baixas concentrações de mAb1 em BD e seringas OMPI

[099] Em tempo real e estabilidade acelerada de 0,2 e 0,6 mg /mL, mAb1 está sendo avaliado em seringas BD e Ompi. Ambas as seringas são de 1 mL longo de tamanho, fabricado com tungstênio baixo, e tem um calibre 27 X % polegada, de paredes finas, agulha pronta para usar. A seringa BD contém 0,8 mg de silicone, aplicada por meio da pulverização a partir da parte superior da flange. A seringa Ompi contém 0,5 mg de silicone e é aplicada com a tecnologia de mergulho do bico, o que dá um revestimento mais uniforme ao longo do comprimento do cilindro da seringa. As formulações foram testadas quanto à estabilidade após armazenagem em ambas as seringas pré-carregadas a 45°C, 25°C e 5°C durante várias quantidades de tempo (variando entre 7 dias e 6 meses, dependendo das condições testadas).

[0100] Os resultados, que são apresentados nas Tabelas 28 a 30, demonstraram que a estabilidade das mAb1 a 45°C na seringa BD é grandemente melhorada em comparação com a do tipo 1, frasco de vidro de borossilicato, tal como determinado por RP-HPLC (precipitação) e análise SE-HPLC (agregação e espécies de clivagem).

[0101] A estabilidade do mAb1 a 45°C na seringa Ompi melhorada em comparação com o tipo 1, os frascos de vidro de borossilicato, mas era significativamente menos estáveis em comparação com a incubação na seringa BD. Estes dados sugerem que o silicone pode estar a bloquear a interação da formulação com a superfície de vidro, melhorando dessa maneira a estabilidade. Uma vez que a seringa BD contém mais de silicone ao longo do corpo da seringa de vidro do que a seringa Ompi, isto pode explicar por que a formulação é mais estável na seringa BD em comparação com a seringa Ompi.

[0102] Não foi observada uma degradação significativa quando mAb1 foi armazenado no BD e seringas OMPI a 5°C ou 25°C durante 6 meses como determinado por SE-HPLC e de análise CEX-HPLC.

Exemplo 11: Estabilidade de Formulação contendo baixas concentrações de mAb1 em dispositivos de armazenamento alternativos

[0103] Estão em curso estudos para examinar a estabilidade do mAb1 em outros dispositivos de armazenamento, incluindo: seringas Oeste CZ (poliolefina cíclica), frascos de vidro Schott Tipo 1 plus® (100 a 200 nm de revestimento de SiO2 sobre a superfície interior do Tipo 1, de borossilicato frascos de vidro Schott), e do tipo 1, os frascos de vidro de borossilicato com nitrogênio espaço superior (ar removido do espaço superior do frasco e substituído por gás N2).

[0104] Os resultados, tal como mostrados nas Tabelas 31 a 36, mostram que a estabilidade a 45°C foi significativamente melhorada para 0,2 e 0,6 mg /mL formulações em seringas de comparação CZ com seringas BD, tal como determinado por RP-HPLC e SE-HPLC. Além disso, a estabilidade da formulação mAb1 a 45°C foi significativamente melhorada a concentrações de 0,2 e 0,6 mg /mL em frascos de vidro Tipo 1, mais ® em comparação com os frascos de Tipo 1, tal como determinado por RP-HPLC e SE-HPLC.

[0105] A degradação significativa por SE-HPLC foi observada para a 0,2 mg /mL de formulação em frascos de vidro Tipo 1, quando incubados a 25°C ou 5°C durante 3 meses. Nenhuma degradação significativa foi observada para a formulação de 0,2 mg /mL em frascos de vidro Tipo 1, plus® quando incubadas a 25°C ou 5°C durante 3 meses.

[0106] A estabilidade a 45°C foi significativamente melhorada para os 0,2 mg /mL formulações em frascos de vidro de Tipo 1 com uma sobreposição de nitrogênio, em comparação com os frascos de vidro de Tipo 1 com uma câmara de expansão de ar, tal como determinado por SE-HPLC.

[0107] A remoção de óxigênio do espaço superior teve o maior efeito sobre a estabilização de 0,2 mg /mL mAb1 formulada com polisorbato 20 a 0,05% (como na Formulação A), apesar de um aumento da taxa de degradação foi ainda observada em comparação com uma formulação de 0,2 mg /mL sem polissorbato 20.

Exemplo 12: Efeito de tungstênio sobre a estabilidade da concentração mínima mAb1

[0108] Estão em curso estudos para examinar a estabilidade do mAb1 quando enriquecido com extrato de tungstênio de pino não filtrado. Os pinos de tungstênio são utilizados no processo de fabrico de seringas preenchidas, para formar o buraco da seringa luer. Um extrato de um pino de tungstênio utilizado em uma linha de produção por BD foi preparado usando mAb1 placebo (semelhante à Formulação A sem mAb1). O extrato de pino não filtrado contém todas as espécies de tungstênio que pode ser deixado para trás na seringa como contaminantes (sais de tungstênio solúveis e insolúveis em óxidos de tungstênio).

[0109] Os resultados SE-HPLC, como mostrado nas Tabelas 37 a 38, demonstram que a estabilidade a 25°C foi reduzida em comparação com um frasco de controle sem tungstênio para as formulações 0,6 mg /mL contendo níveis de tungsténio > ppb 500. As seringas de tungsténio baixas contêm tipicamente <500 ppb de tungstênio enquanto seringas regulares podem conter tanto como 2500 ppb de tungsténio.

[0110] Não foi observada degradação de formulações 0,6 mg /mL com tungsténio até 2500 ppb quando incubadas a 5°C durante 6 meses.

[0111] A presente invenção não é para ser limitada no escopo por meio das modalidades específicas descritas na presente invenção. Na verdade, várias modificações da presente invenção para além das descritas na presente invenção serão aparentes para aqueles que são versados na técnica a partir da descrição anterior e as figuras anexas. Tais modificações têm a intenção de cair dentro do escopo das reivindicações em anexo.

Claims

1. Formulação farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende: (i) 0,2 a 75 mg/mL de um anticorpo humano que se liga especificamente ao fator de crescimento do nervo humano (hNGF); (ii) 0,05% de polissorbato 20; (iii) 8% de sacarose; e (iv) acetato 10 mM, em que: (v) o anticorpo humano que se liga especificamente a hNGF consiste em duas cadeias pesadas e duas cadeias leves, cada cadeia pesada compreendendo uma região variável de cadeia pesada (HCVR) compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 20 e uma região constante da cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 31, e cada cadeia leve compreendendo uma região variável da cadeia leve (LCVR) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 22 e uma região constante da cadeia leve; (vi) a formulação armazenada, após seis meses a 5°C, mantém a estabilidade de modo que 97% ou mais do anticorpo seja mantido em sua forma nativa, conforme detectado por cromatografia líquida de alta eficiência de exclusão por tamanho; e (vii) o pH da formulação é 5,0.

2. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a formulação compreende 0,6 a 60 mg/mL do anticorpo.

3. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que a formulação está contida em um frasco ou seringa de vidro ou em um frasco ou seringa de plástico.

4. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que: 1. o frasco de vidro é um frasco de vidro revestido com dióxido de silício; opcionalmente, em que o espaço superior no frasco de vidro é preenchido com um gás inerte para remover o oxigênio, de preferência em que o gás inerte é argônio ou nitrogênio; ou 2. ) a seringa compreende um êmbolo revestido com fluorocarbono; opcionalmente, em que a seringa é uma seringa com baixo teor de tungstênio, de preferência em que a seringa é uma seringa com baixo teor de tungstênio e compreende um êmbolo revestido com fluorocarbono.

5. Formulação farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que está contida em um autoinjetor ou microinfusor.

6. Formulação farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que é formulada para administração por via intravenosa ou subcutânea.

7. Uso da formulação farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é na preparação de um medicamento para o tratamento, a prevenção e/ou a melhoria de qualquer doença ou distúrbio associado à atividade NGF ou à ativação de NGF.