BG97619A - Метод за получаване на оптичноактивни цианхидрини с ензими - Google Patents
Метод за получаване на оптичноактивни цианхидрини с ензими Download PDFInfo
- Publication number
- BG97619A BG97619A BG97619A BG9761993A BG97619A BG 97619 A BG97619 A BG 97619A BG 97619 A BG97619 A BG 97619A BG 9761993 A BG9761993 A BG 9761993A BG 97619 A BG97619 A BG 97619A
- Authority
- BG
- Bulgaria
- Prior art keywords
- membrane
- enzyme
- aldehyde
- porous membrane
- binder
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/002—Nitriles (-CN)
- C12P13/004—Cyanohydrins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
- C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
- C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D237/20—Nitrogen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/089—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/88—Lyases (4.)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Manufacture Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
1. Метод за получаване на оптичноактивни (S)-цианохидрини чрез взаимодействие на алдехид с циановодородна киселина при контактуване на органичен разтворител, съдържащ киселината и алдехида, с ензима S-оксинитрилаза, характеризиращ се с това, че ензимът е химически свързан към неразтворим композиционен материал, представляващ порьозна мембрана, през която преминават реактивите и която включва полимерно смолесто вещество, в което са диспергирани фино наситнени частички от пълнител и мрежа от практически взаимносвързани пори, като порьозната мембрана е пропусклива за потока от течност, съдържащ посочените реактиви.11 претенции
Description
Изобретението се отнася до метод за получаване на цианхидрини. По-специално, то се отнася до подобрен метод за получаване на оптичноактивни (5)-цианхидрини, намиращи приложение като междинни продукти
при синтезата на известни пиретроидни инсектициди, състоящ се във взаимодействие на алдехиди с циановодородна киселина в присъствие на
5-оксинитрилазен ензим.
Известен е метод на Ефенбергер и съавтори /1/, включен като справ ка в настоящето описание, на взаимодействие на алдехиди с циановодородна киселина в присъствието на ензима оксинитрилаза и при разтвори тел диизопропилов етер за получаване на оптичноактивни цианхидрини.
Както се описва в тази справка, реакцията се провежда с ензима в свързана форма, например свързан към повърхността на стъклени сфери, йонообменни смоли или целулозни частички, под формата на каша, която преди да се получи готовия продукт предварително трябва да се отфилтрува от разтвора. При все че е ефективен за целта за която е предназначен, този метод се характеризира само с един цикъл на обработване на реактивите през свързания ензим, като за да приключи преминаването са не- ι обходими 5 до 6 дни.
- 2 По-подобен начин, Кула и съавтори в /2/ описва метод при който ензима «^-оксинитрилаза е получен от специфичен източник (Ccr-hur. bicolor). При едно от изпълненията на този метод се използва акрилова гранула (перла) за свързване на ензима, т.е. Еупергит С (производство на Роом, Дармщадт), търговски достъпни акрилови гранули, които се използват като се суспендират в реакционната среда или в колона При всеки от случаите, те могат да се използват само във водни системи, за да се избегне разрушаването на акриловите гранули от различните органични разтворители. Нещо повече, при този процес, при който се използват свързани ензими, се получават добиви от около 85 % тегловно, но само след тридневно непрекъснато протичане на процеса, като за алдехид се използва 4-хидроксибензалдехид. Също така /3/, /4-/, /5/ и /6/ допълват или отговарят на цитираните по-горе два източника.
Във всеки от погорецитираните източници се говори за ’’ензимен диафрагмен-реактор. Както обаче показва съответната техническа литература (виж например /7/ с посочените там забележки 16 и 17, /8/ и /9/) тези реактори не представляват нищо повече от серия контейнери, ; разделени с филтруващи мембрани, през които ензима физически не може? да премине. Така, при този тип реактори, реакцията се провежда в раз-j твор съдържащ диспергиран ензим, с който реактивите биха могли да влезат евентуално в контакт чрез дифузия.
Използването на полимерен мембранен реактор за свързване на ензимите е най-общо известно от /10/ и /11/. Виж също /12/ където понататък са описани мембранни реактори използвани в /10/ и /11/. Тези три източника са също така включени в настоящето описание като справкг Съгласно настоящето изобретение, времето на взаимодействие и лекотата за провеждане на процеса при сам по себе си известния метод за получаване на опитчноактивни (5)-циан^сидрини при взаимодействие на алдехиди с циановодородна киселина в присъствие на каталитичния ензим _$ -оксинитрилаза и разтворител, е значително подобрен в сравнение
- 3 с описаните до сега методи, като разтворът на алдехида и киселината се пропуска през химически активирана порьозна мембрана, както е описано по-долу, към която £ -оксинитрилазния ензим е химически свързан.
Трябва да се има предвид, че нормално ($)- и (Е)-енантиомерните форми на циан^хидрина ще се образуват в равни количества, т.е. в съотношение 50 : 50, когато не присъства стереоселективен катализатор. Задача на изобретението е да се повиши количеството на (S) -изомера над (Е)-изомера (5/Е”), при подходящ подбор на подобрен катализатор и на реакционни условия. Друга задача на изобретението е не само да се повиши селективността като се получава повече 8- и по-малко Е-изомери, но също така да се осигури висока конверсия на продукта при най-кратка продължителност от време. Друга задача на изобретението е да се приключи реакцията без да е необходимо физическото отделяне на ензима от крайния продукт.
Съгласно изобретението методът за получаване на желанияе оптичес-ι ки активни циан хидрини се провежда лесно по начина описан по-горе, τ.ί
I I е. 4D63 пропускане на разтвор на алдехид и циановодородна киселина j
I през определена порьозна мембрана към която ензима е химически свързан, било в прекъснат или непрекъснат процес, за подбран период от време и получаване на жерания оптическиактивен циандрсидрин. Когато процеса се провежда по този начин, намерено бе, че изненадващо времето на реагиране може да се намали до един ден, за разлика от предишните методи за които са необходими 6 до 7 дни, като при това се запазва, или в някой случай се дори увеличава, средния добив от продукта като сьщотака се повишава селективността към желания 5-изомер в сравнение с предишните методи.
Желателно е, реакцията да се провежда в органична система в която по същество водно неразтворимия алдехид и получаващия се циан; хидрин са разтворими. Докато може да се използват малки количества от воден буфер, т.е. около 1 тегловен % вода на база общото тегло на сис-
- 4 темата, предпочита се да се използва възможно по-малко количество вода т.е. около - 0.03 %. Така, настоящето изобретение по същество включва систеиа състояща се от органичен разтворител (евентуално съдържащъводен буфер), алдехида и киселината като реактиви и ензим, който е химически свързан към определена порьозна мембрана, както подробно е опи сано по-долу.
Реакцията може да се проведе в широк диапазон от температури и pH условия, които нямат критично значение. Така например, температури от около -6° С до +30° С, за предпочитане около +6° С до+25° С са приемливи. Условията на pH, въпреки че не са от определящо значение, могат да се контролират от буферни системи като натриев ацетат, натриев цитрат или натриев фосфат и могат да са от порядъка на pH от около 3.5 до 7.5.
Използваните алдехиди са примерно описаните в САЩ патент 4 859 784 (цитиран по-горе). Включени са тук, както и описаните в патента, алдехиди с формула п
Е - С - Н в която Е може да бъде наситен или ненаситен, алифатен или ароматен, ΐ който може да бъде заместен с халоген, със сяра, с азот или съдържащ | кислород заместители.
Използваните съгласно метода на изобретението алдехиди е желателно да са по същество водно-неразтворими, т.е. предпочита се те да са разтворими в органичните разтворители от настоящето изобретение. Пред почитат се алдехиди, чиято разтворимост във вода е по-малка от около 2.0 - 0.01 мг/мл и най-добре е да се използват такива, чиято разтворимост е по-малка от 0.1 мг/мл до около 0.01 мг/мл. Примери на тези водно-неразтворими алдехиди са такива представени с формулата
- 5 в която А означава водород или флуор и В означава водород, флуор, хлор или бром. От тях, 3-феноксибензалдехид е предпочитан.
Желателно е, съотношението на алдехида към циановодородната киселина де е от около 1 : 1 до 1 : 100, и по-добре от около 1 : 1 до 1 :
2.
Органичният разтворител който ще се използва може лесно да се подбере между такива които не повлияват неблагоприятно на използваната мембрана или на характера на реакцията. Така например се предпочита използването на ди-н.-бутилов етер, докато ди-изопропилов етер, който се прилага в процеса съгласно САЩ патент 4 659 7S4 (по-горе), неочаквано беше открито, че повлйва на настоящия процес неблагоприятно.
^-оксинитрилазният ензимен катализатор (ЕС 4.1.2.11) е търговсии достъпен от Сигма Кемикъл Къмпани или може да се изолира от кълнове на сорго по известни методи (виж .7.0-.-..-: al., J. 3101. Chon., 216 (1),
Z Ί Ί < и λ
- ν I , , > . · > ) ι .
Количеството на използвания ензим по отношение на алдехида е же лателно около 50 - 2500 единици ензим за грам алдехид, оо-добре около
500 - 750 единици за грам алдехид. Ензимът може да е подходящо хими чески свързан към порьозната мембрана описана по-долу, чрез третиране на мембраната с примерно 5 тегл. % воден разтвор на полиетиленимин, след това примерно с 5 тегл. % воден разтвор на глутаров алдехид и накрая с разтвор на $_-оксинитрилазен ензим в подходящ буфер.
Предимство на метода е, че ензима остава свързан към мембраната
I за няколко дни и така не само представлява по-стабилно и трайно устойство в сравнение с предишните известни методи, но също така се избягва!
ί допълнителния етап на отделяне и извличане на ензима, когато той е в суспензията под формата на каша, както е при САЩ патент 4 859 784 и САЩ патент 5 008 192.
Порьозните мембрани използвани в настоящия метод са описани в по-горе цитирания САЩ патент 4 102 746, където са определине тези свър
- 6 зващи ензима мембрани, природата и метода за получаването им и опреде лят възстановяването на ензима от различни такива материали.
Основно, тези мембрани имат подбрана дебелина и/или слоеве и се състоат от неразтворимо, тридименсионално полимерно смслестообразно свързващо вещество което има фино надробени частички от пълнител дисп ергиранп в свързващото вещество и мрежа от по същество взаимно свързани пори в него. Размерите на порите могат да варират в широки граници, най-добре е те да са от около 0.01 до около 100 микрона и общата порьозност на материала е около 50 до 75 %. Наличните диспергирани частички от пълнителя могат да са в количество от по-малко от 25 тегловни процента по отношение на общото тегло на състава.
Такава мембрана е МР 5мембраната (ФМЦ Корпорейшън, Филаделфия, САЩ) която представлява микропорьозен поли(винил-хлориден)-силициев двуокисен лист с обем на порьозността от порядъка на 70 - 80 %. Размерите на порите, както са определени чрез Меркури Интружън Порозиметри, са най-общо от порядъка на 0.2 мкм до 2.0 мкм. Този лист-носител е изключително хидрофилен, има|отрицателен товар в положителен и повърхностна площ 80 м /г. Също който така, и има може да се смени този материал ниска суха плътв силициевия двуокис, не се поддава на компресия при нормални условия ност от 0.45 г/см· . Активните местоположения са който се съдържа в порьозната матрица, и позволяват прибавянето на ор—;
I ганични функционални групи свързващи се със силициевия двуокис посред-ΐ ством химически връзки. МР5 мембраната има свързващ капацитет от поне около 240 мкг/см . Нещо повече, намерено беше, че тази мембрана, както и други подходящи мембрани които биха могли да се използват, въпреки че обикновено се използват само във водна среда, те се оказват изненадващо стабилни в условията на органичен разтворител съгласно настоящия метод.
Полимерите които образуват на мембраната могат да бъдат от да са термооастични, търговски свързващото вещество, т.е. матрицата, най-различно естество. Желателно е те достъпни смоли от които се предпочита
L -й
- 7 поливинил хлорид (PVC).
Нещо повече, може да се използва също така материали като полиетилен напълнен със силициев двуокис или съполимери на поливинил хлорид с малки количества от моноетиленови мономери като винилацетат, винилиден хлорид, пропилен или други подобни. Алтернативно, матрицата може да се формова от материали като политетрафлуоретилен (РТРЕ), целулозен ацетат или триацетат, полиамиди (като найлон) или други подобни. Когато се използва политетрафлуоретилен, той може да е под формата на фибрилна матрица (виж САЩ патенти 4 152 661 и 4 373 519) като има примерно хидрофилни абсорбтивни частички включени в него. Така, най-общо, всяка термопластична смола, която лесно се пластифицира чрез разтворител или се синтерува чрез топлина или налягане, или може лесно да се формова като се започне от предварителна матрица, и която е химически и физически стабилна при условията на настоящето изобретение може също така да се използва.
Пълнителите, за предпочитане в наситнена форма, могат да бъдат както неорганични вещества, като например по-горе споменатите силициев двуокисни съединения или, например алуминиеви съединения като алуминиев окис или хидроокис;тихя^органични пълнители, като например полизахариди, включително активирани целулозни производни. (От друга страна, намерено бе, че не-активирана целулоза не е ефективна в комбинация с PVC).
Получената мембрана може да се активира чрез обработване по известни начини така че да образува химическа връзка между себе си и ензима т. е. между частичките на пълнителя и ензима. Свързването може да се осъществи чрез хемиадсорбция, чрез ковалентна връзка или чрез напречно свързване между средството-посредник и ензима. Свързващите функционални групи, които могат да са разпределени в мембраната, са примерно всякакви свободни амино остатъци, карбоксилни, изонитрилни, алдехидни или _ кетонии групи които ще свържат 4-оксинитрилазния ензим към мембранния
- 8 пълнител. От тези се предпочита полиетиленимин (ΡΞΙ), който може да се хемиадсорбира върху пълнителя, заедно в комбинация е примерно глутаров алдехид, към който след това се свързва ензима.
Както е описано в САЩ патент 4 102 746 (по-горе), мембраната която се използва в настоящето изобретение може лесно да се получи при смесване на подходящи количества от фино наситнена полимерна смола, фино надробен неорганичен нълнител, разтворител (например циклохексанон) и един не-разтвррител (например вода) за да се получи стабилен, влажен, свободно изтичащ прах. Прахообразната смес след това се екструдира и се пропуска през каландър за да се образува плоскостна струк тура или лист с желани размери. След това плоскостта или листа се прекарват през водна баня за отмиване на разтворителя и накрая преминават през нагрята въздушна сушилня за да се отстрани водата. В съответствие с настоящето изобретение, получаващият се продукт под формата на микропорьозна, стабилна в размерите си, полутвърда, неразтворима, пропускаща течности мембрана може след това да се обработи по начин че да купелува или свързва ензимите към себе си.
Съгласно едно предпочитано изпълнение, първоначалната, химически неактивирана мембрана може да се получи по следния начин: лист от порьозен материал се получава при първоначално сухо смесване на 20.0 либри (9.07 кг) Коноко 5385 поли(винилхлорид)-на смола с едрина на частичките такава, че да преминава пред сито с отвори 180 мкм (80 меша) и 40.0 либри (18.14 кг) Хи-Сил 233, преципитиран хидратиран силициев двуокис, в Патерсон-Кели лоу-шир смесител за течно-твърди вещества в продължение на приблизително 3 минути. След това, при непрекъснато бъркане, се прибавят в продължение на 20 минути чрез помпа 54.6 либри (24.8 кг) разтворител (циклохексанон). Към сместа се прибавят след това 59.0 либри (26.8 кг) вода при въртящ се смесител и размесването продължава след това допълнително още 20 минути като в края се получава влажен, стабилен, свободно-изтичащ прах. Прахът се поставя в
- 9 шнеков екструдер като температурата в барабана е приблизително 120°F (48.9° С) и екструдата преминава между валяците на каландър за да се получи практически плосък лист с дебелина 0.02 инча (0.5 мм). След това листа се пропуска през екстракционна баня с вода и температура 170 Р (76.7° С) и се суши в нагрята пещ при 225° F (107.2° С) в продължение на 6 минути. Готовият порьозен лист има сравнително широки размери на порите простиращи се между около 0.01 микрон до около 100 микро ,_ч на и среден диаметър на порите от порядъка на около 0.15 микрона до и около 0.25 микрона, както това е определено по метода на Меркури Интружън.Общата порьозност на този съдържанието на диспергирания възлиза ва приблизително 56 % риал, например чрез накисване ала оез да се прилага каквото материал е приблизително 65 пълнител (примерно силициев % по обем и двуокис) по тегло. При опит във вода, тя бързо ропорите са взаимно свързани от
Получената по горния начин проведен с този матеще проникне в материда е налягане, което означава, че микв продължение на един час.
м натриев хлорид за да се изпробвана с тринитробензолповърхност до повърхност.
мембрана може след това да се модифи- ·, цира със свързващо средство за по-плътно свързване на $-оксинитрилаза- та по следния начин: Необработената мембрана се поставя в 5 % тегло/ i <! обем воден разтвор на полиетиленимин (PEI) с разклонена верига и моле-’ кулно тегло 50 000 при стайна температура Обработената подложка се промива с вода и отстрани неадсорбирания PEI. Може да бъде сулфонова киселина: наблюдава се получаването на интензивно оранжево оцветяване от тринитрофенил аминовото производно на повърхността на обработената мембранна подложка. Така се демонстрира наличието на значително количество алифатни амино функционални групи. Отложения азот върху третираната мембранна подложка може да се определи ч^рз количествен елементарен анализ, например 1.25 % азот в сухо тегло към 0.02 % азот на сухо тегло при немодифицираната мембранна подложка. Хемиадсорбираният PEI върху модифицираната мембранна подложка е фактически не- -----
'5- 10 обратимо свързан, т.е. той не може да се отстрани чрез инкубиране в разтвори с голями йонни сили (например 1 м натриев хлорид или 1 м B^HPO^/K^PO^) при pH стойности между 3 и 9. Само при силно кисели условия (накисване в 1 М хлороводородна киселина в продължение на 2 часа) може да се получи частична десорбция стигаща до 50 % от азотното съдържание, както се вижда от елементарния анализ. Повърхностната площ на модифицираната подложка, определена чрез стандартния ВЕТ метод възлиза на 55Л м /г при 81.1 м/г при контролата. Обработената е PEI
мембранна подложка показва идентични свойства за преминаване на течности през нея каквито има и необработената мембранна подложка без оглед на използвания буфер или йонна сила.
След теза ензима се езързва с мембраната която се активира химически първоначално с ΡΕΪ, както вече беше описано, и след това със свързваща група като глутаров алдехид, към който ензима окончателно се обвързва. Реактивите се поставят в контакт с ензима при протичането им през порите на мембраната. Потокът от реакционната среда е желателно да се контролира като мембраната или слоевете от мембрана се поставят i !
в корпус или статив, където чрез фиксиране на крайщата на мембраната ς- се образува реакторен апарат и потокът не може да премине покрай крайф щата на мембраната. При желание, могат да се поставят входящ и изходящ отвор които имат достъп до повърхността на мембраната с което се направлява и принуждава реактивите да преминат през сърцевината на реактора и да контактуват с ензима. Характерни реактори от този тип, под формата на дискове,са АКТИ-ДИСК и АСТИ-МОД (ФМЦ Корпорейшън, Филаделфия, ПА, САЩ). Последният диск по-специално включва няколко слон мембрани за да се осигури по-цялостно протичане на процеса. Поради това, трябва да се подразбира, че терминът мембрана” използван|в описанието, включва един или повече слоеве мембрани и крайната дебелина при необходимост може лесно да се определи чрез обичайните тестове. Така, в следващите примери, АКТИ-ДИСК матрицата съдържа някъде между една до
около 5 слойни мембрани, например една мембрана в примерите 2, 3, би 7 и 5 слоя в примерите 1, 4 и 5.
Желаният циан^хидринов реакционен продукт може да се изолира чрез отстраняване на циановодородната киселина и на разтворителя чрез дес тилация.
Настоящето изобретение е по-нататък илюстрирано с примери. Използваните тук означения на ситата са съгласно АМ стандарт Е11-87.
ПРИЖР 1
ПОЛУЧАВАНЕ НА (S)-(ЦИАНО)(3-ФЕНОКСИФЕНИЛ)шАНОЛ ОТ ЦИАНОВОДОРОД И З-ФЕНОКСИБЕНЗАЛДЕХЛД В ДИ-н-БУТИЛОВ ЕТЕР ПРИ ТЕМПЕРАТУРА НА ОКОЛНАТА СРЕДА Етап А Свързване на S-оксинитрилазния ензим върху порьозната матрица
АСТИ-ДИСК матричена подложка, съдържаща поли(винилхлорид)на и силициев двуокисна мембрана (wiP^ листове, ФЕЦ Корпорейшън, Филаделфия, ПА), предварително обработена с полиетиленимин, се поставя в стандарциркулационен тенУреактор с помпа. Реакторът се състои от помпа за течности, способ-
на, да изпомпва максимално 10 мл/минута, свързана на изхода си с прозрачен, гъвкав пласмасов маркуч с входа на АКТИ-ДСК матричен^ подложка. Тя от своя страна е свързана към изхода си с 100 мл рездвоар. Чрез маркуч резервоара е свързан с входа на помпата. АКТИ-Д0СК матричената подложка (Материали за биоподложки, група за химически продукти, ФЬЩ Корпорейшън, Филаделфия, ПА) се състои от пласмасов корпус, 63.5 мм диаметър и 6.4 мм дебелина, притежаващ входящ отвор на една от плоските си страни и изходящ отвор на противоположната плоска страна. В пласмасовия корпус са поместени пет слоя от проницаема за течности порьоз-ι на мембрана състояща се от хидрофобна полимерна матрица от поливинилхлорид) , от финно надробен хидрофилен пълнител от силициев двуокис диспергиран в смолестата матрица и мрежа от взаимносвързани микропори
- 12 образувани в цялия материал.
Двадесет и пет мл воден 5 %-ен (тегло/обем) разтзор на глутаров алдехид се поставя в резервоара и се изпомпва със скорост 6 мл/мин през АКТИ-ДИСК матричената подложка в продължение на 60 минути с оглед да се свърже К-края на ензима към PEI модифицираната АКТИ-ДИСК. Разтворът се заменя с 50 мл вода и водата се помпа през АКТИ-ДЛСК-а матричената подложка в продължение на 30 минути. След това водата се от странява от резервоара.
Двадесет и осем мл воден разтвор на 3_-оксннитрилазен ензим, получен от 7 дневни етиолирани кълнове на сорго/Судан тревен хибрид (анализа да протеин показва 5.4 мг протеин/мл; анализа за активност на ензима показва 10.7 единици/lit протеин) ,се разрежда до 100 мл с 0.05 и разтвор на натриев ацетатен буфер (pH = 5.4) и се поставя в резервоара. Разтворът се помпа през АКТИ-ДИСК матричената подложка в продължение на 30 минути. След това, потокът през АКТИ-ДИСК матрицата се обръща в реактора за да се осигури цялостно и равномерно зареждане с
ензим. Помпането на ензимния разтвор се продължава допълнително още г 30 минути. АКТИ-ДИСК матричената подложка се промива след това с 50 мл| вода 30 минути, както е описано по-горе. Корпусът садържащ АКТИ-ДИСК $ матричената подложка в която е свързан 5-оксинитрилазния ензим се отделя от циркулационния реактор и се поставя в хладилник за съхранение докато стане нужда от нея.
Етап В Получаване на (£)-(циано)(3-феноксифенил) метанол от циановодород и 3-феноксибензалдехид в ди-н-бутилов етер при температура на околната среда
АКТИ-ДИСК матричената подложка от етап А^ съдържаща свързания ензим, се поставя в стандартен циркулационен реактор. Резервоарът в тази система има капацитет 250 мл или повече. Остатъчната вода се отстранява от АКТИ-ДИСК матричената подложка чрез помпане на малко количество
I
- 13 ди-н-бутилов етер през АКТИ-ДИСК матричената подложка непрекъсната з продължение на около 30 минути. За един шарж резервоарът се зарежда с разтвор на 5.1 г (0.026 мола) до 24.8 грама (0.125 мола) 3-феноксибензалдехид в 100 мл ди-н-бутилов етер. Към това чрез спринцовка се прибавят 1.1 молеквивалента циановодород. Разтворът се бърка за да се осигури цялостно разтваряне на циановодорода. Започва се циркулиране на разтвора през АКТИ-ДИСК матричената подложка със скорост на помпане от 1 мл/минута до 5 мл/минута. Периодично се взимат проби за анализ, както е описано по-долу. След приключване на реакцията, обикновено след около 24 часа, реакционната смес се изпомпва от реактора. АКТИ-ДИСК матричената подложка след това се промива чрез помпане на 25 мл ди-н-бутилов етер през нея. След промиването, реакторът е готов за провеждане на нов шарж в него.
С всяка проба взета от реакционната смес се правят два анализа. Единият анализ се прави за да се установи общото превръщане на 3-фенсксибензалдехида в (циано)(3-гаеноксифенил)метанол, а вторият анализ се провежда за да се определи съотношението 5/Е в така получения прод дукт.
За определяне на конверсията в (циано)(3-феноксифенил)метанол, проба от 0.1 мл от реакционната смес се поставя в газхроматографски флакон и се разрежда с около 1 мл метиленхлорид. Към това се прибавя около 1 мл N,0-бис(триметилсилил)трифлуорацетамид. Флаконът се затваря и разклаща след което се оставя да престои 15 минути. Проба от разтвора се инжектира в подходящо програмиран газ хроматограф.
За установяване на съотнешението 5/Е в (циано)(3-феноксифенил) метанола, проба от 0.5 мл от реакционната смес се поставя в 1 драхма флакон. Към това се прибавят три капки мошеров киселинен хлорид (£ (-)-о( -метокси-о(-(трифлуорметил)фенилоцетвн киселинен хлорид) и пет капки пиридин. Получената реакционна смес се бърка и се оставя да взаимодейства в продължение на един час. След това се прибавят 1 мл вода
- 14 и 1 мл етилацетат. Реакционната смес се разклаща и слоят от етилацетат се отделя и се поставя във флакон за газхроматографиране. Проба от раз твора се инжектира в подходящо програмиран газхроматограф.
Резултатите от седем шаржа за получаване на (5)-(циано)(3-фенокси фенил)метанол са дадени по-долу:
| шарж № | алдехид скорост | време на протичане | превръщане в продукт | съотношение на 5/Е | |
| (мола) | на протичане | ||||
| 1 | 0.026 | 1 мл/мин | 24 часа | 76.3 % | 91.4/8.6 |
| 2 | 0.026 | 5 мл/мин | 23 часа | 91.8 % | 91.4/8.6 |
| 7 3 | 0.026 | 5 мл/мин | 19 часа | 88.4 % | 92.4/7.6 |
| 4 | 0.026 | 5 мл/мин | 24 часа | 91.2 % | 93.7/6.3 |
| 5 | 0.125 | 5 мл/мин | 24 часа | 94.0 % | 91.0/9.0 |
| 6 | 0.125 | 5 мл/мин | 24 часа | 90.7 % | 85.7/14.3 |
| 7 | 0.026 | 5 мл/мин | 24 часа | 80.7 % | 75.5/24.6 |
ПРИМЕР 2 ПОЛУЧАВАНЕ НА (;$)-(ДИАНО) (3-ФЕНОКСИФЕНИЛ)МЕТАНОЛ ОТ ЦИАНОВОДОРОД И З-ФЕНОКСИБЕНЗАЛДЕХИД В ДИ-н-БУТИЛОВ ЕТЕР ПРИ ТЕМПЕРАТУРА
6°С (5)-(циано)(3-феноксифенил)метанолът в този пример се получава по начина описан в пример 1. Циркулационният реактор се различава от този в пример 1 по това, че АКТИ-ДИСК матричената подложка съдържа само един слой от пропусклива за течности микропорьозна мембрана върху която е свързан (5)-оксинитрилазния ензим. АКТИ-ДИСК матричената подложка, използвана при този опит, се потапя в баня с постоянна температура която се поддържа 6° С. Провеждат се шестнадесет отделни шаржа. Всеки шарж се зарежда с 1.0 г (0.005 мола) 3-феноксибензалдехид и 0.00.5 мл (излишък) циановодород в 25 мл ди-н-бутилов етер. Скоростта на
- 15 протичане се поддържа 4 до 5 мл/минута. Резултатите от шестнадесетте шаржа за получаване на ($)-(циано)(3-феноксифенил)метанол се дадени по-долу:
| шарж № | време на протичане | превръщане в продукт | съотношение на iZS |
| S | 23 часа | 70.0 % | 95.0/5.0 |
| 9 | 26 часа | 65.8 % | 93.2/6.8 |
| 10 | 24 часа | 62.8 % | - 94.0/6.0 |
| 11 | 24 часа | 65.7 % | 93.0/7.0 |
| 12 | 27 часа | 63.9 % | 93.0/7.0 |
| 13 | 24 часа | 65.9 % | 93.4/6.6 |
| 14 | 36 часа | 76.9 % | '93.0/7.0 |
| 15 | 24 часа | 75.0 % | 93.6/6.5 |
| 16 | 25 часа | 78.2 % | 95.0/5.0 |
| 17 | 24 часа | 77.1 % | 96.0/4.0 |
| 18 | 23 часа | 76.4 % | 95.0/5.0 |
| 19 | 24 часа | 72.7 % | 94.5/5.5 |
| 20 | 24 часа | 69.2 % | 93.0/7.0 |
| 21 | 24 часа | 70.2 % | 90.0/10.0 |
| 22 | 24 часа | 68.2 % | 87.0/13.0 |
| 23 | 24 часа | 56.1 % . ·» | 81.0/19.0 |
ПРИМЕР 3 ПОЛУЧАВАНЕ НА (Ч)-(ЦЛАНО) (3-ФЕНОКСИФЕНИЛ)МЕТАНОЛ ОТ ЦИАНОВОДОРОД И З-ФЕНОКСИБЕНЗАЛДЕХИД В терц.-БУТЛЛ МЕТИЛОВ ЕТЕР ПРИ ТЕМПЕРАТУРА НА ОКОЛНАТА СРЕДА (5)-(циано)(3-феноксифенил)метанолът в този пример се получава по метода описан в пример 1. Циркулационният реактор се различава от този в пример 1 по това, че АКТИ-ДИСК матричената подложка съдържа само
- 16 един слой от пропусклива за течности микропорьозна мембрана върху която е свързан (5)-оксинитрилазния ензий. Провеждат се общо три шаржа. Всеки шарж се зарежда с 1.0 грама (0.005 мола) 3-феноксибензалдихид и 0.5 мл циановодород (последният е в излишък с оглед да се осигури цялостно превръщане и за компенсиране на загуби от изпаряване). Разтворителят при първия шарж е 50 мл ди-н-бутилов етер, а за следващите два шаржа е по 50 мл терц.-бутил метилов етер. Всеки шарж времетраенето на взаимодействието е 24 часа. Скоростта на протичане се поддържа при 5 мл/минута. Резултатите от трите шаржа за получаване на (£)-(щано)(3феноксифенил)метанол са посочени по-долу:
| шарж | разтворител | превръщане в продукт | съотношение на 5/Е |
| 24 | н-дибутилов етер | 95.0 % | 93.0/7.0 |
| 25 | терц.-бутил метилов етер | 74.0 % | 58.0/42.0 |
| 26 | терц.-бутил метилов етер | 88.5 % | 53.0/47.0 |
ПРШЛЕР 4 ПОЛУЧАВАНЕ НА (S)-(ЦИАНО)(3-ФЕНОКСИФЕНИЛ)
МЕТАНОЛ ОТ ЦИАНОВОДОРОД И З-ФЕНОКСИБЕНЗАЛДЕХИД В АЦЕТОНИТРИЛ ПРИ ТЕМПЕРАТУРА НА ОКОЛНАТА
СРЕДА (Ь)-(циано)(З-феноксифенил)метанолът от този пример се получава по метода описан в пример 1. Провежда се един шарж с 25.0 грама (0.126 мола) 3-феноксибензалдехид и 6 мл (излишък) циановодород в 100 мл ацетонитрил. Реакцията се провежда в продължение на 24 часа като скоростт· на протичане на течността е 5 мл/минута. Превръщането в целевия продукт е 88.0 а съотношението на Ь/Е на продукта е 52.0/48.0. ПРИМЕР 5 ПОЛУЧАВАНЕ НА (^)-(ЦИАНО}(З-ФЕНОКСИФЕНИЛ)МЕТАНОЛ ОТ ЦИАНОВОДОРОД И З-ФЕНОКСИБЕНЗАЛ- 17 ДЕХИД В' ТЕТРАХИДРОФУРАН ПРИ ТЕМПЕРАТУРА НА ОКОЛНАТА СРЕДА (£)-(циано)(3-феноксифенил)метанолът от този пример се получава по метода описан в пример 1. Провежда се един шарж при който се зареждат 5.0 грама (0.025 кола) 3-феноксибензалдехид и 1.5 мл (излишък) циановодород н 100 мл тетрахидрофуран. Взаимодействието се провежда в продължение на 24 часа при скорост на преминаване на течността 5 мл/ минута. Превръщането на продукта е 82.0 % и съотношението на 6/Е в продукта е 48.0/52.0.
ПР1.ЕР 6 ПОЛУЧАВАНЕ НА (5)-(ЦИАН0)(3-ФЕНОКСИФЕНИЛ)-
МЕТАНОЛ ОТ 3-ФЕНОКСИБЕНЗАЛДЕХИД ПРИ ТЕМПЕРАТУРА НА ОКОЛНАТА СРЕДА КАТО СЕ ИЗПОЛЗВА
ДАНОВОДОРОД ЗА РАЗТВОРИТЕЛ (Ь)-(циано)(З-феноксифенил)метанолът от този пример се получава по метода описан в пример 1. Циркулационният реактор се различава по АКТИ-ДЛСК матричената подложка, която съдържа само един слой пропусклива за течности микропорьозна мембрана върху която се свързва $_-оксинитрилазния ензим. Провежда се един шарж с 1.0 грама (0.005 мола) 3феноксибензалдехид в 20 мл циановодород. Взаимодействието се провежда i
в продължение на 24 часа и скоростта на протичане на течността е 5 мл/минута. Превръщането в продукт е 96.7 % и съотношението на b/Е в продукта е 58.1/41.9.
ПРИМЕР 7 ПОЛУЧАВАНЕ НА (^)-(ЦЛАНО)(З-ФЕНОКСИФЕНИЛ)МЕТАНОЛ ОТ ЦР1АН0В0Д0Р0Д И З-ФЕНОКСИБЕНЗАЛДЕХИД В ДИИ30ПР0ПИЛ0В ЕТЕР ПРИ ТЕМПЕРАТУРА
НА ОКОЛНАТА СРЕДА
Този пример показва,че разтворителя диизопропилов етер, използван примерно в САЩ патент 4 859 784 (по-горе), е неефективен като разтворител в настоящия метод.
(Ь)-(циано)(3-феноксифенил)метанольт от този пример се получава по метода описан в пример 1. Циркулационният реактор се различава по ν «и -4^- ^.- .' ''. ,.. ϊ'1 '.
- 18 АКТИ-ДИСК матричената подложка, която съдържа само един слой пропусклива за течности микропорьозна мембрана върху която е свързан Ъ-оксинитрилазния ензим. Провеждат се общо два шаржа. Всеки от тях се зарежда с 2.1 грама (0.011 мола) 3-феноксибензалдехид и 0.6 мл (излишък) от циановодород. При първия шарж разтворителя е 50 мл ди-н-бутилов етер, а при втория шарж 50 мл диизопропилов етер. Преди използването му, 500 мл от диизопропиловия етер се пречиства като се пропуска през колона
2.5 см х 28 см с неутрален двуалуминиев триокис. Пречистеният диизопропилов етер се съхранява в азотна атмосфера докато се използва. Циркулационният реактор се промива с 75 мл пречистен изопропилов етер между двата шаржа. Всеки от шаржовете взаимодейства в продължение на 23 - 24 часа. Скоростта на протичане на течността се поддържа при 5 мл/минута. Резултатите от двата шаржа за получаване на (5)-(циано)(3-феноксифенил' метанол са дадени по-долу:
| шарж | разтворител | превръщане в продукт | съотношение на ^/Е |
| 27 | н-дибутилов етер | 89.5 % | 94.0/6.0 |
| 28 | диизопропилов етер | 80.0 % | 66.0/34.0 |
Патентни претенции
Claims (10)
1. метод за получаване на оптичноактивни ($)-цианохидрини чрез взаимодействие на алдехид с циановодородна киселина при контактуване на органичен разтворител, съдържащ киселината и алдехида, с ензима Ь оксинитрилаза, характеризиращ се с това, че ензима е химически свързан към неразтворим композиционен материал състоящ се от порьозна мембрана през която преминават реактивите, като тази порьозна мембрана съдържа полимерни смолесто вещество в което са диспергирани фино наситнени частички от пълнител и мрежа от практически взаимносвързани ι
-Образувани в него пори, като порьозната мембрана е пропусклива за по· тока от течност съдържащ тези реактиви.
2. Метод съгласно претенция 1 за получаване на оптичноактивни (5)цианохидрини при взаимодействие на алдехид с циановодородна киселина при контактуване на органичен разтворител в който се съдържат киселината и алдехида с ензима З-оксинитрилаза, характеризиращ се с това, че ензимат е химически свързан към неразтворим композиционен материал, състоящ се от порьозна мембрана или слоеве от мембрана, притежаващи поне чифт от противоположни повърхности и предварително определена дебелина, през която преминават реактивите, порьозната мембрана включва полимерно смзлестс свързващо вещество в коетфа диспергирани фино на- 'j практически взаимносвьрзанл, образувани в него пори между частичките на пълнителя и смолестпю свър зващо вещество и между съседни частички на пълнителя, количеството на наличните в порьозната мембрана частички от пълнител са поне около 25 % тегловно, размерите на разположените върху повърхностите и в масата на предварително определената дебелина на мембраната пори са различни и са от порядъка на 0.01 микрон до 100 микрона, както това се установя- ва порозиметрично чрез меркури Интружън метода, като порьозната мембрана е пропусклива за потока от течност поне през едната от тези повърх ности.
3. метод съгласно претенции 1 и 2, характеризиращ се с това, че съдържа мембраната :'се състои от. свързващо вещество поли(винил хлорид) и пълнител силициев двуокис.
4. метод съгласно претенции 1 и 2, характеризиращ се с това, че |
I мембраната чрез крайщата си е свързана в корпус, с което течността няма възможност да преминава през крайщата й. '
5. метод съгласно претенция 4, характеризиращ се с това, че корпусът е снабден с входящ отвор който има достъп до едната повърхност на мембраната и изходящ отвор, който има достъп до противоположната повърхност на мембраната.
6. Метод съгласно претенции 1 или 2, характеризиращ се с това, че мембраната е химически активирана със свързващо ензима вещество.
7. Метод съгласно претенции 1 или 2, характеризиращ се с това, че ензима е ковалентно свързан или свързан с напречни връзки към свързващото вещество.
8. Метод съгласно претенция 6 характеризиращ се с това, че мембра ната е химически активирана с полиетиленимин и глутаров алдехид
9. Метод съгласно претенция 1 или 2, характеризиращ се с това, че разтворимостта на алдехида във вода по-малка от около
10. метод съгласно претенции 1 или характеризиращ се c това, че алдехида е 3-феноксибензалдехид се c това, че органичния разтворител е ди-н-бутилов етер.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/809,803 US5177242A (en) | 1991-12-17 | 1991-12-17 | Process for preparing optically active cyanohydrins with enzymes |
| PCT/US1992/009945 WO1993012072A1 (en) | 1991-12-17 | 1992-11-13 | Process for preparing optically active cyanohydrins with enzymes |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BG97619A true BG97619A (bg) | 1994-03-31 |
| BG61277B1 BG61277B1 (en) | 1997-04-30 |
Family
ID=25202264
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BG97619A BG61277B1 (en) | 1991-12-17 | 1993-04-07 | Process for the preparation of optically activecyanohydrines with enzymes |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5177242A (bg) |
| EP (1) | EP0590096B1 (bg) |
| JP (2) | JPH05507736A (bg) |
| KR (1) | KR970009155B1 (bg) |
| CN (1) | CN1075166A (bg) |
| AR (1) | AR247921A1 (bg) |
| AT (1) | ATE135047T1 (bg) |
| AU (1) | AU647982B2 (bg) |
| BG (1) | BG61277B1 (bg) |
| BR (1) | BR9205413A (bg) |
| CA (1) | CA2093826C (bg) |
| CZ (1) | CZ280422B6 (bg) |
| DE (2) | DE69208878T2 (bg) |
| FI (1) | FI931583A (bg) |
| HU (1) | HUT71308A (bg) |
| IL (1) | IL104046A0 (bg) |
| MW (1) | MW4993A1 (bg) |
| MX (1) | MX9206954A (bg) |
| OA (1) | OA09873A (bg) |
| PL (1) | PL170490B1 (bg) |
| RO (1) | RO112765B1 (bg) |
| RU (1) | RU2092558C1 (bg) |
| SK (1) | SK36293A3 (bg) |
| TW (1) | TW242166B (bg) |
| WO (1) | WO1993012072A1 (bg) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT396252B (de) * | 1991-10-31 | 1993-07-26 | Chemie Linz Gmbh | Enzymatisches verfahren zur enantioselektiven herstellung optisch aktiver cyanhydrine |
| GB9222253D0 (en) * | 1992-10-23 | 1992-12-09 | Celltech Ltd | Chemical compounds |
| AT400035B (de) * | 1993-06-01 | 1995-09-25 | Chemie Linz Gmbh | Enzymatisches verfahren zur herstellung aliphatischer s-cyanhydrine |
| DE4322064A1 (de) * | 1993-07-02 | 1995-01-12 | Chemie Linz Deutschland | Enzymatisches Verfahren zur Herstellung aliphatischer S-Cyanhydrine |
| DE19529116A1 (de) * | 1995-08-08 | 1997-03-06 | Chemie Linz Deutschland Gmbh I | (S)-Hydroxynitrillyase aus Hevea brasiliensis |
| DE59711628D1 (de) * | 1996-02-09 | 2004-06-24 | Degussa | Verfahren zur Herstellung von (S)-Cyanhydrinen |
| CN1093531C (zh) * | 1998-05-04 | 2002-10-30 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 氰醇裂解酶催化合成光学活性氰醇化合物 |
| CN1083009C (zh) * | 1999-07-16 | 2002-04-17 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 一种新酶源的醇腈裂解酶催化合成光学活性氰醇化合物的方法 |
| AU2668101A (en) * | 1999-11-25 | 2001-06-04 | Skw Trostberg Aktiengesellschaft | Method for producing optically active cyanhydrins |
| JP3709317B2 (ja) * | 2000-01-12 | 2005-10-26 | 株式会社日本触媒 | 光学活性シアノヒドリンの合成方法 |
| US7078225B2 (en) * | 2000-06-02 | 2006-07-18 | Nippon Shokubai Co., Ltd. | Method for enzymatically producing an optically active cyanohydrin |
| WO2007026623A1 (ja) * | 2005-08-30 | 2007-03-08 | Sumitomo Chemical Company, Limited | ３−アミノ−６−クロロピリダジンの製造方法 |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3862030A (en) * | 1972-12-13 | 1975-01-21 | Amerace Esna Corp | Microporous sub-micron filter media |
| IL46178A (en) * | 1974-12-03 | 1978-10-31 | Rehovot Res Prod | Method for the performance of enzymatic reactions |
| US4102746A (en) * | 1975-08-29 | 1978-07-25 | Amerace Corporation | Immobilized proteins |
| US4169014A (en) * | 1976-08-16 | 1979-09-25 | Amerace Corporation | Method of immobilizing proteinaceous substances |
| US4795704A (en) * | 1985-10-11 | 1989-01-03 | Sepracor, Inc. | Multiphase asymmetric membrane reactor systems |
| US4959467A (en) * | 1985-11-27 | 1990-09-25 | Allied-Signal Inc. | Control of product selectivity in the addition of HCN to arabinose |
| US4900667A (en) * | 1985-12-19 | 1990-02-13 | Allied-Signal Inc. | One carbon homologation of carbohydrates by transcyanohydrination |
| DE3701383A1 (de) * | 1987-01-20 | 1988-07-28 | Degussa | Verfahren zur herstellung von optisch aktiven cyanhydrinen |
| US4800162A (en) * | 1987-04-01 | 1989-01-24 | Sepracor, Inc. | Method for resolution of steroisomers in multiphase and extractive membrane reactors |
| DE3823864A1 (de) * | 1988-01-29 | 1989-08-10 | Kernforschungsanlage Juelich | Enymatisches verfahren zur herstellung von optisch aktiven cyanhydrinen |
| DE3917374A1 (de) * | 1988-07-14 | 1990-12-06 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Verfahren zur herstellung von s-cyanhydrinen |
| EP0446826B1 (de) * | 1990-03-16 | 1995-11-15 | Forschungszentrum Jülich Gmbh | Verfahren zur enzymatischen Herstellung optisch aktiver Cyanhydrine |
| AT396252B (de) * | 1991-10-31 | 1993-07-26 | Chemie Linz Gmbh | Enzymatisches verfahren zur enantioselektiven herstellung optisch aktiver cyanhydrine |
-
1991
- 1991-12-17 US US07/809,803 patent/US5177242A/en not_active Expired - Fee Related
-
1992
- 1992-11-13 RU RU9293033481A patent/RU2092558C1/ru active
- 1992-11-13 PL PL92300043A patent/PL170490B1/pl unknown
- 1992-11-13 CA CA002093826A patent/CA2093826C/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-13 CZ CS93651A patent/CZ280422B6/cs unknown
- 1992-11-13 JP JP93508002A patent/JPH05507736A/ja active Pending
- 1992-11-13 JP JP5508002A patent/JPH0832243B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-13 HU HU9301020A patent/HUT71308A/hu unknown
- 1992-11-13 KR KR1019930701172A patent/KR970009155B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-11-13 DE DE69208878T patent/DE69208878T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-13 AU AU31414/93A patent/AU647982B2/en not_active Ceased
- 1992-11-13 WO PCT/US1992/009945 patent/WO1993012072A1/en active IP Right Grant
- 1992-11-13 DE DE0590096T patent/DE590096T1/de active Pending
- 1992-11-13 SK SK36293A patent/SK36293A3/sk unknown
- 1992-11-13 EP EP92925308A patent/EP0590096B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-13 BR BR9205413A patent/BR9205413A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-11-13 AT AT92925308T patent/ATE135047T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-11-13 RO RO93-00489A patent/RO112765B1/ro unknown
- 1992-11-26 TW TW081109467A patent/TW242166B/zh active
- 1992-12-02 MX MX9206954A patent/MX9206954A/es not_active IP Right Cessation
- 1992-12-02 CN CN92114106A patent/CN1075166A/zh active Pending
- 1992-12-10 IL IL104046A patent/IL104046A0/xx unknown
- 1992-12-11 AR AR92323883A patent/AR247921A1/es active
-
1993
- 1993-04-07 FI FI931583A patent/FI931583A/fi not_active Application Discontinuation
- 1993-04-07 BG BG97619A patent/BG61277B1/bg unknown
- 1993-04-12 OA OA60362A patent/OA09873A/en unknown
- 1993-04-13 MW MW4993A patent/MW4993A1/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4102746A (en) | Immobilized proteins | |
| US4273873A (en) | Preparation of antithrombogenic polymeric materials | |
| Zeng et al. | Membrane chromatography: preparation and applications to protein separation | |
| US4169014A (en) | Method of immobilizing proteinaceous substances | |
| BG97619A (bg) | Метод за получаване на оптичноактивни цианхидрини с ензими | |
| Piletsky et al. | Surface functionalization of porous polypropylene membranes with polyaniline for protein immobilization | |
| EP0106769B1 (fr) | Support particulaire greffé en surface, son procédé de préparation et adsorbants pour chromatographie d'affinité incorporant ce support, ainsi que leur utilisation, notamment en biologie | |
| FI93124B (fi) | Menetelmä liuenneen valkuaisaineen immobilisoimiseksi | |
| CS241105B2 (en) | Methof of totally porous activated gel production | |
| US4705753A (en) | Biologically active acrylonitrile-based copolymeric membrane | |
| CA2121747C (en) | Hydrophilic polymer coated perfluorocarbon polymer-based matrices, their preparation and use in bioaffinity | |
| Krajewska | Diffusional properties of chitosan hydrogel membranes | |
| Kawabata et al. | New method of immobilization of microbial cells by capture on the surface of insoluble pyridinium‐type resin | |
| Yong et al. | The facile synthesis of an aldehyde-containing graft copolymer membrane for covalent protein capture with retention of protein functionality | |
| Kawai et al. | Immobilization of ascorbic acid oxydase in multilayers onto porous hollow-fiber membrane | |
| EP0029411B1 (fr) | Composition adhésive pour le dépôt d'un revêtement adhésif fixateur de molécules biofonctionnelles, revêtement obtenu et procédé pour sa préparation, substrat recouvert du revêtement et son utilisation comme biocatalyseur | |
| Kumakura et al. | Immobilization of microbial cells on cellulose–polymer surfaces by radiation polymerization | |
| SU755296A1 (ru) | Способ получения активированных носителей для иммобилизации биологически активных веществ 1 | |
| JP3890625B2 (ja) | スーパー抗原吸着材料 | |
| JPS60193538A (ja) | 吸着剤 | |
| JPH01119309A (ja) | 異方透過性反応型多孔質分離膜 | |
| Hamzah et al. | IMMOBILIZED METAL AFFINITY CHROMATOGRAPHIC MEMBRANE FOR TRYPSIN SEPARATION | |
| JPH06256434A (ja) | 多孔体、多孔体からなる多孔性担体、多孔性担体を用いた固定化機能性物質、これらの製造方法および多孔体製造用組成物 | |
| JPS5950312B2 (ja) | 酵素もしくは微生物菌体の固定化法 | |
| JP2001300308A (ja) | エンドトキシン吸着材 |