BG63942B1 - Тиолни производни с металопептидазна инхибиторна активност - Google Patents

Тиолни производни с металопептидазна инхибиторна активност Download PDF

Info

Publication number
BG63942B1
BG63942B1 BG102553A BG10255398A BG63942B1 BG 63942 B1 BG63942 B1 BG 63942B1 BG 102553 A BG102553 A BG 102553A BG 10255398 A BG10255398 A BG 10255398A BG 63942 B1 BG63942 B1 BG 63942B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
phenylalanine
phenylmethylpropionyl
mercapto
thiazolyl
group
Prior art date
Application number
BG102553A
Other languages
English (en)
Other versions
BG102553A (bg
Inventor
Franco Pellacini
Mario Fantucci
Gabriele Norcini
Stefano Romagnano
Francesco Santangelo
Claudio Semeraro
Original Assignee
Zambon Group S.P.A.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zambon Group S.P.A. filed Critical Zambon Group S.P.A.
Publication of BG102553A publication Critical patent/BG102553A/bg
Publication of BG63942B1 publication Critical patent/BG63942B1/bg

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/26—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/55—Acids; Esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/30—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/24—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Preliminary Treatment Of Fibers (AREA)
  • Treatment Of Fiber Materials (AREA)

Abstract

Съединенията инхибират едновременно ангиотензинпревръщащ ензим и неутрална ендопептидаза и са приложими за лечение на кардиоваскуларни заболявания. Те имат формула в която R, R1, R2 и R3 имат значенията, посочени в описанието. Изобретението се отнася още до методи за получаване на съединения и до фармацевтични състави, които ги съдържат като активни ингредиенти.

Description

Област на техниката
Изобретението се отнася до производни на тиоли с металопептидазна инхибиторна активност, по-специално производни на N-меркаптоацилфенилаланин, полезни за лечение на кардиоваскуларни заболявания.
Фармакологичният интерес към изследване на молекули, инхибитори на металопептидазите, произтича от влиянието на тези ензими върху сърдечно-съдовата система.
Известно е, че съединения, които инхибират ангиотензин превръщащия ензим (АПЕ), са полезни при лечение на хипертония, сърдечни заболявания и постинфарктни състояния, тъй като инхибират образуването на ангиотензин II, вещество, предизвикващо различни ефекти, вкл. увеличение на кръвното налягане.
Съединения, които инхибират ендотелин превръщащ ензим (БПЕ), са полезни антивазоконстриктори, защото потискат образуването на ендотелин, пептид, състоящ се от 21 аминокиселини и имащ съдосвиваща активност.
От друга страна, съединения, които инхибират ензимна неутрална ендопептидаза (НЕП), познат още като енкефалиназа, са полезни вазодилатори, тъй като този ензим инактивира не само ендогенния енкефалин, но и някои натриевоуретерни фактори, например атриалния фактор, хормон, секретиран от сърцето, който увеличава вазодилацията и на бъбречно ниво увеличава диурезата и натрийурезата.
Ето защо, въпреки че въздействат върху кардиоваскуларната система по различен механизъм, съединенията с металопептидазна инхибиторна активност обикновено се използват поотделно или в комбинация за лечение на хипертония, бъбречна недостатъчност, конгестивна сърдечна недостатъчност и исхемични кардиопатологии.
Предшестващо състояние на техниката
От производните на тиолите, инхибитори на металопептидазите, тиорфан [(DL-(3-Mepxaпато-2-бензилпропаноил) глицин], описан за първи път от Roques и сътр. в Nature, том 288, стр. 286-288 (1980) и каптоприл (The Merck Index, XI издание, No 1773, стр. 267) се смятат за родоначални съединения на инхибиторите на неутрал ната ендопептидаза и ангиотензин превръщащия ензим.
В литературата са описани и други молекули със структура на тиоли, които инхибират металопептидазата.
В патенти на US 4 401 677 и 4 199 512 се описват меркаптоалканоиламино киселини, които са инхибитори на енкефалиназа и аденозин превръщащ ензим.
В патент на ЕР 0419327 се описват производни на аминокиселини с енкефалиназна и АПЕ инхибиторна активност.
В патент на ЕР 0449523 се описват меркапто и ацилтио трифлуорометиламиди с НЕП инхибиторна активност.
В патент WO 93/08162 се описват β,β-дизаместени α-меркаптометилпропиониламиди със смесена АПЕ/НЕП инхибиторна активност.
В WO 0524553 [Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale (INSERM)] се описват ацилмеркаптоалканоилдипептиди, инхибитори на неутралната ендопептидаза и пептидилдипептазаА.
В патент ЕР 0566157 се описват производни на тиоли, като например N-меркаптоациламинокиселини, имащи НЕП-инхибиторна активност.
Описани са и α-меркаптоацилдипептиди, инхибитори на АПЕ и НЕП, от S.S. Bhagwat и сътр. в Bioorganic & Medical Chemistry Letters 7, 735-738, 1995. Съгласно този патент присъствието на дифенилметилова група придава интересна смесена АПЕ/ НЕП инхибиторна активност на молекули с а-меркаптоацилдипептидна структура, а заместването на дифенилната група с групи като а и β-нафтил причинява значителна загуба на активността.
Техническа същност на изобретението
Установено е, че производните на N-меркаптоацил фенилаланин имат забележителна инхибиторна активност по отношение на анпютензин превръщащ ензим и неутрална ендопептидаза (смесена или двойна АПЕ/НЕП инхибиторна активност), което ги прави особено полезни в терапията на кардиоваскуларни патологии.
Затова предмет на изобретението са съединения с формула
R1 ι ·
R-CH2-CH<ONH-CH-COOR2 (I) * I
CH2-R3 *
в която R е меркаптогрупа или R4COS група, която в организма се трансформира до меркаптогрупа; R, е права или разклонена С2-С4 алкилова група или арил или арилалкилова група, съдържаща от 1 до 6 въглеродни атома в алкиловия остатък, като арил е фенил или 5- или 6-членен ароматен хетероцикъл с един или два хетероатома от групата, включваща азот, кислород или сяра, евентуално заместен с един или повече заместители, същите или различни, избрани от групата, включваща халогенни атоми, хидроксигрупи, алкокси, алкил, алкилтио, алкилсулфонил или алкоксикарбонилни групи с 1 до 6 въглеродни атома в алкиловия заместител, C,-C3 алкилови групи, съдържащи един или повече флуорни атоми, карбоксигрупи, нитрогрупи, амино- или аминокарбонилни групи, ациламиногрупи, аминосулфонилни групи, моно- или ди-алкиламино или моно- или диалкиламинокарбонилни групи с 1 до 6 въглеродни атома в алкиловия заместител; 1% е водороден атом, права или разклонена С(-С4 алкилова или бензилова група; R3 е фенилова група, заместена с 5- или 6-членен ароматен хетероцикъл с един или два хетероатома, избрани от групата, включваща азот, кислород или сяра, като фениловата или хетероциклени групи евентуално са заместени с един или повече заместители, същите или различни, както е посочено за R,; R4 е права или разклонена C,-C4 алкилова група или фенилова група; означените със звездичка въглеродни атоми са стереогенни центрове; и фармацевтично приемливи соли.
Съединения с формула I съдържат два стереогенни центъра и могат да съществуват под формата на стереоизомери.
Затова предмет на изобретението са съединения с формула I както под формата на стереоизомерна смес, така и индивидуални стереоизомери.
Съединенията с формула I съгласно изобретението имат смесена АПЕ/НЕП инхибиторна активност и са полезни при лечение на кардиоваскуларни заболявания.
Въпреки че и двата термина “смесена” и “двойна” активност се използват равностойно, “двойна” се използва в литературата повече за съединения, инхибитори едновременно на аденозин превръщащ ензим и неутрална ендопептидаза. В този контекст терминът “смесена” и “двойна” активност имат еквивалентно значение.
Съгласно изобретението, с изключение на посочените примери, под права или разклонена алкилова група се разбира алкил като метил, етил, пропил, изопропил, бутил, втор.-бутил, трет.-бутил, изобутил, пентил, 2-пентил, 3-пентил, изопентил, трет.-пентил, хексил и изохексил; терминът “права или разклонена алкокси група” се отнася до алкокси като метокси, етокси, пропокси и изопропоксигрупа; терминът “халогенен атом” се отнася до флуор, хлор, бром или йод; терминът “ацил” се отнася до ацилова група от алифатна или ароматна карбоксилна киселина като оцетна, пропионова, маслена или бензоена киселина; терминът 5- или 6-членен ароматен хетероцикъл, съдържащ 1 или 2 хетероатома като азот, кислород или сяра, се отнася до група като тиазол, изооксазол, оксазол, изоксазал, изотиазол, пиразол, имидазол, тиофен, пирол, пиридин, пиримидин, пиразин, пиридазин, и фуран, евентуално бензокондензирани.
Примери за фармацевтично приемливи соли на съединения с формула I са солите на алкални или алкалоземни метали и солите на фармацевтично приемливи органични основи. Предпочитани съединения са съединенията с формула I, като R3 е фенилова група, заместена в позиция 4 с хетероциклена група.
Повече предпочитани съединения от този клас са съединенията с формула I, като R, е арилалкилова трупа, евентуално заместена с един или повече заместители - същите или различни, избрани от групата, включваща халогенен атом, хидрокси, алкил или алкокси.
Още повече предпочитаните съединения от този клас са съединенията с формула I, в която R, е фенилалкилова група, евентуално заместена с един или повече заместители, същите или различни, избрани от групата, включваща халогенен атом, хидрокси, или алкокси.
Предпочитани примери за фармацевтично приемливи соли на съединения с формула I са солите на алкални метали като натрий, литий и калий.
За специалистите е ясно, че съединенията с формула I, в които R е R4COS група, превръща се в организма до меркаптогрупа и съединенията с формула I, в които е алкил или бензил, са биологични предшественици на съответните съединения с формула I, в които R е меркаптогрупа (R—SH) или R2 е съответно водороден атом (Rj-H).
Конкретни примери за предпочитани съединения с формула I, предмет на настоящото изобретение, са:
Ν- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(2-тиазолил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(2-пиридил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- (З-фенилкарбонилтао-2-фенилметилпропионил) -4- (3-пиридил) -фенилаланин бензилов естер;
Ν- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(2-фурил)-фенилаланин метилов естер;
К-(3-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(5-пиримидинил)-фенилаланин етилов естер;
Ν- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил) -4- (2-пиразинил) -фенилаланин метилов естер;
Ν- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(2-тиенил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(3-тиенил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(3-фурил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- [3-фенилкарбонилтио-2-(3-пиридилметил)пропионил] -4-(2-тиазолил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- [З-ацетилтио-2- (3-метоксифенил) метилпропионил]-4-(2-тиазолил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- [З-ацетилтио-2- (2-флуорофенил) метилпропионил] -4-(2-тиазолил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- [З-фенилкарбонилтио-2- (2-тиенил) метил-пропионил] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин метилов естер;
Ν- [2- (2-фурил) метил-3-фенилкарбонилтио-пропионил)-4-(2-тиазолил)-фенилаланин метилов естер;
Ν- [2- (З-метил-5-изоксазолил) метил-3-фенилкарбонилтио-пропионил] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин метилов естер;
Ν- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) -
4- (2-тиазолил) -фенилаланин;
Ν-(З-меркапто-2-фенилметилпропионил) -
4- (2-пиридил) -фенилаланин;
Ν- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (3-пиридил) -фенилаланин;
Ν- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (2-фурил) -фенилаланин;
Ν- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (5-пиримидинил) -фенилаланин;
Ν- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (2-пиразинил) -фенилаланин;
N - (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (2-тиенил) -фенилаланин;
Ν- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (3-тиенил) -фенилаланин;
N - (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (3-фурил) -фенилаланин;
Ν- [З-меркапто-2- (З-пиридилметил)пропионил] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин;
N - [З-меркапто-2- (3-метоксифенил) метилпропионил] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин;
Ν- [З-меркапто-2- (2-тиенил) метил-пропионил] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин;
N - [З-меркапто-2- (З-метил-5-изоксазалил) метил-пропионил] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин;
Ν- [2- (2-флуорофенил) метил-3-меркаптопропионил] -4- (2-тиазолил)-фенилаланин;
Ν- [2-(2-фурил)метил-3-меркапто-пропионил] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин;
Получаването на съединенията с формула I, предмет на настоящото изобретение, се извършва чрез синтетична реакция на съединение с формула г
я-снг-сн-ссхж (П) като R и R, имат значенията, посочени погоре; и производно на фенилаланин с формула *
HjN-CEtCOORj (Ш)
ВД като Rj и R3 имат значенията, посочени погоре;
Кондензационната реакция се провежда по известен в химията на пептидите метод.
Преди провеждане на реакцията е полезно да се защитят функционалните групи, които евентуално е възможно да пречат на реакцията.
Евентуална защита се провежда по известни методи.
От тази гледна точка съединенията, в които R е R4COS, за предпочитане се използват като интермедиати с формула II. По този начин се получават съответните съединения с формула I, в която R“R4COS, от които след хидролиза се получават съединения с формула I, като R-SH.
Определянето на целесъобразността от евентуална защита, както и избора на вид защи4 та в зависимост от провежданата реакция и функционални групи, които е необходимо да бъдат защитени, е от компетенция на специалистите.
Отстраняването на евентуалните защитни групи се провежда по известни методи.
Обща литература за използване на защитни групи в органичната химия е посочена в монографията “Защитни групи в органичните синтези” на Theodora W. Greene и Peter G.M. Wuts, John Wiley & Sons Inc., II издание, 1991.
Съединенията c формула II са познати или лесно се получават по известни методи, описани например в патент на GB 1576161.
Алтернативно, съединения с формула II могат да се получат с помощта на синтетични методи, описани от М.С. Foumie-Zalusky и сьтр., в J. Med. Chem. 1994, 37, 1070-1083.
Интермедиатите с формула III също са познати или се получават лесно по познати методи. Например, съединения с формула III могат да се получат чрез синтетични методи, описани от W.C. Sheh et al. в J. Org.Chem. 1992, 57, 379-381.
Алтернативно, съединенията с формула III могат да се получат чрез методи на свързване (крос-свързване) от халогенни хетероциклени съединения и производни на станилфенилаланин, както е описано от D.S. Wilburt et al. в Bioconjugate Chem. 1993, 4, 574-580.
Съединенията c формула I под формата на индивидуални стереоизомери се получават чрез стереоселективен синтез или разделяне на стереоизмерна смес по известни методи.
Получаването на солите на съединенията с формула I съгласно изобретението също се провежда по известни методи.
Съединенията с формула I съгласно изобретението имат смесена АПЕ/НЕП инхибиторна активност и са полезни за лечение на кардиоваскуларни заболявания.
Инхибиторната активност на съединения с формула I се определя с помощта на in vitro опити (пример 8).
По-конкретно, инхибиторната активност на съединеният с формула I е определена при сравнение с тиорфан и каптоприл.
In vitro инхибиторната активност на съединенията с формула I е дадена като 1СИ стойност при пМ концентрации.
Тази активност е сравнима с тази на каптоприл по отношение на АПЕ инхибиторната активност и по-висока от тиорфан по отношение на НЕП инхибиторната активност.
Инхибиторната активност на съединенията с формула I е определена освен това и с помощта на ex vivo опити и сравнение с познати съединения (пример 9).
По-конкретно, 14-[3-меркапто-2-(3,4-метилендиоксифенил) метил-пропионил ] - (S) -фенилаланин и М-[3-меркапто-2-(3,4-метилендиоксифенил) метил-пропионил] -(8)-тирозин, описани като инхибитори на енкефалиназа и аденозин превръщащ ензим съгласно посочения по-горе патент на ЕР 0419327, оттук-нататък са означени като съединения R-1 и R-2, а Ь1-(3-меркапто-2-метилрпропаноил)-Ь-тирозин и М-(3-меркапто-2-метилпропаноил) -L-триптофан, описани като инхибитори на аденозин превръщащ ензим в US 4 199 512 и инхибитори на енкефалиназа в US 4 401 677, оттук-нататък са означени съответно като R3 и R-4 и са използвани като стандарти.
Ex vivo АПЕ/НЕП инхибиторната активност, по конкретно е определена чрез определяне на ензимната активност в тъканни хомогенати (бял дроб и бъбрек съответно за АПЕ и НЕП активност) , получени от плъхове с вродена хипертония, третирани интравенозно и орално с изследваните съединения.
Заслужава да се отбележи, че установената активност на съединенията с формула I в ех vivo опитите, потвърждава данните за смесена активност (двойна активност), показана в in vitro опитите и при орално приложение. Тази активност, освен това е значително по-висока от тази на стандартите.
За практическо използване в терапията съединенията с формула I могат да бъдат включени в твърди или течни фармацевтични състави, подходящи да орално или подкожно приложение.
Затова фармацевтичните състави, съдържащи терапевтично ефективно количество съединение с формула I в смес с носител за фармацевтично използване, са друг предмет на изобретението.
Конкретни примери за фармацевтични състави съгласно изобретението са таблетки, покрити таблетки, капсули, гранулата, разтвори и суспензии, подходящи за орално приложение и разтвори и суспензии, подходящи за подкожно приложение.
Фармацевтичните състави съгласно изобретението се получават по конвенционални методи.
Дневната доза на съединение с формула I или съответна пролекарствена форма зависи от няколко фактора: от това, доколко заболяването е сериозно, индивидуалната реакция на пациента или вида на лекарствената форма; обикновено дозата е от 0,1 до 10 mg на kg тегло, в единична доза или няколко дневни дози.
Изобретението е илюстрирано със следните примери.
Използван е силикагел за флашхроматография на фирмата Baker company (кодов № 7024-00), освен в примерите, където е указано друго.
Примери за изпълнение на изобретението
Пример 1. Получаване на етилов естер на К-трет.-бутоксикарбонил-4- (5-пиримидинил) -Lфенилаланин
Смес от 5-пиримвдинилборна киселина (850 mg, 2 mmol), етилов естер на N-трет.-бутоксикарбонил-4-трифлуорометилсулфонилПЬ-фенилаланин (450 mg, 2,2 mmol), разтвор на натриев карбонат (530 mg) във вода (2,59 ml) и смес на толуор:етанол (10:4,5) (20 ml) се дегазира 30 min с азот.
Добавя се паладиев (О)тетракис(трифенилфосфин) (120 mg, 0,06 mmol) и реакционната смес се нагрява 3 h при 90°С и разбъркване. Сместа се охлажда до стайна температура и отново се прибавя етилов естер на Ь1-трет.-бутоксикарбонил-4трифлуорометилсулфонил-Ь-фенилаланин (112 mg) и паладиев (0)тетракис- (трифенилфосфин) (30 mg). Сместа се нагрява при 90°С и разбъркване в продължение на още 18 h. След охлаждане на реакционната смес до стайна температура се добавят етилацетат (100 ml) и вода (40 ml).
Двете фази се разделят и органичната фаза след сушене над натриев сулфат се изпарява. Полученият остатък се пречиства с флашхроматография [силикагел; елуент хексан:етилацетат (7:3); налягане на азота 0,1 atm]. Получава се безцветно масло на етилов естер на N-трет.-бутоксикарбонил-4-(5-пиримидинил)-L-фенилаланин (130 mg, 14% добив).
Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 1,24 (t, ЗН, CH2-CH3); 1,40 [s, 9H, С(СНЗ)]; 3,01-3,25 (m, 2Н, СН2-СН); 4,19 (q, 2Н, СН2-СН3); 4,524,65 (ш, 1Н, СН-СОО); 5,06 (d, 1Н, NH); 7,25-
7,52 (m, 4Н, фенилен); 8,91 (s, 2Н, N-CH-C-CHN);9,19 (s, 1Н, N-CH-N).
Пример 2. Получаване на метилов естер на М-трет.-бутоксикарбонил-4-(2-тиазолил)-Ь-фенилаланин
Метилов естер на N-трет.-бутоксикарбонил4-(3-флуорометилсулфонил)-L-фенилаланин (8g, 32,3 mmol) и паладиев бис(трифенилфосфин) хлорид (2,3 g) се прибавят към разтвор на 2-триме тилстанилтиазол (13,8 g, 32,3 mmol) в смес на тетрахидрофуран:толуол (10:1) (50 пв), предварително дегазирана с азот.
Сместа се нагрява 24 h на обратен хладник, след което се прибавя отново 2-триметилстанил-тиазол (2 g). След 6 h нагряване на обратен хладник се прибавя метилов естер на N-трет.бутоксикарбонил-4- (трифлуорометилсулфонил) L-фенилаланин (2 g) и паладиев бис (трифенилфосфин) хлорид (700 mg). Получената реакционна смес се оставя 16 h при разбъркване при 70°С, след което се охлажда до стайна температура. Прибавя се вода (200 ml) към сместа и се екстрахира с метиленхлорид (4 х 200 ml). Обединените органични фази се сушат над натриев сулфат и се изпаряват под вакуум. Полученият остатък се пречиства с флашхроматография [силикагел; елуент метиленхлорид:етилацетат (9:1); налягане на азот 0,1 atm]. Получава се метилов естер на Nтрет.-бутоксикарбонил-4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин (2,3 g; 20% добив).
Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 1,40 [s, 9H, C(CH3)]; 3,00-3,21 (m, 2H, CH2); 3,70 (s, 3H, COOCH3); 4,42-4,65 (m, 1H, CH-COO); 5,02 (bd, 1H, NH); 7,30 (d, 1H, S-CH-CH-N); 7,81 (d, 1H, S-CH-CH-N); 7,15-7,90 (m, 4H, фенилен).
Пример 3. Получаване на метилов естер на М-трет.-бутоксикарбонил-4- (3-пиридил)-Lфенилаланин
3-бромпиридин (1,67 g, 10 mmol) и паладиев (О)тетракис (трифенилфосфин) (370 mg; 0,219 mmol) се прибавят към разтвор на метилов естер на К-трет.-бутоксикарбонил-4-(трибутилстанил)-L-фенилаланин (4 g, 7,03 mmol), получен както е описано от D.S. Wilbur et al. в Biconjugate Chem. 1973, 4, 574-580, в безводен диметилформамид (30 ml), дегазиран предварително с азот.
Реакционната смес се оставя 10 min при разбъркване и стайна температура, след което се нагрява 6 h при 105°С. Прибавя се отново паладиев (О)тетракис (трифенилфосфин) (0,0035 mmol) и сместа се разбърква 8 h при 105°С, след което се охлажда до стайна температура.
Прибавя се вода (100 ml) и реакционната смес се екстрахира с хексан (3 х 150 ml). Обединените органични фази се промиват с наситен воден разтвор на калиев флуорид, сушат се над натриев сулфат и се изпаряват под вакуум. Към получения остатък се добавя етилацетат и се филтрува. Разтворът се изпарява под вакуум и оста тъкът се пречиства с флашхроматография [силикагел; хексан.-етилацетат (8:2); налягане на азот 0,1 atm]. Получава се метилов естер на N-трет.бутоксикарбонил-4- (3-пиридил) -L-фенилаланин (1,5 g; 60% добив) като безцветно масло.
ХЙ МС: (М+Н)^357
Ή-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm) :1,40 [s, 9H, C(CHj)]; 3,00-3,20 (m, 2H, CH,); 3,71 (s, 3H, COOCH3); 4,55 (m, 1H, CH-COO); 5,05 (bd, 1H, NH); 7,19-7,51 (m, 4H, фенилен); 7,30-8,82 (bm, 4H, пиридил).
Аналогично са получени следните съединения:
Н-трет.-бутоксикарбонил-4- (2-пиридил) L-фенилаланин метилов естер
ХЙ МС: (М+Н)*-357
Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm) :1,40 [s, 9H, C(CH3)]; 3,03-3,21 (m, 2H, CH^-CH); 3,70 (s, 3H, COOCH3); 4,54-4,65 (m, 1H, CH-COO);
4,98 (d, 1H, CONH); 7,16-7,21 (m, 1H, N-C-CHCH); 7,65-7,77 (m, 2H, N-CH-CH-CH); 7,19-7,93 (m, 4H, фенилен); 8,63-8,69 (m, 1H, N-CH);
N-трет.-бутоксикарбонил-4- (2-пиразинил)-L-фенилаланин метилов естер
Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm) :1,40 [s, 9H, C(CH3)]; 3,02 (m, 2H, CH2-CH); 3,70 (s, 3H, COOCH3); 4,53-4,70 (m, 1H, CH-COO); 5,03 (bd, 1H, NH); 7,21-7,98 (m, 4H, фенилен); 8,49 и 8,26 [2(bs, 2H, N-CH-CH-N)]; 9,0 (s, 1H, CHN-CH-CH);
М-трет.-бутоксикарбонил-4- (2-тиенил) -Lфенилаланин метилов естер
Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm):l,41 [s, 9H, C(CHj)]; 2,98-3,18 (m, 2H, CH,); 3,71 (s, 3H, COOCH3); 4,53-4,64 (m, 1H, CH-COO); 4,98 (bd, 1H, NH); 7,02-7,28 (m, ЗН, тиенил); 7,107,54 (m, 4H, фенилен).
Пример 4. Получаване на метилов естер на
4-(3-пиридил)-L-фенилаланин дихидрохлорид
Тионилхлорид (0,85 ml, 4,78 mmol) се прибавя на капки към разтвор на метилов естер на Nтрет.-бутоксикарбонил-4-(3-пиридил)-1лфенилаланин (1,4 g, 3,93 mmol) в метанол (30 ml), получен както е описано в пример 3, при температура 0°С. В края на прибавянето реакционната смес се темперира до стайна температура и се разбърква при тази температура 8 h. Разтворителят се изпарява под вакуума и се получава метилов естер на 4- (3пиридил) -L-фенилаланин дихидрохлорид (820 mg, 71 % добив), който се използва в следващите реакции.
ХЙ МС: (М+Н)*«257 (свободна база)
Н-ЯМР (200 MHz, D2O): δ (pmm): 3,11-
3.32 (m, 2H, CH2); 3,67 (s, 3H, CH3); 4,31-4,37 (m, 1H, CH); 7,30-7,63 (m, 4H, фенилен); 7,97 (dd, 1H, CH-N-CH-CH-CH); 8,59 (d, 1H, CH-NCH-CH-CH); 8,65-8,71 (m, IH, CH-N-CH-CH);
8,89 (d, 1H, CH-N-CH-CH-CH).
По аналогичен начин се получават следните съединения:
4-(2-пиридил)-L-фенилаланин метилов естер дихидрохлорид
ХЙ МС: (М+Н)*“257 (свободна база)
Н-ЯМР (200 MHz, D2O): δ (pmm): 3,12-
3.33 (m, 2H, CH2); 3,64 (s, 3H, CH3); 4,30-4,37 (m, 1H, CH); 7,36-7,73 (m, 4H, фенилен); 7,78-
8,58 (m, 4H, пиридил);
4- (5-пиримидинил) -L-фенилаланин етилов естер дихидрохлорид
Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-d6): δ (pmm):
1,11 (t, ЗН, CH2-CH); 3,10-3,35 (m, 2H, CH2-CH); 4,04-4,20 (m, 2Н, СН2-СН3); 4,22-4,35 (m, 1Н, СН); 7,40-7,84 (m, 4Н, фенилен); 9,15 (s, 2Н, NCH-C-CH-N), 9,19 (s, 1Н, N-CH-N);
4-(2-пиразинил)-L-фенилаланин метилов естер дихидрохлорид
ХЙ МС: (М+Н)^258 (свободна база)
Н-ЯМР (200 MHz, DC1 IN): δ (pmm): 3,453,67 (m, 2H, CHj); 3,98 (s, 3H, CH3); 4,65-4,72 (m, 1H, CH); 7,68-8,26 (m, 4H, фенилен); 9,02 (d, 1H, CH-N-CH-CH); 9,44 (dd, 1H, CH-N-CHCH); 9,54 (d, 1H, CH-N-CH-CH);
4-(2-тиенил)-Егфенилаланин метилов естер хидрохлорид
ХЙ МС: (M+H) V262 (свободна база) ‘Н-ЯМР (200 MHz, D2O): δ (pmm): 2,983,19 (m, 2H, CH2); 3,65 (s, 3H, CH3); 4,21-4,28 (m, 1H, CH); 6,96-7,28 (m, ЗН, тиенил); 7,08-
7,52 (4H, фенилен);
4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин метилов естер дихидрохлорид
Н-ЯМР (200 MHz, DjO): δ (ршш): 3,103,32 (m, 2Н, СН2-СН); 3,68 (s, ЗН, СН3); 4,30-
4,38 (m, 1Н, СН); 7,30-7,80 (m, 4Н, фенилен); 7,70-7,91 (ш, 4Н, тиазолил).
Пример 5. Получаване на 2-изобутил-З-фенилкарбонилтио-пропионова киселина
Смес на 2-изобутил-акрилова киселина (6,34 g, 49 mmol) и тиобензоена киселина (5,96 ml, 51 mmol) се нагрява 2 h при 100°С и разбъркване. Към реакционната смес се прибавя петролев етер 40-60°С (100 ml) и се охлажда до -70°С и баня от сух лед/ацетон. След филтруване и промиване с петролев етер при -70®С остатъкът се суши при намалено налягане. Получава се твърд 2-изобутил-
3-фенилкарбонилтио-пропионова киселина (11,12 g, 82% добив).
Ή-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 0,901,00 (ш, 6H); 1,40-1,90 (m, ЗН); 2,70-2,90 (m, 5
1Н); 3,10-3,40 (m, 2H); 7,35-7,32 (m, 3H); 7,908,00 (d, 2H).
По аналогичен начин се получават следните съединения:
2- (3-метоксифенил)метил-3-фенилкарбо- 10 нилтио-пропионова киселина •Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 2,32 (s, ЗН); 2,80-3,15 (m, 5H); 3,77 (s, 3H), 6,70-
6,80 (m, 3H); 7,14-7,25 (m, 1H).
3- ацетилтио-2-(2-флуорофенил)метил-про- 15 пионова киселина
Ή-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 2,31 (s, 3H); 2,90-3,20 (m, 5H); 6,95-7,30 (m, 4H).
З-фенилкарбонилтио-2- (2-тиенил) метилпропионова киселина бензиламинова сол 20 •Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): δ (pmm): 2,45-3,25 (m, 5H, S-CH2-CH-CH2); 3,90 (s, 2H, CHj-фенил); 6,85-7,91 (m, 13H, арил).
Пример 6. Получаване на метилов естер на №[(25)-3-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпро- 25 пионил]-4-(2-тиазолил)-Ь-фенилаланин (съединение 1)
Разтвор на хидроксибензотриазол (0,54 g, 4 mmol) в тетрахидрофуран (30 ml), последвано от разтвор на дициклохексилкарбодиимид (0,825 g, 30 4 mmol) в метиленхлорид (15 ml), се прибавят при 0°С и разбъркване към смес на (2S) -3-фенилкарбонилтио-2-фенилметил-пропионова киселина (1,2 g, 4 mmol), 4-(2-тиазолил)-Ь-фенилаланин метилов естер дихидрохлорид (1,34 g, 4 mmol), получен 35 както е описано в пример 4, триетиламин (1,11 ml, mmol) в тетрахидрофуран (20 ml) и метиленхлорид (30 ml).
Реакционната смес се оставя 20 h при разбъркване, след което се филтрува дициклохексил карбамидът и разтворителят се изпарява при намалено налягане. Към остатъка се прибавя ети л-ацетат и разтворът се промива с 20% воден разтвор на натриев хлорид, 5% натриев бикарбонат и отново 20% натриев хлорид.
След отделяне на фазите и изпаряване на органичната фаза полученото бяло твърдо вещест во се пречиства с флашхроматография [силика гел, елуент етилацетат:хексан (40:60); налягане на азот 0,1 atm]. По този начин се получава N[ (2S) -З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил]-4-(2-тиазолил)-Ь-фенил аланин метилестер (1,5 g).
Т.т. 98-100°С.
ХЙ МС: (М+Н)4=545 •Н-ЯМР (200 MHz, CDClj): δ (pmm): 2,63-
3,35 (m, 7H, CHj-CH-CHj, СН2-С6Н4-тиазолил);
3,68 (s, 3H, COOCH3); 4,75-4,85 (m, 1H, CHCOO); 5,78 (d, 1H, NH); 7,10-8,00 (m, 16H, арил).
По аналогичен начин с изходни съедине ния, познати или получени в примери 4 и 5, са получени следните съединения:
N- [ (2S) -З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил] -4-(2-фурил) -L-фенилаланин метилови естер (съединение 2).
Т.т. 132-134°С.
ХЙ МС: (М+Н)=528.
•Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 2,60-
3,35 (m, 7H, CHj-CH-CHj, СН2-С6Н4-фурил); 3,58 (s, 3H, COOCH3); 4,71-4,81 (m, 1H, CH-COO);
5,73 (d, 1H, NH); 6,40-8,00 (m, 17H, арил).
Н-Г(28)-3-Фенилкарбонилтио-2-Фенилметилпропионил1-4-( 5пиримидинилУЬ-Фснилаланин етилов естер (съединение 3,)
Т.т. 117-119°С
ХЙ МС: (М+Н)+=554
Ή-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pram): 1.18 (t, ЗН, СНз-СН2); 2.65-335 (m, 7H, CH2-CH-CH2, СНг-СЛ-пиримидинил); 3.95-4.20 (m, 2H, COOCHj); 4.70-4.80 (m, 1H, CH-COO); 5.78 (d, 1H, NH); 7.05-8.00 (m, 14H, фенил, фенилен); 8.68 (s, 2H, CH-N-CH-N-CH); 9.11 (s, 1H, N-CHN).
М-Г(25УЗ-<Ьенилкарбонилтио-2-<Ьенилметилпропианил]-4-(2пиразинилУЬ-фенилаланин метилов естер (съединение 4)
Т.т. 145-147°С
ХЙМС: (М+Н)+=540 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 2.65-3.35 (m, 7H, CHyCH-CHa, СНг-СбНц-пиразинил); 3.61(s, 3H, COOCH3); 4.75-4.85 (m, 1H, CHCOO); 5.78 (d, 1H, NH); 7.10-8.00 (m, 14H, фенил, фенилен); 8.48-8.75 (m, ЗН, CH-N-CH-CH-N);
И-Г(28)-3-Фенилкарбонилпю-2-Фенилметилпропионил1-4-(3пиридилУ L-Фснилалаяин метилов естер (съединение 5.)
Т. т. 132-134°С
ХЙ МС: (М+Н)+=539 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 2.66-2.79 (m, 1H, CHyCH-CH2);
2.88-3.35 (m, 6H, CH2-CH-CH2, СНуСЛ-пиридал); 3.61 (s, 3H, COOCH3); 4.75-4.85 (m, 1H, CH-COO); 5.77 (d, 1H, NH); 7.09-7.99 (m, 16H, CH-CH-CH-N, фенил, фенилен); 8.51-8.64 (m, 2H, CH-N-CH); Н-Г(28>3-Фенилкарбонил1ио-2-Фенилметилпропионил1-4-(2пиридилУ L-фенилаланин метилов естер (съединение 6)
Т. т. 123-125°С
ХЙМС: (М+Н)+=539 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 2.63-2.77 (m, 1H, СНуСН-СН2); 2.85-3.35 (m, 6H, CHyCH-CHj, СНуСЛ-пиридил); 3.56 (s, 3H, COOCH3); 4.75-4.85 (m, 1H, CH-COO); 5.75 (d, 1H, NH); 7.09-7.99 (m, 16H, CH-CH-CH-N, фенил, фенилен); 8.61-8.65 (m, 1H, N-CH-CH); И-Г(28>Фенилкарбонилтио-2-Фенилметилпропионил1-4-(2-таенил>-ЬФенилаланин метилов естер (съединение 7.)
ХЙ МС: (М+Н)+=544 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 2.64-3.36 (m, 7H, СНуСН-СНг, CONH-CH-СНг); 3.58 (s, ЗН, COOCH3); 4.74-4.83 (m, 1Н, CH-COO);
5.74 (d, 1H, NH); 6.97-7.99 (m, 17H, арил);
Н-Г(28)-Фенилкарбонилто-2-Фенилметилпропионил1-4-(3-тиенил)-ЬФенилаланин метилов естер (съединение 83
ХЙМС: (М+Н)+=544 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 2.63-3.35 (m, 7H, СНуСН-СНз, NH-СН-СНз); 3.58 (s, ЗН, COOCH3); 4.73-4.85 (m, 1H, CH-COO); 5.705.76 (d, 1H, NH); 7.00-7.62 (m, 15H, фенил, фенилен, CH-CH-S); 7.938.00 (m, 2H, CH-S-CH);
Н-Г(28)-3-Фенилкарбонил1ио-2-Фенилметил)пропионил1-443-фурил>· L-Фенилаланин метилов естер (съединение 9.)
Т.т. 115-117°С
ХЙ МС: (М+Н)+=528 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 2.62-3.36 (m, 7H, СНгСН-СЩ NH-СН-СНз); 3.58 (s, ЗН, COOCH3); 4.7М.82 (m, 1Н, CH-COO); 5.72 (bd, 1H, NH); 6.50-8.00 (m, 17H, арил);
Н-[3-Фснилкарбонилгио-2-пиридилметил)пропионил1-4-(2-тиазолил)L-Фенилаланин метилов естер - стереоизомер А (съединение 10.) ХЙ МС: (М+Н)+=546
ТСХ: етилацетатпетролев етер (95:5), Rf=0.33 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 2.60-3.38 (m, 7H, СНуСН-СНг, NH-CH-CHj); 3.60 (s, ЗН, COOCH3); 4.79-4.90 (m, 1H, CH-COO); 621 (d, 1H, NH); 729-7.81 (m, 2H, тиазолил); 6.75-8.48 (m, 13H, фенил, фенилен, пирвдил);
Н-ГЗ-Фенилкарбоиилтио-2-(3-пирилилметил)тх>пионил1-4Ч2тиазолилУЬ-Фенилаланин метилов естер - стереоизомер В (съединение 11)
ХЙ МС: (М+Н)+=546
ТСХ: етилацетатгпетролев етер (95:5), Rr=024 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 2.61-325 (m, 7H, CHyCH-CHj, NH-CH-Cbb); 3.60 (s, ЗН, COOCH3); 4.80-4.91 (m, 1H, CH-COO); 6.09 (bd, 1H, NH); 7.27-7.80 (m, 2H, таазолил), 7.10-8.40 (m, 13H, фенил, фенилен, пиридил);
^Г2-изобугил-3-фенилкарбонилтио-пропионил]-4-(2--тиазолил)-ЬФснилаланин метилов естер (съединение 12) ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 0.80-0.95 (m, 6H), 130-1.80 (m, ЗН), 2.40-2.60 (m, 1Щ 3.00-330 (m, 4H), 3.70 (d, ЗН), 4.90-5.05 (m, 1H), 6.0-6.15 (bt, 1H), 7.10-8.0 (m, 11H>, Х-ГЗ-ацетилтио-2-(3-метокси(Ьенил)метил-пропионил1-4-(2-тиазолил)L-Фенилаланин метилов естер (съединение 13.) ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3); δ (pmm): 230 (d, ЗН), 2.45-320 (m, 7H),
3.63 (d, 3H\ 3.75 (d, 3HX 4.70-4.93 (m, 1H), 5.70-5.90 (dd, 1H), 6.60-6.85 (m, 4H\ 7.17-7.32 (m, 3H), 7.68-7.90 (m, 3H);
Н-(3-ацеггилгио-2-(3-ФлуороФенил^1етил-пропионил1-4-(2-тиазолил)L-фенилаланин метилов естер (съединение 14) ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 2.29 (s, ЗН), 2.55-320 (m, 7H),
3.65 (2s, ЗН), 4.70-4.90 (m, 1H), 5.80-6.00 (2d, 1H), 6.70-732 (m, 3H); Н-[3-Фенилкарбонилгио-2-(2-тиенил)метил-пропионил1-4-(2тиазолилУ-Ь-Фенилаланин метилов естер (съединение 15) 'Н-ЯМР (200 MHz, CDCb): δ (pmm): 2.68-3.37 (m, 7H), 3.60-3.61 (2s, ЗН, СООСНз), 4.31-4.45 (m, 1Н, CH-COOCH3), 6.01-6.10 (2d, 1H, NH), 6.80-8.00 (m, 14H);
Пример 7. Получаване на N-[(2S)-3-Mepкапто-2-фенилметилпропионил] -4- (2-тиазолил) L-фенилаланин (съединение 16).
N- [ (2S) -З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин метилов естер (1,4 g, 2,57 mmol), получен както е описано в пример 6, се суспендира в етанол (30 ml), дегазиран чрез барботиране на азот за отстраняване на кислорода.
Към суспензията при 5“С се прибавя на капки воден дегазиран разтвор на натриева основа IN (7,7 ml), а в края на прибавянето още дегазиран етанол (20 ml).
Реакционната смес се оставя при разбъркване 4 h при стайна температура, след което се охлажда до 0°С и се подкислява с 5% солна киселина (10 ml).
Реакционната смес се изпарява до сухо, добавя се ацетонитрил и вода и след филтруване се получава 1Ч-[(28)-3-меркапто-2-фенилметилпропионил]-4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин (1 g).
Т.т. 180-182°С.
ХЙ МС: (М+Н)4-427.
Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-d6): δ (pmm): 1,80-188 (m, 1H, SH), 2,22-2,84 (m, 5H, CH2-CHCH2), 2,86-3,18 (m, 2H, CH^CH-COO); 4,46-4,57 (m, 1H, CH-COO), 7,10-7,25 (m, 5H, фенил), 7,32-7,84 (m, 4H, фенилен), 7,74 (d, 1H, NCH-CH-S), 7,89 (d, 1H, N-CH-CH-S), 8,35 (d, 1H, NH), 12,76 (s, 1H, COOH);
По същия начин се получават следните съединения:
N- [2R) -З-меркапто-2-фнилметилпропионил] -
4-(2-тиазолил)-L-фенилаланин (съединение 17).
‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-d«): δ (pmm): 2.15-223 (m, 1H, SH), 2.31-
2.74 (m, 5H, CHrCH-CH2), 2.78-3.07 (m, 2H, CHr-CH-COO); 4.424.53 (m, 1H, CH-COO), 7. 02-7.80 (m, 9H, фенил, фенилен), 7.75 (d, 1H, NCH=CH-S), 7.90 (d, 1H, N-CH=CH-S), 8.36 (d, 1H, NH);
Н-Г(28УЗ-меркапто-2-Фенилметилпгюпионил14-(2-<Ьурил>-ЬФенилаланин (съединение 18)
Т.т. 153-155°С
ХЙМС: (М+Н)+=410 ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDCh): δ (pmm): 1.40 (t, 1H, SH), 2.45-325 (m, 7H, CH2-CH-CH2, CHj-CH-COO), 4.804.90 (m, 1H, CH-COO), 5.86 (d, 1H, NH), 6.42-7.42 (m, ЗН, фурил), 7 07-7.57 (m, 9H, фенил, фенилен); Х-Г(25>3-меркапто-2-фенилмети.Ш1ропионил14-(5-пиримидинилl-Lфенилаланин (съединение 19)
Т.т. 193-195°С
ХЙМС: (М+Н)+=422 ‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): δ (pram): 1.81 (bm, 1H, SH), 221-320 (m, 7H, СНз-СН-СНг, СНуСе^-пиримидинил), 4.46-4.57 (m, 1H, CHCOO), 7.06-729 (m, 5H, фенил), 7.36-7.72 (m, 4Ц фенилен), 8.33 (d; 1H, NHCO), 9.08 (s, 2H, N-CH-C-CH-N), 9.15 (s, 1H, N-CH-N);
М-[(25>3-меркапто-2-Феннлметилпропионил1-4-(2-пиразинил)-ЕФенилаланин (съединение 20.)
Т.т. 176-178°С
ХЙ МС: (М+Н)+=422 ‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): δ (pmm): 1.84 (bt, 1H, SH), 221-3.21 (m, 7H, СНз-СН-СНь СНз-СН-СОО), 4.48-4.59 (m, 1H, CH-COO), 7.10-726 (m, 5H, фенил), 7.37-8.05 (m, 4H, фенилен), 8.37 (d, 1H, NHCO), 8.58 (d, 1H, CH-N-CH-CH-N), 8.68-8.70 (m, 1H, CH-N-CH-CH-N), 921 (d, 1H, C-CH-N), 12.78 (b, 1H, COOH>,
Н-Г(25УЗ-меп1саггго-2-Фенилметилпгюпионил1-4-(3-пиридил)-ЬФенилаланин (съединение 21)
Т.т. 146-148°С
ХЙ МС: (М+Н)+=421
Ή-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): δ (pmm): 1.69-1.89 (Ь, 1H, SH), 222-3.18 (m, 7H, CHrCH-CHa, СНуфенилен), 4.45-4.56 (m, 1H, CH-COO), 7.09726 (m, 5H, фенил), 7 42-7.48 (m, 1H, CH-N-CH-CH-CH), 7.62-7.33 (m, 4H, фенилен) 7.98-8.04 (m, 1H, CH-N-CH-CH-CH), 8.30 (d, 1H, CONH),
8.53 (dd,lH, CH-N-CH-CH-CH), 8.83 (d, 1H, CH-N-CH-CH-CH); Н-И25УЗ-меркапто-2-Фенилметилпропионил1-4-(2-пиридил)-ЬФенилаланин (съединение 22)
Т.т. 157-159°С
ХЙ МС: (М+Н)+=421 ‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): δ (pmm): 1.87 (b, 1H, SH), 223-3.19 (m, 7H, CHyCH-CHa, CONH-CH-CHa), 4.44-4.45 (m, 1H, CH-COO), 7 09-
7.93 (m, 8H, N-CH-CH-CH-CH, фенил) 7.30-7.99 (m, 4H, фенилен), 829 (d, 1H, CONH), 8.61-8.65 (m, 1H, C-N-CH);
Н-Г(28УЗ-меокапго-2-Фенилмегилпропионил1-4-(2-таенил)-ЬФенилаланин (съединение 23)
Т.т. 152-154°С ‘Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 1.34-1.43 (m, 1H, SH), 2.44-326 (m, 7H, S-CH2-CH-CH2, CONH-CH-CHz), 4.80-4.89 (m, 1H, NH-CHCOO), 5.81 (d, 1H, NH), 7 02-7.52 (m, 12H, арил);
Н-Г(28)-меркапто-2-Фенилметилпропионил1-4-(3-тиенил~)-ЬФениладанин (съединение 24)
Т.т. 169-171°С
ХЙ МС: (М+Н)М26
ТСХ: етилацетат:хексан:оцетна киселина (50:50:5), Rf=0.44 ’Н-ЯМР (200 MHz, CDCI3): δ (pmm): 1.84 (bs, 1H, SH), 223-3.13 (m; 7H, S-CH2-CH-CH2, NH-CH-CHz), 4.42-4.53 (m, 1H, NH-CH-COO): 7.12-7.80 (m, 12H, арил); 830 (d, 1H, J=82, NH);
Н-И28')-меркапто-2-Фенилметалтхишонил1-4-(3-фурил)-ЬФенилаланин (съединение 25)
Т.т. 140-142°С
ХЙ МС: (М+Н)+=410
ТСХ: етелацстат:хексан:оцетна киселина (50:50:5), RfO.42 ’Н-ЯМР (200 MHz, CDC13): δ (pmm): 1.79-1.90 (m, 1H, SH), 222-3.11 (m, 7H, S-CHz-CH-CHz, NH-CH-CHz), 4.4M.53 (m, 1H, NH-CH-COO);
7.11-7.50 (m, 9H, фенил, фенилен); 6.91-8.12 (m, ЗН, фурил), 830 (d, 1H,J=82, NH);
Н-ГЗ-меркапто-2-(3-пиридилметял)пропионил1-4-(2-тиазолил)-ЬФенилаланин - стетеоизомср А_(съединение 26)
Т.т. 193-196°С
ХЙ МС: (М+Н)+=428
ТСХ: метиленхлорид:метанол:оцетаа киселина (85:15:1.5), Rr=0.53
Ή-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): δ (pmm): 237-3.05 (m, 7H, S-CHz-CHCHz, NH-CH-CHz), 4.36-4.47 (m, 1H, NH-CH-COO); 7.76-7.90 (m, 2H, тиазолил); 7.10-833 (m, 9H, NH, пиридил, фенилен);
К-ГЗ-меркапто-2-СЗ-пирилилметил)пропионил1-4-(2-тиазолил)-ЬФенилаланин - стеоеоизомср В (съединение 27J
ХЙ МС: (М+Н)+=428
ТСХ: метиленхж)рид:метанол:оцетна киселина (85:15:1.5), Rr*0.47 Ή-ЯМР (200 MHz, DMSOdi): δ (pmm): 2.28-320 (m, 7H, S-CHz-CHCHj, NH-CH-CHz), 420-435 (m, 1H, NH-CH-COO); 7.70-7.90 (m, 2H, тиазолил); 7.17-8.40 (d, 9H, NH, пиридил, фенилен);
И-(2-изобушл-3-меркапто-про1шонилМ-(2-тиазолил)-Ь-Фенилаланин (съединение 28) ‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): 8 (pmm): 0.50-1.44 (m, 9H), 1.68-225 (m, 4H), 2.79-322 (m, 2H), 4.50-4.63 (m, 1H), 7.34-7.85 (m, 4H); 7.73-
7.90 (m, 2H), 827-8.39 (2d, 1H);
ХЙ MC: (M+H)+=393
И43-мерка1гго-2-(3-метокси(Ьенил)метил-пропионил1-4-(2-тиазолил)L-Фенилаланин (съединение 29)
ХЙМС: (M+H)+=457 *Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-dtf+DjO): δ (pmm): 2.20-321 (m, 7H), 3.70 (m, ЗН), 4.48 (m, 1H); 6.55-6.86 (m, 3H); 7.00-7.40 (m, 3H), 7.65-7.95 (m, 4HX 8.27-8.45 (bt, CONH);
Н-13-мепкапто-2-(2-ФлуороФенил')метил-пгх>11ионил1-4-(2-тиазплилУЬФенилаланин (съединение 30.)
ХЙМС: (М+Н)+=445 ‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-di): δ (pmm): 2.20-3.18 (m, 8H), 4.35-4.55 (m, 1H); 6.85-735 (m, 6H); 7.65-7.90 (m, 4H), 835 (d, 1H); Н-ГЗ-меркалто-242-та«1ил)метид-11Ропионил1-4-(2-таачплил)-ЬФенилаланин (съединение 31) ‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSOde): δ (pmm): 1.82-3.19 (m, 8H, CHrCHr CHj, NH-СН-СНз), 4.444.59 (m, 1H, CH-COO); 6.62-7.91 (m, 9H, арил),
8.42 (d, 1H, NH);
Н-13-мерканто-242-Фурил)метал-тх>пионил1442-тиазолил)-ЬФенилаланин (съединение 32) ‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): δ (pmm): 1.79-3.18 (m, 8H, S-CH2-CHr CHj, NH-CH-CHa), 4.434.58 (m, 4H, CH-NH); 5.79-7.47 (m, 3H, фурил), 7.30-7.85 (m, 4H, фенилен), 7.73-7.91 (m, 2H, тиазолил), 8.40-
8.46 (2d, ΙΗ,ΝΗ);
Н-[3-меркапто-2-(3-метил-5-изоксазолил)метил-пропионил14-(2тиазолилУЬ-Фенилаланин (съединение 33) ‘Н-ЯМР (200 MHz, DMSO-de): δ (pmm): 2.00-2.12 (2s, ЗН, СНзизоксазолил), 228-3.19 (m, 8Н, Б-СНа-СНг-СНг, СНг-фенилен), 4.434.59 (m, 1Н, CH-NH); 5.75-6.03 (2s, 1H, изоксазолил), 729-7.86 (m, 4H, фенилен), 7.74-7.90 (m, 2H, тиазолил), 8.46-8.53 (2d, 1H, NH);
Пример 8. In vitro определяне на фармакологичната активност чени както е описано от Т. Maeda et al. Biochem. Acta 1983, 731(1), 115-120.
а) НЕП-инхибиторна активност
НЕП-инхибиторната активност е определена в мембрани на бъбречна кора на плъхове, полуОтделените бъбреци от Sprague-Dawley мъжки плъхове с тегло около 300 g се съхраняват при 4°С.
Внимателно се извършва дисекция на бъбречната кора, която се нарязва на ситно и се суспендира в хомогенизиращ буфер (10 тМ натриев фосфат pH 7,4, съдържащ 1 mM MgCl2, 30 mM NaCl, 0,02% NaN2) 1:15 тегло/обем.
Тъканта се хомогенизира на студено 30 s в Ultra-Turrax хомогенизатор. Приблизително 10 ml хомогенизат се прехвърля върху 10 ml захароза (41 % тегло/обем) и се центрофугира 30 min при температура 4°С и 31200 об. при фиксиран ъгъл на ротора. Мембраните се събират от повърхността на буфер/захарозата, промиват се два пъти с 50 mM TRIS/HCI буфер (pH 7,4) и се ресуспендират в същия буфер за съхранение като малки аликвоти при -80°С до употреба.
Инхибиторната активност е определена по метода, описан от С. Llorens и сътр. в Eur. J. Pharmacol. 69, (1981), 113-116.
Аликвоти на мембранната суспензия, получени, както е описано по-горе (концентрация на протеин 5 pg/ml), се инкубират предварително в присъствие на инхибитор аминопептидаза (Bestatin1 mM) 10 min при 30®С.
Прибавя се [3Н] [Leu5] -енкефалин (15 пМ) и буфер TRIS/HCI pH 7,4 (50 тМ) до получаване на краен обем 100 μΐ.
Инкубирането се прекратява (20 mln при 30°С) с прибавяне на НС1 0,1 М (100 μΐ).
Образуването на метаболита [3Н] Tyr-GlyGly се определя количествено с хроматография върху колони с полистирол Porapak Q).
Инхибирането в проценти на образуването на метаболит в мембранните препарати, третирани със съединенията с формула 1 и сравнителните стандарти по отношение на нетретираните мембранни препарати, е изразено като ICj0 (пМ).
б) АПЕ-инхибиторна активност
АПЕ-инхибиторната активност е определе5 на по метода, съобщен от В. Holmquist и сътр. в Analytical Biochemistry 95, 540-548 (1979). 50 μΐ ангиотензин, превръщащ ензим (250 mU/ml, пречистен от бял дроб на заек, ЕС 3.4.15.1 SIGMA), се инкубира предварително с 50 μΐ съединение с 10 формула I или стандартг или подобен ексципиент в кювети в термостат при 37°С.
Реакцията стартира след прибавяне на 0,8 тМ фурилакрилоилфенилаланилглицилглицин (FAPGG-SIGMA). Същевременно се измерва абсорбцията при 340 nm в продължение на 5 min с Beckman DU-50 спектрофотометър, снабден с програма за изчисляване на делта A/min и регресионните коефициенти на кинетичните криви на ензимите.
Инхибирането на ензима в проценти в препаратите, третирани със съединенията с формула I, или стандартите по отношение на нетретираните препарати е дадено като 1СМ (пМ).
В таблица 1 са посочени стойностите на 1СЯ (пМ) за АПЕ-инхибиторната активност и НЕП-инхибиторната активност за съединения 16, 18-25, 27-33 и стандартите тиорфан и каптоприл. Данните в таблица 1 показват, че съединенията с формула 1 от изобретението показват значителна смесена АПЕ/НЕП инхибиторна активност. Тази активност е сравнима с тази на каптоприл по отношение на АПЕ инхибиторната активност и повисока от тиорфан по отношение на НЕП инхибиторната активност.
Таблица 1.
АПЕ- и НЕП-инхибиторна активност, изразени като 1СЯ (пМ), за съединения 16, 18-25, 27-33 и тиорфан и каптоприл.
Съединение АПЕ-инхибигорна активност, 1С30(пМ), НЕП-инхибигорна активност ICJ0(nM),
16 32 1.8
18 1.8 1.8
19 1.9 1.8
20 1.5 2.5
21 1.7 2.6
22 1.8 2.0
23 1.6 0.6
24 2.5 1.3
25 2.4 1
27 9.1 17.3
28 5.8 1.8
29 4.6 9.0
30 10.7 112
31 8.6 12
32 8.6 4.0
33 7.9 4.5
тиорфан 99 18
каптоприл 4.6 неактивен
Пример 9. Ex vivo определяне на фармакологичната активност
а) НБП инхибиторна активност
Ex vivo НЕП инхибиторната активност е определена по мотод, съобщен от М. Orlowsky и сътр. в Biochemistry 1981, 20.4942-4950. Инхибиторната активност на съединенията с формула I е определена в бъбреците на плъхове с вродена хипертония 5 min след интравенозно инжектиране (0,6 и 21 pmol/kg) и 30 min, 60 min и 4 h след орално приложение (30 pmol/kg) на изследваните съединения.
След отстраняване на бъбреците на плъховете с вродена хипертония бъбречната тъкан се хомогенизира и инкубира 15 min при 37°С в присъствие на субстрата глутарил-аланин-аланин-фенил2-нафтиламид (ГААФ) и аминопептидаза М при pH 7,6.
Реакцията се прекратява с прибавяне на 10% водена разтвор на трихлороцетна киселина.
Освободеният 2-нафтиламин се определя като се прибавят фаст гарнет (0-аминоазотолуол, диазониевасол) (2 ml).
Скоростта на ензимната реакция се определя, като се измерва увеличението на оптичната плътност при 524 пМ (ODJ24) по отношение на стандарт, получен от комплекс на 2-нафтиламин и фаст гарнет.
НЕП инхибиторната активност на изследваните съединения се изразява като инхибиторна активност в проценти в бъбреци на плъхове с вродена хипертония.
б) АПЕ инхибиторна активност
Ex vivo АПЕ инхибиторната активност е оп20 ределена с помощта на радиометричен метод, описан от J. W. Ryan и сътр. в Biochem. J. (1977), 167, 501-504.
Инхибиторната активност на съединения с формула I е определена в бели дробове на плъхове с вродена хипертония 5 min след интравенозно инжектиране (0,6 и 21 pmol/kg) и 30 min, 60 min и 4 h след орално приложение (30 pmol/kg) на изследваните съединения.
След отстраняване на белите дробове на плъховете с вродена хипертония, белодробната тъкан се хомогенизира и инкубира 2 h при 37°С в присъствие на [3Н] Hyp-Gly-Gly като субстрат.
Реакцията се прекратява със солна киселина.
Освободената белязана хипурова киселина се екстрахира с етилацетат и измерва с течни сцинтилационна спектрометрия по конвенционални методи.
АПЕ инхибиторната активност на изследваните съединения се изразява като АПЕ-инхибиторна активност в проценти в бели дробове на плъхове с вродена хипертония.
На таблица 2 е даден пример за основна ензимна активност в проценти, получена в опити след интравенозно или орално приложение на съединение 16 и стандарти R-l, R-2, R-З и R-4.
Данните от таблица 2 потвърждават, че съединенията с формула I от изобретението имат значителна АПЕ/НЕП инхибиторна активност както при интравенозно, така и при орално приложение. Освен това ex vivo АПЕ/НЕП инхибиторната активност на съединенията с формула I е значително по-висока от тази на стандартите.
t
Таблица 2.
Ex vivo АПЕ инхибиране (%) и НЕП инхибиране (%) на съединение 16 и съединения R-l, R-2, R-З и R-4.
Съеди- нение Приложение АПЕ инхибиране (бели дробове) НЕП инхибиране (бъбреци)
5 минута 60 мицута 5 мицута 60 минута
16 Lv. (0.6 pmolea/kg) 15% 34%
16 Lv. (21 pmolo»/kg) 72% 49%
16 орално (30 pmolea/kg) 36% 39%
30 мицута 4 часа 30 минута 4 часа
16 орално (30 pmolea/kg) 60% 45% 55% 40%
R-1 орално (30 pmolea/kg) 25% 20% 5% неактивно
R-2 орално (30 pmotoa/kg) 30% 25% 30% неаюивно
R-3 орално (30 pmolea/kg) 25% 20% 10% 5%
R-4 орално (30 pmolca/kg) 25% 10% неактивно неактавно
Патентни претенции

Claims (10)

  1. Патентни претенции
    1. Съединение с формула *1
    I .
    R-CH2-CILCONH-CH-COOR2 (I) * I в която R е меркаптогрупа или R4COS група, превръщаща се в организма в меркаптогрупа; R, е права или разклонена С2-С4 алкилова група или арилова или арилалкилова група с 1 до 6 въглеродни атома в алкиловия заместител, като арил е фенил или 5- или 6-членен ароматен хетероцикъл с един два хетероатома от групата, включваща азот, кислород и сяра, евентуално заместен с един или повече заместители, същите или различни, избрани от групата, включваща халогенни атоми, хидроксигрупи, алкокси, алкил, алкилтио, алкилсулфонил или алкоксикарбонилни групи с 1 до 6 въглеродни атома в алкиловия заместител, С,-С3 алкилови групи, съдържащи един или повече флуорни атоми, карбоксигрупи, нитрогрупи, амино- или аминокарбонилни групи, ациламиногрупи, аминосулфонилни групи, моно- или ди-алкиламино или моно- или диалкиламинокарбонилни групи с 1 до 6 въглеродни атома в алкиловия заместител; Rj е водороден атом, права или разклонена С,-С4 алкилова или бензилова група; е фенилова група, заместена с 5- или 6-членен ароматен хетероцикъл с един или два хетероатома, избрани от групата, включваща азот, кислород и сяра, като фениловата или хетероциклени групи евентуално са заместени с един или повече заместители, същите или различни, както е посочено за Rp R4 е права или разклонена С,-С4 алкило25 ва група или фенилова група; въглеродните атоми, означени със звездичка, са стереогенни центрове; и фармацевтично приемливи соли.
  2. 2. Съединение с формула I съгласно претенция 1, като Из е фенилова група, заместена в
    30 позиция 4 с хетероциклена група.
  3. 3. Съединение с формула I съгласно претенция 2, като R, е арилалкилова група, евентуално заместена с един или повече заместители, същите или различни, избрани от групите, включващи ха-
    35 логенни атоми, хидрокси, алкил или алкоксигрупи.
  4. 4. Съединение с формула I съгласно претенция 3, като R, е фенилалкилова група, евентуално заместена с един или повече заместители, същите или различни, избрани от халогенни ато-
    40 ми, хидрокси, алкил или алкокси групи.
  5. 5. Съединение с формула I съгласно претенция 1 под формата на сол на алкален метал, избран от групата, включващ натрий, литий или калий.
  6. 6. Метод за получаване на съединение с фор45 мула I съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че включва реакция на съединение с формула г
    R-CEfrCH-COOH (П) в която R и R, имат посочените в претенция 1 значения, и производно на фенилаланин с формула
    J^N-CH-COORz (Ш)
    CHrRg като Rj и Rj имат посочените в претенция 1 значения.
  7. 7. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че съдържа терапевтично ефективно количество съединение с формула I съгласно претенция 1 в смес с носител за фармацевтично използване.
  8. 8. Фармацевтичен състав съгласно претенция 6, характеризиращ се с това, че е предназначен за лечение на кардиоваскуларни заболявания.
  9. 9. Използване на терапевтично ефективно количество от съединение съгласно претенция 1 за лечение на кардиоваскуларни заболявания.
  10. 10. Съединение, избрано от групата, включваща:
    N- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(2-тиазолил)-L-фенилаланин метилов естер;
    N- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(2-пиридил)-Ь-фенилаланин метилов естер;
    N- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил )-4-(3-пиридил)-L-фенилаланин бензилов естер;
    N- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(2-фурил)-Ь-фенилаланин метилов естер;
    N- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(5-пиримидинил)-L-фенилаланин етилов естер;
    N- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(2-пиразинил)-L-фенилаланин метилов естер;
    N- (З-фенилкарбонилтао-2-фенипметилпропионил)-4-(2-тиенил)-Ь-фенилаланин метилов естер;
    №(3-фенилкарбонилтио-2-фенилметалпропионил)-4-(3-1иенил)-Ьфенилаланин метилов естер;
    N- (З-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)-4-(3-фурил)-Ь-фенилаланин метилов естер;
    N- [3-фенилкарбонилтио-2-(3-пиридилметил) пропионил] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин метилов естер;
    N- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) -
    4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин;
    N - (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) -
    4- (2-пиридил) -L-фенилаланин;
    N - (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (3-пиридил) -L-фенилаланин;
    1Ч-(3-меркапто-2-фенилметилпропионил)4- (2-фурил) -L-фенилаланин;
    N- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (5-пиримидинил) -L-фенилаланин;
    N - (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (2-пиразинил) -L-фенилаланин;
    N- (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (2-тиенил) -L-фенилаланин;
    N - (З-меркапто-2-фенилметилпропионил) 4- (3-тиенил) -L-фенилаланин;
    Ь}-(3-меркапто-2-фенилметил)пропионил)4- (3-фурил) -L-фенилаланин;
    N- [З-меркапто-2- (3-пиридилметил) пропионил] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин;
    N- [З-ацетилтио-2- (3-метоксифенил) метил-пропионил] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин метилов естер;
    N- [3-ацетилтио-2-(2-флуорофенил)метилпропионил] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин метилов естер;
    N- [З-фенилкарбонилтио-2- (2-тиенил) метил-пропионил] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин метилов естер;
    N- [2- (2-фурил) метил-3-фенилкарбонилтио-пропионил ] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин метилов естер;
    N- [2- (3-метил-5-изоксазолил)метил-3-фенилкарбонилтио-пропионил] -4- (2-тиазолил) -Lфенилаланин метилов естер;
    N- [З-меркапто-2- (3-метоксифенил) метилпропионил] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин;
    N- [З-меркапто-2- (2-тиенил) метил-пропионил] -4- (2-тиазолил) -L-фенилаланин;
    N- [З-меркапто-2- (З-метил-5-изоксазолил) метил-пропионил] -4-(2-тиазолил) -L-фенилаланин;
    N- [2- (2-флуорофенил) метил-3-меркаптопропионил] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин;
    N- [2- (2-фурил) метил- 3-меркапто-пропионил ] -4- (2-тиазолил) -фенилаланин;
    и стереоизомерите (2S) или (2R).
BG102553A 1995-12-28 1998-06-18 Тиолни производни с металопептидазна инхибиторна активност BG63942B1 (bg)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT95MI002773A IT1277737B1 (it) 1995-12-28 1995-12-28 Derivati tiolici ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi
PCT/EP1996/005663 WO1997024342A1 (en) 1995-12-28 1996-12-17 Thiol derivatives with metallopeptidase inhibitory activity

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG102553A BG102553A (bg) 1999-04-30
BG63942B1 true BG63942B1 (bg) 2003-07-31

Family

ID=11372827

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG102553A BG63942B1 (bg) 1995-12-28 1998-06-18 Тиолни производни с металопептидазна инхибиторна активност

Country Status (31)

Country Link
EP (1) EP0877740B1 (bg)
JP (1) JP2000502687A (bg)
KR (1) KR19990076809A (bg)
CN (1) CN1071325C (bg)
AP (1) AP1186A (bg)
AR (1) AR004413A1 (bg)
AT (1) ATE292123T1 (bg)
AU (1) AU713156B2 (bg)
BG (1) BG63942B1 (bg)
BR (1) BR9612373A (bg)
CA (1) CA2241414A1 (bg)
CZ (1) CZ204698A3 (bg)
DE (1) DE69634543D1 (bg)
EA (1) EA000991B1 (bg)
EE (1) EE03766B1 (bg)
GE (1) GEP19991871B (bg)
HK (1) HK1018008A1 (bg)
IL (1) IL124915A (bg)
IS (1) IS1885B (bg)
IT (1) IT1277737B1 (bg)
NO (1) NO310914B1 (bg)
NZ (1) NZ325785A (bg)
OA (1) OA10704A (bg)
PL (1) PL188151B1 (bg)
RO (1) RO119882B1 (bg)
SK (1) SK282977B6 (bg)
TR (1) TR199801229T2 (bg)
UA (1) UA62923C2 (bg)
UY (1) UY24425A1 (bg)
WO (1) WO1997024342A1 (bg)
ZA (1) ZA9610891B (bg)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1289522B1 (it) 1996-12-24 1998-10-15 Zambon Spa Processo per la preparazione di eteroaril-fenilalanine
MY153569A (en) 1998-01-20 2015-02-27 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Inhibitors of ?4 mediated cell adhesion
US8168616B1 (en) 2000-11-17 2012-05-01 Novartis Ag Combination comprising a renin inhibitor and an angiotensin receptor inhibitor for hypertension
GB0203665D0 (en) * 2002-02-15 2002-04-03 Glaxo Group Ltd Process
MY140707A (en) 2002-02-28 2010-01-15 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Process for preparing a phenylalanine derivative and intermediates thereof
DE60336986D1 (de) 2002-03-05 2011-06-16 Sumitomo Chemical Co Verfahren zur herstellung von biarylverbindungen
WO2003104200A1 (en) * 2002-06-07 2003-12-18 Glaxo Group Limited N-mercaptoacyl phenyalanine derivatives, process for their preparation, and pharmaceutical compositions containing them
GB0213122D0 (en) * 2002-06-07 2002-07-17 Glaxo Group Ltd Compounds
US7045653B2 (en) 2002-12-23 2006-05-16 Pfizer, Inc. Pharmaceuticals
GB0327839D0 (en) 2003-12-01 2003-12-31 Novartis Ag Organic compounds
US20080161321A1 (en) 2004-03-17 2008-07-03 David Louis Feldman Use of Renin Inhibitors in Therapy
CA2757650C (en) 2009-04-03 2016-06-07 Statoil Asa Equipment and method for reinforcing a borehole of a well while drilling
KR20130028058A (ko) * 2010-02-03 2013-03-18 엠이에이치 어소시에이츠, 인코포레이티드 선택적 및 생활성 동배체로서의 다수 치환된 플루오로메탄류
TW201136582A (en) 2010-03-16 2011-11-01 Novartis Ag Improved pharmaceutical compositions of aliskiren and methods of delivery

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4401677A (en) * 1981-10-09 1983-08-30 E. R. Squibb & Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
FR2652087B1 (fr) * 1989-09-15 1993-10-15 Bioprojet Ste Civile Derives d'amino-acides, leur procede de preparation et leurs applications therapeutiques.
FR2682952B1 (fr) * 1991-10-25 1993-12-03 Institut Nal Sante Recherc Medic Nouveaux n-(mercaptoacyl) amino-acides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
IT1273455B (it) * 1995-01-27 1997-07-08 Zambon Spa Derivati tiolici ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi

Also Published As

Publication number Publication date
HK1018008A1 (en) 1999-12-10
AU713156B2 (en) 1999-11-25
CN1071325C (zh) 2001-09-19
EE9800192A (et) 1998-12-15
BG102553A (bg) 1999-04-30
NO982977D0 (no) 1998-06-26
IS1885B (is) 2003-08-15
CZ204698A3 (cs) 1998-11-11
TR199801229T2 (xx) 1998-09-21
ATE292123T1 (de) 2005-04-15
AP9801264A0 (en) 1998-06-30
IL124915A0 (en) 1999-01-26
IL124915A (en) 2001-10-31
DE69634543D1 (de) 2005-05-04
AR004413A1 (es) 1998-11-04
BR9612373A (pt) 1999-07-13
SK88998A3 (en) 1998-12-02
WO1997024342A1 (en) 1997-07-10
AU1301897A (en) 1997-07-28
EA199800544A1 (ru) 1999-02-25
NZ325785A (en) 1999-09-29
SK282977B6 (sk) 2003-01-09
UY24425A1 (es) 1997-01-09
NO982977L (no) 1998-08-27
PL327580A1 (en) 1998-12-21
ZA9610891B (en) 1997-06-27
CN1206411A (zh) 1999-01-27
EA000991B1 (ru) 2000-08-28
UA62923C2 (en) 2004-01-15
PL188151B1 (pl) 2004-12-31
GEP19991871B (en) 1999-12-06
NO310914B1 (no) 2001-09-17
AP1186A (en) 2003-07-07
RO119882B1 (ro) 2005-05-30
EP0877740B1 (en) 2005-03-30
OA10704A (en) 2002-11-28
KR19990076809A (ko) 1999-10-15
IT1277737B1 (it) 1997-11-12
IS4780A (is) 1998-06-22
ITMI952773A1 (it) 1997-06-28
JP2000502687A (ja) 2000-03-07
EP0877740A1 (en) 1998-11-18
EE03766B1 (et) 2002-06-17
CA2241414A1 (en) 1997-07-10
ITMI952773A0 (bg) 1995-12-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG63942B1 (bg) Тиолни производни с металопептидазна инхибиторна активност
WO2008053913A1 (fr) Dérivé de sulfonylurée capable d&#39;inhiber sélectivement mmp-13
SK15812000A3 (sk) Inhibítory enzýmu na premenu endotelínu
AU750048B2 (en) Certain heteroaryl substituted thiol inhibitors of endothelin-converting enzyme
EP0636621B1 (en) Beta-mercapto-propanamide derivatives useful in the treatment of cardiovascular diseases
US5994539A (en) Mercapto acyl aminoacid derivatives endowed with dual ACE-NEP inhibitory activity, useful in the treatment of cardiovascular diseases
AU707570B2 (en) Phosphonic acid derivatives with metallopeptidase inhibitory activity
AU713081B2 (en) Phosphinic acid derivatives with metallopeptidase inhibitory activity
EP0883612B1 (en) Thiol derivatives with metallopeptidase (ace/nep) inhibitory activity
JPH10512870A (ja) メタロペプチダーゼ阻害活性を有するチオール誘導体
EP0557303A1 (en) N- (2-THENOYLMERCAPTO-3-METHYLE) -BUTANOYLE] -HOMOCYSTEINE THIOLACTONE, A PROCESS FOR ITS PREPARATION AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING IT.
KR19990079267A (ko) 이소옥사졸(또는 이소옥사졸린) 구조를 갖는 파네실 전이효소억제제