SK15812000A3

SK15812000A3 - Inhibítory enzýmu na premenu endotelínu

Info

Publication number: SK15812000A3
Application number: SK1581-2000A
Authority: SK
Inventors: LOMBAERT Stphane DE; Cynthia Anne Fink; Fariborz Firooznia; Denton Wade Hoyer; Arco Yingcheu Jeng
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1998-04-23
Filing date: 1999-04-21
Publication date: 2001-03-12
Also published as: NO20005293D0; HUP0101640A2; CA2323691A1; BR9909805A; EP1073674A1; WO1999055726A1; JP2002513032A; HUP0101640A3; AU3819999A; ZA200004680B; PL343594A1; RU2000129510A; CN1297453A; NO20005293L; IL138246A0; ID26822A; KR20010034816A; JP4350306B2

Description

Predložený vynález sa týka zlúčenín všeobecného vzorca (I), ktorý je uvedený ďalej. 0 týchto zlúčeninách sa zistilo, že sú vhodné ako inhibítory enzýmu konvertujúceho endotelín (ECE) u cicavcov.

Doterajší stav techniky

Deriváty tiolu opísané podľa vynálezu inhibujú vznik endotelínu, znižujú hladiny endotelínu v plazme a tkanive a inhibujú biologický vplyv aktivity endotelínu u cicavcov.

Predložený vynález poskytuje spôsob inhibície ECE a spôsob liečenia a/alebo prevencie ochorení a stavov závislých od endotelínu, napríklad kardio- a cerebrovaskulárnych ochorení, ako je esenciálna hypertenzia, vazokonštrikcia, kongestívne srdcové zlyhanie, pľúcna hypertenzia, mozgová ischémia (mŕtvica), subarachnoideálne krvácanie, traumatická mozgová príhoda, akútne a chronické zlyhanie ľadvín, ateroskleróza, mozgový vazospazmus, hypertrofia ciev, restenóza, Raynaudova choroba, infarkt myokardu, obezita; tiež dýchacích ochorení, ako je bronchiálna astma; gastrointestinálnych ochorení, ako je zápalové črevné ochorenie, pankreatitída, eméza; tiež hyperplázia prostaty, migrény, diabetes mellitus (diabetické nefropatie), preeklampsie, glaukómu a odmietnutie transplantátu, ako pri transplantáciách aorty alebo pevných orgánov pri allo- alebo xenotransplantácii; a tiež poruchách erekcie; s použitím zlúčenín opísaných ďalej.

Predložený vynález je tiež zameraný na farmaceutické kompozície inhibujúce ECE a nové zlúčeniny opísané podľa vynálezu.

Niektoré zlúčeniny, pri ktorých sa zistilo nové použitie pri inhibícii ECE, sú opísané v U. S. patente 5 506 244 (ktorý je tu uvedený ako odkaz) ako inhibítory enzýmu konvertujúceho angiotenziu a inhibítory neutrálnej endopeptidázy. V tomto patente sú príklady uvedenej zlúčeniny všeobecného vzorca (II), kde Y je karboxylová skupina alebo esterifikovaná karboxylová skupina, R je 4-bifenylová skupina, 3-indolylová skupina alebo 5-hydroxy-3-indolylová skupina a R² je izopropylová skupina.

Podstata vynálezu

Predložený vynález sa týka inhibície enzýmu konvertujúceho endotelín s použitím tiolového derivátu všeobecného vzorca (I)

.R (CHJ ^z'm (I)

S-C-C-NH-C-CONH-CH-Y

R3

kde

R je bicyklická karbocyklická arylová skupina alebo bicyklická heterocyklická arylová skupina; alebo jej úplne alebo čiastočne nasýtená forma; alebo

R je monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná karbocyklickou arylovou skupinou alebo heterocyklickou arylovou skupinou; alebo

R je monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná cykloalkylovou skupinou; alebo

R je monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná azacykloalkylovou skupinou, ktorá je prípadne substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo acylovou skupinou; alebo

R je cykloalkylová skupina substituovaná cykloalkylovou skupinou alebo azacykloalkylovou skupinou;

R¹ je atóm vodíka alebo acylová skupina;

R² je atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, karbocyklická alebo heterocyklická arylová skupina, karbocyklická alebo hetero3 cyklická arylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, cykloalkylová skupina, cykloalkylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, biarylová skupina, biarylalkyíová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, (hydroxy, alkoxy alebo acyloxy)alkylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu a nižšiu alkylovú skupinu, alebo alkyl-(tio, sulfinyl alebo sulfonyl)alkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny;

R³ je atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina; alebo R² a R³spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, tvoria cykloalkylidénovú skupinu alebo cykloalkylidénovú skupinu kondenzovanú s benzoskupinou;

A spolu s atómom uhlíka, na ktorý je pripojená, tvorí kruh a je to trojčlenná až desaťčlenná cykloalkylidénová skupina alebo päťčlenná až desaťčlenná cykloalkenylidénová skupina, ktorá môže byť substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo arylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu alebo môže byť kondenzovaná k nasýtenému alebo nenasýtenému karbocyklickému päťčlennému až sedemčlennému kruhu; alebo A spolu s atómom uhlíka, na ktorý je pripojená, je päťčlenná až šesťčlenná oxacykloalkylidénová skupina, tiacykloalkylidénová skupina alebo azacykloalkylidénová skupina prípadne substituovaná nižšou alkylovou skupinou, acylovou skupinou alebo arylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu; alebo A spolu s atómom uhlíka, na ktorý je pripojená, je 2,2-norbornylidénová skupina;

m je nula alebo 1-3;

Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina alebo karboxylová skupina derivatizovaná vo forme farmaceutický prijateľného esteru;

disulfidových derivátov odvodených od uvedených zlúčenín, kde R¹ je atóm vodíka; alebo ich farmaceutický prijateľných solí; farmaceutických kompozícií obsahujúcich uvedené zlúčeniny; spôsobov prípravy uvedených zlúčenín; medziproduktov; a spôsobov liečenia ochorení cicavcov, ktoré sú citlivé na inhibíciu ECE pomocou podávania uvedených zlúčenín cicavcom, ktorí takúto liečbu potrebujú.

Farmaceutický prijateľnými estermi sú výhodne preliečivá vo forme esterových derivátov, ktoré je možné pomocou solvolýzy alebo za fyziologických podmienok previesť na voľné karboxylové kyseliny všeobecného vzorca (I).

Predložený vynález tiež zahŕňa všetky preliečivá, ktorými sú deriváty zlúčenín podľa vynálezu obsahujúce voľnú karboxylovú skupinu, sulfhydrylovú skupinu alebo hydroxylovú skupinu, keď uvedené preliečivá je možné previesť pomocou solvolýzy alebo za fyziologických podmienok na zlúčeniny s voľnou karboxylovou skupinou, sulfhydrylovou skupinou a/alebo hydroxylovou skupinou. Preliečivá sú napríklad estery voľných karboxylových kyselín a S-acyl a O-acylderiváty tiolov alebo alkoholov, kde acylová skupina má význam definovaný podľa vynálezu.

Farmaceutický prijateľnými preliečivami vo forme esterov karboxylových kyselín sú napríklad nižšie alkylestery, cykloalkylestery, nižšie alkenylestery, arylalkylestery obsahujúce nižšiu alkylovú skupinu, a-(alkanoyloxy)alkylestery obsahujúce nižšie alkylové skupiny, ako je pivaloyloxymetylester, a a-(alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl)alkylestery obsahujúce nižšiu alkoxyskupinu a nižšie alkylové skupiny.

Farmaceutický prijateľnými sólami sú soli odvodené od farmaceutický prijateľných zásad pre akékoľvek kyslé zlúčeniny podľa predloženého vynálezu, napríklad pre zlúčeniny, kde Y je karboxylová skupina. Takýmito sólami sú napríklad soli alkalických kovov (napríklad soli sodíka, draslíka), soli kovov alkalických zemín (napríklad soli horčíka, soli vápnika), amóniové soli (napríklad trometamínové soli).

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) majú v závislosti od povahy substituentov jeden alebo viac asymetrických atómov uhlíka. Predmetom podľa predloženého vynálezu sú tiež vznikajúce diastereoméry a optické antipódy. Výhodná je konfigurácia, kde má asymetrický atóm uhlíka so substituentom Y konfiguráciu S.

Ako inhibítory enzýmu konvertujúceho endotelín sú výhodné zlúčeniny všeobecného vzorca (II) s konfiguráciou S

R¹ CH₂ | O 0 J

R*S CH —C — NH C NH C—Y (II)

kde

R je benzotiofenylová skupina, naftylová skupina, benzofuranylová skupina, indolylová skupina alebo monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná monocyklickou karbocyklickou arylovou skupinou alebo monocyklickou heterocyklickou arylovou skupinou;

R¹ je atóm vodíka alebo karboxylom derivovaná acylová skupina;

R² je nižšia alkylová skupina, hydroxyalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, (alkyltio- alebo alkoxy-)alkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny a nižšiu alkoxyskupinu, karbocyklická alebo heterocyklická arylová skupina, karbocyklická alebo heterocyklická arylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, cykloalkylová skupina, cykloalkylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, alebo biarylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu; Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina alebo karboxylová skupina derivatizovaná vo forme farmaceutický prijateľného esteru;

n je 2-6, výhodne 2, 4 alebo 5;

disulfidové deriváty odvodené od uvedených zlúčenín, kde R¹ je atóm vodíka; alebo ich farmaceutický prijateľné soli.

Ďalej sú výhodné uvedené zlúčeniny všeobecného vzorca (II), kde R má význam definovaný skôr; R¹ je atóm vodíka, arylalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšia alkanoylová skupina, alkoxyalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu a nižšiu alkanoylovú skupinu, alebo heterocyklická alebo karbocyklické aroylová skupina; R² je alkylová skupina obsahujúca 2 až 4 atómy uhlíka prerušená atómom síry alebo atómom kyslíka, alkylová skupina obsahujúca 2 až 5 atómov uhlíka alebo cyklohexylová skupina; Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, karbocyklická alebo heterocyklická arylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alkoxyskupiny a nižšiu alkylovú skupinu; n je 2, 4 alebo 5; alebo ich farmaceutický prijateľné soli.

Ako inhibítory enzýmu konvertujúceho endotelín sú zvlášť výhodné zlúčeniny všeobecného vzorca (III) s konfiguráciou S

R² -..-'R

I 0 O , i n n

R¹ S-CH —C — NH C-NH

CH, (III)

a vzorca (Illa)

F?

R¹ S

CH —C-NH C'

2L

NH

CH, r

CI

I

H (Hla) kde

R je benzotiofenylová skupina, naftylová skupina, benzofuraΊ nylová skupina, indolylová skupina, alebo monocyklické karbocyklická arylová skupina substituovaná monocyklickou karbocyklickou arylovou skupinou alebo monocyklickou heterocyklickou arylovou skupinou;

R¹ je atóm vodíka, nižšia alkanoylová skupina, metoxyalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, benzoylová skupina alebo pyridylkarbonylová skupina;

R² je alkylová skupina obsahujúca 2 až 5 atómov uhlíka, cyklohexylová skupina alebo alkylová skupina obsahujúca 2 až 4 atómy uhlíka prerušená atómom kyslíka alebo atómom síry;

Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina, pyridylmetoxykarbonylová skupina, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alkoxyskupiny a nižšie alkylové skupiny;

alebo ich farmaceutický prijateľné soli.

Ďalšie uskutočnenie podľa predloženého vynálezu sa týka zlúčenín všeobecného vzorca (Illb) s konfiguráciou S

F?

I o

CH —C

CH,

O

R'S-CH —C-NH C-NH-C-Y

I

H

V

Illb) kde

R je benzotiofenylová skupina, naftylová skupina, benzofuranylová skupina, indolylová skupina alebo monokarbocyklická arylová skupina substituovaná monocyklickou karbocyklickou arylovou skupinou alebo monocyklickou heterocyklickou arylovou skupinou;

W je skupina CH₂, atóm kyslíka, atóm síry alebo skupina NR⁴, kde R⁴ je atóm vodíka, acylová skupina, nižšia alkylová skupina alebo arylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu;

Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina, pyridylmetoxykarbonylová skupina, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonylalebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alkoxyskupiny a nižšie alkylové skupiny;

alebo ich farmaceutický prijateľných solí.

Ďalej sú výhodné zlúčeniny všeobecného vzorca (II), (III), (Hla) alebo (Illb) kde R je 4-bifenylylová skupina alebo 3-indolylová skupina; R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina; R² je alkylová skupina obsahujúca 3 až 5 atómov uhlíka, Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina, pyridylmetoxykarbonylová skupina, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alkoxyskupiny a nižšie alkylové skupiny; alebo ich farmaceutický prijateľné soli.

Zvlášť výhodné uskutočnenie sa týka zlúčenín akéhokoľvek skôr uvedeného všeobecného vzorca, kde R je 4-bifenylylová skupina; R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina; R² je n-propylová skupina, n-butylová skupina alebo izobutylová skupina; a Y je 5-tetrazolylová skupina alebo zvlášť výhodne karboxy9 lová skupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina; alebo ich farmaceutický prijateľných solí.

Zvláštne' uskutočnenie podľa predloženého vynálezu sa týka nových zlúčenín všeobecného vzorca (I), (II), (III), (Hla) a (Illb), kde (a) R je monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná cykloalkylovou skupinou;

(b) R je monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná azacykloalkylovou skupinou prípadne substituovanou na atóme dusíka nižšou alkylovou skupinou alebo acylovou skupinou;

(c) R je cykloalkylová skupina substituovaná cykloalkylovou skupinou;

a ďalšie symboly sú definované podľa predloženého vynálezu.

Ďalšie uskutočnenie podľa predloženého vynálezu sa týka zlúčenín všeobecného vzorca (I), (II), (III), (Hla) a (Illb), kde Y je 5-tetrazolylová skupina a ďalšie symboly sú definované podľa predloženého vynálezu.

Výhodné zlúčeniny podľa predloženého vynálezu zahŕňajú nové zlúčeniny všeobecného vzorca (III) alebo (Illb), kde Y je karboxylová skupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina; R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina; R² je nižšia alkylová skupina, nižšia alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, merkaptoskupinou, fenylovou skupinou, fenylovou skupinou substituovanou nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, atómom halogénu, trifluórmetylovou skupinou, ďalej fenylovou skupinou alebo naftylovou skupinou, keď každá táto skupina môže byť nesubstituovaná alebo môže byť nezávisle substituovaná nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, atómom halogénu alebo trifluórmetylovou skupinou, alebo je to cyklohexylová skupina; a R je 3-indolylová skupina, 4-(5-izoxazolyl)fenylová skupina, 4-(210 alebo 3-pyrolyl)fenylová skupina, 4-(2- alebo 3-furanyl)fenylová skupina, 4-(2- alebo 3-tienyl)fenylová skupina, 4-(2- alebo

3- pyridyl)fenylová skupina, piperid-3-yl-fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná na atóme dusíka nižšou alkanoylovou skupinou alebo je to 4-(5-pyrimidinyl)fenylová skupina, naftylová skupina, 5,6,7,8-tetrahydronaftalen-l-ylová skupina, 5,6,7,8—tetrahydronaftalen-2-ylová skupina alebo

4- cyklohexylfenylová skupina, alebo je to 4-bifenylylová skupina alebo 4-bifenylylová skupina substituovaná na jednom alebo obidvoch benzénových kruhoch nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, atómom halogénu alebo trifluórmetylovou skupinou; alebo ich farmaceutický prijateľné soli.

Medzi výhodné zlúčeniny podľa predloženého vynálezu inhibujúce enzým konvertujúci endotelin patria alternatívne nové zlúčeniny všeobecného vzorca (III), kde Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina; R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina; R² je n-propylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, metoxyetylová skupina alebo metyltioetylová skupina; a R je 3-indolylová skupina, 4-(5-izoxazolyl)fenylová skupina, 4—(2— alebo 3-furanyl)fenylová skupina, 4-(2- alebo 3-tienyl)fenylová skupina, 4-bifenylylová skupina, 4-(2- alebo 3-pyridyl)fenylová skupina, 4-(5-pyrimidinyl))fenylová skupina, alebo 4-bifenylylová skupina substituovaná na jednom alebo obidvoch benzénových kruhoch nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, atómom halogénu alebo trifluórmetylovou skupinou; alebo ich farmaceutický prijateľné soli.

Zvlášť výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca (III), kde (a) Y je karboxylová skupina, R¹ je atóm vodíka, R² je n-propylová skupina a R je 4-bifenylylová skupina, (b) Y je metoxykarbonylová skupina, R¹ je acetylová skupina, R² je n-propylová skupina a R je 4-bifenylylová skupina; a ich farmaceutický prijateľné soli, (c) Y je karboxylová skupina, R¹ je atóm vodíka, R² je izobutylová skupina a R je 3-indolylová skupina; a ich farmaceutický prijateľné soli.

(d) Y je metoxykarbonylová skupina, R² je izobutylová skupina a R je 3-indolylová skupina.

Ak nie je uvedené inak, majú definície samotné alebo použité v kombináciách podľa predloženého vynálezu nasledujúce významy:

Arylová skupina je karbocyklická alebo heterocyklická arylová skupina, ktorá je buď monocyklická alebo bicyklická.

Monocyklická karbocyklická arylová skupina je prípadne substituovaná fenylová skupina, výhodne fenylová skupina alebo fenylová skupina substituovaná jedným až troma substituentami, ktorými sú výhodne nižšia alkylová skupina, hydroxylová skupina, nižšia alkoxyskupina, acyloxyskupina, atóm halogénu, kyanoskupina, trifluórmetylová skupina, aminoskupina, nižšia alkanoylaminoskupina, nižšia alkyl-(tio, sulfinyl alebo sulfonyl)ová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, mono- alebo dialkylkarbamoylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny, alebo monoalebo dialkylaminoskupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny.

Bicyklická karbocyklická arylová skupina je 1- alebo 2-naftylová skupina alebo 1- alebo 2-naftylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou alebo atómom halogénu.

Monocyklická heterocyklická arylová skupina je výhodne prípadne substituovaná tiazolylová skupina, tienylová skupina, furanylová skupina, pyridylová skupina, pyrimidinylová skupina, oxazolylová skupina, izoxazolylová skupina, pyrolylová skupina, imidazolylová skupina alebo oxadiazolylová skupina.

Prípadne substituovaná furanylová skupina je 2- alebo 3-fu12 ranylová skupina alebo 2- alebo 3-furanylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou.

Prípadne, substituovaná pyridylová skupina je 2-, 3- alebo

4-pyridylová skupina alebo 2-, 3- alebo 4-pyridylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou.

Prípadne substituovaná tienylová skupina je 2- alebo 3-tienylová skupina alebo 2- alebo 3-tienylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo hydroxyalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu hydroxylovú skupinu.

Prípadne substituovaná tiazolylová skupina je napríklad

4- tiazolylová skupina, alebo 4-tiazolylová skupina substituovaná nižšou alkylovou skupinou.

Prípadne substituovaná pyrimidinylová skupina je 2-, 4- alebo 5-pyridridinylová skupina alebo 2-, 4- alebo 5-pyrimidinylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou.

Prípadne substituovaná oxazolylová skupina je 2-, 4- alebo

5- oxazolylová skupina alebo 2-, 4- alebo 5-oxazolylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou.

Prípadne substituovaná izoxazolylová skupina je 3-, 4- alebo

5-izoxazolylová skupina alebo 3-, 4- alebo 5-izoxazolylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou.

Prípadne substituovaná pyrolylová skupina je 1-, 2- alebo

3- pyrolylová skupina alebo 1-, 2- alebo 3-pyrolylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou.

Prípadne substituovaná imidazolylová skupina je 1-, 2- alebo

4- imidazolylová skupina alebo 1-, 2- alebo 4-imidazolylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou.

Prípadne substituovaná oxadiazolylová skupina je 3- alebo

5- [1,2,4]oxadiazolylová skupina alebo 3- alebo 5-[1,2,4]oxadia13 zolylová skupina výhodne substituovaná nižšou alkylovou skupinou.

Bicyklická heterocyklické arylová skupina je výhodne benzotiofenylová skupina, benzofuranylová skupina, indolylová skupina alebo benzotiazolylová skupina prípadne substituovaná hydroxylovou skupinou, nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou alebo atómom halogénu, výhodne 3-indolylová skupina, 2-benzotiazolylová skupina, 2-benzofuranylová skupina alebo 3-benzo[b]tiofenylová skupina.

Arylová skupina v arylalkylovej skupine obsahujúcej nižšiu alkylovú skupinu je výhodne fenylová skupina alebo fenylová skupina substituovaná jednou alebo dvoma skupinami vybranými zo skupiny, ktorú tvorí nižšia alkylová skupina, nižšia alkoxyskupina, hydroxylová skupina, nižšia alkanoyloxyskupina, atóm halogénu, trifluórmetylová skupina, kyanoskupina, nižšia alkanoylaminoskupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina; tiež je to prípadne substituovaná naftylová skupina.

Arylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu je výhodne benzylová skupina alebo 1- alebo 2-fenetylová skupina prípadne substituovaná na fenylovej skupine jednou alebo dvoma skupinami vybranými zo skupiny, ktorú tvorí nižšia alkylová skupina, nižšia alkoxyskupina, hydroxylová skupina, nižšia alkanoyloxyskupina, atóm halogénu alebo trifluórmetylová skupina.

Termín „nižšia znamená podlá vynálezu v súvislosti s organickými skupinami alebo zlúčeninami skupinu alebo zlúčeninu obsahujúcu až 7 vrátane, výhodne až 4 vrátane a výhodne jeden alebo dva atómy uhlíka. Táto skupina alebo zlúčenina môže byť priama alebo rozvetvená.

Nižšia alkylová skupina výhodne obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, a je to napríklad etylová skupina, propylová skupina, butylová skupina alebo výhodne metylová skupina.

Nižšia alkoxyskupina výhodne obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, a je to napríklad metoxyskupina, propoxyskupina, izopropoxyskupina alebo výhodne etoxyskupina.

t

Cykloalkylová skupina je nasýtená cyklická uhlovodíková skupina, ktorá výhodne obsahuje 5 až 7 atómov v kruhu, výhodne je to cyklopentylová skupina alebo cyklohexylová skupina.

Cykloalkylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu je výhodne 1- alebo 2-(cyklopentyl alebo cyklohexyl)etylová skupina, 1-, 2- alebo 3-(cyklopentyl alebo cyklohexyl)propylová skupina, alebo 1-, 2-, 3- alebo 4-(cyklopentyl alebo cyklohexyl) butylová skupina.

Nižšia alkoxykarbonylová skupina výhodne obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka v alkoxylovej časti, a je to napríklad metoxykarbonylová skupina, propoxykarbonylová skupina, izopropoxykarbonylová skupina alebo výhodne etoxykarbonylová skupina.

Cykloalkylidénová skupina je trojčlenná až desaťčlenná, výhodne trojčlenná, päťčlenná alebo šesťčlenná, a je to cykloalkánová spájajúca skupina, napríklad cyklopropylidénová skupina, cyklopentylidénová skupina, cyklohexylidénová skupina, cykloheptylidénová skupina alebo cyklooktylidénová skupina, kde dve pripojené skupiny sú pripojené k rovnakému atómu uhlíka cykloalkánového kruhu.

Cykloalkenylidénová skupina je päťčlenná až desaťčlenná, výhodne päťčlenná alebo šesťčlenná, a je to cykloalkénová spájajúca skupina, kde sú obidve pripojené skupiny pripojené k rovnakému atómu uhlíka cykloalkénového kruhu.

Cykloalkylidénová skupina kondenzovaná k nasýtenému karbocyklickému kruhu je napríklad perhydronaftylidénová skupina.

Cykloalkylidénová skupina kondenzovaná k nenasýtenému karbocyklickému kruhu je napríklad 1,1- alebo 2,2-tetralinylidénová skupina alebo 1,1- alebo 2,2-indanylidénová skupina.

Päťčlenná alebo šesťčlenná oxacykloalkylidénová skupina je výhodne tetrahydrofuránová alebo tetrahydropyránová spájajúca skupina, napríklad tetrahydrofuranylidénová skupina alebo tetrahydropyranylidénová skupina, kde sú obidve pripojené skupiny viazané k rovnakému atómu uhlíka príslušných kruhov, napríklad v polohe 3 alebo 4.

Päťčlenná alebo šesťčlenná tiacykloalkylidénová skupina je výhodne tetrahydrotiofénová alebo tetrahydrotiopyránová spájajúca skupina, kde sú obidve pripojené skupiny viazané k rovnakému atómu uhlíka príslušných kruhov, napríklad v polohe 3 alebo 4.

Päťčlenná alebo šesťčlenná azacykloalkylidénová skupina je výhodne pyrolidínová alebo piperidínová spájajúca skupina, kde sú obidve pripojené skupiny viazané k rovnakému atómu uhlíka príslušných kruhov, napríklad v polohe 3 alebo 4 a atóm dusíka môže byť substituovaný nižšou alkylovou skupinou, napríklad metylovou skupinou, alebo arylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu, napríklad benzylovou skupinou.

Atóm halogénu (halo) je výhodne atóm fluóru alebo atóm chlóru, ale môže to byť aj atóm brómu alebo atóm jódu.

Acylová skupina je odvodená od karboxylovej kyseliny, a je to výhodne prípadne substituovaná nižšia alkanoylová skupina, cykloalkylkarbonylová skupina, karbocyklická arylalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, aroylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina alebo arylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu, výhodne prípadne substituovaná nižšia alkanoylová skupina alebo aroylová skupina.

Nižšia alkanoylová skupina je výhodne acetylová skupina, propionylová skupina, butanoylová skupina, pentanoylová skupina, alebo pivaloylová skupina.

Prípadne substituovaná nižšia alkanoylová skupina je napríklad nižšia alkanoylová skupina alebo nižšia alkanoylová skupina substituovaná nižšou alkoxykarbonylovou skupinou, nižšou alkanoyloxyskupinou, nižšou alkanoyltioskupinou, nižšou alkoxyskupinou, alebo nižšou alkyltioskupinou; tiež je to nižšia alkanoylová skupina substituovaná napríklad hydroxylovou skupinou, dialkylaminoskupinou obsahujúcou nižšie alkylové skupiny, nižšou alkanoylaminoskupinou, morfolinoskupinou, piperidinoskupinou, pyrolidinoskupinou alebo 1-alkylpiperazinoskupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu.

Aroylová skupina je karbocyklická alebo heterocyklická aroylová skupina, výhodne monocyklická karbocyklická alebo monocyklická heterocyklická aroylová skupina.

Monocyklická karbocyklická aroylová skupina je výhodne benzoylová skupina alebo benzoylová skupina substituovaná nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, atómom halogénu alebo trifluórmetylovou skupinou.

Monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná karbocyklickou arylovou skupinou je výhodne bifenylylová skupina, výhodne 4-bifenylylová skupina, prípadne substituovaná na jednom alebo obidvoch benzénových kruhoch jednou alebo viacerými skupinami vybranými zo skupiny, ktorú tvorí nižšia alkylová skupina, nižšia alkoxyskupina, hydroxylová skupina, nižšia alkyltioskupina, atóm halogénu, trifluórmetylová skupina, aminoskupina, acylaminoskupina alebo nitroskupina.

Monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná heterocyklickou arylovou skupinou je výhodne fenylová skupina, prípadne substituovaná nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, trifluórmetylovou skupinou, ktorá je substituovaná v polohe para monocyklickou heterocyklickou arylovou skupinou, výhodne prípadne substituovanou tiazolylovou skupinou, tienylovou skupinou, furanylovou skupinou, pyridylovou skupinou, pyrimidinylovou skupinou, oxazolylovou skupinou alebo izoxazolylovou skupinou.

Monocyklická heterocyklická aroylová skupina je výhodne pyridylkarbonylová skupina alebo tienylkarbonylová skupina.

Azacykloalkylová skupina je výhodne piperidylová skupina, výhodnejšie 3-piperidylová skupina prípadne substituovaná na atóme dusíka nižšou alkylovou skupinou alebo acylovou skupinou.

Acyloxyskupina je výhodne prípadne substituovaná nižšia alkanoyloxyskupina, nižšia alkoxykarbonyloxyskupina, monocyklická karbocyklická aroyloxyskupina alebo monocyklická heterocyklická aroyloxyskupina; tiež karbocyklická alebo heterocyklická arylalkanoyloxyskupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu.

Prípadne substituovaná nižšia alkanoyloxyskupina je výhodne nižšia alkanoyloxyskupina, ako je acetyloxyskupina, substituovaná akoukoľvek skupinou uvedenou skôr pri substituovanej alkanoylovej skupine.

Arylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu je výhodne monocyklická karbocyklická alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu, výhodne benzyloxykarbonylová skupina.

Biarylová skupina je napríklad 4-bifenylylová skupina.

Biarylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu je výhodne 4-bifenylylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, výhodne 4-bifenylylmetylová skupina.

Nové zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú farmakologicky účinnými inhibítormi enzýmu konvertujúceho endotelín, ktoré inhibujú vznik endotelínu u cicavcov. Inhibujú teda biologický vplyv endotelínu u cicavcov.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú zvlášť vhodné na liečenie, napríklad hypertenzie a srdcového zlyhania, cerebrovaskulárnych porúch, napríklad mozgového vazospazmu a mŕtvice, akútneho alebo chronického zlyhania ľadvín, poruchy erekcie pe18 nisu, pľúcnych ochorení, napríklad bronchiálnej astmy a komplikácií spojených s transplantáciami orgánov u cicavcov.

Uvedené .vlastnosti je možné demonštrovať pri in vitro a in vivo testoch s použitím výhodných cicavcov, napríklad myší, krýs, psov, opíc alebo ich izolovaných orgánov, tkanív a preparátov. Uvedené zlúčeniny sa môžu aplikovať in vitro vo forme roztokov, napríklad výhodne vodných roztokov a in vivo buď enterálne, parenterálne, výhodne vnútrožilovo, napríklad ako suspenzie alebo vodné roztoky. Dávkovanie in vitro sa môže pohybovať v rozsahu molárnej koncentrácie 10⁵ až 10⁹. Dávkovanie in vivo sa môže meniť v závislosti od spôsobu podávania v rozsahu 0,1 až 50 mg/kg, výhodne v rozsahu 1,0 až 25 mg/kg.

In vitro inhibícia enzýmu konvertujúceho endotelín sa môže určiť nasledujúcim spôsobom:

Testovaná zlúčenina sa rozpustí v dimetylsulfoxide alebo 0,25 M roztoku hydrogenuhličitanu sodného a roztok sa zriedi pufrom s pH 7,4 na požadovanú koncentráciu.

Enzým konvertujúci endotelín (ECE) je čiastočne čistený z primárnych buniek endotelu aorty ošípaných pomocou DE52 anióny meniacej kolónovej chromatografie a jeho aktivita sa kvantifikuje pomocou rádioimunotestu, ktorý je opísaný v Anál. Biochem. 212, 434-436 (1993). Alternatívne sa natívny enzým môže substituovať pomocou rekombinantnej formy ECE, ako je opísané napríklad v Celí 78, 473-485 (1994). Ľudský ECE-1 je opísaný niekoľkými skupinami (Schmidt, M. a kol. FEBS Letters, 1994, 356, 238-243; Kaw, S.; Emoto, N.; Jeng, A.; Yanagisawa, M. 4th Int. Conf. on Endothelin; April 23-25, London (UK), 1995; C6; Valdenaire, O. a kol. J. Biol. Chem. 1995, 270, 29794-29798; Shimada, K. a kol. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1995, 207, 807-812) . Inhibícia ECE sa môže určiť tak, ako je opísané v Biochem. Mol. Biol. Int. 31, (5), 861-867 (1993), pomocou rádioimunotestu, čím sa odmeria ET-1 vzniknutý z veľkého (big) ET-1.

Alternatívne sa rekombinantný ľudský ECE-1 (rhECE-1) môže použiť nasledujúcim spôsobom:

Bunky vaječníkov čínskych škrečkov exprimujúce rekombinantný humánny enzým-1 konvertujúci endotelín (rhECE-1; Kaw, S.; Emoto,

N. ; Jeng, A.; Yanagisawa, M. 4th Int. Conf. on Endothelin; April 23-25, London (UK) , 1995; C6) sa kultivujú v DMEM/F12 médiu obsahujúcom 10% fetálne bovinné sérum a lx antibiotický antimykotický prostriedok. Bunky sa odoberú zoškriabnutím, peletujú sa odstredením a homogenizujú sa pri 4°C v pufri obsahujúcom 5 mM MgCl₂, 1 μΜ pepstatín A, 100 μΜ leupeptín, lmM PMSF a 20 mM Tris, pH 7,0, s pomerom 2 ml pufra/ml buniek. Bunky sa izolujú pomocou krátkeho odstredenia a supernatant sa znova odstredil j e pri 100 000 x g 30 minút. Získaná peleta sa suspenduje v pufri obsahujúcom 200 mM NaCl a 50 mM Tes, pH 7,0, s koncentráci proteínu 15 mg/ml a skladuje sa v alikvotných dieloch pri -80°C.

Pri testovaní účinku inhibitora na aktivitu ECE-1 sa 10 μς proteínu preinkubuje so zlúčeninou pri požadovanej koncentrácii 20 minút pri teplote miestnosti v 50 mM TES, pH 7,0, a 0, 005% Triton X-100 v objeme 10 μΐ. Potom sa pridá humánny veľký ET-1 (5 μΐ) do výslednej koncentrácie 0,2 μΜ, a reakčná zmes sa ďalej inkubuje 2 hodiny pri 37°C. Reakcia sa ukončí pridaním 500 μΐ rádioimunotestového pufra (RIA) obsahujúceho 0,1% Triton X-100,

O, 2% bovinný sérový albumín, a 0,02% NaN₃ vo fyziologickom roztoku pufrovanom fosfátom.

Zriedené 200 μΐ vzorky získané z uvedeného enzýmového testu sa inkubujú pri 4°C cez noc s 25 μΐ [¹²⁵I]ET-1 (10 000 cpm/ /skúmavka) a 1:20 000-násobne zriedenými králičími protilátkami, ktoré špecificky rozlišujú karboxylovú skupinu výsledného tryptofánu ET-1. Do každej skúmavky sa pridá 70 μg kozej antikráličej protilátky naviazanej na magnetických perličkách a reakčná zmes sa ďalej inkubuje 30 minút pri teplote miestnosti. Perličky sa potom peletujú s použitím magnetického stojana. Supernatant sa dekantuje a pomocou gama počítadla sa odpočíta rádioaktivita peliet. Celkové a nešpecifické väzby sa určujú v neprítomnosti nerádioaktívnych ET-1 a anti-ET protilátok. Za týchto podmienok ET-1 a veľké ET-1 nahradí [¹²⁵I]ET-1 väzbu k protilátke pri hodnotách IC₅o 21 ± 2 a 260 000 ± 66 000 fmol (priemer ± SEM, n = 3 - 5) .

Na určenie hodnoty IC50 inhibítora sa určí krivka odozvy na koncentráciu pre každý inhibitor. Na úpravu dát sa použije program ALLFIT v IBM-kompatibilnej verzii.

Pre zlúčeniny, kde Y je 5-tetrazolylová skupina alebo karboxylová skupina, je najvýhodnejšie in vitro testovanie.

Na ilustráciu predloženého vynálezu zlúčenina z príkladu 5j predstavuje hodnotu IC50 asi 11 nM pri in vitro teste inhibície rh-ECE-1.

Inhibícia enzýmu konvertujúceho endotelín sa môže tiež určiť in vivo meraním inhibície odozvy tlaku indukovanej veľkým ET-1 u anestetizovaných krýs alebo krýs pri vedomí, ako je opísané ďalej. Vplyv inhibítorov na odozvu tlaku vyvolanú vplyvom veľkého ET-1 sa meria u krýs Sprague-Dawley, čo je opísané v Biochem. Mol. Biol. Int. 21/ (5), 861-867 (1993). Výsledky sú vyjadrené ako percentuálna inhibícia odozvy tlaku indukovanej veľkým ET-1 v porovnaní s vehikulom.

Samci krýs Sprague-Dawley sa anestetizujú Inactinom (100 mg/kg i.p.) a inštrumentujú sa katétrom v stehennej tepne a žile, čím sa zaznamenáva stredný tlak v tepne (MAP) a podávajú sa zlúčeniny. Uskutoční sa tracheostómia a do dýchacej trubice sa zavedie kanyla, čím sa zabezpečí priechodnosť dýchacích ciest. Telesná teplota zvierat sa pomocou zahrievacej prikrývky udržiava na hodnote 37 ± 1°C. Po uskutočnení chirurgického zákroku sa pred prerušením autonómnej neurotransmisie pomocou chlorisondaminu (3 mg/kg i.v.) nechá stabilizovať MAP. Krysy sa potom ošetria testovanou zlúčeninou pri 10 mg/kg i.v. alebo vehikulom a odozva sa vyvolá velkým ET-1 (1 nmcl/kg i.v.) po 15 a 90 minútach. Všeobecne sa údaje vyjadrujú ako maximálne zvýšenie MAP vplyvom veľkého ET-1 u živočíchov ošetrených testovanou zlúčeninou alebo vehikulom.

Samci krýs Sprague-Dawley sa anestetizujú metohexitalom sodným (75 mg/kg i.p.) a inštrumentujú sa katétrami v stehennej tepne a žile, čím sa meria tlak v tepne (MAP) a podáva sa liečivo. Katétre sa pretiahnu cez otočný systém, ktorý umožňuje krysám volne sa pohybovať potom, ako prídu k vedomiu. Krysy sa nechajú z tejto procedúry zotavovať 24 hodín a potom sa začne štúdia. Nasledujúci deň sa zaznamenajú prostredníctvom katétra v stehennej tepne údaje o MAP a prostredníctvom stehennej žily sa podáva testovaná zlúčenina alebo vehikulum. U zvierat sa vyvoláva odozva pomocou veľkého ET-1 s 1 nmol/kg i.v. v rôznych časoch po podaní liečiva. Po zodpovedajúcom čase vymytia v závislosti od dávkovania a diéty sa môžu zvieratá testovať znova pri inej dávke testovanej zlúčeniny alebo vehikula. Všeobecne sa údaje uvádzajú ako zmena MAP vyvolaná velkým ET-1 v dvojminútových intervaloch u zvierat ošetrených testovanou zlúčeninou v porovnaní s vehikulom.

Inhibícia ECE sa môže tiež určiť in vivo pomocou merania inhibície odozvy tlaku indukovanej ET-1 u spontánne hypertenzívnych krýs (SHR) pri vedomí, napríklad ako je opísané v Biochem. Biophys. Res. Commun. 204, 407-412 (1994).

Samcom SHR (vek 16 až 18 týždňov) sa pomocou osmotickej minipumpy, implantovanej pod kožu, podáva buď testovaná zlúčenina alebo vehikulum (IM hydrogénuhličitan sodný). Na piaty deň sa anestetizovaným krysám na meranie MAP a podávanie testovanej zlúčeniny zavedú katétre do stehennej tepny a žily. Po 48 hodinách zotavovania sa pomocou tepnového katétra pripojeného k prevodníku tlaku zaznamená MAP (deň 7). Krvný tlak a srdcový rytmus sa nechajú stabilizovať 30 minút, potom sa uskutoční pomocou chlorisondaminu (10 mg/kg i.v.) blokáda gangliónu. Asi po 15 mi22 nútach sa podáva jednorázová dávka big ET-1 (0,25 nmol/kg i.v.) ako krysám liečeným vehikulom, tak aj krysám liečeným testovanou zlúčeninou. Zmena krvného tlaku ako odozva na veľký ET-1 sa potom porovná medzi dvoma skupinami krýs po 1, 5, 10, 15, 30 a minútach po dávkovaní s použitím dvojfázovej ANOVA.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu inhibujú cerebrovaskulárne zúženie a sú vhodné na liečenie a zmiernenie cerebrálnej spazmy. Sú tiež vhodné na liečenie alebo zmiernenie stavov, pri ktorých sa vyskytuje cerebrálny vazospazmus. Medzi také stavy patrí mŕtvica, mozgová ischémia, akútne a traumatické mozgové príhody, krvácanie mozgu, najmä aneuryzmálne subarachnoidné krvácanie a tiež migréna.

Inhibícia cerebrálneho vazospazmu sa demonštruje meraním inhibície experimentálne indukovaného zúženia bazilárnych mozgových tepien u králika (Caner a kol., J. Neurosurg., 1996, 85,

917-922) .

Bronchiálny účinok sa môže demonštrovať meraním účinku na meranie bronchokonstrikcie vyvolanej EP-1.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu mať tiež inhibičnú aktivitu na enzým konvertujúci angiotenzín (ACE) a neutrálnu endopeptidázu (NEP). Testy na určenie tejto aktivity sú opísané napríklad v (J.S. patente 5 506 244, ktorý je tu uvedený ako odkaz .

Kombinovaný efekt je výhodný napríklad pri liečení kardiovaskulárnych porúch u cicavcov, ako je hypertenzia, kongestívne srdcové zlyhanie a zlyhanie ľadvín.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu všeobecne pripraviť podlá metodológie opísanej v U.S. patente 5 506 244, najmä podľa spôsobov opísaných a ilustrovaných ďalej, napríklad (a) pomocou kondenzácie zlúčeniny všeobecného vzorca (IV) (CH₂)

NH-CH-Y' (IV) kde symboly R, m a A majú rovnaký význam, Y' je 5-tetrazolylová skupina chránená esterifikovaná karboxylová skupina, s všeobecného vzorca (V) ako je opísané skôr a na atóme dusíka alebo karboxylovou kyselinou

R¹S^C^COOH R² R³ (V) alebo jej reaktívnym funkčným derivátom, kde R² a R³ majú význam definovaný skôr, R¹' je labilná skupina chrániaca atóm síry, napríklad acylová skupina, terc-butylová skupina alebo prípadne substituovaná benzylová skupina; alebo (b) pomocou kondenzácie zlúčeniny všeobecného vzorca (VI)

O ¹¹

R¹' S-C-C

Z\

R2 R3

NH-C-COOH

U (VI) alebo jej reaktívneho funkčného derivátu, kde symboly A, R¹', R²a R³ majú význam definovaný skôr, so zlúčeninou všeobecného vzorca (VII) (CH,)

2'm

NH₂ — CH—Y¹ (VII) kde R, m, X a Y' majú význam definovaný skôr; alebo (c) pomocou kondenzácie zlúčeniny všeobecného vzorca (VIII)

R² O

Z-C-c-N-C-C-NH-CH-Y' (VIII)

kde symboly R, A, R², R³ a Y' majú význam definovaný skôr a Z je reaktívna esterifikovaná hydroxylová skupina (napríklad atóm halogénu, ako je atóm chlóru alebo atóm brómu) ako odstupujúca skupina, so zlúčeninou všeobecného vzorca (IX)

R^SH (IX) kde R¹' je labilná skupina chrániaca atóm síry, napríklad acylová skupina, terc-butylová skupina alebo prípadne substituovaná benzylová skupina;

a prevedenie získaného produktu, kde R¹' je prípadne substituovaná benzylová skupina na zlúčeninu všeobecného vzorca (I), kde R¹je atóm vodíka; a v už uvedenom spôsobe, ak sa prechodne chránia akékoľvek interferujúce reaktívne skupiny, odstránenie uvedených ochranných skupín a potom izolácia vznikajúcej zlúčeniny podľa predloženého vynálezu; a, ak je to potrebné, prevedenie akejkoľvek získanej zlúčeniny podľa predloženého vynálezu na inú zlúčeninu podlá predloženého vynálezu; a/alebo, ak je to potrebné, prevedenie voľnej karboxylovej funkčnej skupiny na jej farmaceutický prijateľný esterový derivát alebo prevedenie vznikajúceho esteru na voľnú kyselinu alebo na iný esterový derivát; a/alebo, ak je to potrebné, prevedenie vznikajúcej voľnej zlúčeniny na soľ alebo vznikajúce soli na voľnú zlúčeninu alebo na inú sol a/alebo, ak je to potrebné, rozštiepenie získanej zmesi izomérov alebo racemátov na jednotlivé izoméry alebo racemáty a/alebo, ak je to potrebné, rozštiepenie získaného racemátu na optické antipódy.

Pri východiskových zlúčeninách a medziproduktoch, ktoré sa prevádzajú na zlúčeniny podľa predloženého vynálezu spôsobom opísaným podľa vynálezu, sú funkčné skupiny, ako je tiolová sku25 pina, karboxylová skupina, aminoskupina a hydroxylová skupina, prípadne chránené ochrannými skupinami, ktoré sú bežné v preparatívnej organickej chémii. Chránená tiolová skupina, karboxyloz vá skupina, aminoskupina a hydroxylová skupina sú skupiny, ktoré sa môžu previesť za miernych podmienok na voľnú tiolovú skupinu, karboxylovú skupinu, aminoskupinu a hydroxylovú skupinu bez toho, aby došlo k nežiaducim vedľajším reakciám.

Dôvodom zavedenia ochranných skupín je chrániť funkčné skupiny pred nežiaducimi reakciami s reakčnými zložkami za podmienok použitých na uskutočňovanie požadovanej chemickej transformácie. Potreba a výber ochranných skupín pre príslušné reakcie je odborníkom v tejto oblasti známy a závisí na povahe funkčnej skupiny, ktorá sa má chrániť (tiolová skupina, karboxylová skupina, aminoskupina a tak ďalej), štruktúre a stabilite molekuly, v ktorej sa nachádza daný substituent a reakčných podmienkach .

Známe ochranné skupiny, ktoré spĺňajú tieto podmienky, a tiež spôsob ich zavedenia a odstránenia, sú opísané napríklad v J. F. W. McOmie, Protective Groups in Orgánic Chemistry, Plénum Press, London, N.Y. 1973, T. W. Greene a P.G.M. Woots, Protective Groups in Orgánic Synthesis, Wiley, N.Y. 1991, The Peptides, Vol. I, Schroeder a Luebke, Academic Press, London, N.Y., 1965, a tiež v P. J. Kocienski, Protecting Groups, Thieme, N.Y. 1994.

Vhodnými ochrannými skupinami na prípravu 5-tetrazolylových zlúčenín sú ochranné skupiny bežne používané v chémii tetrazolov, najmä trifenylmetylová skupina, nesubstituovaná alebo substituovaná, (napríklad nitrosubstituovaná), benzylová skupina, ako je 4-nitrobenzylová skupina, nižšia alkoxymetylová skupina, ako je metoxy- a etoxymetylová skupina, tiež 1-etoxyetylová skupina, nižšia alkyltiometylová skupina, ako je metyltiometylová skupina, silylová skupina, ako je trialkylsilylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny, napríklad dimetyl26

-terc-butyl- a triizopropylsilylová skupina, a tiež 2-kyanoetylová skupina, tiež alkoxyalkoxymetylová skupina obsahujúca nižšie alkoxyskupiny, ako je 2-metoxyetoxymetylová skupina, benzyloxymetylová skupina a fenacylová skupina.

Odstránenie ochranných skupín sa uskutočňuje pomocou spôsobov, ktoré sú odborníkom pracujúcim v tejto oblasti známe. Napríklad trifenylmetylová skupina sa obvykle odstráni pomocou hydrolýzy, najmä v prítomnosti kyseliny alebo pomocou hydrogenolýzy v prítomnosti hydrogenačného katalyzátora; 4-nitrobenzylová skupina sa odstráni napríklad pomocou hydrogenolýzy v prítomnosti hydrogenačného katalyzátora; metoxy- alebo etoxymetylová skupina sa odstráni napríklad pomocou reakcie s trialkylcínbromidom, obsahujúcim nižšie alkylové skupiny, ako je trietyl- alebo tributylcínbromid; metyltiometylová skupina sa odstráni napríklad pomocou reakcie s trifluóroctovou kyselinou; silylové skupiny sa odstránia napríklad pomocou reakcie s fluoridmi, ako sú tetraalkylamóniumfluoridy obsahujúce nižšie alkylové skupiny, napríklad tetrabutylamóniumfluorid, alebo fluoridy alkalických kovov, napríklad fluorid sodný; 2-kyanoetylová skupina sa odstráni napríklad pomocou hydrolýzy napríklad roztokom hydroxidu sodného; 2-metoxyetoxymetylová skupina sa odstráni napríklad pomocou hydrolýzy napríklad pomocou kyseliny chlorovodíkovej; a benzyloxymetylová skupina a fenacylová skupina sa odstráni napríklad pomocou hydrogenolýzy v prítomnosti hydrogenačného katalyzátora.

Skupiny chrániace tetrazolovú skupinu, ktoré sa výhodne zavádzajú pomocou prevedenia podobne chráneného amidu na zodpovedajúci N-substituovaný tetrazol, sú napríklad kyanoetylová skupina, p-nitrofenyletylová skupina, nižšia alkoxykarbonyletylová skupina, fenylsulfonyletylová skupina a podobne. Tieto skupiny chrániace tetrazolovú skupinu sa môžu odstrániť pomocou retro Michaelovej odblokujúcej reakcie so zásadou, ako je DBN (1,5-diazabicyklo[4,3,0]non-5-én), amidín, uhličitan alebo alkoxid alkalického kovu, napríklad uhličitan draselný, terc-butoxid draselný, metoxid sodný v inertnom rozpúšťadle.

Skupinou chrániacou aminoskupinu je výhodne terc-butoxykarbonylová skupina alebo benzyloxykarbonylová skupina.

Skupinou chrániacou sulfhydrolovú skupinu je výhodne nižšia alkanoylová skupina, napríklad acetylová skupina.

Príprava zlúčenín podlá predloženého vynálezu podlá spôsobu (a) zahŕňajúca kondenzáciu amínu všeobecného vzorca (IV) s kyselinou všeobecného vzorca (V) alebo jej reaktívnym funkčným derivátom, sa uskutočňuje pomocou postupov známych pri syntéze peptidov.

Kondenzácia podľa spôsobu (a) zlúčeniny všeobecného vzorca (IV) s volnou karboxylovou kyselinou všeobecného vzorca (V) sa výhodne uskutočňuje v prítomnosti kondenzačného činidla, ako je dicyklohexylkarbodiimid alebo N-(3-dimetylaminopropyl)-N'-etylkarbodiimid, a hydroxybenzotriazol, l-hydroxy-7-azabenzotriazol, chlórdimetoxytriazín alebo benzotriazol-l-yloxy-tris-(dimetylaminofosfóniumhexafluorofosfát (BOP činidlo), a trietylamín alebo N-metylmorfolín, v inertnom polárnom rozpúšťadle, ako je dimetylformamid alebo dichlórmetán, výhodne pri teplote miestnosti .

Kondenzácia zlúčeniny všeobecného vzorca (IV) s reaktívnym funkčným derivátom kyseliny všeobecného vzorca (V) vo forme halogenidu kyseliny, výhodne chloridu kyseliny, alebo zmesového anhydridu, sa uskutočňuje v inertnom rozpúšťadle, ako je toluén alebo dichlórmetán, výhodne v prítomnosti zásady, napríklad anorganickej zásady, ako je uhličitan draselný alebo organickej zásady, ako je trietylamín, N-metylmorfolín alebo pyridín, výhodne pri teplote miestnosti.

Reaktívne funkčné deriváty karboxylových kyselín všeobecného vzorca (V) sú výhodne halogenidy kyselín (napríklad chlorid kyseliny) a zmesové anhydridy, ako je pivaloyl alebo izobu28 tyloxykarbonylanhydrid, alebo aktivované estery, ako je benzotriazol, 7-azabenzotriazol alebo hexafluórfenylester.

Východiskové látky všeobecného vzorca (IV) sa môžu pripraviť podľa spôsobov opísaných podľa vynálezu a ilustrovaných v príkladoch .

Príprava východiskovej látky všeobecného vzorca acyláciu esteru aminokyseliny všeobecného vzorca (X) (IV) zahŕňa (X) (CH,)

2'm

NHn-CH-Y' kde R a Y' majú rovnaký význam, ako je uvedené skôr, s vhodnou cyklickou aminokyselinou chránenou atómom dusíka (alebo jej reaktívnym funkčným derivátom) všeobecného vzorca (XI) ^r5nh\ /COOH

O

A (XI) kde A má rovnaký význam, ako je uvedené skôr a R⁵ je labilná skupina chrániaca aminoskupinu, napríklad terc-butoxykarbonylová skupina, pričom sa získa zodpovedajúca zlúčenina všeobecného vzorca (IV) chránená na atóme dusíka.

Kondenzácia zlúčeniny všeobecného vzorca (X) so zlúčeninou všeobecného vzorca (XI) sa uskutočňuje pomocou spôsobov známych zo syntézy peptidov, ako je napríklad opísané skôr pre kondenzáciu zlúčeniny všeobecného vzorca (IV) so zlúčeninou všeobecného vzorca (V) . Skupina chrániaca atóm dusíka sa odstráni pomocou spôsobov, ktoré sú odborníkom pracujúcim v tejto oblasti známe, napríklad terc-butoxykarbonylová skupina sa odstráni pomocou bezvodej kyseliny, ako je kyselina trifluóroctová.

Východiskové aminokyseliny a estery zlúčenín všeobecného vzorca (X) a (XI) sú buď odborníkom v tejto oblasti známe, alebo, ak sú nové, môžu sa pripraviť podľa spôsobov, ktoré sú odbor29 nikom v tejto oblasti známe, napríklad zo zodpovedajúcich aldehydov a ketónov. α-Aminokyseliny všeobecného vzorca (X) sa výhodne získajú ako S-enantioméry. Rozštiepenie esterov N-acylaminokyselín sa môže uskutočniť pomocou hydrolýzy s esterázou, napríklad alkalázou, pričom sa získa S-aminokyselina.

Východiskové látky všeobecného vzorca (V) sú známe alebo, ak sú nové, pripravia sa pomocou bežných postupov. Východiskové látky sa pripravia napríklad zo zodpovedajúcich racemických alebo opticky aktívnych α-aminokyselín, pomocou ich prevedenia na α-brómderiváty, po ktorom nasleduje ich nahradenie vhodnými tiokyselinami alebo prípadne substituovaným benzyltiolom v zásaditých podmienkach, ako je napríklad ilustrované v Európskej patentovej prihláške číslo 524 553 zverejnenej 27. januára 1993. S-Debenzylácia získaného výsledného produktu sa uskutočňuje pomocou redukčného štiepenia napríklad sodíkom v amoniaku. S-deacylácia sa uskutočňuje napríklad pomocou zásadito katalyzovanej hydrolýzy so zriedeným vodným roztokom hydroxidu sodného alebo hydroxidu lítneho.

Príprava zlúčenín podľa predloženého vynálezu podľa postupu (b) zahŕňajúceho kondenzáciu kyseliny všeobecného vzorca (VI) so zlúčeninou všeobecného vzorca (VII), sa uskutočňuje podobným spôsobom, ako je opísané v spôsobe (a) . Podobne sa východiskové látky všeobecného vzorca (VI) pripravia pomocou kondenzácie kyseliny všeobecného vzorca (V) s esterom zodpovedajúcej aminokyseliny všeobecného vzorca (XI) (R⁵ býva atóm vodíka) za podmienok, ktoré sú podobné podmienkam opísaným skôr, po ktorej nasleduje odstránenie skupín chrániacich karboxylovú alebo tetrazolylovú skupinu.

Príprava zlúčenín podľa predloženého vynálezu podľa spôsobu (c) zahŕňajúceho nahradenie odstupujúcej skupiny Z v zlúčenine všeobecného vzorca (VIII) sulfhydrylovým derivátom R¹'-SH, sa uskutočňuje podľa spôsobov, ktoré sú odborníkom pracujúcim v tejto oblasti známe.

Reaktívna esterifikovaná hydroxylová skupina, ktorú predstavuje Z, je hydroxylová skupina esterifikovaná silnou anorganickou alebo organickou kyselinou. Zodpovedajúce skupiny Z sú najmä atóm halogénu, napríklad atóm chlóru, atóm brómu alebo atóm jódu, tiež sulfonyloxyskupiny, ako je nižšia alkyl- alebo arylsulfonyloxyskupina, napríklad (metán-, etán-, benzén- alebo toluén-) sulfonyloxyskupiny, tiež trifluórmetylsulfonyloxyskupina.

Nahradenie sa uskutočňuje v inertnom rozpúšťadle, ako je dimetylformamid, metylénchlorid alebo tetrahydrofurán v prítomnosti zásady, ako je uhličitan draselný, trietylamín, diizopropyletylamín, N-metylmorfolín, a podobne, pri teplote miestnosti alebo pri zvýšenej teplote.

Podobne sa môžu východiskové látky všeobecného vzorca (VIII) pripraviť reakciou amidového derivátu všeobecného vzorca (IV) s kyselinou všeobecného vzorca (XII)

Z-C-COOH

(XII) kde R² a R³ a Z majú význam definovaný skôr, za podmienok opísaných pri spôsobe (a).

Kyseliny všeobecného vzorca (XII), napríklad kde Z je atóm brómu, sa môžu pripraviť zo zodpovedajúcich α-aminokyselín podía spôsobov, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti známe. Prípadne sa aktívne kyseliny všeobecného vzorca (XII) môžu získať z opticky aktívnych α-aminokyselín, ako je ilustrované podía vynálezu.

Spôsob (c) ilustrujú nasledujúce reakčné sekvencie.

HCI (plyn)

MeOH, 25 ^eC θ’ O '>^E‘3^N . _n

ΝζΛ „ _2) Boe anhydnd » ><^OyV‘o'

CH₂C1₂,0-25 °C ' o \ /

1) LiOH

THF, H,0,25 °C -=-1

2) HCI >ry_č

R² 9

V /^R HCI (plyn) _ /R ^N Π ° ^O'^N'Y⁰ MeOH ^Cl n'Y

EtjN

HOAt

Fnrt ^CH2^C|.

NaNO₂

HBr(vodn)

KBr

H₂O,-10°C

v <HCI (plyn)

Or- I n

O

DMF, 25 °C

1) 1 OOMLiOH

2) IM HCI -1

MeOH. 25 °C =^r2 O S* ^sŤd^NY

B: Alternatívne sa zlúčeniny, kde R je biarylová skupina, napríklad derivát N-Boc-cykloleucylbiarylalanínu 7, pripravia pomocou Suzukiho kondenzačnej reakcie napríklad etylesteru 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-(4— trifluórmetánsulfonyloxyfenyl)propiónovej kyseliny 14 a rôznych arylborónových kyselín podľa modifikácie spôsobu zverejneného Carlsonom a Shiehom (J. Org. Chem. 1992, 57, 379) s použitím

PdCl₂(dppf) ako katalyzátora, K₃PO₄ ako zásady, a DME alebo THF ako rozpúšťadla. Syntéza výsledných produktov sa potom skončí rovnako, ako v sekvencií A.

HCI (plyn* ,

MeOH, 25 °C

1) Ei_}N

2) Boe anhydnd

CH₂CI₂.0-25 °C >rYeý°'

1) LiOH

THF, HjO, 25 °C

2) HCI

o

NaNOj HBr(vodn) KBr h₂o.-io°c

R² 10 v

Et₃N

EDCI

HOAt

CHjCIj. 25 °C

medziprodukt

DMF. 25 °C ♦

OIOOMUOH 21 IM HCI

MeOH 25 °C

O S*

Yô s

13a

R' - biaiyl Ar»afyl

C: Alternatívne sa pre zlúčeniny, kde R je biarylová skupina, predposledné medziprodukty brómestery 11 syntetizujú za štandardných kondenzačných podmienok (DCC, HOAT, Et₃N v metylénchloride, ako je opísané skôr) pomocou reakcie brómkyselín 17 s hydrochloridmi esterov aminokyselín 5. Hydrochloridy biarylaminoesterov sa teda pripravia napríklad z etylesteru 2-(benzhydrylidénamino)—3—[4—(4,4,5,5-tetrametyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-ylfenyl]propiónovej kyseliny 18 pomocou Suzukiho kondenzácie a následnej hydrolýzy (Satoh, Y.; Gude, C.; Chán, K.; Firooznia, F. Tetrahedron Lett. 1997, 38, 7645).

ο

HCl (P'yn)

MeOH. 2j‘<T

Cl O

DlOOMLiOH 2) IM HCl

MeOH. 25 C

R’ *biaryl Ar - qryl

D: Pre zlúčeniny, kde R je biarylová skupina, zahŕňa alternatívny postup prípravy N-Boc-cykloleucylbiarylalanínesterových medziproduktov 7 kondenzáciu napríklad metylesteru 2-[(l-terc— butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-(4-jódfenyl)propiónovej kyseliny s rôznymi arylborónovými kyselinami za rovnakých reakčných podmienok, ako je opísané v postupe B. Biarylom substituované medziprodukty 7 sa môžu tiež získať pomocou kondenzácie jódfenylovou skupinou substituovaného medziproduktu 19 s rôznymi arylstanátmi za podmienok Stilleho kondenzačnej reakcie katalyzovanej paládiom s použitím toluénu alebo dioxánu ako rozpúšťadiel.

ο

HCI (plyn) ₍

MeOH, 25 °C

DEt-jN

Boe anhydnd

CH₂CI₂,0-25 °C

1) UOH

THF, H₂0,25 °C

2) HCI

R²

NaNO₂ | HBr(vodn) KBr | h₂o.-io°c

DMF, 25 °C

medziprodukt

I, I OOMLlOH 2) IM HCI

MeOH. 25 °C

R'btaryl Ar ^a aryl

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu, kde Y je ΙΗ-5-tetrazolylová skupina, sa pripravia podobným spôsobom, ale ako východisková látka sa použije tetrazolový derivát všeobecného vzorca (X')

kde R^p je skupina chrániaca tetrazolylovú skupinu (ako je 2-kyanoetylová skupina).

Tetrazolové východiskové látky všeobecného vzorca (X') sa pripravia zo zodpovedajúcich N-acylovaných aminokyselín najskôr prevedením na N-R^p-substituované amidy. Získané amidy potom reagujú za podmienok známych pre vznik tetrazolového kruhu, napríklad za podmienok opísaných v Tetrahedron Letters 1979, 491 a J. Org. Chem. 56, 2395 (1991), napríklad s trimetylsilylazidom v prítomnosti diizopropylazodikarboxylátu a trifenylfosfínu. Odstránenie N-acylovej skupiny vedie k východiskovým látkam všeobecného vzorca (X') .

V uvedených reakčných sekvenciách pre spôsob (c) sa skupina chrániaca tetrazolovú skupinu výhodne odstráni po vzniku bromovaného medziproduktu a pred reakciou napríklad s tioacetátom draselným.

Určité zlúčeniny a medziprodukty podľa predloženého vynálezu sa môžu navzájom na seba previesť za reakčných podmienok, ktoré sú odborníkom pracujúcim v tejto oblasti známe.

Voľné merkaptány sa môžu previesť na S-acylované deriváty pomocou reakcie s reaktívnym derivátom karboxylovej kyseliny (zodpovedajúcim situácii, keď R¹ vo všeobecnom vzorci (I), je acylová skupina), ako je anhydrid kyseliny alebo uvedený chlorid, výhodne v prítomnosti chloridu kobaltnatého v inertnom rozpúšťadle, ako je acetonitril alebo dichlórmetán.

Voľné merkaptány, kde R¹ je atóm vodíka, sa môžu oxidovať na zodpovedajúce disulfidy napríklad pomocou oxidácie alebo s použitím miernych oxidačných činidiel, ako je jód v alkoholovom roztoku. Naopak sa disulfidy môžu redukovať na zodpovedajúce merkaptány napríklad pomocou redukčných činidiel, ako je borohydrid sodný, zinok a kyselina octová alebo tributylfosfin.

Estery karboxylových kyselín sa môžu pripraviť z karboxylových kyselín kondenzáciou napríklad s halogenidom zodpovedajúcim esterifikujúcemu alkoholu v prítomnosti zásady alebo s prebytkom alkoholu, v prítomnosti kyslého katalyzátora, pomocou spôsobov, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti známe.

Estery karboxylových kyselín a S-acylované deriváty sa môžu hydrolyzovať napríklad pomocou vodného roztoku alkálie, ako je uhličitan alebo hydroxid alkalického kovu.

Karbocyklické a heterocyklické aromatické zlúčeniny alebo medziprodukty sa môžu redukovať na zodpovedajúce alicyklické zlúčeniny alebo medziprodukty podľa spôsobov, ktoré sú ilustrované podía predloženého vynálezu, napríklad pomocou katalytickej hydrogenácie.

V prípade, že sa získajú zmesi stereoizomérov (napríklad diastereomérov), môžu sa rozštiepiť pomocou spôsobov, ktoré sú odborníkom pracujúcim v tejto oblasti známe, napríklad pomocou frakčnej kryštalizácie a chromatografie (napríklad na tenkej vrstve, kolónovej, flash chromatografie). Racemické voľné kyseliny sa môžu rozštiepiť na optické antipódy pomocou frakčnej kryštalizácie solí d- alebo 1-(α-metylbenzylaminu, cinchonidínu, cinchonínu, chinínu, chinidínu, dehydroabietylamínu, brucínu alebo strychnínu) a podobne. Racemické produkty, ak nie sú diastereoizomérmi, sa môžu najskôr previesť na diastereoizoméry s opticky aktívnymi činidlami (ako sú opticky aktívne alkoholy, pričom vznikajú estery), ktoré sa môžu potom rozdeliť tak, ako už bolo opísané a napríklad hydrolyzovať na jednotlivé enantioméry. Racemické produkty sa môžu tiež rozštiepiť pomocou chirálnej chromatografie, napríklad vysokotlakovej kvapalinovej chromatografie s použitím chirálneho adsorbenta; tiež pomocou enzymatického rozštiepenia, napríklad esterov s alkalázou.

Uvedené reakcie sa uskutočňujú podľa štandardných postupov, v prítomnosti alebo neprítomnosti riedidiel, ktoré sú výhodne inertné k reagentom a rozpúšťajú ich, katalyzátorov, alkalických alebo kyslých kondenzačných alebo iných uvedených činidiel a/alebo inertnej atmosféry, pri nízkej teplote, teplote miestnosti alebo zvýšenej teplote, ktorá je výhodne blízka teplote varu použitého rozpúšťadla, pri atmosférickom alebo vyššom ako atmosférickom tlaku.

Predložený vynález ďalej zahŕňa všetky varianty uvedených spôsobov, keď sa medziprodukt, ktorý je možné získať v akomkoľvek kroku spôsobu, použije ako východisková látka a uskutočnia sa akékoľvek zostávajúce kroky alebo sa spôsob v akomkoľvek kroku preruší alebo keď za reakčných podmienok vzniknú východiskové látky alebo keď sa reakčné zložky použijú vo forme svojich solí alebo opticky čistých antipódov. Pri uvedených reakciách sa použijú najmä také východiskové látky, ktoré vedú k vzniku takých zlúčenín, ktoré sú označené ako výhodné.

Predložený vynález sa ďalej týka použitia zlúčenín podía predloženého vynálezu a ich farmaceutický prijateľných, netoxických a adičných solí alebo ich farmaceutických kompozícií ako liečiv na inhibíciu enzýmu konvertujúceho endotelin u cicavcov, a napríklad na liečenie porúch závislých od endotelínu, ktoré sú tu uvedené, napríklad kardiovaskulárnych porúch, ako je hypertenzia, zlyhanie srdca, akútne a chronické zlyhanie ľadvín, mŕtvica a cerebrálny vazospazmus a tiež bronchiálna astma, poruchy erekcie a komplikácie spojené s transplantáciou orgánu.

Predložený vynález sa tiež týka použitia zlúčenín podľa predloženého vynálezu na prípravu farmaceutických kompozícií, najmä farmaceutických kompozícií, ktoré majú inhibičnú aktivitu vzhladom na enzým konvertujúci endotelin.

Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu sú kompozície, ktoré sú vhodné na enterálne, ako je perorálne alebo rektálne, transdermálne a parenterálne podávanie cicavcom, vrátane človeka, na liečenie ochorení závislých od endotelínu, keď táto kompozícia obsahuje účinné množstvo farmakologicky aktívnej zlúčeniny podľa predloženého vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľné soli, samotné alebo v kombinácii s jedným alebo viacerými farmaceutický prijateľnými nosičmi.

Farmakologicky aktívne zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú vhodné na výrobu farmaceutických kompozícií obsahujúcich ich účinné množstvo spolu s prísadami alebo nosičmi vhodnými buď na enterálnu alebo parenterálnu aplikáciu. Výhodné sú tablety a želatínové tobolky obsahujúce aktívne činidlo spolu s a) riedidlami, ako je napríklad laktóza, dextróza, sacharóza, manitol, sorbitol, celulóza a/alebo glycín; b) lubrikanty, ako je silika, mastenec, kyselina stearová, jej horečnaté a vápenaté soli a/alebo polyetylénglykol; pre tablety tiež c) spojivá, napríklad hlinitokremičitan horečnatý, škrobová pasta, želatína, tragakant, metylcelulóza, sodná soľ karboxymetylcelulózy a/alebo polyvinylpyrolidón; ak je to potrebné, d) činidlá uľahčujúce rozpad, ako sú napríklad škroby, agar, kyselina alginová alebo jej sodná soľ alebo šumivé zmesi; a/alebo e) absorbenty, farbivá, príchute a sladidlá. Injikovateľné kompozície sú výhodne vodné izotonické roztoky alebo suspenzie a čapíky sa výhodne pripravia z mastných emulzií alebo suspenzií. Uvedené kompozície môžu byť sterilizované a/alebo môžu obsahovať prísady, ako sú konzervačné látky, stabilizátory, zvlhčujúce činidlá alebo emulgačné činidlá, látky podporujúce rozpúšťanie, soli na reguláciu osmotického tlaku a/alebo pufre. Ďalej môžu kompozície obsahovať iné terapeuticky účinné látky. Uvedené kompozície sa pripravia pomocou bežných zmiešavacích, granulačných alebo poťahovacích spôsobov a obsahujú 0,1 až 75%, výhodne 1 až 50% aktívnej zložky.

Vhodné prostriedky na transdermálnu aplikáciu obsahujú účinné množstvo zlúčeniny podľa predloženého vynálezu s nosičom. Medzi výhodné nosiče patria farmakologicky prijateľné rozpúšťadlá, ktoré napomáhajú prechodu cez pokožku pacienta. Typicky sú transdermálne kompozície vo forme obväzu obsahujúceho vonkajšiu časť, zásobník obsahujúci zlúčeninu, prípadne s nosičom, prípadne bariéru kontrolujúcu rýchlosť uvoľňovania zlúčeniny na pokožku pacienta kontrolovanou a vopred určenou rýchlosťou počas dlhšieho časového úseku a časť upevňujúcu prostriedok na pokožku.

Jednotková dávka pre cicavce s hmotnosťou 50 až 70 kg obsahuje 5 až 100 mg aktívnej zložky. Dávkovanie aktívnej zlúčeniny závisí od druhu teplokrvného živočícha (cicavca), telesnej hmôt39 nosti, veku a konkrétneho stavu a od formy podávania.

Nasledujúce príklady sú určené na ilustráciu predloženého vynálezu a nie je ich možné považovať za jeho obmedzenie. Teploty sú udané v stupňoch Celzia. Ak nie je uvedené inak, všetky odparovania sa uskutočňujú za zníženého tlaku, výhodne pri tlaku 2 až 13,3 kPa. Optická otáčavosť sa meria pri teplote miestnosti pri 589 nm (D čiara sodíka) alebo pri iných vlnových dĺžkach, ktoré sú upresnené v príkladoch.

Predpony R a S sa používajú na označenie absolútnej konfigurácie na každom asymetrickom centre. L-Aminokyseliny majú podľa vynálezu konfiguráciu S. Stereochemická konfigurácia, ktorá je označená pri produktoch v príkladoch, je pri príslušných štruktúrnych vzorcoch uvedená bežným spôsobom.

Používajú sa skratky, ktoré sú v tejto oblasti bežné, napríklad BOP činidlo je skratka pre benzotriazol-l-yloxy-tris(dimetylamino) fosfóniumhexafluorofosfát, HOAT je skratka pre 1-hydroxy-7-azabenzotriazol, HOBT je skratka pre 1-hydroxybenzotriazol, EDCI je skratka pre hydrochlorid l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidu, DCC je skratka pre dicyklohexylkarbodiimid.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Príprava α-brómkarboxylových kyselín (a) 5,00 g (38,1 mmol) L-norleucínu (aS-aminohexánovej kyseliny) a 22,7 g (191 mmol) bromidu draselného sa pri teplote miestnosti rozpustí v 50 ml vody. Potom sa pridá 10,8 ml (95,5 mmol) vodného 48% roztoku kyseliny bromovodíkovej a zmes sa ochladí v kúpeli z ľadu a chloridu sodného na -12°C. Potom sa banka vybaví prikvapkávacím lievikom obsahujúcim 3,16 g (45,7 mmol) dusitanu sodného rozpusteného v 20 ml vody. Roztok dusitanu sodného sa nechá kvapkať do reakčnej zmesi počas 30 minút. Keď sa skončí pridávanie dusitanu sodného, zmes sa mieša ďalších 45 minút, prevedie sa do deliaceho lievika a zriedi sa etylacetátom. Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa dvakrát extrahuje etylacetátom. Spojené etylacetátové vrstvy sa trikrát premyjú nasýteným vodným roztokom hydrogensíričitanu sodného (odstránenie žltej farby), sušia sa nad síranom sodným a odparia sa do sucha, pričom sa získa bezfarebný olej, ktorý sa suší za vysokého vákua a získa sa aS-brómhexánová kyselina. ¹H NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 10,4 (s, 1 H), 4,24 (t, 1 H), 1,92-2,17 (m, 2 H),

1, 32-1, 55 (m, 4 H), 0,93 (t, 3 H).

Podobným spôsobom sa pripraví:

(b) aR-brómhexánová kyselina; ¹H NMR (250 MHz, deuterochloroform) Ô 9,80 (s, 1 H), 4,24 (t, 1 H), 1,81-2,26 (m, 2 H), 1,32-1,55 (m, 4 H) , 0,93 (t, 3 H) .

(c) aS-bróm-PR-metylpentánová kyselina; ^ΧΗ NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 10,88 (s, 1 H), 4,29 (d, 1 H), 1,86-2,09 (m, 0,5 H), 1,43-1,68 (m, 0,5 H), 1,24-1,43 (m, 2 H), 1,07 (d, 3 H), 0,95 (t, 3 H).

(d) aS-bróm-ps-metylpentánová kyselina; ^ΧΗ NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 10,35 (s, 1 H), 4,12 (d, 1 H), 1,98-2,10 (m, 0,5 H), 1,67-1,83 (m, 0,5 H), 1,24-1,48 (m, 2 H), 1,05 (d, 3 H), 0,92 (t, 3 H).

(e) aR-bróm-pR-metylpentánová kyselina; ^XH NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 10,65 (s, 1 H), 4,11 (d, 1 H), 1,99-2,10 (m,

0,5 H), 1,67-1,80 (m, 0,5 H), 1,22-1,44 (m, 2 H), 1,04 (d, 3 H), 0,91 (t, 3 H) .

(f) aR-bróm-ps-metylpentánová kyselina; ^ΣΗ NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 10,15 (s, 1 H), 4,27 (d, 1 H), 1, 90-2, 06 (m, 0,5 H), 1,43-1,54 (m, 0,5 H), 1,22-1,38 (m, 2 H), 1,03 (d, 3 H), 0,93 (t, 3 H).

(g) aR-bróm-y-metylpentánová kyselina; ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 9,81 (s, 1 H), 4,29 (d, 1 H), 1,92 (t, 2 H),

1,72-1,89 (m, 1 H), 0,97 (d, 3 H), 0,92 (d, 3 H).

(h) aS-bróm-y-metylpentánová kyselina; ¹H NMR (250 MHz, deutero-

chloroform) & 9,94 (s, 1 H),	4,35 (d, 1 H),	1,94 (t, 2 H),
1,69-1,93 (m, 1 H), 0,94 (d, 3	H), 0,89 (d, 3 H).
(i) aR-bróm-y-tiometylbutánová	kyselina; ^XH NMR	(250 MHz, deute-
rochloroform) δ 9,56 (s, 1 H)	, 4,50 (dd, 1 H)	, 2,57-2,76 (m,
2 H), 2,22-2,43 (m, 2 H) , 2,11	(s, 3 H) .
(j) aS-bróm-y-tiometylbutánová	kyselina; ^XH NMR	(250 MHz, deute-
rochloroform) δ 10,18 (s, 1 H	) , 4,50 (dd, 1 H)	, 2,56-2,76 (m,
2 H), 2,20-2,43 (m, 2 H) , 2,11	(s, 3 H) .
(k) aR-brómpentánová kyselina;	^XH NMR (250 MHz,	deuterochloro-
form) δ 10,06 (s, 1 H), 4,25	(dd, 1 H), 1,91	-2,15 (m, 2 H),

1, 34-1, 62 (m, 2 H), 0,97 (t, 3 H).

(l) aS-brómpentánová kyselina; ^TH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 10,70 (s, 1 H), 4,25 (dd, 1 H), 1,93-2,14 (m, 2 H), 1,34-1, 62 (m, 2 H), 0,96 (t, 3 H).

(m) aR-bróm-pR-metoxybutánová kyselina; ¹H NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 8,62 (s, 1 H), 4,35 (d, 1 H), 4,77 (p, 1 H), 3,43 (s, 3 H), 1,32 (d, 3 H) .

(n) aR-brómpropánová kyselina acid; ¹H NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 9,76 (s, 1 H), 4,40 (kv, 1 H), 1,85 (d, 3 H).

(o) aR-bróm-ps-hydroxybutánová kyselina; ^ΣΗ NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 6,60 (široký s, 2 H) , 4,28 (d, 1 H), 4,13-4,21 (m, 1 H), 1,33 (d, 3 H).

(p) aS-bróm-PR-hydroxybutánová kyselina; ^TH NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 6,66 (široký s, 2 H) , 4,29 (d, 1 H), 4,10-4,21 (m, 1 H) , 1,34 (d, 3 H) .

(q) a-bróm-p-fenylpropiónová kyselina 10; ^ΣΗ NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,25 (m, 5 H), 4,40 (t, 1 H), 3,45 (dd, 1 H),

3,25 (dd, 1 H); IČ (dichlórmetán, cm¹) 1755, 1722, 1603, 1495.

(r) a-bróm-p-naftalén-2-yl-propiónová kyselina; ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,50-7,90 (m, 4 H), 7,25-7,50 (m, 3 H), 4,50 (t, 1 H), 3,55-3,65 (m, 1 H), 3,25-3,45 (m, 1 H); IČ (dichlórmetán, cm'¹) 1752, 1720, 1599, 1510, 1147, 822. [<x]_D +12,146 (10,55 mg/ml v dichlórmetáne).

(s) 3-bifenyl-4-yl-a-brómpropiónová kyselina; ^ΧΗ NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,20-7,60 (m, 9 H), 4,45 (t, 1 H), 3,50 (dd, 1 H), 3,25 (dd, 1 H).

(t) a-bróm-p-cyklohexylpropiónová kyselina; biela pevná látka;

NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 9,24 (s, 1 H), 4,01 (s, 1

H), 2,03-2,10 (m, 1 H), 1,50-1,95 (m, 5 H), 0,94-1,36 (m, 5 H); IČ (KBr, cm'¹) 1753, 1716, 1112. [a]_D +36,104 (10,1 mg/ml v dichlórmetáne) .

Príklad 2 (a) 2,54 g (4,67 mmol) surového metylesteru aS-brómhexanoylcykloleucyl-L-bifenylalanínu sa pri teplote miestnosti rozpustí v dimetylformamide. K roztoku sa pridá 2,67 g (23,4 mmol) tioacetátu draselného. Reakčná zmes sa mieša 4 hodiny a potom sa zriedi éterom a premyje sa postupne štyrikrát 250 ml vody a raz 200 ml solanky. Éterová fáza sa potom suší nad síranom sodným a odparí sa, pričom sa získa hnedý zvyšok. Surový produkt sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 30% etylacetát/hexán a získa sa metylester aR-(acetyltio)-hexanoylcykloleucyl-L-bifenylalanínu vo forme bieleho prášku; ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,18-7,60 (m, 9 H), 7,05 (d, 1 H), 6,40 (s, 1 H), 4,83 (dd, 1 H), 3,82 (s, 3 H), 1, 45-2,24 (m, 10 H), 1,25-1,32 (m, 4 H).

Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

20,0 g (155 mmol) cykloleucínu (1-amino-l-cyklopentánkarboxylovej kyseliny), sa pri teplote miestnosti prevedie do 150 ml absolútneho metanolu a získa sa zakalený biely roztok. Potom sa roztokom 15 minút prebubláva plynný chlorovodík, banka sa vybaví pneumatickým miešadlom a zmes sa mieša ďalších 5 hodín a 45 minút pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa odparí do sucha a ďalej sa suší vo vákuu 30 minút a získa sa biela pevná látka. Biely prášok sa trituruje éterom a potom sa filtruje. Po premytí ďalším éterom sa biela pevná látka suší za vysokého vákua cez noc a získa sa hydrochlorid metylesteru cykloleucínu.

27,0 g (151 mmol) hydrochloridu metylesteru cykloleucínu sa pri teplote miestnosti prevedie do 250 ml dichlórmetánu a získa sa zakalený roztok. Roztok sa ochladí v ľadovom kúpeli na 0°C a potom sa za energického miešania počas 5 minút pridá 44,3 ml (317 mmol) trietylamínu. Potom sa pridá 69,2 g (317 mmol) čistého di-terc-butyldikarbonátu a zmes sa nechá zohriať na teplotu miestnosti a mieša sa 16 hodín. Surová reakčná zmes sa odparí do sucha a získa sa biela pevná látka, ktorá sa potom rozpustí v 200 ml 90% tetrahydrofuránu vo vode. K tomuto číremu bezfarebnému roztoku sa pridá 25,6 ml (317 mmol) pyridínu a reakčná zmes sa mieša 2 hodiny pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa odparí, pričom sa získa svetložltý zvyšok, ktorý sa prevedie do etylacetátu a postupne sa premyje dvakrát vodou, dvakrát IM kyselinou chlorovodíkovou, dvakrát nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a dvakrát solankou. Organická fáza sa potom suší nad síranom sodným a odparí sa, pričom sa získa metylester N-terc-Boc-cykloleucínu; NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 4,85 (s, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 2,14-2,15 (m, 2 H), 1,81-1,91 (m, 2 H), 1,73-1,80 (m, 4 H), 1,42 (s, 9 H).

25,5 g (105 mmol) metylesteru N-terc-Boc-cykloleucínu sa pri teplote miestnosti rozpustí v 900 ml tetrahydrofuránu. Potom sa za rýchleho miešania pridá 420 ml (420 mmol) l,0M vodného roztoku hydroxidu lítneho. Po 16 hodinách miešania sa tetrahydrofurán odstráni na rotačnej odparke, vodná fáza sa premyje dvakrát dichlórmetánom a okyslí sa pomocou koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej na pH 1. Produkt sa extrahuje etylacetátom. Organic44 ká fáza sa suší nad síranom sodným a potom sa odparí do sucha a získa sa číry belavý olej, ktorý sa suší za vysokého vákua a získa sa N-terc-Boc-cykloleucín vo forme bielej amorfnej peny;

^XH NMR (250 MHz, dimetylsulfoxid) δ 12,10 (s, 1 H), 7,09 (s, 1

H), 1,90-1,98 (m, 4 H), 1,60 (s, 4 H), 1,35 (s, 9 H).

50,0 g (146 mmol) N-terc-Boc-L-bifenylalanínu sa pri teplote miestnosti rozpustí v 300 ml absolútneho metanolu a získa sa číry a bezfarebný roztok. Potom sa roztokom 15 minút prebubláva plynný chlorovodík, čím vznikne zakalený biely roztok. Banka sa vybaví pneumatickým miešadlom a roztok sa mieša 3 hodiny pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa odparí a potom sa umiestni na 30 minút do vysokého vákua a získa sa velmi svetložltý prášok, ktorý sa trituruje 550 ml éteru a potom sa filtruje, pričom sa získa biela pevná látka, ktorá sa premyje ďalšími 300 ml éteru. Biely prášok sa suší za vysokého vákua cez noc a získa sa hydrochlorid metylesteru L-bifenylalanínu; ¹H NMR (250 MHz, dimetylsulfoxid) δ 8,67 (s, 3 H), 7,31-7,68 (m, 9 H), 4,32 (t, 1 H), 3,70 (s, 3 H), 3,24 (t, 2 H).

18,5 g (80,7 mmol) N-terc-Boc-cykloleucínu sa pri teplote miestnosti rozpustí v 400 ml dichlórmetánu. Za energického miešania sa postupne pridá : 25,9 g (88,7 mmol) hydrochloridu metylesteru L-bifenylalanínu; 16,8 ml (121 mmol) trietylamínu,

12,1 g (88,7 mmol) HOAt a 30,9 g (161 mmol) kondenzačného činidla EDCI rozpusteného vo vode. Po 18 hodinách miešania sa hnedá zmes zriedi éterom a premyje sa trikrát vodou, dvakrát IM kyselinou chlorovodíkovou, dvakrát nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a dvakrát solankou. Organická fáza sa potom suší nad síranom sodným a odparí sa do sucha. Získaná biela pevná látka sa potom suší za vysokého vákua a získa sa metylester N-terc-Boc-cykloleucyl-L-bifenylalanínu; ^XH NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 7,17-7,56 (m, 10 H), 4,87 (dd, 1 H), 4,74 (s, 1 H), 3,69 (s, 3 H), 3,14 (dd, 2 H), 2,14-2,25 (m, 2 H), 1,60-1,90 (m, 6 H), 1,38 (s, 9 H).

36,0 g (77,1 mmol) metylesteru N-terc-Boc-cykloleucyl-L-bifenylalanínu sa pri teplote miestnosti rozpustí v 400 ml zmesi 3:1 dichlórmetánu a éteru a získa sa poločíry roztok. Za rýchleho miešania sa roztokom prebubláva 15 minút plynný chlorovodík, čím vznikne zakalený biely roztok. Banka sa vybaví pneumatickým miešadlom a roztok sa mieša 3,5 hodiny pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa odparí a potom sa umiestni do vysokého vákua na 30 minút a získa sa svetložltá amorfná pevná látka. Pevná látka sa rozpustí v teplom dichlórmetáne a kryštalizuje sa pridaním hexánu. Belavá pevná látka, ktorá sa v roztoku zráža, sa filtruje, premyje sa studeným hexánom a suší sa za vysokého vákua a získa sa hydrochlorid metylesteru cykloleucyl-L-bifenylalanínu; ¹H NMR (250 MHz, dimetylsulfoxid) δ 8,71 (d, 1 H), 8,18 (s, 3 H), 7,31-7,65 (m, 9 H) , 4,55-4,65 (m, 1 H) , 3,66 (s, 3 H) , 3,00-3,23 (m, 2 H), 2,05-2,22 (m, 2 H), 1,62-2,00 (m, 6 H).

2,00 g (4,96 mmol) hydrochloridu metylesteru cykloleucyl-Lbifenylalanínu, 1,06 g (5,46 mmol) 2S-brómhexánovej kyseliny a 743 mg (5,46 mmol) HOAt sa pri teplote miestnosti rozpustí v 30 ml dichlórmetánu. K roztoku sa pridá 1,18 ml (8,43 mmol) trietylamínu, 1,91 g (9,92 mmol) hydrochloridu 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu (EDCI) ako kondenzačného činidla a reakčná zmes sa mieša 15 hodín. Reakčná zmes sa potom zriedi éterom a postupne sa premyje trikrát vodou, dvakrát IM roztokom kyseliny chlorovodíkovej, dvakrát nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a dvakrát solankou. Éterová fáza sa potom suší nad síranom sodným a odparí sa, pričom sa získa metylester aS-brómhexanoylcykloleucyl-L-bifenylalanínu vo forme svetložltej pevnej látky.

(b) Podobným spôsobom sa pripraví metylester aS-(acetyltio)pentanoylcykloleucyl-L-bifenylalanínu, ktorý má teplotu topenia 130-134°C.

Príklad 3

HS

189 mg (0,351 mmol) metylesteru 2R-(acetyltio)hexanoylcykloleucyl-L-bifenylalanínu sa pri teplote miestnosti rozpustí v 4 ml metanolu. Potom sa pridá 1,4 g (1,4 mmol) vodného roztoku l,00M hydroxidu lítneho. Číra bezfarebná zmes sa mieša dve hodiny a potom sa okyslí pomocou IM roztoku kyseliny chlorovodíkovej na pH 1, čím vznikne biela zrazenina. Biela pevná látka sa extrahuje etylacetátom, premyje sa solankou, suší sa nad síranom sodným a odparí sa do sucha, pričom sa získa belavá pevná látka, ktorá sa ďalej suší za vysokého vákua pri 50°C a získa sa

3-bifenyl-4-yl-2-{ [1-(2R-merkaptohexanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina s teplotou topenia 104-107°C.

Príklad 4

HO

HS

500 mg (0,94 mmol) metylesteru a.R-bróm^S-hydroxybutanoylcykloleucyl-L-bifenylalanínu sa rozpustí v 3 ml metanolu a reaguje s 530 mg (9,4 mmol) hydrátu hydrogensulfidu sodného pri teplote miestnosti cez noc. Reakčná zmes sa odparí do sucha a získa sa žltá pevná látka, ktorá sa prevedie do etylacetátu, okyslí sa pomocou IM roztoku kyseliny chlorovodíkovej na pH 1 a fázy sa rozdelia. Organická fáza sa premyje solankou, suší sa nad síranom sodným a odparí sa do sucha, pričom sa získa žltý olej. Po sušení za vysokého vákua sa získa metylester aS-merkapto^S-hydroxybutanoylcykloleucyl-L-bifenylalanínu;

^XH NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 7,16-7,54 (m, 10 H), 6,24 (s, 1 H), 4,87 (dd, 1 H), 3,72-3, 90 (m, 1 H), 3,71 (s, 3 H),

3,08-3,21 (m, 2 H), 3,00 (dd, 1 H), 2,36 (s, 1 H), 1,68-2,41 (m, 9 H) , 1,25 (d, 3 H) .

Východisková látka sa pripraví z aR-bróm-ps-hydroxybutánovej kyseliny.

Príklad 5

Podobným spôsobom, ako je opísané v predchádzajúcich príkladoch sa pripravia nasledujúce zlúčeniny vzorca

kde (a) Ra = aS-merkaptohexanoylová skupina; teplota topenia 159-162°C;

(b) Ra = aR-merkapto-pR-metylpentanoylová skupina; teplota topenia 172-174°C;

(c) Ra = aR-merkapto-pS-metylpentanoylová skupina; teplota topenia 108-116°C;

(d) Ra = aS-merkapto-pR-metylpentanoylová skupina; teplota topenia 190-191°C;

(e) Ra = aS-merkapto^S-metylpentanoylová skupina; teplota topenia 142-145°C;

(f) Ra = aS-merkapto-y-metylpentanoylová skupina; teplota topenia 187-189°C;

(g) Ra = aR-merkapto-y-metylpentanoylová skupina; teplota topenia 120-124°C;

(h) Ra = aS-merkapto-y-metyltiobutanoylová skupina; teplota topenia 159-163°C;

(i) Ra = aR-merkapto-y-metyltiobutanoylová skupina; teplota topenia 159-163°C;

(j) Ra = aS-perkaptopentanoylová skupina; teplota topenia 180-182°C;

(k) Ra = aR-merkaptopentanoylová skupina; teplota topenia 77-85°C;

(l) Ra = aR-merkapto-pR-metoxybutanoylová skupina; teplota topenia 130-132°C;

(m) Ra = aS-merkaptopropanoylová skupina; teplota topenia 185-187°C;

(n) Ra = aS-merkapto-pS-hydroxybutanoylová skupina; teplota topenia 120-124°C;

(o) Ra = aR-merkapto-pR-hydroxybutanoylová skupina; teplota topenia 155-160°C;

(p) Ra = aS-merkapto-p-metylbutanoylová skupina; teplota topenia 180-181’C.

Príklad 6

Podobným spôsobom, ako je opísané v predchádzajúcich príkladoch, sa pripravia nasledujúce zlúčeniny:

(a)

H OH

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino} -3-naftalen-2-ylpropiónová kyselina; teplota topenia 197-195°C.

(b)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino }-3-naftalen-l-ylpropiónová kyselina; teplota topenia 207°C.

(c)

3-Bicyklohexyl-4-yl-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl] aminoIpropiónová kyselina; teplota topenia 209-210°C.

3-Bicyklohexyl-4-yl-2-terc-butoxykarbonylaminopropiónová kyselina, ktorá je medziproduktom, sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

Suspenzia 5,0 g 3-bifenyl-4-yl-2-terc-butoxykarbonylaminopropiónovej kyseliny a 0,625 g oxidu platiničitého v 40 ml etanolu sa 2 hodiny mieša pri teplote miestnosti pri tlaku vodíka 0,3 MPa. Katalyzátor sa odfiltruje a premyje sa dvakrát etanolom. Etanolový roztok sa potom odparí vo vákuu a zvyšok sa rekryštalizuje z hexánu a získa sa medziprodukt; NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 5, 50-6, 60 (šs, 1 H), 4,90 (d, 1 H), 4,05-4,30 (m, 1 H), 1,80-2,0 (m, 1 H), 1,55-1,80 (m, 6 H), 1,25-1,55 (m, 7 H), 1,47 (s, 9 H), 1,05-1,25 (m, 5 H), 0,75-1,05 (m, 3 H).

(d)

3-(4-Cyklohexylfenyl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)-cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina; teplota topenia 201-202°C.

3-(4-Cyklohexylfenyl)-2-terc-butoxykarbonylaminopropiónová kyselina, ktorá je medziproduktom, sa získa nasledujúcim spôsobom:

Suspenzia 1,0 g 3-bifenyl-4-yl-2-terc-butoxykarbonylamino— propiónovej kyseliny a 0,25 g 5% rodia na uhlí v 10 ml etanolu sa mieša 24 hodín pri tlaku vodíka 0,3 MPa. Katalyzátor sa filtruje a dvakrát sa premyje etanolom. Etanolová fáza sa potom odparí vo vákuu a zvyšok sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli (hexán:etylacetát:kyselina octová, 80:20:1) a získa sa biela pevná látka: ¹H NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 8,25 (šs, 2 H), 7,04 (s, 4 H), 6,05 (šs, 0,25 H), 4,95 (d, 0,5 H), 4,55 (d, 0,5 H), 4,35 (šm, 0,25 H), 2,75-3,20 (m, 1,5 H), 2,35-2,60 (m, 1 H), 1,55-1,90 (m, 6 H), 1,45 (s, 9 H), 1,20-1,50 (m, 4 H) .

(e)

3-Bifenyl-4-yl-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)indán-2— karbonyl]amino}propiónová kyselina; teplota topenia 203-205°C.

(f)

3-Bifenyl-4-yl-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutyrylamino)indán-1-karbonyl]aminoIpropiónová kyselina; teplota topenia 115-120°C.

(g)

3-Bifenyl-4-yl-2-{[1-(2-merkapto-3-fenylpropionylamino)cyklopentánkarbonyl]aminoIpropiónová kyselina; teplota topenia 212-213°C.

3-Bifenyl-4-yl-2-{[1-(2-merkapto-3-naftalen-2-ylpropionylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina; teplota topenia 166-168°C.

(i)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-(5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-yl)propiónová kyselina; teplota topenia 190-192°C.

Metylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-(5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-yl)propionovej kyseliny, ktorý je medziproduktom, sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

Suspenzia 400 mg (0,908 mmol) 2-[(1-fcerc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-naftalen-2-ylpropiónovej kyseliny a 400 mg oxidu platiničitého v 40 ml metanolu sa mieša 39 hodín pri tlaku vodíka 0,29 MPa. Katalyzátor sa odfiltruje a čistí sa pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 33% etylacetátu v hexáne a získa sa medziprodukt vo forme bielej pevnej látky: NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,10 (s, 1 H), 6,90 (d, 1 H), 6,80 (d, 2 H), 4,80 (kv, 1 H), 3,75 (s, 3 H), 3,00 (d,

Η), 2,70 (šs, 2 Η), 2,10-2,40 (m, 2 Η), 1,65-1,80 (m, 14 Η)

1,37 (s, 9 Η).

(j)

HS

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino} -3- (5,6,7,8-tetrahydronaftalen-l-yl)propiónová kyselina; teplota topenia 158-164°C.

Hydrochlorid metylesteru 2-amino-3-(5,6,7,8-tetrahydronaftalen— —1—yl)propiónovej kyseliny sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

Suspenzia 500 mg (1,79 mmol) hydrochloridu metylesteru

1-naftylalanínu a 170 mg oxidu platiničitého v 20 ml metanolu sa mieša 3,5 hodiny pri tlaku vodíka 0,29 MPa. Katalyzátor sa odfiltruje a filtrát sa odparí vo vákuu a získa sa medziprodukt vo forme pevnej látky: ¹H NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 8,50-9,00 (šs, 1 H), 6,95-7,05 (m, 3 H), 4,20 (šs, 1 H), 4,20 (šd, 2 H), 3,45 (s, 3 H), 3,15-3,30 (šm, 1 H (1/2 CH₂) , druhá 1/2 CH₂ na 3,45, 1 H), 2, 65-2,75 (m, 4 H), 1, 65-1,90 (m, 4 H).

(k)

HS

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-(2-metoxybifenyl-4-yl)propiónová kyselina; teplota topenia

121-123°C.

Hydrochlorid metylesteru 2-amino-3-(2-metoxybifenyl-4-yl)propiónovej Kyseliny, ktorý je medziproduktom, sa pripraví zo

4-brómmetyl-2-metoxybifenylu podľa postupu opísaného vo Williams a Im (J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 9726). Biela pevná látka; ^TH NMR (250 MHz, deuterometanol) δ 7,25-7,47 (m, 6 H), 6,96 (s, 1 H), 6,92 (d, 1 H), 4,39 (dd, 1 H), 3,86 (s, 3 H), 3,81 (s, 3 H), 3,19 (dd, 1/2 CH₂ ABX, 1 H, druhý H je skrytý v nerozlíšenom piku).

4-Brómmetyl-2-metoxybifenyl, ktorý je východiskovou látkou, sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

3-Metoxy-4-trifluórmetánsulfonyloxybenzaldehyd sa pripraví zo 4-hydroxy-3-metoxybenzaldehydu; olej; ¹H NMR (250 MHz, deuterometanol) δ 9,95 (s, 1 H), 7,55 (d, 1 H), 7,50 (dd, 1 H), 7,40 (d, 1 H), 3,97 (s, 3 H). Prevedie sa na 2-metoxybifenyl-4-karboxaldehyd podľa postupu zverejneného v Chem. Rev. 1995, 95, 2457-83 na kondenzáciu triflátov tyrozínu a borónových kyselín, číry, bezfarebný olej; ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 10,00 (s, 1 H), 7,30-7,60 (m, 8 H), 3,87 (s, 3 H).

10,0 ml l,0M DIBAL-H (diizobutylalumíniumhydrid) v toluéne sa pridá k roztoku 1,34 g (6,3 mmol) 2-metoxybifenyl-4-karboxaldehydu v 15 ml tetrahydrofuránu. Odstráni sa chladiaci kúpeľ a reakčná zmes sa mieša 30 minút. Reakčná zmes sa rozloží pridaním 3 ml metanolu a získaná zmes sa extrahuje medzi etylacetát a IN roztok kyseliny chlorovodíkovej. Organická fáza sa oddelí a premyje sa soľankou, suší sa nad síranom horečnatým, filtruje sa a odparí, pričom sa získa 2-metoxybifenyl-4-yl)metanol vo forme číreho bezfarebného oleja: ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,45-7,55 (m, 2 H), 7,20-7,45 (m, 4 H), 6,95-7,05 (m, 2 H), 4,75 (s, 2 H), 3,85 (s, 3 H); IČ (dichlórmetán, cm^-1) 3602, 1612, 1279, 1164, 1041, 859, 826.

1,24 g (7,6 mmol) NBS (N-brómsukcínimidu) sa pri 0°C po malých častiach pridá k 1,35 g (6,3 mmol) (2-metoxybifenyl-4-yl)metanolu a 2,0 g (7,0 mmol) trifenylfosfínu v 15 ml dichlórmetánu. Odstráni sa chladiaci kúpeľ a reakčná zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa odparí vo vákuu a zvyšok sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 10% etylacetátu v hexáne a získa sa 4-brómmetyl-2-metoxybifenyl vo forme číreho bezfarebného oleja: ^{3 4}Η NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,45-7,55 (m, 2 H), 7,20-7,45 (m, 4 H), 7,05 (dd, 2 H), 7,00 (d, 1 H), 4,50 (s, 2 H), 3,80 (s, 3 H).

(D

3-Bifenyl-4-yl-2-{[1-(3-bifenyl-4-yl-2-merkaptopropionylamino)cyklopentánkarbonyl]aminoJpropiónová kyselina; teplota topenia 187-189°C.

(m)

3- Bifenyl-4-yl-2-{[4-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)tetrahydropyrán-4-karbonyl]amino}propiónová kyselina; pripraví sa zo

4- aminotetrahydropyrán-4-karboxylovej kyseliny (Lewis a kol., J.

Med. Chem. 1978, 21, 1070); teplota topenia 161-163°C.

(n)

3-(4-Cyklohexylfenyl)-2-([1-(2-merkapto-3-fenylpropionylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina; teplota topenia 172-175°C.

(o)

3- Bifenyl-4-yl-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)tetrahydrotiopyrán-4-karbonyl]amino}propiónová kyselina; pripraví sa zo

4- aminotetrahydrotiopyrán-4-karboxylovej kyseliny (J. Med. Chem. 1978, 21, 1070); teplota topenia 203-204°C.

(P)

3- (2,2'-Dimetoxybifenyl-4-yl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]aminoIpropiónová kyselina; teplota topenia 173-175°C.

Východisková látka, 4-brómmetyl-2,2'-dimetoxybifenyl, sa pripraví podlá postupu opísaného skôr na prípravu 4-brómmetyl-2-metoxybifenylu; ¹H NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,35 (dt, 1 H), 7,20-7,28 (m, 2 H), 6,90-7,10 (m, 4 H), 4,53 (s, 2 H),

3,78 (s, 3 H), 3,76 (s, 3 H).

(q)

3-(4-Izoxazol-5-yl-fenyl)-2-{[1-(2-merkaptopentanoylamino)cyklopentánkarbonyl] aminojpropiónová kyselina; teplota topenia 95-108°C.

Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

560 mg (0,232 mmol) bis(benzoyl)peroxidu sa pridá k roztoku 2,17 g (13,65 mmol) 5-(4-metylfenyl)izoxazolu (Lin, Y.-i.; Lang, Jr., S. A. J. Org. Chem. 1980, 45, 4857) a 2,43 g (13,65 mmol)

N-brómsukcínimidu v 64 ml tetrachlórmetánu a reakčná zmes sa zohrieva cez noc do varu pod spätným chladičom. Reakčná zmes sa odparí vo vákuu a produkt sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za' elúcie zmesou 20% etylacetátu v hexáne (R^ť = 0,6) a získa sa 5-(4-brómmetylfenyl)izoxazol: ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 8,30 (d, 1 H), 7,73 (d, 2 H), 7,45 (d, 2 H), 6,51 (d, 1 H), 4,50 (s, 2 H).

Hydrochlorid 2-amino-3-(4-izoxazol-5-ylfenyl)propiónovej kyseliny sa pripraví podlá postupu opísaného v Stork a kol. (J. Org. Chem. 1976, 41, 3491) s použitím NaHMDS ako zásady, z

5-(4-brómmetylfenyl)izoxazolu; biela pevná látka; ^XH NMR (300 MHz, deuterometanol) δ 8,43 (d, 1 H), 7,86 (d, 2 H), 7,43 (d, 2 H), 6,81 (d, 1 H), 4,35 (t, 1 H), 4,25 (kv, 2 H), 3,21-3,34 (m, 2 H), 1,23 (t, 3 H).

Konverzia na etylester 2-acetylamino-3-(4-izoxazol-5-yl-fenyl)propiónovej kyseliny, po ktorej nasleduje enzymatická hydrolýza pomocou alkalázy, vedie k (S)-2-acetylamino-3-(4-izoxazol-5-yl-fenyl)propiónovej kyseline: ^XH NMR (300 MHz, deuterometanol) δ 8,37 (d, 1 H), 7,75 (d, 2 H), 7,36 (d, 2 H), 7,70 (d, 1 H), 4,71 (dd, 1 H), 3,26 (dd, 1 H), 3,00 (dd, 1 H), 1,91 (s, 3 H) , IČ (KBr, cm¹) 1734, 1621, 1549, 1512, 1466, 1192, 1127, 921, 778. [a]_D +55,509 (9,969 mg/ml metanol).

(r)

3-(4-Izoxazol-5-ylfenyl)-2-{[1-(2-merkapto-4-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónovej kyseliny; teplota tope59 nia 104-110°C.

Príklad 7

Pomocou 'postupov opísaných skôr sa pripravia nasledujúce zlúčeniny:

(a)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-(4'-chlórbifenyl-4-yl) propiónová kyselina; teplota topenia 177-179°C.

Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

3,0 g (12,2 mmol) hydrochloridu etylesteru tyrozínu a 2,8 g (12,2 mmol) N-Boc-cykloleucínu sa suspenduje v 10 ml dichlórmetánu. Pridá sa 1,65 g (12,2 mmol) HOBT, 3,02 g (14,6 mmol) DCC a 1,7 ml (12,2 mmol) trietylamínu a roztok sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa filtruje a dichlórmetán sa odparí vo vákuu. Zvyšok sa prevedie do etylacetátu, filtruje sa a postupne sa premyje IN roztokom kyseliny chlorovodíkovej, vodou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, potom sa suší nad síranom horečnatým, filtruje sa a odparí. Zvyšok sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 50% etylacetátu v hexáne a získa sa etylester 2- [ (1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3- (4— -hydroxyfenyl)propiónovej kyseliny; ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,97 (d, 2 H), 6,7 (d, 2 H), 7,51 (d, 1 H), 5,58 (s, 1 H), 4,70-4,80 (m, 2 H), 4,12 (kv, 2 H), 3,02 (d, 2 H), 2,07-2,35 (m, 2 H), 1,60-2,00 (m, 6 H), 1,40 (s, 9 H), 1,20 (t, 3H).

1,2 ml (7,1 mmol) anhydridu trifluórmetánsulfónovej kyseliny sa pri 0°C pomaly prikvapká k roztoku 2,70 g (6,4 mmol) etylesteru 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3- (4-hydroxyfenyl)propiónovej kyseliny a 0,7 ml (8,7 mmol) pyridínu v 20 ml dichlórmetánu a roztok sa mieša 1 hodinu pri 0°C. Reakčná zmes sa extrahuje medzi vodu a dichlórmetán. Organická fáza sa oddelí a premyje sa nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, suší sa nad síranom horečnatým, filtruje sa a odparí, pričom sa získa etylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-(4-trifluórmetánsulfonyloxyfenyl)propiónovej kyseliny vo forme hnedej pevnej látky; ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,25 (d, 2 H), 7,17 (d, 2 H), 4,80 (kv, 1 H), 4,75 (s, 1 H), 4,10 (dva kvartety, 2 H), 3,12 (ABX m, 2 H), 2,00-2,20 (m, 2 H), 1,60-2,00 (m, 6 H), 1,40 (s, 9 H),

1,18 (t, 3 H).

Pomocou Suzukiho kondenzačnej reakcie etylesteru 2-[(l-tercbutoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-(4-trifluórmetánsulfonyloxyfenyl)propiónovej kyseliny s p-chlórfenylborónovou kyselinou podľa modifikovaného postupu zverejneného Carlsonom a Shiehom (J. Org. Chem. 1992, 57, 379) s použitím PdCl₂(dppf) ako katalyzátora, K3PO4 ako zásady a DME ako rozpúšťadla, sa získa etylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-(4-chlórbifenyl)propiónovej kyseliny.

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3- (4'-metoxybifenyl-4-yl)propiónová kyselina; teplota topenia 179-181°C.

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-[4-(tiofen-3-yl)fenyl]propiónová kyselina; teplota topenia 177-179°C.

(d)

2-{[1-(2-Merkapto-3-fenylpropionylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-[4-(tiofen-3-yl)fenyl]propiónová kyselina; teplota topenia 190-192°C.

(e)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino} -3- [ 4- (tiofen-3-yl) fenyl] propiónová kyselina; teplota topenia 99-101°C.

Medziprodukt, etylester 2-[(terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-[4-(tiofen-3-yl)fenyl]propiónovej kyseliny, sa pripraví pomocou Suzukiho kondenzačnej reakcie nasledur júcim spôsobom:

ml banka s okrúhlym dnom sa naplní 500 mg (0, 905 mmol) etylesteru 2-{[terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino] -3-(4-trifluórmetánsulfonyloxyfenyl)propiónovej kyseliny, 232 mg (1,81 mmol) tiofén-3-borónovej kyseliny, 66 mg (0, 0905 mmol) PdCl₂(dppf), 768 mg (3,62 mmol) fosforečnanu draselného a 9 ml tetrahydrofuránu a reakčná zmes sa zohrieva 10 hodín do varu pod spätným chladičom a potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Reakčná zmes sa extrahuje medzi etylacetát a vodu a vodná fáza sa extrahuje etylacetátom. Spojené organické vrstvy sa premyjú solankou, sušia sa nad síranom horečnatým, filtrujú sa a odparia. Produkt sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 30% etylacetátu v hexáne.

(f)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-[4-(tiofen-2-yl)fenyl]propiónová kyselina; teplota topenia 179-181°C.

2-{[1-(2-Merkapto-3-fenylpropionylamino)cyklopentánkarbonyl]amino} -3- (4'-trifluórmetylbifenyl-4-yl)propiónová kyselina; teplota topenia 222-225°C.

(h)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3- (4'-trifluórmetylbifenyl-4-yl)propiónová kyselina; teplota topenia 235-236.

(i)

3-Bifenyl-3-yl-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl] amino} propiónová kyselina; teplota topenia 75-78°C.

(j)

3-[4-(Furan-2-yl)fenyl]-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina; teplota topenia 152-154°C.

Východisková látka, etylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-[4-(furan-2-yl)fenyl]propiónovej kyseliny sa pripraví z tri-n-butylfuran-2-yl-stanánu nasledujúcim spôsobom:

ml banka s okrúhlym dnom sa naplní 250 mg (0,48 mmol) metylesteru 2- [ (terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino] -3- (4-jódfenyl) propiónovej kyseliny, 196 mg (0,57 mmol) tri-n-butylfuran-2-yl-stanánu, 11 mg (0,012 mmol) Pd₂(dba)3, 30 mg (0,098 mmol) trifenylarzínu a 10 ml toluénu a reakčná zmes sa zohrieva cez noc do varu pod spätným chladičom a potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Reakčná zmes sa filtruje, zriedi sa etylacetátom a premyje sa polonasýteným vodným roztokom fluoridu draselného. Organická fáza sa premyje soľankou, suší sa nad síranom horečnatým, filtruje sa a odparí. Produkt sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 30% etylacetátu v hexáne; teplota topenia 107 až 112°C.

(k)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino} -3- [4- (pyrid-3-yl) fenyl] propiónová kyselina; teplota topenia

212-214°C.

(D

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-[4-(pyrid-3-yl)fenyl]propiónová kyselina; teplota topenia 207-208°C.

(m)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino) -3-[4-(pyrid-3-yl)fenyl]propiónová kyselina; teplota topenia

205-207°C.

(n)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-[4-(pyrid-3-yl)fenyl]propiónová kyselina; teplota topenia 210-211°C.

(o)

2-{[1-(2-Merkapto-3-cyklohexylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl] amino}-3-[4-(pyrid-3-yl)fenyl]propiónová kyselina; teplota topenia 243-244°C.

(P)

3-[4-(l-Acetylpiperid-3-yl)fenyl]-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbu61 tanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina; teplota topenia 190-192°C.

Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

Suspenzia 958 g etylesteru 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-{4-(pyrid-3-yl)fenylpropiónovej kyseliny a 958 mg 10% platiny na uhlí v 10 ml metanolu sa mieša 4 dni pri teplote miestnosti pri tlaku vodíka 0,3 MPa. Katalyzátor sa odfiltruje a premyje sa metanolom. Spojené organické fázy sa odparia vo vákuu. Zvyšok sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou etylacetátu, metanolu a kyseliny octovej 80:20:1 a získa sa etylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-[4-(piperid-3-yl)fenyl]propiónovej kyseliny; ¹H NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,00-7,10 (m, 4 H), 4,70-4,85 (m, 2 H), 4,10 (kv, 2 H), 3, 00-3, 35 (m, 3 H), 2, 60-2,70 (m, 2 H), 2,00-2,30 (m, 4 H), 1, 85-2,00 (m, 2H) , 1,50-1,80 (m, 8 H), 1,38 (s, 9 H), 1,16 (t, 3 H).

ml (0,70 mmol) acetylchloridu sa pomaly pridá k roztoku 277 mg (0,57 mmol) etylesteru 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-[4-(piperid-3-yl)fenyl]propiónovej kyseliny a 11 ml (0,79 mmol) trietylamínu v 2 ml dichlórmetánu. Reakčná zmes sa mieša 2 hodiny pri 0°C a potom sa extrahuje medzi nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného a dichlórmetán. Organická vrstva sa premyje soľankou, suší sa nad síranom horečnatým, filtruje sa a odparí. Zvyšok sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie etylacetátom a získa sa etylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-[4-(l-acetylpiperid-3-yl)fenyl]propiónovej kyseliny; ^XH NMR (300 MHz, deuterochloroform) δ 7,00-7,15 (m, 4 H), 4,80-4,90 (m, 1 H), 4,70 (št, 2 H), 4,15 (kv, 2 H), 3,00-3,15 (m,

3H), 2,45-2,70 (m, 2 H), 2,12, 2,08 (s každý, 3 H) , 1,95-2,40 (m, 6 H), 1,50-1,95 (m, 8 H), 1,40 (s, 9 H), 1,20 (t, 3 H).

Príklad 8

Príprava α-brómacylaminocyklopentánkarboxylových kyselín a ich esterov' (a)

OH

1-(2-Bróm-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarboxylová kyselina sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

5,60 g (18 mmol) metylesteru 1-(2-bróm-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarboxylovej kyseliny sa rozpustí v 40 ml metanolu. Pridá sa 37 ml IN roztoku hydroxidu sodného a roztok sa mieša pri teplote miestnosti 5 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu a zvyšok sa rozpustí vo vode a extrahuje sa trikrát dietyléterom. Vodná fáza sa okyslí 40 ml IN roztoku kyseliny chlorovodíkovej a produkt sa odfiltruje ako biela pevná látka; ^XH NMR (250 MHz, deuterometanol) δ 7,05 (s, 1 H), 4,15 (d, 1 H), 2,15-2,35 (m, 3 H), 1,85-2,00 (m, 2 H), 1,70-1,80 (m, 4 H), 1,00 (d, 3 H), 0,95 (d, 3 H); [a]_D +17,87 (10,38 mg/ml v metanole).

Metylester 1-(2-bróm-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarboxylovej kyseliny, ktorý je prekurzorom, sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

4,92 g (27 mmol) hydrochloridu metylesteru cykloleucínu a 7,72 g (27 mmol) diizopropylamóniovej soli 2-bróm-3-metylbutánovej kyseliny sa suspenduje v 50 ml dichlórmetánu. Pridá sa 3,74 g (27 mmol) HOAT a 6,20 g (30 mmol) DCC a roztok sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Reakčná zmes sa filtruje a dichlórmetán sa odparí vo vákuu. Zvyšok sa prevedie do etylacetátu, filtruje sa a postupne sa premyje IN roztokom kyseliny chlorovodíkovej, vodou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a soľankou, potom sa suší nad síranom horečnatým, filtruje sa a odparí. Zvyšok sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie zmesou 30% etylacetátu v hexáne a získa sa biela pevná látka. ^XH NMR (250 MHz, deuterometanol) δ 6,80 (s,

H), 4,25 (d, 1 H), 3,70 (s, 3 H), 2,10-2,45 (m, 3 H), 1,85-2,00 (m, 2 H), 1,75-1,85 (m, 4 H), 1,05 (d, 3 H), 0,95 (d, 3H); [a]_D +33,09 (10,35 mg/ml v dichlórmetáne).

nasledujúce zlúčeniny:

Podobným spôsobom sa pripravia

1-(2-Bróm-3-metylpentanoylamino)cyklopentánkarboxylová kyselina; biela pevná látka; ^XH NMR (250 MHz, deuterochloroform) δ 7,01 (s, 1 H), 4,89 (šs, 1 H), 4,47 (d, 1 H), 2,21-2,42 (m, 2 H), 1,90-2,20 (m, 3 H), 1,70-1,90 (m, 4 H), 1,30-1,50 (m, 2 H), 0,92 (d, 3 H) , 0,90 (t, 3 H); IČ (dichlórmetán, cm^-1) 1713, 1662, 1508, 1190. [a]_D +31,759 (10,130 mg/ml v dichlórmetáne).

(c)

OH

1-(2-Bróm-3-metylpentanoylamino)cyklopentánkarboxylová kyselina;

biela pevná látka;	^TH NMR (250 MHz, deuterometanol) δ	4,15	(d,
1 H) , 2,20-2,35 (m,	1 H), 2,05-2,15 (m, 1 H), 1,90-2,05	(m, 2	H),
1,70-1,85 (m, 6 H),	1,20-1,45 (m, 1 H), 0,98 (d, 3 H),	0, 95	(t,

H),

Príklad 9

Syntéza esterov biarylaminokyselín

Krok 1

Etylester 2-(benzhydrylidénamino)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)fenyl]propionovej kyseliny sa pripraví podľa postupu publikovaného Storkom (J. Org. Chem. 1976, 41, 3491), s použitím NaHMDS ako zásady, z 2-(4-brómmetylfenyl)-4,4,5, 5,-tetrametyl[1,3,2]dioxaborolanu. Biela, pevná látka; teplota topenia 120-121°C; ^ΧΗ NMR (250 MHz, deuterometanol) δ 7,57 (d, 2 H), 7,27-7,49 (m, 8 H), 7,03 (d, 2 H), 6,58 (d, 2 H), 4,23 (dd, 1 H), 4,18 (kv, 2 H), 3,23 (d, 1 H), 3,09 (dd, 1 H), 1,31 (s, 12 H), 1,24 (t, 3 H).

Krok 2

Etylester 2- (benzhydrylidénamino) -3- (4'—fluórbifenyl-4-yl) propionovej kyseliny sa pripraví podlá všeobecného postupu opísaného Satohom a kol. (Tetrahedron Letter Vol. 48, 7645 (1997)). 50 ml banka sa naplní 600 mg (1,01 mmol) boronátového medziproduktu z kroku 1, 247 mg (1,11 mmol) 1-fluór-4-jódbenzénu, 37 mg (0,051 mmol) PdClžídppf), 860 mg (4,04 mmol) K₃PO₄ a 10 ml DME. Reakčná zmes sa zohrieva 12 hodín do varu pod spätným chladičom, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a extrahuje sa medzi etylacetát a vodu. Organická fáza sa oddelí a premyje sa solankou, suší sa nad síranom horečnatým, filtruje sa a odparí. Zvyšok sa čistí pomocou chromatografie na silikagéli za elúcie gradientom zmesi 5-10% etylacetátu v hexáne a získa sa skôr uvedený imín vo forme svetlohnedého oleja. ^XH NMR (300 MHz, deuterochloroform) Ô 7,50-7,70 (m, 4 H), 7,25-7,40 (m, 8 H), 7,05-7,20 (m, 4 H), 6,55-6,70 (m, 2 H), 4,15-4,30 (m, 3 H), 3,15-3,35 (m, 2 H), 1,15-1,25 (dva t, 3 H).

Krok 3

Hydrochlorid etylesteru 2-amino-3-(4'-fluórbifenyl-4-yl)propiónovej kyseliny:

ml banka sa naplní 350 mg (0,775 mmol) etylesteru

2- (benzhydrylidénamino) -3- (4'-fluórbifenyl-4-yl) propiónovej kyseliny, 10 ml IN roztoku kyseliny chlorovodíkovej a 8 ml dietyléteru. Reakčná zmes sa mieša 12 hodín pri teplote miestnosti a potom sa extrahuje medzi éter a vodu. Vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa dvakrát éterom a potom sa odparí vo vákuu a získa sa produkt vo forme bielej pevnej látky; ^TH NMR (250 MHz, deuterometanol) δ 7,74 (d, 1 H), 7,55-7,65 (m, 4 H), 7,34 (d, 1 H), 7,27 (d, 1 H), 7,17 (t, 1 H), 4,20-4,40 (m, 3 H), 3,15-3,35 (m, 2 H), 1,25 (t, 3 H).

Biarylovou skupinou substituované estery aminokyselín, ktoré sú východiskovými látkami vedúcimi k produktom podľa nasledujúcich príkladov, sa pripravia podobným spôsobom.

Príklad 10

Kondenzácia 1- (2-bróm-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarboxylovej kyseliny (príklad 8) s hydrochloridom etylesteru 2-amino-3-(4'-fluórbifenyl-4-yl)propiónovej kyseliny (príklad 9) s použitím DCC, HOAT a trietylamínu v metylénchloride vedie k 3—(4'— -fluórbifenyl-4-yl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl] aminojpropiónovej kyseline; teplota topenia 196-198°C.

(b)

Podobným spôsobom sa pripraví

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino} -3- (4-pyrid-2-ylfenyl-4-yl) propiónová kyselina (z 2-jódpyridínu); teplota topenia 199-201°C.

(C)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino} -3-(4-pyrimidin-5-ylfenyl)propiónová kyselina (z 5 jódpyrimidínu); teplota topenia 214-215°C.

(d)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino} -3-(4-pyrimidin-5-ylfenyl)propiónová kyselina; teplota topenia 206-208°C.

(e)

Hydrochlorid 2-{[1-(2-merkapto-3-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl] amino}-3-(4-pyrimidin-5-ylfenyl)propiónovej kyseli74 ny; teplota topenia 170-184°C.

(f)

2-{[1-(2-Merkapto-4-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-(4-pyrimidin-5-ylfenyl)propiónová kyselina; teplota tope nia 192-195°C.

(g)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-(4-pyrid-4-ylfenyl)propiónová kyselina (zo 4-brómpyridí nu); teplota topenia 236-238°C.

(h)

3-[4-(5-Hydroxymetyltiofen-3-yl)fenyl]-2-{[1-(2-merkapto-3-me75 tylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina (zo 4-bróm-2-tiofénkarboxaldehydu); teplota topenia 155-158°C.

(i)

OMe

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-(3'-metoxybifenyl-4-yl)propiónová kyselina (z 1-jód-3-metoxybenzénu); teplota topenia 159-160°C.

(j)

3-(2', 3'-Dimetoxybifenyl-4-yl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]aminojpropiónovej kyseliny (z 1-trifluórmetylsulfonyloxy-2,3-dimetoxybenzénu); teplota topenia 83-86°C.

(k)

OMe

3- (3', 5'-Dimetoxybifenyl-4-yl) -2-{ [1- (2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino)propiónová kyselina; teplota to penia 150-152°C.

Príklad 11

Podobným spôsobom, ako je uvedené skôr, sa pripravia nasle dujúce zlúčeniny:

(a)

3- (2'-Hydroxybifenyl-4-yl)-2-{[1-(2-merkapto-4-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino]propiónová kyselina; teplota tope nia 215-217°C.

Východisková látka sa pripraví nasledujúcim spôsobom:

Boc-chránené boronofenylalanínové činidlo, etylester 2-(N -terc-Boc-amino)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)fenyl]propiónovej kyseliny (pozri Roberts a kol., Tetrahed ron Letters 1980, 21, 3435) sa kondenzuje s l-acetoxy-2-jódben zénom počas Suzukiho kondenzačnej reakcie, po ktorej nasleduj kondenzácia k metylesteru N-terc-Boc-cykloleucínu a získa sa me dziprodukt

metylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino] -3-(2'-hydroxybifenyl-4-yl) propiónovej kyseliny; ¹H NMR

(300 MHz, deuterometanol) δ 7,40	(d, 2 H), 7,20-7,26	(m, 4	H),
6,94-6,99 (m, 2 H), 5,79 (šs, 1	H) , 4,88 (škv, 1 H) ,	4,78	(s,
1 H) , 3,73 (s, 3 H) , 3,01-3,24	(m, 2 H), 2,10-2,35	(m, 2	H) ,

1,55-2,00 (m, 6 H), 1,40 (s, 9 H).

3- (2'-Fluórbifenyl-4-yl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina (z 1-fluór-2-jódbenzénu); teplota topenia 171-173°C.

(c)

3- (3'-Fluórbifenyl-4-yl)-2-{[1-(2-merkapto-4-metylpentanoylami78 no)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina (z l-fluór-3— -jódbenzénu); teplota topenia 125-128°C.

Príklad 12

Pomocou postupov, nasledujúce zlúčeniny:

ktoré sú opísané skôr, sa pripravia (a)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3- (2'-metoxybifenyl-4-yl)propiónová kyselina; teplota topenia 172-174°C.

Východisková látka vzorca

a to metylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylaminocyklopentánkarbonyl)amino]-3-(4-jódfenyl)propiónovej kyseliny, sa pripraví pomocou štandardnej kondenzácie N-Boc-cykloleucínu a metylesteru

4-jódfenylalanínu za pomienok, ktoré sú opísané skôr (DCC, HOAT, Et₃N); teplota topenia 137°C.

Táto kondenzácia s 2-metoxyfenylborónovou kyselinou poskytne medziprodukt vzorca

ktorým je metylester 2-[(1-terc-butoxykarbonylamino)cyklopentánkarbonyl) amino] -3- (2'-metoxybifenyl-4-yl)propiónovej kyseliny;

^XH NMR (250 MHz,	dichlórmetán) δ 7,45 (d, 2 H), 7,28	(d, 1 H),
7,	15 (d, 2	H) ,	6,85-7,08 (m, 3	H), 5,74 (s, 1 H),	4,88 (kv,
1	H), 4,74	(šs,	1 H), 3,78 (s,	3 H) , 3,69 (s, 3 H) ,	3,00-3,20

(ABX m, 2 H), 1,60-2,40 (m, 8 H), 1,40 (s, 9 H).

3- (4'-Fluórbifenyl-4-yl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina (zo 4-fluórfenylborónovej kyseliny); teplota topenia 106-108°C.

(c)

2-{[1-(2-Merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]ami80 no}-3- (3'-trifluórmetylbifenyl-4-yl)propiónová kyselina (zo

4-trifluórmetylfenylborónovej kyseliny); teplota topenia 190-192°C.

t (d)

3-(3'-Chlór-4'-fluórbifenyl-4-yl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino)propiónová kyselina (z 3-chlór-4-fluórfenylborónovej kyseliny); teplota topenia 170-172°C.

(e)

2-{[1-(2-Merkapto-4-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-(4'-naftalen-l-ylbifenyl-4-yl)propiónovej kyseliny (z naftalen-l-ylborónovej kyseliny); teplota topenia 151-154°C.

(f)

2-{[1-(2-merkapto-4-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}-3-(4'-metyltiobifenyl-4-yl) propiónová kyselina (zo 4-metyltiofenylborónovej kyseliny); teplota topenia 187-189°C.

Príklad 13

Pomocou postupov opísaných skôr sa tiež pripravia nasledujúce zlúčeniny:

(a) 2-{[1-(2-Merkapto-4-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl] amino]-3-(4,5,6,7-tetrafluór-3-metylbenzofuran-2-yl)propiónová kyselina; teplota topenia 115-117°C.

Východisková látka, hydrochlorid metylesteru 2-amino-3-(4,5.6.7- tetrafluór-3-metylbenzofuran-2-yl)propiónovej kyseliny sa pripraví podlá postupu opísaného Storkom a kol.(J. Org. Chem. 1976, 41, 3491) s použitím NaHMDS ako zásady, z 2-brómmetyl-4,5.6.7- tetrafluoro-3-metylbenzofuránu (pripraveného redukciou zodpovedajúceho etylesteru a prevedením získaného alkoholu na bromid); ^XH NMR (300 MHz, deuterometanol) δ 4,75 (dd, 1 H), 3,70 (s, 3 H), 3,25 (dd, 1 H), 3,10 (dd, 1 H), 2,40 (s, 3 H).

(b) 3-(lH-Indol-3-yl)-2-{[1-(2-merkapto-4-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino]propiónová kyselina; teplota topenia 116-118°C.

(c) 3- (lff-Indol-3-yl) -2-{ [ 1- (2-merkaptopentanoylamino) cyklopentánkarbonyl] amino]propiónová kyselina; teplota topenia 102-105°C.

(d) 2-({1-[3-(4-Hydroxyfenyl)-2-merkaptopropionylamino]cyklopentánkarbonyl } amino) -3- ( lH-indol-3-yl) propiónová kyselina; ^XH NMR

(300 MHz, deuterometanol) δ	7,53	(dd, 1 H), 7,25	(dd,	1 H),	6,90-
-7,10	(m, 5 H) , 6,58-6,70	(m,	2 H), 4,60-4,70	(m,	1	H) ,	3,40-
-3,50	(m, 1 H), 3,15-3,35	(m,	2 H), 2,80-3,02	(m,	1	H) ,	2,72-
-2,80	(m, 1 H), 1,45-2,18 (	m, 8	H) .

(e) 3-Benzo[b]tiofen-3-yl-2-{[1-(2-merkapto-4-metylpentanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina; teplota topenia 135-137°C.

(f) 3-(lH-Indol-3-yl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino}propiónová kyselina.

(g) n-butylester 3-(lH-indolyl-3-yl)-2-{[1-(2-acetyltio-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl]amino]propiónovej kyseliny; teplota topenia 111-112°C.

(h) 3-(4-Bifenylyl)-2-{[1-(2-merkapto-3-metylbutanoylamino)cyklopentánkarbonyl] amino}propiónová kyselina; teplota topenia 180-181°C.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I .R

R2 í^CH2)m ²'m

R¹S - C - C - NH - C - CONH - CH - Y

C) (I)

R kde

R je bicyklické karbocyklické arylová skupina alebo bicyklická heterocyklická arylová skupina; alebo jej úplne alebo čiastočne nasýtená forma; alebo

R je monocyklická karbocyklické arylová skupina substituovaná karbocyklickou arylovou skupinou alebo heterocyklickou arylovou skupinou; alebo

R je monocyklická karbocyklické arylová skupina substituovaná cykloaikylovou skupinou; alebo

R je monocyklická karbocyklické arylová skupina substituovaná azacykloalkylovou skupinou, ktorá je prípadne substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo acylovou skupinou; alebo

R je cykloalkylová skupina substituovaná cykloaikylovou skupinou alebo azacykloalkylovou skupinou;

R¹ je atóm vodíka alebo acylová skupina;

R² je atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, karbocyklické alebo heterocyklická arylová skupina, karbocyklické alebo heterocyklická arylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, cykloalkylová skupina, cykloalkylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, biarylová skupina, biarylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, (hydroxy, alkoxy alebo acyloxy)alkylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu a nižšiu alkylovú skupinu, alebo alkyl-(tio, sulfinyl alebo sulfonyl)alkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny;

R³ je atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina; alebo R² a R³spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, tvoria cykloalkylidénovú skupinu alebo cykloalkylidénovú skupinu kondenzovanú s benzoskupinou;

A spolu s atómom uhlíka, na ktorý je pripojená, tvorí kruh a je to trojčlenná až desaťčlenná cykloalkylidénová skupina alebo päťčlenná až desaťčlenná cykloalkenylidénová skupina, ktorá môže byť substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo arylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu alebo môže byť kondenzovaná k nasýtenému alebo nenasýtenému karbocyklickému päťčlennému až sedemčlennému kruhu; alebo A spolu s atómom uhlíka, na ktorý je pripojená, je päťčlenná až šesťčlenná oxacykloalkylidénová skupina, tiacykloalkylidénová skupina alebo azacykloalkylidénová skupina prípadne substituovaná nižšou alkylovou skupinou alebo arylalkylovou skupinou obsahujúcou nižšiu alkylovú skupinu; alebo A spolu s atómom uhlíka, na ktorý je pripojená, je 2,2-norbornylidénová skupina;

m je nula alebo 1-3;

Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina alebo karboxylová skupina derivatizovaná vo forme farmaceutický prijateľného esteru;

disulfidových derivátov odvodených od uvedenej zlúčeniny, kde R¹je atóm vodíka; alebo ich farmaceutický prijateľných solí; na prípravu farmaceutickej kompozície na inhibíciu enzýmu konvertujúceho endotelín alebo na liečenie ochorení závislých od endotelínu u cicavcov.
2. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1, kde asymetrický atóm uhlíka so substituentom Y má konfiguráciu S.
3. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1 všeobecného vzorca (II)

R* s

I ⁰

CH —C

O

II

NH C

NH <^CH2)n ch₂

I

-c

I

I

H (II) kde

R je benzotiofenylová skupina, naftylová skupina, benzofuranylová skupina, indolylová skupina alebo monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná monocyklickou karbocyklickou arylovou skupinou alebo monocykickou heterocyklickou arylovou skupinou;

R¹ je atóm vodíka alebo acylová skupina odvodená od karboxylu;

R² je nižšia alkylová skupina, hydroxyalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, (alkyltio- alebo alkoxy-)alkylová skupina obsahujúca nižšie alkylové skupiny a nižšiu alkoxyskupinu, karbocyklické alebo heterocyklické arylová skupina, karbocyklické alebo heterocyklická arylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, cykloalkylová skupina, cykloalkylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu, alebo biarylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylovú skupinu;

Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina alebo karboxylová skupina derivatizovaná vo forme farmaceutický prijateľného esteru;

n j e 2 - 6 ;

disulfidového derivátu odvodeného od tejto zlúčeniny, kde R¹ je atóm vodíka; alebo jej farmaceutický prijateľnej soli.
4. Použitie zlúčeniny podľa nároku 3, kde R má význam definovaný podľa nároku 3; R¹ je atóm vodíka, arylalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšia alkanoylová skúpi86 na, alkoxyalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu a nižšiu alkanoylovú skupinu, alebo heterocyklická alebo karbocyklická aroylová skupina; R² je alkylová skupina obsahujúca 2 až 4 atómy uhlíka prerušená atómom síry alebo atómom kyslíka, alkylová skupina obsahujúca 2 až 5 atómov uhlíka alebo cyklohexylová skupina; Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, karbocyklická alebo heterocyklická arylalkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkoxyskupinu, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alkoxyskupiny a nižšie alkylové skupiny; n je 2, 4 alebo 5; alebo ich farmaceutický prijateľných solí.
5. Použitie zlúčeniny podľa nároku 3 všeobecného vzorca (III)

CH,

R¹ S-CH“C-NH C — NH—C-Y ä >

alebo vzorca (Hla)

R² (III)

R¹ S — CH“C —

NH C 22

NH

CH₀

J

C—Y

I

I

H (Hla) kde

R je benzotiofenylová skupina, naftylová skupina, benzofuranylová skupina, indolylová skupina, alebo monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná monocyklickou karbocyklickou arylovou skupinou alebo monocyklickou heterocyklickou arylovou skupinou;

R¹ je atóm vodíka, nižšia alkanoylová skupina, metoxyalkano87 ylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, benzoylová skupina alebo pyridylkarbonylová skupina;

R² je alkylová skupina obsahujúca 2 až 5 atómov uhlíka, cyklohexylová skupina alebo alkylová skupina obsahujúca 2 až 4 atómy uhlíka prerušená atómom kyslíka alebo atómom síry;

Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina, pyridylmetoxykarbonylová skupina, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alkoxyskupiny a nižšie alkylové skupiny; alebo jej farmaceutický prijateľnej soli.
6. Použitie zlúčeniny podľa nároku 5 všeobecného vzorca (III) alebo jej farmaceutický prijateľné soli.
7. Použitie zlúčeniny podía nároku 3 všeobecného vzorca (lllb)

R¹ S

F?

I o O

I II II

CH —C-NH C ch₉

T

NH—C—Y !

H (lllb) kde

R je benzotiofenylová skupina, naftylová skupina, benzofuranylová skupina, indolylová skupina alebo monokarbocyklická arylová skupina substituovaná monocyklickou karbocyklickou arylovou skupinou alebo monocyklickou heterocyklickou arylovou skupinou;

W je skupina CH₂, atóm kyslíka, atóm síry alebo skupina NR⁴, kde R⁴ je atóm vodíka, acylová skupina, nižšia alkylová skupina alebo arylalkylová skupina obsahujúca nižšiu alkylo88 vú skupinu;

R¹ je atóm vodíka, nižšia alkanoylová skupina, metoxyalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, benzoylová skupina alebo pyridylkarbonylová skupina;

R² je alkylová skupina obsahujúca 2 až 5 atómov uhlíka, cyklohexylová skupina alebo alkylová skupina obsahujúca 2 až 4 atómy uhlíka prerušená atómom kyslíka alebo atómom síry;

Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina, pyridylmetoxykarbonylová skupina, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alkoxyskupiny a nižšie alkylové skupiny; alebo jej farmaceutický prijateľnej soli.
8. Použitie zlúčeniny podľa nároku 3, kde R je 4-bifenylylová skupina alebo 3-indolylová skupina; R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina; R² je alkylová skupina obsahujúca 3 až 5 atómov uhlíka, Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina, pyridylmetoxykarbonylová skupina, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alkoxyskupiny a nižšie alkylové skupiny; alebo jej farmaceutický prijateľnej soli.
9. Použitie zlúčeniny podľa nároku 3, kde R je 4-bifenylylová skupina; R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina; R²je n-propylová skupina, n-butylová skupina alebo izobutylová skupina; a Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina; alebo jej farmaceutický prijateľnej soli.
10. Použitie zlúčeniny podľa nároku 6, kde R je 4-bifenylylová skupina; R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina; R²je n-propylová skupina, n-butylová skupina alebo izobutylová skupina; a Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina; alebo jej farmaceutický prijateľnej soli.
11. Použitie podľa nároku 1 na výrobu farmaceutickej kompozície na liečenie hypertenzie, zlyhania srdca, cerebrálneho vazospazmu, mŕtvice, zlyhania ladvín, bronchiálnej astmy, komplikácií spojených s transplantáciou orgánu alebo porúch erekcie.

Použitie podľa nároku

11 zlúčeniny všeobecného vzorca (III)

R²

I ⁰

R¹ S-CH“C —

NH C —

NH-C-Y

I

H (III) kde

R je benzotiofenylová skupina, naftylová skupina, benzofuranylová skupina, indolylová skupina, alebo monocyklická karbocyklická arylová skupina substituovaná monocyklickou karbocyklickou arylovou skupinou alebo monocyklickou heterocyklickou arylovou skupinou;

R¹ je atóm vodíka, nižšia alkanoylová skupina, metoxyalkanoylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, benzoylová skupina alebo pyridylkarbonylová skupina;

R² je alkylová skupina obsahujúca 2 až 5 atómov uhlíka, cyklohexylová skupina alebo alkylová skupina obsahujúca 2 až 4 atómy uhlíka prerušená atómom kyslíka alebo atómom síry;

Y je 5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, benzyloxykarbonylová skupina, pyridylmetoxykarbonylová skupina, a-(alkanoyloxy-, alkoxykarbonyl- alebo dialkylaminokarbonyl-)alkoxykarbonylová skupina obsahujúca nižšiu alkanoylovú skupinu, nižšie alko9 xyskupiny a nižšie alkylové skupiny; alebo jej farmaceutický prijatelnej soli.
13. Zlúčenina všeobecného vzorca (III) (III) alebo zlúčenina všeobecného vzorca (Illb)

FČ

CH,

R¹ S-CH“C-NH C-NH-C-Y

I 1 I

H (Illb)

W /

kde

Y je karboxylová skupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina;

R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina;

R² je nižšia alkylová skupina, nižšia alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, merkaptoskupinou, fenylovou skupinou, fenylovou skupinou substituovanou nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, atómom halogénu, trifluórmetylovou skupinou, ďalej fenylovou skupinou alebo naftylovou skupinou, keď každá táto skupina môže byť nesubstituovaná alebo nezávisle substituovaná nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, atómom halogénu alebo trifluórmetylovou skupinou, alebo je to cyklohexylová skupina; a je 3-indolylová skupina, 4-(5-izoxazolyl)fenylová skupina,

4-(2- alebo 3-pyrolyl)fenylová skupina, 4-(2- alebo 3-furanyl)fenylová skupina, 4-(2- alebo 3-tienyl)fenylová skupina,

4-(2- alebo 3-pyridyl)fenylová skupina, piperid-3-yl-fenylová skupina, ktorá je nesubstituovaná alebo substituovaná na atóme dusíka nižšou alkanoylovou skupinou alebo je to 4-(5--pyrimidinyl) fenylová skupina, naftylová skupina, 5,6,,8-tetrahydronaftalen-l—ylová skupina, 5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-ylová skupina alebo 4-cyklohexylfenylová skupina, alebo je to 4-bifenylylová skupina alebo 4-bifenylylová skupina substituovaná na jednom alebo obidvoch benzénových kruhoch nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, atómom halogénu alebo trifluórmetylovou skupinou;

alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
14. Zlúčenina podľa nároku 13 všeobecného vzorca (III), kde Y je

5-tetrazolylová skupina, karboxylová skupina, alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina; R¹ je atóm vodíka alebo nižšia alkanoylová skupina; R² je n-propylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, n-pentylová skupina, metoxyetylová skupina alebo metyltioetylová skupina; a R je 3-indolylová skupina, 4-(5-izoxazolyl)fenylová skupina, 4-(2- alebo 3-furanyl)fenylová skupina, 4-(2- alebo 3-tienyl)fenylová skupina, 4-bifenylylová skupina, 4-(2- alebo 3-pyridyl)fenylová skupina, 4-(5-pyrimidinyl)fenylová skupina, alebo 4-bifenylylová skupina substituovaná na jednom alebo obidvoch benzénových kruhoch nižšou alkylovou skupinou, nižšou alkoxyskupinou, hydroxylovou skupinou, nižšou alkyltioskupinou, atómom halogénu alebo trifluórmetylovou skupinou; alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
15. Zlúčenina podlá nároku 14 vybraná zo skupiny, ktorú tvorí zlúčenina všeobecného vzorca (III), (i) kde Y je karboxylová skupina, R¹ je atóm vodíka, R² je z

n-propylová skupina a R je 4-bifenylylová skupina alebo jej farmaceutický prijateľná sol;

(ii) kde Y je metoxykarbonylová skupina, R¹ je acetylová skupina, R² je n-propylová skupina a R je 4-bifenylylová skupina alebo jej farmaceutický prijateľná sol;

(iii) kde Y je karboxylová skupina, R¹ je atóm vodíka, R² je izobutylová skupina a R je 3-indolylová skupina alebo jej farmaceutický prijateľná sol; a (iv) kde Y je metoxykarbonylová skupina, R¹ je acetylová skupina, R² je izobutylová skupina a R je 3-indolylová skupina.
16. Farmaceutická kompozícia inhibujúca enzým konvertujúci endotelín, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu podía nároku 13 alebo 14 a nosič.
17. Použitie zlúčeniny podlá nároku 13 alebo 14 na výrobu farmaceutickej kompozície na inhibíciu enzýmu konvertujúceho endotelín alebo na liečenie ochorení závislých od endotelínu u cicavcov.