WO2021132741A1 - 색전 시술 입자 및 이의 제조방법 - Google Patents

색전 시술 입자 및 이의 제조방법 Download PDF

Info

Publication number
WO2021132741A1
WO2021132741A1 PCT/KR2019/018321 KR2019018321W WO2021132741A1 WO 2021132741 A1 WO2021132741 A1 WO 2021132741A1 KR 2019018321 W KR2019018321 W KR 2019018321W WO 2021132741 A1 WO2021132741 A1 WO 2021132741A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
polypeptide
molecular weight
average molecular
gelatin
embolization
Prior art date
Application number
PCT/KR2019/018321
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
김광숙
Original Assignee
주식회사 피엘마이크로메드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 피엘마이크로메드 filed Critical 주식회사 피엘마이크로메드
Publication of WO2021132741A1 publication Critical patent/WO2021132741A1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/10—Polypeptides; Proteins
    • A61L24/104—Gelatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/043—Mixtures of macromolecular materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/12—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets for ligaturing or otherwise compressing tubular parts of the body, e.g. blood vessels, umbilical cord
    • A61B17/12022—Occluding by internal devices, e.g. balloons or releasable wires
    • A61B17/12099—Occluding by internal devices, e.g. balloons or releasable wires characterised by the location of the occluder
    • A61B17/12109—Occluding by internal devices, e.g. balloons or releasable wires characterised by the location of the occluder in a blood vessel
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/12—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets for ligaturing or otherwise compressing tubular parts of the body, e.g. blood vessels, umbilical cord
    • A61B17/12022—Occluding by internal devices, e.g. balloons or releasable wires
    • A61B17/12131—Occluding by internal devices, e.g. balloons or releasable wires characterised by the type of occluding device
    • A61B17/12181—Occluding by internal devices, e.g. balloons or releasable wires characterised by the type of occluding device formed by fluidized, gelatinous or cellular remodelable materials, e.g. embolic liquids, foams or extracellular matrices
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/001—Use of materials characterised by their function or physical properties
    • A61L24/0036—Porous materials, e.g. foams or sponges
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/001—Use of materials characterised by their function or physical properties
    • A61L24/0042—Materials resorbable by the body
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/12—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by hydrolysis, i.e. solvolysis in general
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/36—Materials or treatment for tissue regeneration for embolization or occlusion, e.g. vaso-occlusive compositions or devices
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/40—Preparation and treatment of biological tissue for implantation, e.g. decellularisation, cross-linking

Definitions

  • the present invention relates to embolic particles and a method for preparing the same.
  • Embolization or embolization is a substance that treats a tumor by inserting a specific substance into a blood vessel to block blood that delivers oxygen and nutrients to the tumor tissue.
  • embolic insert must have biocompatible, hydrophilic, non-toxic and biodegrability conditions, micro-particles such as chitosan, starch, gelatin, albumin, and sodium alginic acid are mainly used as embolic materials. are researching
  • gelatin was developed as a hemostatic product using mammal-derived (cow, pig) gelatin in the 1960s. , it is difficult to expect the embolization effect desired by clinicians because the gelatin granules are agglomerated during microtubule embolization.
  • Mammalian-derived gelatin embolic material is a substitute for mammalian-derived gelatin for Hindus and Muslims who do not want to consume cattle related religiously and culturally because there are concerns about transmission of mad cow disease in cattle and foot-and-mouth disease in pigs. You need gelatin that can do that.
  • Korean Publication No. 10-2001-0068458 and the like disclose an embolic material to which polyvinyl acetate particles and the like are applied.
  • An object of the present invention is to provide embolic particles capable of controlling the rate of decomposition in the body and a method for manufacturing the same.
  • the embolization particle according to the embodiment may include a first polypeptide having a first average molecular weight; and a second polypeptide having a second average molecular weight that is less than the first average molecular weight, wherein the first polypeptide and the second polypeptide are crosslinked, the first polypeptide and the second polypeptide are the same or each are derived from different gelatins.
  • further comprising a third polypeptide having a third average molecular weight smaller than the second average molecular weight, wherein the first polypeptide, the second polypeptide and the third polypeptide are cross-linked to each other can be
  • the first average molecular weight may be 40,000 to 100,000, 15,000 to 39,000, or 5,000 to 14,000
  • the second average molecular weight may be 15,000 to 39,000, 5,000 to 14,000, or 500 to 4,000.
  • the first average molecular weight is 40,000 to 100,000 or 15,000 to 39,000
  • the second average molecular weight is 15,000 to 39,000 or 5,000 to 14,000
  • the third average molecular weight is 5,000 to 14,000 or 500 to 4,000 days
  • the first polypeptide may be included in a content of 60 wt% to 80 wt%, and the second polypeptide may be included in a content of 20 wt% to 40 wt%. .
  • the first polypeptide may be included in an amount of 20 wt% to 40 wt%, and the second polypeptide may be included in a content of 60 wt% to 80 wt%. .
  • the third polypeptide may be included in an amount of % to 30 wt%.
  • the first polypeptide, the second polypeptide, and the third polypeptide may each include at least one of the following Chemical Formulas 1 to 6, respectively.
  • R1 is hydrogen or a substituted or unsubstituted C1 to C20 alkyl group
  • R2 is hydrogen or an alcohol group
  • R2 is hydrogen or an alcohol group.
  • R1 is hydrogen or a substituted or unsubstituted C1 to C20 alkyl group.
  • R1 is hydrogen or a substituted or unsubstituted C1 to C20 alkyl group.
  • R1 is hydrogen or a substituted or unsubstituted C1 to C20 alkyl group.
  • R2 is hydrogen or an alcohol group.
  • the method for producing embolic particles comprises the steps of: preparing a first polypeptide having a first average molecular weight by hydrolyzing gelatin; preparing a second polypeptide having a second average molecular weight smaller than the first average molecular weight by hydrolyzing the same or different gelatin as the gelatin; and crosslinking the first polypeptide and the second polypeptide.
  • the first polypeptide and the second polypeptide are crosslinked by a crosslinking agent
  • the embolization particle according to the embodiment is formed by cross-linking a polypeptide having a relatively large average molecular weight and a polypeptide having a relatively small average molecular weight. Accordingly, the embolization particles according to the embodiment may have a desired decomposition rate while having a desired particle size.
  • the average diameter of the embolization particles according to the embodiment may be determined by the content and average molecular weight of a polypeptide having a relatively large average molecular weight.
  • the decomposition rate of the embolization particles according to the embodiment may be determined by the content and average molecular weight of the polypeptide having a relatively small average molecular weight.
  • the embolization particles according to the embodiment may have a desired particle size and a desired degradation rate depending on the content and average molecular weight of the first polypeptide and the second polypeptide.
  • the embolization particles according to the embodiment may have an appropriate size and an appropriate decomposition rate, be embolized in a target blood vessel, maintain the embolization effect until a desired time, and then be decomposed.
  • the embolization particle according to the embodiment may have a fast decomposition rate, and after being first treated on the patient, it may be replaced and operated several times in other blood vessels of the patient depending on the patient's condition. Therefore, the embolization particle according to the embodiment can effectively treat a patient.
  • FIG. 1 is a view showing a process of manufacturing the embolization particles according to the embodiment.
  • Example 7 is a photograph showing the embolization particles of Example 7.
  • Example 3 is a photograph showing the embolization particles of Example 9.
  • Example 4 is a photograph showing after the embolization particles of Example 7 were left at room temperature for 10 days.
  • Example 5 is a photograph showing after the embolization particles of Example 9 were left at room temperature for 10 days.
  • the embolization particle includes a polypeptide.
  • the polypeptide is cross-linked.
  • the polypeptide is derived from gelatin.
  • the polypeptide may be obtained by hydrolyzing the gelatin.
  • the gelatin may include mammal-derived gelatin or fish-derived gelatin.
  • the gelatin includes the fish-derived gelatin, concerns about the occurrence of mad cow disease or foot-and-mouth disease caused by gelatin using conventional cattle or pigs can be solved.
  • the embolization particles according to the embodiment may be formed at a relatively low temperature and may have a uniform porous spherical shape.
  • the gelatin may include glycine (GLYSINE), proline (PROLINE), and hydroxyproline (HYDROXYPROLINE). Accordingly, the embolization particles according to the embodiment may have elasticity, flexibility, and expandability according to the reaction conditions. Accordingly, the embolization particle according to the embodiment may be applied to the blood vessel to predict the blood occlusion time.
  • GLYSINE glycine
  • PROLINE proline
  • hydroxyproline hydroxyproline
  • the gelatin may be fish-derived gelatin.
  • the fish-derived gelatin is prepared from the fish skin of egg species, and may have a property of gelling at a lower temperature than gelatin using cattle or pigs.
  • the fish-derived gelatin is easily cross-linked in a sol state at about 20 to about 40, and embolization particles according to an embodiment may be formed.
  • the gelatin may be prepared from animal-derived collagen or fish-derived collagen.
  • the gelatin may be extracted from the collagen by applying heat to the collagen.
  • the gelatin is generally available in the market, such as marine collagen peptides or collagen peptides.
  • the polypeptide comprises a first polypeptide and a second polypeptide.
  • the first polypeptide has a first average molecular weight and the second polypeptide has a second average molecular weight.
  • the second average molecular weight is less than the first average molecular weight. That is, the embolization particle according to an embodiment includes a first polypeptide having a first average molecular weight; and a second polypeptide having a second average molecular weight that is less than the first average molecular weight; wherein the first polypeptide and the second polypeptide are cross-linked.
  • the average molecular weight may mean a weight average molecular weight.
  • the gelatin may further include the first polypeptide, the second polypeptide, and the third polypeptide.
  • the third polypeptide may have a third average molecular weight that is less than the second average molecular weight. That is, the embolization particle according to the embodiment further comprises a third polypeptide having a third average molecular weight smaller than the second average molecular weight, and the first polypeptide, the second polypeptide, and the third polypeptide may be cross-linked to each other.
  • the gelatin may further include the first polypeptide, the second polypeptide, the third polypeptide, and the fourth polypeptide.
  • the fourth polypeptide may have a fourth average molecular weight that is less than the third average molecular weight.
  • the first average molecular weight may be 40,000 to 100,000, 15,000 to 39,000, or 5,000 to 14,000, and the second average molecular weight may be 15,000 to 39,000, 5,000 to 14,000, or 500 to 4,000.
  • the first average molecular weight may be 40,000 to 60,000, 15,000 to 30,000, or 7,000 to 12,000
  • the second average molecular weight may be 15,000 to 30,000, 7,000 to 12,000, or 1,000 to 2,000.
  • the first average molecular weight may be 40,000 to 100,000 or 15,000 to 39,000
  • the second average molecular weight may be 15,000 to 39,000 or 5,000 to 14,000
  • the third average molecular weight may be 5,000 to 14,000 or 500 to 4,000. More specifically, the first average molecular weight may be 40,000 to 60,000 or 15,000 to 30,000, the second average molecular weight may be 15,000 to 30,000 or 7,000 to 12,000, and the third average molecular weight may be 7,000 to 12,000 or 1,000 to 2,000.
  • the first average molecular weight may be 40,000 to 100,000
  • the second average molecular weight may be 15,000 to 39,000
  • the third average molecular weight may be 5,000 to 14,000
  • the fourth average molecular weight may be 500 to 4,000.
  • the first average molecular weight is the first average molecular weight is 40,000 to 60,000
  • the second average molecular weight is 15,000 to 30,000
  • the third average molecular weight is 7,000 to 12,000
  • the fourth average molecular weight is 1,000 to It can be 2,000.
  • the polypeptide may include more polypeptides having a relatively high average molecular weight than a polypeptide having a relatively low average molecular weight. In this case, the embolic particles formed by crosslinking the polypeptide are degraded relatively slowly in the body.
  • the polypeptide may include the first polypeptide in a content of 60 wt% to 80 wt% based on the content of the total polypeptide, and may include the second polypeptide in a content of 20 wt% to 40 wt% have.
  • the polypeptide contains the first polypeptide in a content of 60wt% to 80wt% based on the content of the total polypeptide, and includes the second polypeptide in a content of 10wt% to 30wt%, 10wt%
  • the third polypeptide may be included in an amount of 30 wt% to 30 wt%.
  • the polypeptide includes the first polypeptide in a content of 50 wt% to 70 wt% based on the content of the total polypeptide, and includes the second polypeptide in a content of 5 wt% to 30 wt%, 5 wt%
  • the third polypeptide may be included in an amount of 30 wt% to 30 wt%
  • the fourth polypeptide may be included in an amount of 5 wt% to 30 wt%.
  • the polypeptide may include more polypeptides having a relatively low average molecular weight than a polypeptide having a relatively high average molecular weight. In this case, the embolic particles formed by crosslinking the polypeptide are degraded relatively quickly in the body.
  • the polypeptide may include the first polypeptide in a content of 20 wt% to 40 wt% based on the content of the total polypeptide, and may include the second polypeptide in a content of 60 wt% to 80 wt% have.
  • the polypeptide includes the first polypeptide in a content of 20 wt% to 40 wt% based on the content of the total polypeptide, and contains the second polypeptide in a content of 20 wt% to 40 wt%, 20 wt%
  • the third polypeptide may be included in an amount of from 40 wt% to 40 wt%.
  • polypeptide contains the first polypeptide in a content of 20 wt% to 40 wt% based on the content of the total polypeptide, and contains the second polypeptide in a content of 10 wt% to 30 wt%, 10 wt%
  • the third polypeptide may be included in an amount of 30 wt% to 30 wt%
  • the fourth polypeptide may be included in an amount of 10 wt% to 30 wt%.
  • the polypeptide comprises the first polypeptide in a content of 10 wt% to 30 wt% based on the content of the total polypeptide, and the second polypeptide in a content of 10 wt% to 30 wt%,
  • the third polypeptide may be included in an amount of 60 wt% to 80 wt%.
  • the polypeptide may include a carboxylic acid group or an amine group. That is, the first polypeptide, the second polypeptide, the third polypeptide, and the fourth polypeptide may include a carboxylic acid group or an amine group.
  • polypeptide may include at least one or more structures of Formulas 1 to 6 below. That is, each of the first polypeptide, the second polypeptide, the third polypeptide, and the fourth polypeptide may include at least one or more structures of Formulas 1 to 6 below.
  • R1 is hydrogen or a substituted or unsubstituted C1 to C20 alkyl group
  • R2 is hydrogen or an alcohol group
  • R2 is hydrogen or an alcohol group.
  • R1 is hydrogen or a substituted or unsubstituted C1 to C20 alkyl group.
  • R1 is hydrogen or a substituted or unsubstituted C1 to C20 alkyl group.
  • R1 is hydrogen or a substituted or unsubstituted C1 to C20 alkyl group.
  • R2 is hydrogen or an alcohol group.
  • R1 may be represented by Formula 7 or Formula 8 below.
  • the embolization particle according to the embodiment is formed by cross-linking the polypeptide.
  • the embolization particles according to the embodiment include a crosslinking agent.
  • the crosslinking agent crosslinks the polypeptide.
  • the crosslinking agent is formaldehyde, glutaraldehyde, dialdehyde starch, epoxy compound, glutaraldehyde glyoxal, glyoxal, 2,2-dimethoxy-2 - Phenylacetophenone, tripolyphosphate sodium salt, diacetaldehyde PEG, scleraldehyde (scleraldehyde), diethyl squarate, epichlorohydrin and at least one selected from the group consisting of genipin (genipin) characterized in that do it with
  • the embolization particles according to the embodiment may include the crosslinking agent in an amount of about 0.25 parts by weight to about 50 parts by weight based on 100 parts by weight of the polypeptide.
  • the embolization particles according to the embodiment may include about 3 parts by weight to about 20 parts by weight of the crosslinking agent based on 100 parts by weight of the polypeptide.
  • the embolization particles according to the embodiment may have an average particle diameter of about 10 ⁇ m to about 5,000 ⁇ m. In more detail, the embolization particles according to the embodiment may have an average particle diameter of about 20 ⁇ m to about 4,500 ⁇ m. In more detail, the embolization particles according to the embodiment may have an average particle diameter of about 30 ⁇ m to about 4,000 ⁇ m.
  • the embolization particle according to the embodiment has a porous structure.
  • the embolization particle according to the embodiment may have a sponge structure. That is, the embolization particles according to the embodiment may include micropores.
  • the embolization particles according to the embodiment may have a porosity of about 20 vol% to about 70 vol%. Accordingly, the embolization particles according to the embodiment may have high elasticity and swelling rate.
  • the embolization particles according to the embodiment are formed by crosslinking gelatin having a relatively large average molecular weight and gelatin having a relatively small average molecular weight. Accordingly, the embolization particles according to the embodiment may have a desired decomposition rate while having a desired particle size.
  • the average diameter of the embolization particles according to the embodiment may be determined by the content and average molecular weight of gelatin having a relatively large average molecular weight.
  • the decomposition rate of the embolization particles according to the embodiment may be determined by the content and average molecular weight of gelatin having a relatively small average molecular weight.
  • the embolization particles according to the embodiment may have a desired particle size and a desired decomposition rate depending on the content and average molecular weight of the first polypeptide and the second polypeptide.
  • the embolization particles according to the embodiment may have an appropriate size and an appropriate decomposition rate, be embolized in a target blood vessel, maintain the embolization effect until a desired time, and then be decomposed.
  • the embolization particle according to the embodiment may have a fast decomposition rate, and after being first treated on the patient, it may be replaced and operated several times in other blood vessels of the patient depending on the condition of the patient. Therefore, the embolization particle according to the embodiment can effectively treat a patient.
  • the microparticles for embolization according to the embodiment are prepared using a polypeptide derived from gelatin. Accordingly, the embolization particles according to the embodiment are excellent in biocompatible (biocompatible), expandability, elasticity and flexibility. Also, the particle diameter of the embolization particles according to the embodiment may vary from about 50 ⁇ m to about 2000 ⁇ m, and the embolization particles according to the embodiment exhibit a porous spherical shape with a uniform sponge structure. Accordingly, the embolization particles according to the embodiment can minimize the stimulation of blood vessels.
  • polypeptides of various average molecular weights may be cross-linked in various amounts to prepare the embolization particles according to the embodiment. Accordingly, the embolization particles according to the embodiment may be used alone or in combination, so that the blood and occlusion duration can be predictably controlled.
  • FIG. 1 it may be manufactured by the following process according to the embodiment.
  • gelatin is prepared (S10).
  • the gelatin may be mammal-derived gelatin or fish-derived gelatin.
  • the weight average molecular weight of the gelatin may be 50,000 to 100,000.
  • the gelatin may be obtained from mammalian collagen or fish collagen. Alternatively, the gelatin is commercially available. As for the gelatin, the contents described above may be referred to.
  • the gelatin is hydrolyzed (S20).
  • the gelatin may be hydrolyzed in a subcritical water state.
  • the gelatin is dissolved or dispersed in water to form an aqueous solution or aqueous dispersion.
  • the content of gelatin in the aqueous solution or the aqueous dispersion may be 3wt% to 20wt%.
  • the aqueous solution or the aqueous dispersion is maintained in a subcritical state for a predetermined time.
  • the aqueous solution or aqueous dispersion may be maintained at a temperature of about 100° C. to about 250° C., in a state of about 30 atmospheres to about 80 atmospheres, for about 10 minutes to about 5 hours.
  • the gelatin is hydrolyzed and a polypeptide is formed.
  • carbon dioxide (CO2) and nitrogen (N2) may be included in the hydrolysis process in the subcritical water state.
  • the gelatin may be hydrolyzed by an enzyme.
  • the gelatin may be hydrolyzed by acid.
  • the gelatin may be hydrolyzed simultaneously by the subcritical water and the enzyme.
  • the polypeptide may be obtained by one hydrolysis process, or by several hydrolysis processes to which various process conditions are applied.
  • the polypeptide may be obtained from the same gelatin by one hydrolysis process, or from different gelatins by several hydrolysis processes.
  • the polypeptide is fractionated (S30).
  • the polypeptide may be fractionated by molecular weight by using gel filtration chromatography (Gel Filtration Chromatography), water as a solvent.
  • the polypeptide is fractionated by HPLC (1260 HPLC system, Agilent, USA) connected to a fraction collector (G1364C 1260 FC-AS, Agilent, USA), and can be divided according to molecular weight.
  • Polypeptides divided according to molecular weight can be obtained by various methods capable of fractionating oligomers or polymers by molecular weight.
  • the polypeptide may be separated by molecular weight through a column.
  • a polypeptide according to the molecular weight can be obtained.
  • the first polypeptide, the second polypeptide, the third polypeptide and the fourth polypeptide can be obtained.
  • the first polypeptide, the second polypeptide, the third polypeptide and the fourth polypeptide each have the first average molecular weight, the second average molecular weight, the third average molecular weight, and the second average molecular weight. 4 may have an average molecular weight.
  • the polypeptide can be fractionated, a polypeptide having an average molecular weight of about 40,000 to 60,000, a polypeptide having an average molecular weight of about 20,000 to about 30,000, a polypeptide having an average molecular weight of about 8,000 to about 12,000, about Polypeptides each having an average molecular weight of from 1,000 to about 2,000 can be obtained.
  • the gelatin is hydrolyzed, and thus the obtained polypeptide is fractionated, so that a polypeptide having a desired average molecular weight can be prepared.
  • the polypeptide is cross-linked by a cross-linking agent (S40). More specifically, a polypeptide of a desired weight average molecular weight can be combined and cross-linked by the cross-linking agent.
  • At least two or more polypeptides of the first polypeptide, the second polypeptide, the third polypeptide, and the fourth polypeptide may be combined and cross-linked by the cross-linking agent.
  • first polypeptide and the second polypeptide may be cross-linked.
  • the first polypeptide, the second polypeptide and the third polypeptide may be cross-linked by a cross-linking agent.
  • the first polypeptide, the second polypeptide, the third polypeptide and the fourth polypeptide may be cross-linked by a cross-linking agent.
  • the crosslinking agent may be as described above.
  • the crosslinking agent may be used in an amount of about 0.25 parts by weight to about 50 parts by weight based on 100 parts by weight of the total polypeptide.
  • the crosslinking agent may be used in an amount of about 3 parts by weight to about 20 parts by weight based on 100 parts by weight of the total polypeptide.
  • the crosslinking reaction is carried out in an aqueous solution containing the polypeptide in an amount of about 3 wt% to about 10 wt%.
  • the cross-linking agent is added to the aqueous solution in the above content, the polypeptide is cross-linked by the cross-linking agent at a temperature of about 20° C. to about 40° C. for about 6 hours to about 12 hours.
  • the aqueous polypeptide solution and the crosslinking agent solution are mixed in a weight ratio of 100:0.5 to 100:10. Thereafter, the mixed solution is first stirred at a temperature of about 20° C. to about 40° C., at about 1,000 rpm to about 1,500 rpm, for about 5 minutes to about 120 minutes. Thereafter, the first stirred mixed solution is secondly stirred at a temperature of about 20° C. to about 40° C. at about 1 rpm to about 500 rpm for about 10 minutes to about 48 hours. Accordingly, an aqueous gelatin solution in which the polypeptide is cross-linked can be prepared.
  • the first stirring step when the stirring speed is out of the stirring speed range of about 1,000 rpm to about 1,500 rpm, bubbles are formed, and a problem in which the density is lowered may occur.
  • the mixed solution when stirring at a temperature of 20° C. or less, the mixed solution may be gelled.
  • the mixed solution when the mixed solution is stirred at a temperature of 40° C. or higher, a problem in that the density is lowered as bubbles are generated may occur.
  • the stirring speed exceeds 500 rpm
  • the functionality as micro particles for embolization may be reduced.
  • the stirring time of 10 minutes to 48 hours in the second stirring is to improve absorption and maintain a uniform shape.
  • an aqueous solution of crosslinked gelatin is prepared by the crosslinking step. Thereafter, the cross-linked gelatin aqueous solution is dropped and sprayed on the oil and fat to prevent the cross-linked gelatin in the gel state from aggregating, and the porous spherical cross-linked gelatin particles having a uniform sponge structure having a particle diameter of about 30 ⁇ m to 4,000 ⁇ m are produced. can be manufactured. In addition, since the degree of exposure of the cross-linked gelatin to oils and fats is low, oils and fats can be easily separated from the cross-linked gelatin.
  • Cross-linked gelatin particles having a spherical spongy structure are formed.
  • the cross-linked gelatin particles may have various average particle diameters depending on the content of the polypeptide according to the average molecular weight, the content of the cross-linking agent, the cross-linking temperature and the cross-linking time, and the like.
  • the cross-linked gelatin particles may have an average particle diameter of about 30 ⁇ m to about 4,000 ⁇ m, depending on the above conditions.
  • the gelatin may be fish gelatin. That is, the gelatin used for the hydrolysis may be derived from fish.
  • the fish gelatin is prepared from the fish skin of turbulent fish species, and may have a property of gelling at a lower temperature than gelatin using cattle or pigs. Accordingly, the polypeptide derived from the fish gelatin is easily cross-linked in a sol state at a temperature of about 20 to about 40 ° C, and porous spheres having a uniform sponge structure having a particle size of about 30 to about 4,000 ⁇ m can be formed. have.
  • the viscosity in the non-gelatinized state is low and the molecular weight is small, so that it can be dropped or sprayed at a higher concentration. Accordingly, in the present embodiment, gelatin microparticles having a high visible density can be prepared.
  • the concentration of the polypeptide aqueous solution derived from the fish gelatin may be 3wt% to about 20wt%.
  • the concentration of the crosslinking agent in the prepared gelatin crosslinking aqueous solution may be about 0.05 wt% to about 10 wt%.
  • the gelatin fine particle emulsion is sprayed or dropped into oil and fat through a nozzle by compressed air in an encapsulator.
  • the temperature of the particulate solution may be about 20 °C to about 40 °C, and the temperature passing through the nozzle may be about 65 °C to about 75 °C.
  • the frequency is set to 40 to 6,000 Hz, the size of the spherical gelatin droplet to be dropped or sprayed can be controlled.
  • the fat may be an ester-based fat, hydrocarbon-based fat, animal fat or vegetable fat.
  • the oil is olive oil, soybean oil, canola oil, grapeseed oil, soybean oil, palm oil, paraffin oil, alpha-bisabolol, stearyl glycyrrhetinate, salicylic acid acid), tocopheryl acetate, panthenol, glyceryl stearate, cetyl octanolate, isopropyl myristate, 2-ethylene isofelagonate (2-ethylene isopelagonate), di-c12-13 alkyl malate, ceteatyl octanoate, butylene glycol dicaptylate/dicaptylate dicaprate, isononyl isostearate, isostearyl isostearate, cetyl octanoate, octyldodecyl myristate, cetyl esters ), c10-30 cholesterol/lan
  • the fat and oil may be paraffin oil, but is not limited thereto, and more preferably, the fat and oil are mixed with 0 to 5 wt% of a crosslinking agent with respect to 100 wt% of the fat and oil, so that the gelatin fine particles in the fat makes it easier to maintain the spherical shape.
  • the fat is cooled to a temperature of 0 ⁇ 10 °C so that the gelatin can easily form a spherical shape as it exists.
  • cross-linked spherical gelatin particles can be prepared.
  • the cross-linked gelatin particles are washed and dried (S50). After the oil containing the spherical gelatin particles is stirred, washing and drying processes are performed to form porous gelatin microparticles having a sponge structure.
  • the cross-linked spherical gelatin particles may be washed with an organic solvent.
  • the oil and fat containing the spherical gelatin particles prepared in step S40 is stirred at a temperature of about 0° C. to about 10° C. at about 400 rpm to about 1,400 rpm, left still, and washed with an organic solvent. Accordingly, the fat and the crosslinking agent contained in the crosslinked spherical gelatin particles are removed, and the crosslinked spherical gelatin particles are solidified.
  • the solidified gelatin particles are freeze-dried for about 3 hours to about 48 hours, and thus, cross-linked porous gelatin microparticles having a sponge structure are formed.
  • the porous gelatin microparticles of the sponge structure formed at this time have a particle size of about 30 ⁇ m to about 4,000 ⁇ m.
  • the gelatin particles can be easily formed into a spherical shape, and the spherical gelatin is suitable to have physical properties.
  • the spherical gelatin particles of the fat and oil phase are prevented from aggregating with each other to maintain a spherical shape.
  • the organic solvent is petroleum ether, ethyl ether, isopropyl acetate, n-propyl acetate, isobutyl acetate, n-butyl acetate, isobutyl isobutyrate, 2-ethylhexyl acetate, ethylene glycol diacetate C9 acetate, C10 Acetate, methyl ethyl ketone, methyl isobutyl ketone, methyl isoamyl ketone, methyl n-amyl ketone, dibutyl ketone, cyclohexanone, isophorone, acetaldehyde, n-butylaldehyde, crotonaldehyde, 2-ethylhexaaldehyde, Isobutylaldehyde, propionaldehyde, ethyl 3-ethoxypropionate, toluene, xylene, trich
  • the organic solvent is ethyl ether or isopropyl acetate.
  • the microparticles for embolization of the present invention are excellent in biocompatible, expandability, elasticity and flexibility as they are manufactured using fish gelatin, and exhibit a porous spherical shape with a uniform sponge structure with a particle size of 30 to 4,000 ⁇ m. Accordingly, it is possible to facilitate vascular occlusion while minimizing vascular stimulation, and is characterized in that it is manufactured by the following manufacturing method.
  • the embolization particles according to the embodiment can be decomposed in the body at a desired time.
  • About 10 g of fish gelatin had an average molecular weight of about 100,000.
  • about 10 g of gelatin was added to about 200 ml of purified water.
  • CO2 and N2 were added to the 5wt% gelatin solution, and a high-temperature and high-pressure 110°C, 30Bar subcritical water hydrolysis solution was prepared for 30 minutes.
  • the hydrolysis solution was fractionated by molecular weight by gel permeation chromatography.
  • first polypeptide having a molecular weight of about 50,000, a second polypeptide having an average molecular weight of about 25,000, a third polypeptide having an average molecular weight of about 10,000, and a fourth polypeptide having an average molecular weight of about 1,500 was obtained
  • aqueous crosslinking agent solution 0.2 ml of the aqueous crosslinking agent solution is added to 20 ml of the gelatin aqueous solution, and the aqueous polypeptide solution is first stirred for 30 minutes at a speed of about 30 to 1,000 rpm, and secondly stirred at 30° C. at a speed of 400 rpm for 24 hours. became Accordingly, an aqueous solution of gelatin crosslinked in a sol state was prepared.
  • the prepared gelatin crosslinking aqueous solution is injected into Encapsulator B-390 (BUCHI, Switzerland) adjusted to a frequency of 400 Hz, electronegativity of 1,200 V, and nozzle temperature of 75 ° C.
  • Spherical gelatin microparticles were formed in the paraffin oil by dropping it into 100 mL of paraffin oil containing .
  • the paraffin oil was assumed to contain 1 mL of 37% formaldehyde in 100 mL of paraffin oil.
  • paraffin oil containing the spherical gelatin particles was stirred at 0° C. at 1,000 rpm and left still for 30 minutes.
  • a first polypeptide having a molecular weight of 50,000 and a second peptide having a molecular weight of 25,000 are cross-linked to form a particle diameter of about 355 ⁇ m to about 500 ⁇ m Gelatin microparticles with
  • gelatin microparticles were prepared by mixing alone, in a ratio of 5:5.
  • Cross-linked gelatin particles were prepared in the same manner as in Example 1, except that the contents of the first polypeptide, the second polypeptide, the third polypeptide, and the fourth polypeptide were as shown in Table 1.
  • Example 1 1 g 1 g - - 20ml 0.2ml
  • Example 2 1.5g - - 0.5g 20ml 0.2ml
  • Example 3 1 g - - 1 g 20ml 0.2ml
  • Example 4 0.5g - - 1.5g 20ml 0.2ml
  • Example 5 - 1.5g 0.5g - 20ml 0.2ml
  • Example 6 - 1 g 1 g - 20ml 0.2ml
  • Example 7 - 0.5g 1.5g - 20ml 0.2ml
  • Example 8 2g - - - 20ml 0.2ml
  • Example 9 2g - - 20ml 0.2ml
  • Example 10 1 g - 1 g - 20ml 0.2ml
  • Example 11 1 g - 1 g 20ml 0.2ml
  • the embolization particles according to the embodiments may have an improved embolic effect and a desired disintegration time.
  • Example 1 355 - 500 ⁇ more than 30 days
  • Example 2 355 - 500 ⁇ within 15 days
  • Example 3 150 - 500 ⁇ 5 days
  • Example 4 150 - 355 ⁇ 5 days
  • Example 5 355 - 500 ⁇ 4 days
  • Example 6 150 - 500 ⁇ 4 days
  • Example 7 150 - 355 ⁇ 2 days
  • Example 8 355 - 500 ⁇ more than 30 days
  • Example 9 150 - 500 ⁇ more than 30 days
  • Example 10 150 - 500 ⁇ within 20 days
  • Example 11 150 - 355 ⁇ within 15 days
  • gelatin micro-particles prepared in the above example were analyzed through a scanning electron microscope, and the gelatin micro-particles of porous spheres having a uniform sponge structure with a particle diameter of about 150 ⁇ m to about 355 ⁇ m were prepared.
  • the present invention relates to micro-particles for embolization and a method for manufacturing the same, and more particularly, using fish gelatin with an average molecular weight of 50,000, 25,000, 10,000, 1,500, having a particle size of about 30 ⁇ m to about 4,000 ⁇ m.
  • micro-particles for embolization which are porous spheres with a sponge structure, biocompatible, expandability, elasticity and flexibility are excellent. Accordingly, the micro-particles for embolization can easily predict blood vessel occlusion time while minimizing vascular stimulation. can
  • the renal artery was accessed through the aorta under fluoroscopy (Integris H5000F, Philips, Bothell, WA, USA), and angiography of the right or left artery was performed using a contrast medium.
  • the embolization particles according to the embodiment were dissolved in physiological saline, and then injected into the renal artery.
  • kidneys of each experimental group were extracted, and the staining and tissue analysis of the kidney tissue were performed.
  • renal arteriography analysis was performed to determine whether there was an embolism effect.
  • the in vitro phase cell line and the embolization particles of Examples were mixed and left at room temperature. Thereafter, the embolization particles were visually observed to determine whether they were decomposed within a few days.
  • microparticles for embolization by the method for producing microparticles for embolization of the present invention is characterized in that gelatin is selectively adjusted to 50,000, 25,000, 10,000, 1,500 molecular weight, crosslinked, and dripped or sprayed on oil. Accordingly, it is possible to easily prepare a porous spherical shape having a uniform sponge structure with a particle size of 30 to 4,000 ⁇ m that can predict and control the embolic absorption time in blood vessels by preventing aggregation of gelatin in the gel state.
  • the embolization particle and its manufacturing method according to the present invention has an appropriate size and an appropriate decomposition rate, is embolized in a target blood vessel, maintains the effect of the embolization procedure until a desired time, and can then be decomposed, so it can be widely applied to tumor treatment can

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

실시예는 색전 시술 입자 및 이의 제조방법이 개시된다. 색전 시술 입자는 제 1 평균 분자량을 가지는 제 1 폴리펩타이드; 및 상기 제 1 평균 분자량보다 더 작은 제 2 평균 분자량을 가지는 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 가교 결합되고, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 동일하거나, 각각 서로 다른 젤라틴으로부터 유래된다. 실시예에 따른 색전 시술 입자는 빠른 분해 속도를 가질 수 있고, 환자의 상태에 따라서 환자의 다른 혈관에 여러번 교체되어 시술될 수 있어서 치료 효과가 우수하다.

Description

색전 시술 입자 및 이의 제조방법
본 발명은 색전 시술 입자 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
색전술(embolization) 또는 색전치료(embolotherapy)는 종양조직에 산소와 영양분을 전달하는 혈액을 차단하기위해 특정물질을 혈관에 삽입하여 종양을 치료하는 물질이다.
일반적인 색전용 삽입물은 생체적합성(biocompatible), 친수성, 비독성(non-toxicity) 및 생분해성(biodegrability)조건을 갖추어야 함에 따라 주로 키토산, 전분, 젤라틴, 알부민, 소듐알긴산 등과 같은 마이크로 입자를 색전물질로 연구하고 있다.
특히 젤라틴은 1960년대 포유류유래 (소, 돼지)젤라틴을 사용하여 지혈용 제품등으로 개발된 것을 응용해 사용하며 다공성의 스폰지 sheet type을 자르거나(cut), 갈아 (mix)가공하여 형태가 불규칙하고, 미세도관 색전시술 중 젤라틴과립이 엉겨 붙어 임상의들이 원하는 색전효과를 기대하기 어렵다.
포유류 유래의 젤라틴 색전물질은 소의 광우병 전염우려와 돼지의 구제역 등의 감염우려가 있고 종교적, 문화적으로 소 관련 섭취를 원하지 않는 힌두교인, 돼지 관련 섭취를 기피하는 이슬람교인에게 포유래 유래의 젤라틴을 대체할 수 있는 젤라틴이 필요로 하다.
한국 공개 번호 제10-2001-0068458호 등에는 폴리아세트산비닐 입자 등을 적용한 색전 재료 등이 개시되어 있다.
본 발명에서는 신체 내에서 분해되는 속도를 조절할 수 있는 색전 시술 입자 및 이의 제조방법을 제공함을 발명의 기술적 과제로 한다.
실시예에 따른 색전 시술 입자는 제 1 평균 분자량을 가지는 제 1 폴리펩타이드; 및 상기 제 1 평균 분자량보다 더 작은 제 2 평균 분자량을 가지는 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 가교 결합되고, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 동일하거나, 각각 서로 다른 젤라틴으로부터 유래된다.
일 실시예에 있어서, 상기 제 2 평균 분자량보다 더 작은 제 3 평균 분자량을 가지는 제 3 폴리펩타이드를 더 포함하고, 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드 및 상기 제 3 폴리펩타이드는 서로 가교 결합될 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 100,000, 15,000 내지 39,000 또는 5,000 내지 14,000이고, 상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 39,000, 5,000 내지 14,000 또는 500 내지 4,000일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 100,000 또는 15,000 내지 39,000이고, 상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 39,000 또는 5,000 내지 14,000이고, 상기 제 3 평균 분자량은 5,000 내지 14,000 또는 500 내지 4,000일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로, 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로, 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로, 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 3 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 제 1 폴리펩파이드, 상기 제 2 폴리펩타이드 및 상기 제 3 폴리펩타이드는 각각 하기의 화학식 1 내지 화학식 6 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000001
여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이고, R2는 수소 또는 알코올기이다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000002
여기서, R2는 수소 또는 알코올기이다.
[화학식 3]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000003
여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
[화학식 4]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000004
여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
[화학식 5]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000005
여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
[화학식 6]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000006
여기서, R2는 수소 또는 알코올기이다.
일 실시예에 따른 색전 시술 입자의 제조방법은 젤라틴을 가수분해하여, 제 1 평균 분자량을 가지는 제 1 폴리펩타이드를 준비하는 단계; 상기 젤라틴과 동일하거나, 다른 젤라틴을 가수분해하여, 상기 제 1 평균 분자량보다 더 작은 제 2 평균 분자량을 가지는 제 2 폴리펩타이드를 준비하는 단계; 및 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드를 가교 결합시키는 단계를 포함한다.
일 실시예에 있어서, 상기 가교 결합시키는 단계에서, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 가교제에 의해서 가교 결합되고, 상기 가교제는 포름알데히드(formaldehyde), 글루타르알데히드(glutaraldehyde), 디알데히드 전분(dialdehyde starch), 에폭시 화합물(epoxy compound), 글루타르알데히드 글리옥살, 글리옥살, 2,2-디메톡시-2-페닐아세토페논, 트리폴리포스페이트 나트륨염, 디아세트알데히드 PEG, 스클레르알데히드(scleraldehyde), 디에틸스쿠아레이트, 에피클로로히드린 및 게니핀(genipin)으로 이루어진 군 중에서 선택되는 적어도 1종 이상일 수 있다.
실시예에 따른 색전 시술 입자는 상대적으로 큰 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드와 상대적으로 작은 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드가 가교 결합되어 형성된다. 이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 원하는 입자 크기를 가지면서도, 원하는 분해 속도를 가질 수 있다. 예를 들어, 상대적으로 큰 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드의 함량 및 평균 분자량에 의해서, 실시예에 따른 색전 시술 입자의 평균 직경이 결정될 수 있다. 또한, 상대적으로 작은 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드의 함량 및 평균 분자량에 의해서, 실시예에 따른 색전 시술 입자의 분해 속도가 결정될 수 있다.
이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드 등의 함량 및 평균 분자량에 의해서, 원하는 입자 크기 및 원하는 분해 속도를 가질 수 있다. 결국, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 적절한 크기 및 적절한 분해 속도를 가지고, 목표 혈관에 색전 시술되어, 원하는 시간까지 색전 시술 효과를 유지하고, 이후 분해될 수 있다.
특히, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 빠른 분해 속도를 가질 수 있고, 첫 번째로 환자에 시술된 이후에 환자의 상태에 따라서 환자의 다른 혈관에 여러번 교체되어 시술될 수 있다. 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 환자를 효과적으로 치료할 수 있다.
도면 1은 실시예에 따른 색전 시술 입자가 제조되는 과정을 도시한 도면이다.
도 2는 실시예 7의 색전 시술 입자를 도시한 사진이다.
도 3은 실시예 9의 색전 시술 입자를 도시한 사진이다.
도 4는 실시예 7의 색전 시술 입자가 상온에서 10일 동안 방치된 후를 도시한 사진이다.
도 5는 실시예 9의 색전 시술 입자가 상온에서 10일 동안 방치된 후를 도시한 사진이다.
실시예에 따른 색전 시술 입자는 폴리펩타이드를 포함한다. 상기 폴리펩타이드는 가교결합된다.
상기 폴리펩타이드는 젤라틴으로부터 유래된다. 상기 폴리펩타이드는 상기 젤라틴이 가수분해되어 얻어질 수 있다.
상기 젤라틴은 포유류 유래 젤라틴 또는 어류 유래 젤라틴을 포함할 수 있다. 특히, 상기 젤라틴은 상기 어류 유래 젤라틴을 포함하는 경우, 종래 소 또는 돼지를 이용한 젤라틴이 갖는 광우병 또는 구제역 발생 우려가 해결될 수 있다.
또한, 상기 폴리펩타이드가 상기 어류 유래 젤라틴으로 형성되는 경우, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 상대적으로 낮은 온도에서 형성될 수 있으며, 균일한 다공성 구형을 가질 수 있다.
상기 젤라틴은 글리신(GLYSINE), 프롤린(PROLINE) 및 하이드록시프롤린(HYDROXYPROLINE) 등을 포함할 수 있다. 이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 반응조건에 따른 탄력성, 유연성 및 팽창성을 가질 수 있다. 이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 혈액 폐쇄 시간을 예측 가능하도록 혈관에 적용될 수 있다.
상기 젤라틴은 어류 유래 젤라틴 일수 있다. 상기 어류 유래 젤라틴은 난류어 어종의 어피로부터 제조되는 것으로, 소 또는 돼지를 이용한 젤라틴에 비해 보다 낮은 온도에서 겔화되는 성질을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 어류 유래 젤라틴은 약 20 내지 약 40에서 용이하게 졸 상태에서 가교되고, 실시예에 따른 색전 시술 입자가 형성될 수 있다.
또한, 상기 젤라틴은 동물 유래 콜라겐 또는 어류 유래 콜라겐으로부터 제조될 수 있다. 상기 젤라틴은 상기 콜라겐에 열이 가해지고, 상기 콜라겐으로부터 추출될 수 있다. 또한, 상기 젤라틴은 마린 콜라겐 펩타이드 또는 콜라겐 펩타이드 등과 같이 일반적으로 시장에서 입수될 수 있다.
상기 폴리펩타이드는 제 1 폴리펩타이드 및 제 2 폴리펩타이드를 포함한다. 상기 제 1 폴리펩타이드는 제 1 평균 분자량을 가지고, 상기 제 2 폴리펩타이드는 제 2 평균 분자량을 가진다. 상기 제 2 평균 분자량은 상기 제 1 평균 분자량보다 더 작다. 즉, 일 실시예에 따른 색전 시술 입자는 제 1 평균 분자량을 가지는 제 1 폴리펩타이드; 및 상기 제 1 평균 분자량보다 더 작은 제 2 평균 분자량을 가지는 제 2 폴리펩타이드; 을 포함하고, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 가교 결합된다.
여기서, 상기 평균 분자량은 중량 평균 분자량을 의미할 수 있다.
상기 젤라틴은 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드 및 제 3 폴리펩타이드를 더 포함할 수 있다. 상기 제 3 폴리펩타이드는 상기 제 2 평균 분자량보다 더 작은 제 3 평균 분자량을 가질 수 있다. 즉, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 상기 제 2 평균 분자량보다 더 작은 제 3 평균 분자량을 가지는 제 3 폴리펩타이드를 더 포함하고, 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드 및 상기 제 3 폴리펩타이드는 서로 가교 결합될 수 있다.
상기 젤라틴은 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드, 상기 제 3 폴리펩타이드 및 제 4 폴리펩타이드를 더 포함할 수 있다. 상기 제 4 폴리펩타이드는 상기 제 3 평균 분자량보다 더 작은 제 4 평균 분자량을 가질 수 있다.
상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 100,000, 15,000 내지 39,000 또는 5,000 내지 14,000이고, 상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 39,000, 5,000 내지 14,000 또는 500 내지 4,000일 수 있다. 더 자세하게, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 60,000, 15,000 내지 30,000 또는 7,000 내지 12,000이고, 상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 30,000, 7,000 내지 12,000 또는 1,000 내지 2,000일 수 있다.
또한, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 100,000 또는 15,000 내지 39,000이고, 상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 39,000 또는 5,000 내지 14,000이고, 상기 제 3 평균 분자량은 5,000 내지 14,000 또는 500 내지 4,000일 수 있다. 더 자세하게, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 60,000 또는 15,000 내지 30,000이고, 상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 30,000 또는 7,000 내지 12,000이고, 상기 제 3 평균 분자량은 7,000 내지 12,000 또는 1,000 내지 2,000일 수 있다.
또한, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 100,000이고, 상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 39,000이고, 상기 제 3 평균 분자량은 5,000 내지 14,000이고, 상기 제 4 평균 분자량은 500 내지 4,000일 수 있다. 더 자세하게, 상기 제 1 평균 분자량은 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 60,000이고, 상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 30,000이고, 상기 제 3 평균 분자량은 7,000 내지 12,000이고, 상기 제 4 평균 분자량은 1,000 내지 2,000일 수 있다.
상기 폴리펩타이드는 상대적으로 높은 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드를 상대적으로 낮은 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드보다 더 많이 포함할 수 있다. 이와 같은 경우, 상기 폴리펩타이드가 가교되어 형성되는 색전 시술 입자는 체내에서, 상대적으로 늦게 분해된다.
예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 또한, 상기 폴리펩타이드는 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 3 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 또한, 상기 폴리펩타이드는 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로 50wt% 내지 70wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 5wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 5wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 3 폴리펩타이드를 포함하고, 5wt 내지 30wt%의 함량으로 제 4 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.
상기 폴리펩타이드는 상대적으로 낮은 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드를 상대적으로 높은 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드보다 더 많이 포함할 수 있다. 이와 같은 경우, 상기 폴리펩타이드가 가교되어 형성되는 색전 시술 입자는 체내에서, 상대적으로 빨리 분해된다.
예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 또한, 상기 폴리펩타이드는 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 3 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 또한, 상기 폴리펩타이드는 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 3 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt 내지 30wt%의 함량으로 제 4 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 3 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.
상기 폴리펩타이드는 카르복실산기 또는 아민기를 포함할 수 있다. 즉, 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드, 상기 제 3 폴리펩타이드 및 상기 제 4 폴리펩타이드는 카르복실산기 또는 아민기를 포함할 수 있다.
또한, 상기 폴리펩타이드는 하기의 화학식 1 내지 6 중 적어도 하나 이상의 구조를 포함할 수 있다. 즉, 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드, 상기 제 3 폴리펩타이드 및 상기 제 4 폴리펩타이드는 각각 하기의 화학식 1 내지 6 중 적어도 하나 이상의 구조를 포함할 수 있다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000007
여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이고, R2는 수소 또는 알코올기이다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000008
여기서, R2는 수소 또는 알코올기이다.
[화학식 3]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000009
여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
[화학식 4]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000010
여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
[화학식 5]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000011
여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
[화학식 6]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000012
여기서, R2는 수소 또는 알코올기이다.
또한, 상기 화학식 3 내지 5에서, 상기 R1은 하기의 화학식 7 또는 화학식 8로 표시될 수 있다.
[화학식 7]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000013
[화학식 8]
Figure PCTKR2019018321-appb-img-000014
실시예에 따른 색전 시술 입자는 상기 폴리펩타이드가 가교 결합되어 형성된다. 실시예에 따른 색전 시술 입자는 가교제를 포함한다. 상기 가교제는 상기 폴리펩타이드를 가교시킨다.
이때, 상기 가교제는 포름알데히드(formaldehyde), 글루타르알데히드(glutaraldehyde), 디알데히드 전분(dialdehyde starch), 에폭시 화합물(epoxy compound), 글루타르알데히드 글리옥살, 글리옥살, 2,2-디메톡시-2-페닐아세토페논, 트리폴리포스페이트 나트륨염, 디아세트알데히드 PEG, 스클레르알데히드(scleraldehyde), 디에틸스쿠아레이트, 에피클로로히드린 및 게니핀(genipin)으로 이루어진 군 중에서 선택되는 적어도 1종 이상인 것을 특징으로 한다.
실시예에 따른 색전 시술 입자는 상기 가교제를 상기 폴리펩타이드 100 중량부를 기준으로, 약 0.25 중량부 내지 약 50 중량부로 포함할 수 있다. 더 자세하게 실시예에 다른 색전 시술 입자는 상기 가교제를 상기 폴리펩타이드 100 중량부를 기준으로 약 3 중량부 내지 약 20 중량부로 포함할 수 있다.
실시예에 따른 색전 시술 입자는 약 10㎛ 내지 약 5,000㎛의 평균 입경을 가질 수 있다. 더 자세하게, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 약 20㎛ 내지 약 4,500㎛의 평균 입경을 가질 수 있다. 더 자세하게, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 약 30㎛ 내지 약 4,000㎛의 평균 입경을 가질 수 있다.
실시예에 따른 색전 시술 입자는 다공성 구조를 가진다. 실시예에 따른 색전 시술 입자는 스펀지 구조를 가질 수 있다. 즉, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 미세 기공을 포함할 수 있다. 실시예에 따른 색전 시술 입자의 약 20vol% 내지 약 70vol%의 공극율을 가질 수 있다. 이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 높은 탄성 및 팽윤율을 가질 수 있다.
실시예에 따른 색전 시술 입자는 상대적으로 큰 평균 분자량을 가지는 젤라틴과 상대적으로 작은 평균 분자량을 가지는 젤라틴이 가교 결합되어 형성된다. 이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 원하는 입자 크기를 가지면서도 원하는 분해 속도를 가질 수 있다. 예를 들어, 상대적으로 큰 평균 분자량을 가지는 젤라틴의 함량 및 평균 분자량에 의해서 실시예에 따른 색전 시술 입자의 평균 직경이 결정될 수 있다. 또한, 상대적으로 작은 평균 분자량을 가지는 젤라틴의 함량 및 평균 분자량에 의해서 실시예에 따른 색전 시술 입자의 분해 속도가 결정될 수 있다.
이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드 등의 함량 및 평균 분자량에 의해서 원하는 입자 크기 및 원하는 분해 속도를 가질 수 있다. 결국, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 적절한 크기 및 적절한 분해 속도를 가지고, 목표 혈관에 색전 시술되어 원하는 시간까지 색전 시술 효과를 유지하고 이후 분해될 수 있다.
특히, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 빠른 분해 속도를 가질 수 있고, 첫번째로 환자에 시술된 이후에 환자의 상태에 따라서 환자의 다른 혈관에 여러번 교체되어 시술될 수 있다. 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 환자를 효과적으로 치료할 수 있다.
실시예에 따른 따른 색전 시술용 마이크로 입자는 젤라틴으로부터 유래된 폴리펩타이드를 이용하여 제조된다. 이에 따라, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 생체적합성(biocompatible), 팽창성, 탄력성 및 유연성이 우수하다. 또한, 실시예에 따른 색전 시술 입자의 입경은 약 50㎛ 내지 약 2000㎛까지 다양할 수 있으며, 실시예에 따른 색전 시술입자는 균일한 스펀지 구조의 다공성 구형을 나타낸다. 이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 혈관 자극을 최소화 할 수 있다.
또한, 다양한 평균 분자량의 폴리펩타이드가 다양한 함량으로 가교되어, 실시예에 따른 색전 시술 입자가 제조될 수 있다. 이에 따라서, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 단독 또는 배합 사용되어, 혈과 폐쇄 지속 시간을 예측 가능하도록 조절할 수 있다.
도 1을 참조하면, 실시예에 따른 다음과 같은 공정에 의해서 제조될 수 있다.
먼저, 젤라틴이 준비된다(S10). 상기 젤라틴은 포유류 유래 젤라틴 또는 어류 유래 젤라틴일 수 있다. 상기 젤라틴의 중량 평균 분자량은 50,000 내지 100,000일 수 있다.
상기 젤라틴은 포유류의 콜라겐 또는 어류의 콜라겐으로부터 얻어질 수 있다. 이와는 다르게, 상기 젤라틴은 상업적으로 입수될 수 있다. 상기 젤라틴은 앞서 설명한 내용이 참고될 수 있다.
이후, 상기 젤라틴은 가수분해된다(S20). 상기 젤라틴은 아임계수 상태에서 가수분해될 수 있다.
보다 자세하게, 상기 젤라틴은 물에 용해 또는 분산되어, 수용액 또는 수분산액이 형성된다. 이때, 상기 수용액 또는 상기 수분산액 내에 젤라틴의 함량은 3wt% 내지 20wt% 일 수 있다.
이후, 상기 수용액 또는 상기 수분산액은 아임계 상태로 일정 시간 동안 유지된다. 예를 들어, 상기 수용액 또는 수분산액은 약 100℃ 내지 약 250℃의 온도에서, 약 30 기압 내지 약 80 기압의 상태로, 약 10분 내지 약 5시간 동안 유지될 수 있다. 이에 따라서, 상기 젤라틴은 가수분해되고, 폴리펩타이드가 형성된다. 또한, 상기 아임계수 상태에서의 가수 분해 과정에 이산화탄소(CO2), 질소(N2)가 포함되어 진행될 수 있다.
또한, 상기 젤라틴은 효소에 의해서 가수분해될 수 있다. 또한, 상기 젤라틴은 산에 의해서, 가수분해될 수 있다. 상기 젤라틴은 상기 아임계수 및 상기 효소에 의해서 동시에 가수분해될 수 있다.
상기 폴리펩타이드는 한 번의 가수분해 공정에 의해서 얻어지거나, 다양한 공정 조건이 적용된 여러 번의 가수분해 공정에 의해서 얻어질 수 있다. 상기 폴리펩타이드는 한 번의 가수분해 공정에 의해서, 동일한 젤라틴으로부터 얻어지거나, 여러 번의 가수분해 공정에 의해서, 서로 다른 젤라틴으로부터 얻어질 수 있다.
이후, 상기 폴리펩타이드는 분획된다(S30). 상기 폴리펩타이드는 겔 여과 크로마토그래피(Gel Filtration Chromatography)에 의해서, 물이 용매로 사용되어, 분자량별로 분획될 수 있다. 상기 폴리펩타이드는 분획 수집기(fraction collector (G1364C 1260 FC-AS, Agilent, USA))가 연결된 HPLC(1260 HPLC system, Agilent, USA)에 의해서, 분획되고, 분자량에 따라서 나누어질 수 있다. 분자량에 따라서 나누어진 폴리펩타이드는 올리고머 또는 폴리머를 분자량 별로 분획할 수 있는 다양한 방법에 의해서, 얻어질 수 있다. 상기 폴리펩타이드는 컬럼을 통하여 분자량별로 분리될 수 있다.
이에 따라서, 분자량에 따른 폴리펩타이드가 얻어질 수 있다. 예를 들어, 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드, 상기 제 3 폴리펩타이드 및 상기 제 4 폴리펩타이드가 얻어질 수 있다.
앞서 설명한 바와 같이, 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드, 상기 제 3 폴리펩타이드 및 상기 제 4 폴리펩타이드는 각각 상기 제 1 평균 분자량, 상기 제 2 평균 분자량, 상기 제 3 평균 분자량 및 상기 제 4 평균 분자량을 가질 수 있다.
예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 분획되어, 약 40,000 내지 60,000의 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드, 약 20,000 내지 약 30,000의 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드, 약 8,000 내지 약 12,000의 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드, 약 1,000 내지 약 2,000의 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드가 각각 얻어질 수 있다.
즉, 상기 젤라틴이 가수 분해되고, 이에 따라서, 얻어진 폴리펩타이드가 분획되어, 원하는 평균 분자량을 가지는 폴리펩타이드가 제조될 수 있다.
이후, 상기 폴리펩타이드는 가교제에 의해서 가교된다(S40). 더 자세하게, 원하는 중량 평균 분자량의 폴리펩타이드가 조합되고, 상기 가교제에 의해서, 가교될 수 있다.
예를 들어, 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드, 상기 제 3 폴리펩타이드 및 상기 제 4 폴리펩타이드 중 적어도 2개 이상의 폴리펩타이드가 조합되어, 상기 가교제에 의해서 가교될 수 있다.
예를 들어, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드가 가교 결합될 수 있다. 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드 및 상기 제 3 폴리펩타이드가 가교제에 의해서 가교 결합될 수 있다. 또한, 상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드, 상기 제 3 폴리펩타이드 및 상기 제 4 폴리펩타이드가 가교제에 의해서 가교 결합될 수 있다.
상기 가교제는 앞서 설명된 바와 같을 수 있다.
상기 가교제는 전체 폴리펩타이드 100 중량부를 기준으로, 약 0.25 중량부 내지 약 50 중량부로 사용될 수 있다. 상기 가교제는 전체 폴리펩타이드 100 중량부를 기준으로 약 3 중량부 내지 약 20 중량부로 사용될 수 있다.
상기 가교 반응은 상기 폴리펩타이드가 약 3wt% 내지 약 10wt%의 함량으로 포함된 수용액에서 진행된다. 상기 가교제가 상기 수용액에, 상기 함량으로 첨가된 후, 약 20℃ 내지 약 40℃의 온도에서, 약 6시간 내지 약 12시간 동안, 상기 폴리펩타이드가 상기 가교제에 의해서 가교반응된다.
예를 들어, 상기 폴리펩타이드 수용액과 가교제 용액은 100:0.5 내지 100:10의 중량비로 혼합된다. 이후, 상기 혼합 용액은 약 20℃ 내지 약 40℃의 온도에서, 약 1,000rpm 내지 약 1,500rpm으로, 약 5분 내지 약 120분간 1차 교반된다. 이후, 상기 1 차 교반된 혼합 용액은 약 20℃ 내지 약 40℃의 온도에서 약 1rpm 내지 약 500rpm으로 약 10분 내지 약 48시간 동안 2차 교반된다. 이에 따라서, 상기 폴리펩타이드가 가교 (cross-linking) 결합된 젤라틴 수용액이 제조될 수 있다.
보다 상세하게, 상기 제 1 차 교반 단계에서, 상기 교반 속도를 약 1,000 rpm 내지 약 1,500rpm의 교반 속도 범위를 벗어날 경우, 거품이 형성되어, 되어 밀도가 낮아지는 문제가 발생될 수 있다. 또한, 상기 제 1 차 교반 단계에서, 20℃ 이하의 온도에서 교반되는 경우, 상기 혼합 용액이 겔화될 수 있다. 또한, 상기 제 1 차 교반 단계에서, 상기 혼합 용액이 40℃ 이상의 온도에서 교반되는 경우, 거품이 생성됨에 따라 밀도가 낮아지는 문제가 발생될 수 있다.
또한, 상기 제 2 차 교반 단계에서, 상기 교반 속도가 500rpm을 초과할 시, 상기 혼합 용액이 겔화됨에 따라 졸 상태로 용이하게 가교할 수 없는 문제가 발생될 수 있으며, 흡수성이 현저히 낮아지는 문제가 발생될 수 있다. 이에 다라서, 상기 교반 속도가 500rpm을 초과하는 경우, 색전 시술용 마이크로 입자로서의 기능성이 저하될 수 있다.
또한, 상기 2차 교반 단계에서, 상기 온도 범위를 벗어날 경우, 상기 혼합 용액이 겔화되어 굳어짐에 따라, 젤라틴 가교 수용액이 용이하게 제조될 수 없을 수 있다. 또한, 상기 제 2 차 교반에서 교반 시간을 10분 ~ 48시간으로 하는 것은 흡수성 향상과 균일한 형상 유지를 위함이다.
이에 따라서, 상기 가교 공정에 의해서, 가교된 젤라틴 수용액이 제조된다. 이후, 상기 가교된 젤라틴 수용액은 유지에 적하 및 분사되어, 겔 상태의 가교된 젤라틴이 응집되는 것을 막으면서, 약 30㎛ 내지 4,000㎛의 입경을 가지는 균일한 스펀지 구조의 다공성 구형 가교된 젤라틴 입자가 제조될 수 있다. 또한, 상기 가교된 젤라틴이 유지에 노출되는 정도가 낮아서, 가교된 젤라틴으로부터 유지가 용이하게 분리될 수 있다.
구형의 스폰지 구조를 가지는 가교된 젤라틴 입자가 형성된다. 상기 가교된 젤라틴 입자는 평균 분자량에 따른 폴리펩타이드의 함량, 가교제의 함량, 가교 온도 및 가교 시간 등에 따라서, 다양한 평균 입경을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 가교된 젤라틴 입자는 상기의 조건에 따라서, 약 30㎛ 내지 약 4,000㎛의 평균 입경을 가질 수 있다.
보다 자세하게, 상기 젤라틴은 어류 젤라틴 일 수 있다. 즉, 상기 가수분해에 사용되는 젤라틴은 어류로부터 유래될 수 있다. 특히, 상기 어류 젤라틴은 난류어 어종의 어피로부터 제조된 것으로서, 소 또는 돼지를 이용한 젤라틴에 비해 보다 낮은 온도에서 겔화되는 성질을 가질 수 있다. 이에 따라서, 상기 어류 젤라틴으로부터 유래된 폴리펩타이드는 약 20 내지 약 40℃의 온도에서, 용이하게 졸 상태에서 가교되어, 입도가 약 30 내지 약 4,000㎛인 균일한 스펀지 구조의 다공성 구체가 형성될 수 있다. 또한, 상기 폴리펩타이드가 상기 어류 젤라틴으로부터 유래될 때, 비겔화 상태일 때의 점도가 낮고, 분자량이 작음에 따라, 보다 고농도로 적하 또는 분사될 수 있다. 이에 다라서, 본 실시예에서, 가시밀도가 높은 젤라틴 마이크로 입자가 제조될 수 있다.
또한, 상기 어류 젤라틴으로부터 유래된 폴리펩타이드 수용액의 농도는 3wt% 내지 약 20wt%일 수 있다. 또한, 상기 2차 교반 단계에서, 제조된 젤라틴 가교 수용액의 가교제 농도는 약 0.05wt% 내지 약 10wt%일 수 있다.
보다 상세하게는, 상기 젤라틴 미립자 유탁액은 인캡슐레이터(Encapsulator)에서 압축공기에 의해 노즐을 통과하여 유지로 분사 또는 적하 하게 된다. 이때, 이때 상기 미립자 용액의 온도는 약 20℃ 내지 약 40℃이고, 노즐을 통과하는 온도는 약 65℃ 내지 약 75℃일 수 있다. 또한, 진동수를 40 ~ 6,000Hz로 함에 따라, 적하 또는 분사되는 구형의 젤라틴 액적의 크기를 제어할 수 있다.
또한, 상기 유지는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 동물 유지 또는 식물 유지일 수 있다. 상세하게는 상기 유지는 올리브유, 콩기름유, 카놀라유, 포도씨유, 대두유, 야자유, 파라핀오일(paraffin oil), 알파-비사볼롤(α-bisabolol), 스테아릴 글리세레티네이트 (stearyl glycyrrhetinate), 살리실산(salicylic acid), 토코페릴 아세테이트 (tocopheryl acetate), 판테놀(panthenol), 글리세릴 스테아레이트 (glyceryl stearate), 세틸옥탄올레이트(cetyl octanolate), 이소프로필 미리스테이트 (isopropyl myristate), 2-에틸렌이소펠라고네이트 (2-ethylene isopelagonate), 디-c12-13 알킬 말레이트 (di-c12-13 alkyl malate), 세테아틸 옥타노에이트 (ceteatyl octanoate), 부틸렌 글리콜디카프틸레이트/디카프레이트 (butylene glycol dicaptylate/dicaprate), 이소노닐이소스테아레이트 (isononyl isostearate), 이소스테아릴 이소스테아레이트(isostearyl isostearate), 세틸 옥타노에이트 (cetyl octanoate), 옥틸도데실 미리스테이트 (octyldodecyl myristate), 세틸 에스테르류 (cetyl esters), c10-30 콜레스테롤/라노스테롤 에스테르 (c10-30 cholesterol/lanosterol ester), 수소화카스터 오일 (hydrogenated castor oil), 모노글리세라이드 (mono-glycerides), 디글리세라이드 (diglycerides), 트리글리세라이드(triglycerides), 비스왁스(beeswax), 카나우바 왁스 (canauba wax), 숙토스 디스테아레이트 (suctosedistearate), PEG-8 비스왁스 (PEG-8 beeswax), 칸델리아 왁스(candelilla(euphorbia cerifera) wax), 미네랄오일, 스쿠알렌 (squalene), 스쿠알란 (squalane), 모노글리세라이드, 디글리세라이드, 트리글리세라이드, 중간사슬글리세라이드, 미글리올(myglyol), 또는 크레모포(cremophor)이다.
바람직하게는 상기 유지는 파라핀 오일일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 보다 바람직하게는 상기 유지는, 유지 100중량%에 대해 0 ~ 5중량%의 가교제가 혼합된 것을 특징으로 하여 상기 유지상에서 젤라틴 미립자가 보다 용이하게 구형을 유지할 수 있도록 한다.
또한, 이때 상기 유지는 0 ~ 10℃의 온도로 냉각되어 존재함에 따라 젤라틴이 용이하게 구형을 형성할 수 있도록 한다.
이에 따라서, 가교된 구형 젤라틴 입자가 제조될 수 있다.
이후, 상기 가교된 젤라틴 입자는 세척되고, 건조된다(S50). 상기 구형의 젤라틴 미립자를 포함하는 유지가 교반된 후, 세척 및 건조 공정을 거쳐서, 스펀지 구조의 다공성 젤라틴 마이크로 입자가 형성될 수 있다.
상기 가교된 구형 젤라틴 입자는 유기 용매에 의해서, 세척될 수 있다.
상기 S40 단계에서 제조된 구형의 젤라틴 미립자를 포함하는 유지는 약 0℃ 내지 약 10℃의 온도에서 약 400rpm 내지 약 1,400rpm으로 교반되고, 정치되고, 유기 용매로 세척된다. 이에 따라서, 상기 가교된 구형 젤라틴 미립자에 포함된 유지 및 가교제가 제거된고, 상기 가교된 구형 젤라틴 입자는 고형화된다.
이후, 상기 고형화된 젤라틴 입자는 약 3시간 내지 약 48시간 동안 동결 건조되고, 이에 따라서, 스펀지 구조의 가교된 다공성 젤라틴 마이크로 입자가 형성된다. 이때 형성된 상기 스펀지 구조의 다공성 젤라틴 마이크로 입자는 약 30㎛ 내지 약 4,000㎛의 입도를 갖는 것을 특징으로 한다.
보다 상세하게는 상기 세척 및 건조 단계에서, 상기 젤라틴 미립자를 포함하는 유지를 400 ~ 1,400rpm으로 교반함으로써, 상기 젤라틴 미립자가 구형으로 용이하게 형성될 수 있도록 함은 물론이고, 상기 구형의 젤라틴이 적합한 물성을 갖도록 한다. 또한, 이때 상기 유지가 0 ~ 10℃의 온도 범위를 유지함에 따라 상기 유지상의 구형의 젤라틴 미립자가 서로 응집되는 것을 방지하여 구형의 형상을 유지할 수 있도록 한다.
또한, 이때 상기 유기 용매는 석유 에테르, 에틸 에테르, 이소프로필 아세테이트, n-프로필 아세테이트, 이소부틸 아세테이트, n-부틸 아세테이트, 이소 부틸 이소부티레이트, 2-에틸헥실 아세테이트, 에틸렌 글리콜 디아세테이트 C9 아세테이트, C10 아세테이트, 메틸 에틸 케톤, 메틸 이소부틸 케톤, 메틸 이소 아밀 케톤, 메틸 n-아밀 키톤, 디부틸 케톤, 사이클로헥사논, 이소포론, 아세트알데하이드, n-부틸알데하이드, 크로톤알데하이드, 2-에틸헥사알데하이드, 이소부틸알데하이드, 프로피온알데하이드, 에틸 3-에톡시프로피오네이트, 톨루엔, 자일렌, 트리클로로에탄, 프로필렌 글리콜 모노메틸 에틸 아세테이트, 에틸렌 글리콜 모노에틸 에테르 아세테이트, 에틸렌 글리콜 모노부틸 에테르, 디에틸렌 글리콜 모노부틸 에테르 아세테이트, 디부틸 프탈레이트, 이데틸 프탈레이트, 디메틸프탈레이트, 디옥틸 프탈레이트, 디옥틸 테레프탈레이트, 부틸 옥틸 프탈레이트, 부틸 벤젠 프탈레이트, 디옥틸 아디페이트, 트리에틸렌 글리콜 디-2-에틸헥사노에이트, 트리옥틸 트리메틸리테이트, 글리세릴 트리아세테이트, 글리세릴/트리프로피오닌, 2,2,4-트리메틸-1,3-펜타네디올 디이소부틸레이트 또는 이들의 혼합물이다.
바람직하게는 상기 유기 용매는 에틸 에테르 또는 이소프로필 아세테이트인 것을 특징으로 한다.
이와 같이 본 발명의 색전 시술용 마이크로 입자는 어류 젤라틴을 이용하여 제조됨에 따라 생체적합성(biocompatible), 팽창성, 탄력성 및 유연성이 우수하고, 입도가 30 ~ 4,000㎛인 균일한 스펀지 구조의 다공성 구형을 나타냄에 따라 혈관 자극을 최소화하면서도 혈관 폐쇄를 용이하게 할 수 있는 것으로, 하기 제조방법에 의해 제조되는 것을 특징으로 한다.
또한, 서로 다른 분자량을 가지는 폴리펩타이드가 가교되어, 실시예에 따른 색전 시술 입자가 형성되기 때문에, 실시예에 따른 색전 시술 입자는 원하는 시점에서 체내에서 분해될 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명하나, 본 발명의 범위가 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
<제조예> 폴리펩타이드의 제조
약 10g의 피시 젤라틴(젤텍, 의료용 젤라틴) 평균 분자량 약 100,000이 준비되었다. 또한, 약 200ml의 정제수에 약 10g 젤라틴이 첨가되었다. 상기 5wt% 젤라틴 용액에 CO2, N2를 첨가하고 고온고압의 110℃, 30Bar 아임계수상태 30분 가수분해 용액이 제조되었다. 상기 가수분해 용액은 겔투과 크로마토 그래피에 의해서 분자량별로 분획되었다. 이에 따라서, 약 50,000의 분자량을 가지는 제 1 폴리펩타이드, 약 25,000의 평균 분자량을 가지는 제 2 폴리펩타이드, 약 10,000의 평균 분자량을 가지는 제 3 폴리펩타이드, 약 1,500의 평균 분자량을 가지는 제 4 폴리펩타이드가 얻어졌다.
<실시예 1> 가교된 젤라틴 입자 제조
이후, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드 각각 1g이 탈이온수에 용해되고, 약 5wt%의 폴리펩타이드 수용액이 제조되었다. 이후, 포름알데히드가 15wt% 메탄올을 포함한 100mL의 수용액에 37ml 첨가하여, 가교제 수용액이 제조되었다.
이후, 상기 젤라틴 수용액 20ml에 상기 가교제 수용액 0.2ml가 첨가되고, 상기 폴리펩타이드 수용액은 약 30에서 1,000rpm의 속도로 30분간 1차 교반되고, 30℃℃에서 400rpm의 속도로 24시간 동안 2차 교반되었다. 이에 따라서, 졸 상태로 가교 결합된 젤라틴 수용액을 제조하였다.
이후, 진동수 400Hz, 전기음성도 1,200V 및 노즐 온도 75℃로 조절한 Encapsulator B-390(BUCHI 사, 스위스)에 상기 제조된 젤라틴 가교 수용액이 주입되고, 압축공기를 통해 상기 Encapsulator B-390의 가교제가 함유된 파라핀 오일 100mL로 적하함으로써 상기 파라핀 오일에 구형의 젤라틴 미립자를 형성하였다. 이때 상기 파라핀 오일은 파라핀 오일 100mL에 37%의 포름알데히드가 1mL 함유된 것으로 하였다.
이후, 상기 구형의 젤라틴 미립자를 포함한 파라핀 오일을 0℃에서 1,000rpm 으로 교반한 후 30분간 정치하였다.
다음으로, 상기 구형의 젤라틴 액적에 이소프로필 에틸 알코올을 첨가하여 세척함으로써, 상기 구형의 젤라틴을 고형화시키고 파라핀 오일 및 포름알데히드를 제거하였다.
상기 고형화된 젤라틴 구체(spheres)를 24시간 동안 동결건조함으로써, 50,000의 분자량을 가지는 제 1 폴리펩타이드와 25,000의 분자량을 가지는 제 2 푤리펩타이드가 가교 결합되어 형성되는 약 355㎛ 내지 약 500㎛의 입경을 가지는 젤라틴 마이크로 입자가 제조되었다.
마지막으로 상기 젤라틴 마이크로 입자를 단독, 5:5비율로 배합하여 제조하였다.
실시예 2-6 및 비교예 1-4
제 1 폴리펩타이드, 제 2 폴리펩타이드, 제 3 폴리펩타이드 및 제 4 폴리펩타이드의 함량이 표 1과 같은 것을 제외하고, 나머지는 실시예 1과 동일하게 가교된 젤라틴 입자가 제조되었다.
구분 분자량5만(g) 분자량2만5천(g) 분자량1만(g) 분자량1500(g) 폴리펩타이드수용액(ml) 가교제수용액(ml)
실시예 1 1g 1g - - 20ml 0.2ml
실시예 2 1.5g - - 0.5g 20ml 0.2ml
실시예 3 1g - - 1g 20ml 0.2ml
실시예 4 0.5g - - 1.5g 20ml 0.2ml
실시예 5 - 1.5g 0.5g - 20ml 0.2ml
실시예 6 - 1g 1g - 20ml 0.2ml
실시예 7 - 0.5g 1.5g - 20ml 0.2ml
실시예 8 2g - - - 20ml 0.2ml
실시예 9 - 2g - - 20ml 0.2ml
실시예 10 1g - 1g - 20ml 0.2ml
실시예 11 - 1g - 1g 20ml 0.2ml
하기의 표 2에서와 같이, 실시예들에 따른 색전 시술 입자는 향상된 색전 효과와 원하는 분해 시간을 가질 수 있다.
구분 입경 범위(㎛) 색전 효과 유무 분해 시간
실시예 1 355 - 500 ○ 30일 이상
실시예 2 355 - 500 ○ 15일 이내
실시예 3 150 - 500 ○ 5 days
실시예 4 150 - 355 ○ 5 days
실시예 5 355 - 500 ○ 4 days
실시예 6 150 - 500 ○ 4 days
실시예 7 150 - 355 ○ 2 days
실시예 8 355 - 500 ○ 30일 이상
실시예 9 150 - 500 ○ 30일 이상
실시예 10 150 - 500 ○ 20일 이내
실시예 11 150 - 355 ○ 15일 이내
<분석예>입경 분석
상기 실시예에서 제조된 젤라틴 마이크로 입자를 주사현미경(scanning electron microscope)를 통하여 분석하였고, 젤라틴 마이크로 입자의 입경이 약 150㎛ 내지 약 355㎛인 균일한 스펀지 구조의 다공성 구체의 젤라틴 마이크로 입자가 제조됨을 확인할 수 있었다
상술한 바와 같이 본 발명은, 색전 시술용 마이크로 입자 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 상세하게는 평균 50,000, 25,000, 10,000, 1,500 분자량 어류 젤라틴을 이용하여 입도가 약 30㎛ 내지 약 4,000㎛인 균일한 스펀지 구조의 다공성 구체인 색전 시술용 마이크로 입자를 제조함에따라 생체적합성(biocompatible), 팽창성, 탄력성 및 유연성이 우수하고, 이에 따라 상기 색전 시술용 마이크로 입자는 혈관 자극을 최소화하면서도 혈관 폐쇄시간를 용이하게 예측할 수 있다.
동물 시험 결과
체중이 약 2.5kg 내지 약 3.5kg의 토기를 마취하고, 고정시킨 후, 동맥 시스템에 마이크로 카테터를 통하여 접근하였다.
이후, 투시하에(Integris H5000F, Philips, Bothell, WA, USA) 대동맥을 통해 신장 동맥으로 접근하였고, 조영제를 이용하여 우측 혹은 좌측동맥의 신장동맥 조영술을 시행하였다.
이후, 실시예에 따른 색전 시술 입자를 생리 식염수에 녹인 후, 신장 동맥에 주입하였다.
이후, 각 실험군의 신장을 적출하고, 신장 조직의 염색 및 조직 분석을 진행하였다. 또한, 신장 동맥 조영 분석을 진행하여, 색전 효과가 있는지를 판단하였다.
용해 시험 평가
인비트로 상 셀라인과 실시예의 색전 시술 입자들이 혼합되고, 상온에서 방치되었다. 이후, 색전 시술 입자들을 육안으로 관찰하여, 몇 일 내에 분해되는지 확인하였다.
또한, 본 발명의 색전 시술용 마이크로 입자의 제조방법에 의한 색전 시술용 마이크로 입자의 제조는 젤라틴을 50,000, 25,000, 10,000, 1,500분자량을 선택 조절한 후 가교하고 유지에 적하 또는 분사하는 것을 특징으로 함에 따라, 겔 상태의 젤라틴이 응집되는 것을 예방하여 혈관내 색전흡수시간을 예측조절가능한 입도가 30 ~ 4,000㎛인 균일한 스펀지 구조의 다공성 구형을 용이하게 제조할 수 있다.
본 발명에 의한 색전 시술 입자 및 이의 제조방법에 의하면, 적절한 크기 및 적절한 분해 속도를 가지고, 목표 혈관에 색전 시술되어, 원하는 시간까지 색전 시술 효과를 유지하고 이후 분해될 수 있어 종양 치료에 널리 적용할 수 있다.

Claims (11)

  1. 제 1 평균 분자량을 가지는 제 1 폴리펩타이드; 및
    상기 제 1 평균 분자량보다 더 작은 제 2 평균 분자량을 가지는 제 2 폴리펩타이드를 포함하고,
    상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 가교 결합되고,
    상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 동일하거나, 각각 서로 다른 젤라틴으로부터 유래되는 색전 시술 입자.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 제 2 평균 분자량보다 더 작은 제 3 평균 분자량을 가지는 제 3 폴리펩타이드를 더 포함하고,
    상기 제 1 폴리펩타이드, 상기 제 2 폴리펩타이드 및 상기 제 3 폴리펩타이드는 서로 가교 결합되는 색전 시술 입자.
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 100,000, 15,000 내지 39,000 또는 5,000 내지 14,000이고,
    상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 39,000, 5,000 내지 14,000 또는 500 내지 4,000인 색전 시술 입자.
  4. 제 2 항에 있어서, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 100,000 또는 15,000 내지 39,000이고,
    상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 39,000 또는 5,000 내지 14,000이고,
    상기 제 3 평균 분자량은 5,000 내지 14,000 또는 500 내지 4,000인 색전 시술 입자.
  5. 제 3 항에 있어서, 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로, 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하는 색전 시술 입자.
  6. 제 3 항에 있어서, 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로, 20wt% 내지 40wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하는 색전 시술 입자.
  7. 제 4 항에 있어서, 전체 폴리펩타이드의 함량을 기준으로, 60wt% 내지 80wt%의 함량으로 상기 제 1 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 2 폴리펩타이드를 포함하고, 10wt% 내지 30wt%의 함량으로 상기 제 3 폴리펩타이드를 포함하는 색전 시술 입자.
  8. 제 1 항에 있어서, 상기 제 1 폴리펩파이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 각각 하기의 화학식 1 내지 화학식 7 중 적어도 하나를 포함하는
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2019018321-appb-img-000015
    여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이고, R2는 수소 또는 알코올기이다.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2019018321-appb-img-000016
    여기서, R2는 수소 또는 알코올기이다.
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2019018321-appb-img-000017
    여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
    [화학식 4]
    Figure PCTKR2019018321-appb-img-000018
    여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
    [화학식 5]
    Figure PCTKR2019018321-appb-img-000019
    여기서, R1은 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20의 알킬기이다.
    [화학식 6]
    Figure PCTKR2019018321-appb-img-000020
    여기서, R2는 수소 또는 알코올기이다.
  9. 젤라틴을 가수분해하여, 제 1 평균 분자량을 가지는 제 1 폴리펩타이드를 준비하는 단계;
    상기 젤라틴과 동일하거나, 다른 젤라틴을 가수분해하여, 상기 제 1 평균 분자량보다 더 작은 제 2 평균 분자량을 가지는 제 2 폴리펩타이드를 준비하는 단계; 및
    상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드를 가교 결합시키는 단계를 포함하는 색전 시술 입자의 제조방법.
  10. 제 9 항에 있어서, 제 1 항에 있어서, 상기 제 1 평균 분자량은 40,000 내지 100,000, 15,000 내지 39,000 또는 5,000 내지 14,000이고,
    상기 제 2 평균 분자량은 15,000 내지 39,000, 5,000 내지 14,000 또는 500 내지 4,000인 색전 시술 입자의 제조방법.
  11. 제 10 항에 있어서, 상기 가교 결합시키는 단계에서, 상기 제 1 폴리펩타이드 및 상기 제 2 폴리펩타이드는 가교제에 의해서 가교 결합되고,
    상기 가교제는 포름알데히드(formaldehyde), 글루타르알데히드(glutaraldehyde), 디알데히드 전분(dialdehyde starch), 에폭시 화합물(epoxy compound), 글루타르알데히드 글리옥살, 글리옥살, 2,2-디메톡시-2-페닐아세토페논, 트리폴리포스페이트 나트륨염, 디아세트알데히드 PEG, 스클레르알데히드(scleraldehyde), 디에틸스쿠아레이트, 에피클로로히드린 및 게니핀(genipin)으로 이루어진 군 중에서 선택되는 적어도 1종 이상인, 색전 시술 입자의 제조방법.
PCT/KR2019/018321 2019-12-23 2019-12-23 색전 시술 입자 및 이의 제조방법 WO2021132741A1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20190172791 2019-12-23
KR10-2019-0172791 2019-12-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2021132741A1 true WO2021132741A1 (ko) 2021-07-01

Family

ID=75461794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2019/018321 WO2021132741A1 (ko) 2019-12-23 2019-12-23 색전 시술 입자 및 이의 제조방법

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20210188946A1 (ko)
EP (1) EP3842077B1 (ko)
KR (1) KR102235900B1 (ko)
WO (1) WO2021132741A1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102605108B1 (ko) * 2021-05-17 2023-11-24 주식회사 엔게인 속용성 젤라틴 입자를 포함하는 근골격계 부위의 통증 완화 또는 치료용 색전재

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0834800A (ja) * 1994-07-27 1996-02-06 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd 新規な生理活性物質
KR100207807B1 (ko) * 1996-11-08 1999-07-15 김세권 항산화성 펩티드 및 그의 생산방법
JP3038202B1 (ja) * 1999-01-18 2000-05-08 日本メナード化粧品株式会社 機能性繊維、その製造方法及び機能性繊維の加工溶液
KR20170095626A (ko) * 2016-02-15 2017-08-23 주식회사 피엘마이크로메드 색전 시술용 마이크로스피어 및 이의 제조방법

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9908014D0 (en) * 1999-04-08 1999-06-02 Scherer Corp R P Pharmaceutical compositions
KR100335866B1 (ko) 2000-01-06 2002-05-10 박호군 폴리아세트산비닐 코어/폴리비닐알코올 외피의 2중 구조를갖는 미세구형 색전재료 및 그의 제조방법
DE102004041340A1 (de) * 2004-08-20 2006-02-23 Deutsche Gelatine-Fabriken Stoess Ag Nanopartikel und Verfahren zu deren Herstellung
JP5307490B2 (ja) * 2008-09-25 2013-10-02 日東電工株式会社 ゼラチン粒子の製造方法
JP4422191B1 (ja) * 2008-09-30 2010-02-24 ゼライス株式会社 架橋ゼラチン、塞栓剤および架橋ゼラチンの製造方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0834800A (ja) * 1994-07-27 1996-02-06 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd 新規な生理活性物質
KR100207807B1 (ko) * 1996-11-08 1999-07-15 김세권 항산화성 펩티드 및 그의 생산방법
JP3038202B1 (ja) * 1999-01-18 2000-05-08 日本メナード化粧品株式会社 機能性繊維、その製造方法及び機能性繊維の加工溶液
KR20170095626A (ko) * 2016-02-15 2017-08-23 주식회사 피엘마이크로메드 색전 시술용 마이크로스피어 및 이의 제조방법

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
STEVENSON ANDRÉ T., JANKUS DANNY J., TARSHIS MAX A., WHITTINGTON ABBY R.: "The correlation between gelatin macroscale differences and nanoparticle properties: providing insight into biopolymer variability", NANOSCALE, ROYAL SOCIETY OF CHEMISTRY, vol. 10, no. 21, 1 January 2018 (2018-01-01), United Kingdom, pages 10094 - 10108, XP055834846, ISSN: 2040-3364, DOI: 10.1039/C8NR00970H *

Also Published As

Publication number Publication date
EP3842077A1 (en) 2021-06-30
EP3842077B1 (en) 2022-10-19
US20210188946A1 (en) 2021-06-24
KR102235900B1 (ko) 2021-04-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2020111895A1 (ko) 생분해성 고분자를 포함하는 화학색전용 수화겔 입자
KR100194827B1 (ko) 서방성 마이크로캡슐
WO2014035206A2 (ko) 색전용 마이크로스피어의 제조방법 및 약물 함유 나노수송체가 결합된 마이크로스피어의 제조방법
WO2019078583A1 (ko) 약물을 포함하는 지속 방출형 마이크로 입자 및 이의 제조 방법
CN1361683A (zh) 含有一种对酸不稳定的活性化合物的新型制剂和药物剂型
WO2021132741A1 (ko) 색전 시술 입자 및 이의 제조방법
US20020090397A1 (en) Novel suppository form comprising an acid-labile active compound
WO2017196051A1 (ko) 다공성의 생분해성 미세입자 및 수용성 천연고분자를 포함하는 성형 필러용 주사제 조성물
EP3313944A1 (en) Two-component bioink, 3d biomaterial comprising the same and method for preparing the same
WO2020197190A1 (en) Method for preparing biocompatible polymer-based apixaban-loaded microspheres
WO2010024615A2 (ko) 용매교류증발법에 의한 서방출성 미립구의 제조방법
WO2017039030A1 (ko) 히알루론산 조성물 및 그의 제조방법
WO2021206440A1 (ko) 색전 시술용 마이크로 비드 및 증식성 질환 치료용 조성물
WO1997000670A1 (en) A composition comprising an active agent dissolved in a glass-forming carrier and a process for the preparation thereof
WO2021091246A1 (ko) 초기 방출 제어가 가능한 서방출성 미립구 및 이의 제조 방법
WO2014168307A1 (ko) 지혈 및 상처치유용 카복시메틸셀룰로오스 폼 및 그의 제조방법
WO2022010317A1 (ko) 도네페질 함유 서방출성 plga 미립구의 제조방법
WO2021010719A1 (ko) 리바스티그민을 포함하는 장기지속형 제제 및 이의 제조방법
WO2019203556A1 (ko) 키토산 섬유성 스폰지 구조의 의료용 드레싱재 및 그 제조 방법
WO2020242234A1 (ko) 캐스파제 저해제 프로드럭을 함유하는 주사용 조성물 및 이의 제조 방법
WO2022124508A1 (ko) 조직 수복용 주사제 조성물 및 이의 제조 방법
WO2020222399A1 (ko) 데슬로렐린을 포함하는 서방성 마이크로 입자 및 이의 제조 방법
KR100341261B1 (ko) 건조가공입자의제조방법,그로부터얻어진건조가공입자및이들입자를함유하는제약조성물
WO2022231360A1 (ko) 분해시간 조절이 가능한 색전용 수화겔 및 이의 제조방법
WO2019039858A1 (ko) 접착제 조성물, 이를 포함하는 접착제 및 이의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 19957084

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 19957084

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 19957084

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1