JP4422191B1 - 架橋ゼラチン、塞栓剤および架橋ゼラチンの製造方法 - Google Patents
架橋ゼラチン、塞栓剤および架橋ゼラチンの製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4422191B1 JP4422191B1 JP2008253616A JP2008253616A JP4422191B1 JP 4422191 B1 JP4422191 B1 JP 4422191B1 JP 2008253616 A JP2008253616 A JP 2008253616A JP 2008253616 A JP2008253616 A JP 2008253616A JP 4422191 B1 JP4422191 B1 JP 4422191B1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- gelatin
- crosslinking
- embolic agent
- embolic
- hours
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 title claims abstract description 117
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 title claims abstract description 117
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 title claims abstract description 117
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 title claims abstract description 117
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 title claims abstract description 116
- 230000003073 embolic effect Effects 0.000 title claims abstract description 63
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims abstract description 59
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 44
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 39
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims abstract description 34
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims abstract description 24
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims abstract description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims abstract description 14
- 230000010108 arterial embolization Effects 0.000 claims description 29
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 10
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 abstract 1
- 230000010102 embolization Effects 0.000 description 29
- 239000000047 product Substances 0.000 description 16
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 14
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 14
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 14
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 13
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 12
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 11
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 10
- 210000002767 hepatic artery Anatomy 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 206010069729 Collateral circulation Diseases 0.000 description 5
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 5
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000002697 interventional radiology Methods 0.000 description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 2
- 230000010109 chemoembolization Effects 0.000 description 2
- BFPSDSIWYFKGBC-UHFFFAOYSA-N chlorotrianisene Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(Cl)=C(C=1C=CC(OC)=CC=1)C1=CC=C(OC)C=C1 BFPSDSIWYFKGBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000001105 femoral artery Anatomy 0.000 description 2
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 2
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 101000856500 Bacillus subtilis subsp. natto Glutathione hydrolase proenzyme Proteins 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 229920001651 Cyanoacrylate Polymers 0.000 description 1
- 206010019635 Hepatic artery embolism Diseases 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 206010038111 Recurrent cancer Diseases 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- NLCKLZIHJQEMCU-UHFFFAOYSA-N cyano prop-2-enoate Chemical class C=CC(=O)OC#N NLCKLZIHJQEMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002594 fluoroscopy Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000007863 gel particle Substances 0.000 description 1
- MAHXCOMHJBHBGO-RTKIROINSA-N hematoxin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2C[C@]2(O)[C@H](OC)C11C=CC(=O)C(O)=C1OC2 MAHXCOMHJBHBGO-RTKIROINSA-N 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002690 local anesthesia Methods 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012798 spherical particle Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
Abstract
【課題】ゼラチン塞栓物質を提供すること。
【解決手段】エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜30万のゼラチンを外来の架橋剤を用いることなく架橋したゼラチンであって、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有する架橋ゼラチン。前記架橋ゼラチンからなる塞栓剤。エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜30万のゼラチンを、外来の架橋剤を用いることなく、実質的に無水の状態で、100〜150℃で加熱して、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有する架橋ゼラチンを得る、架橋ゼラチンの製造方法。
【選択図】なし
【解決手段】エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜30万のゼラチンを外来の架橋剤を用いることなく架橋したゼラチンであって、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有する架橋ゼラチン。前記架橋ゼラチンからなる塞栓剤。エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜30万のゼラチンを、外来の架橋剤を用いることなく、実質的に無水の状態で、100〜150℃で加熱して、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有する架橋ゼラチンを得る、架橋ゼラチンの製造方法。
【選択図】なし
Description
本願発明は、外来の架橋剤を用いることなく架橋して得た架橋ゼラチン、この架橋ゼラチンを用いた塞栓剤および架橋ゼラチンの製造方法に関する。
ＩＶＲ（Interventional Radiology）は、Ｘ線透視像、血管造影像、超音波像、またはＣＴ像を確認しながら針やカテーテルを用いて外科的な手術を実施せずに病気を治療する方法である。手術を必要としないため身体への負担が少なく患部だけを正確に治療することが可能な画期的な方法でもある。その内容は、塞栓した血管や胆管の拡張、出血した血管の止血ならびに癌の死滅など様々である。
特に肝細胞癌治療におけるＩＶＲの貢献度は非常に高い。特に経動脈的塞栓療法（transcatheter arterial embolization； 以下、ＴＡＥと略記）や抗癌剤を用いた経動脈的化学塞栓療法（transcatheter arterial chemoembolization； 以下、ＴＡＣＥと略記）は、多発例、大型の肝癌、切除後の再発例などに幅広く適用が可能な主要な肝細胞癌療法である。また、当治療法は組織選択的治療法であるため、正常細胞の壊死などの副作用も最小限に抑えることができる利点もある。
当治療法の概要を以下に記す。まず、足の付け根に局部麻酔をおこない大腿動脈からカテーテルを挿入して肝動脈を経由し肝細胞癌組織近傍まで送針する。そこから、抗癌剤のリピオドール懸濁液を癌組織に注入し、続いて非イオン性造影剤を用いて懸濁した塞栓物質により癌組織に通じる血管を塞栓して行われる。当治療法によれば、抗癌剤の効果に加え、癌組織への血液の供給を絶つ「いわゆる兵糧攻め」と組み合わせにより、効果的に癌組織を壊死させることができる。
塞栓物質は、これまで自己凝血塊、筋肉片、金属、活性炭粒子、ゼラチンスポンジ、シリコン球、ポリビニルアルコールスポンジ、シアノアクリレート、ポリ乳酸グリコール酸マイクロスフェアーなどの使用が報告されているが、現在のところゼラチンスポンジが世界各国で最も一般的に用いられている。
例えば、特許文献1には、ゼラチン球状粒子の製造法が記載されているが、得られたゼラチン粒子は、グルタルアルデヒドなどの架橋剤を使用して架橋されたものである。グルタルアルデヒドに限らず架橋剤の多くは生体適合性に欠け、それらの残留性及び毒性が懸念されていることが文献等で報告されている。（非特許文献1、2、3など）
特公昭６２−３３２６３号公報
特開２００７−２３１２２５号公報
van Luyn M J., Biomaterials, 13(14), pp.1017-1024(1992)
van Luyn M J., J.Biomed., Mater. Res., 26(8), pp.1091-1110(1992)
Huang Lee LL., J.Biomed., Mater. Res., 24(9), pp.1185-1201(1990)
国内で唯一血管内での塞栓が許可されている製品が、ジェルパート（アステラス製薬（株）製造販売、日本化薬（株）発売）である。このジェルパートは、特許文献1に記載の塞栓剤の実施品であり、一時塞栓物質に分類されるが、完全な再開通率は低く、再開通までに要する時間は１ヶ月以上とも言われている。
例えば、1〜10日間程度の所定の時間は塞栓能を示すが、塞栓治療後に速やかな再開通能および生体内可溶性を示し、残留性及び毒性が懸念されているグルタルアルデヒドなどの架橋剤を使用しないゼラチン塞栓物質は、現在知られていない。
そこで本発明の目的は、上述のようなゼラチン塞栓物質を提供することにある。
ところで、上記塞栓物質として利用されているゼラチンは、ゲル化能、粘性、気泡性ならびに吸着防止能等の特徴から、食用、化粧用、工業用、医薬用等の様々な用途に利用されている天然物由来のタンパク質である。天然物由来であるため、ゼラチンには通常、微量ではあるがエンドトキシンが含まれている。このエンドトキシンは、極めて微量で強い発熱活性を示す耐熱性の毒素であるため、医療分野での利用には、ゼラチンからのエンドトキシン除去は不可欠である。
エンドトキシンは、リポポリサッカライド分子からなり、リポポリサッカライドサブユニットの分子量は、約２万と言われている。エンドトキシンは、熱によって失活するが、熱によってエンドトキシンを完全に失活させるには、２５０℃で３０分以上の加熱が必要である（第十四改正日本薬局方エンドトキシン試験法）。
医療用ゼラチンについても、用途に応じた低エンドトキシン化が必要である。特許文献1の実施例1および2においては、食品用グレードのゼラチンを原料として用いてゲル粒子を作成した後に155℃で4時間加熱することで、エンドトキシンの失活とゼラチンの架橋を行っている。上述のように特許文献1の実施品であるジェルパートは、一時塞栓物質に分類されるが、完全な再開通率は低く、再開通までに要する時間は１ヶ月以上とも言われている。エンドトキシンの失活が必要であることから、155℃で4時間加熱の加熱を行っている。
それに対して本発明者らは、エンドトキシンを低減化したゼラチンを多量生産に適した方法により製造できる方法を確立し、エンドトキシンを低減化した多量のゼラチンを提供することに成功した(特許文献2)。このエンドトキシンを低減化したゼラチンを原料として用いることで、グルタルアルデヒドなどの架橋剤を使用することなく、かつ塞栓能を有し、かつ、塞栓治療後に速やかな再開通能および生体内可溶性を示す水可溶性の塞栓剤として適用可能な、新たな架橋ゼラチンを提供できることを見出して本発明を完成させた。
本発明は以下の通りである。
[1]エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜15万のゼラチンを加熱架橋した架橋ゼラチンであって、前記架橋ゼラチンは生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有するものであり、前記架橋率は、前記加熱架橋を120〜145℃の範囲の温度で実施することで付与される、架橋ゼラチンからなる塞栓剤。
[2]架橋前のゼラチンの分子量が5万〜15万の範囲である[1]に記載の塞栓剤。
[3]架橋率は、生理食塩水への溶解時間が1〜168時間の範囲である[1]または[2]に記載の塞栓剤。
[4]動脈塞栓術用である[1]〜[3]のいずれかに記載の塞栓剤。
[5]肝臓ガンに対する動脈塞栓術用である[1]〜[3]のいずれかに記載の塞栓剤。
[6]架橋ゼラチンが多孔質または実質の粒状品である[1]〜[5]のいずれかに記載の塞栓剤。
[7]塞栓剤を用いた動脈塞栓術を複数回繰返して行う動脈塞栓術用であって、後続の動脈塞栓術は、先行する動脈塞栓術で用いた塞栓剤が溶解した後に先行する動脈塞栓術を行った部位に対して少なくとも1回行われる、[1]〜[6]のいずれかに記載の塞栓剤。
[8]後続の動脈塞栓術は、先行する動脈塞栓術後、疾患の再発が確認された後に行われる[7]に記載の塞栓剤。
[9]エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜15万のゼラチンを、外来の架橋剤を用いることなく、実質的に無水の状態で120〜145℃で加熱して、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有する架橋ゼラチンからなる塞栓剤を得る、塞栓剤の製造方法。
[1]エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜15万のゼラチンを加熱架橋した架橋ゼラチンであって、前記架橋ゼラチンは生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有するものであり、前記架橋率は、前記加熱架橋を120〜145℃の範囲の温度で実施することで付与される、架橋ゼラチンからなる塞栓剤。
[2]架橋前のゼラチンの分子量が5万〜15万の範囲である[1]に記載の塞栓剤。
[3]架橋率は、生理食塩水への溶解時間が1〜168時間の範囲である[1]または[2]に記載の塞栓剤。
[4]動脈塞栓術用である[1]〜[3]のいずれかに記載の塞栓剤。
[5]肝臓ガンに対する動脈塞栓術用である[1]〜[3]のいずれかに記載の塞栓剤。
[6]架橋ゼラチンが多孔質または実質の粒状品である[1]〜[5]のいずれかに記載の塞栓剤。
[7]塞栓剤を用いた動脈塞栓術を複数回繰返して行う動脈塞栓術用であって、後続の動脈塞栓術は、先行する動脈塞栓術で用いた塞栓剤が溶解した後に先行する動脈塞栓術を行った部位に対して少なくとも1回行われる、[1]〜[6]のいずれかに記載の塞栓剤。
[8]後続の動脈塞栓術は、先行する動脈塞栓術後、疾患の再発が確認された後に行われる[7]に記載の塞栓剤。
[9]エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜15万のゼラチンを、外来の架橋剤を用いることなく、実質的に無水の状態で120〜145℃で加熱して、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有する架橋ゼラチンからなる塞栓剤を得る、塞栓剤の製造方法。
本発明によれば、塞栓治療に必要な所定の時間は塞栓能を有し、塞栓治療完了後に速やかな再開通能および生体内可溶性を示す架橋ゼラチンからなる塞栓物質を提供できる。しかも、本発明の架橋ゼラチンは、残留性及び毒性が懸念されているグルタルアルデヒドなどの架橋剤を使用しない。本発明の架橋ゼラチンからなる塞栓物質であれば、従来品と異なり側副血行路が発達し難く、癌組織への血液の供給を絶つ「兵糧攻め」の効果を最大限に発揮させることが可能である。さらに、再開通後の塞栓部位に塞栓物質が殆ど残留しないため、ＴＡＥやＴＡＣＥが何度も実施でき、再発する癌組織への治療に特に有効であろうと考えられる。特徴である水への可溶に要する時間は０．５〜２４０時間の範囲で調整可能であり、生体内可溶性に要する時間あるいは塞栓時間は、例えば、１〜６日間の範囲で調整可能であり、癌治療に限らず幅広く利用することが可能である。
[架橋ゼラチン]
本発明の架橋ゼラチンは、エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜30万のゼラチンを外来の架橋剤を用いることなく架橋したゼラチンであって、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有することを特徴とする。
本発明の架橋ゼラチンは、エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜30万のゼラチンを外来の架橋剤を用いることなく架橋したゼラチンであって、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有することを特徴とする。
本発明の架橋ゼラチンは、(1)エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜30万のゼラチンを原料として使用するものであること、(2)この原料ゼラチンを外来の架橋剤を用いることなく架橋したものであること、(3)架橋の程度は、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有すること、を特徴とする。
本発明の架橋ゼラチンの原料となるエンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜30万のゼラチンは、特許文献2(特開２００７−２３１２２５号公報)に記載の方法により製造することができる。より具体的には、天然由来のゼラチンからである、ゼラチンおよびエンドトキシンを含む原料ゼラチンを含有する溶液を、分画分子量が3万から30万の範囲であり、所望の分子量に対応した分画分子量を有する限外ろ過膜で処理して、透過液として得られたものである。
特に本発明では、残留エンドトキシン濃度が低ければ低いほど好ましく、好ましくは０．１ＥＵ／ｍＬ未満、より好ましくは０．０５ＥＵ／ｍＬ未満、さらに好ましくは０．０３ＥＵ／ｍＬ未満である。このようなより低いエンドトキシン濃度を有する分子量3万〜30万のゼラチンを得るという観点からは、上記限外ろ過膜での処理は、例えば、原料ゼラチンとしてエンドトキシン濃度の低いものを用いる、あるいは、2回以上限外ろ過膜で処理することもできる。また、限外ろ過膜の分画分子量が小さいほどエンドトキシン除去効果は高いことから、分画分子量が小さい限外ろ過膜を用いて調製した、分子量の小さいゼラチンを原料ゼラチンとして用いることもできる。
さらに、架橋前のゼラチンの分子量は、架橋の程度にもよるが、架橋ゼラチンの溶解時間に影響を与え、架橋前のゼラチンの分子量が小さいほど架橋の程度が同じであれば溶解時間は短くなる。生理食塩水への溶解時間は、240時間以下であり、好ましくは、後述するように1〜168時間の範囲である。
本発明の架橋ゼラチンの架橋の程度を示す架橋率は、生理食塩水への溶解時間として表すことができ、240時間以下である。上記のように、架橋率は、架橋前のゼラチンの分子量に依存するが、架橋前のゼラチンの分子量以外に、架橋のための加熱の温度と時間にも依存する。加熱の温度が高くなればなるほど、また加熱の時間が長くなればなるほど、架橋率は高くなる。実施例に示す実験結果によれば、加熱温度は、100〜160℃の範囲とすることが適当である。加熱の時間は、架橋前のゼラチンの分子量、加熱温度および所望の架橋率(生理食塩水への溶解時間)に応じて適宜決定することができる。尚、架橋ゼラチンの生理食塩水への溶解時間は、架橋条件を変えることで240時間(10日間)を超える例えば、366時間(14日間)以下にすることも可能である。
本発明は、本発明の架橋ゼラチンの製造方法も包含し、この製造方法は、エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜15万のゼラチンを、外来の架橋剤を用いることなく、実質的に無水の状態で、100〜160℃で加熱して、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有する架橋ゼラチンを得る、ことを含むものである。
前述のように、タンパク質１．０ ％当たりのエンドトキシン量を１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させたゼラチンは、ゼラチンおよびエンドトキシンを含む原料ゼラチン含有溶液を、分画分子量が3万から30万の範囲である分画分子量を有する限外ろ過膜で処理して、透過液として得られたものである。
架橋は、原料ゼラチンを、外来の架橋剤を用いることなく、実質的に無水の状態で、100〜160℃で加熱して行う。外来の架橋剤を用いることなく、とは、原料ゼラチンをそのまま、第三成分を添加することなく加熱することを意味する。実質的に無水の状態とは、本発明の目的を損ねない範囲内の水分含量で、加熱架橋時に粒子が溶解しない範囲内の水分含量とも言える。例えば、水分含量で示すと、30％未満、さらには20％未満、さらには10％未満が好ましい。実質的に無水の状態は、原料ゼラチンを、予め乾燥することで得られる。予め乾燥させずにゼラチン溶液のまま加熱処理を実施しても熱架橋は起きにくい。予めの乾燥は、熱架橋処理に対する影響の少ない凍結乾燥のような熱架橋が起こらない乾燥方法が望ましい。そのような乾燥方法としては、例えば、造粒乾燥やスプレードライヤーによる乾燥方法を挙げることができる。
加熱温度は、100〜160℃の範囲から、所望の架橋率(生理食塩水への溶解時間)に応じて、加熱の時間および架橋前のゼラチンの分子量も考慮して、適宜決定することができる。例えば、架橋前のゼラチン(凍結乾燥品の場合)の分子量が5万の場合には、加熱時間を24時間とした場合には、130〜150℃の範囲、好ましく130〜145℃の範囲、より好ましくは130〜140℃の範囲であることが、所望の架橋率(生理食塩水への溶解時間)の架橋ゼラチンが得られるという観点から適当である。架橋前のゼラチンの分子量が10万の場合には、加熱時間を24時間とした場合には、110〜135℃の範囲、好ましく120〜130℃の範囲、より好ましくは130〜140℃の範囲であることが、所望の架橋率(生理食塩水への溶解時間)の架橋ゼラチンが得られるという観点から適当である。これら架橋率は加熱時間を24時間とした場合のものであり、加熱時間が短くなれば、架橋率も変化する。加熱時間は、例えば、30分から48時間の範囲、好ましくは1時間〜24時間の範囲から適宜設定できる。
本発明の架橋ゼラチンにおいて、架橋率は、好ましくは、生理食塩水への溶解時間が1〜168時間の範囲である。生理食塩水への溶解時間が1〜168時間の範囲である架橋ゼラチンは、本発明の架橋ゼラチンを塞栓剤として用いる場合に、特に有効だからである。本発明の架橋ゼラチンを塞栓剤として用いる場合、塞栓剤の利用形態により、生理食塩水への溶解時間は、架橋率や原料ゼラチンの分子量を変化させることで、1〜168時間の範囲で、短くしたり長くしたりすることができる。勿論、168時間を超えて、240時間、さらには、336時間まで、伸ばすことは技術的に十分可能である。
本発明は、上記本発明の架橋ゼラチンからなる塞栓剤も包含する。塞栓剤は前述のように、肝細胞癌治療におけるＩＶＲにおいて利用さており、本発明の架橋ゼラチンからなる塞栓剤は、塞栓治療に必要な所定の時間は塞栓能を有し、かつ、比較的短期間での溶解が可能であることから、塞栓治療完了後に速やかな再開通能および生体内可溶性を示す点を特徴とする。
本発明の塞栓剤は、動脈塞栓術用とすることができ、特に、肝臓ガンに対する動脈塞栓術用として有用である。本発明の塞栓剤は、塞栓剤としての機能を考慮すると、多孔質または実質の粒状品である架橋ゼラチンからなるものであることが適当である。多孔質または実質の粒状品の粒子径は、例えば、20〜2,000μmの範囲であることができる。
特に本発明の塞栓剤は、塞栓剤を用いた動脈塞栓術を複数回繰返して行う動脈塞栓術用として有用であり、後続の動脈塞栓術は、先行する動脈塞栓術で用いた塞栓剤が溶解した後に先行する動脈塞栓術を行った部位に対して少なくとも1回行われる。本発明の塞栓剤は、比較的短期間で生体内溶解を示すことから、複数回の動脈塞栓術を繰返実施することが可能であり、複数回の動脈塞栓術を繰返実施することで、動脈塞栓術の効果を高めることができる。後続の動脈塞栓術は、先行する動脈塞栓術後、疾患、例えば、肝臓ガンの再発が確認された後に行われる。
以下に、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。
ゼラチン（分子量5万、エンドトキシン含有量:タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満）を十分に膨潤させた後、６０℃のお湯にて湯煎し溶解させ、２０％溶液を調製した。ゼラチン溶液が固化しないように５５℃に保温しながら、造粒乾燥装置（スプリュ−ドＳＧＤ-０．５：大川原製作所）を用いて噴霧乾燥させることで造粒品を得ることが可能であった。得られた造粒品を篩にかけ、２５０〜８５０μｍ、８５０〜１４００μｍ、及び１４００〜２０００μｍの3種類の粒度分布の造粒サンプルを作製した。
得られたサンプルは、乾熱滅菌機（ＤＶＳ４０１：ヤマト科学）を用いて１１０〜１５０℃、２４時間の加熱処理をおこなった。加熱処理無しのサンプルを比較対照として加熱温度による可溶化時間への影響を検討した。粒度分布の異なる加熱サンプル（４．０ｇ）を蓋付容器に入れた。図１に、粒度分布の異なる造粒サンプルを蓋付容器に入れた外観を示す。上段：加熱処理なし、下段：加熱処理（１２０℃、２４時間）あり。上下段ともに左から２５０〜８５０μｍ、８５０〜１４００μｍ、及び１４００〜２０００μｍの粒度分布の造粒品が容器に入っている状態である。
容器毎に生理食塩水を３７ｍＬ注ぎ、粒を壊さないように分散させ蓋を閉めた。３７℃に設定した振とう機付き恒温水槽（ＷＡＴＥＲ ＢＡＴＨ ＳＢ−２４：ＥＹＥＬＡ）にセットし、振とうスピード レベル５にて振とう保温した。その後、任意の時刻に軽く攪拌し、蓋を開け、上清のタンパク質（ゼラチン）濃度を測定して可溶化時間を測定した。結果を図２に示す。
図２は、加熱処理における造粒ゼラチンの可溶化への影響を検討した結果である。グラフ上段：２５０〜８５０μｍ、中段：８５０〜１４００μｍ、そして下段：１４００〜２０００μｍの粒度分布の結果を示し、左側に１２時間までの結果、右側に２４０時間（１０日間）までの結果を示した。加熱処理を行った造粒サンプルは、粒度分布に関わらず検討開始１２時間目までに加熱温度と可溶化に要する時間に相関が認められ、加熱温度が高いほど可溶化しにくくなることがわかった。１１０〜１３０℃までの加熱処理を行うことにより、全て可溶化するまでに数時間から１ないし２日、１４０〜１５０℃では、数日〜１０日間を要する可溶化ゼラチンを得ることができることがわかった。どの粒度分布の造粒品も非加熱処理ならば、０．５時間以内に全量可溶化するのに対し、加熱処理によって、全て可溶化するまでに要する時間を数時間から約１０日間まで変化させることができた。
分子量の異なる２種類のゼラチン（ＭＷ：１００，０００ならびにＭＷ：５０，０００、エンドトキシン含有量:タンパク質１．０ ％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満）を溶解させ、２％溶液を調製した。蓋付容器に２種類のゼラチン溶液を別々に注ぎ、マイナス８０℃の冷凍庫（ＣＬ-１００Ｆ２：日本フリーザー）へ一晩放置して凍結させた。次の日、凍結乾燥機（FDU-830：EYELA）を用いて減圧しながら乾燥を開始し、４８時間後に乾燥を終了させた。得られた凍結乾燥品は乾熱滅菌機（ＤＶＳ４０１：ヤマト科学）を用いて加熱温度１１０〜１５０℃、２４時間の処理をおこなった。加熱処理したゼラチンは、メス刃および眼科剪刀にて１〜２mm角細片を作製した。角細片の写真を図３に示す。
得られた熱処理ゼラチン（１〜２mm角細片）を試験管に２０粒計り取り、生理食塩水を１０ｍＬ入れ、３７℃に設定した恒温水槽（ＷＡＴＥＲ ＢＡＴＨ ＳＢ−２４：ＥＹＥＬＡ）にセットし、振とうスピードをレベル５にて振とう保温した。定時に試験管の中身をシャーレに移し替え、不溶解物を目視で確認できなくなった時間を可溶化時間とした。架橋のための加熱温度（架橋温度）と完全に可溶化するまでに要した時間の関係を図４に示す。ゼラチンの分子量によって、架橋温度と完全可溶化までに要した時間との関係が異なることが分かる。
図には示さないが、比較対照に行ったジェルパートは、１４日間まで可溶化する様子が認められなかった。分子量約１００，０００の凍結乾燥ゼラチンへ加熱処理（１５０℃、２４時間）を実施すれば、ジェルパートと同様に１４日間まで水可溶化しない性質も付加させることができた。
［試験例１］
正常豚肝動脈塞栓に関する実験方法を説明する。
実施例２で製造された熱処理ゼラチン（１〜２ｍｍ角細片）に造影剤を染み込ませたものを実験に使用した。比較対照としてジェルパート（２ｍｍ角）を用いた。正常雌豚（９頭）に全身麻酔を行い、大腿部を消毒後、血管カテーテルを用いて大腿動脈から蛍光透視下にて左肝動脈、内側枝および外側枝に血流がほぼ完全に遮断されるまで熱処理ゼラチンまたはジェルパートをゆっくり注入した。総計２７本の血管に塞栓術を行い、塞栓後、４時間、1日、２日、３日、５日、そして６日目に肝動脈を造影し、塞栓周辺の状態を観察した。結果を図５、６、７に示す。
正常豚肝動脈塞栓に関する実験方法を説明する。
実施例２で製造された熱処理ゼラチン（１〜２ｍｍ角細片）に造影剤を染み込ませたものを実験に使用した。比較対照としてジェルパート（２ｍｍ角）を用いた。正常雌豚（９頭）に全身麻酔を行い、大腿部を消毒後、血管カテーテルを用いて大腿動脈から蛍光透視下にて左肝動脈、内側枝および外側枝に血流がほぼ完全に遮断されるまで熱処理ゼラチンまたはジェルパートをゆっくり注入した。総計２７本の血管に塞栓術を行い、塞栓後、４時間、1日、２日、３日、５日、そして６日目に肝動脈を造影し、塞栓周辺の状態を観察した。結果を図５、６、７に示す。
図５は、ジェルパートを用いた正常豚肝動脈塞栓の経過観察結果である。In Vitroの可溶化試験の結果は、１４日間経過しても可溶化する様子は認められなかった。In Vivoの結果は、６日間経過しても再開通する様子はなく、塞栓３日後には、側副血行路が認められた。（塞栓部位：△、側副血行路：↑）生体内に存在するタンパク質分解酵素により多少は分解されていると思われるが、６日目までに再開通する様子は確認することができない。塞栓時間はかなり長いと思われた。
図６は、加熱処理（１２５℃、２４時間）を行ったゼラチン（分子量：約１００，０００）を用いた正常豚肝動脈塞栓の経過観察結果である。In Vitroの可溶化試験の結果は、２．４日間目に全て可溶化した。In Vivoにおいては、４時間を経過しても再開通せず確実に塞栓されていたが、塞栓１日目後には再開通が確認され、側副血行路は認められなかった。（塞栓部位：△）In Vitroの可溶化試験の塞栓時間より、In Vivoの塞栓時間が短くなる理由は、生体内に存在するタンパク質分解酵素によって塞栓物質が分解され、再開通しやすくなったためだと考えている。
図７は、加熱処理（１３５℃、２４時間）を行ったゼラチン（分子量：約５０，０００）を用いた正常豚肝動脈塞栓の経過観察結果である。In Vitroの可溶化試験の結果は、２．４日間目に全量可溶化した。In Vivoにおいて、塞栓１日目後には再開通しており、側副血行路は認められない。（塞栓部位：△）In Vivoの塞栓時間が短くなる理由は、生体内に存在するタンパク質分解酵素によって塞栓物質が分解され、再開通しやすくなったためだと考えている。
CRP、白血球、AST、総ビリルビン、γ-GTPとクレアチニンの変化を評価するために、塞栓前、塞栓後１日、３日、そして５日目に採血した。比較対照も含め全例で異常値は見当たらなかった（データは示さない）。
全例とも６日後に、屠殺し、臓器を摘出した。摘出した臓器は、１０％ホルマリン溶液により固定した。各検体から５個程度の組織片を採取して作製した切片についてヘマトキシン・エオシン染色を実施し、顕微鏡下で観察した。観察結果に異常はなかった。血管の断面写真を図８に示す。
図８は、塞栓６日後の塞栓部の血管断面図である。左図は本特許品（１３５℃、２４時間加熱処理品）で塞栓した血管を、右図はジェルパートにて塞栓した血管を示している。実施例４で作製した加熱処理ゼラチンを塞栓した血管は、すべて1日目には再開通しており、６日目の血管内に塞栓物質は、予想通り認められなかった。一方、ジェルパートは塞栓６日後も塞栓し続け、側副血行路が発達しており、塞栓部には塞栓物質が予想通りにはっきりと確認できた。ジェルパートは、生体内に存在するタンパク質分解酵素と接触しても、６日目まで再開通する様子が認められなかった。本発明のサンプルと比較すると、非常に分解されにくい印象であった。
本発明は、動脈塞栓術等に用いることでできるが塞栓剤として利用できる架橋ゼラチンを提供できる。
Claims (9)
- エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜15万のゼラチンを加熱架橋した架橋ゼラチンであって、前記架橋ゼラチンは生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有するものであり、前記架橋率は、前記加熱架橋を120〜145℃の範囲の温度で実施することで付与される、架橋ゼラチンからなる塞栓剤。
- 架橋前のゼラチンの分子量が5万〜15万の範囲である請求項1に記載の塞栓剤。
- 架橋率は、生理食塩水への溶解時間が1〜168時間の範囲である請求項1または2に記載の塞栓剤。
- 動脈塞栓術用である請求項1〜3のいずれかに記載の塞栓剤。
- 肝臓ガンに対する動脈塞栓術用である請求項1〜3のいずれかに記載の塞栓剤。
- 架橋ゼラチンが多孔質または実質の粒状品である請求項1〜5のいずれかに記載の塞栓剤。
- 塞栓剤を用いた動脈塞栓術を複数回繰返して行う動脈塞栓術用であって、後続の動脈塞栓術は、先行する動脈塞栓術で用いた塞栓剤が溶解した後に先行する動脈塞栓術を行った部位に対して少なくとも1回行われる、請求項1〜6のいずれかに記載の塞栓剤。
- 後続の動脈塞栓術は、先行する動脈塞栓術後、疾患の再発が確認された後に行われる請求項7に記載の塞栓剤。
- エンドトキシン含有量を、タンパク質１．０％当たり１ＥＵ／ｍＬ未満に低下させた、分子量3万〜15万のゼラチンを、外来の架橋剤を用いることなく、実質的に無水の状態で120〜145℃で加熱して、生理食塩水への溶解時間が240時間以下である架橋率を有する架橋ゼラチンからなる塞栓剤を得る、塞栓剤の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2008253616A JP4422191B1 (ja) | 2008-09-30 | 2008-09-30 | 架橋ゼラチン、塞栓剤および架橋ゼラチンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2008253616A JP4422191B1 (ja) | 2008-09-30 | 2008-09-30 | 架橋ゼラチン、塞栓剤および架橋ゼラチンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP4422191B1 true JP4422191B1 (ja) | 2010-02-24 |
| JP2010083788A JP2010083788A (ja) | 2010-04-15 |
Family
ID=42016923
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2008253616A Active JP4422191B1 (ja) | 2008-09-30 | 2008-09-30 | 架橋ゼラチン、塞栓剤および架橋ゼラチンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4422191B1 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103656625A (zh) * | 2012-09-18 | 2014-03-26 | 日东电工株式会社 | 明胶粒子及其用途、和给用生理活性物质的装置 |
| CN105025940A (zh) * | 2013-02-27 | 2015-11-04 | 富士胶片株式会社 | 细胞移植用细胞结构体、生物亲和性高分子块及它们的制造方法 |
| CN111065421A (zh) * | 2017-09-04 | 2020-04-24 | 国立研究开发法人物质·材料研究机构 | 含有交联明胶衍生物粒子的伤口敷料 |
| US20200368402A1 (en) * | 2019-05-10 | 2020-11-26 | Incept, Llc | Embolization with transient materials |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104244999B (zh) * | 2012-03-12 | 2017-02-22 | 富士胶片株式会社 | 组织修复材料的制造方法 |
| CN113227129A (zh) | 2018-12-26 | 2021-08-06 | 国立研究开发法人物质·材料研究机构 | 粉体、创伤被覆材料、防粘连材料、止血材料及粉体的制造方法 |
| CN110876812A (zh) * | 2019-12-06 | 2020-03-13 | 赛克赛斯生物科技股份有限公司 | 明胶海绵栓塞剂及其制备方法和应用、治疗血管疾病或肿瘤的药物 |
| WO2021132741A1 (ko) * | 2019-12-23 | 2021-07-01 | 주식회사 피엘마이크로메드 | 색전 시술 입자 및 이의 제조방법 |
-
2008
- 2008-09-30 JP JP2008253616A patent/JP4422191B1/ja active Active
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103656625A (zh) * | 2012-09-18 | 2014-03-26 | 日东电工株式会社 | 明胶粒子及其用途、和给用生理活性物质的装置 |
| CN105025940A (zh) * | 2013-02-27 | 2015-11-04 | 富士胶片株式会社 | 细胞移植用细胞结构体、生物亲和性高分子块及它们的制造方法 |
| EP2962703A4 (en) * | 2013-02-27 | 2016-02-24 | Fujifilm Corp | CELLULAR STRUCTURE FOR CELL TRANSPLANTATION, BIOCOMPATIBLE POLYMER BLOCK AND METHODS FOR PRODUCING SAME |
| CN111065421A (zh) * | 2017-09-04 | 2020-04-24 | 国立研究开发法人物质·材料研究机构 | 含有交联明胶衍生物粒子的伤口敷料 |
| US20200368402A1 (en) * | 2019-05-10 | 2020-11-26 | Incept, Llc | Embolization with transient materials |
| CN113873956A (zh) * | 2019-05-10 | 2021-12-31 | 因赛普特有限责任公司 | 使用暂时性材料的栓塞 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2010083788A (ja) | 2010-04-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4422191B1 (ja) | 架橋ゼラチン、塞栓剤および架橋ゼラチンの製造方法 | |
| Hong et al. | A strongly adhesive hemostatic hydrogel for the repair of arterial and heart bleeds | |
| JP6235104B2 (ja) | 止血組成物 | |
| Rong et al. | Alginate-calcium microsphere loaded with thrombin: a new composite biomaterial for hemostatic embolization | |
| JP3804071B2 (ja) | 部分的に加水分解されたポリビニルアセテートを含有する液体塞栓剤 | |
| JP5320290B2 (ja) | 可撓性生体吸収性止血性の充填材及びステント | |
| JP2009082728A (ja) | 血管の障害を治療するための組成物、システムおよび方法 | |
| Li et al. | Immobilized thrombin on X-ray radiopaque polyvinyl alcohol/chitosan embolic microspheres for precise localization and topical blood coagulation | |
| JP2005500102A (ja) | 乾燥止血組成物およびそれらの調製のための方法 | |
| Dowling et al. | Determination of efficacy of a novel alginate dressing in a lethal arterial injury model in swine | |
| WO2013060769A2 (en) | Hemostatic compositions | |
| Becker et al. | Calcium alginate gel as a biocompatible material for endovascular arteriovenous malformation embolization: six-month results in an animal model | |
| Wang et al. | Biocompatibility, hemostatic properties, and wound healing evaluation of tilapia skin collagen sponges | |
| TW202102254A (zh) | 擔載凝血酶之止血用片材 | |
| JPH0129774B2 (ja) | ||
| CN107376005A (zh) | 一种生物可降解医用止血纸及其制备方法 | |
| CN111298188A (zh) | 自固化双组分离子和温度双敏感型消化道粘膜保护胶及其应用 | |
| EP3542830B1 (en) | Sol for occluding holes in living tissue, protecting ulcers, and treating vascular embolization | |
| EP4289450A1 (en) | Embolization hydrogel having controllable degradation time, and preparation method therefor | |
| Totre et al. | Properties and hemostatic application of gelatin | |
| EP3934704B1 (en) | Particulate gel for the treatment of a bleeding in the sinus or nasal cavity | |
| RU2721604C1 (ru) | Способ получения остеопластических биоматериалов из костной ткани | |
| JP2010162063A (ja) | 塞栓材 | |
| KR101633226B1 (ko) | 인공혈관의 제조방법 | |
| JP2020130541A (ja) | 医療材料およびその製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20091201 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20091203 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121211 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4422191 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121211 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121211 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121211 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131211 Year of fee payment: 4 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |