WO2021075929A1 - 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물 - Google Patents

애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물 Download PDF

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WO2021075929A1
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skin
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heparin
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이태호
손용성
백남준
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동아제약 주식회사
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Definitions

  • the present invention relates to a composition for improving skin damage comprising an aeyeop extract, and more specifically (i) aeyeop extract; (ii) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) a cosmetic composition for improving skin damage and an external preparation for skin comprising dexpanthenol as an active ingredient, a method for improving skin damage using the same, and a use thereof for improving skin damage.
  • the skin is in direct contact with the external environment and is responsible for protecting the body from various harmful factors.
  • Such skin is damaged by various factors such as aging, stress, trauma, external pollutants, and ultraviolet rays, and from this, phenomena such as wounds, skin wrinkles, pigmentation, elasticity reduction, and inflammatory reactions occur in combination.
  • phenomena such as wounds, skin wrinkles, pigmentation, elasticity reduction, and inflammatory reactions occur in combination.
  • interest in skin beauty is increasing day by day, attempts are being made to overcome this phenomenon.At the same time, interest and demand for functional cosmetics related to skin regeneration, wrinkle improvement, elasticity improvement, pigmentation improvement, inflammation improvement, etc. Is increasing.
  • Non-Patent Document 1 Effects of NoscarnaTM on Hypertrophic Scarring in the Rabbit Ear Model: Histopathological Aspects. Archives of Pharmacal Research. 2012. Vol. 35, No. 11, pp. 1999-2006.
  • the present invention provides a cosmetic composition for improving skin damage, comprising a leaf extract.
  • the present invention provides a skin external preparation for improving skin damage, comprising a leaf extract.
  • the present invention provides a method for improving skin damage comprising the step of applying a composition comprising a leaf extract.
  • the present invention provides a use of a composition comprising a leaf extract for improving skin damage.
  • the present invention provides a use of a composition comprising a leaf extract for the manufacture of cosmetics for improving skin damage.
  • the composition containing the Aloe extract promotes the proliferation and migration of fibroblast cell lines, and has an inhibitory activity against the DOPA oxidation reaction. And exhibits elastase inhibitory activity and ROS inhibitory ability, and it was confirmed that it suppresses the expression of inflammatory cytokines, thereby completing the present invention.
  • the present invention (i) aeyeop extract; (ii) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) provides a cosmetic composition comprising dexpanthenol as an active ingredient.
  • the present invention (i) aeyeop extract; (ii) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) provides a cosmetic composition for improving skin damage comprising dexpanthenol as an active ingredient.
  • the term "Artemisia princeps leaf” of the present invention refers to a leaf of a perennial herbaceous plant belonging to the Asteraceae family, and is known to exhibit pharmacological effects such as mainly hemostatic action and Jinhae expectorant action.
  • the artemisia may be purchased commercially sold, or may be harvested or cultivated in nature, but is not limited thereto.
  • extract refers to an extract obtained by extracting the leaves, a diluted solution or a concentrate of the extract, a dried product obtained by drying the extract, a preparation or purified product of the extract, or a mixture thereof, and the like, the extract itself And extracts of all formulations that can be formed using the extract.
  • the method of extracting the leaves is not particularly limited, and may be extracted according to a method commonly used in the art.
  • Non-limiting examples of the extraction method include a hot water extraction method, an ultrasonic extraction method, a filtration method, a reflux extraction method, and the like, which may be performed alone or in combination of two or more methods.
  • the kind of the extraction solvent used to extract the apex leaves is not particularly limited, and any solvent known in the art may be used.
  • Non-limiting examples of the extraction solvent include water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof, and these may be used alone or in combination of one or more.
  • the extraction solvent may be water, ethanol, or an aqueous ethanol solution, and more specifically, an aqueous 50% ethanol solution (w/w), but is not limited thereto.
  • heparin refers to a substance consisting of alternating bonds of ⁇ -1,4 D-glucosamine and D-glucuronic acid, and generally inhibits blood coagulation when administered orally or by injection, resulting in acute coronary artery. It is usefully used in the treatment of diseases, atrial fibrillation, and deep vein thrombosis.
  • composition of the present invention may include heparin or a salt thereof, and specifically, heparin sodium, but is not limited thereto.
  • allantoin refers to a substance produced by oxidation of uric acid present in the allantois of a mammal, and the chemical name is (2,5-dioxo-4-imide). It is dazolidinyl) urea, and is a material having a structure represented by the following formula (1).
  • panthenol refers to an alcohol derivative of vitamin B5 and pantothenic acid, and is also referred to as a provitamin of vitamin B5 due to the property of being oxidized and transformed into pantothenic acid. It is a material having the structure of the following formula (2).
  • the term “improving skin damage” refers to any action in which the damaged skin condition is improved or beneficially changed, and specifically, skin regeneration (wound healing), wound mark improvement/relief, skin texture improvement, (and) It can mean improving pigmentation, improving skin wrinkles, improving skin elasticity, and reducing skin irritation (relieving inflammation). It is not limited thereto. This includes the improvement of damaged skin including burns, scars, pigmentation, scars, etc. due to acne.
  • skin regeneration refers to a series of reactions in which skin tissue is reconstructed in response to damage to the skin caused by aging, trauma, disease, or the like. In the present invention, it may specifically mean wound healing, but is not limited thereto.
  • the term “improving/relieving wound marks” refers to a series of reactions in which the scars and/or marks left during or after healing of the damaged skin are improved/resolved. In the present invention, it may specifically mean improvement/reduction of traces and/or scar color, traces and/or scar thickening, traces and/or scar pruritus, but is not limited thereto.
  • skin texture improvement refers to an improvement in the overall condition that may appear on the skin, such as a series of reactions in which the gap between the skin is increased, the bones become deep, or the skin that is roughened by the accumulation of dead skin cells on the skin surface becomes soft. In the present invention, it may mean improvement of an overall condition that may appear on damaged skin, but is not limited thereto.
  • the term “improving (hyperpigmentation)” refers to a series of reactions in which darkened skin tone becomes brighter. In the present invention, it may mean that a skin tone darkened by spots or freckles is brightened, but is not limited thereto.
  • skin wrinkle improvement refers to a series of reactions that inhibit or inhibit the formation of wrinkles on the skin, or alleviate wrinkles that have already been created.
  • the term "improving skin elasticity” refers to a series of reactions that relieve the degree of sagging or sagging of the skin.
  • treating skin irritation refers to a series of reactions to relieve symptoms of skin irritated by external pollutants or diseases. In the present invention, it may specifically mean relief of inflammation, itchiness, redness, etc. caused by stimulation, but is not limited thereto.
  • aerobatic extract of the present invention (ii) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) a composition comprising dexpanthenol improves skin damage, specifically skin regeneration (wound healing), wound mark improvement/relief, skin texture improvement, (hyperpigmentation) improvement, skin wrinkle improvement, skin elasticity improvement, skin It can be usefully used for relieving irritation (relieving inflammation).
  • aeyeop extract of the present invention (i) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) a composition comprising dexpanthenol promotes the proliferation and migration of fibroblasts primary cultured in human dermis, exhibits inhibitory activity against DOPA oxidation, and inhibits elastase, an enzyme that degrades elastin. It showed the activity and ROS inhibitory ability, and was confirmed to inhibit the expression of the inflammatory cytokine TNF- ⁇ .
  • composition of the present invention may exhibit a remarkably excellent synergistic effect as compared to the case of containing each substance alone or two or three of the four components by including all of the four components.
  • the composition of the present invention is significantly superior to a composition containing only heparin or a salt thereof, allantoin and dexpanthenol, or a composition containing only aerosol extract by mixing the aerobatic extract with a mixture of heparin or a salt thereof, allantoin and dexpanthenol. It can have a synergistic effect.
  • composition of the present invention may include 0.05 to 3.0 parts by weight of aeop extract, 0.5 to 30 parts by weight of allantoin, and 10 to 250 parts by weight of dexpanthenol based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof.
  • the artery leaf extract may be included in an amount of 0.05 to 3.0 parts by weight based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof, and specifically 0.075 to 2.5 parts by weight, 0.1 to 2.0 parts by weight, 0.15 to 1.5 parts by weight, but limited thereto. It does not become.
  • the artery leaf extract may be included in an amount of 0.05 to 0.5 parts by weight, specifically 0.1 to 0.3 parts by weight, or 0.8 to 1.6 parts by weight, specifically 1.0 to 1.2 parts by weight, based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof, but is limited thereto. It does not become.
  • allantoin may be included in an amount of 0.5 to 30 parts by weight based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof, and specifically 0.75 to 25 parts by weight, 1.0 to 20 parts by weight, 2.0 to 20 parts by weight, 2.5 to 19.95 parts by weight, It may be included in 3.0 to 15 parts by weight, 3.0 to 5.0 parts by weight, and 3.5 to 4.5 parts by weight, but is not limited thereto.
  • allantoin may be included in 3 to 5 parts by weight, specifically 3 to 4 parts by weight or 4 to 5 parts by weight, based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof, but is not limited thereto.
  • dexpanthenol may be included in an amount of 10 to 250 parts by weight based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof, and specifically 12.5 to 230 parts by weight, 15 to 225 parts by weight, 17.5 to 220 parts by weight, 20 to 215 parts by weight , 20.5 to 210 parts by weight may be included, but is not limited thereto.
  • dexpanthenol may be included in 10 to 30 parts by weight, specifically 15 to 25 parts by weight, or 200 to 210 parts by weight, specifically 205 to 210 parts by weight, based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof, but is limited thereto. It does not become.
  • composition of the present invention may include 0.1 to 2.0 parts by weight of aerobatic extract, 1.0 to 20 parts by weight of allantoin, and 20 to 210 parts by weight of dexpanthenol based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof.
  • composition of the present invention may include 0.15 to 1.5 parts by weight of aerobatic extract, 2.5 to 19.95 parts by weight of allantoin, and 20.5 to 210 parts by weight of dexpanthenol based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof.
  • composition of the present invention may contain from 0.05 to 0.5 parts by weight of asteris extract, 3 to 5 parts by weight of allantoin, and 10 to 30 parts by weight of dexpanthenol based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof.
  • composition of the present invention may comprise 0.8 to 1.6 parts by weight of aerobatic extract, 3 to 5 parts by weight of allantoin, and 200 to 210 parts by weight of dexpanthenol based on 1 part by weight of heparin or a salt thereof.
  • composition of the present invention may exhibit a remarkably excellent synergistic effect as compared to the case of containing each substance alone or two or three of the four components by including the four components in parts by weight.
  • the composition of the present invention is compared with a composition containing only heparin or a salt thereof, allantoin and dexpanthenol, or a composition containing only a leaf extract by mixing a mixture of heparin or a salt thereof, allantoin, and dexpanthenol in the weight part of the above. It can exhibit a remarkably excellent synergistic effect.
  • composition of the present invention based on the total composition of 1000 ml (i) 0.01 to 0.2 g of aeyeop extract; (ii) 0.01 to 1.0 g of heparin or a salt thereof; (iii) 0.05 to 5.0 g of allantoin; And (iv) 5.0 to 15 g of dexpanthenol.
  • the artemisiaeum extract may contain 0.01 to 0.2 g based on the total composition 1000 ml, specifically 0.015 to 0.15 g, 0.02 to 0.13 g, 0.03 to 0.12 g, 0.04 to 0.1 g, 0.045 to 0.08 g, 0.05 To 0.07 g may be included, but is not limited thereto.
  • heparin or a salt thereof may be included 0.01 to 1.0 g based on the total composition 1000 ml, specifically 0.02 to 0.8 g, 0.03 to 0.5 g, 0.04 to 0.4 g may be included, but is not limited thereto.
  • allantoin may be contained 0.05 to 5.0 g based on the total composition 1000 ml, specifically 0.06 to 4.5 g, 0.07 to 4.0 g, 0.08 to 3.5 g, 0.09 to 3.0 g, 0.09 to 2.5 g, 0.1 to 2.0 g may be included, but is not limited thereto.
  • dexpanthenol may contain 5.0 to 15 g based on 1000 ml of the total composition, specifically 5.5 to 14 g, 6.0 to 13 g, 6.5 to 12 g, 7.0 to 11 g, 7.5 to 10 g. However, it is not limited thereto.
  • composition of the present invention may exhibit a remarkably superior synergistic effect compared to the case of containing each substance alone or two or three components of the four components by including the four components by the weight.
  • the composition of the present invention is compared with a composition containing only heparin or a salt thereof, allantoin and dexpanthenol, or a composition containing only aerosol extract by mixing a mixture of heparin or a salt thereof, allantoin and dexpanthenol at the above weight. It can exhibit a remarkably excellent synergistic effect.
  • composition of the present invention may contain 50 to 450 parts by weight of a mixture of heparin or a salt thereof, allantoin, and dexpanthenol based on 1 part by weight of the aerobatic extract, and specifically 80 to 420 parts by weight, 90 to 400 parts by weight, 100 to It may include 250 parts by weight, 130 to 200 parts by weight, and 150 to 180 parts by weight, but is not limited thereto.
  • composition of the present invention may exhibit a remarkably excellent synergistic effect as compared to the case of containing each substance alone or two or three of the four components by including the four components in parts by weight.
  • the composition of the present invention is compared with a composition containing only heparin or a salt thereof, allantoin and dexpanthenol, or a composition containing only a leaf extract by mixing a mixture of heparin or a salt thereof, allantoin, and dexpanthenol in the weight part of the above. It can exhibit a remarkably excellent synergistic effect.
  • the ingredients contained in the cosmetic composition include (i) aerobatic extract as an active ingredient; (ii) sodium heparin; (iii) allantoin; And (iv) ingredients commonly used in cosmetic compositions other than dexpanthenol, and include conventional adjuvants such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments, colors and flavors, and carriers.
  • the cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, skins, creams, lotions, powders, soaps, surfactants- It may be formulated as a cleansing, oil, pack, foam, patch, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, or spray, but is not limited thereto. In more detail, it may be prepared in the form of a flexible lotion, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, a pack, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a spray or a powder.
  • the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivatives, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, or zinc oxide may be used as carrier components.
  • lactose When the formulation of the present invention is a powder or spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, or polyamide powder may be used as a carrier component.
  • lactose talc
  • silica aluminum hydroxide
  • calcium silicate or polyamide powder
  • propellants such as butane or dimethyl ether.
  • a solvent, a solubilizing agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, butyl Ene glycol, 1,3-butyl glycol oil, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, glycerol, glycerin, aliphatic ester, phenoxyethanol, triethanolamine, polyethylene glycol, beeswax, polysorbate 60, sorbitansquioleide, paraffin, Sorbitan stearate, lipophilic glycerin monostearate, stearic acid, glyceryl stearate/PEG-400 stearate, carboxypolymer, sitosterol, polyglyceryl 2-oleate, ceramide, cholesterol, stea carrier component, such as water, ethanol, isopropano
  • the formulation of the present invention is a suspension
  • a liquid diluent such as water, ethanol, butylene glycol or propylene glycol, an ethoxylated isostearyl alcohol, a suspension such as polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester
  • a suspension such as polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester
  • microcrystalline cellulose, hydroxyethylcellulose, sodium hyaluronate, phenoxyethanol, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth, and the like may be used.
  • the formulation of the present invention is a surfactant containing cleansing, as a carrier component, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, fatty alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters may be used.
  • polyvinyl alcohol kaolin, talc, zinc oxide, or titanium dioxide may be used as a carrier component. .
  • the present invention (i) aeyeop extract; (ii) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) provides a skin external preparation for improving skin damage comprising dexpanthenol as an active ingredient.
  • skin external preparation of the present invention is a concept encompassing all substances used for external application of the skin in general, and non-limiting examples of the external preparation for skin include a plaster, a lotion, and a liner. (liniment), liquid and solution, aerosol, extracts, ointment, fluid extracts, emulsion, suspensions, capsules ), creams, soft or hard gelatin capsules or patches.
  • the external preparation for skin may be a parenteral administration formulation formulated in a solid, semi-solid or liquid form by adding a commercially available inorganic or organic carrier, excipient, and diluent.
  • the formulation for parenteral administration may be a transdermal dosage form selected from the group consisting of drops, ointments, lotions, gels, creams, patches, sprays, suspensions, and emulsions, but is not limited thereto.
  • Carriers, excipients, and diluents that may be included in the external preparation include lactose, dextrose, sucrose, oligosaccharide, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, gum acacia, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, Cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oils.
  • composition for external application for skin by each formulation other ingredients other than the composition of the present invention described above can be appropriately selected and blended by a person skilled in the art without difficulty depending on the formulation or purpose of use of other external preparations for skin, and in this case, applied simultaneously with other ingredients. If you do, there can be a synergistic effect.
  • each component included in the external preparation for skin of the present invention the weight ratio between the components, the weight ratio between the aerobatic extract and heparin or a salt thereof, an allantoin and dexpanthenol mixture, and the like are the same as in the composition.
  • the present invention (i) aeyeop extract; (ii) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) applying a composition comprising dexpanthenol as an active ingredient to the skin.
  • the present invention for improving skin damage (i) aerobatic extract; (ii) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) provides the use of a composition comprising dexpanthenol as an active ingredient.
  • the present invention for the manufacture of a cosmetic for improving skin damage (i) aeyeop extract; (ii) heparin or a salt thereof; (iii) allantoin; And (iv) provides the use of a composition comprising dexpanthenol as an active ingredient.
  • the weight of each component included in the composition is the same as those of salpin.
  • composition comprising the extract of the present invention promotes the proliferation and migration of fibroblasts primary cultured in human dermis, exhibits inhibitory activity against DOPA oxidation, and inhibits the inhibitory activity of elastase, an enzyme that degrades elastin. And ROS inhibitory ability, and inhibits the expression of the inflammatory cytokine TNF- ⁇ , so skin regeneration (wound healing), wound mark improvement/relief, skin texture improvement, (hyper) pigmentation improvement, skin wrinkle improvement, skin elasticity improvement, It can be useful for relieving skin irritation (relieving inflammation).
  • compositions of Examples 1 to 6 of the present invention are as shown in Table 1 below.
  • the toxicity of the sample was evaluated in a human dermal fibroblast (HDF) cell line, and it was confirmed that there is no toxicity.
  • HDF human dermal fibroblast
  • a fibroblast cell line human dermal fibroblast cell line
  • penicillin 50 IU/ml, streptomycin 50 ⁇ g/ml, and 10% FBS in DMEM medium containing 37°C was maintained and cultured in an incubator containing 5% carbon dioxide.
  • the cultured cell line was cultured in 24-well plates at 3 x 10 6 cells/ml for 24 hours, and the bottom of the culture dish was scraped with a scraper (p200 pipette tip) to create an empty space on the bottom of the culture dish.
  • the test substance purified water or composition of each example
  • composition of the present invention exhibits excellent cell migration enhancing effect, and can be usefully used for skin regeneration (wound healing), wound mark improvement/relieving, and skin texture improvement. In addition, it was found that the composition of the present invention can improve damaged skin conditions.
  • the inhibitory activity of tyrosinase involved in the rate-determining step of the melanin synthesis process on the DOPA oxidation reaction was observed. Specifically, 850 ⁇ l of 0.1 M phosphate buffer (PBS, pH 7.0), 50 ⁇ l of the test substance, and 50 ⁇ l of human tyrosinase were sequentially added to the test tube. To this solution, 50 ⁇ l of 0.06 mM L-DOPA (L-3,4-dihydroxyphenylalanine) solution as a substrate was added, reacted at 37 °C, and absorbance was measured at 475 nm. Instead of the sample solution, the solvent in which the sample was dissolved was used as the sample solution and corrected. DPOA oxidation inhibition rate was calculated using the following formula. The results are shown in Table 5 below.
  • composition of the present invention exhibits excellent DPOA oxidation inhibitory activity, and can be usefully used for improving (hyperpigmentation). In addition, it was found that the composition of the present invention can improve damaged skin conditions.
  • the toxicity of the sample was evaluated in a human dermal fibroblast (HDF) cell line, and it was confirmed that there is no toxicity.
  • HDF human dermal fibroblast
  • the inhibitory activity against elastase which induces depression of the skin dermal layer, was observed by twisting the three-dimensional structure of elastin, a major protein constituting the skin dermis.
  • a test substance was added to 50 mM Tris-HCl (pH 8.6) aqueous solution to prepare, and 100 ⁇ l of the prepared aqueous solution was dispensed into a 96-well plate.
  • the substrate of the reaction N- succinyl - an (alanine) 3 -p- not nitro fluoride (N-succinyl- (Ala) 3 -p-nitroanilide) in 50 mM Tris-HCl (pH 8.8 ) solution to a concentration of 2.2 mM
  • 20 ⁇ l was additionally dispensed into the 96-well plate to which the previously prepared aqueous solution was dispensed.
  • Elastase (Elastase; from porcine pancreas; ⁇ 4 units/mg protein), an enzyme of the reaction, was prepared at 0.25 mg/ml, and 30 ⁇ l was additionally dispensed into a 96-well plate. After reacting at 25°C for 10 minutes, absorbance was measured at OD 410 nm. The results are shown in Table 6 below.
  • composition of the present invention exhibits excellent elastase inhibitory activity, and can be usefully used for improving skin wrinkles and skin elasticity. In addition, it was found that the composition of the present invention can improve damaged skin conditions.
  • ROS inhibitory ability analysis ROS assay
  • ROS reactive oxygen species
  • the cell line was cultured, and the cell line was seeded in a kit for ROS analysis, and after 24 hours, DCFH-DA (2',7'-dichlorofluorescein diacetate) 50 uM was reacted for 30 minutes. After treating the test substance and reacting for 24 hours, the fluorescence reaction was measured by absorbance. ROS inhibitory ability was calculated using the following formula, and the results are shown in Table 7 below.
  • composition of the present invention exhibits excellent ROS inhibitory ability, and can be usefully used for improving skin wrinkles and improving skin elasticity. In addition, it was found that the composition of the present invention can improve damaged skin conditions.
  • the inhibitory activity of the expression of the inflammatory cytokine TNF- ⁇ was observed.
  • An aqueous solution was prepared by putting the test substance, and 50 ⁇ l of the prepared aqueous solution was dispensed into a 96-well plate. 50 ⁇ l of the antibody was additionally dispensed into the 96-well plate to which the aqueous solution was dispensed.
  • the P plate was stirred at 400 rpm using a stirrer, and incubated at room temperature for 1 hour.
  • the cultured plate was washed 3 times at room temperature using 350 ⁇ l of a washing buffer.
  • composition of the present invention exhibits excellent TNF- ⁇ expression inhibitory activity and can be usefully used for skin irritation relief (inflammation relief). In addition, it was found that the composition of the present invention can improve damaged skin conditions.

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Abstract

본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 (i) 애엽 추출물; 및 (ii) 헤파린나트륨; (iii) 알란토인 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물 및 피부 외용제, 이를 이용한 피부 손상 개선 방법 및 피부 손상 개선을 위한 이의 용도에 관한 것이다.

Description

애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물
본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물 및 피부 외용제, 이를 이용한 피부 손상 개선 방법 및 피부 손상 개선을 위한 이의 용도에 관한 것이다.
피부는 외부 환경과 직접적으로 접해 있으면서 다양한 유해 인자로부터 몸을 보호하는 기능을 담당하고 있다. 이러한 피부는 노화, 스트레스, 외상, 외부 오염 물질, 자외선 등 다양한 요인에 의해 손상되며, 이로부터 상처, 피부 주름 생성, 색소 침착, 탄력 저하, 염증반응 등의 현상이 복합적으로 일어나게 된다. 피부 미용에 대한 관심이 날로 높아지면서 이러한 현상을 극복하기 위한 시도들이 행하여지고 있고, 이와 함께 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선, 색소 침착 개선, 염증 개선 등에 관련된 기능성 화장품에 대한 관심과 수요 역시 계속적으로 증가하고 있다.
지금까지의 연구결과에 의하면 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형이 주름의 생성, 탄력 저하 등에 직접적으로 관여하는 것으로 알려져 있다. 또한, 피부의 색을 결정짓는 멜라닌은 과도한 생성 또는 축적으로 인해 기미, 주근깨 등 과색소침착의 원인이 된다는 것은 널리 알려진 사실이다.
한편, 대부분의 알려진 주름 개선, 탄력 개선 또는 색소침착 개선 등의 효과를 가진 물질들은 피부 적용시 자극, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 피부 손상의 전반적인, 실질적인 개선, 예를 들어 상처 흔적 완화, 상처 치유, 염증 완화 등의 효과는 기대하기 어렵다. 이에, 생체에 안전하고 효과가 우수한 새로운 피부 손상 개선용 조성물의 개발이 절실히 요구되고 있다.
[선행기술문헌]
(비특허문헌 1) Effects of NoscarnaTM on Hypertrophic Scarring in the Rabbit Ear Model: Histopathological Aspects. Archives of Pharmacal Research. 2012. Vol.35, No.11, pp.1999-2006.
본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 피부 외용제를 제공한다.
본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 조성물을 도포하는 단계를 포함하는 피부 손상 개선 방법을 제공한다.
본 발명은 피부 손상 개선을 위한 애엽 추출물을 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.
본 발명은 피부 손상 개선용 화장품의 제조를 위한 애엽 추출물을 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.
세포에 대한 독성을 나타내지 않는 안전하고 피부 손상 개선 효과가 우수한 조성물을 개발하고자 노력 연구한 결과, 애엽 추출물을 포함하는 조성물이 섬유아세포 세포주의 증식 및 이동을 촉진하고, DOPA 산화반응에 대한 저해 활성을 나타내고, 엘라스타제 저해 활성 및 ROS 억제능을 나타내며, 염증성 사이토카인의 발현을 억제하는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명은 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어, "애엽(Artemisia princeps leaf)"은 국화과의 속하는 다년생 초본식물의 잎을 말하며, 주로 지혈작용, 진해거담작용 등의 약리효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. 본 발명에서 애엽은 상업적으로 판매되는 것을 구입하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "추출물"은 상기 애엽을 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
상기 애엽을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서, 상기 애엽을 추출하는데 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 구체적으로, 상기 추출 용매는 물, 에탄올 또는 에탄올수용액일 수 있으며, 보다 구체적으로 50% 에탄올수용액(w/w)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "헤파린"은 D-글루코사민과 D-글루쿠론산이 α-1,4의 교대결합으로 이루어진 물질을 의미하며, 일반적으로 경구나 주사로 투여시 혈액응고를 저해하여 급성관상동맥질환, 심방세동, 심부정맥혈전증 등의 치료에 유용하게 사용된다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염을 포함할 수 있으며, 구체적으로 헤파린 나트륨을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "알란토인"은 포유동물의 요막(allantois)에 존재하는 요산(uric acid)의 산화에 의해 생성되는 물질을 의미하며, 화학식명으로는 (2,5-다이옥소-4-이미다졸리디닐)우레아이고, 하기 화학식 1의 구조를 갖는 물질이다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000001
본 발명의 용어, "덱스판테놀"은 비타민 B5, 판토텐산의 알코올 유도체를 의미하며, 산화되어 판토텐산으로 변하는 특성으로 인해 비타민 B5의 프로비타민이라고도 불린다. 하기 화학식 2의 구조를 갖는 물질이다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000002
본 발명의 용어, "피부 손상 개선"은 손상된 피부 상태가 전반적으로 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미하며, 구체적으로 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선, (과)색소침착 개선, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 자극 완화(염증 완화) 등을 의미할 수 있으나. 이에 제한되는 것은 아니다. 이는 화상, 흉터, 여드름 등에 의한 착색, 반흔 등을 포함한 손상된 피부의 개선을 포함한다.
상기 용어 "피부 재생"은 노화, 외상, 질환 등에 의해 피부에 유발된 손상 등에 대응하여 피부 조직이 재구성되는 일련의 반응을 의미한다. 본 발명에서는 구체적으로 상처 치유 등을 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어 "상처 흔적 개선/완화"는 손상되었던 피부의 치유 중 또는 치유 후 남는 흔적 및/또는 흉터가 개선/완화되는 일련의 반응을 의미한다. 본 발명에서는 구체적으로 흔적 및/또는 흉터의 색, 흔적 및/또는 흉터 비후 정도, 흔적 및/또는 흉터 소양증 등의 개선/완화를 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어 "피부결 개선"은 피부 사이의 간격이 늘어지고 골이 깊어지거나 피부 표면에 각질이 쌓여 거칠어진 피부가 부드러워지는 일련의 반응 등 피부에 나타날 수 있는 전반적인 상태의 개선을 의미한다. 본 발명에서는 손상된 피부에 나타날 수 있는 전반적인 상태의 개선을 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어 "(과)색소침착 개선"은 어두워진 피부 톤이 밝아지는 일련의 반응을 의미한다. 본 발명에서는 구체적으로 기미나 주근깨 등으로 어두워진 피부 톤이 밝아지는 것을 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어 "피부 주름 개선"은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 일련의 반응을 의미한다.
상기 용어 "피부 탄력 개선"은 피부가 쳐지거나 늘어지는 정도를 완화시키는 일련의 반응을 의미한다.
상기 용어 "피부 자극 완화"는 외부 오염 물질 또는 질환 등에 의해 자극 받은 피부의 증상을 완화시키는 일련의 반응을 의미한다. 본 발명에서는 구체적으로 자극에 의해 발생한 염증, 가려움증, 홍조 등의 완화를 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 포함하는 조성물은 피부 손상 개선, 구체적으로 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선, (과)색소침착 개선, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 자극 완화(염증 완화) 등의 용도로서 유용하게 사용될 수 있다.
관련하여 본 발명의 구체적인 일 실시예에서는, 본 발명의 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 포함하는 조성물은 사람 진피에서 1차 배양한 섬유아 세포주의 증식 및 이동을 촉진시키고, DOPA 산화반응에 대한 저해 활성을 나타내고, 엘라스틴을 분해하는 효소인 엘라스타제의 저해 활성 및 ROS 억제능을 나타내며, 염증성 사이토카인 TNF-α의 발현을 억제하는 것을 확인하였다.
본 발명의 조성물은 상기 4 가지 성분을 모두 포함함으로써 각 물질 단독 또는 상기 4 성분 중 2 성분 또는 3 성분을 포함하는 경우와 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물에 애엽 추출물을 혼합함으로써 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀만을 포함하는 조성물 또는 애엽 추출물만을 포함하는 조성물과 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.05 내지 3.0 중량부의 애엽 추출물, 0.5 내지 30 중량부의 알란토인 및 10 내지 250 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명에서, 애엽 추출물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.05 내지 3.0 중량부로 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.075 내지 2.5 중량부, 0.1 내지 2.0 중량부, 0.15 내지 1.5 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 애엽 추출물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.05 내지 0.5 중량부, 구체적으로 0.1 내지 0.3 중량부, 또는 0.8 내지 1.6 중량부, 구체적으로 1.0 내지 1.2 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명에서, 알란토인은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.5 내지 30 중량부로 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.75 내지 25 중량부, 1.0 내지 20 중량부, 2.0 내지 20 중량부, 2.5 내지 19.95 중량부, 3.0 내지 15 중량부, 3.0 내지 5.0 중량부, 3.5 내지 4.5 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 알란토인은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 3 내지 5 중량부, 구체적으로 3 내지 4 중량부 또는 4 내지 5 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 덱스판테놀은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 10 내지 250 중량부로 포함될 수 있으며, 구체적으로 12.5 내지 230 중량부, 15 내지 225 중량부, 17.5 내지 220 중량부, 20 내지 215 중량부, 20.5 내지 210 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 덱스판테놀은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 10 내지 30 중량부, 구체적으로 15 내지 25 중량부, 또는 200 내지 210 중량부, 구체적으로 205 내지 210 중량부 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.1 내지 2.0 중량부의 애엽 추출물, 1.0 내지 20 중량부의 알란토인 및 20 내지 210 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.15 내지 1.5 중량부의 애엽 추출물, 2.5 내지 19.95 중량부의 알란토인 및 20.5 내지 210 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.05 내지 0.5 중량부의 애엽 추출물, 3 내지 5 중량부의 알란토인 및 10 내지 30 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.8 내지 1.6 중량부의 애엽 추출물, 3 내지 5 중량부의 알란토인 및 200 내지 210 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 상기 4 가지 성분을 상기 중량부로 포함함으로써 각 물질 단독 또는 상기 4 성분 중 2 성분 또는 3 성분을 포함하는 경우와 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
구체적으로 본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물에 애엽 추출물을 상기 중량부로 혼합함으로써 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀만을 포함하는 조성물 또는 애엽 추출물만을 포함하는 조성물과 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 조성물은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 (i) 0.01 내지 0.2 g의 애엽 추출물; (ii) 0.01 내지 1.0 g의 헤파린 또는 이의 염; (iii) 0.05 내지 5.0 g의 알란토인; 및 (iv) 5.0 내지 15 g의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명에서, 애엽 추출물은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 0.01 내지 0.2 g 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.015 내지 0.15 g, 0.02 내지 0.13 g, 0.03 내지 0.12 g, 0.04 내지 0.1 g, 0.045 내지 0.08 g, 0.05 내지 0.07 g 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 헤파린 또는 이의 염은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 0.01 내지 1.0 g 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.02 내지 0.8 g, 0.03 내지 0.5 g, 0.04 내지 0.4 g 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 알란토인은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 0.05 내지 5.0 g 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.06 내지 4.5 g, 0.07 내지 4.0 g, 0.08 내지 3.5 g, 0.09 내지 3.0 g, 0.09 내지 2.5 g, 0.1 내지 2.0 g 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 덱스판테놀은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 5.0 내지 15 g 포함될 수 있으며, 구체적으로 5.5 내지 14 g, 6.0 내지 13 g, 6.5 내지 12 g, 7.0 내지 11 g, 7.5 내지 10 g 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 상기 4 가지 성분을 상기 중량으로 포함함으로써 각 물질 단독 또는 상기 4 성분 중 2 성분 또는 3 성분을 포함하는 경우에 비하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
구체적으로 본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물에 애엽 추출물을 상기 중량으로 혼합함으로써 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀만을 포함하는 조성물 또는 애엽 추출물만을 포함하는 조성물과 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 조성물은 애엽 추출물 1 중량부를 기준으로 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물을 50 내지 450 중량부로 포함할 수 있으며, 구체적으로 80 내지 420 중량부, 90 내지 400 중량부, 100 내지 250 중량부, 130 내지 200 중량부, 150 내지 180 중량부로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 상기 4 가지 성분을 상기 중량부로 포함함으로써 각 물질 단독 또는 상기 4 성분 중 2 성분 또는 3 성분을 포함하는 경우와 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
구체적으로 본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물에 애엽 추출물을 상기 중량부로 혼합함으로써 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀만을 포함하는 조성물 또는 애엽 추출물만을 포함하는 조성물과 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명에서 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린나트륨; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 스킨, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 팩, 폼, 패취, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 또는 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 팩, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유, 글리세롤, 글리세린, 지방족 에스테르, 페녹시에탄올, 트리에탄올아민, 폴리에틸렌 글리콜, 밀납, 폴리솔베이트 60, 솔비탄세스퀴오레이드, 파라핀, 소르비탄 스테아레이트, 친유형 모노스테아린산 글리세린, 스테아린산, 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트, 카르복시폴리머, 시토스테롤, 폴리글리세릴 2-올레이트, 세라마이드, 콜레스테롤, 스테아레스-4, 디세틸포스페이트, 마카다미아 오일, 카르복시비닐폴리머, 잔탄검 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오즈, 소디움히아루로네이트, 페녹시에탄올, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 팩(필오프 팩, 워시오프(wash off) 팩, 또는 마스크 시트 팩)인 경우에는 담체 성분으로서 폴리비닐알코올, 카올린, 탈크, 산화아연, 또는 이산화티탄 등이 이용될 수 있다.
본 발명은 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 피부 외용제를 제공한다.
이때, 상기 "애엽", "추출물", "헤파린", "알란토인", "덱스판테놀" 및 "피부 손상 개선" 등의 정의는 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "피부 외용제"는 일반적으로 피부 외용에 사용하는 물질 전반을 포함하는 포괄하는 개념으로, 피부 외용제 제형의 비제한적인 예로는 경고제(plaster), 로션제(lotion), 리니멘트제(liniment), 액제(liquid and solution), 에어로솔제(aerosol), 엑스제(extracts), 연고제(ointment), 유동엑스제(fluid extracts), 유제(emulsion), 현탁제(suspesions), 캅셀제(capsules), 크림제(creams), 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀제 또는 첩부제가 있다.
본 발명에 따른 피부 외용제는 상용되는 무기 또는 유기의 담체, 부형제 및 희석제를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 제제화된 비경구 투여제일 수 있다. 상기 비경구 투여를 위한 제제로는 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 패취, 스프레이, 현탁제 및 유제로 이루어진 군에서 선택되는 경피 투여형 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 외용제에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
각 제형에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기한 본 발명의 조성물 이외의 다른 성분들을 기타 피부 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 이 경우 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승효과가 일어날 수 있다.
본 발명의 피부 외용제에 포함되는 각 성분의 중량, 각 성분간의 중량비, 애엽 추출물과 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀 혼합물 간의 중량비 등은 조성물에서와 동일하다.
본 발명은 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 손상 개선 방법을 제공한다.
본 발명은 피부 손상 개선을 위한 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.
본 발명은 피부 손상 개선용 화장품의 제조를 위한 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.
이때, 상기 "애엽", "추출물", "헤파린", "알란토인", "덱스판테놀" 및 "피부 손상 개선" 등의 정의는 전술한 바와 같다.
상기 조성물에 포함되는 각 성분의 중량, 각 성분간의 중량비, 애엽 추출물과 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀 혼합물 간의 중량비 등은 앞서 살핀 바와 동일하다.
본 발명의 애엽 추출물을 포함하는 조성물은 사람 진피에서 1차 배양한 섬유아 세포주의 증식 및 이동을 촉진시키고, DOPA 산화반응에 대한 저해 활성을 나타내고, 엘라스틴을 분해하는 효소인 엘라스타제의 저해 활성 및 ROS 억제능을 나타내며, 염증성 사이토카인 TNF-α의 발현을 억제하므로, 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선, (과)색소침착 개선, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 자극 완화(염증 완화) 등에 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
<제조예 1> 애엽 추출물의 제조
애엽 600 g에 50% 에탄올수용액(w/w) 6 kg를 가해 8시간 동안 약 60°C에서 가온하여 추출한 후 여과하였다. 총 여과액 대비 1%(w/w)의 활성탄을 가한 후, 약 1 내지 2시간 동안 교반한 후 여과하였다. 여과액을 감압농축하여 60 g의 건조엑스를 수득하였다.
<제조예 2> 애엽 추출물을 포함하는 조성물의 제조
본원발명의 실시예 1 내지 6 조성물의 함량은 하기 표 1에 나타낸 바와 같다.
[표 1]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000003
하기 표 2에 나타낸 바와 같이, 덱스판테놀을 정제수에 녹이고, 애엽 추출물 1 g을 10 L에 녹인 용액(애엽 추출물 용액, 0.01%) 또는 애엽 추출물 2 g을 10 L에 녹인 용액(애엽 추출물 용액, 0.02%)을 가한 후 헤파린나트륨과 알란토인을 녹이고, 정제수 1 L로 정용하여 덱스판테놀, 애엽추출물, 알란토인, 헤파린나트륨의 4가지 성분을 포함하는 조성물을 조제하였다.
[표 2]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000004
<실시예 1> 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선 효과 (wound healing assay)
인간 진피 섬유아세포(Human Dermal Fibroblast; HDF) 세포주에서 시료 독성을 평가하여 독성이 없음을 확인하였다.
본원발명 조성물의 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선 효과를 확인하기 위하여, 사람 진피에서 1차 배양한 섬유아 세포주(인간 진피 섬유아세포 세포주)에서 세포이동 증진효과를 현미경(microscopy)으로 관찰하였다. 구체적으로, 사람 진피에서 1차 배양한 섬유아 세포주를 배양접시의 바닥에 접종한 후, 페니실린 50 IU/ml, 스트렙토마이신 50 μg/ml, 및 10% FBS를 함유하는 DMEM배지에 넣고 37°C를 유지하여 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기내에서 배양하였다. 배양한 세포주는 24-웰 플레이트(24-well plates)에 3 x 10 6 cell/ml로 24시간 동안 배양하고, 배양접시 바닥을 스크래퍼(p200 피펫 팁)로 긁어서 배양접시 바닥에 빈 공간을 만든 후, 시험물질(정제수 또는 각 실시예 조성물)을 처리하여 24시간 및 48시간 후에 시험물질에 의한 세포이동 증진효과를 도립 현미경(inverted microscopy)으로 관찰하였다. 그 결과는 하기 표 3(24시간 후) 및 표 4(48시간 후)에 나타내었다.
[표 3]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000005
[표 4]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000006
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 세포이동 증진효과를 나타내고, 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
<실시예 2> (과)색소침착 개선 효과 (DOPA oxidation inhibitory assay)
B16F10 마우스 세포주에서 시료 독성을 평가하여 독성이 없음을 확인하였다.
본원발명 조성물의 (과)색소침착 개선 효과를 확인하기 위하여, 멜라닌 합성과정의 속도결정단계에 관여하는 타이로시나제의 DOPA 산화반응에 대한 저해 활성을 관찰하였다. 구체적으로, 시험관에 0.1 M 인산염완충액(PBS, pH 7.0) 850 μl, 시험물질 50 μl, 휴먼 타이로시나제 50 μl를 순서대로 넣어주었다. 이 액에 기질로써 0.06 mM L-DOPA(L-3,4-dihydroxyphenylalanine)액 50 μl를 넣고, 37 °C에서 반응시킨 다음 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료액 대신 시료를 녹인 용매를 공시료액으로 하여 보정하였다. DPOA 산화반응 저해율은 하기 식을 이용하여 계산하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000007
[표 5]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000008
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 DPOA 산화반응 저해 활성을 나타내고, (과)색소침착 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
<실시예 3> 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 효과
인간 진피 섬유아세포(Human Dermal Fibroblast; HDF) 세포주에서 시료 독성을 평가하여 독성이 없음을 확인하였다.
엘라스타제 저해 활성 분석(Elastase inhibition assay)
본원발명 조성물의 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 효과를 확인하기 위하여, 피부 진피를 구성하는 주요 단백질인 엘라스틴의 3차원 구조를 뒤틀어 피부 진피층의 함몰을 유도하는 엘라스타제에 대한 저해 활성을 관찰하였다. 50 mM Tris-HCl(pH 8.6) 수용액에 시험물질을 넣어 준비하였으며, 준비된 수용액을 96-웰 플레이트에 100 μl 분주하였다. 반응의 기질인 N-석시닐-(알라닌) 3-p-니트로아닐라이드(N-succinyl-(Ala) 3-p-nitroanilide)를 50 mM Tris-HCl(pH 8.8) 용액에 2.2 mM 농도가 되도록 하여 앞서 준비된 수용액을 분주했던 96-웰 플레이트에 20 μl을 추가 분주하였다. 반응의 효소인 엘라스타제(Elastase; from porcine pancreas; ≥ 4 units/mg protein)를 0.25 mg/ml로 제조하여 96-웰 플레이트에 30 μl을 추가 분주하였다. 25°C에서 10분간 반응한 후 O.D. 410 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 6에 나타내었다.
[표 6]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000009
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 엘라스타제 저해 활성을 나타내고, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
ROS 억제능 분석 (ROS assay)
본원발명 조성물의 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 효과를 확인하기 위하여, 피부 주름, 탄력 저하의 주요 원인 중의 하나인 ROS(reactive oxygen species)의 억제능을 관찰하였다. 구체적으로, 세포주를 배양하여 ROS 분석용 키트에 세포주를 시딩(seeding)하고, 24시간 후 DCFH-DA(2',7'-dichlorofluorescein diacetate) 50 uM로 30분간 반응하였다. 시험물질을 처리하고 24시간 동안 반응시킨 후 형광반응을 흡광도로 측정. ROS 억제능은 하기 식을 이용하여 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 7에 나타내었다.
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000010
[표 7]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000011
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 ROS 억제능을 나타내고, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
<실시예 4> 항염증 효과
RAW 264.7 murine macrophage 세포주에서 시료 독성을 평가하여 독성이 없음을 확인하였다.
본원발명 조성물의 항염증 효과를 확인하기 위하여, 염증성 사이토카인 TNF-α의 발현 억제 활성을 관찰하였다. 시험물질을 넣어 수용액을 준비하였으며, 준비된 수용액을 96-웰 플레이트에 50 μl 분주하였다. 수용액을 분주했던 96-웰 플레이트에 항체 50 μl을 추가 분주하였다. P플레이트는 교반기를 이용하여 400 rpm으로 교반하며, 1시간 동안 실온에서 배양하였다. 배양한 플레이트는 세척 버퍼(buffer) 350 μl을 이용하여 실온에서 3회 세척하였다. TMB development solution 100 μl을 96-웰 플레이트에 분주한 후 어두운 상태로 교반기를 이용하여 400 rpm으로 교반하며 10분간 반응시켰다. 반응 플레이트의 각 웰에 stop solution 100 μl를 분주하고 교반기로 1분간 교반한 후, O.D. 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 8에 나타내었다.
[표 8]
Figure PCTKR2020014206-appb-img-000012
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 TNF-α 발현 억제 활성을 나타내고, 피부 자극 완화(염증 완화) 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시예일뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (16)

  1. (i) 애엽 추출물;
    (ii) 헤파린 또는 이의 염;
    (iii) 알란토인; 및
    (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는, 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 헤파린 또는 이의 염은 헤파린 나트륨인 것인, 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 손상 개선용인 것인, 화장료 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 피부 손상 개선은 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선, (과)색소침착 개선, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 및 피부 자극 완화(염증 완화)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것인, 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 (ii) 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 (i) 애엽 추출물 0.05 내지 3.0 중량부, (iii) 알란토인 0.5 내지 30 중량부, (iv) 덱스판테놀 10 내지 250 중량부를 포함하는 것인, 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 (ii) 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 (i) 애엽 추출물 0.15 내지 1.5 중량부, (iii) 알란토인 2.5 내지 19.95 중량부, (iv) 덱스판테놀 20.5 내지 210 중량부를 포함하는 것인, 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 스킨, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 팩, 폼, 패취, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형인 것인, 화장료 조성물.
  8. (i) 애엽 추출물;
    (ii) 헤파린 또는 이의 염;
    (iii) 알란토인; 및
    (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는, 피부 외용제.
  9. 제8항에 있어서, 상기 헤파린 또는 이의 염은 헤파린 나트륨인 것인, 피부 외용제.
  10. 제8항에 있어서, 상기 피부 외용제는 피부 손상 개선용인 것인, 피부 외용제.
  11. 제8항에 있어서, 상기 피부 외용제는 (ii) 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 (i) 애엽 추출물 0.05 내지 3.0 중량부, (iii) 알란토인 0.5 내지 30 중량부, (iv) 덱스판테놀 10 내지 250 중량부를 포함하는 것인, 피부 외용제.
  12. 제8항에 있어서, 상기 피부 외용제는 (ii) 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 (i) 애엽 추출물 0.15 내지 1.5 중량부, (iii) 알란토인 2.5 내지 19.95 중량부, (iv) 덱스판테놀 20.5 내지 210 중량부를 포함하는 것인, 피부 외용제.
  13. 제8항에 있어서, 상기 피부 외용제는 경고제(plaster), 로션제(lotion), 리니멘트제(liniment), 액제(liquid and solution), 에어로솔제(aerosol), 엑스제(extracts), 연고제(ointment), 유동엑스제(fluid extracts), 유제(emulsion), 현탁제(suspesions), 캅셀제(capsules), 크림제(creams), 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀제 및 첩부제로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형인 것인, 피부 외용제.
  14. 제1항에 따른 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 손상 개선 방법.
  15. 피부 손상 개선을 위한 제1항에 따른 조성물의 용도.
  16. 피부 손상 개선용 화장품의 제조를 위한 제1항에 따른 조성물의 용도.
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