WO2016159604A2 - 코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자 활성화용 조성물 - Google Patents

코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자 활성화용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
WO2016159604A2
WO2016159604A2 PCT/KR2016/003116 KR2016003116W WO2016159604A2 WO 2016159604 A2 WO2016159604 A2 WO 2016159604A2 KR 2016003116 W KR2016003116 W KR 2016003116W WO 2016159604 A2 WO2016159604 A2 WO 2016159604A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
composition
skin
acid
gene
klotho
Prior art date
Application number
PCT/KR2016/003116
Other languages
English (en)
French (fr)
Other versions
WO2016159604A3 (ko
Inventor
김현정
김지현
김주원
노호식
강현서
Original Assignee
(주)아모레퍼시픽
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from KR1020150045227A external-priority patent/KR20160116872A/ko
Priority claimed from KR1020150045129A external-priority patent/KR20160116831A/ko
Application filed by (주)아모레퍼시픽 filed Critical (주)아모레퍼시픽
Priority to CN201680024945.4A priority Critical patent/CN107592810A/zh
Priority to US15/563,119 priority patent/US10238624B2/en
Priority to JP2017551113A priority patent/JP6799542B2/ja
Publication of WO2016159604A2 publication Critical patent/WO2016159604A2/ko
Publication of WO2016159604A3 publication Critical patent/WO2016159604A3/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A61K31/36—Compounds containing methylenedioxyphenyl groups, e.g. sesamin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
    • A61K8/498—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom having 6-membered rings or their condensed derivatives, e.g. coumarin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/007—Preparations for dry skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Definitions

  • a longevity gene comprising kojic acid derivative as an active ingredient, specifically, a composition for activating Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, FoxO3a gene.
  • Retinoid refers to retinol, retinoic acid or derivatives thereof.
  • Retinoids have a variety of biological effects, and skin-related effects have been reported on hyperkeratosis and acne, and retinoids such as retinol and retinoic acid have been known as external preparations for anti-aging (Dermatology therapy, 1998, 16, 357). 364).
  • these retinoids have a positive effect and have a disadvantage in that irritation occurs even when only a small amount is applied to the skin, and because of their instability, they are easily oxidatively altered when exposed to air.
  • studies to stabilize the retinoids continue to progress, but the stimulation to the skin, that is, the situation of safety has not yet been solved.
  • aging research has been mainly focused on photoaging and endogenous aging.
  • photoaging methods that can block ultraviolet rays, which are the main cause and prevent changes caused by UV irradiation, have been actively studied, and methods for mitigating endogenous aging caused by aging have been studied.
  • Recently, research has been focused on finding ways to control the aging phenomenon. In particular, research on how to prevent aging and prolong life based on genetic research that controls the aging and life span of individuals.
  • the present disclosure aims to provide a composition for activating the Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, or FoxO3a gene, which is a longevity gene associated with anticancer or life extension.
  • the present specification solves the problem of skin irritation, which is a problem of retinoids, and at the same time, a kojic acid derivative capable of specifically binding to the retinoic acid receptor (RAR), which is a receptor for retinoids, to solve the instability of the formulation as a skin external preparation.
  • RAR retinoic acid receptor
  • the disclosed technology is Sirt-1, Klotho, XPD, comprising a kojic acid derivative represented by the following formula (1), salts thereof, prodrugs thereof, hydrates thereof, solvates thereof or isomers thereof as an active ingredient
  • a composition for activating one or more genes selected from the group consisting of ERCC8, and FoxO3a is provided.
  • R 1 is -CH 2 -or -CH 2 CH 2-
  • R 2 is -C (O) OCH 2-
  • the kojic acid derivative may be cozyl methylene dioxycinnamate represented by the following formula (2).
  • the kojic acid derivative, salt thereof, prodrug thereof, hydrate thereof, solvate thereof or isomer thereof may be included in 0.00001 to 10% by weight based on the total weight of the composition.
  • the composition may be for enhancing expression of one or more proteins selected from the group consisting of Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, and FoxO3a.
  • the composition may be for anticancer.
  • the composition may be for anticancer against skin cancer.
  • the composition may be for extending the life.
  • the composition may be for extending skin cell life.
  • the skin cells may be dermal dermal derived fibroblasts.
  • the composition may be for skin moisturizing or skin barrier strengthening.
  • the composition may be a topical skin composition.
  • the technology disclosed herein has the effect of providing a composition that activates the Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, or FoxO3a gene, which is a longevity gene associated with anticancer or life extension.
  • the technology disclosed herein can specifically bind to the retinoic acid receptor (RAR), a receptor for retinoids, to solve the skin irritation problem that is a problem of retinoids and at the same time solve the instability of the formulation as an external preparation for skin.
  • RAR retinoic acid receptor
  • the longevity gene Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, or FoxO3a gene is activated to provide an effective skin improvement composition for prolonging skin cell life, moisturizing skin or strengthening skin barrier.
  • Figure 1 is a photograph of the DAPI staining observation results of the control (control) not treated with seletinoid G in the test example of the present specification (Phase; transmitted light, DAPI; blue, FoxO3a; red, Merge; violet). The top photo and bottom photo show the results of two independent test runs.
  • Figure 2 is a photograph of DAPI staining observation results of the test group treated with 15 ppm seletinoid G in the test example of the present specification (Phase; transmitted light, DAPI; blue, FoxO3a; red, Merge; violet). The top photo and bottom photo show the results of two independent test runs.
  • Figure 3 is a photograph of DAPI staining observation results of the test group treated with 150 ppm seletinoid G in the test example of the present specification (Phase; transmitted light, DAPI; blue, FoxO3a; red, Merge; violet). The top photo and bottom photo show the results of two independent test runs.
  • Figure 4 is a photograph of DAPI staining observation results of the test group treated with 450 ppm seletinoid G in the test example of the present specification (Phase; transmitted light, DAPI; blue, FoxO3a; red, Merge; violet). The top photo and bottom photo show the results of two independent test runs.
  • Figure 5 is a graph showing the nuclear translocation (nuclear translocation rate) in the test example of the present specification, the control group 13.2%, seletinoid G 15 ppm treatment group 35.7 &, seletinoid G 150 ppm treatment group 86.3%, seletinoid In the G 450 ppm treatment group, 66.9% confirmed that the sentinoids activated the longevity gene FoxO3a significantly.
  • the disclosed technology is Sirt-1, Klotho, XPD, comprising a kojic acid derivative represented by the following formula (1), salts thereof, prodrugs thereof, hydrates thereof, solvates thereof or isomers thereof as an active ingredient
  • a composition for activating at least one gene selected from the group consisting of ERCC8, and FoxO3a is provided.
  • R 1 is -CH 2 -or -CH 2 CH 2-
  • R 2 is -C (O) OCH 2-
  • the technology disclosed herein is one selected from the group consisting of gene activation, protein expression enhancement, anticancer, life extension, bioaging delay, bioaging symptoms improvement, skin hydration or skin barrier enhancement, and gene related disease improvement
  • the technology disclosed herein is at least one selected from the group consisting of kojic acid derivatives represented by the formula (1), salts thereof, prodrugs thereof, hydrates thereof, solvates thereof and isomers thereof, or effective thereof
  • Compositions for gene activation, protein expression enhancement, anti-cancer, life extension, bio-aging delayed, bio-aging symptoms improvement, skin moisturizing or skin barrier enhancement, or gene-related disease improvement comprising the components, Provided are methods for activating genes, enhancing protein expression, anticancer, prolonging life, delaying bioaging, improving symptoms of bioaging, enhancing skin moisturizing or skin barriers, or improving gene related diseases, including administration to a subject in need thereof.
  • the techniques disclosed herein are for gene activation, for protein expression enhancement, for anticancer, for prolonging life, for delaying bioaging, for improving symptoms of bioaging, for moisturizing or for strengthening skin barriers, or for gene association
  • kojic acid derivative represented by Formula 1 a salt thereof, a prodrug thereof, a hydrate thereof, a solvate thereof, and an isomer thereof are provided.
  • the gene is at least one selected from the group consisting of Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, and FoxO3a
  • the protein is at least one protein selected from the group consisting of Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, and FoxO3a.
  • the cancer includes skin cancer, the life span includes the life span of the skin cells, the living body includes the skin, and the improvement includes any one or more of prevention, treatment, or improvement.
  • the kojic acid derivative may be cozyl methylene dioxycinnamate represented by the following formula (2).
  • salt or “pharmaceutically acceptable salt” means a salt according to one aspect of the invention that is pharmaceutically acceptable and has the desired pharmacological activity of the parent compound.
  • the salt is formed from (1) an inorganic acid such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, or the like; Or acetic acid, propionic acid, hexanoic acid, cyclopentanepropionic acid, glycolic acid, pyruvic acid, lactic acid, malonic acid, succinic acid, malic acid, maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, citric acid, benzoic acid, 3- (4-hydroxybenzoyl) Benzoic acid, cinnamic acid, mandelic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, 1,2-ethane-disulfonic acid, 2-hydroxyethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, 4-chlorobenzenesulfonic acid, 2-naphthalenesulfonic acid, 4-toluenesulfonic acid, camphorsulfonic acid, 4-methylbicyclo
  • Suitable base salts are sodium, lithium, potassium, magnesium, aluminum, calcium, zinc, N, N'-dibenzylethylenediamine, chloroprocaine, choline, diethanolamine, ethylenediamine, N-methylglucosamine and pro Salts of cain.
  • pharmaceutically acceptable means the approval of a government or equivalent regulatory body to use in animals, more specifically in humans, by avoiding significant toxic effects when used in conventional medicinal dosages. It can be received or approved, or listed in a pharmacopoeia or recognized as another general pharmacopeia.
  • prodrug refers to a drug that modulates physical and chemical properties by chemically changing a drug, which itself does not exhibit physiological activity, but is originally produced by the action of a chemical or enzyme in the body after administration.
  • the drug can be turned into a drug.
  • prodrugs are converted into active drugs through chemical transformation through metabolic processes.
  • such prodrugs are functional derivatives of the compounds of the invention and are readily converted into the desired compounds in vivo.
  • conventional methods of selecting and preparing suitable prodrug derivatives are described in "Design Of Prodrugs", H Bund Saard, Elsevier, 1985. The entire contents of this document are incorporated herein by reference.
  • hydrate refers to a compound to which water is bound, and is a broad concept including an inclusion compound having no chemical bonding force between water and the compound.
  • solvate means a higher order compound produced between molecules or ions of a solute and molecules or ions of a solvent.
  • isomers refers to a relationship of compounds having the same chemical formula but not identical, and isomers include structural isomers, geometric isomers, optical isomers, and stereoisomers.
  • Structural isomers refer to compounds having the same molecular formula but different structures, and geometric isomers refer to isomers that differ in the spatial arrangement of atoms or groups of atoms bonded to two atoms connected by double bonds, and stereoisomers to Compounds having chemical constitution but differing in terms of the arrangement of atoms or groups in space;
  • optical isomers (enantiomers) refer to two stereoisomers of a compound having mirror images that do not overlap one another; diastereomers are two or more A stereoisomer with an asymmetric center whose molecules are not mirror images of each other.
  • isomers in particular are not only optical isomers (eg, essentially pure enantiomers, essentially pure diastereomers or mixtures thereof), but also form isomers ( conformation isomers (ie, isomers that differ only by their angles of one or more chemical bonds), position isomers (especially tautomers) or geometric isomers (eg, cis-trans isomers) do.
  • essentially pure means at least about 90%, preferably at least about 95%, of a specific compound, for example enantiomers or diastereomers, when used in connection with an enantiomer or diastereomer. More preferably at least about 97% or at least about 98%, even more preferably at least about 99%, even more preferably at least about 99.5% (w / w).
  • gene activation refers to facilitating the process by which certain genes on the DNA of a chromosome are transcribed and translated into proteins to reveal their function. In other words, by promoting the gene expression means that the transcription and translation process into the mRNA is active to ensure that the function of the gene is well expressed.
  • the Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, and FoxO3a genes are known as longevity genes associated with lifespan.
  • SIRT1 sirtuin 1
  • sirtuin 1 is a NAD + dependent deacetylase, wherein the human Sirt-1 gene is located at 69.64-69.68 Mb of chromosome 10, for example, having an mRNA sequence of NM_001142498. Moreover, it has a protein sequence of NP_001135970. It is known to be an enzyme that modulates protein function by deacetylating lysine residues of various proteins (Ageing Res, Vol. 1, pages 313-326, (2002)), and is known to have an effect of inhibiting the death of senescent cells.
  • SIRT1 is involved in chromatin reconstitution, DNA damage responses, and dietary restriction associated with life extension associated with gene expression inhibition (Chen et al., Science 310, 1641, 2005). SIRT1 is also known to be involved in allergic respiratory diseases (J Allergy Clin Immunol. 2010 Feb; 125 (2): 449-460.e14. Doi: 10.1016 / j.jaci.2009.08.009.Epub 2009 Oct 27 .). SIRT1, like Sir2 in yeast, reconstructs chromatin and inhibits gene expression through histone deacetylation. In addition to histone proteins, SIRT1 induces deacetylation of various transcription factors related to cell growth, stress response, and endocrine control.
  • Klotho is an enzyme produced by the KL gene, which produces type I membrane proteins associated with ⁇ -glucuronidase.
  • the human klotho gene is located at 33.59-33.64 Mb of chromosome 13 and has an mRNA sequence of NM_004795, for example. It also has a protein sequence of NP_004786.
  • Klotho gene knock-out mice rapidly increase in aging, and atherosclerosis, angiocalcification, soft tissue calcification, emphysema, decreased activity, and gonad formation associated with elevated levels of 1,25 (OH) 2D3 Abnormality, infertility, skin atrophy, ataxia, hypoglycemia and hyperphosphatemia (Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing. Nature 1997; 390, 45-51). Conversely, increased klotho protein expression leads to increased lifespan, increased insulin resistance and increased IGF-1 resistance (Kurosu et al., 2005).
  • Klotho's monobasic polymorphism also known as longevity gene, has been reported to be associated with shortening of life, osteoporosis, stroke and coronary artery disease (Arking et al., 2002, Kawano et al., 2002; Mullin et al. , 2005, Ogata et al., 2002; Yamada et al., 2005).
  • high Klotho protein levels prolong brain cell lifespan, reduce the incidence of related diseases such as heart disease, enhance cognitive ability such as attention, memory, and cognition, and the lack of this protein promotes the aging process.
  • XPD XPD (ERCC2; Excision repair cross-complementation group 2) protein is a member of a repair device that maintains DNA retention. This is one of the two enzymes involved in DNA unwinding, and along with other XP proteins, nucleotide cleavage repair, a type of DNA repair, causes XPD gene damage to cause a variety of skin diseases and aging (Mol Cell. 2003 Jun; 11). (6): 1635-46.).
  • the human XPD gene is located at 45.85-45.87 Mb of chromosome 19 and has an mRNA sequence of NM_000400, for example. Moreover, it has a protein sequence of NP_000391.
  • DNA repair defects accelerate aging and cause aging-related diseases (Best, BP (2009). "Nuclear DNA damage as a direct cause of aging”. Rejuvenation Research 12 (3): 199-208.) Risk of development (Bernstein C, Bernstein H, Payne CM, Garewal H. DNA repair / pro-apoptotic dual-role proteins in five major DNA repair pathways: fail-safe protection against carcinogenesis. Mutat Res. 2002 Jun; 511 (2): 145-78.Review.).
  • XPD a DNA repair protein that affects these DNA repair defects, cause pigmentary dry skin, cocaine syndrome, and hair sulfur dystrophy.
  • Pigmentary dry skin disease is a recessive gene photosensitive skin disease with a high incidence of skin cancer and is caused by genetic mutations involved in DNA repair.
  • Cocaine syndrome is a form of dwarfism that is characterized by delayed growth, photosensitivity, and premature ejaculation. The disease is also known to be caused by defects in DNA repair genes, and genes that cause cocaine syndrome are also involved in protein production and are thought to be caused by abnormal accumulation and production of abnormal proteins in cells.
  • Cocaine Syndrome a combination of dual pigmented dry skin syndrome.
  • Hair sulfur dystrophy is a yellow-deficient hair dystrophy that causes hair to break and break well due to a lack of protein production, including sulfur. The common cause of these three diseases is known as XPD, one of the DNA repair proteins.
  • Excision repair cross-complementation group 8 is also a protein that plays an important role in DNA repair.
  • the human ERCC8 gene is located at 60.17-60.24 Mb of chromosome 5 and has an mRNA sequence of NM_000082, for example. It also has a protein sequence of NP_000073. Mutations in ERCC8 can lead to cocaine syndrome, a hereditary disease with premature aging. From this premature aging phenomenon, it can be seen that ERCC8 significantly affects aging.
  • the FoxO3a gene is known as a longevity gene associated with lifespan.
  • FoxO3a is a protein encoded by FoxO3 (Forhead box O3), which is known as a longevity gene, and is a transcription factor located in the insulin signaling pathway and is a protein that acts on expression of enzymes such as Mn-SOD and Catalase.
  • the human FoxO3 gene is located at 108.88-109.01 Mb of chromosome 6 and has an mRNA sequence of NM_001455, for example. It also has a protein sequence of NP_001446.
  • FoxO3 protein is also known as a cancer inhibitor (Myatt SS, Lam EW (November 2007). "The emerging roles of forkhead box (Fox) proteins in cancer”. Nat. Rev. Cancer 7 (11): 847-59.) . FoxO3 gene activity is associated with cancer development, and its degradation is often seen in cancer, and FoxO3 gene is known to be involved in inflammatory diseases following lymphocyte proliferation (Immunity 2004. 21: 203-213., Proc. Natl. Acad. Sci. 2004. 101: 2975-2980., Cell 1999. 96: 857-868).
  • the kojic acid derivative, salt thereof, prodrug thereof, hydrate thereof, solvate thereof or isomer thereof is included in 0.00001 to 10% by weight based on the total weight of the composition, thereby having excellent efficacy and formulation without side effects. It may have stability. More specifically, the kojic acid derivative, salt thereof, prodrug thereof, hydrate thereof, solvate thereof or isomer thereof is 0.0001 to 5% by weight, more specifically 0.0005 to 3% by weight, more specifically based on the total weight of the composition It may be from 0.001 to 2% by weight.
  • the composition may be for enhancing expression of one or more proteins selected from the group consisting of Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, and FoxO3a.
  • the composition may be for anticancer.
  • the composition may be for cancer against the skin.
  • the composition may be for prolonging life, delaying aging of the living body or improving symptoms of living aging.
  • the composition may be for extending skin cell life.
  • the skin cells may be dermal dermal derived fibroblasts.
  • the composition may be for skin moisturizing or skin barrier strengthening.
  • the composition may be for the prevention, amelioration or treatment of diseases associated with Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, or FoxO3a gene.
  • Sirt-1-related diseases are diseases caused by Sirt-1, such as a lack or inhibition of the Sirt-1 protein, an enzyme that deacetylates lysine residues of various proteins to regulate protein function, specifically cancer, diabetes, and degenerative nerves. Diseases, obesity, inflammatory diseases, allergic respiratory diseases, and the like.
  • the degenerative neurological disease may be Alzheimer's, muscular dystrophy, axonal sclerosis, Parkinson's disease, Huntington's disease or multiple sclerosis, and the inflammatory disease is dermatitis, allergy, conjunctivitis, periodontitis, rhinitis, otitis media, sore throat, tonsillitis, pneumonia, gastric ulcer, duodenal ulcer , Hepatitis, esophagitis, gastritis, enteritis, pancreatitis, colitis, nephritis, arthritis, systemic edema, local edema.
  • the inflammatory disease is dermatitis, allergy, conjunctivitis, periodontitis, rhinitis, otitis media, sore throat, tonsillitis, pneumonia, gastric ulcer, duodenal ulcer , Hepatitis, esophagitis, gastritis, enteritis, pancreatitis, colitis, nephritis, arthritis, systemic e
  • Klotho-related diseases are diseases caused by klotho, such as lack of klotho protein, and specifically, cancer, arteriosclerosis, osteoporosis, stroke, and Alzheimer's disease.
  • XPD-related diseases are diseases caused by XPD, a DNA repair protein that affects DNA repair defects, and specifically include cancer, pigmentary dry skin, cocaine syndrome, and hair sulfur dystrophy.
  • ERCC8-related diseases are diseases caused by ERCC8, a DNA repair protein that affects DNA repair defects, and specifically include cancer and cocaine syndrome.
  • FoxO3-related diseases are diseases caused by FoxO3 gene activity or inhibition, and include cancer, neurodegenerative diseases, and inflammatory diseases.
  • degenerative neurological diseases include Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Lou Gehrig's disease, Huntington's disease, multiple sclerosis, and the like.
  • inflammatory diseases include dermatitis, allergies, conjunctivitis, periodontitis, rhinitis, otitis media, sore throat, tonsillitis, pneumonia, gastric ulcer, duodenal ulcer, hepatitis, esophagitis, gastritis, enteritis, pancreatitis, colitis, nephritis, arthritis, systemic edema, local edema, etc. Can be mentioned.
  • the composition may be an external composition for skin, wherein the external composition for skin is used herein to include both pharmaceutical compositions and cosmetic compositions.
  • the pharmaceutical composition may further comprise appropriate carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions in one aspect.
  • the carriers, excipients and diluents that may be included in the composition include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, Cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.
  • the components included in the cosmetic composition may include components commonly used in cosmetic compositions in addition to kojic acid derivatives, salts thereof, prodrugs thereof, hydrates thereof, solvates thereof or isomers thereof as active ingredients, such as antioxidants, Conventional adjuvants such as stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments, pigments and flavorings, and carriers.
  • the cosmetic composition may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing, oils It may be formulated as powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, spray, and the like, but is not limited thereto.
  • Basic cosmetics such as powder, oil-in-water (O / W) or oil-in-water (O / W), makeup cosmetics such as lipstick, makeup base or foundation, cleaning agent such as shampoo, rinse, body cleanser, toothpaste or mouthwash It may be prepared in the form of a hair cosmetic such as hair tonic, gel or mousse, hair or hair dye.
  • the carrier component is animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide, or the like. This can be used.
  • the formulation of the cosmetic composition of the present disclosure is a powder or a spray
  • lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as the carrier component, and in particular, in the case of a spray, additionally chlorofluorohydro Propellant such as carbon, propane / butane or dimethyl ether.
  • a solvent, solubilizer or emulsion may be used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate , Propylene glycol, butylene glycol, 1,3-butyl glycol oil, polyoxyethylene hardened castor oil, glycerol, glycerin, aliphatic ester, phenoxyethanol, triethanolamine, polyethylene glycol, beeswax, polysorbate 60, sorbitan Quiolade, paraffin, sorbitan stearate, lipophilic monostearic acid glycerine, stearic acid, glyceryl stearate / fig-400 stearate, carboxypolymer, cytosterol, polyglyceryl 2-oleate, ceramide, cholesterol, steares- 4,
  • the carrier component such as water, ethanol, isopropanol
  • a liquid diluent such as water, ethanol, butylene glycol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester as carrier components
  • Suspending agents such as, microcrystalline cellulose, hydroxyethyl cellulose, sodium hyaluronate, phenoxyethanol, aluminum meta hydroxide, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
  • the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, isethionate, an imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate.
  • Cozymethylene dioxycinnamate 20mg, isomerized sugar 10g, mannitol 5g, a suitable amount of purified water was added to the purified water according to the conventional method for dissolving each component, and the lemon flavor was added appropriately, the above components were mixed and purified water was added to the whole After adjusting to 100ml to fill a brown bottle sterilized to prepare a liquid.
  • Ointments were prepared in a conventional manner (% by weight) according to the compositions described below.
  • Beta Glucan >................wave 7.0
  • the nutritional lotion was prepared in a conventional manner according to the composition described below (% by weight).
  • a nutritious cream was prepared in a conventional manner according to the composition described below (% by weight).
  • NHF normal human fibroblast
  • DMEM medium
  • NHEKs normal human epidermal keratinocytes
  • Lonza Allendale, NJ, USA
  • KGM-GOLD Lonza, Allendale, NJ, USA
  • keratinocyte growth medium KGM-GOLD, Lonza, Allendale, NJ, USA
  • the kojic acid derivatives disclosed herein significantly increase the expression of Sirt-1, Klotho, XPD and ERCC8 genes known as longevity genes. That is, the kojic acid derivatives can be seen that activate the Sirt-1, Klotho, XPD and ERCC8 gene to activate their function to act as a longevity gene.
  • the keratinocytes which make up most of the epidermis of the cells that make up human skin, are deeply involved in moisturizing, which inhibits skin moisture evaporation, and the barrier function that protects the skin from external harmful factors.
  • the composition according to the present disclosure includes the kojic acid derivative as an active ingredient, and thus Sirt-1, Klotho, XPD and ERCC8 genes in keratinocytes that function as a barrier to protect skin from moisture and external harmful factors that inhibit skin moisture evaporation. It can be seen that there is a skin improvement effect useful for moisturizing the skin and strengthening the skin barrier by activating.
  • the kojic acid derivative disclosed in the present specification activates the longevity genes Sirt-1, Klotho, XPD, and ERCC8, indicating that it has an effect of extending the lifespan of skin cells, specifically fibroblasts that occupy most of the dermis. Can be. This effect was found to be superior to retinol.
  • human melanoma cells (Human MNT1 melanoma cells) were purchased from Lonza, and the effect of seletinoid G on the FoxO3a gene activation was investigated. It was confirmed by the nuclear translocation rate.
  • seletinoid G was treated with human melanoma celloma at concentrations of 15, 150, and 450 ppm for 48 hours and stained with DAPI solution diluted at 1/10000 for 30 minutes, followed by Confocal Laser Scanning Microscope, Zeiss) was used to evaluate the degree of FoxO3a activation to the extent that red and blue fluorescence were superimposed in the nucleus and observed as violet fluorescence.
  • the kojic acid derivative disclosed herein significantly increases the expression amount of FoxO3a gene known as longevity gene. That is, the kojic acid derivatives can be seen that activate the FoxO3a gene to activate its function to act as a cancer inhibitor, longevity gene.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 명세서에는 코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자, 구체적으로 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, FoxO3a 유전자 활성화용 조성물이 개시된다. 상기 조성물은 장수 유전자를 활성화함으로써, 항암, 수명 연장, 피부 보습 또는 피부 장벽 강화 효과가 있다.

Description

코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자 활성화용 조성물
본 명세서에는 코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자, 구체적으로 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, FoxO3a 유전자 활성화용 조성물이 개시된다.
레티노이드는 레티놀, 레티노익산 또는 이의 유도체를 일컫는 말이다. 레티노이드는 다양한 생물학적 작용을 나타내는데 피부와 관련하여서는 과각질화, 여드름에 대한 효과가 보고되고 있으며, 안티에이징을 위한 외용제로서 레티놀과 레티노익산 등의 레티노이드 효능은 알려진 사실이다(Dermatology therapy, 1998, 16, 357 ∼ 364). 하지만 이들 레티노이드는 긍정적인 효과와 더불어, 소량만을 피부에 적용하여도 자극이 나타난다는 단점을 가지며, 또한 불안정성으로 인하여 공기 중에 노출되면 쉽게 산화 변질되기 때문에 사용하는데 많은 제약이 있다. 이에 레티노이드를 안정화하기 위한 연구는 계속해서 진행되고 있으나, 아직까지 피부에 대한 자극 즉 안전성의 문제는 해결되지 않고 있는 실정이다.
한편, 노화에 관한 연구는 주로 광노화와 내인성 노화를 중심으로 연구되어 왔다. 광노화의 경우 주 원인인 자외선을 차단하고 자외선 조사에 따른 변화를 예방할 수 있는 방법들이 활발이 연구되어 왔으며, 나이가 들어 발생하는 내인성 노화를 완화하기 위한 방법들도 연구되어 왔다. 최근에는 이런 노화 현상을 총괄하여 조절하는 방법을 찾는 것에 연구가 집중되고 있다. 특히 개체의 노화 및 수명을 조절하는 유전자 연구를 바탕으로 노화를 예방하고 수명을 연장하는 방법의 연구가 진행되고 있다.
일 측면에서, 본 명세서는 항암 또는 수명 연장과 관련된 장수 유전자인 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 또는 FoxO3a 유전자를 활성화하는 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
다른 측면에서, 본 명세서는 레티노이드의 문제점인 피부 자극 문제를 해결함과 동시에 피부 외용제로서 제형의 불안정성을 해결할 수 있도록 레티노이드의 수용체인 RAR(retinoic acid receptor)에 특이적으로 결합할 수 있는 코지산 유도체를 이용하여 장수 유전자인 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 또는 FoxO3a 유전자를 활성화하여 피부 세포 수명 연장, 피부 보습 또는 피부 장벽 강화에 효과적인 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 하기 화학식 1로 표시되는 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 이성질체를 유효성분으로 포함하는 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 유전자 활성화용 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2016003116-appb-I000001
(상기 식 중, R1은 -CH2- 또는 -CH2CH2- 이고, R2는 -C(O)OCH2-, -CH=CHC(O)OCH2- 또는 -CH=CH- 이다.)
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 코지산 유도체는 하기 화학식 2로 표시되는 코질메칠렌디옥시신나메이트일 수 있다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2016003116-appb-I000002
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 이성질체는 조성물 총 중량을 기준으로 0.00001 내지 10 중량%로 포함될 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 단백질 발현 증진용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 항암용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부암에 대한 항암용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 수명 연장용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부 세포 수명 연장용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 피부 세포는 피부 진피 유래 섬유아세포일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부 보습용 또는 피부 장벽 강화용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부 외용제 조성물일 수 있다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 항암 또는 수명 연장과 관련된 장수 유전자인 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 또는 FoxO3a 유전자를 활성화하는 조성물을 제공하는 효과가 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 레티노이드의 문제점인 피부 자극 문제를 해결함과 동시에 피부 외용제로서 제형의 불안정성을 해결할 수 있도록 레티노이드의 수용체인 RAR(retinoic acid receptor)에 특이적으로 결합할 수 있는 코지산 유도체를 이용하여 장수 유전자인 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 또는 FoxO3a 유전자를 활성화하여 피부 세포 수명 연장, 피부 보습 또는 피부 장벽 강화에 효과적인 피부 개선용 조성물을 제공하는 효과가 있다.
도 1은 본 명세서의 시험예에서 seletinoid G를 처리하지 않은 대조군(control)의 DAPI 염색 관찰 결과 사진이다(Phase; 투과광, DAPI; 블루, FoxO3a; 레드, Merge; 바이올렛). 상단 사진과 하단 사진은 같은 테스트를 독립적으로 2회 실시한 결과를 나타낸다.
도 2는 본 명세서의 시험예에서 seletinoid G를 15 ppm으로 처리한 시험군의 DAPI 염색 관찰 결과 사진이다(Phase; 투과광, DAPI; 블루, FoxO3a; 레드, Merge; 바이올렛). 상단 사진과 하단 사진은 같은 테스트를 독립적으로 2회 실시한 결과를 나타낸다.
도 3은 본 명세서의 시험예에서 seletinoid G를 150 ppm으로 처리한 시험군의 DAPI 염색 관찰 결과 사진이다(Phase; 투과광, DAPI; 블루, FoxO3a; 레드, Merge; 바이올렛). 상단 사진과 하단 사진은 같은 테스트를 독립적으로 2회 실시한 결과를 나타낸다.
도 4는 본 명세서의 시험예에서 seletinoid G를 450 ppm으로 처리한 시험군의 DAPI 염색 관찰 결과 사진이다(Phase; 투과광, DAPI; 블루, FoxO3a; 레드, Merge; 바이올렛). 상단 사진과 하단 사진은 같은 테스트를 독립적으로 2회 실시한 결과를 나타낸다.
도 5는 본 명세서의 시험예에서 핵 이행 정도(nuclear translocation rate)를 그래프로 나타낸 결과로서, 대조군은 13.2%, seletinoid G 15 ppm 처리군은 35.7&, seletinoid G 150 ppm 처리군은 86.3%, seletinoid G 450 ppm 처리군은 66.9%로 셀레티노이드가 장수 유전자 FoxO3a를 현저하게 활성화함을 확인하였다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 하기 화학식 1로 표시되는 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 이성질체를 유효성분으로 포함하는 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a 로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 유전자 활성화용 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2016003116-appb-I000003
(상기 식 중, R1은 -CH2- 또는 -CH2CH2- 이고, R2는 -C(O)OCH2-, -CH=CHC(O)OCH2- 또는 -CH=CH- 이다.)
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 유전자 활성화, 단백질 발현 증진, 항암, 수명연장, 생체노화 지연, 생체노화 증상 개선, 피부보습 또는 피부 장벽 강화, 및 유전자 관련 질환 개선으로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상에 사용하기 위한, 상기 화학식 1로 표시되는 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 및 이의 이성질체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 화학식 1로 표시되는 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 및 이의 이성질체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상, 또는 이를 유효성분으로 포함하는 유전자 활성화용, 단백질 발현 증진용, 항암용, 수명연장용, 생체노화 지연용, 생체노화 증상 개선용, 피부보습용 또는 피부 장벽 강화용, 또는 유전자 관련 질환 개선용 조성물을, 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 것을 포함하는 유전자 활성화, 단백질 발현 증진, 항암, 수명연장, 생체노화 지연, 생체노화 증상 개선, 피부보습 또는 피부 장벽 강화, 또는 유전자 관련 질환 개선 방법을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 유전자 활성화용, 단백질 발현 증진용, 항암용, 수명연장용, 생체노화 지연용, 생체노화 증상 개선용, 피부보습용 또는 피부 장벽 강화용, 또는 유전자 관련 질환 개선용 조성물을 제조하기 위한, 상기 화학식 1로 표시되는 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 및 이의 이성질체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 용도를 제공한다.
상기 유전자는 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상이고, 상기 단백질은 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 단백질이며, 상기 암은 피부암을 포함하고, 상기 수명은 피부세포의 수명을 포함하며, 상기 생체는 피부를 포함하고, 상기 개선은 예방, 치료, 또는 개선 중 어느 하나 이상을 포함한다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 코지산 유도체는 하기 화학식 2로 표시되는 코질메칠렌디옥시신나메이트일 수 있다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2016003116-appb-I000004
seletinoid G
본 명세서에서 "염" 또는 "약학적으로 허용 가능한 염"은 약학적으로 허용 가능하고 모 화합물(parent compound)의 바람직한 약리 활성을 갖는 본 발명의 일 측면에 따른 염을 의미한다. 무기산 또는 유기산 또는 무기 염기 또는 유기 염기로 형성된 통상적인 염 및 4급 암모늄의 산부가염을 포함한다. 상기 염은 (1) 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나; 또는 아세트산, 프로파이온산, 헥사노산, 시클로펜테인프로피온산, 글라이콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-히드록시벤조일) 벤조산, 신남산, 만델산, 메테인설폰산, 에테인설폰산, 1,2-에테인-디설폰산, 2-히드록시에테인설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄퍼설폰산, 4-메틸바이시클로 [2,2,2]-oct-2-엔-1-카르복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로파이온산, 트리메틸아세트산, tert-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 히드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산과 같은 유기산으로 형성되는 산 부가염(acid addition salt); 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 프로톤이 치환될 때 형성되는 염을 포함할 수 있다. 적절한 염기 염의 더욱 특정한 예는 나트륨, 리튬, 칼륨, 마그네슘, 알루미늄, 칼슘, 아연, N,N'-디벤질에틸렌디아민, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, N-메틸글루코사민 및 프로카인의 염을 포함한다.
본 명세서에서 "약학적으로 허용 가능"이란 통상의 의약적 복용량(medicinal dosage)으로 이용할 때 상당한 독성 효과를 피함으로써, 동물, 더 구체적으로는 인간에게 사용할 수 있다는 정부 또는 이에 준하는 규제 기구의 승인을 받을 수 있거나 승인 받거나, 또는 약전에 열거되거나 기타 일반적인 약전으로 인지되는 것을 의미한다.
본 명세서에서 "프로드럭(prodrug)"은 어떤 약물을 화학적으로 변화시켜 물리적, 화학적 성질을 조절한 약물을 의미하며, 그 자체는 생리 활성을 나타내지 않지만 투여 후 체내에서 화학적 혹은 효소의 작용에 의해 원래의 약물로 바뀌어 약효를 발휘할 수 있다. 프로드럭은 투여되면, 대사 과정을 통하여 화학 변환을 통해 활성 약물로 변환된다. 일반적으로, 이러한 프로드럭은 본 발명의 화합물의 기능적 유도체이고, 생체 내에서 원하는 화합물로 쉽게 변환된다. 예를 들어, 적절한 프로드럭 유도체를 선별하고 제조하는 통상의 방법은 문헌["Design Of Prodrugs", H Bund Saard, Elsevier, 1985]에 기재되어 있다. 이 문헌의 전체 내용은 본원에 참고로 원용된다.
본 명세서에서 "수화물(hydrate)"은 물이 결합되어 있는 화합물을 의미하며, 물과 화합물 사이에 화학적인 결합력이 없는 내포 화합물을 포함하는 광범위한 개념이다.
본 명세서에서 "용매화물"은 용질의 분자나 이온과 용매의 분자나 이온 사이에 생긴 고차의 화합물을 의미한다.
본 명세서에서 "이성질체"란 화학식은 같으나 동일하지는 않은 화합물의 관계를 의미하며, 이러한 이성질체의 종류에는 구조 이성질체, 기하 이성질체, 광학 이성질체 및 입체 이성질체가 있다. 구조 이성질체란, 분자식은 같지만 구조가 달라 다른 성질을 갖는 화합물을 의미하고, 기하 이성질체란, 이중결합으로 연결된 두 원자에 결합된 원자 또는 원자단의 공간적 배치가 다른 이성질체를 의미하고, 입체 이성질체란, 동일한 화학적 구성을 갖지만 공간 중에서 원자 또는 기의 배열의 측면에서 상이한 화합물 의미하고, 광학 이성질체(거울상 이성질체)란, 서로 겹치지 않는 거울상을 갖는 한 화합물의 두 입체이성질체를 의미하며, 부분입체 이성질체란, 둘 이상의 비대칭 중심을 가지고 그것의 분자들이 서로 거울상이 아닌 입체이성질체를 의미한다.
본 명세서에서 "이성질체"는 특히 광학 이성질체(optical isomers)(예를 들면, 본래 순수한 거울상 이성질체(essentially pure enantiomers), 본래 순수한 부분 입체 이성질체(essentially pure diastereomers) 또는 이들의 혼합물)뿐만 아니라, 형태 이성질체(conformation isomers)(즉, 하나 이상의 화학 결합의 그 각도만 다른 이성질체), 위치 이성질체(position isomers)(특히, 호변이성체(tautomers)) 또는 기하 이성질체(geometric isomers)(예컨대, 시스-트랜스 이성질체)를 포함한다.
본 명세서에서 "본래 순수(essentially pure)"란, 예컨대 거울상 이성질체 또는 부분 이성질체와 관련하여 사용한 경우, 거울상 이성질체 또는 부분 이성질체를 예로 들 수 있는 구체적인 화합물이 약 90% 이상, 바람직하게는 약 95% 이상, 보다 바람직하게는 약 97% 이상 또는 약 98% 이상, 보다 더 바람직하게는 약 99% 이상, 보다 더욱 더 바람직하게는 약 99.5% 이상(w/w) 존재하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 "유전자 활성화"란 염색체의 DNA 상에 있는 특정 유전자가 전사되고 단백질로 번역되어 그 기능이 나타나게 되는 과정을 촉진하는 것을 의미한다. 즉, 유전자 발현을 촉진시킴으로써 mRNA로의 전사 및 단백질로의 번역 과정이 활발히 일어나 상기 유전자의 기능이 잘 발현되도록 하는 것을 의미한다.
상기 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a 유전자는 수명과 관련된 장수 유전자로 알려져 있다.
SIRT1(silent mating type information regulation 2 homolog; sirtuin 1)은 NAD+ 의존적 탈아세틸효소로서, 사람의 Sirt-1 유전자는 10번 염색체의 69.64-69.68 Mb에 위치하고, 예컨대, NM_001142498의 mRNA 서열을 갖는 것이다. 또한, NP_001135970의 단백질 서열을 갖는 것이다. 여러 단백질의 리신 잔기를 탈아세틸화하여 단백질 기능을 조절하는 효소로 알려져 있으며(Ageing Res, Vol.1 페이지 313-326, (2002)), 노화 세포의 사멸을 억제하는 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
미국 하버드 의과대학 연구진은 음식 섭취량을 줄였을 때 수명이 연장되는 이유가 Sirt-1의 활동이 증가하기 때문이라는 사실을 발표한 바 있다(Science. 2004 Jul 16;305(5682):390-2. Epub 2004 Jun 17.). NAD+ 의존적 class III 히스톤 탈아세틸 활성을 가진 효모의 Sir2와 가장 유사하고, 특히, Nuclear factor-kB, p53 등의 전사인자에 붙어 있는 아세틸기를 잘라내어 이들의 기능을 조절한다(Cancer Res, Vol.64 페이지 7513-7525, (2004); Cell, Vol.107, 페이지 149-159, (2001); Trends Endocrinol Metab, Vol.17 페이지 186-191, (2006)).
SIRT1은 유전자 발현 억제와 관련된 크로마틴 재구성, DNA 손상 반응, 식이제한에 동반된 수명연장 등에 관여한다(Chen et al., Science 310, 1641, 2005). 또한, SIRT1은 알러지성 호흡기질환에 관여하는 것으로 알려져 있다(J Allergy Clin Immunol. 2010 Feb;125(2):449-460.e14. doi: 10.1016/j.jaci.2009.08.009. Epub 2009 Oct 27.). SIRT1은 효모의 Sir2처럼 히스톤 탈아세틸화를 통해 크로마틴을 재구성하고 유전자의 발현을 억제하며, 히스톤 단백질 외에도 세포성장, 스트레스 반응, 내분비조절 등에 관련된 다양한 전사인자의 탈아세틸화를 유도한다.
최근 연구에 따르면, 상기 SIRT1의 탈아세틸화 활성을 증가시켜 당뇨, 비만, 신경퇴행성질환 또는 노화관련질환 등에 적용하는 기술이 보고되고 있다. 즉, 유전자발현, 당 대사, 인슐린 생산, 염증반응, 뇌신경세포 보호 등에 관여하여 세포의 성장, 노화, 죽음을 제어하며, 조직 및 개체 수준에서는 암, 대사질환, 비만, 염증질환, 당뇨, 심장질환, 뇌퇴행성질환 등 다양한 노화질환의 발생에 관여하는 것으로 보고되고 있다.
Klotho는 KL 유전자에 의해 생성되는 효소로서, 상기 유전자는 β-글루쿠로니다아제와 관련된 I형 막 단백질을 생성한다. 사람의 klotho 유전자는 13번 염색체의 33.59-33.64 Mb에 위치하고, 예컨대, NM_004795의 mRNA 서열을 갖는 것이다. 또한, NP_004786의 단백질 서열을 갖는 것이다.
Klotho 유전자가 넉아웃(knock-out)된 마우스는 각종 노화 현상이 빠른 속도로 증가하며, 1,25(OH)2D3 농도 상승과 연관된 동맥경화, 혈관석회화, 연조직 석회화, 폐기종, 활동저하, 생식선 형성이상, 불임, 피부위축, 운동실조증, 저혈당증 및 고인산혈증을 나타낸다(Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing. Nature 1997; 390, 45-51). 반대로, klotho 단백질 발현이 증가하게 되면 수명증가, 인슐린 저항성 증가 및 IGF-1 저항성 증가 등이 나타난다(Kurosu et al., 2005).
사람에서도 장수유전자로 알려진 Klotho의 단일염기 다형성은 수명단축, 골다공증, 뇌졸중 및 관상동맥질환과 연관되어 있음이 보고된 바 있다(Arking et al., 2002, Kawano et al., 2002; Mullin et al., 2005, Ogata et al., 2002; Yamada et al., 2005). 또한, Klotho 단백질 수치가 높으면 뇌세포 수명이 연장되고 심장질환 등 관련 질환의 발병을 감소시키며 주의력, 기억력, 인지력 등 인식 능력을 강화시켜 주고, 이 단백질이 부족하면 노화 과정이 촉진되는 것으로 나타났다. 그러나, 현재 피부 세포와 Klotho 발현의 연관성이나 Klotho 발현을 증가시킬 수 있는 물질에 대한 연구가 없는 실정이다.
XPD(ERCC2; Excision repair cross-complementation group 2) 단백질은 DNA 보존성을 유지하는 수선 장치의 한 구성원이다. 이는 DNA 풀림에 관여하는 두 효소 중 하나이며, 다른 XP 단백질과 함께 DNA 수선의 한 종류인 뉴클레오티드 절단 수선을 수행하여 XPD 유전자 손상은 다양한 피부 질환과 노화의 원인이 된다(Mol Cell. 2003 Jun;11(6):1635-46.). 사람의 XPD 유전자는 19번 염색체의 45.85-45.87 Mb에 위치하고, 예컨대, NM_000400의 mRNA 서열을 갖는 것이다. 또한, NP_000391의 단백질 서열을 갖는 것이다.
한편, DNA 수선 결함은 노화를 가속화하여 노화 관련 질병을 야기(Best,BP (2009). "Nuclear DNA damage as a direct cause of aging". Rejuvenation Research 12(3): 199-208.)하고, 암 발생 위험(Bernstein C, Bernstein H, Payne CM, Garewal H. DNA repair/pro-apoptotic dual-role proteins in five major DNA repair pathways: fail-safe protection against carcinogenesis. Mutat Res. 2002 Jun;511(2):145-78. Review.)을 높인다.
이러한 DNA 수선 결함에 영향을 미치는 DNA 수선 단백질인 XPD의 유전자 돌연변이는 색소성 건피증, 코케인 증후군, 모발유황이영양증의 원인으로 작용한다. 색소성 건피증은 높은 피부암 발생을 보이는 열성유전자 광과민성 피부 질환이며 DNA 수선에 관련된 유전자 돌연변이에 의해 일어난다. 코케인 증후군은 왜소증의 한 형태로 성장이 지연되거나 광과민성을 보이고 조로증을 보이는 것이 특징이다. 이 질환 또한 DNA 수선 유전자에 결함이 생겨 일어나는 것으로 알려져 있고, 코케인 증후군을 일으키는 유전자는 단백질 생성에도 관여하여 세포 내 비정상적인 단백질의 축적과 생산으로 증상이 나타나는 것으로 여겨진다. 코케인 증후군은 4가지 형태가 있는데, 이중 색소성 건피증과 복합적으로 나타나는 증후군도 있다. 모발유황이영양증은 황결핍성 모발 이영양증으로 황을 포함한 단백질 생산의 결핍으로 모발이 잘 부스러지고 끊어지게 된다. 이들 세 질환의 공통된 원인 단백질로 알려진 것이 바로 DNA 수선 단백질 중 하나인 XPD이다.
ERCC8(Excision repair cross-complementation group 8) 역시 DNA 수선과정에서 중요한 역할을 하는 단백질이다. 사람의 ERCC8 유전자는 5번 염색체의 60.17-60.24 Mb에 위치하고, 예컨대, NM_000082의 mRNA 서열을 갖는 것이다. 또한, NP_000073의 단백질 서열을 갖는 것이다. ERCC8의 변이가 발생할 경우 조기 노화 현상을 동반한 유전 질환인 코케인 증후군이 나타날 수 있다. 이 조기 노화 현상으로부터 ERCC8이 노화에 큰 영향을 미치고 있는 것을 알 수 있다.
FoxO3a 유전자는 수명과 관련된 장수 유전자로 알려져 있다. FoxO3a는 장수유전자로 알려진 FoxO3(Forhead box O3)에 의해 인코딩되는 단백질이며, 인슐린 신호전달경로에 위치하는 전사인자로서 Mn-SOD, Catalase와 같은 효소의 발현에 작용하는 단백질이다. 사람의 FoxO3 유전자는 6번 염색체의 108.88-109.01 Mb에 위치하고, 예컨대, NM_001455의 mRNA 서열을 갖는 것이다. 또한, NP_001446의 단백질 서열을 갖는 것이다. FoxO3a가 활성화되면 생체 내 방어기작의 활성화 등을 통해 항노화 효능을 구현한다.
FoxO3 단백질은 또한 암 억제제로 알려져 있다(Myatt SS, Lam EW (November 2007). "The emerging roles of forkhead box (Fox) proteins in cancer". Nat. Rev. Cancer 7 (11): 847-59.). FoxO3 유전자 활성은 암 발생과 관련이 있으며, 이의 활성 저하가 암에서 종종 나타나며, FoxO3 유전자는 림프구 증식에 따른 염증성 질환에도 관여하는 것으로 알려져 있다(Immunity 2004. 21:203-213., Proc. Natl. Acad. Sci. 2004. 101: 2975-2980., Cell 1999. 96: 857-868).
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 이성질체는 조성물 총 중량을 기준으로 0.00001 내지 10 중량%로 포함됨으로써 부작용 없이 우수한 효능 및 제형 안정성을 가질 수 있다. 또한, 더욱 구체적으로 상기 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 이성질체는 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 내지 5 중량%, 더욱 구체적으로 0.0005 내지 3 중량%, 더욱 구체적으로 0.001 내지 2 중량%일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 단백질 발현 증진용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 항암용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부에 대한 항암용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 수명 연장용, 생체 노화 지연용 또는 생체 노화 증상 개선용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부 세포 수명 연장용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 피부 세포는 피부 진피 유래 섬유아세포일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부 보습용 또는 피부 장벽 강화용일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 또는 FoxO3a 유전자 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용일 수 있다.
Sirt-1 관련 질환은 여러 단백질의 리신 잔기를 탈아세틸화하여 단백질 기능을 조절하는 효소인 Sirt-1 단백질의 부족 또는 억제 등 Sirt-1에 의해 야기되는 질환으로, 구체적으로 암, 당뇨병, 퇴행성신경질환, 비만, 염증질환, 알러지성 호흡기질환 등이 있다. 상기 퇴행성신경질환은 알츠하이머, 근위축성 축삭경화증, 파킨슨병, 헌팅톤병 또는 다발성경화증일 수 있으며, 상기 염증질환은 피부염, 알레르기, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 십이지장궤양, 간염, 식도염, 위염, 장염, 췌장염, 대장염, 신장염, 관절염, 전신부종, 국소부종일 수 있다.
klotho 관련 질환은 klotho 단백질의 부족 등 klotho에 의해 야기되는 질환으로, 구체적으로 암, 동맥경화, 골다공증, 뇌졸중, 알츠하이머 등이 있다.
XPD 관련 질환은 DNA 수선 결함에 영향을 미치는 DNA 수선 단백질인 XPD에 의해 야기되는 질환으로, 구체적으로 암, 색소성 건피증, 코케인 증후군, 모발유황이영양증 등이 있다.
ERCC8 관련 질환은 DNA 수선 결함에 영향을 미치는 DNA 수선 단백질인 ERCC8에 의해 야기되는 질환으로, 구체적으로 암, 코케인 증후군 등이 있다.
FoxO3 관련 질환이란 FoxO3 유전자 활성 또는 억제에 의해 야기되는 질환으로서, 암, 퇴행성 신경질환, 염증성 질환 등이 있다. 퇴행성 신경질환의 예로는 알츠하이머 질환, 파킨슨 질환, 루게릭 질환, 헌팅톤 질환, 다발성 경화증 등을 들 수 있다. 염증성 질환의 예로는 피부염, 알레르기, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 십이지장궤양, 간염, 식도염, 위염, 장염, 췌장염, 대장염, 신장염, 관절염, 전신부종, 국소부종 등을 들 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부 외용제 조성물일 수 있으며, 본 명세서에서 피부 외용제 조성물은 약학 조성물 및 화장료 조성물 모두를 포함하는 것을 의미한다.
상기 약학 조성물은 일 측면에서 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 일 측면에서 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등이 있다.
상기 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서의 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 이성질체 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 로션, 바디로션, 영양 크림, 맛사지 크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 젤, 패치, 스프레이, 파우더, 수중유(O/W)형 또는 유중수(O/W)형 등의 기초 화장료, 립스틱, 메이크업베이스 또는 파운데이션 등의 메이크업 화장료, 샴푸, 린스, 바디클렌저, 치약 또는 구강 청정제 등의 세정료, 헤어토닉, 젤 또는 무스 등의 정발제, 양모제 또는 염모제 등의 모발용 화장료의 제형으로 제조될 수 있다.
본 명세서의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 명세서의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 명세서의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용될 수 있고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 글리세롤, 글리세린, 지방족 에스테르, 페녹시에탄올, 트리에탄올아민, 폴리에틸렌 글리콜, 밀납, 폴리솔베이트 60, 솔비탄세스퀴오레이드, 파라핀, 소르비탄 스테아레이트, 친유형 모노스테아린산 글리세린, 스테아린산, 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트, 카르복시폴리머, 시토스테롤, 폴리글리세릴 2-올레이트, 세라마이드, 콜레스테롤, 스테아레스-4, 디세틸포스페이트, 마카다미아 오일, 카르복시비닐폴리머, 산탄검 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 있다.
본 명세서의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오즈, 소디움히아루로네이트, 페녹시에탄올, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 명세서의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물의 제형예를 아래에서 설명하나, 다른 여러 가지 제형으로도 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제형예 1] 캡슐제
코질메칠렌디옥시신나메이트 10mg, 결정성 셀룰로오스 3mg, 락토오스 14.8mg, 마그네슘 스테아레이트 0.2mg을 통상의 캡슐제 제조방법에 따라 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
[제형예 2] 액제
코질메칠렌디옥시신나메이트 20mg, 이성화당 10g, 만니톨 5g, 정제수 적량을 통상의 액제 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합하고 정제수를 가하여 전체 100ml로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조하였다.
[제형예 3] 연고
하기 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다(중량%).
코질메칠렌디옥시신나메이트............. 3.0
글리세린............................... 8.0
부틸렌글리콜......................... 4.0
유동파라핀........................... 15.0
베타글루칸............................ 7.0
카보머.................................. 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드....... 3.0
스쿠알란................................ 1.0
세테아릴 글루코사이드................. 1.5
소르비탄 스테아레이트................. 0.4
세테아릴 알코올....................... 1.0
밀납.................................. 4.0
방부제, 색소, 향료................... 적량
정제수............................... 잔량
[제형예 4] 영양 화장수
하기 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양 화장수를 제조하였다(중량%).
코질메칠렌디옥시신나메이트............... 0.1
글리세린................................. 3.0
부틸렌글리콜............................. 3.0
프로필렌글리콜........................... 3.0
카르복시비닐폴리머....................... 0.1
밀납..................................... 4.0
폴리솔베이트 60.......................... 1.5
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드......... 5.0
스쿠알란................................. 5.0
솔비탄세스퀴올레이트..................... 1.5
세테아릴 알코올.......................... 1.0
트로메타민............................... 0.2
방부제, 향료............................. 적량
정세수................................... 잔량
[제형예 5] 영양 크림
하기 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양 크림을 제조하였다(중량%).
코질메칠렌디옥시신나메이트............... 0.1
글리세린................................. 3.5
부틸렌글리콜............................. 3.0
유동파라핀............................... 7.0
베타글루칸............................... 7.0
카보머................................... 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드......... 3.0
스쿠알란................................. 5.0
세테아릴 글루코사이드.................... 1.5
소르비탄 스테아레이트.................... 0.4
폴리솔베이트 60.......................... 1.2
트로메타민............................... 0.1
방부제, 향료............................. 적량
정세수................................... 잔량
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
시험예 . 장수 유전자 활성화 효과
Sirt -1, Klotho , XPD 및 ERCC8의 경우
본 명세서에 개시된 코지산 유도체의 장수 유전자 활성화 효과를 확인하기 위하여 인간 각질형성세포(Normal Human Keratinocyte, NHK)와 섬유아세포(Normal Human Fibroblast, NHF)를 이용하여 코질메칠렌디옥시신나메이트가 Sirt-1, Klotho, XPD 및 ERCC8 활성화에 미치는 영향을 레티놀과 함께 비교하였다.
구체적으로, 코질메칠렌디옥시신나메이트와 레티놀 각각을 각질형성세포(NHK), 섬유아세포(NHF)에 10 ppm의 농도로 처리하여 37℃에서 24시간 동안 배양한 후 세포로부터 전체 RNA를 분리하여 Sirt-1, Klotho, XPD 및 ERCC8 mRNA의 상대적인 발현양을 비교하였다. NHF(normal human fibroblast)는 Lonza(Allendale, NJ, USA)로부터 구입한 후 60mm 디쉬에 배지(DMEM)를 이용하여 2×105씩 분주하여 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이후 배지를 버리고 새로운 조직 배양 플라스크로 이동시켰다. 또한, NHEKs(normal human epidermal keratinocytes)는 Lonza(Allendale, NJ, USA)로부터 구입하여 각질세포 성장 배지(KGM-GOLD, Lonza, Allendale, NJ, USA)에서 배양하였으며, 0.025% 트립신으로 떼어내어 계대배양하고 새로운 조직 배양 플라스크로 이동시켰다. 계대배양 2 내의 세포를 실험에 이용하였다.
전체 RNA는 제조사의 프로토콜에 따라 TRIzol™(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)을 이용하여 분리하였다. RNA 농도는 분광광도법적으로 측정하였고, RNA integrity는 BioAnalyzer 2100(Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)을 이용하여 측정하였다. RNA 4μg을 SuperScript®III 역전사효소(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)를 이용하여 cDNA로 역전사시키고 분취량을 -70℃에서 저장하였으며, 타겟 유전자의 발현 수준은 정량적 리얼 타임 TaqMan RT-PCR(7500Fast, Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)로 측정하였다. 사이클 조건은 95℃에서 10분간, 95℃에서 15분간 50 사이클, 및 60℃에서 1분간으로 하였다.
<표 1> 각질형성세포 실험 - Sirt-1 mRNA 상대 발현양
Figure PCTKR2016003116-appb-I000005
<표 2> 섬유아세포 실험 - Sirt-1 mRNA 상대 발현양
Figure PCTKR2016003116-appb-I000006
<표 3> 각질형성세포 실험 - Klotho mRNA 상대 발현양
Figure PCTKR2016003116-appb-I000007
<표 4> 섬유아세포 실험 - Klotho mRNA 상대 발현양
Figure PCTKR2016003116-appb-I000008
<표 5> 각질형성세포 실험 - XPD mRNA 상대 발현양
Figure PCTKR2016003116-appb-I000009
<표 6> 섬유아세포 실험 - XPD mRNA 상대 발현양
Figure PCTKR2016003116-appb-I000010
<표 7> 각질형성세포 실험 - ERCC8 mRNA
Figure PCTKR2016003116-appb-I000011
<표 8> 섬유아세포 실험 - ERCC8 mRNA
Figure PCTKR2016003116-appb-I000012
상기 표에서 보는 바와 같이, 본 명세서에 개시된 코지산 유도체는 장수 유전자로 알려져 있는 Sirt-1, Klotho, XPD 및 ERCC8 유전자의 발현양을 현저하게 증가시키는 것을 알 수 있다. 즉, 상기 코지산 유도체는 Sirt-1, Klotho, XPD 및 ERCC8 유전자를 활성화하여 장수 유전자로 작용하는 이들의 기능을 활성화함을 알 수 있다.
인간의 피부를 구성하는 세포들 중 표피의 대부분을 차지하고 있는 각질형성세포(keratinocyte)는 피부 수분 증발을 억제하는 보습, 외부 유해 인자로부터 피부를 지켜주는 장벽 기능과 관련이 깊다. 본 명세서에 따른 조성물은 코지산 유도체를 유효성분으로 포함함으로써, 피부 수분 증발을 억제하는 보습 및 외부 유해 인자로부터 피부를 지켜주는 장벽 기능을 하는 각질형성세포에서 Sirt-1, Klotho, XPD 및 ERCC8 유전자를 활성화하여 피부 보습 및 피부 장벽 강화에 유용한 피부 개선 효과가 있음을 알 수 있다. 또한, 본 명세서에 개시된 코지산 유도체는 장수 유전자인 Sirt-1, Klotho, XPD 및 ERCC8을 활성화함으로써, 피부 세포, 구체적으로 진피의 대부분을 차지하고 있는 섬유아세포(fibroblast)의 수명 연장 효과가 있음을 알 수 있다. 이러한 효과는 레티놀에 비하여 월등히 우수한 것으로 나타났다.
FoxO3a 유전자의 경우
본 명세서에 개시된 코지산 유도체의 장수 유전자 활성화 효과를 확인하기 위하여 인간 흑색종 세포종(Human MNT1 melanoma cells)을 Lonza로부터 구입하여 코질메칠렌디옥시신나메이트인 seletinoid G가 FoxO3a 유전자 활성화에 미치는 영향을 핵 이행 정도(nuclear translocation rate)로 확인하였다.
구체적으로, seletinoid G를 인간 흑색종 세포종에 15, 150, 450 ppm의 농도로 48시간 동안 처리하고 1/10000로 희석한 DAPI용액으로 30분간 염색한 후 공초점 레이저 주사현미경(Confocal Laser Scanning Microscope, Zeiss)으로 관찰하여 레드 형광과 블루 형광이 핵 안에 겹쳐져 바이올렛 형광으로 관찰되는 정도로 FoxO3a 활성화 정도를 평가하였다.
- 1차 항체: anti-FoxO3a (1:200), 4℃, 오버나이트
- 2차 항체: Alexa Fluor 555-conjugated goat (1:5000), 상온, 1시간
그 결과, 본 명세서에 개시된 코지산 유도체는 장수 유전자로 알려져 있는 FoxO3a 유전자의 발현양을 현저하게 증가시키는 것을 알 수 있었다. 즉, 상기 코지산 유도체는 FoxO3a 유전자를 활성화하여 암 억제제, 장수 유전자로 작용하는 이의 기능을 활성화함을 알 수 있다.
이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.

Claims (11)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 이성질체를 유효성분으로 포함하는 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 유전자 활성화용 조성물.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2016003116-appb-I000013
    (상기 식 중, R1은 -CH2- 또는 -CH2CH2- 이고, R2는 -C(O)OCH2-, -CH=CHC(O)OCH2- 또는 -CH=CH- 이다.)
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 코지산 유도체는 하기 화학식 2로 표시되는 코질메칠렌디옥시신나메이트인, 조성물.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2016003116-appb-I000014
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 코지산 유도체, 이의 염, 이의 프로드럭, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 이성질체는 조성물 총 중량을 기준으로 0.00001 내지 10 중량%로 포함되는, 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 Sirt-1, Klotho, XPD, ERCC8, 및 FoxO3a로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 단백질 발현 증진용인, 조성물.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 항암용인, 조성물.
  6. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 피부암에 대한 항암용인, 조성물.
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 수명 연장용인, 조성물.
  8. 제 7항에 있어서,
    상기 조성물은 피부 세포 수명 연장용인, 조성물.
  9. 제 8항에 있어서,
    상기 피부 세포는 피부 진피 유래 섬유아세포인, 조성물.
  10. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 피부 보습용 또는 피부 장벽 강화용인, 조성물.
  11. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 피부 외용제 조성물인, 조성물.
PCT/KR2016/003116 2015-03-31 2016-03-28 코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자 활성화용 조성물 WO2016159604A2 (ko)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201680024945.4A CN107592810A (zh) 2015-03-31 2016-03-28 含有曲酸衍生物作为活性成分的用于活化长寿基因的组合物
US15/563,119 US10238624B2 (en) 2015-03-31 2016-03-28 Composition for activating longevity genes, containing kojic acid derivative as active ingredient
JP2017551113A JP6799542B2 (ja) 2015-03-31 2016-03-28 コウジ酸誘導体を有効成分として含む長寿遺伝子活性化用組成物

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2015-0045227 2015-03-31
KR1020150045227A KR20160116872A (ko) 2015-03-31 2015-03-31 코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 FoxO3a 유전자 활성화용 조성물
KR10-2015-0045129 2015-03-31
KR1020150045129A KR20160116831A (ko) 2015-03-31 2015-03-31 코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자 활성화용 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2016159604A2 true WO2016159604A2 (ko) 2016-10-06
WO2016159604A3 WO2016159604A3 (ko) 2016-12-08

Family

ID=57005017

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2016/003116 WO2016159604A2 (ko) 2015-03-31 2016-03-28 코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자 활성화용 조성물

Country Status (5)

Country Link
US (1) US10238624B2 (ko)
JP (1) JP6799542B2 (ko)
CN (1) CN107592810A (ko)
TW (1) TW201642851A (ko)
WO (1) WO2016159604A2 (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023182606A1 (ko) * 2022-03-22 2023-09-28 주식회사 클로소사이언스 항노화 유전자 klotho의 발현을 유도하는 신규 화합물
CN115721575A (zh) * 2022-05-10 2023-03-03 株式会社爱茉莉太平洋 缓和皮肤敏感性或者抑制皮脂分泌用组合物

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100482668B1 (ko) * 2002-06-22 2005-04-13 주식회사 태평양 히드록시 피라논 유도체 및 이의 제조방법
KR100483113B1 (ko) 2002-09-17 2005-04-14 주식회사 태평양 코질-벤조산 유도체와 그 제조방법 및, 이를 함유하는화장료 조성물
KR101853718B1 (ko) 2011-09-02 2018-05-03 (주)아모레퍼시픽 코지산 유도체 제조 방법
CN102503908B (zh) * 2011-11-22 2013-09-04 江苏省原子医学研究所 维a酸衍生物、其制备方法、其药物组合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
JP2018510182A (ja) 2018-04-12
JP6799542B2 (ja) 2020-12-16
WO2016159604A3 (ko) 2016-12-08
TW201642851A (zh) 2016-12-16
CN107592810A (zh) 2018-01-16
US10238624B2 (en) 2019-03-26
US20180078522A1 (en) 2018-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2013039350A2 (ko) 세라마이드를 포함하는 피부 외용제 조성물
WO2021033829A1 (ko) 피부 상태 개선 활성을 갖는 펩타이드 및 이의 용도
WO2014129779A1 (ko) 약산성 피부 외용 조성물 및 이를 포함하는 화장료
WO2015002393A1 (ko) 감귤 미성숙과 추출물, 또는 시네프린 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 피부질환 치료 또는 예방용 조성물
WO2019103433A1 (ko) 안정성이 개선된 신규 유사세라마이드 화합물 및 이를 포함하는 조성물
WO2021112398A1 (ko) 비타민 c를 포함하는 조성물
WO2016159604A2 (ko) 코지산 유도체를 유효성분으로 포함하는 장수 유전자 활성화용 조성물
WO2011025107A1 (ko) 피부 가려움증 개선을 위한 조성물
WO2016093515A1 (ko) 장수 유전자 활성화용 조성물
WO2016159580A1 (ko) 티아사포제놀 유도체를 유효성분으로 포함하는 조성물
WO2012173382A2 (ko) 탄시논ⅱａ를 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물
KR20150062443A (ko) 아이오논(ionone) 유도체 화합물
WO2023055007A1 (ko) 항노화 활성을 갖는 펩타이드 및 이의 용도
WO2016085302A1 (ko) 제니스테인 또는 에피갈로카테친 갈레이트를 포함하는 세포 회춘 촉진 유도용 조성물
WO2019143145A1 (ko) 레졸빈 d2를 유효성분으로 함유하는 피부 염증 치료용 조성물
WO2021145699A1 (ko) 콜히친을 포함하는 피부 질환 치료용 조성물
WO2021075929A1 (ko) 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물
WO2012173383A2 (ko) 크립토탄시논을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물
KR101716806B1 (ko) 피부 가려움증의 억제, 개선 또는 완화용 조성물
WO2019088648A1 (ko) 미도드린을 포함하는 조성물 및 이의 용도
WO2019225891A1 (ko) 아이리린 b를 포함하는 피부 항노화 조성물
WO2018151563A1 (ko) 코스모스 추출물을 포함하는 광노화 방지 및 피부주름 개선용 조성물
WO2022014803A1 (ko) 신규한 스핑고지질 및 이를 포함하는 피부외용제 조성물
WO2013070018A1 (ko) 카르노스산 또는 그 유도체를 포함하는 조성물
WO2009082185A1 (ko) 플라티코딘-디를 함유하는 피부미백제

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 16773385

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2017551113

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 15563119

Country of ref document: US

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 16773385

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2