KR20230033662A - 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 (i) 애엽 추출물; 및 (ii) 헤파린나트륨; (iii) 알란토인 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물 및 피부 외용제에 관한 것이다.

Description

애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물 {Compositions for improving skin damage comprising Artemisia princeps leaf extract}
본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물 및 피부 외용제에 관한 것이다.
피부는 외부 환경과 직접적으로 접해 있으면서 다양한 유해 인자로부터 몸을 보호하는 기능을 담당하고 있다. 이러한 피부는 노화, 스트레스, 외상, 외부 오염 물질, 자외선 등 다양한 요인에 의해 손상되며, 이로부터 상처, 피부 주름 생성, 색소 침착, 탄력 저하, 염증반응 등의 현상이 복합적으로 일어나게 된다. 피부 미용에 대한 관심이 날로 높아지면서 이러한 현상을 극복하기 위한 시도들이 행하여지고 있고, 이와 함께 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선, 색소 침착 개선, 염증 개선 등에 관련된 기능성 화장품에 대한 관심과 수요 역시 계속적으로 증가하고 있다.
지금까지의 연구결과에 의하면 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형이 주름의 생성, 탄력 저하 등에 직접적으로 관여하는 것으로 알려져 있다. 또한, 피부의 색을 결정짓는 멜라닌은 과도한 생성 또는 축적으로 인해 기미, 주근깨 등 과색소침착의 원인이 된다는 것은 널리 알려진 사실이다.
한편, 대부분의 알려진 주름 개선, 탄력 개선 또는 색소침착 개선 등의 효과를 가진 물질들은 피부 적용시 자극, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 피부 손상의 전반적인, 실질적인 개선, 예를 들어 상처 흔적 완화, 상처 치유, 염증 완화 등의 효과는 기대하기 어렵다. 이에, 생체에 안전하고 효과가 우수한 새로운 피부 손상 개선용 조성물의 개발이 절실히 요구되고 있다.
Effects of NoscarnaTM on Hypertrophic Scarring in the Rabbit Ear Model: Histopathological Aspects. Archives of Pharmacal Research. 2012. Vol.35, No.11, pp.1999-2006.
본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명은 애엽 추출물을 포함하는 피부 손상 개선용 피부 외용제를 제공한다.
세포에 대한 독성을 나타내지 않는 안전하고 피부 손상 개선 효과가 우수한 조성물을 개발하고자 노력 연구한 결과, 애엽 추출물을 포함하는 조성물이 섬유아세포 세포주의 증식 및 이동을 촉진하고, DOPA 산화반응에 대한 저해 활성을 나타내고, 엘라스타제 저해 활성 및 ROS 억제능을 나타내며, 염증성 사이토카인의 발현을 억제하는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어, "애엽(Artemisia princeps leaf)"은 국화과의 속하는 다년생 초본식물의 잎을 말하며, 주로 지혈작용, 진해거담작용 등의 약리효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. 본 발명에서 애엽은 상업적으로 판매되는 것을 구입하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "추출물"은 상기 애엽을 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
상기 애엽을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서, 상기 애엽을 추출하는데 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 구체적으로, 상기 추출 용매는 물, 에탄올 또는 에탄올수용액일 수 있으며, 보다 구체적으로 50% 에탄올수용액(w/w)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "헤파린"은 D-글루코사민과 D-글루쿠론산이 α-1,4의 교대결합으로 이루어진 물질을 의미하며, 일반적으로 경구나 주사로 투여시 혈액응고를 저해하여 급성관상동맥질환, 심방세동, 심부정맥혈전증 등의 치료에 유용하게 사용된다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염을 포함할 수 있으며, 구체적으로 헤파린 나트륨을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "알란토인"은 포유동물의 요막(allantois)에 존재하는 요산(uric acid)의 산화에 의해 생성되는 물질을 의미하며, 화학식명으로는 (2,5-다이옥소-4-이미다졸리디닐)우레아이고, 하기 화학식 1의 구조를 갖는 물질이다.
[화학식 1]
Figure pat00001
본 발명의 용어, "덱스판테놀"은 비타민 B5, 판토텐산의 알코올 유도체를 의미하며, 산화되어 판토텐산으로 변하는 특성으로 인해 비타민 B5의 프로비타민이라고도 불린다. 하기 화학식 2의 구조를 갖는 물질이다.
[화학식 2]
Figure pat00002
본 발명의 용어, "피부 손상 개선"은 손상된 피부 상태가 전반적으로 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미하며, 구체적으로 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선, (과)색소침착 개선, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 자극 완화(염증 완화) 등을 의미할 수 있으나. 이에 제한되는 것은 아니다. 이는 화상, 흉터, 여드름 등에 의한 착색, 반흔 등을 포함한 손상된 피부의 개선을 포함한다.
상기 용어 "피부 재생"은 노화, 외상, 질환 등에 의해 피부에 유발된 손상 등에 대응하여 피부 조직이 재구성되는 일련의 반응을 의미한다. 본 발명에서는 구체적으로 상처 치유 등을 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어 "상처 흔적 개선/완화"는 손상되었던 피부의 치유 중 또는 치유 후 남는 흔적 및/또는 흉터가 개선/완화되는 일련의 반응을 의미한다. 본 발명에서는 구체적으로 흔적 및/또는 흉터의 색, 흔적 및/또는 흉터 비후 정도, 흔적 및/또는 흉터 소양증 등의 개선/완화를 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어 "피부결 개선"은 피부 사이의 간격이 늘어지고 골이 깊어지거나 피부 표면에 각질이 쌓여 거칠어진 피부가 부드러워지는 일련의 반응 등 피부에 나타날 수 있는 전반적인 상태의 개선을 의미한다. 본 발명에서는 손상된 피부에 나타날 수 있는 전반적인 상태의 개선을 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어 "(과)색소침착 개선"은 어두워진 피부 톤이 밝아지는 일련의 반응을 의미한다. 본 발명에서는 구체적으로 기미나 주근깨 등으로 어두워진 피부 톤이 밝아지는 것을 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어 "피부 주름 개선"은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 일련의 반응을 의미한다.
상기 용어 "피부 탄력 개선"은 피부가 쳐지거나 늘어지는 정도를 완화시키는 일련의 반응을 의미한다.
상기 용어 "피부 자극 완화"는 외부 오염 물질 또는 질환 등에 의해 자극 받은 피부의 증상을 완화시키는 일련의 반응을 의미한다. 본 발명에서는 구체적으로 자극에 의해 발생한 염증, 가려움증, 홍조 등의 완화를 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 포함하는 조성물은 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선, (과)색소침착 개선, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 자극 완화(염증 완화) 등의 용도로서 유용하게 사용될 수 있다.
관련하여 본 발명의 구체적인 일 실시예에서는, 본 발명의 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 포함하는 조성물은 사람 진피에서 1차 배양한 섬유아 세포주의 증식 및 이동을 촉진시키고, DOPA 산화반응에 대한 저해 활성을 나타내고, 엘라스틴을 분해하는 효소인 엘라스타제의 저해 활성 및 ROS 억제능을 나타내며, 염증성 사이토카인 TNF-α의 발현을 억제하는 것을 확인하였다.
본 발명의 조성물은 상기 4 가지 성분을 모두 포함함으로써 각 물질 단독 또는 상기 4 성분 중 2 성분 또는 3 성분을 포함하는 경우와 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물에 애엽 추출물을 혼합함으로써 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀만을 포함하는 조성물 또는 애엽 추출물만을 포함하는 조성물과 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.05 내지 3.0 중량부의 애엽 추출물, 0.5 내지 30 중량부의 알란토인 및 10 내지 250 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명에서, 애엽 추출물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.05 내지 3.0 중량부로 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.075 내지 2.5 중량부, 0.1 내지 2.0 중량부, 0.15 내지 1.5 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 애엽 추출물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.05 내지 0.5 중량부, 구체적으로 0.1 내지 0.3 중량부, 또는 0.8 내지 1.6 중량부, 구체적으로 1.0 내지 1.2 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명에서, 알란토인은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.5 내지 30 중량부로 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.75 내지 25 중량부, 1.0 내지 20 중량부, 2.0 내지 20 중량부, 2.5 내지 19.95 중량부, 3.0 내지 15 중량부, 3.0 내지 5.0 중량부, 3.5 내지 4.5 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 알란토인은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 3 내지 5 중량부, 구체적으로 3 내지 4 중량부 또는 4 내지 5 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 덱스판테놀은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 10 내지 250 중량부로 포함될 수 있으며, 구체적으로 12.5 내지 230 중량부, 15 내지 225 중량부, 17.5 내지 220 중량부, 20 내지 215 중량부, 20.5 내지 210 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 덱스판테놀은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 10 내지 30 중량부, 구체적으로 15 내지 25 중량부, 또는 200 내지 210 중량부, 구체적으로 205 내지 210 중량부 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.1 내지 2.0 중량부의 애엽 추출물, 1.0 내지 20 중량부의 알란토인 및 20 내지 210 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.15 내지 1.5 중량부의 애엽 추출물, 2.5 내지 19.95 중량부의 알란토인 및 20.5 내지 210 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.05 내지 0.5 중량부의 애엽 추출물, 3 내지 5 중량부의 알란토인 및 10 내지 30 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 0.8 내지 1.6 중량부의 애엽 추출물, 3 내지 5 중량부의 알란토인 및 200 내지 210 중량부의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 상기 4 가지 성분을 상기 중량부로 포함함으로써 각 물질 단독 또는 상기 4 성분 중 2 성분 또는 3 성분을 포함하는 경우와 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
구체적으로 본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물에 애엽 추출물을 상기 중량부로 혼합함으로써 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀만을 포함하는 조성물 또는 애엽 추출물만을 포함하는 조성물과 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 조성물은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 (i) 0.01 내지 0.2 g의 애엽 추출물; (ii) 0.01 내지 1.0 g의 헤파린 또는 이의 염; (iii) 0.05 내지 5.0 g의 알란토인; 및 (iv) 5.0 내지 15 g의 덱스판테놀을 포함할 수 있다.
본 발명에서, 애엽 추출물은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 0.01 내지 0.2 g 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.015 내지 0.15 g, 0.02 내지 0.13 g, 0.03 내지 0.12 g, 0.04 내지 0.1 g, 0.045 내지 0.08 g, 0.05 내지 0.07 g 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 헤파린 또는 이의 염은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 0.01 내지 1.0 g 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.02 내지 0.8 g, 0.03 내지 0.5 g, 0.04 내지 0.4 g 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 알란토인은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 0.05 내지 5.0 g 포함될 수 있으며, 구체적으로 0.06 내지 4.5 g, 0.07 내지 4.0 g, 0.08 내지 3.5 g, 0.09 내지 3.0 g, 0.09 내지 2.5 g, 0.1 내지 2.0 g 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 덱스판테놀은 전체 조성물 1000 ml를 기준으로 5.0 내지 15 g 포함될 수 있으며, 구체적으로 5.5 내지 14 g, 6.0 내지 13 g, 6.5 내지 12 g, 7.0 내지 11 g, 7.5 내지 10 g 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 상기 4 가지 성분을 상기 중량으로 포함함으로써 각 물질 단독 또는 상기 4 성분 중 2 성분 또는 3 성분을 포함하는 경우에 비하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
구체적으로 본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물에 애엽 추출물을 상기 중량으로 혼합함으로써 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀만을 포함하는 조성물 또는 애엽 추출물만을 포함하는 조성물과 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 조성물은 애엽 추출물 1 중량부를 기준으로 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물을 50 내지 450 중량부로 포함할 수 있으며, 구체적으로 80 내지 420 중량부, 90 내지 400 중량부, 100 내지 250 중량부, 130 내지 200 중량부, 150 내지 180 중량부로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 상기 4 가지 성분을 상기 중량부로 포함함으로써 각 물질 단독 또는 상기 4 성분 중 2 성분 또는 3 성분을 포함하는 경우와 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
구체적으로 본 발명의 조성물은 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀의 혼합물에 애엽 추출물을 상기 중량부로 혼합함으로써 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀만을 포함하는 조성물 또는 애엽 추출물만을 포함하는 조성물과 비교하여 현저히 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명에서 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린나트륨; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 스킨, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 팩, 폼, 패취, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 또는 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 팩, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유, 글리세롤, 글리세린, 지방족 에스테르, 페녹시에탄올, 트리에탄올아민, 폴리에틸렌 글리콜, 밀납, 폴리솔베이트 60, 솔비탄세스퀴오레이드, 파라핀, 소르비탄 스테아레이트, 친유형 모노스테아린산 글리세린, 스테아린산, 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트, 카르복시폴리머, 시토스테롤, 폴리글리세릴 2-올레이트, 세라마이드, 콜레스테롤, 스테아레스-4, 디세틸포스페이트, 마카다미아 오일, 카르복시비닐폴리머, 잔탄검 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오즈, 소디움히아루로네이트, 페녹시에탄올, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 팩(필오프 팩, 워시오프(wash off) 팩, 또는 마스크 시트 팩)인 경우에는 담체 성분으로서 폴리비닐알코올, 카올린, 탈크, 산화아연, 또는 이산화티탄 등이 이용될 수 있다.
본 발명은 (i) 애엽 추출물; (ii) 헤파린 또는 이의 염; (iii) 알란토인; 및 (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 피부 외용제를 제공한다.
이때, 상기 "애엽", "추출물", "헤파린", "알란토인", "덱스판테놀" 및 "피부 손상 개선" 등의 정의는 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "피부 외용제"는 일반적으로 피부 외용에 사용하는 물질 전반을 포함하는 포괄하는 개념으로, 피부 외용제 제형의 비제한적인 예로는 경고제(plaster), 로션제(lotion), 리니멘트제(liniment), 액제(liquid and solution), 에어로솔제(aerosol), 엑스제(extracts), 연고제(ointment), 유동엑스제(fluid extracts), 유제(emulsion), 현탁제(suspesions), 캅셀제(capsules), 크림제(creams), 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀제 또는 첩부제가 있다.
본 발명에 따른 피부 외용제는 상용되는 무기 또는 유기의 담체, 부형제 및 희석제를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 제제화된 비경구 투여제일 수 있다. 상기 비경구 투여를 위한 제제로는 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 패취, 스프레이, 현탁제 및 유제로 이루어진 군에서 선택되는 경피 투여형 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 외용제에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
각 제형에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기한 본 발명의 조성물 이외의 다른 성분들을 기타 피부 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 이 경우 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승효과가 일어날 수 있다.
본 발명의 피부 외용제에 포함되는 각 성분의 중량, 각 성분간의 중량비, 애엽 추출물과 헤파린 또는 이의 염, 알란토인 및 덱스판테놀 혼합물 간의 중량비 등은 조성물에서와 동일하다.
본 발명의 애엽 추출물을 포함하는 조성물은 사람 진피에서 1차 배양한 섬유아 세포주의 증식 및 이동을 촉진시키고, DOPA 산화반응에 대한 저해 활성을 나타내고, 엘라스틴을 분해하는 효소인 엘라스타제의 저해 활성 및 ROS 억제능을 나타내며, 염증성 사이토카인 TNF-α의 발현을 억제하므로, 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선, (과)색소침착 개선, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 자극 완화(염증 완화) 등에 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
<제조예 1> 애엽 추출물의 제조
애엽 600 g에 50% 에탄올수용액(w/w) 6 kg를 가해 8시간 동안 약 60°C에서 가온하여 추출한 후 여과하였다. 총 여과액 대비 1%(w/w)의 활성탄을 가한 후, 약 1 내지 2시간 동안 교반한 후 여과하였다. 여과액을 감압농축하여 60 g의 건조엑스를 수득하였다.
<제조예 2> 애엽 추출물을 포함하는 조성물의 제조
본원발명의 실시예 1 내지 6 조성물의 함량은 하기 표 1에 나타낸 바와 같다.
[표 1]
Figure pat00003
하기 표 2에 나타낸 바와 같이, 덱스판테놀을 정제수에 녹이고, 애엽 추출물 1 g을 10 L에 녹인 용액(애엽 추출물 용액, 0.01%) 또는 애엽 추출물 2 g을 10 L에 녹인 용액(애엽 추출물 용액, 0.02%)을 가한 후 헤파린나트륨과 알란토인을 녹이고, 정제수 1 L로 정용하여 덱스판테놀, 애엽추출물, 알란토인, 헤파린나트륨의 4가지 성분을 포함하는 조성물을 조제하였다.
[표 2]
Figure pat00004
<실시예 1> 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선 효과 (wound healing assay)
인간 진피 섬유아세포(Human Dermal Fibroblast; HDF) 세포주에서 시료 독성을 평가하여 독성이 없음을 확인하였다.
본원발명 조성물의 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선 효과를 확인하기 위하여, 사람 진피에서 1차 배양한 섬유아 세포주(인간 진피 섬유아세포 세포주)에서 세포이동 증진효과를 현미경(microscopy)으로 관찰하였다. 구체적으로, 사람 진피에서 1차 배양한 섬유아 세포주를 배양접시의 바닥에 접종한 후, 페니실린 50 IU/ml, 스트렙토마이신 50 μg/ml, 및 10% FBS를 함유하는 DMEM배지에 넣고 37°C를 유지하여 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기내에서 배양하였다. 배양한 세포주는 24-웰 플레이트(24-well plates)에 3 x 106 cell/ml로 24시간 동안 배양하고, 배양접시 바닥을 스크래퍼(p200 피펫 팁)로 긁어서 배양접시 바닥에 빈 공간을 만든 후, 시험물질(정제수 또는 각 실시예 조성물)을 처리하여 24시간 및 48시간 후에 시험물질에 의한 세포이동 증진효과를 도립 현미경(inverted microscopy)으로 관찰하였다. 그 결과는 하기 표 3(24시간 후) 및 표 4(48시간 후)에 나타내었다.
[표 3]
Figure pat00005
[표 4]
Figure pat00006
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 세포이동 증진효과를 나타내고, 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
<실시예 2> (과)색소침착 개선 효과 (DOPA oxidation inhibitory assay)
B16F10 마우스 세포주에서 시료 독성을 평가하여 독성이 없음을 확인하였다.
본원발명 조성물의 (과)색소침착 개선 효과를 확인하기 위하여, 멜라닌 합성과정의 속도결정단계에 관여하는 타이로시나제의 DOPA 산화반응에 대한 저해 활성을 관찰하였다. 구체적으로, 시험관에 0.1 M 인산염완충액(PBS, pH 7.0) 850 μl, 시험물질 50 μl, 휴먼 타이로시나제 50 μl를 순서대로 넣어주었다. 이 액에 기질로써 0.06 mM L-DOPA(L-3,4-dihydroxyphenylalanine)액 50 μl를 넣고, 37 °C에서 반응시킨 다음 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료액 대신 시료를 녹인 용매를 공시료액으로 하여 보정하였다. DPOA 산화반응 저해율은 하기 식을 이용하여 계산하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.
Figure pat00007
[표 5]
Figure pat00008
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 DPOA 산화반응 저해 활성을 나타내고, (과)색소침착 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
<실시예 3> 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 효과
인간 진피 섬유아세포(Human Dermal Fibroblast; HDF) 세포주에서 시료 독성을 평가하여 독성이 없음을 확인하였다.
엘라스타제 저해 활성 분석(Elastase inhibition assay)
본원발명 조성물의 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 효과를 확인하기 위하여, 피부 진피를 구성하는 주요 단백질인 엘라스틴의 3차원 구조를 뒤틀어 피부 진피층의 함몰을 유도하는 엘라스타제에 대한 저해 활성을 관찰하였다. 50 mM Tris-HCl(pH 8.6) 수용액에 시험물질을 넣어 준비하였으며, 준비된 수용액을 96-웰 플레이트에 100 μl 분주하였다. 반응의 기질인 N-석시닐-(알라닌)3-p-니트로아닐라이드(N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide)를 50 mM Tris-HCl(pH 8.8) 용액에 2.2 mM 농도가 되도록 하여 앞서 준비된 수용액을 분주했던 96-웰 플레이트에 20 μl을 추가 분주하였다. 반응의 효소인 엘라스타제(Elastase; from porcine pancreas; ≥ 4 units/mg protein)를 0.25 mg/ml로 제조하여 96-웰 플레이트에 30 μl을 추가 분주하였다. 25°C에서 10분간 반응한 후 O.D. 410 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 6에 나타내었다.
[표 6]
Figure pat00009
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 엘라스타제 저해 활성을 나타내고, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
ROS 억제능 분석 (ROS assay)
본원발명 조성물의 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 효과를 확인하기 위하여, 피부 주름, 탄력 저하의 주요 원인 중의 하나인 ROS(reactive oxygen species)의 억제능을 관찰하였다. 구체적으로, 세포주를 배양하여 ROS 분석용 키트에 세포주를 시딩(seeding)하고, 24시간 후 DCFH-DA(2',7'-dichlorofluorescein diacetate) 50 uM로 30분간 반응하였다. 시험물질을 처리하고 24시간 동안 반응시킨 후 형광반응을 흡광도로 측정. ROS 억제능은 하기 식을 이용하여 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 7에 나타내었다.
Figure pat00010
[표 7]
Figure pat00011
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 ROS 억제능을 나타내고, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
<실시예 4> 항염증 효과
RAW 264.7 murine macrophage 세포주에서 시료 독성을 평가하여 독성이 없음을 확인하였다.
본원발명 조성물의 항염증 효과를 확인하기 위하여, 염증성 사이토카인 TNF-α의 발현 억제 활성을 관찰하였다. 시험물질을 넣어 수용액을 준비하였으며, 준비된 수용액을 96-웰 플레이트에 50 μl 분주하였다. 수용액을 분주했던 96-웰 플레이트에 항체 50 μl을 추가 분주하였다. P플레이트는 교반기를 이용하여 400 rpm으로 교반하며, 1시간 동안 실온에서 배양하였다. 배양한 플레이트는 세척 버퍼(buffer) 350 μl을 이용하여 실온에서 3회 세척하였다. TMB development solution 100 μl을 96-웰 플레이트에 분주한 후 어두운 상태로 교반기를 이용하여 400 rpm으로 교반하며 10분간 반응시켰다. 반응 플레이트의 각 웰에 stop solution 100 μl를 분주하고 교반기로 1분간 교반한 후, O.D. 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 8에 나타내었다.
[표 8]
Figure pat00012
상기 결과로부터, 본 발명의 조성물이 우수한 TNF-α 발현 억제 활성을 나타내고, 피부 자극 완화(염증 완화) 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. 또한, 본 발명의 조성물이 손상된 피부 상태를 개선할 수 있음을 알 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시예일뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (11)

  1. (i) 애엽 추출물;
    (ii) 헤파린 또는 이의 염;
    (iii) 알란토인; 및
    (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 헤파린 또는 이의 염은 헤파린 나트륨인 것인, 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 피부 손상 개선은 피부 재생(상처 치유), 상처 흔적 개선/완화, 피부결 개선, (과)색소침착 개선, 피부 주름 개선, 피부 탄력 개선 및 피부 자극 완화(염증 완화)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것인, 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 (ii) 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 (i) 애엽 추출물 0.05 내지 3.0 중량부, (iii) 알란토인 0.5 내지 30 중량부, (iv) 덱스판테놀 10 내지 250 중량부를 포함하는 것인, 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 (ii) 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 (i) 애엽 추출물 0.15 내지 1.5 중량부, (iii) 알란토인 2.5 내지 19.95 중량부, (iv) 덱스판테놀 20.5 내지 210 중량부를 포함하는 것인, 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 스킨, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 팩, 폼, 패취, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형인 것인, 화장료 조성물.
  7. (i) 애엽 추출물;
    (ii) 헤파린 또는 이의 염;
    (iii) 알란토인; 및
    (iv) 덱스판테놀을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 개선용 피부 외용제.
  8. 제7항에 있어서, 상기 헤파린 또는 이의 염은 헤파린 나트륨인 것인, 피부 외용제.
  9. 제7항에 있어서, 상기 피부 외용제는 (ii) 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 (i) 애엽 추출물 0.05 내지 3.0 중량부, (iii) 알란토인 0.5 내지 30 중량부, (iv) 덱스판테놀 10 내지 250 중량부를 포함하는 것인, 피부 외용제.
  10. 제7항에 있어서, 상기 피부 외용제는 (ii) 헤파린 또는 이의 염 1 중량부를 기준으로 (i) 애엽 추출물 0.15 내지 1.5 중량부, (iii) 알란토인 2.5 내지 19.95 중량부, (iv) 덱스판테놀 20.5 내지 210 중량부를 포함하는 것인, 피부 외용제.
  11. 제7항에 있어서, 상기 피부 외용제는 경고제(plaster), 로션제(lotion), 리니멘트제(liniment), 액제(liquid and solution), 에어로솔제(aerosol), 엑스제(extracts), 연고제(ointment), 유동엑스제(fluid extracts), 유제(emulsion), 현탁제(suspesions), 캅셀제(capsules), 크림제(creams), 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀제 및 첩부제로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형인 것인, 피부 외용제.
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