WO2019139403A1 - 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물 - Google Patents

세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물 Download PDF

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skin
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wound healing
mistletoe
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Definitions

  • the present invention relates to a composition for skin regeneration, sedation or wound healing, which comprises sericin, caspian extract and mistletoe extract.
  • the present invention relates to a skin regenerating, soothing or wound healing cosmetic composition comprising sericin, caspase extract and mistletoe extract Composition; Skin external agent; Quasi-drug composition; And a health functional food composition.
  • Skin is in direct contact with the external environment and is responsible for protecting our body from various harmful factors.
  • skin is damaged by age increases, ultraviolet rays, external contaminants, stress, trauma, etc.
  • Skin regeneration is a process of tissue regeneration that takes place through complex biological processes including cell proliferation, differentiation and replication, synthesis of matrix proteins, angiogenesis and reorganization of the wound.
  • an inflammatory reaction when the skin is damaged, an inflammatory reaction first occurs. Inflammation reactions are initiated by macrophages activated by predation of bacteria entering the wound, and reactive ntrogen species (RNS) such as NO, NO 2 , HNO 2 , and ONOO - do.
  • RNS reactive ntrogen species
  • excessive inflammatory reaction causes excessive production of active nitrogen species to cause skin necrosis, nodules, cysts, etc. Therefore, it is necessary to control the inflammatory reaction for proper treatment.
  • fibroblasts actively proliferate, and the proliferated cells migrate to the damaged skin to fill the defect, or to accumulate matrix proteins such as collagen and elastin, thereby giving skin elasticity, moisturizing, and flexibility. Therefore, for skin regeneration, wound healing, and skin irritation mitigation, it is important to appropriately control the inflammatory response and to reconstitute the skin by promoting proliferation and migration of fibroblasts.
  • a cosmetic composition for moisturizing, wrinkle-improving, whitening, anti-allergy or skin-soothing which contains a hippocampus extract showing an effect of promoting collagen production and the like
  • a cosmetic composition (Korean Patent Registration No. 10-1762750) including an essential oil extracted from a flower of Mugunghwa, which exhibits an effect of promoting the proliferation and migration of the skin, is disclosed.
  • the present inventors have made intensive efforts to develop a substance that regenerates or calms the skin and further exhibits a wound healing effect.
  • a mixture of sericin, caspase extract and mistletoe extract showed proliferation and migration of keratinocyte / fibroblast Promoting the expression of genes constituting the skin matrix, and further demonstrating excellent anti-inflammatory effects, thus completing the present invention.
  • One object of the present invention is to provide a cosmetic composition for skin regeneration, sedation or wound healing, which comprises sericin, caspian extract and mistletoe extract.
  • Another object of the present invention is to provide an external preparation for skin regeneration, sedation or wound healing, which comprises sericin, casualty extract and mistletoe extract.
  • the sericin, caspian extract and mistletoe extract of the present invention promotes proliferation and migration of keratinocytes, promotes the expression of elastin, a protein constituting the matrix of the skin, and exhibits anti-inflammatory activity inhibiting the production of NO Therefore, it can be useful for regeneration, sedation and wound healing of the skin.
  • Figure 1 is a graph showing the cell proliferation promoting effect of a mixture of sericin, caspase extract and mistletoe extract. * Means p ⁇ 0.05, ** means p ⁇ 0.01.
  • FIG. 2 is a graph (A) showing the cell migration promoting effect of a mixture of sericin, Casuarina extract and mistletoe extract; And image (B). * Means p ⁇ 0.05, ** means p ⁇ 0.01.
  • FIG. 3 is a graph showing the effect of promoting the expression of elastin (elastin) in the skin of a mixture of sericin, caspase extract and mistletoe extract. * Means p ⁇ 0.05.
  • FIG. 4 is a graph showing the effect of reducing NO (nitric oxide) production in a mixture of sericin, caspase extract and mistletoe extract. * Means p ⁇ 0.05.
  • One aspect of the present invention provides a cosmetic composition for skin regeneration, sedation, or wound healing, which comprises sericin, casualty extract and mistletoe extract.
  • the sericin, caspase extract and mistletoe extract of the present invention promote the proliferation and migration of keratinocytes, promote expression of an elastin gene constituting the skin matrix, and exert an anti-inflammatory effect that inhibits the production of NO, , Good skin regeneration, sedation or wound healing effects.
  • the term "sericin” of the present invention is a protein produced in silkworm, and exhibits properties similar to gelatin. It dissolves in hot water and gels when cooled. It has high solubility in water and low molecular weight, so it is easy to use as an extract.
  • casualty (Erect hedge parsley) of the present invention means a biannual herbaceous plant belonging to the genus Torilis japonica . It is used as a herbal medicine in one room, and is known to be effective for chronic eczema, pruritus of the vulva, and eczema of the scrotum.
  • mistletoe of the present invention means a parasitic shrub of mistletoe with the scientific name of Viscum album . Stems and leaves are used as herbal medicines in one medicine, and they are known to be used for toothache, back pain, bronchitis and arteriosclerosis.
  • casual sperm extract "and" mistletoe extract in the present invention means the above-mentioned casualties and extracts extracted from mistletoe.
  • extract refers to an extract obtained by extracting the casualties or mistletoe, a diluted solution or concentrate of the extract, a dried product obtained by drying the extract, a controlled preparation or purified product of the extracted solution, , The extract itself and extracts of all the formulations that can be formed using the extract.
  • the method for extracting the casualty or mistletoe is not particularly limited and may be carried out according to a method commonly used in the art.
  • Non-limiting examples of the extraction method include hydrothermal extraction, ultrasonic extraction, filtration, and reflux extraction. These may be performed alone or in combination with two or more methods.
  • the kind of the extraction solvent used for extracting the casualties or mistletoe is not particularly limited, and any solvent known in the art can be used.
  • Nonlimiting examples of the extraction solvent include water, alcohols having 1 to 4 carbon atoms, and mixed solvents thereof. These solvents may be used alone or in combination.
  • skin regeneration of the present invention means a series of reactions in which skin tissue is reconstituted in response to general skin aging and skin-induced damage, and is mainly performed by proliferation and migration of skin cells such as keratinocytes .
  • skin regenerates skin elasticity improvement and wrinkle improvement effect may occur.
  • the damage may be caused by ultraviolet rays, external pollutants, wound, trauma, burn, stress, and the like, but is not limited thereto.
  • wound refers to a state in which a living body is damaged, and is also referred to as a wound. Such damage may be caused by external causes such as ultraviolet rays, external contaminants, wounds, trauma, burns, or internal causes such as stress.
  • wound healing refers to recovery of a wound as described above.
  • the wound healing process is divided into acute phase, recovery phase and scarring phase.
  • the acute phase is also referred to as the exudate, accompanied by an inflammatory reaction and a blood clotting reaction.
  • the restorer is also called a proliferative cell, and cell proliferation and migration actively take place, and collagen and elastin, which are kind of connective tissues, are actively synthesized and the epidermal tissue is regenerated.
  • the scarring stage slows the proliferation of active cells and increases the physical strength of the damaged area as the proteins forming the connective tissue are cross-linked. As a result, tissues other than the surrounding normal tissues are placed in the damaged area. By repeating the above steps, the wound is healed.
  • the cause of skin regeneration or wound healing is not limited, but may be specifically achieved by proliferation, migration, or promotion of elastin gene expression of keratinocytes.
  • the skin may have reduced water loss and / or reduced redness, but the present invention is not limited thereto.
  • the cause of skin sedation is not limited, but may be accomplished through anti-inflammatory activity.
  • the anti-inflammatory activity of the composition of the present invention may improve skin irritation and calm the skin.
  • a mixture of sericin, caspase extract and mistletoe extract promotes the proliferation and migration of keratinocytes (Figs. 1 and 2) compared to each single substance, and the gene expression of elastin, (FIG. 3), indicating anti-inflammatory effects inhibiting NO synthesis by LPS (FIG. 4).
  • composition of the present invention comprising the sericin, casualty extract and mistletoe extract can be usefully used as skin regeneration, wound healing or skin soothing.
  • the cosmetic composition of the present invention may contain 0.0001 to 80% by weight, specifically 0.0005 to 70% by weight, more specifically 0.001 to 60% by weight, based on the total weight of the composition, of sericin, caspase extract and mistletoe extract. If the content is less than 0.0001% by weight, the desired activity can not be sufficiently attained, which is not preferable. If the content exceeds 80% by weight, an increase in the effect is not expected to increase markedly, It can cause problems.
  • the cosmetic composition according to the present invention can be used as a cosmetic composition in the form of a solution, an external ointment, a cream, a foam, a nutritional lotion, a softening longevity pack, a pack, a soft water, an emulsion, a makeup base, an essence, But may be formulated into a formulation selected from the group consisting of emulsions, pastes, gels, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations, patches and sprays, It does not.
  • the cosmetic composition of the present invention may further comprise at least one cosmetically acceptable carrier to be incorporated in a general skin cosmetic composition, and examples thereof include oil, water, a surfactant, a moisturizer, A thickener, a chelating agent, a coloring matter, an antiseptic, a flavoring, and the like may be appropriately compounded, but the present invention is not limited thereto.
  • the cosmetically acceptable carrier to be contained in the cosmetic composition of the present invention varies depending on the formulations.
  • the carrier component may be an animal oil, a vegetable oil, a wax, a paraffin, a starch, a tracer, a cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, zinc oxide Mixtures of these may be used.
  • lactose When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder or a mixture thereof may be used as the carrier component, Propellants such as fluorohydrocarbons, propane / butane or dimethyl ether.
  • a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, 1,3-butyl glycol oil may be used, in particular fatty acid esters of cottonseed oil, peanut oil, corn oil, olive oil, castor oil and sesame oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycols or sorbitan may be used have.
  • the formulation of the present invention is a suspension
  • a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspension such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Crystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.
  • the formulation of the present invention is a soap, an alkali metal salt of a fatty acid, a fatty acid hemiester salt, a fatty acid protein hydrolizate, isethionate, a lanolin derivative, an aliphatic alcohol, a vegetable oil, glycerol, .
  • the formulation of the present invention is a pack (a peel off pack, a wash off pack, or a mask sheet pack), polyvinyl alcohol, kaolin, talc, zinc oxide, titanium dioxide or the like may be used as the carrier component .
  • Another aspect of the present invention provides an external skin preparation for skin regeneration, sedation, or wound healing, which comprises a mixture of sericin, casualty extract and mistletoe extract.
  • external preparation for skin is a generic concept including the entirety of materials used for external skin application.
  • Non-limiting examples of the external preparation for skin include a plaster, lotion, such as liniment, liquid and solution, aerosol, extracts, ointment, fluid extracts, emulsions, suspensions, capsules, ), Creams, soft, hard gelatin capsules, patches, or sustained release agents.
  • the external preparation for skin may be a parenteral dosage form which is formulated in solid, semi-solid or liquid form by adding a compatible inorganic or organic carrier, excipient and diluent.
  • the preparation for parenteral administration may be a transdermal dosage form selected from the group consisting of drops, ointments, lotions, gels, creams, patches, sprays, suspensions, and emulsions.
  • Examples of the carrier, excipient and diluent which can be contained in the external preparation include lactose, dextrose, sucrose, oligosaccharide, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, Cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.
  • components other than the composition of the present invention may be mixed and selected without difficulty by those skilled in the art depending on the formulation or use purpose of other external preparation for skin, etc. In this case, A synergistic effect can occur.
  • the external preparation for skin of the present invention may also be used as a pharmaceutical composition.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may further comprise a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent conventionally used in the production of a pharmaceutical composition, which carrier comprises a non-naturally occuring carrier .
  • compositions may be formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral preparations, suppositories and sterilized injection solutions according to conventional methods.
  • compositions or the composition are free of toxicity to cells or humans exposed to the composition.
  • the type of the carrier is not particularly limited, and any carrier conventionally used in the art and pharmaceutically acceptable may be used.
  • the carrier include, but are not limited to, saline, sterilized water, Ringer's solution, buffered saline, albumin injection solution, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol and ethanol. These may be used alone or in combination of two or more.
  • other conventional additives such as an antioxidant, a buffer and / or a bacteriostatic agent can be added and used.
  • the content of sericin, caspase extract and mistletoe extract contained in the pharmaceutical composition is not particularly limited, but may be 0.01 to 100% by weight, specifically 1 to 80% by weight based on the total weight of the pharmaceutical composition.
  • Another aspect of the present invention provides a skin regeneration, sedation or wound healing method comprising the step of administering the pharmaceutical composition to an individual in need thereof.
  • the term "individual" of the present invention refers to all animals including humans who need skin regeneration, sedation or wound healing.
  • administering means introducing the desired substance into the subject in a suitable manner.
  • the composition of the present invention may be administered via any conventional route by which an in vivo target can be reached.
  • the route of administration of the composition of the present application is not particularly limited, but may be oral or parenteral administration. Specifically, it can be administered parenterally, and more specifically, it can be applied to the skin (i.e., transdermal administration).
  • the skin regeneration, sedation or wound healing method of the present invention may comprise the step of administering the pharmaceutical composition to a subject in a pharmaceutically effective amount.
  • pharmaceutically effective amount means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment and not causing side effects, Including, but not limited to, age, weight, health status, type of disease, severity, activity of the drug, sensitivity to the drug, method of administration, time of administration, route of administration and rate of release, And can be readily determined by those skilled in the art according to factors well known in the art.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, and can be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents. In addition, they can be administered singly or multiply. It is important to take into account all of the above factors and to administer an amount that can achieve the maximum effect in a minimal amount without causing side effects, which can be readily determined by one skilled in the art.
  • Another embodiment of the present invention provides a quasi-skin composition for skin regeneration, sedation or wound healing, comprising sericin, casualty extract and mistletoe extract.
  • quasi-drug product of the present invention means products that are less active than drugs, among the products used for diagnosis, treatment, improvement, alleviation, treatment or prevention of diseases of human or animal.
  • quasi-drugs according to the Pharmaceutical Affairs Law include products used for the treatment and prevention of diseases of humans and animals, products which are mild to the human body or which do not act directly on the human body.
  • the composition may be added as it is, or may be used together with other quasi-drugs or quasi-drugs, and may be suitably used according to a conventional method.
  • the amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to the intended use (prevention, health or therapeutic treatment).
  • the quasi-drug composition may be prepared and used in the form of an ointment, a lotion, a spray, a patch, a cream, a powder, a suspension, a gel or a gel, though not particularly limited thereto.
  • Another embodiment of the present invention provides a health functional food composition for skin regeneration, sedation or wound healing, comprising a mixture of sericin, casualty extract and mistletoe extract.
  • the term "functional food" of the present invention is the same term as " food for special health use (FoSHU) " Means high food.
  • the health functional food is mixed with a health food or a health supplement.
  • the health functional food composition of the present invention can be taken on a daily basis, a high skin regeneration, sedation or wound healing effect can be expected and can be very useful for health promotion purposes.
  • the content of sericin, caspian extract and mistletoe extract contained in the health functional food composition is not particularly limited, but is 0.01 to 100% by weight, specifically 1 to 80% by weight based on the total weight of the health functional food composition .
  • the health functional food may be formulated to be selected from the group consisting of pills, powders, granules, infusions, tablets, capsules and beverages in order to obtain a useful effect on skin regeneration, sedation or wound healing.
  • the kind of the health functional food and examples thereof include various drinks, gum, tea, vitamin complex, health supplement foods, and the like.
  • the health functional food composition may contain other ingredients that do not interfere with the preventive or improving effect of the health functional food, and the kind thereof is not particularly limited.
  • various herbal medicine extracts, food-acceptable food-aid additives or natural carbohydrates, such as ordinary foods, may be added as an additional ingredient.
  • the health functional food composition may further include ingredients that can be used in a foodstuff acceptable carrier or a food composition to improve odor, taste, and visual appearance, and may be appropriately selected and used by those skilled in the art have.
  • Another embodiment of the present invention provides the use of a composition comprising sericin, caspase extract and mistletoe extract for skin regeneration, sedation or wound healing.
  • Another aspect of the present invention provides the use of a composition comprising sericin, caspase extract and mistletoe extract for the manufacture of cosmetic, food, medicine or medicament for skin regeneration, sedation or wound healing.
  • composition comprising sericin, caspase extract and mistletoe extract and uses thereof are as described above.
  • sericin was obtained in the following manner. First, the cut silkworm cocoons were used as raw materials. Water (H 2 O) was added at 7 to 8 times the weight of the raw material, and the temperature was raised by steam. The mixture was extracted at 95 ° C. for 6 hours to obtain a sericin crude extract. Then, the crude extract was filtered with a 20 ⁇ filter, and the proteolytic enzyme was added to the filtrate, followed by reaction at 55 ⁇ for 24 hours and heating at 95 ⁇ for 30 minutes to inactivate the enzyme reaction. After filtration through a 10 ⁇ filter, the filtrate was concentrated and pulverized using a spray drier.
  • the mistletoe extract was obtained by the following method. After washing and drying the mistletoe, 400 g of butylene glycol and 550 g of water were added to 50 g of mistletoe and extracted with an ultrasonic extractor at 50 ° C for 72 hours. Then, it was aged for 24 hours, filtered with a 0.5 mu m filter, and filtered with a 0.3 mu m filter to obtain each extract.
  • the casualty extract was obtained by the following method. 1 kg of dried casualties were quantified and washed, and then 49 kg of distilled water was added thereto, followed by extraction at 60 ° C for 2 hours. The extracted liquid phase was aged at room temperature for 48 hours and filtered with a filter press. The filtered extract was sterilized by using a sterilization filter, and a caspase extract was prepared by adding preservative.
  • Example 1 Confirmation of cell proliferation promoting effect of sericin, casualty extract and mistletoe extract mixture
  • HaCat a human keratinocyte cell
  • DMEM High glucose
  • FBS fetal bovine serum
  • gentamicin 1% gentamicin
  • 0.001%, v / v caspase-extract alone
  • mistletoe extract alone 0.001%
  • the MTT solution was treated at a concentration of 100 ⁇ g / mL and reacted for 1 hour at 37 ° C. in a 5% CO 2 incubator.
  • 100 ⁇ l of acid-isopropanol was added to each well and 570 Absorbance was measured with an ELISA reader at.
  • the cell proliferative potency was increased by about 1.3 to 1.5 times or more in the case of treating the mixture of sericin, caspase extract and mistletoe extract alone.
  • the caspase extract and the mistletoe extract alone do not have cell proliferating ability, they can exert excellent synergistic effects when they are mixed with sericin.
  • HaCat cells were divided into a 96-well plate at a density of 1 ⁇ 10 3 cells / well and replaced with DMEM medium supplemented with 5% FBS for 24 hours. Sericin alone (0.0005%, 0.002%, v / v) , Killer extract alone (0.002%, 0.01%, v / v), mistletoe extract alone (0.0005%, 0.005%, v / v), or mixtures thereof. After 48 hours, the wound was applied with a yellow tip. After 24 hours, the degree of wound closure was photographed and the area was measured through the image J (image J) program.
  • NHDF a normal human dermal fibroblast
  • FGM-2 Bullet kit medium 37 ° C and 5% CO 2 .
  • NHDF cells were then divided into 6 well plates at a density of 1 ⁇ 10 5 cells / well. Sericin alone (0.002%, 0.005%, v / v), caspase extract alone (0.005%, v / v) (0.002%, 0.01%, v / v), or a mixture thereof was treated in each well. Twenty-four hours later, the cells were dissolved in Trizol, and the total RNA was extracted. The total RNA was extracted, and the expression level of elastin gene was confirmed by qPCR after conversion to cDNA.
  • the primers used were: Elastin (F: 5'-TCG CAA CAC GTA ACG CAA T-3 ', SEQ ID NO: 1; R: 5'-ACT TCT CTT TTT CCA CCC CAT TT- 2), gapdh (F: 5'-CCT CAA GAT CAT CAG CAA T-3 ', SEQ ID NO: 3; R: 5'-CCA TCC ACA GTC TTC TGG GT-3', SEQ ID NO: 4).
  • mouse murine macrophage Raw264.7 was cultured in DMEM (High glucose) medium supplemented with 10% FBS and 1% gentamycin at 37 ° C and 5% CO 2 .
  • Raw 264.7 cells were then seeded into 12 well plates at a density of 5 ⁇ 10 5 cells / well.
  • the cell culture was collected and centrifuged, and then 100 ⁇ l of the cell culture solution and 100 ⁇ l of the Griess reagent were reacted for 10 minutes, and the absorbance was measured with an ELISA reader at 540 nm.
  • the amount of NO synthesis by the LPS of the cells is about 1.3 to 1.5 times or more Respectively.

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Abstract

본 발명은 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 피부 재생용, 상처 치유용 또는 피부 진정용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물; 피부 외용제; 의약외품 조성물; 및 건강기능식품 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부의 기질을 구성하는 단백질인 엘라스틴의 발현을 촉진하며, NO의 생성을 억제하는 항염 활성을 나타내므로, 피부의 재생, 진정 및 상처 치유에 유용하게 활용될 수 있다.

Description

세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물
본 발명은 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물; 피부 외용제; 의약외품 조성물; 및 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
피부는 외부 환경과 직접 접해 있으면서 다양한 유해 인자로부터 우리 몸을 보호하는 기능을 담당하고 있다. 그러나 피부는 연령의 증가, 자외선, 외부 오염 물질, 스트레스, 외상 등에 의해 손상되며, 이 경우 손상된 피부는 재생 과정을 시작한다. 피부 재생은 조직회복의 과정으로써 세포의 증식, 분화 및 복제, 기질 단백질(matrix protein)의 합성, 혈관의 신생 및 창상의 재구성 등을 포함하는 복잡한 생물학적 과정을 거져 이루어진다.
구체적으로, 피부가 손상되면 먼저 염증반응이 일어난다. 염증반응은 상처를 통해 들어온 박테리아를 포식하여 활성화된 대식세포에 의해 시작되며, NO, NO2, HNO2, ONOO-와 같은 활성질소종(reactive ntrogen species, RNS)이 이물질을 공격하기 위해 다량 생성된다. 그러나, 과도한 염증반응은 상기의 활성질소종을 과다하게 생성하여 피부괴사, 결절, 낭종 등을 야기하므로 적절한 치료를 위해서는 염증반응을 조절할 필요가 있다.
이후, 세포의 증식 및 이동 과정이 진행되는데, 이는 피부가 손상된 후 2일부터 3주까지 지속된다. 이 시기에 섬유아세포는 활발히 증식되며, 증식된 세포는 손상된 피부로 이동하여 흠을 채우거나, 콜라겐, 엘라스틴 등의 기질 단백질을 축적시켜 피부의 탄력, 보습, 유연성 등을 부여한다. 따라서, 피부 재생, 상처 치유, 피부의 자극 완화를 위해서는 염증반응을 적절히 제어하고, 섬유아세포의 증식 및 이동을 촉진하여 피부를 재구성하는 것이 중요하다.
이와 관련하여, 피부의 재생, 진정 또는 상처 치유를 위한 다양한 물질의 개발이 이루어지고 있다. 구체적으로, 콜라겐 생성을 촉진하는 효과 등을 나타내는 해마추출물을 유효성분으로 함유하는 보습, 주름 개선, 미백, 항알러지 또는 피부진정용 화장료 조성물(한국 등록특허공보 제10-1788537호), 각질형성세포의 증식, 이동을 촉진하는 효과 등을 나타내는 무궁화의 꽃으로부터 추출된 정유를 포함하는 피부 재생용 외용제 및 화장료 조성물(한국 등록특허공보 제10-1762750호) 등이 공지되었다.
본 발명자들은 피부를 재생 또는 진정시키고, 나아가 상처 치유 효과를 나타내는 물질을 개발하고자 예의노력 연구한 결과, 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 각질형성세포/섬유아세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부 기질을 구성하는 유전자의 발현을 촉진하며, 나아가 우수한 항염증 효과를 나타냄을 확인하여, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 피부 외용제를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부의 기질을 구성하는 단백질인 엘라스틴의 발현을 촉진하며, NO의 생성을 억제하는 항염 활성을 나타내므로, 피부의 재생, 진정 및 상처 치유에 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 증식 촉진 효과를 보여주는 그래프이다. *는 p<0.05, **는 p<0.01를 의미한다.
도 2는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 이동 촉진 효과를 보여주는 그래프(A); 및 이미지(B)이다. *는 p<0.05, **는 p<0.01를 의미한다.
도 3은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 기질 유전자(elastin; 엘라스틴)의 발현 촉진 효과를 보여주는 그래프이다. *는 p<0.05를 의미한다.
도 4는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 NO(Nitric Oxide) 생성 감소 효과를 보여주는 그래프이다. *는 p<0.05를 의미한다.
본 발명의 하나의 양태는 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부 기질을 구성하는 엘라스틴(elastin) 유전자의 발현을 촉진하며, NO의 생성을 억제하는 항염증 효과가 우수하므로, 우수한 피부 재생, 진정 또는 상처 치유 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 용어, "세리신(sericin)"은 누에에서 만들어지는 단백질로서, 젤라틴과 유사한 특성을 나타낸다. 뜨거운 물에 녹고 식으면 겔화하며, 물에 대한 용해성이 높고 분자량이 낮아서 추출물로 이용하기 쉽다.
본 발명의 용어, "사상자"(Erect hedge parsley)는 Torilis japonica의 학명을 갖는 산형과에 속하는 2년생 초본식물을 의미한다. 한방에서 약재로 이용되며, 만성습진이나 외음부의 소양증, 음낭습진에 효과가 있다고 알려져 있다.
본 발명의 용어, "겨우살이"(mistletoe)는 Viscum album의 학명을 갖는 겨우살이과의 기생관목을 의미한다. 줄기와 잎은 한방에서 약재로 이용되며, 치통, 요통, 동상, 동맥경화 등에 사용한다고 알려져 있다.
또한, 본 발명의 용어, "사상자 추출물" 및 "겨우살이 추출물"은 상기의 사상자 및 겨우살이로부터 추출한 추출물을 의미한다.
구체적으로, 상기 용어, "추출물"은 상기 사상자 또는 겨우살이를 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
상기 사상자 또는 겨우살이를 추출하는 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
또한, 상기 사상자 또는 겨우살이를 추출하는데 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있다.
본 발명의 용어, "피부 재생"은 전반적인 피부 노화 및 피부에 유발된 손상 등에 대응하여 피부 조직이 재구성되는 일련의 반응을 의미하며, 주로 각질형성세포 등의 피부 세포의 증식 및 이동에 의해 수행된다. 피부가 재생됨에 따라 피부 탄력 증진, 주름 개선 효과가 나타날 수 있다. 한편, 상기 손상은 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상, 화상, 스트레스 등에 의한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "상처"는 생체가 손상된 상태로서, 창상이라고도 한다. 상기 손상은 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상, 화상 등의 외부 원인, 또는 스트레스 등의 내부 원인에 의해 야기될 수 있다.
또한, 본 발명의 용어, "상처 치유"는 상술한 바와 같은 상처를 회복하는 것을 말한다. 상처 치유 과정은 급성기, 수복기 및 반흔화 단계로 구분된다. 급성기는 삼출기라고도 하며, 염증반응 및 혈액응고 반응이 수반된다. 수복기는 증식기라고도 하며, 세포의 증식 및 이동이 활발히 이루어지며, 결합조직의 일종인 콜라겐, 엘라스틴 등이 단백질이 활발히 합성되어 표피조직이 재생된다. 반흔화 단계는 활발한 세포의 증식은 느려지고, 결합조직을 구성하는 단백질이 가교되면서 손상 부위의 물리적 강도가 증대되는 단계로서 주위의 정상 조직과는 다른 조직이 손상 부위에 자리잡게 된다. 상기와 같은 단계를 반복함으로써 상처가 치유되게 된다.
본 발명에서, 상기 피부 재생 또는 상처 치유의 원인은 제한이 없으나, 구체적으로 각질형성세포의 증식, 이동 또는 엘라스틴(elastin) 유전자의 발현 촉진에 의해 달성되는 것일 수 있다.
본 발명의 용어, "피부 진정"은 홍반 또는 자극 받은 피부 부위 등을 완화시키고 가라앉히는 것을 의미하며, 피부 자극 완화를 포함하는 개념일 수 있다. 예를 들어, 피부의 수분 손실 감소 및/또는 붉은기 감소를 들 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 피부 진정의 원인은 제한이 없으나, 구체적으로 항염 활성을 통해 달성되는 것일 수 있으며, 본 발명의 조성물의 항염 활성에 의해 피부 염증이 개선되어 피부가 진정될 수 있다.
본 발명의 구체적인 일 실시예에서는, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 각각의 단독 물질에 비하여 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진시키고(도 1 및 2), 피부 기질 단백질인 엘라스틴의 유전자 발현을 촉진시키며(도 3), LPS에 의한 NO 합성을 억제하는 항염증 효과를 나타냄을 확인하였다(도 4).
이는, 상기 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 본 발명의 조성물이 피부 재생, 상처 치유 또는 피부 진정 용도로서 유용하게 사용될 수 있음을 시사하는 것이다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 조성물 총 중량 대비 0.0001 내지 80 중량%, 구체적으로 0.0005 내지 70 중량%, 더욱 구체적으로 0.001 내지 60 중량% 포함할 수 있다. 상기 함량이 0.0001 중량% 미만이면 본래 목적하는 활성을 충분하게 달성할 수 없어 바람직하지 못하며, 80 중량%를 초과하면 증가하는 함량만큼 뚜렷한 효과의 증대가 기대되지 않아 비경제적이며, 화장료 조성물의 안전성에 문제를 발생시킬 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선스크린-크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 팩(필오프 팩, 워시오프(wash off) 팩, 또는 마스크 시트 팩)인 경우에는 담체 성분으로서 폴리비닐알코올, 카올린, 탈크, 산화아연, 또는 이산화티탄 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 다른 하나의 양태는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 피부 외용제 제공한다.
이때, 상기 "세리신", "사상자 추출물", "겨우살이 추출물", "피부 재생", "상처 치유", "피부 진정"에 대한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "피부 외용제"는 일반적으로 피부 외용에 사용하는 물질 전반을 포함하는 포괄하는 개념으로, 피부 외용제 제형의 비제한적인 예로는 경고제(plaster), 로션제(lotion), 리니멘트제(liniment), 액제(liquid and solution), 에어로솔제(aerosol), 엑스제(extracts), 연고제(ointment), 유동엑스제(fluid extracts), 유제(emulsion), 현탁제(suspesions), 캅셀제(capsules), 크림제(creams), 연질, 경질 젤라틴 캅셀, 첩부제, 또는 서방화제제가 있다.
본 발명에 따른 피부 외용제는 상용되는 무기 또는 유기의 담체, 부형제 및 희석제를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 제제화된 비경구 투여제일 수 있다. 상기 비경구 투여를 위한 제재로는 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 패취, 스프레이, 현탁제 및 유제로 이루어진 군에서 선택되는 경피 투여형 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 외용제에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
각 제형에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기한 본 발명의 조성물 이외의 다른 성분들을 기타 피부 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 이 경우 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승효과가 일어날 수 있다.
또한, 본 발명의 피부 외용제는 약학 조성물로도 사용할 수 있다.
*본 발명의 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있고, 상기 담체는 비자연적 담체(non-naturally occuring carrier)를 포함할 수 있다.
상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 "약학적으로 허용가능한"은 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다.
구체적으로, 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되고 약학적으로 허용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다. 또한, 필요한 경우 항산화제, 완충액 및/또는 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가하여 사용할 수 있으며, 희석제, 분산제, 계면 활성제, 결합제, 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제 등으로 제제화하여 사용할 수 있다.
이때, 상기 약학 조성물에 포함되는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 약학 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%, 구체적으로 1 내지 80 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 상기 약학 조성물을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유 방법을 제공한다.
이때, 상기 "세리신", "사상자 추출물", "겨우살이 추출물", "피부 재생", "상처 치유", "피부 진정"에 대한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "개체"는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유가 필요한 인간을 포함하는 모든 동물을 의미한다.
본 발명의 용어, "투여"는 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미한다. 본 발명의 조성물이 생체 내 표적에 도달할 수 있는 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 본 출원의 조성물의 투여 경로는 특별히 제한되지 않으나, 경구 또는 비경구 투여할 수 있다. 구체적으로는 비경구 투여할 수 있으며, 보다 구체적으로 피부에 도포하는 방식(즉, 경피투여)으로 적용될 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 피부 재생, 진정 또는 상처 치유 방법은 개체에 상기 약학 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 개별 치료제로 투여되거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 또한, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용을 유발하지 않으면서 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 의약외품 조성물을 제공한다.
이때, 상기 "세리신", "사상자 추출물", "겨우살이 추출물", "피부 재생", "상처 치유", "피부 진정"에 대한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미한다. 예를 들어, 약사법에 따른 의약외품은 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람/동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.
본 발명에 따른 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
상기 의약외품 조성물은 특별히 이에 제한되지 않으나, 구체적으로 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
이때, 상기 "세리신", "사상자 추출물", "겨우살이 추출물", "피부 재생", "상처 치유", "피부 진정"에 대한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "건강기능식품"(functional food)은 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)과 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 본 발명에서, 상기 건강기능식품은 건강식품 또는 건강보조식품과 혼용된다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 높은 피부 재생, 진정 또는 상처 치유 효과를 기대할 수 있으며, 건강 증진 목적으로 매우 유용하게 사용될 수 있다.
이때, 상기 건강기능식품 조성물에 포함되는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 건강기능식품 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%, 구체적으로 1 내지 80 중량%로 포함될 수 있다.
상기 건강기능식품은 피부 재생, 진정 또는 상처 치유에 유용한 효과를 얻기 위하여 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 및 음료 형태로 이루어지는 군에서 선택되는 것으로 제형화된 것으로 제조될 수 있다. 또한, 상기 건강기능식품의 종류에는 별다른 제한이 없으며, 예를 들어 각종 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 될 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물에는 건강기능식품의 예방 또는 개선 효과에 방해가 되지 않는 다른 성분을 추가할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품 조성물은 식품학적으로 허용가능한 담체, 또는 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 성분을 추가로 포함할 수 있으며, 이는 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유를 위한, 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 조성물의 용도를 제공한다. 본 발명의 또 다른 하나의 양태는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장품, 식품, 의약품 또는 약제를 제조하기 위한, 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.
상기 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 조성물 및 이의 용도에 대해서는 전술한 바와 같다.
이하 본 발명을 하기 예에 의해 상세히 설명한다. 다만, 하기 예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 하기 예에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
제조예 1. 세리신( sericin ), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 수득 방법
먼저, 세리신은 다음과 같은 방법으로 수득하였다. 먼저, 절단된 누에고치를 원료로 사용하였다. 정량한 원료 무게에 대하여 7~8배의 물(H2O)을 넣고 스팀으로 온도를 올려 95℃에서 6시간 동안 추출하여 세리신 조추출물을 얻었다. 이후, 상기 조추출물을 20 ㎛ 필터로 여과하고, 상기 여과액에 단백질 분해효소를 넣고 55℃에서 24시간 동안 반응시켰으며, 효소반응을 불활성화시키기 위해 95℃에서 30분 동안 가열하였다. 이후, 10 ㎛ 필터로 여과한 후 여과액을 농축하고 분무 건조기를 이용하여 분말화하였다.
한편, 겨우살이 추출물은 다음과 같은 방법으로 수득하였다. 겨우살이를 세척 및 건조한 후, 겨우살이 50g에 부틸렌 글리콜(Butylene Glycol) 400g과 물 550g을 넣고 50℃에서 72시간 동안 초음파 추출기를 이용하여 추출하였다. 이후, 24시간 동안 숙성하였고, 0.5 ㎛ 필터로 여과하고, 0.3 ㎛ 필터로 여과하여 각 추출물을 수득하였다.
또한, 사상자 추출물은 다음과 같은 방법으로 수득하였다. 건조된 사상자 1kg을 정량하고 세척한 후, 증류수 49kg를 넣고 60℃에서 2시간 동안 추출하였다. 추출된 액상을 실온에서 48시간 동안 숙성 시킨 후, 압력 여과기(Filter press)로 여과하였다. 여과된 추출액을 제균 필터를 사용하여 제균 처리하였으며, 방부원료를 첨가하여 사상자 추출물을 제조하였다.
실시예 1. 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 증식 촉진 효과 확인
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 대한 효과를 확인하기 위하여, 상기 혼합물의 세포 증식 촉진 효과를 MTT 어세이(MTT assay)를 통해 확인하였다.
구체적으로, 인간 각질형성세포(Human keratinocyte cell)인 HaCat를 10% FBS와 1% 젠타마이신(gentamicine)이 첨가된 DMEM(High glucose)배지에서 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 이후, HaCat 세포를 96웰 플레이트에 5×103 세포/웰의 수로 분주하였고, 세리신 단독(0.001%, v/v), 사상자 추출물 단독(0.002%, v/v), 겨우살이 추출물 단독(0.001%, 0.002%, 0.005%, 0.01%, v/v), 또는 이들의 혼합물을 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 이후, MTT 용액을 100 ㎍/mL 농도로 처리하였고, 37℃, 5% CO2 배양기에서 1시간 동안 반응시킨 후 배양액을 모두 제거하고 각 웰에 산성-이소프로판올(acid-isopropanol) 100 ㎕씩 넣어 570 nm에서 ELISA 리더기로 흡광도를 측정하였다.
시료(%) 세포증식능(%)
세리신 사상자추출물 겨우살이추출물
0 0 0 100
0.01 0 0 121.96
0 0.002 0 96.4
0 0 0.001 97.27
0 0 0.002 102.34
0 0 0.005 112.53
0 0 0.01 110.15
0.01 0.002 0.001 142.79
0.01 0.002 0.002 159.00
0.01 0.002 0.005 153.37
0.01 0.002 0.01 148.19
그 결과, 상기 표 1 및 도 1에서 볼 수 있듯이, 세리신, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물 단독을 처리하는 것에 비하여, 이들의 혼합물을 처리하는 경우 세포 증식능이 약 1.3 내지 1.5배 이상 증가하는 것을 확인하였다. 특히, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 그 단독으로는 세포 증식능을 갖지 않음에도 불구하고, 세리신과 혼합하여 사용하는 경우에 우수한 시너지 효과를 발휘할 수 있음을 알 수 있었다.
상기 결과를 통해, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 이들 단독에 비하여 세포 증식 촉진 활성이 현저히 월등하므로, 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 우수한 효과를 낼 것임을 알 수 있었다.
아울러, 겨우살이 추출물의 다양한 농도에서도 모두 우수한 세포 증식능을 갖는 것을 확인하였으며, 농도를 달리하여도 시너지 효과가 나타남을 알 수 있었다.
실시예 2. 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 이동 촉진 효과 확인
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 대한 효과를 확인하기 위하여, 상기 혼합물의 세포 이동 촉진 효과를 상처 치유 어세이(Wound healing assay)를 통해 확인하였다.
구체적으로, HaCat 세포를 96웰 플레이트에 1×103 세포/웰의 수로 분주하였고, 24시간 후 5% FBS가 첨가된 DMEM 배지로 교체한 후 세리신 단독(0.0005%, 0.002%, v/v), 사상자 추출물 단독(0.002%, 0.01%, v/v), 겨우살이 추출물 단독(0.0005%, 0.005%, v/v), 또는 이들의 혼합물을 각 웰에 처리하였다. 48시간 후 옐로우 팁(yellow tip)을 이용하여 상처를 주었고, 24시간 후 상처가 닫힌 정도를 사진을 찍어 이미지 J(image J) 프로그램을 통해 면적을 측정하였다.
시료(%) 세포이동성(%)
세리신 사상자추출물 겨우살이추출물
0 0 0 53.68
0.0005 0 0 57.61
0.002 0 0 61.45
0 0.002 0 57.00
0 0.01 0 55.48
0 0 0.0005 54.34
0 0 0.005 75.12
0.0005 0.002 0.0005 96.15
0.002 0.01 0.0005 97.20
0.002 0.01 0.005 98.80
그 결과, 상기 표 2 및 도 2에서 볼 수 있듯이, 세리신, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물 단독을 처리하는 것에 비하여, 이들의 혼합물을 처리하는 경우 세포 이동능이 약 1.3 내지 1.8배 이상 증가하는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통해, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 이들 단독에 비하여 세포 이동 촉진 활성이 현저히 월등하므로, 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 우수한 효과를 낼 것임을 알 수 있었다.
아울러, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물의 다양한 농도에서도 모두 우수한 세포 이동능을 갖는 것을 확인하였으며, 농도를 달리하여도 시너지 효과가 나타남을 알 수 있었다.
실시예 3. 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 기질 유전자의 발현 촉진 효과 확인
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 대한 효과를 확인하기 위하여, 상기 혼합물의 피부 기질 유전자인 엘라스틴(elastin)의 발현 촉진 효과를 RT-PCR을 통해 확인하였다.
구체적으로, 인간 피부 섬유아세포(normal human dermal fibroblast)인 NHDF를 는 FGM-2 블릿 키트(Bullet kit) 배지에서 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 이후, NHDF 세포를 6웰 플레이트에 1×105 세포/웰의 수로 분주하였고, 세리신 단독(0.002%, 0.005%, v/v), 사상자 추출물 단독(0.005%, v/v), 겨우살이 추출물 단독(0.002%, 0.01%, v/v), 또는 이들의 혼합물을 각 웰에 처리하였다. 24시간 후 트리졸(Trizol)을 이용하여 세포를 녹인 후 토탈 RNA를 추출하였으며, 이를 cDNA로 변환한 후 qPCR을 통해 엘라스틴(elastin) 유전자의 발현양을 확인하였다. 이때, 사용한 프라이머는 다음과 같다: 엘라스틴(F: 5'-TCG CAA CAC GTA ACG CAA T-3', 서열번호 1; R: 5'-ACT TCT CTT TTT CCA CCC CAT TT-3', 서열번호 2), gapdh(F: 5'-CCT CAA GAT CAT CAG CAA T-3', 서열번호 3; R: 5'-CCA TCC ACA GTC TTC TGG GT-3', 서열번호 4).
시료(%) Elastin/gapdh
세리신 사상자추출물 겨우살이추출물
0 0 0 1
0.002 0 0 1.215
0 0.005 0 0.76
0 0 0.002 0.88
0 0 0.01 1.07
0.002 0.005 0.002 1.51
0.005 0.005 0.01 1.58
그 결과, 상기 표 3 및 도 3에서 볼 수 있듯이, 세리신, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물 단독을 처리하는 것에 비하여, 이들의 혼합물을 처리하는 경우 세포의 엘라스틴 발현양이 약 1.3 내지 2배 이상 증가하는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통해, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 이들 단독에 비하여 세포의 엘라스틴 유전자 발현 촉진 활성이 현저히 월등하므로, 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 우수한 효과를 낼 것임을 알 수 있었다.
아울러, 세리신 또는 겨우살이 추출물의 다양한 농도에서도 모두 우수한 엘라스틴 발현 촉진 효과를 갖는 것을 확인하였으며, 농도를 달리하여도 시너지 효과가 나타남을 알 수 있었다.
실시예 4. 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 항염증 효과 확인
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 대한 효과를 확인하기 위하여, 상기 혼합물의 항염증 효과를 NO(Nitric Oxide) 합성 정도를 통해 확인하였다.
구체적으로, 마우스 대식세포(murine macrophage)인 Raw264.7을 10% FBS와 1% 젠타마이신이 첨가된 DMEM(High glucose)배지에서 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 이후, Raw264.7 세포를 12웰 플레이트에 5×105 세포/웰의 수로 분주하였고, LPS 1 ㎍/mL과 세리신 단독(0.002%, v/v), 사상자 추출물 단독(0.001%, 0.002%, v/v), 겨우살이 추출물 단독(0.0005%, 0.001%, v/v), 또는 이들의 혼합물을 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 이후, 세포 배양액을 모아 원심분리한 후 세포 배양액 100 ㎕와 그리스(Griess) 시약 100 ㎕을 10분간 반응시켰으며, 540 nm에서 ELISA 리더기로 흡광도를 측정하였다.
시료(%) NO합성(%)
세리신 사상자 추출물 겨우살이추출물
0 0 0 100
0.002 0 0 96.06
0 0.001 0 101.63
0 0.002 0 96.39
0 0 0.0005 109.49
0 0 0.001 110.49
0.002 0.001 0.0005 81.31
0.002 0.001 0.001 72.78
0.002 0.002 0.001 79.67
그 결과, 상기 표 4 및 도 4에서 볼 수 있듯이, 세리신, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물 단독을 처리하는 것에 비하여, 이들의 혼합물을 처리하는 경우 세포의 LPS에 의한 NO 합성양이 약 1.3 내지 1.5배 이상 감소하는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통해, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 이들 단독에 비하여 대식세포의 NO 생성양이 현저히 감소하므로, 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 우수한 효과를 낼 것임을 알 수 있었다.
아울러, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물의 다양한 농도에서도 모두 우수한 항염증 효과를 갖는 것을 확인하였으며, 농도를 달리하여도 시너지 효과가 나타남을 알 수 있었다.
이상의 설명으로부터, 본 출원이 속하는 기술분야의 당업자는 본 출원이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 출원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 출원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (10)

  1. 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 피부 재생 또는 상처 치유는 각질형성세포의 증식, 이동 또는 엘라스틴(elastin) 유전자의 발현 촉진에 의해 달성되는 것인, 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 피부 진정은 항염 활성을 통해 달성되는 것인, 화장료 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 항염은 대식세포의 NO(Nitric oxide) 합성 억제에 의해 달성되는 것인, 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
  6. 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 피부 외용제.
  7. 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 의약외품 조성물.
  8. 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 건강기능식품 조성물.
  9. 피부 재생, 진정 또는 상처 치유를 위한, 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 조성물의 용도.
  10. 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장품을 제조하기 위한, 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 조성물의 용도.
PCT/KR2019/000454 2018-01-11 2019-01-11 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물 WO2019139403A1 (ko)

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