KR20190085748A - 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물 - Google Patents
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 피부 재생용, 상처 치유용 또는 피부 진정용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물; 피부 외용제; 의약외품 조성물; 및 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부의 기질을 구성하는 단백질인 엘라스틴의 발현을 촉진하며, NO의 생성을 억제하는 항염 활성을 나타내므로, 피부의 재생, 진정 및 상처 치유에 유용하게 활용될 수 있다.
본 발명의 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부의 기질을 구성하는 단백질인 엘라스틴의 발현을 촉진하며, NO의 생성을 억제하는 항염 활성을 나타내므로, 피부의 재생, 진정 및 상처 치유에 유용하게 활용될 수 있다.
Description
본 발명은 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물; 피부 외용제; 의약외품 조성물; 및 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
피부는 외부 환경과 직접 접해 있으면서 다양한 유해 인자로부터 우리 몸을 보호하는 기능을 담당하고 있다. 그러나 피부는 연령의 증가, 자외선, 외부 오염 물질, 스트레스, 외상 등에 의해 손상되며, 이 경우 손상된 피부는 재생 과정을 시작한다. 피부 재생은 조직회복의 과정으로써 세포의 증식, 분화 및 복제, 기질 단백질(matrix protein)의 합성, 혈관의 신생 및 창상의 재구성 등을 포함하는 복잡한 생물학적 과정을 거져 이루어진다.
구체적으로, 피부가 손상되면 먼저 염증반응이 일어난다. 염증반응은 상처를 통해 들어온 박테리아를 포식하여 활성화된 대식세포에 의해 시작되며, NO, NO2, HNO2, ONOO-와 같은 활성질소종(reactive ntrogen species, RNS)이 이물질을 공격하기 위해 다량 생성된다. 그러나, 과도한 염증반응은 상기의 활성질소종을 과다하게 생성하여 피부괴사, 결절, 낭종 등을 야기하므로 적절한 치료를 위해서는 염증반응을 조절할 필요가 있다.
이후, 세포의 증식 및 이동 과정이 진행되는데, 이는 피부가 손상된 후 2일부터 3주까지 지속된다. 이 시기에 섬유아세포는 활발히 증식되며, 증식된 세포는 손상된 피부로 이동하여 흠을 채우거나, 콜라겐, 엘라스틴 등의 기질 단백질을 축적시켜 피부의 탄력, 보습, 유연성 등을 부여한다. 따라서, 피부 재생, 상처 치유, 피부의 자극 완화를 위해서는 염증반응을 적절히 제어하고, 섬유아세포의 증식 및 이동을 촉진하여 피부를 재구성하는 것이 중요하다.
이와 관련하여, 피부의 재생, 진정 또는 상처 치유를 위한 다양한 물질의 개발이 이루어지고 있다. 구체적으로, 콜라겐 생성을 촉진하는 효과 등을 나타내는 해마추출물을 유효성분으로 함유하는 보습, 주름 개선, 미백, 항알러지 또는 피부진정용 화장료 조성물(한국 등록특허공보 제10-1788537호), 각질형성세포의 증식, 이동을 촉진하는 효과 등을 나타내는 무궁화의 꽃으로부터 추출된 정유를 포함하는 피부 재생용 외용제 및 화장료 조성물(한국 등록특허공보 제10-1762750호) 등이 공지되었다.
이러한 배경하에, 본 발명자들은 피부를 재생 또는 진정시키고, 나아가 상처 치유 효과를 나타내는 물질을 개발하고자 예의노력 연구한 결과, 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 각질형성세포/섬유아세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부 기질을 구성하는 유전자의 발현을 촉진하며, 나아가 우수한 항염증 효과를 나타냄을 확인하여, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 피부 외용제를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 하나의 양태는 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부 기질을 구성하는 엘라스틴(elastin) 유전자의 발현을 촉진하며, NO의 생성을 억제하는 항염증 효과가 우수하므로, 우수한 피부 재생, 진정 또는 상처 치유 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 용어, "세리신(sericin)"은 누에에서 만들어지는 단백질로서, 젤라틴과 유사한 특성을 나타낸다. 뜨거운 물에 녹고 식으면 겔화하며, 물에 대한 용해성이 높고 분자량이 낮아서 추출물로 이용하기 쉽다.
본 발명의 용어, "사상자"(Erect hedge parsley)는 Torilis japonica의 학명을 갖는 산형과에 속하는 2년생 초본식물을 의미한다. 한방에서 약재로 이용되며, 만성습진이나 외음부의 소양증, 음낭습진에 효과가 있다고 알려져 있다.
본 발명의 용어, "겨우살이"(mistletoe)는 Viscum album의 학명을 갖는 겨우살이과의 기생관목을 의미한다. 줄기와 잎은 한방에서 약재로 이용되며, 치통, 요통, 동상, 동맥경화 등에 사용한다고 알려져 있다.
또한, 본 발명의 용어, "사상자 추출물" 및 "겨우살이 추출물"은 상기의 사상자 및 겨우살이로부터 추출한 추출물을 의미한다.
구체적으로, 상기 용어, "추출물"은 상기 사상자 또는 겨우살이를 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
상기 사상자 또는 겨우살이를 추출하는 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
또한, 상기 사상자 또는 겨우살이를 추출하는데 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있다.
본 발명의 용어, "피부 재생"은 전반적인 피부 노화 및 피부에 유발된 손상 등에 대응하여 피부 조직이 재구성되는 일련의 반응을 의미하며, 주로 각질형성세포 등의 피부 세포의 증식 및 이동에 의해 수행된다. 피부가 재생됨에 따라 피부 탄력 증진, 주름 개선 효과가 나타날 수 있다. 한편, 상기 손상은 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상, 화상, 스트레스 등에 의한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "상처"는 생체가 손상된 상태로서, 창상(創傷)이라고도 한다. 상기 손상은 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상, 화상 등의 외부 원인, 또는 스트레스 등의 내부 원인에 의해 야기될 수 있다.
또한, 본 발명의 용어, "상처 치유"는 상술한 바와 같은 상처를 회복하는 것을 말한다. 상처 치유 과정은 급성기, 수복기 및 반흔화 단계로 구분된다. 급성기는 삼출기라고도 하며, 염증반응 및 혈액응고 반응이 수반된다. 수복기는 증식기라고도 하며, 세포의 증식 및 이동이 활발히 이루어지며, 결합조직의 일종인 콜라겐, 엘라스틴 등이 단백질이 활발히 합성되어 표피조직이 재생된다. 반흔화 단계는 활발한 세포의 증식은 느려지고, 결합조직을 구성하는 단백질이 가교되면서 손상 부위의 물리적 강도가 증대되는 단계로서 주위의 정상 조직과는 다른 조직이 손상 부위에 자리잡게 된다. 상기와 같은 단계를 반복함으로써 상처가 치유되게 된다.
본 발명에서, 상기 피부 재생 또는 상처 치유의 원인은 제한이 없으나, 구체적으로 각질형성세포의 증식, 이동 또는 엘라스틴(elastin) 유전자의 발현 촉진에 의해 달성되는 것일 수 있다.
본 발명의 용어, "피부 진정"은 홍반 또는 자극 받은 피부 부위 등을 완화시키고 가라앉히는 것을 의미하며, 피부 자극 완화를 포함하는 개념일 수 있다. 예를 들어, 피부의 수분 손실 감소 및/또는 붉은기 감소를 들 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 피부 진정의 원인은 제한이 없으나, 구체적으로 항염 활성을 통해 달성되는 것일 수 있으며, 본 발명의 조성물의 항염 활성에 의해 피부 염증이 개선되어 피부가 진정될 수 있다.
본 발명의 구체적인 일 실시예에서는, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 각각의 단독 물질에 비하여 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진시키고(도 1 및 2), 피부 기질 단백질인 엘라스틴의 유전자 발현을 촉진시키며(도 3), LPS에 의한 NO 합성을 억제하는 항염증 효과를 나타냄을 확인하였다(도 4).
이는, 상기 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는 본 발명의 조성물이 피부 재생, 상처 치유 또는 피부 진정 용도로서 유용하게 사용될 수 있음을 시사하는 것이다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 조성물 총 중량 대비 0.0001 내지 80 중량%, 구체적으로 0.0005 내지 70 중량%, 더욱 구체적으로 0.001 내지 60 중량% 포함할 수 있다. 상기 함량이 0.0001 중량% 미만이면 본래 목적하는 활성을 충분하게 달성할 수 없어 바람직하지 못하며, 80 중량%를 초과하면 증가하는 함량만큼 뚜렷한 효과의 증대가 기대되지 않아 비경제적이며, 화장료 조성물의 안전성에 문제를 발생시킬 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선스크린-크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 팩(필오프 팩, 워시오프(wash off) 팩, 또는 마스크 시트 팩)인 경우에는 담체 성분으로서 폴리비닐알코올, 카올린, 탈크, 산화아연, 또는 이산화티탄 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 다른 하나의 양태는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 피부 외용제 제공한다.
이때, 상기 "세리신", "사상자 추출물", "겨우살이 추출물", "피부 재생", "상처 치유", "피부 진정"에 대한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "피부 외용제"는 일반적으로 피부 외용에 사용하는 물질 전반을 포함하는 포괄하는 개념으로, 피부 외용제 제형의 비제한적인 예로는 경고제(plaster), 로션제(lotion), 리니멘트제(liniment), 액제(liquid and solution), 에어로솔제(aerosol), 엑스제(extracts), 연고제(ointment), 유동엑스제(fluid extracts), 유제(emulsion), 현탁제(suspesions), 캅셀제(capsules), 크림제(creams), 연질, 경질 젤라틴 캅셀, 첩부제, 또는 서방화제제가 있다.
본 발명에 따른 피부 외용제는 상용되는 무기 또는 유기의 담체, 부형제 및 희석제를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 제제화된 비경구 투여제일 수 있다. 상기 비경구 투여를 위한 제재로는 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 패취, 스프레이, 현탁제 및 유제로 이루어진 군에서 선택되는 경피 투여형 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 외용제에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
각 제형에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기한 본 발명의 조성물 이외의 다른 성분들을 기타 피부 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 이 경우 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승효과가 일어날 수 있다.
또한, 본 발명의 피부 외용제는 약학 조성물로도 사용할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있고, 상기 담체는 비자연적 담체(non-naturally occuring carrier)를 포함할 수 있다.
상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 "약학적으로 허용가능한"은 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다.
구체적으로, 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되고 약학적으로 허용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다. 또한, 필요한 경우 항산화제, 완충액 및/또는 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가하여 사용할 수 있으며, 희석제, 분산제, 계면 활성제, 결합제, 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제 등으로 제제화하여 사용할 수 있다.
이때, 상기 약학 조성물에 포함되는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 약학 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%, 구체적으로 1 내지 80 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 상기 약학 조성물을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유 방법을 제공한다.
이때, 상기 "세리신", "사상자 추출물", "겨우살이 추출물", "피부 재생", "상처 치유", "피부 진정"에 대한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "개체"는 피부 재생, 진정 또는 상처 치유가 필요한 인간을 포함하는 모든 동물을 의미한다.
본 발명의 용어, "투여"는 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미한다. 본 발명의 조성물이 생체 내 표적에 도달할 수 있는 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 본 출원의 조성물의 투여 경로는 특별히 제한되지 않으나, 경구 또는 비경구 투여할 수 있다. 구체적으로는 비경구 투여할 수 있으며, 보다 구체적으로 피부에 도포하는 방식(즉, 경피투여)으로 적용될 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 피부 재생, 진정 또는 상처 치유 방법은 개체에 상기 약학 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 개별 치료제로 투여되거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 또한, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용을 유발하지 않으면서 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 의약외품 조성물을 제공한다.
이때, 상기 "세리신", "사상자 추출물", "겨우살이 추출물", "피부 재생", "상처 치유", "피부 진정"에 대한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미한다. 예를 들어, 약사법에 따른 의약외품은 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람/동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.
본 발명에 따른 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
상기 의약외품 조성물은 특별히 이에 제한되지 않으나, 구체적으로 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
이때, 상기 "세리신", "사상자 추출물", "겨우살이 추출물", "피부 재생", "상처 치유", "피부 진정"에 대한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "건강기능식품"(functional food)은 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)과 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 본 발명에서, 상기 건강기능식품은 건강식품 또는 건강보조식품과 호용된다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 높은 피부 재생, 진정 또는 상처 치유 효과를 기대할 수 있으며, 건강 증진 목적으로 매우 유용하게 사용될 수 있다.
이때, 상기 건강기능식품 조성물에 포함되는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 건강기능식품 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%, 구체적으로 1 내지 80 중량%로 포함될 수 있다.
상기 건강기능식품은 피부 재생, 진정 또는 상처 치유에 유용한 효과를 얻기 위하여 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 및 음료 형태로 이루어지는 군에서 선택되는 것으로 제형화된 것으로 제조될 수 있다. 또한, 상기 건강기능식품의 종류에는 별다른 제한이 없으며, 예를 들어 각종 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 될 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물에는 건강기능식품의 예방 또는 개선 효과에 방해가 되지 않는 다른 성분을 추가할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품 조성물은 식품학적으로 허용가능한 담체, 또는 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 성분을 추가로 포함할 수 있으며, 이는 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다.
본 발명의 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 각질형성세포의 증식 및 이동을 촉진하고, 피부의 기질을 구성하는 단백질인 엘라스틴의 발현을 촉진하며, NO의 생성을 억제하는 항염 활성을 나타내므로, 피부의 재생, 진정 및 상처 치유에 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 증식 촉진 효과를 보여주는 그래프이다. *는 p<0.05, **는 p<0.01를 의미한다.
도 2는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 이동 촉진 효과를 보여주는 그래프(A); 및 이미지(B)이다. *는 p<0.05, **는 p<0.01를 의미한다.
도 3은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 기질 유전자(elastin; 엘라스틴)의 발현 촉진 효과를 보여주는 그래프이다. *는 p<0.05를 의미한다.
도 4는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 NO(Nitric Oxide) 생성 감소 효과를 보여주는 그래프이다. *는 p<0.05를 의미한다.
도 2는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 이동 촉진 효과를 보여주는 그래프(A); 및 이미지(B)이다. *는 p<0.05, **는 p<0.01를 의미한다.
도 3은 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 기질 유전자(elastin; 엘라스틴)의 발현 촉진 효과를 보여주는 그래프이다. *는 p<0.05를 의미한다.
도 4는 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 NO(Nitric Oxide) 생성 감소 효과를 보여주는 그래프이다. *는 p<0.05를 의미한다.
이하 본 발명을 하기 예에 의해 상세히 설명한다. 다만, 하기 예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 하기 예에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
제조예 1. 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 수득 방법
먼저, 세리신은 다음과 같은 방법으로 수득하였다. 먼저, 절단된 누에고치를 원료로 사용하였다. 정량한 원료 무게에 대하여 7~8배의 물(H2O)을 넣고 스팀으로 온도를 올려 95℃에서 6시간 동안 추출하여 세리신 조추출물을 얻었다. 이후, 상기 조추출물을 20 ㎛ 필터로 여과하고, 상기 여과액에 단백질 분해효소를 넣고 55℃에서 24시간 동안 반응시켰으며, 효소반응을 불활성화시키기 위해 95℃에서 30분 동안 가열하였다. 이후, 10 ㎛ 필터로 여과한 후 여과액을 농축하고 분무 건조기를 이용하여 분말화하였다.
한편, 겨우살이 추출물은 다음과 같은 방법으로 수득하였다. 겨우살이를 세척 및 건조한 후, 겨우살이 50g에 부틸렌 글리콜(Butylene Glycol) 400g과 물 550g을 넣고 50℃에서 72시간 동안 초음파 추출기를 이용하여 추출하였다. 이후, 24시간 동안 숙성하였고, 0.5 ㎛ 필터로 여과하고, 0.3 ㎛ 필터로 여과하여 각 추출물을 수득하였다.
또한, 사상자 추출물은 다음과 같은 방법으로 수득하였다. 건조된 사상자 1kg을 정량하고 세척한 후, 증류수 49kg를 넣고 60℃에서 2시간 동안 추출하였다. 추출된 액상을 실온에서 48시간 동안 숙성 시킨 후, 압력 여과기(Filter press)로 여과하였다. 여과된 추출액을 제균 필터를 사용하여 제균 처리하였으며, 방부원료를 첨가하여 사상자 추출물을 제조하였다.
실시예 1. 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 증식 촉진 효과 확인
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 대한 효과를 확인하기 위하여, 상기 혼합물의 세포 증식 촉진 효과를 MTT 어세이(MTT assay)를 통해 확인하였다.
구체적으로, 인간 각질형성세포(Human keratinocyte cell)인 HaCat를 10% FBS와 1% 젠타마이신(gentamicine)이 첨가된 DMEM(High glucose)배지에서 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 이후, HaCat 세포를 96웰 플레이트에 5×103 세포/웰의 수로 분주하였고, 세리신 단독(0.001%, v/v), 사상자 추출물 단독(0.002%, v/v), 겨우살이 추출물 단독(0.001%, 0.002%, 0.005%, 0.01%, v/v), 또는 이들의 혼합물을 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 이후, MTT 용액을 100 ㎍/mL 농도로 처리하였고, 37℃, 5% CO2 배양기에서 1시간 동안 반응시킨 후 배양액을 모두 제거하고 각 웰에 산성-이소프로판올(acid-isopropanol) 100 ㎕씩 넣어 570 nm에서 ELISA 리더기로 흡광도를 측정하였다.
시료(%) | 세포증식능 (%) |
||
세리신 | 사상자 추출물 |
겨우살이 추출물 |
|
0 | 0 | 0 | 100 |
0.01 | 0 | 0 | 121.96 |
0 | 0.002 | 0 | 96.4 |
0 | 0 | 0.001 | 97.27 |
0 | 0 | 0.002 | 102.34 |
0 | 0 | 0.005 | 112.53 |
0 | 0 | 0.01 | 110.15 |
0.01 | 0.002 | 0.001 | 142.79 |
0.01 | 0.002 | 0.002 | 159.00 |
0.01 | 0.002 | 0.005 | 153.37 |
0.01 | 0.002 | 0.01 | 148.19 |
그 결과, 상기 표 1 및 도 1에서 볼 수 있듯이, 세리신, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물 단독을 처리하는 것에 비하여, 이들의 혼합물을 처리하는 경우 세포 증식능이 약 1.3 내지 1.5배 이상 증가하는 것을 확인하였다. 특히, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물은 그 단독으로는 세포 증식능을 갖지 않음에도 불구하고, 세리신과 혼합하여 사용하는 경우에 우수한 시너지 효과를 발휘할 수 있음을 알 수 있었다.
상기 결과를 통해, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 이들 단독에 비하여 세포 증식 촉진 활성이 현저히 월등하므로, 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 우수한 효과를 낼 것임을 알 수 있었다.
아울러, 겨우살이 추출물의 다양한 농도에서도 모두 우수한 세포 증식능을 갖는 것을 확인하였으며, 농도를 달리하여도 시너지 효과가 나타남을 알 수 있었다.
실시예 2. 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 세포 이동 촉진 효과 확인
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 대한 효과를 확인하기 위하여, 상기 혼합물의 세포 이동 촉진 효과를 상처 치유 어세이(Wound healing assay)를 통해 확인하였다.
구체적으로, HaCat 세포를 96웰 플레이트에 1×103 세포/웰의 수로 분주하였고, 24시간 후 5% FBS가 첨가된 DMEM 배지로 교체한 후 세리신 단독(0.0005%, 0.002%, v/v), 사상자 추출물 단독(0.002%, 0.01%, v/v), 겨우살이 추출물 단독(0.0005%, 0.005%, v/v), 또는 이들의 혼합물을 각 웰에 처리하였다. 48시간 후 옐로우 팁(yellow tip)을 이용하여 상처를 주었고, 24시간 후 상처가 닫힌 정도를 사진을 찍어 이미지 J(image J) 프로그램을 통해 면적을 측정하였다.
시료(%) | 세포이동성 (%) |
||
세리신 | 사상자 추출물 |
겨우살이 추출물 |
|
0 | 0 | 0 | 53.68 |
0.0005 | 0 | 0 | 57.61 |
0.002 | 0 | 0 | 61.45 |
0 | 0.002 | 0 | 57.00 |
0 | 0.01 | 0 | 55.48 |
0 | 0 | 0.0005 | 54.34 |
0 | 0 | 0.005 | 75.12 |
0.0005 | 0.002 | 0.0005 | 96.15 |
0.002 | 0.01 | 0.0005 | 97.20 |
0.002 | 0.01 | 0.005 | 98.80 |
그 결과, 상기 표 2 및 도 2에서 볼 수 있듯이, 세리신, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물 단독을 처리하는 것에 비하여, 이들의 혼합물을 처리하는 경우 세포 이동능이 약 1.3 내지 1.8배 이상 증가하는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통해, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 이들 단독에 비하여 세포 이동 촉진 활성이 현저히 월등하므로, 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 우수한 효과를 낼 것임을 알 수 있었다.
아울러, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물의 다양한 농도에서도 모두 우수한 세포 이동능을 갖는 것을 확인하였으며, 농도를 달리하여도 시너지 효과가 나타남을 알 수 있었다.
실시예 3. 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 기질 유전자의 발현 촉진 효과 확인
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 대한 효과를 확인하기 위하여, 상기 혼합물의 피부 기질 유전자인 엘라스틴(elastin)의 발현 촉진 효과를 RT-PCR을 통해 확인하였다.
구체적으로, 인간 피부 섬유아세포(normal human dermal fibroblast)인 NHDF를 는 FGM-2 블릿 키트(Bullet kit) 배지에서 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 이후, NHDF 세포를 6웰 플레이트에 1×105 세포/웰의 수로 분주하였고, 세리신 단독(0.002%, 0.005%, v/v), 사상자 추출물 단독(0.005%, v/v), 겨우살이 추출물 단독(0.002%, 0.01%, v/v), 또는 이들의 혼합물을 각 웰에 처리하였다. 24시간 후 트리졸(Trizol)을 이용하여 세포를 녹인 후 토탈 RNA를 추출하였으며, 이를 cDNA로 변환한 후 qPCR을 통해 엘라스틴(elastin) 유전자의 발현양을 확인하였다. 이때, 사용한 프라이머는 다음과 같다: 엘라스틴(F: 5'-TCG CAA CAC GTA ACG CAA T-3', 서열번호 1; R: 5'-ACT TCT CTT TTT CCA CCC CAT TT-3', 서열번호 2), gapdh(F: 5'-CCT CAA GAT CAT CAG CAA T-3', 서열번호 3; R: 5'-CCA TCC ACA GTC TTC TGG GT-3', 서열번호 4).
시료(%) | Elastin /gapdh |
||
세리신 | 사상자 추출물 |
겨우살이 추출물 |
|
0 | 0 | 0 | 1 |
0.002 | 0 | 0 | 1.215 |
0 | 0.005 | 0 | 0.76 |
0 | 0 | 0.002 | 0.88 |
0 | 0 | 0.01 | 1.07 |
0.002 | 0.005 | 0.002 | 1.51 |
0.005 | 0.005 | 0.01 | 1.58 |
그 결과, 상기 표 3 및 도 3에서 볼 수 있듯이, 세리신, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물 단독을 처리하는 것에 비하여, 이들의 혼합물을 처리하는 경우 세포의 엘라스틴 발현양이 약 1.3 내지 2배 이상 증가하는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통해, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 이들 단독에 비하여 세포의 엘라스틴 유전자 발현 촉진 활성이 현저히 월등하므로, 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 우수한 효과를 낼 것임을 알 수 있었다.
아울러, 세리신 또는 겨우살이 추출물의 다양한 농도에서도 모두 우수한 엘라스틴 발현 촉진 효과를 갖는 것을 확인하였으며, 농도를 달리하여도 시너지 효과가 나타남을 알 수 있었다.
실시예 4. 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 항염증 효과 확인
세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물의 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 대한 효과를 확인하기 위하여, 상기 혼합물의 항염증 효과를 NO(Nitric Oxide) 합성 정도를 통해 확인하였다.
구체적으로, 마우스 대식세포(murine macrophage)인 Raw264.7을 10% FBS와 1% 젠타마이신이 첨가된 DMEM(High glucose)배지에서 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 이후, Raw264.7 세포를 12웰 플레이트에 5×105 세포/웰의 수로 분주하였고, LPS 1 ㎍/mL과 세리신 단독(0.002%, v/v), 사상자 추출물 단독(0.001%, 0.002%, v/v), 겨우살이 추출물 단독(0.0005%, 0.001%, v/v), 또는 이들의 혼합물을 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 이후, 세포 배양액을 모아 원심분리한 후 세포 배양액 100 ㎕와 그리스(Griess) 시약 100 ㎕을 10분간 반응시켰으며, 540 nm에서 ELISA 리더기로 흡광도를 측정하였다.
시료(%) | NO합성 (%) |
||
세리신 | 사상자 추출물 |
겨우살이 추출물 |
|
0 | 0 | 0 | 100 |
0.002 | 0 | 0 | 96.06 |
0 | 0.001 | 0 | 101.63 |
0 | 0.002 | 0 | 96.39 |
0 | 0 | 0.0005 | 109.49 |
0 | 0 | 0.001 | 110.49 |
0.002 | 0.001 | 0.0005 | 81.31 |
0.002 | 0.001 | 0.001 | 72.78 |
0.002 | 0.002 | 0.001 | 79.67 |
그 결과, 상기 표 4 및 도 4에서 볼 수 있듯이, 세리신, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물 단독을 처리하는 것에 비하여, 이들의 혼합물을 처리하는 경우 세포의 LPS에 의한 NO 합성양이 약 1.3 내지 1.5배 이상 감소하는 것을 확인하였다.
상기 결과를 통해, 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물의 혼합물은 이들 단독에 비하여 대식세포의 NO 생성양이 현저히 감소하므로, 피부 재생, 진정, 자극 완화, 상처 치유 등에 우수한 효과를 낼 것임을 알 수 있었다.
아울러, 사상자 추출물 또는 겨우살이 추출물의 다양한 농도에서도 모두 우수한 항염증 효과를 갖는 것을 확인하였으며, 농도를 달리하여도 시너지 효과가 나타남을 알 수 있었다.
이상의 설명으로부터, 본 출원이 속하는 기술분야의 당업자는 본 출원이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 출원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 출원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
<110> JAYEONIN INC.
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<223> elastin F primer
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tcgcaacacg taacgcaat 19
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<223> gapdh F primer
<400> 3
cctcaagatc atcagcaat 19
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> gapdh R primer
<400> 4
ccatccacag tcttctgggt 20
Claims (8)
- 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 피부 재생 또는 상처 치유는 각질형성세포의 증식, 이동 또는 엘라스틴(elastin) 유전자의 발현 촉진에 의해 달성되는 것인, 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 피부 진정은 항염 활성을 통해 달성되는 것인, 화장료 조성물.
- 제3항에 있어서, 상기 항염은 대식세포의 NO(Nitric oxide) 합성 억제에 의해 달성되는 것인, 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 피부 외용제.
- 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 의약외품 조성물.
- 세리신(sericin), 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 건강기능식품 조성물.
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