WO2020075764A1 - Ｔｒｐｖ４活性抑制剤 - Google Patents

Ｔｒｐｖ４活性抑制剤 Download PDF

Info

Publication number
WO2020075764A1
WO2020075764A1 PCT/JP2019/039851 JP2019039851W WO2020075764A1 WO 2020075764 A1 WO2020075764 A1 WO 2020075764A1 JP 2019039851 W JP2019039851 W JP 2019039851W WO 2020075764 A1 WO2020075764 A1 WO 2020075764A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
rosmarinic acid
salt
acid derivative
following formulas
mmol
Prior art date
Application number
PCT/JP2019/039851
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
真純 岩下
尚也 北村
Original Assignee
花王株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 花王株式会社 filed Critical 花王株式会社
Priority to US17/284,369 priority Critical patent/US20210346331A1/en
Priority to CN201980066753.3A priority patent/CN112823002A/zh
Priority to EP19871061.8A priority patent/EP3865129A4/en
Publication of WO2020075764A1 publication Critical patent/WO2020075764A1/ja

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/222—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin with compounds having aromatic groups, e.g. dipivefrine, ibopamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/732—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids of unsaturated hydroxy carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/734—Ethers
    • C07C69/736—Ethers the hydroxy group of the ester being etherified with a hydroxy compound having the hydroxy group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring

Definitions

  • the present invention relates to a rosmarinic acid derivative or a salt thereof, which is useful for preventing or ameliorating overactive bladder, irritable bowel syndrome and the like.
  • TRPV4 Transient receptor or potential channel subfamily V member 4
  • TRPV4 is one of the proteins that make up the temperature-sensitive TRP channel.
  • TRPV4 is expressed in a wide range of tissues such as kidney, lung, bladder, heart, skin, brain and digestive tract, and is considered to play different physiological roles.
  • TRPV4 is particularly strongly expressed in the renal distal tubular epithelial cells, and it has been suggested that the action of TRPV4 detects urine osmotic pressure and flow rate (Non-Patent Document 1).
  • TRPV4 has been reported to be involved in the function of the bladder (Non-Patent Document 2). That is, TRPV4 exists in the bladder epithelial cells inside the bladder, and when urine accumulates and the bladder epithelial cells spread, calcium flows into the cells via the TRPV channel constituted by TRPV4 and the like. The inflow of calcium releases ATP from the cells, and the swelling of the bladder is transmitted to the nerve.
  • the effect of TRPV4 on the micturition interval is greater than that of other proteins that compose the TRP channel (Non-Patent Document 3).
  • IBS Irritable Bowel Syndrome
  • enteritis caused by bacterial or viral infections and diseases such as ulcerative colitis and colorectal cancer
  • IBS is an organic disease such as inflammation or ulcer even when tested. It is a disease that causes abdominal discomfort, such as diarrhea, constipation, abdominal pain, and lower abdominal tension due to gas overload, although no disease is observed.
  • the amount of metabolites of polyunsaturated fatty acids (5,6-epoxyeicosatrienoic acid; 5,6-EET), which is a TRPV4 agonist is high in the colon, and the disruption of the colon containing the 5,6-EET
  • the intestinal motility reaction is increased and the intestine is overreacted. In this case, suppressing the expression of TRPV4 suppresses the overreaction (Non-Patent Document 4). ).
  • TRPV4 inhibition is expected to prevent or ameliorate overactive bladder and irritable bowel syndrome.
  • Patent Document 1 JP-A-2014-24809
  • Patent Document 2 JP-A-2005-272362
  • Non-Patent Document 1 Tian W., Am. J. Physiol. Renal. Physiol., 2004, 287, p. F17-F24
  • Non-Patent Document 2 Nilius B., Physiol. Rev., 2007, 87, p. 165-217
  • Non-Patent Document 3 Gevaert T., J. Clin. Invest., 2007, 117, p. 3453-3462
  • Non-Patent Document 4 Nicolas Cenac et al., Gastroenterology 2015 149, 433-444.
  • the present invention relates to the following 1) to 7).
  • a TRPV4 activity inhibitor comprising a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a preventive or ameliorating agent for irritable bowel syndrome which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a food for suppressing TRPV4 activity which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a food for preventing or improving overactive bladder which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a food for preventing or improving irritable bowel syndrome which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof for producing a TRPV4 activity inhibitor Use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for producing a preventive or ameliorating agent for overactive bladder. 10) Use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for producing a preventive or ameliorating agent for irritable bowel syndrome. 11) Use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for producing a food for suppressing TRPV4 activity.
  • a method for inhibiting TRPV4 activity which comprises administering or ingesting an effective amount of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof to a subject in need thereof.
  • 21) A method for preventing or improving overactive bladder which comprises administering or ingesting an effective amount of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof to a subject in need thereof.
  • a method for preventing or ameliorating irritable bowel syndrome which comprises administering or ingesting an effective amount of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof to a subject in need thereof.
  • the present invention relates to providing a compound that suppresses the activity of TRPV4 and is useful for the prevention or amelioration of overactive bladder, irritable bowel syndrome and the like.
  • the present inventors have conducted studies on rosmarinic acid derivatives, and as a result, the rosmarinic acid derivatives represented by the above formulas (Ia) to (Id) have an excellent TRPV4 activity-suppressing action, resulting in overactive bladder and irritable bowel. It has been found to be useful for prevention or improvement of syndromes and the like.
  • the rosmarinic acid derivative or a salt thereof of the present invention can effectively suppress TRPV4 activity, and is useful for the prevention or amelioration of diseases caused by activation of TRPV4 channels, such as overactive bladder and irritable bowel syndrome. Is.
  • the rosmarinic acid derivative of the present invention is represented by the following formulas (Ia) to (Id), and the compound represented by (Ia) is 4,3′-di-O-methyl-rosmarinic acid, (Ib).
  • the compound represented is 4,4′-di-O-methyl-rosmarinic acid
  • the compound represented by (Ic) is 3,4-di-O-methyl-rosmarinic acid
  • the compound represented by (Id) is 3 ′
  • the compound represented by (Ia) or (Ib) is a novel compound that has never been isolated or synthesized.
  • the compound (Ia) is (E) -3- (3-hydroxy-4-methoxyphenyl) -2- ⁇ [3- (4-hydroxy-3-methoxyphenyl) acryloyl] oxy ⁇ propionic acid
  • (Ib) Is (E) -3- (3-hydroxy-4-methoxyphenyl) -2- ⁇ [3- (3-hydroxy-4-methoxyphenyl) acryloyl] oxy ⁇ propionic acid
  • (Ic) is (E) -3 -(3,4-dimethoxyphenyl) -2- ⁇ [3- (3,4-dihydroxyphenyl) acryloyl] oxy ⁇ propionic acid
  • (Id) is (E) -3- (3,4-dihydroxyphenyl)- It can also be expressed as 2- ⁇ [3- (3,4-dimethoxyphenyl) acryloyl] oxy ⁇ propionic acid.
  • the rosmarinic acid derivative of the present invention has optical isomers, but it may be any optical isomer or a mixture of optical isomers. In the present invention, the R isomer or the optical isomer mixture is preferable.
  • Examples of the salt of the rosmarinic acid derivative of the present invention include salts with alkali metals such as sodium and potassium, salts with alkaline earth metals such as calcium and magnesium, ammonium salts, and salts with amines such as triethylamine. Can be mentioned.
  • the rosmarinic acid derivative of the present invention or a salt thereof can exist not only in unsolvated form but also as hydrate or solvate. Therefore, in the present invention, all crystal forms and hydrates or solvates are included. Preferred examples of solvates include hydrates, alcoholates and acetone solvates.
  • the rosmarinic acid derivative of the present invention can be produced, for example, by the method shown in the production example described below.
  • the synthetic schemes of (Ia) to (Id) are illustrated below.
  • the rosmarinic acid derivative of the present invention suppresses TRPV4 activity. That is, in the presence of a TRPV4 stimulating substance (TRPV4 agonist, agonist), when a transformed cell functionally expressing TRPV4 (TRPV4 expressing cell) is brought into contact with the rosmarinic acid derivative by introducing the TRPV4 gene. , Has an action of inhibiting TRPV4 activity by inhibiting the inflow of an amount of cations into cells by a TRPV4 stimulating substance. Therefore, the rosmarinic acid derivative of the present invention or a salt thereof serves as a TRPV4 activity inhibitor and can be used for inhibiting TRPV4 activity or for producing a TRPV4 activity inhibitor.
  • TRPV4 stimulating substance TRPV4 agonist, agonist
  • TRPV4 is present in bladder epithelial cells inside the bladder.
  • intracellular calcium is taken in through the TRPV4 channel, whereby ATP is released from the cell surface and the bladder bulge is transmitted to nerves. Therefore, suppressing the activity of TRPV4 can prevent or improve overactive bladder.
  • the amount of 5,6-EET (TRPV4 agonist) which is a metabolite of polyunsaturated fatty acid, is high, and the crushed solution of the colon containing the 5,6-EET is also present.
  • the rosmarinic acid derivative or a salt thereof of the present invention serves as a preventive or ameliorating agent for overactive bladder, a preventive or ameliorating agent for irritable bowel syndrome, and for the prevention or amelioration of overactive bladder or irritable bowel syndrome, or overdose. It can be used for producing a preventive or ameliorating agent for active bladder and irritable bowel syndrome.
  • TRPV4 means "Transient receptor potential cation channel subfamily V member 4".
  • TRPV4 is a protein encoded by the TRPV4 gene in humans.
  • “suppressing the activity of TRPV4” means suppressing the activity of TRPV4 which is a receptor.
  • the activity expressed by binding of a TRPV4 stimulant to TRPV4 for example, the ability to regulate ion flux (eg, the ability to transport cations such as calcium ions and sodium ions from the extracellular space to the intracellular space) It means to suppress or inhibit the regulation ability of membrane potential (for example, generation ability of electric current).
  • overactive bladder is a symptom syndrome that requires urgency to urinate, and usually indicates urinary frequency or urge incontinence.
  • “irritable bowel syndrome” is a general term for diseases that mainly occur due to abnormal movements and secretory functions of the large intestine, and enteritis due to infection with bacteria and viruses, and diseases such as ulcerative colitis and colon cancer. Differently, it means a disease that is diagnosed when the test shows no abnormalities but diarrhea or repeated constipation.
  • “use” for suppressing TRPV4 activity and for preventing or ameliorating overactive bladder or irritable bowel syndrome may be administration or ingestion in animals including humans, and therapeutic use. May also be for non-therapeutic use.
  • “Non-therapeutic” means a concept that does not include medical practice, that is, a concept that does not include a method of operating, treating, or diagnosing a human, more specifically, a doctor or a person who is instructed by a doctor operates a human , A concept that does not include a method of performing treatment or diagnosis.
  • prevention means preventing or delaying the onset of a disease or symptom in an individual, or reducing the risk of the onset of a disease or symptom in an individual.
  • improvement means improvement or prevention of a disease, symptom or condition, deterioration of a disease, symptom or condition, or reversal, prevention or delay of progression of a disease, symptom or condition.
  • the TRPV4 activity inhibitor, the preventive or ameliorating agent for overactive bladder or irritable bowel syndrome of the present invention when ingested or administered to animals including humans, has the effect of inhibiting TRPV4 activity, the prevention of overactive bladder or irritable bowel syndrome.
  • it may be a drug, a quasi drug, a supplement, or a food product that exhibits an improving effect, or a material or a formulation to be added thereto.
  • the food of the present invention includes, in addition to general foods and drinks, foods indicating that fact as necessary, functional foods, foods for patients, foods for specified health use, foods with functional claims, supplements. .
  • the above-mentioned pharmaceuticals (including quasi drugs) containing the rosmarinic acid derivative of the present invention or a salt thereof can be administered in any dosage form, but oral administration is preferred.
  • the active ingredient can be mixed with a solid or liquid nontoxic pharmaceutical carrier suitable for administration methods such as oral administration, rectal administration and injection, and then administered in the form of a conventional pharmaceutical preparation.
  • formulations include solid agents such as tablets, granules, powders and capsules, liquid agents such as solutions, suspensions and emulsions, and freeze-dried agents. These preparations can be prepared by conventional means for preparation. Further, if necessary, conventional additives such as stabilizers, wetting agents, emulsifiers, binders, isotonic agents, excipients and the like can be appropriately added.
  • the form of the food containing the rosmarinic acid derivative or a salt thereof of the present invention includes soft drinks, tea drinks, coffee drinks, fruit juice drinks, carbonated drinks, jellies, wafers, biscuits, bread, noodles, sausages and the like.
  • a nutritional supplement composition in the same form as the above-mentioned oral administration preparation can be mentioned.
  • solid preparation such as tablets, capsules, troches and the like
  • tablets are preferable, and chewable tablets are more preferable.
  • the rosmarinic acid derivative of the present invention or a salt thereof alone or other food materials solvents, softeners, oils, emulsifiers, preservatives, fragrances, stabilizers, coloring Agents, antioxidants, moisturizers, thickeners and the like can be used in appropriate combination.
  • the content of the rosmarinic acid derivative of the present invention or the salt thereof in the above-mentioned pharmaceuticals (including quasi drugs) and foods varies depending on the use form, but is usually preferably 0.01% by mass or more, more preferably It is 0.1% by mass or more, more preferably 1% by mass or more, preferably 100% by mass or less, more preferably 90% by mass or less, still more preferably 70% by mass or less. Further, it is preferably 0.01 to 100% by mass, more preferably 0.1 to 90% by mass, and further preferably 1 to 70% by mass.
  • the daily dose per adult for oral administration is usually 0.1 mg or more, more preferably 1 mg or more, still more preferably 10 mg or more as the rosmarinic acid derivative or a salt thereof. It is preferably 2000 mg or less, more preferably 500 mg or less, still more preferably 200 mg or less. Further, it is preferably 0.1 to 2000 mg, more preferably 1 to 500 mg, still more preferably 10 to 200 mg.
  • the above-mentioned preparation can be administered according to any administration schedule, but it is preferable to administer it once a day to several times a day and continuously administer it for several weeks to several months.
  • the subject to be administered or ingested is not particularly limited as long as it is an animal including human that requires or desires inhibition of TRPV4 activity, overactive bladder, and prevention or improvement of irritable bowel syndrome, but is not limited to overactive bladder or urgency. It is effective to administer or ingest it to a person who exhibits symptoms such as urinary dysfunction such as urinary incontinence, or a person who exhibits symptoms such as diarrhea or constipation due to stress, abdominal pain, or tension of the lower abdomen due to excessive gas.
  • a preventive or ameliorating agent for overactive bladder which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a preventive or ameliorating agent for irritable bowel syndrome which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a food for suppressing TRPV4 activity which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a food for preventing or improving overactive bladder which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • a food for preventing or improving irritable bowel syndrome which comprises a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof as an active ingredient.
  • ⁇ 8> Use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for producing a TRPV4 activity inhibitor.
  • ⁇ 9> Use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for producing a preventive or ameliorating agent for overactive bladder.
  • ⁇ 10> Use of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof for producing a preventive or ameliorating agent for irritable bowel syndrome.
  • ⁇ 11> Use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for producing a food for suppressing TRPV4 activity.
  • ⁇ 12> Use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for producing a food for preventing or improving overactive bladder.
  • ⁇ 13> Use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for producing a food for preventing or improving irritable bowel syndrome.
  • ⁇ 17> A non-therapeutic use of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof for suppressing TRPV4 activity.
  • ⁇ 18> A non-therapeutic use of a rosmarinic acid derivative or a salt thereof selected from the following formulas (Ia) to (Id) for preventing or improving overactive bladder.
  • ⁇ 19> A non-therapeutic use of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof for preventing or ameliorating irritable bowel syndrome.
  • a method for inhibiting TRPV4 activity which comprises administering or ingesting an effective amount of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof to a subject in need thereof.
  • a method for preventing or improving overactive bladder which comprises administering or ingesting an effective amount of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof to a subject in need thereof.
  • a method for preventing or ameliorating irritable bowel syndrome which comprises administering or ingesting an effective amount of a rosmarinic acid derivative selected from the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof to a subject in need thereof.
  • the content of the active ingredient in the food is preferably 0.01% by mass or more, more preferably 0.1% by mass or more, still more preferably 1% by mass or more, and preferably 100% by mass or less in the total amount. , More preferably 90% by mass or less, further preferably 70% by mass or less, or preferably 0.01 to 100% by mass, more preferably 0.1 to 90% by mass, further preferably 1 to 70% by mass. Is.
  • the daily dose per adult is preferably 0.1 mg or more as a rosmarinic acid derivative represented by the following formulas (Ia) to (Id) or a salt thereof. , More preferably 1 mg or more, further preferably 10 mg or more, preferably 2000 mg or less, more preferably 500 mg or less, still more preferably 200 mg or less, or preferably 0.1 to 2000 mg, more preferably 1 ⁇ 500 mg, more preferably 10 to 200 mg.
  • ⁇ Reagent> Ferulic acid, isoferric acid, isovanillin, N-acetylglycine, 3,4-dimethoxybenzaldehyde, 3,4-dimethoxycinnamic acid and caffeic acid were purchased from Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. and used.
  • Allyl bromide (Allyl-Br), 4-dimethylaminopyridine (DMAP), tetrabutylammonium iodide (TBAI), tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) complex ([Pd (PPh 3 ) 4 ]), morpholine , 3,4-dihydroxybenzaldehyde, sodium hydroxide (NaOH), potassium carbonate (K 2 CO 3 ), 1,4-dioxane, dichloromethane (CH 2 Cl 2 ), tetrahydrofuran (THF) are Fuji Film Wako Pure Chemical Industries, Ltd. We purchased more and used.
  • EDCI 1-Ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride
  • EDCI 1-Ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride
  • Sodium acetate (NaOAc) was purchased from Sigma-Aldrich Japan GK and used.
  • Acetic anhydride (Ac 2 O), hydrochloric acid, sodium borohydride (NaBH 4 ), formic acid, methanol (MeOH), acetone, ethyl acetate, hexane, chloroform (CHCl 3 ) were purchased from Kanto Chemical Co., Inc. and used. .
  • Isovanillin (15.22 g, 100 mmol), N-acetylglycine (15.22 g, 130 mmol) and acetic anhydride (50 mL) were added to a 300 mL eggplant-shaped flask, sodium acetate (10.66 g, 130 mmol) was added, and the mixture was heated at 120 ° C. Stir for 2 days. After cooling to room temperature, it was diluted with ethyl acetate (300 mL), and the insoluble matter was filtered using filter paper.
  • the obtained solution was washed twice with ion-exchanged water and saturated saline (each 200 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and then the solvent was distilled off under reduced pressure with an evaporator.
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: n-hexane-ethyl acetate (2: 1, v / v)) to obtain compound 1 (14.54 g, 52.8 mmol, 53%). .
  • the compound 1 (3.85 g, 13.99 mmol) was added to a 300 mL eggplant-shaped flask, 1,4-dioxane (70 mL) and 3 mol / L hydrochloric acid (70 mL) were sequentially added, and the mixture was stirred at 90 ° C. for 6 hours. After cooling to room temperature, it was diluted with ethyl acetate, and the obtained organic layer was washed twice with 1 mol / L hydrochloric acid and saturated saline (200 mL each), dried over anhydrous sodium sulfate, and evaporated under reduced pressure with an evaporator. I left.
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: chloroform-methanol (90: 10 ⁇ 60: 40, v / v)).
  • the obtained target product (3.12 g) was used in the next reaction as a crudely purified product.
  • reaction residue (1.78 g).
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: n-hexane-ethyl acetate (80: 20 ⁇ 50: 50, v / v)) to give compound 4 (952.3 mg, 3.26 mmol, 50%). (3 steps)) was obtained.
  • the obtained solution was diluted with ethyl acetate (200 mL), washed with 1 mol / L hydrochloric acid and saturated brine (100 mL each), dried over anhydrous sodium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure with an evaporator.
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: n-hexane-ethyl acetate (95: 5 ⁇ 70: 30, v / v)) to give compound 5 (1.10 g, 4.01 mmol, 80%). ) Got.
  • a compound 4 (161.9 mg, 0.55 mmol), dichloromethane (10 mL) and 4-dimethylaminopyridine (184.8 mg, 1.50 mmol) were added to a 50 mL eggplant flask and stirred to obtain a clear solution. Then, after adding compound 9 (234.3 mg, 1.00 mmol), 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (287.6 mg, 1. (50 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 18 hours.
  • Isovanillin (16.62 g, 100 mmol), N-acetylglycine (22.25 g, 190 mmol) and acetic anhydride (70 mL) were added to a 300 mL eggplant flask, sodium acetate (10.66 g, 130 mmol) was added, and the mixture was heated at 120 ° C. Stir for 2 days. After cooling to room temperature, it was diluted with ethyl acetate (300 mL), and the insoluble matter was filtered using filter paper.
  • the obtained solution was washed twice with ion-exchanged water and saturated saline (each 200 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and then the solvent was distilled off under reduced pressure with an evaporator.
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: n-hexane-ethyl acetate (2: 1, v / v)) to obtain compound 11 (7.73 g, 31.3 mmol, 31%). .
  • a compound 13 (766.5 mg, 3.39 mmol) and tetrabutylammonium iodide (373.1 mg, 1.01 mmol) were added to a 200 mL eggplant flask, and then acetone (40 mL) was added and stirred to obtain a clear solution. It was Subsequently, potassium carbonate (1.40 g, 10.16 mmol) and allyl bromide (2.05 g, 16.94 mmol) were sequentially added, and the mixture was stirred under heating at 50 ° C. for 16 hours.
  • reaction residue (1.78 g).
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (elution solvent: n-hexane-ethyl acetate (80: 20 ⁇ 50: 50, v / v)) to quantify compound 14 (946.6 mg, 3.55 mmol). I got it.
  • the obtained solution was diluted with ethyl acetate (200 mL), washed with 1 mol / L hydrochloric acid and saturated brine (100 mL each), dried over anhydrous sodium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure with an evaporator.
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: n-hexane-ethyl acetate (95: 5 ⁇ 70: 30, v / v)) to give compound 15 (1.77 g, 58.9 mmol, 59%). ) Got.
  • the obtained solution was washed twice with ion-exchanged water and saturated saline (each 200 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and then the solvent was distilled off under reduced pressure with an evaporator.
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: n-hexane-ethyl acetate (2: 1, v / v)) to obtain compound 18 (9.78 g, 37.4 mmol, 75%). .
  • the obtained solution was diluted with ethyl acetate (200 mL), washed with 1 mol / L hydrochloric acid and saturated saline (100 mL each), dried over anhydrous sodium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure with an evaporator.
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: n-hexane-ethyl acetate (70: 30 ⁇ 30: 70, v / v)) to give compound 19 (708.2 mg, 2.37 mmol, 34%). ) Got.
  • the obtained residue was purified by silica gel column chromatography (eluting solvent: 0.1% formic acid / chloroform-methanol (90: 10 ⁇ 80: 20, v / v)) to obtain compound 20 (466.5 mg). It was The obtained compound 20 was used as a crude product in the next reaction.
  • a compound 22 (192.4 mg, 0.604 mmol), dichloromethane (15 mL) and 4-dimethylaminopyridine (226.5 mg, 1.85 mmol) were added to a 50 mL eggplant flask and stirred to obtain a clear solution. Subsequently, 3,4-dimethoxycinnamic acid (249.8 mg, 1.20 mmol) was added, and the mixture was cooled with an ice bath while 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride ( 347.6 mg, 1.81 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 3 hours.
  • Test Example 1 Evaluation of TRPV4 activity inhibitory action (1) Reagent Human duodenum-derived cells (Hutu-80 cells) and human cervical cancer-derived cell lines (HeLa cells) are from American Type Culture Collection, and High Pure PCR Product Purification Kit is , PcDNA3.1 Directional TOPO Expression Kit, DMEM / F12 medium is from Invitrogen, TransIT-HeLaMONSTER Transfection Kit is from Mirus, Detachin is from Genlantis, 96 well Opticunactual puncture is from Quantum, and the well is more than 4 wells.
  • PCR conditions > a) PCR solution composition cDNA (Template) 15 ⁇ L 5x PrimeSTAR GXL Buffer 10 ⁇ L dNTPs mixture (2.5 mM) 4 ⁇ L PrimeSTAR GXL DNA Polymerase 1 ⁇ L Forward Primer (10 ⁇ M) 1 ⁇ L Reverse Primer (10 ⁇ M) 1 ⁇ L Water 18 ⁇ L b) Temperature and cycle conditions 95 ° C 2 min ⁇ 98 °C 10sec, 70 °C 2min, 33cycles
  • the obtained PCR product was purified using High Pure PCR Product Purification Kit.
  • a human TRPV4 gene expression vector was produced using the purified PCR product and pcDNA3.1 Directional TOPO Expression Kit.
  • the intracellular calcium ion influx activity was measured using Calcium Kit II-fluo 4. After mixing 1: 1 of Loading buffer and Hanks' balanced salt solution containing Fluo4-AM, 180 ⁇ L / well was added to the human TRPV4 expressing cells prepared in (3) above, and the mixture was incubated at 37 ° C. for 1 hour. Then, the fluorescence intensity (excitation wavelength: 488 nm, fluorescence wavelength: 524 nm) was measured every 2 seconds using a fluorescence plate reader FDSS3000 (Hamamatsu Photonics) at 37 ° C.
  • GSK1016790a which is a TRPV4 agonist and 4,3′-di-O-methyl-rosmarinic acid, 3 ′, 4′-di-O-methyl-rosmarinic acid, which was prepared in the above production example as a sample, , 4'-di-O-methyl-rosmarinic acid and 3,4-di-O-methyl-rosmarinic acid solutions were diluted with Hanks' balanced salt solution, and the mixed solution (mixed immediately before addition) was added at 20 ⁇ L / Well was added, and the fluorescence intensity change was measured every 2 seconds until 300 seconds. GSK1016790a was added so that the final concentration was 3 nM.
  • TRPV4 activity was calculated by the following formula, with the calcium ion influx rate by the treatment of TRSK4 agonist GSK1016790a being 100%.
  • Fmax Maximum fluorescence intensity of wells added GSK1016790a and sample at 0 to 300 seconds of measurement
  • FmaxC1 Maximum fluorescence intensity of wells added GSK1016790a and solvent at 0 to 300 seconds of measurement
  • FmaxC2 Solvent at 0 to 300 seconds of measurement start Maximum fluorescence intensity of wells added with only F0: Fluorescence intensity of the same well as Fmax immediately after the start of measurement
  • F0C1 Fluorescence intensity of wells same as FmaxC1 immediately after start of measurement
  • F0C2 Fluorescence intensity of wells added with only solvent immediately after start of measurement
  • 4'-di-O-methyl-rosmarinic acid, 4,4'-di-O-methyl-rosmarinic acid and 3,4-di-O-methyl-rosmarinic acid are GSK and 4,3'-DiMe, respectively.
  • -RA, 3 ', 4'-DiMe-RA, 4,4'-DiMe-RA, 3,4-DiMe-RA The results are expressed as mean value (Mean) ⁇ standard error (SE).

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

ＴＲＰＶ４の活性を抑制し、過活動膀胱や過敏性腸症候群等の予防又は改善に有用な化合物を提供する。　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とするＴＲＰＶ４活性抑制剤。

Description

ＴＲＰＶ４活性抑制剤
　本発明は、過活動膀胱や過敏性腸症候群等の予防又は改善に有用な、ロズマリン酸誘導体又はその塩に関する。
　ＴＲＰＶ４（Transient receptor potential cation channel subfamily V member 4）は、温度感受性ＴＲＰチャネルを構成するタンパク質の１つである。ＴＲＰＶ４は、腎、肺、膀胱、心臓、皮膚、脳、消化管など幅広い組織で発現しており、異なった幅広い生理的役割を果たしていると考えられている。
　腎の遠位尿細管上皮細胞には特に強くＴＲＰＶ４が発現しており、ＴＲＰＶ４の作用により尿の浸透圧や流量が感知されることが示唆されている（非特許文献１）。また、ＴＲＰＶ４は膀胱の機能に関与することが報告されている（非特許文献２）。すなわち、膀胱内側の膀胱上皮細胞にはＴＲＰＶ４が存在し、尿が溜まって膀胱上皮細胞が伸展した場合に、ＴＲＰＶ４などにより構成されるＴＲＰＶチャネルを介して、細胞内にカルシウムが流入する。このカルシウムの流入によってＡＴＰが細胞から放出され、膀胱の膨らみが神経に伝わる。また、ＴＲＰＶ４が排尿間隔に及ぼす影響は、ＴＲＰチャネルを構成する他のタンパク質よりも大きいことが報告されている（非特許文献３）。
　また、過敏性腸症候群（Irritable Bowel Syndrome：ＩＢＳ）は、細菌やウイルスの感染による腸炎や、潰瘍性大腸炎・大腸がん等の病気とは異なり、検査を行っても炎症や潰瘍といった器質的疾患が認められないにもかかわらず、下痢や便秘、腹痛、ガス過多による下腹部の張りなどの腹部不快感が生じる疾患である。ＩＢＳ患者ではＴＲＰＶ４アゴニストである多価不飽和脂肪酸の代謝産物（５，６－エポキシエイコサトリエン酸；５，６－ＥＥＴ）量が結腸で多いこと、当該５，６－ＥＥＴを含む結腸の破砕液をマウス結腸へ投与した場合に腸運動反応が増加して腸が過剰反応するが、この場合においてＴＲＰＶ４の発現を抑制すると当該過剰反応が抑制されることが報告されている（非特許文献４）。
　したがって、ＴＲＰＶ４活性を阻害することにより、過活動膀胱や過敏性腸症候群を予防又は改善することが期待される。
　一方、下記構造式で表される３’－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（ｉ）、４’－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（ｉｉ）、または３，３’－Ｏ－ジメチル－ロズマリン酸（ｉｉｉ）等の特定のロズマリン酸誘導体がシクロオキシゲナーゼ２の誘導抑制活性を有し、抗炎症作用があることが報告されている（特許文献２）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
　　〔特許文献１〕特開２０１４－２４８０９号公報
　　〔特許文献２〕特開２００５－２７２３６２号公報
　　〔非特許文献１〕Tian  W.，Am．J．Physiol．Renal．Physiol.，2004，287，p．F17-F24
　　〔非特許文献２〕Nilius  B.，Physiol．Rev.，2007，87，p．165-217
　　〔非特許文献３〕Gevaert  T.，J．Clin．Invest.，2007，117，p．3453-3462
　　〔非特許文献４〕Nicolas Cenac et al., Gastroenterology 2015 149, 433-444
　本発明は、以下の１）～７）に係るものである。
　１）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とするＴＲＰＶ４活性抑制剤。
　２）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過活動膀胱の予防又は改善剤。
　３）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過敏性腸症候群の予防又は改善剤。
　４）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とするＴＲＰＶ４活性抑制用食品。
　５）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過活動膀胱の予防又は改善用食品。
　６）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過敏性腸症候群の予防又は改善用食品。
　７）下記式（Ｉａ）又は（Ｉｂ）で表されるロズマリン酸誘導体又はその塩。
　８）ＴＲＰＶ４活性抑制剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
　９）過活動膀胱の予防又は改善剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
　１０）過敏性腸症候群の予防又は改善剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
　１１）ＴＲＰＶ４活性抑制用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
　１２）過活動膀胱の予防又は改善用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
　１３）過敏性腸症候群の予防又は改善用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
　１４）ＴＲＰＶ４活性の抑制に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
　１５）過活動膀胱の予防又は改善に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
　１６）過敏性腸症候群の予防又は改善に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
　１７）ＴＲＰＶ４活性を抑制するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
　１８）過活動膀胱を予防又は改善するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
　１９）過敏性腸症候群を予防又は改善するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
　２０）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取するＴＲＰＶ４活性抑制方法。
　２１）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取する過活動膀胱の予防又は改善方法。
　２２）下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取する過敏性腸症候群の予防又は改善方法。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
発明の詳細な説明
　本発明は、ＴＲＰＶ４の活性を抑制し、過活動膀胱や過敏性腸症候群等の予防又は改善に有用な化合物を提供することに関する。
　本発明者等は、ロズマリン酸誘導体について検討を行った結果、上記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）で示されるロズマリン酸誘導体が、優れたＴＲＰＶ４活性抑制作用を有し、過活動膀胱や過敏性腸症候群等の予防又は改善のために有用であることを見出した。
　本発明のロズマリン酸誘導又はその塩は、ＴＲＰＶ４活性を効果的に抑制することができ、ＴＲＰＶ４チャネルが活性化されることによって生じる疾患、例えば過活動膀胱や過敏性腸症候群の予防又は改善に有用である。
　本発明のロズマリン酸誘導体は、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）で示されるものであり、（Ｉａ）で示される化合物は４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、（Ｉｂ）で示される化合物は４，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、（Ｉｃ）で示される化合物は３、４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、（Ｉｄ）で示される化合物は３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸である。このうち、（Ｉａ）又は（Ｉｂ）で示される化合物は、これまでに単離又は合成されたことがない、新規化合物である。
　なお、化合物（Ｉａ）は（Ｅ）－３－（３－ヒドロキシ－４－メトキシフェニル）－２－｛［３－（４－ヒドロキシ－３－メトキシフェニル）アクリロイル］オキシ｝プロピオン酸、（Ｉｂ）は（Ｅ）－３－（３－ヒドロキシ－４－メトキシフェニル）－２－｛［３－（３－ヒドロキシ－４－メトキシフェニル）アクリロイル］オキシ｝プロピオン酸、（Ｉｃ）は（Ｅ）－３－（３，４－ジメトキシフェニル）－２－｛［３－（３、４－ジヒドロキシフェニル）アクリロイル］オキシ｝プロピオン酸、（Ｉｄ）は（Ｅ）－３－（３，４－ジヒドロキシフェニル）－２－｛［３－（３、４－ジメトキシフェニル）アクリロイル］オキシ｝プロピオン酸と表記することもできる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
　本発明のロズマリン酸誘導体には光学異性体が存在するが、いずれかの光学異性体であっても、光学異性体の混合物であってもよい。本発明ではＲ体又は光学異性体混合物が好ましい。
　本発明のロズマリン酸誘導体の塩としては、例えば、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩、アンモニウム塩、トリエチルアミン等のアミン類との塩等を挙げることができる。
　本発明のロズマリン酸誘導体又はその塩は、未溶媒和型のみならず、水和物又は溶媒和物としても存在することができる。従って、本発明においては、その全ての結晶型及び水和若しくは溶媒和物を含むものである。溶媒和物の好ましい例としては、水和物、アルコール和物、アセトン和物などが挙げられる。
　本発明のロズマリン酸誘導体は、例えば後記製造例に示す方法により製造できる。以下に、（Ｉａ）～（Ｉｄ）の合成スキームを例示する。
１．　４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉａ）の合成例
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
２．　４，４’－ジ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｂ）の合成例
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000027
３．　３、４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｃ）の合成例
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000028
４．　３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｄ）の合成例
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000029
　後記実施例で示すように、本発明のロズマリン酸誘導体は、ＴＲＰＶ４活性を抑制する。すなわち、ＴＲＰＶ４刺激物質（ＴＲＰＶ４作動薬、アゴニスト）の存在下で、ＴＲＰＶ４遺伝子導入により、ＴＲＰＶ４が機能的に発現している形質転換細胞（ＴＲＰＶ４発現細胞）と当該ロズマリン酸誘導体とを接触させた場合、ＴＲＰＶ４刺激物質による細胞内の陽イオン量の流入を抑制するという、ＴＲＰＶ４活性抑制作用を有する。
　したがって、本発明のロズマリン酸誘導体又はその塩は、ＴＲＰＶ４活性抑制剤となり、ＴＲＰＶ４活性抑制のため、或いはＴＲＰＶ４活性抑制剤を製造するために使用できる。
　前述のとおり、ＴＲＰＶ４は、膀胱内側の膀胱上皮細胞に存在する。尿が溜まって膀胱上皮細胞が伸展した場合、ＴＲＰＶ４チャネルを介して細胞内にカルシウムが取り込まれ、これによってＡＴＰが細胞表面から放出され、膀胱の膨らみが神経に伝達される。したがって、ＴＲＰＶ４の活性を抑制することにより、過活動膀胱を予防又は改善することができる。また、過敏性腸症候群患者の結腸においては、多価不飽和脂肪酸の代謝産物である５，６－ＥＥＴ（ＴＲＰＶ４アゴニスト）の量が多いこと、また当該５，６－ＥＥＴを含む結腸の破砕液をマウス結腸へ投与した場合に腸が過剰反応し、当該過剰反応はＴＲＰＶ４の発現を抑制することにより抑制されることが報告されている（前記非特許文献１）ことから、ＴＲＰＶ４活性を抑制することにより、過敏性腸症候群を予防又は改善することができる。
　したがって、本発明のロズマリン酸誘導体又はその塩は、過活動膀胱の予防又は改善剤、過敏性腸症候群の予防又は改善剤となり、過活動膀胱や過敏性腸症候群の予防又は改善のため、或いは過活動膀胱や過敏性腸症候群の予防又は改善剤を製造するために使用できる。
　本発明において「ＴＲＰＶ４」とは、「Transient receptor potential cation channel subfamily V member 4」を意味する。ＴＲＰＶ４は、ヒトにおいてＴＲＰＶ４遺伝子によってコードされているタンパク質である。
　また、「ＴＲＰＶ４の活性抑制」とは、受容体であるＴＲＰＶ４の活性を抑制することを指す。具体的には、ＴＲＰＶ４刺激物質がＴＲＰＶ４に結合することによって発現する活性、例えばイオン流束の調節能（例えば、細胞外から細胞内へのカルシウムイオン、ナトリウムイオンなどの陽イオンの輸送能など）、膜電位の調節能（例えば、電流の発生能など）を抑制又は阻害することを意味する。
　本発明において、「過活動膀胱」とは尿意切迫感を必須とした症状症候群であり、通常頻尿や切迫性尿失禁を伴うものを指す。また、「過敏性腸症候群」とは、主として大腸の運動および分泌機能の異常で起こる疾患の総称であり、細菌やウイルスの感染による腸炎や、潰瘍性大腸炎・大腸がん等の病気とは異なり、検査では異常が見当たらないが下痢や便秘を繰り返す症状が続く場合に診断される疾患を意味する。
　本発明において、ＴＲＰＶ４活性抑制のため、過活動膀胱或いは過敏性腸症候群の予防又は改善のための「使用」は、ヒトを含む動物への投与又は摂取であり得、また治療的使用であっても非治療的使用であってもよい。「非治療的」とは、医療行為を含まない概念、すなわち人間を手術、治療又は診断する方法を含まない概念、より具体的には医師又は医師の指示を受けた者が人間に対して手術、治療又は診断を実施する方法を含まない概念である。
　なお、本明細書において「予防」とは、個体における疾患若しくは症状の発症の防止若しくは遅延、又は個体の疾患若しくは症状の発症の危険性を低下させることをいう。また、「改善」とは、疾患、症状若しくは状態の好転、疾患、症状若しくは状態の悪化の防止若しくは遅延、又は疾患、症状若しくは状態の進行の逆転、防止若しくは遅延をいう。
　本発明のＴＲＰＶ４活性抑制剤、過活動膀胱若しくは過敏性腸症候群の予防又は改善剤は、ヒトを含む動物に摂取又は投与した場合に、ＴＲＰＶ４活性抑制効果、過活動膀胱或いは過敏性腸症候群の予防又は改善効果を発揮する医薬品、医薬部外品、サプリメント又は食品となり、或いはこれらへ配合するための素材又は製剤となり得る。
　また、本発明の食品には、一般飲食品のほか、必要に応じてその旨を表示した食品、機能性食品、病者用食品、特定保健用食品、機能性表示食品、サプリメントが包含される。
　本発明のロズマリン酸誘導体又はその塩を含む上記医薬品（医薬部外品を含む）は、任意の投与形態で投与され得るが、経口投与が好ましい。投与に際しては、有効成分を経口投与、直腸内投与、注射等の投与方法に適した固体又は液体の医薬用無毒性担体と混合して、慣用の医薬品製剤の形態で投与することができる。
　このような製剤としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤、凍結乾燥剤等が挙げられる。これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。また、必要に応じて、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤、賦形剤等の慣用の添加剤を適宜添加することもできる。
　また、本発明のロズマリン酸誘導体又はその塩を配合した上記食品の形態は、清涼飲料水、茶系飲料、コーヒー飲料、果汁飲料、炭酸飲料、ゼリー、ウエハース、ビスケット、パン、麺、ソーセージ等の飲食品や栄養食等の各種食品の他、さらには、上述した経口投与製剤と同様の形態（錠剤、カプセル剤、トローチ剤等の固形製剤）の栄養補給用組成物が挙げられる。なかでも、錠剤が好ましく、チュアブル錠がより好ましい。
　種々の形態の食品を調製するには、本発明のロズマリン酸誘導体又はその塩を単独で、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせて用いることができる。
　上記の医薬品（医薬部外品を含む）や食品中の本発明のロズマリン酸誘導体又はその塩の含有量は、その使用形態により異なるが、通常、好ましくは０．０１質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、更に好ましくは１質量％以上であり、また、好ましくは１００質量％以下、より好ましくは９０質量％以下、更に好ましくは７０質量％以下である。また、好ましくは０．０１～１００質量％、より好ましくは０．１～９０質量％、更に好ましくは１～７０質量％である。
　本発明のロズマリン酸誘導体又はその塩を医薬品や食品として、或いは医薬品や食品に配合して使用する場合のヒトへの投与量は、対象者の状態、体重、性別、年齢又はその他の要因に従って変動し得るが、経口投与の場合の成人１人当たりの１日の投与量は、通常、当該ロズマリン酸誘導体又はその塩として、好ましくは０．１ｍｇ以上、より好ましくは１ｍｇ以上、更に好ましくは１０ｍｇ以上であり、また、好ましくは２０００ｍｇ以下、より好ましくは５００ｍｇ以下、更に好ましくは２００ｍｇ以下である。また、好ましくは０．１～２０００ｍｇ、より好ましくは１～５００ｍｇ、更に好ましくは１０～２００ｍｇである。
　また、上記製剤は、任意の投与計画に従って投与され得るが、１日１回～数回に分け、数週間～数ヶ月間継続して投与することが好ましい。
　投与又は摂取対象としては、ＴＲＰＶ４活性抑制、過活動膀胱、過敏性腸症候群の予防又は改善を必要とする若しくは希望するヒトを含む動物であれば特に限定されないが、過活動膀胱又は尿意切迫感及び切迫性尿失禁等の排尿障害などの症状を呈するヒト、ストレス等により下痢や便秘、腹痛、ガス過多による下腹部の張りなどの症状を呈するヒトへの投与又は摂取が有効である。
　上述した実施形態に関し、本発明においては以下の態様が開示される。
＜１＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とするＴＲＰＶ４活性抑制剤。
＜２＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過活動膀胱の予防又は改善剤。
＜３＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過敏性腸症候群の予防又は改善剤。
＜４＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とするＴＲＰＶ４活性抑制用食品。
＜５＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過活動膀胱の予防又は改善用食品。
＜６＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過敏性腸症候群の予防又は改善用食品。
＜７＞下記式（Ｉａ）又は（Ｉｂ）で表されるロズマリン酸誘導体又はその塩。
＜８＞ＴＲＰＶ４活性抑制剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
＜９＞過活動膀胱の予防又は改善剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
＜１０＞過敏性腸症候群の予防又は改善剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
＜１１＞ＴＲＰＶ４活性抑制用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
＜１２＞過活動膀胱の予防又は改善用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
＜１３＞過敏性腸症候群の予防又は改善用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
＜１４＞ＴＲＰＶ４活性の抑制に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
＜１５＞過活動膀胱の予防又は改善に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
＜１６＞過敏性腸症候群の予防又は改善に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
＜１７＞ＴＲＰＶ４活性を抑制するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
＜１８＞過活動膀胱を予防又は改善するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
＜１９＞過敏性腸症候群を予防又は改善するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
＜２０＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取するＴＲＰＶ４活性抑制方法。
＜２１＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取する過活動膀胱の予防又は改善方法。
＜２２＞下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取する過敏性腸症候群の予防又は改善方法。
＜２３＞＜１＞及び＜８＞のＴＲＰＶ４活性抑制剤、＜２＞及び＜９＞の過活動膀胱の予防又は改善剤、＜３＞及び＜１０＞の過敏性腸症候群の予防又は改善剤、＜４＞及び＜１１＞のＴＲＰＶ４活性抑制用食品、＜５＞及び＜１２＞の過活動膀胱の予防又は改善用食品、＜６＞及び＜１３＞の過敏性腸症候群の予防又は改善用食品における、前記有効成分の含有量は、総量中好ましくは０．０１質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、更に好ましくは１質量％以上であり、また、好ましくは１００質量％以下、より好ましくは９０質量％以下、更に好ましくは７０質量％以下であるか、又は好ましくは０．０１～１００質量％、より好ましくは０．１～９０質量％、更に好ましくは１～７０質量％である。
＜２４＞＜１４＞～＜２３＞において、成人１人当たりの１日の投与量は、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）で表されるロズマリン酸誘導体又はその塩として、好ましくは０．１ｍｇ以上、より好ましくは１ｍｇ以上、更に好ましくは１０ｍｇ以上であり、また、好ましくは２０００ｍｇ以下、より好ましくは５００ｍｇ以下、更に好ましくは２００ｍｇ以下であるか、又は好ましくは０．１～２０００ｍｇ、より好ましくは１～５００ｍｇ、更に好ましくは１０～２００ｍｇである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000030
　以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
＜試薬＞
　フェルラ酸、イソフェルラ酸、イソバニリン、Ｎ－アセチルグリシン、３，４－ジメトキシベンズアルデヒド、３，４－ジメトキシけい皮酸、カフェ酸は東京化成工業株式会社より購入して用いた。臭化アリル（Ａｌｌｙｌ－Ｂｒ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、テトラブチルアンモニウムヨージド（ＴＢＡＩ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（[Ｐｄ（ＰＰｈ３）４]）、モルホリン、３，４－ジヒドロキシベンズアルデヒド、水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）、炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）、１，４－ジオキサン、ジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）は富士フィルム和光純薬株式会社より購入して用いた。１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）は株式会社同仁化学研究所より購入して用いた。酢酸ナトリウム（ＮａＯＡｃ）はシグマアルドリッチジャパン合同会社より購入して用いた。無水酢酸（Ａｃ２Ｏ）、塩酸、水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４）、ぎ酸、メタノール（ＭｅＯＨ）、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、クロロホルム（ＣＨＣｌ３）は関東化学株式会社より購入して用いた。
製造例１　４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉａ）の合成１）化合物１の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000031
　３００ｍＬナスフラスコにイソバニリン（１５．２２ｇ、１００ｍｍｏｌ）とＮ－アセチルグリシン（１５．２２ｇ、１３０ｍｍｏｌ）、無水酢酸（５０ｍＬ）を加えた後、酢酸ナトリウム（１０．６６ｇ、１３０ｍｍｏｌ）を加え、１２０℃加熱下２日間攪拌した。室温まで冷やした後、酢酸エチル（３００ｍＬ）にて希釈、不溶物をろ紙を用いてろ過した。得られた溶液を、イオン交換水、飽和食塩水（各２００ｍＬ）にて２回ずつ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（２：１、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１（１４．５４ｇ、５２．８ｍｍｏｌ、５３％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ （６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．８１（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５（ｓ、１Ｈ）、７．００（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ)、２．３９（ｓ、３Ｈ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）.１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６８．８４、１６７．９６、１６５．３８、１５３．６７、１３９．９２、１３２．２２、１３１．２０、１３０．４１、１２６．４０、１２６．１７、１１２．１４、５６．０６、２０．７０、１５．６７．
２）化合物２の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000032
　３００ｍＬナスフラスコに化合物１（３．８５ｇ、１３．９９ｍｍｏｌ）を加えた後、１，４－ジオキサン（７０ｍＬ）、３ｍｏｌ／Ｌ塩酸（７０ｍＬ）を順次加え、９０℃加熱下、６時間攪拌した。室温まで冷やした後、酢酸エチルで希釈、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸、飽和食塩水（各２００ｍＬ）で２回ずつ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロホルム－メタノール（９０：１０→６０：４０、ｖ／ｖ））により精製した。得られた目的物（３．１２ｇ）は、粗精製物として、次の反応に用いた。
３）化合物３の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000033
　２００ｍＬナスフラスコに化合物２（１．５８ｇ、７．５ｍｍｏｌ）と２５体積％メタノール／イオン交換水（８０ｍＬ）を加え懸濁させた後、氷浴で冷却した。続いて１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（８ｍＬ）を加え、澄明な溶液を得た。この時、溶液のｐＨは１２．０であった。水素化ホウ素ナトリウム（０．４３ｇ、１１．２５ｍｍｏｌ）を加えた後、氷浴を除去し、室温にて１７時間攪拌した。攪拌後、氷浴での冷却下３ｍｏｌ／Ｌ塩酸（３０ｍＬ）を加え、反応溶液を酸性化することで反応を停止した。引き続き、酢酸エチル（１００ｍＬ）にて３回抽出、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各１００ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（９５：５→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製した。得られた目的物（１．０５ｇ）は、粗精製物として、次の反応に用いた。
４）化合物４の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000034
　２００ｍＬナスフラスコに、化合物３（９７２．２ｍｇ、４．５８ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムヨージド（５０６．０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を加えた後、アセトン（５０ｍＬ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、炭酸カリウム（１．９０ｇ、１３．７４ｍｍｏｌ）と臭化アリル（１．６６ｇ、１３．７４ｍｍｏｌ）を順次加え、５０℃加熱下１６時間攪拌した。その後室温まで冷却し、アセトン（１００ｍＬ）により希釈し、不溶物をろ過した後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去し反応残渣（１．７８ｇ）を得た。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（８０：２０→５０：５０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物４（９５２．３ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌ、５０％（３工程））を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　６．８０（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．７５（ｍ、２Ｈ）、６．０７（ｍ、１Ｈ）、５．９０（ｍ、１Ｈ）、５．３９（ｄｄ,Ｊ＝１７．２、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．３４（ｄｄ、Ｊ＝１７．２、１．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．２９（ｄｄ、Ｊ＝１０．５、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．２８（ｄｄ、Ｊ＝１０．６、１．３Hz、１Ｈ）、４．６５（ｍ、２Ｈ）、４．５９（ｍ、２Ｈ）、４．４４(ｄｔ、Ｊ＝６．４、４．４Ｈｚ、１Ｈ)、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．０７（ｄｄ,Ｊ＝１４．０、４．５Ｈｚ、１Ｈ）、２．９２（ｄｄ、Ｊ＝１４.１、６．５Ｈｚ、１Ｈ）、２．７２（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ）.１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１７３．８３、１４８．４７、１４７．７４、１３３．３０、１３１．４１、１２８．５０、１２２．０１、１１９．２５、１１８．０３、１１４．８６、１１１．５２、７１．３２、６９．８２、６６．２５、５５．９４、４０．０１.
５）化合物５の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000035
　２００ｍＬナスフラスコに、フェルラ酸（０．９７ｇ、５．００ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウムヨージド（０．５９ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を加えた後、アセトン（５０ｍＬ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、炭酸カリウム（２．１３ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）、臭化アリル（３．０８ｇ、２５．４１ｍｍｏｌ）を加え、５０℃加熱下で７時間攪拌した。攪拌後吸引ろ過を行い、不要物を除去した。得られた溶液を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各１００ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（９５：５→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物５（１．１０ｇ、４．０１ｍｍｏｌ、８０％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７.６５（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．０７（ｍ、２Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．３４（ｄ、Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．０８（ｍ、１Ｈ）、６．００（ｍ、１Ｈ）、５．４２（ｄｄ、Ｊ＝１７．３、１.４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３８（ｄｄ、Ｊ＝１７．３、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．３１（ｄｄ、Ｊ＝１０．５、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．２７（ｄｄ、Ｊ＝１１．５、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．７０（ｍ、２Ｈ）、４．６５（ｍ、２Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）．
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６６．８６、１５０．１２、１４９．５０、１４４．９９、１３２．７３、１３２．３９、１２７．５１、１２２．４７、１１８．４８、１１８．２３、１１５．５７、１１２．７６、１０９.９３、６９．７３、６５．１２、５５．１２.
６）化合物６の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000036
　１００ｍＬナスフラスコに化合物５（８２９．５ｍｇ、３．０２ｍｍｏｌ）を入れた後、テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）、メタノール（２０ｍＬ）、１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を加え、室温で１５時間攪拌した。その後酢酸エチルを加えた後、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（２０ｍＬ）で２回ずつ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（１００：０→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物６（６７８．５ｍｇ、２．９０ｍｍｏｌ、９７％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）　δ　１２．２５（ｂｒ　ｓ、１Ｈ）、７．５２（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、Ｊ ＝１．９ Ｈｚ、１Ｈ）、７．１８（ｄｄ、Ｊ ＝８．３、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．９８（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．４５（ｄ、Ｊ ＝１６．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．０４（ｍ、１Ｈ）、５．４０（ｄｄ、Ｊ＝１７．３、１．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．２７（ｄｄ、Ｊ＝１０．４、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．６０（ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ).
１３Ｃ－ＮＭＲ （１５０ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ－ｄ６）　δ　１６８．３９、１５０．００、１４９．６０、１４４．５６、１３３．９８、１２７．７２、１２２．９７、１１８．３０、１１７．３０、１１３．３６、１１０．９８、６９．２６、５６．０８.
７）化合物７の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000037
　５０ｍＬナスフラスコに、化合物４（２１７．２ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１０ｍＬ）、４－ジメチルアミノピリジン（１８７．１ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、化合物６（２３４．３ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）を添加した後、氷浴を用いて冷却しつつ、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２８７．６ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１８時間攪拌した。攪拌後、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各５０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（９０：１０→５０：５０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物７（３０８．４ｍｇ、０．６０６ｍｍｏｌ、８１％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．６４（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｍ、２Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｍ、３Ｈ）、６．３３（ｄ、Ｊ＝１６．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．０６（ｍ、２Ｈ）、５．８６（ｍ、１Ｈ）、５．４２（ｄｄ、Ｊ＝１７．２、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３４（ｍ、４Ｈ）、５．２５（ｄｄ、Ｊ＝１０．５、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．２４（ｄｄ、Ｊ＝１０．５、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．６５（ｍ、４Ｈ）、４．５８（ｍ、２Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．１８（ｄｄ、Ｊ＝１４．５、４．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．１３（ｄｄ,Ｊ＝１４．４、８．４Ｈｚ、１Ｈ）.
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６９．６４、１６６．３６、１５０．３４、１４９．５２、１４８．５１、１４７．７６、１４６．０２、１３３．２２、１３２．６７、１３１．４８、１２８．２６、１２７．３１、１２２．７９、１２１．８９、１１８．８３、１１８.５３、１１８．０５、１１４．７１、１１４．６６、１１２．７１、１１１．５５、１０９．９２、７３．０２、６９．８８、６９．７３、６５．９６、５５．９５、５５．９４、３７．０８.
８）４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉａ）の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000038
　３０ｍＬナスフラスコに化合物７（９０．２ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）、モルホリン（５４２．３ｍｇ、６．２３ｍｍｏｌ）を加え、氷浴を用いて冷却しつつ攪拌し、澄明な溶液を得た。続いて、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（４８．５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を加え、室温下２４時間攪拌した。その後、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（４７．６ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を加え、室温下２時間攪拌した。更にその後、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（４５．８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加え、室温下２４時間攪拌した。続いて、氷浴下酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した後に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各３０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（１００：０→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉａ、９０．２ｍｇ、０．２４１ｍｍｏｌ、５７％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）　δ　７．６４（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．１１（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．０９（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．９７（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．８３（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄｄ、Ｊ＝８．２、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．３８（ｄ、Ｊ＝１６．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．２３（ｄｄ、Ｊ＝８．５、４．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．８３（ｓ、３Ｈ）、３．１５（ｄｄ、Ｊ＝１４．４、４．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．０６（ｄｄ、Ｊ＝１４．４、８．５Ｈｚ、１Ｈ）.
製造例２　４，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｂ）の合成１）化合物８の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000039
　アルゴン雰囲気下、イソフェルラ酸（１．５０ｇ、７．７２ｍｍｏｌ）にテトラヒドロフラン７ｍＬを加えた。さらに、５５％水素化ナトリウム（１．０１ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）、臭化アリル（１６．８ｍＬ、１３９ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＩ（２８５ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を順次加え、７０℃加熱環流条件下、２４時間撹拌した。その後、反応系に８ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液１６ｍＬおよびイオン交換水１００ｍＬを加え、クロロホルム １００ｍＬで３回抽出した。無水硫酸ナトリウムを用いて有機層を乾燥させた後、溶媒を減圧留去した。得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（８５：１５，ｖ/ｖ））、化合物８　１．８８ｇ（８９％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．６４（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．１１（ｄｄ、Ｊ＝８．３、２．１Ｈｚ、１Ｈ），７．０６（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．３０（ｄ、Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．０９（ｄｄｄ、Ｊ＝２２．６、１０．８、５．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．００（ｄｄｄ，Ｊ＝２２．７、１０．８、５．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．４０（ｄｄｄｄ、Ｊ＝３１．２、１７．１、２．８、１．７Ｈｚ、２Ｈ）、５．３０（ｄｄｄｄ、Ｊ＝２７．０、１０．３、２．５、１．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．７１（ｄｔ、Ｊ＝５．５、１．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．６４（ｄｔ、Ｊ＝５．３、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ，３Ｈ）.
２）化合物９の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000040
　アルゴン雰囲気下、化合物８（１．８８ｇ、６．８６ｍｍｏｌ）に１，４－ジオキサン３４ｍＬおよび０．４ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液３４ｍＬを加え、５０℃、７時間撹拌した。その後、反応系にイオン交換水１００ｍＬを加え、クロロホルム１００ｍＬで２回洗浄した。さらに、水層に１．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸水溶液を１０ｍＬ加えた後、クロロホルム１００ｍＬで３回抽出した。無水硫酸ナトリウムを用いて有機層を乾燥させた後、溶媒を減圧留去し、化合物９　１．４０ｇ（８４％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）　δ　７．７１（ｄ，Ｊ＝１５.８Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｄ，Ｊ＝１５．８Ｈｚ，１Ｈ），６．０９（ｄｄｄ，Ｊ＝２２．６，１０．５，５．３Ｈｚ，１Ｈ），５．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝１７．３，３．０，１．５Ｈｚ，１Ｈ），５．３３（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．５，２．６，１．１Ｈｚ，１Ｈ），４.６５（ｄｔ，Ｊ＝５．７，１．６Ｈｚ，２Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ）.
３）化合物１０の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000041
　５０ｍＬナスフラスコに、化合物４（１６１．９ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１０ｍＬ）、４－ジメチルアミノピリジン（１８４．８ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、化合物９（２３４．３ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）を添加した後、氷浴を用いて冷却しつつ、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２８７．６ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１８時間攪拌した。攪拌後、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各５０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（９０：１０→５０：５０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１０（２８２．５ｍｇ、０．５５５ｍｍｏｌ、７４％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．６３（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．１０（ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｍ、３Ｈ）、６．３０（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．０８（ｍ、２Ｈ）、５．８６（ｍ、１Ｈ）、５．４２（ｄｄ、Ｊ＝１７．３、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．３５（ｍ、３Ｈ）、５．３０（ｄｄ、Ｊ＝１０．７、１．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．２５（ｄｄ、Ｊ＝１０．５、１.３Ｈｚ、１Ｈ）、５．２４（ｄｄ、Ｊ＝１０．２、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．６４（ｍ、４Ｈ）、４．５９（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．１８（ｄｄ、Ｊ＝１４．３、４．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．１３（ｄｄ、Ｊ＝１４．４、８．４Ｈｚ、１Ｈ）.
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６９．６４、１６６．３８、１５１．７８、１４８．５０、１４８．１４、１４７．７６、１４６．０３、１３３．２１、１３２．８３、１３１．４８、１２８．２８、１２７．０１、１２３．１８、１２１．８９、１１８．８２、１１８.４３、１１８．０６、１１４．７１、１１４．５６、１１１．７９、１１１．５５、１１１．２９、７３．０３、６９．８７、６５．９５、５６．０１、５５．９４、３７．０７.
４）４、４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｂ）の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000042
　３０ｍＬナスフラスコに化合物１０（１０１．７ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）、モルホリン（５４２．３ｍｇ、６．２３ｍｍｏｌ）を加え、氷浴を用いて冷却しつつ攪拌し、澄明な溶液を得た。続いて、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（５０．１ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を加え、室温下２４時間攪拌した。その後、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（４５．７ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加え、室温下２時間攪拌した。更にその後、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（４５．８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加え、室温下２４時間攪拌した。続いて、氷浴下酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した後に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各３０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（１００：０→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、４、４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（化合物Ｉｂ、７３．９ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ、９９％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）　δ　７．５９（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．０８（ｍ、２Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄｄ、Ｊ＝７．９、２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．３３（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、５.２２（ｄｄ、Ｊ＝８．５、４．４ Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、３．１５（ｄｄ、Ｊ＝１４．３、４．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．０５（ｄｄ、Ｊ＝１４．３、８．４Ｈｚ、１Ｈ）.
製造例３　３，４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｃ）の合成１）化合物１１の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000043
　３００ｍＬナスフラスコにイソバニリン（１６．６２ｇ、１００ｍｍｏｌ）とＮ－アセチルグリシン（２２．２５ｇ、１９０ｍｍｏｌ）、無水酢酸（７０ｍＬ）を加えた後、酢酸ナトリウム（１０．６６ｇ、１３０ｍｍｏｌ）を加え、１２０℃加熱下２日間攪拌した。室温まで冷やした後、酢酸エチル（３００ｍＬ）にて希釈、不溶物をろ紙を用いてろ過した。得られた溶液を、イオン交換水、飽和食塩水（各２００ｍＬ）にて２回ずつ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（２：１、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１１（７．７３ｇ、３１．３ｍｍｏｌ、３１％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．９４（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７.５１（ｄｄ、Ｊ＝８．５、２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．１２（ｓ、１Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．９６（ｓ、３Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、２．４２（ｓ、３Ｈ）.
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６８．１８、１６４．９０、１５１．９１、１４９．１０、１３１．７０、１３０．５０、１２７．３６、１２６．４４、１１３．７８、１１０．８３、５６．０１、５５．９５、１５．７４.２）化合物１２の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000044
　３００ｍＬナスフラスコに化合物１１（３．９２ｇ、１５．８５ｍｍｏｌ）を加えた後、１，４－ジオキサン（５０ｍＬ）、３ｍｏｌ／Ｌ塩酸（５０ｍＬ）を順次加え、９０℃加熱下、６時間攪拌した。室温まで冷やした後、酢酸エチルで希釈、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸、飽和食塩水（各２００ｍＬ）で２回ずつ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロホルム－メタノール（９０：１０→６０：４０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１２（３．５９ｇ）を定量的に得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）　δ　７．５９（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．２８（ｄｄ、Ｊ＝８．３、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．９４（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．４６（ｓ、１Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）.
１３Ｃ－ＮＭＲ （１５０ ＭＨｚ, ＣＤ３ＯＤ）　δ　１６７．２３、１４８．６１、１４８．５８、１３９．６０、１２８．３７、１２２．９９、１１２．８２、１１１．０６、１１０．２５、５４．９２、５４．９０.
３）化合物１３の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000045
　２００ｍＬナスフラスコに化合物１２（１．５７ｇ、７．０ｍｍｏｌ）と２５体積％メタノール／イオン交換水（６０ｍＬ）を加え懸濁させた後、氷浴で冷却した。続いて１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（６ｍＬ）を加え、澄明な溶液を得た。この時、溶液のｐＨは１２．０であった。水素化ホウ素ナトリウム（０．４０ｇ、１０．５０ｍｍｏｌ）を加えた後、氷浴を除去し、室温にて１７時間攪拌した。攪拌後、氷浴での冷却下３ｍｏｌ／Ｌ塩酸（３０ｍＬ）を加え、反応溶液を酸性化することで反応を停止した。引き続き、酢酸エチル（１００ｍＬ）にて３回抽出、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各１００ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（９５：５→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１３（１．１０ｇ、６９％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）　δ　６．９０（ｄ、Ｊ＝１．９ Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄｄ、Ｊ＝８．２、２．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．３３（ｄｄ、Ｊ＝７．４、４．７ Ｈｚ、１Ｈ）、３．８３（ｓ、３Ｈ）、３．８１（ｓ、３Ｈ）、３．０５（ｄｄ、Ｊ＝１４．０、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．８７（ｄｄ、Ｊ＝１４．０、７．８　Ｈｚ、１Ｈ）．
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）　δ　１７５．７７、１４８．７２、１４７．８０、１３０．３０、１２１．５８、１１３．１２、１１１．４６、７１．４６、５５．０７、５４.９３、３９．７６.
４）化合物１４の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000046
　２００ｍＬナスフラスコに、化合物１３（７６６．５ｍｇ、３．３９ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムヨージド（３７３．１ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を加えた後、アセトン（４０ｍＬ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、炭酸カリウム（１．４０ｇ、１０．１６ｍｍｏｌ）と臭化アリル（２．０５ｇ、１６．９４ｍｍｏｌ）を順次加え、５０℃加熱下１６時間攪拌した。その後室温まで冷却し、アセトン（１００ｍＬ）により希釈し、不溶物をろ過した後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去し反応残渣（１．７８ｇ）を得た。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（８０：２０→５０：５０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１４（９４６．６ｍｇ、３．５５ｍｍｏｌ）を定量的に得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　６．７９（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｍ、２Ｈ）、５．９１（ｍ、１Ｈ）、５．３６（ｄｄ、Ｊ＝１７．２Ｈｚ、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．２９（ｄｄ、Ｊ＝１０．６Ｈｚ、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．６６（ｍ、２Ｈ）、４．４５（ｍ、１Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．０９（ｄｄ、Ｊ＝１４．０Ｈｚ、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、２．９４（ｄｄ、Ｊ＝１４．０Ｈｚ、６．６Ｈｚ、１Ｈ）、２．７５（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ）．
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１７３．８６、１４８．７６、１４８．００、１３１．４０、１２８．６５、１２１．５８、１１９．２６、１１２．６８、１１１．０８、７１．３４、６６．２５、５５．８７、５５．８２、４０．０８.
５）化合物１５の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000047
　２００ｍＬナスフラスコに、カフェ酸（１．８０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウムヨージド（０．７４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を加えた後、アセトン（１００ｍＬ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、炭酸カリウム（６．９１ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）、臭化アリル（６．０６ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）を加え、５０℃加熱下で１６時間攪拌した。攪拌後吸引ろ過を行い、不要物を除去した。得られた溶液を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各１００ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（９５：５→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１５（１．７７ｇ、５８．９ｍｍｏｌ、５９％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．６３（ｄ、Ｊ＝１６．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０９（ｍ、２Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．３０（ｄ、Ｊ＝１６．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．０７（ｍ、２Ｈ）、５．９８（ｍ、１Ｈ）、５．４３（ｍ、２Ｈ）、５．３７（ｄｄ、Ｊ＝１７．３、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．３０（ｍ、２Ｈ）、５．２７（ｄｄ、Ｊ＝１０．３、１.２Ｈｚ、１Ｈ）、４．７０（ｍ、２Ｈ）、４．６３（ｍ、４Ｈ）.
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６６．８５、１５０．６２、１４８．４９、１４４．９４、１３３．０４、１３２．８５、１３２．３７、１２７．４６、１２２．７２、１１８．２２、１１８．０３、１１７．９６、１１５．５４、１１３．３０、１１２．５０、６９.９０、６９．６９、６５．１０.
６）化合物１６の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000048
　１００ｍＬナスフラスコに化合物１５（１．２１ｇ、４．０３ｍｍｏｌ）を入れた後、テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）、メタノール（１０ｍＬ）と１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を加え、室温で１５時間攪拌した。その後酢酸エチルを加えた後、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各２０ｍＬ）で２回ずつ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（１００：０→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１６（１．１０ｇ）を定量的に得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）　δ　１２．２５（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．２０（ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．４３（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．０５（ｍ、２Ｈ）、５．４２（ｍ、２Ｈ）、５．２７（ｍ、２Ｈ）、４．６２（ｍ、４Ｈ）.
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ,ＤＭＳＯ－ｄ６）　δ　１６８．３６、１５０．２８、１４８．４０、１４４．５１、１３４．２６、１３４．０１、１２７．６８、１２３．２１、１１８．００、１１７．８９、１１７．３２、１１３．７４、１１２．６９、６９．３３、６９．２１.
７）化合物１７の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000049
　５０ｍＬナスフラスコに、化合物１４（２０２．１ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１０ｍＬ）、４－ジメチルアミノピリジン（１８４．４ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、化合物１６（２３４．９ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）を添加した後、氷浴を用いて冷却しつつ、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２９０．９ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１８時間攪拌した。攪拌後、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各５０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（９０：１０→５０：５０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１７（３８４．４ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ、１００％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．６２（ｄ、Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｍ、２Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８０（ｍ、３Ｈ）、６．３０（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．０７（ｍ、２Ｈ）、５．８８（ｍ、１Ｈ）、５．４２（ｍ、２Ｈ）、５．３４（ｍ、１Ｈ）、５．３０（ｍ、３Ｈ）、５．２４（ｍ、１Ｈ）、４．６４（ｍ、６Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．２０（ｄｄ、Ｊ＝１４．３、４．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．１５（ｄｄ、Ｊ＝１４．４、８．４Ｈｚ、１Ｈ）.
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６９．６５、１６６．３７、１５０．８７、１４８．７７、１４８.５１、１４８．０５、１４６．００、１３３．０２、１３２．８２、１３１．４７、１２８．３６、１２７．２７、１２３．０２、１２１．４９、１１８．８４、１１８．０９、１１８．００、１１４．６４、１１３．２６、１１２．５７、１１２．４８、１１１．１２、７３．０４、６９．９５、６９．７０、６５．９５、５５．８７、５５．８６、３７．１５.
８）３、４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｃ）の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000050
　３０ｍＬナスフラスコに化合物１７（９９．９ｍｇ、０．１９６ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）、モルホリン（５２２．６ｍｇ、６．００ｍｍｏｌ）を加え、氷浴を用いて冷却しつつ攪拌し、澄明な溶液を得た。続いて、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（４６．８ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を加え、室温下２４時間攪拌した。その後、氷浴下酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した後に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各３０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（１００：０→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、３、４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（化合物Ｉｃ、５６．５ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ、７７％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）　δ　７．４５（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．９３（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．８３（ｍ、２Ｈ）、６．７８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４（ｄｄ、Ｊ＝８．１、２．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．６８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．１６（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄｄ、Ｊ＝８．５、４．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．１０（ｄｄ、Ｊ＝１４．３、４．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．０１（ｄｄ、Ｊ＝１４．３、８．７Ｈｚ、１Ｈ）．
製造例４　３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｄ）の合成１）化合物１８の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000051
　２００ｍＬナスフラスコに３，４－ジヒドロキシベンズアルデヒド（６．９１ｇ、５０ｍｍｏｌ）とＮ－アセチルグリシン（７．６１ｇ、６５ｍｍｏｌ）、無水酢酸（５０ｍＬ）を加えた後、酢酸ナトリウム（５．３３ｇ、６５ｍｍｏｌ）を加え、１２０℃加熱下１６時間攪拌した。室温まで冷やした後、酢酸エチル（３００ｍＬ）にて希釈、不溶物をろ紙を用いてろ過した。得られた溶液を、イオン交換水、飽和食塩水（各２００ｍＬ）にて２回ずつ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（２：１、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１８（９．７８ｇ、３７．４ｍｍｏｌ、７５％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　８．０６（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｄ、Ｊ＝８．０、２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｓ、１Ｈ）、２．４０（ｓ、３Ｈ）、２．３２（ｓ、３Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）．
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６８．０５、１６７．８０、１６７．４６、１６６．７１、１４４．１６、１４２．３３、１３３．２４、１３１．８４、１３０．７１、１２９．１２、１２６．７０、１２３．８１、２０．６８、２０．６２、１５．６８．
２）化合物１９の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000052
　３００ｍＬナスフラスコに化合物１８（１．４２ｇ、７．２ｍｍｏｌ）とメタノール（５０ｍＬ）とテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）を添加し、室温で攪拌し、澄明な溶液を得た。本溶液に炭酸カリウム（２．９０ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）を入れ、１時間攪拌した。続いて、臭化アリル（３．３９ｇ、２８．０ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウムヨージド（０．７７ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）をいれ、９０℃加熱下で４時間攪拌した。その後、得られた溶液を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各１００ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（７０：３０→３０：７０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物１９（７０８．２ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ、３４％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．０７（ｍ、２Ｈ）、６．９０（ｍ、２Ｈ）、６．０７（ｍ、２Ｈ）、５．４０（ｍ、２Ｈ）、５．３１（ｍ、２Ｈ）、４．６２（ｍ、４Ｈ）、２．１６（ｓ、３Ｈ）．
３）化合物２０の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000053
　１００ｍＬナスフラスコに化合物１９（６８０．０ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）を加えた後、１，４－ジオキサン（２５ｍＬ）、３ｍｏｌ／Ｌ塩酸（２５ｍＬ）を順次加え、９０℃加熱下、６時間攪拌した。室温まで冷やした後、酢酸エチルで希釈、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸、飽和食塩水（各１００ｍＬ）で２回ずつ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（９０：１０→８０：２０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物２０（４６６．５ｍｇ）を得た。得られた化合物２０は、粗精製物として、次の反応に用いた。
４）化合物２１の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000054
　１００ｍＬナスフラスコに化合物２０（３６６．５ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）と２５％メタノール／イオン交換水（２０ｍＬ）を加え懸濁させた後、氷浴で冷却した。続いて１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（２ｍＬ）を加え、澄明な溶液を得た。この時、溶液のｐＨは１２．０であった。水素化ホウ素ナトリウム（７５．７ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）を加えた後、氷浴を除去し、室温にて１７時間攪拌した。攪拌後、氷浴での冷却下３ｍｏｌ／Ｌ塩酸（１０ｍＬ）を加え、反応溶液を酸性化することで反応を停止した。引き続き、酢酸エチル（３０ｍＬ）にて３回抽出、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各３０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（１００：０→７０：３０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物２４（２５０．４ｍｇ）を得た。得られた化合物２１は、粗精製物として、次の反応に用いた。
５）化合物２２の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000055
　２００ｍＬナスフラスコに、化合物２１（２４２．４ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムヨージド（６２．８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加えた後、アセトン（３０ｍＬ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、炭酸カリウム（３６０．７ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）と臭化アリル（３１５．８ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）を順次加え、５０℃加熱下２時間攪拌した。その後室温まで冷却し、酢酸エチル（１００ｍＬ）により希釈し、得られた有機層を１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各３０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去し、反応残渣（３８９．５ｍｇ）を得た。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（８０：２０→５０：５０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物２２（２０３．６ｍｇ、３７％（３工程））を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　６．８１（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．７８（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．７３（ｄｄ、Ｊ＝８．２、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．０７（ｍ、２Ｈ）、５．９０（ｍ、１Ｈ）、５．３９（ｍ、２Ｈ）、５．２９（ｍ、４Ｈ）、４．６５（ｄ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、４．５８（ｍ、４Ｈ）、４．４３（ｄｄ、Ｊ＝１０．８、６．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．０５（ｄｄ、Ｊ＝１４．１、４．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９１（ｄｄ、Ｊ＝１４．１、６．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．６９（ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、１Ｈ）．
６）化合物２３の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000056
　５０ｍＬナスフラスコに、化合物２２（１９２．４ｍｇ、０．６０４ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１５ｍＬ）、４－ジメチルアミノピリジン（２２６．５ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）を加え攪拌し、澄明な溶液を得た。引き続き、３，４－ジメトキシけい皮酸（２４９．８ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）を添加した後、氷浴を用いて冷却しつつ、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（３４７．６ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３時間攪拌した。攪拌後、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各５０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ－ヘキサン－酢酸エチル（９０：１０→６０：４０、ｖ／ｖ））により精製し、化合物２３（２８８．２ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ、９４％）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　７．６４（ｄ、Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０９（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０４（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．８４（ｍ、２Ｈ）、６．７９（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．３３（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．０６（ｍ、２Ｈ）、５．８６（ｍ、１Ｈ）、５．３１（ｍ、７Ｈ）、４．６４（ｍ、２Ｈ）、４．５７（ｍ、４Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．１７（ｄｄ、Ｊ＝１４．４、４．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．１２（ｄｄ、Ｊ＝１４．４、８．５Ｈｚ、１Ｈ）．
１３Ｃ－ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）　δ　１６９．６１、１６６．３３、１５１．４３、１４９．２９、１４８．４４、１４７．７３、１４５．９９、１３３．５６、１３３．４４、１３１．５１、１２８．９０、１２７．２２、１２２．９６、１２２．０３、１１８．７６、１１７．５６、１１７．５１、１１５．６９、１１４．６９、１１４．２９、１１１．０７、１０９．７２、７２．９９、７０．０８、７０．０５、６５．９１、５６．００、５５．９４、３７．０９.
７）３’、４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸Ｉｄ）の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000057
　５０ｍＬナスフラスコに化合物２３（１０１．７ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）、モルホリン（５２２．６ｍｇ、６．００ｍｍｏｌ）を加え、氷浴を用いて冷却しつつ攪拌し、澄明な溶液を得た。続いて、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）錯体（４６．６ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を加え、室温下２４時間攪拌した。その後、氷浴下酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した後に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と飽和食塩水（各３０ｍＬ）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、エバポレーターにて溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０．１体積％ぎ酸／クロロホルム－メタノール（１００：０→９０：１０、ｖ／ｖ））により精製し、３’、４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（化合物Ｉｄ、８７．２ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）　δ　７．５２（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．１１（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．０８（ｄｄ、Ｊ＝８．３、２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．６７（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．６１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．５３（ｄｄ、Ｊ＝８．０、２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．３１（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．０９（ｄｄ、Ｊ＝８．７、４．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）、３．７７（ｓ、３Ｈ）、３．０１（ｄｄ、Ｊ＝１４．４、４．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．９１（ｄｄ，Ｊ＝１４．４、８．８Ｈｚ、１Ｈ）．
試験例１　ＴＲＰＶ４活性抑制作用の評価
（１）試薬
　ヒト十二指腸由来細胞（Ｈｕｔｕ－８０細胞）、ヒト子宮頸癌由来細胞株（ＨｅＬａ細胞）はＡｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎより、Ｈｉｇｈ　Ｐｕｒｅ　ＰＣＲ　Ｐｒｏｄｕｃｔ　Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｋｉｔはロッシュより、ｐｃＤＮＡ３．１　Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ　ＴＯＰＯ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ｋｉｔ、ＤＭＥＭ／Ｆ１２培地はインビトロジェンより、ＴｒａｎｓＩＴ－ＨｅＬａＭＯＮＳＴＥＲ　Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ＫｉｔはＭｉｒｕｓより、ＤｅｔａｃｈｉｎはＧｅｎｌａｎｔｉｓより、９６ｗｅｌｌ　Ｏｐｔｉｃａｌ　ｂｏｔｔｏｍ　ｐｌａｔｅはＮｕｎｃより、Ｃａｌｃｉｕｍ　Ｋｉｔ　ＩＩ　－　ｆｌｕｏ　４はＤＯＪＩＮＤＯより、Ｈａｎｋｓ’ｂａｌａｎｃｅｄ　ｓａｌｔ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ、牛胎児血清はＧｉｂｃｏより、ＧＳＫ１０１６７９０ａはＳｉｇｍａ　Ａｌｄｒｉｃｈより、５ｘ　ＰｒｉｍｅＳＴＡＲ　ＧＸＬ　Ｂｕｆｆｅｒ、ｄＮＴＰｓ　ｍｉｘｔｕｒｅ、ＰｒｉｍｅＳＴＡＲ　ＧＸＬ　ＤＮＡ　Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅはタカラバイオより、それぞれ購入して用いた。
（２）ヒトＴＲＰＶ４遺伝子発現ベクターの作製
　Ｈｕｔｕ－８０細胞から抽出したｔｏｔａｌＲＮＡを逆転写して得られたｃＤＮＡを鋳型にして、公開されているヒトＴＲＰＶ４遺伝子配列を参考に合成した、下記に示す塩基配列で表されるオリゴヌクレオチドからなるプライマーセットを用いて、下記の条件下でポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行った。
＜プライマーセット＞
フォワードプライマー；５’－ＣＡＣＣＡＴＧＧＣＧＧＡＴＴＣＣＡＧＣＧＡＡＧＧＣＣＣ－３’（配列番号１）
リバースプライマー；５’－ＣＴＡＧＡＧＣＧＧＧＧＣＧＴＣＡＴＣＡＧＴＣＣ－３’（配列番号２）
＜ＰＣＲ条件＞
ａ）ＰＣＲ溶液組成
　ｃＤＮＡ（Ｔｅｍｐｌａｔｅ）　　　　　　　　　　　　　　　１５μＬ
　５ｘ　ＰｒｉｍｅＳＴＡＲ　ＧＸＬ　Ｂｕｆｆｅｒ　　　　　　１０μＬ
　ｄＮＴＰｓ　ｍｉｘｔｕｒｅ（２．５ｍＭ）　　　　　　　　　　４μＬ
　ＰｒｉｍｅＳＴＡＲ　ＧＸＬ　ＤＮＡ　Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　　１μＬ
　Ｆｏｒｗａｒｄ　Ｐｒｉｍｅｒ（１０μＭ）　　　　　　　　　　１μＬ
　Ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｐｒｉｍｅｒ（１０μＭ）　　　　　　　　　　１μＬ
　Ｗａｔｅｒ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１８μＬ
ｂ）温度とサイクル条件
　９５℃　２ｍｉｎ
　↓
　９８℃　１０ｓｅｃ, ７０℃　２ｍｉｎ, ３３ｃｙｃｌｅｓ
　得られたＰＣＲ産物を、Ｈｉｇｈ　Ｐｕｒｅ　ＰＣＲ　Ｐｒｏｄｕｃｔ　Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｋｉｔを用いて精製した。精製したＰＣＲ産物と、ｐｃＤＮＡ３．１　Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ　ＴＯＰＯ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ｋｉｔを用いて、ヒトＴＲＰＶ４遺伝子発現ベクターを作製した。
（３）ヒトＴＲＰＶ４発現細胞の作製
　１０％牛胎児血清を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地を用いて、ＨｅＬａ細胞の培養を行った。ＨｅＬａ細胞をＴ－７５細胞培養用フラスコに５×１０５ｃｅｌｌｓ／Ｆｌａｓｋで播種した。培養３日後、前記（２）で作製したヒトＴＲＰＶ４遺伝子発現用ベクター（８μｇ）をＴｒａｎｓＩＴ－ＨｅＬａＭＯＮＳＴＥＲ　Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　Ｋｉｔを用いて細胞にトランスフェクションし、１日培養した。
　Ｄｅｔａｃｈｉｎで細胞をはがし９６ｗｅｌｌ　Ｏｐｔｉｃａｌ　ｂｏｔｔｏｍ　ｐｌａｔｅに１０％牛胎児血清を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地で１．５×１０４ｃｅｌｌｓ／９０μＬ／ｗｅｌｌの細胞密度で播き、さらに１日培養した。
（４）細胞内カルシウムイオン流入活性の測定
　細胞内カルシウムイオン流入活性の測定は、Ｃａｌｃｉｕｍ　Ｋｉｔ　ＩＩ　－　ｆｌｕｏ　４を用いて行った。Ｆｌｕｏ４－ＡＭを含有したＬｏａｄｉｎｇ　ｂｕｆｆｅｒ及びＨａｎｋｓ’ｂａｌａｎｃｅｄ　ｓａｌｔ　ｓｏｌｕｔｉｏｎを１：１で混合した後、前記（３）で作製したヒトＴＲＰＶ４発現細胞に１８０μＬ／ｗｅｌｌ添加し、３７℃で１時間インキュベートした。その後、３７℃で蛍光プレートリーダーＦＤＳＳ３０００（浜松ホトニクス）を用いて蛍光強度（励起波長：４８８ｎｍ、蛍光波長：５２４ｎｍ）を２秒毎に測定した。測定開始３０秒後にＴＲＰＶ４作動薬であるＧＳＫ１０１６７９０ａと検体として前記製造例で調製した４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、４，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３，４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸溶液をそれぞれＨａｎｋｓ’ｂａｌａｎｃｅｄ　ｓａｌｔ　ｓｏｌｕｔｉｏｎで希釈し、それらの混合溶液（添加直前に混合）を２０μＬ／ｗｅｌｌ添加し、３００秒まで２秒毎に蛍光強度変化を測定した。なお、ＧＳＫ１０１６７９０ａは終濃度３ｎＭとなるように添加した。
　また、ＴＲＰＶ４活性抑制の陽性対照として、ＴＲＰＶ４の拮抗薬であるＨＣ０６７０４７を終濃度１０μＭで添加した。
　検体のＴＲＰＶ４活性は、ＴＲＰＶ４作動薬であるＧＳＫ１０１６７９０ａの処理によるカルシウムイオン流入率を１００％として、次式により算出した。
（数１）
　カルシウムイオン流入率（％）＝［（Ｆｍａｘ／Ｆ０）－（ＦｍａｘＣ２／Ｆ０Ｃ２）］／［（ＦｍａｘＣ１／Ｆ０Ｃ１）－（ＦｍａｘＣ２／Ｆ０Ｃ２）］×１００
　Ｆｍａｘ：測定開始０～３００秒のＧＳＫ１０１６７９０ａと検体を添加したウェルの最高蛍光強度
　ＦｍａｘＣ１：測定開始０～３００秒のＧＳＫ１０１６７９０ａと溶媒を添加したウェルの最高蛍光強度
　ＦｍａｘＣ２：測定開始０～３００秒の溶媒のみを添加したウェルの最高蛍光強度
　Ｆ０：測定開始直後のＦｍａｘと同じウェルの蛍光強度
　Ｆ０Ｃ１：測定開始直後のＦｍａｘＣ１と同じウェルの蛍光強度
　Ｆ０Ｃ２：測定開始直後の溶媒のみを添加したウェルの蛍光強度
　検体を添加した場合のカルシウムイオン流入率（各群ｎ＝３）を、ＧＳＫ１０１６７９０ａ＋溶媒添加時と比較しＤｕｎｎｅｔｔ’ｓ　ｔｅｓｔを用いて検定した。４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉａ）、３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｄ）、４，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｂ）、３，４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸（Ｉｃ）を添加した場合の結果を表１に示す（表中、ＧＳＫ１０１６７９０ａ、４,３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、４，４’ －ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３，４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸は、それぞれＧＳＫ、４，３’－ＤｉＭｅ－ＲＡ、３’，４’－ＤｉＭｅ－ＲＡ、４，４’－ＤｉＭｅ－ＲＡ、３，４－ＤｉＭｅ－ＲＡと略記）。尚、結果は平均値（Ｍｅａｎ）±標準誤差（Ｓ．Ｅ．）として表記した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000058
　表１より、陽性対照であるＴＲＰＶ４の拮抗薬と同様、４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、４，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３，４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸はＴＲＰＶ４作動薬によるカルシウムイオン流入を有意に低下させた。
　以上の結果から、４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、４，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３，４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸は、ＴＲＰＶ４の活性を抑制することを示している。さらに、ＴＲＰＶ４活性を抑制する作用を有する４，３’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３’，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、４，４’－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸、３，４－ジ－Ｏ－メチル－ロズマリン酸は、過敏性腸症候群又は過活動膀胱の予防又は改善に有効であることを示している。

Claims (22)

  1. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とするＴＲＰＶ４活性抑制剤。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
  2. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過活動膀胱の予防又は改善剤。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
  3. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過敏性腸症候群の予防又は改善剤。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
  4. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とするＴＲＰＶ４活性抑制用食品。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
  5. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過活動膀胱の予防又は改善用食品。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
  6. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を有効成分とする過敏性腸症候群の予防又は改善用食品。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
  7. 　下記式（Ｉａ）又は（Ｉｂ）で表されるロズマリン酸誘導体又はその塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
  8. 　ＴＲＰＶ４活性抑制剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
  9. 　過活動膀胱の予防又は改善剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
  10. 　過敏性腸症候群の予防又は改善剤を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
  11. 　ＴＲＰＶ４活性抑制用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
  12. 　過活動膀胱の予防又は改善用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
  13. 　過敏性腸症候群の予防又は改善用食品を製造するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
  14. 　ＴＲＰＶ４活性の抑制に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
  15. 　過活動膀胱の予防又は改善に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
  16. 　過敏性腸症候群の予防又は改善に使用するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
  17. 　ＴＲＰＶ４活性を抑制するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
  18. 　過活動膀胱を予防又は改善するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
  19. 　過敏性腸症候群を予防又は改善するための、下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩の非治療的使用。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
  20. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取するＴＲＰＶ４活性抑制方法。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
  21. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取する過活動膀胱の予防又は改善方法。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
  22. 　下記式（Ｉａ）～（Ｉｄ）から選ばれるロズマリン酸誘導体又はその塩を、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取する過敏性腸症候群の予防又は改善方法。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
PCT/JP2019/039851 2018-10-10 2019-10-09 Ｔｒｐｖ４活性抑制剤 WO2020075764A1 (ja)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US17/284,369 US20210346331A1 (en) 2018-10-10 2019-10-09 Trpv4 activity inhibitor
CN201980066753.3A CN112823002A (zh) 2018-10-10 2019-10-09 Trpv4活性抑制剂
EP19871061.8A EP3865129A4 (en) 2018-10-10 2019-10-09 INHIBITORS OF TRPV4 ACTIVITY

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2018-191980 2018-10-10
JP2018191980A JP7223477B2 (ja) 2018-10-10 2018-10-10 Ｔｒｐｖ４活性抑制剤

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2020075764A1 true WO2020075764A1 (ja) 2020-04-16

Family

ID=70164543

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2019/039851 WO2020075764A1 (ja) 2018-10-10 2019-10-09 Ｔｒｐｖ４活性抑制剤

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20210346331A1 (ja)
EP (1) EP3865129A4 (ja)
JP (1) JP7223477B2 (ja)
CN (1) CN112823002A (ja)
WO (1) WO2020075764A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3812365A4 (en) * 2018-06-20 2022-03-23 Kao Corporation ROSMARINIC ACID DERIVATIVE OR SALT THEREOF

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003521511A (ja) * 2000-02-01 2003-07-15 グラクソ グループ リミテッド 便秘のためのｃｏｘ−２阻害剤の使用
JP2005526040A (ja) * 2002-02-19 2005-09-02 ファルマシア・コーポレーション 失禁の治療のためのシクロオキシゲナーゼ阻害剤及び抗ムスカリン剤の使用
JP2005272362A (ja) 2004-03-25 2005-10-06 Meiji Seika Kaisha Ltd 抗炎症活性を有する新規ロスマリン酸誘導体
JP2014024809A (ja) 2012-07-27 2014-02-06 Kao Corp Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
JP2018177738A (ja) * 2017-04-20 2018-11-15 花王株式会社 Ｔｒｐｖ４活性抑制剤

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI356699B (en) * 2004-11-10 2012-01-21 Kissei Pharmaceutical Agent for treating interstitial cystitis and agent
US20080031980A1 (en) * 2006-08-02 2008-02-07 Al Rodriguez Curcumin-containing composition, methods of making, and methods of using
CN101962323B (zh) * 2010-07-16 2013-06-05 中国人民解放军第二军医大学 2-丙烯酰x基-3-取代苯基丙酸类化合物及其用途
US11179430B2 (en) * 2012-06-08 2021-11-23 Finzelberg Gmbh & Co. Kg Extracts from mother-of-thyme and the use i'hereof
SI3354282T1 (sl) * 2015-01-26 2021-07-30 Kaleido Biosciences, Inc. Glikanski terapevtiki in z njimi povezani postopki
JP6716330B2 (ja) * 2015-09-08 2020-07-01 花王株式会社 ウロプラキン発現促進剤

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003521511A (ja) * 2000-02-01 2003-07-15 グラクソ グループ リミテッド 便秘のためのｃｏｘ−２阻害剤の使用
JP2005526040A (ja) * 2002-02-19 2005-09-02 ファルマシア・コーポレーション 失禁の治療のためのシクロオキシゲナーゼ阻害剤及び抗ムスカリン剤の使用
JP2005272362A (ja) 2004-03-25 2005-10-06 Meiji Seika Kaisha Ltd 抗炎症活性を有する新規ロスマリン酸誘導体
JP2014024809A (ja) 2012-07-27 2014-02-06 Kao Corp Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
JP2018177738A (ja) * 2017-04-20 2018-11-15 花王株式会社 Ｔｒｐｖ４活性抑制剤

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GEVAERT T., J. CLIN. INVEST., vol. 117, 2007, pages 3453 - 3462
NICOLAS CENAC ET AL., GASTROENTEROLOGY, vol. 149, 2015, pages 433 - 444
NILIUS B., PHYSIOL. REV., vol. 87, 2007, pages 165 - 217
See also references of EP3865129A4
TIAN W., AM. J. PHYSIOL. RENAL. PHYSIOL., vol. 287, 2004, pages F17 - F24
YUAN, H. ET AL.: "Synthesis of derivatives of methyl rosmarinate and their inhibitory activities against matrix metalloproteinase-1(MMP-1)", EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 62, 2013, pages 148 - 157, XP055704413, ISSN: 0223-5234 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3812365A4 (en) * 2018-06-20 2022-03-23 Kao Corporation ROSMARINIC ACID DERIVATIVE OR SALT THEREOF

Also Published As

Publication number Publication date
US20210346331A1 (en) 2021-11-11
EP3865129A4 (en) 2022-08-10
CN112823002A (zh) 2021-05-18
JP7223477B2 (ja) 2023-02-16
JP2020059675A (ja) 2020-04-16
EP3865129A1 (en) 2021-08-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2630044T3 (es) Compuestos de alquilamido y usos de los mismos
JP6620096B2 (ja) ピラノクロメニルフェノール誘導体、及び代謝症候群または炎症疾患治療用医薬組成物
BRPI0807023A2 (pt) Composto de tiazol como ligante de ppard e produto farmacêutico, cosmético e alimento saudável dele composto
WO2019233440A1 (zh) 一类用于肝病治疗或预防的化合物
JP6910188B2 (ja) Ｔｒｐａ１活性化剤
JP7195067B2 (ja) ロズマリン酸誘導体又はその塩
JP2019520381A (ja) 光学活性ピラノクロメニルフェノール誘導体およびそれを含む薬学的組成物
JP6910187B2 (ja) Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
WO2020075764A1 (ja) Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
WO2007145253A1 (ja) ＮＦ－κＢ活性化阻害剤
JP5737889B2 (ja) 抗肥満剤
JP2013542183A (ja) セスタテルペン化合物およびこれらの物質の用途
JP5985292B2 (ja) Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
KR20210022504A (ko) 신규 세스퀴테르펜 유도체(1) 및 이의 용도
JP5931633B2 (ja) Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
JP2006213657A (ja) ヒトβ３アドレナリン受容体アゴニスト剤
JP6075830B2 (ja) Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
JP5923404B2 (ja) Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
US20240115589A1 (en) Pharmaceutical composition for preventing cytokine storm
JP6417120B2 (ja) 経口紫外線抵抗性向上剤
WO2011046200A1 (ja) 分化誘導因子又はその類縁体を含有する抗炎症剤
WO2020203593A1 (ja) 免疫賦活剤及び免疫賦活用飲食品
JP5952672B2 (ja) Ｔｒｐｖ４活性抑制剤
TW201932443A (zh) 新穎化合物
KR101074954B1 (ko) （１ｓ,２ｓ,３ｓ,４ｓ）―５―아미노사이클로펜탄―１,２,３,４―테트라올을 포함하는 항비만 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 19871061

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2019871061

Country of ref document: EP

Effective date: 20210510