WO2018230824A1 - 퀘르세틴 및 비타민 d를 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물 - Google Patents

퀘르세틴 및 비타민 d를 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물 Download PDF

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WO2018230824A1
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Definitions

  • a composition for improving acne skin containing quercetin and vitamin D
  • the present invention relates to a composition for improving acne skin, and more particularly to a composition for improving acne skin containing quercetin and vitamin D.
  • Acne is a chronic inflammatory disease of the skin and appears in the form of comedones, papules, pustules, cysts and nodule on the face, chest, shoulders and back.
  • Acne is known to be caused by a combination of mechanisms such as increased sebum secretion, pore stenosis due to abnormal keratinization of pores, bacterial infections, and inflammatory reactions.
  • Acrylonitrile propionibacterium acnes hydrolyzes sebum to produce free-fat dissipation. When sebum secretion increases, the production of free fatty acids by acne bacteria increases, causing inflammatory reactions. Known.
  • anti-hormonal agents may be used to inhibit the production of sebum, but its use may cause systemic side effects, local cell growth disorders, etc., thus requiring considerable caution. Tetracyclin, erythromycin and krymama to inhibit Although antibiotics such as clindamycin are used, repeated use of antibiotics may cause side effects such as the emergence of antibiotic resistant bacteria.
  • the therapeutic agent that increases sebum release by removing the stratum corneum to relieve pore stenosis to treat acne includes retinoic acid, benzoyl peroxide and salicylate.
  • vitamin-A derivative retinoic acid can damage normal cells of stratum corneum as well as keratin, and benzoylperoxide or salicylic acid can cause side effects such as skin hypersensitivity.
  • agents are used to treat acne skin symptoms by relieving inflammatory reactions.
  • Anti-inflammatory agents that suppress inflammation are nonsteroidal substances such as acetyl salycylate, ibuprofen, and indomethacin (ibuprofen). indomethacin) and prednisolone as steroidal substances, but these drugs are limited in their use as cosmetics.
  • Quercetin is a polyphenolic substance found in many plants such as vegetables and fruits, and is known for its physiological effects such as antioxidant activity, anticancer activity and anti-inflammatory action (Li et al, (2016) Nutrients. 15: 167 -180).
  • quercetin is known to have an alleviating effect on atopic dermatitis (Karuppagounder et al, (2016) Drug Discov Today. 21: 632-639).
  • Vitamin D Vitamin D is a fat-soluble vitamin, and it has been reported that relieving the deficiency of vitamin D by oral administration of vitamin D in acne patients improves acne symptoms, which is caused by decreased sebum synthesis and decreased inflammatory cytokines. It appears to improve symptoms (Toossi et al, (2015) Clin Cases Miner Bone Me tab. 12: 238-342, Lim et al, (2016) PLoS One.ll: e 0161162). However, as a result of the study in the present invention, vitamin D alone showed no antimicrobial activity against acne bacteria.
  • the present inventors have made intensive research to overcome the problems of the prior art, in the case of acne skin improvement composition containing quercetin (Quercetin) and vitamin D as an active ingredient, vitamin D alone against acne bacteria Despite the lack of antimicrobial activity, the combination of quercetin and anti-acne bacteria can help to improve acne skin by synergistic effects. Thus, the present invention has been completed.
  • the main object of the present invention is a quercetin and vitamin that can improve acne skin by synergistic effect on the suppression of acne bacteria when prescribed with quercetin, although vitamin D alone has no antibacterial activity against acne bacteria It is to provide a composition for improving acne skin containing D.
  • the present invention provides a composition for improving acne skin, containing quercetin (Quercet in) and vitamin D as an active ingredient.
  • acne bacterium propionabacte As a way to improve acne on the skin, acne bacterium propionabacte There is a method of inhibiting, in the case of vitamin D, the inhibitory effect of the acne bacteria is weak. However, when such vitamin D is prescribed together with quercetin having an anti-inflammatory effect, it was confirmed that the inhibitory effect of acne bacteria is excellent, and the present invention was completed.
  • Quercetin (quercet in), an active ingredient of the present invention, is a flavonoid (f l avonoid) family belonging to polyphenols and is generally distributed as a glycoside of quercetin, widely distributed in vegetables and fruits. Quercetin is a natural substance with low toxicity and antioxidant function, which is a general characteristic of flavonoids.
  • Vitamin D an active ingredient of the present invention, is a fat-soluble vitamin mainly involved in the metabolism of calcium, and its dehydrocholester in the skin can be synthesized by receiving this ultraviolet light.
  • cholecalcifer derived from animals (vi tamin D3) and ergocalcifera derived from fungi such as mushrooms (vi tamin D2) act as effective vitamin D.
  • Quercetin and vitamin D used in the present invention may be prepared or purchased by methods conventional in the art, and the preparation method is not particularly limited.
  • quercetin has an antibacterial effect against acne bacteria
  • vitamin D has an antibacterial effect against acne bacteria
  • the sebaceous gland of the composition (Example 1) containing quercetin and vitamin D at the same concentration was 21.2 and composition containing only vitamin D (Comparative Example 3) at 4.6, whereas the composition containing only quercetin at 4 weeks was 4.6.
  • the number reduction rate was 37.1, and the sebaceous gland number reduction rate was higher than the sum of the results of Comparative Example 2 and Comparative Example 3.
  • the quercetin and vitamin D are contained in an amount of 0.001 to 10% by weight, respectively, based on the total weight of the composition. This is because when the effect is less than 0.001% by weight, the effect is insignificant, and when it exceeds 10% by weight may cause problems of skin side effects and solubility in the formulation.
  • the quercetin and vitamin D may contain quercetin: vitamin D in an amount of 0.1 to 100: 0.1 to 100 by weight, preferably 0.1 to 50: 0.1 to 50, and more preferably 0.1 to 10: 0.1 to It is characterized by containing 10 weight ratio.
  • quercetin vitamin D in an amount of 0.1 to 100: 0.1 to 100 by weight, preferably 0.1 to 50: 0.1 to 50, and more preferably 0.1 to 10: 0.1 to It is characterized by containing 10 weight ratio.
  • the composition is characterized in that the cosmetic composition.
  • the cosmetic composition is a flexible cosmetics, nourishing cosmetics, massage cream, nutrition cream, essence, pack, gel, ampoule or skin adhesive type cosmetic agent It is characterized by being a type.
  • Ingredients included in the cosmetic composition of the present invention as an active ingredient may include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the composition, for example, conventional stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings Adjuvants and carriers.
  • the composition is characterized in that the composition for external application to the skin.
  • the composition for external application for skin is characterized in that it is a transdermal dosage form such as lotion, ointment, gel, cream, patch or spray.
  • ointments such as pastes, creams and gels
  • bases, stabilizers, wetting agents and preservatives which are usually used can be blended as necessary, and the ingredients can be mixed and formulated by conventional methods.
  • the base for example, white petrolatum, polyethylene, paraffin glycerol, cellulose derivatives, polyethylene glycol, silicone, bentonite and the like can be used.
  • a preservative paraoxycyanic acid methyl, paraoxybenzoic acid ethyl, paraoxybenzoic acid propyl, etc. can be used.
  • a film or foam sheet such as a woven or nonwoven fabric made of cotton, staple f iber and chemical fiber, soft vinyl chloride, polyethylene and polyurethane can be suitably used.
  • the formulations may be prepared according to conventional methods in the art and may be administered in amounts generally used in the cosmetic or dermatological arts.
  • composition of the present invention can also be used as a pharmaceutical composition, when the pharmaceutical composition is formulated as a solid preparation for oral administration, the solid preparation for oral administration includes tablets, pills, powders, granules, capsule, etc. These solid preparations are formulated by mixing at least one excipient in the extract.
  • pharmaceutical compositions of the present invention may be formulated into liquid preparations for oral administration.
  • Liquid preparations for oral administration include suspensions, liquids, emulsions, and syrups. These liquid preparations include a variety of liquids in addition to commonly used inert diluents (eg, purified water, GalN / LPS, liquid paraffin).
  • Eggplant excipients for example wetting agents, Sweeteners, fragrances, preservatives and the like.
  • the dosage of the composition according to the present invention may be appropriately selected depending on the route of administration, the administration target, age, sex, weight, individual difference and disease state.
  • the composition of the present invention may vary the content of the active ingredient according to the degree of disease, preferably 0.01-1000 mg / kg / day, more preferably of l ⁇ 100 mg / kg / day It may be administered in an effective amount.
  • the composition containing quercetin and vitamin D of the present invention has an antimicrobial effect against acne bacteria and may alleviate inflammation caused by acne bacteria.
  • when applied to the acne skin can have an effect of significantly reducing the number of acne has an excellent acne skin improvement effect.
  • Comparative Example 2 a composition comprising quercetin
  • Figure 2 is a photograph showing the degree of acne improvement before and after applying Comparative Example 3 (composition comprising vitamin D) to the skin 4 weeks after the application.
  • Figure 3 is a photograph showing the degree of acne improvement 4 weeks after application and before application to the skin of Example 1 (a composition comprising quercetin and vitamin D).
  • the antibacterial activity of quercetin and vitamin D against acne was observed by measuring the minimum inhibitory concentration and the minimum bactericidal concentration.
  • Propionibact an acne bacterium used in this experiment erium acnesiP. acnes., KCOM 1466, KCOM 15.42
  • KCOM Korea Oral Microbiology
  • Gwangju Korea
  • PHR1237 was purchased from Sigma_Aldr ich.
  • ood-Agar medium trypt ic soy broth 3%, yeast extract 0.5%, 0.025% resazu rin 2 mL, agar 1.5%, cysteine HC1-H20 0.05%, hem in solution 0.5 mg / mL, vi tamin l 2 g / mL, sheep blood 5.0%) (BRL) was used to incubate in anaerobic conditions (anaerobic gas mixture: 85% N 2 , 10% H 2 , 5% C0 2 ) using an anaerobic bacteria incubator (Ba ctron 300).
  • Quercetin and vitamin D were dissolved in DMS0 (dimethylsulfoxide) at a concentration of 200 mg / mL, and then added to the bacterial culture solution, and the reaction solution was sequentially diluted twice so that the final concentration was 1, 0.5, 0.25, 0.125, 0.065 and 0.03125 mg / mL.
  • DMS0 dimethylsulfoxide
  • the bacterial culture solution dispensed in the cell culture vessel (96-wel 1 plate) is shown in Table 1 after observing the absorbance at 600nm after 24 hours incubation.
  • the minimum bactericidal concentration was obtained by taking 10 nL of the bacterial culture solution with the highest concentration of lime from the minimum inhibitory concentration value and diluting it 10 times for smearing on agar medium and incubating for 24 hours in a 37 ° C bacterial incubator.
  • Table 1 minimum growth inhibitory concentration for P. acnes
  • Table 2 minimum bactericidal concentration for P. acnes
  • the minimum growth inhibitory concentration of quercetin in P. acnes strains KCOM 1466 and KCOM 1542 was 0.125 mg / mL, and the minimum bactericidal concentration of KCOM 1 466 strain was 0.25mg / mL, KCOM
  • Each of the 1542 strains showed 0.5 mg / mL, indicating that quercetin had antimicrobial activity against P. acnes.
  • the minimum growth inhibitory concentration of vitamin D was higher than 1 mg / mL in P. acnes strains KC0M 1466 and KC0M 1542, indicating that vitamin D had no antibacterial activity against acne.
  • vitamin D was added to the bacterial culture so that the final concentrations were 0.005, 0.01, 0.05 and 0.1 mg / mL.
  • Quercetin final concentration is 1, 0.5, 0.25, 0. 125, 0.065, 0.03125 and 0.015625 mg / mL were added twice by dilution in sequence to incubate for 24 hours, and then the absorbance was measured at 600 nm. The observed results of the minimum inhibitory concentrations are shown in Table 3.
  • P. acnes (KCOM 1466) P. acnes (KCOM 1542) Quercetin 0. 125 0. 125 Vitamin D (0.005 nig / mL) + Quercetin 0. 125 0. 125 Vitamin D (0.01 mg / mL) + Quercetin 0 125 0.065 Vitamin D (0.05 mg / mL) + Quercetin 0.065 0.065 Vitamin D (0.1 mg / mL) + Quercetin 0.065 0.065
  • P. acnes (KCOM 1466) P. acnes (KCOM 1542) Quercetin 0.25 0.5 Vitamin D (0.005 mg / mL) + Quercetin 0.25 0.5 Vitamin D (0.01 mg / mL) + Quercetin 0.25 0.25 Vitamin D (0.05 mg / mL ) + Quercetin 0.1125 0.1125 Vitamin D (0.1 mg / mL) + Quercetin 0.1125 0.125
  • the minimum growth inhibitory concentration of quercetin in P. acnes strains KC 0M 1466 and KC0M 1542 was both 0.125 mg / mL and 0.05 mg of vitamin D in the cell culture medium.
  • the minimum growth inhibitory concentration of quercetin against acne strains was reduced to 0.065 mg / mL, indicating that vitamin D increased quercetin bactericidal activity.
  • the minimum bactericidal concentrations were 0.25 mg / mL for the KC0M 1466 strain and 0.5 mg / mL for the KCOM 1542 strain, and acne strains (KC0M 1466 and KC0M) were added to the culture medium with more than 0.05 mg / mL of vitamin D. Quercetin minimum bactericidal concentration for 1542)
  • Example 1 and Comparative Example 1-3 Preparation of cosmetics for improving acne
  • Example 1 the preparation of a lotion containing quercetin and vitamin D (Example 1) is a method of preparing a lotion by dissolving quercetin and vitamin D in ethanol (An et al. (200 7) Korean Journal of Bio Life Chem. 50: 210-216 ), And the components of the prepared lotion are shown in Table 5.
  • Comparative Example 1 is a lotion that does not contain quercetin or vitamin D, Comparative Example 2 lotion containing 0.2% by weight of quercetin, Comparative Example 3 lotion containing 0.05% by weight of vitamin D, Example 1 0.2% by weight of quercetin Cosmetics containing 0.05% by weight of vitamin D.
  • Example 1 As for the acne skin symptoms improvement effect of quercetin and vitamin D, the cosmetics prepared in Example 1 and Comparative Examples 1-3 were applied to people with acne skin to observe the skin symptoms improvement effect.
  • the acne symptom improvement experiment excludes those who are using acne treatments for those who have acne skin on the face, those who have disease or skin care are excluded from the test subjects.
  • Example 1 and Comparative Examples 1 to 3 lotion were supplied to each experimental group.
  • the supplied lotion was applied to the skin of acne-prone areas for 4 weeks, once every morning and evening, and the skin was photographed once a week.
  • the skin was washed for 30 minutes to clean the surface of the skin and allowed to rest for 30 minutes, and then the acne target site was photographed using the skin imaging device A-ONE Li te (Ver .2.01, Bombtech Electronics Co., Ltd.).
  • the number of acne and sebaceous glands was calculated from the area of the target area, and the percentage of acne and sebaceous gland loss was converted into a percentage (%) by Equation 1 below. Indicated.
  • Example 3 Confirmation of Fiji Player Change
  • sebaceous gland number decreased in 2 and 4 weeks compared to the beginning of the experiment in Example 1 (Quercetin + Vitamin D lotion) application participants, and the rate of sebaceous gland reduction was 21.4 23 ⁇ 4 4 weeks 37. 1% It is shown that the sebaceous gland number is significantly reduced compared to Comparative Example 1-3, and when quercetin and vitamin D are mixed and applied, there is a synergistic effect on sebaceous gland number reduction.
  • the sebaceous gland number is known to increase sebum production as sebum production increases, and a combination of quercetin and vitamin D has a synergistic effect on the reduction of sebaceous athletes.
  • the synergistic effect of improving acne symptoms is thought to be a factor.
  • the composition containing quercetin and vitamin D of the present invention has an antimicrobial effect against acne bacteria and may alleviate inflammation caused by acne bacteria.
  • when applied to the acne skin can have an effect of significantly reducing the number of acne has an excellent acne skin improvement effect.

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Abstract

본 발명은 퀘르세틴 (Quercetin) 및 비타민 D를 유효성분으로 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 퀘르세틴 (Quercetin) 및 비타민 D를 유효성분으로 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물의 경우, 비타민 D 단독으로는 여드름균에 대한 항균력이 없음에도 불구하고 퀘르세틴과 함께 처방하는 경우 여드름균 억제에 대한 시너지 효과를 발휘하여 여드름 피부를 효과적으로 개선할수 있다.

Description

【명세서】
【발명의 명칭】
퀘르세틴 및 비타민 D를 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물
【기술분야】
본 발명은 여드름 피부 개선용 조성물에 관한 것으로， 더욱 구체적으로 퀘르세틴 및 비타민 D를 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물 에 관한 것이다.
【배경기술】
여드름은 피부에 발생하는 만성 염증성 질환으로 얼굴， 가슴， 어깨 및 등 부위에 면포 (comedone) , 구진 (papule) , 농포 (pustule) , 낭종 (cyst ) 및 결절 (nodule) 등의 형태로 나타난다. 여드름의 원인은 피지 분비증가， 모공의 이상 각화로 인한 모공협착， 세균감염, 염증 반응 등 여러 가지 메커니즘이 복합적 으로 작용하여 나타나는 것으로 알려져 있다.
피지선에서 피지의 분비가 증가되고， 모공협착으로 인하여 피지 배출이 억제되면 면포 (comedones)가 형성되고， 혐기성 피부 상재균인 프로피오니박테 리움아크네스 ( /i /Z c er/i acnes) 7} 피지선에 침범하여 증식하면 구진 ( p apule) , 농포 (pustule) , 낭종 (cyst ) , 결절 (nodule)로 발전하게 되며 심하면 반흔 (scar)을 남기기도 한다.
여드름균인 프로피오니박테리움아크네스는 피지를 가수분해하여 유리지 방산을 생성하는데, 피지의 분비가 종가하면 여드름균에 의한 유리지방산의 생 성도가 증가되어 염증반응을 유발함으로써 여드름 증상이 나타나는 것으로 알 려져 있다.
여드름 증상을 완화하기 위해서는 피지를 억제하거나 피지선에서 피지의 배출을 증가시키며， 여드름 균의 세균성장을 억제하거나 염증반웅을 억제하는 방법 등이 이용되고 있다.
구체적으로， 피지의 생산을 억제하기 위하여 항호르몬제제 등이 이용될 수 있으나 이의 사용은 전신적인 부작용이나, 국소적인 세포성장 장애 등을 일 으킬 우려가 있으므로 상당한 주의가 필요하며， 여드름 균의 성장을 억제하기 위하여 테트라사이클린 (tetracycl in) , 에리스로마신 (erythromycin)과 크린다마 신 (clindamycin) 등의 항생물질의 사용되고 있으나 반복적인 항생물질의 사용 은 항생제 내성균의 출현과 같은부작용을 일으킬 가능성이 있다.
또한， 여드름을 치료하기 위하여 피부각질층을 제거하여 모공협착을 완 화시켜서 피지 배출을 증가시키는 치료제로는 레티노익산 (retinoic acid), 벤 조일퍼오사이드 (benzoyl peroxide) 및 살리실산 (salicylate) 등이 있다. 그러 나 비타민 -에이 (vitamin-A) 유도체 레티노익산는 피부각질뿐만 아니라각질충 ( stratum corneum)의 정상 세포를 손상시킬 수 있고， 벤조일퍼오사이드나 살리 실산은 피부 과민 반웅등의 부작용을 일으킬 수 있다.
뿐만 아니라， 염증반응을 완화시켜서 여드름피부 증상을 치료하는 제제 가 사용되고 있는데， 염증반웅을 억제하는 소염제로는 비스테로이드계 물질로 서 아세칠 살리실산 (acetyl salycylate), 이부프로펜 (ibuprofen)， 인도메타신 ( indomethacin) 등이 있으며 스테로이드계 물질로서는 프레드니솔론 (prednisolo ne) 등이 있으나， 이들은 의약품으로서 화장료에는 그사용이 제한되고 있다. 퀘르세틴 (quercetin)은 채소와 과일 등 식물에 많이 들어있는 폴리페놀 계 물질로서 항산화작용, 항암작용， 항염증작용 등 여러 가지 생리작용이 알려 져 있다 (Li et al, (2016) Nutrients. 15:167-180). 또한， 퀘르세틴은 아토피 성 피부염에도 염증완화작용이 있는 것으로 알려져 있다 (Karuppagounder et al ， (2016) Drug Discov Today. 21:632-639).
비타민 D Vitamin D)는 지용성 비타민으로서， 여드름환자에서 비타민 D 를 경구 투여하여 비타민 D의 결핍을 해소시키면 여드름 증상의 개선이 있다는 보고가 있는데, 이는 피지합성 감소 및 염증성 사이토카인의 감소에 의한 여 드름 증상의 개선으로 보인다 (Toossi et al, (2015) Clin Cases Miner Bone Me tab. 12:238-342， Lim et al , (2016) PLoS One. ll:e 0161162). 그러나, 본원 발명에서 연구한 결과， 비타민 D 단독으로는 여드름 균에 대한 항균력이 없는 것으로 나타났다.
이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예 의 연구 노력한 결과, 퀘르세틴 (Quercetin) 및 비타민 D를 유효성분으로 함유 하는 여드름 피부 개선용 조성물의 경우， 비타민 D 단독으로는 여드름균에 대 한 항균력이 없음에도불구하고 퀘르세틴과 함께 처방하는 경우 여드름균 성장 억제에 대한 시너지 효과를 발휘하여 여드름 피부를 개선할수 있음을 확인하 고, 본 발명을 완성하게 되었다.
【발명의 상세한 설명】
【기술적 과제】
따라서， 본 발명의 주된 목적은 비타민 D 단독으로는 여드름균에 대한 항균력이 없음에도 불구하고 퀘르세틴과 함께 처방하는 경우 여드름균 억제에 대한 시너지 효과를 발휘하여 여드름 피부를 개선할 수 있는 퀘르세틴 및 비타 민 D를 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물을 제공하는 데 있다.
【기술적 해결방법】
본 발명의 한 양태에 따르면， 본 발명은 퀘르세틴 (Quercet in) 및 비타민 D를 유효성분으로 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물을 제공한다.
피부의 여드름을 개선하기 위한 방법으로는 여드름균인 프로피오나박테
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억제하는 방법이 있는데， 비타민 D의 경우에는 상기 여드름균의 억제효과가 미약하다. 그러나 이러한 비타민 D가 항염증 효과가 있는 퀘르세틴과 함께 처방되는 경우， 여드름균의 억제 효과가 우수한 것을 확인하고， 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 유효성분인 퀘르세틴 (quercet in)은 폴리페놀 (polyphenol )류에 속하는 플라보노이드 ( f l avonoid)계이며 일반적으로 퀘르세틴의 배당체로서 채 소와 과일 등에 널리 분포해 있다. 퀘르세틴은 플라보노이드계 물질의 일반적 인 특성인 항산화기능이 있으며 독성이 낮은 천연 물질이다.
본 발명의 유효성분인 비타민 D는 지용성 비타민으로서 칼슘의 대사에 주로 관여하며 피부에서 그 dehydrocholester이이 자외선을 받아서 합성될 수 있다. 사람에는 동물에서 유래한 콜레칼시페를 (vi tamin D3)과 버섯 등의 균류 에서 유래한 에르고칼시페리를 (vi tamin D2)이 유효 비타민 D로 작용한다.
본 발명에 사용되는 퀘르세틴과 비타민 D는 당업계에 통상적인 방법에 의해 제조 또는 구매 될 수 있으며, 그 제조방법은 특별히 한정되지 않는다. 본 발명의 실험예에 따르면, 여드름균에 대한 억제효과를 최소성장억제 농도 및 최소살균농도 측정을 통해 확인한 결과， 퀘르세틴은 여드름균에 대한 항균효과가 있으나， 비타민 D는 여드름균에 대한 항균효과가 없는 것을 확인하 였으며， 퀘르세틴과 비타민 D를 함께 처방하였을 때, 퀘르세틴 단독의 항균효 과보다 더 우수한항균효과를 나타내는 것을 확인하였다 (실험예 1 참조) .
또한， 퀘르세틴 및 비타민 D를 포함하는 조성물 (실시예 1)의 여드름 피 부증상 개선효과를 확인한 결과， 퀘르세틴만을 포함하는 조성물 (비교예 2)의 여드름 수 감소율은 4주차에 36.1이였으며, 비타민 D만을 포함하는 조성물 (비 교예 3)의 여드름수 감소율은 4주차에 6.6인데 반해 퀘르세틴 및 비타민 D를 동일한농도로 포함한조성물 (실시예 1)의 여드름 수 감소율은 69.4로서， 비교 예 2 및 비교예 3의 결과값을 합한 값보다 높은 여드름 수 감소율을 보였다. 또한, 피지선 수 감소율은 4주차에 퀘르세틴만을 포함하는 조성물은 21.2, 비 타민 D만을 포함하는 조성물 (비교예 3)은 4.6인데 반해 퀘르세틴 및 비타민 D 를 동일한 농도로 포함한 조성물 (실시예 1)의 피지선 수 감소율은 37.1로서， 비교예 2 및 비교예 3의 결과값을 합한 값보다 높은 피지선 수 감소율을 보였 다. 이러한 결과로 볼 때, 본 발명의 퀘르세틴 및 비타민 D를 함유하는조성물 은 여드름균 억제를 통한 여드름 수 및 피지선 수 감소에 대한시너지 효과를 통해 여드름 피부를 개선할수 있음을 시사한다 (실험예 2， 표 4-5 참조) .
본 발명에 있어서， 상기 퀘르세틴 및 비타민 D는 조성물 총 중량 대비 각각 0.001 내지 10 중량 %로 포함되는 것을 특징으로 한다. 이는 0.001 중량 % 미만일 경우 그 효과가미미하고， 10중량 %를 초과할 경우 피부부작용과 제형 내 용해도둥의 문제가발생할수 있기 때문이다.
본 발명에 있어서， 상기 퀘르세틴 및 비타민 D는 퀘르세틴 ： 비타민 D를 0.1 내지 100 ： 0.1 내지 100중량비로 함유할수 있으며， 바람직하게는 0.1 내지 50 ： 0.1 내지 50， 더욱 바람직하게는 0.1 내지 10 ： 0.1 내지 10 중량 비로 함유하는 것을특징으로 한다. 본 발명의 조성물은 퀘르세틴 및 비타민 D 를 적절히 흔합하여 사용할 경우， 여드름 균의 성장을 억제하고 여드름 피부 증상을 개선하는 효과가 퀘르세틴이나 비타민 D를 단독으로사용하였을 때보다 더 우수하다.
본 발명에 있어서， 상기 조성물은 화장료용 조성물인 것을 특징으로 한 다.
본 발명에 있어서， 상기 화장료용 조성물은 유연화장수, 영양화장수， 마 사지크림, 영양크림, 에센스， 팩, 젤, 앰플 또는 피부 점착 타입의 화장료 제 형인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 조성 물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며， 예를 들면， 안정화제， 용해화제， 비타민， 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조 제 및 담체를 포함한다.
본 발명에 있어서， 상기 조성물은 피부 외용제용 조성물인 것을 특징으 로 한다.
본 발명에 있어서， 상기 피부외용제용 조성물은 로션, 연고, 겔, 크림， 패취 또는 분무제와 같은 경피 투여형 제형인 것을 특징으로 한다.
연고제， 예를 들면 페이스트， 크림 및 겔의 형태로 하는 경우에는， 통상 사용되는 기제， 안정제， 습윤제 및 보존제 등을 필요에 따라 배합할 수 있어， 통상적인 방법에 의해 성분을 흔합하여 제제화할 수 있다. 기제로서는 예를 들면 백색 바셀린, 폴리에틸렌, 파라핀ᅳ 글리세린， 셀를로오스 유도체, 폴리에 틸렌글리콜， 실리콘 및 벤토나이트 등을 사용할 수 있다. 보존제로서는 파라옥 시안식향산 메틸， 파라옥시안식향산 에틸， 파라옥시안식향산 프로필 등을사용 할 수 있다. 첩부제 (貼付齊 )의 형태로 하는 경우에는, 통상의 지지체에 상기 연고， 크림， 겔 또는 페이스트 등을 통상적인 방법에 의해 도포할 수 있다. 지 지체로서는 면， 스테이플 파이버 (staple f iber ) 및 화학섬유로 되는 직포 또는 부직포， 연질 염화비닐， 폴리에틸렌 및 폴리우레탄 등의 필름 또는 발포체 시 트를 적합하게 사용할 수 있다.
상기 제형은 당 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있으며， 화장품 학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 투여될 수 있다.
또한， 본 발명의 조성물은 약학적 조성물로도 이용될 수 있으며， 약학적 조성물을 경구 투여용 고상 제제로 제형화할 경우， 경구 투여를 위한 고상 제 제에는 정제， 환제， 산제, 과립제, 캡술제 등이 포함되는데， 이러한 고상 제제 는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제를 흔합하여 제형화된다. 또한， 본 발명의 약학적 조성물을 경구 투여용 액상 제제로 제형화할 수도 있다. 경 구 투여를 위한 액상 제제는 현탁제, 내용액제， 유제， 시럽제 등이 해당되는데 , 이러한 액상 제제에는 통상적으로 사용되는 불활성 회석제 (예를 들면， 정제 수， GalN/LPS, 리퀴드 파라핀) 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제， 감미제， 방향제， 보존제 등이 포함될 수있다.
본 발명에 따른조성물의 투여량은 투여 경로， 투여 대상， 연령， 성별， 체중, 개인차 및 질병 상태에 따라 적절히 선택될 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물은 질환의 정도에 따라유효성분의 함량을 달리할수 있으나, 바 람직하게는 0.01-1000 mg/체중 kg/day, 보다 바람직하게는 l~100mg/체중 kg/day 의 유효량으로 투여될 수 있다.
【발명의 효과】
이상 설명한바와 같이, 본 발명의 퀘르세틴 및 비타민 D를 함유하는조 성물은 여드름 균에 대한 항균효과가 있어서 여드름 균에 의한 염증을 완화시 킬 수 있다. 또한， 여드름 피부에 도포하면 여드름 수가 현저히 감소되는 효과 를 나타낼 수 있어서 우수한 여드름 피부 개선 효과를 가진다.
【도면의 간단한설명】
도 1은 비교예 2(퀘르세틴을 포함하는 조성물)을 피부에 도포하기 전과 도포 4주후의 여드름 개선 정도를 나타내는사진이다.
도 2는 비교예 3(비타민 D를 포함하는 조성물)을 피부에 도포하기 전과 도포 4주후의 여드름 개선 정도를 나타내는사진이다.
도 3은 실시예 1(퀘르세틴 및 비타민 D를 포함하는 조성물)을 피부에 도 포하기 전과도포 4주후의 여드름 개선 정도를 나타내는사진이다.
【발명의 실시를 위한 형태】
이하， 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실 시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다. 실험예 1 : 최소성장억제농도 (Minimal Inhibi tory Concentrat ion; MIC)와 최소 살균농도 (Minimum Bacter i cidal Concentrat ion; MBC) 즉정
퀘르세틴과 비타민 D의 여드름균에 대한항균력을 최소억제농도와 최소 살균농도를 측정하여 관찰하였다. 본 실험에 사용된 여드름균인 Propionibact erium acnesiP. acnes., KCOM 1466, KCOM 15.42)는 한국 구강미생물자원은행 (Kor ean Collection for Oral Microbiology(KCOM) , Gwangju, Korea)에서 분양 받아 사용하였고， 퀘르세틴 (quercetin; Q4951)과 비타민 D vitamin D; cholecalcif erol; PHR1237)는 Sigma_Aldr ich사 제품을 구입하여 사용하였다.
여드름균 (P. acnes) 균주 KC0M 1466와 KC0M 1542을 각각 혈액한천배지 (B
1 ood-Agar medium: trypt ic soy broth 3%, yeast extract 0.5%, 0.025% resazu rin 2 mL, agar 1.5%, cysteine HC1-H20 0.05%， hem in solution 0.5 mg/mL, vi tamin l 2 g/mL, sheep blood 5.0%)(BRL)를 사용하여 혐기성 세균배양기 (Ba ctron 300)를 사용하여 혐기성조건 (anaerobic gas mixture ： 85% N2, 10% H2, 5% C02)에서 배양하였다.
최소억제농도는 액체배지 희석법 (Murray & Jorgensen, (1981) Antimicr ob Agents Chemother . 20： 66-70) 으로 측정하였다. 즉， 세균을 선택배지를 이 용하여 37 X 세균배양기에서 24시간 배양한 후, 1 X 106 CFU/mL가 되도록 회 석하여 세포배양용기 (96-well pi ate)에 분주하고, 퀘르세틴과 비타민 D는 DMS0 (dimethylsulfoxide)에 200 mg/mL농도로 각각 용해시킨 후 세균배양액에 첨가 하여 최종농도가 1， 0.5, 0.25， 0.125, 0.065 및 0.03125 mg/mL이 되도록 순차 적으로 2배씩 회석하였다.
실험의 음성대조군은 DMSO를 사용하였고, 양성대조군은 항생제 테트라사 이클린 (tetracycline)를 사용하였다. 세포배양용기 (96-wel 1 plate)에 분주된 세균배양액은 24시간 배양한 후 600nm에서 흡광도를 측정하여 관찰한 결과를 표 1에 나타냈다. 최소살균농도는 최소억제농도 값부터 회석배수가 높은 농도 의 세균배양액을 10 nL취해 10배 회석시켜 한천배지에 도말하고 37°C세균 배 양기에서 24시간 동안 배양한 후 형성된 세균 군락을 관찰한 결과를 표 1(여드 름균 (P. acnes) 대한 최소성장 억제농도와 표 2(여드름균 (P. acnes) 대한 최소살균농도) 에 나타냈다.
[표 1]
최소성장억제농도 (mg/mL)
분지
P. acnes (KCOM 1466) P. acnes (KCOM 1542) 퀘르세틴 0. 125 0. 125
비타민 D >1 >1
테트라사이클린 <0.003125 <0.003125
[표 2]
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그 결과， 여드름균 (P . acnes)균주 KCOM 1466과 KCOM 1542에서 퀘르세틴 의 최소성장억제농도는모두 0. 125 mg/mL로 나타났고， 최소살균농도는 KCOM 1 466균주는 0.25mg/mL , KCOM 1542 균주는 0.5mg/mL로 각각 나타나서 퀘르세틴 이 여드름균 (P . acnes) 에 대해서 항균작용이 있는 것으로 나타났다.
또한, 여드름균 (P . acnes) 균주 KC0M 1466과 KC0M 1542에서 비타민 D의 최소성장억제농도는모두 1 mg/mL 이상으로 나타나서 비타민 D는 여드름 균에 대한항균력이 없는 것으로 나타났다. 또한， 퀘르세틴의 항균작용에 미치는 비타민 D의 영향을관찰하기 위하 여 세균배양액에 비타민 D를 최종농도가 0.005 , 0.01 , 0.05 및 0. 1 mg/mL이 되 도록 첨가한후 비타민 D각각의 농도에 퀘르세틴 최종농도가 1， 0.5， 0.25 , 0 . 125， 0.065 , 0.03125 및 0.015625 mg/mL이 되도록 순차작으로 2배씩 회석해서 첨가하여 24시간 배양한후 600nm에서 흡광도를 측정하였으며, 관찰한 최소억 제농도측정 결과를 표 3에 나타냈다.
또한， 최소억제농도 값부터 회석배수가높은농도의 세균배양액을 10nL 취해 10배 희석시켜 한천배지에 도말하고 세균 배양기에서 24시간동안 배양 한후 형성된 세균군락을관찰한 최소살균농도측정 결과를표 4 에 나타냈다 [표 3] 퀘르세틴 최소성장억제농도 (mg/mL) 물질
P. acnes (KCOM 1466) P. acnes (KCOM 1542) 퀘르세틴 0. 125 0. 125 비타민 D(0.005nig/mL) +퀴르세틴 0. 125 0. 125 비타민 D(0.01mg/mL) +퀴르세틴 0. 125 0.065 비타민 D(0.05mg/mL) +퀴르세틴 0.065 0.065 비타민 D(0. 1mg/mL)+퀴르세틴 0.065 0.065
[표 4]
최소살균농도 (mg/mL )
물질
P. acnes (KCOM 1466) P. acnes (KCOM 1542) 퀘르세틴 0.25 0.5 비타민 D(0.005mg/mL)+퀴르세틴 0.25 0.5 비타민 D(0.01mg/mL) +퀴르세틴 0.25 0.25 비타민 D(0.05mg/mL)+퀴르세틴 0. 125 0. 125 비타민 D(0. 1mg/mL) +퀴르세틴 0. 125 0. 125
그 결과， 상기 표 3에서 나타나는 바와 같이 여드름균 (P . acnes) 균주 KC 0M 1466과 KC0M 1542에서 퀘르세틴의 최소성장억제농도는 모두 0. 125mg/mL 로 나타났고， 세포 배양액에 비타민 D를 0.05mg/raL 이상 첨가하면 여드름균주 (KC0 M 1466과 KC0M 1542)에 대한 퀘르세틴의 최소성장억제농도는 0.065 mg/mL 로 감소되어 비타민 D가 퀘르세틴의 정균작용을 증가시키는 것으로 나타났다. 또한， 표 4에서 최소살균농도는 KC0M 1466 균주는 0.25mg/mL , KCOM 1542 균주는 0.5mg/mL으로 나타났고， 세포 배양액에 비타민 D를 0.05mg/mL 이상 첨 가하면 여드름균주 (KC0M 1466과 KC0M 1542)에 대한 퀘르세틴의 최소살균농도가
0. 125 mg/mL로 감소되어 비타민 D가 퀘르세틴의 살균작용을 증가시키는 것으 로 나타났다. 실시예 1 및 비교예 1-3: 여드름 개선용화장수의 제조
퀘르세틴과 비타민 D의 여드름 피부개선효과를 관찰하기 위하여 퀘르세 틴과 비타민 D 함유 화장수를 제조하여 여드름 피부에 도포하는실험을 실시하 였다.
구체적으로， 퀘르세틴과 비타민 D를 함유하는 화장수의 제조 (실시예 1) 는 퀘르세틴과 비타민 D를 에탄올에 용해시켜 화장수 제조방법 (An et al . (200 7) 한국웅용생명화학회지 50 : 210-216)에 따라 제조하였으며， 제조된 화장수의 성분은표 5과 같다.
비교예 1은 퀘르세틴이나 비타민 D가포함되지 않은 화장수， 비교예 2는 퀘르세틴이 0.2중량 % 함유된 화장수, 비교예 3은 비타민 D가 0.05중량 % 함유 된 화장수, 실시예 1은 퀘르세틴 0.2중량¾와 비타민 D 0.05중량%가 함유된 화 장수이다.
[표 5]
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실험예 2 : 여드름 피부증상 개선 효과
퀘르세틴 및 비타민 D의 여드름 피부증상 개선 효과는 실시예 1 및 비교 예 1-3에서 제조한화장수를 여드름 피부를 가진 사람에게 도포하여 피부증상 개선효과를 관찰하였다. 여드름 증상 개선 실험은 안면에 여드름 피부를 가진 자원 참여자를 대 상으로 여드름 치료제를 사용중인 자， 질병이 있거나 피부 관리를 받고 있는 자는 실험대상에서 제외시켰으며, 실험의 진행은 생명윤리위원회의 윤리규정에 따랐다.
실험 참여자는 20명 (남자 12명， 여자 8명)으로 연령 분포는 20~25세였 다. 실험 참여자에게 실험 내용과 방법을 상세히 설명하여 이해시킨 후 여자 2 명과 남자 3명을 한 실험군으로 실시예 1 및 비교예 1 내지 3 등 총 4 실험군 으로 나누었다.
상기 실시예 1 및 비교예 1 내지 3 화장수를 각 실험군에 공급하였다. 공급된 화장수는 모든 실험참여자에게 매일 아침과 저녁 각각 1회씩 4주 동안 여드름 발생부위 피부에 도포하게 하였고 1주에 1회씩 피부를 촬영하였다. 피부 촬영은 피부 표면 청결을 위해서 세안하고 30분간 안정을 취하게 한 후 피부촬영장치 A-ONE Li te(Ver .2.01 , 봄텍전자주식회사， Korea)를 이용해 여드름 표적부위를 촬영하였고， 촬영된 사진에서 표적부위 일정한 크기의 면 적에서 여드름 수와 피지선 수를 산출하여 다음 식 1에 의해서 여드름과 피지 선 수 감소율을 백분율 (%)로 환산하여 비교 분석하였으며， 여드름 수 변화를 분석한 결과는 표 6에 나타내었다.
[식 1]
Figure imgf000012_0001
[표 6]
Figure imgf000012_0002
그 결과， 비교예 1(대조 화장수) 도포 실험참여자에서 여드름 수는 실험 시작할 때에 비하여 2주및 4주경과 후 감소가 일어나지 않았다. 비교예 2(퀘 르세틴 화장수) 도포 실험참여자에서 여드름 수는 실험 시작할 때에 비하여 2 주 및 4주에 감소되었는데， 여드름 수 감소율은 2주 14.6 %， 4주 36. 1% 로 나 타났다. 또한, 비교 예 3(비타민 D 화장수) 도포 실험참여자에서 여드름 수는 실험 시작할 때에 비하여 2주에는 변화가 없었고, 4주에는 9.6% 감소되었으나 실험예와 차이가 없었다. 이에 반해 실시예 1(퀘르세틴 +비타민 D 화장수) 도포 실험참여자에서 여드름 수는 실험 시작할 때에 비하여 2주 및 4주에 감소되었 는데， 여드름 수 감소율은 2주 25. 1 , 4주 69.4% 로 나타나서 비교예 2-3에 비하여 감소율이 현저히 증가되어 퀘르세틴과 비타민 D를 흔합하여 도포할 경 우， 여드름 피부 증상 개선에 상승효과가 있는 것으로 나타났다. 실험예 3 : 피지선수 변화 확인
A-ONE Li te(Ver .2.01 , 봄텍전자주식회사， Korea)를 아용해 여드름 표적 부위를 촬영하여 표적부위 일정한 크기의 면적에서 피지선 수를 산출하여 피지 선 수 감소율을 백분율 (%)로 환산하여 비교 분석한 결과는 표 7에 나타내었다. [표 7]
Figure imgf000013_0001
그 결과， 비교예 1 도포 실험참여자에서 피지선 수를 관찰한 결과 실험 시작할 때에 비하여 2주 및 4주경과 후 피지선 수의 변화가 일어나지 않았다. 비교예 2(퀘르세틴 화장수) 도포 실험참여자에서 피지선 수는 실험 시작할 때 에 비하여 2주 및 4주에 여드름이 감소되었는데， 피지선 수 감소율은 2주 14. 1 %, 4주 21.2 %로 나타났다. 또한, 비교예 3(비타민 D화장수) 도포 실험참여 자에서 피지선수는 실험 시작할 때에 비하여 2주 및 4주경과 후 피지선 수 변 화가 없었다. 이에 반해， 실시예 1(퀘르세틴+비타민 D 화장수) 도포 실험참여 자에서 피지선 수는 실험 시작할 때에 비하여 2주 및 4주에 감소되었는데， 피 지선 수 감소율은 2주 21.4 ¾， 4주 37. 1%로 나타나서 비교예 1-3에 비하여 피 지선 수가 현저히 감소되어 퀘르세틴 및 비타민 D를 흔합하여 도포하면 피지선 수 감소에 상승효과가 있는 것으로 나타났다.
피지선 수는 피지의 생산이 증가되면 피지선 수도 증가하는 것으로 알려 져 있어서， 퀘르세틴 및 비타민 D를 흔합하여 도포하면 피지선수 감소에 상승 효과가 나타나는 것은 피지생산의 억제에 상승효과가 있는 것으로 추측되며， 이는 여드름 증상 개선의 상승효과에 한요인으로 생각된다.
【산업상 이용가능성】
이상설명한 바와 같이， 본 발명의 퀘르세틴 및 비타민 D를 함유하는 조 성물은 여드름 균에 대한 항균효과가 있어서 여드름 균에 의한 염증을 완화시 킬 수 있다. 또한， 여드름 피부에 도포하면 여드름 수가 현저히 감소되는 효과 를 나타낼 수 있어서 우수한 여드름 피부 개선효과를 가진다.

Claims

【청구의 범위】
【청구항 1】
퀘르세틴 (Quercet in) 및 비타민 D를 유효성분으로 함유하는 여드름 피부 개선용 조성물.
【청구항 2】
제 1항에 있어서， 상기 퀘르세틴 및 비타민 D는 조성물 총 중량 대비 각 각 0.001 내지 10 중량 %로 포함되는 것을 특징으로 하는 여드름 피부 개선용 조성물.
【청구항 3]
제 1항에 있어서, 상기 퀘르세틴 및 비타민 D는 퀘르세틴 ： 비타민 D를 0.1 내지 100 ： 0.1 내지 100 중량비로 함유하는 것을 특징으로 하는 여드름 피부 개선용 조성물.
【청구항 4]
제 1항에 있어서， 상기 조성물은 화장료용 조성물인 것을 특징으로 하는 여드름 피부 개선용 조성물.
【청구항 5]
제 4항에 있어서， 상기 화장료용 조성물은 유연화장수， 영양화장수， 마 사지크림， 영양크림, 에센스, 팩, 젤， 앰플.또는 피부 점착 타입의 화장료 제 형인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 6]
제 1항에 있어서， 상기 조성물은 피부 외용제용 조성물인 것을 특징으로 하는 여드름 피부 개선용 조성물.
【청구항 7】 제 6항에 있어서， 상기 피부외용제용 조성물은 로션， 연고, 겔， 크림 는 분무제와 같은 경피 투여형 제형인 것을 특징으로 조성물.
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