WO2014103793A1 - 分光器及び顕微分光システム - Google Patents

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    • G02B21/0064—Optical details of the image generation multi-spectral or wavelength-selective arrangements, e.g. wavelength fan-out, chromatic profiling

Definitions

  • the present invention relates to a spectroscope and a microspectroscopic system.
  • Fluorescence microscopes require some form of spectroscopic function on the principle that fluorescence must be separated and detected from excitation light.
  • an apparatus for acquiring multiple excitation light and multiple fluorescence images of a multiple-stained specimen an apparatus that guides the separated fluorescence to a plurality of light receivers via a mirror array made of micromirrors is disclosed (for example, Patent Documents). 1).
  • the present invention has been made in view of such problems, and an object thereof is to provide a spectroscope capable of obtaining better signal light with a light receiver and a microspectroscopic system having the spectroscope.
  • a spectroscope receives a spectroscopic light, a spectroscopic element that splits signal light, a first optical system that collects spectroscopic light dispersed by the spectroscopic element, and the spectroscopic light.
  • a light receiver, and the light receiver includes a plurality of regions having wavelength characteristics with different sensitivities for detecting spectroscopic light.
  • a microspectroscopic system includes a microscope that scans light from a light source and collects it on a specimen through an objective lens, and collects signal light emitted from the specimen through the objective lens, and the microscope.
  • a microscope that scans light from a light source and collects it on a specimen through an objective lens, and collects signal light emitted from the specimen through the objective lens, and the microscope.
  • One of the above-described spectroscopes that spectrally detects signal light from the above.
  • a signal can be acquired in a light receiving region with better sensitivity in the light receiver.
  • the microspectroscopic system 1 includes a confocal microscope having a light source system 10, a confocal unit 20 and a microscope 30, a spectroscope 40, and a control unit 50.
  • the confocal unit 20 and the spectroscope 40 are optically connected by an optical fiber 28 via fiber couplers 29a and 29b.
  • the light source system 10 includes a laser device 11, an optical fiber 13, and fiber couplers 12 and 14.
  • the laser device 11 includes, for example, a laser diode, and emits illumination light having a target wavelength characteristic. This illumination light is guided to the confocal unit 20 via the optical fiber 13. In the example of FIG. 1, the illumination light is excitation light for exciting the specimen 33 to emit fluorescence.
  • the confocal unit 20 includes a collimating lens 21 that converts illumination light from the light source system 10 into a substantially parallel light beam, a dichroic mirror 22, a scanning unit 23, a scanner lens 24, a condensing lens 25, and a pinhole 26a.
  • a pinhole plate 26 and a relay lens 27 are provided.
  • the microscope 30 includes a second objective lens 31 and an objective lens 32, and a stage 34 on which the specimen 33 is placed.
  • the confocal unit 20 and the microscope 30 are combined to form a scanning confocal microscope.
  • the dichroic mirror 22 is configured to reflect the laser light emitted from the light source system 10 toward the microscope 30 and transmit the fluorescence emitted from the specimen 33 excited by the laser light.
  • the image side focal point of the condenser lens 25 is disposed so as to substantially coincide with the pinhole 26 a of the pinhole plate 26.
  • Laser light (excitation light) emitted from the laser device 11 of the light source system 10 that is a light source is introduced into the optical fiber 13 through the fiber coupler 12. Further, the laser light passing through the optical fiber 13 enters the collimating lens 21 of the confocal unit 20 from the fiber coupler 14. The laser light is converted into substantially parallel light by the collimator lens 21, then reflected by the dichroic mirror 22 to the optical path on the microscope 30 side, and applied to the scanning unit 23 and the scanner lens 24, which are composed of two orthogonally arranged galvanometer mirrors. Introduced and scanned in two dimensions. The scanned laser light is made into substantially parallel light by the second objective lens 31, condensed by the objective lens 32, and condensed at one point on the specimen 33.
  • the position on the specimen 33 scanned two-dimensionally by the scanning unit 23 is controlled by controlling the operation of the galvanometer mirror in the scanning unit 23 by the control unit 50. Then, the fluorescence (signal light) emitted from the specimen 33 excited by the laser light is converted into substantially parallel light by the objective lens 32, and follows the path opposite to the laser light (excitation light) to the dichroic mirror 22. Incident. Further, the fluorescence incident on the dichroic mirror 22 passes through the dichroic mirror 22 and is collected by the condenser lens 25 onto the pinhole 26 a of the pinhole plate 26.
  • the light that has passed through the pinhole 26a is guided to the optical fiber 28 from the fiber coupler 29a via the relay lens 27.
  • the relay lens 27 As shown in FIG. 1, the light that has passed through the pinhole 26a becomes a divergent light beam as it is, and is condensed again, and apparently appears at the opening end of the optical fiber 28. Even with a small aperture diameter, it becomes possible to enter effectively (with little loss).
  • the condensing point formed in the pinhole 26a is an image of a light spot on the specimen 33, even if there is light emitted from another point on the specimen 33, the pinhole 26a. Then, an image is not formed and is blocked by the pinhole plate 26 and hardly reaches the fiber coupler 29a. Therefore, only the light that can pass through the pinhole 26 a can reach the fiber coupler 29 a via the relay lens 27.
  • the scanning confocal microscope is a microscope capable of observing a specimen not only with high lateral resolution but also with high vertical resolution.
  • Fluorescence incident on the fiber coupler 29a passes through the optical fiber 28 and is introduced into the spectroscope 40 via the fiber coupler 29b.
  • the spectroscope 40 includes a collimating optical system 41 that makes signal light (fluorescence in the example of FIG. 1) incident from an optical fiber 28 a substantially parallel light beam, and a wavelength dispersion element having spectral characteristics.
  • a diffraction grating 42 (hereinafter referred to as a “spectral element”), a reflecting mirror array 44 in which minute reflecting mirrors (micro mirrors) are arranged in one or two dimensions to form a reflecting surface, and wavelength dispersion by the diffraction grating 42
  • the collected optical system 43 that is a first optical system that collects the received signal light (spectral light) two-dimensionally on the reflecting surface of the reflector array 44, and a plurality of light receiving units that form a plurality of detection regions 46a.
  • a light receiver 46 having a light receiving element array in which elements 46b are arranged in an array and forming a light receiving area, and signal light (spectral light) reflected by the reflecting mirror array 44 is imaged on the light receiving area of the light receiver 46.
  • a projection optical system 45 which is a second optical system to be To.
  • the optical axis direction of the spectroscope 40 (the central direction in which the signal light emitted from the optical fiber 28 travels) is the Z axis
  • the horizontal direction is the X axis
  • the vertical direction is the Y axis in a plane orthogonal to the optical axis.
  • the reflector array is analog controlled, and each micromirror can be set at an arbitrary angle.
  • a product made by Adamant Industries is used, but the present invention is not limited to this.
  • the reflective array can be manufactured using known MEMS technology.
  • the signal light introduced by the optical fiber 28 is converted into substantially parallel light by the collimating optical system 41 and irradiated to the diffraction grating 42.
  • this diffraction grating 42 a plurality of diffraction grating grooves extending in the X-axis direction are engraved along the Y-axis direction at minute intervals. For this reason, the signal light incident on the diffraction grating 42 is diffracted in the Y-axis direction. At this time, since the diffraction angle is determined by the wavelength, the signal light is dispersed and dispersed in the Y-axis direction according to the wavelength.
  • the spectral direction by the diffraction grating 42 corresponds to the Y-axis direction
  • the direction orthogonal to the spectral direction corresponds to the X-axis direction.
  • the diffraction grating 42 is described as a reflection type, but it can also be configured as a transmission type. Further, the diffraction grating 42 can be constituted by a relief type or a VPHG (Volume Phase Holographic Grating).
  • the signal light (spectral light) thus dispersed is incident on the condensing optical system 43.
  • the condensing optical system 43 is configured so that the refractive powers in the X-axis direction and the Y-axis direction are different.
  • the refractive power in the Y-axis direction is larger than the refractive power in the X-axis direction. It is configured.
  • a cylindrical lens having a refractive power only in the Y-axis direction can be used as the two-dimensional condensing optical system 43.
  • the spectroscopic light incident on the condensing optical system 43 has an optical pattern having the same length in the X-axis direction but having a different light wavelength for each line arranged in the Y-axis direction. Projected on top.
  • the spectral light LI1 diffracted by the diffraction grating 42 to the upper side in the Y-axis direction is an optical pattern IM11 (line image) on the upper side in the Y-axis direction of the reflector array 44 by the condensing optical system 43 It is condensed as.
  • the spectral light LI2 diffracted downward in the Y-axis direction by the diffraction grating 42 is condensed as an optical pattern IM12 (line image) by the condensing optical system 43 on the lower side in the Y-axis direction of the reflector array 44. .
  • the reflecting mirror array 44 is configured such that micromirrors 44a having a structure as shown in FIG. 3 are arranged one-dimensionally or two-dimensionally.
  • an electrode 44d is disposed on the upper surface of the drive base 44e, and a frame 44b that supports a micromirror 44a disposed so as to cover the upper surface by a hinge (shaft) 44c is disposed.
  • Each of the micromirrors 44a has a predetermined one-dimensional structure based on a voltage applied to the electrode 44d disposed on the drive base 44e around the hinge 44c supported by the frame 44b based on a signal from the controller 50.
  • the mirror surface can be tilted (rotated) in the direction (X-axis direction that is a direction substantially orthogonal to the spectral direction in the present embodiment).
  • X-axis direction that is a direction substantially orthogonal to the spectral direction in the present embodiment.
  • the micromirror 44a has a square or an aspect ratio close to that of the square, if the required vertical width and horizontal width of the reflector array 44 are not large, a two-dimensional array is used and the X-axis direction is used.
  • the present invention is not limited to the reflecting mirror array 44 composed of a plurality of micromirrors 44a, but may be a microdeflecting member (array) composed of microdeflecting elements that deflect spectroscopic light.
  • the signal light (spectral light) reflected by the reflector array 44 is guided to the light receiver 46 by the projection optical system 45.
  • the light receiver 46 includes a detection region 46a composed of a rectangular region having a long side in the Y-axis direction and a short side in the X-axis direction.
  • the plurality of detection regions 46a are in the X-axis direction, that is, the reflector array 44.
  • Each detection region 46a is divided into a plurality of sub-regions arranged in the Y-axis direction, that is, in the direction in which the signal light is split by the diffraction grating 42 which is a spectroscopic element.
  • a case where two regions of the first sub region 46a1 and the second sub region 46a2 are formed will be described.
  • two or more light receiving elements 46b arranged in the Y-axis direction are arranged in each of the detection areas 46a, and each of these light receiving elements 46b is configured to belong to one of the sub areas described above. ing.
  • the light receiving element 46b is a photoelectric conversion element (PMT).
  • the light receiving element 46b disposed in each of the two sub-regions 46a1 and 46a2 shown in FIG. 4 is configured so that the sensitivity (conversion efficiency) of photoelectric conversion with respect to the wavelength of incident light differs for each of the sub-regions 46a1 and 46a2.
  • Has been. 4 shows a case where the detection area 46a is divided into two sub-areas 46a1 and 46a2.
  • the present invention is not limited to this, and the detection area 46a may be divided into three or more areas. Also, as shown in FIG.
  • the light receiving element 46b may be formed in a rectangular shape, and the adjacent light receiving elements 46b may be arranged in close contact with each other.
  • At least one light-receiving element 46a may be arranged in each sub-region.
  • the projection optical system 45 includes a first condenser lens 45a having a refractive power that is rotationally symmetric with respect to the optical axis, and a second condenser lens in which the refractive power in the Y-axis direction is larger than the refractive power in the X-axis direction. 45b, and is designed so that the combined focal length differs between the Y-axis direction and the X-axis direction.
  • a cylindrical lens having a refractive power only in the Y-axis direction can be used as the second condenser lens 45b of the projection optical system 45.
  • the order in which the first condenser lens 45a and the second condenser lens 45b are arranged in the optical axis direction may be reversed.
  • the focal length in the X-axis direction of the projection optical system 45 is designed to be equal to the distance L2 between the principal surface in the X-axis direction of the projection optical system 45 and the light receiver 46.
  • the control unit 50 controls the tilt angle of the micromirrors 44a of the reflector array 44 to configure the light receiver 46 depending on the reflection direction of the signal light (spectral light) by the micromirrors 44a on the reflector array 44. It is possible to select which detection region 46a of the plurality of detection regions 46a the signal light (spectral light) is incident on.
  • the reflector array 44 and the light receiver 46 are designed to be conjugate.
  • the focal length f in the Y-axis direction is designed to satisfy the following expression (1).
  • the magnification in the Y-axis direction of the projection optical system 45 needs to be less than or equal to the ratio between the size of the detection area 46a and the size of the reflecting surface of the reflector array 44.
  • the magnification of the projection optical system 45 is equal to the ratio between the distance L2 and the distance L1, the relationship of the following equation (2) needs to be satisfied.
  • the light receiving region of the light receiver 46 is divided into a plurality of sub-regions arranged in the Y-axis direction (wavelength dispersion direction).
  • the wavelength band that needs to be detected by the light receiver 46 is ⁇ s to ⁇ f (assuming that ⁇ s ⁇ f), and the preset wavelength that is detected in each of the first sub-region 46a1 and the second sub-region 46a2.
  • Let the boundary wavelength of the range be ⁇ o.
  • a light receiving region having high efficiency with respect to light having a wavelength ⁇ s to ⁇ o is defined as a first sub region 46a1
  • a light receiving region having high efficiency with respect to light having a wavelength ⁇ o to ⁇ f is defined as a second sub region 46a2. .
  • the height of the light receiving area (detection area 46a) of the light receiver 46 in the Y-axis direction (wavelength dispersion direction) is h
  • the height of the first sub area 46a1 is h1
  • the height of the second sub area 46a2 is h.
  • h1 h ⁇ ( ⁇ o ⁇ s) / ( ⁇ f ⁇ s)
  • h2 h ⁇ ( ⁇ f ⁇ o) / ( ⁇ f ⁇ s) (3)
  • a gallium arsenide phosphorus (GaAsP) crystal photocathode is used for the first subregion 46a1
  • a gallium arsenide (GaAs) crystal photocathode is used for the second subregion 46a2.
  • each line composed of the micromirrors 44a arranged in the X-axis direction of the reflector array 44 is spectrally separated and signal lights having different wavelengths are incident. Therefore, as shown in FIG. 2B, by controlling the inclination angle of the micromirror 44a for each line, it is possible to control which detection region 46a the spectrally separated signal light enters for each wavelength. it can.
  • the reflected light LO1 of the light pattern IM11 collected on the upper side in the Y-axis direction of the reflector array 44 is condensed on the detection region 46a on the left side in the X-axis direction to form an image IM21.
  • the reflected light LO2 of the light pattern IM12 condensed on the lower side in the axial direction is condensed on the detection region 46a on the right side in the X-axis direction to form an image IM22.
  • which of the first and second sub-regions 46a1 and 46a2 forms an image in each detection region 46a is determined by the spectral direction by the diffraction grating 42, that is, the wavelength of the dispersed light. Therefore, by appropriately determining the sizes of the first and second sub-regions 46a1 and 46a2 according to the above-described formula (3), it is related to the direction (tilt angle) of the micromirrors 44a of the reflector array 44. Instead, each of the spectroscopic lights can be condensed on a sub-region that is sensitive to the wavelength of each light.
  • Each of the light receiving elements 46b arranged in the detection region 46a of the light receiver 46 detects the intensity of the spectral light incident on these light receiving elements 46b, and the detected value is passed to the control unit 50. And is output as an image to a display device (not shown).
  • the focal length fc of the collimating optical system 41 may be set so that the width of the light beam after passing through the collimating optical system 41 is approximately equal to the lateral width (X-axis direction width) of the reflector array 44. If the width of the reflecting mirror array 44 in the X-axis direction is W, the following conditional expression (4) may be satisfied. NAf is the numerical aperture of the optical fiber 28.
  • the diffraction grating 42 has a grating constant d in order to spectrally detect signal light in the range of ⁇ 1 to ⁇ 2.
  • the angle of incidence ⁇ 2 from the diffraction grating 42 is in the range from sin ⁇ 1 ( ⁇ 1 / d ⁇ sin ⁇ 1) to sin ⁇ 1 ( ⁇ 2 / d ⁇ sin ⁇ 1). It becomes. Therefore, the half angle of view ⁇ of the spectral light emitted from the diffraction grating 42 is expressed by the following equation (5).
  • the focal length f1 of the condensing optical system 43 in the Y-axis direction is Conditional expression (6) may be satisfied.
  • the focal length of the projection optical system 45 includes a focal length f2T in the X-axis direction and a focal length f2L in the Y-axis direction, which are determined as follows.
  • the lateral width (width in the X-axis direction) of one detection region 46a in the light receiver 46 is WdT
  • Nd detection regions 46a are arranged in the X-axis direction
  • each micromirror 44a of the reflector array 44 is ⁇ ⁇ m.
  • the vertical width (width in the Y-axis direction (height h)) of the reflector array 44 is PSLM ⁇ NSLM. Therefore, the component in the Y-axis direction of the spectroscopic light reflected by the reflecting mirror array 44 is condensed by the projection optical system 45 and becomes the vertical width (Y-axis direction width) WdL of the detection region 46a. Therefore, the magnification M of the projection optical system 45 may be set to the following expression (8).
  • the focal length f2L in the Y-axis direction of the projection optical system 45 is equal to the focal length f2T in the X-axis direction of the projection optical system 45 because the distance L2 from the projection optical system 45 to the light receiver 46 is the same as that of the reflecting mirror array 44. If the distance from the principal plane of the projection optical system 45 in the Y-axis direction is L1, the following equation (9) is expressed from the relationship of the above equation (1).
  • the detection region 46a to which the spectral light for each wavelength separated by the diffraction grating 42 is incident is determined by user setting (for example, selection of the detection region 46a used in the light receiver 46, designation of the fluorescent dye (fluorescent dye and A correspondence table of fluorescence wavelengths is stored in the storage unit in the control unit 50), a fluorescence wavelength region (detection wavelength range) to be acquired, an excitation wavelength designation, and the like, and the calculation method described above and the calculation method described later are used.
  • the selection can be made by controlling the tilt angle of the micromirrors 44a of the reflector array 44 based on the signal calculated by the controller 50.
  • the micromirrors 44a on the reflector array 44 are desirably arranged one-dimensionally in the Y-axis direction, but the micromirrors 44a are arranged two-dimensionally. It does not matter. At that time, the micromirrors 44a that are at the same height in the Y-axis direction and are aligned in the X-axis direction may be controlled to have the same reflection angle.
  • the inclination of the micromirror 44a corresponding to the wavelength of the light on the reflector array 44 is increased.
  • the detection region 46a that constitutes the light receiver 46 is blanked from the detection region 46a, so that the excitation light that does not need to be detected is condensed at that position. By controlling this, it is possible to prevent unnecessary light from entering the light receiver 46.
  • the plurality of detection regions 46a configuring the light receiver 46 by rotating (shaking) the micromirrors 44a configuring the reflecting mirror array 44 in the X-axis direction.
  • Spectral light can be entered by selecting one of them, and the wavelength resolution and the acquisition wavelength region can be arbitrarily changed.
  • the entire spatial modulation element 44 on which the dispersed light is projected can be projected onto one detection region 46a.
  • Each detection region 46a is composed of a plurality of subregions arranged in the Y-axis direction (two subregions 46a1 and 46a2 in FIG. 4), and each subregion is configured to have different sensitivity to the wavelength of light incident thereon.
  • the light is condensed in the sub-region having the optimum sensitivity according to the wavelength of the light split by the diffraction grating 42. Therefore, even if the wavelength resolution or the acquisition wavelength band is changed, the fluorescence wavelength can always be acquired in the light receiving region having the optimum sensitivity.
  • micromirrors 44a of the reflector array 44 on which the excitation light is incident can be deflected in a predetermined direction by controlling the tilt angle of the micromirrors 44a so that the excitation light does not enter the light receiver 46. .
  • the spectroscope 40 since the spectroscope 40 according to the first embodiment uses the optical fiber 28 as the incident end, it can be easily connected to a confocal microscope. That is, in general, in a confocal microscope, light detection is performed by a photodetector connected to a pinhole, but light after passing through the pinhole is incident on the optical fiber so that light can be easily introduced into the optical fiber. Can be done. In this manner, a spectroscope suitable for a confocal microscope having a spectroscopic function can be configured.
  • FIG. 6 shows the configuration of the spectrometer 140 according to the second embodiment.
  • the difference from the spectroscope 40 according to the first embodiment is that the emission end of the optical fiber 28 and the reflector array 44 are in a conjugate relationship in the lateral direction (X-axis direction in the XZ cross section). That is, the diffraction grating 42 and the light receiving region of the light receiver 46 have a conjugate relationship in the axial direction.
  • the relationship in the vertical direction (Y-axis direction) is the same as that in the first embodiment.
  • the same components as those in the first embodiment are denoted by the same reference numerals, and detailed description thereof is omitted.
  • a spectroscope 140 shown in FIG. 6A includes a collimating optical system 41 that makes signal light incident from the optical fiber 28 substantially parallel light, a diffraction grating 42 that is a wavelength dispersion element (spectral element) having spectral characteristics, A reflecting mirror array 44 in which micromirrors are arranged two-dimensionally, and a condensing optical system that condenses signal light (spectral light) that has undergone wavelength dispersion by the diffraction grating 42 on the reflecting surface of the reflecting mirror array 44 in a one-dimensional manner.
  • a collimating optical system 41 that makes signal light incident from the optical fiber 28 substantially parallel light
  • a diffraction grating 42 that is a wavelength dispersion element (spectral element) having spectral characteristics
  • a reflecting mirror array 44 in which micromirrors are arranged two-dimensionally
  • a condensing optical system that condenses signal light (spectral light) that has undergone wavelength dispersion by the diffraction grat
  • a light receiver 46 having a light receiving element array in which a plurality of light receiving elements 46b forming a plurality of detection regions 46a are arranged in an array in the X-axis direction, and light reflected by the reflecting mirror array 44
  • a projection optical system 45 that forms an image in the light receiving region.
  • the signal light taken in via the optical fiber 28 is converted into substantially parallel light by the collimating optical system 41 and irradiated to the diffraction grating 42.
  • This signal light is dispersed at different angles for each wavelength by the diffraction grating 42 and is collected on the reflecting mirror array 44 by the condensing optical system 143.
  • the reflector array 44 has the configuration shown in FIG. 3 as in the first embodiment.
  • the condensing optical system 143 has a refractive power rotationally symmetric with respect to the optical axis.
  • the spectral light LI1 diffracted by the diffraction grating 42 to the upper side in the Y-axis direction is condensed as a point image IM11 on the upper side in the Y-axis direction of the reflecting mirror array 44 by the condensing optical system 143.
  • the spectroscopic light LI2 diffracted by the diffraction grating 42 to the lower side in the Y-axis direction is condensed as a point image IM12 by the condensing optical system 143 on the lower side in the Y-axis direction of the reflecting mirror array 44.
  • the projection optical system 45 includes a first condenser lens 45a having a refractive power rotationally symmetric with respect to the optical axis and a second condenser lens 45b composed of, for example, a cylindrical lens.
  • the combined focal length is designed to be different between the Y-axis direction and the X-axis direction.
  • the focal length in the X-axis direction of the projection optical system 45 is equal to the distance L22 between the X-axis direction main surface of the projection optical system 45 and the light receiver 46, as in the first embodiment. As shown in FIG. 6B, this depends on the reflection direction (direction of the reflected light LO1) of the signal light (spectral light LI1) by the micromirrors 44a on the reflecting mirror array 44. It is possible to select which detection region 46a of the plurality of detection regions 46a constituting the light receiver 46 is incident on the signal light.
  • the focal length in the Y-axis direction of the projection optical system 45 is designed so that the reflector array 44 and the light receiver 46 are conjugated as in the first embodiment. That is, when the distance between the reflecting mirror array 44 and the principal plane in the Y-axis direction of the projection optical system 45 is L21, the focal length f is set to have the relationship of the following equation (11).
  • the magnification of the projection optical system 45 in the Y-axis direction needs to be less than or equal to the ratio between the size of the detection area 46a and the size of the reflecting surface of the reflector array 44.
  • the magnification of the projection optical system 45 is equal to the ratio between the distance L22 and the distance L21, it is necessary to satisfy the relationship of the following equation (12).
  • the heights h1 and h2 of the two sub-regions 46a1 and 46a2 constituting the detection region 46a of the light receiver 46 are expressed by the above-described formula (3) As described above.
  • the focal length fc of the collimating optical system 41 may be set so that the width of the light beam after passing through the collimating optical system 41 is approximately equal to the lateral width (width in the X-axis direction) of the detection region 46a. If the width in the X-axis direction of the mirror array 44 is W ′, the relationship of the following equation (13) may be satisfied. However, NAf is the numerical aperture of the optical fiber 28, and f22T and f21 are the focal length in the X-axis direction of the projection optical system 45 and the focal length of the condensing optical system 143, respectively, determined from the following equations.
  • a diffraction grating having a grating constant d is used, and the incident angle to the diffraction grating 42 is set.
  • the output angle ⁇ 2 from the diffraction grating 42 is in a range from sin ⁇ 1 ( ⁇ 1 / d ⁇ sin ⁇ 1) to sin ⁇ 1 ( ⁇ 2 / d ⁇ sin ⁇ 1). Therefore, the half angle of view ⁇ of the spectral light emitted from the diffraction grating 42 is expressed by the equation (5) shown in the first embodiment.
  • the focal length f21 of the condensing optical system 143 is expressed by the following conditional expression (14 ) Should be satisfied.
  • the focal length of the projection optical system 45 includes a focal length f22T in the X-axis direction and a focal length f22L in the Y-axis direction, which are determined as follows.
  • the lateral width (width in the X-axis direction) of one detection region 46a in the light receiver 46 is WdT
  • Nd detection regions 46a are arranged in the X-axis direction
  • each micromirror 44a of the reflector array 44 is ⁇ ⁇ m.
  • the vertical width (Y-axis direction width) of the reflector array 44 is expressed as PSLM ⁇ NSLM. Therefore, of the spectral light reflected by the reflecting mirror array 44, the light extending in the Y-axis direction is collected by the projection optical system 45 and put into the vertical width (Y-axis direction width) WdL of the detection region 46a. Therefore, the magnification M of the projection optical system 45 may be set to the expression (8) shown in the first embodiment.
  • the focal length f22L in the Y-axis direction of the projection optical system 45 is the same as the distance L22 from the projection optical system 45 to the light receiver 46 is equal to the lateral focal length f22T of the projection optical system 45. If the distance between the optical system 45 and the principal surface in the Y-axis direction is L21, the following equation (16) is obtained from the relationship of the above equation (11).
  • the micromirror that reflects the fluorescence wavelength by the reflecting mirror array 44 The inclination ⁇ of 44a may be controlled so as to satisfy the following equation (17).
  • the reflected light LO1 of the point image IM11 collected on the upper side in the Y-axis direction of the reflecting mirror array 44 is condensed on the detection region 46a on the left side in the X-axis direction and image IM21.
  • the reflected light LO2 of the point image IM12 collected on the lower side in the Y-axis direction of the reflector array 44 is condensed on the detection region 46a on the right side in the X-axis direction to form an image IM22.
  • the images IM21 and IM22 of the point images IM11 and IM12 formed by the projection optical system 45 are linear light patterns extending in the X-axis direction.
  • the micro mirrors 44a on the reflector array 44 are desirably arranged one-dimensionally in the Y-axis direction, but the micro mirrors 44a may be arranged two-dimensionally. Absent. In this case, the micromirrors 44a that are at the same height in the Y-axis direction and are aligned in the X-axis direction may be controlled to have the same reflection angle.
  • the spectroscope 140 By configuring the spectrometer 140 according to the second embodiment as described above, in the first embodiment, the spectroscope 140 extends in a line shape in the X-axis direction on the reflector array 44. Since the image is a point image in the embodiment, the element size of the reflector array 44 can be reduced.
  • FIG. 7 shows a configuration of a spectroscope 240 according to the third embodiment.
  • the difference between the spectroscopes 40 and 140 according to the first and second embodiments is that the vertical direction (Y-axis direction in the YZ section) and the horizontal direction (X-axis direction in the XZ section) differ from the exit end of the optical fiber 28.
  • the reflecting mirror array 244 has a conjugate relationship, and similarly, the diffraction grating 42 and the light receiving region of the light receiver 46 have a conjugate relationship.
  • symbol is attached
  • the spectroscope 240 shown in FIG. 7A includes a collimating optical system 41 that makes signal light incident from the optical fiber 28 substantially parallel light, a diffraction grating 42 that is a wavelength dispersion element (spectral element) having spectral characteristics, A reflecting mirror array 244 in which micro-reflecting mirrors (micro-mirrors) are two-dimensionally arranged, and a signal beam (spectral light) that has undergone wavelength dispersion by the diffraction grating 42 is focused on the reflecting mirror array 244 in a one-dimensional manner.
  • a collimating optical system 41 that makes signal light incident from the optical fiber 28 substantially parallel light
  • a diffraction grating 42 that is a wavelength dispersion element (spectral element) having spectral characteristics
  • a reflecting mirror array 244 in which micro-reflecting mirrors (micro-mirrors) are two-dimensionally arranged, and a signal beam (spectral light) that has undergone wavelength dispersion by the diffraction
  • An optical system 143 a light receiver 46 having a light receiving element array in which a plurality of light receiving elements 46b forming a detection region 46a are arranged in an array in the X-axis direction, and light reflected by the reflector array 244 A projection optical system 245 that forms an image in the light receiving region.
  • the detection area 46a is divided into a first sub-area 46a1 and a second 46a2.
  • the signal light taken in via the optical fiber 28 is converted into substantially parallel light by the collimating optical system 41 and irradiated to the diffraction grating 42.
  • the observation light is dispersed at different angles for each wavelength by the diffraction grating 42 and is collected on the reflecting mirror array 244 by the condensing optical system 143.
  • the condensing optical system 143 has a refractive power that is rotationally symmetric with respect to the optical axis. Therefore, as shown in FIGS.
  • the spectral light LI1 diffracted by the diffraction grating 42 to the upper side in the Y-axis direction is pointed to the upper side in the Y-axis direction of the reflector array 244 by the condensing optical system 143. It is condensed as an image IM11.
  • the spectral light LI2 diffracted by the diffraction grating 42 downward in the Y-axis direction is condensed as a point image IM12 by the condensing optical system 143 on the lower side of the reflecting mirror array 244 in the Y-axis direction.
  • the reflector array 244 is not only in the predetermined one-dimensional direction (X-axis direction) described above, but also in a direction substantially perpendicular to the one-dimensional direction (Y-axis direction).
  • the mirror surface can also be tilted, that is, the mirror surface can be tilted in two axes, the X-axis direction and the Y-axis direction.
  • two sets of electrodes first electrode 244f and second electrical decoration 244g
  • first electrode 244f and second electrical decoration 244g are arranged on the upper surface of the drive base 244h, and further, these upper surfaces are covered.
  • a first frame 244b that supports the arranged micromirror 244a by a first hinge (shaft) 244c and a second frame 244d that supports the first frame 244b by a second hinge (shaft) 244e are disposed.
  • Each micromirror 244a can tilt the mirror surface in the X-axis direction by the voltage applied to the first electrode 244f around the first hinge 244c supported by the first frame 244b.
  • the frame 244b is configured such that the mirror surface can be inclined in the Y-axis direction by a voltage applied to the second electrode 244g around the second hinge 244e supported by the second frame 244d.
  • the projection optical system 245 has the same focal length in the Y-axis direction and the X-axis direction.
  • the projection optical system 245 has a refractive power that is rotationally symmetric with respect to the optical axis.
  • the light receiver 46 is disposed at the rear focal position of the projection optical system 245 with respect to the Y-axis direction (spectral direction) in a plane substantially orthogonal to the optical axis of the projection optical system 245. .
  • the focal length of the projection optical system 245 is designed to be equal to the distance L2 between the main surface of the projection optical system 245 and the light receiver 46, as shown in FIGS. 7 (a), 7 (c), and 7 (d).
  • the focal length fc of the collimating optical system 41 is obtained by multiplying the diameter of the light beam after passing through the collimating optical system 41 by the magnification determined by the condensing optical system 143 and the projection optical system 245, and the diameter of the light receiving element 46b. Therefore, if the diameter of the light receiving element 46b is ⁇ , the relationship of the following equation (18) may be satisfied.
  • NAf is the numerical aperture of the optical fiber 28, and f32 and f31 are the focal length of the projection optical system 245 and the focal length of the condensing optical system 143 determined from the following equations, respectively.
  • a diffraction grating having a grating constant d is used, and the incident angle to the diffraction grating 42 is set.
  • the output angle ⁇ 2 from the diffraction grating 42 is in a range from sin ⁇ 1 ( ⁇ 1 / d ⁇ sin ⁇ 1) to sin ⁇ 1 ( ⁇ 2 / d ⁇ sin ⁇ 1). Therefore, the half angle of view ⁇ of the spectral light emitted from the diffraction grating 42 is expressed by the equation (5) shown in the first embodiment.
  • the focal length f31 of the condensing optical system 143 is expressed by the following conditional expression (19 ) Should be satisfied.
  • the focal length of the projection optical system 245 is determined as follows.
  • the light receiving element 46b has a vertical width (Y-axis direction width) of WdL
  • the light-receiving element 46b has Nd rows in the X-axis direction
  • a horizontal width (X-axis direction width) of WdT The micromirrors 244a of the reflecting mirror array 244 have a deflection angle of ⁇ ⁇ m in the vertical direction (Y-axis direction) and in the horizontal direction (X-axis direction). Assuming that the deflection angle is ⁇ ⁇ m, the focal length f32 of the projection optical system 245 only needs to satisfy the relationship of the following equations (20) and (21).
  • the reflected light LO1 of the point image IM11 collected on the upper side in the Y axis direction of the reflector array 244 is condensed on the light receiving element 46b on the upper left side in the X axis direction as shown in FIG. 7B.
  • the reflected light LO2 of the point image IM12 that forms the image IM21 and is condensed on the lower side in the Y-axis direction of the reflector array 244 is condensed on the light receiving element 46b on the right side in the lower X-axis direction to form the image IM22. ing.
  • micromirrors 244a on the reflector array 244 are desirably arranged two-dimensionally in the Y-axis direction, but the micromirrors 244a may be arranged one-dimensionally. At that time, the micromirrors 244a that are at the same height in the Y-axis direction and are aligned in the X-axis direction may be controlled to have the same reflection angle.
  • the element size of the reflector array 244 can be reduced by configuring the spectrometer 240 according to the third embodiment as described above.
  • the micromirror 244a of the reflector array 244 can be rotated in the direction (X-axis direction) orthogonal to the spectral direction to select the detection region 46a of the spectral light reflected by each micromirror 244a, and the micromirror 244a.
  • Is configured to be rotatable also in the spectral direction (Y-axis direction), the position on the light receiving region of the light receiver 46 corresponding to the spectral direction determined by the wavelength of the signal light in the diffraction grating 42, that is, for each detection region 46a
  • These sub-regions 46a1 and 46a2 can be selected according to the rotation angle of the micromirror 244a in the Y-axis direction without being fixed to the sub-regions 46a1 and 46a2.
  • each of the plurality of detection areas 46a is divided into sub-areas, but it is not necessary that all the detection areas 46a are divided into sub-areas, and at least one detection area is detected. It is only necessary that the region 46a is divided into sub-regions.
  • the detection region 46 a formed of a rectangular region having a long side in the Y-axis direction and a short side in the X-axis direction is the micro-mirror in the X-axis direction, that is, the reflector array 44.
  • the detection regions 46a are arranged in an array in the rotation direction of 44a, and each detection region 46a has a plurality of subregions (FIG. 4) arranged in the Y-axis direction, that is, in the direction in which the signal light is dispersed by the diffraction grating 42 serving as a spectroscopic element. Is divided into two sub-regions 46a1 and 46a2), but is not limited to this.
  • two modifications of the light receiver will be described.
  • the light receiver 46 ′ according to the first modification shown in FIG. 9A has a detection region 46a ′ composed of a rectangular region having a long side in the Y-axis direction and a short side in the X-axis direction. That is, from the first detection region group 46a1 ′ and the two or more detection regions 46a ′ that are arranged in an array in the rotation direction of the micromirrors 44a of the reflector array 44 and are composed of two or more detection regions 46a ′. And a light receiving element 46b ′ disposed in each of the two area groups 46a1 ′ and 46a2 ′ has a wavelength of incident light for each of the area groups 46a1 ′ and 46a2 ′.
  • FIG. 9A shows a case where two region groups 46a1 'and 46a2' are arranged, but three or more regions may be arranged.
  • the light receiver 46 ′ includes a light receiving element 46b ′ formed in a rectangular shape in each of the two area groups 46a1 ′ and 46a2 ′, and an adjacent light receiving element 46b ′. It may be configured to be arranged closely, or, like the light receiver 46 shown in FIG. Alternatively, the sensitivity to the wavelength may be changed.
  • FIG. 9A can be used in place of the light receiver 46 of FIG. 4, the condensing optical system 43, the reflector array 44, and the like shown in FIGS.
  • This is a configuration of the projection optical system 45.
  • the formation position of the image in the Y-axis direction in the light receiver 46 ′ is reflected as in the image IM shown in FIG. 9A when the rotation direction of the micro mirror 44a of the reflector array 44 is the X-axis direction.
  • the detection region 46 ′′ composed of a rectangular region having the long side in the X-axis direction and the short side in the Y-axis direction has the Y-axis.
  • a first detection region group 46a1 "composed of two or more detection regions 46a” and a second detection region group 46a2 "composed of two or more detection regions 46a” are arranged in an array in the axial direction.
  • the light receiving elements 46b ′′ arranged in the two region groups 46a1 ′′ and 46a2 ′′ have different photoelectric conversion sensitivities (conversion efficiencies) with respect to the wavelength of incident light, for each of the region groups 46a1 ′′ and 46a2 ′′.
  • 9B shows a case where two area groups 46a1 ′′ and 46a2 ′′ are arranged, but it may be arranged such that three or more areas are arranged.
  • the light receiver 46 ′′ has two In each of the area groups 46a1 ′′ and 46a2 ′′, a light receiving element 46b ′′ formed in a rectangular shape may be arranged so that adjacent light receiving elements 46b ′′ are in close contact with each other, or the light receiver 46 shown in FIG.
  • a plurality of circular or elliptical light receiving elements may be arranged in the X-axis direction for each detection region 46a ′, and the sensitivity to the wavelength may be changed for each region group.
  • the dispersed light can be rotated in the Y-axis direction of the micromirrors 44a.
  • the group of regions 46a1 ′′ and 46a2 ′′ can be selected by moving the image IM formed in the Y-axis direction.
  • the first condenser lens 45a having a refractive power rotationally symmetric with respect to the optical axis of the first embodiment and the refractive power in the Y-axis direction are the refractive power in the X-axis direction.
  • a projection optical system including the first condenser lens 45a having a refractive power rotationally symmetric with respect to the optical axis may be used.
  • a linear (Y-axis direction) image is formed on the light receiver 46.
  • the rotation direction of the micro mirror 44a of the reflector array 44 may be at least rotated in the X-axis direction, but the light receiver 46 ′ shown in FIG. 7A is applied. In this case, it is preferable to rotate both in the X-axis direction and the Y-axis direction.
  • the light receiver 46 ′′ shown in FIG. 7B it is sufficient to rotate at least in the Y-axis direction.
  • reflector arrays 44 and 244, projection optics which are the configurations of the spectroscopes 40, 140, and 240 of the first to fourth embodiments (FIGS. 2, 6, and 7).
  • PMT array photoreceiver

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Abstract

 波長分解能や取得波長帯域を変更しても常に受光器におけるより良い感度の受光領域で信号光を取得することができる分光器及びこの分光器を有する顕微分光システムを提供する。 顕微分光システム1に用いられる分光器40は、信号光を分光する分光素子42と、分光素子42で分光された分光光を集光する集光光学系43と、分光光を受光する受光器46と、を有し、受光器46は、分光光を検出する感度が互いに異なる波長特性を有する複数の領域を有する。

Description

分光器及び顕微分光システム
 本発明は、分光器及び顕微分光システムに関する。
 蛍光顕微鏡では蛍光を励起光から分離検出する必要がある原理上、何らかの形での分光機能が必須となっている。多重染色した標本の多重励起光、多重蛍光像を取得する装置として、分光された蛍光を微小鏡からなるミラーアレイを介して複数の受光器にそれぞれ導く装置が開示されている(例えば、特許文献1参照)。
米国発行特許発明第7256890号明細書
 しかしながら、多重蛍光像の波長範囲は広範囲である場合に、各受光器において、十分な信号光を取得できないという課題があった。
 本発明はこのような課題に鑑みてなされたものであり、受光器でより良い信号光を取得することができる分光器及びこの分光器を有する顕微分光システムを提供することを目的とする。
 前記課題を解決するために、本発明に係る分光器は、信号光を分光する分光素子と、この分光素子で分光された分光光を集光する第1の光学系と、分光光を受光する受光器と、を有し、受光器は、分光光を検出する感度が互いに異なる波長特性を有する複数の領域を有することを特徴とする。
 また、本発明に係る顕微分光システムは、光源からの光を走査して対物レンズを介して標本に集光し、標本から射出した信号光を対物レンズを介して集光する顕微鏡と、この顕微鏡からの信号光を分光して検出する上述の分光器のいずれかと、を有することを特徴とする。
 本発明によれば、多重蛍光像の波長範囲が広範囲であっても、受光器におけるより良い感度の受光領域で信号を取得することができる。
顕微分光システムの構成を示すブロック図である。 第1の実施形態に係る分光器を説明するための説明図である。 第1及び第2の実施形態に係る分光器で用いられる反射鏡アレイの構成を説明するための説明図である。 第1及び第2の実施形態に係る分光器で用いられる受光器の構成を説明するための説明図である。 受光基の結晶光電素子による波長の変換効率(感度)との関係を示すグラフである。 第2の実施形態に係る分光器を説明するための説明図である。 第3の実施形態に係る分光器を説明するための説明図である。 第3の実施形態に係る分光器で用いられる反射鏡アレイの構成を説明するための説明図である。 受光器における検出領域の配置について変形例を示す説明図であって、(a)は第1の変形例を示し、(b)は第2の変形例を示す。
[第1の実施形態]
 以下、本発明の好ましい実施形態について図面を参照して説明する。まず、図1~図5を用いて第1の実施形態に係る分光器を有する顕微分光システムの構成について説明する。図1に示すように、この顕微分光システム1は、光源系10、共焦点ユニット20及び顕微鏡30を有する共焦点顕微鏡と、分光器40と、制御部50と、を有する。この顕微分光システム1において、共焦点ユニット20と分光器40とは、ファイバカプラ29a,29bを介して光ファイバ28により光学的に接続されている。
 光源系10は、レーザ装置11と、光ファイバ13と、ファイバカプラ12,14と、を有する。レーザ装置11は、例えば、レーザーダイオードを備え、目的の波長特性を有する照明光を射出する。この照明光は、光ファイバ13を介して共焦点ユニット20に導かれる。なお、図1の例では、照明光は、標本33を励起して蛍光を発光させるための励起光である。
 共焦点ユニット20は、光源系10からの照明光を略平行光束とするコリメートレンズ21と、ダイクロイックミラー22と、走査ユニット23と、スキャナレンズ24と、集光レンズ25と、ピンホール26aを有するピンホール板26と、リレーレンズ27と、を有する。また、顕微鏡30は、第2対物レンズ31及び対物レンズ32と、標本33が載置されるステージ34と、を有する。これらの共焦点ユニット20と顕微鏡30とを組み合わせて走査型共焦点顕微鏡が構成される。なお、ダイクロイックミラー22は、光源系10から射出されたレーザ光を顕微鏡30側に反射し、このレーザ光により励起した標本33から放射される蛍光を透過するように構成されている。また、集光レンズ25の像側焦点は、ピンホール板26のピンホール26aと略一致するように配置されている。
 光源である光源系10のレーザ装置11から射出されたレーザ光(励起光)はファイバカプラ12を介して光ファイバ13に導入される。さらにこの光ファイバ13を通ったレーザ光はファイバカプラ14から共焦点ユニット20のコリメートレンズ21に入射する。そして、このレーザ光はコリメートレンズ21で略平行光に変換された後、ダイクロイックミラー22で顕微鏡30側の光路に反射され、直交配置された2つのガルバノミラーからなる走査ユニット23及びスキャナレンズ24に導入されて、二次元的に走査される。走査されたレーザ光は、第2対物レンズ31で略平行光にされた後、対物レンズ32で集光され、標本33上の1点に集光される。なお、走査ユニット23により二次元的に走査される標本33上の位置は、制御部50により走査ユニット23におけるガルバノミラーの動作を制御することにより制御される。そして、このレーザ光により励起された標本33から放射された蛍光(信号光)は、対物レンズ32で略平行光に変換され、レーザ光(励起光)と逆の経路を辿ってダイクロイックミラー22に入射する。さらに、ダイクロイックミラー22に入射した蛍光はこのダイクロイックミラー22を透過し、集光レンズ25によりピンホール板26のピンホール26a上に集光される。
 ピンホール26aを通過した光は、リレーレンズ27を経て、ファイバカプラ29aから光ファイバ28に導かれる。リレーレンズ27を介すると、図1に示すように、ピンホール26aを通過した光が、そのままであると発散光束となるところを、再び、集光され、光ファイバ28の開口端において、見かけ上、小さな開口径でも、有効に(ロスが少なく)入射できるようになる。
 ここで、ピンホール26aに形成される集光点は標本33上での光スポットの像となっているため、標本33上の他の点から発した光がたとえあったとしても、ピンホール26aでは像を結ばずピンホール板26により遮られ、ファイバカプラ29aにほとんど到達できない。そのため、このピンホール26aを通過できた光のみが、リレーレンズ27を介してファイバカプラ29aに到達できる。この結果、走査型共焦点顕微鏡では高い横分解能だけでなく、高い縦分解能を持って標本を観察できる顕微鏡となっている。
 ファイバカプラ29aに入射した蛍光は、光ファイバ28を通り、ファイバカプラ29bを介して分光器40に導入される。
 図2(a)に示すように、分光器40は、光ファイバ28から入射する信号光(図1の例では蛍光)を略平行光束とするコリメート光学系41と、分光特性を有する波長分散素子(以下「分光素子」と呼ぶ)である回折格子42と、1次元又は2次元に微小反射鏡(微小鏡)が配列されて反射面を形成する反射鏡アレイ44と、回折格子42で波長分散を受けた信号光(分光光)を反射鏡アレイ44の反射面上に2次元に集光する第1の光学系である集光光学系43と、複数の検出領域46aを形成する複数の受光素子46bがアレイ状に並べられた受光素子アレイを有して受光領域を形成する受光器46と、反射鏡アレイ44で反射された信号光(分光光)を受光器46の受光領域に結像させる第2の光学系である投影光学系45と、を有する。以下、この分光器40の光軸方向(光ファイバ28から出射した信号光が進む中心方向)をZ軸とし、この光軸に直交する面内において水平方向をX軸とし、垂直方向をY軸として説明する。反射鏡アレイは、アナログ制御であり、各微小鏡は、任意の角度に設定可能であり、例えば、アダマンド工業製が用いられるが、これに限らない。反射アレイは、公知のMEMS技術を用いて製造できる。
 この分光器40では、光ファイバ28により導入された信号光を、コリメート光学系41により略平行光とし、回折格子42に照射する。この回折格子42は、X軸方向に延びる回折格子溝が微小間隔でY軸方向に複数並んで刻まれている。そのため、この回折格子42に入射した信号光は、Y軸方向に回折される。このとき回折角はその波長によって決まるため、この信号光はY軸方向に波長に応じて分散され、分光される。すなわち、光軸に直交する面内において、回折格子42による分光方向がY軸方向に相当し、この分光方向に直交する方向がX軸方向に相当する。また、図2では回折格子42は反射型で記載されているが、透過型でも構成することは可能である。また、回折格子42は、レリーフ型でもVPHG(Volume Phase Holographic Grating)でも構成可能である。
 そして、このようにして分光された信号光(分光光)は集光光学系43に入射する。この集光光学系43は、X軸方向とY軸方向の屈折力が異なるように構成されており、この図2においてはY軸方向の屈折力がX軸方向の屈折力より大きくなるように構成されている。例えば、この2次元集光光学系43としては、Y軸方向にのみ屈折力を有するシリンドリカルレンズを用いることができる。そのため、この集光光学系43に入射した分光光は、X軸方向には同一の長さであるがY軸方向に並ぶライン毎に異なる光波長からなる光パターンが生成され、反射鏡アレイ44上に投影される。例えば、図2の構成の場合、回折格子42でY軸方向上側に回折された分光光LI1は、集光光学系43により反射鏡アレイ44のY軸方向上側に光パターンIM11(ライン状像)として集光される。また、回折格子42でY軸方向下側に回折された分光光LI2は、集光光学系43により反射鏡アレイ44のY軸方向下側に光パターンIM12(ライン状像)として集光される。
 反射鏡アレイ44は、図3に示すような構造をした微小鏡44aが1次元、若しくは2次元に配列しているものである。この反射鏡アレイ44は、駆動基盤部44eの上面に電極44dが配置され、さらにこれらの上面を覆うように配置される微小鏡44aをヒンジ(軸)44cにより支えるフレーム44bが配置されている。そして、各微小鏡44aはフレーム44bで支えられたヒンジ44cの周りに、駆動基盤部44e上に配置された電極44dに、制御部50からの信号に基づいて加えられた電圧によって所定の1次元方向(本実施形態では分光方向と略直交する方向であるX軸方向)に鏡面を傾斜させる(回転させる)ことができるように構成されている。一般に微小鏡44aは正方形かそれに近い縦横比となっているため、反射鏡アレイ44として必要な縦幅と横幅に大きな開きが無いような場合には2次元配列したものを利用し、X軸方向に並ぶ微小鏡44aのX軸方向の各ラインに同一の制御を行うことで、あたかもY軸方向の幅が狭くX軸方向に長い鏡があるようにすることもできる。
 複数の微小鏡44aからなる反射鏡アレイ44に限られず、分光光を偏向する微小偏向素子からなる微小偏向部材(アレイ)であればよい。
 反射鏡アレイ44において反射された信号光(分光光)は、投影光学系45によって受光器46に導かれる。ここで、図4を用いて、この第1の実施形態における受光器46の構成について説明する。この受光器46は、Y軸方向が長辺であり、X軸方向が短辺である矩形領域からなる検出領域46aを含み、複数の検出領域46aは、X軸方向、すなわち、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向にアレイ状に並んで配置されている。また、各検出領域46aは、Y軸方向、すなわち、分光素子である回折格子42により信号光が分光される方向に並んだ複数のサブ領域に分割されている。ここでは、第1のサブ領域46a1と第2のサブ領域46a2の2つの領域が形成されている場合について説明する。さらに、検出領域46aの各々には、Y軸方向に並ぶ2つ以上の受光素子46bが配置されており、これらの受光素子46bの各々は、上述したサブ領域のいずれかに属するように構成されている。受光素子46bは、光電変換素子(PMT)である。この図4に示す2つのサブ領域46a1,46a2の各々に配置された受光素子46bは、サブ領域46a1,46a2毎に、入射する光の波長に対する光電変換の感度(変換効率)が異なるように構成されている。なお、図4は検出領域46aを2つのサブ領域46a1,46a2に分割した場合であるが、これに限定されることはなく、3つ以上の領域に分割するように構成しても良い。また、図4に示すように、2つのサブ領域46a1,46a2の各々に、円形又は楕円形状の受光素子46bをY軸方向に複数並べ、サブ領域毎に波長に対する感度を変える構成に代えて、受光素子46bを矩形形状に形成し、隣接する受光素子46b同士を密接させて配置するように構成しても良い。
 各サブ領域には、複数の受光素子46aを配置した例を図示したが、各サブ領域には、少なくとも1つの受光素子46aが配置されていればよい。
 また、投影光学系45は、光軸に対して回転対称な屈折力を有する第1集光レンズ45aと、Y軸方向の屈折力の方がX軸方向の屈折力より大きい第2集光レンズ45bと、からなり、合成焦点距離がY軸方向とX軸方向とで異なるように設計されている。この投影光学系45の第2集光レンズ45bも、Y軸方向にだけ屈折力を有するシリンドリカルレンズを用いることができる。なお、第1集光レンズ45a及び第2集光レンズ45bの光軸方向に並ぶ順序は逆でも良い。
 この第1の実施形態では投影光学系45のX軸方向の焦点距離は、この投影光学系45のX軸方向主面と受光器46との距離L2に等しくなるように設計されている。そのため、制御部50による反射鏡アレイ44の微小鏡44aの傾斜角の制御によって、反射鏡アレイ44上の微小鏡44aによる信号光(分光光)の反射方向に依存して受光器46を構成する複数の検出領域46aのうちのどの検出領域46aに信号光(分光光)を入射させるかを選択することができる。
 一方、投影光学系45のY軸方向の焦点距離に関しては、反射鏡アレイ44と受光器46とが共役になるように設計されている。すなわち、反射鏡アレイ44と投影光学系45のY軸方向主面との距離がL1である場合に、Y軸方向の焦点距離fが次式(1)を満足するように設計されている。
f = L1×L2/(L1+L2)        (1)
 このとき、受光器46の受光領域が、図4に示すようにY軸方向に並ぶ複数の受光素子46bで構成されている場合、反射鏡アレイ44のY軸方向の像が縮小されて1つの検出領域46aに収まる必要があることから、投影光学系45のY軸方向の倍率は、検出領域46aの大きさと反射鏡アレイ44の反射面の大きさとの比以下となっている必要がある。ここで、投影光学系45の倍率は上述の距離L2と距離L1との比に等しいので、次式(2)の関係を満たす必要がある。
L2/L1≦検出領域のY軸方向サイズ/反射鏡アレイの反射面のY軸方向サイズ  (2)
 また、上述したように、受光器46の受光領域は、Y軸方向(波長分散方向)に並ぶ複数のサブ領域に分割されている。この受光器46で検出することが必要な波長帯域がλs~λf(λs<λfとする)であり、第1のサブ領域46a1と第2のサブ領域46a2とでそれぞれ検出する、予め設定した波長範囲の境界波長をλoとする。また、波長λsからλoまでの光に対して効率の高い受光領域を第1のサブ領域46a1とし、波長λoからλfまでの光に対して効率の高い受光領域を第2のサブ領域46a2とする。受光器46の受光領域(検出領域46a)のY軸方向(波長分散方向)の高さをhとし、第1のサブ領域46a1の高さをh1とし、第2のサブ領域46a2の高さをh2としたとき、次式(3)に示すように受光領域を分割することが好ましい。
h1 = h×(λo-λs)/(λf-λs)
h2 = h×(λf-λo)/(λf-λs)          (3)
 例えば、図5に示すように、第1のサブ領域46a1にガリウム砒素リン(GaAsP)の結晶光電面を用い、第2のサブ領域46a2にガリウム砒素(GaAs)の結晶光電面を用いることにより500~900nmまで感度がある受光領域を作成する場合を考える。その場合700nmを境に検出するサブ領域を使い分ける(選択する)ので、第1及び第2のサブ領域46a1,46a2のそれぞれの大きさは、次のようになる。
h1(GaAsP) = h×(700-500)/(900-500) =0.5h
h2(GaAs)  = h×(900-700)/(900-500) =0.5h
 以上より、この第1の実施形態に係る分光器40においては、反射鏡アレイ44のX軸方向に並ぶ微小鏡44aから構成されるラインの各々には、分光され、波長の異なる信号光が入射するため、図2(b)に示すように、ライン毎に微小鏡44aの傾斜角度を制御することにより、分光された信号光を波長毎にどの検出領域46aに入射させるかを制御することができる。例えば、反射鏡アレイ44のY軸方向上側に集光された光パターンIM11の反射光LO1は、X軸方向左側の検出領域46aに集光されて像IM21を形成し、反射鏡アレイ44のY軸方向下側に集光された光パターンIM12の反射光LO2は、X軸方向右側の検出領域46aに集光されて像IM22を形成している。このとき、各検出領域46aにおいて第1及び第2のサブ領域46a1,46a2のどちらに像が形成されるかは、回折格子42による分光方向、すなわち、分光された光の波長により決定される。したがって、上述した式(3)により、第1及び第2のサブ領域46a1,46a2の大きさを適切に決定しておくことにより、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの向き(傾斜角度)に関わらず、各々の光の波長に対して感度の良いサブ領域上に分光光の各々を集光させることができる。
 なお、受光器46の検出領域46aに配置された受光素子46bの各々は、これらの受光素子46bに入射する分光光の強度を検出し、その検出値が制御部50に渡され、制御部50で演算処理されて画像として図示しない表示装置等に出力される。
 それでは、この第1の実施形態に係る分光器40の具体的な設計手段を以下に示す。なお、集光光学系43及び第2集光レンズ45bについてはY軸方向にのみ屈折力を有するシリンドリカルレンズを用いる場合について説明する。
 まず、コリメート光学系41の焦点距離fcは、このコリメート光学系41を通過した後の光ビームの幅がおおよそ反射鏡アレイ44の横幅(X軸方向幅)と等しくなるようにすれば良いので、反射鏡アレイ44のX軸方向幅をWとすると、次の条件式(4)を満足すれば良い。但し、NAfは光ファイバ28の開口数である。
W = 2×fc×NAf             (4)
 次に集光光学系(シリンドリカルレンズ)43のY軸方向の焦点距離f1については、波長としてλ1~λ2の範囲の信号光を分光して検出するために、回折格子42として格子定数dのものを使い、この回折格子42への入射角をθ1とすると、回折格子42からの出射角θ2は、sin-1(λ1/d-sinθ1)からsin-1(λ2/d-sinθ1)までの範囲となる。従って、回折格子42から出射する分光光の半画角Δθは次式(5)で表される。
Δθ=(sin-1(λ2/d-sinθ1)-sin-1(λ1/d-sinθ1))/2  (5)
 よって、反射鏡アレイ44の微小鏡44aのY軸方向のピクセルピッチをPSLMとし、Y軸方向に並ぶピクセル数をNSLMとすると、集光光学系43のY軸方向の焦点距離f1は、次の条件式(6)を満たすようにすれば良い。
2×f1×sinΔθ = PSLM×NSLM        (6)
 最後に投影光学系45の焦点距離については、X軸方向の焦点距離f2TとY軸方向の焦点距離f2Lとがあるが、これらはそれぞれ次のように決める。
 まず、受光器46における1つの検出領域46aの横幅(X軸方向幅)がWdTで、この検出領域46aがX軸方向にNd本並んでおり、反射鏡アレイ44の各微小鏡44aは±αmの偏向角を持つとすると、この投影光学系45のX軸方向の焦点距離f2Tは、次式(7)の関係を満たせば良い。
f2T×sinαm = WdT×Nd/2         (7)
 なお、受光器46の受光領域が、図4に示すように複数の受光素子46bで形成されている場合、反射鏡アレイ44の縦幅(Y軸方向幅(高さh))がPSLM×NSLMとして表されるため、この反射鏡アレイ44で反射された分光光のうち、Y軸方向の成分が、投影光学系45で集光されて検出領域46aの縦幅(Y軸方向幅)WdLに入ればいいので、投影光学系45の倍率Mを次式(8)となるようにすれば良い。
M = WdL/(PSLM×NSLM)          (8)
 一方、投影光学系45のY軸方向の焦点距離f2Lは、投影光学系45から受光器46までの距離L2が、投影光学系45のX軸方向焦点距離f2Tに等しいので、反射鏡アレイ44と投影光学系45のY軸方向主面との距離がL1であれば、上述の式(1)の関係より、次式(9)のように表される。
f2L = L1×f2T/(L1+f2T)        (9)
 このように設計された光学系において、光軸に対してX軸方向にk番目の位置にある検出領域46aに分光光を入射させる際には、反射鏡アレイ44でその蛍光波長を反射している微小鏡44aの傾きαを、次式(10)となるように制御すれば良い。なお、回折格子42で分光された波長毎の分光光をどの検出領域46aに入射させるかは、ユーザ設定(例えば、受光器46において使用する検出領域46aの選択、蛍光色素の指定(蛍光色素と蛍光波長の対応表を制御部50内の記憶部に記憶する)、取得する蛍光波長領域(検出波長範囲)、励起波長の指定等)に基づいて前述した算出手法、後述する算出手法を用いて制御部50において算出した信号に基づいて、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの傾斜角を制御することにより選択することができる。
α = sin-1(k×WdT/f2T)        (10)
 反射鏡アレイ44上の微小鏡44aはこの第1の実施形態のような光学配置の場合にはY軸方向に1次元に配列していることが望ましいが、微小鏡44aが2次元に配列していてもかまわない。その際にはY軸方向の同一高さにありX軸方向に並ぶ微小鏡44aが同一の反射角となるように制御されれば良い。
 蛍光検出をする際に使われる励起光など、検出領域46aに入射することが望ましくない波長の光に関しては、反射鏡アレイ44上のその光の波長に対応する微小鏡44aの傾きを大きくすることでいずれの検出領域46aにも入射しない方向に飛ばしてしまうこともできる。上記の設計手順において受光器46を構成する検出領域46aのうち最も端に位置するものをブランクにしてしまうことで、検出が不要な励起光についてはその位置に集光するように反射鏡アレイ44を制御することで、受光器46に対して不要な光が入射することを防ぐことができる。
 このように、第1の実施形態に係る分光器40においては、反射鏡アレイ44を構成する微小ミラー44aをX軸方向に回転させる(振る)ことによって受光器46を構成する複数の検出領域46aのうちの1つを選んで分光光を入射させることができ、波長分解能や取得波長領域を任意に変えることができる。また分光された光が投影されている空間変調素子44全体を1つの検出領域46aに投影することができる。また、各々の検出領域46aはY軸方向に並ぶ複数のサブ領域から構成され(図4では2つのサブ領域46a1,46a2)、それぞれのサブ領域が入射する光の波長に対する感度が異なるように構成されるともに、回折格子42により分光された光の波長に合わせて最適な感度のサブ領域に集光されるように構成されている。そのため、波長分解能や取得波長帯域を変えても最適な感度の受光領域で常に蛍光波長を取得することができる。
 さらに、励起光が入射する、反射鏡アレイ44の微小鏡44aは、励起光が受光器46に入射しないように、微小鏡44aの傾斜角を制御することにより所定の方向に偏向することができる。
 また、この第1の実施形態に係る分光器40は、光ファイバ28を入射端としているので、容易に共焦点顕微鏡に接続することが可能である。すなわち、一般に共焦点顕微鏡では光検出をピンホールに接続した光検出器で行っているが、ピンホール透過後の光を光ファイバに入射させることで光検出器への光導入を容易に光ファイバで行うことが可能である。このようにして、分光機能を持った共焦点顕微鏡に適した分光器を構成することができる。
[第2の実施形態]
 図6に、第2の実施形態に係る分光器140の構成を示す。第1の実施形態に係る分光器40との違いは、横方向(XZ断面におけるX軸方向)において光ファイバ28の射出端と反射鏡アレイ44とが共役関係であり、同様に横方向(X軸方向)において回折格子42と受光器46の受光領域とが共役関係になったことである。なお、縦方向(Y軸方向)の関係は第1の実施形態と同様である。また、この第1の実施形態と同様の構成要素については、同一の符合を付し、詳細な説明は省略する。
 図6(a)に示す分光器140は、光ファイバ28から入射する信号光を略平行光とするコリメート光学系41と、分光特性を有する波長分散素子(分光素子)である回折格子42と、2次元に微小鏡が配列された反射鏡アレイ44と、回折格子42で波長分散を受けた信号光(分光光)を反射鏡アレイ44の反射面上に1次元に集光する集光光学系143と、複数の検出領域46aを形成する複数の受光素子46bがX軸方向にアレイ状に並べられた受光素子アレイを有する受光器46と、反射鏡アレイ44で反射した光を受光器46の受光領域に結像させる投影光学系45と、を有する。
 この分光器140では、光ファイバ28を介して取り込まれた信号光を、コリメート光学系41により略平行光とし、回折格子42に照射する。この信号光は回折格子42で波長毎に異なる角度に分散されて集光光学系143により反射鏡アレイ44上に集光される。なお、反射鏡アレイ44は第1の実施形態と同様に、図3に示す構成を有している。また、この第2の実施形態において、集光光学系143は光軸に回転対称な屈折力を有している。そのため、回折格子42でY軸方向上側に回折された分光光LI1は、集光光学系143により反射鏡アレイ44のY軸方向上側に点像IM11として集光される。また、回折格子42でY軸方向下側に回折された分光光LI2は、集光光学系143により反射鏡アレイ44のY軸方向下側に点像IM12として集光される。
 反射鏡アレイ44で反射された分光光は投影光学系45によって受光器46に導かれる。ここで、投影光学系45は第1の実施形態と同様、光軸に回転対称な屈折力を有する第1集光レンズ45aと例えばシリンドリカルレンズで構成される第2集光レンズ45bとからなり、合成焦点距離がY軸方向とX軸方向で異なるように設計されている。
 この第2の実施形態では投影光学系45のX軸方向の焦点距離は、第1の実施形態と同様に、投影光学系45のX軸方向主面と受光器46との距離L22に等しくなるように設計されており、図6(b)に示すように、反射鏡アレイ44上の微小鏡44aによる信号光(分光光LI1)の反射方向(反射光LO1の方向)に依存して、この信号光を、受光器46を構成する複数の検出領域46aのうちのどの検出領域46aに入射させるかを選択することができる。
 また、投影光学系45のY軸方向の焦点距離に関しては、第1の実施形態と同様に、反射鏡アレイ44と受光器46とが共役となるように設計されている。すなわち、反射鏡アレイ44と投影光学系45のY軸方向主面との距離がL21である場合に焦点距離fが、次式(11)の関係となるように設定されている。
f = L21×L22/(L21+L22)    (11)
 また、第1の実施形態と同様に、受光器46の受光領域が、図4に示すようにY軸方向に並ぶ複数の受光素子46bで構成されている場合、反射鏡アレイ44の像が1つの検出領域46aに収まる必要があることから、投影光学系45のY軸方向の倍率は検出領域46aの大きさと反射鏡アレイ44の反射面の大きさとの比以下となっている必要がある。ここで、投影光学系45の倍率は距離L22と距離L21との比に等しいので、次式(12)の関係を満たす必要がある。
L22/L21≦検出領域のY軸方向サイズ/反射鏡アレイの反射面のY軸方向サイズ  (12)
 また、受光器46の検出領域46aを構成する2つのサブ領域46a1,46a2の各々の高さh1,h2(1個の受光素子46aの高さをhとする)は、上述の式(3)を用いて説明した通りである。
 以下に、この第2の実施形態に係る分光器140の具体的な設計手段を示す。なお、第2集光レンズ45bについてはY軸方向にのみ屈折力を有するシリンドリカルレンズを用いる場合について説明する。
 まず、コリメート光学系41の焦点距離fcは、このコリメート光学系41を通過した後の光ビームの幅がおおよそ検出領域46aの横幅(X軸方向幅)と等しくなるようにすれば良いので、反射鏡アレイ44のX軸方向幅をW′とすると、次式(13)の関係を満足すれば良い。但し、NAfは光ファイバ28の開口数であり、f22T及びf21はそれぞれ下記の式から決まる投影光学系45のX軸方向の焦点距離及び集光光学系143の焦点距離である。
W′ = (f22T/f21)×2×fc×NAf      (13)
 次に集光光学系143の焦点距離f21については、波長としてλ1~λ2の範囲の信号光を検出するために、回折格子42として格子定数dのものを使い、回折格子42への入射角をθ1とすると、回折格子42からの出射角θ2は、sin-1(λ1/d-sinθ1)からsin-1(λ2/d-sinθ1)までの範囲となる。従って、回折格子42から出射する分光光の半画角Δθは第1の実施形態で示した式(5)で表される。よって、反射鏡アレイ44の微小鏡44aのY軸方向のピクセルピッチをPSLMとし、Y軸方向に並ぶピクセル数をNSLMとすると、集光光学系143の焦点距離f21は、次の条件式(14)を満たすようにすれば良い。
2×f21×sinΔθ = PSLM×NSLM        (14)
 最後に投影光学系45の焦点距離については、X軸方向の焦点距離f22TとY軸方向の焦点距離f22Lとがあるが、これらはそれぞれ次のように決める。
 まず、受光器46における1つの検出領域46aの横幅(X軸方向幅)がWdTで、この検出領域46aがX軸方向にNd本並んでおり、反射鏡アレイ44の各微小鏡44aは±αmの偏向角を持つとすると、この投影光学系45のX軸方向の焦点距離f22Tは、次式(15)の関係を満たせば良い。
f22T×sinαm = WdT×Nd/2          (15)
 なお、受光器46の受光領域が、図4(b)に示すように複数の受光素子46bで形成されている場合、反射鏡アレイ44の縦幅(Y軸方向幅)がPSLM×NSLMとして表されるため、この反射鏡アレイ44で反射された分光光のうち、Y軸方向に延びる光が、投影光学系45で集光されて検出領域46aの縦幅(Y軸方向幅)WdLに入ればいいので、投影光学系45の倍率Mは、第1の実施形態で示した式(8)となるようにすれば良い。
 一方、投影光学系45のY軸方向の焦点距離f22Lは、投影光学系45から受光器46までの距離L22が、投影光学系45の横方向焦点距離f22Tに等しいので、反射鏡アレイ44と投影光学系45のY軸方向主面との距離がL21であれば、上述の式(11)の関係より、次式(16)のように表される。
f22L = L21×f22T/(L21+f22T)     (16)
 このように設計された光学系において、光軸に対してX軸方向にk番目の位置にある検出領域46aに入射させる際には、反射鏡アレイ44でその蛍光波長を反射している微小鏡44aの傾きαを、次式(17)となるように制御すれば良い。
α = sin-1(k×WdT/f22T)         (17)
 例えば、図6(a)に示すように、反射鏡アレイ44のY軸方向上側に集光された点像IM11の反射光LO1は、X軸方向左側の検出領域46aに集光されて像IM21を形成し、反射鏡アレイ44のY軸方向下側に集光された点像IM12の反射光LO2は、X軸方向右側の検出領域46aに集光されて像IM22を形成している。このとき、投影光学系45により形成される点像IM11,IM12の像IM21,IM22は、X軸方向に延びるライン状の光パターンとなる。
 なお、この第2の実施形態においても、反射鏡アレイ44上の微小鏡44aはY軸方向に1次元に配列していることが望ましいが、微小鏡44aが2次元に配列していてもかまわない。その際にはY軸方向の同一高さにありX軸方向に並ぶ微小鏡44aが同一の反射角となるように制御されればよい。
 複数の微小鏡44aからなる反射鏡アレイ44に限られず、分光光を偏向する微小偏向素子からなる微小偏向素子部材(アレイ)であればよい。
 第2の実施形態に係る分光器140を以上のような構成にすることによって、第1の実施形態では、反射鏡アレイ44上にX軸方向にライン状に延びていたが、この第2の実施形態では点像となるので、反射鏡アレイ44の素子サイズを小さくすることができる。
[第3の実施形態]
 図7に、第3の実施形態に係る分光器240の構成を示す。第1及び第2の実施形態に係る分光器40,140との違いは、縦方向(YZ断面におけるY軸方向)及び横方向(XZ断面におけるX軸方向)で、光ファイバ28の射出端と反射鏡アレイ244が共役関係であり、同様に回折格子42と受光器46の受光領域が共役関係になったことである。なお、第1及び第2の実施形態と同様の構成要素については、同一の符合を付し、詳細な説明は省略する。
 図7(a)に示す分光器240は、光ファイバ28から入射する信号光を略平行光とするコリメート光学系41と、分光特性を有する波長分散素子(分光素子)である回折格子42と、2次元に微小反射鏡(微小鏡)が配列された反射鏡アレイ244と、回折格子42で波長分散を受けた信号光(分光光)を反射鏡アレイ244上に1次元に集光する集光光学系143と、検出領域46aを形成する複数の受光素子46bがX軸方向にアレイ状に並べられた受光素子アレイを有する受光器46と、反射鏡アレイ244で反射した光を受光器46の受光領域に結像させる投影光学系245と、を有する。検出領域46aは、図4に示すように、第1のサブ領域46a1、第2の46a2に分割されている。
 この分光器240では、光ファイバ28を介して取り込まれた信号光を、コリメート光学系41により略平行光とし、回折格子42に照射する。観察光は回折格子42で波長毎に異なる角度に分散されて集光光学系143により反射鏡アレイ244上に集光される。この第3の実施形態においても、第2の実施形態と同様に、集光光学系143は光軸に回転対称な屈折力を有している。そのため、図7(a),(b)に示すように、回折格子42でY軸方向上側に回折された分光光LI1は、集光光学系143により反射鏡アレイ244のY軸方向上側に点像IM11として集光される。また、回折格子42でY軸方向下側に回折された分光光LI2は、集光光学系143により反射鏡アレイ244のY軸方向下側に点像IM12として集光される。
 また、反射鏡アレイ244は第1及び第2の実施形態とは異なり、上述の所定の1次元方向(X軸方向)に加えて、この1次元方向に略直交する方向(Y軸方向)にも鏡面を傾斜させることができる、すなわち、X軸方向及びY軸方向の2軸に鏡面を傾斜させることができるようになっている。例えば、図8に示すように、反射鏡アレイ244は、駆動基盤部244hの上面に2組の電極(第1電極244f及び第2電飾244g)が配置され、さらにこれらの上面を覆うように配置される微小鏡244aを第1ヒンジ(軸)244cにより支える第1フレーム244bと、この第1フレーム244bを第2ヒンジ(軸)244eにより支える第2フレーム244dとが配置されている。そして、各微小鏡244aは、第1フレーム244bで支えられた第1ヒンジ244cの周りに第1電極244fに加えられた電圧によってX軸方向に鏡面を傾斜させることができ、さらに、この第1フレーム244bは、第2フレーム244dで支えられた第2ヒンジ244eの周りに第2電極244gに加えられた電圧によってY軸方向に鏡面を傾斜させることができるように構成されている。
 反射鏡アレイ244において反射された分光光は投影光学系245によって受光器46に導かれる。ここで、投影光学系245は、第1及び第2の実施形態とは異なり、Y軸方向とX軸方向で焦点距離は同じである。例えば、この投影光学系245は、光軸に回転対称な屈折力を有して構成されている。この第3の実施形態において、受光器46は、投影光学系245の光軸と略直交する面内におけるY軸方向(分光方向)に関してこの投影光学系245の後側焦点位置に配置されている。すなわち、投影光学系245の焦点距離は、投影光学系245の主面と受光器46との距離L2に等しくなるように設計されており、図7(a),(c),(d)に示すように、反射鏡アレイ244上の微小鏡244aによる信号光(分光光LI1)の反射方向(反射光LO1の方向)に依存して受光器246を構成する受光素子246aのうちのどの受光素子246aに入射するかを選択することができる。
 以下に、この第3の実施形態に係る分光器240の具体的な設計手段を示す。
 まず、コリメート光学系41の焦点距離fcは、このコリメート光学系41を通過した後の光ビームの径に集光光学系143と投影光学系245で決まる倍率を乗じた径が受光素子46bの径に等しくなるようにすれば良いので、受光素子46bの径をΦとすると、次式(18)の関係を満たせば良い。但し、NAfは光ファイバ28の開口数であり、f32及びf31はそれぞれ下記の式から決まる投影光学系245の焦点距離及び集光光学系143の焦点距離である。
Φ ≧ (f32/f31)×2×fc×NAf       (18)
 次に集光光学系143の焦点距離f31については、波長としてλ1からλ2の範囲の信号光を検出するために、回折格子42として格子定数dのものを使い、回折格子42への入射角をθ1とすると、回折格子42からの出射角θ2は、sin-1(λ1/d-sinθ1)からsin-1(λ2/d-sinθ1)までの範囲となる。従って、回折格子42から射出する分光光の半画角Δθは第1の実施形態で示した式(5)で表される。よって、反射鏡アレイ244の微小鏡244aのY軸方向のピクセルピッチをPSLMとし、Y軸方向に並ぶピクセル数をNSLMとすると、集光光学系143の焦点距離f31は、次の条件式(19)を満たすようにすれば良い。
2×f31×sinΔθ = PSLM×NSLM       (19)
 最後に投影光学系245の焦点距離については、次のように決める。
 図7(b)に示すように、受光素子46bの縦幅(Y軸方向幅)がWdLで、この受光素子46bがX軸方向にNd列、横幅(X軸方向幅)がWdTで、Y軸方向にMd行、2次元上に並んでおり、また、反射鏡アレイ244の各微小鏡244aは縦方向(Y軸方向)に±αmの偏向角を持ち、横方向(X軸方向)に±βmの偏向角をもつとすると、この投影光学系245の焦点距離f32は、次式(20),(21)の関係を満たせば良い。
f32×sinαm = WdL×Nd/2          (20)
f32×sinβm = WdT×Md/2          (21)
 このように設計された光学系において、光軸に対して縦方向(Y軸方向)にj番目で、横方向(X軸方向)にk番目の位置にある受光素子46bに入射させる際には、反射鏡アレイ244でその蛍光波長を反射している微小鏡244aの傾きα,βを、次式(22),(23)となるように制御すれば良い。
α = sin-1(j×WdL/f32)          (22)
β = sin-1(k×WdT/f32)          (23)
 例えば、反射鏡アレイ244のY軸方向上側に集光された点像IM11の反射光LO1は、図7(b)に示すように、上段のX軸方向左側の受光素子46bに集光されて像IM21を形成し、反射鏡アレイ244のY軸方向下側に集光された点像IM12の反射光LO2は、下段のX軸方向右側の受光素子46bに集光されて像IM22を形成している。
 なお、反射鏡アレイ244上の微小鏡244aはY軸方向に2次元に配列していることが望ましいが、微小鏡244aが1次元に配列していてもかまわない。その際にはY軸方向の同一高さにありX軸方向に並ぶ微小鏡244aが同一の反射角となるように制御されればよい。
 第3の実施形態に係る分光器240を以上のような構成にすることによって、反射鏡アレイ244の素子サイズを小さくすることができる。また、反射鏡アレイ244の微小鏡244aを分光方向と直交する方向(X軸方向)に回転させて、各微小鏡244aで反射した分光光の検出領域46aを選択できるだけでなく、この微小鏡244aを分光方向(Y軸方向)にも回転可能に構成することにより、回折格子42において信号光の波長で決まる分光方向に対応した受光器46の受光領域上の位置、すなわち、検出領域46a毎のサブ領域46a1,46a2に固定されず、微小鏡244aのY軸方向の回転角度によりこれらのサブ領域46a1,46a2も選択することができる。
 なお、図4に示す受光器46では、複数の検出領域46aのそれぞれが、サブ領域に分割されているが、全ての検出領域46aがサブ領域に分割されている必要はなく、少なくとも1つの検出領域46aがサブ領域に分割されていればよい。
 また、図4に示す受光器46は、Y軸方向が長辺であり、X軸方向が短辺である矩形領域からなる検出領域46aが、X軸方向、すなわち、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向にアレイ状に並んで配置され、各検出領域46aは、Y軸方向、すなわち、分光素子である回折格子42により信号光が分光される方向に並んだ複数のサブ領域(図4に示す場合、2つのサブ領域46a1,46a2)に分割されているが、これに限られない。以下に受光器の2つの変形例について説明する。
[第1の変形例]
 図9(a)に示す第1の変形例に係る受光器46′は、Y軸方向が長辺であり、X軸方向が短辺である矩形領域からなる検出領域46a′が、X軸方向、すなわち、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向にアレイ状に並んで配置され、2以上の検出領域46a′からなる第1の検出領域群46a1′と、2以上の検出領域46a′からなる第2の検出領域群46a2′とを有し、2つの領域群46a1′,46a2′の各々に配置された受光素子46b′は、領域群46a1′,46a2′毎に、入射する光の波長に対する光電変換の感度(変換効率)が異なるように構成されている。なお、図9(a)は2つの領域群46a1′,46a2′を配置した場合であるが、3つ以上の領域を配置するように構成しても良い。また、この受光器46′は、図9(a)に示すように、2つの領域群46a1′,46a2′の各々に、矩形形状に形成した受光素子46b′を、隣接する受光素子46b′を密接させて配置するように構成しても良いし、図4に示す受光器46と同様に、検出領域46a′毎に、円形又は楕円形状の受光素子をY軸方向に複数並べ、領域群毎に波長に対する感度を変えるように構成にしても良い。
 なお、図4の受光器46に代えて、図9(a)に示す受光器46′が使用できる構成は、図2、図6及び図7に示す集光光学系43、反射鏡アレイ44、投影光学系45の構成である。但し、受光器46′における像のY軸方向の形成位置は、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向がX軸方向の場合は、図9(a)に示す像IMのように、反射鏡アレイ44上の像の位置関係に対応するが、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向がY軸方向にも回転する場合は、同一にすることが可能である。
[第2の変形例]
 また、図9(b)に示す第2の変形例に係る受光器46″は、X軸方向が長辺であり、Y軸方向が短辺である矩形領域からなる検出領域46″が、Y軸方向にアレイ状に並んで配置され、2以上の検出領域46a″からなる第1の検出領域群46a1"と、2以上の検出領域46a"からなる第2の検出領域群46a2″とを有し、2つの領域群46a1″,46a2″の各々に配置された受光素子46b″は、領域群46a1″,46a2″毎に、入射する光の波長に対する光電変換の感度(変換効率)が異なるように構成されている。なお、図9(b)は2つの領域群46a1″,46a2″を配置した場合を示しているが、3つ以上の領域を配置するように構成しても良い。また、この受光器46″は、図9(b)に示すように、2つの領域群46a1″,46a2″の各々に、矩形形状に形成した受光素子46b″を、隣接する受光素子46b″を密接させて配置するように構成しても良いし、図4に示す受光器46と同様に、検出領域46a′毎に、円形又は楕円形状の受光素子をX軸方向に複数並べ、領域群毎に波長に対する感度を変えるように構成にしても良い。
 なお、図4の受光器46に代えて、図9(b)に示す受光器46"が使用できる構成は、図2、図6及び図7に示す集光光学系43、反射鏡アレイ44、投影光学系45の構成である。但し、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向をX軸方向に代えて、Y軸方向にする、又は反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向をX軸方向のみならず、Y軸方向も可能にする必要がある。また、投影光学系45を構成する第2集光レンズ45bをY軸方向の屈折力の方がX軸方向の屈折力より大きくなるように構成することに代えて、X軸方向の屈折力の方がY軸方向の屈折力より大きくなるように構成する必要がある。
 反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向をY軸方向とすることにより、分光された光を、微小鏡44aのY軸方向に回転させることができ、これにより、受光器46′の受光領域に形成された像IMをY軸方向に移動させることで領域群46a1″,46a2″を選択することができる。
 さらに、第4の実施形態として、第1の実施形態の、光軸に対して回転対称な屈折力を有する第1集光レンズ45aとY軸方向の屈折力の方がX軸方向の屈折力より大きい第2集光レンズ45bからなる投影光学系45に代えて、光軸に対して回転対称な屈折力を有する第1集光レンズ45aからなる投影光学系にしてもよい。受光器46上には、ライン状(Y軸方向)の像が形成される。図4に示す受光器46を適用する場合は、反射鏡アレイ44の微小鏡44aの回転方向は、少なくともX軸方向に回転すればよいが、図7(a)に示す受光器46′を適用する場合は、X軸方向、Y軸方向の両方で回転するほうが好ましく、また図7(b)に示す受光器46″を適用する場合は、少なくともY軸方向に回転すればよい。
 さらに、第5の実施形態として、第1の実施形態から第4の実施形態(図2、6、7)の分光器40、140、240の構成である、反射鏡アレイ44、244、投影光学系45、245を備えず、回折格子42で分光した分光光を直接、受光器(PMTアレイ)で検出する分光器、例えば、US7286225に記載の分光器の受光器(例えば、図1の分光ユニット230の受光器237)、US7724365に記載の分光器の受光器(例えば、図1のスペクトル検出部2のスペクトルディテクタ24)を図9(b)に示すような受光器に置き換えてよい。
 なお、上述の各実施形態の要件は、適宜組み合わせることができる。また、一部の構成要素を用いない場合もある。また、法令で許容される限りにおいて、上述の各実施形態及び変形例で引用した装置などに関する全ての公開公報及び米国特許の開示を援用して本文の記載の一部とする。
1 顕微分光システム  20 共焦点ユニット  30 顕微鏡
40 分光器  41 コリメート光学系  43 集光光学系
44 反射鏡アレイ  44a 微小鏡(反射鏡) 45 投影光学系
46 受光器  46a 検出領域  46a1 第1のサブ領域
46a2 第2のサブ領域  46b 受光素子  50 制御部

Claims (18)

  1.  信号光を分光する分光素子と、
     前記分光素子で分光された分光光を集光する第1の光学系と、
     前記分光光を受光する受光器と、を有し、
     前記受光器は、前記分光光を検出する感度が互いに異なる波長特性を有する複数の領域を有することを特徴とする分光器。
  2.  複数の偏向素子が、少なくとも前記分光素子による分光方向に配列され、前記複数の偏向素子の各々が、前記分光光を少なくとも所定の方向に偏向可能な偏向部材と、
     前記偏向部材で偏向された前記分光光を受光する第2の光学系と、を有することを特徴とする請求項1に記載の分光器。
  3.  前記複数の領域は、前記分光光の分光方向に配置され、
     前記受光器は、前記複数の領域からなる検出領域が、前記偏向部材により偏向可能な前記所定の方向に複数配列されてなる請求項2に記載の分光器。
  4.  前記複数の領域は、前記分光光の分光方向に直交する方向に配置され、
     前記複数の領域はそれぞれ、複数の検出領域からなることを特徴とする請求項2に記載の分光器。
  5.  前記複数の領域は、前記分光光の分光方向に配置され、
     前記複数の領域はそれぞれ、複数の検出領域からなることを特徴とする請求項2に記載の分光器。
  6.  前記複数の検出領域は、互いに隣接配置されてなる請求項4または5に記載の分光器。
  7.  ユーザの入力指示に基づいて、前記偏向部材を制御することにより前記分光光を任意の前記検出領域に入射させる制御部を有する請求項3~6のいずれか一項に記載の分光器。
  8.  前記偏向部材は、複数の反射鏡からなる反射鏡アレイであり、前記複数の反射鏡の各々が、少なくとも前記所定の方向の所定軸を中心にして回転可能に構成されてなる請求項2~7のいずれか一項に記載の分光器。
  9.  前記第2の光学系は、前記偏向部材に形成された像を前記分光方向に関して縮小投影する請求項2~8のいずれか一項に記載の分光器。
  10.  前記第2の光学系は、当該第2の光学系の光軸に直交する面内であって、前記偏向部材の前記偏向可能な前記所定の方向の屈折力と前記所定の方向に略直交する方向の屈折力とが異なり、
     前記偏向部材及び前記受光器は、前記第2の光学系を介して、前記偏向部材の前記偏向可能な前記所定の方向と略直交する方向に関して共役関係であることを特徴とする請求項2~9のいずれか一項に記載の分光器。
  11.  前記第2の光学系は、当該第2の光学系の光軸と略直交する面内であって、前記偏向部材の前記偏向可能な前記所定の方向と略直交する方向にのみ屈折力を有するシリンドリカルレンズであることを特徴とする請求項2~10のいずれか一項に記載の分光器。
  12.  前記第1の光学系は、当該第1の光学系の光軸と略直交する面内であって、前記偏向部材の前記偏向可能な前記所定の方向と略直交する方向にのみ屈折力を有するシリンドリカルレンズであることを特徴とする請求項2~11のいずれか一項に記載の分光器。
  13.  前記受光器の配置位置は、前記偏向部材の前記偏向可能な前記所定の方向に関して前記第2の光学系の後側焦点位置であることを特徴とする請求項2~12のいずれか一項に記載の分光器。
  14.  前記複数の領域は、前記分光光の分光方向に配置され、
     前記複数の領域はそれぞれ、複数の検出領域からなることを特徴とする請求項1に記載の分光器。
  15.  前記第1の光学系は、当該第1の光学系の光軸に回転対称な屈折力を有することを特徴とする請求項1~11、13、14のいずれか一項に記載の分光器。
  16.  前記複数の領域は、第1の領域及び第2の領域であり、
     前記複数の領域の前記分光光の分光方向、又は前記分光方向と直交する方向の高さをhとし、前記信号光の波長のうち、検出する波長の最小値をλs、最大値をλfとし、前記複数の領域で検出する、予め設定した波長範囲の境界波長をλoとし、前記境界波長よりも短い波長の分光光を検出する前記第1の領域の高さをh1とし、前記境界波長よりも長い波長の分光光を検出する前記第2の領域の高さをh2としたとき、次式
    h1 = h×(λo-λs)/(λf-λs)
    h2 = h×(λf-λo)/(λf-λs)
    の条件を満足するように構成されていることを特徴とする請求項1~15のいずれか一項に記載の分光器。
  17.  前記信号光を略平行光とするコリメート光学系を更に有し、
     前記信号光は、光ファイバの端面から射出されて前記コリメート光学系に入射するように構成されることを特徴とする請求項1~16のいずれか一項に記載の分光器。
  18.  光源からの光を走査して対物レンズを介して標本に集光し、前記標本から射出した信号光を前記対物レンズを介して集光する顕微鏡と、
     前記顕微鏡からの前記信号光を分光して検出する請求項1~17のいずれか一項に記載の分光器と、を有することを特徴とする顕微分光システム。
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