WO2010147441A2 - 밤껍질 추출물을 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

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Definitions

  • the present invention relates to a cosmetic composition comprising a chestnut extract.
  • Itching is defined as an unpleasant skin sensation that causes the desire to scratch, and is a physiological self-defense mechanism such as pain, tactile, cold or hot, that can be perceived when the skin is exposed to harmful stimuli from the outside. It protects you.
  • Itching is caused by a variety of causes, including inflammation, cancer, metabolic diseases, infections, psychiatric illnesses, medications, or stress, and recent studies have shown that organic connections between the skin, peripheral nervous system, and central nervous system cause itching. And deeply involved in response and control.
  • Histamines have been used mainly for the study of itching so far, but it has been argued that chronic itching, such as atopy, is due to neurological causes rather than histamine-dependent pathways, which is why antihistamine is atopic disease. It is explained whether or not it is effective in the itch (Stander et al., Experimental Dermatology, 11, pp 12-24, 2002).
  • first-generation antihistamines are mainly used for systemic administration, and have anti-sympathetic effects, indicating sedation.
  • First-generation antihistamines, chlorpheniramine are not known to suppress the itch of atopic dermatitis patients when administered topically (Munday et. al., Dermatology, 205, pp 40-45, 2002), Topical antihistamines are not recommended for atopic dermatitis because of the risk of skin hypersensitivity.
  • drugs that inhibit cytochrome P450 activity ketoconazole, erythromycin
  • an object of the present invention is to solve the technical problem that has been requested from the past. Specifically, an object according to an embodiment of the present invention is to provide a cosmetic composition for mitigating or suppressing itching and an immunosuppressive cosmetic composition comprising a chestnut extract.
  • an embodiment according to the present invention relates to a cosmetic composition for reducing or suppressing itching, including as an active ingredient chestnut extract having an excellent itching or suppressing effect, while reducing the side effects of conventional itching treatments will be.
  • One embodiment according to the present invention relates to a cosmetic composition for improving skin barrier function comprising a chestnut extract as an active ingredient.
  • One embodiment according to the present invention relates to a cosmetic composition for immunosuppression comprising a chestnut extract as an active ingredient.
  • One embodiment according to the present invention relates to a cosmetic composition for improving or treating atopic dermatitis, comprising a chestnut extract as an active ingredient.
  • Cosmetic composition according to the present invention by containing the chestnut extract as an active ingredient, by reducing the activity of protease-activated receptor-2 (PAR-2), which is a stimulation source of itching, relieve excellent itching Or it can be suppressed, and through the immunosuppressive activity of the chestnut extract can fundamentally treat immune hypersensitivity reactions that can cause itching.
  • PAR-2 protease-activated receptor-2
  • FIG. 1 is a graph showing the measurement results of the inhibitory effect of PAR-2 activity (trypsin treatment) of chestnut extract according to an embodiment of the present invention
  • Figure 2 is a graph showing the measurement results of the inhibitory effect of PAR-2 activity (SLIGKV treatment) of the chestnut extract according to an embodiment of the present invention
  • Figure 3 is a graph showing the measurement results of the inhibitory effect of PAR-2 activity (trypsin, SLIGKV treatment) of chestnut 1,3-butylglycol (BG) extract according to an embodiment of the present invention
  • Figure 4 is a graph showing the effect of reducing the TNF- ⁇ secretion of the chestnut extract according to an embodiment of the present invention
  • Figure 5 is a graph showing the IL-6 secretion reduction effect of chestnut extract according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 6 is a graph showing the IL-1 ⁇ secretion reduction effect of chestnut extract according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 7 is a graph showing the IL-8 secretion reduction effect of the chestnut extract according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 8 is a graph showing the GM-CSF secretion reduction effect of the chestnut extract according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 9 is a graph showing the effect of reducing IL-6 secretion by trypsin and active peptide (SLIGKV) of chestnut extract according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 10 is a graph showing the effect of reducing IL-8 secretion by trypsin and active peptide (SLIGKV) of chestnut extract according to an embodiment of the present invention
  • FIG. 11 is a graph showing the effect of reducing GM-CSF secretion by trypsin and active peptide (SLIGKV) of chestnut extract according to an embodiment of the present invention
  • FIG. 12 is a graph showing the effect of inhibiting itching in atopic dermatitis patients of chestnut extract according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 13 is a graph showing the results of the measurement of the inhibitory effect of PAR-2 activity according to the endothelial (cuticle) and shell (shell) extract of chestnuts according to an embodiment of the present invention.
  • the present invention relates to a cosmetic composition for itching relief or inhibition comprising chestnut extract as an active ingredient.
  • the inventors of the present application using the proteinase-activated receptor-2 (PAR-2) as a target for the treatment of itching, by measuring the degree of inhibition of activity of PAR-2 by chestnut extract, As demonstrated in the examples, it was confirmed that excellent PAR-2 antagonism in vitro, it was confirmed that it exhibits an itch inhibitory effect in patients suffering from atopic dermatitis.
  • PAR-2 proteinase-activated receptor-2
  • the itch is also called pruritus, the cause or form of the itch is not particularly limited, for example, inflammatory dermatitis, atopic dermatitis, dermatitis due to roughness of skin, sweat bands, erosion, frostbite, contact dermatitis, seborrheic dermatitis And dermatitis consisting of psoriasis and psoriasis.
  • the present invention includes the chestnut extract as an active ingredient exhibits an effect of improving skin barrier function. This effectively prevents or treats secondary skin damage caused by disease or itching that occurs as a result of reduced skin barrier function.
  • the composition has a significant effect on alleviating the skin barrier damage or improving the resilience of the skin barrier to secondary skin damage caused by, for example, itching derived from atopic dermatitis, thereby significantly reducing the skin barrier. Can be improved.
  • the composition can improve the skin barrier, in particular, by enhancing skin moisturization or preventing skin keratinization, and the inventors of the present application apply oxazolon to hairless mice as demonstrated in the following examples.
  • Experiments were conducted in the treated allergy model, and transepidermal water loss (TEWL) and skin thickness were measured, and chestnut extract showed effective skin moisturization or anti-keratinization effect. It was.
  • TEWL transepidermal water loss
  • chestnut extract showed effective skin moisturization or anti-keratinization effect. It was.
  • the present invention relates to an immunosuppressive cosmetic composition
  • an immunosuppressive cosmetic composition comprising a chestnut extract as an active ingredient.
  • the composition may be, for example, a composition for the treatment of atopy, rheumatoid arthritis or Crohn's disease, and may be a composition for the prevention or treatment of atopic diseases, which is an immune hypersensitivity reaction.
  • GM-CSF granulocyte macrophage colony stimulating factor
  • chestnut extract is associated with tumor necrosis factor- ⁇ (TNF- ⁇ ), interleukin-6 (IL-6), interleukin-1 ⁇ (IL). -1 ⁇ ), Interleukin-8 (IL-8), or Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor (GM-CSF), which have been shown to significantly reduce the expression of chestnut extract. It is suitable for the active ingredient of the cosmetic composition for inhibition.
  • TNF- ⁇ tumor necrosis factor- ⁇
  • IL-6 interleukin-6
  • IL-1 ⁇ interleukin-1 ⁇
  • IL-8 Interleukin-8
  • GM-CSF Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor
  • the present invention is suitable for the active ingredient of the cosmetic composition for improving or treating atopic dermatitis by including chestnut extract as an active ingredient.
  • interleukin-6 IL-6
  • interleukin-8 IL-8
  • chestnut extract is effectively used for the prevention and treatment of itching from atopic diseases. Can be.
  • the chestnut means a dark brown bark covering the fruit of chestnut
  • the chestnut extract used herein refers to one or more extracts selected from the group consisting of chestnut endothelium (hulled skin), skin and mixtures thereof. It may be. Chestnut hulls can be used as chestnuts, and chestnut hulls (chest husks) can be used, but PAR-2 antagonists are superior in the group treated with chestnut hulls (chest husks) extract. It showed the action.
  • the chestnut is irrelevant to any kind of shell derived from chestnuts, and is not particularly limited, for example, chestnut (Castanea crenata S. et Z., Castanea mollissima Bl., Castanea bulgaris), chestnut (Castanea Bungeana Bl) and It may be one or more chestnut hulls selected from the group consisting of Castanea crenata for multicarpa (Uyeki) Chung.
  • Extraction method of the chestnut extract is not particularly limited, for example, may be extracted through a solvent selected from the group consisting of water, lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, 1, 3-butyl glycol and mixed solvents thereof,
  • the solvent may be at least one selected from the group consisting of water, methanol, ethanol, 1, 3-butylglycol, butanol, and mixtures thereof.
  • the chestnut extract is 10-100% aqueous alcohol solution or 10-.
  • 1, 3-butylglycol may be extracted, specifically, chestnut 20-90% ethanol aqueous extract or 10-70% 1,3-butylglycol extract, more specifically chestnut 40-90% It may be an aqueous ethanol extract or 10-50% 1,3-butylglycol extract, and more specifically may be a chestnut 60-90% ethanol aqueous extract or 20-40% 1,3-butylglycol extract.
  • the content of the chestnut extract included in the composition is not particularly limited, but may be included in an amount of 0.005 to 80% by weight based on the total weight of the composition, and may preferably be included in 0.01 to 30% by weight. If the content of the chestnut extract is too small, the effect may be insignificant, and if too much, the stability of the formulation may be lowered.
  • combinations of chestnut extract with one or more of antihistamine, steroids, local anesthesia, immunosuppressants may also be used to alleviate or suppress itching and to suppress immunosuppression.
  • composition containing the chestnut extract as an active ingredient and one or more of antihistamine, steroids, local anesthesia, immunosuppressive agent, it is safe and large effect without any side effects such as itching or suppression, and immune suppression Can be represented.
  • the cosmetic composition is not particularly limited in formulation, and may be appropriately selected in the formulation of cosmetics as desired.
  • softening cream skin lotion and milk lotion
  • nourishing cream essence
  • nourishing cream massage cream, pack, gel, essence
  • eye cream eye essence
  • cleansing cream cleansing foam
  • cleansing water cleansing water, pack, powder
  • the dosage of the active ingredient is within the level of those skilled in the art, and the daily dosage of the composition depends on various factors such as less progression, time of onset, age, health condition, complications, etc. of the subject to be administered.
  • the composition may be administered by dividing the composition 1 to 500 mg / kg, preferably 30 to 200 mg / kg, once or twice a day, and the dosage may be in the range of the present invention by any method. It is not limiting.
  • Chestnut was leached at room temperature for 3 days using 30% 1,3-butyl glycol (1,3-buthylene glycol). Subsequently, the filter was sequentially filtered with a filter of 250 mesh, 3 ⁇ m, 1 ⁇ m, and 0.5 ⁇ m. Then, after standing for 3 days at 0 ⁇ 4 °C (Standing), and then filtered sequentially with a filter of 0.5 ⁇ m, 0.3 ⁇ m, 0.2 ⁇ m size to obtain a chestnut 1,3 butyl glycol extract.
  • Chestnut was leached for 3 days at room temperature using 70% ethanol. Subsequently, the filter was sequentially filtered through a filter having a size of 250 mesh, 3 ⁇ m, 1 ⁇ m, 0.5 ⁇ m, 0.3 ⁇ m, and 0.2 ⁇ m. Thereafter, the solution was concentrated at 60 ° C. and then vacuum dried at 30 ° C. for 18 hours to obtain chestnut ethanol extract in powder form.
  • keratinocytes (cell name: HaCaT obtained from ATCC) were dispensed into 4 wells of 4 ⁇ 10 4 cells / well in 96 well plates and incubated for 24 hours in a 37 ° C., 5% CO 2 incubator. . After 24 hours, two 96-well plates were washed with HBSS (Hanks' Balanced Salt solution) buffer, followed by reaction buffer (2 uM Fluo-4-AM, 20% pluronic acid, 2.5 mM probenecid). Put it in.
  • HBSS Hors' Balanced Salt solution
  • the keratinocytes (Cell name: HaCaT obtained from ATCC) were dispensed into 4 ⁇ 10 4 cells / well in 96 well plates, and then cultured in a 37 ° C., 5% CO 2 incubator for 24 hours. It was. After 24 hours, two 96-well plates were washed with Hanks' Balanced Salt solution (HBSS) buffer, followed by reaction buffer: 2 uM Fluo-4-AM, 20% pluronic acid, 2.5 mM probenecid ) Into the cells.
  • HBSS Hanks' Balanced Salt solution
  • the difference between the minimum value and the maximum value obtained by measuring flex for 80 seconds was calculated, and the value was determined during 5uM PAR-AP (SLIGKV) treatment.
  • the inhibition rate was determined by comparing the difference between the minimum and maximum values.
  • SLIGKV Human
  • an activating peptide acts as a direct ligand
  • PAR-2 is activated
  • calcium ions are introduced into cells, and in the group treated with chestnut extract, PAR-2 activation is inhibited. It can be seen that the influx of calcium ions is significantly reduced.
  • the keratinocytes (Cell name: HaCaT obtained from ATCC) were dispensed into 4 ⁇ 10 4 cells / well in 96 well plates, and then cultured in a 37 ° C., 5% CO 2 incubator for 24 hours. It was. After 24 hours, two 96-well plates were washed with Hanks' Balanced Salt solution (HBSS) buffer, followed by reaction buffer: 2 uM Fluo-4-AM, 20% pluronic acid, 2.5 mM probenecid ) Into the cells.
  • HBSS Hanks' Balanced Salt solution
  • flex was measured for 80 seconds to determine the difference between the minimum and maximum values. After the determination, the value was compared with the difference between the minimum value and the maximum value at 2 U / ml Trypsin or 5 uM PAR-AP (SLIGKV) treatment to determine the inhibition rate.
  • normal human skin keratinocytes (NHEK, obtained from Lonza) were dispensed into 96 well plates at 5 ⁇ 10 4 cells / well, and then in a 37 ° C., 5% CO 2 incubator. Incubated for 24 hours. After 24 hours, the cells were washed twice with PBS and replaced with serum free KBM (keratinocyte basement media). Chestnuts were treated by concentration in each well (10, 25, 50 ppm) and reacted for 30 minutes, followed by PGSA (10, 50 ppm) and LPS (1 ppm), respectively. After incubation for 24 hours at 37 °C, 5% CO 2 incubator (incubator), the culture medium was taken and subjected to ELISA for TNF- ⁇ . ELISA used the experimental method of the manufacturer (BD science).
  • chestnut significantly reduces the secretion of TNF- ⁇ increased by PGSA and LPS.
  • chestnut significantly inhibits the secretion of IL-6 increased by PGSA and LPS.
  • chestnut reduces the amount of IL-1 ⁇ secreted by PGSA and LPS according to the concentration.
  • chestnut significantly reduces the secretion of IL-8 increased by PGSA and LPS.
  • normal human skin keratinocytes (NHEK, obtained from Lonza) were dispensed into 96 well plates at 5 ⁇ 10 4 cells / well, and then in a 37 ° C., 5% CO 2 incubator. Incubate for 24 hours. After 24 hours, the cells were washed twice with PBS and replaced with serum free KBM (keratinocyte basement media). Each well was treated with chestnut extract by concentration (10, 50ppm) and reacted for 30 minutes, followed by trypsin (10nM) or PAR-2 activating peptide (SLIGKV, 50 uM), respectively. After incubation for 24 hours at 37 °C, 5% CO 2 incubator (incubator), the culture medium was taken and subjected to ELISA for IL-6. ELISA used the experimental method of the manufacturer (BD science).
  • the chestnut extract inhibits the secretion of IL-6 by trypsin and active peptide (SLIGKV) in a concentration-dependent manner.
  • chestnut extract inhibits the secretion of IL-8 by trypsin and active peptide (SLIGKV) in a concentration-dependent manner.
  • chestnut extract inhibits the secretion of GM-CSF by trypsin and active peptide (SLIGKV) in a concentration-dependent manner.
  • Chestnut husk (skin) and cuticle (endothelium) were separated and dried, chestnut husk extract was prepared in the same manner as in Example 1-2), chestnut husk extract in the same manner as in Example 1-2). Prepared. Using the same method as in Test Example 2, the effect of inhibiting PAR-2 activity of chestnut ethanol extract and chestnut ethanol extract was shown in Table 6 and FIG. 13.
  • the effect of inhibiting PAR-2 activity was measured in the same manner as in Test Example 14, except that the concentrations of the husks of the chestnut (skin) and the skin of the skin (endothelium) were treated as shown in Table 7 below.
  • compositions according to the present invention are described below, the pharmaceutical composition or health food composition is applicable to various formulations, which are intended to explain in detail only, not intended to limit the present invention.
  • Nutritional longevity was prepared according to the composition described in Table 2 below in a conventional manner.
  • Nutritional cream was prepared in a conventional manner according to the composition shown in Table 3.

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Abstract

본 발명은 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 가려움증 완화 또는 억제용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 화장료 조성물에 포함되는 밤껍질 추출물은 본 발명에 따른 하나의 실시예에서, 가려움의 자극원인 단백분해효소 활성 수용체-2(Proteinase-Activated Receptor-2: PAR-2)의 활성을 억제함으로써, 우수한 가려움증 완화 또는 억제 효과를 발휘할 수 있음이 확인되었는 바, 가려움증 완화 또는 억제용 화장료 조성물의 유효 성분으로 적합하게 사용될 수 있다.

Description

밤껍질 추출물을 포함하는 화장료 조성물
본 발명은 밤껍질 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
가려움은 긁고 싶은 욕구를 유발하는 불유쾌한 피부 감각으로 정의 되어 있으며, 통증, 촉각, 차가움 또는 뜨거움과 같은 생리적 자기 방어기전으로서, 피부가 외부로부터의 해로운 자극에 노출되었을 때, 이를 인지하도록 하여 피부를 보호하는 역할을 한다.
가려움증은 다양한 피부 질환 또는 전신 질환에서 흔히 나타나는 공통된 증상 중 한가지로, 두드러기나 여러 약물들의 부작용에 따른 급성 가려움증은 쉽게 치유될 수 있으나, 담도 폐쇄나 신장질환 또는 아토피 질환과 같은 중증의 만성 가려움증은 그 치료가 매우 어려운 실정이다.
가려움은 염증이나 암, 대사성 질환, 감염, 정신과적 질병, 약물투여 또는 스트레스 등 다양한 원인에 의해 유발되며, 최근의 여러 연구결과는 피부와 말초신경계 및 중추신경계의 유기적 연결이 가려움을 유발시키는 자극에 대한 반응과 조절에 깊게 관여함을 밝히고 있다.
최근, 특정 감각신경세포와 그들의 수용체들이 가려움에 특이적으로 반응함이 밝혀져, 가려움이 더 이상 통증의 하위 양상이 아닌 감각신경계의 개별적 감각으로 받아들여지고 있으며, 서로 다른 가려움 매개 물질들과 그 수용체들이 다양한 가려움 유발 질환들에 관여할 것으로 여겨지고 있다(Steinhoff et al.,Journal of Investigative Dermatology, 126, pp1705-1718, 2006).
지금까지의 가려움증 연구를 위한 실험에서 주로 히스타민이 사용되어 왔지만, 아토피와 같은 만성 가려움증에서는 히스타민 의존적 경로(pathway)에 의해서라기 보다는, 신경성 원인에 따를 것이라는 주장이 제기되고 있으며, 이는 왜 항히스타민이 아토피 질환의 가려움증에 효과적이지 못한지를 설명하고 있다(Stander et al., Experimental Dermatology, 11, pp12-24, 2002).
또한, 일세대 항히스타민제는 주로 전신 투여하여 사용하는데, 항부교감 작용이 있어서 진정작용을 나타내고, 1 세대 항히스타민제인 클로르페니라민은 국소 투여시 아토피성 피부염 환자의 가려움을 억제시키지 못하는 것으로 알려져 있으며(Munday et al.,Dermatology, 205, pp40-45, 2002), 피부 과민반응의 위험이 있기 때문에 아토피성 피부염에 국소 항히스타민제의 사용은 권장되지 않는다. 진정작용이 없는 2 세대 항히스타민제 에바스틴과 터페나딘은 사이토크롬(cytochrome) P450 활성을 저해하는 약물(ketoconazole, erythromycin)과 함께 복용하면 부정맥을 일으킬 수 있어(Hey et al., Arzneimittelforschung, 46, pp159-163, 1996), 이와 관련된 부작용이 나타난다.
따라서, 효과적이면서도 부작용이 적어 안전한 가려움증 완화제, 특히 아토피와 같은 만성 가려움증에 유효한 완화제의 개발에 대한 필요성이 시급한 상황이다.
따라서, 본 발명은 과거로부터 요청되어 온 기술적 과제를 해결하는 것을 목적으로 한다. 구체적으로 본 발명의 일실시예에 따른 목적은 밤껍질 추출물을 포함하는 가려움증 완화 또는 억제용 화장료 조성물 및 면역 억제용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
이러한 목적에 따라, 본 발명에 따른 일실시예는 종래의 가려움증 치료제들이 갖는 부작용을 줄이면서도, 탁월한 가려움증 억제 또는 완화 효과가 있는 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 가려움증 완화 또는 억제용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 일실시예는 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 장벽 기능 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 일실시예는 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 면역 억제용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 일실시예는 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 아토피 피부염의 개선 또는 치료용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함함으로써, 가려움의 자극원인 단백분해효소 활성 수용체-2(Proteinase-Activated Receptor-2: PAR-2)의 활성을 억제를 통해, 우수한 가려움증 완화 또는 억제를 발휘할 수 있으며, 밤껍질 추출물의 면역 억제활성을 통해 가려움증을 유발하는 원인이 될 수 있는 면역 과민성 반응을 근본적으로 치료할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 PAR-2 활성 억제 효과(트립신 처리)의 측정 결과를 나타낸 그래프이다;
도 2는 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 PAR-2 활성 억제 효과(SLIGKV 처리)의 측정 결과를 나타낸 그래프이다;
도 3은 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 1,3-부틸글리콜(BG) 추출물의 PAR-2 활성 억제 효과(트립신, SLIGKV 처리)의 측정 결과를 나타낸 그래프이다;
도 4는 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 TNF-α 분비 감소 효과를 나타낸 그래프이다;
도 5는 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 IL-6 분비 감소 효과를 나타낸 그래프이다;
도 6은 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 IL-1α 분비 감소 효과를 나타낸 그래프이다;
도 7은 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 IL-8 분비 감소 효과를 나타낸 그래프이다;
도 8은 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 GM-CSF 분비 감소 효과를 나타낸 그래프이다;
도 9는 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 IL-6 분비 감소 효과를 나타낸 그래프이다;
도 10은 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 IL-8 분비 감소 효과를 나타낸 그래프이다;
도 11은 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 GM-CSF 분비 감소 효과를 나타낸 그래프이다;
도 12는 본 발명의 일실시예에 따라 밤껍질 추출물의 아토피성 피부염 환자에서 가려움증 억제효과를 나타낸 그래프이다;
도 13은 본 발명의 일실시예에 따라 밤의 내피(속껍질) 및 외피(겉껍질) 추출물에 따른 PAR-2 활성 억제 효과의 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
본 발명은 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 가려움증 완화 또는 억제용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 출원의 발명자들은 단백분해효소 활성 수용체-2(Proteinase-Activated Receptor-2: PAR-2)를 가려움증 치료의 타겟으로 하여, 밤껍질 추출물에 의한 PAR-2의 활성 억제 정도를 측정한 결과, 하기 실시예에 입증된 바와 같이 시험관 내에서 우수한 PAR-2 길항 작용을 보임을 확인하였고, 아토피성 피부염을 앓고 있는 환자들에게서 가려움 억제 효과를 나타냄을 확인하였다.
상기 가려움증은 소양증이라고도 하며, 이러한 가려움증의 유발 원인 또는 형태는 특별히 제한되지 않으나, 예를 들어 염증성 피부염, 아토피성 피부염, 살갗의 거칠어짐으로 인한 피부염, 땀띠, 진무름, 동상, 접촉성 피부염, 지루성 피부염, 건선 및 유건선으로 이루어진 피부염 중 하나 이상으로부터 유발되는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하여 피부 장벽 기능 개선 효과를 나타낸다. 이를 통해, 피부 장벽 기능 저하에 따라 발생하는 질환 또는 가려움에 의해 유발된 2차적인 피부 손상을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.
상기 조성물은 예를 들어, 아토피성 피부염으로부터 유래된 가려움에 의해 발생한 2차적인 피부 손상에 대하여, 피부 장벽 손상의 완화 또는 피부 장벽의 회복력 개선에 유의한 효과를 보이며, 이를 통해 유의하게 피부 장벽을 개선시킬 수 있다.
상기 조성물은 특히, 피부 보습 증진 또는 피부 과각질화 방지를 통해 피부 장벽을 개선시킬 수 있으며, 하기 실시예를 통해 입증된 바와 같이 본 출원의 발명자들은 무모 생쥐(Hairless mice)에 옥사졸론(oxazolon)을 처리한 알러지 모델에서 실험을 진행하였고, 경표피수분손실(transepidermal water loss, TEWL)과 피부두께(skin thickness)를 측정한 결과, 밤껍질 추출물이 효과적인 피부 보습 증진 또는 과각질화 방지 효과를 나타냄을 확인하였다.
더욱이, 본 발명은 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 면역 억제용 화장료 조성물에 관한 관한 것이다. 상기 조성물은 예를 들어 아토피, 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) 또는 크론씨병(Crohn's disease)의 치료를 위한 조성물일 수 있으며, 그 중에서도 면역 과민성 반응인 아토피 질환의 예방 또는 치료를 위한 조성물일 수 있다.
아토피 질환이 피부의 손상 등으로 인한 급성 단계에서 만성질환단계로 발전 할 때 면역매개물질들의 다양한 분비양상 변화가 관찰 되는데, 아토피질환을 앓고 있는 환자들의 손상된 피부에서 다수의 인터루킨(Interleukin)들의 농도가 증가하게 된다. 또한, 과립구 대식세포 집락 자극인자(GM-CSF)는 아토피 피부질환 환자들의 손상된 피부에서 그 분비량이 증가하여, 만성염증반응을 일으키는 것으로 알려져 있으며, 아토피 환자의 면역체계의 불균형을 일으키게 된다(Matsubara et al., FEBS Letters, 566, pp195-200, 2004).
이와 관련하여, 본 출원의 발명자들은 밤껍질 추출물이 면역 과민성 반응과 관련된 종양 괴사인자-α(Tumor Necrosis Factor-α: TNF-α), 인터루킨-6(IL-6), 인터루킨-1 α(IL-1α), 인터루킨-8(IL-8) 또는 과립구 대식세포 집락 자극인자(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor: GM-CSF)의 발현을 유의하게 감소시킬 수 있음을 확인하였는 바, 밤껍질 추출물은 면역 억제용 화장료 조성물의 유효 성분에 적합하다.
특히, 본 발명은 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하여 아토피 피부염의 개선 또는 치료용 화장료 조성물의 유효 성분에 적합하다.
또한, 상기 인터루킨-6(IL-6) 및 인터루킨-8(IL-8)은 아토피질환에서 가려움을 유발하는 인자로도 알려져 있어, 밤껍질 추출물이 아토피 질환 유래의 가려움증 예방 및 치료를 위해 효과적으로 사용될 수 있다.
상기 밤껍질은 밤나무의 과실을 싸고 있는 짙은 갈색의 껍질을 의미하며, 본 명세서에서 사용되는 밤껍질 추출물은 밤의 내피(율피), 외피 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물을 의미하는 것일 수 있다. 밤껍질로는 밤의 내피(율피)가 사용될 수 있고, 밤의 외피(밤의 겉껍질)가 사용될 수 있으나, 특히 밤의 외피(밤의 겉껍질) 추출물을 처리한 군에서 우수한 PAR-2 길항 작용을 보임을 확인하였다.
상기 밤껍질은 어떠한 종류의 밤으로부터 유래된 껍질이라도 무관하며, 특별히 제한되지 않으나 예를 들어, 밤(Castanea crenata S. et Z., Castanea mollissima Bl., Castanea bulgaris), 약밤(Castanea Bungeana Bl) 및 상두밤(Castanea crenata for. multicarpa (Uyeki) Chung)으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 밤의 껍질일 수 있다.
상기 밤껍질 추출물의 추출 방법은 특별히 제한되지 않으나, 예를 들어 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올, 1, 3-부틸글리콜 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 용매를 통해 추출될 수 있으며, 상기 용매는 예를 들어 물, 메탄올, 에탄올, 1, 3-부틸글리콜, 부탄올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있으며, 바람직하게 상기 밤껍질 추출물은 10~100% 알코올수용액 또는 10~100% 1, 3-부틸글리콜에서 추출될 수 있고, 구체적으로 밤껍질 20~90% 에탄올 수용액 추출물 또는 10~70% 1,3-부틸글리콜 추출물일 수 있으며, 더욱 구체적으로 밤껍질 40~90% 에탄올 수용액 추출물 또는 10~50% 1,3-부틸글리콜 추출물일 수 있으며, 더욱 구체적으로 밤껍질 60~90% 에탄올 수용액 추출물 또는 20~40% 1,3-부틸글리콜 추출물일 수 있다.
상기 조성물에 포함되는 밤껍질 추출물의 함량은 특별히 제한되지 않으나, 조성물 총 중량을 기준으로 0.005 내지 80 중량%의 함량으로 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.01 내지 30중량%로 포함될 수 있다. 상기 밤껍질 추출물의 함량이 너무 적으면, 효과가 미미할 수 있고, 너무 많으면 제형의 안정도가 낮아질 수 있다.
경우에 따라서, 가려움증 완화 또는 억제, 및 면역 억제를 위해 밤껍질 추출물과 항히스타민, 스테로이드, 국소마취, 면역 억제제 중 하나 또는 그 이상의 물질들과의 병용 또한 가능하다.
종래 아토피성 피부염 및 가려움증 완화를 위한 기술은 항히스타민제의 복용이나 스테로이드제제를 외용제로 도포하는 것이었으나, 이들 제제의 경우 일시적 치료효능을 보이더라도 곧 재발한다는 단점을 갖고 있고, 아울러 이들 약물들을 복용 하였을 경우, 중추신경 장애, 소화기 장애 등의 부작용이 보고되고 있다. 부신피질호르몬인 스테로이드제제는 강력한 소염작용과 면역억제작용으로 효과가 우수하지만 부작용 또한 심각하며, 면역 억제제인 타크롤리무스 수화물 연고가 아토피성 피부염의 치료에 유효한 것으로 보고되고 있으나, 피부암을 유발 하거나, 피부손상 부위에 다량으로 체내 흡수되었을 때에는 신장 장해를 유발할 염려가 있어서 안전성 측면에서 장기적 사용이 어려운 실정이다.
이에, 밤껍질 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물과 항히스타민, 스테로이드, 국소마취, 면역억제제중 하나 또는 그 이상을 적절히 병용 할 경우, 가려움증 완화 또는 억제, 및 면역 억제 등에 부작용을 동반하지 않고 안전하게 큰 효과를 나타낼 수 있다.
상기 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 화장품의 제형을 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 유연화장수(스킨로션 및 밀크로션), 영양화장수, 에센스, 영양크림, 마사지크림, 팩, 젤, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일 및 보디 에센스로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 유효 성분의 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 조성물의 1일 투여 용량은 투여하고자 하는 대상의 미만 진행 정도, 발병 시기, 연령, 건강상태, 합병증 등의 다양한 요인에 따라 달라지지만, 성인을 기준으로 할 때 일반적으로는 상기 조성물 1 내지 500mg/kg, 바람직하게는 30 내지 200 mg/kg을 1일 1 내지 2회 분할하여 투여할 수 있으며, 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
이하, 실시예를 통해 본 발명을 더욱 상술하지만, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 본 발명의 범주가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 밤껍질 추출물의 제조
1-1) 밤껍질 1,3-부틸글리콜 추출물의 제조
밤껍질을 30% 1,3-부틸글리콜(1,3-buthylene glycol)을 이용하여 상온에서 3일간 침출시켰다. 이어, 250 메쉬, 3㎛, 1㎛, 0.5㎛ 크기의 여과기로 순차적으로 여과하였다. 이후, 0~4℃에서 3일간 방치(Standing)한 다음, 0.5㎛, 0.3㎛, 0.2㎛ 크기의 여과기로 순차적으로 여과하여 밤껍질 1,3 부틸글리콜 추출물을 얻었다.
1-2) 밤껍질 에탄올 추출물의 제조
밤껍질을 70% 에탄올을 이용하여 상온에서 3일간 침출시켰다. 이어, 250 메쉬, 3㎛, 1㎛, 0.5㎛, 0.3㎛, 0.2㎛ 크기의 여과기로 순차적으로 여과하였다. 이후 60℃에서 용액을 농축시킨 후 30℃에서 18시간 동안 진공 건조를 실시하여 밤껍질 에탄올 추출물을 분말 형태로 얻었다.
[시험예 1] 밤껍질 에탄올 추출물의 PAR-2 활성 억제효과(in vitro, Trypsin 처리, HEK: Human Epidermal Keratinocyte)
실험 하루 전 각질형성세포(세포주명: HaCaT 입수처: ATCC)를 96 웰(well) 플레이트에 4X104cell/well이 되도록 분주한 후 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후, HBSS(Hanks'Balanced Salt solution) 버퍼로 96 웰 플레이트를 2회 세척(washing) 후, 반응 버퍼(reaction buffer: 2uM Fluo-4-AM, 20% pluronic acid, 2.5mM probenecid)를 세포에 넣어주었다. 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 30분, 상온에서 30분간 반응시킨 후, HBSS 버퍼로 2회 세척(washing)하고 밤껍질 에탄올 추출물을 각각 1ppm, 2ppm, 5ppm, 10ppm, 20ppm, 30ppm 및 50ppm의 농도로 세포에 처리하였다. 10분간 반응시킨 후, 2U/ml 트립신(Trypsin)을 처리하고 80초간 세포 내 Ca2+ 농도 변화를 측정하였다. 세포 내 Ca2+ 농도 변화 측정은 플렉스테이션3(FlexStation3: Molecular Device, USA)를 이용하였다. 밤껍질 에탄올 추출물과 트립신(Trypsin) 처리 후, 80초간 플렉스(flex)를 측정하여 얻어낸 값의 최소값과 최대값의 차를 구한 후, 그 값을 트립신(Trypsin) 처리 시의 최소 값과 최대값의 차와 비교하여 억제율을 구하였다.
도 1을 참조하면, 트립신에 의해 PAR-2의 N-말단에서 세린 시퀀스(sequence)를 잘라 PAR-2가 활성화되는 경우, 세포 내로 칼슘 이온들이 유입되는데, 밤껍질 추출물을 처리한 군의 경우 PAR-2 활성화가 억제되어 칼슘 이온의 유입이 현저하게 감소됨을 확인할 수 있다.
[시험예 2] 밤껍질 에탄올 추출물의 PAR-2 활성 억제효과(in vitro, SLIGKV 처리, HEK: Human Epidermal Keratinocyte)
실험 하루 전 각질형성세포(세포주명: HaCaT 입수처: ATCC)를 96 웰(well) 플레이트에 4X104cell/well이 되도록 분주한 후 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후, HBSS(Hanks' Balanced Salt solution) 버퍼로 96 웰(well) 플레이트를 2회 세척(washing) 후, 반응 버퍼(reaction buffer: 2uM Fluo-4-AM, 20% pluronic acid, 2.5mM probenecid)를 세포에 넣어주었다. 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 30분, 상온에서 30분간 반응시킨 후, HBSS 버퍼로 2회 세척(washing)하고 밤껍질 에탄올 추출물을 세포에 각각 1ppm, 2ppm, 5ppm, 10ppm, 20ppm, 30ppm 및 50ppm의 농도로 처리하였다. 10분간 반응시킨 후, 5uM PAR-AP(SLIGKV)을 처리하고 80초간 세포 내 Ca2+ 농도 변화를 측정하였다. 세포 내 Ca2+ 농도 변화 측정은 플렉스테이션3(FlexStation3: Molecular Device, USA)를 이용하였다. 밤껍질 에탄올 추출물과 5uM PAR-AP(SLIGKV) 처리 후 80초간의 플렉스(flex)를 측정하여 얻어낸 값의 최소값과 최대값의 차를 구한 후, 그 값을 5uM PAR-AP(SLIGKV)처리 시의 최소 값과 최대값의 차와 비교하여 억제율을 구하였다.
도 2를 참조하면, 활성화 펩타이드인 SLIGKV(Human)가 직접적인 리간드로 작용하여 PAR-2가 활성화되면, 세포 내로 칼슘 이온들이 유입되는데, 밤껍질 추출물을 처리한 군의 경우 PAR-2 활성화가 억제되어 칼슘 이온의 유입이 현저하게 감소됨을 확인할 수 있다.
[시험예 3] 밤껍질 1,3-부틸글리콜(BG) 추출물의 PAR-2 활성 억제효과(in vitro, SLIGKV 처리, HEK: Human Epidermal Keratinocyte)
실험 하루 전 각질형성세포(세포주명: HaCaT 입수처: ATCC)를 96 웰(well) 플레이트에 4X104cell/well이 되도록 분주한 후 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후, HBSS(Hanks' Balanced Salt solution) 버퍼로 96 웰(well) 플레이트를 2회 세척(washing) 후, 반응 버퍼(reaction buffer: 2uM Fluo-4-AM, 20% pluronic acid, 2.5mM probenecid)를 세포에 넣어주었다. 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 30분, 상온에서 30분간 반응시킨 후, HBSS 버퍼로 2회 세척(washing)하고 밤껍질 1,3-부틸글리콜(BG) 추출물을 각각 0.1w/v%, 0.5w/v % 및 1 w/v%의 농도로 세포에 처리하였다. 10분간 반응시킨 후, 2U/ml 트립신(Trypsin) 또는 5uM PAR-AP(SLIGKV)을 처리하고 80초간 세포 내 Ca2+ 농도 변화를 측정하였다. 세포 내 Ca2+ 농도 변화 측정은 플렉스테이션3(FlexStation3: Molecular Device, USA)를 이용하였다. 밤껍질 1,3-부틸글리콜(BG) 추출물과 2U/ml 트립신(Trypsin) 또는 5uM PAR-AP(SLIGKV)처리 후 80초간의 플렉스(flex)를 측정하여 얻어낸 값의 최소값과 최대값의 차를 구한 후, 그 값을 2U/ml Trypsin 또는 5uM PAR-AP(SLIGKV)처리 시의 최소 값과 최대값의 차와 비교하여 억제율을 구하였다.
도 3을 참조하면, 트립신 또는 PAR-2 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 세포 내 칼슘 이온들의 유입이 밤껍질 추출물의 농도를 높여줌에 따라 현저하게 감소됨을 확인할 수 있다.
[시험예 4] 밤껍질 추출물의 TNF-α 분비 감소
실험 하루 전 피부 각화상피세포(Normal human skin keratinocyte, NHEK, 입수처: Lonza) 를 96 웰(well) 플레이트에 5X104cell/well이 되도록 분주한 후 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후, PBS로 세포를 2회 씻어주고 세럼 프리 KBM(serum free KBM(keratinocyte basement media))으로 갈아주었다. 각각의 웰(well)에 밤껍질을 농도별로 처리하고(10, 25, 50ppm) 30분간 반응시킨 후, PGSA(10, 50ppm), LPS(1ppm)를 각각 처리하였다. 24시간 동안 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 배양한 후 배양액을 취하여 TNF-α에 대한 ELISA를 진행하였다. ELISA는 제조회사(BD science)의 실험방법을 이용하였다.
도 4를 참조하면, 밤껍질이 PGSA와 LPS에 의해 증가한 TNF-α의 분비를 현저히 감소시켜 주는 것을 관찰할 수 있다.
[시험예 5] 밤껍질 추출물의 IL-6 분비 감소
IL-6에 대한 ELISA를 진행한 것을 제외하고는 시험예 4와 실질적으로 동일한 방법을 이용하였다.
도 5를 참조하면, 밤껍질이 PGSA와 LPS에 의해 증가한 IL-6의 분비를 현격히 억제시키는 것을 관찰할 수 있다.
[시험예 6] 밤껍질 추출물의 IL-1 α 분비 감소
IL-1α에 대한 ELISA를 진행한 것을 제외하고는 시험예 4와 실질적으로 동일한 방법을 이용하였다.
도 6을 참조하면, 밤껍질이 PGSA와 LPS에 의해 증가한 IL-1α의 분비량을 농도에 따라서 감소시켜 주는 것을 관찰할 수 있다.
[시험예 7] 밤껍질 추출물의 IL-8 분비 감소
IL-8에 대한 ELISA를 진행한 것을 제외하고는 시험예 4와 실질적으로 동일한 방법을 이용하였다.
도 7을 참조하면, 밤껍질이 PGSA와 LPS에 의해 증가한 IL-8의 분비를 현저히 감소시켜 주는 것을 관찰할 수 있다.
[시험예 8] 밤껍질 추출물의 GM-CSF 분비 감소
GM-CSF에 대한 ELISA를 진행한 것을 제외하고는 시험예 4와 실질적으로 동일한 방법을 이용하였다.
도 8을 참조하면, 밤껍질의 농도가 증가함에 따라 PGSA와 LPS에 의해 분비되는 GM-CSF의 양이 감소하는 것을 관찰 할 수 있다.
[시험예 9] 밤껍질 추출물의 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 IL-6 분비 억제효과
실험 하루 전 피부 각화상피세포(Normal human skin keratinocyte, NHEK, 입수처: Lonza) 를 96 웰(well) 플레이트에 5X104cell/well이 되도록 분주한 후 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 24시간 동안 배양한다. 24시간 후, PBS로 세포를 2회 씻어주고 세럼 프리 KBM(serum free KBM(keratinocyte basement media))으로 갈아주었다. 각각의 웰(well)에 밤껍질 추출물을 농도별로 처리하고(10, 50ppm) 30분간 반응시킨 후, 트립신(10nM) 또는 PAR-2 활성화 펩타이드(SLIGKV, 50 uM)를 각각 처리하였다. 24시간 동안 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 배양한 후 배양액을 취하여 IL-6에 대한 ELISA를 진행하였다. ELISA는 제조회사(BD science)의 실험방법을 이용하였다.
도 9를 참조하면, 밤껍질 추출물이 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 IL-6의 분비를 농도의존적으로 억제함을 관찰할 수 있다.
[시험예 10] 밤껍질 추출물의 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 IL-8 분비 억제효과
IL-8에 대한 ELISA를 진행한 것을 제외하고는 시험예 9와 실질적으로 동일한 방법을 이용하였다.
도 10을 참조하면, 밤껍질 추출물이 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 IL-8의 분비를 농도 의존적으로 억제함을 관찰할 수 있다.
[시험예 11] 밤껍질 추출물의 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 GM-CSF 분비 억제효과
GM-CSF에 대한 ELISA를 진행한 것을 제외하고는 시험예 9와 실질적으로 동일한 방법을 이용하였다.
도 11을 참조하면, 밤껍질 추출물이 트립신과 활성 펩타이드(SLIGKV)에 의한 GM-CSF의 분비를 농도의존적으로 억제함을 관찰할 수 있다.
[시험예 12] 아토피성 피부염 환자에서 밤껍질 추출물의 가려움증 억제효과
약 2주간 10명의 아토피성 피부염 환자들을 대상으로 밤껍질 추출물 (0.3% 고형분 농도)을 가려운 부위에 집중적으로 사용하도록 한 후, 사용 전과 사용 후의 가려움 정도를 7점 척도의 설문지로 측정하여 가려움 완화 효과를 확인하였다.
도 12를 참조하면, 밤껍질 추출물을 2주간 사용한 후 가려움의 정도가 1점씩 낮아진 것을 관찰 할 수 있었다.
[시험예 13] 밤껍질 에탄올 추출물의 피부 보습 효과 측정
약 2주간 10명의 아토피성 피부염 환자들을 대상으로 밤껍질 추출물 (0.3% 고형분 농도)을 집중적으로 사용하도록 한 후, 사용 전과 사용 후의 피부 촉촉함 정도를 7점 척도의 설문지로 측정하여 피부 보습 효과를 확인하였다. 10명의 점수를 확인한 결과, 평균 6점 이상으로 추출물 도포 후 피부가 촉촉해 졌다고 응답하여, 우수한 피부 보습 효과를 나타냄을 관찰할 수 있었다.
[시험예 14] 밤 겉껍질 에탄올 추출물과 밤 속껍질 에탄올 추출물의 PAR-2 활성 억제효과 비교(in vitro, SLIGKV 처리, HEK: Human Epidermal Keratinocyte)
밤의 겉껍질(외피)과 속껍질(내피)을 분리하여 건조한 후, 실시예 1-2)와 같은 방법으로 밤 겉껍질 추출물을 제조하였고, 밤 속껍질 추출물 또한 실시예 1-2)와 같은 방법으로 제조하였다. 시험예 2에서와 같은 방법을 사용하여, 밤 겉껍질 에탄올 추출물과 밤 속껍질 에탄올 추출물의 PAR-2 활성 억제효과를 측정하여 하기 표 6 및 도 13에 나타내었다.
[표 6]
Figure PCTKR2010003984-appb-I000001
[시험예 15] 밤 겉껍질 에탄올 추출물과 밤 속껍질 에탄올 추출물의 PAR-2 활성 억제효과 비교(in vitro, SLIGKV 처리, HEK: Human Epidermal Keratinocyte)
밤의 겉껍질(외피)과 속껍질(내피) 추출물의 농도를 하기 표 7에서와 같이 처리한 것을 제외하고는 시험예 14와 동일한 방법으로 PAR-2 활성 억제효과를 측정하였다.
[표 7]
Figure PCTKR2010003984-appb-I000002
하기에 본 발명에 따른 조성물의 제형예를 설명하나, 약학 조성물 또는 건강식품 조성물은 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)
하기 표 1에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 유연화장수를 제조하였다.
[표 1]
Figure PCTKR2010003984-appb-I000003
[제형예 2] 영양화장수(밀크로션)
하기 표 2에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다.
[표 2]
Figure PCTKR2010003984-appb-I000004
[제형예 3] 영양크림
하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다.
[표 3]
Figure PCTKR2010003984-appb-I000005
[제형예 4] 마사지 크림
하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다.
[표 4]
Figure PCTKR2010003984-appb-I000006
[제형예 5] 팩
하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조하였다.
[표 5]
Figure PCTKR2010003984-appb-I000007

Claims (15)

  1. 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 가려움증 완화 또는 억제용 화장료 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은 염증성 피부염, 아토피성 피부염, 살갗의 거칠어짐으로 인한 피부염, 땀띠, 진무름, 동상, 접촉성 피부염, 지루성 피부염, 건선 및 유건선으로 이루어진 피부염 중 하나 이상으로부터 유발되는 가려움증을 완화 또는 억제하는 가려움증 완화 또는 억제용 화장료 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은 아토피성 피부염으로부터 유발되는 가려움증을 완화 또는 억제하는 가려움증 완화 또는 억제용 화장료 조성물.
  4. 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 장벽 기능 개선용 화장료 조성물.
  5. 제 4 항에 있어서,
    상기 조성물은 아토피성 피부염으로부터 유래된 피부 장벽 손상의 완화 또는 피부 장벽의 회복력 개선을 위한 것인 피부 장벽 개선용 화장료 조성물.
  6. 제 4 항에 있어서,
    상기 조성물은 피부 보습 증진 또는 피부 과각질화 방지를 위한 것인 피부 장벽 개선용 화장료 조성물.
  7. 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 면역 억제용 화장료 조성물.
  8. 제 7 항에 있어서,
    상기 조성물은 아토피 질환의 예방 또는 치료를 위한 것인 면역 억제용 화장료 조성물.
  9. 제 7 항에 있어서,
    상기 조성물은 아토피의 치료를 위한 면역 억제용 화장료 조성물.
  10. 밤껍질 추출물을 유효 성분으로 포함하는 아토피 피부염의 개선 또는 치료용 화장료 조성물.
  11. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 밤껍질 추출물은 조성물 총 중량을 기준으로 0.005 내지 80 중량%의 함량으로 포함되는 화장료 조성물.
  12. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 밤껍질은 밤의 내피, 외피 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 화장료 조성물.
  13. 제 12 항에 있어서,
    상기 밤껍질은 밤의 외피(겉껍질)인 화장료 조성물.
  14. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 밤껍질 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올, 1, 3-부틸글리콜 및 이들의 혼합 용매로부터 선택된 하나 이상의 용매를 통해 추출된 화장료 조성물.
  15. 제 14 항에 있어서,
    상기 밤껍질 추출물은 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올, 1, 3-부틸글리콜 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매를 통해 추출되는 화장료 조성물.
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