KR20220123618A - 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물 - Google Patents

울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20220123618A
KR20220123618A KR1020220107379A KR20220107379A KR20220123618A KR 20220123618 A KR20220123618 A KR 20220123618A KR 1020220107379 A KR1020220107379 A KR 1020220107379A KR 20220107379 A KR20220107379 A KR 20220107379A KR 20220123618 A KR20220123618 A KR 20220123618A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
goblin
composition
sensitive skin
skin
extract
Prior art date
Application number
KR1020220107379A
Other languages
English (en)
Inventor
신영희
노경백
정은선
박덕훈
Original Assignee
바이오스펙트럼 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 바이오스펙트럼 주식회사 filed Critical 바이오스펙트럼 주식회사
Priority to KR1020220107379A priority Critical patent/KR20220123618A/ko
Publication of KR20220123618A publication Critical patent/KR20220123618A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/005—Preparations for sensitive skin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 발명은 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부 자극 및 세포 독성이 없어 인체 안정성이 우수하면서도 JAK1 활성 억제 효능, 에오탁신-1 발현 억제 효능, 칼리크레인-5 활성 억제 효능, 및 TLR-2 활성화 억제 효능이 매우수하여 민감성 피부 질환을 예방, 개선 및 치료하는데 매우 효과적이므로, 민감성 피부 질환, 특히 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 예방, 개선 또는 치료를 위한 화장료 조성물, 약학 조성물, 피부 외용제 조성물 및 의약외품 조성물에 유효성분으로 유용하게 이용할 수 있다.

Description

울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물{Composition for sensitive skin comprising Bidens pilosa extracts}
본 발명은 도깨비바늘속 식물 추출물, 특히 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, JAK1, 에오탁신-1 및 KLK-5 활성을 억제함으로써 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 홍반 등의 민감성 피부 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는, 울산도깨비바늘의 지상부 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 약학 조성물, 피부 외용제 조성물 및 의약외품 조성물에 관한 것이다.
피부는 인체의 1차 방어 장벽으로서의 중요한 역할을 담당하고 있다. 피부는 미생물, 화학물질 및 물리적인 인자 등과 같은 외부로부터의 유해한 요인들에 의해 항상 위협을 받고 있기 때문에 방어 장벽으로서 역할을 수행하기 위해서는 타 기관보다 더 효율적이고도 우수한 방어기구가 필요하다. 민감성 피부란 피부의 장벽 조직이 평균 이상으로 얇아 외부 환경의 자극성 물질, 알레르기성 물질 등에 의해, 또는 스트레스, 과로 등의 인체 내부 원인에 의해 정상적인 피부보다 더 민감하게 반응하여 피부염을 잘 일으키는 피부를 말한다(이승헌 등, 피부 장벽학, 여문각, 2010).
아토피 피부염은 소아에서 흔히 나타나고 성인이 되어서도 증상이 지속될 수 있는 만성 알레르기성 피부 반응이다. 가족 중에 천식, 알레르기비염 등 다른 알레르기 질환이 있는 경우 아토피피부염이 발생할 가능성이 높으며, 식품이나 집먼지진드기 같은 알레르겐에 의해 발생할 수 있다. 아토피피부염은 주위 환경으로부터 신체를 방어하는 면역조절기능이 불균형을 이루어 생기는 질환인데, 과도한 면역반응으로 인해 알레르기 물질이 아닌데도 알레르기 반응이 피부로 나타나는 질환이다. 아토피성 피부염에서 가장 널리 사용되는 치료제는 스테로이드제로 알려져 있으나 이 치표제를 사용한 경우 2~4주의 단기간 치료에는 효과적이고 안전한 것으로 밝혀졌지만 장기간 치료는 안정성과 효과가 성립되지 않고 피부가 얇아지거나(skin thinning) 피부위축(stunting of growth), 상흔(stretch marks), 피부변색(skin discoloration) 등의 부작용이 발생되는 사례가 보고되고 있는 실정이다. 이처럼 합성 의약품은 장기간 사용에 의한 내성 유발과 하나의 유효성분으로는 치료가 안되는 질병들이 발생함에 따라 점차로 다양한 유효성분과 기능을 지닌 천연 추출물에 관심이 고조되고 있다.
야누스 인산화효소(Janus kinase; JAK)는 면역과 염증조절의 중추적 역할을 하는 단백질에 명령을 내리는 효소로 알려져 있으며, JAK1, JAK2, JAK3 그리고 TYK2 등 4종류로 구분되어진다. JAK의 다양한 기능들 중 STAT 단백질과 함께 싸이토카인(cytokine)에 신속하게 신호전달경로를 제공하는 것이 가장 많이 알려져 있다. 그 과정을 간단히 보면, 활성화된 JAK은 cytokine 수용체의 tyrosine 잔기를 인산화시켜 세포질의 유전자 조절 단백질인 STAT와 결합하게 된다. 이때 STAT는 JAK에 의해 인산화되어 활성화된다. 활성화된 STAT는 수용체에서 분리되어 이량체를 형성한 후 핵으로 이동하여 특정 유전자의 발현을 촉진한다. JAK 억제제는 세포내 면역활성화 신호전달에서 중요한 역할을 하는 JAK의 작용을 저해하고 면역반응의 과잉 활성화를 억제함에 따라 자가면역 및 알레르기성 질환을 개선할 것으로 기대되는 아토피성 피부염 치료에서 최근 주목받고 있는 연구 타겟이다. 일본담배산업(JT)은 야누스키나제(JAK) 저해제 'JTE-052'(delgocitinib) 연고제를 일본 후생노동성에 아토피성 피부염 치료제로 승인을 신청했다고 발표했으며 임상시험에서 JTE-052 연고가 위약에 비해 우월한 것으로 확인됐다고 한다.
로사시아(rosacea)는 주로 얼굴에 나타나는 안면홍조로서, 심해지면 두피나 상체로 번지기도 하는 만성 피부질환이다. 이 질환은 처음에는 얼굴에 홍조로 나타나 시간이 지나면서 모세혈관들이 뚜렷해지면서 전체적으로 얼굴을 더욱 붉게 만든다. 로사시아의 주요 발병원인 및 치료는 다양하게 연구되어 있지만 아직까지 불명확하다. 로사시아 환자들에서는 아토피 피부염 및 만성 두드러기와 같은 많은 피부 염증성 질환에서 나타나는 면역시스템 조절장애가 발견되었으며, 카텔리시딘(cathelicidin)과 이를 활성화 형태로 바꾸는 역할을 하는 주된 세린단백질가수분해효소(serine protease)인 칼리크레인 5(kallikrein 5)의 기준 발현 정도가 증가되어 있다. 또한 선천성 면역계의 주요한 패턴인식 수용체인 톨유사수용체-2 (Toll like receptor-2, TLR-2)는 로사시아 피부질환에서 발현이 증가함을 관찰했다. 외부자극 또는 유발인자에 의해 활성화될 때, 전염증성 사이토카인 및 케모카인 등을 생성을 통해 염증반응을 유도하며 표피 프로테아제인 칼리크레인-5의 발현을 증가시키는 것으로 알려져 있다. 피부는 외부변화 또는 내부면역시스템이상에 의해 카텔리시딘이나 칼리크레인 5의 발현이 증가하고 카텔리시딘은 칼리크레인 5에 의해 LL-37와 같은 활성형 펩티드로 바뀌면서 염증, 혈관신생, 모세혈관 확장 등 작용을 하여 안면홍조 또는 로사시아 등 피부질환을 유발할 수 있다(Takahashi,Toshiya, and Richard L.Gallo. The critical and multifunctional roles of antimicrobial peptides in dermatology. Dermatologic clinics 35.1 (2017):39-50).
한편, 도깨비바늘속(Bidens) 식물은 국화과(Compositae)에 속하는 한해살이풀로 한국을 비롯해서 중국, 일본, 말레시아, 호주, 아프리카 등지의 산과 들 물기가 있는 곳에 자생한다. 상기 도깨비바늘속 식물은 allkaloid, tannin, saponin, flavonoid 등이 있으며 이 성분들은 간보호효과(Yuan 등, 2008; Zhong 등, 2007), 지사효과(Mukeherjee 등, 1995), 항산화효과(Wang 등, 1997) 등의 약리기능이 있다.
상기 도깨비바늘 관련하여 대한민국 등록특허 제10-1757674호는 피부 탄력 증진 및 피부 주름 개선 용도를 개시하고 있으며, 대한민국 공개특허 제10-2014-0089173호는 울산 도깨비바늘은 TRAIL의 세포사멸 감수성을 증가시켜 TRAIL에 의한 항암효과를 증가시킬 수 있음을 개시하고 있다. 그러나 아직까지 도깨비바늘속 식물의 민감성 피부 질환, 예를 들어 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 개선에 관해서는 밝혀진 바가 없다.
이에 본 발명자들은 도깨비바늘속 식물 추출물, 특히 울산도깨비바늘의 지상부 추출물이 민감성 피부 질환에 탁월한 효능이 있으며 피부자극 및 세포독성이 없어 인체 안전성이 우수하다는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
대한민국 등록특허 제10-1757674호 (2017.07.07. 공고) 대한민국 공개특허 제10-2014-0089173호 (2014.07.14. 공개)
이승헌 등, 피부 장벽학, 여문각, 2010 Takahashi,Toshiya, and Richard L.Gallo. The critical and multifunctional roles of antimicrobial peptides in dermatology. Dermatologic clinics 35.1 (2017):39-50
본 발명의 하나의 목적은 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 화장료 조성물을 제공하기 위한 것이다.
본 발명의 또 하나의 목적은 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하기 위한 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부질환 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물을 제공하기 위한 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공하기 위한 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부질환 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명의 도깨비바늘 속 식물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부 자극 및 세포 독성이 없어 인체 안정성이 우수하면서도 JAK1 활성 억제 효능, 에오탁신-1 발현 억제 효능, 칼리크레인-5 활성 억제 효능, 및 TLR-2 활성화 억제 효능이 매우수하여 민감성 피부 질환을 예방, 개선 및 치료하는데 매우 효과적이므로, 민감성 피부 질환, 특히 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 예방, 개선 또는 치료를 위한 화장료 조성물, 약학 조성물, 피부 외용제 조성물 및 의약외품 조성물에 유효성분으로 유용하게 이용할 수 있다.
도 1은 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 Janus kinase 1 활성 억제효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 2는 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 Eotaxin-1 발현 억제효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 3은 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 칼리크레인-5 활성 억제효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 4은 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 TLR-2 활성화 억제 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
본 발명은 도깨비바늘 속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 도깨비바늘 속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 약학 조성물, 피부 외용제 조성물 및 의약외품 조성물에 관한 것으로, 상기 조성물은 피부자극 및 세포독성이 없어 인체 안정성이 우수하면서도 피부의 내외부 자극인자에 의해 발현 및 활성이 증가되는 야뉴스 인산화효소(Janus kinase) 및 에오탁신(eotaxin)의 활성을 억제하여 아토피 피부염, 여드름, 건선 등과 같은 민감성 피부 질환의 증상을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료할 수 있다. 또한 표피의 프로테아제인 칼리크레인-5의 발현 및 활성 억제를 통해 카텔리시딘의 LL-37로의 절단을 억제함으로써, LL-37에 의해 유도되는 안면홍조, 로사시아 및 피부 홍반 등과 같은 민감성 피부 질환의 증상을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
하나의 양태로서, 본 발명은 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 도깨비바늘(Bidens) 속 식물은 국화과(Compositae)에 속하는 한해살이풀로, 도깨비바늘 (Bidens bipinnata L.) 및 울산도깨비바늘 (Bidens pilosa L.)이 이에 속한다.
본 발명에서의 용어 "추출물(extract)"이란, 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온 또는 가온상태에서 일정시간 동안 추출, 분획하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물에 더하여, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다.
상기 도깨비바늘속 추출물은 물 또는 다양한 유기용매 등으로 추출하여 수득할 수 있다. 이때, 사용되는 유기용매는 민감성 피부에 나타나는 증상, 예를 들어 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 치료 효과를 갖는 추출물을 수득할 수 있는 한, 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 물, 극성용매 또는 비극성용매가 될 수 있고, 보다 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올(에탄올, 메탄올, 프로판올 또는 부탄올 등), 이들의 혼합용매 등이 될 수 있으며, 가장 바람직하게는 물을 사용할 수 있다.
본 발명에 있어서, 도깨비바늘속 식물 추출물은 도깨비바늘속 식물의 잎, 줄기, 뿌리 및 전초로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상으로부터 추출된 것을 의미하며, 바람직하게는 도깨비바늘속 식물의 지상부로부터 추출된 것을 의미한다.
또한, 상기 추출물을 수득하기 위한 방법 역시 민감성 피부에 나타나는 증상, 예를 들어 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등을 예방, 개선 또는 치료 효과를 갖는 추출물을 수득할 수 있는 한, 특별히 이에 제한되지 않는다. 추출 방법은 열수 추출, 냉침 추출, 초음파 추출, 또는 환류 냉각 추출 방법 등이 있으며, 열수 추출 방법으로 실시하는 것이 바람직하다.
하나의 구체적 예로서, 상기 열수 추출은 도깨비바늘속 식물 분말을 물에 침지하고, 90 내지 130℃, 바람직하게는 121℃로 가열하여 추출하는 가열추출법의 방법을 사용할 수 있다. 한편, 추출시간은 10분 내지 12시간인 것이 바람직하며, 20분 내지 8시간인 것이 더욱 바람직하고, 30분인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 아울러, 추출 횟수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 1 내지 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하고, 2회인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 수득한 도깨비바늘속 식물 추출물은 이에 제한되지는 않으나, 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하여 감압농축될 수 있다. 또한 감압농축 후 이에 제한되지는 않으나, 동결건조, 감압건조, 진공건조, 비등건조, 또는 분무건조를 통해 건조될 수 있다.
본 발명에 있어서, “민감성 피부”란 피부의 장벽 조직이 평균 이상으로 얇아 외부 환경의 자극성 물질, 알레르기성 물질 등에 의해, 또는 스트레스, 과로 등의 인체 내부 원인에 의해 정상적인 피부보다 더 민감하게 반응하여 피부 홍조 등의 자극반응이나 피부염을 잘 일으키는 피부를 말한다.
본 발명에 있어서, “민감성 피부 증상” 및 “민감성 피부 질환”이란 피부의 내외부 자극인자에 의해 피부가 민감하게 반응하여 비정상적으로 나타나는 증상으로 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등을 말한다.
본 발명의 도깨비바늘속 식물 추출물은 외부 환경 또는 인체 내부 원인에 의해 피부에 비정상적으로 나타나는 민감성 피부 증상을 개선 및 치료할 수 있다.
하나의 구체적인 예로, 본 발명의 도깨비바늘속 식물 추출물은 면역조절인자인 야누스키나아제(Janus kinase)의 활성을 억제하여 세포질의 유전자 조절 단백질인 STAT의 활성화를 저해함으로써 활성화된 STAT에 의해 유도되는 면역반응 과잉을 효과적으로 억제할 수 있다(도 1 참조).
또 하나의 구체적인 예로, 본 발명의 도깨비바늘속 식물 추출물은 알러지성 면역 반응 매개 물질인 에오탁신-1(eotaxin-1)의 발현을 억제하여 면역반응 과잉을 효과적으로 억제할 수 있다(도 2 참조).
또 다른 하나의 구체적인 예로, 본 발명의 도깨비바늘속 식물 추출물은 표피의 프로테아제인 칼리크레인-5의 발현 및 활성 억제를 통해 카텔리시딘의 LL-37로의 절단을 억제함으로써, LL-37에 의해 유도되는 안면홍조, 로사시아 및 피부 홍반의 증상을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
본 발명의 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 화장료 조성물은 전체 화장료 조성물 중량을 기준으로 하여 도깨비바늘속 식물추출물을 0.0001 내지 70.0 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 68.0 중량%를 포함한다. 상기 도깨비바늘속 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 민감성 피부 증상의 개선 효과를 기대할 수 없고, 70.0 중량%를 초과하는 경우 함량 증가에 따른 민감성 피부 증상의 개선 효과가 미미하며 화장품 제형을 제조하는데 어려움이 발생한다.
본 발명에 있어서, 상기 "화장료 조성물"에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.
다른 하나의 양태로서, 본 발명은 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 민감성 피부 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 도깨비바늘속 식물 추출물의 민감성 피부 질환, 예를 들어 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 예방 또는 치료 효과에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명에서의 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 민감성 피부 질환의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 상기 약학적 조성물의 투여에 의해 민감성 피부 질환의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 상기 민감성 피부 질환의 예방 또는 치료는 상기 추출물에 의해 야누스키나아제(Janus kinase)의 활성을 억제하여 세포질의 유전자 조절 단백질인 STAT의 활성화를 저해함으로써 활성화된 STAT에 의해 유도되는 면역반응 과잉을 억제하고/억제하거나, 알러지성 면역 반응 매개 물질인 에오탁신-1(eotaxin-1)의 활성을 억제하여 면역반응 과잉을 억제하고/억제하거나, 칼리크레인-5(Kallein-5)의 발현 및 활성을 억제시키고, 카텔리시딘(cathelicidin)의 LL-37로의 절단을 억제하여 LL-37 활성화를 억제함에 의해 달성되는 것일 수 있다.
본 발명의 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 전체 약학적 조성물 중량을 기준으로 하여 도깨비바늘속 식물 추출물을 0.0001 내지 70.0 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 68.0 중량%를 포함한다. 상기 도깨비바늘속 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 민감성 피부 질환의 치료 효과를 기대할 수 없고, 70.0 중량%를 초과하는 경우 함량 증가에 따른 민감성 피부 증상의 개선 효과가 미미하며 의약품 제형을 제조하는데 어려움이 발생한다.
본 발명의 용어, "약학 조성물"은 질병의 예방 또는 치료를 목적으로 제조된 것을 의미하며, 각각 통상의 방법에 따라 다양한 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 예컨대, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형으로 제형화할 수 있고, 윤활제, 습윤제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 비경구형 제형으로 제형화하여 사용될 수 있다. 또한, 외용제, 좌제, 피부외용제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 조성물은 얼굴의 중앙 부위, 코 주변과 같이 돌출한 부위와 뺨, 턱, 이마, 두피, 목, 가슴, 등 및 눈 부위와 같은 민감성 피부 질환의 피부병변에 직접 도포 또는 산포하는 등의 방법에 의해 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 상기 부위에만 한정되지 않고 민감성 피부 질환이 발병한 어느 부위든 적용될 수 있다.
또한, 각각의 제형에 따라 약학적으로 허용가능한 담체, 예컨대 완충제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제, 기제 등 당업계에 공지된 담체를 추가로 포함하여 제조할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용 가능한 담체"란 생물체를 자극하지 않으면서, 주입되는 유효성분의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 의미할 수 있다. 본 발명에 사용 가능한 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되고 약학적으로 허용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 담체는 비자연적 담체 (non-naturally occuring carrier)일 수 있다.
본 발명의 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 상기 약학적으로 유효한 양은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 건강상태, 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 구체적으로 투여 개체의 몸무게 1㎏ 당 일반적으로 1일 0.001㎎ 내지 300㎎이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로 또는 민감성 피부 질환의 예방 또는 개선 효과를 나타내는 기타 약학적 활성 화합물과 결합하여 또는 적당한 집합을 이루어 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여할 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용을 유발하지 않으면서 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명에서 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 투여 방식은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방식에 따를 수 있다. 상기 투여 방식의 비제한적인 예로, 조성물을 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다. 바람직하게는 비경구 투여, 보다 바람직하게는 도포에 의한 국소 투여(topical application) 방식으로 적용될 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 조성물은 얼굴의 중앙 부위, 코 주변과 같이 돌출한 부위와 뺨, 턱, 이마, 두피, 목, 가슴, 등 및 눈 부위와 같은 민감성 피부 질환의 피부병변에 직접 도포 또는 산포하는 등의 방법에 의해 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 목적하는 투여 방식에 따라 다양한 제형으로 제작될 수 있다.
본 발명의 조성물의 투여빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 도깨비바늘 속 식물 추출물을 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 민감성 피부 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
상기 도깨비바늘 속 식물 추출물의 민감성 피부 질환의 치료 효과는 전술한 바와 같다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개체"란, 민감성 피부 질환이 발병되었거나 발병할 가능성이 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미할 수 있다. 상기 동물은 인간뿐만 아니라 이와 유사한 증상의 치료를 필요로 하는 소, 말, 양, 돼지, 염소, 낙타, 영양, 개, 고양이 등의 포유동물일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 상기 예방 또는 치료 방법은 구체적으로, 민감성 피부 질환이 발병하였거나 발병할 위험이 있는 개체에 상기 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 투여하는 방법은, 상기에 전술한 바와 같다.
상기 예방은 본 발명에 따른 민감성 피부 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물을 개체에 투여하여 민감성 피부 질환의 발병을 억제시키거나 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.
또한, 상기 치료는 본 발명의 상기 조성물을 민감성 피부 질환 발병 의심 개체에 투여하여 민감성 피부 질환의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미할 수 있다.
상기 도깨비바늘 속 식물 추출물을 포함하는 약학적 조성물에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명의 조성물은 투여를 위하여, 상기 기재한 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로오스, 폴리비닐피 롤리돈, 셀룰로오스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로오스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일을 들 수 있다.
본 발명의 조성물의 적합한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 구체적으로, 상기 도깨비바늘 속 식물 추출물의 투여량은 0.001~300㎎/Kg일 수 있다. 또한 외용제인 경우에는 성인 기준으로 1.0 내지 3.0㎖의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속 하는 것이 좋다. 다만, 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 도깨비바늘 속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 민감성 피부 질환의 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
상기 도깨비바늘 속 식물 추출물의 민감성 피부 질환의 예방 또는 개선 효과는 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "개선"은 개체에서 피부의 면역과잉 반응으로 발생하거나 표피 프로테아제 칼리크레인-5의 발현 및 활성의 증가로 발생하는 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 발병 억제, 경감, 제거를 의미한다.
본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이, 팩 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
또한, 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 도깨비바늘 속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 민감성 피부 질환의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 도깨비바늘 속 식물 추출물의 민감성 피부 질환의 치료 효과는 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미한다. 예를 들어, 약사법에 따른 의약외품은 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람/동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.
구체적으로, 상기 의약외품은 피부외용제 및 개인위생용품을 포함할 수 있다. 보다 구체적으로 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 또는 연고제일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에 따른 상기 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 도깨비바늘 속 식물 추출물은 천연 약용식물을 원료로 하므로 여드름, 아토피성 피부염, 건선, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반 등의 민감성 피부 증상 및 질환을 개선 및 치료하기 위한 화장료 조성물 또는 약학 조성물로 사용할 경우에도 일반적인 합성 화합물에 비하여 부작용이 덜할 수 있으므로 안전하게 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예 1: 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물 제조
도깨비바늘 및 울산도깨비바늘의 지상부를 채취하여 이물질 및 불순물이 완전히 제거되도록 깨끗이 세척한 후, 20 내지 35℃에서 음건한 다음 입자의 크기가 1mm 이하가 되도록 분쇄하였다. 그 후 상기 분쇄된 도깨비바늘 및 울산도깨비바늘 분말 50 g에 정제수 1ℓ를 첨가하여 121℃에서 30분간 반응 시킨 후 수득한 추출액을 여과지(Advantec, No.2)를 사용하여 여과하였다. 상기 여과물을 감압 농축하여 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물을 각각 제조하였다.
실시예 2: 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 야누스 인산화 효소 1 활성 억제효능 측정
도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 야뉴스 인산화 효소(Janus kinase) 1 활성 억제능은 HTRF KinEASE™-TK kit (Cisbio,프랑스) 를 이용하여 측정하였다. HTRF는 TR-FRET(time-resolved fluorescence resonance energy transfer technology) 분석 방법으로 HTS(high-throughput screening)에 적용되어 의약품 개발에 많이 사용하는 방법 중 하나로 일반적인 사이토카인(cytokines) 측정부터 효소 활성(enzyme activity), 단백질 인산화(protein phosphorylation), 단백질 상호작용(protein-protein interaction), cAMP 측정 등을 수용체/공여체(acceptor/donor) 반응을 통한 형광으로 측정할 수 있으며, 두 가지 파장대에서 측정하므로 버퍼(buffer) 및 배지(medium) 등의 간섭을 감소시킬 수 있는 장점이 있다. HTRF KinEase™-TK kit의 모든 구성요소들은 설명서에 따라 다루어졌다. 키나제는 샘플의 존재 및 부재 하에 적절한 기질과 반응시키고 검출 시약에 의해 인산화된 기질을 포착하는 방식으로 테스트 물질의 키나제 활성 억제능을 측정하는 것이다. 간단히 다음과 같은 두 단계를 거친다.
단계 1. 키나제 반응
키나제는 샘플의 존재 및 부재 하에 적절한 기질과 반응시킨다. 효소 완충제를 샘플 대신 보충하여 대조군(-)으로 하고 록소리티닙(Ruxolitinib) 100nM 처리군을 양성대조군(positive cotrol)으로 한다. 이 단계 동안, 키나제는 기질을 인산화한다. TK 기질-비오틴은 키나제와 함께 배양되며 효소 반응을 시작하기 위해 ATP를 첨가한다. 순서는 테스트 샘플 및 ATP를 포함하는 효소 혼합체를 HTRF 96-well low volume plate (Cisbio, 프랑스)에 첨가하고 실온에서 15분간 반응시킨다. 상기 혼합물에 적당한 TK Substrate-biotin를 첨가하여 2시간 반응시킨다.
단계 2. 형광 검출
반응이 끝난 상기 혼합물에 Eu-cryptate와 XL665 conjugates를 첨가한다. 검출 시약은 인산화된 기질을 포착하며 결과적인 TR-FRET 신호는 인산화 수준에 비례한다. 그 결과를 도 1에 나타내었다. 여기서 보듯이 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물은 농도의존적으로 Janus kinase 1 활성을 억함을 확인할 수 있었다.
실시예 3: 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 에오탁신-1 발현 억제효능 측정
마우스의 정상 섬유아세포(mouse normal fibroblast, NIH/3T3)를 DMEM 배지가 들어 있는 24-웰 마이크로 플레이트에 웰당 약 2 × 105개의 세포가 되도록 접종시키고, 5% 농도의 CO2 배양기에서 37℃로 24시간 동안 배양하였다. 그 후 10, 20 및 50 ppm의 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물을 각각 처리한 다음 인터루킨-4(Recombinant Mouse IL-4 Protein, R&D Systems,미국)를 50ng/㎖을 함께 처리하여 24시간 동안 배양한 후 세포 배양액을 수집하였다. 그 다음 ELISA kit을 이용하여 에오탁신-1(eotaxin-1)의 분비정도를 측정하였다. 대조군(-)으로는 도깨비바늘속 식물 추출물 및 인터루킨-4를 모두 처리하지 않은 마우스섬유아세포를 사용하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2는 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 에오탁신-1(eotaxin-1) 발현 억제 효과를 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물은 농도 의존적으로 에오탁신-1(eotaxin-1) 발현 억제효과를 나타내었다.
실시예 4: 도깨비바늘 추출물과 울산도깨비바늘의 칼리크레인-5 활성 억제효능 측정
피부의 각질세포에 존재하는 세린계 단백질분해효소(protease)인 칼리크레인-5 (kallikrein-5)의 효소활성을 측정하기 위해, 재조합 칼리크레인-5 (R&D systems, 미국)와 7-Amino-4-methylcoumarin (AMC) 형광이 결합된 칼리크레인-5의 기질인 Boc-Val-Pro-Arg-AMC (R&D systems, 미국)를 반응시켜 효소활성을 측정하였다. 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물을 2 μg/ml 재조합 칼리크레인-5 50 μl에 농도별(10, 50, 100 ppm)로 처리하여 실온에서 10분간 먼저 반응시킨 뒤, 800 μM 칼리크레인-5 기질 50 μl을 더하여 380 nm/480 nm 형광에서 5분간 카이네틱 모드로 측정하였다. 양성 대조군으로는 트립신 저해제인 류펩틴(Leupeptin) (Sigma aldrich, 미국)을 사용하였고, 음성대조군으로는 재조합 칼리크레인을 처리하지 않은 조건을 사용하였다. 활성 정도는 각 조건 측정값의 최고 형광값에서 최저 형광값을 빼준 값을 기준으로, 도깨비바늘속 식물 추출물 무처리군의 형광값과 비교하여 도깨비바늘속 추출물 처리군의 형광값 정도를 비교하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3은 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 칼리크레인-5 활성 억제효과를 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물은 농도 의존적으로 칼리크레인-5 활성 억제효과를 나타내었다.
실시예 5: 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 TLR-2 활성화 억제 효과 측정
도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 TLR-2 활성화에 억제에 의한 염증 유발 억제효능을 측정하였다. TLR-2와 SEAP (secreted embryonic alkaline phosphatase) 리포터 유전자(reporter gene)와 함께 형질주입된 HEK-Blue™ TLR2 cell line (Invivogen, 미국)을 사용하였으며, SEAP 리포터 유전자는 전사인자인 NF-kB와 AP-1 결합 부위를 포함하고 있으므로, TLR-2가 활성화에 의해 NF-kB와 AP-1을 활성화되면 SEAP을 생성하여 세포외로 분비하게 된다. 구체적으로 HEK-Blue™ TLR2 cell line을 10% FBS가 포함된 DMEM에 배양한 후 48-웰 플레이트에 웰 당 1 × 105 세포수로 접종시킨 뒤 도깨비바늘속 식물 추출물을 1시간 동안 전처리한 다음 키틴 (Carbosynth, 미국)을 처리하여 12 시간 동안 다시 배양하였다. 여기서 키틴은 모낭충의 구성인자로 염증성 로사시아의 주요한 유발인자로 알려져 있다. 실험에 사용한 키틴은 40 ~ 70 μm 크기로 분리하여 처리하였다. 12시간 배양한 세포 배양 상등액 20 μl를 덜어낸 다음 QUANTI-Blue™ (Invivogen, 미국) 80 μl와 섞은 후 37℃에서 1시간 동안 반응시켰다. TLR-2 활성화 정도는 Quanti-Blue와 세포외로 분비된 SEAP의 반응으로 인한 발색정도를 비교하여 측정하였고 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4는 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 TLR-2 신호전달 활성억제 효능을 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물은 키틴에 의해 유도된 TLR-2 신호전달의 활성화를 효과적으로 억제하는 효능을 나타내었다.
실시예 5 : 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물의 인체 피부에 대한 안전성 확인 시험
본 발명에 따른 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물이 인체피부에 안전한지 확인하기 위하여 피부 안전성 검증 실험을 수행하였다. 이를 위해 피부누적자극시험을 실시하였다.
실시예 1의 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물을 각각 0.1%, 0.5% 및 1%를 함유한 영양 크림을 제조하였다. 구체적으로, 수상인 정제수, 트리에탄올아민 및 프로필렌 글리콜을 70℃로 가열하고 용해시킨 후, 밀납, 유동파라핀, 유상성분, 유화제 및 방부제를 70℃로 가열하여 용해한 액을 첨가하여 유화시켰다. 유화가 완료된 후 상기 용액을 45℃로 냉각시키고 도깨비바늘 추출물을 각각 0.1%, 0.5% 및 1% 첨가하고 분산시킨 다음 30℃로 냉각하였다. 상기 도깨비바늘 추출물의 함량을 0.1%, 0.5% 및 1%로 증가시킴에 따라서 유동파라핀의 함량을 각각 9.91%, 9.51% 및 9.01%로 줄여가며 영양크림을 제조하였다.
상기와 같이 제조한 영양크림을 사용하여 건강한 30명의 성인을 대상으로 윗 팔뚝 부위에 격일로 총 9회의 24시간 누적 첩포를 시행하여 도깨비바늘속 식물 추출물이 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다.
첩포 방법은 핀 챔버 (Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부외용제를 15 ㎕씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 하기 수학식 1을 이용하여 점수화 하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
[수학식 1]
평균반응도 = [[{(반응지수 × 반응도)/ (총 피검자수 × 최고점수(4점))}] × 100] ÷ 검사회수(9회)
반응도에서 ±는 1점, +는 2점 및 ++는 4점의 점수를 부여하며, 평균반응도가 3 미만일 때 안전한 조성물로 판정된다.
시험물질 반응이 나타난 피검자 수 평균반응도
1주 2주 3주
1차 2차 3차 4차 5차 6차 7차 8차 9차
± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋
대조군
(스쿠알렌)		 - - - - - - 1 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.09
도깨비바늘속
추출물
(0.1%)
[시험군 1]		 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.00
도깨비바늘속
추출물
(0.5%) [시험군 2]		 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.00
도깨비바늘속 추출물
(1%)
[시험군 3]		 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.00
상기 표 4에 나타난 바와 같이, 시험군 1, 2 및 3 모두 ±, + 및 ++에 해당하는 사람의 수가 모두 0명이고, 평균 반응도 역시 0.00이었다. 상기 시험결과 3 이하의 평균반응도를 나타내므로, 본 발명에 따른 도깨비바늘속 식물 추출물은 뚜렷한 누적자극 양상을 나타내지 않는 인체 피부에 안전한 물질로 판정되었다.
본 발명의 조성물은 하기와 같이 제제예로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
제제예 1 : 화장료 제제
1-1. 유연화장수
하기의 표 2와 같이 도깨비바늘과 울산도깨비바늘 추출물 각각(이하에서, 편의상 도깨비바늘속 추출물이라고 표현함)을 유효성분으로 포함하는 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
도깨비바늘속 추출물 0.01
글리세린 3.0
부틸렌 글리콜 2.0
프로필렌 글리콜 2.0
카복시비닐폴리머 0.1
에탄올 10.0
트리에탄올아민 0.1
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량 정제수 82.79
총계 100.0
1-2. 영양화장수
하기의 표 3과 같이 도깨비바늘속 추출물을 유효성분으로 포함하는 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
도깨비바늘속 추출물 0.01
밀납 4.0
폴리소르베이트 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.5
유동파라핀 5.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5.0
글리세린 3.0
부틸렌 글리콜 3.0
프로필렌 글리콜 3.0
카복시비닐폴리머 0.1
트리에탄올아민 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 69.69
총계 100.0
1-3. 영양크림
하기의 표 4와 같이 도깨비바늘속 추출물을 유효성분으로 포함하는 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
도깨비바늘속 추출물 0.01
밀납 10.0
폴리소르베이트 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.5
유동파라핀 10.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5.0
글리세린 5.0
부틸렌 글리콜 3.0
프로필렌 글리콜 3.0
트리에탄올아민 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 56.79
총계 100.0
1-4. 마사지 크림
하기의 표 5와 같이 도깨비바늘속 추출물을 유효성분으로 포함하는 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
도깨비바늘속 추출물 0.01
밀납 10.0
폴리소르베이트 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.8
유동파라핀 40.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 4.0
글리세린 5.0
부틸렌 글리콜 3.0
프로필렌 글리콜 3.0
트리에탄올아민 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 27.49
총계 100.0
1-5. 팩
하기의 표 6과 같이 도깨비바늘속 추출물을 유효성분으로 포함하는 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
도깨비바늘속 추출물 0.01
폴리비닐알콜 13.0
소듐카복시메틸셀룰로스 0.2
알란토인 0.1
에탄올 5.0
노닐페닐에테르 0.3
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 81.39
총계 100.0
제제예 2 : 약제학적 제제
2-1. 연고제의 제조
성분 함량(g)
도깨비바늘속 추출물 0.1
디에탄올아민 1.5
전분폴리비닐프톨리돈 5.0
프로필렌글리콜 30.0
정제수 63.4
총계 100.0

Claims (5)

  1. 울산도깨비바늘(Bidens pilosa L.)의 지상부 추출물; 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료로 이루어진 군에서 1이상 선택된 보조제; 및 담체로 이루어진 건선, 안면홍조, 로사시아, 또는 홍반 중의 어느 하나 이상 선택된 민감성 피부 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 민감성 피부용 화장료 조성물.
  3. 울산도깨비바늘(Bidens pilosa L.)의 지상부 추출물 및 약학적으로 허용 가능한 담체로 이루어진 건선, 안면홍조, 로사시아, 또는 홍반 중의 어느 하나 이상 선택된 민감성 피부 질환 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  4. 울산도깨비바늘(Bidens pilosa L.)의 지상부 추출물 및 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제로 이루어진 민감성 피부 질환의 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물로,
    상기 민감성 피부 질환은 건선, 안면홍조, 로사시아, 또는 홍반 중 어느 하나인 것으로 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
  5. 울산도깨비바늘(Bidens pilosa L.)의 지상부 추출물 및 약학적으로 허용 가능한 담체로 이루어진 민감성 피부 질환의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물로,
    상기 민감성 피부 질환은 건선, 안면홍조, 로사시아, 또는 홍반 중 어느 하나인 것으로 특징으로 하는 의약외품 조성물.
KR1020220107379A 2020-04-22 2022-08-26 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물 KR20220123618A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220107379A KR20220123618A (ko) 2020-04-22 2022-08-26 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200048998A KR20210130595A (ko) 2020-04-22 2020-04-22 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물
KR1020220107379A KR20220123618A (ko) 2020-04-22 2022-08-26 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200048998A Division KR20210130595A (ko) 2020-04-22 2020-04-22 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220123618A true KR20220123618A (ko) 2022-09-08

Family

ID=78519364

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200048998A KR20210130595A (ko) 2020-04-22 2020-04-22 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물
KR1020220107379A KR20220123618A (ko) 2020-04-22 2022-08-26 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200048998A KR20210130595A (ko) 2020-04-22 2020-04-22 도깨비바늘속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (2) KR20210130595A (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118340696A (zh) * 2024-03-01 2024-07-16 诺德溯源(广州)生物科技有限公司 一种温和适合敏感肌的抗衰组合物及其制备方法、应用

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116077376A (zh) * 2023-01-09 2023-05-09 上海大喂科技发展有限公司 具有纯净修护功能配方的气垫及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20140089173A (ko) 2013-01-04 2014-07-14 한국생명공학연구원 울산 도깨비 바늘 추출물 및 trail을 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 치료용 약학적 조성물
KR101757674B1 (ko) 2015-08-28 2017-07-14 주식회사 코리아나화장품 도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 증진 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20140089173A (ko) 2013-01-04 2014-07-14 한국생명공학연구원 울산 도깨비 바늘 추출물 및 trail을 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 치료용 약학적 조성물
KR101757674B1 (ko) 2015-08-28 2017-07-14 주식회사 코리아나화장품 도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 증진 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Takahashi,Toshiya, and Richard L.Gallo. The critical and multifunctional roles of antimicrobial peptides in dermatology. Dermatologic clinics 35.1 (2017):39-50
이승헌 등, 피부 장벽학, 여문각, 2010

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118340696A (zh) * 2024-03-01 2024-07-16 诺德溯源(广州)生物科技有限公司 一种温和适合敏感肌的抗衰组合物及其制备方法、应用

Also Published As

Publication number Publication date
KR20210130595A (ko) 2021-11-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100772575B1 (ko) 생약성분 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물
KR20220123618A (ko) 울산도깨비바늘 추출물을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물
KR101567633B1 (ko) 감귤 미성숙과 추출물, 또는 시네프린 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 피부질환 치료 또는 예방용 조성물
KR100633380B1 (ko) 특정 생약추출 혼합물을 함유하는 아토피 피부용 한방화장료 조성물
KR20200063855A (ko) 밀크씨슬 꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물
US20210361559A1 (en) Composition containing cirsium japonicum extract as active ingredient for stimulating melanogenesis
KR102350141B1 (ko) 마치현, 애엽 및 홍경천의 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보호 및 피부자극 완화용 화장료 조성물
KR101419588B1 (ko) 홍삼 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물
KR20110125087A (ko) 한방추출물을 유효성분으로 하는 소양증 개선용 조성물
KR20150101162A (ko) 개망초 (Erigeron annuus (L.) Pers.) 추출물 또는 브레비스카핀 (breviscapine) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물
KR20150033797A (ko) 아토피성 피부질환 예방 및 치료용 약학적 조성물
KR102455238B1 (ko) 한방 복합추출물을 포함하는 비듬 및 두피 케어용 조성물
KR20180001708A (ko) 아미노산의 함량이 증가된 발아녹두를 유효성분으로 함유하는 피부 가려움증 완화 또는 피부 면역조절용 화장료 조성물 및 약학 조성물
KR102514975B1 (ko) 이소오카닌을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부용 조성물
KR101419587B1 (ko) 홍삼 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 재생 촉진용 조성물
KR102050470B1 (ko) 식물 추출물을 포함하는 피부 가려움증 완화용 화장료 조성물
KR101879315B1 (ko) 천연 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부진정용 조성물
KR20160091593A (ko) 심비디움(cymbidium) 추출물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 알레르기 질환 또는 접촉성 피부염 예방 및 치료용 약학조성물
KR20230076873A (ko) 쑥속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 로사시아 예방 및 개선용 조성물
KR102142931B1 (ko) 붉나무 열매 추출물을 포함하는 피지분비 억제용 조성물
KR102502443B1 (ko) 달맞이꽃의 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 튼살 예방, 개선, 또는 치료를 위한 조성물
KR102542032B1 (ko) 왕벚나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물
KR102718114B1 (ko) 배롱나무꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 체취, 피지 분비 및 비듬 억제용 조성물
KR102248513B1 (ko) 무좀 예방 및 치료용 조성물
KR102405779B1 (ko) 쐐기풀을 포함하는 기능성 조성물 및 이의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
A107 Divisional application of patent
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application