WO2010076922A1 - 버섯 발효인삼 분말을 함유하는 항암용 건강식품 - Google Patents

버섯 발효인삼 분말을 함유하는 항암용 건강식품 Download PDF

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WO2010076922A1
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mushroom
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fermented
cancer
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배기환
김문일
유재국
박병욱
김진표
이익수
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주식회사한국신약
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    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the present invention relates to a health food for cancer containing mushroom fermented ginseng powder.
  • Ginseng is a perennial plant belonging to the genus Panax, which has been used as a traditional drug in Korea and China since ancient times, and the genus Panax is one of the most important genus in Chinese medicine. Ginseng not only has an excellent effect on the prevention and treatment of various diseases, but also has a wide range of effects as a tonic and energizing agent for those who have no disease at all, and is known to have no side effects even after long-term use.
  • Ginseng is used as a medicine to intensify the yang of soy sauce, heart, lung, kidney, and spleen, and open stomach of stomach, stop ovulation, vomiting, thirst and make blood flow well. It is lighter and longer life.
  • saponin a major component of ginseng, is known to be good for cancer, diabetes, male function enhancement, hypertension, arteriosclerosis, dementia, osteoporosis prevention, anti-aging, promoting brain activity, menopausal disorders, and skin care for women. In particular, it has been found to have higher anticancer activity, potent hypoglycemic action, and suppress complications than anticancer drugs.
  • the chemical structure of saponin is a glycoside consisting of glyco and aglycone.
  • saponins When these saponins are absorbed by the body, they are broken down by the unique microorganisms in the human intestine and absorbed into the body.
  • the intestinal microorganisms that break down ginseng saponin vary depending on the human constitution and dietary habits, and their presence and degree of retention. Therefore, the effects of ginseng saponin may be different after taking ginseng.
  • chaga mushroom Inonotus obliquus
  • chaga mushroom is a parasitic mushroom in birch trees of more than 45 degrees north latitude, such as Siberia, North America, and Northern Europe, and is effective in treating adult diseases such as cancer. It grows on the sap and eats the sap, which usually grows for 15 to 20 years, and is also found in alders, willows, and maples, but these are ineffective.
  • Russia it has been handed down as a elixir for treating incurable diseases since the 16th century.
  • Komarov Science Institute Komarov Science Institute, and is now recognized as an official medicine for cancer treatment in Russia.
  • Ganoderma lucidum is also called Bulchocho. It occurs in the roots of hardwoods in summer and also sprouts on the ground. It is a year-round mushroom that has a gloss like lacquer on its lampshade and bag surface. In oriental medicine, it is effective in tonic, Jinhae, and small sarcoma, and is used for nervous breakdown, heart disease, hypertension, and various carcinomas. These mushrooms are covered with hard skin and have a varnish like varnish. They are used as an herbal medicine in Japan and as a Chinese herbaceous land, and are widely used for decorative purposes.
  • Coriolus versicolor is called cloud cloud, mushroom paper or cloud finger in Chinese because it is like a cloud. Or it is called 'cloud mushroom'. It grows on rotten stems and branches of hardwoods from spring to autumn. Fruiting bodies are engraftment, eccentric, or layered together. It is effective for the prevention and treatment of natural hepatitis, chronic active hepatitis, chronic bronchitis, liver cancer, gastrointestinal cancer, breast cancer and lung cancer.
  • Korean Patent Publication No. 2008-20749 discloses ginseng and its extract fermented with Cordyceps sinensis and its use
  • Korean Patent Publication No. 2004-108476 In the manufacturing method of functional bio-converted ginseng using edible and medicinal mushroom culture, Korean Patent Publication No. 2006-62083 is known how to convert ginseng saponin composition.
  • the present inventors have tested the anticancer activity of fermented ginseng using endless mushroom spawn, chaga, chaga, ganoderma lucidum, fingerling mushrooms, chaga, ganoderma lucidum, fingerling mushrooms Fermenting the spawn together with ginseng confirmed that the anticancer effect of the mushroom fermented ginseng was markedly increased by the biological conversion ability of the mushroom spawn, thus completing the present invention.
  • the problem to be solved by the present invention is fermentation of ginseng and mushroom spawn can easily ingest the active ingredient of ginseng irrespective of the constitution of human, mushroom fermentation can maximize the anti-cancer effect of ginseng and mushroom spawn To provide ginseng powder.
  • an object of the present invention is to provide a method for producing a health food for cancer containing the mushroom fermented ginseng powder.
  • Anti-cancer health food according to the present invention for solving the above problems includes fermented ginseng powder fermented with mushroom spawn.
  • Method for producing a health food for cancer for solving the other problems is the step of drying ginseng; Sterilizing the ginseng; Inoculating the ginseng and mushroom spawn; Fermenting the mushroom spawn and ginseng to make a fermented product; Pulverizing the fermented product.
  • the mushroom spawn may be at least one selected from the group consisting of chaga ( Inonotus obliquus ), Ganoderma lucidum ( Ganoderma lucidum ), fingerlings ( Coriorus versicolor ) spawn.
  • the ginseng may be at least one selected from the group consisting of ginseng, white ginseng, straight ginseng, half-goak ginseng, grain ginseng, blood white ginseng, red ginseng, cheonsam, jisam, sheep ginseng, jeolsam, taegeuk ginseng, misam ginseng, and ginseng ginseng.
  • the step of drying the ginseng uses a conventional ginseng drying method, in the present invention is dried for 10 to 36 hours at 15 ⁇ 30 °C to dry the moisture content of 60 to 80%.
  • Sterilizing the ginseng using a conventional ginseng sterilization method uses an autoclave.
  • Inoculating the ginseng and mushroom spawn is inoculated in an amount of 1 to 30% of the ginseng used weight, preferably inoculated in an amount of 5 to 20%.
  • Fermenting the mushroom spawn and ginseng to make the fermentation is a solid fermentation at 20 ⁇ 30 °C for 30 to 60 days.
  • the step of pulverizing the pulverized product is dried by hot air at 40 ⁇ 60 °C after the fermentation, and then pulverized by a conventional method of grinding ginseng to prepare a mushroom fermented ginseng powder.
  • the extract When the mushroom fermented ginseng extract of the present invention is used as a food, the extract may be added as it is or used with other foods or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method.
  • the mixed amount of the active ingredient may be appropriately determined according to its purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment), and may be used according to the effective dose of the pharmaceutical composition, but for health and hygiene purposes or to control health.
  • the active ingredient In the case of long-term intake of the target may be below the above range, the active ingredient may be used in an amount above the above range because there is no problem in terms of safety.
  • the present invention provides a health functional food for preventing or improving cancer comprising the extract of the present invention and a food supplement acceptable food supplement.
  • the health functional food of the present invention includes the form of tablets, capsules, pills or liquids, and the food to which the compound of the present invention can be added, for example, various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, etc. And health functional foods. Specifically, it provides a health functional food for cancer prevention or improvement comprising an extract containing the extract of the present invention as an active ingredient and a food supplement acceptable food supplement additive.
  • the anti-cancer health food containing the mushroom fermented ginseng powder according to the present invention increases the absorption power in vivo through metabolic process by fermenting mushroom spawn in ginseng and making it in the form of ginseng saponin which can be absorbed in vivo. Regardless of the presence of enteric microorganisms, anyone can standardize the effects of ginseng saponin.
  • Rg1 which inhibits platelet aggregation
  • Re which has anticancer effect
  • Rb2 which activates macrophages
  • Rd which expands vasodilation
  • Ganoderma lucidum fermented ginseng increases Rd, which causes vasodilation
  • fingering Fermented ginseng mushrooms have increased anti-cancer and pharmacological effects than conventional ginseng or sterile ginseng by increasing Rc, which promotes protein and lipid synthesis, and analgesic Rc, and Rd, which stimulates the secretion of adrenal stimulus hormone.
  • fermented ginseng increases the main ingredient of ginseng and saponin, the main ingredient of anti-cancer activity of ginseng, so it shows higher effect than the anti-cancer effect of mushrooms and ginseng.
  • Fermented ginseng prepared according to the manufacturing method of the present invention can be applied to fermented foods or functional foods, etc. to increase shelf life and improve the medical functionality of the fermented foods or functional foods.
  • FIG. 1 is a flow chart sequentially showing the manufacturing process of mushroom fermented ginseng powder according to the present invention.
  • Figure 2 is a chromatograph analyzed by HPLC the content of saponin standard compared to the saponin content of the fermented ginseng powder according to the present invention.
  • Figure 4 is a chromatograph analyzed by HPLC the saponin content of chaga mushroom fermented ginseng powder according to the present invention.
  • Chaga mushroom powder was prepared in the same manner as in Example 1, using chaga mushroom.
  • Cloudy mushroom powder was prepared in the same manner as in Example 1 except for using fingering mushrooms.
  • Example 1 After cooling the sterile ginseng sterilized in the process in Example 1 10% inoculated chaga mushroom spawn, solid fermentation at 28 °C 50 days, harvested and hot-air dried at 50 °C, and then pulverized to prepare a chaga mushroom fermented ginseng powder.
  • Taxol was purchased from SIGMA (PO115) as a positive control.
  • the rats used in the experiment were Japanese black rats (BDF 1 male) purchased from Central Experimental Animal Co., Ltd., and their weight was 20 ⁇ 2g, the breeding temperature was 22 ⁇ 2 °C, and the solid feed (Samyang Feed (Co.) and water)
  • the first solvent (EP) was used as the extraction solvent, and the sample was a sterile saline solution prepared by Korea Pharmaceutical Co., Ltd.
  • RPMI 1640 medium used for cancer cell culture was used as a medium provided by WelGENE Inc.
  • GIBCO Co., Ltd. was used as a test tube for cell culture, a flask for culture, and a filter for obtaining cancer cells, Falcon Co., Ltd.
  • the devices used for cancer transplantation were sterilized at 120 ° C. for 30 minutes. The volume of the cancer was measured using a digital caliper (Digital Caliper).
  • the lung cancer (Lewis Lung Carcinoma: LLC) cells used in the experiment were used by the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, and the lung cancer (Lewis Lung Carcinoma: LLC) cells were cultured in an incubator at 37 ° C with RPMI 1640 medium containing 10% FBS. Trypsin-EDTA was used to separate from the attachment surface. When cells were filled in a 200 ml culture flask, two animals were transplanted and grown in vivo, and then animal experiments were performed using them.
  • Table 1 shows the results of calculating the inhibition rate by stopping the sample administration and measuring the volume of the cancer and the weight of the cancer 15 days after transplantation of lung cancer (LLC) cells into the mouse.
  • the ginseng powder (Example 1) showed a cancer volume inhibition rate of 17.7% and a cancer weight inhibition rate of 16.4%, and the cancer volume inhibition rate of Chaga mushroom powder (Example 2) was 15.5%, and the cancer weight inhibition rate was 14.1%, the cancer volume inhibition rate of Ganoderma lucidum powder (Example 3) was 10.4%, the cancer weight inhibition rate was 9.8%, the cancer volume inhibition rate of the fingering mushroom powder (Example 4) was 8.7%, cancer The weight gain ratio was 8.1%, showing a low anticancer effect.
  • Chaga mushroom fermented ginseng powder fermented with mushroom spawn in ginseng showed the highest anticancer effect of 33.6% of cancer volume inhibition rate and 33.0% of cancer weight inhibition
  • Ganoderma lucidum fermented ginseng powder Example 6
  • the fingertips of fermented ginseng powder Example 7) showed good anticancer effects with inhibition rates of 30.6% and 24.8%, and cancer weight inhibition rates of 29.8% and 24.1%.
  • Taxol showed anticancer effect of 34.0% for cancer volume inhibition and 36.3% for cancer weight inhibition.
  • chaga and ginseng fermented ginseng, Ganoderma lucidum and Ginseng fermented ginseng, which have fermented ginseng together with mushroom spawn, have better anticancer effects than conventional ginseng and mushrooms and show anticancer effects similar to Taxol. It has been confirmed that the effect is sufficient as a chemical cancer preventive agent or cancer improvement for ingestion to prevent cancer.
  • Saponin content of ginseng powder, chaga mushroom fermented ginseng powder, Ganoderma lucidum fermented ginseng powder, and fingering mushroom fermented ginseng powder according to the present invention were analyzed by HPLC.
  • HPLC analysis conditions were used as mobile phase, A pump was H 2 O and B pump was AcCN, and the time difference was used.
  • the oven temperature of the column was 30 °C and UV detection was 230nm. Is Discovery C18 (4.6 ⁇ 250 mm, 5 ⁇ m, Supelco Co.).
  • Example 5 As a result, the Chaga mushroom fermented ginseng powder of Example 5 according to the present invention (see Fig. 4) was increased Rg1, Re, Rb2, Rd than the ginseng powder of Example 1 (see FIG. 2), and the ganoderma lucidum of Example 6
  • the mushroom fermented ginseng powder (see FIG. 5) increased Rd
  • the fingering mushroom fermented ginseng powder of Example 7 (see FIG. 6) was found to increase Rc and Rd.

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Abstract

본 발명은, 버섯 발효 인삼 분말을 함유하는 항암용 건강식품에 관한 것으로, 인삼을 건조하는 단계; 상기 인삼을 멸균하는 단계; 상기 인삼에 버섯종균을 접종 및 발효시켜 발효물을 만드는 단계; 상기 발효물을 분쇄하는 단계를 포함한다. 이로써, 발효인삼은 종래의 인삼과 버섯종균을 발효시킴으로써 암세포의 신생을 억제하고, 암세포의 자살을 유도하며, 전이를 억제하는 등의 항암작용과 혈당을 낮추는 작용에 더 효과적이다.

Description

[규칙 제26조에 의한 보정 15.04.2009]　버섯 발효인삼 분말을 함유하는 항암용 건강식품
본 발명은 버섯 발효인삼 분말을 함유하는 항암용 건강식품에 관한 것이다.
인류 건강을 위협하는 최악의 질병인 악성종양, 즉 암은 심혈관 질환 다음으로 서구사회에서 가장 일반적인 사망원인이다. 현대사회에서 인구의 노령화 흡연인구의 증가 및 대기오염으로 인한 폐암이 현저히 증가하고 있으며 식생활의 서구화에 따른 고지방식의 섭취, 환경오염물질의 증가 음주량의 증가 등으로 대장암, 유방암, 전립선암 등이 지속적으로 증가 추세에 있다.
따라서 암의 조기예방 및 치료를 가능하게 하여 인간 건강의 증진, 건강한 삶의 질 향상 및 인류보건 증진에 기여할 수 있는 항암 물질의 창출이 절실히 요구되고 있다. 암치료를 위해 개발된 약제들은 전신치료용 주사나 경구투여에 따른 혈류를 따라 전신에 작용하는 비특이성으로 암세포에 대한 특이성이 낮다. 따라서 약제 투여에 따른 전신적인 부작용이 많으며 수술이나 방사선 치료에 비해 부작용이 많이 나타나는 단점이 있다. 기존의 항암 약물들을 이용하는 암치료 기간은 1주일에 3-5 일씩 3-4 주 간격으로 6개월에서 1년 정도 투여함에 따라 다양한 항암제 부작용을 야기시켜 치료를 중단하는 사례가 많이 발생한다.
암세포를 직접 공격하여 약효를 발휘하는 기존의 화학적 치료법은 부작용이 매우 강할 뿐만 아니라 비특이성의 단점에도 불구하고 임상적으로는 제한적으로 사용할 수밖에 없는 실정이다. 이에 많은 발명자들이 항암 활성을 가지는 천연 소재를 찾아오고 있으며 그 중에서도 인삼을 포함한 버섯류의 항암 활성에 대한 많은 연구결과들이 보고되고 있다.
상기 천연물중에서 인삼은 예로부터 한국과 중국에서 전통적인 약물로 사용되어온 파낙스(Panax)속에 속하는 다년생 식물로, 파낙스(Panax)속은 한의학에서 의학적으로 가장 중요한 속(genus)들 중의 하나이다. 인삼은 각종 질병의 예방과 치료에 탁월한 효과를 나타낼 뿐만 아니라 전혀 병이 없는 사람들에게도 힘과 활력을 주는 강장제로서 광범위한 약효를 나타내며 장기간 사용하여도 전혀 부작용이 없다고 알려져 있다.
신농본초경에는 인삼은 오장 즉 간장, 심장, 폐장, 신장, 비장의 양기를 돋구어 주는 주약으로 사용하고, 위장의 기를 열어주며, 곽란, 구토, 갈증을 멎게 하고 혈액을 잘 통하게 하며 오래 복용하면 몸이 가벼워지고 장수한다고 기록하고 있다. 또한, 인삼의 주요 성분인 사포닌은 암, 당뇨병, 남성기능 향상, 고혈압, 동맥경화, 치매, 골다공증 예방, 노화방지, 두뇌활동 촉진, 갱년기 장애, 여성 피부미용등에 좋은 것으로 알려져 있다. 특히, 항암제보다 더 높은 항암작용을 하고 강력한 혈당강하작용을 하며 합병증을 억제시키는 효능이 있는 것으로 밝혀졌다.
인삼의 주요성분인 사포닌의 화학구조는 크게 당부분(glycone)과 비당부분(aglycone)으로 구성된 배당체이다. 이러한 사포닌이 체내에서 흡수될 때는 사람의 장내에 있는 특유 미생물에 의해 분해되어 체내로 흡수되어 진다. 하지만 인삼사포닌을 분해하는 장내 미생물은 사람의 체질에 따라 그리고 식습관에 따라 그 존재의 유무와 보유하고 있는 정도가 다르며, 그로 인해 인삼의 복용 후 저마다 효능의 차이가 나타날 수 있다.
한편 차가버섯(Inonotus obliquus)은 시베리아와 북아메리카, 북유럽 등 북위 45도 이상 지방의 자작나무에 기생하는 버섯으로 암 등 성인병 치료에 효능이 뛰어나다. 바이러스에 의해 착생하여 수액을 먹고 자라는데, 대개 15∼20년 동안 성장하며, 오리나무와 버드나무·단풍나무 등에서도 발견되지만 이들은 효능이 없다. 러시아에서는 16세기경부터 불치병을 치료하는 비약으로 전해내려 왔으며, 1951년 소련 과학아카데미 코마로프과학연구소에서 본격적으로 연구되기 시작하여, 현재 러시아에서는 공식적인 암치료 약재로 인정받고 있다.
영지버섯(Ganoderma lucidum)은 불로초라고도 한다. 여름에 활엽수 뿌리에서 발생하여 땅 위에도 돋는다. 갓과 자루 표면에 옻칠을 한 것과 같은 광택이 있는 1년생 버섯이다. 한방에서는 강장·진해·소종(消腫) 등의 효능이 있어 신경쇠약·심장병·고혈압·각종 암종에 사용한다. 이 버섯은 갓자루가 단단한 각피로 싸여 있고 니스를 칠한 것 같은 광택이 있어 일본에서는 만년버섯, 중국에서는 영지라고 하여 한약재료로 귀하게 사용하고 장식용으로도 이용되며, 세계적으로 널리 분포한다.
운지버섯(Coriolus versicolor)은 마치 구름처럼 뭉쳐서 난다고 하여 한자로 구름운, 버섯지 즉 운지(雲芝)라고 부른다. 또는‘구름버섯’이라고 부른다. 봄부터 가을에 걸쳐 활엽수의 썩은 줄기나 가지 위에서 군생한다. 자실체는 착생이거나 반착생 또는 겹으로 뭉쳐난다. 천연성 간염, 만성활동성 간염, 만성 기관지염, 간암의 예방 및 치료, 소화기계 암, 유방암 폐암에 효과가 있고, 항암 성분이 최초로 발견된 약용버섯이며, 전세계에 분포한다.
현재까지는 인삼과 버섯종균을 이용한 발효인삼에 대한 연구가 이루어지고 있으며, 특히 대한민국 특허공개번호 제2008-20749호에는 동충하초로 발효된 인삼과 그 추출물 및 그 용도, 대한민국 특허공개번호 제2004-108476호에는 식용 및 약용버섯 배양을 이용한 기능성 생변환 인삼의 제조방법, 대한민국 특허공개번호 제2006-62083호에는 인삼 사포닌 조성의 전환방법 등이 공지되어 있다.
그러나, 상기한 바와 같이 상황버섯과 동충하초의 종균을 이용한 발효인삼의 제조방법이 공지되어 있으나 이와 비슷한 효능이 있는 차가버섯, 영지버섯, 운지버섯의 종균을 이용한 발효인삼에 대한 연구와 개발은 이루어져 있지 않는 실정이다.
본 발명자들은 끊임없는 버섯 종균을 이용한 발효인삼에 대한 항암활성 효과를 실험한 결과, 인삼, 차가버섯, 영지버섯, 운지버섯이 가지는 항암효과와 면역증강 효과를 활용하여 차가버섯, 영지버섯, 운지버섯 종균을 인삼과 함께 발효시키어 버섯종균이 지니고 있는 생물학적 변환 능력에 의해 버섯 발효인삼이 가지고 있는 항암효과가 현저히 증가됨을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 인삼과 버섯종균을 발효시켜 인삼의 유효성분을 사람의 체질과 상관없이 용이하게 섭취할 수 있고, 인삼과 버섯종균이 지니고 있는 항암효과를 극대화시킬 수 있는 버섯 발효인삼 분말을 제공하는데 있다.
나아가, 본 발명의 과제는 상기 버섯 발효인삼 분말을 함유하는 항암용 건강식품의 제조방법을 제공하는데 있다.
상기 과제를 해결하기 위한 본 발명에 따른 항암용 건강식품은 버섯종균과 함께 발효시킨 발효인삼 분말을 포함한다.
상기 다른 과제를 해결하기 위한 본 발명에 따른 항암용 건강식품의 제조방법은 인삼을 건조하는 단계; 상기 인삼을 멸균하는 단계; 상기 인삼과 버섯종균을 접종하는 단계; 상기 버섯종균과 인삼을 발효시켜 발효물을 만드는 단계; 상기 발효물을 분쇄하는 단계를 포함한다.
상기 버섯종균은 차가버섯(Inonotus obliquus), 영지버섯(Ganoderma lucidum), 운지버섯(Coriorus versicolor) 종균을 포함하는 그룹에서 선택되는 적어도 하나일 수 있다.
상기 인삼은 수삼, 백삼, 직삼, 반곡삼, 곡삼, 피대백삼, 홍삼, 천삼, 지삼, 양삼, 절삼, 태극삼, 미삼, 수미삼을 포함하는 그룹에서 선택되는 적어도 하나일 수 있다.
상기 인삼을 건조하는 단계는 통상적인 인삼 건조하는 방법을 사용하며, 본 발명에서는 15~30℃에서 10 내지 36시간 건조시켜 수분 함량이 60~80% 되게 건조한다.
상기 인삼을 멸균하는 단계는 통상적인 인삼 멸균 방법을 사용하며, 본 발명에서는 고압멸균기를 사용한다.
상기 인삼과 버섯종균을 접종하는 단계에서 버섯종균 사용량은 인삼 사용 중량의 1~30%의 양으로 접종하며, 바람직하게는 5~20%의 양으로 접종한다.
상기 버섯종균과 인삼을 발효시켜 발효물을 만드는 단계는 20~30℃에서 30~60일간 고체발효한다.
상기 분쇄물을 분쇄하는 단계는 상기 발효 후 40~60℃에서 열풍 건조시킨 후, 통상적인 인삼의 분쇄방법으로 분쇄하여 버섯 발효인삼 분말을 제조한다.
본 발명의 버섯 발효 인삼 추출물을 식품으로 사용할 경우, 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있고, 상기 약학적 조성물의 유효용량에 준해서 사용할 수 있으나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 추출물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 암 예방 또는 개선용을 위한 건강 기능식품을 제공한다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 화합물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다. 상세하게는, 본 발명의 추출물을 유효성분으로 함유하는 추출물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 암 예방 또는 개선용 건강 기능식품을 제공한다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 버섯 발효인삼 분말을 함유하는 항암용 건강식품은, 인삼에 버섯종균을 발효시켜 생체내에 흡수가 가능한 인삼 사포닌의 형태로 미리 만들어줌으로써 대사과정을 통해 생체내의 흡수력을 높이며, 사포닌 분해능을 갖는 장내미생물의 존재 유무에 관계없이 누구나 인삼 사포닌의 효능이 발휘될 수 있도록 표준화를 할 수 있다.
특히 차가버섯, 영지버섯, 운지버섯과 인삼의 발효를 통해 버섯균주의 작용에의해 인삼이나 멸균인삼보다 다양한 종류의 진세노사이드 생성이 확인되었으며 특히 인삼성분 함량이 증가됨을 확인하였는데, 차가버섯 발효인삼은 혈소판 응집 억제 작용을 하는 Rg1, 항암효과가 있는 Re, 대식 세포 화성화 작용을 하는 Rb2, 혈관 확장 작용을 하는 Rd를 증가시키고, 영지버섯 발효인삼은 혈관 확장 작용을 하는 Rd를 증가시키고, 운지버섯 발효인삼은 단백질 및 지질합성 촉진, 진통 작용을 하는 Rc와 부신피직 자극호르몬 분비 촉진 작용을 하는 Rd를 증가시켜 종래의 인삼이나 멸균인삼보다 좋은 항암효과 및 약리작용을 하는 효과를 갖게 되었다.
따라서 발효인삼은 인삼의 주요 성분과 인삼의 항암활성 주요성분인 사포닌이 증가되어 기존의 버섯과 인삼의 항암효과보다 더높은 효과를 나타내며 부작용이 없어 누구나 섭취할 수 있다.
본 발명의 제조방법에 따라 제조된 발효인삼은 발효식품이나 기능성 식품 등에 적용하여 저장성을 높이고 발효식품이나 기능성 식품의 의학적 기능성을 향상시킬 수 있다.
도 1 은 본 발명에 따른 버섯 발효인삼 분말의 제조공정을 순차적으로 나타내는 순서도이다.
도 2 는 본 발명에 따른 발효인삼 분말의 사포닌 함량에 비교가 되는 사포닌 표준물질의 함량을 HPLC로 분석한 크로마토그래프이다.
도 3 은 본 발명에 따른 인삼 분말의 사포닌 함량을 HPLC로 분석한 크로마토그래프이다.
도 4 는 본 발명에 따른 차가버섯 발효인삼 분말의 사포닌 함량을 HPLC로 분석한 크로마토그래프이다.
도 5 는 본 발명에 따른 영지버섯 발효인삼 분말의 사포닌 함량을 HPLC로 분석한 크로마토그래프이다.
도 6 은 본 발명에 따른 운지버섯 발효인삼 분말의 사포닌 함량을 HPLC로 분 석한 크로마토그래프이다.
이하, 본 발명의 바람직한 실시 예를 설명하기로 한다. 그러나 본 발명은 여기서 설명되어지는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다.
<실시예 1> 인삼 분말
수삼을 깨끗한 물로 세척한 후, 25℃에서 24시간 건조시켜 수분함량이 70%가 되도록 조절한 후, 소독된 칼이나 가위를 이용하여 수삼을 1cm 크기로 절단하고, 비닐팩에 200g씩 담아 실러(sealer)로 밀봉한 후, 멸균기 121℃, 1.2kgf/cm2 조건에서 10분간 멸균한 후 멸균기에서 비닐팩을 꺼내어 방냉한 후 50℃에서 열풍건조시킨 후, 분쇄하여 인삼분말을 제조하였다.
<실시예 2> 차가버섯 분말
실시예 1과 동일한 방법으로 하되, 차가버섯을 이용하여 차가버섯 분말을 제조하였다.
<실시예 3> 영지버섯 분말
실시예 1과 동일한 방법으로 하되, 영지버섯을 이용하여 영지버섯 분말을 제조하였다.
<실시예 4> 운지버섯 분말
실시예 1과 동일한 방법으로 하되 운지버섯을 이용하여 운지버섯 분말을 제조하였다.
<실시예 5> 차가버섯 발효인삼 분말
실시예 1에서 과정중에서 멸균된 인삼 방냉 후 차가버섯종균을 10% 접종하고, 28℃에서 50일간 고체발효시키고, 수확하여 50℃에서 열풍건조시킨 후, 분쇄하여 차가버섯 발효인삼 분말을 제조하였다.
<실시예 6> 영지버섯 발효인삼 분말
실시예 5와 동일한 방법으로 하되, 영지버섯종균을 접종하여 영지버섯 발효인삼 분말을 제조하였다.
<실시예 7> 운지버섯 발효인삼 분말
실시예 5와 동일한 방법으로 하되, 운지버섯종균을 접종하여 운지버섯 발효인삼 분말을 제조하였다.
<비교예 1> 탁솔(Taxol)
탁솔(Taxol)은 양성대조군으로서 SIGMA(PO115)에서 구입하여 사용하였다.
<실험예 1> 제조된 인삼, 버섯, 발효인삼분말의 항암효과 테스트
상기 실시예 1~7에서 제조된 인삼분말, 차가버섯 분말, 영지버섯 분말, 운지버섯 분말, 차가버섯 발효인삼 분말, 영지버섯 발효인삼 분말, 운지버섯 발효인삼 분말과 비교예 1의 탁솔(Taxol)에 대한 항암효과를 검증하기 위해 동물실험을 실시하였다.
실험에 사용한 쥐는 중앙실험동물(주)에서 구입한 일본산 검은 쥐(BDF1 male)로서 체중은 20±2g이며, 사육온도는 22±2℃ 였고 고형사료(삼양사료(Co.)와 물을 충분히 공급하였다. 추출용 용매는 1급 시약(E.P.)을 사용하였으며, 시료는 대한약품주식회사에서 제조한 멸균 생리식염수를 사용하였다. 암세포배양에 사용한 RPMI 1640배지는 WelGENE Inc.에서 제공한 배지를 사용하였고, Trypsin-EDTA는 GIBCO사 것을 사용하였다. 세포배양에 필요한 시험관과 배양용 플라스크 그리고 암세포를 얻기 위한 필터는 Falcon사 것을 사용하였다. 암 이식에 사용한 기구들은 120℃에서 30분 소독한 기구들을 사용하였고, 암의 부피는 디지털 캘리퍼스(Digital Caliper)를 사용하여 그 부피를 측정하였다.
실험에 사용한 폐암(Lewis Lung Carcinoma:LLC)세포는 한국생명공학연구원에서 분양받아 사용하였으며, 폐암(Lewis Lung Carcinoma:LLC)세포는 10% FBS를 넣은 RPMI 1640배지로 37℃의 배양기에서 배양하였고, 부착면으로부터 분리할 때는 Trypsin-EDTA를 사용하였다. 200ml의 배양용 플라스크에 세포가 차면 2마리 동물에 이식하여 in vivo에서 세포를 키운 후 그것을 사용하여 동물실험을 진행하였다.
항암동물실험은 약 15×15×15mm3 크기로 자란 종양을 수술하여 Falcon사의 필터를 이용하여 암세포를 다른 세포와 분리하였으며, 여러 번 세척하여 얻은 암세포를 2×105cell/ml의 농도로 만들어 실험동물의 겨드랑이에 0.1ml씩 주사하여 암을 유발하였다. 암 이식 후 15일간 인삼분말, 차가버섯 분말, 영지버섯 분말, 운지버섯 분말, 차가버섯 발효인삼 분말, 영지버섯 발효인삼 분말, 운지버섯 발효인삼 분말을 각각 100mg/kg의 용량으로 일본산 검은 쥐에게 경구투여하고, 양성대조군으로 탁솔(시그마에서 구입) 25㎎/kg을 14일간 매일 1회 복강주사 하였다. 암 이식 후 15일째 발효인삼 분말의 투여를 중지하였다.
<시험예 1> 제조된 버섯 발효인삼 분말의 항암효과 비교평가
본 발명에 의해 제조된 실시예1~7과 비교예 1의 항암효과에 관한 비교평가를 항암동물 실험을 통해 평가하였으며, 암 이식 후 15일째 발효인삼 분말과 탁솔의 투여를 중지한 후, 디지털 캘리퍼스(Digital Caliper)를 사용하여 결과를 측정하였다. 암의 부피와 암부피억제율의 계산은 암의 부피(Tumor Volume, TV)=Length(mm)×Width2/2. Inhibition Ratio of Tumor Volume,IRTV)=(TV of control - TV of test)×100/ TV of control의 공식으로 계산하였다. 암의 부피를 측정한 후 수술하여 암 덩어리를 얻어 그 중량을 측정하였고, 억제율은 암무게억제율(Inhibition Ratio of Tumor Weight,IRTW)=(TW of control - TW of test)×100/ TW of control의 공식으로 계산하였다.
모든 데이터는 mean±S.D.로 나타냈으며, 분석은 Student's t-test를 실시하였고, p values는 0.05 이하인 경우 유의성이 있다고 하였으며, 제조된 버섯발효인삼 분말의 항암효과 비교평가 실험결과는 아래 표1 에 나타내었다.
표 1
구분 용량 (mg/kg) 종양 크기 (mm3) 암부피억제율(%) 종양 무게 (g) 암무게억제율(%)
대조군 0 1885±235 0 1.67±0.3 0
인삼 분말 100 1551±126 17.7 1.39±0.3 16.4
차가버섯 분말 100 1592±125 15.5 1.43±0.2 14.1
영지버섯 분말 100 1688±101 10.4 1.50±0.1 9.8
운지버섯 분말 100 1721±135 8.7 1.53±0.4 8.1
차가버섯 발효 인삼 분말 100 1251±133 33.6 1.12±121 33.0
영지버섯 발효 인삼 분말 100 1308±98 30.6 1.16±137 29.8
운지버섯 발효 인삼 분말 100 1417±145 24.8 1.27±111 24.1
탁솔 (양성대조군) 25 1206±126 34.0 1.06±103 36.3
상기 표1 은 마우스에게 폐암(LLC)세포를 이식 후 15일째 샘플투여를 중지하고 암의 부피 및 암의 무게를 측정하여 억제율을 계산한 결과를 나타낸다. 발효과정을 거치지 않은 인삼분말(실시예1)의 암부피억제율은 17.7%, 암무게억제율은 16.4%로 나타났고, 차가버섯분말(실시예2)의 암부피억제율은 15.5%, 암무게억제율은 14.1%로 나타났으며, 영지버섯분말(실시예3)의 암부피억제율은 10.4%, 암무게억제율은 9.8%로 나타났고, 운지버섯분말(실시예4)의 암부피억제율은 8.7%, 암무게억게율은 8.1%로 낮은 항암효과를 보였다. 그러나 인삼에 버섯종균을 발효시킨 차가버섯 발효인삼분말(실시예5)의 암부피억제율은 33.6%, 암무게억제율은 33.0%로 가장 높은 항암효과를 보였으며, 영지버섯 발효인삼 분말(실시예6)과 운지버섯 발효인삼분말(실시예7)의 암부피억제율은 30.6%와 24.8%, 암무게억제율은 29.8%와 24.1%의 억제율로 좋은 항암효과를 보였다. 양성대조군으로 탁솔은 암부피억제율은 34.0%, 암무게억제율은 36.3%의 항암효과를 보였다.
따라서, 버섯종균과 함께 인삼을 발효시킨 차가버섯 발효인삼, 영지버섯 발효인삼, 운지버섯 발효인삼은 종래의 인삼과 버섯보다 항암효과가 우수하며 탁솔(Taxol)과 비슷한 항암효과를 보여 우리가 평소에 섭취하여 암을 예방하는 화학적 암 예방제 또는 암 개선용으로서 그 효과가 충분하다는 것으로 확인되었다.
<실험예 2> HPLC를 이용한 발효인삼의 사포닌 함량 분석
본 발명에 따른 인삼분말, 차가버섯 발효인삼 분말, 영지버섯 발효인삼 분말, 운지버섯 발효인삼 분말의 사포닌 함량을 HPLC로 분석하여 비교하였다.
HPLC분석 조건으로는 이동상으로 A pump는 H2O, B pump는 AcCN을 사용하였고, 시간대 별로 비율차이를 두어 실시하였으며, 칼람의 오븐 온도는 30℃, UV 검파는 230nm였고, 실험에 사용된 칼람은 Discovery C18 (4.6×250mm, 5μm, Supelco Co.)이다.
실험 결과, 실시예 1의 인삼분말(도 2 참조)보다 본 발명에 따른 실시예 5의 차가버섯 발효인삼 분말(도 4 참조)은 Rg1, Re, Rb2, Rd가 증가되었고, 실시예 6의 영지버섯 발효인삼 분말(도 5 참조)은 Rd가 증가되었고, 실시예 7의 운지버섯 발효인삼 분말(도 6 참조)은 Rc와 Rd가 증가된 것으로 나타났다.
이로써, 버섯종균과 함께 인삼을 발효시킨 차가버섯 발효인삼 분말, 영지버섯 발효인삼 분말, 운지버섯 발효인삼 분말은 버섯종균과 함께 발효시키지 않은 인삼분말보다 사포닌 성분의 함량이 우수하다는 것으로 확인되었다.
<사용예 1: 항암기능성 정제의 제조>
실시예 5 내지 7의 버섯 발효인삼 분말 100g에 락토오스 70g, 감자전분 75g 및 콜로이드성 규산 10g을 넣어 혼합하였다. 상기 혼합물에 10% 젤라틴 용액을 첨가시킨 후 분쇄하여 14 메쉬로 여과하여 건조시킨 뒤 여기에 감자전분 65g, 활석 25g 및 스테아린산 마그네슘 2g을 첨가한 다음 얻은 혼합한 후 1정이 400mg이 되도록 타정하였다.
<사용예 2: 항암기능성 캡슐제제의 제조>
실시예 5 내지 7의 버섯 발효인삼 분말 60 중량%, 대추분말 15중량% 및 결정 셀룰로오스 25중량%를 70% 알코올을 이용하여 혼합한 후 60℃에서 30시간 동안 건조시킨 다음 분쇄하여 50 메쉬로 여과하여 캡슐에 충진시킴으로써 500mg/cap 단위로 제조하였다.
<사용예 3: 항암기능성 음료의 제조>
실시예 5 내지 7의 버섯 발효인삼 분말 0.48 ∼ 1.28 ㎎, 꿀 522 ㎎, 치옥토산아미드 5 ㎎, 니코틴산아미드 10 ㎎, 염산리보플라빈나트륨 3 ㎎, 염산피리독신 2 ㎎, 이노시톨 30 ㎎, 오르트산 50 ㎎ 및 물 200 ㎖의 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.

Claims (6)

  1. 버섯 발효인삼 분말의 제조에 있어서,
    인삼을 건조하는 단계(제 1공정);
    상기 인삼을 멸균하는 단계(제 2공정);
    상기 인삼에 차가버섯(Inonotus obliquus), 영지버섯(Ganoderma lucidum), 운지버섯(Coriorus versioclor)을 포함하는 그룹에서 선택되는 적어도 하나인 것을 특징으로 하는 종균을 접종 및 20~30℃에서 30~60일간 고체발효시켜 발효물을 만드는 단계(제 3공정);
    상기 발효물을 분쇄하는 단계(제 4공정);
    를 포함하는 것을 특징으로 하는 버섯 발효인삼 분말의 제조 방법.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 인삼은 수삼, 백삼, 직삼, 반곡삼, 곡삼, 피대백삼, 홍삼, 천삼, 지삼, 양삼, 절삼, 태극삼, 미삼, 수미삼을 포함하는 그룹에서 선택되는 적어도 하나인 것을 특징으로 하는 버섯 발효인삼 분말의 제조 방법.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 제 1공정의 인삼 건조는 수분 함량이 60~80%가 되게 하는 것을 특징으로 하는 버섯 발효인삼 분말의 제조 방법.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 제 3공정의 버섯종균 사용량은 인삼 사용중량의 5~20%인 것을 특징으로 하는 버섯 발효인삼 분말의 제조 방법.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 하나의 항의 방법으로 제조된 버섯 발효인삼 분말을 함유하는 것을 특징으로 하는 암 예방 또는 개선용 건강식품.
  6. 제 5 항에 있어서,
    상기 식품은 정제, 캡슐, 또는 음료의 형태임을 특징으로 하는 암 예방 또는 개선용 건강식품.
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