KR102366845B1 - 효모발효를 통한 진세노사이드 특이성분 함량이 증가된 흑삼 농축액의 제조방법 - Google Patents

효모발효를 통한 진세노사이드 특이성분 함량이 증가된 흑삼 농축액의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 흑삼 농축액을 희석한 흑삼 희석액에 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후 배양하는 단계; 및 상기 배양한 흑삼 발효액을 살균처리하고, 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 진세노사이드 함량이 증진된 흑삼 발효 농축액의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 진세노사이드 함량이 증진된 흑삼 발효 농축액에 관한 것이다.

Description

효모발효를 통한 진세노사이드 특이성분 함량이 증가된 흑삼 농축액의 제조방법{Method for producing black ginseng concentrate with enhanced specific ginsenoside content using yeast fermentation}
본 발명은 (1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 혼합한 혼합물에 물을 첨가하고 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하는 단계; (2) 수삼을 증숙한 후 건조하는 과정을 반복하여 흑삼을 제조하는 단계; (3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 첨가하고 추출하여 흑삼 추출액을 제조하는 단계; (4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 농축하여 흑삼 농축액을 제조하는 단계; (5) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 배양하여 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조하는 단계; (6) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 희석한 흑삼 희석액에 상기 (5)단계의 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후 배양하는 단계; 및 (7) 상기 (6)단계의 배양한 흑삼 발효액을 살균처리하고, 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 흑삼 발효 농축액의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 흑삼 발효 농축액에 관한 것이다.
전통적으로 흑삼(black ginseng)은 고려 인삼을 가을에 수확해 재래식 가마솥에 유황성분이 함유된 소나무 장작으로 아홉 차례 찌고(구증), 태양열 건조장에서 아홉 차례 건조(구포)해 50여 일에 걸쳐 완성된다. 흑삼에는 홍삼의 주성분인 진세노사이드 Rg3 성분이 구증구포 과정에서 증가하여 기능성이 우수한 것으로 알려져 있다. 그러나 수삼을 홍삼 및 흑삼으로 변화시키기 위한 과정 중 특히 수회에 걸친 고온에서의 증숙 또는 건조와 같은 열처리 단계에서 인체에 유해한 벤조피렌(benzopyrene)이 발생할 수 있다.
진세노사이드(ginsenoside)는 인삼에 있는 사포닌으로 최근 항암, 항산화, 콜레스테롤 저하효과가 밝혀지면서 생리활성물질로 각광받기 시작했다. 인삼 사포닌은 다른 식물에서 발견되는 사포닌과는 다른 특이한 화학구조를 가지고 있으며 약리효능도 특이하여 인삼(ginseng) 배당체(glycoside)란 의미로 '진세노사이드'라 불린다.
특히, 흑삼의 전통적인 제조공정은 열처리에 의한 방법인 구증구포에 의하여 흑삼을 제조하는 방법이 알려져 있으며, 구증구포의 과정 중 색상이 백색(수삼, 백삼)→ 적다갈색(홍삼)→흑다갈색(흑삼)으로 변하며 맛과 유용성도 변하게 된다.
전통적인 방법에 따라 제조된 흑삼의 효능은 인삼을 구증구포하는 과정에서 생삼의 독소들이 제거되고 인체에 유익한 생리활성 성분들이 생겨나서 백삼에 없는 항산화 작용 성분과 다양한 아미노산, 유리지방산 등이 포함되어 있고, 인삼보다 많은 30여 종류의 사포닌(Rg1, Rh2, Rg3 등) 성분을 함유하며, 인삼과는 다르게 중성화가 되어 흡수력이 매우 뛰어나고 열이 많은 사람도 복용하는데 아무런 문제가 발생하지 않는다.
또한, 흑삼은 구증구포(九蒸九曝) 과정에서 인삼조직 중 전분 입자가 졸(sol) 상태에서 겔(gel) 상태로 전환되기 때문에 수삼 및 홍삼보다 소화흡수가 잘 되며, 구증구포를 거치는 동안 화학적 성분 변화가 일어남에 따라 새로운 생리활성성분이 생성되어 인체에 유익한 성분이 증가하므로 유효성분 함량이 높으며, 숙취제거, 노화방지, 피로개선, 스트레스 저하효과, 혈액순환, 면역기능, 골다공증 예방, 빈혈치료, 남성 불임 치료효과, 고혈압 및 당뇨병 개선 등에 효능이 있는 성분이 홍삼보다 탁월하다.
한국등록특허 제1659974호에는 백국균 발효를 이용한 발효흑삼 추출물의 제조방법이 개시되어 있고, 한국공개특허 제2016-0112455호에는 진세노사이드 Rg3 강화 발효흑삼 농축액이 개시되어 있으나, 본 발명의 효모발효를 통한 진세노사이드 특이성분 함량이 증가된 흑삼 농축액의 제조방법과는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로서, 본 발명자들은 흑삼 농축액의 특정 진세노사이드 함량을 증진시키고 기호도가 우수한 고품질의 흑삼 농축액을 제조하기 위해, 흑삼 제조, 추출, 발효 등의 제조조건을 최적화하여 품질 및 기호도가 증진된 흑삼 발효 농축액의 제조방법을 제공하는 데 있다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 혼합한 혼합물에 물을 첨가하고 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하는 단계; (2) 수삼을 증숙한 후 건조하는 과정을 반복하여 흑삼을 제조하는 단계; (3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 첨가하고 추출하여 흑삼 추출액을 제조하는 단계; (4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 농축하여 흑삼 농축액을 제조하는 단계; (5) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 배양하여 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조하는 단계; (6) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 희석한 흑삼 희석액에 상기 (5)단계의 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후 배양하는 단계; 및 (7) 상기 (6)단계의 배양한 흑삼 발효액을 살균처리하고, 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 흑삼 발효 농축액의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 흑삼 발효 농축액을 제공한다.
본 발명의 흑삼 발효 농축액은 진세노사이드 특이성분인 Rg3, Rk1, Rg5뿐만 아니라, Rf, Rg2, Rb3, Rd, Rh2 함량 역시 가장 높은 증가율을 나타내어 건강 기능성 식품 또는 다양한 분야에서 활용이 가능하며, 쓴맛은 저감되고 부드러운 맛은 증진되어 섭취가 용이한 흑삼 발효 농축액을 제공할 수 있다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 혼합한 혼합물에 물을 첨가하고 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하는 단계;
(2) 수삼을 증숙한 후 건조하는 과정을 반복하여 흑삼을 제조하는 단계;
(3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 첨가하고 추출하여 흑삼 추출액을 제조하는 단계;
(4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 농축하여 흑삼 농축액을 제조하는 단계;
(5) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 배양하여 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조하는 단계;
(6) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 희석한 흑삼 희석액에 상기 (5)단계의 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후 배양하는 단계; 및
(7) 상기 (6)단계의 배양한 흑삼 발효액을 살균처리하고, 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 흑삼 발효 농축액의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 흑삼 발효 농축액의 제조방법에서, 상기 (1)단계의 추출액은 바람직하게는 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 4.5~5.5:2.7~3.3:1.8~2.2 중량비율로 혼합한 혼합물에 물을 8~12배(v/w) 첨가하고 70~80℃에서 2~4시간 동안 추출한 후 여과하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 5:3:2 중량비율로 혼합한 혼합물에 물을 10배(v/w) 첨가하고 75℃에서 3시간 동안 추출한 후 여과하여 제조할 수 있다. 본 발명자는 예비실험에서 상기 추출액을 사용하지 않거나, 상기 재료 일부만 사용한 추출액을 사용하여 흑삼 발효 농축액을 제조하는 것에 비해, 상기와 같은 재료 종류 및 배합비로 제조한 추출액을 사용하여 흑삼 발효 농축액을 제조하는 것이 특정 진세노사이드 함량을 더욱 증진시키면서 제조된 흑삼 발효 농축액의 기호도도 향상시킬 수 있었다.
또한, 본 발명의 흑삼 발효 농축액의 제조방법에서, 상기 (2)단계의 흑삼은 바람직하게는 수삼을 90~110℃에서 2~4시간 동안 증숙한 후 40~60℃에서 5~7시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 8~10회 반복하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 수삼을 100℃에서 3시간 동안 증숙한 후 50℃에서 6시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 9회 반복하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 흑삼 발효 농축액의 제조방법에서, 상기 (3)단계의 흑삼 추출액은 바람직하게는 흑삼을 분쇄한 후 추출액을 6~10배(v/w) 첨가하고 90~100℃에서 7~9시간 동안 추출하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 흑삼을 분쇄한 후 추출액을 8배(v/w) 첨가하고 95℃에서 8시간 동안 추출하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 흑삼 발효 농축액의 제조방법에서, 상기 (4)단계의 흑삼 농축액은 바람직하게는 흑삼 추출액을 여과한 후 55~65℃에서 농축하여 60~75 brix의 흑삼 농축액을 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 흑삼 추출액을 여과한 후 60℃에서 농축하여 65~70 brix의 흑삼 농축액을 제조할 수 있다.
상기 (2) 내지 (4)단계와 같은 조건으로 흑삼 농축액을 제조하는 것이 흑삼 특유의 진한 맛과 향을 지니면서 쓴맛은 저감되고, 유효성분 함량은 더욱 증진된 흑삼 농축액으로 제조할 수 있었다.
또한, 본 발명의 흑삼 발효 농축액의 제조방법에서, 상기 (5)단계의 사카로마이세스 세레비지애 배양액은 바람직하게는 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 30~35℃에서 20~28시간 동안 배양하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 30~35℃에서 24시간 동안 배양하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 흑삼 발효 농축액의 제조방법에서, 상기 (6)단계는 바람직하게는 흑삼 농축액을 8~12 brix로 희석한 흑삼 희석액에 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후, 30~35℃에서 66~78시간 동안 배양할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 흑삼 농축액을 10 brix로 희석한 흑삼 희석액에 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후, 30~35℃에서 72시간 동안 배양할 수 있다.
또한, 본 발명의 흑삼 발효 농축액의 제조방법에서, 상기 (7)단계는 바람직하게는 흑삼 발효액을 85~95℃에서 20~40분 동안 살균처리하고, 60~75 brix로 농축할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 흑삼 발효액을 90℃에서 30분 동안 살균처리하고, 65~70 brix로 농축할 수 있다.
상기 (5) 내지 (7)단계와 같은 조건으로 효모 발효하여 흑삼 발효 농축액을 제조하는 것이 부드러운 맛이 우수하고, 특정 진세노사이드 함량을 증진시킬 수 있었다.
본 발명의 흑삼 발효 농축액의 제조방법은, 보다 구체적으로는
(1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 4.5~5.5:2.7~3.3:1.8~2.2 중량비율로 혼합한 혼합물에 물을 8~12배(v/w) 첨가하고 70~80℃에서 2~4시간 동안 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하는 단계;
(2) 수삼을 90~110℃에서 2~4시간 동안 증숙한 후 40~60℃에서 5~7시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 8~10회 반복하여 흑삼을 제조하는 단계;
(3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 6~10배(v/w) 첨가하고 90~100℃에서 7~9시간 동안 추출하여 흑삼 추출액을 제조하는 단계;
(4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 농축하여 60~75 brix의 흑삼 농축액을 제조하는 단계;
(5) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 30~35℃에서 20~28시간 동안 배양하여 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조하는 단계;
(6) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 8~12 brix로 희석한 흑삼 희석액에 상기 (5)단계의 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후, 30~35℃에서 66~78시간 동안 배양하는 단계; 및
(7) 상기 (6)단계의 배양한 흑삼 발효액을 85~95℃에서 20~40분 동안 살균처리하고, 60~75 brix로 농축하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 5:3:2 중량비율로 혼합한 혼합물에 물을 10배(v/w) 첨가하고 75℃에서 3시간 동안 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하는 단계;
(2) 수삼을 100℃에서 3시간 동안 증숙한 후 50℃에서 6시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 9회 반복하여 흑삼을 제조하는 단계;
(3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 8배(v/w) 첨가하고 95℃에서 8시간 동안 추출하여 흑삼 추출액을 제조하는 단계;
(4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 농축하여 65~70 brix의 흑삼 농축액을 제조하는 단계;
(5) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 30~35℃에서 24시간 동안 배양하여 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조하는 단계;
(6) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 10 brix로 희석한 흑삼 희석액에 상기 (5)단계의 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후, 30~35℃에서 72시간 동안 배양하는 단계; 및
(7) 상기 (6)단계의 배양한 흑삼 발효액을 90℃에서 30분 동안 살균처리하고, 65~70 brix로 농축하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 흑삼 발효 농축액을 제공한다.
이하, 본 발명의 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1. 흑삼 발효 농축액
(1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 5:3:2 중량비율로 혼합한 혼합물에 혼합물 대비 정제수를 10배(v/w) 첨가하고 75℃에서 3시간 동안 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하였다.
(2) 중미삼을 포함하는 동체삼과 미삼을 분리하여 수삼을 세척하고, 세척한 동체삼을 100℃에서 3시간 동안 증숙하였다. 상기 증숙한 동체삼을 열풍건조기로 50℃에서 6시간 동안 건조하였다. 상기 증숙 및 건조하는 과정을 총 9회 반복하여 흑삼을 제조하였다.
(3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 분쇄한 흑삼 대비 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 8배량(v/w) 첨가한 후 95℃에서 8시간 동안 추출하여 흑삼 추출액을 제조하였다.
(4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 60℃에서 농축하여 65~70 brix의 흑삼 농축액을 제조하였다.
(5) 배지(YM배지) 제조 시 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 30~35℃에서 24시간 동안 배양하여 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조하였다.
(6) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 10 brix로 희석한 흑삼 희석액에 상기 (5)단계의 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 10% 접종한 후, 30~35℃에서 150 rpm으로 교반하면서 72시간 동안 배양하였다.
(7) 상기 (6)단계의 배양한 흑삼 발효액을 90℃에서 30분 동안 살균처리하고, 65~70 brix가 될 때까지 감압농축하였다.
비교예 1. 흑삼 농축액
(1) 중미삼을 포함하는 동체삼과 미삼을 분리하여 수삼을 세척하고, 세척한 동체삼을 100℃에서 3시간 동안 증숙하였다. 상기 증숙한 동체삼을 열풍건조기로 50℃에서 6시간 동안 건조하였다. 상기 증숙 및 건조하는 과정을 총 9회 반복하여 흑삼을 제조하였다.
(2) 상기 (1)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 분쇄한 흑삼 대비 정제수를 8배량(v/w) 첨가한 후 95℃에서 8시간 동안 추출하여 흑삼 추출액을 제조하였다.
(3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 60℃에서 농축하여 65~70 brix의 흑삼 농축액을 제조하였다.
비교예 2. 흑삼 발효 농축액
상기 제조예 1의 방법으로 흑삼 발효 농축액을 제조하되, (5)단계에서 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조 시, 흑삼 농축액을 첨가하는 구성을 생략하고, 배지(YM배지)에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 30~35℃에서 24시간 동안 배양하여 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 이용하여, 흑삼 발효 농축액을 제조하였다.
비교예 3. 흑삼 농축액
(1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 5:3:2 중량비율로 혼합한 혼합물에 정제수를 10배(v/w) 첨가하고 75℃에서 3시간 동안 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하였다.
(2) 중미삼을 포함하는 동체삼과 미삼을 분리하여 수삼을 세척하고, 세척한 동체삼을 100℃에서 3시간 동안 증숙하였다. 상기 증숙한 동체삼을 열풍건조기로 50℃에서 6시간 동안 건조하였다. 상기 증숙 및 건조하는 과정을 총 9회 반복하여 흑삼을 제조하였다.
(3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 분쇄한 흑삼 대비 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 8배량(v/w) 첨가한 후 95℃에서 8시간 동안 추출하여 흑삼 추출액을 제조하였다.
(4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 60℃에서 농축하여 65~70 brix의 흑삼 농축액을 제조하였다.
비교예 4. 흑삼 발효 농축액
(1) 중미삼을 포함하는 동체삼과 미삼을 분리하여 수삼을 세척하고, 세척한 동체삼을 100℃에서 3시간 동안 증숙하였다. 상기 증숙한 동체삼을 열풍건조기로 50℃에서 6시간 동안 건조하였다. 상기 증숙 및 건조하는 과정을 총 9회 반복하여 흑삼을 제조하였다.
(2) 상기 (1)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 분쇄한 흑삼 대비 정제수를 8배량(v/w) 첨가한 후 95℃에서 8시간 동안 추출하여 흑삼 추출액을 제조하였다.
(3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼 추출액을 이용하여 제조예 1의 (4) 내지 (7)단계와 동일한 방법으로, 흑삼 발효 농축액을 제조하였다.
비교예 5. 흑삼 발효 농축액
(1) 메밀싹에 메밀싹 대비 정제수를 10배(v/w) 첨가하고 75℃에서 3시간 동안 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하였다.
(2) 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 이용하여, 제조예 1의 (2) 내지 (7)단계와 동일한 방법으로 흑삼 발효 농축액을 제조하였다.
비교예 6. 흑삼 발효 농축액
(1) 운지버섯에 운지버섯 대비 정제수를 10배(v/w) 첨가하고 75℃에서 3시간 동안 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하였다.
(2) 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 이용하여, 제조예 1의 (2) 내지 (7)단계와 동일한 방법으로 흑삼 발효 농축액을 제조하였다.
실시예 1. 진세노사이드 함량
진세노사이드의 함량 분석은 UVD(Ultra Visible Detector)가 장착된 HPLC(High Performance Liquid Chromatography)로 분석하였고, 분석조건은 하기 표 1과 같고, 함량 계산식은 하기 식과 같다.
진세노사이드 함량(㎎/g) = S ×(a×시료채취량(g)
S: 시험용액 중 개별 진세노사이드 농도(㎎/㎖)
a: 시험용액의 전량(㎖)
b: 희석배수
진세노사이드 분석조건
장비 HPLC Agilent 1260 series
검출기 DAD detector(203 nm)
컬럼 Prontosil 120-5-C18-ace-EPS
(4.6 mm×250mm, 5.0 ㎛)
컬럼온도 40℃
이동상 Acetonitrile:D.W. (gradient)
유속 1.0 ㎖/min
주입 용량 10 ㎕
진세노사이드 분석 결과는 표 2와 같다. 진세노사이드 Rg1과 Re는 발효 후 감소하였다. 반면, 나머지 진세노사이드 함량의 경우 발효 후 증가하는 경향을 나타내었고, 진세노사이드 Rg3, Rk1, Rg5의 합은 제조예 1의 흑삼 발효 농축액에서 더 높게 나타났다. 상기 진세노사이드 외에 진세노사이드 Rf, Rg2, Rb3, Rd, Rh2 등의 함량 역시 제조예 1에서 가장 높은 증가율을 나타내었다.
진세노사이드 함량 분석 결과(㎎/g)
진세노사이드 종류 비교예 1 비교예 2 제조예 1
함량(mg/g) 증가율(%) 함량(mg/g) 증가율(%)
Rg1 0.39 0.34 -12.82 0.32 -17.95
Re 0.58 0.50 -13.79 0.48 -17.24
Rf 1.04 1.36 30.77 1.45 39.42
Rb1 3.39 4.22 24.48 4.30 26.84
Rg2 1.43 2.00 39.86 2.12 48.25
Rc 1.92 2.43 26.56 2.47 28.65
Rb2 1.72 2.23 29.65 2.13 23.84
Rb3 0.32 0.34 6.25 0.37 15.63
Rd 1.32 1.70 28.79 1.80 36.36
F2 0.07 0.15 114.29 0.07 -
Rg3 4.23 5.58 31.91 6.09 43.97
Rk1 3.47 4.28 23.34 4.67 34.58
Rg5 4.01 4.85 20.95 5.34 33.17
Rh2 0.11 0.13 18.18 0.15 36.36
Rg3+Rk1+Rg5 11.72 14.71 25.51 16.09 37.29
Rg1+Rb1+Rg3 8.0 10.1 26.25 10.7 33.75
14종 합 24.0 30.1 25.42 31.7 32.08
실시예 2. 관능평가
제조예 1과 비교예 1 내지 4의 흑삼 발효 농축액의 기호도를 비교하기 위해 관능평가를 실시하였으며, 성인 45명을 대상으로 각각의 농축액을 섭취하도록 한 후 향, 맛 및 전반적인 기호도를 아주 나쁠 경우 1점, 아주 좋을 경우 5점으로 하여 평가하게 하였다.
관능평가
구분 전반적인 기호도
제조예 1 4.5 4.4 4.4
비교예 1 3.4 3.4 3.3
비교예 2 4.3 4.0 4.2
비교예 3 3.8 3.7 3.7
비교예 4 4.0 3.9 3.9
그 결과, 제조예 1과 비교예 2는 향에 대한 기호도에서는 큰 차이를 나타내지 않았으나, 제조예 1이 비교예 2에 비해 맛과 전반적인 기호도에서 더 높은 점수를 나타내었다. 또한, 비교예들 중에서는 비교예 1이 가장 낮은 점수를 나타내었다. 따라서, 제조예 1과 같이 흑삼 추출 시 추출액을 사용하여 추출한 후 효모 발효하여 흑삼 농축 발효액을 제조하는 것이 섭취가 용이하고 기호도가 우수한 것을 확인하였다.
실시예 3. 흑삼 발효 농축액의 관능평가
제조예 1의 방법으로 제조된 흑삼 발효 농축액과 비교예 5 및 6의 흑삼 발효 농축액을 가지고 실시예 2와 동일한 방법으로 관능평가를 실시하였다.
흑삼 발효 농축액의 관능평가
구분 전반적인 기호도
제조예 1 4.5 4.4 4.4
비교예 5 4.0 3.9 3.9
비교예 6 4.1 3.8 4.0
그 결과, 제조예 1의 흑삼 발효 농축액이 비교예 5 및 6의 흑삼 발효 농축액에 비해 향, 맛 및 전반적인 기호도에서 더 높은 점수를 나타내었다. 따라서, 추출액 제조 시 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 모두 사용하여 추출한 추출액을 이용하여 흑삼 발효 농축액을 제조하는 것이 기호도를 더욱 높일 수 있음을 확인하였다.

Claims (5)

  1. (1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 4.5~5.5:2.7~3.3:1.8~2.2 중량비율로 혼합한 혼합물에 물을 8~12배(v/w) 첨가하고 70~80℃에서 2~4시간 동안 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하는 단계;
    (2) 수삼을 증숙한 후 건조하는 과정을 반복하여 흑삼을 제조하는 단계;
    (3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 6~10배(v/w) 첨가하고 90~100℃에서 7~9시간 동안 추출하여 흑삼 추출액을 제조하는 단계;
    (4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 농축하여 흑삼 농축액을 제조하는 단계;
    (5) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 배양하여 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조하는 단계;
    (6) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 희석한 흑삼 희석액에 상기 (5)단계의 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후, 30~35℃에서 66~78시간 동안 배양하는 단계; 및
    (7) 상기 (6)단계의 배양한 흑삼 발효액을 살균처리하고, 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 흑삼 발효 농축액의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    (1) 메밀싹, 무화과 말랭이 및 운지버섯을 4.5~5.5:2.7~3.3:1.8~2.2 중량비율로 혼합한 혼합물에 물을 8~12배(v/w) 첨가하고 70~80℃에서 2~4시간 동안 추출한 후 여과하여 추출액을 제조하는 단계;
    (2) 수삼을 90~110℃에서 2~4시간 동안 증숙한 후 40~60℃에서 5~7시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 8~10회 반복하여 흑삼을 제조하는 단계;
    (3) 상기 (2)단계의 제조한 흑삼을 분쇄한 후, 상기 (1)단계의 제조한 추출액을 6~10배(v/w) 첨가하고 90~100℃에서 7~9시간 동안 추출하여 흑삼 추출액을 제조하는 단계;
    (4) 상기 (3)단계의 제조한 흑삼 추출액을 여과한 후 농축하여 60~75 brix의 흑삼 농축액을 제조하는 단계;
    (5) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 첨가한 희석배지에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)를 접종한 후 30~35℃에서 20~28시간 동안 배양하여 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 제조하는 단계;
    (6) 상기 (4)단계의 제조한 흑삼 농축액을 8~12 brix로 희석한 흑삼 희석액에 상기 (5)단계의 제조한 사카로마이세스 세레비지애 배양액을 접종한 후, 30~35℃에서 66~78시간 동안 배양하는 단계; 및
    (7) 상기 (6)단계의 배양한 흑삼 발효액을 85~95℃에서 20~40분 동안 살균처리하고, 60~75 brix로 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 흑삼 발효 농축액의 제조방법.
  5. 제1항 또는 제4항의 방법으로 제조된 흑삼 발효 농축액.
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