WO2009082881A1 - Dérivés de tétrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine, leurs procédés de préparation et leurs utilisations médicales - Google Patents

Dérivés de tétrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine, leurs procédés de préparation et leurs utilisations médicales Download PDF

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WO2009082881A1
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pyrazine
acid
amino
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PCT/CN2008/001936
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Peng Cho Tang
Fanglong Yang
Jiang Fan
Hu FENG
Yang Wang
Tao Yang
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Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd.
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
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    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
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    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
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    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones

Definitions

  • Tetrahydroimidazolium fl,5-aj pyridinium derivative preparation method thereof and application thereof in medicine
  • the present invention relates to a novel tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine derivative of the formula (I), a process for the preparation thereof, and a pharmaceutical composition containing the same, and as a therapeutic agent It is used as a dipeptidyl peptidase IV inhibitor.
  • Diabetes is a multi-pathogenic metabolic disease characterized by chronic hyperglycemia accompanied by disorders of sugar, fat and protein metabolism caused by defects in insulin secretion and/or function. Diabetes is a very old disease. It is caused by the absolute or relative lack of insulin in the human body. The blood glucose level is increased, and then the sugar is discharged from the urine, and there are polydipsia, polyuria, polyphagia, weight loss, and head. Halo, fatigue and other symptoms.
  • Type I diabetics ie, insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM) patients produce little or no insulin.
  • Insulin is a hormone used in the body to regulate glucose utilization.
  • People with type 2 diabetes ie, insulin-independent diabetes mellitus (NIDDM) have the same or higher plasma insulin levels than non-diabetic patients.
  • NIDDM insulin-independent diabetes mellitus
  • Glucose and lipid metabolism in tissue cells such as muscle, liver, and 25 adipose tissue are stimulating. Even if the plasma insulin level is improved, the patient's significant resistance to insulin cannot be overcome.
  • Insulin resistance is mainly due to a decrease in the number of insulin receptors, as well as insulin receptor defects, which have not been understood so far.
  • the resistance to insulin responsiveness causes insulin to fail to activate glucose uptake, oxidation, and storage in muscle tissue, and is ineffective in inhibiting lipolysis of adipose tissue and production and secretion of hepatic glucose.
  • DPPIV Dipeptidyl peptidase-IV
  • a serine protease that cleaves N-terminal dipeptidase in a peptide chain containing a proline residue at the secondary end, although DPPIV has no physiological effects on mammals. It is fully confirmed, but it plays an important role in neuroenzyme metabolism, T-cell activation, cancer cell metastasis into the endothelium and HIV virus entry into lymphoid cells (W098/19998).
  • DPPIV can prevent the secretion of glucagon-like peptide (GLP)-1, in particular, it can cleave the N-terminal group-propadipeptide enzyme of GLJP-1 from the active form of GLP- 1(7-36) NH 2 degraded to inactive GLP-1 (9-36) NH 2 (Endocdnology, 1999, 140: 5356 ⁇ 5363). Due to physiological conditions, the half-life of intact GLP-1 in circulating blood is very short, and the inactive metabolites after DPPIV degrades GLP-1 can bind to GLP-1 receptor antagonistic activity GLP-1, thereby shortening the physiology of GLP-1. reaction.
  • DPPIV inhibitors can completely protect endogenous and even exogenous GLP-1 from being inactivated by DPPIV, greatly increasing the physiological activity of GLP-1 (5 to 10 times), due to GLP-1 secretion of pancreatic insulin. It is an important stimulator and can directly affect the distribution of glucose. DPPIV inhibitors play a very good role in the treatment of non-insulin-dependent diabetes mellitus (NIDDM) (US6110949).
  • NIDDM non-insulin-dependent diabetes mellitus
  • DPP-IV inhibitors have been disclosed (US5462928, US5543396, WO9515309, WO2003004498, WO2003082817, WO2004032836, WO2004085661), wherein the DPPIV inhibitor MK-0431 produced by Merck Company shows good DPPIV inhibitory activity and selectivity, and Listed in 2006.
  • An object of the present invention is to provide a compound having a therapeutic or palliative drug which inhibits DPPIV activity and which can be used for diabetes or the like. Summary of the invention
  • R 1 is selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a trifluoromethyl group, a cycloalkyl group, an aryl group or a heteroaryl group, wherein the alkyl group, heterocycloalkyl group, aryl group, heteroaryl group are optionally further selected by one or more Substituted by a substituent of a halogen, a cyano group, an aryl group, a hydroxyl group or an amino group, preferably a trifluoromethyl group;
  • R 2 is selected from the group consisting of hydroxyl, amino, alkyl, alkoxy, cyclodecyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl or -NR 4 R 5 , wherein alkyl, decyloxy, cycloalkyl, hetero a cycloalkyl, aryl or heteroaryl group optionally further one or more Substituted from halogen, amino, cyano, hydroxy, alkyl, cycloalkyl, alkoxy, aryl, heteroaryl, -NR 4 R 5 , -OC(0)OR ⁇ carboxylic acid or carboxylic acid ester Substituted by
  • R 3 is selected from a hydrogen atom or an alkyl group
  • R 4 and R 5 are each independently selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocyclic fluorenyl group, an aryl group or a heteroaryl group, wherein an alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocyclic fluorenyl group, an aryl group or a heteroaryl group.
  • R 6 is selected from halogen, cyano, hydroxy, decyl or decyloxy, wherein alkyl or alkoxy is unsubstituted or substituted with one or more halogens;
  • R 7 is a sulfhydryl group
  • R 8 is an alkyl group or a cycloalkyl group.
  • the pharmaceutically acceptable salt described in the present invention is a salt of the compound of the present invention and an acid selected from the group consisting of malic acid, lactic acid, maleic acid, hydrochloric acid, methanesulfonic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, citric acid, tartaric acid, Acetic acid or trifluoroacetic acid.
  • Typical compounds of the invention include, but are not limited to:
  • the present invention includes a compound represented by the following formula (IA) which is an intermediate for the synthesis of the compound of the formula (I):
  • Ar is a phenyl group, the phenyl group of which is unsubstituted or further substituted by 1 to 5 R 6 ;
  • R 1 is selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a trifluoromethyl group, a cycloalkyl group, an aryl group or a heteroaryl group, wherein the alkyl group, heterocycloalkyl group, aryl group, heteroaryl group is optionally further selected by one or more Substituted by a substituent of a halogen, a cyano group, an aryl group, a hydroxyl group or a chloro group, preferably a trifluoromethyl group;
  • R 3 is selected from a hydrogen atom or an alkyl group
  • R 6 is selected from halogen, cyano, hydroxy, alkyl or alkoxy, wherein the fluorenyl or alkoxy group is unsubstituted or is optionally further substituted by one or more halogens;
  • X is a halogen.
  • the present invention includes a compound represented by the following formula (IB) which is an intermediate for the synthesis of the compound of the formula (I):
  • R 1 is selected from a hydrogen atom, a fluorenyl group, a trifluoromethyl group, a cycloalkyl group, an aryl group or a heteroaryl group, wherein the alkyl group, heterocycloalkyl group, aryl group, heteroaryl group are optionally further selected by one or more Substituted by a substituent of a halogen, a cyano group, an aryl group, a hydroxyl group or an amino group, preferably a trifluoromethyl group;
  • R 2 is selected from the group consisting of hydroxyl, amino, alkyl, alkoxy, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl or -NR 4 R 5 , wherein alkyl, decyloxy, cycloalkyl, hetero
  • the cycloalkyl, aryl or heteroaryl group is further optionally further selected from one or more selected from the group consisting of halogen, amino, cyano, hydroxy, alkyl, cycloalkyl, alkoxy, aryl, heteroaryl, -NR 4 Substituted with a substituent of R 5 , —OC(0)OR 8 , a carboxylic acid or a carboxylic acid ester;
  • R 3 is selected from a hydrogen atom or an alkyl group
  • R 4 and R 5 are each independently selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocycloalkyl group, an aryl group or a heteroaryl group, wherein an alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocycloalkyl group, an aryl group or a heteroaryl group.
  • R 4 and R 5 together form a 4 to 8 membered heterocyclic group, wherein the 4 to 8 membered heterocyclic ring contains one or more N, 0, S atoms, and the 4 to 8 membered heterocyclic ring is optionally further One or more selected from the group consisting of halogen, hydroxy, amino, alkoxy, alkyl, cyano, aryl, heterocycloalkyl, heteroaryl, carbonyl, hydroxyalkyl, -S0 2 R 7 , -NR 4 R 5 , -C(0)NR 4 R 5 , -C(0)R 7 , substituted with a substituent of a carboxylic acid or a carboxylic acid ester; R 7 is an alkyl group;
  • R 8 is selected from an alkyl group or a cycloalkyl group.
  • the anhydride is added dropwise to the starting pyrazine 2-methylamine under an ice bath, and then reacted at room temperature to form an amide product;
  • the imidazo[1,5-a]pyrazine ring is reduced in hydrogen in a solvent of palladium on carbon to form an R 1 , R 3 substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine product;
  • R 1 , R 3 substituted imidazo[1,5-a]pyrazine product is dissolved in a dichloromethane solvent, and in the condensing agent bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)phosphoryl chloride and Condensation reaction with carboxylic acid under the action of triethylamine;
  • R 1 -substituted imidazo[1,5-a]pyrazine is hydrogenated and reduced in an ethanol solvent at room temperature, and then reacted with di-tert-butyl dicarbonate in an ethanol solvent to protect the amino group to obtain an amino-protected R 1 substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyridinium;
  • the obtained halogenated product is reacted in a methanol solvent with an octacarbonyl dicobalt and chloroacetate in a carbon monoxide atmosphere to obtain an ester-substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine;
  • the obtained carboxylic acid compound is reacted with a haloalkyl group in a dry ice-acetone bath to obtain an alkyl-substituted acid;
  • the acid of the alkyl substituted product can be further esterified to give a ketone-substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine;
  • the alkyl-substituted acid can be used in a dichloromethane solvent in the condensation reagent bis(2-oxo-3-oxazolidine Reaction with N-methoxymethylamine under the action of hypophosphoryl chloride;
  • the product obtained by the condensation reaction is reacted with a Grignard reagent in a tetrahydrofuran solvent to obtain a ketone-substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine;
  • keto-substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine is deprotected under acidic conditions to give the intermediate (IB).
  • another aspect of the present invention is a process for the preparation of the compound (I) of the formula, which comprises:
  • the intermediate ( ⁇ ) is reacted with chloroacetate in a carbon monoxide atmosphere under an action of an oil bath under an action of octacarbonyl octacobalt in an oil bath, and then hydrolyzed to a carboxylic acid at room temperature under basic conditions;
  • Another aspect of the invention is a process for the preparation of a compound of formula (I), which comprises the following steps -
  • the intermediate (IB) is condensed with a carboxylic acid under the conditions of a condensing reagent bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)phosphinic chloride, and the obtained product is further subjected to removal of an amino protecting group under acidic conditions to give a general formula.
  • Compound (1) Further, a process for producing the compound of the above formula (I), which further comprises an acid addition product salt of the compound of the formula (I).
  • the salt is a salt of the above compound with an acid selected from the group consisting of phosphoric acid, malic acid, lactic acid, maleic acid, hydrochloric acid, methanesulfonic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, citric acid, tartaric acid, acetic acid or trifluoroacetic acid.
  • the preferred acid is hydrochloric acid.
  • the present invention relates to a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier or excipient.
  • the present invention relates to the use of a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a medicament for the treatment of diabetes mellitus, hyperglycemia, obesity or insulin resistance.
  • One aspect of the invention is a method for inhibiting the catalytic activity of dipeptidyl peptidase IV, characterized in that the dipeptidyl peptidase IV is contacted with a compound or salt according to any one of the formula (I).
  • Another aspect of the invention is the use of a compound, salt or pharmaceutical composition according to any one of the formula (I) for the treatment of a disease such as type II diabetes, hyperglycemia, obesity or insulin resistance.
  • a disease such as type II diabetes, hyperglycemia, obesity or insulin resistance.
  • Alkyl means a saturated aliphatic hydrocarbon group including straight chain and branched chain groups of 1 to 20 carbon atoms. Preference is given to alkyl groups having 1 to 10 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, 2-propyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, pentyl and the like. More preferred are lower alkyl groups having 1 to 4 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, 2-propyl, n-butyl, isobutyl or t-butyl groups and the like.
  • the alkyl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more, independently selected from the group consisting of halogen, hydroxy, amino, alkoxy, alkyl, cyano, aryl, heterocycle. Alkyl, heteroaryl, carbonyl, hydroxydecyl, -S0 2 R 7 , -NR 4 R 5 , -C(0)NR 4 R 5 , -C(0)R 7 , -OC(0)OR 8 , a carboxylic acid or a carboxylic acid ester.
  • Cycloalkyl means a 3 to 8 membered all carbon monocyclic, all carbon 5/6 or 6/6 fused or polycyclic fused ring (“fused" ring system means each in the system The rings share an adjacent pair of carbon atoms) groups with other rings in the system, wherein one or more of the rings may contain one or more double bonds, but none of the rings have a fully conjugated pi-electron system.
  • cycloalkyl group examples include a cyclopropyl group, a cyclobutyl group, a cyclopentyl group, a cyclopentene group, a cyclohexanyl group, a cyclohexadiene group, an adamantane, a cycloheptane, a cycloheptatriene or the like.
  • the cycloalkyl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more, independently selected from the group consisting of halogen, hydroxy, amino, alkoxy, alkyl, cyano, aryl, heterocyclic.
  • Aryl means a group having at least one aromatic ring structure, that is, an aromatic ring having a conjugated ⁇ -electron system, including a carbocyclic aryl group, a heteroaryl group, and a biaryl group.
  • the alkynyl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more, independently selected from the group consisting of 3 ⁇ 4, hydroxy, amino, alkoxy, alkyl, cyano, aryl, hetero Cycloalkyl, heteroaryl, carbonyl, hydroxydecyl, -S0 2 R 7 , -NR 4 R 5 , -C(0)NR 4 R 5 , -C(0)R 7 , carboxylic acid or carboxylate .
  • Heteroaryl means an aryl group having from 1 to 3 heteroatoms as ring atoms, the remaining ring atoms being carbon, and heteroatoms including oxygen, sulfur and nitrogen.
  • the ring may be a 5- or 6-membered ring.
  • the heterocyclic aryl group include a furyl group, a thienyl group, a pyridyl group, a pyrrole, an N-alkylpyrrolyl group, a pyrimidinyl group, a pyrazinyl group, an imidazolyl group and the like.
  • the heteroaryl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more, independently selected from the group consisting of halogen, hydroxy, amino, alkoxy, alkyl, cyano, aryl, hetero Cyclodecyl, heteroaryl, carbonyl, hydroxyalkyl, -S0 2 R 7 , -NR 4 R 5 , -C(0)NR 4 R 5 , -C(0)R 7 , carboxylic acid or carboxylate .
  • Heterocyclic fluorenyl means a monocyclic or fused ring radical having from 5 to 9 ring atoms in the ring wherein one or two ring atoms are selected from nitrogen, oxygen or S(0)n (where n is an integer) From 0 to 2), the remaining ring atoms are carbon. These rings may also have one or more double bonds. However, these rings do not have a fully conjugated ⁇ -electron system.
  • Unsubstituted heterocyclic fluorenyl includes, but is not limited to, pyrrolidinyl, piperidino, piperazino, morpholinyl, thiomorpholinyl, homopiperazine, etc.
  • heterocycloalkyl may be substituted or Unsubstituted.
  • the alkynyl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more, independently selected from the group consisting of halogen, hydroxy, amino, alkoxy, alkyl, cyano, aryl, heterocycle.
  • Haldroxy means an -OH group.
  • Alkoxy means -0-(alkyl) and -0-(unsubstituted cycloalkyl). Representative examples include, but are not limited to, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, cyclopropoxy, cyclobutoxy, cyclopentyloxy, cyclohexyloxy, and the like.
  • the alkoxy group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituent is preferably one or more, independently selected from the group consisting of halogen, hydroxy, amino, alkoxy, alkyl, cyano, aryl, Heterocycloalkyl, heteroaryl, carbonyl, hydroxyalkyl, -S0 2 R 7 , -NR 4 R 5 , -C(0)NR 4 R 5 , -C(0)R 7 , carboxylic acid or carboxylic acid ester.
  • Halogen means fluoro, chloro, bromo or iodo, preferably fluoro or chloro.
  • Trifluoromethyl means -CF 3 .
  • Amino means -N3 ⁇ 4.
  • Hydroalkyl means an alkyl group substituted by a hydroxy group.
  • “Pharmaceutical composition” means a mixture of one or more of the compounds described herein, or a physiologically/pharmaceutically acceptable salt or prodrug thereof, with other chemical components, such as a physiological/pharmaceutically acceptable carrier. And excipients.
  • the purpose of the pharmaceutical composition is to facilitate the administration of the compound to the organism.
  • the preparation method of the compound (I) of the general formula of the present invention comprises the following steps:
  • the raw pyrazine 2-methylamine is added dropwise with an acid anhydride in an ice bath, and then reacted at room temperature to form an amide product; after the amide product is mixed with phosphorus oxychloride at room temperature, phosphorus pentoxide is added, and the mixture is heated and refluxed.
  • An imidazo[1,5-a]pyrazine ring is formed; the imidazo[1,5-a]pyrazine ring is reduced in hydrogen in a solvent of palladium on carbon to form an R 1 -substituted tetrahydroimidazole.
  • [1,5-a]pyrazine product the R 1 -substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine product in dichloromethane solvent and in the condensation reagent bis(2-oxo-3- Condensation reaction with carboxylic acid under the action of oxazolidinylphosphoryl chloride and triethylamine; the obtained condensation product is reacted with halogenated succinimide in an anhydrous ethanol solvent at room temperature to form a compound of formula (IA);
  • the compound of the formula (IA) is reacted with chloroacetate in a carbon monoxide atmosphere under an action of an oil bath in an oil bath under an action of dicotid octacarbonyl, and then hydrolyzed to a carboxylic acid under acidic conditions at room temperature;
  • An acid compound condensation reaction with an amine or with an alcohol at room temperature, or with a 1-halocarbonate followed by an acid The amino protecting group is removed under the neutral
  • the preparation method of the compound (I) of the formula of the present invention comprises the following steps -
  • [1,5- a]pyrazine the obtained amino-protected R 1 -substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine is reacted with a halogenated succinimide at room temperature to obtain a halogenated group.
  • the obtained halogenated product is reacted in a solvent of methanol with octacarbonyl hexacarbonyl and chloroacetate under a carbon monoxide atmosphere to obtain an ester-substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine.
  • the resulting ester-substituted tetrahydroimidazo[l,5-a]pyrazine is hydrolyzed under basic conditions Acid
  • the obtained carboxylic acid compound is reacted with a haloalkyl group in a dry ice-acetone bath to obtain an alkyl-substituted product; the carboxyl group in the alkyl-substituted product can be further esterified to obtain an intermediate (IB); It can be reacted with N-methoxymethylamine in a dichloromethane solvent under the action of a condensation reagent bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)phosphoryl chloride; the product obtained by the condensation reaction and the Grignard reagent Reaction in tetrahydrofuran solvent to give a ketone-substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine; removing the amino-protecting group under acidic conditions with a ketone-substituted tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine To obtain a compound of the formula (IB); the intermediate compound (IB) is con
  • the compound of the formula (I) is purified and reacted in an acid solution of methanol, dichloromethane or ethyl acetate to obtain an acid addition product salt.
  • the structure of the example compounds was determined by nuclear magnetic resonance (H NMR) or mass spectrometry (MS).
  • the iHNMR shift ( ⁇ ) is given in parts per million (ppm). !
  • the HNMR was measured by a Bruker AVANCE-400 nuclear magnetic instrument.
  • the solvent was deuterated methanol (CD 3 OD), deuterated chloroform (CDC1 3 ), and the internal standard of hexamethyl dimethyl sulfoxide (DMSO-d6) was silane (TMS), chemical shifts are 10- 6 (ppm) is given as a unit;
  • MS FINNIGAN LCQAd (ESI) mass spectrometer manufactured by Therm, model: Finnigan LCQ advantage MAX;
  • the IC 50 value was determined using a NovoStar plate reader (BMG, Germany);
  • the nitrogen atmosphere means that the reaction flask is connected to a nitrogen balloon of about 1 L volume.
  • the hydrogen atmosphere means that the reaction flask is connected to a hydrogen balloon of about 1 L volume.
  • 2,2,2-Trifluoro-N-pyrazine-2-methyl-carboxamide li (21.0 g, 100 mmol) was added to the reaction flask at room temperature, 100 mL of phosphorus oxychloride was added, and stirred at room temperature 30 After a minute, phosphorus pentoxide (17.8 g, 125 mmol) was added, and the reaction was heated under reflux for 5 hours. The reaction was traced by thin layer chromatography until the starting material disappeared, the solvent phosphorus trichloride was removed, and the reaction system was quenched with deionized water. 20% sodium hydroxide solution was adjusted to pH 5-6 in an ice-bath, and extracted with ethyl acetate (250 mL ⁇ 4). Purification gave the title product 3-trifluoromethyl-imidazo[1,5-a]pyrazine lj (12.0 g, yellow solid).
  • 3-trifluoromethyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine 3-trifluoromethyl-imidazo[1,5-a]pyrazine lj (12.0 g, 64.2 mmol) was dissolved in 150 mL of absolute ethanol with stirring, and 500 mg of 10% palladium on carbon was added and stirred under a hydrogen atmosphere overnight.
  • Morpholine (19 mg, 0.218 mmol) and bis(2-oxo-3-oxazolidinyl) Phosphonoyl chloride (53.5 mg, 0.218 mmol) was dissolved in 5 mL of dichloromethane with stirring.
  • Triethylamine (0.1 mL, 0.65 mmol) was added and allowed to react overnight at room temperature. The reaction was traced by thin layer chromatography until the starting material disappeared.
  • reaction was traced by thin layer chromatography until the starting material disappeared.
  • the reaction mixture was concentrated, and then purified mjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjj
  • reaction was traced by thin layer chromatography until the material disappeared.
  • the reaction mixture was purified to silica gel column chromatography toiel [1,5-a]pyrazin-7-yl)-3-oxo-1-(2,4,5-trifluoro-benzyl)-propyl]-carbamic acid tert-butyl ester 8a (150 mg, White solid), Yield: 98.6 %.
  • Triethylamine (0.25 mL, 1.62 mmol) was added and allowed to react at room temperature overnight, and the reaction was traced by thin layer chromatography until the starting material disappeared.
  • the reaction mixture was concentrated under reduced vacuolululululululululululululu 8H-imidazo[1,5-a]pyrazin-7-yl)-3-oxo-1-(2,4,5-trifluoro-benzyl)-propyl]-carbamic acid tert-butyl ester 9a (120 mg, white solid), Yield: 77%.
  • Triethylamine (0.36 g, 3.6 mmol) was added at room temperature, and the reaction mixture was stirred at room temperature for 2 hr. (cyclopropylcarbamoyl)-3-trifluoromethyl-5,6-dihydro-8H-imidazo[1,5-a]pyrazine-7-yl]-3-oxo-1-( 2,4,5-Trifluoro-benzyl)-propyl]-carbamic acid tert-butyl ester 15a (0.1 g, oily liquid), yield: 45 %.
  • Triethylamine (0.25 mL, 1.62 mmol)
  • bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)phosphinic acid chloride (0.138 g, 0.54 mmol) was added and allowed to react at room temperature for 20 hours.
  • the reaction mixture was chromatographed until the material was evaporated, and the residue was evaporated.
  • reaction mixture was concentrated, and then purified mjjjjjjjjj ,6-Dihydro-8H-imidazo[1,5-a]pyrazin-7-yl]-3-oxo small (2,4,5-trifluorobenzyl)-propyl]-carbamic acid Butyl ester 29a (0.1 g, white solid).
  • [1,5-a]pyrazine-1-ethyl 1-(1-ethoxyoxy)carboxylate 34a (0.26 g, 0.39 mmol) and 5 mL of ethyl acetate were added to the reaction flask, and then 3 mL of 6.5 N was added.
  • [1,5-a]pyrazine-1-carboxylic acid tert-butyl ester 36a (0.094 g, 0.15 mmol) and 10 mL of ethyl acetate were added to the reaction flask, and 3 mL of 5.5 N hydrogen chloride was added to the reaction flask under ice bath. After the dropwise addition, the ice bath was removed, and the mixture was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was evaporated to dryness, and the mixture was evaporated to dryness.
  • the reaction tube was taken out from the oil bath, and after it was cooled to room temperature, 40 mL of water was added thereto, and the mixture was extracted with ethyl acetate (25 mL ⁇ 3).
  • the product in the aqueous phase was detected by thin layer chromatography, and the organic phase was collected and washed with water (20 mL> ⁇ 2), the organic phase was combined, dried with EtOAcjHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 4,5-trifluorophenyl)butyryl)-3-(trifluoromethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5-a]pyrazine-1-carboxylic acid (isopropyl Oxyformyloxy)ethyl ester 37a (0.29 g, pale yellow solid), yield: mp.
  • the reaction tube was taken out from the oil bath, and after the reaction mixture was cooled to room temperature, 40 mL of water was added thereto, and the mixture was extracted with ethyl acetate (30 mL ⁇ 3), and the organic phase was combined, washed with 30 mL of water, and then washed with 30 mL of saturated brine, and the organic phase was combined. Drying over anhydrous magnesium sulfate, EtOAc (EtOAc m.
  • the inhibition rate or semi-inhibitory concentration of each compound, IC 5Q (the concentration of the compound measured when the enzyme activity is inhibited to 50%), is determined by a fixed amount of the enzyme mixed substrate and different concentrations of the test compound.
  • Tris buffer Prepare 100 mL of 2 mM Tris buffer, dissolve 0.0242 g Tris in approximately 90 mL of deionized water, adjust pH to 8.00 with HC1 and NaOH, and finally add deionized water to 100 mL.
  • DPPIV enzyme CalBiochem Catalog no. 317630, dissolved in Tris buffer to 2 mM.
  • DPPIV—GloTM substrate Promega Catalog no. G8350
  • DPPIV -GloTM Buffer Promega Catalog no.G8350
  • the ratio of mixed substrate and DPPIV-Glo. is 1:49. Mix the vibrations to mix thoroughly. Before use at room temperature Let stand for 30-60 minutes.
  • the compound of the present invention has a half-inhibitory concentration IC 5C value ranging from 0.005 ⁇ M to 0.216 ⁇ M, and most of the compounds of the present invention have good inhibitory activity against DPPIV compared with the IC 5 o value of 0.023 ⁇ M of MK-0431. .

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Description

四氢咪唑并 fl,5-aj吡瞎类衍生物， 其制备方法及其在医药上的应用 技术领域
本发明涉及一种通式 (I)所示新的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪类衍生物、 其制备 方法以及含有该衍生物的药物组合物、以及其作为治疗剂特别是作为二肽基肽酶 IV抑制剂的用途。 背景技术
糖尿病是一种多病因的代谢疾病，特点是慢性高血糖，伴随因胰岛素分泌及 /或作用缺陷引起的糖、 脂肪和蛋白质代谢紊乱。 糖尿病是一种非常古老的疾病， 是由于人体内胰岛素绝对或相对缺乏而引起的血中葡萄糖浓度升高，进而糖大量 从尿中排出， 并出现多饮、 多尿、 多食、 消瘦、 头暈、 乏力等症状。
永久性的或不受控制的高血糖症导致发病率与死亡率的增加。通常糖稳态异 常直接或间接地与脂质、脂蛋白质、脱辅基脂蛋白新陈代谢的变更或其他的代谢 和血液动力疾病有关。 II型糖尿病患者患有大多孔脂质体及微血管综合症， 如冠 状心脏病、 中风、 外周血管性疾病、 高血压、 肾病、 神经病和视网膜病等疾病 危险性显著增加。 因此， 对糖稳态、脂类代谢、 高血压等疾病进行治疗控制， 对 于临床上治疗糖尿病是极其重要的。
通常来说， 有两种类型的糖尿病。 I型糖尿病人， 即胰岛素依赖型糖尿病 (IDDM)患者自身产生的胰岛素很少或几乎没有。 胰岛素是体内用来调节葡萄糖 利用的一种荷尔蒙。 II型糖尿病人， 即胰岛素非依赖型糖尿病 (NIDDM)患者与非 糖尿病患者的血浆内胰岛素水平是相同的或者更高，然而，此类患者却对胰岛素 产生抵抗力， 这些胰岛素对于主要的胰岛素敏感的组织细胞， 如肌肉、肝脏、 25 个脂肪组织等的葡萄糖和脂类代谢起着刺激作用。即使血浆胰岛素水平提髙，也 无法克服患者对于胰岛素显著的抵抗力。
胰岛素抵抗力并主要是因为胰岛素受体数量的减少而产生的，还有胰岛素受 体缺陷，到目前为止此机制还未能理解。胰岛素应答性的抵抗力导致胰岛素无法 在肌肉组织中， 对葡萄糖摄取、氧化、存储进行激活， 无法有效抑制脂肪组织脂 解作用， 和肝脏葡萄糖的产生和分泌。
二肽基肽酶 -IV(DPPIV)是一种丝氨酸蛋白酶，它可以在次末端含有一个脯氨 酸残基的肽链里裂解 N-末端二肽酶， 尽管 DPPIV对哺乳动物的生理作用还没有 得到完全的证实， 但其在神经酶代谢， T-细胞激活， 癌细胞转移入内皮及 HIV 病毒进入淋巴样细胞过程中都起到重要的作用 （W098/19998)。 最近，有研究表明 DPPIV可以阻止胰升糖素样肽 (GLP)-l的分泌， 尤其， 它 可以裂解 GLJP-1 中 N-末端的组 -丙二肽酶， 使其从活性形式的 GLP-1(7-36)NH2 降解为无活性的 GLP-l(9-36)NH2(Endocdnology， 1999， 140： 5356〜5363)。 由 于生理情况下， 循环血中完整 GLP-1的半衰期很短， DPPIV降解 GLP-1后的无 活性代谢物能与 GLP-1受体结合拮抗活性 GLP-1从而缩短了对 GLP-1的生理反 应。 而 DPPIV抑制剂能完全保护内源性甚至外源性的 GLP- 1不被 DPPIV灭活， 极大的提高 GLP-1的生理活性 (5〜10倍)， 由于 GLP-1对胰腺胰岛素的分泌是一 个重要的刺激器并能直接影响葡萄糖的分配， DPPIV抑制剂对非胰岛素依赖型 糖尿病 (NIDDM)的治疗起到很好的作用 (US6110949)。
目前一些 DPP-IV抑制剂已被公开（US5462928、 US5543396, WO9515309, WO2003004498、 WO2003082817, WO2004032836, WO2004085661 )，其中 Merck 公司生成的 DPPIV抑制剂 MK-0431显示了良好的 DPPIV抑制活性及选择性， 并已 于 2006年上市。
Figure imgf000004_0001
然而， 尽管已有若干 DPPIV抑制剂被公幵， 但是目前还未有长效的药物， 仍然需要性质得到改善的 DPPIV抑制剂。
本发明的目的是提供一种具有抑制 DPPIV活性并且可用于糖尿病或类似疾 病的治疗或缓解性药物的化合物。 发明内容
为了克服现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种通式 (I)所示的四 氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪类化合物， 以及它们的互变异构体、 对映体、 非对映体、 消 旋体和药学上可接受的盐， 以及代谢产物和代谢前体或前药。
Figure imgf000004_0002
R1选自氢原子、 烷基、三氟甲基、 环烷基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、 杂环 烷基、 芳基、 杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、 芳基、羟基或氨 基的取代基所取代， 优选为三氟甲基；
R2选自羟基、氨基、烷基、烷氧基、环垸基、杂环烷基、芳基、杂芳基或 -NR4R5， 其中烷基、垸氧基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基任选进一步被一个或多个 选自卤素、氨基、 氰基、 羟基、 烷基、 环烷基、 烷氧基、 芳基、 杂芳基、 -NR4R5、 -OC(0)OR\ 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R3选自氢原子或烷基；
R4和 R5各自独立地选自氢原子、 烷基、 环烷基、 杂环垸基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、环烷基、杂环垸基、 芳基或者杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤 素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 烷基、 氰基、 芳基、 环垸基、 杂环烷基、 杂芳基、 羟 垸基、 -S02R7、 -NR4R5、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
或者， R4和 R5—起形成一个 4〜8元杂环基，其中 4〜8元杂环内含有一个或 多个 N、 0、 S原子， 并且 4〜8元杂环上任选进一步被一个或多个选自卤素、 羟 基、氨基、烷氧基、烷基、氰基、芳基、杂环烷基、杂芳基、羰基、羟烷基、 -S02R7、 -NR4R5、 -C(0)NR4R5、 -C(0)R7、 =0、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R6选自卤素、 氰基、 羟基、 垸基或者垸氧基， 其中烷基或者烷氧基是未取代 的或者进一歩被一个或多个卤素取代；
R7为垸基；
R8为烷基或环烷基。 本发明中所述的药学上可接受的盐为本发明化合物与选自下列的酸形成的 盐- 苹果酸、 乳酸、 马来酸、 盐酸、 甲磺酸、 硫酸、 磷酸、 柠檬酸、 酒石酸、 乙 酸或三氟乙酸。 本发明的典型化合物包括， 但不限于:
Figure imgf000005_0001
Figure imgf000006_0001
Figure imgf000007_0001
Figure imgf000008_0001
Figure imgf000009_0001
或它们药学上可接受的盐。 进一步， 本发明包括下述通式（IA)所示的化合物， 其作为通式 (I)化合物合 成的中间体：
Figure imgf000010_0001
其中：
Ar是苯基， 其苯基是未取代的或者进一步被 1〜5个 R6所取代；
R1选自氢原子、 烷基、 三氟甲基、 环烷基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、 杂环 垸基、 芳基、 杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤素、 氰基、 芳基、 羟基或氯 基的取代基所取代， 优选为三氟甲基；
R3选自氢原子或烷基；
R6选自卤素、 氰基、 羟基、 烷基或烷氧基， 其中垸基或烷氧基是未取代的或 者任选进一步被一个或多个卤素取代；
X为卤素。 进一步， 本发明包括下述通式 (IB)所示的化合物， 其作为通式 (I)化合物合成 的中间体：
Figure imgf000010_0002
其中:
R1选自氢原子、 垸基、 三氟甲基、 环烷基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、 杂环 烷基、 芳基、 杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤素、 氰基、 芳基、 羟基或氨 基的取代基所取代， 优选为三氟甲基；
R2选自羟基、氨基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环垸基、芳基、杂芳基或 -NR4R5， 其中烷基、 垸氧基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基任选进一步被一个或多个 选自卤素、 氨基、 氰基、羟基、烷基、 环烷基、 烷氧基、 芳基、 杂芳基、 -NR4R5、 -OC(0)OR8、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R3选自氢原子或烷基；
R4和 R5各自独立地选自氢原子、 烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、环烷基、杂环烷基、 芳基或者杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤 素、 羟基、 氨基、 垸氧基、 烷基、 氰基、 芳基、 环烷基、 杂环垸基、 杂芳基、 羟 烧基、 -S02R7、 -NR4R5、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
或者， R4和 R5—起形成一个 4〜8元杂环基，其中 4〜8元杂环内含有一个或 多个 N、 0、 S原子， 并且 4〜8元杂环上任选进一步被一个或多个选自卤素、 羟 基、氨基、烷氧基、烷基、氰基、芳基、杂环垸基、杂芳基、羰基、羟烷基、 -S02R7、 -NR4R5、 -C(0)NR4R5, -C(0)R7, 羧酸或羧酸酯的取代基所取代； R7为烷基；
R8选自烷基或环烷基。
在本发明的另一个方面， 是提供中间体 (IA)所示化合物的制备方法， 包括以 下步骤：
Figure imgf000011_0001
在冰浴下向原料吡嗪 2-甲胺中滴加酸酐，然后在室温下反应，生成酰胺产物;
Figure imgf000011_0002
将酰胺产物与三氯氧磷在室温下混合搅拌后， 加入五氧化二磷， 加热回流缩 合生成咪唑并 [1,5- a]吡嗪环；
Figure imgf000011_0003
将咪唑并 [1,5-a]吡嗪环在乙醇溶剂中， 于钯 /碳催化下， 氢气还原生成 R1 , R3取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪产物；
Figure imgf000011_0004
将 R1 , R3取代的咪唑并 [1,5-a]吡嗪产物溶解在二氯甲烷溶剂中， 并在缩合剂 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯及三乙胺作用下与羧酸发生缩合反应；
Figure imgf000011_0005
得到的縮合产物在室温下无水乙醇溶剂中与卤代琥珀酰亚胺反应生成中间 体 (ΙΑ)。 在本发明的另一个方面， 是制备中间体 (IB)所示化合物的制备方法， 包括以
Figure imgf000012_0001
将 R1取代的咪唑并 [1,5-a]吡嗪在室温下， 于乙醇溶剂中氢化还原， 然后与二 碳酸二叔丁酯在乙醇溶剂中反应， 对氨基进行保护， 得到氨基保护的 R1取代的 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗉；
、0
Figure imgf000012_0002
得到的氨基保护的 R1取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在乙醇溶剂中，室温下与 卤代琥珀酰亚胺反应得到卤代产物；
Figure imgf000012_0003
得到的卤代产物在甲醇溶剂中， 在油浴下与八羰基二钴及氯乙酸酯在一氧化 碳气氛中反应， 得到酯基取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪；
Figure imgf000012_0004
得到的酯基取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在碱性条件下水解成酸;
Figure imgf000012_0005
得到的羧酸化合物在干冰 -丙酮浴下， 与卤代烷基反应， 得到烷基取代的酸;
Figure imgf000012_0006
烷基取代产物的酸可进一步酯化， 得到酮取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪;
Figure imgf000012_0007
或者，烷基取代的酸可以在二氯甲烷溶剂中，在缩合试剂双 (2-氧代 -3-噁唑烷 基)次磷酰氯作用下与 N-甲氧基甲胺反应;
Figure imgf000013_0001
经缩合反应得到的产物与格氏试剂在四氢呋喃溶剂中反应， 得到酮取代的四 氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪；
Figure imgf000013_0002
将酮取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在酸性条件下脱掉氨基保护基， 得到中间 体 (IB)。 进一步， 本发明的另一方面是通式化合物 (I)的制备方法， 该方法包括：
Figure imgf000013_0003
中间体 (ΙΑ)在甲醇溶剂中， 于油浴下在八羰基二钴的作用下与氯乙酸酯在- 氧化碳气氛中反应， 然后在室温， 碱性条件下水解再酸化成羧酸；
Figure imgf000013_0004
得到的羧酸在缩合试剂作用下与胺或与醇在室温下发生縮合反应，或者与 1- 卤代碳酸酯反应， 然后在酸性条件下脱掉氨基保护基得到通式化合物 (1)。 本发明的另一方面是通式化合物 (I)的制备方法， 该方法包括以下步骤-
Figure imgf000013_0005
中间体 (IB)与羧酸在缩合试剂双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯的条件下进行 缩合， 得到的产物进一步在酸性条件下脱掉氨基保护基得到通式化合物 (1)。 进一步， 所述通式化合物 (I)的制备方法， 其中还包括通式化合物 (I)的酸加成 产物盐。其中，所述的盐为上述化合物与选自以下的酸形成的盐：磷酸、苹果酸、 乳酸、马来酸、盐酸、 甲磺酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、酒石酸、 乙酸或三氟乙酸， 优选的酸是盐酸。
本发明涉及一种药用组合物、其含有治疗有效剂量的本发明化合物或其药学 上可接受的盐， 及药学上可以接受的载体或赋形剂。
进一步，本发明还涉及本发明化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗 Π型 糖尿病、 高血糖症、 肥胖症或胰岛素抵抗症的药物中的用途。
本发明的一方面是抑制二肽基肽酶 IV催化活性的方法， 其特征在于将所述 的二肽基肽酶 IV与通式 (I)中任何一个所述的化合物或盐接触。
本发明的另一方面是通式 (I)中任何一个所述化合物、盐或药物组合物用于治 疗 II型糖尿病、 高血糖症、 肥胖症或胰岛素抵抗症等疾病中的用途。 发明的详细说明
除非有相反陈述， 下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。
"烷基"指饱和的脂族烃基团， 包括 1至 20个碳原子的直链和支链基团。 优选含有 1至 10个碳原子的烷基， 例如甲基、 乙基、 丙基、 2-丙基、 正丁基、 异丁基、叔丁基、戊基等。更优选的是含有 1至 4个碳原子的低级烷基， 例如甲 基、 乙基、 丙基、 2-丙基、 正丁基、 异丁基或叔丁基等。 烷基可以是取代的或未 取代的， 当被取代时，取代基优选为一个或多个，独立地选自卤素、羟基、氨基、 烷氧基、烷基、氰基、芳基、杂环烷基、杂芳基、羰基、羟垸基、 -S02R7、 -NR4R5、 -C(0)N R4R5, -C(0)R7、 -OC(0)OR8、 羧酸或羧酸酯。
"环烷基"指 3至 8元全碳单环、全碳 5元 /6元或 6元 /6元稠合环或多环稠 合环（"稠合"环系意味着系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原 子）基团， 其中一个或多个环可以含有一个或多个双键， 但没有一个环具有完全 共轭的 π电子系统。环烷基的实例有环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯、环己垸、 环己二烯、 金刚烷、环庚烷、环庚三烯等。环烷基可以是取代或未取代的， 当被 取代时， 取代基优选为一个或多个， 独立地选自卤素、 羟基、氨基、 烷氧基、 烷 基、 氰基、 芳基、 杂环烷基、 杂芳基、羰基、羟烷基、 -S02R7、 -NR4R5、 -C(0)N R4R5、 -C(0)R7、 羧酸或羧酸酯。
"芳基"指具有至少一个芳环结构的基团，即具有共轭的 π电子体系的芳环， 包括碳环芳基、 杂芳基和联芳基。 炔基可以是取代的或未取代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个， 独立地选自 ¾素、羟基、氨基、烷氧基、烷基、氰基、 芳基、杂环烷基、杂芳基、羰基、羟垸基、 -S02R7、 -NR4R5、 -C(0)N R4R5、 -C(0)R7、 羧酸或羧酸酯。 "杂芳基"指具有 1至 3个杂原子作为环原子， 其余的环原子为碳的芳基， 杂原子包括氧、硫和氮。所述环可以是 5元或 6元环。杂环芳基基团的实例包括 呋喃基、 噻吩基、 吡啶基、 吡咯、 N-烷基吡咯基、 嘧啶基、 吡嗪基、 咪唑基等。 杂芳基可以是取代的或未取代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个， 独立 地选自卤素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 烷基、 氰基、 芳基、 杂环垸基、 杂芳基、 羰 基、 羟烷基、 - S02R7、 -NR4R5、 -C(0)N R4R5、 -C(0)R7、 羧酸或羧酸酯。
"杂环垸基"指单环或稠环基团， 在环中， 具有 5至 9个环原子， 其中一个 或两个环原子选自氮、 氧或 S(0)n (其中 n是整数 0至 2) 的杂原子， 其余环原 子为碳。 这些环还可以具有一个或多个双键。 不过， 这些环不具有完全共轭的 π 电子系统。 未取代的杂环垸基包括但不限于吡咯烷基、 哌啶子基、 哌嗪子基、 吗 啉基、 硫代吗啉基、 高哌嗪其等、 杂环烷基可以是取代的或未取代的。 炔基可以 是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个，独立地选自卤素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 烷基、 氰基、 芳基、 杂环烷基、 杂芳基、 羰基、 羟烷基、
-S02R7、 -NR4R5、 -C(0)N R4R5、 -C(0)R7、 羧酸或羧酸酯。
"羟基"指 -OH基团。
"烷氧基"指 -0- (烷基）和 -0- (未取代的环烷基）。 代表性实例包括但不限 于甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 丁氧基、 环丙氧基、 环丁氧基、 环戊氧基、 环己氧 基等。烷氧基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个， 独立地选自为卤素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 烷基、 氰基、 芳基、 杂环烷基、 杂芳 基、 羰基、 羟烷基、 - S02R7、 -NR4R5、 -C(0)N R4R5、 -C(0)R7、 羧酸或羧酸酯。
"卤素"指氟、 氯、 溴或碘， 优选氟或氯。
"三氟甲基"指 -CF3。
"氨基"指 -N¾。
"氰基"指 -CN。
"羰基 "指 C(=0)。
"羧酸"指 （烷基） C(=0)OH。
"羧酸酯"指 （烷基） c(=o)o (垸基）。
"羟烷基"指被羟基取代的烷基。
"药物组合物"表示一种或多种本文所述化合物或其生理学上 /药学上可接 受的盐或前体药物与其他化学组分的混合物， 其他组分例如生理学 /药学上可接 受的载体和赋形剂。 药物组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。 本发明化合物的合成方法
为了完成本发明的目的， 本发明采用如下技术方案：
本发明的通式化合物 (I)的制备方法， 包括以下步骤：
Figure imgf000016_0001
将原料吡嗪 2-甲胺在冰浴下滴加酸酐， 再在室温下反应， 生成酰胺产物； 将 酰胺产物与三氯氧磷在室温下混合搅拌后，加入五氧化二磷，加热回流缩合生成 咪唑并 [1,5-a]吡嗪环； 将咪唑并 [1,5-a]吡嗪环在乙醇溶剂中， 在钯 /碳催化下， 氢 气还原生成 R1取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪产物;将 R1取代的四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪产物在二氯甲烷溶剂中， 并在缩合试剂双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯及三 乙胺作用下与羧酸发生缩合反应；得到的缩合产物在室温下无水乙醇溶剂中与卤 代琥珀酰亚胺反应生成通式化合物 (IA); 中间体通式化合物 (IA)在甲醇溶剂中， 油浴下在八羰基二钴的作用下与氯乙酸酯在一氧化碳气氛中反应， 然后在室温 下，酸性条件下水解成羧酸；得到的羧酸化合物缩合试剂作用下与胺或与醇在室 温下发生缩合反应，或者与 1-卤代碳酸酯反应然后在酸性条件下脱掉氨基保护基 得到通式化合物 (1)。
本发明的通式化合物 (I)的制备方法， 包括以下步骤-
Figure imgf000016_0002
将原料 R1取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在室温下， 乙醇溶剂中氢化还原， 然 后与二碳酸二叔丁酯在乙醇溶剂中反应， 得到氨基保护的 R1取代的四氢咪唑并
[1,5- a]吡嗪； 得到的氨基保护的 R1取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在乙醇溶剂中， 室温下与卤代琥珀酰亚胺反应得到卤代产物；得到的卤代产物在甲醇溶剂中，在 油浴下与八羰基二钴及氯乙酸酯在一氧化碳气氛下反应，得到酯基取代的四氢咪 唑并 [1,5-a]吡嗪； 得到的酯基取代的四氢咪唑并 [l，5-a]吡嗪在碱性条件下水解成 酸；
得到的羧酸化合物在干冰 -丙酮浴下，与卤代烷基反应，得到烷基取代的产物； 烷基取代产物中的羧基可进一歩酯化， 得到中间体 (IB); 得到的羧酸化合物也可 以在二氯甲烷溶剂中， 在缩合试剂双 (2-氧代- 3-噁唑烷基)次磷酰氯作用下与 N- 甲氧基甲胺反应； 经缩合反应得到的产物与格氏试剂在四氢呋喃溶剂中反应， 得 到酮取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪； 将酮取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在酸性条 件下脱掉氨基保护基， 得到通式化合物 (IB); 中间体通式化合物 (IB)与羧酸在缩 合试剂双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯的条件下进行缩合， 得到的产物进一步在 酸性条件下脱掉氨基保护基得到通式化合物 (1)。
通式化合物 (I)经纯化后在酸的甲醇、二氯甲烷或乙酸乙酯溶液中反应， 得到 其酸加成产物盐。
具体实施方式
以下结合实施例用于进一步描述本—发明，但这些实施例并非限制着本发明的 范围。
实施例 化合物的结构是通过核磁共振 (^HNMR)或质谱 (MS)来确定的。 iHNMR位移 (δ)以百万分之一 (ppm)的单位给出。 ！HNMR的测定是用 Bruker AVANCE-400核 磁仪， 测定溶剂为氘代甲醇 (CD3OD)、 氘代氯仿 (CDC13)， 六氘代二甲基亚砜 (DMSO-d6)内标为四甲基硅烷 (TMS), 化学位移是以 10—6(ppm)作为单位给出；
MS的测定用 FINNIGAN LCQAd (ESI)质谱仪 (生产商： Therm， 型号： Finnigan LCQ advantage MAX;
IC50值的测定用 NovoStar酶标仪 (德国 BMG公司）；
薄层硅胶使用烟台黄海 HSGF254或青岛 GF254硅胶板；
柱层析一般使用烟台黄海硅胶 200~300目硅胶为载体。
实施例中无特殊说明， 反应均在氮气氛下进行。
氮气氛是指反应瓶连接一个约 1L容积的氮气气球。
氢气氛是指反应瓶连接一个约 1L容积的氢气气球。 实施例 1
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰 ]-3-三氟甲基 -5，6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -1-甲酸甲酯盐酸盐
Figure imgf000018_0001
第一歩
2,2-二甲基 -5- [2-(2,4,5-三氟苯基) -乙酰基] -[1,3] 二噁烷 -4,6-二酮 将 2,2-二甲基 -[1,3]二噁烷 -4,6-二酮 (5.69 g， 39.5 mmol)搅拌下溶解于 400 mL 二氯甲烷中， 在冰浴冷却下， 加入 2,4,5-三氟苯乙酸 la(7.15 g， 37.6 mmol)和对 二甲氨基吡啶 (7.35 g， 60.2 mmol), 缓慢滴加 250 mL 1-(3-二甲基氨基-丙基) -3- 乙基-碳二亚胺盐酸盐 (8.28 g， 43.2 mmol)的二氯甲垸悬浊液， 室温下搅拌 36小 时后，用 5 %硫酸氢钾溶液 (250 mLx7)和饱和氯化钠溶液 (250 mLx2)洗涤反应液， 无水硫酸镁干燥， 抽滤， 减压浓缩滤液， 得到标题产物 2,2-二甲基 -5-[2-(2,4,5- 三氟苯基)-乙酰基 ]-[1,3] 二噁烷 -4,6-二酮 lb(11.4 g， 白色固体)， 收率： 96%。 MS m/z (ESI): 315.5(M-1)。
第二步
3-氧代 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸乙酯
将 2,2-二甲基 -5-[2-(2,4,5-三氟苯基) -乙酰基] -[1,3] 二噁烷 -4,6-二酮 lb(15.72 g， 49.6 mmol)撹拌下溶解于 280 mL乙醇中， 油浴 70°C下搅拌过夜。冷却， 减压 浓缩，用硅胶柱色谱法纯化所得残余物，得到标题产物 3-氧代 -4-(2,4,5-三氟苯基) - 丁酸乙酯 l.c(12 g， 黄色液体)， 收率： 88%。
MS m/z (ESI): 259(M-1)。
第三步
3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -2-烯酸乙酯 将 3-氧代 -4-(2，4,5-三氟苯基) -丁酸乙酯 lc(24.6 g， 94.5 mmol)溶解于 240 mL 甲醇中， 加入醋酸铵 (36.4 g， 473 mmol), 加热回流 3小时后， 薄层色谱跟踪反 应至原料消失， 减压浓缩反应液， 加入 100 mL水， 用乙酸乙酯 (200 ml 3)萃取， 合并有机相， 依次用 200 mL饱和氯化钠溶液洗搽， 无水硫酸镁干燥， 过滤， 向 滤液经减压浓缩得到的淡黄色固体中， 加入 50 mL乙酸乙酯， 在 80Ό下溶解， 加入 50 mL正己垸， 晶种， 冷却至室温下， 0.5小时后， 加入 100 mL正己烷， 置于冰箱中过夜， 抽滤， 得到标题产物 3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁 -2-烯酸乙酯 ld(19.5 g， 白色固体)， 收率： 80%。
MS m/z (ESI): 260.1 [M+1]
第四步
3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸乙酯 将 3-氧代 -4- (2,4,5-三氟苯基) -丁酸乙酯 ld(4.1 g， 15.8 mmol)加入高压釜中， 再加入 70 mL甲醇， 二碳酸二叔丁酯 (3.8 g, 17.4 mmol), 氯 (1,5-环辛二烯)铑 (I) 二聚体 (32 mg， 0.0632 mmol)和 (R)-l-[(S)-2- (二苯基膦基)二茂铁基]-乙基-叔丁基 膦 (68 mg， 0.126 mmol),在 30°C下， 6.67个大气压的氢气中反应 24小时。过滤， 减压浓缩滤液， 在 50Ό下加入 34 mL甲醇， 完全溶解后加入 12 mL水， 静置至 室温后， 在冰箱中过夜， 过滤， 用甲醇 /水 (v:v=3:2)混合溶剂洗涤固体产品， 真空 干燥， 得到标题产物 3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸乙酯 le(4 g， 淡 黄色固体)， 收率： 70%。
MS m/z (ESI): 362.4[M+1]。
第五歩
(R)-3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸 将 3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸乙酯 le(10 g， 27.7 mmol)和氢 氧化钠 (3.32 g， 83.1 mmol)搅拌下溶解于 100 mL甲醇和 50 mL水的混合溶剂中， 在 40-45Ό下反应 1-1.5小时后， 减压浓缩除去部分溶剂， 加入少量水， 在冰浴 下，加入 1N盐酸调节溶液 pH为 2-3，用乙酸乙酯 (200 mLx3)萃取，合并有机相， 用 200 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 用无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用 乙酸乙酯 /正己垸重结晶， 得到标题产物 (R)-3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯 基) -丁酸 lf(9.2 g， 白色固体)， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 332.3 [M-l]。
参考文献: Tetrahedron Asymmetry, 2006, 17(2), 205-209
第六步
C-吡嗪 -2-基 -甲胺
将 2-氰基吡嗪 lg(10.5 g, 100 mmol)搅拌下溶解于 150 mL 1,4-二氧六环中，加 Λ 1.0 g兰尼镍于 250 mL高压反应釜中， 在 60°C下， 40个大气压的氢气中反应 8小时。 过滤， 减压浓缩滤液， 得到标题产物 C-吡嗪 -2-基 -甲胺 lh (10.7 g,棕色 油状物)， 收率： 98%。
MS m/z (ESI): 110[M+1]。 第七步
2,2,2-三氟 -N-吡嗪 -2-甲基-甲酰胺
将 C-吡嗪 -2-基-甲胺 lh(10.9 g， lOO mmol)加入到反应瓶中，冰浴冷却至 0°C， 在 1小时内慢慢滴加 20 mL三氟乙酸酐， 室温下搅拌 2小时， 薄层色谱跟踪反 应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化， 得到标题产物 2,2,2-三 氟- N-吡嗪 -2-甲基-甲酰胺 li (21.0 g， 棕色油状物)。
MS m/z (ESI): 206.1 [M+l]。
第八步
3-三氟甲基-咪唑并 [l，5-a]吡嗪
室温条件下， 将 2,2,2-三氟- N-吡嗪- 2-甲基-甲酰胺 li(21.0 g， lOO mmol)加入 反应瓶中，加入 100 mL三氯氧磷，室温搅拌 30分钟后，加入五氧化二磷 (17.8 g, 125 mmol), 加热回流反应 5小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 除去溶剂三 氯化磷， 反应体系用去离子水淬灭反应， 再用 20%氢氧化钠溶液在冰浴中调节 pH为 5-6，用乙酸乙酯 (250 mLx4)萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，过滤， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱色谱法纯化， 得到标题产物 3-三氟甲基-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 lj(12.0 g， 黄色固体)， 收率： 65 %。
MS m/z (ESI): 188·0[Μ+1]。
!HNMR (400MHz, CDC13): δ 9.15(s, 1H), 8.06(d, 1H), 7.92(s, 1H)， 7.81(d, 1H)
第九步
3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 将 3-三氟甲基-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 lj (12.0 g， 64.2 mmol)搅拌下溶解于 150 mL 无水乙醇中， 加入 500 mg 10%钯 /碳， 在氢气氛下搅拌过夜。 用粗硅胶将反应液 过滤， 减压浓缩滤液， 得到标题产物 3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 lk(12.2 g, 棕色固体)， 收率： 99%。
^MR (400MHz, CDC13): δ 6.84(s， 1Η), 4.10(m, 4H), 3.26(m, 2H), 1.81(s, 1H) 第十步
(R)-[3-氧代 -l-(2,4,5-三氟苄基) -3-(3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H- 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯
氮气氛下，将 3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸 lk(8.6 g， 45 mmol), 9.4 mL三乙胺搅拌下溶解于 300 mL二氯甲烷中， 室温下搅拌 5分钟后， 依次加 入 3-三氟甲基 -5,6,7，8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 lf(15.0 g， 45 mmol)及双 (2-氧代 -3- 噁唑垸基)次膦酰氯 (17.1 g, 67.3 mmol), 室温下反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应 至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-氧代 -1-(2,4，5-三氟苄基) -3-(3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H- 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 11 (20.0 g， 白色固体)， 收率： 88%。 ¾ MR (400MHz, CD3OD): δ 7.25(m, 1H), 7.11(m, 1H), 7.032(s, 1H), 4.93(m, 2H), 4.35(m, 3H), 4.05(m, 2H), 2.99(m, 2H), 2.73(m, 2H), 1.34(s, 9H)
第十一步
(R)-[3-氧代小(2,4,5-三氟苄基)- 3-(l-溴 -3-三氟甲基- 5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a]吡
' 嗪 -7-基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯
将 (R)-[3-氧代小(2,4,5-三氟苄基) -3-(3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 11(20.0 g, 39.6 mmol)搅拌下溶解于 300 mL无水 乙醇中， 室温下加入 N-溴化琥珀酰亚胺 (14.1 g, 79.2 mmol), 继续搅拌 1小时后， 加入碳酸钾 (10.9 g, 79.2 mmol)和二碳酸二叔丁酯 (8.6 g, 39.6 mmol), 反应 1小时 后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 粗硅胶过滤反应液， 除去碳酸钾， 减压浓缩 滤液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-氧代 -1- (2,4,5-三氟 苄基) -3-(1-溴 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -丙基] -氨基甲酸 叔丁酯 lm(20.0 g, 白色固体)， 收率： 86%。
^MR (400MHz, CDC13): δ 7.063 (m, 1H), 6.88(m, 1H), 4.72(s, 1H), 4.56(s, 1H), 4.13(m, 3H), 3.88(m, 2H), 2.94(m, 2H), 2.62(m, 2H), 1.36(s， 9H)
第十二歩
(R)- 7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑 并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯
将八羰基二钴 (4.02 g, 11.76 mmol), 氯乙酸乙酯 (0.71 g, 5.88 mmol), 碳酸钾 (1.62 g, 11.76 mmol)以及 50 mL甲醇放入反应瓶中， 搅拌 5分钟后， 加入 (R)-[3- 氧代小(2,4,5-三氟苄基) -3-(1-溴 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 lm(2.3 g, 3.92 mmol)， 油浴 60°C下反应， 颜色由深褐 色变成紫色， 2小时后 ESI跟踪反应， 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色 谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯 基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪小甲酸甲酯 ln(l.l g, 白 色固体)， 收率： 50%。
MS m/z (ESI): 565·0(Μ+1)。
参考文献： Journal of Organometallic Chemistry, 1985, 285(1-3), 293-303
第十三步
(R)- 7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -1-甲酸甲酯盐酸盐
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯 In (0.12 g, 2.12 mmol)加入到 5 mL 2.2N的氯 化氢的乙酸乙酯溶液中， 室温下反应 5小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰 ]-3-三氟甲 基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5- a]吡嗪小甲酸甲酯盐酸盐 1(0.12 g,淡黄色固体)， 收 率： 94.3 % o
MS m/z (ESI): 465.2(M+1)。
^INMR (400MHz, CD3OD): δ 7.101-7.08(m, 1H), 6.906-6.864(m, 1H), 5.343-4.995 (m, 2H), 4.221-4.093 (m, 5H), 3.954(s， 3H), 2.978-2.937(m, 2H), 2.71 -2.643 (m, 2H), 2.06 l(s, 2H)。 实施例 2
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1- (2-甲磺酰-乙基)-甲酰胺盐酸盐
Figure imgf000022_0001
第一步
(R)- 7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并
[1,5- a]P比嗪- 1-甲酸
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯 ln(2.0 g, 3.5 mmol)搅拌下溶解于 50 mL甲醇 中， 加入 30 mL 4N的氢氧化钠溶液， 室温下反应 1小时后， 薄层色谱跟踪反应 至原料消失， 加入 2N盐酸调节反应液 pH值为 3， 用乙酸乙酯 (50 mLx4)萃取反 应液， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 得到标题产物 (R)- 7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(1.9 g,淡黄色固体)。
^MR (400MHz, CD3OD): 6 7.29-7.226(m, 1Η), 7.121-7.082(m, 1H), 5.151-5.028 (m, 2H), 4.409-4.064 (m, 5H), 2.984-2.769(m, 4H), 1.417-1.255(m, 9H)。
第二步
(R)-[3-[l-(2-甲磺酰基-乙基氨基甲酰) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪
-7-基] -3-氧代小(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g, 0.27 mmol)、 2-甲磺酸基乙胺 (65.5 mg, 0.41 mmol)和双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.104 g, 0.41 mmol)搅拌下溶解于 5 mL 二氯甲垸中， 加入三乙胺 (0.25 niL, 1.62 mmol), 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪 反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题 产物 (R)-[3-[l-(2-甲磺酰基-乙基氨基甲酰) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 2b(60 mg, 白色固 体)， 收率： 34%
MS m/z (ESI)： 678.2(M+23)。
参考文献： Journal of Organic Chemistry, 2006, 71(3), 1220-1225
第三步
(R)- 7-[3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪小 (2-甲磺酰-乙基)-甲酰胺盐酸盐
将 (R)-[3-[l-(2-甲磺酰基-乙基氨基甲酰) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代小(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 2b (0.06 g, 0.091 mmol)溶解于少量乙酸乙酯中， 加入 4 mL 3.1N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 4小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标 题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2，4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-(2-甲磺酰-乙基)-甲酰胺盐酸盐 2(60 mg, 白色固体)。
MS m/z (ESI): 556.3(M+1)。
^MR (400MHz, CD3OD): 57.44-7.35(m, 1H), 7.30-7.21 (m, 1H), 5.15-5.02(m, 2H): 4.53-4.45(m, 2H), 4.34- 4.27(m, 2H), 4.05-3.94(m, 4H), 3.89-3.62(s, 4H), 3.12-3.07(m: 2H), 3.03-2.82(m, 2H)。 实施例 3
(R)-3-氨基 -1-[1- (吗啉 -4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] _4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
Figure imgf000023_0001
第一步
(R)-[3-[l- (吗啉 -4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 小(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基- 4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]- 3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -1-甲酸 2a(60 mg, 0.109 mmol). 吗啉 (19 mg, 0.218 mmol)和双 (2—氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (53.5 mg, 0.218 mmol)搅拌下溶解于 5 mL二氯甲烷 中， 加入三乙胺 (0.1 mL, 0.65 mmol), 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原 料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残佘物， 得到标题产物 (R)-[3-[l- (吗啉 -4-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 3a(60 mg, 白色固体)， 收率： 89%。 MS m/z (ESI)： 620.0(M+1)。
第二步
(R)-3-氨基 -1-[1- (吗啉 - 4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基]— 4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
将 (R)-[3-[l-(吗啉 -4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 7- 基] -3-氧代小(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 3a (0.07 g, 0.11 mmol)溶解 于少量乙酸乙酯中， 加入 6 mL 3.1N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 4小 时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-3-氨 基小[1— (吗啉 4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5- 三氟苯基)-丁 -1-酮盐酸盐 3(70 mg,淡黄色固体)。
MS m/z (ESI): 520.2(M+1)。
^MR (400MHz, CD3OD): 57.42-7.37(m, 1H), 7.26-7.22(m, 1H), 5.15-5.05(m, 2H): 4.53-4.44(m, 2H), 4.34-4.26(m, 2H), 4.02-3.94(m, 4H), 3.89-3.84(m, 1H), 3.76-3.61(m, 4H), 3.11-3.06(m, 2H), 3.05-2.83(m, 2H)。 实施例 4
(R)- 7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1- (氰基甲基: )-甲酰胺盐酸盐
Figure imgf000024_0001
第一步
(R)-[3-[l- (氰基甲基 -氨基甲酰) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氧代小(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)- 7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪小甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol), 氨基乙腈硫酸盐 (85 mg, 0.41 mmol), 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.206 g, 0.81 mmol)和三乙胺 (0.37 mL, 2.7 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲烷中， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反 应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产 物 (R)- [3-[1- (氰基甲基 -氨基甲酰) -3-三氟甲基 -5，6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 4a(150 mg, 白色固体)， 收 率： 94.4%。
第二步
(R)-7- [3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6，7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪- 1 - (氰基甲基)-甲酰胺盐酸盐
将 (R)-[3-[l- (氰基甲基-氨基甲酰) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基]- 3-氧代小 (2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 4a (0.3 g, 0.25 mmol)溶 解于 10 mL二氯甲烷中， 加入 5 mL三氟乙酸， 室温下反应 1小时后， 薄层色谱 跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三 氟苯基)—丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪小 (氰基甲基)-甲酰胺 盐酸盐 4(130 mg,淡黄色固体：)。
MS m/z (ESI).- 489.2(M+1)。 实施例 5
(R)-3-氨基 -1-[1-(4-甲基-哌嗪小羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪
-7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮二盐酸盐
Figure imgf000025_0001
第一步
(R)-[3-[l-(4-甲基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5- a]吡嗪小甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol)、 1-甲基哌嗪 (54 mg, 0.54 mmol) 和双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)搅拌下溶解于 8 niL二氯甲 垸中， 加入三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol), 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-[l-(4-甲基 -哌嗪 -1-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氧代小 (2,4,5-三氟-节基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 5a(80 mg, 白色固体)， 收 率： 49%。
MS m/z (ESI): 633.2(M+1)。
第二步
(R)-3-氨基 -1-[1-(4-甲基-哌嗪- 1-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪
-7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁小酮二盐酸盐 将 (R)-[3-[l-(4-甲基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢- 8H-咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 5a (0.08 g, 0.126 mmol) 溶解于 6 mL 3.1N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应过夜后， 薄层色谱跟踪 反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-3-氨基 -1-[1-(4-甲基 -哌嗪 —1—羰基 )_3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基]- 4-(2,4,5-三氟苯基)-丁 -1-酮二盐酸盐 5(90 mg, 白色固体)。
MS m/z (ESI): 533.2(M+1)。
'HNMR (400MHZ, CD3OD): 67.45-7.38(m, 1H), 7.27-7.23 (m, 1H), 5.10-5.05(m, 2H): 4.35-4.28(m, 2H), 4.10-4.09(m, 1H), 4.00-3.95(m, 2H), 3.68-3.56(m, 4H), 3.35-3.24(m, 4H), 3.13(m, 2H), 3.00-2.88(m, 5H；)。 实施例 6
(R)-3-氨基 -1- [1-(1,1-二氧代-硫代吗啉 -4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
Figure imgf000026_0001
第一步
(R)-[3-[l-(l,l-二氧代-硫代吗啉 -4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2，4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]- 3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a (150 mg, 0.27 mmol)、硫吗啉 -1,1-二氧化物盐酸盐 (73 mg, 0.54 mmol), 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)和三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol)搅拌下溶解于 8 mL二氯甲烷中， 加入 4 mL Ν,Ν-二甲基甲 酰胺， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅 胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-[l-(l,l-二氧代-硫代吗啉 -4-羰 基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -7-基] -3-氧代小(2,4,5-三氟苄基) - 丙基] -氨基甲酸叔丁酯 6a(170 mg， 白色固体)， 收率： 94%。
MS m/z (ESI): 668.1(M+l)o
第二步
(R)-3-氨基 -1-[1-(1,1-二氧代-硫代吗啉 -4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[1 ,5-a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1 -酮盐酸盐
将 (R)-[3-[l-(l,l-二氧代-硫代吗啉 -4-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 6a (0.15 g, 0.22 mmol)溶解于 4 mL 3. IN的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应过夜， 薄层 色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R 3-氨基 -1-[1-(1,1- 二氧代 -硫代吗啉- 4-羰基) -3-三氟甲基- 5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基]— 4-(2,4,5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐 6(140 mg,淡黄色固体)。
MS m/z (ESI): 568.2(M+1)。
lHNMR (400MHz, CD3OD): 57.45-7.39(m, 1H), 7.29-7.20(m, 1H), 5.10-5.04(m, 2H): 4.35-4.28(m, 2H), 4.16-4.09(m, 2H), 4.02-3.93(m, 5H), 3.27-3.13(m, 4H),
3.18-3.04(m, 2H), 2.99-2.85(m, 2H)。 实施例 7
Figure imgf000027_0001
第一步 (R)-[3-[l-(4-氨基甲酰 -哌啶 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗉 -7-基] -3-氧代小 (2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]- 3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol)、 4-氨甲酰基哌啶 (70 mg, 0.54 mmol)和双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)搅拌下溶解于 8 mL 二氯甲垸中，加入三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol),再加入 4 mLN,N-二甲基甲酰胺， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色 谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-[l-(4-氨基甲酰 -哌啶 -1-羰基) -3-三氟 甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [l，5-a]吡嗪- 7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨 基甲酸叔丁酯 7a(180 mg, 白色固体)， 收率： 98%。
MS m/z (ESI): 660.9(M+1)。
第二步
(R)小 {7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并
[1,5-a]吡嗪- 1-羰基 哌啶 -4-甲酰胺盐酸盐 将 (R)- [3-[1-(4-氨基甲酰 -哌啶 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基]- 3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基]-氨基甲酸叔丁酯 7a(0.18 g, 0.27 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中，加入 6 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 3.5小吋后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到 标题产物 (R)-l-{7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基]- 3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪 唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-羰基 } -哌啶 -4-甲酰胺盐酸盐 7(0.12 g, 白色固体)， 收率： 74%。 MS m/z (ESI): 561.2(M+1)。
!H MR (400MHz, CD3OD): 57.42-7.3 l(m, 1H), 7.28-7.16(m, 1H), 5.17-4.97(m, 2H): 4.43_4.24(m, 2H), 4.20-4.03(m, 1H), 4.03-3.89(m, 2H), 3.30-3.18(m, 2H), 3.17-3.06(m, 2H), 3.03-2.72(m, 4H), 2.65-2.53(m, 1H)， 2.15-2.03(m, 2H), 1.93-1.83(m, 2H), 1.77-1.60(m, 2H)。 实施例 8
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7，8-四氢咪唑并 [l，5-a] 吡嗪 -1-甲基甲酰胺盐酸盐
Figure imgf000028_0001
Figure imgf000029_0001
第一步
(R)- [3-(l-甲基氨基甲酰基- 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗉 -7-基) -3-氧 代小(2,4,5-三氟- 基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5，6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪小甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol),甲胺盐酸盐 (36.5 mg, 0.54 mmol) 和双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)搅拌下溶解于 8 mL二氯 甲烷中， 加入三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol), 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应 至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)- [3-(1-甲基氨基甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧 代 -1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 8a(150 mg, 白色固体)， 收率： 98.6 %。
MS m/z (ESI): 563.9(M+1)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5- a] 吡嗪 -1-甲基甲酰胺盐酸盐 '
将 (R)-[3-(l-甲基氨基甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 8a (0.15 g, 0.27 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中， 加入 5 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下 反应 4小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7- [3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪- 1-甲基甲酰胺盐酸盐 8(0.135 g, 白色固体)， 收率： 90%。
MS m/z (ESI): 464.2(M+1)。
iHNMR (400MHz, CD3OD): 57.40-7.38(m, 1H), 7.23 (m, 1H), 5.13-5.04(m, 2H), 4.31-4.25(m, 2H), 4.07(m, 1H), 3.96(m, 2H), 3.10(m5 2H), 2.99-2.76(m, 5H)。 实施例 9
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5，6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-二甲基甲酰胺盐酸盐
Figure imgf000030_0001
第一步
(R)-[3- (1-二甲基氨基甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基)- 3- 氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基- 4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]- 3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol)、 二甲胺盐酸盐 (44 mg, 0.54 mmol)和双 (2-氧代 -3-噁唑垸基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)搅拌下溶解于 8 mL 二氯甲烷中， 加入三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol), 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪 反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题 产物 (R)-[3-(l-二甲基氨基甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -3-氧代 -1- (2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 9a(120 mg, 白色固体)， 收 率： 77%。
MS m/z (ESI): 578.1(M+1)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-二甲基甲酰胺盐酸盐
将 (R)-[3-(l-二甲基氨基甲酰 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -3-氧代小 (2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 9a(0.138 g, 0.245 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中， 加入 4 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温 下反应 3小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产 物 (R)- 7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-二甲基甲酰胺盐酸盐 9(0.12 g, 白色固体)， 收率： 98%。
MS m/z (ESI): 478.2(M+1)。 实施例 10
(R)-7-[3-氨基 -4-(2，4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸盐酸盐
Figure imgf000031_0001
第一歩
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]- 3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸盐酸盐
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(218 mg, 0.4 mmol)加入反应瓶中， 加入 5 mL氯化氢 乙醇溶液， 室温下反应， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到 标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5，6,7,8-四氢咪唑 并 [1,5-a]吡嗪小甲酸盐酸盐 10(60 mg, 白色固体)， 收率： 30.8%。
MS m/z (ESI): 451.2(M+1)。
iHNMR (400MHz, CD3OD): δ 7.416-7.37(m, 1H), 7.281-7.234(m, 1H), 5.189-5.053 (m, 2H), 4.361-4.286 (m, 1H), 4.15-3.999(m, 2H), 3.941-3.925(m, 2H), 3.212-2.883 (m, 2H), 2.861-2.805(m, 2H)。 实施例 11
(R)-3-氨基 -l-[l-(3-氨基 -哌啶 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 — 7—基]—4-(2,4,5-三氟苯基)-丁小酮二盐酸盐
Figure imgf000031_0002
第一步
哌啶 -3-基-氨基甲酸叔丁酯
将 (R)-3-氨基哌啶盐酸盐 lla(3 g, 22.1 mmol)和碳酸钾 (6.1 g, 44.2 mmol)搅拌 下溶解于 60 mL甲醇中，搅拌 30分钟后，加入二碳酸二叔丁酯 (4.8 g, 22.1 mmol), 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色 谱法纯化所得残余物， 得到标题产物哌啶 -3-基-氨基甲酸叔丁酯 llb(1.3 g,油状 液体)， 收率： 29%。
MS m/z (ESl): 201.0(M+1)。
第二步
(R)-(l-{7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基- 5,6,7,8-四 氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-羰基 } -哌啶 -3-基) -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)- 7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.12 g, 0.218 mmol), 哌啶 -3-基-氨基甲酸叔丁酯 llb(0.173 g, 0.545 mmol)和三乙胺 (0.275 g, 2.18 mmol)搅拌下溶解于 12 mL二氯 甲烷中， 室温下加入双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.138 g, 0.545 mmol), 反应 过夜， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-(l-{7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四 氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 1-羰基 } -哌啶 -3-基) -氨基甲酸叔丁酯 llc(0.1 g, 油状液体)， 收率： 63 %。 .
MS m/z (ESI): 733.1(M+1)。
第三步
(R)-3-氨基 -1-[1-(3-氨基 -哌啶 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪
-7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁小酮盐二酸盐 将 (R)-(l-{7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-羰基 } -哌啶 -3-基) -氨基甲酸叔丁酯 llc(0.1 g, 0.163 mmol)加入 10 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯溶液中， 室温下反应过夜， 薄 层色谱跟踪反应至原料消失，减压浓缩反应液，得到标题产物 (R)-3-氨基 -1-[1-(3- 氨基 -哌啶 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三 氟苯基) -丁 -1-酮二盐酸盐 11(0.09 g, 白色固体)， 收率： 98%。
MS m/z (ESI): 533.3(M+1)。
JHNMR (400MHz, CD3OD): δ 7.415-7.396(m, 1H), 7.26-7.2154(m, 1H), 5.131-4.085 (m, 11H), 3.994-2.837 (m, 8H), 2.11-1.846(m, 5H)。 实施例 12
(R)-3-氨基 -1-[1- (吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
Figure imgf000033_0001
第 ~ ^步
(R)-[3-氧代 -3-[l - (吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基]小(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基- 4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基]- 3-三氟甲基 -5,6,7，8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol)、 吡咯烷 (38.4 mg, 0.54 mmol)和 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)搅拌下溶解于 8 mL二氯甲 垸中， 加入三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol), 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-氧代 -3-[1- (吡咯烷小羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -1- (2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 12a (120 mg, 白色固体)， 收率： 74%。
第二歩
(R)-3-氨基 -1-[1- (吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -4-(2，4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
将 (R)-[3-氧代 -3-[1- (吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基] -1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 12a(0.12 g, 0.199 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中， 加入 4 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下 反应 3小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-3-氨基小[1- (吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐 12(0.10 g, 白色固体)， 收率： 94%。
MS m/z (ESI): 504.2(M+1)。 实施例 13
(R)-3-氨基 -1-[1-哌嗪小羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮二盐酸盐
Figure imgf000034_0001
第一步
(R)-4-{7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4，5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1 ,5-a]吡嗪- 1 -羰基 } -哌嗪- 1 -甲酸叔丁酯 将 (R)- 7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1 -甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol)、 1-甲酸叔丁酯哌嗪 (100.6 mg, 0.54 nimol)、 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)和三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol)搅拌下溶解于 6 mL二氯甲烷中， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟 踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标 题产物 (R)-4-{7- [3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-羰基 } -哌嗪 -1-甲酸叔丁酯 13a (200 mg, 白色固 体)， 收率： 99%。
MS m/z (ESI): 719.0(M+1)。
第二步
(R)-3-氨基 -1-[1-哌嗪 -1-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -7- 基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮二盐酸盐
将 (R)-4-{7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4，5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-羰基 } -哌嗪小甲酸叔丁酯 13a(0.12 g, 0.199 mmol)加入反应瓶中， 加入 5 mL 2.3N的氯化氢的甲醇溶液， 室温下反应过夜， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-3-氨基 -1-[1-哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三 氟苯基) -丁 -1-酮二盐酸盐 13(0.10 g, 白色固体)， 收率： 94%。
MS m/z (ESI): 504.2(M+1)。
^MR (400MHz, CD3OD): 57.45-7.40(m, 1H), 7.26-7.23(m, 1H), 5.10-5.04(m, 2H), 4.71 .46(m, 2H), 4.42-4.24(m, 2H), 4.18-4.06(m, 2H), 4.06-3.89(m, 3H), 3.78-3.55(m, 4H), 3.24-3.06(m, 2H), 3.06-2.80(m, 2H)。 实施例 14 (R)-3-氨基 -l-[l-((R)-3-羟基 -P比咯垸 - 1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁 -1-酮盐酸盐
Figure imgf000035_0001
第一步
(R)-[3-[l-((R)- 3-羟基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪
-7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)- 7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2，4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基- 5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol), (R)-3-羟基吡咯烷 (47 mg, 0.54 mmol), 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)和三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol)搅拌下溶解于 6 mL二氯甲垸中， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反 应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产 物 (R)-[3-[l-((R)- 3-羟基 -P比咯烷 -1-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 14a (90 mg, 白色固 体)， 收率： 53 %。
MS m/z (ESI): 620舉+1)。
第二步
(R)-3-氨基 -l-[l-((R)-3-羟基-吡咯垸小羰基 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐 将 (R)-[3-[l-((R)-3-羟基 -P比咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 14a(90 mg, 0.15 mmol)加入 10 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯溶液，室温下反应过夜，薄层色 谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得 到标题产物 (R)-3-氨基 -l-[l-((R)-3-羟基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H- 咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐 14(60 mg, 白色固体)， 收率： 72%
MS m/z (ESI): 520·3(Μ+1)。
!HNMR (400MHz, CD3OD): δ 7.417-7.372(m, 1H), 7.275-7.234(m, 1H), 5.527-4.87 (m, 2H), 4.87-4.346 (m, 1H), 4.346-4.117(m, 2H), 4.117-3.352(m, 8H), 3.349- 2.98(m, H), 2.98-2.088(m, 2H), 2.088-2.029 (m, 2H)。 实施例 15
(R)-7-[3-氨基- 4- (2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1, 吡嗪 -1-环丙基甲酰胺盐酸盐
Figure imgf000036_0001
第一歩
(R)-[3-[l- (环丙基氨基甲酰基 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氧代小 (2,4,5-三氟- 基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.2 g, 0.36 mmol)、 环丙基胺 (0.05 g, 0.54 mmol)和双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.18 g, 0.72 mmol)搅拌下溶解于 20 mL二氯甲烷 中， 室温下加入三乙胺 (0.36 g, 3.6 mmol), 室温下反应 2小时， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物，得到标题产物 (R)-[3-[l- (环丙基氨基甲酰基 )-3- 三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙 基] -氨基甲酸叔丁酯 15a(0.1 g,油状液体)， 收率： 45 %。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪小环丙基甲酰胺盐酸盐
将 (R)-[3-[l- (环丙基氨基甲酰基 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 15a (0.1 g, 0.16 mmol)加 入 5 mL 2.2N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至 原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-环丙基甲酰胺盐酸盐 15(82 mg,淡黄色固体)， 收率： 95 %。
MS m/z (ESI): 490.2(M+1)。
1HNMR (400MHz, CD3OD): δ 7.423-7.174 (m, 2Η), 5.284-4.872 (m, 2H),
4.716-2.019 (m， 10H), 2.019 (s, 2H), 1.349-1.191(m, 2H), 0.907-0.596 (m, 2H)。 实施例 16
(R)-({7- [3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-羰基 氨基) -乙酸甲酯盐酸盐
Figure imgf000037_0001
第一步
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪小甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol)和氨基-乙酸甲酯盐酸盐 （512 mg, 0.408 mmol)搅拌下溶解于 8 mL二氯甲烷中， 加入三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol),搅拌 5分钟后，加入双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol), 室温下反应 20小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶 柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-({7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三 氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪小羰基 }-氨基) -乙酸 甲酯 16a (90 mg,淡黄色油状物)， 收率： 53.6%。
第二步
将 (R)- ({7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-羰基 }-氨基) -乙酸甲酯 16a(0.09 g, 0.145 mmol)及 2 mL 乙酸乙酯加入反应瓶中， 加入 4 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 3 小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓縮反应液， 得到标题产物 (R)-({7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-羰基 }-氨基) -乙酸甲酯盐酸盐 16(80 mg, 白色固体)， 收率： 99%。
MS m/z (ESI): 522.2(M+1)。
iHNMR (400MHz, CD3OD): S7.47-7.30(m, 1H), 7.30-7.14(m, 1H), 5.23-5.00(m, 2H); 4.39-4.20(m, 2H), 4.18-4.06(m, 3H), 4.17-4.07(m, 3H), 4.01-3.89(m, 2H), 3.84-3.24(m, 3H), 3.20-2.76(m, 4H)。 实施例 17
(R)小 [1_(4-乙酰基-哌嗪小羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
Figure imgf000038_0001
第一步
(R)-[3-[l-(4-乙酰基 -哌嗪 -1-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基- 4- (2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪小甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol), 1-哌嗪 -1-基 -乙酮盐酸盐（90 mg, 0.54 mmol)和双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)搅拌下溶 解于 8 mL二氯甲垸中， 加入三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol), 室温下反应过夜， 薄 层色谱跟踪反应至原料消失，减压浓缩反应液，用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-[l-(4-乙酰基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 17a (80 mg, 白色固体)， 收率： 45 %。
MS m/z (ESI): 660.9(M+1)。
第一步
(R)小 [1-(4-乙酰基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐 将 (R)-[3-[l-(4-乙酰基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基] -3-氧代 -1- (2,4，5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 17a(0.08 g, 0.12 mmol) 及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中， 加入 2 mL 2.7N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室 温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-l-[l-(4-乙酰基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐 17(70 mg, 白色固体)， 收率： 98 %。 MS m/z (ESI): 561.2(M+l
!ΗΝΜΚ (400MHz, CD3OD): 87.50-7.36(m, 1H), 7.33-7.15(m, 1H), 5.23-4.97(m, 2H); 4.60-4.06(m, 5H), 4.06-3.88(m, 2H), 3.88-3.48(m, 6H), 3.24-2.7 l(m, 4H), 2.26-2.12(m, 3H)。 实施例 18
(R)- 3-氨基 -l-[l-(2-羟基甲基-吡咯烷- 1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 - 1 -酮盐酸盐
Figure imgf000039_0001
第一步
(R)-[3-[l-(2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基- 5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪小甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol)、 （R)-吡咯烷 -2-基甲醇 (54.6 mg, 0.54 mmol)、 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)和三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol)搅拌下溶解于 8 mL二氯甲烷中， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟 踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标 题产物 (R)-[3-[l-(2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 18a (120 mg, 无色油状物)， 收率： 70%。
MS m/z (ESI): 633.9(M+1)。
第二步
(R)- 3-氨基 -1-[1-(2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[I,5- a]吡嗪- 7_基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁小酮盐酸盐 将 (R)-[3-[l-(2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 18a (0.12 g, 0.19 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中，加入 4 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯 溶液， 室温下反应 3小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-3-氨基 -1-[1-(2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐 18(0.12 g, 白色固 体)， 收率： 88 %。
MS m/z (ESI): 534.2(M+1)。
'HNMR (400MHZ, CD3OD): 87.39-7.35(m, 1H), 7.23-7.19(m, 1H), 5.16-5.04(m, 2H), .33-4.26(m, 2H), 4.15-4.09(m, 2H), 3.98(m, 1H), 3.86-3.57(m, 5H), 3.04(m, 2H), .93-2.86(m, 1H), 2.82-2.72(m, 1H) 实施例 19
(R)- 4-{7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -1-羰基 } -哌嗪 -2-酮盐酸盐
Figure imgf000040_0001
第一步
(R)-[3-氧代 -3-[1-(3-氧代 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基- 5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基 ]小(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(150 mg, 0.27 mmol), 2-羰基哌嗪 (60 mg, 0.6 mmol), 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次膦酰氯 (0.138 g, 0.54 mmol)、三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol) 和 8 mL二氯甲烷加入反应瓶中， 加入 10 niL N,N-二甲基甲酰胺， 室温下反应过 夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得 残余物， 得到标题产物 (R)-[3-氧代 -3-[1-(3-氧代 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二 氢— 8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基]小(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 19a (140 mg,无色油状物)， 收率： 82%。
MS m/z (ESI): 632·7(Μ+1)。
第二步
(R 4-{7-[3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -1-羰基 } -哌嗪 -2-酮盐酸盐
将 (R)-[3-氧代 -3-[1-(3-氧代 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 19a (0.14 g, 0.22 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中，加入 4 mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应过夜后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题 产物 (R)-4-{7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-羰基 } -哌嗪 -2-酮盐酸盐 19(0.12 g, 白色固体)， 收率： 93 %。 MS m/z (ESI): 533.2(M+1)。
!HNMR (400MHz, CD3OD): δ 7.38(m, 1H), 7.24-7.22(m, 1H), 5.08-5.01(m, 2H): 4.57(m, 2H), 4.32-4.27(m, 2H), 4.08(m, 1H), 3.97-3.94(m, 4H), 3.47(m, 2H), 3.11(nx 2H), 2.97-2.84(m, 2H)。 实施例 20
(R)-3-氨基 -1- [1- (噻唑烷 -3-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -7- 基] -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐
Figure imgf000041_0001
第一步 ' '
(R)-[3-氧代 -3-[1- (噻唑烷 -3-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基]- 1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基- 4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g, 0.27 mmol)、 噻唑烷 (57 mg, 0.6 mmol)、三乙 胺 (0.275 g, 2.72 mmol)和双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.138 g, 0.544 mmol)搅 拌下溶解于 10 mL二氯甲烷中， 室温下搅拌 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料 消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3- 氧代 -3-[1-(噻唑烷 -3-羰基 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -Ί- 基] -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 20a(0.15 g, 白色固体)， 收率： 89 %。
MS m/z (ESI)： 644.1 (M+23)。
" 第二步
(R)-3-氨基 -1-[1- (噻唑烷 -3-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
将 (R)-[3-氧代 -3-[1- (噻唑烷 -3-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基]小(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 20a (0.15 g, 0.24 mmol)加入到 5 mL 2.2 N氯化氢的乙酸乙酯溶液中， 室温下反应 4小时， 薄层色谱跟踪反应至 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-3-氨基 -1-[1- (噻唑烷 -3-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁小酮盐酸盐 20(100 mg,淡黄色固体)， 收率： 75 %。 MS m/z (ESI): 522· 1(Μ+1)。
^MR (400MHz, CD3OD): δ 7.447-7.358(m, 1H), 7.3-7.204(m, 1H), 5.217-5.05(m: 2H), 4.752-4.461 (m, 2H), 4.37-4.284(m, 2H), 4.284-4.086(m, 2H), 4.086-3.952(m, 2H), 3.719-3.607(m, 1H), 3.211-2.827(m, 4H), 2.827-2.784(m, 2H)。 实施例 21
(R)-7— [3—氨基—4— (2,4,5-三氟苯基) -丁酰 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡 嗪- 1- (吡啶 -3-基)甲酰胺二盐酸盐
Figure imgf000042_0001
第一步
(R)- [3-氧代 -3- [1- (吡啶 -3-基氨基甲酰基 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪- 7-基] -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g, 0.272 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲垸 中， 加入 3-氨基吡啶 (38.4 mg, 0.41 mmol), 三乙胺 (0.275 g, 2.72 mmol)和双 (2-氧 代 _3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.138 g, 0.544 mmol), 室温下搅拌过夜， 薄层色谱跟踪 反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题 产物 (R)-[3-氧代 -3-[1- (吡啶 -3-基氨基甲酰基 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 21a(0.1 g, 白色固 体)， 收率： 58.8 %。
MS m/z (ESI)： 627.1 (M+l)。
• 第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [l，5-a]卩比 嗪 -1- (吡啶 -3-基)甲酰胺二盐酸盐
将 (R)-[3-氧代 -3-[1- (吡啶 -3-基氨基甲酰基 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -1 -(2,4,5-三氟- 基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 21a(0.1 g, 0.16 mmol) 加入到 10 mL 2.2 N氯化氢的乙酸乙酯溶液中， 室温下反应 4小时， 薄层色谱跟 踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标 题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1- (吡啶 - 3-基)甲酰胺二盐酸盐 21(80 mg, 白色固体)， 收率： 89%。 MS m/z (ESI): 527·2(Μ+1)。
^MR (400MHz, CD3OD): δ 9.584(s, 1H), 8.88-8.857(m, 1H), 8.63-8.601(m, 1H), 8.115-8.07(m, 1H), 7.438-7.215(m, 2H), 5.209-5.137(m, 2H), 4.87-3.937(m, 5H), 3.34-2.902(m, 5H), 2.06 l(m, 2H)。 实施例 22
(R)- 3-氨基 -l-[l-(4-甲磺酰基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -4- (2,4,5-三氟苯基)-丁 -1-酮盐酸盐
Figure imgf000043_0001
第一步
(R)-[3-[l-(4-甲磺酰基-哌嗪- 1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪
-7-基] -3-氧代 -1-(2，4,5-三氟- 基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)- 7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g, 0.27 mmol)、 1-甲磺酰基 -哌嗪 (0.109 g, 0.55 11111101)和三乙胺(0.38 mL, 2.7 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲烷中， 加入双 (2- 氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.139 g, 0.55 mmol),室温下搅拌反应过夜，薄层色谱 跟踪反应至原料消失，减压浓縮反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到 标题产物 (R)-[3-[l-(4-甲磺酰基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 22a(0.2 g, 白 色固体)。
MS m/z (ESI): 696.9(M+l)o
第二步
(R)-3-氨基 -l-[l-(4-甲磺酰基 -哌嗪 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5，6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -4-(2，4,5-三氟苯基) -丁小酮盐酸盐 将 (R)- [3- [1-(4-甲磺酰基-哌嗪小羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 22a (0.19 g, 0.27 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中，加入 4 mL 2.7N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 3小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标 题产物 (R)- 3-氨基 -1-[1- (4-甲磺酰基 -哌嗪 -1-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑 并 [1,5- a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4，5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐 22(170 mg, 白色固体)， 收 率： 99%
MS m/z (ESI): 597.2(M+1)。
!HNMR (400MHz, CD3OD): 57.46-7.34(m, IH), 7.33-7.20(m, IH), 5.18-5.07(s, IH), 5.06-4.97(s, IH), 4.56-4.28(m, 4H)， 4.17-4.07(m, IH), 4.03-3.78(m, 4H)， 3.73-3.17(m: 3H), 3.16-2.75(m, 8H)。 实施例 23
(R)-7-[3-氨基- 4- (2,4,5-三氟苯基) -丁酰 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1 ,5-a] 嗪小甲酸乙酯盐酸盐
Figure imgf000044_0001
第一步
(R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基) -丁酰 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑 并 [1,5-a]吡嗪- 1-甲酸乙酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.16 g, 0.29 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲烷 中， 加入乙醇 (0.05 mL, 0.87 mmol), 三乙胺 (0.202 mL, 1.45 mmol)和双 (2-氧代 -3- 噁唑垸基)次磷酰氯 (0.148 g, 0.58 mmol), 室温下搅拌反应 5小时后， 薄层色谱跟 踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标 题产物 (R)- 7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸乙酯 23a(0.1 g,无色油状液体)。
MS m/z (ESI): 579.0(M+1)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -1-甲酸乙酯盐酸盐 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基- 5,6,7,8- 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 1-甲酸乙酯 23a (0.09 g, 0.156 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入 反应瓶中， 加入 4 mL 2.7N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 3小时后， 薄 层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 - 4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸乙 酯盐酸盐 23(80 mg, 白色固体)， 收率： 99%。
MS m/z (ESI): 479.1(M+1)。
iHNMR (400MHz, CD3OD): 57.50-7.45(m, 1H), 7.40-7.18(m, 1H), 5.20-5.00(m, 2H): 4.5-4.22(m, 4H), 4.15-4.06(m, 1H), 4.06-3.89(m, 2H), 3.23-2.78(m, 4H), 1.40-1.48(m; 3H)。 实施例 24
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6，7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酰胺盐酸盐
Figure imgf000045_0001
第一步
(R)-[3-(l-氨基甲酰 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代 小(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7，8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g, 0.27 mmol)、双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰 氯 (0.206 g, 1.08 mmol)和三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol)搅拌下溶解于 10 mL四氢呋 喃中， 搅拌 10分钟后， 加入碳酸铵 (78 mg, 0.81 mmol), 室温下搅拌反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失，减压浓缩反应液，用硅胶柱色谱法纯化所得残余 物， 得到标题产物 (R)-[3-(l-氨基甲酰 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代小(2,4，5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 2½(0.162 g, 白色固体)。 MS m/z (ESI): 549.9(M+1)。
第二歩
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酰胺盐酸盐
将 (R)-[3-(l-氨基甲酰 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 7-基)- 3-氧 代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 24a (0.16 g, 0.29 mmol)及 2 mL乙酸 乙酯加入反应瓶中， 加入 5 mL 2.7N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 3小 时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7-[3- 氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7，8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲 酰胺盐酸盐 24(150 mg， 白色固体)， 收率： 95 %。
MS m/z (ESI): 450.2(M+1)。
IHNMR (400MHz, CD3OD): 57.40-7.36(m, 1H), 7.28-7.22(m, 1H), 5.14-5.05(m, 2H) 4.34-4.27(m, 2H), 4.10-4.07(m, 1H), 3.99-3.94(m, 1H), 3.21-3.09(m, 2H), 3.02-2.85(m, 1H), 2.82-2.76(m, 1H)。 实施例 25
(R)-3-氨基 -1- [1-((R)- 3-氟-吡咯烷- 1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基]斗(2,4,5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐
Figure imgf000046_0001
第一步
(R)-[3-[l-((R)-3-氟-吡咯垸 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氧代 -1-(2,4，5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基- 4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g, 0.27 mmol),双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷 酰氯 (0.140 g, 0.54 mmol)、 三乙胺 (0.4 mL, 2.6 mmol)和 (R)-3-氟吡咯烷盐酸盐 (68 mg, 0.54 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲垸中， 室温下搅拌反应过夜， 薄层色 谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得 到标题产物 (R)-[3-[l-((R)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代小(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 25a(0.162 g, 白色固体)。 ' MS m/z (ESI): 622.0(M+l) c 第二步
(R)-3-氨基 ((R)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -4-(2,4，5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐 将 (R)-[3-[l-((R)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 25a (0.15 g, 0.27 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中，加入 5 mL 2.7N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 3小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标 题产物 (R)-3-氨基 -1- [ ((R)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a]吡嗪- 7-基] -4- (2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐 25(140 mg, 白色固体)，收率： 94%。
MS m/z (ESI): 522.2(M+1)。
iHNMR (400MHz, CD3OD): 57.42-7.37(m, 1H), 7.26-7.22(m, 1H), 5.47-5.29(m, 1H): 5.18-5.10(m, 2H), 4.56-4.48(m, 1H), 4.37-4.28(m, 2H), 4.16-3.89(m, 5H), 3.74-3.68(m, 1H), 3.16-3.11(m, 2H), 3.07-2.77(m, 2H), 2.39-2.03(m, 2H)。 实施例 26
(R)-3-氨基小 [l-((S)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -4- (2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
Figure imgf000047_0001
第一歩
(R)-[3-[l-((S)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基] -3-氧代 -1-(2，4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g, 0.27 mmol)、双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰 氯 (0.140 g, 0.54 mmol)、三乙胺 (0.4 mL, 2.6 mmol)和 (S)-3-氟吡咯烷盐酸盐 (68 mg, 0.54 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲烷中，室温下搅拌反应过夜，薄层色谱跟 踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标 题产物 (R)-[3-[l-((S)-3-氟 -P比咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪- 7-基] -3-氧代 -l -(2,4,5-三氟苄基) -丙基]-氨基甲酸叔丁酯 26a(0.15 g, 白色固 体)， 收率： 89%。
MS m/z (ESI): 622.0(M+1)。
第二步
(R)-3-氨基小[1- ((S)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a] 吡嗪 -7-基]- 4-(2，4，5-三氟苯基)-丁 -1-酮盐酸盐 将 (R)-[3-[l-((S)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -3-氧代小 (2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 26a (0.15 g, 0.24 mmol)及 2 mL乙酸乙酯加入反应瓶中，加入 5 mL 2.7N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下反应 3小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标 题产物 (R)- 3-氨基- l-[l-((S)-3-氟-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -7-基] -4- (2,4,5-三氟苯基)-丁- 1-酮盐酸盐 26(140 mg, 白色固体)，收率： 94%。
MS m/z (ESI): 522.2(M+1)。
'HNMR (400MHZ, CD3OD): 57.42-7.37(m, 1H), 7.26-7.22(m, 1H), 5.47-5.29(m, 1H): 5.18-5.10(m, 2H), 4.56-4.48(m, 1H), 4.37-4.28(m, 2H), 4.16-3.89(m, 5H), 3.74-3.68(m, 1H), 3.16- 3.11(m, 2H), 3.07-2.77(m, 2H), 2.39-2.03(m, 2H)。 实施例 27
(R)-l-(l-乙酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -7-基) - -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1 -酮盐酸盐
Figure imgf000048_0001
第一步 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 将 3-三氟甲基-咪唑并 [l，5-a]吡嗪 lj(3.5g， 18.7mmol)溶解于 50 mL乙醇中， 搅拌下加入 0.5 g 10%钯 /碳， 在氢气氛下搅拌过夜， 反应完毕。 用硅藻土将反应 液过滤， 减压浓缩滤液， 得到的残留物用 100 mL乙醇洗涤， 得到的溶液在搅拌 下， 逐渐滴加二碳酸二叔丁酯 (6.2 g, 28.1mmol)的 100 mL乙醇溶液， 滴加完毕 后， 继续搅拌 30分钟后反应完毕。 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得 残余物， 得到本标题产物 3-三氟甲基- 5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁 酯 27a(3.7 g， 白色固体)， 产率： 68 %。
第二步
1-溴 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 在 100 mL千燥的烧瓶中加入上述步骤所得的化合物 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 27a(300 mg， 1.04mmol)和 50 mL乙醇， 搅 拌溶解后，加入 N-溴琥珀酰亚胺 (369 mg， 2.08mmol)， 得到的混合物在室温下搅 拌， 1小时后反应完毕， 将反应液在减压下浓缩， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余 物，得到本标题产物 1-溴 -3-三氟甲基 -5,6-二氢- 8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 7-甲酸叔丁 酯 27b (220 mg， 白色固体)， 产率： 57.8 %。
第二步
3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 7-叔丁酯 1-甲酉旨 将八羰基二钴 (5.54 g, 16.2 mmol)和碳酸钾(11.2 g, 81.1 mmol)搅拌下溶解于 100 mL甲醇中， 在 60°C搅拌 15分钟， 加入 1-溴 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑 并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 27b(3 g, 8.11 mmol)和氯乙酸甲酯 (5.25 g, 48.6 mmol), 在一氧化碳气氛下， 反应 6小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 将反 应液冷却至室温， 用硅胶过滤， 甲醇淋洗， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱色谱法纯化 所得残余物， 得到标题产物 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二甲 酸 7-叔丁酯 -1-甲酯 27c(1.92 g, 白色固体)，收率： 67%。（参考文献： J. Organomet. Chem, 1985, 293)
MS m/z (ESI): 350·5(Μ+1)。
, 第四步
3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8Η-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 7-叔丁酯 将 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 7-叔丁酯 1-甲酯
27c(1.92 g, 5.5 mmol)搅拌下溶解于 50 mL甲醇中，加入 30 mL 4N氢氧化钠溶液， 室温下反应 30分钟， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 加入 2N盐酸调节反应液 pH为 4-5， 用乙酸乙酯 (100 mLx3)萃取， 合并有机相， 无水硫酸镁干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 得到标题产物 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二 甲酸 7-叔丁酯 27d(2 g, 白色固体)， 直接用于下一步反应。 第五步
1- (甲氧基-甲基-氨基甲酰 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔 丁酯
将 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5- a]吡嗪 -1,7-二甲酸 7-叔丁酯 27d(1.84 g, 5.5 mmol)、 N-甲氧基甲胺 (0.805 g, 8.25 mmol)搅拌下溶解于 50 mL二氯甲垸中， 加入三乙胺 (3 mL, 22 mmol), 加入双 (2-氧代 -3-噁唑垸基)次磷酰氯 (2.1 g, 8.25 mmol), 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用 硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 1- (甲氧基-甲基-氨基甲酰 )-3-三氟 甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 7-甲酸叔丁酯 27e(2.1 g， 白色固体)。
MS m/z (ESI): 379.1(M+1)。
第六步
1-乙酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 7-甲酸叔丁酯 将 1- (甲氧基-甲基-氨基甲酰 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 甲酸叔丁酯 27e(0.3 g, 0.79 mmol)搅拌下溶解于 20 mL四氢呋喃中，在 0°C滴加甲 基溴化镁 (1.13 mL, 1.58 mmol), 在 0°C反应 1.5小时， 薄层色谱跟踪反应至原料 消失， 加入 50 mL饱和氯化铵溶液及 10 mL饱和氯化钠溶液， 用乙酸乙酯 (50 ml 3)萃取， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱 色谱法纯化所得残余物，得到标题产物 1-乙酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 27f(0.24 g,黄色油状液体)， 收率： 90 %。
MS m/z (ESI): 334.0(M+1)。
第七步
1-(3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-基) -乙酮 将 1-乙酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 27f(0.24 g, 0.72 mmol)搅拌下溶解于少量乙酸乙酯中， 加入 5 mL 2.7N氯化氢的 乙酸乙酯溶液中，室温下反应，薄层色谱跟踪反应至原料消失，减压浓缩反应液， 得到标题产物 1-(3-三氟甲基 -5，6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-基) -乙酮 27g，直接 用于下一步反应。
第八步
(R)-[3-(l-乙酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代
-1-(2,4，5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 1-(3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-基) -乙酮 27g(192 mg, 0.72 mmol)和 (R)-3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸 lf(0.24 g, 0.72 mmol)搅拌 下溶解于 20 mL二氯甲烷中， 加入三乙胺 (0.4 mL, 2.88 mmol), 搅拌均匀后， 加 入双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.275 g, 1.08 mmol), 室温下反应过夜， 薄层 色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-(l-乙酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢- 8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -3-氧代小 (2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 27h(0.3 g, 白色固体)。
MS m/z (ESI): 449.2(M+1)。
第九步
(R)-l- (1-乙酰基 -3-三氟甲基 -5，6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氨基
-4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
将 (R)-[3-(l-乙酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 27h(0.3 g, 0.55 mmol)搅拌下溶解于 2 mL乙酸乙酯中， 加入 5 mL2.4N氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下搅拌， 薄层色 谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得 到标题产物 (R)-l-(l-乙酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3- 氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐 27(0.15 g, 白色固体)， 收率： 57%。 MS m/z (ESI): 548·9(Μ+1)。
1HNMR (400MHz, CD3OD): δ 7.37(m, 1H), 7.26(m, 1H), 5.09(m, 1H), 5.02(d, 1H), 4.87-3.92(m, 5H), 3.1-2.78(m, 4H), 2.57(d, 2H)， 2.04(d, 1H)。 实施例 28
(R)-3-氨基 -1-(1-环戊基羰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) _ (2,4,5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐
Figure imgf000051_0001
第一步
1-环戊基羰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 将 1- (甲氧基-甲基-氨基甲酰 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 甲酸叔丁酯 27e(0.3 g, 0.79 mmol)搅拌下溶解于 20 mL四氢呋喃中，在 0°C滴加环 戊基溴化镁 (0.79 mL, 1.58 mmol), 在 0°C反应 3小时， 薄层色谱跟踪反应至原料 消失， 加入 50 mL饱和氯化铵溶液及 10 mL饱和氯化钠溶液， 用乙酸乙酯 (100 mlx3)萃取， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱 色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 1-环戊基羰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H- 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 28a(0.1 g,黄色油状液体)， 收率： 30 %。
MS m/z (ESI): 388.1(M+1)。
第二歩
环戊基 -(3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-基)-甲酮 将 1-环戊基羰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-甲酸叔丁酯 28a(0.1 g, 0.258 mmol)搅拌下溶解于少量乙酸乙酯中， 加入 5 mL 2.7N氯化氢的 乙酸乙酯溶液中， 室温下反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩 反应液， 得到标题产物环戊基 -(3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-基) - 甲酮 28b， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 288.2(M+1)。
第三步
(R)-[3-(l-环戊基羰基 -3-三氟甲基- 5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代
-1- (2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯盐酸盐 将环戊基 -(3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1，5- a]吡嗪 -1-基) -甲酮 28b(83 mg, 0.258 mmol)和 (R)-3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸 lf(0.129 g, 0.388 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲垸中， 加入三乙胺 (0.143 mL, 1.03 mmol), 搅 拌均匀后， 加入双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.099 g, 0.388 mmol), 室温下反 应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化 所得残余物，得到标题产物 (R)-[3-(l-环戊基羰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯盐酸盐 28c(0.11 g,橙色油状液体)， 收率： 72%。
MS m/z (ESI): 602.9(M+1)。
第四步
(R)-3-氨基 -1-(1-环戊基羰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁小酮盐酸盐
将 (R)-[3-(l-环戊基羰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3- 氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 28c(0.11 g, 0.183 mmol)搅拌下溶 解于 2 mL乙酸乙酯中， 加入 5 mL2.4N氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下搅拌， 薄层色谱跟踪反应至原料消失，减压浓縮反应液，用硅胶柱色谱法纯化所得残余 物， 得到标题产物 (R)-3-氨基 -1-(1-环戊基羰基- 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁小酮盐酸盐 28(80 mg,黄色固体)， 收率： 81 %。 MS m/z (ESI): 503.2(M+1)。
'H MR (400MHZ, CD3OD): δ 7.41 (m, 1H), 7.25 (m, 1H), 5.10(d, 1H), 4.87(s, 1H): 4.37-3.91(m, 6H), 3.14- 2.82(m, 4H), 2.03-1.72(m, 8H)。 实施例 29
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4，5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基_5,6，7，8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-(2-二甲氨基乙基) -甲酰胺二盐酸盐
Figure imgf000053_0001
第一步
(R)-[3-[l-(2-二甲基氨基-乙基氨基甲酰 )- 3-三氟甲基- 5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -3-氧代小 (2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g， 0.27 mmol),双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰 氯 (0.14 g, 0.54 mmol)和三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲 垸中，加入 Ν,Ν'-二甲基乙烷 -1,2-二胺 (48 mg, 0.54 mmol),室温下搅拌反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失，减压浓缩反应液，用硅胶柱色谱法纯化所得残余 物， 得到标题产物 (R)-[3-[l -(2-二甲基氨基 -乙基氨基甲酰)- 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代小(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 29a(0.1 g, 白色固体)。
第二步
(R)- 7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪- 1 -(2-二甲氨基乙基)-甲酰胺二盐酸盐 将 (R)-[3-[l-(2-二甲基氨基-乙基氨基甲酰 )-3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 29a(0.10 g, 0.16 mmol)搅拌下溶解于 2 mL乙酸乙酯中，加入 6 mL2.4N氯化氢的乙酸乙酯溶 液， 室温下反应 4小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 加入 5 mL乙酸乙酯， 搅拌， 过滤， 用乙酸乙酯淋洗白色固体， 得到标题产物 (R)-7-[3- 氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)—丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5，6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-(2- 二甲氨基-乙基)-甲酰胺二盐酸盐 29(80 mg， 白色固体)， 收率： 63 %。
1HNMR (400MHz, CD3OD): S7.46- 7.39(m, 1H), 7.29-7.23 (m, 1H), 5.18-5.09(m, 2H): 4.37-4.27(m, 2H), 4.15-4.09(m, 1H), 4.00-3.95(m, 1H), 3.77-3.75 (m, 2H), 3.39-3.35(m, 2H), 3.13-3.12(m, 2H), 3.02(s, 3H), 3.01(m， 4H), 2.98-2.88(m, 1H)。 实施例 30
(R)-3-氨基 -1-[1-((S)2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰基) - 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -7-基] -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐
Figure imgf000054_0001
第一步
(R)-[3-[l- ((S)-2-羟基甲基-吡咯垸- 1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢- 8H-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7-基] -3-氧代小 (2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)- 7- [3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪小甲酸 2a(0.15 g, 0.27 mmol)、(S)-吡咯烷 -2-基甲醇 (54.62 mg, 0.54 mmol)和三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲垸中， 加入 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.14 g, 0.54 mmol)， 室温下搅拌反应过夜， 薄层 色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-[3-[l-((S)-2-羟基甲基-吡咯院 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H- 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 30a(0.2 g, 白色固体)。
第二步 '
(R)-3-氨基 -1-[1-((S)2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -7-基] -4- (2,4，5-三氟苯基) -丁 -1-酮盐酸盐 将 (R)-[3-[l-((S)-2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰基) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -7-基] -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 30a (0.16 g, 0.25 mmol)及 2 mL二氯甲烷加入反应瓶中，加入 5 mL 2.7N的氯化氢的甲醇溶液， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色 谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-3-氨基 -1-[1-((S)2-羟基甲基-吡咯烷 -1-羰 基) -3-三氟甲基- 5,6-二氢- 8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -4- (2,4,5-三氟苯基) -丁 -1-酮 盐酸盐 30(120 mg, 白色固体)， 收率： 84%。
]HNMR (400MHz, CD3OD): S7.34- 7.30(m, 1H), 7.19-7.12(m, 1H), 5.10-4.92(m, 2H), 4.27-4.25(m, 2H), 4.21-4.18(m, 1H), 4.06-3.98(m, 2H), 3.91-3.90(m, 1H), 3.84-3.80(m, 1H), 3.72-3.48(m, 3H), 3.03-2.99(m, 2H), 2.93-2.73 (m, 2H), 2.01-1.85(m, 4H)。 实施例 31
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]- 3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1- (吡啶 -2-基)甲酰胺二盐酸盐
Figure imgf000055_0001
第一步
(R)-[3-氧代 -3-[1- (吡啶 -2-基氨基甲酰) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7-基]小(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酰叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15 g, 0.27 mmol)、 2-氨基吡啶 (51 g, 0.54 mmol) 和三乙胺 (0.25 mL, 1.62 mmol)搅拌下溶解于 10 mL二氯甲烷中，搅拌 20分钟后， 加入双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.14 g， 0.54 mmol), 室温下搅拌反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失，减压浓缩反应液，用硅胶柱色谱法纯化所得残余 物，得到标题产物 (R)-[3-氧代 -3-[1- (吡啶 -2-基氨基甲酰) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H- 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基]- 1-(2,4,5-三氟苄基) -丙基] -氨基甲酰叔丁酯 31a(0.1 g, 白 色固体)， 收率： 59%。
MS m/z (ESI): 627.1(M+1)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2，4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1- (吡啶 -2-基)甲酰胺二盐酸盐
将 (R)-[3-氧代 -3-[1- (吡啶 -2-基氨基甲酰) -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基] -1-(2，4,5-三氟苄基)-丙基] -氨基甲酰叔丁酯 31a (0.10 g, 0.16 mmol)及 2 mL二氯甲烷加入反应瓶中，加入 5 mL 2.7N的氯化氢的甲醇溶液，室 温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱 法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三 氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1 - (吡啶 -2-基）甲酰胺二盐酸盐 31(80 mg, 白色固体)， 收率: 95.2 % 0
MS m/z (ESI): 527.1 (M+1)。
]HNMR (400MHZ, CD3OD): 58.48(m, 2H), 8.08-8.05(m, 1 H), 7.65-7.63(m, 1 H)， 7.45- 7.41(m, 1H), 7.27-7.26(m, 1H), 5.24-5.17(m, 2H)， 4.43-4.34(m, 2H), 4.14(m, 1H), 4.05(ra, 1H), 3.96(m, 1H), 3.21 -3.03(m, 2H), 2.96-2.72(m, 2H)。 实施例 32
(R)-7-[3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1- (4-氟苯基)-甲酰胺盐酸盐
Figure imgf000056_0001
第一步
(R)-叔丁基 -4-(1-((4-氟苯基)氨甲酰 )-3- (三氟甲基) -5,6-二氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪
-7(8H)-基) -4-氧小(2,4,5-三氟苯基）氨基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -SA^- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.15g,0.27mmol)、双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.14g,0.54mmol),三乙胺 (0.25mL,1.62mmol)搅拌溶解于 10mL二氯甲烷中，将 4 一氟苯胺 (0.06g,0.54mmol)—次加入， 搅拌过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-叔丁基 -4-(1-((4-氟苯基)氨甲酰 )-3- (三氟甲基) -5,6-二氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7(8H)-基) -4-氧 -1-(2,4,5-三氟苯基)氨基甲酸叔丁酯 32a(0.12g， 白色固体)， 收率： 69%。
MS m/z (ESI): 643.9(M+1)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1- (4-氟苯基) -甲酰胺盐酸盐 将 (R)-叔丁基 -4-(l-((4-氟苯基)氨甲酰 )-3- (三氟甲基) -5,6-二氢咪唑并 [1,5-a]吡 嗪 -7(8H)-基) -4-氧 -1-(2,4，5-三氟苯基)氨基甲酰叔丁酯 32a(0.12g,0.186mmol)以及 2mL乙酸乙酯加入到反应瓶中， 再加入 8mL 2.7N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 搅 拌反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5- a] 吡嗪- 1- (4-氟苯基)-甲酰胺盐酸盐 32(110mg， 白色固体)， 收率： 100 %。
MS m/z (ESI): 544.1(M+1)。
1HNMR (400MHz, DMSO): 510.124(d, 1H), 8.190(s, 2H), 7.849(s, 1H), 7.552(m, 1H), 7.157(d, 2H), 5.023(m, 2H), 4.23 l (m, 2H), 3.897(m, 3H), 3.014(m, 4H), 2.0(m, 2H)。 实施例 33
(R)_ 7— [3—氨基 -4— (2,4,5三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5，6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸苄酯盐酸盐
Figure imgf000057_0001
(R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6，7，8-四氢咪 唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸苄酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.24g, 0.44mmol) 1-羟基-苯并-三氮唑（0.072g， 0.53mmol)以及 N -(3-二甲胺丙基) - N，-乙基碳二亚胺盐酸盐 (0.102g, 0.53mmol)搅 拌溶解于 10mL二氯甲垸中， 再加入苯甲醇 (0.1ml, 0.88mmol), 室温下搅拌反应 过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所 得残余物， 得到标题产物 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) - 丁酰 基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸苄酯 33a(0.056g， 白色固体)， 收率： 20%。
MS m/z (ESI): 640.9(M+1)。
第二步 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5- a] 吡嗪 -1-甲酸苄酯盐酸盐
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸苄酯 33a(0.056g,0.087mmol)与 2mL 2.7N的氯化氢的 乙酸乙酯溶液加入反应瓶中，室温下搅拌 2小时，薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基- 4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基]- 3-三氟 甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸苄酯盐酸盐 33(0.043g， 白色固体)， 收 率： 86%。
MS m/z (ESI): 541.2(M+1)。
1HNMR(400MHz, CD3OD): 7.526-7.498(m, 2H), 7.498-7.364(m, 5H), 5.415(s, 2H), 5.121-5.003(m, 2H), 4.498-3.820(m, 5H), 3.341-2.903(m, 4H)。 实施例 34
(R)- 7- [3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-(1-乙氧酰氧基)甲酸乙酯盐酸盐
Figure imgf000058_0001
第一步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-(1-乙氧酰氧基)甲酸乙酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4，5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪- 1-甲酸 2a(0.275g,0.5mmol)以及 4mLN,N-二甲基甲酰胺加入 到反应管中， 搅拌下依次加入 1-氯乙基碳酸乙酯 (0.092g,0.6mmol)、 碘化钾 (0.0415g,0.25mmol)、以及碳酸钾 (0.083g,0.6mmol)，封管置于油浴中控制外温 65°C 反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 将反应管冷却至室温后加入 40mL 水， 用乙酸乙酯萃取 (25mLx3)， 合并有机相用水洗 (20mLx2)， 无水硫酸镁干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-7-[3- 氨基 -4-(2,4，5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-(1- 乙氧酰氧基)甲酸乙酯 34a(0.26g,白色固体)， 收率： 78.1 %。
MS m/z (ESI): 666.9(M+1), 689.1(M+23)0 1HNMR (400MHz, CDC13): 57.08(m, 2H), 6.90(m, IH), 5.36(m， 1H)， 5.15(m, IH), 5.01 (m, IH), 4.27-3.94(m, 6H)， 3.0(m, 2H), 2.68(ra, IH), 1.71(d, 3H), 1.61(s, 2H), 1.40(s, 9H)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1，5- a] 吡嗪 - 1 -(1 -乙氧酰氧基)甲酸乙酯盐酸盐
将 (R)- 7- [3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并
[1,5-a]吡嗪- 1-(1-乙氧酰氧基)甲酸乙酯 34a (0.26g,0.39mmol)以及 5mL乙酸乙酯一 同加入到反应瓶中， 再加入 3mL 6.5N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下搅拌反 应 6小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯 化所得残余物， 得到标题产物 (R)-7- [3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲 基- 5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-(1-乙氧酰氧基)甲酸乙酯盐酸盐 34(0.2g，白色 固体)， 收率： 85 %。
MS m/z (ESI): 567.0(M+1)。
1HNM (400MHz, CD3OD): 57.30(m, IH), 7.15(m, IH), 6.96(m, IH), 5.06(m, 2H),
4.32(t, IH), 4.24(m, 3H), 4.03(m, 2H), 3.60(m, IH), 2.88(d, 2H), 2.67(m, 2H), 1.93(s,
IH), 1.65(t, 3H)。 实施例 35
(R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸异丙酯盐酸盐
Figure imgf000059_0001
第一步
(R)-7-(3- (叔丁氧羰基氨基) -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5，6，7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸异丙酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.3g, 0.54mmol)放入 50mL反应瓶中， 加入 10mL 二氯甲烷， 再加入 2mL异丙醇， 随后再加入 0.3mL三乙胺， 1分钟后加入双 (2- 氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.277g, 1.09mmol), 室温下搅拌反应 2小时， 再加入 10mL异丙醇以及异丙醇钠 (0.177g, 2.16mmol), 室温下搅拌反应 1.5小时， 薄层 色谱跟踪反应至原料消失， 加入约 10mL饱和氯化铵溶液， 有白色固体析出， 垫 硅胶过滤， 收集滤液， 加入 50mL水， 用乙酸乙酯萃取 (25mLx5)， 合并有机相， 用 30mL饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱色 谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-异丙基 -7-(3- (叔丁氧羰基氨基) -4-(2,4,5- 三氟苯基）丁酰基 )-3- (三氟甲基 )-5,6,7,8-四氢咪唑并 [1 ,5-a]吡嗪- 1-甲酸酯 35a(0.185g, 白色固体)， 收率： 57.8 %。
MS m/z (ESI): 593.0(M+1)。
1HNMR (400MHz,CDCl3):87.146-7.082(m, 1H), 6.929-6.883(m, 1H), 5.405-5.010(m, 3H), 4.219-3.937(m, 5H), 3.022-2.307(m, 4H), 1.484- 1.242(m, 15H)。
第二步
(R)-7-(3- (叔丁氧羰基氨基) -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸异丙酯盐酸盐
将 (R)-7-(3- (叔丁氧羰基氨基 )-4- (2,4,5-三氟苯基）丁酰基 )-3-(三氟甲 基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸异丙酯 35a(0.17g, 0.29mmol)以及 10mL 乙酸乙酯一同放入到反应瓶中， 在冰浴下加入 5mL 5.5N的氯化氢的乙酸乙酯溶 液， 加毕撤去冰浴， 室温下搅拌 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓 缩反应液，用正己烷洗涤 (10mLx2)，减压浓缩滤液，得到标题产物 (R)-7-(3- (叔丁 氧羰基氨基) -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪小甲酸异丙酯盐酸盐 35(0.15g, 白色固体)， 收率： 97.8 %。
MS m/z (ESI): 493.1(M+1)。
1HNM (400MHz,DMSO):57.631-7.482(m, 2H), 5.159-4.308(m, 3H), 4.285-3.742(m, 5H), 3.110-2.735(m, 4H), 1.473-1.063(m, 6H)。 实施例 36
(R)- 7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) - 5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸叔丁基酯盐酸盐 ·
Figure imgf000060_0001
第一歩
(R)- 7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸叔丁基酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4，5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基- 5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪小甲酸 2a(0.3g, 0.54mmol)、 10mL二氯甲烷、 5mL叔丁醇加 入到 lOOmL反应瓶中， 搅拌下依次加入 0.3mL三乙胺和双 (2-氧代 -3-噁唑垸基） 次磷酰氯 (0.277g, 1.09mmol)， 室温下搅拌反应 2小时， 再加入 10mL叔丁醇以及 叔丁醇钾 (0.24g, 2.16mmol)， 继续于室温下搅拌反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应 至原料消失。向反应液中加入 10mL饱和氯化铵溶液，有白色固体析出，垫 100-200 目硅胶过滤， 收集滤液， 加入 50mL水， 用乙酸乙酯萃取 (25mLx5)， 合并的有机 相依次用 30mL饱和食盐水洗涤， 用无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用 硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (R)-7-(3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基） 丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸叔丁基酯 36a(0.11g, 白色固体)， 收率： 33.6%。
MS m/z (ESI): 629·2(Μ+23)。
1HNMR(400MHz,CH3OD):67.255-7.090(m,2H), 5.077-4.964(m, 2H), 4.500-4.227(m, 3H), 4.227-4.032(m, 2H), 2.994-2.744(m, 4H), 1.496-1.202(m, 18H)。
第二步
(R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪- 1 -甲酸叔丁基酯盐酸盐
将 (R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并
[1,5-a]吡嗪 -1-甲酸叔丁基酯 36a(0.094g， 0.15mmol)与 10mL乙酸乙酯加入到反应 瓶中， 在冰浴下向反应瓶中加入 3mL 5.5N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 滴加完毕 后撤去冰浴， 室温下搅拌 3小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应 液， 加入 20mL正己烷洗涤， 减压浓缩， 得到标题产物 (R)- 7-(3-氨基 -4-(2，4,5-三 氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸叔丁基酯盐 酸盐 36(0.084g, 白色固体)， 收率： 100%。
MS m/z (ESI): 507.0(M+1)。
1HNMR(400MHz,CH3OD):57.431-7.387(m,lH), 7.246-7.198(m, 1H), 5.108-4.981(m, 2H), 4.354-3.926(m, 5H), 3.174-3.095(m, 2H), 2.996-2.896(m, 2H), 1.276(s, 9H)。 实施例 37
(R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸 (异丙氧基甲酰氧基)乙酯盐酸盐 '
Figure imgf000062_0001
第一步
(R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )- 3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [l，5-a] 吡嗪 -1-甲酸 (异丙氧基甲酰氧基)乙酯
将 (R)-7- [3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [l，5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(Q.275g, 0.5mmol)与 4mL Ν,Ν-二甲基甲酰胺加入 到反应管中， 搅拌使其溶解， 依次向反应管中加入碳酸 -1-氯乙酯-异丙酯 (O.lg, 0.6mmol)、 碘化钾 (0.0415g, 0.25mmol)、 碳酸钾 (0.083g, 0.6mmol)， 加毕， 封管， 置于油浴中控制油浴外温 65°C， 反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失。 将反应管从油浴中取出， 待其冷至室温后， 向其中加水 40mL， 用乙酸乙酯萃取 (25mLx3), 薄层色谱检测水相中无产物， 收集有机相， 用水洗 (20mL><2)， 合并 有机相， 用无水硫酸镁干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残 余物， 得到标题产物 (R)-7-(3-氨基 - 4-(2,4,5-三氟苯基）丁酰基 )-3- (三氟甲 基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 (异丙氧基甲酰氧基)乙酯 37a(0.29g,淡 黄色固体)， 收率： 85.3 %。
MS in/z (ESI): 698.0(M+18) c
!HNMR (400MHz, CDC13): 57.12(m, 1H), 7.05(m, 1H), 6.92(m, 1H), 5.38(d, 1H), 5.15(d, 1H), 5.0 l(s, 1H), 4.94(m, 1H), 4.23-3.94(m, 5H), 2.98(m, 2H), 2.70(m, 1H), 1.70(d, 2H), 1.62(s, 1H), 1.40(s, 9H)。
第二步
(R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪- 1 -甲酸 (异丙氧基甲酰氧基)乙酯盐酸盐 将 (R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -1-甲酸 (异丙氧基甲酰氧基)乙酯 37a(0.29g, 0.43mmol)与 5mL乙酸乙 酯加入到反应瓶中， 再加入 3mL 6.5N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下搅拌反 应 4小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯 化所得残余物， 得到标题产物 (R)-7-(3-氨基 -4-(2，4，5-三氟苯基)丁酰基 )-3- (三氟甲 基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸（异丙氧基甲酰氧基）乙酯盐酸盐 37(0.24g, 白色固体)， 收率： 91.2%。 MS m/z (ESI): 581.1(M+1)0
1HNMR (400MHz, CD3OD): 67.38(m, 1H), 7.25(m, 1H), 6.96(m, 1H), 5.10(m, 2H), 4.88(m, 1H), 4.33(m, 2H), 4.11(m, 2H)， 3.95(m, 2H), 3.05(m, 2H), 3.00(m, 1H)， 2.85(m, 1H), 2.03(m, 3H), 1.64(m, 3H)。 实施例 38
(R)-7-[3-氨基- 4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸 -(1-环己基酰氧基)乙酯盐酸盐
Figure imgf000063_0001
第一步
(R)-7-[3-氨基- 4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基- 5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸 -(1-环己基酰氧基)乙酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(0.275g, 0.5mmol)与 4mL Ν,Ν-二甲基甲酰胺放入 反应管中，搅拌使 2a溶解，依次向反应管中加入碳酸 -1-氯乙酯-环己基酯 (0.124g, 0.6mmol)、 碘化钾 (0.0415g, 0.25mmol)、 碳酸钾 (0.083g, 0.6mmol)， 加毕， 封管， 至于油浴中控制外温 65Ό搅拌反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失。 将 反应管从油浴中取出， 待反应液冷却至室温后， 向其中加入 40mL水， 用乙酸乙 酯萃取 (30mLx3)， 合并有机相， 用 30mL水洗， 再用 30mL饱和食盐水洗， 合并 有机相， 用无水硫酸镁干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残 余物，得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 -(1-环己基酰氧基)乙酯 38a(0.25g, 白色固体)， 收 率： 69.4%。
MS m/z (ESI): 721.0(M+1)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-甲酸 -(1-环己基酰氧基)乙酯盐酸盐
将 (R)-7-[3-氨基 -4-(2，4，5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1 ,5-a]吡嗪- 1-甲酸 -(1-环己基酰氧基)乙酯 38a(0.25g, 0.347mmol)与 5mL乙酸乙酯 放入反应瓶中， 搅拌下加入 3 mL 6.5N的氯化氢的乙酸乙酯溶液， 室温下搅拌反 应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化 所得残余物， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪小甲酸 -(1-环己基酰氧基)乙酯盐酸盐 38(0.22g, 白 色固体)， 收率： 96.1 %。
MS m/z (ESI): 621.1(M+1)。
!HNMR (400MHz, CD3OD): S7.30(m, 1H), 7.16(m, 1H), 6.95(m, 1H), 5.10(m, 1H), 4.64(m, 1H), 4.29(d, 2H), 4.02(d, 2H), 3.61(s, 1H), 2.87(d, 2H), 2.70(s, 1H), 2.65(m, 1H), 1.93(s, 3H), 1.74(s, 2H), 1.64(m, 3H), 1.47(m, 3H), 1.31(m, 3H)。 实施例 39
(R)-7- [3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基]- 8-甲基 -3-三氟甲基- 5,6,7,8-四氢咪唑 并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯盐酸盐
Figure imgf000064_0001
第一步
8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 -7-叔丁酯 将 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 7-叔丁酯 27d (0.85g, 2.54mmol)溶解于 25mL无水甲苯和 8mL无水四氢呋喃的混合溶剂中， 将 反应瓶置于千冰-丙酮浴中冷却至 -78°C，加入四甲基乙二胺 (1.32mL, 8087mmol), 逐滴加入正丁基锂 (5.55mL， 8.87mmol)， 五分钟滴加完毕， 保持外温 -78°C， 反应 15分钟， 逐滴加入碘甲烷 (0.4mL, 6.34mmol)， 保持 -78 °C反应 10分钟， 然后升至 室温反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应 原料消失。 向反应液中加入 15mL氯化铵 的饱和溶液， 然后加入 20mL水， 用 2N的盐酸调节 pH值至 3-4， 用乙酸乙酯萃 取 (30mLx3)， 合并有机相， 用无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱 色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 -7-叔丁酯 39a(0.215g, 白色固体)， 收率： 24.3 %。
第二步
8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1，7-二甲酸 -7-叔丁酯 -1- 甲酯 将 8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 -7-叔丁酯 39a(0.349g, lmmol)溶解于 15mLN,N-二甲基甲酰胺中， 搅拌下加入碳酸氢钠 (0.84g, lOmmol), 逐滴加入碘甲烷 (0.43g,3mmol)， 室温下搅拌反应 40小时， 薄 层色谱跟踪反应至原料消失，减压浓缩反应液，用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 8-甲基- 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 -7- 叔丁酯 -1-甲酯 39b(0.5g,黄色油状物)， 收率： 100%。
MS m/z (ESI): 364·0(Μ+1)。
lHNMR (400MHz, CDC13): δ 5.85(t, 1H), 4.24(t， 2H), 4.04(t, 2H), 3.93(s, 3H), 1.56(d, 3H), 1.51(s, 9H)。
第三步
8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯盐酸盐 将 8-甲基- 3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -1,7-二甲酸 -7-叔丁酯 -1-甲酯 39b(0.35g, 0.96mmol)放入反应瓶中， 加入 10mL 2.3N的氯化氢的乙酸乙 酯溶液， 室温下搅拌反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应 液， 得到标题产物 8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪小甲酸甲酯 盐酸盐 39c粗品 (0.4g,黄色油状物)。
]HNMR (400MHz, CDC13): δ 7.10(m, 1H), 6.9 l(m, 1H), 5.57(m, 1H), 5.45(m, 2H), 4.18(m, 2H)， 3.97(s, 3H), 3.36(t, 1H), 2.98(m, 2H), 2.26(m, 2H), 1.60(d, 3H), 1.40(s, 9H)。
第四步
(R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5，6,7,8-四 氢咪唑并 [l，5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯
将 8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6，7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯盐酸盐 39c 粗品（0.289g, 0.96mmol)与（R)-3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酸 lf(0.353g, 1.06mmol)溶于 10mL 二氯甲垸中， 搅拌下依次加入三乙胺 (0.4mL, 2.9mmol)和双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (0.368g, 1.45mmol), 室温下搅拌反应 过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所 •得残余物， 得到标题产物 (R 7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -3- 三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯 39d(0.43g,黄色油状物)， 收 率： 77.2 %。
MS m/z (ESI): 579.1(M+1)。
第五步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基) -丁酰基] -8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪 唑并 [l，5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯盐酸盐
将 7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯 39d (0.23g, 0.4mmol)放入反应瓶中，加入 5mL 2.3N 的氯化氢的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌反应 2小时，薄层色谱跟踪反应至原料消 失， 减压下浓缩反应液， 得到标题产物 (R)-7- [3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基) -丁酰 基 ]-8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1，5- a]吡嗪 -1-甲酸 -甲酯盐酸盐 39(0.205g, 白色固体)， 收率： 100%。
MS m/z (ESI): 479.1(M+l)o
iHNMR (400MHz, CDC13): δ 7.33 (m, 1H), 6.93 (m, 1H), 5.58(m, 1H), 5.02(m, 1H), 4.33(m, 2H), 3.86(s, 3H)， 3.43(t, 2H), 3.06(m, 2H), 2.49(m, 2H), 1.57(d, 3H)。 实施例 40、 41
(R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基) -(S)-8-甲基 -3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪 唑并 [1,5-a]吡嗪- 1-甲酸甲酯盐酸盐
(R)-7-(3-氨基 -4- (2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-(R)-8-甲基 -3- (三氟甲基) - 5,6,7,8-四氢咪 唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸甲酯盐酸盐
Figure imgf000066_0001
将 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-8-甲基 -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢 咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 1-甲酸甲酯盐酸盐 39 (141mg, 29.5 mmol)进行手性拆分， 采 用 HPLC法， 用手性柱对异构体进行分离 (分离条件： 手性柱 Chiralcel AD-H, 流 动相： 正己烷： 异丙醇： 二乙胺 =70: 30： 0.1， 流速： 1.0 ml/min)， 收集其相应 组分， 旋转蒸发除去溶剂， 并在室温下真空干燥 4小时， 得到标题产物 (R)-7-(3- 氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰基 )-(S)-8-甲基 -3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并
[1,5-a]吡嗪- 1-甲酸甲酯盐酸盐 40 (57 mg， 11.9 mmol)和 (R)-7-(3-氨基 -4-(2,4,5- 三氟苯基)丁酰基) -(R)-8-甲基 -3- (三氟甲基) -5,6,7,8-四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-甲酸 甲酯盐酸盐 41 (50 mg， 10.5 mmol)。 实施例 42
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-氨基甲酰乙胺
Figure imgf000066_0002
Figure imgf000067_0001
第一歩
(R)-[3- (1-乙基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代
-1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯
将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [1,5- a]吡嗪 -1-甲酸 2a(180 mg, 0.33 mmol)溶解于 10 mL四氢呋喃中， 力口 入乙基胺盐酸盐 (269 mg, 3.3 mmol) , 双 (2-氧代 -3-噁唑垸基)次磷酰氯 (168 mg, 0.66 mmol)以及三乙胺 (367 mg, 3.63 mmol), 室温下搅拌反应 4小时， 薄层色谱 跟踪反应， 原料消失， 过滤反应液， 减压浓缩滤液， 用硅胶柱层析法纯化所得残 余物， 得到标题产物 (R)-[3-(l-乙基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪- 7-基) -3-氧代小(2,4,5-三氟-苄基) -丙基]-氨基甲酸叔丁酯 42a(190 mg, 白色固体)， 收率： >100%。
MS m/z (ESI)： 600.1 (M+23)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2，4,5-三氟-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪小氨基甲酰乙胺
将 (R)-[3-(l-乙基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -3-氧代 -1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 42a(190 mg, 0.33 mmol)溶 解于 10 mL二氯甲烷中， 再加入三氟乙酸 (750 mg, 6.6 mmol), 室温下搅拌反应 2 小时， 薄层色谱跟踪反应， 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所 得残余物， 得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-氨基甲酰乙胺 42(120 mg, 白色固体)， 收率： 76.4%。
MS m/z (ESI): 478.1(M+1)。
lHNMR (400MHz,CD3OD): δ 1.68-1.24(m, 3H), 2.79-3.01(m, 2H), 3.10(s, 2H), 3.33-3.41(m, 2H), 4.24-4.30(d, 2H), 5.03-5.18(m, 2H), 7.14-7.23(m, 1H), 7.36-7.37(d, 1H)。 实施例 43
(R 7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-氨基甲酰丁胺
Figure imgf000068_0001
第一步
(R)-[3- (1-丁基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代
- 1-(2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 将 (R)- 7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2，4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6，7,8- 四氢咪唑 [1,5-a]吡嗪小甲酸 2a(180 mg, 0.33 mmol)溶解于 10 mL二氯甲烷中， 加 入丁基胺盐酸盐 (193 mg, 2.64 mmol), 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (167 mg, 0.66 mmol)以及三乙胺 (100 mg, 0.99 mmol), 室温下撹拌反应过夜， 薄层色谱跟 踪反应， 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱层析法纯化所得残余物， 得到标 题产物 (R)-[3-(l-丁基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -3-氧代- 1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 43a(120 mg, 白色固体)， 收率： 60%。
MS m/z (ESI): 606·0(Μ+1)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7，8-四氢-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-氨基甲酸丁胺
将 (R)-[3- (1-丁基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -3-氧代 -1 -(2,4,5-三氟-苄基) -丙基]-氨基甲酸叔丁酯 43a(120 mg, 0.198 mmol) 溶解于 10 mL二氯甲烷中， 再加入三氟乙酸 (452 mg, 3.97 mmol), 室温下搅拌反 应 2小时， 薄层色谱跟踪反应， 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯 化所得残余物，得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲 基 -5,6,7，8-四氢-咪唑并 [1,5-a]吡嗪小氨基甲酰丁胺 43(70 mg, 白色固体)， 收率： 70%。
MS m/z (ESI): 506.1(M+1)。
!HNMR (400MHz, CD3OD): δ 0.93-0.99(m, 3H), 1.34-1.41(m, 2H), 1.59-1.62(m, 2H), 2.80-2.98(m, 3H), 3.07-3.15(m, 2H), 3.37(m, 1H), 3.90-3.91(d, 2H), 4.06-4.07(m, 1H), 4.27-4.34(m, 2H), 5.03-5.15(m, 2H), 7.20-7.37(m, 2H)。 实施例 44
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三無-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-氨基甲酰丙胺
Figure imgf000069_0001
第一步
(R)- [3-(1-丙基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧代 小 (2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氣基甲酸叔丁酯 将 (R)-7-[3-叔丁氧羰基氨基 -4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酰基 ]-3-三氟甲基 -5,6,7,8- 四氢咪唑 [l，5-a]吡嗪 -1-甲酸 2a(190 mg, 0.345 mmol)溶解于 10 mL二氯甲垸中， 加入丙胺 (163 mg, 2.76 mmol), 双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯 (176 mg, 0.69 mmol)以及三乙胺 (105 mg, 1.04 mmol), 室温下搅拌反应过夜， 薄层色谱跟踪反 应， 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱层析法纯化所得残余物， 得到标题产 物 (R)-[3-(l-丙基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢- 8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7-基) -3-氧 代 -1-(2,4,5-三氟-苄基) -丙基] -氨基甲酸叔丁酯 44a(70 mg, 白色固体)， 收率- 34.3%。
MS m/z (ESI): 614·1(Μ+23)。
第二步
(R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢-咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1-氨基甲酸丙胺
将 (R)-[3-(l-丙基氨甲酰基 -3-三氟甲基 -5,6-二氢 -8H-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -7- 基) -3-氧代 -1- (2,4,5-三氟-苄基)-丙基] -氨基甲酸叔丁酯 44a(70 mg, 0.118 mmol)溶 解于 10 mL二氯甲烷中， 再加入三氟乙酸 (270 mg, 2.37 mmol), 室温下搅拌反应 1小时， 薄层色谱跟踪反应， 原料消失， 减压浓缩反应液， 用硅胶柱色谱法纯化 所得残余物，得到标题产物 (R)-7-[3-氨基 -4-(2,4,5-三氟-苯基) -丁酰基] -3-三氟甲基 -5,6,7,8-四氢-咪唑并 [1,5-a]吡嗪 -1-氨基甲酰丙胺 44(25 mg, 白色固体)， 收率- 43.1%。
MS m/z (ESI): 492.1(M+1)。
iHNMR (400MHz, CD3OD): δ 0.90-1.00(m, 3H), 1.60-1.66(m, 2H), 2.75-2.84(m, 2008/001936
1H), 2.93-2.99(m5 1H), 3.09(s, 2H), 3.94- 3.95(d, 2H)， 4.07(m, Hi), 4.24-4.29(m, 2H), 5.03-5.13(m, 2H), 7.19-7.23(t, 1H), 7.36-7.38(d, 1H)。 测试例：
生物学评价
DPP IV抑制活性的测定
下面的方法是用来测定本发明化合物抑制 DPPIV酶活性的能力。 每个化合 物的抑制率或半抑制浓度 IC5Q(把酶活性抑制至 50%时所测化合物的浓度)是以固 定量的酶混合底物及不同浓度的待测化合物来测定的。
DPP IV抑制活性的测定
材料和方法：
材料：
a. 白色 96孔板 (BMG)
b. Tris缓冲液：制备 lOOmL 2mM的 Tris缓冲液，将 0.0242g Tris溶解于约 90mL 去离子水中， 用 HC1和 NaOH调节 pH到 8.00， 最后加去离子水至 100mL。 c. DPPIV酶 (CalBiochem Catalog no.317630), 溶解于 Tris缓冲液中至 2mM。
d. DPPIV— Glo™底物 (Promega Catalog no.G8350)，溶解于去离子水中至 lmM。 e. DPPIV -Glo™缓冲液 (Promega Catalog no.G8350)
f. 荧光素检测试剂 (Promega Catalog no.G8350)
g. DMSO
h. 去离子水
操作：
按以下操作顺序进行：
1. 解冻 DPPIV— Glo.使用前缓冲并平衡到室温。
2. 使用前缓冲冻存的荧光素检测试剂。
3. 悬浮 DPPIV— Glo.在底物中加入超纯水轻微混合均勾后， 制成 ImM的底物。
4. 将荧光素检测试剂放入茶色瓶中， 加入 DPPIV— Glo.。 荧光素检测试剂应在 1分钟内溶解。
5. 用 DMSO溶解所测化合物至最终操作浓度的 50倍。
6. 每个试管中加入 50倍浓度的所测化合物 2 L，在反面对照合空白对照中加入 2μΙ^Μ80。
7. 在每个试管中加入 46 iL Tris缓冲液， 在空白对照中加入 48 L Tris缓冲液。
8. 在反面对照和测试样的每个试管中加入 2μί DPPIV酶。
9. 振动混合并离心试管。 将试管中物质全部转移到 96-well平板上。
10.混合底物和 DPPIV— Glo.比例为 1:49。 振动混合至充分混合。 使用前在室温 下静置 30-60分钟。
11.在每个 96-well平板孔中加入 50μί DPPIV— Glo.和底物的混合液， 用封膜封 住平板。
12.用平板振荡器在 300-500rpm/30S下慢慢混合 96孔中物质。 在室温下培养 30 分钟到 3小时。
13.记录发光。
抑制率定义： [1-(S-B)/(N-B)]*100%
S: 样品
B: 空白对照
N: 反面对照
IC50值:
Figure imgf000071_0001
41 0.005
42 0.018
43 0.063
44 0.052
经过测试， 测定的本发明化合物对 半抑制浓度 IC5C值范围在 0.005μΜ〜0.216μΜ， 与 MK-0431的 IC5o值 0.023μΜ相比， 本发明的大部分化 合物对 DPPIV有良好的抑制活性。

Claims

权利要求书:
1. 一种由通式 (I)表示的化合物或其药学上可接受的盐:
Figure imgf000073_0001
其中：
Ar是苯基， 该苯基是未取代的或者进一步被 1〜5个 R6所取代；
R1选自氢原子、 烷基、 三氟甲基、 环烷基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、 环烷 基、 芳基、 杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤素、 氰基、 芳基、 羟基或氨基 的取代基所取代， 优选 R1是三氟甲基；
R2选自羟基、 氨基、 垸基、 烷氧基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基、 杂芳基或 NR4R5， 其中烷基、 烷氧基、 环烷基、 杂环垸基、 芳基或杂芳基任选进一步被一 个或多个选自卤素、氨基、 氰基、 羟基、垸基、环烷基、烷氧基、 芳基、 杂芳基、 -N 4R5, -OC(0)ORs、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R3选自氢原子或烷基；
R4和 R5各自独立地选自氢原子、 烷基、 环垸基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基， 其中垸基、环烷基、 杂环垸基、 芳基或者杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤 素、 羟基、 氨基、 垸氧基、 烷基、 氰基、 芳基、 环烷基、 杂环烷基、 杂芳基、 羟 烷基、 -S02R7、 -NR4R5、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
或者， R4和 R5—起形成一个 4〜8元杂环基， 其中 4〜8元杂环内含有一个 或多个 N、 0、 S原子， 并且 4〜8元杂环上任选进一步被一个或多个选自卤素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 烷基、 氰基、 芳基、 杂环烷基、 杂芳基、 羰基、 羟烷基、 -S02R7、 -NR4R5、 -C(0)NR4R5、 -C(0)R7、 =0、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R6选自卤素、 氰基、 羟基、 烷基或烷氧基， 其中烷基或垸氧基是未取代的或 者进一步被一个或多个卤素取代；
R7为烷基；
R8选自烷基或环烷基。
2. 根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐， 其中该化合物选自:
Figure imgf000074_0001
C6T00/800ZN3/X3d Ϊ88丽 600Z OAV
Figure imgf000075_0001
3. 根据权利要求 1或 2所述的化合物或其药学上可接受的盐， 所述的盐为所述 化合物与选自以下的酸形成的盐： 苹果酸、乳酸、马来酸、盐酸、 甲磺酸、硫酸、 磷酸、 柠檬酸、 酒石酸、 乙酸或三氟乙酸， 优选所述的盐是盐酸盐。
4.通式 (IA)所示的化合物，所述化合物为合成如权利要求 1所述的通式 (I)化合物 的中间体：
Figure imgf000076_0001
其中：
Ar是苯基， 该苯基是未取代的或者进一步被 1〜5个 R6所取代；
R1选自氢原子、 垸基、 三氟甲基、 环烷基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、 环烷 基、 芳基、 杂芳基任选进一步被一个或多个选自 ¾素、 氰基、 芳基、 羟基或氨基 的取代基所取代， 优选 R1是三氟甲基；
R3选自氢原子或烷基；
R6选自卤素、 氰基、 羟基、 烷基或垸氧基， 其中烷基或烷氧基是未取代的或 者进一步被一个或多个卤素取代；
X为卤素。
5. 通式 (IB)化合物， 所述化合物为合成如权利要求 1 所述的通式 (I)化合物的中 间体：
Figure imgf000076_0002
其中：
R1选自氢原子、 垸基、 三氟甲基、 环烷基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、 环烷 基、 芳基、 杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤素、 氰基、 芳基、 羟基或氨基 的取代基所取代， 优选 R1是三氟甲基；
R2选自羟基、氨基、垸基、垸氧基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基或 -NR4R5， 其中烷基、烷氧基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基任选进一步被一个或多个 选自卤素、 氨基、 氰基、羟基、 烷基、 环烷基、烷氧基、 芳基、 杂芳基、 -NR4R5、 -OC(0)OR8、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R3选自氢原子或烷基；
R4和 R5各自独立地选自氢原子、 烷基、 环垸基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基， 其中烷基、环烷基、 杂环垸基、 芳基或者杂芳基任选进一步被一个或多个选自卤 素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 烷基、 氰基、 芳基、 环烷基、 杂环垸基、 杂芳基、 羟 烷基、 -S02R7、 -N 4 5, 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
或者， R4和 R5—起形成一个 4〜8元杂环基，其中 4〜8元杂环内含有一个或 多个 N、 0、 S原子， 并且 4〜8元杂环上任选进一步被一个或多个选自卤素、羟 基、氨基、垸氧基、烷基、氰基、芳基、杂环垸基、杂芳基、羰基、羟烷基、 -S02R7、 -NR4R5、 -C(0)NR4R -C(0) 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R7为烷基；
R8选自烷基或环烷基。
6. 根据权利要求 4所述的通式 (IA)化合物的制备方法， 该方法包括：
Figure imgf000077_0001
在冰浴下向原料吡嗪 2-甲胺中滴加酸酐，然后在室温下反应，生成酰胺产物;
Figure imgf000077_0002
将酰胺产物与三氯氧磷在室温下混合搅拌后， 加入五氧化二磷， 加热回流缩 合生成咪唑并 [1,5-a]吡嗪环；
Figure imgf000077_0003
将咪唑并 [1,5-a]吡嗪环在乙醇溶剂中， 于钯 /碳催化下， 氢气还原生成 R1 , R3取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪产物；
Figure imgf000077_0004
将 R1, R3取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪产物溶解在二氯甲垸溶剂中， 并在缩 合剂双 (2-氧代 -3-噁唑烷基)次磷酰氯及三乙胺作用下与羧酸发生缩合反应；
Figure imgf000078_0001
得到的缩合产物在室温下在无水乙醇溶剂中与卤代琥珀酰亚胺反应生成通 式 (IA)化合物。
7. 根据权利要求 5所述的通式 (IB)化合物的制备方法， 该方法包括:
Figure imgf000078_0002
将 R1取代的咪唑并 [1,5-a]吡嗪在室温下， 于乙醇溶剂中氢化还原， 然后与二 碳酸二叔丁酯在乙醇溶剂中反应， 对氨基进行保护， 得到氨基保护的 R1取代的 四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪；
Figure imgf000078_0003
得到的氨基保护的 R1取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在乙醇溶剂中，室温下与 卤代琥珀酰亚胺反应得到卤代产物；
Figure imgf000078_0004
得到的卤代产物在甲醇溶剂中， 于油浴下与八羰基二钴及氯乙酸酯在一氧化 碳气氛下反应， 得到酯基取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪;
Figure imgf000078_0005
得到的酯基取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在碱性条件下水解成酸;
Figure imgf000079_0001
得到的羧酸化合物在干冰 -丙酮浴下， 与卤代烷基反应， 得到垸基取代的酸;
Figure imgf000079_0002
烷基取代的酸可进一歩酯化， 得到酮取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪;
Figure imgf000079_0003
或者， 烷基取代的酸在二氯甲烷溶剂中: 在縮合试剂双 (2-氧代 -3-噁唑烷基) 次磷酰氯作用下与 Ν-甲氧基甲胺反应；
Figure imgf000079_0004
经缩合反应得到的产物与格氏试剂在四氢呋喃溶剂中反应， 得到酮取代的四 氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪；
Figure imgf000079_0005
将酮取代的四氢咪唑并 [1,5-a]吡嗪在酸性条件下脱掉氨基保护基， 得到通式 (IB)化合物。
8. 根据权利要求 1或 2所述的通式 (I)化合物的制备方法， 该方法包括-
Figure imgf000079_0006
根据权利要求 4所述的通式 (IA)在甲醇溶剂中， 于油浴下在八羰基二钴的作 用下及氯乙酸酯在一氧化碳气氛下反应，然后在室温，碱性条件下水解再酸化成 羧酸；
Figure imgf000080_0001
得到的羧酸在缩合试剂作用下与胺， 或与醇在室温下发生缩合反应， 或者与 1-卤代碳酸酯反应， 然后在酸性条件下脱掉氨基保护基得到通式 (I)化合物。
9. 根据权利要求 1或 2所述的通式 (I)化合物的制备方法， 该方法包括:
Figure imgf000080_0002
根据权利要求 5 所述的通式 (IB)化合物与羧酸在縮合试剂双 (2-氧代 -3-噁唑 烷基)次膦酰氯的条件下 _进行缩合， 得到的产物进一步在酸性条件下脱掉氨基保 护基得到通式 (I)化合物。
10.根据权利要求 8或 9所述的制备方法，其中还包括通式 (I)化合物与酸反应生 成酸加成盐， 所述的酸选自苹果酸、乳酸、马来酸、盐酸、 甲磺酸、硫酸、磷酸、 柠檬酸、 酒石酸、 乙酸或三氟乙酸， 优选所述的酸是盐酸。
11. 一种药用组合物， 其含有治疗有效剂量的根据权利要求 1〜3任何一项所述 的化合物或其药学上可接受的盐， 及药学上可以接受的载体或赋形剂。
12. 根据权利要求 1〜3任何一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备治 疗 II型糖尿病、 高血糖症、 肥胖症或胰岛素抵抗症的药物中的用途。
13. 一种抑制二肽基肽酶 IV催化活性的方法， 其特征在于将所述的二肽基肽酶 IV与权利要求 1〜3任何一项所述的化合物或盐接触。
14. 根据权利要求 11所述的药物组合物在制备治疗 II型糖尿病、 高血糖症、 肥 胖症或胰岛素抵抗症的药物中的用途。
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UAA201008000A UA101002C2 (ru) 2007-12-26 2008-11-27 ПРОИЗВОДНЫЕ ТЕТРАГИДРОИМИДАЗО[1,5-а]ПИРАЗИНА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И ИХ МЕДИЦИНСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
JP2010539997A JP5481008B2 (ja) 2007-12-26 2008-11-27 テトラヒドロ・イミダゾ［１，５−α］ピラジン誘導体、その調製プロセスおよび医薬的使用
CA2706735A CA2706735C (en) 2007-12-26 2008-11-27 Tetrahydro-imidazo[1,5-.alpha.]pyrazine derivatives, preparation process and medicinal use thereof
US12/743,795 US8207161B2 (en) 2007-12-26 2008-11-27 Tetrahydro-imidazo[1,5-α]pyrazine derivatives, preparation process and medicinal use thereof
MX2010006438A MX2010006438A (es) 2007-12-26 2008-11-27 Derivados de tetrahidro-imidazo [1,5-a] pirazina proceso de preparacion y su uso medicinal.
BRPI0821440-9A BRPI0821440A2 (pt) 2007-12-26 2008-11-27 Derivados de tetra-hidro-imidazo[1,5-a] pirazina, processo de preparação e uso medicinal dos mesmos
RU2010125703/04A RU2483070C2 (ru) 2007-12-26 2008-11-27 ПРОИЗВОДНЫЕ ТЕТРАГИДРОИМИДАЗО[1,5-a]ПИРАЗИНА, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ИХ В МЕДИЦИНЕ
EP08868957.5A EP2230241B1 (en) 2007-12-26 2008-11-27 Tetrahydro-imidazo[1,5-a]pyrazine derivatives, preparation methods and medical uses thereof
CN2008800097616A CN101641361B (zh) 2007-12-26 2008-11-27 四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪类衍生物，其制备方法及其在医药上的应用
ES08868957.5T ES2529435T3 (es) 2007-12-26 2008-11-27 Derivados de tetrahidro-imidazo[1,5-A]pirazina, procedimientos de preparación y usos médicos de los mismos
HK10102993.1A HK1134817A1 (en) 2007-12-26 2010-03-23 Tetrahydro-imidazo[1,5-a]pyrazine derivatives, preparation methods and medical uses thereof
ZA2010/04154A ZA201004154B (en) 2007-12-26 2010-06-10 Tetrahydro-imidazo[1,5-a]pyrazine derivatives,preparation methods and medical uses thereof
US13/463,532 US8513411B2 (en) 2007-12-26 2012-05-03 Tetrahydro-imidazo[1,5-α] pyrazine derivatives, preparation process and medicinal use thereof

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Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008157751A2 (en) 2007-06-21 2008-12-24 Cara Therapeutics, Inc. Substituted imidazoheterocycles
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
WO2011161030A1 (de) 2010-06-21 2011-12-29 Sanofi Heterocyclisch substituierte methoxyphenylderivate mit oxogruppe, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als gpr40 rezeptor modulatoren
WO2012004269A1 (de) 2010-07-05 2012-01-12 Sanofi ( 2 -aryloxy -acetylamino) - phenyl - propionsäurederivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
WO2012004270A1 (de) 2010-07-05 2012-01-12 Sanofi Spirocyclisch substituierte 1,3-propandioxidderivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
WO2012010413A1 (de) 2010-07-05 2012-01-26 Sanofi Aryloxy-alkylen-substituierte hydroxy-phenyl-hexinsäuren, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
WO2012019427A1 (zh) 2010-08-09 2012-02-16 上海恒瑞医药有限公司 酞嗪酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
US20120122875A1 (en) * 2009-05-27 2012-05-17 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Salts of Methyl (R)-7-[3-Amino-4-(2,4,5-Trifluoro-Phenyl)-Butyryl]-3-Trifluoromethyl-5,6,7,8-Tetrahydro-Imidazo[1,5-A]Pyrazine-1-Carboxylate
EP2402342A4 (en) * 2010-03-08 2012-09-19 Jiangsu Hengrui Medicine Co PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR TREATING TYPE 2 DIABETES
EP2551259A1 (en) * 2010-03-25 2013-01-30 Zhejiang Jiuzhou Pharmaceutical Co., Ltd. Sitagliptin intermediate compounds, preparation methods and uses thereof
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013045413A1 (en) 2011-09-27 2013-04-04 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
US8518946B2 (en) 2009-03-05 2013-08-27 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Salts of (R)-7-[3-amino-4-(2,4,5-trifluorophenyl)butanoyl]-3-trifluoromethyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5-a] pyrazine-1-carboxylic acid, preparation method and medical use thereof
WO2014064215A1 (en) 2012-10-24 2014-05-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) TPL2 KINASE INHIBITORS FOR PREVENTING OR TREATING DIABETES AND FOR PROMOTING β-CELL SURVIVAL
TWI462925B (zh) * 2010-09-27 2014-12-01 Jiangsu Hengrui Medicine Co 治療２型糖尿病的藥物組合物
WO2016151018A1 (en) 2015-03-24 2016-09-29 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method and pharmaceutical composition for use in the treatment of diabetes
CN114478536A (zh) * 2020-10-28 2022-05-13 上海森辉医药有限公司 四氢吡嗪稠环衍生物的制备方法

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101961336B (zh) * 2009-07-21 2012-05-30 江苏恒瑞医药股份有限公司 治疗哺乳动物包括人2型糖尿病的药物组合物
CN102471294B (zh) * 2010-04-12 2013-11-20 上海源力生物技术有限公司 手性环状β-氨基芳基丁酸衍生物、其制备方法及通过其制备手性β-氨基芳基丁酸衍生物的方法
TWI494313B (zh) * 2010-12-29 2015-08-01 Jiangsu Hengrui Medicine Co 治療包括人類之哺乳動物中第２型糖尿病的醫藥組成物
WO2012088682A1 (en) * 2010-12-29 2012-07-05 Shanghai Fochon Pharmaceutical Co Ltd. 2-(3-aminopiperidin-1-yl)-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pyrimidine-5,7(3h,6h)-dione derivates as dipeptidyl peptidase iv(dpp-iv) inhibitors
SI2736909T1 (sl) 2011-07-27 2017-08-31 Farma Grs, D.O.O. Proces za pripravo sitagliptina in njegovih farmacevtsko sprejemljivih soli
CN103087067A (zh) * 2012-08-02 2013-05-08 盛世泰科生物医药技术(苏州)有限公司 作为二肽基酶抑制剂的化合物及其组合物，以及它们的用途
CN103724352B (zh) * 2012-10-16 2017-11-28 江苏盛迪医药有限公司 一种dpp‑iv抑制剂的中间体、其制备方法和通过其制备dpp‑iv抑制剂的方法
TWI500613B (zh) 2012-10-17 2015-09-21 Cadila Healthcare Ltd 新穎之雜環化合物
JP6412563B2 (ja) * 2013-10-30 2018-10-24 シャンハイ ヘンルイ ファーマスーティカル カンパニー リミテッドＳｈａｎｇｈａｉ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． ピラゾロピリミドンまたはピロロトリアゾン誘導体、その製造方法、およびそれらの医薬適用
CN103664962A (zh) * 2013-12-20 2014-03-26 南京华威医药科技开发有限公司 哌嗪类衍生物
EP3087076B1 (en) * 2013-12-23 2017-09-27 Merck Patent GmbH Imidazopyrazinone derivatives
CN103910734B (zh) * 2014-03-28 2016-01-13 南京华威医药科技开发有限公司 一种具有哌嗪结构的dpp-4抑制剂
KR101709127B1 (ko) * 2015-06-16 2017-02-22 경동제약 주식회사 Dpp-iv 억제제의 제조를 위한 신규 중간체, 이의 제조방법 및 이를 이용한 dpp-iv 억제제의 제조방법
CN108658990B (zh) * 2017-03-31 2021-03-23 南京科技职业学院 一类新型咪唑并[1,5-a]吡嗪类布鲁顿激酶抑制剂
AU2018307761A1 (en) * 2017-07-24 2020-02-20 Isocure Biosciences Inc. Inhibitors of mutant isocitrate dehydrogenases and compositions and methods thereof
EP3773587A4 (en) 2018-03-29 2021-09-29 Board of Regents, The University of Texas System IMIDAZOPIPERAZINE INHIBITORS OF TRANSCRIPTION ACTIVATION PROTEINS
US10899769B2 (en) 2018-04-06 2021-01-26 Board Of Regents, The University Of Texas System Imidazopiperazinone inhibitors of transcription activating proteins
CN108383845B (zh) * 2018-04-26 2020-11-06 盛世泰科生物医药技术(苏州)有限公司 盛格列汀盐的晶型和无定形及其制备方法和用途
CN113620957B (zh) * 2020-05-08 2022-04-19 盛世泰科生物医药技术(苏州)有限公司 一种胺甲基吡嗪类化合物的制备方法
CN113773323B (zh) * 2020-06-10 2023-05-12 江苏恒瑞医药股份有限公司 3r-氨基取代丁酰胺衍生物的制备方法
WO2024015889A2 (en) * 2022-07-14 2024-01-18 The Scripps Research Institute Small molecule regulators of alveolar type 2 cell proliferation for the treatment of pulmonary diseases
CN115583935A (zh) * 2022-11-03 2023-01-10 浙江工业大学 一种4-(2,4,5-三氟苯基)-3-氧丁酸酯的制备方法

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995015309A1 (en) 1993-12-03 1995-06-08 Ferring B.V. Dp-iv-serine protease inhibitors
US5462928A (en) 1990-04-14 1995-10-31 New England Medical Center Hospitals, Inc. Inhibitors of dipeptidyl-aminopeptidase type IV
US5543396A (en) 1994-04-28 1996-08-06 Georgia Tech Research Corp. Proline phosphonate derivatives
WO1998019998A2 (en) 1996-11-07 1998-05-14 Novartis Ag N-substituted 2-cyanopyrrolidines
US6110949A (en) 1999-06-24 2000-08-29 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-4-cyanothiazolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
WO2003004498A1 (en) 2001-07-06 2003-01-16 Merck & Co., Inc. Beta-amino tetrahydroimidazo (1, 2-a) pyrazines and tetrahydrotrioazolo (4, 3-a) pyrazines as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
WO2003082817A2 (en) 2002-03-25 2003-10-09 Merck & Co., Inc. Beta-amino heterocyclic dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
WO2004032836A2 (en) 2002-10-07 2004-04-22 Merck & Co., Inc. Antidiabetic beta-amino heterocylcic dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2004085661A2 (en) 2003-03-24 2004-10-07 Merck & Co., Inc Process to chiral beta-amino acid derivatives

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4504924B2 (ja) * 2002-12-20 2010-07-14 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 糖尿病の治療および予防のためのジペプチジルペプチダーゼ阻害薬としての３−アミノ−４−フェニルブタン酸誘導体
ATE545647T1 (de) * 2006-12-22 2012-03-15 Actelion Pharmaceuticals Ltd 5,6,7,8-tetrahydro-imidazoä1,5-aüpyrazinderivat
NZ582760A (en) * 2007-06-21 2011-12-22 Cara Therapeutics Inc Substituted imidazoheterocycles
CN101417999A (zh) * 2007-10-25 2009-04-29 上海恒瑞医药有限公司 哌嗪类衍生物,其制备方法及其在医药上的应用
CN101524082A (zh) 2009-04-28 2009-09-09 北京燕化永乐农药有限公司 吡唑醚菌酯与咪鲜胺复配农药

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5462928A (en) 1990-04-14 1995-10-31 New England Medical Center Hospitals, Inc. Inhibitors of dipeptidyl-aminopeptidase type IV
WO1995015309A1 (en) 1993-12-03 1995-06-08 Ferring B.V. Dp-iv-serine protease inhibitors
US5543396A (en) 1994-04-28 1996-08-06 Georgia Tech Research Corp. Proline phosphonate derivatives
WO1998019998A2 (en) 1996-11-07 1998-05-14 Novartis Ag N-substituted 2-cyanopyrrolidines
US6110949A (en) 1999-06-24 2000-08-29 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-4-cyanothiazolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
WO2003004498A1 (en) 2001-07-06 2003-01-16 Merck & Co., Inc. Beta-amino tetrahydroimidazo (1, 2-a) pyrazines and tetrahydrotrioazolo (4, 3-a) pyrazines as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
CN1524082A (zh) * 2001-07-06 2004-08-25 作为治疗或预防糖尿病的二肽基肽酶抑制剂的β-氨基四氢咪唑并(1,2-A)吡嗪和四氢三唑并(4,3-A)吡嗪
WO2003082817A2 (en) 2002-03-25 2003-10-09 Merck & Co., Inc. Beta-amino heterocyclic dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
WO2004032836A2 (en) 2002-10-07 2004-04-22 Merck & Co., Inc. Antidiabetic beta-amino heterocylcic dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2004085661A2 (en) 2003-03-24 2004-10-07 Merck & Co., Inc Process to chiral beta-amino acid derivatives

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ENDOCRINOLOGY, vol. 140, 1999, pages 5356 - 5363
J. ORGANOMET. CHEM, 1985, pages 293
JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY, vol. 71, no. 3, 2006, pages 1220 - 1225
JOURNAL OF ORGANOMETALLIC CHEMISTRY, vol. 285, no. 1-3, 1985, pages 293 - 303
See also references of EP2230241A4 *
TETRAHEDRON ASYMMETRY, vol. 17, no. 2, 2006, pages 205 - 209

Cited By (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2170350A2 (en) * 2007-06-21 2010-04-07 Cara Therapeutics, Inc. Substituted imidazoheterocycles
JP2010530891A (ja) * 2007-06-21 2010-09-16 カラ セラピューティクス インコーポレイテッド 置換イミダゾ複素環
EP2170350A4 (en) * 2007-06-21 2011-09-28 Cara Therapeutics Inc SUBSTITUTED IMIDAZOHETEROCYCLES
WO2008157751A2 (en) 2007-06-21 2008-12-24 Cara Therapeutics, Inc. Substituted imidazoheterocycles
KR101731602B1 (ko) 2009-03-05 2017-04-28 지앙수 헨그루이 메디슨 컴퍼니 리미티드 테트라하이드로―이미다조［1,5―ａ］피라진 유도체 염, 이의 제조방법 및 용도
US8518946B2 (en) 2009-03-05 2013-08-27 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Salts of (R)-7-[3-amino-4-(2,4,5-trifluorophenyl)butanoyl]-3-trifluoromethyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5-a] pyrazine-1-carboxylic acid, preparation method and medical use thereof
EP2436684A4 (en) * 2009-05-27 2012-12-19 Jiangsu Hengrui Medicine Co SALTS OF METHYL (R) -7- [3-AMINO-4- (2,4,5-TRIFLUOR-PHENYL) -BUTYRYL] -3-TRIFLUOROMETHYL-5,6,7,8-TETRAHYDRO-IMIDAZO- [1, 5-A] pYRAZINE-1-carboxylate
US20120122875A1 (en) * 2009-05-27 2012-05-17 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Salts of Methyl (R)-7-[3-Amino-4-(2,4,5-Trifluoro-Phenyl)-Butyryl]-3-Trifluoromethyl-5,6,7,8-Tetrahydro-Imidazo[1,5-A]Pyrazine-1-Carboxylate
US8618104B2 (en) * 2009-05-27 2013-12-31 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Salts of methyl (R)-7-[3-amino-4-(2,4,5-trifluoro-phenyl)-butyryl]-3-trifluoromethyl-5,6,7,8-tetrahydro-imidazo[1,5-A]pyrazine-1-carboxylate
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
KR101686265B1 (ko) 2010-03-08 2016-12-13 지앙수 헨그루이 메디슨 컴퍼니 리미티드 타입 2 당뇨병 치료용 약학적 조성물
EP2402342A4 (en) * 2010-03-08 2012-09-19 Jiangsu Hengrui Medicine Co PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR TREATING TYPE 2 DIABETES
JP2013521223A (ja) * 2010-03-08 2013-06-10 ジエンス ヘンルイ メデイシンカンパニー リミテッド ２型糖尿病治療用の医薬組成物
KR20130006567A (ko) * 2010-03-08 2013-01-17 지앙수 헨그루이 메디슨 컴퍼니 리미티드 타입 2 당뇨병 치료용 약학적 조성물
EP2551259A4 (en) * 2010-03-25 2014-04-16 Zhejiang Jiuzhou Pharm Co Ltd SITAGLIPTIN INTERMEDIATE COMPOUNDS, PREPARATION METHODS AND USES THEREOF
EP2551259A1 (en) * 2010-03-25 2013-01-30 Zhejiang Jiuzhou Pharmaceutical Co., Ltd. Sitagliptin intermediate compounds, preparation methods and uses thereof
WO2011161030A1 (de) 2010-06-21 2011-12-29 Sanofi Heterocyclisch substituierte methoxyphenylderivate mit oxogruppe, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als gpr40 rezeptor modulatoren
WO2012004270A1 (de) 2010-07-05 2012-01-12 Sanofi Spirocyclisch substituierte 1,3-propandioxidderivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
WO2012010413A1 (de) 2010-07-05 2012-01-26 Sanofi Aryloxy-alkylen-substituierte hydroxy-phenyl-hexinsäuren, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
WO2012004269A1 (de) 2010-07-05 2012-01-12 Sanofi ( 2 -aryloxy -acetylamino) - phenyl - propionsäurederivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
WO2012019427A1 (zh) 2010-08-09 2012-02-16 上海恒瑞医药有限公司 酞嗪酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
US9273052B2 (en) 2010-08-09 2016-03-01 Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Co., Ltd. Phthalazinone ketone derivative, preparation method thereof, and pharmaceutical use thereof
US9566277B2 (en) 2010-08-09 2017-02-14 Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Co., Ltd. Methods of using phthalazinone ketone derivatives
TWI462925B (zh) * 2010-09-27 2014-12-01 Jiangsu Hengrui Medicine Co 治療２型糖尿病的藥物組合物
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013045413A1 (en) 2011-09-27 2013-04-04 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2014064215A1 (en) 2012-10-24 2014-05-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) TPL2 KINASE INHIBITORS FOR PREVENTING OR TREATING DIABETES AND FOR PROMOTING β-CELL SURVIVAL
WO2016151018A1 (en) 2015-03-24 2016-09-29 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method and pharmaceutical composition for use in the treatment of diabetes
CN114478536A (zh) * 2020-10-28 2022-05-13 上海森辉医药有限公司 四氢吡嗪稠环衍生物的制备方法

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