WO2009070924A1

WO2009070924A1 - Pharmaceutical compositions with a mechanism of multi-target receptor retroaction for treating depression

Info

Publication number: WO2009070924A1
Application number: PCT/CN2007/003400
Authority: WO
Inventors: Zuoguang Zhang
Original assignee: Chi, Yu-Fen
Priority date: 2007-11-30
Filing date: 2007-11-30
Publication date: 2009-06-11
Also published as: CA2746663A1; JP2011504887A; EP2216040A1; BRPI0722182A2; US20100311674A1; EP2216040A4; JP5628682B2; AU2007361992A1; ZA201004033B; AU2007361992B2; MX2010005840A; IL206082A0; KR20100091206A

Description

多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物组合物

技术领域

本发明涉及一组以包含人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸及大枣环磷酸腺苷 (大枣 cyclic adenosine monophosphate, 大枣 cAMP )的原料，制成多巴标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物，尤其涉及一种功效成份明确、疗效明显、长期服用安全性高、能避免引起强呕吐等副作用的治疗忧郁症的口服药物或保健食品。背景技术

忧郁症是一种常见的疾病，据统计在一般人口中大约有 25%女性在其一生中经历过忧郁症，男性中约有 10%左右经历过忧郁症（张春兴著：《现代心理学》 )。世界卫生组织（WHO )提供的数据：忧郁症在全世界的发病率约为 11%, 目前全球约有 3.4亿精神忧郁患者，而且这个数字仍成上升趋势，调查发现在今后 20年，忧郁症将会上升为全球第二大常见疾病。

现有技术中，抗忧郁药物以百忧解、赛乐特、左洛复等（SSRI、 SN I、 NDRI等类的 5-HT、 E、 DA再摄取抑制剂）为主，其作用机制是通过增加人体神经介质内 5羟色胺等成分含量以援解忧郁症状。

但是，已问市的抗忧郁药物都有不同程度的副作用，例如：增加自杀率、头痛、头晕、晕眩、失眠、嗜睡、耳鸣、口干、厌食、食欲增加、体重上升、血压上升、肠胃不适、反胃、恶心、呕吐、消化不良、腹泻、便秘、下肢痛、皮肤出疹、颤抖、痉挛、多汗、水肿、性欲降低、性无能等。近年来百忧解等抗忧郁药物已成为社会严重关注的问题，美国食品暨药物管理局 ( Food and Drug Administration, FDA )更于 2004年要求药厂将市场上主要的 32种抗忧郁药物重新标示其副作用和警告的部分，并对医护人员强调这些药物可能增加儿童及青少年自杀的机率。其中，赛乐特更是早在 1996年就被发现存在有安全隐患，自 2001年开始已陆续从市场上召回。 2004年 6 月，美国纽约州总检察长指控英国葛兰素史克公司为了获取利润，欺骗性隐瞒了服用赛乐特与"增加青少年自杀倾向及行为的风险 "之间有关联的研究报告。在这种背景下，如何研发新一代副作用低叉能有明显抗忧郁作用的药物已成为全球医药界所关注的问题。

近年来，国际医药界的科学家们在忧郁症致病机理的研究方面出现了新的突破，发现除了以 5-HT、 NE、 DA的再摄取抑制方式治疗忧郁症之外，更可以采取调节受体后作用机制的方式治疗忧郁症，并且由于受体后作用机制调节类药物罗列普拉 ( Rolipram )的问世而成为医药界抗忧郁药物的研发热点。罗列普拉是四型磷酸二酯酶（ phosphodiesterase 4, PDE4 )的抑制剂，临床试验表明其具有明显的抗忧郁作用，但由于服用罗列普拉会出现强烈呕吐, 故被迫终止研发，然而罗列普拉却开拓了新一代 "受体后作用机制抗抑郁药物" 的研发思路。

综上所述，申请人在了解了公知技术中所具有的局限性后，经过悉心研究与探索，并本着锲而不舍的精神，终于发现了本发明的 "多靶标受体后作用机制用于治疗抑郁症的药物组合物" , 以下为本发明的简要说明。发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一组以包含人参皂甙 Rgl、 Rbl、甘草酸及大枣 cAMP的原料，制成多靶标受体后作用机制用于治疗抑郁症的口服药物或保健食品，特别是功效成份明确、疗效明显、长期服用安全性高、不会引起强烈呕吐等副作用的新技术方案。

本发明药物的解决方案是经发明人潜心研究探索的结果，依据现代医学治疗忧郁症的病理及药理学理论，特别是结合受体后作用机制抗忧郁药靶标研究，经过大量的动物实验证明：人参皂甙含有腺苷酸环化酶（ adenylate cyclase, AC )刺激腺苷，并含有 cAMP磷酸二酯酶（CAPD ) 的抑制成份；甘草酸（甘草次酸）是 cAMP磷酸二酯酶（CAPD )强抑制剂。人参皂甙、甘草酸（甘草次酸）二者配伍，协同作用，可以进一步提高 cAMP的利用度和活性，而 cAMP的浓度和活性增强，则可增加去甲肾上腺素（ norepinephrine, NE )等神经递质的合成与释放，增强脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor, BDNF ) 的表达，抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴 ( hypothalamic-pituitary-adrenal axis, HPA轴）的亢进和糖皮质激素的分泌，从而达到显著的抗忧郁功能。另外，大枣 cAMP亦可以提高人体 cAMP的表达，从而起到抗忧郁作用，将大枣中含量极微（约万分之一）的大枣 cAMP 提取并純化成含 1%大枣 cAMP的大枣提取物来进行抗试- 性抑郁作用动物试验的结果显示，具有明显的抗试验性抑郁功能，但仅通过常规的例如用水加温提取而未进一步纯化提高其提取物大枣 cAMP浓度的大枣提取物 ,虽然含有微量的大枣 cAMP却不具有明显的抗试验性抑郁功能，为了进一步增强本发明的抗忧郁功效，还可将大枣 cAMP、人参皂甙和甘草酸三者配伍。人参、甘草、大枣是几千年以来中医及食补药膳常用的药材和食品，在千百年的食用和临床使用过程中，已充分证明人参、甘草、大枣三者配伍的安全性，发明人研究及实验的结果证明这三种药材若仅以常规使用的煎煮方式提取所得的提取物和目前用于治疗忧郁症的抗忧郁药物相比不具备显著的抗忧郁疗效；但再采取例如上柱层析的纯化方式进一步提高提取物中所含的人参皂甙 Rgl、 Rbl及大枣 cAMP等有效成份的浓度，再加上甘草酸或甘草次酸等原料制成用于治疗忧郁症的药物，经过动物试验证明和目前用于治疗忧郁症的抗忧郁药物相比具有显著的抗忧郁功能；收集三种药材提取及上柱层析纯化得到提取物后剩余的残渣，以高效液相检测后虽然含微量的人参皂甙 Rgl、 R 、甘草酸和大枣 eAMP, 但是经过动物试验后证明没有显著的抗忧郁功能；而服用人参、甘草及大枣不会发生强烈呕吐等副作用，故发明人提出以人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸和大枣 cAMP为原料，制成多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的口服药物或保健食品，特别是除了例如用水、乙醇等溶剂加温提取之外更进一步纯化提高提取物中人参皂甙 Rgl、 Rbl及大枣 cAMP浓度的原料加上含甘草酸或甘草次酸等原料制成功效成份明确、疗效明显、长期服用安全性高、不会引起强烈呕吐等副作用的新技术方案以改进公知技术中所具有的不足之处。

本发明药物组合物与罗列普拉抗忧郁的药物标的及作用机制比较

作用机制 1.启动 cAMP依赖的酪氨酸羟化酶， 1.启动 cAMP依赖的酪氨酸羟化酶，增加 NE合成；增加 E合成；

2.磷酸化突触蛋白，增加 NE幹放； 2.磷酸化突触蛋白，增加 NE释放；

3.抑制磷酸二酯酶，减少 cAMP 降 3.抑制磷酸二酯酶，减少 cAMP降解解,提高 cAMP利用度而发挥作用。提高 cAMP利用度而发挥作用；

4.启动 AC, 增加 cAMP的浓度和活性；

5.通过提高 ATP促使 cAMP的生成；

6.促进苯丙酸透过血脑屏障，促进 NE、 DA的合成和下调 HPA轴；

7.通过直接上调脑细胞中 BDNF 和 NT-3的表达，抗应' ¾ 应。

服药反应会引起强烈呕吐等副作用。长期服用安全性高、副作用低，且可预防及改善神经退行性疾病及抗衰老。

本发明药物与公知的受体后作用机制的抗忧郁药物罗列普拉不同之处，在于既可以同样的通过多靶标受体后作用机制达到抗忧郁作用，又能避免如服用罗列普拉后所引起的强烈呕吐等副作用。

由于甘草酸在人体内转化为甘草次酸的转化率几乎达到 100%, 而脂溶性比甘草酸强的甘草次酸能够透过血脑屏障进入脑内，故甘草酸抑制 CAPD 起到抗忧郁功效是通过体内转化为甘草次酸来进行的，因此，可以用甘草酸或草次酸为原料加工制成本发明的药物组合物。

本发明揭露了一种多耙标受体后作用机制用于治疗抑郁症的药物组合物，所述药物组合物是由包括人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸或甘草次酸的原料所制成。

优选地，本发明的药物組合物，是由包括人参皂甙（Rgl+RM )合计 2〜26 重量份与甘草酸或甘草次酸 3~48重量份的原料所制成。

优选地，本发明的药物組合物，是由包括人参皂甙（Rgl+Rbl )合计 4〜13 重量份与甘草酸或甘草次酸 5〜16重量份的原料所制成。

根据本发明的另一概念，本发明揭露了一种多靶标受体后作用机制用于治疗抑郁症的药物组合物，所述药物组合物是由包括人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸或甘草次酸及大枣 cAMP的原料所制成。优选地，本发明的药物组合物 ,是由包括人参皂甙（ Rgl+Rbl )合计 2〜26 重量份与甘草酸或甘草次酸 3〜48重量份及大枣 cAMP 0.002-0.5重量份的原料所制成。

优选地，本发明的药物组合物，是由包括人参皂甙（Rgl+Rbl )合计 4-13重量份与甘草酸或甘草次酸 5~16重量份及大枣 cAMP 0.01-0.1重量份的原料所制成。

优选地，本发明的药物組合物可以包括药学上可接受的载体或添加剂，可以制成锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂等任何药剂学上所公知的口服药物剂型。

' 优选地，所述的药物组合物可用来制成用于治疗抑郁症的药物、保健食品和营养剂。

本发明的说明书和权利要求中所述的用于治疗忧郁症的口服药物，是实现本发明目的的核心内容，在本发明公开后，本领域的技术人员可以根据中医理论或是相关现代药理学理论，对上述药物进行常规的加减化裁或是用功效作用相同的其它中药有效成分（如远志甙、柴胡甙、甘草香豆素等）替代。这种常规的加减化裁和用作用机理相似或相同的其它 CAPD抑制剂、 AC启动剂的中药或是相应的有效成分来替代，均属于本领域技术和研究人员的一般性技术活动，故其都在本发明的保护范围之内。

通过参阅附图及详细说明可以更好地了解本发明。附图概述

图 1为制备本发明实施例 1药物的方法流程示意图。

图 2为制备本发明实施例 2药物的方法流程示意图。

图 3为制备本发明实施例 3药物的方法流程示意图。

图 4为制备本发明实施例 4药物的方法流程示意图。

图 5为制备本发明实施例 5药物的方法流程示意图。

图 6为制备本发明实施例 6药物的方法流程示意图。本发明的较佳实施方式

以下将结合附图和实施例进一步说明本发明。本发明主要是采用本领域技术人员公知的方法结合本发明的特征制备本发明所述的药物。以下实施例仅仅是为了说明，并非限定本发明。

为了完成本发明的目的，本发明特别提出下列技术方案。

本发明揭露了一种多靶标受体后作用机制用于治疗抑郁症的药物組合物，所述药物組合物由包括人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸或甘草次酸的原料制成。

方案一：

以含有人参皂甙 Rgl、 RM及甘草酸或甘草次酸的原料，加工制成本发明多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物組合物。

方案二：

以含有人参皂甙( Rgl+Rbl )合计 2-26重量份与甘草酸或甘草次酸 3〜48 重量份的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方案三：

以含有人参皂甙（Rgl+Rbl )合计 4-13重量份与甘草酸或甘草次酸 5~16 重量份的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方案四：

以含有人参皂甙 Rgl、 Rbl、甘草酸或甘草次酸及大枣 cAMP等原料，加工制成本发明多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物组合物。

方案五：

以含有人参皂甙（Rgl+Rbl )合计 2〜26重量份、甘草酸或甘草次酸 3〜48 重量份及大枣 cAMP 0.002~0.5重量份的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方案六：

以含有人参皂甙（Rgl+Rbl )合计 4-13重量份、甘草酸或甘草次酸 5~16 重量份及大枣 cAMP 0.01-0.1重量份的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方案七：

本发明的药物组合物可以包括药学上可接受的载体或添加剂，可以制成锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂等任何药剂学上所公知的口服药物剂型。

方案八：

本发明所述的药物组合物可用来制成用于治疗抑郁症的药物、保健食品和营养剂。

为了完成本发明的目的，特提出以下药物的制作方法。

方法一：

自人参及甘草中提取含有人参皂甙 Rgl、Rbl及甘草酸的提取物为原料，或直接釆用已制备成的含有人参皂武 Rgl、Rbl及甘草酸或甘草次酸的原料，加工制成本发明多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物组合物。

方法二：

将含有人参皂甙( Rgl+Rbl )合计 2~26重量份与甘草酸或甘草次酸 3〜48 重量份的原料，加工制成本发明的药物组合物。方法三：

将含有人参皂甙( gl+Rbl )合计 4~13重量份与甘草酸或甘草次酸 5〜1⁶ 重量份的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方法四：

自人参及甘草及大枣中提取含有人参皂甙 Rgl、 Rbl、甘草酸及大枣 cAMP的提取物为原料，或直接采用已制备成的含有人参皂戒 Rgl、 Rbl、甘草酸或甘草次酸及大枣 cAMP的原料，加工制成本发明多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物组合物。

方法五：

将含有人参皂甙（ Rgl+Rbl )合计 2〜26重量份、甘草酸或甘草次酸 3~48 重量份及大枣 cAMP 0.002〜0.5重量份的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方法六：

将含有人参皂甙（ Rgl+Rbl )合计 4-13重量份、甘草酸或甘草次酸 5~16 重量份及大枣 cAMP 0.01-0.1重量份的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方法七：

本发明所述的药物组合物可以包括药学上可接受的载体或添加剂，可以制成锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂等任何药剂学上所公知的口服药物剂型。

方法八：

将本发明所述的原料依保健食品生产制造标准的方法，加工制成本发明用于治疗忧郁症的保健食品。具体实施例

以下将结合附图和具体实施例进一步说明本发明。

实施例 1

请参阅图 1, 其为制备本发明实施例 1药物的方法流程示意图。在图 1 中, 先将 20 kg的人参破碎后用 70%乙醇溶液加温提取，经上柱层析分离纯化、干燥，得含 120 g人参皂甙（Rgl+Rbl ) 的人参提取物 0.8 kg; 接着，再将 10 kg的甘草破碎后常温浸泡 12小时，以水提醇沉法提取、浓缩干燥，得含甘草酸 200 g的甘草提取物 2 kg; 之后，将上述方法得到的人参提取物 150 g及甘草提取物 200 g粉碎混合均匀后，得 350 g (含 22.5 g人参皂甙 Rgl+Rbl及 20 g甘草酸）本发明方案一的药物組合物。

实施例 2

请参阅图 2, 其为制备本发明实施例 2药物的方法流程示意图。在图 2 中，将已制备成纯度为 96%的甘草次酸 3.96 g及实施例 1所得的人参提取物 200 g粉碎混合均匀后，得 203.96 g (含 30 g人参皂甙 Rgl+Rbl及 3.8 g甘草次酸）本发明方案二的药物组合物。

实施例 3

请参阅图 3, 其为制备本发明实施例 3药物的方法流程示意图。在图 3 中，将已制备成的 3.4 g纯度为 90%的人参皂甙 Rgl、 7.8 g纯度为 90%的人参鬼甙 Rbl及 36.8 g纯度为 95%的甘草酸粉碎混合均匀后，得 48 g (含 10 g 人参皂甙 Rgl+Rbl及 35 g甘草酸）本发明方案三的药物组合物。

实施例 4

请参阅图 4, 其为制备本发明实施例 4药物的方法流程示意图。在图 4 中，将 10 kg的大枣破碎后加水常温浸泡，再以水提醇沉法提取获得大枣提取液，再用大孔树脂 OU-2、 ME-2两柱先后连续上柱吸附分离、干燥，得含大枣 cAMP 0.3 g的大枣提取物 30 g作为原料供制备本发明药物。

接着，将实施例 1得到的人参提取物 150 g、甘草提取物 200 g及前述大枣提取物 3 g粉碎混合均匀后，得 353 g (含 22.5 g人参皂甙 Rgl+Rbl、 20 g甘草酸及 0.03 g大枣 cAMP )本发明方案四的药物组合物。

实施例 5

请参阅图 5, 其为制备本发明实施例 5药物的方法流程示意图。在图 5 中 , 将实施例 1得到的人参提取物 150 g及甘草提取物 200 g及实施例 4得到的大枣提取物 0.5 g粉碎混合均匀后，得 350.5 g (含 22.5 g 人参皂甙 Rgl+ bK 20 g甘草酸及 0.005 g大枣 cAMP )本发明方案五的药物组合物。

实施例 6

请参阅图 6，其为制备本发明实施例 6药物的方法流程示意图。在图 6 中，将已制备成的 6.8 g纯度为 90%的人参皂甙 Rgl、 15.6 g纯度为 90%的人参皂甙 Rbl、 26 g纯度为 96%的甘草次酸及实施例 4得到的大枣提取物 10 g粉碎混合均匀后，得 58.4 g (含 20 g人参皂甙 Rgl+Rbl、 25 g甘草次酸及 0.1 g大枣 cAMP )本发明方案六的药物组合物。

实验例一实施例 1对小鼠悬尾实验的影响

1.1 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0±2 g, 二级，北京首都医科大学实验动物科学部提供。

1.2 实验药品

实施例 1: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

1.3 实验仪器：秒表。 1.4剂量设计

实施例 1高剂量： 80 mg/kg/d,中剂量： 40 mg/kg/d及4氐剂量： 20 mg/kg/d。

1.5 实验方法及结果

1.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1.实施例 1高剂量組（80 mg/kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 1中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3.实施例 1低剂量组（20 mg/kg, PO,给药 7d )； 4.帕罗西汀組（ 3 mg/kg, PO,给药 7d )； 5.生理盐水组（PO )。最后一次给药后 1小时进行悬尾实验。

1.5.2 实验方法

将小鼠尾（距尾尖 1 cm处）用胶布粘在头高出台面 5 cm的木条上悬吊

6分钟，记录后 5分钟内小鼠的不动时间。

1.5.3 统计学处理

实验数据用 ±>¾)表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 1.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 1。

表 1、实施例 1对小鼠不动时间的影响

组另'】动物数（只）不动时间（秒）生理盐水组（模型组） 10 113.22士 21.18 帕罗西汀組 10 75.33±22.91* 实施例 1高剂量组 10 54.67±26.38** 实施例 1中剂量組 10 72.68±27.06* 实施例 1低剂量组 10 95.26±49.91 注：与模型组比较 * P<0.05 **P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 1高、中剂量组和帕罗西汀组均可減少小鼠悬尾后的不动时间，且与生理盐水组（模型组）相比有显著性差异，从而可以推断本发明实施例 1具有抗实验性抑郁功能。

实验例 2 实施例 1对小鼠利血平诱导体温下降的影响

2.1 实验动物

2.2 实验药品

• 实施例 1: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

利血平：广东邦民制药厂有限公司。

2.3 实验仪器

GM222型电子温度计，秒表。

2.4剂量设计

实施例 1高剂量： 80 mg/kg/d,中剂量： 40 mg kg/d及 4氐剂量： 20 mg/kg d。

2.5 实 ^方法及结果

2.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1.实施例 1高剂量组（80 mg/kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 1中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3.实施例 1低剂量组（20 mg/kg, PO,给药 7d )； 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg, PO,给药 7d )； 5.生理盐水组（PO ) 。

2.5.2 实险方法

在第 8天给药后 1小时测定小鼠肛温，然后经腹腔注射利血平 2 mg kg，于注射利血平后 4小时再测定小鼠肛温。每次测温时温度计插入小鼠肛门的深度及时间均一致。

2.5.3 统计学处理

实验数据用 ±5©表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 2.5.4 实验结果

. 实验结果请参阅表 2。

表 2、实施例 1对小鼠利血平诱导体温下降的影响

组另动物数（只）体温下降值（°c ) 生理盐水组（模型组） 10 3.65±0.77 帕罗西汀组 10 2.38±0.69** 实施例 1高剂量组 10 1.85±1.01** 实施例 1中剂量组 10 2.05±1.03** 实施例 1低剂量组 10 2.35±0.69** 注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 1高、中、低三个剂量组和帕罗西汀组均可明显减少利血平诱导的体温下降，表明其抗实验性抑郁作用可能与影响单胺递质含量有关，从而可以推断本发明实施例 1具有抗实^^性抑郁功能。

实验例 3 实施例 1对小鼠悬尾实验的影响

3.1 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0±2 g, 二级，北京首都医科大学实 -险动物科学部提供。

3.2 实验药品

实施例 2: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

3.3 实验仪器

秒表。

3.4剂量设计实施例 2高剂量： 80 mg/kg/d,中剂量： 40 mg/kg/d及低剂量： 20 mg/kg/d。

3.5 实验方法及结果

3.5.1 分組给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1.实施例 2高剂量组（80 mg/kg， PO, 给药 7d )； 2.实施例 2中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3.实施例 2低剂量组（ 20 mg/kg, PO,给药 7d )； 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg， PO,给药 7d )； 5.生理盐氷组（PO ) 。最后一次给药后 1小时进行悬尾实验。

3.5.2 实验方法

将小鼠尾（距尾尖 1 cm处）用胶布粘在头高出台面 5 cm的木条上悬吊 6分钟，记录后 5分钟内小鼠的不动时间。

3.5.3 统计学处理

实验数据用 ± S£>表示,实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。

3.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 3。

表 3、实施例 2对小鼠不动时间的影响

组别动物数（只）不动时间（秒）生理盐水组（模型组） 10 113.22士 21.18 帕罗西汀组 10 75.33±22.91* 实施例 2高剂量组 10 93.27±36.42

实施例 2中剂量组 10 76.21±28.36* 实施例 2低剂量组 10 107.79±32.56 注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 2中剂量组和帕罗西汀组均可减少小鼠悬尾后的不动时间，且与生理盐水组（模型组）相比有显著性差异，从而可以推断本发明实施例 2具有抗实验性抑郁功能。实验例 4 实施例 2对小鼠利血平诱导体温下降的影响

4.1 实验动物

4.2 实验药品

实施例 2: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

利血平：广东邦民制药厂有限公司。

4.3 实验仪器

GM222型电子温度计，秒表。

4.4剂量设计

实施例 2高剂量： 80 mg/kg/d.中剂量： 40 mg/kg/d及低剂量： 20 mg kg/d。

4.5 实睑方法及结果

4.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1，实施例 2高剂量组（80 mg kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 2中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3.实施例 2低剂量组（20 mg/kg, PO,给药 7d )； 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg, PO,给药 7d )； 5.生理盐水组（PO ) 。

4.5.2 实验方法

在第 8天给药后 1小时测定小鼠肛温，然后经腹腔注射利血平 2 mg/kg, 于注射利血平后 4小时再测定小鼠肛温。每次测温时温度计插入小鼠肛门的深度及时间均一致。

4.5.3 统计学处理

实验数据用 ±5ΐ>表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 4.5.4 实验结果实验结果请参阅表 4。

表 4、实施例 2对小鼠利血平诱导体温下降的影响

组别动物数（只）体温下降值（ V ) 生理盐水组（模型组） 10 3.65±0.77 帕罗西汀组 10 2.38士 0.69** 实施例 2高剂量组 10 2.93±0.74* 实施例 2中剂量组 10 2.31±0.82** 实施例 2低剂量组 10 3.21士 0.71 注：与模型组比较 * P<0.05 * <0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例中剂量组和帕罗西汀组均可明显减少利血平诱导的体温下降，表明其抗实验性抑郁作用可能与影响单胺递盾含量有关，从而可以推断本发明实施例 2具有抗实验性抑郁功能。

实验例 5 实施例 3对小鼠悬尾实验的影响

5.1 实-险动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0±2 g，二级，北京首都医科大学实验动物科学部提供。

5.2 实验药品

实施例 3: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

5.3 实验仪器：

秒表。

5.4剂量设计

实施例 3高剂量： 80 mg kg/d、中剂量： 40 mg/kg/d及低剂量： ²0 mg kg/d。

5.5 实验方法及结果 5.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每組 10只： 1.实施例 3高剂量組（80 mg/kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 3中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3.实施例 3低剂量组（20 mg/kg, PO,给药 7d )； 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg, PO,给药 7d )； 5.生理盐水组（PO ) 。最后一次给药后 1小时进行悬尾实验。

5.5.2 实验方法

将小鼠尾（距尾尖 1 cm处）用胶布粘在头高出台面 5 cm的木条上悬吊 6分钟 , 记录后 5分钟内小鼠的不动时间。

5.5.3 统计学处理

实验数据用土表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 5.5.4 实臉结果

实验结果请参阅表 5。

表 5、实施例 3对小鼠不动时间的影响

组另 J 动物数（只）不动时间（秒）生理盐水组（模型组） 10 113.22±21.18 帕罗西汀组 10 75.33±22.91* 实施例 3高剂量组 10 70.37±28.14* 实施例 3中剂量组 10 76.26±23.81* 实施例 3低剂量组 10 . 90.40士 31.32 注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 3高、中剂量组和帕罗西汀组均可减少小鼠悬尾后的不动时间，且与生理盐水组（模型组）相比有显著性差异，从而可以推断本发明实施例 3具有抗实验性抑郁功能。

实验例 6 实施例 3对小鼠利血平诱导体温下降的影响 6.1 实验动物

6.2 实验药品

实施例 3: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

利血平：广东邦民制药厂有限公司。

6.3 实驗仪器

GM222型电子温度计，秒表。

6.4剂量设计

实施例 3高剂量： 80 mg/kg/d,中剂量： 40 mg/kg/d及低剂量： 20 mg/kg/d。

6.5 实验方法及结果

6.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1,实施例 3高剂量组（80 mg/kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 3中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3·实施例 3低剂量组（20 mg/kg, PO,给药 7d ) ; 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg, PO, 给药 7d ) ; 5.生理盐水组（PO ) 。

6.5.2 实-险方法

6.5.3 统计学处理

• 实验数据用 ±S£)表示，实-睑结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 6.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 6。

表 6、实施例 3对小鼠利血平诱导体温下降的影响組别动物数（只）体温下降值（ V ) 生理盐水组（模型组） 10 3.65士 0.77 帕罗西汀组 10 2.38±0.69** 实施例 3高剂量组 10 2.18士 0.92** 实施例 3中剂量组 10 2.36士 0.83** 实施例 3低剂量组 10 2.97土 0.67* 注：与模型组比较 * P<0.05 **P<0.01

结论：

才艮据以上实验，可以看出本发明实施例 3高、中、低剂量组和帕罗西汀组均可明显减少利血平诱导的体温下降，表明其抗实验性抑郁作用可能与影响单胺递质含量有关，从而可以推断本发明实施例 3 具有抗实验性抑郁功 f¾。

实验例 7 实施例 4对大鼠嗅球损毁实验的影响

7.1 实睑动物

嗅球毁损模型：健康 Wistar雄性大鼠，二级，体重 330土20 g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司（合格证编号 SCXK (京） 2002-0003 ) 。

7.2试剂与药品

实施例 4由欧纳尔生物工程技术有限公司提供（批号： 060313 )，帕罗西汀为中美天津史克制药有限公司产品（批号： 0405001 1 ) , 以上药物用 0.5%羧甲基纤维素纳（CMC-Na )配制后供灌胃使用；注射用青霉素钠为华北制药股份有限公司产品（批号： S051 1204 ) ；去曱肾上腺素 ( NE )及 5- 羟色胺（5-HT )标准品为 Sigma公司产品；其它试剂均为市售。

7.3仪器

自制开野实验箱，避暗实验箱，大鼠脑立体定位仪，高效液相色语仪， DFM-96型 10管放射免疫 γ计数器。 7.4 实验方法

7.4.1动物分组与给药方法

大鼠随机分 6组，假手术组、模型对照組、实施例 4 高剂量组（60 mg/kg/d )、实施例 4中剂量组（ 30 mg/kg/d )、实施例 4低剂量组（ 15 mg/kg d )、帕罗西汀组（ 2 mg/kg d )。受试药与阳性药用 0.5%羧甲基纤维素纳（ CMC-Na ) 配制。每天一次灌胃给药。

7.4.2模型制备方法

大鼠用水合氯醛麻醉，麻醉后从大鼠前门前 1 cm至前囱后 1 cm正中线处切开，暴露颅骨。在距离前囱前 8 mm、正中线两侧 2 mm处分另 l]开骨窗，直径约 2 mm。用特制电烙铁垂直插入颅内 2秒，破坏嗅球，用止血海棉填充骨窗缝合皮肤；术后每 4天以腹腔注射（intraperitoneal, IP )给与青霉素钠 40,000单位/ Kg, 并连续给与受试药物 24天。

7.5观测指标

7.5.1开野实验

开野实验箱由浅蓝色胶合板及铝合金框架构成（ 1 m X 1 m X 0.4 m ) ，箱底划分为 25个方格（每个 20 cm x 20 cm ) , 沿四壁为外周格，其余为中央格。将动物放入正中方格中，观察 3分钟内动物的跨格次数（三爪以上跨入邻格）和站立次数（两前肢离地 1 cm以上）。

7.5.2被动回避实验一避暗法

· 实^:箱内由明、暗两室组成，中间有一个通道供大鼠出入，暗室隔栅与电击仪相联，两室间有一活动隔板。如大鼠进入暗室则遭电击。训练时，将大鼠头背向洞口放入明室中适应 5分钟，然后将隔板抽出观察 5分钟，记录大鼠首次进入暗室时间（触电潜伏期），此为学习成绩。 24 小时后重复测试，抽出隔板并通电 5分钟观察大鼠第一次钻入暗室的时间，此为记忆成绩。

7.6统计学处理

实验数据用 iS 表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。

7.7 实-睑结果 7.7.1 开野实验结果请参阅表 7。

表 7、嗅球毁损模型大鼠开野实验结果

水平运动垂直运动动物数

(跨格次数） (直立次数）实施例 4高剂量组 11只 49.18 + 27.68 ** 10.91 ±6.91 ** 实施例 4中剂量组 11只 54.55 ±23.01 13.45 ±5.72* 实施例 4低剂量组 11只 61.82 ±21.43 15.18 ±4.47 帕罗西汀组 11只 55.36 ±25.96* 14.36 ±5.55 模型组 11只 79.55 ± 24.33 19.09土 8.53 假手术组 11只 45.36 ±26.84** 10.45 ±6.19 ** 注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

7.7.2避暗实验结果请参阅表 8。

表 8、嗅球毁损模型大鼠避暗实验结果

动物数第一天潜伏期 (S) 第二天潜伏期 (S) 实施例 4高剂量组 11只 187.00 ±87.59* 289.82 ±28.59 * 实施例 4中剂量组 11只 191.71 +72.95 * 288.82 + 37.09* 实施例 4低剂量组 11只 152.44 + 76.81 271.18 ±38.61 帕罗西汀组 11只 181.87 ±90.54* 265.00土 65.39 模型组 11只 111.21 + 82.93 236.88 + 74.17 假手术组 11只 211.46± 82.10** 292.82 ± 14.37 * 注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

实验例 7结果显示：实施例 4高剂量组可明显改善嗅球毁损所造成的大鼠水平及垂直运动增加，实施例 4中剂量组对嗅球毁损模型大鼠的垂直运动增加也有明显改善作用。另外，实施例 4高、中剂量组对嗅球毁损所造成的大鼠学习及记忆功能减退也有明显改善作用。

实验例 8 实施例 4对大鼠不可预测长期应激实验的影响

8.1 实验

不可预测性长期应激模型：健康 Wistar雄性大鼠，二级，体重 240 ~ 270 g, 购于北京维通利华实验动物技术有限公司（合格证编号 SCXK (京） 2002-0003 ) 。

8.2试剂与药品

实施例 4由欧纳尔生物工程技术有限公司提供（批号： 060313 ) , 帕罗西汀为中美天津史克制药有限公司产品（批号： 04050011 ) , 以上药物用 0.5%羧曱基纤维素纳（CMC-Na )配制后供灌胃使用；注射用青霉素钠为华北制药股份有限公司产品（批号： S0511204 )；去甲肾上腺素（NE )及 5- 羟色胺（5-HT )标准品为 Sigma公司产品；其它试剂均为市售。

8.3仪器

自制开野实验箱，避暗实验箱，大鼠脑立体定位仪，高效液相色语仪，

DFM-96型 10管放射免疫 γ计数器。

8.4 实验方法

8.4.1 动物分组与给药方法

大鼠随机分 6组，假手术组、模型对照组、实施例 4 高剂量组（60 mg/kg/d )、实施例 4中剂量組（ 30 mg/kg/d )、实施例 4低剂量组（ 15 mg kg/d )> 帕罗西汀组 ( 2 mg/kg/d )。受试药与阳性药用 0.5%羧曱基纤维素纳（ CMC-Na ) 配制。每天一次灌胃给药。

8.4.2模型制备方法

不可预测性长期应激模型：空白对照组正常饮食饮水，不给任何刺激。其它五组，每笼饲养 1只，并接受 24天不可预知的应激刺激，包括： 3次 24小时禁食， 3次 24小时断水， 3次 24小时潮湿垫料（鼠盒中加水 200 ml ), 3次通宵照明， 3次 4°C冷水游泳 5分钟， 3次 45°C烤箱热烘 5分钟， 3次 1 分钟夹尾，及 3次 30分钟高速水平振荡。每天随机给予一种刺激，共刺激 24天，每种刺激不得连续给予。每天一次灌胃给药，共 24天。

8.5观测指标

8.5.1 开野实同上。

8.5.2被动回避实—除：同上。

8.5.3大鼠强迫游泳

末次给药后实验分两天进行。第一天预试 15分钟，玻璃缸内装 25°C温水，水深 25 cm。 24小时后，进行正式实验，给药后 1小时，将大鼠放入叙中，观察并记录 5分钟不动时间。

8.5.4体重测试

- 比较各组动物实前后体重的增加值。

8.5.5饮蔗糖水量测试：

比较各种动物蔗糖摄入量。让各组大鼠饮用 1%的蔗糖水（定时为 1小时），应激前、应激后 3周各测一次饮水量；大鼠在禁食禁水 14小时后，将 1%的蔗糖水放入笼中代替原来的饮用水。称量记录大鼠饮用蔗糖水 1小时前后的瓶重的差值计算每次的蔗糖水饮用量。比较各组每一次测试中糖水摄入量的差异。

8.5.6高效液相一电化学检测法

测定大鼠大脑皮质中 NE及 5-HT含量。

8.6统计学处理

实验数据用 ^土表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 8.7 实验结果

8.7.1 大鼠饮蔗糖水量结果请参阅表 9。

表 9、不可预测性长期应激模型大鼠饮蔗糖水量

动物数饮蔗糖水量 (g) 实施例 4高剂量组 13只 22.55士 5.03 实施例 4中剂量组 13只 26.53 ±4.99 **

.实施例 4低剂量组 13只 26.97士 6.93 ** 帕罗西汀组 13只 26.29 ±4.87 ** 模型组 13只 19.42 ±4.25 空白对照组 13只 29.41 +3.83 ** 注：与模型组比较 *P<0.05 **P<0.01

2 大鼠体重增量结果请参阅表 10。

表 10、不可预测性长期应激模型大鼠体重增量

动物数体重增量 (g) 实施例 4高剂量组 13只 86.08 ± 10.84 实施例 4中剂量组 13只 96.00 ± 11.05 ** 实施例 4低剂量组 13只 95.15 ±15.46 ** 帕罗西汀组 13只 96.85 ±9.30** 模型组 13只 84.92 ± 12.61 空白对照组 13只 120.54 ± 10.60 ** 注：与模型组比较 **P<0.01

3大鼠强迫游泳实-睑不动时间结果请参阅表 11。

表 11、不可预测性长期应激模型大鼠强迫游泳实验不动时间动物数不动时间 (秒）实施例 4高剂量组 13只 23.28 ± 18.05 ** 实施例 4中剂量組 13只 18.95 ± 12.55 ** 实施例 4低剂量组 13只 25.20 ± 13.60* 帕罗西汀组 13只 31.38 + 19.59 模型组 13只 39.95 ± 17.46 空白对照组 13只 26.96士 12.76 * 注：与模型组比较 <0.05， ** P<0.01

.7.4大鼠开野实验结果请参阅表 12。

不可预测性长期应邀模型大鼠开野实验结果

垂直运动（直立次动物数水平运动（跨格次数）

数）实施例 4高剂量组 14 58.31 士 15.35 * 16.54 ± 4.24 ** 实施例 4中剂量组 14 49.15 ± 14.26 13.54 ± 4.48 实施例 4低剂量组 14 52.62 + 21.83 16.15 ± 7.32 * 帕罗西汀组 14 61.85 ± 21.68 ** 14.69 + 4.2 模型组 14 39.54 ± 16.31 11.46 + 3.26 空白对照组 14 64.00 ± 11.97 ** 16.85 ± 3.18 ** 注：与模型组比较 *P<0.05, ** P<0.01

.7.5大鼠避暗实验结果请参阅表 13。

表 13、不可预测性长期应激模型大鼠避暗实验结果

动物数第一天潜伏期 (S) 第二天潜伏期 (S) 实施例 4 高剂量 13只 65.43 ± 31.44 259.22 ± 56.51 組 13只 58.18 ± 18.0 212.76 ± 77.27 实施例 4 中剂量 13只 75.98 ± 32.22 * 204.85 ± 94.99 组

13只 75.75 + 46.52 * 257.46 ± 66.92 实施例 4 低剂量

13只 50.01 ± 15.7 189.25 ± 111.99

13只 80.00 ± 39.17 * 263.38 ± 59.68 帕罗西汀組

模型组

空白对照组

注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

.7.6 大鼠大脑皮质中 NE及 5- HT含量检测结果请参阅表 14。表 14、不可预测性长期应激模型大鼠大脑皮质中 E及 5-HT含量动物

5-HT E

Mi-

(nmol/L脑组织匀浆） (nmol/L脑组织匀浆）

(只）

实施例 4高剂量组 12 230.4157±47.78554* 269.5409±58.86389** 实施例 4中剂量组 12 303.4418±70.31711** 227.2976士 28.95101** 实施例 4低剂量组 12 332.7343±76.25168** 201.8688±29.80775** 帕罗西汀组 12 227.0637±46.53838* 220.5419±38.31681** 模型组 12 179.3866±20.49374 57.6671±77.66958 空白对照组 12 228.1478±28.40397* 132.8598±20.84756** 与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

实 -捡例 8结果显示：实施例 4中小剂量组可明显改善不可预测性长期应激刺激所造成的饮蔗糖水量减少及体重下降；实施例 4高中低剂量组均可明显增加大鼠强迫游泳实验不动时间；实施例 4高剂量组可明显改善不可预测性长期应激刺激所造成的大鼠水平及垂直运动减少，实施例 4低剂量组对不可预测性长期应激刺激所造成的大鼠垂直运动减少也有明显改善作用；实施例 4 剂量组对不可预测性长期应激刺激所造成的大鼠学习能力降低有改善作用；实施例 4高中低剂量组均可明显增加大鼠大脑皮质中 E及 5-HT 含量。

实验例 9 实施例 5对小鼠悬尾实-睑的影响

9.1 药品

实施例 5由欧纳尔生物工程技术有限公司提供（中试放大产品）；帕罗西汀为中美天津史克制药有限公司产品（批号： 05070384 ) , 以上药物用生理盐水配制后供灌胃使用。

9.2动物 ICR小鼠，雄性，体重 20.0±l g, 二级，由北京大学医学部实 -险动物科学部提供，动物质量合格证号 SCXK (京） 2006-0008。

9.3仪器

秒表。

9.4方法

小鼠 70只，随机平均分成 5组， NS组、帕罗西汀组（3 mg/kg/d )、实施例 5高剂量组（80 mg/kg/d )、实施例 5中剂量组（40 mg/kg/d )、实施例 5低剂量组（20 mg/kg/d ) 。每日灌胃给药一次，于第八天给药后 1小时将小鼠尾端（距尾尖 1 cm处）用胶布粘在置于一敞口箱内的水平支撑物上，使小鼠呈倒悬状态，小鼠头距底面约 10 cm, 悬吊 6分钟，记录后 5分钟内小鼠的累积不动时间。

9.5统计学处理

实验数据以 ±ffi»表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行单因素方差分析。

9.6结果

小鼠悬尾实验不动时间结果请参阅表 15。

表 15、实施例 5对小鼠悬尾实验累积不动时间的影响

动物数 (只）剂量 (mg/kg/d) 不动时间 (秒）实施例 5高剂量组 14 80 64.75±42.22** 实施例 5中剂量组 14 40 55.41±33.83** 实施例 5低剂量组 14 20 62.75±26.61** 帕罗西汀组 14 3 53.27±20.02**

NS组 14 113.59±36.11 注：与 NS组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

研究结果显示实施例 5高、中、低三个剂量组及临床有效的抗抑郁药帕罗西汀均可明显缩短小鼠悬尾累积不动时间，表明实施例 5具有一定的抗实一险性抑郁作用。

实 ^瞼例 10 实施例 5对小鼠强迫游泳实 3 的影响

10.1 药品

实施例 5由欧纳尔生物工程技术有限公司提供 (中试放大产品）；帕罗西汀为中美天津史克制药有限公司产品（批号： 05070384 ) , 以上药物用生理盐水配制后供灌胃使用。

10.2动物

ICR小鼠，雄性，体重 20.0±l g, 二级，由北京大学医学部实验动物科学部提供，动物质量合格证号 SCXK (京） 2006-0008。

10.3 仪器

秒表。

10.4 方法

小鼠分组及给药如同小鼠悬尾实验。实验各组小鼠于给药 1小时后进行实验，实验前及第八天小鼠训练游泳 15分钟， 24小时后测试，将小鼠分别放入水深 10 cm、直径 14 cm的玻璃缸中，水温 25Ό , 观察 5分钟记录小鼠在水中的累积不动时间。

10.5 统计学处理

实验数据以土表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行单因素方差分析。

10.6 结果

小鼠强迫游泳实验结果请参阅表 16。

表 16、实施例 5对小鼠强迫游泳实验的影响

动物数剂量 (mg/kg/d) 不动时间 (秒） (只）实施例 5高剂量组 14 80 88.35±51.64* 实施例 5中剂量组 14 40 65.87±38.96** 实施例 5低剂量组 14 20 88.12±38.57* 帕罗西汀组 14 3 57廉 38.07**

■ NS组 14 132.47±40.64 注：与 NS组比较 <0.05 ** P<0.01

结论：

研究结果显示实施例 5高、中、低剂量组及临床有效的抗抑郁药帕罗西汀均可明显缩短小鼠强迫游泳累积不动时间，表明实施例 5具有一定的抗实验性抑郁作用。

实验例 11

将实施例 1及实施例 4提取后收集所剩的人参残渣 9公斤、甘草残渣 7 公斤与大枣残渣 0.9公斤，将其干燥、粉碎、混合均匀后得含极微量的人参皂甙 Rgl、 Rbl、及甘草酸和大枣 cAMP的残渣混合物，进行对小鼠悬尾实验的影响的对照试验。

11.1 实 ^验动物

11.2 实验药品

残渣混合物：北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

11.3 实验仪器

秒表。

11.4剂量设计

• 残渣混合物高剂量： 160 mg kg d、中剂量： 80 mg kg/d及、低剂量： ⁴0 mg/kg/d₀

11.5 实猃方法及结果

11.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每組 10只： 1.残渣混合物高剂量组（ 160 mg/kg, PO, 给药 7d )； 2.残渣混合物中剂量组（80 mg kg， PO, 给药 7d )； 3.残渣混合物低剂量组（40 mg/kg， PO, 给药 7d )； 4.帕罗西汀组（3 mg/kg, PO, 给药 7d )； 5.生理盐水组（PO )。最后一次给药后 1小时进行悬尾实验。

11.5.2 实验方法

将小鼠尾（距尾尖 1 cm处）用胶布粘在头高出台面 5 cm的木奈上悬吊 6分钟，记录后 5分钟内小鼠的不动时间。

11.5.3 统计学处理

实验数据用 ±5 )表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 11.5.4 实验结果

实验结杲请参阅表 17。

表 17、残渣混合物对小鼠不动时间的影响

动物数（只）不动时间（秒）生理盐水组（模型组） 10 82.03±43.01 帕罗西汀组 10 38.37±20.76* 残渣混合物高剂量组 10 76.91士 31.09 残渣混合物中剂量组 10 78.89±48.18 残渣混合物低剂量组 10 81.31±58.68

注：与模型组比较 * P<0.05 **P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出残渣混合物高、中、低三个剂量组虽可缩短小鼠悬尾后的不动时间，但与生理盐水組（模型组）相比差异无显著性，从而可以推断该残渣混合物不具有抗实验性抑郁功能。本发明用于治疗忧郁症的口服药物的应用范围：

1. 本发明所述的用于治疗忧郁症的口服药物中，可以含有药物学上可接受的添加剂；

' 2.本发明所述的用于治疗忧郁症的口服药物可以将其加工制成散剂、胶嚢剂、片剂、等各种已知的剂型；以及

3. 本发明所述的用于治疗忧郁症的口服药物可以制成用于治疗忧郁症的保健食品。

本领域技术人员可以对本发明做出各种改进，而不脱离如所附权利要求的保护范围。

Claims

权利要求书

1. 一种多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物组合物，包括：人参皂甙，其包含 Rgl及 Rbl; 及

甘草酸类，其由选自含甘草酸、甘草次酸及其组合之一的原料制成。

2. 如权利要求 1 所述的药物组合物，其中所述药物组合物包括 2 ~ 26 重量份的所述人参皂甙 Rgl + RW及 3〜48重量份的所述甘草酸类。

3. 如权利要求 1 所述的药物组合物，其中所述药物组合物包括 4 ~ 13 重量份的所述人参皂甙 Rgl + Rbl及 5 ~ 16重量份的所述甘草酸类。

4. 如权利要求 1 所述的药物組合物，其中所述药物组合物包括的所述人参皂甙是舍人参皂甙 Rgl及 Rbl的人参提取物；所迷甘草酸类是含甘草酸的甘草提取物。

5. 如权利要求 1 所述的药物组合物，其中所述药物组合物含有选自药学上可接受的载体、添加剂及其组合之一。

6. 如权利要求 1 所述的药物組合物，其中所述药物组合物制成剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型之一。

7. 如权利要求 1 所述的药物組合物，其中所述药物组合物制成保健食品或营养剂。

8. 一种多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物组合物，包括：人参皂甙，其包含 Rgl及 Rbl;

甘草酸类，其选自甘草酸、甘草次酸及其组合之一；及

大枣环磷酸腺苷为原料制成。

9. 如权利要求 8 所述的药物组合物，其中所述药物组合物包括 2 ~ 26 重量份的所述人参皂甙 Rgl + Rbl、 3 ~ 48重量份的所迷甘草酸类及 0.002 ~

0.5重量份的所述大枣环磷酸腺苷。

10.如权利要求 8所述的药物組合物，其中所述药物组合物包括 4 ~ 13 重量份的所述人参皂甙 Rgl + Rbl、 5 - 16重量份的所述甘草酸类及 0.01 ~ 0.1重量份的所述大枣环磷酸腺苷。

11.如权利要求 8所迷的药物组合物，其中所述药物组合物包括的所述人参皂甙是含人参皂甙 Rgl及 Rbl的人参提取物；所述甘草酸类是含甘草酸的甘草提取物；所述大枣环磷酸腺苷是含大枣环磷酸腺苷的大枣提取物。

12. 如权利要求 8所述的药物组合物，其中所述含大枣环磷酸腺苷的原料是下述的第二提取物：先提取大枣获得第一提取物，再纯化所述第一提取物得所述第二提取物，其中所述第二提取物的大枣环磷酸腺苷浓度高于所述第一提取物的大枣环磷酸腺苷浓度。

13. 如权利要求 8所述的药物组合物，其中所述药物组合物含有选自药学上可接受的载体、添加剂及其组合之一。

14.如权利要求 8所述的药物組合物，其中所述药物组合物制成剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型之一。

15. 如权利要求 8所述的药物组合物，其中所述药物组合物制成保健食品或营养剂。

16. 一种多靶标受体后作用机制用于治疗忧郁症的药物组合物的含大枣环磷酸腺苷的原料的制备方法，其包括下列步骤：

(a)提取大枣获得第一提取物；及

(b) 纯化所述第一提取物获得第二提取物，

其中所述第二提取物的大枣环磷酸腺苷浓度高于所述第一提取物的大枣环磷酸腺苷浓度。

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17.如权利要求 16所述的制备方法，其中步驟 (b)选用含酪基的大孔树脂上柱吸附分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

18.如权利要求 17所述的制备方法，其中步驟 (b)选用含基的大孔树脂

OU-2上柱吸附分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

19.如权利要求 18所述的制备方法，其中步骤 (b)再以大孔树脂 ME-²上柱分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。