WO2005107496A1 - 生キノコエキス製造方法、エキス及びエキス配合物 - Google Patents

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Gen-Ichiro Soma
Akio Yuasa
Kazuhiro Fukuta
Chie Kohchi
Hiroyuki Inagawa
Takashi Nishizawa
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Maruasaen Corporation
Tokushima Prefecture Government
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Definitions

  • the present invention relates to a method for producing a raw mushroom extract for producing an extract having an immunosuppressive function or an antiallergic effect, an extract thus obtained, and an extract blend containing the extract.
  • Shiitake mushrooms are broadly classified according to their shape into round and thick umbrellas, like a bud, and thick and thin umbrellas, like the Koshin. You. It is said that dried shiitake mushrooms have better taste, flavor and nutritional value than raw ones. Shiitake is a mushroom that has become the most familiar to consumers due to the taste and unique flavor of the guanylate-free amino acid contained. It is thought that dried shiitake mushrooms emit a good scent because when they are dried in the sun, an aromatic component called lentionin, which contains zodiac, is produced. Shiitake mushrooms are rich in ergosterol, a vitamin D precursor, that changes to 100 IU of vitamin D2 when exposed to ultraviolet light. This means that if you need dried Dried Shiitake mushrooms, you can supplement the vitamin D2 needed for one day. As described above, it is known that dried shiitake mushrooms are significantly different from raw shiitake mushrooms in texture, aroma and vitamins.
  • Patent Document 1 JP 2001-346538 A
  • Patent Document 2 JP 2004-248531 A
  • the present invention provides a raw mushroom extract production method for producing an extract having an immunosuppressive function or an antiallergic effect, an extract obtained in this manner, and an extract blend containing the extract. With the goal.
  • the method for producing a raw mushroom extract of the present invention is characterized in that edible raw mushroom fruit bodies are pasteurized, self-fermented, frozen, and then thawed.
  • raw fruiting bodies the umbrella and handle parts, which are generally recognized as mushrooms
  • their own protein was Degraded by protein decomposing enzymes to form free amino acids. This is because the production process (particularly pasting) is not only simply degraded but also oxidized by the action of oxidases and other factors. It is thought that.
  • the edible raw mushrooms are shiitake mushrooms, matsutake mushrooms, maitake, shimeji, enokitake, eryngii, mushroom, reishi, or agaritas, so that many types of mushrooms can be used as materials.
  • the extract of the present invention is characterized by being produced by the above-mentioned raw mushroom extract production method.
  • the above extract has an immunosuppressive function, it can be used for an extract having an immunosuppressive function different from the use of the immune activation function.
  • the above-mentioned extract exhibits an anti-allergic effect and can be used as an extract having a therapeutic / preventive effect against various diseases such as allergic diseases.
  • the extract composition of the present invention is characterized by containing the above extract.
  • the above-mentioned extract compound is a pharmaceutical product, a quasi-drug, a veterinary drug, a cosmetic, a food, or a functional food, so that it can be applied to many uses.
  • the present invention is a production method for separating and extracting an immunosuppressive effect contained in shiitake mushrooms by an extremely simple method.
  • an extract having an inhibitory effect on immune function can be produced.
  • this extract has a low polysaccharide content and can be easily powdered, making it an extremely easy-to-handle material.
  • a functional material having an effect of suppressing the immune function of human is provided. This will result in the development of functional foods that have therapeutic and preventive effects on various diseases, such as various infectious diseases and allergic diseases, necessary for modern humans.
  • FIG. 1 shows the results of measuring the amount of amino acids contained in each Shiitake mushroom extract.
  • FIG. 2 is a view showing the results of measuring the amount of ⁇ -aminobutyric acid contained in each Shiitake mushroom extract.
  • FIG. 3 is a diagram showing the immunosuppressive effect of each Shiitake mushroom extract.
  • FIG. 4 is a view showing the allergic reaction suppressing effect of the extract of the present invention.
  • raw shiitake mushrooms cultivated by the fungus bed cultivation method in Tokushima Prefecture were used immediately after harvest, that is, as fresh as possible.
  • the shiitake paste was packed in an appropriate amount in a bag, and the bag was sealed under reduced pressure using a vacuum pump or the like. This was kept at the above temperature for 2 to 18 hours, preferably 3 to 6 hours.
  • the raw shiitake mushrooms which were self-fermented following pasting, were slowly frozen below -20 ° C. After complete freezing, slow thawing was performed, and the thawed liquid obtained at that time was collected and subjected to heat treatment (120 ° C, about 40 minutes) for both inactivation and sterilization of the enzyme in the liquid.
  • the precipitate generated by the heat treatment was filtered with a filter press or the like, and then subjected to heat sterilization again to obtain a target extract.
  • the resulting extract has a water content of around 93% and contains almost no polysaccharide, 1-2% carbohydrates such as darcos and trehalose, 0.8-0.9% free amino acids, and 50-70mg / 100ml ⁇ -aminobutyric acid.
  • the shiitake mushroom extract prepared in this manner was used as FP extract.
  • the powdery FP extract can be dried by spray drying or freeze vacuum drying.
  • the following three types were prepared as control extracts.
  • the FT extract is prepared by pasting raw shiitake mushrooms, adding twice the volume of distilled water without in-house fermentation, extracting with hot water at 120 ° C for 50 minutes, and centrifuging (about 10,000 xg, 20 minutes). It is.
  • the SFP extract is an extract obtained by subjecting raw shiitake mushrooms to heat treatment (autoclave treatment at 120 ° C.
  • ND extract is a supernatant obtained by powdering dried shiitake mushrooms, adding the same amount of distilled water as the water content of the FT extract, extracting with hot water at 120 ° C for 50 minutes, and centrifuging (about 10,000 xg, 20 minutes) .
  • Table 1 shows the results of measuring the amounts of LPS (lipopolysaccharide), sugar, protein, and nucleic acid contained in each of the shiitake mushroom extracts obtained by the above production method.
  • FIG. 1 is a diagram showing the results of measuring the amount of amino acids contained in each Shiitake mushroom extract obtained by the above production method.
  • FIG. 2 shows the ⁇ -aminobutyric acid contained in each shiitake mushroom extract obtained by the above production method
  • FIG. 3 is a view showing the results of measuring the amount of GABA.
  • LPS was measured using Toxicolor System (Seikagaku Corporation) using standard endotoxin as a standard substance. The measured value is the sum of LPS and ⁇ -glucan.
  • the self-fermented FP extract showed an increase in free amino acids, except for a part, as compared with the FT extract and SFP extract, which were not self-fermented.
  • aspartic acid, proline, glycine, valine, Tyrosine was frequently detected.
  • aspartic acid and glutamic acid increase without grinding.
  • ⁇ -Aminobutyric acid which is being recognized as a functional component that normalizes hypertension, showed a 4-fold or more increase compared to FT extract.
  • polysaccharides which were present in a large amount in the FT extract or SFP extract once heated, were hardly extracted in the FP extract, and gelling by the polysaccharides could be avoided, and the extraction efficiency was dramatically improved. .
  • Immune activity can be compared with the amount of nitric oxide produced when macrophages are stimulated with LPS. Therefore, LPS (1 g / ml) and various Shiitake mushroom extracts diluted to 11.3% were added to a suspension (8 ⁇ 10 5 ⁇ 11 / 100 ⁇ 1) of the mouse macrophage cell line RAW264. Was added, and the culture supernatant after 24 hours was collected, and the nitrite concentration corresponding to the amount of nitric oxide produced by Daries' reagent was measured. Stimulation of RAW264 cells with LPS induces nitric oxide.
  • FP extract When FP extract is added here, the production of nitrogen is suppressed, and it is considered that the FP extract contains a factor that suppresses macrophage activation (FIG. 3).
  • Shiitake mushrooms are thought to contain both immunostimulatory and immunosuppressive components.
  • the immunosuppressive effect of FP extract is stronger than that of FT extract and ND extract, indicating that the immunosuppressive component of raw shiitake mushroom was effectively separated by the FP extract extraction method.
  • the content of GABA which is considered to be effective for amino acid component change and hypertension, is increasing, and this is thought to have a synergistic effect on the immune function suppressing effect.
  • an anti-dinitrophenyl (DNP) -IgE antibody was intravenously administered to a mouse, and 3 hours later, a solution containing di-trofluorobenzene (DNFB) was used as an allergen in the right ear of the mouse.
  • DNP di-trofluorobenzene
  • the thickness of the pinna is measured using a thickness gauge before and after application (at 1st, 2nd and 24th hours), and the increase in thickness of the force plate before application is edema m) It was calculated as Intravenous administration of vehicle A sex control group and a group to which an anti-DNP-IgE monoclonal antibody solution was intravenously administered were set as a positive control group.
  • the control group (negative and positive) had free access to water, and was orally administered with distilled water at 500 ⁇ l / mouse 2 hours before the application of the allergen.
  • prednine which is a steroid
  • the sample was administered intraperitoneally at a dose of 10 mg / kg of water-soluble predonin 2 hours before allergen application.
  • FP extract was freely ingested for 24 hours after 7 days before the allergen application, and 2 hours before the allergen application, a 2.5-fold aqueous solution was orally administered at 500 ⁇ l / mouse using a probe at 500 ⁇ l / mouse. .
  • the effect of drug administration was evaluated based on the rate of inhibition of the early reaction observed 1 hour after application of the allergen and the delayed reaction induced 24 hours later.
  • the inhibition rate was calculated by subtracting the average value of the edema of the positive control group at each time from the average value of the edema of the FP extract-administered or prednin-administered group, and the average value of the edema of the positive control group at each hour.
  • the value was calculated by multiplying the value obtained by dividing the average value of the edema of the group by the subtracted value by 100.
  • IgE ( ⁇ ) in FIG. 4 indicates the mean standard deviation of the edema of the negative control group to which the solvent was intravenously administered.
  • IgE (+) indicates the mean standard deviation of edema in the positive control group to which the anti-DNP-IgE monoclonal antibody solution was intravenously administered.
  • Predonin indicates the standard deviation of the edema of the predonin-administered group, which is known to have an effect of suppressing both the early response (edema at 1 hour) and the delayed response (edema at 24 hours).
  • FP extract indicates the mean standard deviation of edema in the FP extract administration group.
  • Raw materials such as granulated sugar, starch syrup, water and shiitake mushroom extract are mixed at a ratio of 5: 5: 5: 1 and heated. And boiled down at 120-160 ° C. This was cooled on a cooling iron plate, stretched into a rod shape, and shaped into granules of about 5 g to obtain candy. This candy had a taste of mushrooms (shiitake mushrooms) for everyone, with a good flavor. Because the extract stayed in the mouth for a long time, it alleviated inflammation of the throat.
  • the mushroom (shiitake mushroom) had a unique smell and a slightly brown color.
  • both hands were applied to only one hand of a woman with rough hands, the inflammation of the rough hands of the applied person was completely cured.

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Abstract

　椎茸の機能性に着目し新規で安全な免疫機能修飾エキスを提供することを課題として、生椎茸全体を原料としてペースト化し、これにより自家発酵を促進させ、さらに凍結・融解させることにより、免疫機能の抑制効果を示すエキスが製造可能である。かつ、このエキスは多糖類の含量が低く、粉末化することも容易で、極めて扱いやすい素材である。この発明により天然食材として広く流通している椎茸より、ヒトの免疫機能を抑制する作用を担う機能性素材が提供され、この素材を配合することにより現代のヒトに必要な諸種感染症やアレルギー性疾患等の諸疾患に対して治療・予防効果を持つ機能性食品が開発される。  

Description

明 細 書
生キノコエキス製造方法、エキス及びエキス配合物
技術分野
[0001] 本発明は、免疫抑制機能又は抗アレルギー効果を有するエキスを製造する生キノ コエキス製造方法、及びそのようにして得られるエキス、さらにそのエキスを配合した エキス配合物に関する。
背景技術
[0002] 椎茸は、その形状によって、傘がつぼみのように丸く肉厚な「冬姑（どんこ）」、傘が 開 、たように平らで肉薄な「香信 (こうしん)」に大別される。生よりも干した椎茸の方が 、味、風味、栄養価ともに上回るとされている。椎茸は、含有するグァニル酸ゃ遊離ァ ミノ酸の呈味性や独特の風味により、消費者に最も馴染まれてきたキノコである。干し 椎茸が良い香りを発するのは、日光に当てて乾燥させることにより、ィォゥを含むレン チォニンという芳香成分が生成されるためと考えられている。椎茸には、エルゴステロ ールというビタミン D前駆体が豊富に含まれており、紫外線が当たると、 100IUのビタミ ン D2に変化する。これは 1日に必要なビタミン D2を干し椎茸なら 1枚で補うことができ る。以上のように、干椎茸は生椎茸とでは食感 ·香り 'ビタミン等が大幅に異なることが 知られている。
[0003] また、古来より椎茸が不老不死の妙薬である等の民間伝承も多い。近年、科学的に も椎茸に含まれているレンチナン（ j8 -1-3グルカン)の免疫増強効果が喧伝された 経緯もあって、一般の消費者にお！ヽても「健康食品」としても認識が高！、食品である。 レンチナンは注射で効果が発現するものであるとともに、特殊な製造方法によって製 造されかつ高度に精製された医薬品成分として利用されているので、干し椎茸ある いは生椎茸そのものが加工食品あるいは自家発酵食品として免疫機能修飾作用を 期待できるかどうかに関してはこれまで十分に明らかになっているとは言えない。
[0004] 一方本発明者らは、椎茸については、コンピュータ管理した栽培により、均一な品 質を持つ生椎茸生産の他、生椎茸を原料とした加工食品の開発を行い、椎茸生産 技術に関して提案している (特許文献 1参照)。さらに、椎茸の多糖類の機能性に着 目すると同時に、自家発酵による食品素材及び新規調味料の開発等、各種食品素 材化技術を追求し生椎茸の高付加価値化に取り組んできた (特許文献 2参照)。自 家発酵とは、特別に他の微生物等を加えずに自身が持つ酵素反応等により内容成 分を (人間にとつて)有用な物質に変化させることである。
特許文献 1：特開 2001— 346538号公報
特許文献 2：特開 2004— 248531号公報
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0005] これまで椎茸が健康に対する機能性を示すことに関して、椎茸の機能性、とりわけ 免疫修飾効果に関しては十分な検討が加えられているとは言えず、椎茸の機能性に 着目して新規で安全な免疫機能修飾エキスを提供することはできなカゝつた。本発明 者らはさらに膨大な実験を長年にわたって繰り返した結果、椎茸には免疫増強と抑 制の両免疫制御作用があることを世界で初めて示す事に成功した。そこで、椎茸が 異なる成分を有する食品であることに着目し、これらの免疫制御の機能を解明'分離 して素材ィ匕を達成し、これを適切に用いる（食する）ことで諸疾患に対して予防 '治療 効果が期待でき、健康を維持する食品が開発可能であると着想した。実際に、椎茸 にはもともと免疫増強成分と免疫抑制成分が含有されていることを見出し、し力もそ れぞれの成分を含むエキスを分離製造することが可能であることを見出した。
[0006] また、免疫抑制作用力 期待させる諸疾患に対する予防 ·治療効果の一つとしてァ トビー性皮膚炎の実験動物モデルである IgE依存型アレルギー反応に対する抑制効 果を調べた。その結果、エキスの経口適用により、抑制効果すなわち抗アレルギー効 果が認められた。アトピー性皮膚炎は近年患者数が増加し、社会的問題になってき て 、る。にもかかわらずステロイド抵抗性など難治性アトピー性皮膚炎の療法は未だ 確立されているとは言えず、効果的な予防又は治療法の確立が望まれている。
[0007] そこで本発明は、免疫抑制機能又は抗アレルギー効果を有するエキスを製造する 生キノコエキス製造方法、及びそのようにして得られるエキス、さらにそのエキスを配 合したエキス配合物を提供することを目的とする。 課題を解決するための手段
[0008] 本発明の生キノコエキス製造方法は、可食性生キノコ子実体をペーストイ匕し自家発 酵させたものを凍結しその後融解することを特徴とする。これまでの実験で、生の子 実体 (一般にキノコと認識されている傘と柄の部分)をペーストイ匕し、一定期間、一定 温度で保存させることにより、遊離アミノ酸等の増加（自身のタンパク質がタンパク分 解酵素により分解され、遊離アミノ酸となった）が見られた。これは、通常「自己消化」 とも言われる力 本製造工程 (特にペースト化）においては、単純に分解のみでなく 酸化酵素等の働きによる酸化が考えられ、その結果アレルギー抑制に関与する成分 に変化すると考えられる。
[0009] また、前記可食性生キノコは、椎茸、松茸、マイタケ、シメジ、エノキタケ、エリンギ、 マッシュルーム、レイシ、又はァガリタスであることで、多くの種類のキノコを素材とする ことができる。
[0010] また、本発明のエキスは、上記生キノコエキス製造方法によって製造されたことを特 徴とする。
[0011] また、上記エキスは、免疫抑制機能をもつことで、免疫活性化機能の用途とは異な る免疫抑制機能をもつエキスの用途に用いることができる。
[0012] また、上記エキスは、抗アレルギー効果を示すことで、アレルギー性疾患等の諸疾 患に対して治療 ·予防効果を持つエキスの用途に用いることができる。
[0013] また、本発明のエキス配合物は、上記エキスが配合されていることを特徴とする。
[0014] また、上記エキス配合物は、医薬品、医薬部外品、動物用医薬品、化粧料、食品、 又は機能性食品であることで、多くの用途に応用することができる。
発明の効果
[0015] 本発明は、極めて簡単な方法で、椎茸に含まれる免疫抑制効果を分離してエキス 化する製造法である。本発明によれば、免疫機能の抑制効果を示すエキスが製造可 能である。かつ、このエキスは多糖類の含量が低ぐ粉末化することも容易で、極めて 扱いやすい素材である。この発明により天然食材として広く流通している椎茸より、ヒ トの免疫機能を抑制する作用を担う機能性素材が提供され、この素材を配合すること により現代のヒトに必要な諸種感染症やアレルギー性疾患等の諸疾患に対して治療 •予防効果を持つ機能性食品が開発される。
[0016] 本明細書は本願の優先権の基礎である特願 2004— 137881の明細書及び Z又 は図面に記載される内容を包含する。
図面の簡単な説明
[0017] [図 1]図 1は、各椎茸エキスに含有されるアミノ酸の量を測定した結果を示す図である
[図 2]図 2は、各椎茸エキスに含有される γ -ァミノ酪酸の量を測定した結果を示す図 である。
[図 3]図 3は、各椎茸エキスの免疫抑制効果を示す図である。
[図 4]図 4は、本発明エキスのアレルギー反応抑制効果を示す図である。
発明を実施するための最良の形態
[0018] 以下本発明の実施例を図面に基づいて説明する。ただし、以下に示す実施例は、 本発明の技術思想を具体ィヒするための免疫抑制エキスの製造方法、及びエキス、 及びエキスを配合した医薬品、医薬部外品、食品、化粧料を例示するものであって、 V、かなる意味でも発明はこれらに限定されるものではな!/、。
[0019] (1)原材料として用いたキノコ
原材料として、徳島県において菌床栽培方式で栽培された生椎茸を、収穫後直ち に、即ちできる限り鮮度の高いものを用いた。
[0020] (2)生椎茸のペーストイ匕
生椎茸をペーストイ匕する際には、磨砕機にて、 l,600rpmの回転数で 40ミクロン〜 70 ミクロンまで磨砕してペーストとした。そのとき、摩擦熱等による温度上昇は、椎茸磨 砕物の品温が 60°Cを超えず、ある程度の品温、 20°C〜50°C、好ましくは 30°C〜40°C となるように調節した。このペースト化が、自家発酵の促進につながる。 [0021] (3)ペースト化した椎茸の自家発酵
ペーストイ匕した生椎茸でさらに自家発酵を促進させるため、椎茸ペーストを適当量 袋に詰め、真空ポンプ等により減圧操作を行い、密封した。これを 2時間〜 18時間、 好ましくは 3時間〜 6時間、前記の温度で保温した。
[0022] (4)椎茸を素材にしたエキス製造法
ペースト化に続いて自家発酵させた生椎茸を、 -20°C以下に緩慢凍結させた。完全 に凍結後、今度は緩慢解凍を行い、そのとき得られる解凍液部を収集し、液中の酵 素失活及び殺菌を兼ねて加熱処理を行った（120°C、 40分程度)。加熱処理により派 生した沈殿は、フィルタープレス等でろ過後、再度、加熱殺菌処理を行い、目的のェ キスを得た。得られるエキスは、水分 93%前後でほとんど多糖類を含まず、ダルコ一 ス、トレハロース等の糖質を 1〜2%、遊離アミノ酸を 0.8〜0.9%、 γ -ァミノ酪酸を 50〜 70mg/100ml、ェリタデニンを 15〜20mg/100ml含み、 pH5.5〜6.5である。この方法で 調整した椎茸エキスを FPエキスとした。当該 FPエキスの粉末ィ匕はスプレードライもしく は凍結真空乾燥により可能である。対照エキスとして以下の 3種類を用意した。 FTェ キスは、生椎茸をペースト化し、自家発酵をさせずに 2倍量の蒸留水を加え、 120°C、 50分熱水抽出後、遠心分離 (約 10,000xg、 20分)した上清である。 SFPエキスは、生 椎茸をそのまま加熱処理（120°C、 50分のオートクレーブ処理）したものをペーストイ匕 し、以後の緩慢凍結力も FPエキスと同様の操作にて凍結解凍抽出したエキスである 。 NDエキスは、乾燥椎茸を粉末にし、 FTエキスの水分量と同量の蒸留水を加え、 120 °C、 50分熱水抽出後、遠心分離 (約 10,000xg、 20分)した上清である。
[0023] (5)各種椎茸エキス中成分の測定
表 1に、上記製造法によって得られた各椎茸エキスに含有される LPS (リポポリサッカ ライド)、糖、タンパク質、及び核酸の量を測定した結果を示す。
[0024] 図 1は、上記製造法によって得られた各椎茸エキスに含有されるアミノ酸の量を測 定した結果を示す図である。
[0025] 図 2は、上記製造法によって得られた各椎茸エキスに含有される γ -ァミノ酪酸（ GABA)の量を測定した結果を示す図である。
1) LPSは、トキシカラーシステム（生化学工業)を用い、標準エンドトキシンを標準物質 として、測定した。測定値は、 LPSと β -グルカンの総和である。
2)糖は、フエノール硫酸法により、グルコースを標準物質として測定した。
3)タンパク質はブラッドフォード法により、牛血清アルブミンを標準物質として測定した
4)核酸は OD260の吸光度 X 50 g/mlから算出した。
5)遊離アミノ酸量及び γ -ァミノ酪酸 (GABA)は-ンヒドリン法を利用しアミノ酸分析計 (6300Ε型、ベックマン社製）にて測定した。
[0026] 自家発酵させた FPエキスは、自家発酵してな 、FTエキスや SFPエキスと比較し、遊 離アミノ酸の増大が一部を除き認められ、特にァスパラギン酸、プロリン、グリシン、バ リン、チロシンが多く検出された。ただし、ァスパラギン酸とグルタミン酸は磨砕しなく ても増加することが分かる。
[0027] 高血圧を正常化する機能性成分として認知されつつある γ —ァミノ酪酸 (GABA)は FTエキスと比較して、 4倍以上の増大が認められた。なおかつ、一度熱をカゝけた FTェ キスや SFPエキスでは多く存在した多糖類が FPエキスではほとんど抽出されておらず 、多糖類によるゲルィ匕を避けることができ、抽出効率が飛躍的に向上した。
[表 1] 表 1 . 椎茸エキス中の LPS、 糖、 タンパク質、 及び核酸含量の比較
Figure imgf000008_0001
(6)椎茸エキスによるマクロファージ細胞に対する免疫抑制化
免疫活性はマクロファージを LPSで刺激した場合に産生される一酸ィ匕窒素量で比 較することが可能である。そこで、マウスマクロファージ細胞株 RAW264のけんだく液 ( 8 Χ 105οβ11/100 ^ 1)に、 LPS (1 g/ml)と、 11.3%になるように希釈した各種椎茸エキス をあわせて 100 /z l添加し、 24時間後の培養上清を回収し、ダリエス試薬にて産生され た一酸ィ匕窒素量に対応する亜硝酸濃度を測定した。 RAW264細胞を LPSで刺激する と一酸化窒素が誘導される。ここに FPエキスを加えると、この一酸ィ匕窒素産生が抑制 されることより、 FPエキス中には、マクロファージ活性ィ匕を抑制する因子が含まれると 考えられる（図 3)。前述したように、椎茸には免疫活性化成分と免疫抑制化成分の 両方が含まれていると考えられる。 FPエキスの免疫抑制効果は、 FTエキス、 NDェキ スに比べて強いことより、 FPエキス抽出方法にて、生椎茸の持つ免疫抑制成分が効 果的に分離されたことが示されている。 FPエキスでは、上述のようにアミノ酸の成分変 化及び高血圧に効果があるとされる GABAの含量が増えており、このことが免疫機能 の抑制効果に相乗的に作用することが考えられる。
[0029] (7) FPエキスの経口投与によるマウスの IgE依存性アレルギー反応に対する抑制効 果
FPエキスにっ 、て、マウスを用いた IgE依存性アレルギー反応の実験系により抑制 効果が認められるかどうかについて検討した。
[0030] 本実験系は抗ジニトロフ ニル (DNP) -IgE抗体をマウスに静脈内投与し、 3時間後 にジ-トロフルォロベンゼン（DNFB)を含む液を、アレルゲンとしてマウスの右側の耳 介に塗布することで誘導される耳介の浮腫に対して抑制効果を示す力調べるもので 、感作されたマスト細胞が抗原と結合し、ヒスタミンなどのケミカルメディエータを遊離 することで、誘導される早期反応（1時間目の浮腫)と、続いてサイト力インの産生によ る細胞浸潤により誘導される遅発反応 (24時間目の浮腫)を特徴とする。
[0031] 本実施例では、抗 DNP-IgEモノクローナル抗体溶液（1 μ g/BALB/cマウス）又はコ ントロールとして、抗体を溶解させて ヽな 、溶媒（りん酸バッファー）を静脈内投与し、 3時間後に 0.25%の DNFB (ジニトロフルォロベンゼン）を含むアセトン 'オリーブ油（4:1) 溶液 20 1を、アレルゲンとしてマウスの右側の耳介に塗布した。アレルゲン塗布の直 前にシックネスゲージを用いて耳介 (右）の厚さを測定した。塗布前及び塗布後（1時 間目、 2時間目及び 24時間目）に耳介の厚さをシックネスゲージを用いて測定し、塗 布前力ゝらの厚さの増加分を浮腫 m)として算出した。溶媒を静脈投与した群を陰 性対照群とし、抗 DNP-IgEモノクローナル抗体溶液を静脈投与した群を陽性対照群 とした。対照群（陰性及び陽性）は、水を自由摂取させ、さら〖こ、アレルゲン塗布 2時 間前に蒸留水を 500 μ 1/マウスでゾンデを用いて経口投与した。
[0032] 対照薬として、ステロイドであるプレドニンを用いた。サンプルの投与方法は、水溶 性のプレドニンは 10mg/kgの用量でアレルゲン塗布の 2時間前に腹腔内投与した。
FPエキスは、アレルゲン塗布の 7日前より 24時間後の間、自由摂取させ、さらに、ァレ ルゲン塗布 2時間前に 2.5倍濃度の水溶液を 500 μ 1/マウスでゾンデを用いて経口投 与した。
[0033] 薬剤の投与の効果はアレルゲン塗布 1時間後に認められる早期反応と、 24時間後 に誘起される遅発反応の抑制率で評価した。抑制率は、各時間の陽性対照群の浮 腫の平均値力 FPエキス投与群又はプレドニン投与群の浮腫の平均値を減じた値 を、各時間の陽性対照群の浮腫の平均値力 陰性対照群の浮腫の平均値を減じた 値で割った値に、 100を乗じて算出した。その結果、対照薬として用いたプレドニン投 与群では 70%以上の抑制率が早期及び遅発反応で認められた。これに対して椎茸 を原材料とし著しく安価に製造可能な FPエキス 1%添加群にぉ ヽても、 20〜40%程度 の抑制率が早期及び遅発反応で認められた。
[0034] 図 4の「IgE( -)」は、溶媒を静脈投与した陰性対照群の浮腫の平均値士標準偏差を 示す。
「IgE(+)」は、抗 DNP-IgEモノクローナル抗体溶液を静脈投与した陽性対照群の浮 腫の平均値士標準偏差を示す。
「プレドニン」は、早期反応（1時間目の浮腫)および遅発反応 (24時間目の浮腫)を 共に抑制する効果が知られているプレドニン投与群の浮腫の平均値士標準偏差を 示す。
「FPエキス」は、 FPエキス投与群の浮腫の平均値士標準偏差を示す。
[0035] (8)椎茸エキス配合食品の製造方法及び椎茸エキス配合食品
FPヱキス入り飴製造方法
原材料としてグラニュー糖、水飴、水、椎茸エキスを 5 : 5 : 5 : 1の割合で混合し、加熱 して 120°C〜160°Cで煮詰めた。これを冷却用鉄板上で冷却し、棒状に引き伸ばし て 5g前後の粒状に成型し飴を得た。この飴は、原料キノコ（椎茸）の風味はなぐ万人 向けの味であった。エキス分が口内に留まる時間が長いため、のどの炎症を緩和し た。
[0036] (9)椎茸エキスを使用したノ、ンドクリームの製造方法
1)FPエキス入り脂溶性クリーム処方
下記組成の脂溶性基材に FPエキスを 9対 1の割合で添加し、混合して軟膏を得た。 100g中
白色ワセリン 25g
ステアリルアルコール 20g
プロピレンァノレコーノレ 12g
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 60· · · '4g
モノステアリン酸グリセリン lg
パラォキシ安息香酸メチル O.lg
パラォキシ安息香酸プロピル O.lg
精製水 適量 含有
原料キノコ（椎茸)独特のにおいはなぐ若干褐色を呈した。両方の手に手荒れの ある女性の片手のみに塗布してもらったところ、塗布した方の手荒れの炎症が完治し た。
[0037] 2)椎茸エキス入り水溶性クリーム処方
下記組成表において、まず A組を 70度で加熱溶解し、これに 1/4量の精製水で溶き 70度で加熱溶解した B組と、 1/4量の精製水で溶き 70度で加熱溶解した C組をカロえ、 ホモジナイザーで充分混合した後、 40度まで冷却して、 D組をカ卩ぇ PHを 6.8まで調整 したものに残りの精製水と FPエキスを 30%加えて十分混合して乳液を得た。椎茸独 特のにおいは少なぐ若干褐色を呈した。椎茸エキスが持つ糖質等の保水性により、 肌の乾燥を防止した。手荒れ等の炎症を緩和した。 [表 2]
Figure imgf000012_0001
本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願をそのまま参考として本明 細書にとり入れるものとする。

Claims

請求の範囲
[1] 可食性生キノコ子実体をペーストイ匕し自家発酵させたものを凍結しその後融解する ことを特徴とする生キノコエキス製造方法。
[2] 前記可食性生キノコは、椎茸、松茸、マイタケ、シメジ、エノキタケ、エリンギ、マツシ ュルーム、レイシ、又はァガリタスであることを特徴とする請求項 1記載の生キノコェキ ス製造方法。
[3] 請求項 1又は 2記載の生キノコエキス製造方法によって製造されたことを特徴とする エキス。
[4] 免疫抑制機能をもつことを特徴とする請求項 3記載のエキス。
[5] 抗アレルギー効果を示すことを特徴とする請求項 3又は 4記載のエキス。
[6] 請求項 3乃至 5 、ずれかに記載のエキスが配合されて 、ることを特徴とするエキス 配合物。
[7] 前記エキス配合物は、医薬品、医薬部外品、動物用医薬品、化粧料、食品、又は 機能性食品であることを特徴とする請求項 6記載のエキス配合物。
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