WO2005045004A1 - アブラナ科植物病害の防除剤および防除方法 - Google Patents

アブラナ科植物病害の防除剤および防除方法 Download PDF

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disease
controlling
cgf4526
variovorax
plants
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PCT/JP2004/016597
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Inventor
Yoshiyuki Takahara
Katsumasa Nagai
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Central Glass Company, Limited
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Definitions

  • the present invention relates to an agent and a method for controlling cruciferous plant diseases using bacteria belonging to the genus Variovorax.
  • Clubroot which is a major soil disease of cruciferous plant diseases, is a soil fungal disease that occurs in more than 300 species of cruciferous plants such as Chinese cabbage, cabbage, cauliflower, and broccoli. Clubroot disease is hindering the stable production of these cruciferous crops. As a symptom, nodules are formed on the roots about 20 days after planting, and when infected from the early stage, cabbage and cabbage do not head, and even when infected after the latter half, the harvest does not increase, and harvesting does not occur at all. Some are not obtained.
  • Non-patent Document 1 filamentous fungi
  • Patent Document 2 bacteria belonging to the genus Bacillus
  • Patent Document 2 this your Rere over (-, Zhu 1 to Pseudomonas j3 ⁇ 4 Vietnam Enshisu (Pseudomonas vietnamiensi s) microorganism belonging to the, yellowing disease of cruciferous plants such as Chinese cabbage (Bateishiriumu disease
  • Non-Patent Document 1 Nihonbyoshoho Vol.62, 1996, p.281
  • Patent Document 1 JP-A-11-335217
  • Patent Document 2 JP 2003-231606 Summary of the Invention
  • An object of the present invention is to provide a controlling agent and a controlling method which are highly effective in controlling cruciferous clubroots such as Chinese cabbage clubroot and cabbage clubroot which are diseases of cruciferous plants without environmental pollution. To provide.
  • the present inventors have conducted intensive studies in order to solve the above-mentioned problems, and as a result, a strain of the genus Variovorax CG F4526 having a high control effect against clubroot of Brassicaceae plants such as Chinese cabbage ( Variovorax sp. CGF4526), and found that it is possible to particularly effectively control root-knot disease by bringing a control agent containing the present bacterium into contact with a cruciferous plant, thereby completing the present invention.
  • an agent for controlling root-knot disease of cruciferous plants comprising a strain of the genus Variovorax and a viable fungus thereof as an active ingredient, and a crucifer using the same
  • a method for controlling a plant clubroot disease is provided.
  • the Variovorax sp. CGF4526 strain according to the present invention not only effectively controls the clubroot disease of cruciferous plants but also has excellent storage stability and plant growth. It also has the effect of promoting odor, and has high practicality as a pesticide.
  • the use of the agent or method for controlling root-knot disease of cruciferous plants in the present invention can strongly suppress the onset of root-knot disease of cruciferous plants, and currently used chemical agents It has the same or better effect. Further, the use of the control agent of the present invention does not cause environmental pollution by pesticides unlike the existing chemical agents. Furthermore, the controlling agent of the present invention can be distributed in a stable state on the market. [0012] The controlling agent of the present invention can be mixed with seedling cultivation soil at the time of sowing and can be poured onto seeds before and after sowing. It is also possible to immerse the roots of the seedlings before planting in the diluent, or to inject the seedlings during growing or immediately before planting. INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, clubroot diseases of cruciferous plants such as Chinese cabbage, cabbage, cauliflower and broccoli can be strongly controlled without problems of environmental pollution.
  • the microorganism of the present invention is a strain of the genus Variovorax sp. CGF4526, which has a high control effect against root-knot disease of cruciferous plants. This strain (microorganism) was deposited as shown in the data below.
  • Variovorax sp. CGF4526 was selected from about 7000 strains of bacteria isolated and collected from rice and vegetables, based on the antibacterial activity against filamentous fungi and the disease control test using potted Chinese cabbage. This is the strain obtained as a result of the experiment.
  • the growth state of CGF4526 on a nutrient agar medium is shown below. The observation was performed after culturing at 30 ° C for 3 days.
  • CGF4526 The colony morphology of CGF4526 is cream-colored, round, smooth on all edges, low-convex, and glossy.
  • the 1530 bp nucleotide sequence of 16s-rRNA was determined.
  • a homology search was performed using the nucleotide sequence of the obtained 16s_rRNA.
  • the highest homology was Variovorax paradoxus.
  • CGF4526 is a gram-negative bacillus having motility, which is a bacterium belonging to Pseudomonas gnolepaceae by being positive for catalase activity, positive for oxidase activity and not forming endospores. Belongs to Pseudomonas gnorape II due to its assimilation Bacteria were classified. In addition, 16s-rRNA analysis indicated that it belongs to the genus Rioborax. In the genus Variovorax, it is considered Variovorax paradoxus (Variovorax paradoxus), but since it has not been determined, Variovorax sp.
  • the medium used here is not particularly limited as long as the bacteria can proliferate.
  • the medium appropriately contains a carbon source, a nitrogen source, and an inorganic substance capable of growing, any of a natural medium and a synthetic medium can be used.
  • the medium include a bouillon medium, a King B medium, a PS medium, and a PDB medium.
  • the concentration of the cells is usually concentrated to about 50 ⁇ 10 1 Q cfuZml.
  • the control agent of the present invention may be used as it is, the live bacteria after culturing, it is generally used as a solid or liquid preparation usable as an agricultural chemical. Therefore, the cultured wet cells are coated with a protective agent consisting of saccharides, sodium glutamate and sodium phosphate buffer, and dried under vacuum.
  • the protective agent may be mixed with the cells in the form of an aqueous solution or as a solid.
  • the immobilization of the cells of the present invention can be carried out by using a saccharide comprising one or more of saccharose, fructose, glucose and sorbitol as a protective agent, mixing with the cells, and vacuum drying. Alternatively, it can be performed by drying with a method such as freezing vacuum.
  • the Variovorax bacterium CGF4526 strain cultured here can be mixed with an appropriate carrier to prepare a powder or granules.
  • the carrier includes mineral powders such as talc, calcium carbonate, and diatomaceous earth; peat moss; high molecular compounds such as polybutyl alcohol; and natural high molecular compounds such as xanthan gum and alginic acid.
  • concentration of the bacterial cell 10 5 cfu / g or more, preferably 10 7 cfu / g or more.
  • 10 9 cfu / g or more preferably 10 1Q cfu / g or more.
  • control agent of the present invention can be used without a problem of phytotoxicity.
  • the control agent of the present invention can be mixed with seedling cultivation soil at the time of sowing, or can be poured onto seeds before and after sowing. Further, it is also possible to immerse the roots of the seedlings before planting in the diluent, or to inject the seedlings during raising or immediately before planting. It is preferable to combine the treatments at the time of sowing and at the time of planting because the colonization of the fungus on roots becomes more efficient.
  • the controlling agent of the present invention is used in the above method, in the case of the mixing treatment with the seedling cultivation soil, lg or more is mixed per 1 L of the soil, and the mixture is stirred so as to be uniform.
  • the bacterial concentration in the culture medium is 10 6 cfu
  • the diluent when the grown seedlings are immersed in the present diluent before or after sowing or before planting, the diluent has a bacterial concentration of 10 7 cfu / ml or more, preferably 10 8 cfu / ml or more. Adjust as follows.
  • CGF4526 is a fungal fungus (Fusarium oxysporum and 1> Vertici ⁇ lrum dali ae) that is a filamentous fungus among the bacteria isolated and collected from rice, vegetables, and weeds. Furthermore, as a result of selection by a pot test for yellowing and clubroot using Chinese cabbage seedlings, they were found to have an effect of controlling Chinese cabbage yellow spot and cruciferous plant clubroot, and were selected.
  • Antibacterial activity against Fusarium oxysporum and Chinese cabbage verticillium was measured by using a test strain of Fusarium oxysporum and Chinese cabbage verticillium daliae on a PDA medium. (Potato dextrose medium) was measured by performing confronting culture. Culture was performed at 25 ° C for 1 week or 3 weeks. [0030] Furthermore, the bacterial strain having antibacterial activity obtained in the confrontation culture was subjected to a control test against Chinese cabbage yellow rot and Chinese cabbage root-knot disease.
  • the method was as follows: roots of Chinese cabbage seedlings were immersed in a 10 8 cfu / ml diluted solution of the test strain for 24 hours at the time of planting, and planting was carried out on the contaminated soil four to five weeks after the planting. As a result, it was found that clubroot was strongly suppressed.
  • Bouillon medium meat extract 3g, peptone 10g, NaCl 15g, water 1L, pH 7.0
  • PDA medium potato dextrose medium: Potato exudate 200 g, glucose 20 g, water 1 L, pH 5.6) 0
  • Variovorax bacterium CGF4526 was cultured in a broth liquid medium for 24 hours, and the obtained cells were separated by centrifugation to prepare a suspension of the test bacteria.
  • Chinese cabbage seedlings (cultivar: Shin-Megumi Megumi) were immersed in this suspension and left for 24 hours while immersed in the suspension. After that, they were planted in contaminated soil.
  • the contaminated soil used was field soil that was homogenized and mixed with Chinese cabbage roots (with roots) that were infected by Chinese cabbage. After 33 days, the presence or absence of disease was investigated, and the control effect was determined. The results are shown in Table 2.
  • a high control effect was observed for the variolax bacterium CGF4526.
  • the degree of onset was calculated from the degree of root-knot formation, and the evaluated root-onset index was 0; healthy, 1; no more than 10% of roots were attached, and 2; 3 to 50% of the roots have attached nodules. 3; 50% or more of the roots have attached nodules.
  • Severity 100 X ⁇ (index value) X (number of individuals corresponding to each index) ⁇ ⁇ ⁇ 3 X (number of test strains)
  • Variovorax bacterium CGF4526 was cultured in a broth liquid medium for 24 hours, and the obtained cells were separated by centrifugation to prepare a suspension of the test bacteria.
  • Broccoli seedlings (variety: Ryokutei) were immersed in this suspension, and left for 24 hours while immersed in the suspension. After that, they were transplanted to a 10.5 cm polypot filled with contaminated soil mixed with the crushed liquid of the roots affected by Chinese cabbage. Approximately 30 days later, the presence or absence of disease was examined, and the control effect was determined. The results are shown in Table 3.
  • the concentration of the suspension of the Norobolux bacterium strain CGF4526 was 10 8 cfu / ml. As a result, a high control effect was observed for the Variovorax bacterium CGF4526.
  • the vario borax bacteria CGF4526 strain was cultured for 24 hours in broth liquid medium, the obtained cells were separated by centrifugation and incorporated into a cell concentration of 10 8 cfu / g sowing soil.
  • Chinese cabbage seeds (variety; Megumi Shin Ideal) were sown and raised for 3 weeks.
  • a suspension (10 8 cfu / ml) of the Varioborax bacterium strain CGF4526 cultured in the same manner was prepared, and Chinese cabbage seedlings were immersed in the suspension and left for 24 hours while immersed in the suspension. After that, the plants were planted in a field mixed with the crushed liquid of the diseased root of Chinese cabbage. Approximately 65 days later, the presence or absence of disease was investigated, and the control effect was determined. The results are shown in Table 4. As a result, a high control effect was observed for Norioborax bacterium CGF4526.

Abstract

アブラナ科植物根こぶ病害に対して拮抗能を有するバリオボラックス属細菌ＣＧＦ４５２６を有効成分として含む防除剤をアブラナ科植物と接触させることによって、アブラナ科植物病害である根こぶ病害に対して防除効果が高く、環境汚染のないアブラナ科病害の防除剤および防除方法を提供が提供される。

Description

明 細 書
アブラナ科植物病害の防除剤および防除方法
技術分野
[0001] 本発明は、学名バリオボラックス属（Variovorax)に属する細菌を用いたアブラナ科 植物病害の防除剤および防除方法に関する。
発明の背景
[0002] アブラナ科植物病害の主要な土壌病害である根こぶ病は、ハクサイ、キャベツ、カリ フラワー、ブロッコリ一などアブラナ科植物 300種以上の植物に発生する土壌糸状菌 病害である。根こぶ病は、これらアブラナ科作物の安定した生産に支障をきたしてい る。病徴としては、植付け後 20日位から根にこぶが生成し、初期から感染した場合に はハクサイやキャベツでは結球せず、後半以降に感染した場合でも収穫物が大きく ならず、全く収穫が得られないことも見られる。
[0003] 現在、アブラナ科植物の根こぶ病害の防除には、土壌消毒剤としていくつかの化 学薬剤が使用されている。しかし、これらの化学薬剤には、環境上の問題や使用者 及び近隣住民への安全性の問題、さらに近年の消費者の減農薬'無農薬指向に合 致しないというような問題がある。更には、病原菌の菌密度が高い場合には、効果が 劣ることも稀ではない。
[0004] そこで、この病害の防除には、防除効果が高ぐ水質汚染などの環境汚染及び安 全性を満足する防除剤の開発が望まれている。
[0005] これまでにアブラナ科植物根こぶ病に対しての生物防除法は、糸状菌（非特許文 献 1)やバチルス属細菌（特許文献 1)がある。また本願に関連する技術として、特許 文献 2ίこおレヽー (-、シュ1 ~ドモナス j¾ベトナ ェンシス (Pseudomonas vietnamiensi s)に属する微生物が、ハクサイ等のアブラナ科植物の黄化病（バーテイシリゥム病害
)に防除効果を有することが開示されている。
非特許文献 1 :日植病報第 62卷、 1996年、 p. 281
特許文献 1 :特開平 11-335217
特許文献 2 :特開 2003-231606 発明の概要
[0006] 本発明の目的は、アブラナ科植物病害であるハクサイ根こぶ病、キャベツ根こぶ病 等のアブラナ科根こぶ病に対して防除効果が高ぐ環境汚染のない防除剤および防 除方法を提供することである。
[0007] 本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を行った結果、ハクサイ等ァ ブラナ科植物の根こぶ病に対して高い防除効果を有するバリオボラックス属細菌 CG F4526株（Variovorax sp. CGF4526)を見出し、本細菌を有効成分とする防除 剤を、アブラナ科植物に接触させることで、根こぶ病害の防除を特に効果的に行える ことを見出し、本発明を完成した。
[0008] 本発明に依れば、バリオボラックス属（Variovorax)菌株並びにその生菌を有効成 分として含有することを特徴とするアブラナ科植物根こぶ病の防除剤並びにそれを 用いたアブラナ科植物根こぶ病害の防除方法が提供される。
詳細な説明
[0009] 本出願人は、アブラナ科植物の根こぶ病に対して高い防除効果を有するァシドボ ラックス属デラフィールディ（Acidovorax delafieldii)に属する微生物を見レ、だし、 既に特許出願をしている（特願 2002_158565 (特開 2003—342109) )。また、同じ くアブラナ科植物の根こぶ病に対して高い防除効果を有するシユードモナス属べトナ ミエンシス（Pseudomonas vietnamiensis)に属する細菌を見出し、特許出願して レヽる（特願 2003-171251)。
[0010] 本発明に係るバリオボラックス属細菌 CGF4526株（Variovorax sp. CGF452 6)は、アブラナ科植物の根こぶ病害を効果的に防除するのみならず、保存安定性に も優れ、植物の生長を促進する作用も併せ持ち、農薬としての高い実用性を有して いる。
[0011] 本発明におけるアブラナ科植物根こぶ病害の防除剤または防除方法を用いれば、 アブラナ科植物根こぶ病の病害に対して発病を強く抑制することができ、現在使用さ れている化学薬剤と同等以上の効果を奏する。また、本発明の防除剤の使用は既存 の化学薬剤のように農薬による環境汚染を引き起こすことはない。さらに、本発明の 防除剤は市場において安定な状態で流通させることができる。 [0012] 本発明の防除剤は、播種時の育苗培土に混合したり、播種前後の種子にかん注す ること力 Sできる。さらに定植前の苗の根をその希釈液に浸漬したり、育苗中または定 植直前の苗にかん注する方法も可能である。本発明により、ハクサイ、キャベツ、カリ フラワー、ブロッコリ一などのアブラナ科植物の根こぶ病害を、環境汚染の問題もなく 、強く防除できる。
[0013] 本発明の微生物は、アブラナ科植物根こぶ病害に対して高い防除効果を有するバ リオボラックス属細菌 CGF4526 (Variovorax sp. CGF4526)菌株である。この 菌株 (微生物）は、以下のデータに示されるとおりに、寄託された。
1)寄託機関の名称と宛名：独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託セ ンター 郵便番号 305 - 8566 茨城県つくば巿東 1丁目 1番地 1 中央第 6
2)寄託曰：2003年 10月 21曰
3)受託番号： FERM BP-10160
[0014] バリオボラックス属細菌 CGF4526 (Variovorax sp. CGF4526)は、イネや野 菜から分離収集した約 7000菌株の細菌から、糸状菌に対する抗菌活性、さらにポッ ト栽培ハクサイによる病害防除検定試験による選抜の結果得られた菌株である。
[0015] バリォボラックス属細菌〇0 4526 (¥& 0 0 & 3 . CGF4526)は、光学顕微 鏡および電子顕微鏡での形態観察の結果、細胞の大きさは、 1一 3 μ ΐηの桿菌であり 、細胞の多形性はなぐいずれも運動性を有していた。グラム反応は、陰性で、内胞 子は形成しなかった。
[0016] その他の細菌学的性質について、以下に示す。
1.培養的性質
CGF4526の栄養寒天培地における生育状態を以下に示す。観察は、 30°C、 3日 間培養後に行った。
[0017] CGF4526のコロニー形態は、クリーム色、円形、全縁滑らか、低凸状、光沢ありで ある。
2.一般的性質
[0018] [表 1] 形態 かん菌（0.7~0.8 1. 5~2.0/ 111)
厶染色 性 ： +
細胞運培グ 温度 37°C ： +
胞子動養ラ 45¾：
カタラーゼ
才キシダーゼ ： +
O Fテスト
硝酸塩還元
インドール産生
ブドウ糖酸性化
アルギニンヒドラターゼ
ウレァ一ゼ +
エスクリン加水分解
ゼラチン加水分解
0—ガラクトシダーゼ ：
チトクロームォキシダーゼ +
M a c C o n k e y寒天 lg地での生育性：■
溶血性 一
资化性
ブドウ糖 ： +
Lーァラビノース： +
D—マンノース： +
D—マンニ卜一レ： +
N—ァセチルー D—ダルコサミン： +
マルトース：一
ダルコン酸カリウム： +
n—力プリン酸 +
アジビン酸
d I—リンゴ酸 +
クェン酸ナ卜リウ厶
齚酸フ Iニル ：
[0019] 3. 16s_rRNA分析
16s-rRNAの塩基配列 1530bpを決定した。解析は得られた 16s_rRNAの塩基 配列を用いて相同性検索を行った結果、相同率の上位はバリオボラックス 'パラドキ サス (Variovorax paradoxus)であった。
[0020] 以上の細菌学的性質により、 CGF4526は、運動性を有するグラム陰性の桿菌で、 カタラーゼ活性陽性、ォキシダーゼ活性陽性、内胞子を形成しないことにより、シュ ードモナスグノレープに属する細菌であり、資化性からシユードモナスグノレープ IIに属 する細菌に分類された。また、 16s— rRNA解析から、ノくリオボラックス属細菌に属す ることがわ力つた。なお、バリオボラックス属の中では、バリオボラックス 'パラドキサス（ Variovorax paradoxus)と考えられるものの、断定するには至っていないために、 バリオボラックス 'エスピー (Variovorax sp. )とした。
[0021] 次に、これらの菌の培養および防除剤としての製剤は、慣用の手法で行うことがで きるが、以下に例をもって説明する。ここで使用する培地は菌が増殖するものであれ ば特に限定するものではない。生育に可能な炭素源、窒素源、無機物を適当に含有 している培地であれば、天然培地、合成培地のいずれも用いることができる。培地と してはブイヨン培地、キング B培地、 PS培地、 PDB培地などが例示できる。以上のよ うな培地で 15— 42°C好ましくは 28°C— 35°Cで 12— 48時間培養し増殖させたのち に遠心分離機もしくは膜濃縮機により濃縮して集菌を行い培地成分を取り除く。この 操作により菌体の濃度は通常 1一 50 X 101QcfuZml程度に濃縮される。本発明の防 除剤は、培養後の生菌をそのまま使用しても良いが、一般には農薬として使用可能 な固体または液体の製剤として使用される。したがって、培養した湿菌体に糖類とグ ルタミン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム緩衝液からなる保護剤をカ卩え、真空乾燥するも のである。
[0022] 真空乾燥する前に保護剤と混合した菌体を予備凍結し、凍結したまま真空乾燥す ることが菌の生存率を維持するためには好ましい。なお、保護剤は水溶液の状態で 菌体と混合してもよぐ固体のまま混合してもよい。
[0023] 本発明の菌体の固定化は、保護剤としてサッカロース、フルクトース、グルコースお よびソルビトールの一種または二種以上からなる糖類を用いることで行レ、、菌体と混 合し、真空乾燥もしくは凍結真空などの方法で乾燥することによって行うことができる
[0024] ここで培養したバリオボラックス属細菌 CGF4526株は、しかるべき担体と混合し、 粉剤もしくは粒剤とすることができる。この場合の担体には、タルク、炭酸カルシウム、 ケイソゥ土等の鉱物性粉末や、ピートモス、さらには、ポリビュルアルコールなどの高 分子化合物、ザンサンゴムやアルギン酸などの天然高分子化合物などがある。菌体 の濃度は、 105cfu/g以上、好ましくは 107cfu/g以上とする。水和剤の場合には、 109cfu/g以上、好ましくは 101Qcfu/g以上とする。
[0025] 一般にハクサイ、キャベツ、カリフラワー、ブロッコリ一などアブラナ科植物の生産は 育苗トレイに播種し、 3— 5週間育苗した後に、畑に定植を行う。本発明の防除剤は、 薬害の問題もなく使用できる。本発明の防除剤は、播種時の育苗培土に混合したり、 播種前後の種子にかん注することができる。さらに定植前の苗の根をその希釈液に 浸漬したり、育苗中または定植直前の苗にかん注する方法も可能である。播種時及 び定植時の両方の処理を組み合わせると根への本菌の定着がより効率的になるた め好ましい。
[0026] 本発明の防除剤を上記方法で使用する場合、育苗培土への混合処理の場合は、 土壌 1L当りに lg以上混合し、均一になるように撹拌する。培土中の菌濃度は 106cfu
/g以上、好ましくは 107cfu/g以上になるように調整する。
[0027] また、育苗された苗を播種前後もしくは定植前に本防除剤希釈液に浸漬処理する 場合の希釈液の菌濃度は 107cfu/ml以上、好ましくは 108cfu/ml以上になるよう に調整する。
[0028] 次に、バリオボラックス属細菌 CGF4526の選抜について詳しく記載する。 CGF45 26は、イネ、野菜および雑草などから分離 ·収集した細菌の中から糸状菌であるトマ ト 凋病菌 (Fusarium oxysporumノおよ 1>ハクサイ ィ匕病菌 (Vertici丄 lrum dali ae)に対する抗菌活性、さらにハクサイ苗を用いた黄化病および根こぶ病ポット検定 試験による選抜の結果、ハクサイ黄化病およびアブラナ科植物根こぶ病に対し、防 除効果を有することを見出し、選抜された。具体的には、圃場力 採取した植物の根 を水道水で洗浄した後、根を細かく裁断し、滅菌水に入れ、ミキサーで潰した。その 潰した液を、適当に希釈し、ブイヨン寒天培地に塗布し、培養を行った。そこで出現し たコロニーを単離、保存し、供試菌株とした。
[0029] トマト萎凋病菌（Fusarium oxysporum)およびハクサイ黄化病菌（Verticillium daliae)に対する抗菌活性の測定は、トマト萎凋病菌（Fusarium oxysporum)お よびハクサイ黄化病菌（Verticillium daliae)と供試菌株を PDA培地（ポテトデキス トロース培地）上で対峙培養を行うことにより測定した。培養は、 25°Cで 1週間または 3週間行った。 [0030] さらに、対峙培養で得られた抗菌活性を有する菌株について、ハクサイ黄化病及び ハクサイ根こぶ病に対して防除試験を行った。方法は、供試菌株の 108cfu/ml希釈 液にハクサイ苗の根を植付け時に 24時間浸漬処理を行レ、、汚染土壌に植え付けた 後、 4一 5週間目に発病調查を行った。その結果、根こぶ病を強く抑制することがわ かった。
[0031] 以下の実施例は本発明を例証するものであるが、本発明は以下の実施例によって 限定されるものではない。なお、実施例に用いた培地の組成を次に示す。
ブイヨン培地：肉エキス 3g、ペプトン 10g, NaCl 15g、水 1L、 pH7. 0
PDA培地（ポテトデキストロース培地）：ポテト滲出液 200g、ブドウ糖 20g、水 1L、 pH 5. 6) 0
[0032] 〔実施例 1〕 ハクサイ根こぶ病に対する防除試験
バリオボラックス属細菌 CGF4526株をブイヨン液体培地で 24時間培養し、得られた 菌体を遠心により分離し、供試菌の懸濁液を調整した。この懸濁液に、ハクサイ苗（ 品種:新理想めぐみ）を浸漬し、懸濁液に浸漬したまま 24時間置いた。その後、汚染 土壌に植え付けた。汚染土壌は、ハクサイ根こぶ菌に罹病したハクサイ根 (根こぶ付 き）をホモジナイズし混和した畑土壌を使用した。 33日間後に発病の有無を調査し、 防除効果の判定を行った。その結果を表 2に示す。
[0033] バリオボラックス属細菌 CGF4526株の懸濁液の菌濃度は、 1 X 108cfu/mlで行 つた。その結果、バリオボラックス属細菌 CGF4526に高い防除効果が認められた。 ハクサイ根こぶ病の検定は根部の根こぶの生成程度から発病度を算出し、評価した 根部発病指数 0 ;健全、 1 ;根の 10%以下に根こぶの付着を認める、 2 ;根の 10%か ら 50%に根こぶの付着を認める、 3 ;根の 50%以上に根こぶの付着を認める。
発病度 = 100 X {∑ (指数の値） X (各指数に該当する固体数） } ÷ { 3 X (供試株数）
}。
[0034] [表 2] 処理 供試株数 発病株率 発病度 防除価 無処理 8 1 0 0 . 0 6 6 . 7 ―
CGF4526 8 2 5 . 0 1 2 . 5 8 1 . 3 [0035] 〔実施例 2〕 ブロッコリ一根こぶ病に対する防除試験
バリオボラックス属細菌 CGF4526株をブイヨン液体培地で 24時間培養し、得られた 菌体を遠心により分離し、供試菌の懸濁液を調整した。この懸濁液に、ブロッコリ一 苗（品種:緑帝）を浸漬し、懸濁液に浸漬したまま 24時間置いた。その後、ハクサイ根 こぶ病の罹病根の破砕液を混和した汚染土壌を詰めた 10. 5 cmのポリポットに移植 した。約 30日間後に発病の有無を調査し、防除効果の判定を行った。その結果を表 3に示す。ノ リオボラックス属細菌 CGF4526株の懸濁液の菌濃度は、 108cfu/ml で行った。その結果、バリオボラックス属細菌 CGF4526に高い防除効果が認められ た。
[0036] [表 3]
Figure imgf000009_0001
[0037] 〔実施例 3〕 ハクサイ根こぶ病に対する防除試験（圃場試験）
バリオボラックス属細菌 CGF4526株をブイヨン液体培地で 24時間培養し、得られた 菌体を遠心により分離し、播種土壌に 108cfu/gの菌濃度に混和した。ハクサイ種子 (品種;新理想めぐみ）を播種し、 3週間育苗した。同様に培養したバリオボラックス属 細菌 CGF4526株菌の懸濁液（108cfu/ml)を調整し、ハクサイ苗を浸漬し、懸濁液 に浸漬したまま 24時間置いた。その後、ハクサイ根こぶ病の罹病根の破砕液を混和 した畑に定植した。約 65日間後に発病の有無を調査し、防除効果の判定を行った。 その結果を表 4に示す。その結果、ノくリオボラックス属細菌 CGF4526に高い防除効 果が認められた。
[0038] [表 4] 処理 供試株数 発病株率 発辆度 防除価 無処理 1 6 6 8 . 8 3 7 . 5 ―
CGF4526 1 6 1 2 . 5 4 . 2 8 8 . 8

Claims

請求の範囲
[1] アブラナ科植物の根こぶ病害に対して拮抗能を有するバリオボラックス属細菌 CGF4
526¾ (Variovorax sp. CGF4526)。
[2] アブラナ科植物の根こぶ病害に対して拮抗能を有するバリオボラックス属細菌 CGF4
526株（ &1 (^0で& sp. CGF4526)を有効成分として含む防除剤。
[3] バリオボラックス属細菌 CGF4526株（Variovorax sp. CGF4526)をアブラナ科 植物に接触させることを特徴とする、アブラナ科植物の根こぶ病害の防除方法。
[4] アブラナ科植物がハクサイ、キャベツ、カリフラワーまたはブロッコリ一である、請求項
3に記載の防除方法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009067717A (ja) * 2007-09-12 2009-04-02 Mayekawa Mfg Co Ltd マメ科植物の害虫による摂食を阻害する方法

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4918850B2 (ja) * 2005-12-27 2012-04-18 セントラル硝子株式会社 アブラナ科植物病害の防除剤および防除方法
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JP6384087B2 (ja) * 2014-03-31 2018-09-05 栗田工業株式会社 植物の栽培方法
KR101711091B1 (ko) * 2015-07-17 2017-02-28 한국생명공학연구원 식물 병원균에 대해 방제활성을 가지는 내생세균인 바리오보락스 파라독서스 kb5 균주 및 이의 용도

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH11335217A (ja) * 1998-05-22 1999-12-07 Taki Chem Co Ltd アブラナ科根こぶ病防除材

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH11335217A (ja) * 1998-05-22 1999-12-07 Taki Chem Co Ltd アブラナ科根こぶ病防除材

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NARISAWA K. ET AL: "Suppression of clubroot and Verticillium yellows in Chinese cabbage in the field by the root endophytic fungus, Heteroconium Chaetospira", PLANT PATHOLOGY, vol. 49, 2000, pages 141 - 146, XP002985996 *
OTSU Y. ET AL: "Biological control of phytophagous ladybird beetles Epilachna vigintioctopunctata (Col.Coccinellidae) by chitinolytic phylloplane bacteria Alcaligenes paradoxus entrapped in alginate beads", JOURNAL OF APPLIED ENTOMOLOGY, vol. 127, no. 8, September 2003 (2003-09-01), pages 441 - 446, XP002985997 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009067717A (ja) * 2007-09-12 2009-04-02 Mayekawa Mfg Co Ltd マメ科植物の害虫による摂食を阻害する方法

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