JP2009247302A - バシルス・アミロリクエファシエンスの新菌株及びそれを用いた植物病害防除剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】自然界から分離したバシルス・アミロリクエファシエンスの新菌株である3K−4株は、農園芸作物の細菌性及び糸状菌性のいずれの植物病害防除にも有効で、かつ各種の施用方法が可能であるため、優れた植物病害防除剤として利用できる。該3K−4株は、死菌体ではなく生菌体が植物病害防除に有効であり、また、生菌体の生産物ではなく生菌体自体が有効である点でも特徴的である。
【選択図】なし
Description
(2)農園芸作物の細菌性病害と糸状菌性病害の双方の防除に有効で、且つ主要作物に病原性を示さないこと、を特徴とする上記(1)に記載の菌株。
(4)該菌株が生菌体菌株であること、を特徴とする上記(3)に記載の植物病害防除剤。
(6)上記(3)又は(4)に記載の植物病害防除剤を、植物の種子あるいは植物体に浸漬、噴霧、塗布、注入又は粉衣処理の少なくともひとつの処理をすること、を特徴とする植物病害防除方法。
(7)上記(3)又は(4)に記載の植物病害防除剤を、植物を栽培する土壌に灌注、噴霧又は混和処理の少なくともひとつの処理をすること、を特徴とする植物病害防除方法。
(1)形態学的性質
形態:桿菌
大きさ:幅0.7〜0.9μm 長さ3〜5μm
運動性:+
肉汁寒天平板培養:白色〜クリーム色のコロニーを形成し、表面はしわ状
グラム染色性:+
カタラーゼ反応:+
生育温度
27℃:+
45℃:+
50℃:+
55℃:−
生育NaCl濃度
5%:+
7%:+
10%:+
Glucoseからの酸生成:+
Lactoseからの酸生成:+
Mannitolからの酸生成:+
Melibioseからの酸生成:+
Sucroseからの酸生成:+
D−turanoseからの酸生成:+
Xyloseからの酸生成:+
DNAの加水分解:−
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キャベツ黒すす病菌(Alternaria brassicicola)に汚染されたキャベツ種子(品種:早秋、タキイ種苗株式会社製)を細菌用培地(キングB培地)と糸状菌用培地(モルツアガー培地)に並べてアルタナリア属菌の発育適温に保った。その結果、ほとんどのキャベツ種子からアルタナリア属菌が両培地に発生したが、中にはアルタナリア属菌が発生せず、細菌または糸状菌が発生した種子が特にキングB培地において低率ながら見られた。そこでこれらの発生した菌からアルタナリア属菌に拮抗性のある菌をスクリーニングし、バシルス・アミロリクエファシエンス3K−4株を分離した。
バシルス・アミロリクエファシエンス3K−4株をNB培地で振とう培養し(27℃、7日間、125rpm)、遠心集菌して蒸留水で洗浄し、再度遠心集菌したものを滅菌水に懸濁した。懸濁液は、4℃で一晩放置し、溶菌(lysis)させて、芽胞懸濁液とした。
バシルス・アミロリクエファシエンス3K−4菌株をNB液体培地中で培養し、得られた芽胞を蒸留水に懸濁して作成した芽胞懸濁液8重量部、珪藻土40重量部、クレー50重量部、ジナフタレンジスルホン酸ナトリウム1重量部及びリグニンスルホン酸ナトリウム1重量部を混合乾燥後、粉砕して水和剤とした。
バシルス・アミロリクエファシエンス3K−4菌株の芽胞懸濁液6重量部、ラウリルアルコール硫酸エステルのナトリウム塩1重量部、リグニンスルホン酸ナトリウム1重量部、カルボキシメチルセルロース2重量部及びクレー90重量部を均一に混合粉砕する。この混合物を、押出式造粒機を用いて14〜32メッシュの粒状に加工した後、乾燥して粒剤とした。
園芸培土を充填した9cm×9cmのプラスチック製角鉢にキャベツ種子(品種:早秋)を5粒播種し、ガラス温室内で育苗した。第2葉が完全展開したキャベツに、実施例1および2で得られた芽胞懸濁液或いは水和剤を1000倍に希釈した菌液を300L/10aの割合で噴霧した。風乾後、キャベツ黒すす病菌の分生胞子懸濁液(1E+05個/ml)を噴霧接種し、24時間湿室(RH100%、25℃、暗条件)に置き、その後は調査までガラス温室内で底面給水により管理した。接種4日後に各ポットの第1葉及び第2葉について表1の基準で調査し、数1より発病度を求めた。試験規模は1区1ポットの3反復で実施し、結果を表2に示した。なお、1E+05は1×105を表わす。
畑土を充填した9cm×9cmのプラスチック製角鉢にヒマワリ種子(品種:グッドスマイル)を5粒播種し、ガラス温室内で育苗した。本葉が完全展開したヒマワリに、実施例1で得られた芽胞懸濁液を300L/10aの割合で噴霧した。風乾後、ヒマワリ黒斑病菌の分生胞子懸濁液(1E+05個/ml)を噴霧接種し、24時間湿室(RH100%、25℃、暗条件)に置き、その後は調査までガラス温室内で底面給水により管理した。接種4日後に各ポットの第1葉及び第2葉について表1の基準で調査し、数1より発病度を求めた。試験規模は1区1ポットの3反復で実施し、結果を表3に示した。
畑土を充填した9cm×9cmのプラスチック製角鉢にニンジン種子(品種:向陽二号)を5粒播種し、ガラス温室内で育苗した。第4複葉が完全展開したニンジンに、実施例1で得られた芽胞懸濁液を300L/10aの割合で噴霧した。風乾後、ニンジン黒斑病菌の分生胞子懸濁液(1E+05個/ml)を噴霧接種し、24時間湿室(RH100%、25℃、暗条件)に置き、その後は調査までガラス温室内で底面給水により管理した。接種4日後に各ポットの全複葉について表1の基準で調査し、数1より発病度を求めた。試験規模は1区1ポットの3反復で実施し、結果を表4に示した。
園芸培土を充填した128穴トレーにダイコン種子(品種:YRくらま)を80粒(8穴×10列)播種し、ガラス温室内で育苗した。第2葉が完全展開したダイコンに、実施例1で得られた芽胞懸濁液を300L/10aの割合で噴霧した。風乾後、ダイコン黒斑病菌の分生胞子懸濁液(1E+05個/ml)を噴霧接種し、24時間湿室(RH100%、25℃、暗条件)に置き、その後は調査までガラス温室内で底面給水により管理した。接種4日後に各トレーの第1葉及び第2葉について表1の基準で調査し、数1より発病度を求めた。試験規模は1区16株の3反復で実施し、結果を表5に示した。
キュウリつる割病汚染畑土壌を充填したプラスチック製角鉢にキュウリ種子(品種:相模斑白)を9粒播種し、実施例1で得られた芽胞液を3L/m2の割合で灌注処理した。覆土後、ガラス温室内で発芽・生育させた。播種14日後に発病苗数を調査し、発病率を求めた。試験規模は1区1ポットの3反復で実施し、結果を表6に示した。
畑土を充填した直径12cmの素焼鉢にキャベツ種子(品種:四季穫)を播種し、ガラス温室内で育苗した。本葉3葉期に、実施例1で得られた芽胞懸濁液を300L/10aの割合で噴霧した。風乾後、キャベツ黒腐病菌(1E+05個/ml)を噴霧接種し、24時間湿室(RH100%、25℃、暗条件)におき、その後は調査までガラス温室内で底面給水により管理した。接種7日後に各ポットの第1、2葉及び第3葉について表1の基準で調査し、数1より発病度を求めた。試験規模は1区1ポットの3反復で実施し、結果を表7に示した。
直径12cmの素焼鉢に生育させたカンキツ(夏ミカン)を剪定し、新しく展開した葉に、実施例1で得られた芽胞懸濁液を300L/10aの割合で噴霧した。風乾後、カンキツかいよう病菌(1E+05個/ml)を噴霧接種し、24時間湿室(RH100%、25℃、暗条件)におき、その後は調査までガラス温室内で底面給水により管理した。接種21日後に各ポットの全葉について病斑数を調査し、平均病斑数を求めた。試験規模は1区1ポットの3反復で実施し、結果を表8に示した。
PD液体培地で27℃、52時間振とう培養して得られたイネ苗立枯細菌病菌(Burkholderia plantarii)懸濁液(1E+08cfu/ml)にイネ種籾(品種:黄金晴)を減圧条件下で1時間浸漬接種し、イネ苗立枯細菌病感染籾を作成した。実施例1で得られた芽胞懸濁液に、上記のイネ苗立枯細菌病感染籾を24時間浸漬した後、浸漬処理液を捨て、32℃の湿室内に1日保って催芽させた。育苗培土を充填させた径6cmのプラスチックカップに催芽種子を播種し、播種3日後、30℃の育苗庫内に保ち、更に25℃の湿室内で15日間管理した後に、全苗について発病の有無を調査し、発病苗率を求めた。1カップ当たりの播種量は乾籾3g(90〜110粒)、試験は3反復で実施し、結果を表9に示した。
Claims (7)
- バシルス・アミロリクエファシエンス(Bacillus amyloliquefaciens)3K−4菌株(FERM P−21519)。
- 農園芸作物の細菌性病害と糸状菌性病害の防除に有効で、且つ主要作物に病原性を示さないこと、を特徴とする請求項1に記載の菌株。
- 請求項1又は2に記載の菌株を含有し、農園芸作物の細菌性病害と糸状菌性病害の防除に有効で、かつ主要作物に病原性を示さないこと、を特徴とする植物病害防除剤。
- 該菌株が生菌体菌株であること、を特徴とする請求項3に記載の植物病害防除剤。
- 請求項3又は4に記載の植物病害防除剤を植物の茎葉に処理すること、を特徴とする植物病害防除方法。
- 請求項3又は4に記載の植物病害防除剤を、植物の種子あるいは植物体に浸漬、噴霧、塗布、注入又は粉衣処理の少なくともひとつの処理をすることを特徴とする植物病害防除方法。
- 請求項3又は4に記載の植物病害防除剤を、植物を栽培する土壌に灌注、噴霧又は混和処理することを特徴とする植物病害防除方法。
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