WO2005025598A1 - Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓに対する抗菌剤 - Google Patents

Description

Pr o p i on i b a c t e r i um a c n e sに対する抗菌斉！!

技術分野

本発明【ま、 P r o p i on i b a c t e r i um a c n e sに対する抗菌剤に 関する。 より詳しくは、後述の式 [I]で示されるペプチドを有効成分として含有す る P r o p i on i b a c t e r i um a c n e sに对する 菌斉! ]に する。

背景技術

P r o p i on i b a c t e r i um a c n e s a c n e s ; /ク不ネ平 菌） は嫌気性のグラム陽性無芽胞桿菌であり、皮膚や腸管に常在している。本来ヒ トに対する病原性は低いものと考えられてきた力 最近の研究からいくつかの慢性 疾患の発症、進行に重要な役割を果たしていることが明らかとなってきた。 P. a c n e sは 1) 補体を活性化する、 2) 好中球の走ィ匕性因子を産生する、 3) 好中 球による酵素の放出を誘発するなど、免疫系を強く活性化する。 P. a c n e sが 発症、 進行に関与する疾患としては例えばざ瘡、 サルコイドーシス、 ぶどう膜炎、 結膜炎、 角膜炎、 角膜フリクテン、 心内膜炎、 脊椎関節炎等が挙げられる。

このため、 P. a c n e sに対して優れた抗菌作用を有する薬^ Jの開発が望まれ ている。

このうち、 ざ瘡は脂腺性毛包が侵される慢性炎症性疾患であり、皮疹が顔面、頸 部、 胸背部に好発する。 面皰、 赤い丘疹、 膿疱、 硬結、 小結節、 嚢腫、 瘢痕などの 多様な皮疹が種々の程度に混在して見られる。 ざ瘡は通常、微小面皰から閉鎖面皰 ができ、 それが開放面皰、 あるいは炎症性面皰である赤い丘疹、 膿疱へと移行し、 重篤な場合はざ瘡瘢痕等の後遺症が残る。 また、 ざ瘡は青年等にとっては精神的苦 悩の原因ともなるため、 適切な治療が求められる。

ざ瘡では、毛包中に存在する P. a c ne sがリパーゼを産生し、皮脂成分中の トリグリセリドを遊離脂肪酸に分解する。遊離脂肪酸は毛漏斗上皮を刺激して過角 化を引き起こし、 面皰形成を誘導する。 さらに、 P. a c n e sは好中球走化性因 子、補体活性化因子、 プロテア一ゼ、 ヒアル口-ダーゼ等を産生し、病変部へ好中 球が誘導され、 毛包上皮が破壊される。 その結果、 病変部に膿腫が生じる （池田重 雄監修、 「標準皮膚科学 （第 6版） 」 、 第 2 7 0頁〜第 2 7 2頁、 医学書院発行、 2 0 0 1年参照） 。

従って、 ざ瘡の治療剤としては、 P . a c n e sに対する抗菌作用に加えて、過 角化抑制作用、 好中球誘導による炎症の抑制作用を併せ持った薬剤が望ましい。 しかし、 従来のざ瘡の治療方法としては、 例えば、

1 ) 抗生物質外用剤、 合成抗菌外用剤、 レチノイド剤の塗布。

2 ) テトラサイタリン系抗生剤、 マクロライド系抗菌剤の内服。

3 ) 脱脂作用のあるィォゥカンフルローションの塗布。

等が挙げられるが、副作用の問題や効果面でも効果が限定的であったり、重症のざ 瘡に対しては有効ではなかったりする。そのため、いくつかの治療法を組み合わせ ることも行われている力 薬物間相互作用による副作用の懸念があり、全体として 高価なものとなってしまうなどの問題点がある。

また、サルコィドーシスは非乾酪壌死性類上皮細胞肉芽腫を特徴とする全身疾患 であり、 肺が最も一般的に影響を受ける器官であるが、 眼、 皮膚、 リンパ腺、 骨や 関節、 心臓、神経組織、 その他の内臓にも病巣は及ぶ。 ぶどう膜炎はサルコィドー シスの全身病変の一部として現れる。サルコィドーシスは何らかの起因体によって T細胞が活性ィ匕され、この活性化 T細胞の産生するサイトカインによって局所へ単 球が集積し、マクロファージへの分化を経て類上皮細胞肉芽腫形成に至る I V型ァ レルギ一性疾患である。 サルコィドーシスの原因は長い間不明であつたが、 近年、 P . a c n e sが原因として注目されている。サルコィドーシスの病変部リンパ節 から P . a c n e sの菌体が高率多量に採取され、 また類上皮細胞肉芽腫内に P . a c n e sの菌体成分が多量に集積していることが示されている。サルコィドーシ スは有効な治療法が確立されておらず難治性の疾患である。サルコィドーシス患者 のうち 7 0 %程は経過観察を余儀なくされ、ステロイドホルモンが第一選択薬とし て用いられているが、 副作用等が問題である （あたらしい眼科、 第 1 7卷 （臨時増 刊号） 、 第 8 7頁〜第 8 9頁、 2 0 0 0年参照） 。

一方、 下式 [ I ]

で示されるペプチドが WO 96/12732号パンフレツト等に開示されている。

WO96/12732号パンフレツトには、式 [ I ]で示されるペプチド（以下「ぺ プチド [1]」 とする） からなる抗生物質、 抗腫瘍物質、 抗炎症物質及び創傷治癒物 質が開示されている。 また、 ペプチド [I]からなる抗菌剤、 抗腫 ¾¾、 抗炎症剤、 創傷治癒剤、 抗潰 «Jが開示されている。 さらに、ペプチド [I]の抗菌作用、 特に 好気性のダラム陽性菌に対する抗菌作用、ァレルギ一性おょぴ非ァレルギ一性炎症 抑制作用が開示されている。

特開平 10— 067677号公報には、ベプチド [ I ]と感染性皮膚疾患治療剤と を含有することを特徴とする感染性皮膚疾患治療剤が開示されている。

特開平 10— 120575号公報には、ぺプチド [ I ]を更に含有することを特徴 とする油脂性基剤と白糖とからなる創傷治療剤が開示されている。

特開平 10— 120590号公報には、 寄生性皮膚疾患治療薬おょぴぺプチド [ I ]を含有することを特徴とする寄生性皮膚疾患治療用外用剤が開示されている。 特開平 10— 259141号公報には、副腎皮質ホルモン、 ぺプチド [ I ]、 ビタ ミン E及ぴスクワランを含有することを特徴とする皮膚疾患治療用外用剤が開示 されている。

上記事情に鑑み、本発明は P. a c n e sに対する優れた抗菌剤を提供すること を目的とする。 また、 本発明は P. a c n e sに起因する疾患、 例えばざ瘡、 サル コィドーシス等の予防または治療剤を提供することを目的とする。 さらに、 P. a c u e sに対する抗菌作用、過角化抑制作用、好中球誘導による炎症の抑制作用を 併せ持つたざ瘡の予防または治,を提供することを目的とする。

発明の開示

本発明者らは、 上記目的を達成すべく鋭意研究したところ、 ペプチド [I]が P. a c n e sに対する極めて優れた抗菌作用を有することを見出し、更にはぺプチド [ I ]が表皮角化細胞増殖抑制作用及び好中球浸潤を伴った炎症の抑制作用を有す ることを見出し、 とりわけざ瘡の予防または治療に有用であることを確認し、本発 明を完成するに至った。

即ち、 本発明は以下に関する。

(1) 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を有効成分として含有す る P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e sに对する 菌斉 U。

(2) 式 [I] で示されるペプチドまたは医薬として許容されるその塩を有効成分 として含有する P r o p i on i b a c t e r i um a c n e s感染に起因す る疾患の予防または治療剤。

(3) P r o p i on i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患がざ 瘡、 サルコィドーシス、 ぶどう膜炎、 結膜炎、 角膜炎、 角膜フリクテン、 心内膜炎 及ぴ脊椎関節炎からなる群から選択される疾患である上記（2)記載の予防または 治療剤。

(4) P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患がざ 瘡である上記 （3) 記載の予防または治療剤。

(5) ざ瘡が尋常性ざ瘡である上記 （4) 記載の予防または治療剤。

(6) P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患がサ ルコイド一シスである上記 (3) 記載の予防または治療剤。

(7) サノレコィド一シスが眼サルコィドーシスである上記 (6) 言己載の予防または 治療剤。

(8) 剤型が外用剤である上記 (1) 〜 （7) のいずれかに記載の剤。

(9) 式 [I] で示されるペプチドまたは医薬として許容されるその塩を有効成分 として含有するざ瘡の予防または治療用化粧料。

( 10)式 [ I ]で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を用いる P r o p i o n i b a c t e r i urn a c n e s感染の予防または治療方法。

(1 1)式 [I]で示されるペプチドまたは医薬として許容されるその塩を用いる P r o p i o n i b a c t e r i urn a c n e s感染に起因する疾患の予防また は治療方法。

( 12)式 [ I ]で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を有効成分 として含有する化粧料を用いるざ瘡の予防または治療方法。

(13) P r o p i on i b a c t e r i um a c n e sに対する抗菌斉 Uを製造 するための、式 [ I ]で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩の利用。

(14) P r o p i on i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患の 予防または治療剤を製造するための、式 [ I ]で示されるペプチドまたは医薬として 許容されるその塩の利用。

(15) ざ瘡の予防または治療用化粧料を製造するための、式 [I]で示されるぺプ チドまたは医薬として許容されるその塩の利用。

( 16)式 [ I ]で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩及び医薬と して許容される担体を含有する P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e sに対する抗菌剤組成物、並びに当該組成物を P r o p i o n i b a c t e r i u m a c n e s感染の予防または治療に使用し得るまたは使用すべきであること を記載した記載物を含む商業的パッケージ。

( 17)式 [ I ]で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩及び医薬と して許容される担体を含有する P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患の予防または治療用医薬組成物、並びに当該組成物を P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患の予防または治 療に使用し得るまたは使用すべきであることを記載した記载物を含む商業的パッ ケージ。

(18) 式 [I] で示されるペプチドまたは医薬として許容されるその塩及ぴ医薬 として許容される担体を含有するざ瘡の予防または治療用化粧料組成物、及ぴ当該 組成物をざ瘡の予防または治療に使用し得るまたは使用すべきであることを記載 した記載物を含む商業的パッケージ。

本発明によれば、 P. a c n e sに対する優れた抗菌剤を得ることができる。 ま た、 ざ瘡、サルコィドーシス等の P. a c n e s感染に起因する疾患の予防または 治療剤； P. a c n e sに対する抗菌作用、過角化抑制作用、好中球誘導による炎 症の抑制作用を併せ持ったざ瘡の予防または治療剤；ざ瘡の予防または治療用化粧 料を得ることができる。

発明の詳細な説明

本発明の P. a c n e sに対する抗菌剤、 P. a c n e s感染に起因する疾患の 予防または治療剤、ざ瘡の予防または治療用化粧料はべプチド[ I ]を有効成分とし て含有するものである。

ベプチド [ I ]は、ストレブトマイセス属に属するぺプチド [ I ]生産菌株、例えば、 放線菌ストレプトマイセス 'ノビリス （Streptomyces nobilis、 以下 「S. ノビリ ス」 と略記する） を培養し、得られた培養液または同液の乾固物もしくは培養菌体 から有機溶剤によって抽出された抽出物を、各種力ラムクロマトグラフィーに付し、 目的物を含む力ラムクロマトグラフィ一画分を再結晶処理することにより得るこ とができる。 ペプチド [I]を生産する放線菌 S. ノビリスは、公的保存機関から入手可能であ り、 たとえば理化学研究所の保存菌 (J CM4274) (これは米国において AT CC 19252およぴォランダにおいて CB S 198. 65としても保存） などの 菌が使用できる。

ペプチド [I]は、 W096/12732号パンフレツトまたは特開平 10— 17 5996号公報等に記載の方法によって得ることができる。

ぺプチド [ I ]の医薬として許容しうる塩としては、無毒性で医薬として許容しう る慣用の塩が好適であり、例えばナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、 力 ルシゥム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩、アンモニゥム塩などの無機塩 基との塩、 及ぴトリエチ^^アミン、 ピリジン、 ピコリン、 エタノールァミン、 トリ エタノーノレアミン、 ジシク口へキシルァミン、 N, N， 一ジべンジルェチレンアミ ンなどの有機アミン塩、 及び塩酸、 臭化水素酸、硫酸、 リン酸などの無機酸塩、 及 ぴギ酸、 酢酸、 トリフルォロ酢酸、 マレイン酸、 酒石酸などの有機カルボン酸塩、 及びメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、 p—トルエンスルホン酸などのスル ホン酸付加塩、及ぴアルギニン、 ァスパラギン酸、 グルタミン酸などの塩基性又は 酸性アミノ酸といつた塩基との塩又は酸付加塩が挙げられる。

ペプチド [I]は、 P. a c n e sに対して極めて優れた抗菌作用を有し、 P. a c n e s感染、 P. a c n e s感染に起因する疾患、 例えばざ瘡、 サルコィドーシ ス、 ぶどう膜炎、 結膜炎、 角膜炎、 角膜フリクテン、 心内膜炎、 脊椎関節炎等、 好 ましくはざ瘡、 サルコイドーシスの予防または治療に有効である。

上記ざ瘡には、 尋常性ざ瘡、 新生児ざ瘡、集簇性ざ瘡、 毛包虫性ざ瘡、 ざ瘡様発 疹、外的化学物質によるざ瘡、壊疽性ざ瘡、 夏季ざ瘡等が含まれるが、 好ましくは 尋常性ざ瘡である。

上記サルコィドーシスには、 肺、 眼、皮膚、 リンパ腺、 骨、 関節、 心臓、 神経組 織、その他の内臓のサルコィドーシスが含まれる力 好ましくは眼のサルコィドー シスである。

ざ瘡は P. a c n e s感染に起因し、過角化、好中球誘導による炎症を伴う疾患 であるので、 P. a c n e sに対する抗菌作用、過角化抑制作用、好中球誘導によ る炎症の抑制作用を併せ持つぺプチド [ I ]は、ざ瘡の予防または冶療に極めて有効 である。

本発明に係る P. a c n e sに対する抗菌剤、 P. a c n e s感染に起因する疾 患の予防または治療剤はヒトを含む哺乳動物へ自体公知の剤型、 例えば、 軟膏剤、 タリーム剤、 ゲル剤、 ゲルクリーム剤、 ローション剤、 パスタ剤、 リニメント剤、 乳剤、 外用液剤、硬膏剤、 エアゾール剤、 P及入剤、 スプレー剤、 坐剤、 浣腸剤、 薬 浴剤、 貼付剤、 プラスター剤、 テープ剤、 点鼻剤、 点耳剤、 点眼剤、 眼軟膏剤等の 外用剤、 注射剤 （液剤、 懸濁剤など） 、 注入剤、 点滴剤等の非経口剤、 錠剤、 顆粒 剤、 細未立剤、 カプセル剤、 マイクロカプセル剤、 ペレット剤、 粉末、 散剤、 丸剤、 飲用液剤、 液剤、 浸剤、 煎剤、 エキス剤、 懸濁剤 （たとえばオリープ油） 、 シロッ プ剤、リモナ一デ剤、エリキシル剤、トローチ剤等の経口剤等の剤型で投与される。 本発明に係る P. a c n e sに対する抗菌剤、 P. a c n e s感染に起因する疾 患の予防または治療剤の剤型は、病変部位、効果の発現の有意性等を考慮して適宜 選択することが可能であるが、外用剤として投与することが好ましい。 P . a c n e s感染に起因する疾患がざ瘡である場合には、外用剤の中でも、軟膏剤、 タリー ム剤、 ゲル剤、 ゲルクリーム剤、 ローション剤、 パスタ剤、 リニメント剤、 乳剤、 外用液剤、 硬膏剤、 スプレー剤、 薬浴剤、 貼付剤、 プラスター剤、 テープ剤等の剤 型が特に好ましい。 P. a c n e s感染に起因する疾患が眼サルコィドーシスであ る場合は、 点眼剤または眼軟膏剤等の剤型が特に好ましい。

本発明に係る P. a c n e sに対する抗菌剤、 P. a c n e s感染に起因する疾 患の予防または治療剤は、その使用に際し各種剤型に適した方法で投与される。 た とえば外用剤の場合には、 これを皮膚ないしは粘膜などの所要部位に直接噴霧、貼 付または塗布し、 錠剤、 丸剤、 飲用液剤、 懸濁剤、 ？ L剤、 顆粒剤およびカプセル剤 の場合には経口投与され、 注射剤の場合には静脈内、 筋肉内、皮内、皮下、 関節腔 内もしくは腹腔内投与され、 坐剤の場合には直腸内投与される。

これらの医薬組成物は、例えばカカオパター、 白色ワセリン、 ポリエチレンダリ コーノレ、 プロピレングリコー \ 流動パラフィン、 ミツロウ、 オリープ油、 カカオ 油、 ゴマ油、 ダイズ油、 ツバキ油、 ラッカセィ油、 牛油、 膝油、 ラノリン、 メチノレ パラベン、 ポリオキシェチレン硬ィヒヒマシ油、 ゲル化炭化水素 (例えば、 プラスチ ベース、 ポロイド等） 、 セチルアルコール、 ステアリルアルコール等の基剤；例え ばスクロース、 でん粉、 マンニット、 ソルビット、 ラクトース、 グルコース、 セル ロース、 タルク、 リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の賦形剤；例えばセルロー ス、メチノレセノレロース、ヒ ドロキシェチノレセノレロース、ヒ ドロキメチノレセノレロース、 ポリプロピルピロリ ドン、 ゼラチン、 アラビアゴム、 ポリエチレングリコール、 ス クロース、 でん粉、 カルボキシメチルデンプン、 アルギン酸ナトリウム、 デキスト リン、 ポリビュルアルコール、 ステアリン酸等の結合剤；例えばでん粉、 カルボキ シメチルセルロース、 ヒドロキシプロピルでん粉、炭酸水素ナトリゥム、 リン酸カ ルシゥム、 タエン酸カルシゥム等の崩壊剤；例えばステアリン酸マグネシゥム、 ェ ァロシル、 タルク、 ラウリル硫酸ナトリゥム等の滑沢剤；例えばクェン酸、 メント ール、 グリシン、 オレンジ末等の矯味剤；例えば安息香酸ナトリウム、重亜硫酸ナ トリウム、 メチルパラベン、 プロピルパラベン等の保存剤；例えば、 クェン酸、 ク ェン酸ナトリウム、酢酸等の安定化剤；例えばメチルセルロース、 ポリビュルピロ リドン、ステアリン酸アルミニゥム等の懸濁化剤；例えばヒドロキシプロピルメチ ルセルロース等の分散剤；例えば精製水、 生理食塩水、 ェタノール、 メタノール、 ジメチルスルホキシド （DM S O) 等の希釈剤；例えばトラガントガム等の増粘剤 等のような製剤化に慣用の医薬として許容される有機または無機の各種担体を用 いる自体公知の方法によつて製剤ィ匕される。

さらに必要に応じて、 力オリン、 ベントナイト、酸化亜鉛等の充填剤；グリセリ ン、プロピレングリコール等の保湿剤；支持体；粘着剤；補助物質；着色剤；香料； p H調整剤；増量剤；可溶化剤；緩衝剤；付質剤；界面活性剤；抗酸化剤；噴射剤； 溶解剤；溶解補助剤等を用いてもよい。 また適当な溶剤を選定することにより、ぺ プチド [ I ]をそのままの形態で液剤として使用することもできる。

本発明に係る P . a c n e sに対する抗菌剤、 P . a c n e s感染に起因する疾 患の予防または治療剤を軟膏剤、 クリーム剤、 ゲノレ剤、 ゲルクリーム剤、 ローショ ン剤、 パスタ剤、 リニメント剤、 乳剤、 外用液剤、 硬膏剤、 スプレー剤、 貼付剤、 プラスター剤、 テープ剤等の皮膚外用剤として使用する場合、更に、 N—ァシルサ ルコシン又はその塩、炭素数 1 0〜： L 8の高級脂肪酸と炭素数 1〜 2 0のアルコー ルとの反応生成物である高級脂肪酸エステル、炭素数 2〜 1 0のジカルボン酸又は その塩、炭素数 3〜 6のヒドロキシカルボン酸と炭素数 1〜 2 0のアルコールとの 反応生成物であるヒドロキシカルポン酸エステル、及ぴ、脂肪酸エタノールアミド からなる群より選ばれる少なくとも 1種の経皮吸収促進剤を含有させることで、薬 効成分が皮膚に吸収されやすくなり、 治療効果をより向上させることができる。 上記 N—ァシルサルコシンとしては、例えば、 N—ラウロイルサルコシン、 N— ォレオイルサルコシン、 N—パルミトイルサルコシン、 ヤシ油脂肪酸サルコシン等 が挙げられ、その塩としては、例えば、上記 N—ァシルサルコシンのナトリゥム塩、 カリウム塩、 マグネシウム塩、 カルシウム塩、 アルミニウム塩等が挙げられる。 上記高級脂肪酸エステルは、炭素数 1 0〜 1 8の高級脂肪酸と炭素数 1〜 2 0の アルコールとの反応生成物である。 上記高級脂肪酸の炭素数が、 小さすぎると、生 成物の高級脂肪酸エステルが揮発し易くなり、大きすぎると、経皮吸収効果が低下 する。また、上記アルコールの炭素数が、大きすぎると、経皮吸収効果が低下する。 上記炭素数 1 0〜1 8の高級脂肪酸としては、例えば、力プリン酸、ラウリン酸、 ミリスチン酸、パルミチン酸、 ステアリン酸等の飽和脂肪族モノカルボン酸；パル ミトレイン酸、 ォレイン酸、パクセン酸、 リノ一ノレ酸、 リノレン酸等の不飽和脂肪 族モノカルボン酸；セパシン酸等の飽和脂肪族ジカルボン酸等が挙げられる。 上記炭素数 1〜2 0のアルコールとしては、 例えば、 メチルアルコール、 ェチル アルコ一ノレ、 プロピノレアノレコーノレ、 イソプロピルァノレコーノレ、 プチルァルコール、 ィソブチノレアノレコ一ノレ、 ターシャリーブチノレアルコ一/レ、 ペンチノレアルコーノレ、 へ キシルアルコール、 ヘプチルアルコール、 ォクチルアルコール、 力プリルアルコ一 ノレ、 ノ-ルァノレコール、 デシルァノレコール、 ラウリルアルコール、 ミ リスチルアル コール、パルミチルアルコール、 ステアリルアルコール等の脂肪族飽和アルコール 等が挙げられる。

上記高級脂肪酸エステルとしては、例えば、 ミリスチン酸ィソプロピル、パルミ チン酸ィソプロピル、 ラウリン酸ィソプロピル、ステアリン酸ィソプロピル等が挙 げられる。 上記ジカルボン酸又はその塩は、炭素数 2〜1 0である。炭素数が小さすぎても 大きすぎても、経皮吸収効果が低下する。上記炭素数 2〜1 0のジカルボン酸とし ては、 例えば、 シユウ酸、 マロン酸、 コハク酸、 ダルタル酸、 アジピン酸、 ピメリ ン酸、 スベリン酸等の飽和脂肪族ジカルボン酸；フマル酸、 マレイン酸等の不飽和 脂肪族ジカルポン酸；フタル酸、 イソフタル酸、 テレフタル酸等の芳香族ジカルポ ン酸等が挙げられ、 その塩としては、 例えば、 上記ジカルボン酸のナトリウム塩、 カリウム塩、 マグネシウム塩、 カルシウム塩、 アルミニウム塩等が挙げられる。 上記ヒドロキシカルボン酸エステルは、炭素数 3〜6のヒドロキシカルポン酸と 炭素数 1〜 2 0のアルコールとの反応生成物である。上記ヒドロキシカルボン酸の 炭素数が、小さすぎると、生成物のヒドロキシカルボン酸エステルが揮発し易くな り、 大きすぎると、 経皮吸収効果が低下する。 また、 上記アルコールの炭素数力 大きすぎると、 経皮吸収効果が低下する。

上記炭素数 3〜 6のヒドロキシカルボン酸としては、例えば、乳酸、 グリセリン 酸等のモノカルボン酸；リンゴ酸、酒石酸等のジカルボン酸等が挙げられる。 上記 炭素数 1〜 2 0のアルコールとしては、上述の高級脂肪酸エステルの反応に用いら れるものと同様のもの等が挙げられる。上記ヒドロキシカルボン酸エステルとして は、 例えば、 乳酸ミリスチル、 乳酸セチル等が挙げられる。

上記脂肪酸エタノールアミドとしては、 例えば、 脂肪酸モノエタノールアミド、 脂肪酸ジエタノールアミド；これらのアルキレンォキサイド付加物等が挙げられる。 上記脂肪酸ェタノールァミドとしては、例えば、ラウリン酸モノエタノールァミド、 ラウリン酸ジエタノールアミド、 ラウロイルモノエタノールアミド、パルミチン酸 モノエタノールアミド、パルミチン酸ジエタノールアミド、 ミリスチン酸モノエタ ノールァミ ド、 ミリスチン酸ジエタノールァミド、 ラウリン酸'ミリスチン酸モノ エタノールアミド、ヤシ油脂肪酸モノエタノールアミド、ヤシ油脂肪酸ジエタノー ルァミド、ポリォキシェチレン付加ラウロイルモノエタノールァミド、ポリォキシ エチレン付加ヤシ油脂肪酸モノエタノールァミド等が挙げられる。

本発明に係る P . a c n e sに対する抗菌剤、 P . a c n e s感染に起因する疾 患の予防または治療剤中に含ませることのできる上記経皮吸収促進剤としては、特 に、 N—ラウロイルサルコシン、 ミリスチン酸ィソプロピル、 パルミチン酸イソプ 口ピル、 フマル酸、 マレイン酸、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、 ラウリン酸ジエタ ノールアミドが好ましい。上記経皮吸収促進剤としては、上記のものが好ましいが これらに限定されるものではなく、 従来公知のものを用いることができる。

本発明に係る P. a c n e sに対する抗菌剤、 P. a c n e s感染に起因する疾 患の予防または治療剤中に含まれるペプチド [I]の量は、特に限定されず、剤型や 投与経路等を考慮して広範囲に適宜選択される力 好ましくはぺプチド [ I ]が 10 一¹。〜 20重量⁰ /₀の範囲であり、 より好ましくは 10—⁷〜 10重量％の範囲である。 特に外用剤として使用する場合には、ぺプチド [ I ]が 0. 01-20重量％、好ま しくは 0. 1〜5重量⁰ /₀の範囲である。

本発明に係る P. a c n e sに対する抗菌剤、 P. a c n e s感染に起因する疾 患の予防または治療剤の投与量は、 特に限定されず、 患者の体重、年齢、 剤型、 投 与経路、症状、患部の大きさ等を考慮して広範囲に適宜選択される力 通常は 1日 当りペプチド [I]として 10 p g/k g〜l 0 OmgZk g程度の範囲、好ましく は 0. lmgZk g〜l OmgZk g程度の範囲であり、 1〜4回に分けて投与さ れる。

また、本発明は、ぺプチド [ I ]または医薬として許容されるその塩を有効成分と して含有するざ瘡の予防または治療用化粧料にも係るものである。

ィ匕粧料としては、 例えば、ィ匕粧水、 クリーム、 乳液、 パック等の種々の組成物の 形態の皮膚化粧料が挙げられる。ベプチド [ I ]を含有する組成物を化粧料として調 製する場合には、ぺプチド [ I ]を医薬組成物として調製する場合に添加することが できる上述の添加物に加え、ィ匕粧品活性剤、 防腐剤、 香料、フィラー、顔料、 UV 遮蔽剤、 臭気吸収剤、 染料、保湿剤 （グリセロール等） 等、 通常化粧料の分野で用 いられている添加物を本発明に係る組成物の有利な特性が悪影響を受けない範囲 で添加することもできる。例えば、化粧水は、精製水にグリセリンのような保湿剤、 皮膚栄養剤等を溶解し、防腐剤、香料等をアルコールに溶解し、 両者を混合して室 温下に可溶化させ、アルコール部にぺプチド [ I ]または医薬として許容されるその 塩を加えて製造することができる。 本発明に係るざ瘡の予防または治療用化粧料は、通常、有効量を皮膚などの所要 部位に直接噴霧、 貝占付または塗布されることにより使用 （投与） される。

本発明に係るざ瘡の予防または治療用化粧料に含まれるぺプチド [ I ]の量は、化 粧料の組成物の形態等に応じて広範囲に適宜選択される力 好ましくはぺプチド [1]として0. 001〜20重量％、 より好ましくは 0· 01〜5重量⁰ /₀の範囲で ある。

本発明に係るざ瘡の予防または治療用化粧料の使用量は、特に限定されず、組成 物の形態、使用部位等を考慮して広範囲に適宜選択されるが、通常は 1回の使用あ たり化粧料として 0. 01 g〜： L 0 g程度の範囲であり、 1日あたり 1〜4回使用 される。

以下、実施例を示して本発明をより具体的に説明する力 本発明は以下に示す実 施例によって限定されるものではない。

(実施例 1)

1991年に日本国内の教育病院で分離され、当施設で確定同定され、保存され た P. a c ne s 6株を試験菌として用いた。 GAM寒天培地 （日水製薬社製） で 35°C、 48時間嫌気培養し、発育したコロニーを GAM b r o t h (日水製 薬社製） に接種し、 35°C、 18〜 20時間嫌気培養した。 これを、 ゼラチン含有 緩衝生理食塩水 (B SG； Na C 1 ： 8. 5 g、 KH₂P O₄： 0. 3 g、 N a ₂H P 0₄: 0. 6 g、 g e 1 a t i n : 0. l gを 1000 mLの滅菌水に溶解した溶 液） で 100倍に希釈し、接種菌液とした。 ベプチド[ I：]はジメチルスルホキシド (DMSO) で溶解し、 DM SOで順次 2倍希釈した。 これを DMSOの終濃度が 1%となるように滅菌シャーレに分注し、そこに滅菌した b r a i n h e a r t i n f u s i on a g a r (BBL) を 9. 9mL添加し、 ペプチド [I ]の終 濃度が 128 μ g/mL〜0. 0039 μ gZmLになるよう 2倍希釈系列の寒天 平板を作製した。 接種菌液をスタンプ法により寒天平板に接種し、 35°C、 48時 間嫌気培養した。 M I Cの判定は N CCLS (M 11— A 4 ) に準じ行つた。 結果 を表 1に示す。 . 蘭株番号 MIC( g/mL)

Propionibacterium acnes #11053 ≤0.0039

#"054 ≤ 0.0039

#11055 ≤ 0.0039

#11056 ≤ 0.0039

#11057 ≤ 0.0039

#11058 ≤ 0.0039

(結果）

表 1から明らかなように、ペプチド [I]は試験に用いた 6つの P. a c n e sの 菌株全てに対して強力な抗菌活性を有することが示された。

(実施例 2)

正常ヒト表皮角化細胞（三光純薬株式会社より購入） を正常ヒト表皮角化細胞増 殖培地 （KGM2) で 2X 10⁴ c e 1 1 s ZmLの細胞濃度に調製後、 96穴プ レートに 100 Lずつ播種した （2 X 10³ c e 1 1 s Z穴） 。 37°Cで CO 2 インキュベーターで 2〜 3時間培養後、 0. 02%メタノール一 KGM2に溶解し たぺプチド [ I ]を 100 /i LZ穴添加した。最終メタノール濃度は、 0. 01 %に した。細胞を 3日間培養後、培地交換をしてさらに 3日間培養した。培養後に Ce 1 1 c o un t i n g k i t試薬 (和光純薬 (株)社製） を 20 μ L,穴添加 して、 CO 2インキュベーターで呈色反応を行った。反応時間は、発色状態を見な がら 1〜 4時間にした。反応後、プレートリーダ一で吸光度を 450n mで測定し、 細胞増殖の指標とした。 実験はトリプリケィト （Tr i p 1 ί c a t e) で 3回繰 り返して行い、吸光度をぺプチド [ I ]非添加群と比較し、 Dunn e t多重比較検 定法により検定した。 結果を表 2に示す。 表 2 ペプチド [I]濃度 (M) 吸光度 (450nm)

0 1.067

1.0 X 10"⁹ 1.126

3.0X 10— ⁹ 1.088

1.0X10— ⁸ 0.848

3.0X10^-8 0.123

1.0X10⁷ 0.122 ^

**： P< 0. 01 (Dunn e t多重比較検定）

(結果）

表 2から明らかなように、ぺプチド [ I ]は強力な正常ヒト表皮角化細胞増殖抑制 活性を有することが示された。

(実施例 3)

BDF 1系雌性マウス （ 7週齢） の右耳介両面に 1 %DM S O—ァセトン溶液で 溶解した TPA 50 gZmLを片面 20 Lずつ塗布 （2 ^ gZ耳） して、皮 膚炎を誘発した。ペプチド [I]はアセトン Zメタノール（1： 1)に溶解して用い、

T P A刺激の 24時間及ぴ 1時間前に右耳介両面に片面 20 Lずつ塗布した。右 耳の厚さを T P A刺激の 6時間及び 24時間後に Pe a c o c k d i a l t h i c kne s s g aug eで測定し、浮腫の指標にした。 T P A刺激の 24時 間後に右耳を採取して、 MPO活性を測定し、好中球浸潤の指標とした。各群 5匹 ずつ測定を行った。結果は耳の厚さ、 MP O活性それぞれについて下式より抑制率 (%) として求めた。

抑制率（％) = [ (ぺプチド [ I ]非投与群の平均値—ぺプチド [ I ]投与群の平均値） / (ぺプチド [ I ]非投与群の平均値— TP A非塗布群の平均値） ] X 100 結果は D unn e t多重比較検定法により検定した。 結果を表 3に示す。 表 3 抑制率 (％)

ペプチド [i]濃度 (重 %) MPO活性 浮腫 (6hr) 浮腫 (24hr)

(24hr)

0.3 58.3** 42.0* 75.5**

1.0 81.1 ** 78.0** 91.0**

3.0 76.4** 80.0** 96.0**

*： P < 0. 05、 **: P<0. 01 (Dunn e t多重比較検定）

(結果）

表 3より明ら力、なように、ぺプチド [ I ]は T P A誘発マゥス皮膚炎にぉレ、て浮腫、 好中球浸潤を強力に抑制した。 この結果から、本発明のペプチド [I]は好中球浸潤 による炎症の抑制作用を有することが示唆された。

(実施例 4)

BALBZc系雌性マウス （5週齢） の右耳介両面に 10%DMSO—アセトン 溶液で溶解したカルシウムィオノフォア （A23187) 1111 71111^を片面1 0 Lずつ塗布 O^ gZ耳） して、皮膚炎を誘発した。 ペプチド [I]はァセト ン Zメタノール （1 ： 1) に溶解して用い、 A23187刺激の 24時間及ぴ 1時 間前に右耳介両面に片面 20 μ Lずつ塗布した。右耳の厚さを A 23187刺激の 6時間及び 24時間後に P e a c o c k d i a l t h i c k e s s g a u g eで測定し、浮腫の指標にした。 A 23187刺激の 24時間後に右耳を採取 して、 MP O活性を測定し、好中球浸潤の指標とした。各群 5四ずつ測定を行つた。 結果は耳の厚さ、 MP O活性それぞれについて下式より抑制率（％)として求めた。 抑制率（％) = [ (ぺプチド[ I ]非投与群の平均値一ぺプチド [ I ]投与群の平均値） / (ぺプチド [ I ]非投与群の平均値— A 23187非塗布群の平均値） ] X 100 結果は D unn e t多重比較検定法により検定した。 結果を表 4に示す。 表 4 抑制率（％)

ペプチド [I]濃度 (重量％) MPO活性 浮腫 (6hr) 浮腫 (24hr)

(24hr)

0.3 63.6** -6.9 -3.2

1.0 86.4** 29.4** 41.6**

3.0 77.2** 51.9 ** 69.6**

**： P<0. 01 (Dunn e t多重比較検定）

(結果）

表 4より明らかなように、ペプチド [I]は A23187誘発マウス皮膚炎におい て浮腫、好中球浸潤を強力に抑制した。 この結果から、ぺプチド [ I ]は好中球浸潤 による炎症の抑制作用を有することが示唆された。

(実施例 5)

ペプチド [I] lmg

プラスチベース （大正製薬ネ： fc ) 1 g

ぺプチド [ I ] 1 m gを乳鉢を用いて細かく ¾、枠した後、プラスチベース 1 gを添 加し、 これらを乳鉢上でよく混合して、 軟膏剤を調製する。

(実施例 6)

ペプチド [I] 0. 2mg

メタノール 12. 5 μ L

プラスチベース （大正 薬社製） 1 g

ぺプチド [I]0. 8mgをメタノール 50 Lに溶解した後、得られた本発明べ プチド含有メタノールのうち 12. 5 / Lを乳鉢上でプラスチベース 1 gとよく混 合して軟膏剤を調製する。

(実施例 7 )

ペプチド [I] 0. 5mg

DMSO 0. lmL

5重量⁰ /₀アラビアゴム水溶液 1. 9mL ペプチド [I]0.5mgに DMSO 0. 1 mLを添加して前者を溶解させた後、 得られた本発明べプチド含有 D M S O溶液 0. 1 m Lを少量ずつ攪拌しながら 5重 量⁰ /₀ァラビアゴム溶液 1. 9mLに添加し、 均一に懸濁した液剤を調製する。

(実施例 8 )

ペプチド [I] 0. 5mg

生理食塩水 2mL

ぺプチド [ I ] 0. 5 m gに少量の生理食塩水を添加し、超音波を用いて均一な懸 濁液にした後、 生理食塩水を添加して溶液量を 2 mLとし、 液剤を調製する。

(実施例 9 )

ぺプチド [ I ] 25 m g

エタノーノレ 2. 5mL

ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 60 1 g

生理食塩水 96. 5mL

ペプチド [I]25mgをエタノール 2. 5mLに溶解した後、ポリオキシェチレ ン硬ィ匕ヒマシ油 60を 1 g加える。得られた溶液を少量ずつ攪拌しながら生理食塩 水 96. 5 m Lに添加し、 液剤を調製する。

(実施例 10) - ぺプチド [ I ] 10 m g

マクロゴーノレ 400 5 OmL

生理食塩水適量

ペプチド [I] 1 Omgを 5 OmLのマクロゴール 400に溶解した後、これに生 理食塩水を加えて 10 OmLにし、 液剤を調製する。

産業上の利用可能性

本発明は、 P. a c ne sに対する抗菌剤；ざ瘡、 サルコィドーシス等の P. a c ue s感染に起因する疾患の予防または治療剤；ざ瘡の予防または治療用ィヒ粧料 等に関し、 医薬産業上有用である。 本出願は、 日本で出願された特願 2003-323063を基礎としており、そ の内容は本明細書に全て包含されるものである。

Claims

請求の範囲

1. 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を有効成分として含有す る P r o p i on i b a c t e r i um a c n e sに对する饥 斉! I。

2. 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を有効成分として含有す る Pr o p i o n i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患の予防 または治療剤。

3. P r o p i o n i b a c t e r i m a c n e s感染に起因する疾患がざ瘡、 サルコィドーシス、 ぶどう膜炎、 結膜炎、 角膜炎、 角膜フリクテン、 心内膜炎及ぴ 脊椎関節炎からなる群から選択される疾患である請求項 2記載の予防または治療 剤。

4. P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患がざ瘡 である請求項 3記載の予防または治療剤。

5. ざ瘡が尋常性ざ瘡である請求項 4記載の予防または治療剤。

6. P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患がサノレ コィドーシスである請求項 3記載の予防または治療剤。

7.サルコィドーシスが眼サルコィドーシスである請求項 6記載の予防または治療 剤。

8. 剤型が外用剤である請求項 1〜 7のいずれかに記載の剤。

9. 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を有効成分として含有す るざ瘡の予防または治療用化粧料。

10. 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を用いる P r 0 p i 0 n i b a c t e r i urn a c n e s感染の予防または治療方法。

1 1. 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を用いる P r o p i o n i b a c t e r i urn a c n e s感染に起因する疾患の予防または治療方法。

12. 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩を有効成分として含有す る化粧料を用いるざ瘡の予防または治療方法。

13. P r o p i on i b a c t e r i um a c e sに対する抗菌斉 !jを製造す るための、 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩の利用。

14. P r o p i o n i b a c t e r i um a c n e s感染に起因する疾患の予 防または治療剤を製造するための、 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩の利用。

15. ざ瘡の予防または治療用化粧料を製造するための、 下式 [I]

で示されるぺプチドまたは医薬として許容されるその塩の利用。