WO2004112751A1 - 薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤 - Google Patents

薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤 Download PDF

Info

Publication number
WO2004112751A1
WO2004112751A1 PCT/JP2004/008188 JP2004008188W WO2004112751A1 WO 2004112751 A1 WO2004112751 A1 WO 2004112751A1 JP 2004008188 W JP2004008188 W JP 2004008188W WO 2004112751 A1 WO2004112751 A1 WO 2004112751A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
drug
porous apatite
apatite derivative
water
metal compound
Prior art date
Application number
PCT/JP2004/008188
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Yutaka Mizushima
Yasuaki Ogawa
Junzo Tanaka
Toshiyuki Ikoma
Original Assignee
Ltt Bio-Pharma Co., Ltd.
Independent Administrative Institution, National Institute For Materials Science
Galenisearch, Laboratories
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ltt Bio-Pharma Co., Ltd., Independent Administrative Institution, National Institute For Materials Science, Galenisearch, Laboratories filed Critical Ltt Bio-Pharma Co., Ltd.
Priority to JP2005507206A priority Critical patent/JP4709007B2/ja
Priority to CA002526563A priority patent/CA2526563A1/en
Priority to EP04745782A priority patent/EP1634585A4/en
Priority to AU2004249032A priority patent/AU2004249032A1/en
Priority to US10/559,512 priority patent/US20060153930A1/en
Publication of WO2004112751A1 publication Critical patent/WO2004112751A1/ja

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/30—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/42—Phosphorus; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1611—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the present invention relates to sustained-release drug-containing microparticles based on microparticles of a porous apatite derivative that disappears in a living body, a method for producing the same, and a preparation containing the same.
  • PLGA is a biodegradable base that is hydrolyzed and disappears in the living body, and has favorable properties as a base for injections.
  • the sustained-release base a material having so-called biodegradability or biodegradability that disappears from the body within a time period close to the end of drug release after administration must be selected. I have to. Even in the case of highly water-soluble drugs, the initial burst release of excess drug released at the beginning of administration must be small. Furthermore, considering the case where the drug is proteinaceous, it is necessary to find a sustained-release base and a manufacturing method that can be manufactured without using an organic solvent as much as possible.
  • the drug encapsulation amount in the drug-containing microparticles must be 10% by weight or more, and it must be able to easily pass through a fine needle of 23G or less, and the microparticle preparation must be prepared for a sustained drug release period of at least 3 days or more.
  • sustained-release fine particles of various drugs can be obtained by using fine particles of a porous apatite derivative. Furthermore, the combined use of a water-soluble divalent metal compound and a drug excluding human growth hormone will result in a sustained release of the drug for at least 3 days or more, and a suppression of the initial burst release even for a highly water-soluble drug. I found it. Furthermore, they found that the same effect was obtained even when a water-soluble divalent metal compound was not used.
  • the present invention is to obtain sustained-release microparticles for various drugs, and to avoid the initial burst release of drugs that are sustained-released for at least 3 days and have high water solubility.
  • An object of the present invention is to provide a drug-containing sustained-release fine particle capable of producing a drug, a method for producing the same, and a preparation containing the same.
  • the drug-containing sustained-release microparticles of the present invention comprise a drug excluding human growth hormone and a porous apatite derivative, and further comprise a drug excluding human growth hormone, a porous apatite derivative, and a water-soluble polyvalent metal.
  • water-soluble polyvalent metal compounds such as zinc chloride, calcium chloride, calcium hydroxide, iron chloride, iron hydroxide, cobalt chloride, aluminum chloride, zinc acetate, and the like.
  • water-soluble divalent metal compounds are most preferred.
  • zinc compound and calcium compound are preferred.
  • Zinc chloride is most preferred.
  • Others such as zinc acetate and calcium salt are also preferred.
  • the preparation for parenteral administration of the present invention contains sustained-release drug-containing fine particles as an active ingredient. Consists of
  • the preparation for parenteral administration is a subcutaneous injection or an intramuscular injection.
  • the porous apatite derivative is obtained by substituting a part of calcium, which is a component of hydroxyapatite, with zinc as a composition during production.
  • it is a porous apatite derivative.
  • the zinc substitution rate or the content rate of the porous apatite derivative is 0.1 to 2.0.
  • the method for producing drug-containing sustained-release fine particles of the present invention is characterized in that fine particles of a porous apatite derivative are stirred and dispersed in a drug-containing aqueous solution, and after the aqueous solution infiltrates the porous apatite derivative.
  • An aqueous solution containing a water-soluble divalent metal compound is added, and the water-soluble divalent metal compound is infiltrated into the porous apatite derivative.
  • additives such as a stabilizer are added, followed by freeze-drying or vacuum drying. Consisting of
  • an aqueous solution containing a water-soluble divalent metal compound may not be added, and thus the water-soluble divalent metal compound may not be infiltrated into the porous apatite derivative.
  • the porous apatite derivative is a porous apatite derivative obtained by substituting a part of calcium, which is a constituent part of hydroxyapatite, with zinc at the time of production, and the substitution or content of zinc in the porous apatite derivative is 0.1%.
  • the water-soluble divalent metal compound is preferably zinc salt or zinc acetate.
  • the drug used except for human growth hormone used herein is not particularly limited, but a water-soluble drug is preferable.
  • protein drugs include interferons, interleukins, G_CSF, BDNF, FGF, EGF, and various antibodies.
  • peptide drugs include GnRH derivatives, TRH, enkephalins, PTH, and calcitonin.
  • DNA-related substances include antisense and ribozyme.
  • Other examples include anti-inflammatory drugs, steroids, anti-dementia drugs, and drugs for treating cardiovascular diseases.
  • the basic production method is as follows: fine particles of a porous apatite derivative are stirred and dispersed in an aqueous solution containing a drug, and after the aqueous solution is sufficiently infiltrated into the porous apatite derivative, An aqueous solution containing a water-soluble divalent metal compound is added to sufficiently infiltrate the water-soluble divalent metal compound into the porous apatite derivative. Thereafter, an additive such as a suitable stabilizer is added thereto and freeze-dried or vacuum-dried to obtain drug-containing sustained-release fine particles of a powder based on the porous apatite derivative fine particles containing the drug.
  • an additive such as a suitable stabilizer is added thereto and freeze-dried or vacuum-dried to obtain drug-containing sustained-release fine particles of a powder based on the porous apatite derivative fine particles containing the drug.
  • the obtained powder When actually administered, the obtained powder is dispersed in an appropriate dispersion medium and injected subcutaneously or intramuscularly. Dispersion of the encapsulated drug by dispersing the microparticles thus obtained in a large amount of purified water at room temperature shows that the amount of the encapsulated drug varies depending on the drug, but it depends on the porous apatite derivative. Did not release the drug. That is, it is considered that the drug is infiltrated and adsorbed into the pores of the porous apatite.
  • porous apatite derivative fine particles used here can be obtained by a known method.
  • the most preferred porous apatite derivative is a hydroxyapatite composition in which part of Ca is replaced by zinc (Zn).
  • the substitution rate (the number of Zn atoms per CalO atom) is preferably 0.1-5.0, more preferably 0.1-2.0. At this time, the rate of disappearance in the living body differs depending on the ratio of (Ca + Zn) / P.
  • the ratio of (Ca + Zn) / P is preferably in the range of 1.67 to 1.51. When a porous apatite derivative in this range is used, it disappears in vivo within a few weeks and several months.
  • the substitution rate or the content is preferably 0.1 to 5.0, more preferably 0.1 to 2.0.
  • the firing temperature is preferably 150 ° C. to 600 ° C. at room temperature and 800 ° C.
  • 150 ° C-400 ° C is more preferable. If it is fired at 800 ° C or higher, it will not disappear in vivo.
  • the particle size of the fine particles can be controlled by the firing temperature, it can be used in the range of 0.1 ⁇ to 100 zm. Of these, 0.1 111-20 111 is preferred. Further, 0.2 ⁇ -10 ⁇ m can be more preferably used.
  • the adsorption rate of the above-mentioned drug to the porous apatite derivative is much higher in the porous apatite derivative than in the hydroxyapatite without Zn substitution. This puts zinc This is because the specific surface area and the porosity are significantly increased by the replacement or the inclusion.
  • the higher the adsorption rate the smaller the total dose of the drug-containing sustained-release fine particles, which is preferable.
  • the preferred absorption rate depends on the optimal dose of the drug, but is generally 230 to 30% by weight of the porous apatites. Of these, 5 to 25% by weight is preferably used. Further, those that adsorb 10% by weight or more are more preferable.
  • the water-soluble divalent metal compound to be added after the drug is adsorbed to the porous apatite derivatives is preferably Zn or Ca. Of these, Zn is most preferred.
  • the amount used depends on the physicochemical properties of the drug, but is generally used in the range of 1 to 70% by weight of the porous apatite derivative. In order to maintain sufficient sustained release, 5-70% by weight is preferably used.
  • chlorides and salts of organic acids are preferably used. Examples include zinc chloride, zinc acetate, calcium salt and the like.
  • the sustained release period of the drug-containing sustained-release microparticles obtained as described above can be controlled by the calcination temperature of the HAP derivative and the amount of the divalent metal compound used. Release is possible. Sustained release over one week is possible, and practically, sustained release over one week is preferable.
  • the particle size of the drug-containing sustained release microparticles finally obtained may be passed through an injection needle used for ordinary administration.
  • the smaller the diameter of the needle the less fear there is for the patient.
  • the smaller the particle size of the drug-containing sustained-release microparticles the better.
  • the particle size is extremely small, the amount of the drug retained is reduced and the initial burst release is increased.
  • 0.5 ⁇ —20 ⁇ is preferable.
  • 0.5 ⁇ 10 ⁇ m is more preferred. Particles less than 10 am easily pass through a 27G needle.
  • the drug used here is not particularly limited, but may be water-soluble and may be adsorbed on porous abatite derivatives.
  • a measure of water solubility can be evaluated by its solubility in water. If the solubility is 100 ⁇ g / mL or more, drug-containing sustained-release microparticles can usually be prepared. More preferably, the solubility is 500 xg / mL or more, and lmg / mL or more.
  • the solution (100 ⁇ L) was mixed, left at room temperature for 10 minutes, centrifuged at 2500 G, and the amount of betamethasone phosphate or hydroxycortisone phosphate liberated in the supernatant was quantified based on the absorption value at 230 nm of the supernatant.
  • the amount of the remaining drug that had flowed off during the supernatant from the initially applied predetermined amount of drug was taken as the adsorption amount.
  • the results are shown in Table 1 below. As is clear from Table 1, the higher the amount of the HAP or the porous apatite derivative relative to the drug, the higher the ratio of the drug adsorbed to the HAP or the porous apatite derivative. The adsorption ratio was significantly higher with the porous apatite derivative than with HAP.
  • Beta means betamethasone phosphate
  • Hyd means hydrocortisone phosphate
  • the steroid means betamethasone phosphate or hydroxycortisone phosphate.
  • Porous hydroxyapatite (HAP) or porous apatite derivative (0.5 mol zinc 45 mg of the substituted or contained derivative ( ⁇ - ⁇ -0 ⁇ 5)) was precisely weighed, and 30 / ig was added as IFN from a 2.4 mg / mL solution of interferon-a (IFN), and the mixture was allowed to stand for 10 minutes. Thereafter, 1 mL of a 20 mM zinc acetate solution was added thereto, and shaken for 30 minutes. When 1.5 mL of water was added to this dispersion and washed, IFN in the washing was quantified, and no IFN was detected in the case of HAP or HAP_Zn_0.5.
  • IFN interferon-a
  • Zinc acetate 20 mM 78 In all systems, the elution was suppressed by the addition of zinc acetate, and sustained release over a longer period of time was observed as compared to no addition. When HAP was compared with ⁇ - ⁇ -0 ⁇ 5, the dissolution of HAP-Zn-0.5 was clearly delayed, indicating a longer sustained release.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Abstract

種々の薬物に関する徐放性微粒子を得ること、又少なくとも３日間以上にわたり薬物が徐放され、かつ水溶性の高い薬物においても初期バースト放出を抑制することが出来る薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤を提供することにある。ヒト成長ホルモンを除く薬物、及び多孔性アパタイト誘導体からなり、かつ、ヒト成長ホルモンを除く薬物、多孔性アパタイト誘導体および水溶性２価金属化合物からなる。多孔性アパタイト誘導体の微粒子を薬物含有の水溶液中に攪拌・分散し、水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤したのち水溶性２価金属化合物を含む水溶液を添加し、水溶性２価金属化合物を該多孔性アパタイト誘導体に浸潤させ、その後安定剤などの添加物を加えて、凍結乾燥または真空乾燥することにより製造されることからなる。

Description

明 細 書
薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤 技術分野
[0001] 本発明は、生体内で消失する多孔性アパタイト誘導体の微粒子を基剤とする薬物 含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤に関する。
背景技術
[0002] 薬物の長期間にわたる微粒子の徐放性注射剤は、これまでポリ乳酸 ·グリコール酸
(PLGA)を基剤にしてその多くは検討されてきた（特開平 11一 286403、特開 2000— 239104、特開 2002— 326960参照）。又、ヒト成長ホルモン（hGH)を含有する PLGAを 基剤とした徐放性マイクロカプセルが報告されている（Nature Medicine, 2: 795-799， 1996)。又、 LHRHァゴニストであるリュープロレリンを含有する PLGAを基剤とした徐 放性マイクロカプセルが報告されている（Chemical Pharmaceutical Bulletin, 36: 1095-1103, 1988)。 PLGAは生体内で加水分解して消失する生体内消化性の基剤 で注射剤の基剤としては好ましい性質を有している。しかし、一般的に PLGAを使用 する微粒子型の徐放性製剤にぉレ、て内封される薬物の水溶性が高ければ、投与初 期に過乗 IJな放出（初期バースト）をすることは避けられない問題点がある。また、製造 に際して、有機溶媒の使用が避けられず、タンパク性薬物においては失活の問題が ある。さらに、通常使用される製造方法としての溶媒除去法を採用すると、水溶性薬 物の場合、その封入量は 10重量％以下となり、活性の弱い薬物では全体の投与量 が大きくなり、投与しにくい。また、製剤の平均粒子径が 20 μ πι以上となり、比較的大 きぐ注射用針は 21 23Gと太い針が必要となる。また、ヒドロキシアパタイトを用いた 薬物の徐放性粒子についてはすでにレ、くつかの報告はある（Η. Gautier et al: Journal of Biomedical Material Research, 40, 60り—り 13, 1998、 J.LrUicheux et al: Journal of Biomedical Material Research, 34, 165—170, 1997)。し力し、いずれも薬 物とヒドロキシアパタイトとの 2成分系であり、ヒドロキシアパタイトの粒子径も 40— 80 μ mあるレ、は 200 /i mと大きく、また、 in vivoにおける徐放効果は不明である。さらに、ァ パタイト粒子に吸着した薬物（封入量)も 1%以下と小さいものであった。 発明の開示
[0003] 徐放性基剤には、投与後、薬物の放出の終了に近い時間内に生体内から消失す るいわゆる生体内分解性あるいは生体内消失性の性質を有する素材を選定しなけ ればならなレ、。水溶性の高い薬物の場合においても投与初期に過剰の薬物が放出 する初期バースト放出も小さいものでなければならなレ、。さらに、薬物がタンパク性で ある場合を考慮して、有機溶媒を極力使用しないで製造ができる徐放性基剤と製造 方法をみいださなければならない。薬物含有微粒子中の薬物封入量は 10重量％以 上とし、 23G以下の細い注射針でも容易に通過でき、薬物徐放期間は少なくとも 3日 間以上にわたる微粒子製剤を調製するものでなければならない。
[0004] 本発明者らは、これらの問題を解決するために、多孔性アパタイト誘導体の微粒子 を利用することによって、種々の薬物に関する徐放性微粒子が得られることをみいだ した。さらに、水溶性 2価金属化合物及びヒト成長ホルモンを除く薬物を併用すること によって少なくとも 3日間以上にわたり薬物が徐放されること、ならびに水溶性の高い 薬物においても初期バースト放出が抑制されることをみいだした。さらに、水溶性 2価 金属化合物を用いない場合でも同様の効果があることをみいだした。
[0005] そこで、本発明は、種々の薬物に関する徐放性微粒子を得ること、又少なくとも 3日 間以上にわたり薬物が徐放され、かつ水溶性の高い薬物においても初期バースト放 出を回避することが出来る薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有す る製剤を提供することを目的とする。
[0006] 本発明の薬物含有徐放性微粒子は、ヒト成長ホルモンを除く薬物、及び多孔性ァ パタイト誘導体からなり、さらに、ヒト成長ホルモンを除く薬物、多孔性アパタイト誘導 体および水溶性多価金属化合物からなるものであり、水溶性多価金属化合物として は、塩化亜鉛、塩ィ匕カルシウム、水酸化カルシウム、塩化鉄、水酸化鉄、塩ィ匕コバル ト、塩ィ匕アルミニウム、酢酸亜鉛などがあげられる力 なかでも水溶性 2価金属化合物 が最も好ましい。水溶性 2価金属化合物としては亜鉛化合物及びカルシウム化合物 が好適である力 塩化亜鉛が最も好ましい。その他酢酸亜鉛、塩ィヒカルシウム等も好 l である。
又、本発明の非経口的投与用製剤は薬物含有徐放性微粒子を有効成分とするこ とからなる。
又、非経口的投与用製剤が皮下注射剤または筋肉注射剤であることが好適である 又、多孔性アパタイト誘導体がヒドロキシアパタイトの構成成分であるカルシウムの 一部を組成として製造時に亜鉛に置換した多孔性アパタイト誘導体であることが好適 である。
又、多孔性アパタイト誘導体の亜鉛置換率または含有率が 0.1— 2.0であることが好 適である。
[0007] 又、本発明の薬物含有徐放性微粒子の製造法は、多孔性アパタイト誘導体の微粒 子を薬物含有の水溶液中に攪拌 ·分散し、水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に 浸潤したのち水溶性 2価金属化合物を含む水溶液を添カ卩し、水溶性 2価金属化合物 を該多孔性アパタイト誘導体に浸潤させ、その後安定剤などの添加物をカ卩えて、凍 結乾燥または真空乾燥することからなる。
さらに、その製造法において、水溶性 2価金属化合物を含む水溶液を添加せず、し たがって水溶性 2価金属化合物を該多孔性アパタイト誘導体に浸潤させない場合も ある。
又、同様に、多孔性アパタイト誘導体がヒドロキシアパタイトの構成部分であるカル シゥムの一部を製造時に亜鉛に置換した多孔性アパタイト誘導体であること、多孔性 アパタイト誘導体の亜鉛の置換または含有率が 0.1— 2.0であること、水溶性 2価金属 化合物が塩ィヒ亜鉛または酢酸亜鉛であることが好適である。
[0008] また、ここで用いられるヒト成長ホルモンを除く薬物についてはとくに限定しないが 水溶性の薬物が好ましい。例えば、タンパク性薬物では、インターフェロン類、インタ 一リュウキン類、 G_CSF、 BDNF、 FGF、 EGF、各種抗体などがあげられる。ペプチド 系薬物としては、 GnRH誘導体、 TRH、エンケフアリン類、 PTH、カルシトニンなどがあ げられる。 DNA関連物質として、アンチセンス、リボザィムなどがあげられる。その他、 抗炎症薬、ステロイド、抗痴呆薬、循環器系疾患治療薬などがあげられる。
[0009] 基本的な製造方法は、多孔性アパタイト誘導体の微粒子を薬物含有の水溶液中に 攪拌'分散し、十分に水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤したのち、さらに 水溶性 2価金属化合物を含む水溶液を添加し、水溶性 2価金属化合物を十分に該 多孔性アパタイト誘導体中に浸潤させる。その後、適当な安定剤などの添加物を加 えて凍結乾燥または真空乾燥することによって薬物を含む多孔性アパタイト誘導体 微粒子を基剤とする粉末の薬物含有徐放性微粒子を得る。実際に投与するときには 、この得られた粉末を適当な分散媒中に分散して、皮下または筋肉内などに注射投 与する。このようにして得られた微粒子を室温で多量の精製水中に分散することによ つて封入した薬物の脱離を測定すると、薬物により異なるが、多孔性アパタイト誘導 体類に対して一定の量までは薬物は脱離しなかった。すなわち、薬物は、多孔性ァ パタイト類の細孔内に浸潤して吸着しているものと考えられる。
[0010] ここで使用する多孔性アパタイト誘導体微粒子は、既知の方法で得ることができる。
たとえば、「山ロ喬'柳田博明編、牧島亮男 ·青木秀希著:セラミックスサイエンスシリ ーズ 7バイオセラミックス.技報堂出版株式会社、 7-9ページ, 1984」に記載されている 方法などが挙げられる。多孔性アパタイト誘導体としては、ヒドロキシアパタイトの組成 として Caの一部を亜鉛（Zn)で置換したものが最も好ましレ、。その置換率（CalO原子 に対する Znの原子数）は、 0.1— 5.0が好ましぐ 0.1— 2.0がより好ましい。このとき、 (Ca+Zn)/Pの比率によって生体内での消失速度が異なり、 1.67よりも小さい方が水に 溶けやすぐすなわち生体内で消失する速度が速くなる。（Ca+Zn)/Pの比が 1.67— 1.51の範囲内であることが好ましい。この範囲の多孔性アパタイト誘導体を使用する と生体内で数週間力 数ケ月以内で消失する。その置換率または含有率 (CalO原子 に対する Znの原子数）は、 0.1— 5.0が好ましぐ 0.1— 2.0がより好ましい。また、多孔性 アパタイト誘導体を製造するときの焼成温度は、低い方が水に溶けやすぐしたがつ て生体内での消失速度も速くなる。焼成温度は、室温一 800°Cが用いられる力 150 °C一 600°Cが好ましい。さらには 150°C— 400°Cがより好ましレ、。 800°C以上で焼成され ると生体内で消失しなくなる。微粒子の粒子径は、焼成温度で制御できるが 0.1 μ πι 一 100 z mの範囲で使用できる。このうち、 0.1 111ー20 111が好ましレ、。さらには、 0.2 μ πι- 10 μ mがより好ましく利用できる。
[0011] 上記の薬物の多孔性アパタイト誘導体への吸着率は、 Zn置換をしないヒドロキシァ パタイトに比較して多孔性アパタイト誘導体の方がはるかに大きい。これは亜鉛を置 換または含有させることで、有意に比表面積 ·気孔率が高くなるためである。吸着率 の大きいほど薬物含有徐放性微粒子の総投与量が少なくなり好ましい。好ましい吸 着率は、薬物の至適投与量によって異なるが、一般的には、多孔性アパタイト類の 2 一 30重量％である。このうち 5— 25重量％が好ましく用いられる。さらには 10重量％以 上吸着するものがより好ましい。
[0012] 多孔性アパタイト誘導体類に薬物を吸着させた後添加する水溶性 2価金属化合物 は、 Znまたは Caが好ましい。なかでも Znが最も好ましい。その使用量は、薬物の物理 化学的性質によって異なるが、一般的には、多孔性アパタイト誘導体の 1一 70重量％ の範囲で使用される。十分な徐放性を維持させるには、 5— 70重量％が好ましく用い られる。使用される水溶性 2価金属化合物は、塩化物、有機酸の塩が好んで用いら れる。たとえば塩化亜鉛、酢酸亜鉛、塩ィ匕カルシウムなどが挙げられる。
[0013] 以上のようにして得られた薬物を含有する徐放性微粒子の徐放期間は、 HAP誘導 体の焼成温度、 2価金属化合物の使用量により制御でき、 3日間以上にわたり薬物 の徐放が可能である。 1週間以上にわたる徐放も可能で、実用的には 1週間以上の 徐放が好ましい。
[0014] 最終的に得られた薬物含有徐放性微粒子の粒子径は、通常の投与に用いられる 注射針を通過すればよい。実際には、注射針の径は細いほど患者に対する恐怖心 も小さい。注射針の太さをあらわす国際基準で 25G以下 (数字の大きいほど細くなる） の太さの針を通過することが好ましい。このため、薬物含有徐放性微粒子の粒子径 は小さいほど好ましいが、極端に小さくすると薬物の保持量が少なくなるし、かつ、初 期バースト放出が大きくなる。実際には 0.5 μ πι— 20 μ πιが好ましい。さらに、 0·5 μ πι 一 10 μ mがより好ましレ、。 10 a m以下の粒子とすると 27Gの注射針を容易に通過する 。ここで使用される薬物には特に制限がないが、水溶性であることおよび多孔性アバ タイト誘導体類に吸着すればよい。水溶性の尺度は、水に対する溶解度で評価でき る。その溶解度は 100 μ g/mL以上あれば通常は薬物含有徐放性微粒子を調製でき る。より好ましくは 500 x g/mL以上、 lmg/mL以上の溶解度がさらに好ましい。
実施例
[0015] 以下に実施例をあげて本発明を詳細に記載するがもちろんこの例に限定されるの ものではない。
?榊 g n ¾実 K_ά.リ施例 1
リン酸べタメタゾンあるいはリン酸ヒドロキシコーチゾン水溶液（100 μ L、 100 /i g/mL )に所定量の多孔性ヒドロキシアパタイト（HAP)または多孔性アパタイト 0.5モル亜鉛 置換誘導体 (HAP_Zn_0.5)の水懸濁液（100 μ L)を混合し、室温 10分間放置後 2500 Gで遠心し、その上清の 230nmでの吸収値から上清に遊離したリン酸ベタメタゾンま たはリン酸ヒドロキシコーチゾンを定量した。はじめに適用した所定量の薬物量から上 清中に流失した残りの薬物量を吸着量とした。その結果を下記の表 1に示す。表 1か ら明らかのように、薬物に対して HAPまたは多孔性アパタイト誘導体の量が大きくなる ほど薬物は HAPまたは多孔性アパタイト誘導体に高い比率で吸着した。その吸着比 は、 HAPに比べて多孔性アパタイト誘導体を用いた方が有意に高かった。
Figure imgf000007_0001
1 10 100 1000
HAPまたは HAP- Zn/ステロイド（重量比） 表 1中 Betaは、リン酸べタメサゾンを意味し、 Hydは、リン酸ヒドロコルチゾンを意味す る。また、ステロイドとは、リン酸べタメタゾンまたはリン酸ヒドロキシコーチゾンを意味 する。
実施例 2
多孔性ヒドロキシアパタイト（HAP)または多孔性アパタイト誘導体 (0.5モル亜鉛置 換または含有誘導体（ΗΑΡ-Ζη-0·5) )を 45mg精秤し、それにインターフェロン- a ( IFN)の 2.4mg/mL溶液から IFNとして 30 /i gを加え、 10分間放置した。その後、これに 20mMの酢酸亜鉛溶液を lmLカ卩え、 30分間振とうした。この分散液に 1.5mLの水を加 え、洗浄して洗浄液中 IFNを定量したところ、 HAPの場合も HAP_Zn_0.5の場合も IFN は検出されなかった。すなわち、全ての IFNは HAPまたは HAP-Zn-0.5に吸着してい ることが確認された。このように、有機溶媒を使用しないでタンパク質である IFNを吸 着した薬物含有微粒子をえることができた。洗浄後、得られた粉末に 20%FCS含有の PBS溶液 20mLをカ卩え、 37°Cで 16時間振とうした。上清に溶出してきた IFNを定量して 溶出率を算出した。下記の表 2に示す結果が得られた。
表 2 HAPおよび HAP_Zn_0.5に吸着した IFNの溶出率 溶出した IFN (%)
HAP 酢酸亜鉛 Om 92
酢酸亜鉛 20mM 87
HAP-Zn-0. 5 酢酸亜鉛 Om 89
酢酸亜鉛 20mM 78 いずれのシステムでも酢酸亜鉛の添加によって溶出は抑制され、無添加に比較して より長時間にわたる徐放性をしめした。 HAPと ΗΑΡ-Ζη-0·5とを比較すると、明らかに HAP-Zn-0.5の方が溶出は遅延され、より長時間の徐放性を示した。

Claims

請求の範囲
[I] ヒト成長ホルモンを除く薬物および多孔性アパタイト誘導体力 なることを特徴とする 薬物含有徐放性微粒子。
[2] ヒト成長ホルモンを除く薬物、多孔性アパタイト誘導体および水溶性 2価金属化合物 からなることを特徴とする薬物含有徐放性微粒子。
[3] 多孔性アパタイト誘導体がヒドロキシアパタイトの構成成分であるカルシウムの一部を 製造時に亜鉛に置換した多孔性アパタイト誘導体であることを特徴とする請求の範 囲第 1又は 2項記載の薬物含有徐放性微粒子。
[4] 多孔性アパタイト誘導体の亜鉛置換または含有率が 0.1— 2.0であることを特徴とする 請求の範囲第 3項記載の薬物含有徐放性微粒子。
[5] 水溶性 2価金属化合物が亜鉛化合物であることを特徴とする請求の範囲第 2項記載 の薬物含有徐放性微粒子。
[6] 水溶性 2価金属化合物が塩ィヒ亜鉛または酢酸亜鉛であることを特徴とする請求の範 囲第 5項記載の薬物含有徐放性微粒子。
[7] 請求の範囲 1一 6のいずれかに記載された薬物含有徐放性微粒子を有効成分として 含有することを特徴とする非経口的投与用製剤。
[8] 非経口的投与用製剤が皮下注射剤または筋肉注射剤のいずれかであることを特徴 とする請求の範囲第 7項記載の製剤。
[9] 多孔性アパタイト誘導体の微粒子を薬物含有の水溶液中に攪拌 ·分散し、水溶液が 該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤したのち水溶性 2価金属化合物を含む水溶液を 添加し、水溶性 2価金属化合物を該多孔性アパタイト誘導体に浸潤させ、その後安 定剤などの添加物をカ卩えて、凍結乾燥または真空乾燥することにより製造されること を特徴とする薬物含有徐放性微粒子の製造法。
[10] 多孔性アパタイト誘導体がヒドロキシアパタイトの構成部分であるカルシウムの一部を 製造時に亜鉛に置換した多孔性アパタイト誘導体であることを特徴とする請求の範 囲第 9項記載の製造法。
[II] 多孔性アパタイト誘導体の亜鉛の置換または含有率が 0.1— 2.0であることを特徴とす る請求の範囲第 10項記載の製造法。 水溶性 2価金属化合物が塩化亜鉛または酢酸亜鉛であることを特徴とする請求の範 囲第 9項記載の製造法。
PCT/JP2004/008188 2003-06-18 2004-06-11 薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤 WO2004112751A1 (ja)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2005507206A JP4709007B2 (ja) 2003-06-18 2004-06-11 薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤
CA002526563A CA2526563A1 (en) 2003-06-18 2004-06-11 Drug-containing sustained release microparticle, process for producing the same and preparation containing the microparticle
EP04745782A EP1634585A4 (en) 2003-06-18 2004-06-11 MEDICINAL PRODUCTS CONTAINING DELAYED MICROTEIL, PROCESS FOR ITS PREPARATION AND MICROPARTICLE CONTAINING PREPARATION
AU2004249032A AU2004249032A1 (en) 2003-06-18 2004-06-11 Drug-containing sustained release microparticle, process for producing the same and preparation containing the microparticle
US10/559,512 US20060153930A1 (en) 2003-06-18 2004-06-11 Drug-containing sustained release microparticle, process for producing the same and preparation containing the microparticle

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2003-173431 2003-06-18
JP2003173431 2003-06-18

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2004112751A1 true WO2004112751A1 (ja) 2004-12-29

Family

ID=33534720

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2004/008188 WO2004112751A1 (ja) 2003-06-18 2004-06-11 薬物含有徐放性微粒子、その製造法、及びそれを含有する製剤

Country Status (8)

Country Link
US (2) US20060153930A1 (ja)
EP (1) EP1634585A4 (ja)
JP (1) JP4709007B2 (ja)
KR (1) KR20060052695A (ja)
CN (1) CN100490897C (ja)
AU (1) AU2004249032A1 (ja)
CA (1) CA2526563A1 (ja)
WO (1) WO2004112751A1 (ja)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005082405A1 (ja) * 2004-02-26 2005-09-09 Japan Science And Technology Agency たんぱく性薬物の注射用徐放性微粒子製剤およびその製造法
WO2006109635A1 (ja) 2005-04-06 2006-10-19 Kabushiki Kaisha Sangi 腸管吸収用抗腫瘍剤
JP2009137875A (ja) * 2007-12-05 2009-06-25 National Institute For Materials Science エリスロポエチン徐放製剤とその作製方法
JP2015110603A (ja) * 2015-01-08 2015-06-18 ラボラトリー スキン ケア インコーポレイテッド 活性剤を充填した、均一、硬質、球状のナノ多孔質リン酸カルシウム粒子の製造方法
US10028903B2 (en) 2008-09-23 2018-07-24 Laboratory Skin Care, Inc. Active agent loaded uniform, rigid, spherical, nanoporous calcium phosphate particles and methods of making and using the same

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3915001B2 (ja) * 2003-06-18 2007-05-16 独立行政法人科学技術振興機構 ヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤およびその製造方法
US7901726B2 (en) 2007-08-31 2011-03-08 Boston Scientific Scimed, Inc. Porous medical articles for therapeutic agent delivery

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS59101145A (ja) * 1982-11-30 1984-06-11 日本特殊陶業株式会社 薬液含浸多孔質セラミツクス
JPH03218310A (ja) * 1988-12-29 1991-09-25 Asahi Optical Co Ltd 薬剤徐放性顆粒及びその製造方法
JPH04327525A (ja) * 1991-04-26 1992-11-17 Kyocera Corp 徐放性薬剤含有セラミックス多孔体
JPH09165327A (ja) * 1995-12-15 1997-06-24 Noboru Harada 小球体及びそれを含有する医薬用組成物
WO1998009645A1 (fr) * 1996-09-04 1998-03-12 Dott Research Laboratory Compositions medicamenteuses contenant des peptides, destinees a l'administration orale
JP2002020218A (ja) * 2000-07-06 2002-01-23 Miyoshi Kasei Kk 皮脂吸着性粉体及びその使用
JP2004075662A (ja) * 2002-06-20 2004-03-11 Mukku:Kk 徐放性組成物、その製造方法およびその製剤

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4157378A (en) * 1973-01-11 1979-06-05 Colgate Palmolive Company Process for preparing fluorapatite
EP0376331A3 (en) * 1988-12-29 1991-03-13 Asahi Kogaku Kogyo Kabushiki Kaisha Slow release drug delivery granules and process for production thereof
JPH11286403A (ja) 1998-03-31 1999-10-19 Mitsui Chem Inc 徐放性製剤
JP3218310B2 (ja) 1998-11-18 2001-10-15 株式会社スモリ工業 軸状固定部材、板材固定構造ならびに建築物施工および解体方法
JP2000239104A (ja) 1999-02-16 2000-09-05 Mitsui Chemicals Inc 徐放性製剤
JP4161031B2 (ja) * 2000-10-31 2008-10-08 独立行政法人産業技術総合研究所 亜鉛含有リン酸カルシウム微粒子含有懸濁液または粒子溶媒混合系及び亜鉛欠乏症治療剤
JP2002326960A (ja) 2000-12-15 2002-11-15 Takeda Chem Ind Ltd 組成物、その製造法および用途
US20040180091A1 (en) * 2003-03-13 2004-09-16 Chang-Yi Lin Carbonated hydroxyapatite-based microspherical composites for biomedical uses
JP3915001B2 (ja) * 2003-06-18 2007-05-16 独立行政法人科学技術振興機構 ヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤およびその製造方法
JP4327525B2 (ja) 2003-07-09 2009-09-09 マスプロ電工株式会社 ケーブルモデムシステム

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS59101145A (ja) * 1982-11-30 1984-06-11 日本特殊陶業株式会社 薬液含浸多孔質セラミツクス
JPH03218310A (ja) * 1988-12-29 1991-09-25 Asahi Optical Co Ltd 薬剤徐放性顆粒及びその製造方法
JPH04327525A (ja) * 1991-04-26 1992-11-17 Kyocera Corp 徐放性薬剤含有セラミックス多孔体
JPH09165327A (ja) * 1995-12-15 1997-06-24 Noboru Harada 小球体及びそれを含有する医薬用組成物
WO1998009645A1 (fr) * 1996-09-04 1998-03-12 Dott Research Laboratory Compositions medicamenteuses contenant des peptides, destinees a l'administration orale
JP2002020218A (ja) * 2000-07-06 2002-01-23 Miyoshi Kasei Kk 皮脂吸着性粉体及びその使用
JP2004075662A (ja) * 2002-06-20 2004-03-11 Mukku:Kk 徐放性組成物、その製造方法およびその製剤

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP1634585A4 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005082405A1 (ja) * 2004-02-26 2005-09-09 Japan Science And Technology Agency たんぱく性薬物の注射用徐放性微粒子製剤およびその製造法
WO2006109635A1 (ja) 2005-04-06 2006-10-19 Kabushiki Kaisha Sangi 腸管吸収用抗腫瘍剤
EP1872798A4 (en) * 2005-04-06 2008-12-03 Sangi Kk ANTI-TUMOR AGENT ABSORBABLE BY INTESTINATION
US8293274B2 (en) 2005-04-06 2012-10-23 Kabushiki Kaisha Sangi Intestinal absorptive anti-tumor agent
JP5097540B2 (ja) * 2005-04-06 2012-12-12 株式会社サンギ 腸管吸収用抗腫瘍剤
JP2009137875A (ja) * 2007-12-05 2009-06-25 National Institute For Materials Science エリスロポエチン徐放製剤とその作製方法
US10028903B2 (en) 2008-09-23 2018-07-24 Laboratory Skin Care, Inc. Active agent loaded uniform, rigid, spherical, nanoporous calcium phosphate particles and methods of making and using the same
US10758478B2 (en) 2008-09-23 2020-09-01 Laboratory Skin Care, Inc. Active agent loaded uniform, rigid, spherical, nanoporous calcium phosphate particles and methods of making and using the same
JP2015110603A (ja) * 2015-01-08 2015-06-18 ラボラトリー スキン ケア インコーポレイテッド 活性剤を充填した、均一、硬質、球状のナノ多孔質リン酸カルシウム粒子の製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP1634585A4 (en) 2009-08-12
US20060153930A1 (en) 2006-07-13
JPWO2004112751A1 (ja) 2006-08-31
EP1634585A1 (en) 2006-03-15
AU2004249032A1 (en) 2004-12-29
CN100490897C (zh) 2009-05-27
US20100322902A1 (en) 2010-12-23
JP4709007B2 (ja) 2011-06-22
CN1798547A (zh) 2006-07-05
US8313767B2 (en) 2012-11-20
KR20060052695A (ko) 2006-05-19
CA2526563A1 (en) 2004-12-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8313767B2 (en) Drug-containing sustained release microparticle, process for producing the same and preparation containing the microparticle
EP0633020B1 (en) Method of producing sustained-release preparation
US5916597A (en) Composition and method using solid-phase particles for sustained in vivo release of a biologically active agent
CA2214889C (en) Polypeptide-containing pharmaceutical forms of administration in the form of microparticles and a process for the production thereof
JP2004075662A (ja) 徐放性組成物、その製造方法およびその製剤
KR100792557B1 (ko) 나노 캡슐화를 이용하여 제조된 지질 핵 및 고분자 쉘구조를 갖는 단백질 약물 전달용 나노 미립구
HU211602A9 (en) Sustained release formulations of water soluble peptides
JP2004507450A (ja) ポリマーマトリックスから生物学的環境中へのタンパク質制御放出のための難溶性生体適合性粒子上被着タンパク質
JPWO2005082405A1 (ja) たんぱく性薬物の注射用徐放性微粒子製剤およびその製造法
JP3915001B2 (ja) ヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤およびその製造方法
JP2008106024A (ja) たんぱく性薬物含有徐放性微粒子組成物およびその製造方法
KR100908517B1 (ko) 호흡기계 약제 전달을 위한 서방형 다공성 미세입자 및 그제조 방법
WO2008041704A1 (fr) Préparation à libération contrôlée
JP3761594B2 (ja) 徐放性製剤の製造法
JP5352993B2 (ja) エリスロポエチン徐放製剤とその作製方法
NL195092C (nl) Preparaten van in water oplosbare peptiden met een langzame afgifte.

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BW BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NA NI NO NZ OM PG PH PL PT RO RU SC SD SE SG SK SL SY TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): BW GH GM KE LS MW MZ NA SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IT LU MC NL PL PT RO SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2005507206

Country of ref document: JP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2526563

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2004249032

Country of ref document: AU

REEP Request for entry into the european phase

Ref document number: 2004745782

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2004745782

Country of ref document: EP

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2006153930

Country of ref document: US

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 10559512

Country of ref document: US

Ref document number: 20048155488

Country of ref document: CN

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 1020057023473

Country of ref document: KR

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2004249032

Country of ref document: AU

Date of ref document: 20040611

Kind code of ref document: A

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2004249032

Country of ref document: AU

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2004745782

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 1020057023473

Country of ref document: KR

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 10559512

Country of ref document: US