WO2004102182A1 - 試料注入装置及び方法、並びに該試料注入装置を有する液体クロマトグラフィ装置 - Google Patents

試料注入装置及び方法、並びに該試料注入装置を有する液体クロマトグラフィ装置 Download PDF

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washing
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Yuki Togashi
Osamu Shirota
Aya Ohkubo
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Shiseido Company, Ltd.
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    • G01N2035/00534—Mixing by a special element, e.g. stirrer
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Definitions

  • the present invention relates to a sample injection device and a sample injection method for injecting a sample into a moving liquid, and a liquid chromatography apparatus having the sample injection device.
  • a liquid chromatography apparatus in which a sample is pressurized together with a liquid as a mobile phase and sent to a column to separate and elute the components of the sample and detect with a detector, basically has a structure as shown in FIG. Having a configuration.
  • the liquid chromatography apparatus includes a mobile phase storage tank 101 for storing a liquid as a mobile phase, a mobile phase deaerator 102 for removing air in the liquid as a mobile phase, and a liquid as a mobile phase.
  • a pump 103 for sending from the mobile phase storage tank 101 to the detector 107, a sample is injected into the liquid as a mobile phase toward the separation column 105 (automatic). It includes a filled separation column 105, a column thermostat 106 for keeping the separation column 105 at a substantially constant temperature, and a detector 107 for detecting the components of the eluted sample.
  • Carryover refers to the detection result of a previously measured sample substance remaining in a liquid chromatography device in time series, as if the substance were present in the sample currently being measured. This is a phenomenon that reduces the reliability of the analysis results. Carry-over occurs when a sample is injected into a liquid as a mobile phase in the automatic sample injector 104, the sample is adsorbed on the metal and / or resin in the automatic sample injector 104 and remains, and the remaining sample is removed. Is caused by being introduced into the liquid chromatography analysis system when the next sample is injected.
  • a self-cleaning function can be provided in the automatic sample injector 104. As shown in FIG. 6, the main operation of the automatic sample injection device 104 is to collect the sample supplied to the sample container 14 with the sample needle 10 and to connect the sample needle 10 from which the sample has been collected to the injection valve 15.
  • the sample is injected from the sample needle 10 to the sample loop 16 through the sample injection path, and the flow path of the sample in the injection valve 15 is switched.
  • Sending the sample in the column to the separation column 105 is powerful. For this reason, as a place where the sample is adsorbed and remains in the automatic sample injection device 104 (sample adsorption site), the outer wall of the sample needle 10 after the sample is collected, and the sample needle 10 after the sample is injected. And the inner wall of the sample injection path, the inner wall of the sample loop 16 after the sample is sent to the separation column 105, and the flow path of the sample in the injection valve 15.
  • the self-cleaning function is provided corresponding to these sample adsorption sites, the function of cleaning the outer wall of the sample needle, the function of cleaning the inner wall of the sample needle, the function of cleaning the sample injection path, and the sample loop and injection functions It is sufficient to provide four self-cleaning functions of the valve cleaning function. These four self-cleaning functions are described below.
  • (1) Function for washing the outer wall of the sample needle immediately before sample injection (needle press) As shown in FIG. 7, the needle press is used to inject the sample collected by the sample needle 10 into the needle. Immediately before injection into the port, the sample needle 10 is immersed in the cleaning solution sent to the cleaning unit 17 to wash the sample adsorbed and remaining on the outer wall of the sample needle 10 after collecting the sample. . The washing solution that has washed the sample remaining on the outer wall of the sample needle 10 is discarded, and the pure washing solution is supplied to the washing unit 17.
  • the needle press allows the user to set the time (washing time) during which the sample needle 10 is immersed in the washing solution.
  • the needle post-soak immerses the sample needle 10 in the washing liquid supplied to the washing section 17 and simultaneously inserts the sample needle 10 into the sample needle 10.
  • the washing liquid supplied to the washing section 17 and simultaneously inserts the sample needle 10 into the sample needle 10.
  • the cleaning solution that has washed the sample remaining on the inner wall of the sample needle 10 is discarded, and the pure cleaning solution is supplied to the washing unit 17.
  • the user can set the time (washing time) for flowing the washing solution to the sample needle 10.
  • post-injection wash is a cleaning method in which after the sample is injected into the injection port, the following operations 1) to 3) are sequentially performed during the analysis of the sample. Function.
  • the user can set the volume of the washing solution to be sucked into the sample needle 10 and the number of times the washing solution is discharged and sucked (the number of washing times). It is also possible to provide two or more cleaning liquid ports 24 and use two or more cleaning liquids.
  • the cleaning liquid used first is a liquid having a strong detergency (such as a strong alkali that is not desired to pass through the separation column 105), and is used later. Is a liquid used as a mobile phase, a liquid with strong detergency can be used, and the liquid with strong detergency can be used for analysis. Mixing into the system can be prevented.
  • a loop rinsing valve is required outside the automatic sample injector.
  • the loop rinse valve 108 operates to switch the flow path of the mobile phase liquid supplied to the mobile phase storage tank 101. That is, as shown in FIG. 10 (a), when the cleaning function of the loop rinse is not operated, the liquid as the mobile phase sent out by the pump 103 is supplied into the sample injection device 104 and separated together with the sample. To the detector column 105 and the detector 107. Conversely, as shown in FIG.
  • the liquid as the mobile phase sent out by the pump 103 does not pass through the sample injection device 104, and the separation column 105 And sent directly to the detector 107. If such a loop rinse valve 108 is used, the sample is sent to the separation column 105 through the flow path shown in FIG. 10 (a), and is immediately switched to the flow path shown in FIG. 10 (b). By transmitting the liquid as the phase to the separation column 105, the analysis can be performed, and at the same time, the sample loop and the injection valve can be washed.
  • Loop rinsing is a cleaning function for sequentially executing the following operations 1) to 4) after injecting a sample into the sample loop 16, as shown in Figs.
  • the user can set the time for discharging the cleaning liquid from the sample needle 10 (cleaning time) and the number of times the injection valve 15 is switched.
  • two or more washing solution containers are provided, these washing solution containers are connected to the sample needle 10, and the connection between these washing solution containers and the sample needle 10 is switched to provide two types of washing solution containers. It is also possible to use the above cleaning liquid.
  • the cleaning liquid used first is a liquid having a strong detergency (such as a strong alkali that does not want to pass through the separation column 105), and the cleaning liquid used later is If the liquid is used as a mobile phase, it is possible to use a liquid having a strong detergency and to prevent the liquid having a strong detergency from being mixed into an analysis system. .
  • a strong detergency such as a strong alkali that does not want to pass through the separation column 105
  • a sample introduction device that introduces a sample into an analyzer such as a liquid chromatography, which can perform mixing of a sample or washing for $ 21 without sucking and discharging a liquid, is also disclosed in Japanese Patent Application Laid-Open No. H10-260,086. No. 11-304779.
  • the sample introduction device includes a vibration generating unit such as an ultrasonic vibrator arranged directly or in contact with a sample injection needle via a member capable of transmitting vibration, and a vibration control unit for controlling the vibration generating unit. Unit.
  • the ultrasonic transducer placed in contact with the sample injection needle or a metal part connected to the sample injection needle, and is controlled by the vibration control unit when mixing the sample or washing the needle.
  • the needle itself is vibrated by the ultrasonic vibrator.
  • the automatic sample injection device provided with four self-cleaning functions executes the four self-cleaning functions in combination in order to reduce the carryover phenomenon, and therefore requires an average cleaning time of about 3 minutes.
  • a needle press is performed before the start of analysis, but a wash of about 1 to 5 seconds is usually sufficient. No cleaning time is required. Therefore, the other three self-cleaning functions except the needle press require about 3 minutes in total.
  • these three self-cleaning functions can be performed simultaneously with the analysis of the sample. Therefore, if the analysis time is 3 minutes or more, there is no problem because all three self-cleaning functions are performed within the analysis time.
  • a vibration generating unit such as an ultrasonic vibrator arranged directly or in contact with a sample injection needle via a member capable of transmitting vibration
  • the automatic sample injection device is basically a precision machine, so it is necessary to avoid unnecessary vibration. For this reason, a sample introduction device equipped with an ultrasonic vibrator arranged directly or in contact with a sample injection needle via a member capable of transmitting vibration is affected by the ultrasonic vibration of the sample injection needle. There is also a problem that it can be received.
  • An object of the present invention is to provide a sample injection device, a sample injection method, and a liquid chromatography device having the sample injection device, which do not lower the durability of the sample needle.
  • One of the above objects is to provide a sample container to which a sample is supplied, a sample needle to suck and discharge the sample, a cleaning unit to which a cleaning liquid for cleaning at least the sample needle is supplied, A sample injecting unit for injecting the sample discharged from the needle into a moving liquid, and a needle moving unit for moving the sample needle between the sample container, the washing unit, and the sample injecting unit.
  • the cleaning section is achieved by a sample injection device having an ultrasonic vibrator for generating ultrasonic waves in the cleaning liquid.
  • the cleaning unit since the cleaning unit has the ultrasonic vibrator that generates ultrasonic waves in the cleaning liquid, carryover can be sufficiently reduced, and the cleaning is simple and the cleaning time is short.
  • the present invention can provide a sample injection device which has a means and does not reduce the durability of the sample needle where the effect of vibration by the washing means is small and the error of the sample injection amount is small.
  • the cleaning unit is configured to reduce vibration of the ultrasonic vibrator from propagating to members other than the cleaning unit in the sample injection device. It has a member.
  • the cleaning unit is configured to reduce the propagation of the vibration by the ultrasonic vibrator to members other than the cleaning unit in the sample injection device. Therefore, the influence of the vibration by the ultrasonic vibrator on members other than the cleaning unit in the sample injection device can be further reduced.
  • the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is preferably 20 kHz or more and 80 kHz or less.
  • the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is 20 kHz or more.
  • the inner diameter of the sample needle is preferably 0.1 mm or more and 0.8 mm or less.
  • the inner diameter of the sample needle is not less than 0.1 mm and not more than 0.8 m. m or less, it is possible to provide a sample injection device capable of reducing sample loss.
  • One of the above objects is a step of sucking a sample into a sample needle, a step of holding the sample in the sample needle, and a step of immersing the sample needle in a cleaning liquid, and a step of applying ultrasonic waves to the cleaning liquid. And a step of cleaning the sample needle immersed in the cleaning liquid, and a step of discharging the sample from the sample needle and injecting the sample into a moving liquid.
  • sample injection method a step of sucking the sample into the sample needle, a step of holding the sample in the sample needle, and a step of immersing the sample needle in the cleaning liquid, Generating a sound wave to clean the sample needle immersed in the cleaning solution; and discharging the sample from the sample needle and injecting it into the moving liquid.
  • a sample injection method that can be reduced, has a simple and short cleaning time, has little effect of vibration due to the cleaning means, has a small error in the sample injection amount, and does not reduce the durability of the sample needle. Can be provided.
  • the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is preferably 20 kHz or more and 80 kHz or less.
  • the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is not less than 20 kHz and not more than 80 kHz. Therefore, it is possible to provide a sample injection method capable of reducing carryover more efficiently. it can.
  • the inner diameter of the sample needle is preferably 0.1 mm or more and 0.8 mm or less.
  • the inner diameter of the sample needle is not less than 0.1 mm and not more than 0.8 mm, it is possible to provide a sample injection method capable of reducing loss of a sample. .
  • a mobile phase storage tank for storing a liquid as a mobile phase, a sample injection device for injecting a sample into the liquid as the mobile phase, and the sample together with the liquid as the mobile phase.
  • a separation column for separating the components of the sample sent from the injection device; and
  • a sample container to which the sample is supplied, a sample needle for sucking and discharging the sample, and at least the sample needle for detecting a component of the sample separated by the separation column.
  • a washing unit to which a washing liquid for washing the sample needle is supplied, a sample injection unit to inject the sample discharged from the sample needle into the liquid as the mobile phase, and the sample container, the washing unit, and
  • the liquid chromatography apparatus includes a needle moving means for moving the sample needle between the sample injection units, and the cleaning unit includes an ultrasonic vibrator for generating ultrasonic waves in the cleaning liquid.
  • the sample injection device supplies a sample container to which the sample is supplied, a sample needle for sucking and discharging the sample, and a cleaning liquid for washing at least the sample needle.
  • a sample injection unit for injecting the sample discharged from the sample needle into the liquid as the mobile phase, and the sample container between the sample container, the washing unit, and the sample injection unit.
  • the cleaning unit has an ultrasonic vibrator that generates ultrasonic waves in the cleaning liquid, so that carry-over can be sufficiently reduced, and the cleaning time is simple and easy.
  • a sample injection device that does not reduce the durability of the sample needle that does not reduce the error of the sample injection amount that is less affected by vibration due to the cleaning device. It is possible to provide a that liquid chromatography apparatus.
  • the washing unit is configured to reduce a vibration of the ultrasonic oscillator from propagating to members other than the washing unit in the sample injection device. It has a member.
  • the washing unit includes a vibration damping member that reduces the propagation of the vibration by the ultrasonic transducer to members other than the washing unit in the sample injection device. Accordingly, the influence of the vibration by the ultrasonic vibrator on the members other than the cleaning unit in the sample injection device can be further reduced.
  • the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is preferably 20 kHz or more and 80 kHz or less.
  • the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is 20 k Since the frequency is not less than Hz and not more than 80 kHz, it is possible to provide a liquid chromatography apparatus having a sample injection device capable of reducing carryover more efficiently.
  • the inner diameter of the sample needle is preferably
  • the liquid chromatography apparatus since the inner diameter of the sample needle is not less than 0.1 mm and not more than 0.8 mm, it is necessary to provide a liquid chromatography apparatus capable of reducing loss of a sample. S can.
  • FIG. 1 is a view showing an automatic sample injection device according to the present invention.
  • FIG. 2 is a view for explaining the operation of an injection valve.
  • FIG. 3 is a diagram illustrating a sample injection method of the present invention.
  • FIG. 4 is a diagram illustrating a liquid chromatography device.
  • FIG. 5 is a diagram showing the results of carryover evaluation performed on a liquid chromatography apparatus, where (a) shows a sample peak, and (b) shows a needle pre-wash and a needle post-wash.
  • FIG. 7C is a diagram showing a detection result in the case of performing all of the four self-cleaning functions
  • FIG. 7D is a diagram showing a detection result in the case of performing only the ultrasonic cleaning in the present invention. .
  • FIG. 6 is a diagram illustrating main operations of the automatic sample injection device.
  • FIG. 7 is a view for explaining a needle press.
  • FIG. 8 is a view for explaining a needle posture.
  • FIG. 9 is a diagram for explaining post-injection cache.
  • FIG. 10 is a diagram for explaining the operation of the loop rinse valve in the loop rinse, wherein (a) the case where the cleaning function of the loop rinse is not operated, and (b) the case where the cleaning function of the loop rinse is operated.
  • FIG. 10 is a diagram for explaining the operation of the loop rinse valve in the loop rinse, wherein (a) the case where the cleaning function of the loop rinse is not operated, and (b) the case where the cleaning function of the loop rinse is operated.
  • FIG. 11 is a diagram illustrating cleaning of a sample loop and an injection valve in loop rinsing.
  • FIG. 12 is a diagram illustrating the configuration and operation of an automatic sample injection device using a direct injection method.
  • FIG. 13 is a diagram showing the results of evaluation of carryover performed on a liquid chromatography device including an automatic sample injection device using a direct injection method, where (a) is a sample peak, and (b) is a sample peak.
  • FIG. 7 is a diagram illustrating detection results when ultrasonic cleaning is performed and when ultrasonic cleaning is not performed.
  • FIG. 14 is a view for explaining the relationship between the inner diameter of the sample needle and the standing wave of ultrasonic waves generated in the cleaning liquid.
  • FIG. 15 is a diagram showing a relationship between a vibration frequency of an ultrasonic transducer and a carry bar regarding ultrasonic cleaning in the present invention.
  • FIG. 16 is a diagram showing the relationship between the inner diameter of a sample needle and the sample retention.
  • the sample injection device of the present invention includes at least a sample container, a sample needle, a washing unit, a sample injection unit, and a needle moving unit.
  • the sample container is supplied with a sample to be injected into the moving liquid and is stored therein.
  • the sample needle sucks and discharges the sample to be injected into the moving liquid.
  • the sample needle is connected to, for example, a syringe, and discharges and aspirates the sample by controlling the pressure in the sample needle by pushing and pulling the syringe.
  • the washing unit is supplied with a washing liquid for washing at least the sample needle.
  • the cleaning liquid supplied to the cleaning unit may be used for cleaning the sample injection path and the sample loop in the above-mentioned injection valve other than the sample dollar. Also, the cleaning liquid may be the same liquid as the moving liquid.
  • the sample injection unit is a member that injects the sample discharged from the sample needle into the liquid that moves inside the sample injection device of the present invention. More specifically, the sample injection unit includes the above-described injection valve, sump phenol, and the like.
  • the needle moving means moves the sample needle between the sample container, the washing unit, and the sample injection unit.
  • the needle moving means may move the sample needle alone to the sample container, the washing section, and the sample injection section. Also instead, knee
  • the dollar moving means may be different means depending on the movement of the sample needle between the sample container and the washing unit and the movement of the sample needle between the washing unit and the sample injection unit.
  • the cleaning section has an ultrasonic vibrator for generating ultrasonic waves in the cleaning liquid, and is made of a material capable of transmitting ultrasonic waves generated by the vibration of the ultrasonic vibrator to the cleaning liquid.
  • the ultrasonic vibrator can be attached to an arbitrary place in the cleaning unit (for example, a bottom surface of the cleaning unit) as long as the ultrasonic vibrator can vibrate freely.
  • the vibration of the ultrasonic transducer can be controlled by a device that controls the vibration of the ultrasonic wave.
  • the vibration of the ultrasonic transducer generates ultrasonic waves in the cleaning liquid stored in the cleaning section.
  • Ultrasonic waves generated by the ultrasonic transducer are non-coherent compression waves, which are reflected by the inner wall of the cleaning section and vibrate the cleaning liquid near the outer wall of the sample needle immersed in the cleaning liquid. This makes it possible to wash the sample adsorbed and remaining on the outer wall of the sample needle.
  • the ultrasonic needle is not attached to the sample needle itself (directly or via a member capable of transmitting vibration), so that the sample needle itself is not vibrated. Therefore, in the present invention, the sample needle is not subjected to the load due to the vibration of the ultrasonic vibrator, so that the sample needle is not deteriorated (without decreasing the durability of the sample needle), and the ultrasonic wave of the sample needle is reduced. Cleaning can be realized. In addition, since the sample needle itself does not vibrate, even if the sample needle is ultrasonically cleaned after aspirating the sample, it is necessary to inject the sucked sample into a moving liquid that is less likely to be lost in the cleaning solution. There is little error in the amount of fees.
  • the washing unit has a vibration damping member.
  • the vibration damping member reduces the propagation of the vibration by the ultrasonic vibrator to members other than the cleaning unit in the sample injection device. Therefore, it is possible to further reduce the adverse effect of the vibration of the ultrasonic transducer on members other than the cleaning unit in the sample injection device.
  • the vibration damping member is, for example, a spring And an elastic body such as rubber. Also, if the vibration from the ultrasonic vibrator does not propagate to members other than the cleaning section in the sample injection device, the energy of the vibration from the ultrasonic vibrator is not wasted and is effectively used for cleaning the sample needle. can do.
  • the vibration frequency of the ultrasonic transducer is preferably 20 kHz or more and 80 kHz or less. If the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is less than 20 kHz, the volume of the cleaning liquid stored in the cleaning section is sufficient to generate sufficient standing ultrasonic waves in the cleaning liquid stored in the cleaning section. Need to be larger. Therefore, the size of the sample injection device including the washing unit and the size of the liquid chromatography device including the sample injection device must be increased. On the other hand, if the vibration frequency of the ultrasonic vibrator exceeds 80 kHz, a larger special ultrasonic vibrator is needed to generate sufficient standing ultrasonic waves in the cleaning liquid stored in the cleaning section. become.
  • the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is not less than 20 kHz and not more than 80 kHz, a standing ultrasonic wave can be more easily generated in the cleaning liquid stored in the cleaning section. Further, when the vibration frequency of the ultrasonic transducer is less than 20 kHz or more than 80 kHz, the efficiency of reducing carryover is slightly reduced. On the other hand, when the vibration frequency of the ultrasonic transducer is 20 kHz or more and 80 kHz or less, carryover can be more efficiently reduced.
  • the size of the cleaning unit in the direction in which the ultrasonic vibration is transmitted in the cleaning liquid is not too small with respect to the wavelength of the standing wave of the ultrasonic wave generated in the cleaning liquid.
  • the size of the cleaning unit in the direction in which the vibration is transmitted is larger than the wavelength of the standing wave of the ultrasonic wave generated in the cleaning liquid. In this case, a standing ultrasonic wave can be stably generated in the cleaning liquid stored in the cleaning section, and the sample adsorbed and remaining on the outer wall of the sample needle can be effectively removed.
  • the inner diameter of the sample needle is significantly smaller than the wavelength of the standing ultrasonic wave generated in the cleaning liquid stored in the cleaning section.
  • the inside diameter of the sample needle is significantly smaller than the wavelength of the ultrasonic standing wave generated in the cleaning liquid stored in the cleaning section, sometimes a standing ultrasonic wave is generated in the liquid sample held in the sample needle. No loss of liquid sample held in the sample needle due to ultrasonic waves. As a result, without loss of the liquid sample held in the sample needle by ultrasonic The sample adsorbed and remaining on the outer wall of the needle can be removed.
  • the ultrasonic wave is applied to the liquid sample held in the sample needle. Occasionally, a portion of the liquid sample held in the sample needle may be lost.
  • FIG. 14 is a diagram illustrating the relationship between the inner diameter of the sample needle and the standing ultrasonic wave generated in the cleaning liquid.
  • the inner diameter A of the sample needle 10 is preferably 0.1 mm or more and 0.8 mm or less. Masure, When the inner diameter A of the sample needle 10 is 0.8 mm or less, the inner diameter A of the sample needle 10 is smaller than the wavelength B of the standing wave 32 of the ultrasonic wave generated in the cleaning liquid 31 stored in the cleaning section.
  • the sample adsorbed and remaining on the outer wall of the sample needle 10 can be removed without loss of the liquid sample 30 held in the sample dollar 10 by ultrasonic waves.
  • the vibration frequency force of the ultrasonic vibrator 21 is not less than 20 kHz and not more than 80 kHz and exceeds the inner diameter A force of the sample needle 10 of 0.8 mm, one of the liquid sample 30 held in the sample needle 10 Parts may be lost.
  • the inner diameter A of the sample needle 10 is not less than 0.1 mm regardless of the vibration frequency of the ultrasonic transducer 21, a sufficient amount of the sample to be injected into the moving liquid is placed in the sample needle 10. Can be collected.
  • the inner diameter A 1S of the sample needle 10 is smaller than 0.1 mm, the amount of the sample that can be collected in the sample needle 10 is too small. It may be difficult to collect a sample.
  • the automatic sample injector includes a sample needle 10, a syringe 11, a cleaning liquid pump 12, a valve 13, a sample container 14, an injection valve 15, a sample loop 16, a cleaning unit 17, a cleaning liquid container 18, a cleaning liquid port 24, and It has a needle moving means not shown.
  • the sample needle 10 is connected to a syringe 11, and the sample needle 10 is pushed and pulled by the syringe 11 so that the sample needle 10 is supplied to the sample container 14. Can be sucked and discharged.
  • the cleaning liquid stored in the cleaning liquid container 18 is continuously sent out to the cleaning unit 17 or the sample needle 10 by the cleaning liquid pump 12.
  • a valve 13 is provided between the sample needle 10 and the syringe 11.
  • the cleaning liquid delivered from the cleaning liquid container 18 is supplied to the cleaning unit 17 or the sample needle 11.
  • the cleaning liquid is continuously supplied to the cleaning unit 17, and a certain amount or more of the cleaning liquid is discharged from the cleaning unit 17 as a waste liquid.
  • the cleaning unit 17 is provided with an ultrasonic vibrator, and is fixed to the bottom surface of the automatic sample injection device via a vibration damping panel as a vibration damping member.
  • the injection valve 15 has an injection port 19 through which the sample needle 10 is inserted and a sample or a washing liquid is injected from the sample needle 10, and a sample loop 16 is connected thereto.
  • a liquid is supplied to the injection valve 15 from outside the automatic sample injector, and the liquid is sent to the outside of the automatic sample injector. More specifically, when the automatic sample injection device is used in a liquid chromatography device, a solvent provided as a mobile phase is supplied by a pump provided outside the automatic sample injection device, and the solvent is separated. To the column for use. Further, one or a plurality of washing liquid ports 24 (three washing liquid ports 24 in FIG. 1) may be provided in the automatic sample injection device (in this case, a post which is one of the self-cleaning functions described above). Injection wash can be performed).
  • the injection valve 15 has six ports, and these six ports are connected by any combination of the solid line A and the dotted line B.
  • the injection valve 15 can switch the connection indicated by the solid line A or the dotted line B.
  • the washing liquid is the same as the solvent as the mobile phase.
  • the solvent as the mobile phase supplied from the external pump is sent to the separation ram.
  • the sample is supplied to the injection port 19 by the sample needle
  • the supplied sample is held in the sample norape 16.
  • the length of the sample nose 16 is designed to hold the maximum amount of sample that can be supplied by the sample needle.
  • the solvent as the mobile phase supplied from the outside of the automatic sample injector passes through the sample loop 16 And sent to the separation column.
  • the sample is held in the sample loop 16, the sample is sent to the separation column together with the solvent as the mobile phase passing through the sample loop 16.
  • a cleaning liquid is supplied to the injection port 19 via a sample needle.
  • the washing liquid is the same as the solvent as the mobile phase, so that all the flow paths connecting the six ports are connected. It can be washed with a washing solution (solvent as a mobile phase). At the same time, the injected sample can be sent to a separation column to separate and analyze the components of the sample.
  • the sample injection method of the present invention will be described. First, the sample is sucked into the sample needle, and the sample needle is immersed in the washing liquid while the sample is held on the sample needle.
  • the sample injection method of the present invention using the sample injection device of the present invention will be described with reference to FIG.
  • the previously-washed sample injection needle 10 is moved to the sample container 14 by the needle moving means, and is immersed in the sample supplied to the sample container 14.
  • the syringe 11 connected to the sample needle 10 is pulled to suck the sample into the sample needle 10.
  • the needle for sample 10 is moved to the washing unit 17 using the needle moving means, and is immersed in the washing liquid supplied to the washing unit.
  • the cleaning liquid flows through the cleaning section 17, and the cleaning section 17 is continuously supplied with a pure cleaning liquid. It is.
  • the ultrasonic vibrator 21 attached to the cleaning unit 17 is vibrated to generate ultrasonic waves in the cleaning liquid.
  • the outer wall of the sample needle 10 immersed in the cleaning liquid can be cleaned by the ultrasonic waves generated in the cleaning liquid.
  • the sample needle 10 itself does not vibrate. There is no loss to the cleaning solution.
  • the washing unit is provided with a vibration damping panel 22 which is a vibration damping member, which prevents the vibration of the ultrasonic transducer 21 from propagating to members other than the washing unit 17 in the sample injection device. Reduce.
  • the sample needle 10 After the sample needle 10 has been ultrasonically cleaned, the sample needle 10 is moved to the injection valve 15 which is a sample injection part using the needle moving means, and the sample needle is inserted into the injection port 19 of the injection valve 15. Purchase 10 Finally, the syringe 11 connected to the sample needle 10 is pushed, and the sample collected in the sample needle 10 is moved via the injection valve 15 and the sample loop 16 provided in the injection valve 15. Inject into the liquid you want.
  • the sample injection device and / or the sample injection method of the present invention carryover can be sufficiently reduced.
  • the conventional four self-cleaning functions needle pre-wash, needle post-wash, post-injection wash, and loop rinse
  • the washing conditions can be easily set.
  • the cleaning time can be reduced as compared with the conventional cleaning using the four self-cleaning functions.
  • one or more of the above-described conventional four self-cleaning functions may be combined with the ultrasonic cleaning of the sample needle according to the present invention, if necessary.
  • the durability of the sample needle does not decrease.
  • the liquid chromatography apparatus of the present invention comprises at least a mobile phase storage tank 101 and a sample injection device 10. 4. It has a separation column 105 and a detector 107, and the sample injection device 104 uses the sample injection device of the present invention.
  • the mobile phase storage tank 101 stores a well-known liquid as a mobile phase used for liquid chromatography.
  • the sample injection device of the present invention has a mechanism for cleaning the sample needle with ultrasonic waves, and injects the sample into a liquid as a mobile phase.
  • the separation column 105 is filled with a well-known column filler as a stationary phase, and separates a sample component sent from the sample injection device 104 together with a liquid as a mobile phase.
  • the detector 107 detects the components of the sample separated by the separation column 105.
  • a liquid such as a pump 103 provided between the mobile phase storage tank 101 and the sample injection device 104 is moved.
  • Use phase delivery means Before the liquid as the mobile phase is sent to the sample injecting device 104 by the mobile phase sending means such as the pump 103, a well-known movement provided between the mobile phase storage tank 101 and the mobile phase sending means such as the pump 103.
  • the air contained in the liquid as the mobile phase be degassed by the phase deaerator 102.
  • a well-known column thermostat 106 for keeping the temperature of the separation column 105 constant is provided in the separation power column 105. It is desirable.
  • an automatic sample injection device using a direct injection method can be used as a sample injection device in the liquid chromatography device of the present invention.
  • the configuration and operation of the automatic sample injection device using the direct injection method will be described with reference to FIG.
  • the automatic sample injection device using the direct injection method includes a sample needle 10, a syringe 11, a cleaning liquid pump 12, a valve 13, a sample container 14, an injection valve 15, a pipe 25, cleaning units 17 and 17 ', And needle moving means (not shown).
  • the sample needle 10 constitutes a part of a pipe 25 connecting two ports of the injection valve 15.
  • the sample nozzle 10 is combined with the pipe 25 to form a flow path through which the solvent as the mobile phase flows.
  • the sample needle 10 is used. Is Separate from the tube 25 and move to the sample container 14, the washing unit 17 and / or 17 ', respectively, using the needle moving means. Further, the syringe 11 is connected to one port of the injection valve 15 and can be connected to the sample needle 10 by switching the connection between the ports of the injection valve 15. When the syringe 11 is connected to the sample needle 10, the sample needle 10 can suck and discharge the sample supplied to the sample container 14 by pushing and pulling the syringe 11.
  • the cleaning liquid pump 12 continuously sends the cleaning liquid stored in the cleaning liquid container to the cleaning unit 17 or 17 ′.
  • a valve 13 is provided between the injection valve 15 and the syringe 11, and by switching this valve 13, the cleaning liquid delivered from the cleaning liquid container is transferred to the cleaning unit 17 or 17 ′. Can be supplied. That is, when the injection valve 15 is connected to the cleaning liquid pump 12 by switching the valve 13, the cleaning liquid is supplied to the cleaning unit 17 through the port of the injection valve 15 connected to the cleaning unit 17. . When the cleaning unit 17 ′ is connected to the cleaning liquid pump 12 by switching the valve 13, the cleaning liquid is supplied to the cleaning unit 17 ′.
  • the cleaning liquid is continuously supplied to the cleaning unit 17 or 17 ′, and a certain amount or more of the cleaning liquid is discharged as waste liquid from the cleaning unit 17 or 17 ′ through the waste liquid port 23.
  • an ultrasonic vibrator 21 is attached near the cleaning unit 17. By vibrating the ultrasonic vibrator 21, ultrasonic waves can be generated in the cleaning liquid supplied to the cleaning unit 17.
  • a solvent as a mobile phase is supplied to the injection valve 15 by a pump 103 provided outside the automatic sample injection device, and the solvent is sent to a separation column 105.
  • the injection valve 15 has six ports, and these six ports are connected by any combination of the solid line A or the dotted line B.
  • the injection valve 15 can switch the connection indicated by the solid line A or the dotted line B.
  • the washing liquid is the same as the solvent as the mobile phase.
  • the six ports of the injection valve 15 are connected as shown by a solid line A.
  • the sample needle 10 is integrally connected to the pipe 25.
  • the solvent as the mobile phase supplied from the external pump 103 is sent to the separation column 105 through a flow path formed by coupling the sample needle 10 and the pipe 25 to the body.
  • the three ports of the valve 13 are not connected to each other as shown by C1 in FIG.
  • the connection of the six ports in the injection valve 15 is switched as shown by the dotted line B.
  • the solvent as the mobile phase supplied from the external pump 103 is sent to the separation column 105 without passing through the sample needle 10 and the pipe 25. Therefore, it becomes possible to separate the sample needle 10 from the pipe 25, to collect a sample with the sample needle 10, and to wash the sample needle.
  • the sample needle 10 when collecting the sample supplied to the sample container 14 using the sample needle 10, the sample needle 10 was placed on the sample container 14 using the needle moving means. The tip of the sample needle 10 is immersed in the sample.
  • the sample needle 10 and the syringe 11 are connected via the injection valve 15, by pulling the syringe 11, the force S for collecting an appropriate amount of the sample into the sample needle 10 can be obtained.
  • the sample needle 10 from which the sample has been collected is moved to the washing section 17 and / or 17 ′ by using the needle moving means without pushing and pulling the syringe 11. Move up to Then, the tip of the sample needle 10 is immersed in the washing unit 17 and / or 17 ′.
  • the ultrasonic vibrator 21 attached near the washing unit 17 is vibrated. Ultrasonic waves are generated in the cleaning liquid in the cleaning section 17. In this way, the outer surface of the distal end portion of the sample needle 10 can be effectively cleaned by the ultrasonic waves generated in the cleaning liquid of the cleaning section 17.
  • the sample held by the sample needle 10 does not vibrate the sample needle 10 itself even when ultrasonic waves are generated in the cleaning liquid, so that there is no loss of the collected sample to the cleaning liquid.
  • the waste liquid generated by ultrasonic cleaning of sample $ 10 is discharged to the outside through the waste liquid port 23. It is.
  • the knob 13 is moved to the position shown in FIG. In the state shown in C3, the cleaning liquid pump 12 and the cleaning unit 17 'are connected, and the cleaning liquid is continuously supplied to the cleaning unit 17'. Thereby, the outer surface of the tip portion of the sample needle 10 can be washed with the washing liquid continuously supplied to the washing section 17 '. Then, the waste liquid generated by washing the sample needle 10 is discarded outside through the waste liquid port 23.
  • the sample needle 10 is moved to the pipe 25 by using a needle moving means that does not push and pull the syringe, and the sample needle 10 is connected to the pipe 25.
  • a flow path of the solvent as the mobile phase supplied from the external pump 103 is formed.
  • the sample collected in the sample needle is injected into the pipe 25 by pressing the syringe.
  • the connection of the six ports in the injection valve 15 is switched as shown by the dotted line A.
  • the solvent flows as a mobile phase supplied from an external pump 103 through the pipe 25 and is supplied to the separation column 105 together with the sample injected into the pipe 25.
  • the components of the sample supplied to the separation column 105 together with the solvent as the mobile phase are separated by the separation column 105, and those components can be detected by the detector.
  • the valve 13 is set to the state C2 or C3 shown in FIG. 12, and the cleaning liquid pump 12 and the cleaning section 17 or 17 'are connected to exchange the cleaning liquid in the cleaning section 17 or 17'. That is, when the valve 13 is set to the state C2 shown in FIG. 12, the cleaning liquid pump 12 and the cleaning unit 17 are connected, and a certain amount of the cleaning liquid is supplied to the cleaning unit 17.
  • the cleaning liquid remaining in the cleaning section 17 after the ultrasonic cleaning of the sample needle 10 is discarded to the outside through the waste liquid port 23, and the cleaning section 17 is supplied with a new cleaning liquid supplied by the cleaning liquid pump.
  • the valve 13 is set to the state C3 shown in FIG. 12, the cleaning liquid pump 12 and the cleaning unit 17 'are connected, and a certain amount of the cleaning liquid is supplied to the cleaning unit 17'.
  • the cleaning liquid remaining in the cleaning section 17 ′ after applying the needle press to the sample need nozzle 10 is discarded to the outside through the waste liquid port 23, and the cleaning section 17 ′ is pumped by the cleaning liquid pump.
  • the supplied new cleaning liquid is supplied.
  • a mixed solvent of CH CN (volume ratio 55:45) was used.
  • the solvent flow rate in the mobile phase is 0.2
  • a mixed solvent having the same composition as the solvent of the mobile phase was also used for the washing solution.
  • the separation column 105 a column having an inner diameter of 2 mm and a length of 150 mm was used, and the temperature of the separation column 105 was maintained at 40 ° C. by using a column thermostat 106.
  • a column packing material as a stationary phase in liquid chromatography octadecinolerated silica gel having a particle diameter of 5 microns was used. As a sample for evaluating carry-over, carry-over is likely to occur.
  • a basic and hydrophobic clodin hexidine represented by As a detector 107 for detecting clodin hexidine, an absorption spectrophotometer using ultraviolet light having a wavelength of 260 nm was used.
  • the ultrasonic cleaning in the present invention did not change the injection amount of the sample into the mobile phase.
  • 2 ⁇ l of 12 ppm closin hexidine was collected with a sample needle 10, and then the sample needle 10 was immersed in the washing part, and at the same time, the outer wall of the sample needle 10 was ultrasonically cleaned. Thereafter, the collected sample was injected into the mobile phase.
  • the injection amount of the sample detected when the sample needle 1 o was ultrasonically cleaned did not change compared to when the sample needle 10 was not ultrasonically cleaned. Therefore, it was found that the ultrasonic cleaning in the present invention did not reduce the amount of the sample injected into the mobile phase.
  • Figure 5 shows the carry-over evaluation results.
  • chlorohexidine with a high concentration of 1200 ppm was collected into a sample needle and injected into the mobile phase, and a peak due to hexidine was detected.
  • the same solvent as the mobile phase not containing hexidine (hereinafter referred to as a blank sample) was injected in No. 2, and the presence or absence of remaining closin hesidine (carry-over) was observed.
  • cleaning shown in the following (1), (2) and (3) was performed.
  • FIG. 5 (a) shows the peak of Clos hexidine, which was detected when a 2 / L high concentration of 1200 ppm Clos hexidine was injected into the mobile phase.
  • Figures 5 (b), (c) and (d) show the measurement results of carryover (residual closin hexidine) after injection of the blank sample when only washing was performed.
  • the horizontal axis represents the relative detection time
  • the vertical axis represents the absorbance proportional to the concentration of hexidine.
  • the cleaning time by ultrasonic cleaning was 20 seconds.
  • Carryover was evaluated in the same manner as in Example 1 using a liquid chromatography apparatus as shown in Fig. 4 provided with an automatic sample injection apparatus by the direct injection method as shown in Fig. 12.
  • the flow rate of the solvent in the mobile phase was 0.2 ml / min.
  • a mixed solvent having the same composition as the solvent of the mobile phase was also used for the washing solution.
  • As the separation column 105 a column having an inner diameter of 2 mm and a length of 150 mm was used, and the temperature of the separation column 105 was maintained at 40 ° C. using a column thermostat 106.
  • the column packing material used as the stationary phase in liquid chromatography is Silylated silica gel was used.
  • Hexidine was used as a sample to evaluate carryover.
  • a detector 107 for detecting clodin hexidine an absorbance detector using ultraviolet light having a wavelength of 260 nm was used.
  • FIG. 13 shows the evaluation results of carry over.
  • clodin hexidine with a high concentration of 120 Oppm of 2 ⁇ M was collected into a sample needle and injected into the mobile phase, and a peak due to clodin hexidine was detected.
  • the same solvent as that of the mobile phase containing no 21-hexidine hereinafter referred to as a blank sample
  • Fig. 13 (a) shows the peak of Clos hexidine, which was detected when a 2 / L high concentration of 1200 ppm Clos hexidine was injected into the mobile phase.
  • Hexidine is shown in P1 and P2 in Fig. 13 (b), respectively.
  • the horizontal axis is the relative detection time (minutes)
  • the vertical axis is the absorbance proportional to the concentration of clodin hexidine.
  • FIG. 15 shows the relationship between the vibration frequency of the ultrasonic vibrator and the carryover related to the ultrasonic cleaning in the present invention shown in (1) of the second embodiment.
  • the horizontal axis in Fig. 15 shows the vibration frequency (kHz) of the ultrasonic transducer provided in the washing section of the sample injection device, and the vertical axis shows carryover, that is, the high concentration of 1200 ppm injected into the mobile phase.
  • the vibration frequencies of the ultrasonic vibrator were set at 10 kHz, 20 kHz, 30 kHz, 40 kHz, 50 kHz, 60 kHz, 70 kHz, 80 kHz, 90 kHz, 100 kHz, and 120 kHz, respectively.
  • the output of the ultrasonic vibrator was 50 W.
  • Figure 15 shows the result of the carry-over variation with respect to the vibration frequency of the ultrasonic transducer.
  • the vibration frequency of the ultrasonic vibrator is 20 kHz or more and 80 kHz or less
  • carry-over becomes small. It was confirmed that when the vibration frequency of the ultrasonic vibrator was less than 20 kHz or more than 80 kHz, the carryover became slightly larger. That is, when the vibration frequency of the ultrasonic transducer is 20 kHz or more and 80 kHz or less, carryover can be more efficiently reduced.
  • FIG. 16 shows the relationship between the inner diameter of the sample needle and the sample retention.
  • the horizontal axis in FIG. 16 indicates the inner diameter (mm) of the sample needle, and the vertical axis indicates the retention rate (%) of the standard sample held by the sample needle, that is, the superposition of the cleaning liquid in the cleaning section. Do not generate sound waves.
  • the inner diameters of the sample needles were 0.18 mm, 0.42 mm, 0.50 mm, 0.80 mm, and 1.00 mm, respectively.
  • the vibration frequency of the ultrasonic transducer was 80 kHz. As shown in Fig. 16, when the inside diameter of the sample needle is 0.80 mm or less, the retention rate of the standard sample held by the sample needle is approximately 100%, There was no loss of the standard sample held in the needle.
  • the present invention has a cleaning means that can sufficiently reduce carryover, is simple and has a short cleaning time, and has a small influence of vibration by the cleaning means and a small error in a sample injection amount.
  • the present invention can be applied to a sample injection device and a sample injection method that do not reduce the durability of the needle, and to a liquid chromatography device having the sample injection device.

Abstract

　キャリーオーバーを十分に低減することができ、簡便で洗浄時間が短い洗浄手段を有し、洗浄手段による振動の影響が少なく、試料の注入量の誤差が少なく、試料用ニードルの耐久性を低下させない、試料注入装置及び試料注入方法、並びに該試料注入装置を有する液体クロマトグラフィ装置を提供する。試料が供給される試料用容器１４、試料を吸引及び吐出する試料用ニードル１０、少なくとも試料用ニードル１０を洗浄する洗浄液が供給される洗浄部１７、試料用ニードル１０から吐出される試料を、移動する液体に注入する試料注入部１５、並びに試料用容器１４、洗浄部１７、及び試料注入部１５の間で試料用ニードル１０を移動させるニードル移動手段、を有し、洗浄部１７は、洗浄液に超音波を発生させる超音波振動子２１を有する試料注入装置とする。

Description

明 細 書
試料注入装置及び方法、並びに該試料注入装置を有する液体クロマトグ ラフィ装置
技術分野
[0001] 本発明は、移動する液体に試料を注入する試料注入装置及び試料注入方法、並 びに該試料注入装置を有する液体クロマトグラフィ装置に関する。
背景技術
[0002] 試料を移動相としての液体と共に加圧してカラムへ送り、試料の成分を分離及び溶 出させて検出器で検出する液体クロマトグラフィの装置は、基本的には、図 4に示す ような構成を有する。図 4において、液体クロマトグラフィの装置は、移動相としての液 体を貯蔵しておく移動相貯槽 101、移動相としての液体中の空気を除去する移動相 脱気装置 102、移動相としての液体を移動相貯槽 101から検出器 107まで送るため のポンプ 103、試料を分離用カラム 105へ向う移動相としての液体へ注入する（自動 )試料注入装置 104、試料の成分を分離するための充填剤で満たされた分離用カラ ム 105、分離用カラム 105を略一定の温度に保つカラム恒温槽 106、及び溶出され た試料の成分を検出する検出器 107を含む。
[0003] このような構造を有する液体クロマトグラフィの検出感度力 高くなるにつれて、キヤ リーオーバーと呼ばれる現象が問題になってきた。キャリーオーバーとは、時系列的 に前に測定した試料の物質が液体クロマトグラフィの装置内に残留し、あた力も現在 測定している試料中にその物質が存在するかのような検出結果を示す現象であり、 分析結果の信頼性を低下させる。キャリーオーバーは、自動試料注入装置 104にお いて移動相としての液体へ試料を注入するとき、試料が、自動試料注入装置 104内 の金属及び/又は樹脂に吸着して残留し、その残留した試料が、次の試料を注入す るときに、液体クロマトグラフィの分析系へ導入されてしまうことによって生じる。特に、 塩基性及び/又は脂溶性の物質を含む試料は、自動試料注入装置 104内の金属 及び/又は樹脂に吸着し易いため、 自動試料注入装置 104内に残留し易ぐキヤリ 一オーバーが顕著に観察されることが知られてレ、る。 [0004] 自動試料注入装置 104内に吸着し残留する試料を除去することによってキャリーォ 一バーを低減させるために、 自動試料注入装置 104内に自己洗浄機能を設けること ができる。 自動試料注入装置 104の主な動作は、図 6に示すように、試料用容器 14 に供給された試料を試料用ニードル 10で採取すること、試料を採取した試料用ニー ドル 10をインジェクションバルブ 15のインジェクションポート 19に揷入し、試料用ニー ドル 10からサンプルループ 16へ試料注入路を通じて試料を注入すること、及びイン ジヱクシヨンバルブ 15内の試料の流路が切り替り、サンプルループ 16内の試料を分 離用カラム 105へ送出すること、力 なる。このため、 自動試料注入装置 104内にお ける試料が吸着及び残留する場所 (試料吸着部位）として、試料を採取した後の試 料用ニードル 10の外壁、試料を注入した後における試料用ニードル 10の内壁及び 試料注入路の内壁、試料を分離用カラム 105へ送出した後のサンプルループ 16の 内壁及びインジェクションバルブ 15内の試料の流路が挙げられる。
[0005] 自己洗浄機能は、これらの試料吸着部位に対応して設けられるため、試料用ニー ドルの外壁洗浄機能、試料用ニードルの内壁洗浄機能、試料注入路洗浄機能、並 びにサンプルループ及びインジェクションバルブ洗浄機能の四つの自己洗浄機能を 設ければよい。これら四つの自己洗浄機能を以下に説明する。
[0006] (1)試料注入直前の試料用ニードルの外壁洗浄機能（ニードルプレゥォッシュ） 図 7に示すように、ニードルプレゥォッシュは、試料用ニードル 10に採取した試料を インジェクションポートに注入する直前に、洗浄部 17に送り込まれた洗浄液中に試料 用ニードル 10を浸漬させることで、試料を採取した後に試料用ニードル 10の外壁に 吸着及び残留した試料を洗浄する機能である。試料用ニードル 10の外壁に残留す る試料を洗浄した洗浄液は、廃棄され、純粋な洗浄液が、洗浄部 17に補充される。 ニードルプレゥォッシュでは、ユーザーは、試料用ニードル 10を洗浄液に浸漬する時 間 (洗浄時間）を設定すること力できる。
[0007] (2)試料注入直後の試料用ニードルの内壁洗浄（ニードルポストゥォッシュ）
図 8に示すように、ニードルポストゥォッシュは、試料をインジヱクシヨンポートに注入 した直後、洗浄部 17に供給される洗浄液に試料用ニードル 10を浸漬すると共に試 料用ニードル 10内に洗浄液を流すことで、試料用ニードル 10の内壁に吸着及び残 留した試料を洗浄する機能である。試料用ニードル 10の内壁に残留する試料を洗 浄した洗浄液は、廃棄され、純粋な洗浄液が、洗浄部 17に補充される。ニードルボス トウォッシュでは、ユーザーは、試料用ニードル 10に洗浄液を流す時間（洗浄時間） を設定すること力 Sできる。
[0008] (3)試料注入後の試料注入路洗浄（ポストインジェクションゥォッシュ）
図 9に示すように、ポストインジヱクシヨンゥォッシュは、試料をインジヱクシヨンポート に注入した後、試料の分析中に、以下の 1)乃至 3)の動作を順に実行する洗浄機能 である。
[0009] 1)洗浄液ポート 24上に試料用ニードル 10を移動させ、洗浄液ポート 24に用意さ れた洗浄液を試料用ニードル 10に吸引させる。
[0010] 2)洗浄液を吸引して保持した試料用ニードル 10をインジヱクシヨンバルブ 15のイン ジヱクシヨンポート 19に揷入し、試料用ニードル 10内の洗浄液を (繰り返し）吐出及 び吸引することによって、インジェクションバルブ 15内の試料注入路（インジェクション ポート 19から廃液ポート 23までの流路）を洗浄する。このとき、インジェクションバルブ 15は、インジェクションポート 19と廃液ポート 23を接続させており、インジェクションポ ート 19は、サンプルノレープ 16と接続されてない。従って、試料を試料注入路に注入 した後、インジェクションポート 19と廃液ポート 23を接続させることで、サンプルルー プ 16を通じて試料を分析すると同時に、インジェクションポート 19及び廃液ポート 23 間の流路を洗浄することができる。
[0011] 3)試料注入路を洗浄した洗浄液を吸弓 Iした試料用ニードル 10を廃液ポート 23へ 移動させ、試料注入路を洗浄した洗浄液を廃液ポート 23へ廃棄する。
[0012] ポストインジェクションゥォッシュでは、ユーザーは、試料用ニードル 10に吸引する 洗浄液の容量並びに洗浄液を吐出及び吸引する回数 (洗浄回数)を設定することが できる。また、二個以上の洗浄液ポート 24を設け、二種類以上の洗浄液を使用する ことも可能である。例えば、二種類の洗浄液を使用する場合には、先に使用する洗 浄液が、洗浄力の強い液体 (分離用カラム 105を通過することを望まない強アルカリ など）であり、後に使用する洗浄液が、移動相として使用される液体であるとすれば、 洗浄力の強い液体を使用することができると共に、その洗浄力の強い液体が、分析 系に混入することを防止することができる。
[0013] (4)分析進行中のサンプルループ及びインジェクションバルブ洗浄機能（ループリ ンス）
ループリンスを行うためには、 自動試料注入装置の外にループリンスバルブを必要 とする。図 10 (a)及び（b)に示すように、ループリンスバルブ 108は、移動相貯槽 101 力 供給される移動相の液体の流路を切り替えるように動作する。すなわち、図 10 (a )に示すように、ループリンスの洗浄機能を動作させないときには、ポンプ 103によつ て送出された移動相としての液体は、試料注入装置 104内へ供給され、試料と共に 分離用カラム 105及び検出器 107に送出される。逆に、図 10 (b)に示すように、ルー プリンスの洗浄機能を動作させるときには、ポンプ 103によって送出された移動相とし ての液体は、試料注入装置 104を通過せず、分離用カラム 105及び検出器 107へ 直接送出される。このようなループリンスバルブ 108を使用すれば、図 10 (a)に示す 流路で試料を分離用カラム 105に送出した後、すぐに図 10 (b)に示す流路に切り替 えれば、移動相としての液体を、分離用カラム 105へ送出することによって分析を進 行させると同時に、サンプルループ及びインジェクションバルブを洗浄することができ る。
[0014] ループリンスは、図 10及び図 11に示すように、試料をサンプルループ 16に注入し た後、以下の 1)乃至 4)の動作を順に実行する洗浄機能である。
[0015] 1)試料をサンプルノレープ 16に注入した後、分離用カラム 105及び検出器 107を含 む分析系の流路から、自動試料注入装置が、ループリンスバルブ 108によって完全 に切り離される。
[0016] 2)移動相としての液体を、 自動試料注入装置 104を通さずに分離用カラム 105へ 送出することによって、分析を行うと同時に、 自動試料注入装置 104内では、試料用 ニードル 10を、インジェクションバルブ 15のインジェクションポート 19に揷入し、試料 用ニードル 10から洗浄液を吐出させることによって、サンプルループ 16及びインジェ クシヨンバルブ 15内を洗浄する。ここで、試料用ニードル 10は、洗浄液が貯蔵された 洗浄液用容器と接続されており、洗浄液は、洗浄液用容器から試料用ニードルへ供 給される。 [0017] 3)洗浄液が試料用ニードル 10から吐出されている間に
の流路が切り換わるため、インジェクションポート 19から廃液ポート 23までの流路も洗 净すること力できる。
[0018] 4)サンプルループ 16及びインジヱクシヨンバルブ 15内の洗浄が終了すると、ルー プリンスバルブ 108が切り替り、図 10 (a)に示すように通常の自動試料注入装置 104 を通じた流路に戻る。
[0019] ループリンスでは、ユーザーは、試料用ニードル 10から洗浄液を吐出する時間（洗 浄時間）及びインジヱクシヨンバルブ 15の切り替えの回数を設定することができる。ま た、二個以上の洗浄液用容器を設け、これらの洗浄液用容器と試料用ニードル 10を 接続し、これらの洗浄液用容器と試料用ニードル 10との接続を切り替えることによつ て、二種類以上の洗浄液を使用することも可能である。例えば、二種類の洗浄液を 使用する場合には、先に使用する洗浄液が、洗浄力の強い液体 (分離用カラム 105 を通過することを望まない強アルカリなど）であり、後に使用する洗浄液が、移動相と して使用される液体であるとすれば、洗浄力の強い液体を使用することができると共 に、その洗浄力の強い液体が、分析系に混入することを防止することができる。
[0020] 一方、ニードルの洗浄に関して、液を吸引及び吐出することなく試料の混合又は二 一ドルの洗浄を行うことができる、液体クロマトグラフィなどの分析装置に試料を導入 する試料導入装置も特開平 11-304779号公報に開示されてレ、る。この試料導入装 置は、試料注入用ニードルに直接に、又は振動を伝達しうる部材を介して接触して 配置された超音波振動子などの振動発生部と、振動発生部を制御する振動制御部 とを備える。より具体的には、試料注入用ニードル又は試料注入用ニードルにつなが る金属部分に接触して配置された超音波振動子を備えており、試料混合時又はニー ドル洗浄時には、振動制御部で制御しながら超音波振動子でニードル自体を振動さ せている。
[0021] 四つの自己洗浄機能を設けた自動試料注入装置は、キャリーオーバー現象を低 減させるために四つの自己洗浄機能を組み合わせて実行するので、平均 3分程度の 洗浄時間を必要とする。これら四つの自己洗浄機能において、ニードルプレゥォッシ ュは、分析開始前に行われるが、通常 1乃至 5秒程度の洗浄で十分であり、あまり洗 浄時間を要しない。よって、ニードルプレゥォッシュを除く他の三つの自己洗浄機能 力 合計 3分程度の時間を要する。ただし、これら三つの自己洗浄機能は、試料を分 析すると同時に実行可能である。これより、分析時間が、 3分以上であれば、三つの 自己洗浄機能は、全て分析時間内に行われるため、問題ない。しかしながら、液体ク 口マトグラフィによる分析については、分析時間は、短縮されつつあり、分析時間の短 縮化に合わせて、洗浄時間も短縮する必要がある（例えば、洗浄時間 = 1分以内）。
[0022] また、四つの自己洗浄機能を設けた自動試料注入装置は、分析試料に適合した最 適な洗浄の条件を設定するために、四つの自己洗浄機能の動作条件をそれぞれ設 定する必要がある。し力 ながら、上述のように、四つの自己機能の動作条件は、合 計 6乃至 8個程度のパラメータを設定する必要があり、設定するパラメータの数が多 レ、と共に複雑であり、ユーザーにとって不便である。
[0023] 一方、試料注入用ニードルに直接に、又は振動を伝達しうる部材を介して接触して 配置された超音波振動子などの振動発生部を備える試料導入装置においては、試 料注入用ニードル自体を振動させるので、試料注入用ニードルに負荷がかかる。そ の結果、試料注入用ニードルの劣化が起こり、試料注入用ニードルの耐久性が低下 すること力 念される。また、このような試料注入用ニードルに試料を吸引した状態で 試料注入用ニードルを洗浄すると、試料注入用ニードル自体が振動するため、試料 注入用ニードルに吸引された試料の一部力 洗浄液の中に失われ、試料の注入量 に大きな誤差を生じる可能性がある。さらに、試料注入用ニードル自体を振動させる ことで、試料注入用ニードルを介して自動試料注入装置における他の部材にも振動 が伝播する可能性がある。しかしながら、自動試料注入装置は、基本的に精密機械 であるため、不要な振動を回避することが要求される。このため、試料注入用ニード ルに直接に、又は振動を伝達しうる部材を介して接触して配置された超音波振動子 を備える試料導入装置は、試料注入用ニードルの超音波振動による影響を受け得る という問題もある。
[0024] 発明の開示
本発明の目的は、キャリーオーバーを十分に低減することができ、簡便で洗浄時間 が短い洗浄手段を有し、洗浄手段による振動の影響が少なぐ試料の注入量の誤差 が少なぐ試料用ニードルの耐久性を低下させない、試料注入装置及び試料注入方 法、並びに該試料注入装置を有する液体クロマトグラフィ装置を提供することである。
[0025] 上記目的の一つは、試料が供給される試料用容器、前記試料を吸引及び吐出す る試料用ニードル、少なくとも前記試料用ニードルを洗浄する洗浄液が供給される洗 浄部、前記試料用ニードルから吐出される前記試料を、移動する液体に注入する試 料注入部、並びに前記試料用容器、前記洗浄部、及び前記試料注入部の間で前記 試料用ニードルを移動させるニードル移動手段を有し、前記洗浄部は、前記洗浄液 に超音波を発生させる超音波振動子を有する試料注入装置によって達成される。
[0026] 上記試料注入装置によれば、前記洗浄部は、前記洗浄液に超音波を発生させる 超音波振動子を有するので、キャリーオーバーを十分に低減することができ、簡便で 洗浄時間が短い洗浄手段を有し、洗浄手段による振動の影響が少なぐ試料の注入 量の誤差が少なぐ試料用ニードルの耐久性を低下させない、試料注入装置を提供 すること力 Sできる。
[0027] 上記試料注入装置において、前記洗浄部は、好ましくは、前記超音波振動子によ る振動が、前記試料注入装置における前記洗浄部の以外の部材へ伝播することを 低減させる、振動緩衝部材を有する。
[0028] 上記試料注入装置によれば、前記洗浄部は、前記超音波振動子による振動が、前 記試料注入装置における前記洗浄部の以外の部材へ伝播することを低減させる、振 動緩衝部材を有するので、試料注入装置における洗浄部の以外の部材に対する超 音波振動子による振動の影響をより低減することができる。
[0029] 上記試料注入装置において、前記超音波振動子の振動周波数は、好ましくは、 20 kHz以上 80kHz以下である。
[0030] 上記試料注入装置によれば、前記超音波振動子の振動周波数は、 20kHz以上 8
0kHz以下であるので、キャリーオーバーをより効率良く低減することができる試料注 入装置を提供することができる。
[0031] 上記試料注入装置において、前記試料用ニードルの内径は、好ましくは、 0. lmm 以上 0. 8mm以下である。
[0032] 上記試料注入装置によれば、前記試料用ニードルの内径は、 0. lmm以上 0. 8m m以下であるので、試料の損失を低減することができる試料注入装置を提供すること ができる。
[0033] 上記目的の一つは、試料用ニードルに試料を吸引するステップ、前記試料用ニー ドルに前記試料を保持すると共に、前記試料用ニードルを洗浄液に浸漬するステツ プ、前記洗浄液に超音波を発生させ、前記洗浄液に浸漬された前記試料用ニード ルを洗浄するステップ、及び前記試料を、前記試料用ニードルから吐出し、移動する 液体に注入するステップを有する試料注入方法によって達成される。
[0034] 上記試料注入方法によれば、試料用ニードルに試料を吸引するステップ、前記試 料用ニードルに前記試料を保持すると共に、前記試料用ニードルを洗浄液に浸漬す るステップ、前記洗浄液に超音波を発生させ、前記洗浄液に浸漬された前記試料用 ニードルを洗浄するステップ、及び前記試料を、前記試料用ニードルから吐出し、移 動する液体に注入するステップを有するので、キャリーオーバーを十分に低減するこ とができ、簡便で洗浄時間が短い洗浄手段を有し、洗浄手段による振動の影響が少 なぐ試料の注入量の誤差が少なぐ試料用ニードルの耐久性を低下させない、試料 注入方法を提供することができる。
[0035] 上記試料注入方法において、前記超音波振動子の振動周波数は、好ましくは、 20 kHz以上 80kHz以下である。
[0036] 上記試料注入方法によれば、前記超音波振動子の振動周波数は、 20kHz以上 8 0kHz以下であるので、キャリーオーバーをより効率良く低減することができる試料注 入方法を提供することができる。
[0037] 上記試料注入方法において、前記試料用ニードルの内径は、好ましくは、 0. lmm 以上 0. 8mm以下である。
[0038] 上記試料注入方法によれば、前記試料用ニードルの内径は、 0. lmm以上 0. 8m m以下であるので、試料の損失を低減することができる試料注入方法を提供すること ができる。
[0039] 上記目的の一つは、移動相としての液体が貯蔵される移動相貯槽、前記移動相と しての液体に試料を注入する試料注入装置、前記移動相としての液体と共に前記試 料注入装置から送出される前記試料の成分を分離する分離用カラム、及び前記分 離用カラムによって分離された前記試料の成分を検出する検出器を有し、前記試料 注入装置は、前記試料が供給される試料用容器、前記試料を吸引及び吐出する試 料用ニードル、少なくとも前記試料用ニードルを洗浄する洗浄液が供給される洗浄 部、前記試料用ニードルから吐出される前記試料を前記移動相としての液体に注入 する試料注入部、並びに前記試料用容器、前記洗浄部、及び前記試料注入部の間 で前記試料用ニードルを移動させるニードル移動手段を有し、前記洗浄部は、前記 洗浄液に超音波を発生させる超音波振動子を有する液体クロマトグラフィ装置によつ て達成される。
[0040] 上記液体クロマトグラフィ装置によれば、前記試料注入装置は、前記試料が供給さ れる試料用容器、前記試料を吸引及び吐出する試料用ニードル、少なくとも前記試 料用ニードルを洗浄する洗浄液が供給される洗浄部、前記試料用ニードルから吐出 される前記試料を前記移動相としての液体に注入する試料注入部、並びに前記試 料用容器、前記洗浄部、及び前記試料注入部の間で前記試料用ニードルを移動さ せるニードル移動手段を有し、前記洗浄部は、前記洗浄液に超音波を発生させる超 音波振動子を有するので、キャリーオーバーを十分に低減することができ、簡便で洗 浄時間が短い洗浄手段を有し、洗浄手段による振動の影響が少なぐ試料の注入量 の誤差が少なぐ試料用ニードルの耐久性を低下させない、試料注入装置を有する 液体クロマトグラフィ装置を提供することができる。
[0041] 上記液体クロマトグラフィ装置において、前記洗浄部は、好ましくは、前記超音波振 動子による振動が、前記試料注入装置における前記洗浄部の以外の部材へ伝播す ることを低減させる、振動緩衝部材を有する。
[0042] 上記液体クロマトグラフィ装置によれば、前記洗浄部は、前記超音波振動子による 振動が、前記試料注入装置における前記洗浄部の以外の部材へ伝播することを低 減させる、振動緩衝部材を有するので、試料注入装置における洗浄部の以外の部 材に対する超音波振動子による振動の影響をより低減することができる。
[0043] 上記液体クロマトグラフィ装置において、前記超音波振動子の振動周波数は、好ま しくは、 20kHz以上 80kHz以下である。
[0044] 上記液体クロマトグラフィ装置によれば、前記超音波振動子の振動周波数は、 20k Hz以上 80kHz以下であるので、キャリーオーバーをより効率良く低減することができ る試料注入装置を有する液体クロマトグラフィ装置を提供することができる。
[0045] 上記液体クロマトグラフィ装置において、前記試料用ニードルの内径は、好ましくは
、 0. 1mm以上 0. 8mm以下である。
[0046] 上記液体クロマトグラフィ装置によれば、前記試料用ニードルの内径は、 0. lmm 以上 0. 8mm以下であるので、試料の損失を低減することができる液体クロマトグラフ ィ装置を提供すること力 Sできる。
図面の簡単な説明
[0047] [図 1]本発明による自動試料注入装置を示す図である。
[図 2]インジェクションバルブの動作を説明する図である。
[図 3]本発明の試料注入方法を説明する図である。
[図 4]液体クロマトグラフィ装置を説明する図である。
[図 5]液体クロマトグラフィ装置に対して行ったキャリーオーバーの評価結果を示す図 であり、（a)は、試料のピーク、（b)は、ニードルプレゥォッシュ及びニードルポストゥォ ッシュを実行した場合の検出結果、 （c)四つの自己洗浄機能の全てを実行した場合 の検出結果、及び（d)は、本発明における超音波洗浄のみを実行した場合の検出結 果を示す図である。
[図 6]自動試料注入装置の主な動作を説明する図である。
[図 7]ニードルプレゥォッシュを説明する図である。
[図 8]ニードルポストゥォッシュを説明する図である。
[図 9]ポストインジェクションゥォッシュを説明する図である。
[図 10]ループリンスにおけるループリンスバルブの動作を説明する図であり、（a)ルー プリンスの洗浄機能を動作させない場合、及び (b)は、ループリンスの洗浄機能を動 作させる場合、を示す図である。
[図 11]ループリンスにおけるサンプルループ及びインジェクションバルブの洗浄を説 明する図である。
[図 12]直接注入方式による自動試料注入装置の構成及び動作を説明する図である [図 13]直接注入方式による自動試料注入装置を含む液体クロマトグラフィ装置に対 して行ったキャリーオーバーの評価結果を示す図であり、（a)は、試料のピークであり 、（b)は、超音波洗浄を実行した場合及び超音波洗浄を実行しない場合の検出結果 を示す図である。
[図 14]試料用ニードルの内径と洗浄液に発生する超音波の定常波との関係を説明 する図である。
[図 15]本発明における超音波洗浄に関する超音波振動子の振動周波数とキャリーォ 一バーとの関係を示す図である。
[図 16]試料用ニードルの内径と試料の保持率との関係を示す図である。
発明を実施するための最良の形態
[0048] 以下、本発明の実施の形態について図面と共に説明する。
[0049] まず、本発明の試料注入装置の構成を説明する。本発明の試料注入装置は、少な くとも、試料用容器、試料用ニードル、洗浄部、試料注入部、及びニードル移動手段 を含む。
[0050] 試料用容器には、移動する液体に注入される試料が供給され、溜められる。試料 用ニードルは、移動する液体に注入する試料を吸引及び吐出する。試料用ニードル は、例えば、シリンジに接続され、シリンジの押し引きによって試料用ニードル内の圧 力を制御することによって、試料を吐出及び吸引する。洗浄部は、少なくとも試料用 ニードルを洗浄する洗浄液が供給される。洗浄部に供給される洗浄液は、試料用二 一ドル以外、例えば、上述のインジヱクシヨンバルブ内の試料注入経路及びサンプル ループなどの洗浄に使用してもよい。また、洗浄液は、移動する液体と同じ液体であ つてもよレ、。洗浄部においては、純粋な洗浄液が連続的に供給され、試料用ニード ルなどを洗浄して汚染された洗浄液は、廃液される。試料注入部は、本発明の試料 注入装置内を移動する液体に、試料用ニードルから吐出された試料を注入する部材 である。試料注入部は、より具体的には、上述のインジェクションバルブ及びサンプ ノレノレープなどを含む。ニードル移動手段は、試料用容器、洗浄部、及び試料注入部 の間で試料用ニードルを移動させる。ニードル移動手段は、試料用容器、洗浄部、 及び試料注入部に、単独で試料用ニードルを移動させてもよい。また代わりに、ニー ドル移動手段は、試料用容器と洗浄部との間における試料用ニードルの移動と、洗 浄部と試料注入部との間における試料用ニードルの移動とで、異なる手段であっても よい。
[0051] 本発明によれば、洗浄部は、洗浄液に超音波を発生させる超音波振動子を有する と共に超音波振動子の振動によって発生した超音波を洗浄液に伝達し得る材料で 作られている。超音波振動子は、超音波振動子が、自由に振動できる場所であれば 、洗浄部における任意の場所 (例えば、洗浄部の底面）に取り付けることができる。超 音波振動子の振動は、超音波の振動を制御するデバイスによって、制御することが できる。超音波振動子の振動は、洗浄部に溜められている洗浄液に超音波を発生さ せる。超音波振動子によって発生した超音波は、コヒーレントでない疎密波であり、洗 浄部の内壁で反射され、洗浄液に浸漬された試料用ニードルの外壁の近傍におけ る洗浄液を振動させる。これにより、試料用ニードルの外壁に吸着及び残留した試料 を洗净すること力 Sできる。
[0052] 本発明の試料注入装置では、試料用ニードル自体に（直接に又は振動を伝達しう る部材を介して)超音波振動子を取り付けないので、試料用ニードル自体を振動させ ない。よって、本発明においては、試料用ニードルに超音波振動子の振動による負 荷がなぐ試料用ニードルを劣化させずに (試料用ニードルの耐久性を低下させずに )、試料用ニードルの超音波による洗浄を実現することができる。また、試料用ニード ル自体が振動しないので、試料を吸引した後に試料用ニードルを超音波洗浄しても 、吸引した試料が、洗浄液の中に失われることが少なぐ移動する液体に注入する試 料の量における誤差が少ない。よって、試料を、移動する液体へ精密に注入すること 力 Sできる。さらに、試料用ニードル自体を振動させないので、試料用ニードルを介し た試料注入装置の他の部材へ振動が伝播することがなぐ試料用ニードルの振動に よる試料注入装置の振動を防止することができる。
[0053] 洗浄部は、振動緩衝部材を有することが望ましレ、。この振動緩衝部材は、超音波振 動子による振動が、試料注入装置における洗浄部の以外の部材へ伝播することを低 減させる。よって、試料注入装置における洗浄部の以外の部材に対する超音波振動 子の振動による悪影響をより低減することができる。振動緩衝部材は、例えば、ばね 及びゴムなどの弾性体である。また、超音波振動子による振動が、試料注入装置に おける洗浄部の以外の部材へ伝播しなければ、超音波振動子による振動のェネル ギーを無駄にせず、試料用ニードルの洗浄に有効に利用することができる。
[0054] 超音波振動子の振動周波数は、 20kHz以上 80kHz以下であることが好ましい。超 音波振動子の振動周波数が、 20kHz未満である場合には、洗浄部に溜められてい る洗浄液に超音波の定常波を十分に発生させるために、洗浄部に溜められている洗 浄液の容積をより大きくする必要がある。よって、洗浄部を含む試料注入装置の大き さ及び試料注入装置を含む液体クロマトグラフィ装置の大きさをより大きくしなければ ならない。一方、超音波振動子の振動周波数が、 80kHzを超える場合には、洗浄部 に溜められている洗浄液に超音波の定常波を十分に発生させるために、より大型の 特殊な超音波振動子が必要になる。よって、超音波振動子の振動周波数が、 20kH z以上 80kHz以下であることによって、洗浄部に溜められている洗浄液に超音波の 定常波をより容易に発生させることができる。また、超音波振動子の振動周波数が、 2 0kHz未満であるカ 又は 80kHzを超える場合には、キャリーオーバーを低減する効 率が若干低下する。一方、超音波振動子の振動周波数が、 20kHz以上 80kHz以 下である場合には、キャリーオーバーをより効率良く低減することができる。
[0055] また、洗浄液において超音波の振動が伝達する方向における洗浄部の大きさが、 洗浄液に発生する超音波の定常波の波長に対して小さすぎないことが重要であり、 好ましくは、超音波の振動が伝達する方向における洗浄部の大きさは、洗浄液に発 生する超音波の定常波の波長よりも大きい。この場合には、洗浄部に溜められている 洗浄液に超音波の定常波を安定して発生させることができ、試料用ニードルの外壁 に吸着及び残留した試料を効果的に除去することができる。
[0056] さらに、試料用ニードルの内径は、洗浄部に溜められている洗浄液に発生する超 音波の定常波の波長よりも著しく小さいことが好ましい。試料用ニードルの内径が、 洗浄部に溜められている洗浄液に発生する超音波の定常波の波長よりも著しく小さ レ、ときには、試料用ニードル内に保持された液体の試料に超音波の定常波が発生 せず、超音波による試料用ニードル内に保持された液体の試料の損失が無い。その 結果、超音波による試料用ニードル内に保持された液体の試料の損失無しに、試料 用ニードルの外壁に吸着及び残留した試料を除去することができる。これに対して、 試料用ニードルの内径が、洗浄部に溜められている洗浄液に発生する超音波の定 常波の波長に近くなると、試料用ニードル内に保持された液体の試料に超音波が発 生して、試料用ニードル内に保持された液体の試料の一部が失われる場合もある。
[0057] 図 14は、試料用ニードルの内径と洗浄液に発生する超音波の定常波との関係を 説明する図である。図 14に示すように、例えば、超音波振動子 21の振動周波数が、 20kHz以上 80kHz以下であるときには、試料用ニードル 10の内径 Aは、 0. 1mm以 上 0. 8mm以下であることが好ましレ、。試料用ニードル 10の内径 A力 0. 8mm以下 であるときには、試料用ニードル 10の内径 Aは、洗浄部に溜められている洗浄液 31 に発生する超音波の定常波 32の波長 Bよりも小さい。よって、超音波による試料用二 一ドル 10内に保持された液体の試料 30の損失無しに、試料用ニードル 10の外壁に 吸着及び残留した試料を除去することができる。一方、超音波振動子 21の振動周波 数力 20kHz以上 80kHz以下であり、試料用ニードル 10の内径 A力 0. 8mmを超 えるときには、試料用ニードル 10内に保持された液体の試料 30の一部が失われる 場合もある。また、試料用ニードル 10の内径 Aが、超音波振動子 21の振動周波数に よらず、 0· 1mm以上であるときには、移動する液体に注入するのに十分な量の試料 を試料用ニードル 10内に採取することができる。一方、試料用ニードル 10の内径 A 1S 0. 1mmよりも小さいときには、試料用ニードル 10内に採取することができる試料 の量が少なすぎ、また、試料の粘度等により、試料用ニードル 10内に試料を採取す ることが困難である場合もある。
[0058] なお、本発明の試料注入装置における上記の動作は、全て自動で行うこと、すなわ ち自動試料注入装置であることが好ましい。
[0059] ここで、本発明による自動試料注入装置の具体例を図 1と共に説明する。 自動試料 注入装置は、試料用ニードル 10、シリンジ 11、洗浄液用ポンプ 12、バルブ 13、試料 用容器 14、インジェクションバルブ 15、サンプルループ 16、洗浄部 17、洗浄液用容 器 18、洗浄液ポート 24、及び図示してないニードル移動手段を有する。図 1の自動 試料注入装置において、試料用ニードル 10は、シリンジ 11に接続されており、シリン ジ 11の押し引きによって、試料用ニードル 10は、試料用容器 14に供給された試料 を吸引及び吐出することができる。また、洗浄液用容器 18に貯蔵されている洗浄液 は、洗浄液用ポンプ 12によつて洗浄部 17又は試料用ニードル 10に連続的に送出さ れる。ここで、試料用ニードル 10及びシリンジ 11の間には、バルブ 13が設けられて おり、このバルブ 13を切り替えることによって、洗浄液用容器 18から送出される洗浄 液を、洗浄部 17又は試料用ニードル 10へ供給することができる。洗浄部 17には、洗 浄液が連続的に供給され、一定量以上の洗浄液は、廃液として洗浄部 17から排出 される。洗浄部 17は、超音波振動子が取り付けられており、また、振動用緩衝部材と しての振動用緩衝パネを介して自動試料注入装置の底面に固定されている。インジ ェクシヨンバルブ 15は、試料用ニードル 10が揷入されると共に試料用ニードル 10か ら試料又は洗浄液を注入するためのインジヱクシヨンポート 19を有し、及びサンプル ループ 16が接続されている。また、インジヱクシヨンバルブ 15には、 自動試料注入装 置の外部から液体が供給され、 自動試料注入装置の外部へこの液体を送出する。よ り具体的には、 自動試料注入装置が、液体クロマトグラフィ装置において使用される 場合には、 自動試料注入装置の外部に設けられたポンプによって移動相としての溶 媒が供給され、この溶媒を分離用カラムに送出する。さらに、一つ又は複数の洗浄液 ポート 24 (図 1においては三個の洗浄液ポート 24)を自動試料注入装置内に設けて もよい（この場合には、上述した自己洗浄機能の一つであるポストインジェクションゥォ ッシュを実行することが可能になる）。
[0060] ここで、液体クロマトグラフィ装置において使用される場合におけるインジェクション バルブの動作を、図 2を用いて詳細に説明する。インジェクションバルブ 15は、六個 のポートを有し、これら六個のポートは、実線 A又は点線 Bのいずれかの組み合わせ で接続される。インジヱクシヨンバルブ 15は、これら実線 A又は点線 Bで示される接続 を切り替えることができる。なお、以下の説明で、洗浄液は、移動相としての溶媒と同 じものとする。
[0061] インジェクションバルブ 15における六個のポートが、実線 Aによって示されるように 接続される場合には、外部のポンプから供給される移動相としての溶媒は、分離用力 ラムへ送出される。一方、試料が、試料用ニードルによってインジヱクシヨンポート 19 に供給されるときには、その供給された試料は、サンプルノレープ 16内に保持される。 なお、サンプルノレープ 16の長さは、試料用ニードルによって供給され得る最大の量 の試料を保持できるように設計されている。試料用ニードルによって試料が供給され る代わりに、洗浄液が供給されるときには、洗浄液が、試料用ニードルから連続的に 供給され、サンプルノレープ 16を通じて廃液ポートへ排出される。すなわち、サンプノレ ループ 16内を洗浄液で洗浄することができる。
[0062] インジヱクシヨンバルブ 15における六個のポートの接続を、点線 Bによって示される ように切り替えると、 自動試料注入装置の外部から供給される移動相としての溶媒は 、サンプルループ 16を通過し、分離用カラムへ送出される。このとき、サンプルルー プ 16内に試料が保持されていれば、サンプルループ 16を通過する移動相としての 溶媒と共に分離用カラムへ送出される。このようにして、分離用カラムで試料の成分 を分離し、それら成分を検出器で検出することができる。一方、インジェクションポート 19には、試料用ニードルを介して洗浄液が供給される。これにより、インジヱクシヨン ポート 19から廃液ポートまでの流路を洗浄することができる。
[0063] 上述した六個のポートの接続を A及び Bの間で切り替えることにより、洗浄液が、移 動相としての溶媒と同じであるので、六個のポート間を接続する全ての流路を、洗浄 液 (移動相としての溶媒)で洗浄することができる。同時に、注入された試料を、分離 カラムへ送出して、試料の成分を分離分析することができる。
[0064] 次に、本発明の試料注入方法を説明する。まず、試料用ニードルに試料を吸引し、 試料用ニードルに試料を保持したまま、試料用ニードルを洗浄液に浸漬する。ここで
、洗浄液に超音波を発生させ、洗浄液に浸漬された試料用ニードルを洗浄する。そ の後、試料を、試料用ニードルから吐出し、移動する液体に注入する。
[0065] ここで、本発明の試料注入装置を使用する本発明の試料注入方法を図 3と共に説 明する。まず、予め洗浄された試料注入用ニードル 10を、ニードル移動手段によつ て、試料用容器 14まで移動させ、試料用容器 14に供給された試料に浸漬させる。 次に、試料用ニードル 10に接続されたシリンジ 11を引いて、試料用ニードル 10内に 試料を吸引する。試料を吸引した後、ニードル移動手段を使用して、試料用ニードル 10を、洗浄部 17まで移動させ、洗浄部に供給された洗浄液に浸漬させる。洗浄液は 、洗浄部 17を通じて流れており、洗浄部 17には、純粋な洗浄液が連続的に供給さ れる。ここで、洗浄部 17に取り付けられた超音波振動子 21を振動させて、洗浄液に 超音波を発生させる。このように洗浄液に発生させた超音波によって、洗浄液に浸漬 した試料用ニードル 10の外壁を洗浄することができる。なお、吸引した試料を試料用 ニードル 10に保持したまま、試料用ニードル 10の外壁を、上述の超音波洗浄の方 法によって洗浄しても、試料用ニードル 10自体を振動させないので、吸引した試料 の洗浄液への損失は、まったくない。また、洗浄部には、振動緩衝部材である振動緩 衝用パネ 22が取り付けられており、超音波振動子 21の振動が、試料注入装置にお ける洗浄部 17以外の部材に伝播することを低減する。試料用ニードル 10を超音波 洗浄した後は、ニードル移動手段を使用して、試料用ニードル 10を、試料注入部で あるインジェクションバルブ 15まで移動させ、インジェクションバルブ 15のインジヱク シヨンポート 19に試料用ニードル 10を揷入する。最後に、試料用ニードル 10に接続 したシリンジ 11を押して、試料用ニードル 10内に採取した試料を、インジヱクシヨンバ ルブ 15及びインジェクションバルブ 15に設けられたサンプルループ 16などを介して 、移動する液体に注入する。
[0066] 本発明の試料注入装置及び/又は試料注入方法によれば、キャリーオーバーを 十分に低減することができる。また、従来の四つの自己洗浄機能（ニードルプレゥォッ シュ、ニードルポストゥォッシュ、ポストインジェクションゥォッシュ、ループリンス）を使 用する必要がないため、試料注入装置を、簡単にすることができ、洗浄の条件を容 易に設定することができる。また、従来の四つの自己洗浄機能を使用した洗浄に対し て洗浄時間を短くすることができる。ただし、一つ又は複数の上記従来の四つの自己 洗浄機能を、必要に応じて、本発明における試料用ニードルの超音波洗浄と組み合 わせてもよい。さらに、試料用ニードノレ自体を振動させないので、試料用ニードルの 耐久性を低下させることがない。また、超音波振動子の振動による、試料用ニードル に吸引された試料の洗浄液への損失がまったくなぐ試料の注入量の誤差も少ない 。さらに、洗浄部に振動緩衝部材を設ければ、試料注入装置における洗浄部の以外 の部材に対する振動の影響をより低減することができる。
[0067] 次に、本発明の液体クロマトグラフィ装置を図 4と共に説明する。図 4に示すように、 本発明の液体クロマトグラフィ装置は、少なくとも移動相貯槽 101、試料注入装置 10 4、分離用カラム 105、及び検出器 107を有し、試料注入装置 104には、本発明の試 料注入装置が使用されている。移動相貯槽 101には、液体クロマトグラフィに使用す る移動相としての周知の液体が貯蔵されている。本発明の試料注入装置は、上述し たように、試料用ニードルを超音波により洗浄する機構を有し、移動相としての液体 に試料を注入する。分離用カラム 105は、固定相としての周知のカラム充填剤が充 填されており、移動相としての液体と共に試料注入装置 104から送出される試料の 成分を分離する。検出器 107は、分離用カラム 105によって分離された試料の成分 を検出する。ここで、移動相貯槽 101に貯蔵されている移動相としての液体を、検出 器 107まで送出するためには、移動相貯槽 101と試料注入装置 104との間に設けら れるポンプ 103などの移動相送出手段を使用する。また、ポンプ 103などの移動相 送出手段によって移動相としての液体を試料注入装置 104へ送出する前に、移動相 貯槽 101とポンプ 103などの移動相送出手段との間に設けられる周知の移動相脱気 装置 102によって、移動相としての液体に含まれる空気を脱気することが好ましい。さ らに、分離用カラム 105による理論段数などの分離の性能を一定に保っためには、 分離用カラム 105の温度を一定に保っための周知のカラム恒温槽 106を、分離用力 ラム 105に設けることが望ましい。
[0068] 本発明の液体クロマトグラフィ装置における試料注入装置として、直接注入方式に よる自動試料注入装置を用いることもできる。ここで、直接注入方式による自動試料 注入装置の構成及び動作を図 12と共に説明する。
[0069] 直接注入方式による自動試料注入装置は、試料用ニードル 10、シリンジ 11、洗浄 液用ポンプ 12、バルブ 13、試料用容器 14、インジェクションバルブ 15、配管 25、洗 浄部 17及び 17'、及び図示してないニードル移動手段を有する。図 12に示す直接 注入方式による自動試料注入装置においては、試料用ニードル 10は、インジェクシ ヨンバルブ 15における二つのポートを結ぶ配管 25の一部を構成している。試料用二 ードノレ 10は、配管 25内を移動相としての溶媒が流れるときには、配管 25と結合して 、移動相としての溶媒が流れる流路を形成する。一方、試料用ニードル 10を用いて 試料用容器 14に入れられた試料を採取するとき、及び試料用ニードルを洗浄部 17 及び/又は 17'に供給された洗浄液で洗浄するときには、試料用ニードル 10は、配 管 25から分離して、ニードル移動手段を使用して、それぞれ、試料用容器 14、洗浄 部 17及び/又は 17'まで移動する。また、シリンジ 11は、インジェクションバルブ 15 における一つのポートに接続されており、インジェクションバルブ 15におけるポート間 の接続を切り替えることによって、試料用ニードル 10と接続させることができる。シリン ジ 11が試料用ニードル 10と接続しているときには、シリンジ 11の押し引きによって、 試料用ニードル 10は、試料用容器 14に供給された試料を吸引及び吐出することが できる。また、洗浄液用ポンプ 12は、洗浄液用容器に貯蔵されている洗浄液を洗浄 部 17又は 17'に連続的に送出する。ここで、インジェクションバルブ 15及びシリンジ 1 1の間には、バルブ 13が設けられており、このバルブ 13を切り替えることによって、洗 浄液用容器から送出される洗浄液を、洗浄部 17又は 17'へ供給することができる。 すなわち、バルブ 13を切り替えることによって、インジェクションバルブ 15を洗浄液用 ポンプ 12と接続させると、洗浄液は、洗浄部 17と接続されたインジヱクシヨンバルブ 1 5のポートを通じて、洗浄部 17へ供給される。また、バルブ 13を切り替えることによつ て、洗浄部 17 'を洗浄液用ポンプ 12と接続させると、洗浄液は、洗浄部 17'へ供給さ れる。洗浄部 17又は 17'には、洗浄液が連続的に供給され、一定量以上の洗浄液 は、廃液として洗浄部 17又は 17'から廃液ポート 23を通じて排出される。また、洗浄 部 17の近傍には、超音波振動子 21が取り付けられている。この超音波振動子 21を 振動させることによって、洗浄部 17に供給された洗浄液に超音波を発生させることが できる。また、インジェクションバルブ 15には、 自動試料注入装置の外部に設けられ たポンプ 103によって移動相としての溶媒が供給され、この溶媒を分離用カラム 105 に送出する。
[0070] 次に、直接注入方式による自動試料注入装置の動作を、図 12を用いて詳細に説 明する。
[0071] 直接注入方式による自動試料注入装置においてもインジェクションバルブ 15は、 六個のポートを有し、これら六個のポートは、実線 A又は点線 Bのいずれかの組み合 わせで接続される。インジヱクシヨンバルブ 15は、これら実線 A又は点線 Bで示される 接続を切り替えることができる。なお、以下の説明で、洗浄液は、移動相としての溶媒 と同じものとする。 [0072] まず、インジェクションバルブ 15における六個のポートを、実線 Aによって示される ように接続させる。この場合には、試料用ニードル 10は、配管 25と一体に結合してい る。そして、外部のポンプ 103から供給される移動相としての溶媒は、試料用ニード ル 10及び配管 25がー体に結合することで形成された流路を通じて、分離用カラム 1 05へ送出される。ここで、バルブ 13の三つのポートは、図 12の C1に示すように、互 いに接続されていない。
[0073] 次に、インジェクションバルブ 15における六個のポートの接続を、点線 Bによって示 されるように切り替える。このとき、外部のポンプ 103から供給される移動相としての溶 媒は、試料用ニードル 10及び配管 25を通過せずに、分離用カラム 105へ送出され る。よって、試料用ニードル 10を配管 25から分離して、試料用ニードル 10によって 試料を採取すること、及び試料用ニードルを洗浄することが可能となる。
[0074] まず、試料用ニードル 10を用いて試料用容器 14に供給された試料を採取するとき には、試料用ニードル 10は、ニードル移動手段を使用して、試料用容器 14が置か れた位置まで移動し、試料用ニードル 10の先端部分が試料に浸漬される。ここで、 試料用ニードル 10及びシリンジ 11は、インジェクションバルブ 15を介して接続されて いるので、シリンジ 11を引くことによって、試料用ニードル 10に適量の試料を採取す ること力 Sできる。
[0075] 次に、試料用ニードルを洗浄するときには、試料を採取した試料用ニードル 10を、 シリンジ 11を押し引きすることなぐ引き続きニードル移動手段を使用して、洗浄部 1 7及び/又は 17'まで移動させる。そして、試料用ニードル 10の先端部分を、洗浄部 17及び/又は 17'に浸漬させる。試料用ニードル 10を洗浄部 17へ移動させ、試料 用ニードル 10の先端部分を洗浄部 17へ浸漬させる際には、洗浄部 17の近傍に取り 付けられた超音波振動子 21を振動させて、洗浄部 17内の洗浄液に超音波を発生さ せる。このようにして、洗浄部 17の洗浄液に発生した超音波で試料用ニードル 10の 先端部分の外側表面を効果的に洗浄することができる。なお、試料用ニードル 10に 保持された試料は、洗浄液に超音波を発生させても、試料用ニードル 10自体を振動 させないので、採取した試料の洗浄液への損失は、まったくない。そして、試料用二 一ドル 10の超音波洗浄によって生じた廃液は、廃液ポート 23を通じて外部へ廃棄さ れる。一方、試料用ニードル 10を洗浄部 17'へ移動させ、洗浄部 17'へ浸漬させて 、試料用ニードル 10のニードルプレゥォッシュを行なう場合には、ノくルブ 13を、図 12 の C3に示す状態にして、洗浄液用ポンプ 12と洗浄部 17'を接続させ、洗浄液を洗 浄部 17'に連続的に供給する。これにより、洗浄部 17'に連続的に供給された洗浄 液で試料用ニードル 10の先端部分の外側表面を洗浄することができる。そして、試 料用ニードル 10の洗浄によって生じた廃液は、廃液ポート 23を通じて外部へ廃棄さ れる。
次に、シリンジを押し引きすることなぐニードル移動手段を使用して、試料用ニード ノレ 10を配管 25まで移動させ、試料用ニードル 10を配管 25と結合させる。このように して外部のポンプ 103から供給される移動相としての溶媒の流路が形成される。ここ で、シリンジを押すことによって、試料用ニードル内に採取された試料を、配管 25内 に注入する。採取された試料を配管 25内に注入した後、インジヱクシヨンバルブ 15 における六個のポートの接続を、点線 Aによって示されるように切り替える。これにより 、外部のポンプ 103から供給される移動相としての溶媒力 配管 25内を流れ、配管 2 5に注入された試料と共に分離用カラム 105に供給される。そして、移動相としての 溶媒と共に分離用カラム 105に供給された試料の成分が、分離用カラム 105で分離 され、それらの成分を検出器で検出することができる。同時に、バルブ 13を、図 12に 示す C2又は C3の状態にして、洗浄液用ポンプ 12と洗浄部 17又は 17'を接続させ て、洗浄部 17又は 17'における洗浄液を交換することができる。すなわち、バルブ 1 3を、図 12に示す C2の状態にすると、洗浄液用ポンプ 12と洗浄部 17が接続されて、 一定量の洗浄液が洗浄部 17に供給される。その結果、試料用ニードル 10を超音波 洗浄した後に残留する洗浄部 17の洗浄液は、廃液ポート 23を通じて外部に廃棄さ れ、洗浄部 17には洗浄液用ポンプによって供給された新たな洗浄液が供給される。 同様に、バルブ 13を、図 12に示す C3の状態にすると、洗浄液用ポンプ 12と洗浄部 17'が接続されて、一定量の洗浄液が洗浄部 17'に供給される。その結果、試料用 ニードノレ 10にニードルプレゥォッシュを適用した後に残留する洗浄部 17 'の洗浄液 は、廃液ポート 23を通じて外部に廃棄され、洗浄部 17'には洗浄液用ポンプによつ て供給された新たな洗浄液が供給される。 実施例 1
[0077] 本発明の液体クロマトグラフィ装置に対して行ったキャリーオーバーの評価の結果 を図 5と共に説明する。
[0078] 図 1乃至図 3に示すような自動試料注入装置を設けた図 4に示すような液体クロマト グラフィ装置を用いてキャリーオーバーに関する評価を行った。液体クロマトグラフィ の移動相の溶媒として、 lOOmMの NaClO及び lOmMの NH H PO (pH2. 6) /
4 4 2 4
CH CNの混合溶媒 (体積比 55 : 45)を用いた。また、移動相の溶媒の流速は、 0. 2
3
ml/分であった。なお、洗浄液にも、移動相の溶媒と同じ組成の混合溶媒を使用し た。分離用カラム 105は、内径 2mm X長さ 150mmのカラムを使用し、カラム恒温槽 106を用いて分離用カラム 105の温度を 40°Cに保った。液体クロマトグラフィの固定 相としてのカラム充填剤には、粒子径 5ミクロンのォクタデシノレ化シリカゲルを用いた 。キャリーオーバーを評価するための試料として、キャリーオーバーが起こり易い、 [0079] [化 1]
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によって表される、塩基性かつ疎水性のクロ口へキシジンを用いた。このクロ口へキシ ジンを検出するための検出器 107として、波長 260nmの紫外線を用いた吸光光度 検出器を使用した。
[0080] まず、本発明における超音波洗浄によって、移動相への試料の注入量が変化しな レ、ことを確認した。試料として 2 μ 1の 12ppmのクロ口へキシジンを、試料用ニードル 1 0で採取し、次に、試料用ニードル 10を洗浄部に浸漬させると同時に試料用ニード ル 10の外壁を超音波洗浄し、その後、採取した試料を、移動相に注入した。ここで、 試料用ニードル 1 oを超音波洗浄したときに検出された試料の注入量は、試料用ニー ドル 10を超音波洗浄しないときと比較して変化しなかった。よって、本発明における 超音波洗浄では、移動相への試料の注入量が、減少しないことがわかった。
[0081] 次に、本発明の試料注入装置におけるキャリーオーバーの評価を行った。キャリー オーバーの評価結果を図 5に示す。まず、試料として、 2 1の高濃度 1200ppmのク ロロへキシジンを試料用ニードルに採取して移動相へ注入し、クロ口へキシジンによ るピークを検出した。次に、 2 のクロ口へキシジンを含有しない移動相と同じ溶媒（ 以下、ブランク試料と呼ぶ）を注入して、残留するクロ口ヘシジン (キャリーオーバー） の有無を観察した。この際に、以下の（1)、 （2)及び（3)に示す洗浄を行った。
[0082] (1) 2 μ 1の高濃度 1200ppmのクロ口へキシジンを試料用ニードルに採取した後、 ニードルプレゥォッシュを実行してから、採取した試料を移動相へ注入した。その後、 試料用ニードルに、ニードルポストゥォッシュを適用した後、ブランク試料を採取して、 移動相へ注入した。
[0083] (2) 2 μ 1の高濃度 1200ppmのクロ口へキシジンを試料用ニードルに採取した後、 ニードルプレゥォッシュを実行してから、採取した試料を移動相へ注入した。その後、 試料用ニードルに、ニードルポストゥォッシュ、ポストインジェクションゥォッシュ、及び ループリンスを適用した後、ブランク試料を採取して、移動相へ注入した。
[0084] (3) 2 μ 1の高濃度 1200ppmのクロ口へキシジンを試料用ニードルに採取した後、 本発明における超音波洗浄を実行してから、採取した試料を移動相へ注入した。そ の後、試料用ニードルを洗浄せずに、ブランク試料を採取して、移動相へ注入した。
[0085] 2 / lの高濃度 1200ppmのクロ口へキシジンを移動相へ注入した際に、検出された クロ口へキシジンのピークを図 5 (a)に示す。また、上述の（1)ニードルプレゥォッシュ 及びニードルポストゥォッシュを実行した場合、（2)上述した四つの自己洗浄機能の 全てを実行した場合、及び（3)本発明における超音波洗浄のみを実行した場合にお ける、ブランク試料注入後のキャリーオーバー（残留するクロ口へキシジン）の測定結 果を、それぞれ図 5 (b)、（c)及び (d)に示す。なお、図 5 (a)乃至（d)において、横軸 は、相対的な検出時刻であり、縦軸は、クロ口へキシジンの濃度に比例する吸光度で める。 [0086] ここで、キャリーオーバーがなければ、残留するクロ口へキシジンのピークは、測定 されないはずである。図 5 (b)に示すように、従来のニードルプレゥォッシュ及びニー ドルポストゥォッシュを実行した場合には、残留するクロ口へキシジン、すなわちキヤリ 一オーバーが、検出された。この検出された残留クロ口へキシジンは、試料用ニード ルにニードルプレゥォッシュを長時間（5秒以上)適用しても、除去されなかった。次に 、図 5 (c)に示すように、従来の四つの自己洗浄機能の全てを実行した場合には、残 留するクロ口へキシジンが検出されず、キャリーオーバーを除去することができたが、 四つの自己洗浄機能の全てを実行するために、 3. 9分の洗浄時間を要した。最後に 、図 5 (d)に示すように、本発明における超音波洗浄のみを実行した場合には、残留 するクロ口へキシジンが検出されず、キャリーオーバーを除去することができると共に
、超音波洗浄による洗浄時間は、 20秒であった。
[0087] 以上の結果より、本発明の液体クロマトフラフィ装置において、本発明における試料 用ニードルの超音波洗浄を行うことによって、四つの自己洗浄機能をすベて実行し た場合と同程度までキャリーオーバーを低減させることができ、洗浄時間を短縮する ことができた。また、試料用ニードルの外壁を超音波洗浄するだけでもよいため、洗 浄工程を簡略化することができる。
実施例 2
[0088] 直接注入方式による自動試料注入装置を含む液体クロマトグラフィ装置に対して行 つたキャリーオーバーの評価の結果を図 13と共に説明する。
[0089] 図 12に示すような直接注入方式による自動試料注入装置を設けた図 4に示すよう な液体クロマトグラフィ装置を用いて、実施例 1と同様に、キャリーオーバーに関する 評価を行った。
[0090] すなわち、液体クロマトグラフィの移動相の溶媒として、 lOOmMの NaCIO及び 10
4 mMの NH H PO (pH2. 6) /CH CNの混合溶媒（体積比 55： 45)を用いた。また
4 2 4 3
、移動相の溶媒の流速は、 0. 2ml/分であった。洗浄液にも、移動相の溶媒と同じ 組成の混合溶媒を使用した。分離用カラム 105は、内径 2mm X長さ 150mmのカラ ムを使用し、カラム恒温槽 106を用いて分離用カラム 105の温度を 40°Cに保った。 液体クロマトグラフィの固定相としてのカラム充填剤には、粒子径 5ミクロンのオタタデ シル化シリカゲルを用いた。キャリーオーバーを評価するための試料としてクロ口へキ シジンを用いた。このクロ口へキシジンを検出するための検出器 107として、波長 260 nmの紫外線を用いた吸光光度検出器を使用した。
[0091] キャリーオーバーの評価結果を図 13に示す。まず、試料として、 2 μ ΐの高濃度 120 Oppmのクロ口へキシジンを試料用ニードルに採取して移動相へ注入し、クロ口へキ シジンによるピークを検出した。次に、 2 1のクロ口へキシジンを含有しない移動相と 同じ溶媒（以下、ブランク試料と呼ぶ）を注入して、残留するクロ口ヘシジン (キャリー オーバー）の有無を観察した。
[0092] この際に、以下の（1)及び（2)に示す洗浄を行った。
[0093] (1) 2 μ 1の高濃度 1200ppmのクロ口へキシジンを試料用ニードルに採取した後、 本発明における超音波洗浄のみを実行してから、採取した試料を移動相へ注入した 。その後、試料用ニードルを洗浄せずに、ブランク試料を採取して、移動相へ注入し た。
[0094] (2) 2 μ 1の高濃度 1200ppmのクロ口へキシジンを試料用ニードルに採取した後、 ニードルプレゥォッシュのみを実行してから、採取した試料を移動相へ注入した。試 料用ニードルを洗浄せずに、ブランク試料を採取して、移動相へ注入した。
[0095] 2 / lの高濃度 1200ppmのクロ口へキシジンを移動相へ注入した際に、検出された クロ口へキシジンのピークを図 13 (a)に示す。また、上述の（1)本発明における超音 波洗浄のみを実行した場合、及び（2)ニードルプレゥォッシュのみを実行した場合に おける、ブランク試料注入後のキャリーオーバー（残留するクロ口へキシジン）の測定 結果を、それぞれ図 13 (b)の P1及び P2に示す。なお、図 13 (a)及び (b)において、 横軸は、相対的な検出時間（分）であり、縦軸は、クロ口へキシジンの濃度に比例する 吸光度である。
[0096] 図 13 (b)の P2に示すように、従来のニードルプレゥォッシュのみを実行した場合に は、残留するクロ口へキシジン、すなわちキャリーオーバー力 検出された。一方、図 13 (b)の P1に示すように、本発明による超音波洗浄のみを実行した場合には、残留 するクロ口へキシジンが検出されず、キャリーオーバーを除去することができた。
[0097] 以上の結果より、直接注入方式による自動試料注入装置を有する液体 ί フィ装置においてもまた、本発明における試料用ニードルの超音波洗浄を行うことに よって、キャリーオーバーを十分に低減させることができた。
[0098] さらに、本実施例 2の（1)に示す本発明における超音波洗浄に関して、試料注入装 置の洗浄部に設けた超音波振動子の振動周波数を変動させて、キャリーオーバー の評価を行った。図 15は、本実施例 2の（1)に示す本発明における超音波洗浄に関 する超音波振動子の振動周波数とキャリーオーバーとの関係を示す。なお、図 15に おける横軸は、試料注入装置の洗浄部に設けた超音波振動子の振動周波数 (kHz) を示し、縦軸は、キャリーオーバー、すなわち、移動相に注入した高濃度 1200ppm のクロ口へキシジンの注入量 2 μ 1に対する移動相へブランク試料を注入した後に検 出されたクロ口へキシジンの量の百分率（％)を示す。よって、キャリーオーバー（％) の値が、小さレ、ほど、ブランク試料を注入した後に検出されたクロ口へキシジンの量が 少なぐキャリーオーバーが効率的に低減されることになる。超音波振動子の振動周 波数は、それぞれ、 10kHz、 20kHz, 30kHz, 40kHz, 50kHz, 60kHz, 70kHz 、 80kHz, 90kHz, 100kHz,及び 120kHziこ設定した。また、超音波振動子【こよる 振動の出力は、 50Wとした。超音波振動子の振動周波数に対するキャリーオーバー の変動の結果を図 15に示す。図 15に示すように、本実施例 2の（1)に示す本発明に おける超音波洗浄に関して、超音波振動子の振動周波数が、 20kHz以上 80kHz以 下である場合に、キャリーオーバーが小さぐ超音波振動子の振動周波数が、 20kH z未満である力、又は 80kHzを超える場合には、キャリーオーバーが若干大きくなる ことが確認された。すなわち、超音波振動子の振動周波数が、 20kHz以上 80kHz 以下である場合に、キャリーオーバーをより効率良く低減させることができる。
[0099] さらに、本実施例 2の（1)に示す本発明における超音波洗浄に関して、高濃度 120 Oppmのクロ口へキシジンの代わりに濃度 60ppmのクロ口へキシジン（標準試料）を用 レ、、試料用ニードルの内径を変動させて、超音波による試料用ニードル内に保持さ れた標準試料の損失に関する評価を行った。図 16は、試料用ニードルの内径と試 料の保持率との関係を示す。なお、図 16における横軸は、試料用ニードルの内径（ mm)を示し、縦軸は、試料用ニードルに保持された標準試料の保持率（％)、すなわ ち、洗浄部の洗浄液に超音波を発生させなレ、場合における試料用ニードルに保持さ れた標準試料の容量に対する洗浄部の洗浄液に超音波を発生させた場合における 試料用ニードルに保持された標準試料の容量の比を示す。よって、試料用ニードノレ に保持された標準試料の保持率（％)は高いほど、超音波による試料用ニードル内 に保持された標準試料の損失が少ないことになる。試料用ニードルの内径は、それ ぞれ、 0. 18mm, 0. 42mm, 0. 50mm, 0. 80mm,及び 1. 00mmであった。また 、超音波振動子の振動周波数は、 80kHzであった。図 16に示すように、試料用ニー ドルの内径が、 0. 80mm以下である場合には、試料用ニードルに保持された標準試 料の保持率は、概略 100%であり、超音波による試料用ニードル内に保持された標 準試料の損失は無かった。一方、試料用ニードルの内径力 0. 80mmよりも大きい（ 1. 00mmである）場合には、超音波による試料用ニードル内に保持された標準試料 の一部が損失し、試料用ニードルに保持された標準試料の保持率は、 65%であった
[0100] 以上、本発明の実施の形態及び実施例を具体的に説明してきたが、本発明は、こ れらの実施の形態及び実施例に限定されるものではなぐこれら本発明の実施の形 態及び実施例を、本発明の主旨及び範囲を逸脱することなぐ変更又は変形するこ とができる。
産業上の利用可能性
[0101] 本発明は、キャリーオーバーを十分に低減することができ、簡便で洗浄時間が短い 洗浄手段を有し、洗浄手段による振動の影響が少なぐ試料の注入量の誤差が少な ぐ試料用ニードルの耐久性を低下させない、試料注入装置及び試料注入方法、並 びに該試料注入装置を有する液体クロマトグラフィ装置に適用することができる。

Claims

請求の範囲
[1] 試料が供給される試料用容器、
前記試料を吸引及び吐出する試料用ニードル、
少なくとも前記試料用ニードルを洗浄する洗浄液が供給される洗浄部、 前記試料用ニードルから吐出される前記試料を、移動する液体に注入する試料注 入部、並びに
前記試料用容器、前記洗浄部、及び前記試料注入部の間で前記試料用ニードル を移動させるニードル移動手段
を有する試料注入装置にぉレ、て、
前記洗浄部は、前記洗浄液に超音波を発生させる超音波振動子を有することを特 徴とする試料注入装置。
[2] 前記洗浄部は、前記超音波振動子による振動が、前記試料注入装置における前 記洗浄部の以外の部材へ伝播することを低減させる、振動緩衝部材を有することを 特徴とする請求項 1記載の試料注入装置。
[3] 前記超音波振動子の振動周波数は、 20kHz以上 80kHz以下であることを特徴と する請求項 1記載の試料注入装置。
[4] 前記試料用ニードルの内径は、 0. 1mm以上 0. 8mm以下であることを特徴とする 請求項 3記載の試料注入装置。
[5] 試料用ニードルに試料を吸引するステップ、
前記試料用ニードルに前記試料を保持すると共に、前記試料用ニードルを洗浄液 に浸漬するステップ、
前記洗浄液に超音波を発生させ、前記洗浄液に浸漬された前記試料用ニードルを 洗浄するステップ、及び
前記試料を、前記試料用ニードルから吐出し、移動する液体に注入するステップを 有することを特徴とする試料注入方法。
[6] 前記超音波振動子の振動周波数は、 20kHz以上 80kHz以下であることを特徴と する請求項 5記載の試料注入方法。
[7] 前記試料用ニードルの内径は、 0. 1mm以上 0. 8mm以下であることを特徴とする 請求項 6記載の試料注入方法。
[8] 移動相としての液体が貯蔵される移動相貯槽、
前記移動相としての液体に試料を注入する試料注入装置、
前記移動相としての液体と共に前記試料注入装置から送出される前記試料の成分 を分離する分離用カラム、及び
前記分離用カラムによって分離された前記試料の成分を検出する検出器 を有する液体クロマトグラフィ装置において、
前記試料注入装置は、前記試料が供給される試料用容器、前記試料を吸引及び 吐出する試料用ニードル、少なくとも前記試料用ニードルを洗浄する洗浄液が供給 される洗浄部、前記試料用ニードルから吐出される前記試料を前記移動相としての 液体に注入する試料注入部、並びに前記試料用容器、前記洗浄部、及び前記試料 注入部の間で前記試料用ニードルを移動させるニードル移動手段を有し、
前記洗浄部は、前記洗浄液に超音波を発生させる超音波振動子を有することを特 徴とする液体クロマトグラフィ装置。
[9] 前記洗浄部は、前記超音波振動子による振動が、前記試料注入装置における前 記洗浄部の以外の部材へ伝播することを低減させる、振動緩衝部材を有することを 特徴とする請求項 8記載の液体クロマトグラフィ装置。
[10] 前記超音波振動子の振動周波数は、 20kHz以上 80kHz以下であることを特徴と する請求項 8記載の液体クロマトグラフィ装置。
[11] 前記試料用ニードルの内径は、 0. 1mm以上 0. 8mm以下であることを特徴とする 請求項 10記載の液体クロマトグラフィ装置。
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EP04733102.0A EP1624301B1 (en) 2003-05-15 2004-05-14 Sample injection method for liquid chromatography
KR1020057021644A KR101100094B1 (ko) 2003-05-15 2004-05-14 시료주입 장치 및 방법, 및 상기 시료주입 장치를 갖는액체 크로마토그래피 장치
US12/068,202 US7500386B2 (en) 2003-05-15 2008-02-04 Sample injection apparatus and liquid chromatography apparatus having the sample injection apparatus

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Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1843153A1 (en) * 2005-01-24 2007-10-10 Shiseido Company, Limited Sample injector, sample injecting method and liquid chromatography equipment
WO2007117321A2 (en) * 2005-12-08 2007-10-18 Parker-Hannifin Corporation Syringe wash station for analytical applications
JP2007309938A (ja) * 2006-05-17 2007-11-29 Amr Inc サンプルインジェクション用ニードルユニットおよびそれを用いたシリンジのサンプル吸引、洗浄装置
JP2009002672A (ja) * 2007-06-19 2009-01-08 Hitachi High-Technologies Corp クロマトグラフ装置用試料導入方法及び装置
US8057756B2 (en) 2005-01-28 2011-11-15 Parker-Hannifin Corporation Sampling probe, gripper and interface for laboratory sample management systems
US8187535B2 (en) 2004-06-14 2012-05-29 Parker-Hannifin Corporation Robotic handling system and method with independently operable detachable tools
WO2017130430A1 (ja) * 2016-01-26 2017-08-03 株式会社島津製作所 クロマトグラフ装置
JP2018048892A (ja) * 2016-09-21 2018-03-29 株式会社日立ハイテクノロジーズ 自動分析装置

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4600053B2 (ja) * 2005-01-24 2010-12-15 東ソー株式会社 クロマトグラフ分析に使用されるデータ処理装置
US7661326B2 (en) * 2006-10-26 2010-02-16 Beckman Coulter, Inc. Apparatus for aspirating and dispensing liquids in an automated analyzer
CH699313A1 (de) 2008-08-15 2010-02-15 Ctc Analytics Ag Probenaufgabevorrichtung.
JP5397269B2 (ja) * 2010-02-26 2014-01-22 株式会社島津製作所 試料導入装置
JP5471846B2 (ja) * 2010-05-31 2014-04-16 株式会社島津製作所 液体試料導入装置及び液体試料導入方法
DE102012203686B4 (de) 2012-03-08 2021-11-18 Leica Biosystems Nussloch Gmbh Eindeckautomat mit optischem Grenzfüllstandsmessgerät für eine Flüssigkeit
JP5924113B2 (ja) * 2012-05-15 2016-05-25 株式会社島津製作所 ニードル洗浄機構
KR101407536B1 (ko) * 2012-11-09 2014-06-17 주식회사 위드텍 컬럼 자동세정시스템 및 컬럼 자동세정방법
JP5789635B2 (ja) * 2013-04-26 2015-10-07 株式会社堀場製作所 全血血球免疫測定装置
JP5771236B2 (ja) * 2013-05-17 2015-08-26 株式会社堀場製作所 血液分析装置
CN104049045A (zh) * 2014-05-21 2014-09-17 江苏德峰药业有限公司 一种高粘度或高凝固点物质的气相针维护方法
EP3559678B1 (en) 2016-12-23 2022-10-26 Roche Diagnostics GmbH Method and device to wash an aspiration probe by ultrasonic vibrations
KR102174436B1 (ko) * 2017-08-17 2020-11-04 주식회사 엘지화학 불용성 안료 화합물의 정성분석방법
CN109521214A (zh) * 2017-09-20 2019-03-26 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 自动分析仪及其样本针或试剂针的工作方法、清洗室
EP3775871B1 (en) * 2018-03-29 2023-09-13 Waters Technologies Corporation Autosampler seal pack for reducing a carryover percentage
KR102285715B1 (ko) * 2019-09-27 2021-08-05 대한민국 배양액 내 무기 시료의 성분 및 농도 분석 장치 및 이를 이용한 배양액 내 무기 시료의 성분 및 농도 분석 방법
CN114544994A (zh) * 2020-11-25 2022-05-27 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 一种样本分析装置和样本分析方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01254871A (ja) * 1988-04-05 1989-10-11 Tosoh Corp 分析装置用分注ノズルの洗浄方法および分注ノズル装置
JPH08254538A (ja) * 1995-03-16 1996-10-01 Olympus Optical Co Ltd 医療用分析機の洗浄装置
JPH0921730A (ja) * 1995-07-07 1997-01-21 Olympus Optical Co Ltd 医療用分析機の分注ノズル洗浄装置
JPH11304779A (ja) * 1998-04-24 1999-11-05 Shimadzu Corp 試料導入装置

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2852417A (en) * 1954-06-17 1958-09-16 Detrex Corp Cleaning method and apparatus
US2992142A (en) * 1958-01-17 1961-07-11 Detrex Chem Ind Ultrasonic cleaning method
US2992152A (en) * 1959-09-25 1961-07-11 Chapman Ralph Method of forming a board product
US4216671A (en) * 1974-06-14 1980-08-12 Metropolitan Sanitary District Of Greater Chicago Automatic cleaning of sensing probes
US5056464A (en) * 1990-01-18 1991-10-15 Embrex, Inc. Automated injection system for avian embryos with advanced fluid delivery system
CN2133370Y (zh) 1992-05-04 1993-05-19 潘宁 磁波清洗机
US6328828B1 (en) * 1997-08-08 2001-12-11 Lester Lee Rusczyk Ultrasonic process and ultraclean product of same
JPH11230989A (ja) * 1997-12-10 1999-08-27 Mitsubishi Electric Corp プローブカード用プローブ針のクリーニング方法およびクリーニング装置とそれに用いる洗浄液
US6913934B2 (en) * 1998-08-13 2005-07-05 Symyx Technologies, Inc. Apparatus and methods for parallel processing of multiple reaction mixtures
US6759014B2 (en) * 2001-01-26 2004-07-06 Symyx Technologies, Inc. Apparatus and methods for parallel processing of multiple reaction mixtures
JP2001170538A (ja) * 1999-12-16 2001-06-26 Juki Corp 接着剤塗布装置
US7521245B1 (en) * 2000-06-05 2009-04-21 Perkinelmer Las, Inc. Method for washing and drying pins in microarray spotting instruments
JP2002228668A (ja) * 2001-01-31 2002-08-14 Shimadzu Corp オートサンプラ
US6719850B2 (en) * 2002-01-11 2004-04-13 Connoisseurs Products Corp. Sonic jewelry cleaner
JP2004325398A (ja) * 2003-04-28 2004-11-18 Hitachi Software Eng Co Ltd 連続吸入用ニードル及び連続吸入装置

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01254871A (ja) * 1988-04-05 1989-10-11 Tosoh Corp 分析装置用分注ノズルの洗浄方法および分注ノズル装置
JPH08254538A (ja) * 1995-03-16 1996-10-01 Olympus Optical Co Ltd 医療用分析機の洗浄装置
JPH0921730A (ja) * 1995-07-07 1997-01-21 Olympus Optical Co Ltd 医療用分析機の分注ノズル洗浄装置
JPH11304779A (ja) * 1998-04-24 1999-11-05 Shimadzu Corp 試料導入装置

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP1624301A4 *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8187535B2 (en) 2004-06-14 2012-05-29 Parker-Hannifin Corporation Robotic handling system and method with independently operable detachable tools
EP1843153A1 (en) * 2005-01-24 2007-10-10 Shiseido Company, Limited Sample injector, sample injecting method and liquid chromatography equipment
EP1843153A4 (en) * 2005-01-24 2009-09-02 Shiseido Co Ltd SAMPLE INJECTOR, SAMPLE INJECTION METHOD AND DEVICE FOR LIQUID CHROMATOGRAPHY
US8057756B2 (en) 2005-01-28 2011-11-15 Parker-Hannifin Corporation Sampling probe, gripper and interface for laboratory sample management systems
WO2007117321A2 (en) * 2005-12-08 2007-10-18 Parker-Hannifin Corporation Syringe wash station for analytical applications
WO2007117321A3 (en) * 2005-12-08 2008-03-27 Parker Hannifin Corp Syringe wash station for analytical applications
JP2007309938A (ja) * 2006-05-17 2007-11-29 Amr Inc サンプルインジェクション用ニードルユニットおよびそれを用いたシリンジのサンプル吸引、洗浄装置
JP4522432B2 (ja) * 2006-05-17 2010-08-11 エーエムアール株式会社 サンプルインジェクション用ニードルユニットおよびそれを用いたシリンジのサンプル吸引、洗浄装置
JP2009002672A (ja) * 2007-06-19 2009-01-08 Hitachi High-Technologies Corp クロマトグラフ装置用試料導入方法及び装置
WO2017130430A1 (ja) * 2016-01-26 2017-08-03 株式会社島津製作所 クロマトグラフ装置
JP2018048892A (ja) * 2016-09-21 2018-03-29 株式会社日立ハイテクノロジーズ 自動分析装置

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