UA54400C2 - Твердий пристрій для проведення мультианалітних аналізів, спосіб його формування і система, що включає такий пристрій - Google Patents
Твердий пристрій для проведення мультианалітних аналізів, спосіб його формування і система, що включає такий пристрій Download PDFInfo
- Publication number
- UA54400C2 UA54400C2 UA98041977A UA98041977A UA54400C2 UA 54400 C2 UA54400 C2 UA 54400C2 UA 98041977 A UA98041977 A UA 98041977A UA 98041977 A UA98041977 A UA 98041977A UA 54400 C2 UA54400 C2 UA 54400C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- substrate
- areas
- ligands
- reaction sites
- analyte
- Prior art date
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title abstract description 14
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 117
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims abstract description 66
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 44
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 9
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims description 38
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 34
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims description 30
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 28
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 28
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 24
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 24
- 150000001282 organosilanes Chemical class 0.000 claims description 22
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 14
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 14
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 claims description 11
- 229910010293 ceramic material Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- 239000004816 latex Substances 0.000 claims description 10
- 229920000126 latex Polymers 0.000 claims description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 9
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 8
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 8
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 7
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 7
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 6
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 claims description 6
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 6
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 6
- 238000013519 translation Methods 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 4
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 3
- 239000010453 quartz Substances 0.000 claims description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 2
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 claims 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 claims 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 abstract description 8
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 22
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 17
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 15
- -1 aryl azides Chemical class 0.000 description 13
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- NVBFHJWHLNUMCV-UHFFFAOYSA-N sulfamide Chemical compound NS(N)(=O)=O NVBFHJWHLNUMCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 9
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 8
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 7
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 6
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 6
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 6
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 6
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 5
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 5
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 5
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000012965 benzophenone Substances 0.000 description 4
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 4
- 229920002120 photoresistant polymer Polymers 0.000 description 4
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 4
- 235000011330 Armoracia rusticana Nutrition 0.000 description 3
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 3
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 3
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- RWCCWEUUXYIKHB-UHFFFAOYSA-N benzophenone Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)C1=CC=CC=C1 RWCCWEUUXYIKHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical group O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N urea hydrogen peroxide Chemical compound OO.NC(N)=O AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CQQSQBRPAJSTFB-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(CBr)C=C1 CQQSQBRPAJSTFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GOUHYARYYWKXHS-UHFFFAOYSA-N 4-formylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(C=O)C=C1 GOUHYARYYWKXHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 2
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 2
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 2
- 238000005411 Van der Waals force Methods 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 2
- 239000003263 anabolic agent Substances 0.000 description 2
- 229940070021 anabolic steroids Drugs 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 2
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000000206 photolithography Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960000973 sulfadimethoxine Drugs 0.000 description 2
- ZZORFUFYDOWNEF-UHFFFAOYSA-N sulfadimethoxine Chemical compound COC1=NC(OC)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 ZZORFUFYDOWNEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002597 sulfamerazine Drugs 0.000 description 2
- QPPBRPIAZZHUNT-UHFFFAOYSA-N sulfamerazine Chemical compound CC1=CC=NC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 QPPBRPIAZZHUNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- 229940040944 tetracyclines Drugs 0.000 description 2
- 238000012876 topography Methods 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBKHNGHPZZZJCI-UHFFFAOYSA-N (4-aminophenyl)-phenylmethanone Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C(=O)C1=CC=CC=C1 RBKHNGHPZZZJCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GFNDFCFPJQPVQL-UHFFFAOYSA-N 1,12-diisocyanatododecane Chemical compound O=C=NCCCCCCCCCCCCN=C=O GFNDFCFPJQPVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SWJPEBQEEAHIGZ-UHFFFAOYSA-N 1,4-dibromobenzene Chemical compound BrC1=CC=C(Br)C=C1 SWJPEBQEEAHIGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFMWZTSOMGDDJU-UHFFFAOYSA-N 1,4-diiodobenzene Chemical compound IC1=CC=C(I)C=C1 LFMWZTSOMGDDJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PFDBEACWLCHWRZ-UHFFFAOYSA-N 2-(4-bromophenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=C(Br)C=C1 PFDBEACWLCHWRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WWYFPDXEIFBNKE-UHFFFAOYSA-N 4-(hydroxymethyl)benzoic acid Chemical compound OCC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 WWYFPDXEIFBNKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOWSWEBLNVACCL-UHFFFAOYSA-N 4-Bromophenyl acetate Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C(Br)C=C1 QOWSWEBLNVACCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHZLNPMOSADWGC-UHFFFAOYSA-N 4-amino-N-(2-quinoxalinyl)benzenesulfonamide Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CN=C(C=CC=C2)C2=N1 NHZLNPMOSADWGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PQXPAFTXDVNANI-UHFFFAOYSA-N 4-azidobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 PQXPAFTXDVNANI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRYZBQLXDKPBDU-UHFFFAOYSA-N 4-bromobenzaldehyde Chemical compound BrC1=CC=C(C=O)C=C1 ZRYZBQLXDKPBDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUXYZHVUPGXXQG-UHFFFAOYSA-N 4-bromobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(Br)C=C1 TUXYZHVUPGXXQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006283 4-chlorobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1Cl)C([H])([H])* 0.000 description 1
- BRLRJZRHRJEWJY-VCOUNFBDSA-N 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-n-[3-[3-(4-azido-2-nitroanilino)propyl-methylamino]propyl]pentanamide Chemical group C([C@H]1[C@H]2NC(=O)N[C@H]2CS1)CCCC(=O)NCCCN(C)CCCNC1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1[N+]([O-])=O BRLRJZRHRJEWJY-VCOUNFBDSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000003846 Carbonic anhydrases Human genes 0.000 description 1
- 108090000209 Carbonic anhydrases Proteins 0.000 description 1
- BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N Dioxetane Chemical compound C1COO1 BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical class OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000030914 Fatty Acid-Binding Human genes 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000007390 Glycogen Phosphorylase Human genes 0.000 description 1
- 108010046163 Glycogen Phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 101001129925 Mus musculus Leptin receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000036675 Myoglobin Human genes 0.000 description 1
- 108010062374 Myoglobin Proteins 0.000 description 1
- 241001325209 Nama Species 0.000 description 1
- XORSRGIHAXMXMD-UHFFFAOYSA-N OCCO.BrC1=CC=C(C=O)C=C1 Chemical compound OCCO.BrC1=CC=C(C=O)C=C1 XORSRGIHAXMXMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N Phosgene Chemical compound ClC(Cl)=O YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000159610 Roya <green alga> Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N Sulfisoxazole Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1C NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123317 Sulfonamide antibiotic Drugs 0.000 description 1
- PJSFRIWCGOHTNF-UHFFFAOYSA-N Sulphormetoxin Chemical compound COC1=NC=NC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1OC PJSFRIWCGOHTNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 102000004903 Troponin Human genes 0.000 description 1
- 108090001027 Troponin Proteins 0.000 description 1
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 description 1
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 description 1
- 238000000441 X-ray spectroscopy Methods 0.000 description 1
- GKXVJHDEWHKBFH-UHFFFAOYSA-N [2-(aminomethyl)phenyl]methanamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1CN GKXVJHDEWHKBFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 229960004050 aminobenzoic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 150000008366 benzophenones Chemical class 0.000 description 1
- 229940125388 beta agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- 229940097320 beta blocking agent Drugs 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 1
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 1
- 150000001615 biotins Chemical class 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000002038 chemiluminescence detection Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- KRVSOGSZCMJSLX-UHFFFAOYSA-L chromic acid Substances O[Cr](O)(=O)=O KRVSOGSZCMJSLX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000001427 coherent effect Effects 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- LIKFHECYJZWXFJ-UHFFFAOYSA-N dimethyldichlorosilane Chemical compound C[Si](C)(Cl)Cl LIKFHECYJZWXFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003640 drug residue Substances 0.000 description 1
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005370 electroosmosis Methods 0.000 description 1
- 229920006332 epoxy adhesive Polymers 0.000 description 1
- 108091022862 fatty acid binding Proteins 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 229940124307 fluoroquinolone Drugs 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- AWJWCTOOIBYHON-UHFFFAOYSA-N furo[3,4-b]pyrazine-5,7-dione Chemical compound C1=CN=C2C(=O)OC(=O)C2=N1 AWJWCTOOIBYHON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- RRAMGCGOFNQTLD-UHFFFAOYSA-N hexamethylene diisocyanate Chemical compound O=C=NCCCCCCN=C=O RRAMGCGOFNQTLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N hexane-1,6-diamine Chemical compound NCCCCCCN NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- LFKYBJLFJOOKAE-UHFFFAOYSA-N imidazol-2-ylidenemethanone Chemical compound O=C=C1N=CC=N1 LFKYBJLFJOOKAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000007373 indentation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002555 ionophore Substances 0.000 description 1
- 230000000236 ionophoric effect Effects 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- NWLSIXHRLQYIAE-UHFFFAOYSA-N oxiran-2-ylmethoxysilicon Chemical compound [Si]OCC1CO1 NWLSIXHRLQYIAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003854 p-chlorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1Cl 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 238000005498 polishing Methods 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000004853 protein function Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 150000003376 silicon Chemical class 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- XOXHILFPRYWFOD-UHFFFAOYSA-N sulfachloropyridazine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(Cl)N=N1 XOXHILFPRYWFOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008831 sulfachlorpyridazine Drugs 0.000 description 1
- SEEPANYCNGTZFQ-UHFFFAOYSA-N sulfadiazine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=NC=CC=N1 SEEPANYCNGTZFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004306 sulfadiazine Drugs 0.000 description 1
- 229960002135 sulfadimidine Drugs 0.000 description 1
- 229960004673 sulfadoxine Drugs 0.000 description 1
- ASWVTGNCAZCNNR-UHFFFAOYSA-N sulfamethazine Chemical compound CC1=CC(C)=NC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 ASWVTGNCAZCNNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005158 sulfamethizole Drugs 0.000 description 1
- VACCAVUAMIDAGB-UHFFFAOYSA-N sulfamethizole Chemical compound S1C(C)=NN=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 VACCAVUAMIDAGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004936 sulfamethoxypyridazine Drugs 0.000 description 1
- VLYWMPOKSSWJAL-UHFFFAOYSA-N sulfamethoxypyridazine Chemical compound N1=NC(OC)=CC=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 VLYWMPOKSSWJAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002211 sulfapyridine Drugs 0.000 description 1
- GECHUMIMRBOMGK-UHFFFAOYSA-N sulfapyridine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC=N1 GECHUMIMRBOMGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003097 sulfaquinoxaline Drugs 0.000 description 1
- 229960001544 sulfathiazole Drugs 0.000 description 1
- JNMRHUJNCSQMMB-UHFFFAOYSA-N sulfathiazole Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=NC=CS1 JNMRHUJNCSQMMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- LXEJRKJRKIFVNY-UHFFFAOYSA-N terephthaloyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 LXEJRKJRKIFVNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- ZWZVWGITAAIFPS-UHFFFAOYSA-N thiophosgene Chemical compound ClC(Cl)=S ZWZVWGITAAIFPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005490 tosylate group Chemical group 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000004506 ultrasonic cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/551—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being inorganic
- G01N33/552—Glass or silica
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S977/00—Nanotechnology
- Y10S977/902—Specified use of nanostructure
- Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
- Y10S977/924—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis using nanostructure as support of dna analysis
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/24—Nuclear magnetic resonance, electron spin resonance or other spin effects or mass spectrometry
Abstract
Твердий пристрій для проведення мультианалітних аналізів, який містить субстрат і множину дискретних реакційних сайтів, кожен з яких має ліганд, ковалентно з'єднаний з субстратом, в якому поверхня субстрату між реакційними сайтами є інертною по відношенню до аналіту. Такий пристрій можна одержати за допомогою процесу активування поверхні субстрату і нанесення ряду лігандів на дискретні ділянки поверхні.
Description
Опис винаходу
Галузь винаходу 2 Цей винахід відноситься до пристрою і приладу для одночасного визначення декількох речовин, що аналізуються (аналітів).
Передумови винаходу
Звичайно різні щодо складу аналіти аналізуються за допомогою спеціальних способів, наприклад, ферментного імуноаналізу, рідинної хроматографії з високою дозволяючою здатністю, газової хроматографії, 70 ферментних та колориметричних способів. Більшість з цих способів призначена для аналізу одного аналіту під час одного тесту.
Автоматизація аналітичних способів в цілому зосереджена на серійних аналізаторах і аналізаторах для перевірки довільних проб, де багаторазові аналізи окремих зразків проводяться з використанням окремих послідовних способів аналізу. Це вимагає використання численних індивідуальних наборів для аналізу. Крім того, аналіз вимагає використання декількох видів обладнання , наприклад, аналізаторів для клінічного хімічного аналізу, рідинних хроматографів з високою дозволяючою здатністю, мас-спектроскопів з використанням газової хроматографії, автоматичних приладів для імуноаналізу або приладів з використанням атомного поглинання.
Мульти-аналітна система повинна мати у своєму складі засоби для забезпечення одночасного аналізу декількох аналітів у зразку, що випробовується. Спосіб мульти-аналітного аналізу часто патентують, але звичайно обидва ці критерії не витримуються.
Типовий субстрат мульти-аналітної системи має у своєму складі велику кількість різноманітних зв'язуючих лігандів. Зразок, що випробовується, вносять у кожну реакційну зону і після цього для ідентифікації присутнього аналіту використовують численні методи виявлення. Важливо, щоб спосіб виявлення, що с 29 використовується, визначав кількість кожного окремого аналіту. Го)
Найбільш загальним способом одержання мульти-аналітних рядів просторово-різних ділянок біологічно-активних лігандів на субстраті є фотолітографічний метод. Субстрат покривають фотолабільним зшивальним агентом. Теоретично цей зшивальний агент стає реактивним по відношенню до зв'язувального ліганду тільки після світлового опромінення з відповідною довжиною хвилі. Просторова дозволяюча здатність о 30 досягається шляхом нанесенням на субстрат фізичного покриття (яке звичайно виготовляють із хрому). Га»)
Конфігурація отворів у покритті визначає конфігурацію сполучних ділянок на субстраті. Для кожного біологічного ліганду, що іммобілізується, загальна схема така: опромінення перших сайтів, інкубування З опроміненого субстрату з першим лігандом, що іммобілізується, промивання з метою видалення погано «І зв'язаних лігандів, блокування сайтів, активованих на стадії опромінення, які не прореагували, і опромінення 325 ділянок, де повинен бути іммобілізований другий біологічний ліганд, після чого повторюються ті ж стадії, що і о для першого ліганду. Просторова дозволяюча здатність регулюється шляхом контролю ділянки опромінення : або за допомогою когерентного УФ лазерного джерела світла, або кількістю фізичних покриттів і за допомогою некогерентного джерела світла. Це перетворює завдання іммобілізації множини біологічних лігандів у тривалий « процес. Другим недоліком фотолітографічного методу є використання дорогах фізичних покриттів або лазерного З 50 джерела світла. Далі, рівень неспецифічного зв'язування є високим. с Наприклад, використання арилазидів, фторарилазидів і бензофенонів призводить до високого ступеня
Із» неспецифічного зв'язування. Високий рівень неспецифічного зв'язування на високому фоні аналізу значно знижує динамічний діапазон кожного мульти-аналітного аналізу. Неспецифічне зв'язування має місце в основному із-за пасивної адсорбції молекул неактивованою поверхнею фотолабільного зшивального агента 45 через іонні взаємодії, сили Ван-дер-Ваальса і т.д. і-й МУО-А-9516204 описує фотолітографічний підхід до зменшення проблеми, пов'язаної з високим «» неспецифічним зв'язуванням. Згідно з цим підходом поверхнево-зшивальною молекулою є авідин, а фотолабільною молекулою є фотобіотин або його похідне. Незважаючи на те, що заявлено зменшення шк неспецифічного зв'язування, цей метод потребує вищезгаданої довготривалої послідовності дій. Іммобілізація 20 ав! 20 окремих біологічних лігандів потребує в цілому 80 етапів при виконанні основних вимог до опромінення, зв'язування, блокування та промивання для кожного окремого ліганду, що іммобілізується с Просторову дозволяючу здатність також можна досягти пасивною адсорбцією. Наприклад, заявка
США-А-5432099 описує зв'язування ліганду з поверхнею субстрату шляхом сполучення іонної взаємодії, гідрофобної взаємодії і сил Ван-дер-Ваальса. Пасивна адсорбція залежить від змін рН, температури, іонної концентрації і від типу субстрату, що використовується, утруднюючи контроль над процесом зв'язування.
ГФ) Основним недоліком цього підходу є чутливість пропорції слабо іммобілізованого ліганду, що підлягає десорбції, під час стадій промивання або інкубування біологічного аналізу, що призводить до поганої інтра-та о інтерточності аналізу.
Поперечно-зшивальним агентом, який описується в багатьох публікаціях, є глютаральдегід. Цей зшивальний 60 агент призводить до багатьох недоліків, у тому числі до тенденції білків до поперечного зшивання що, можливо, змінює функції білку. Наступним недоліком є те, що процедура з'єднання повинна мати стадію відновлення, яка є довготривалою і потенційно дуже небезпечною, наприклад, якщо у ролі відновника використовують ціаноборогідрид натрію. Використовують гетеробіфункціональні зшивальні агенти, проте в багатьох випадках це потребує зв'язування вільних сульфідрильних груп з білком. Це викликає необхідність модифікації білку перед бо іммобілізацією.
При проведенні мульти-аналітного аналізу бажано одержувати як якісні, так і кількісні результати.
Наприклад, мульти-аналітні аналізи можна проводити з антибіотиками. У великій мірі вони основані на аналізах з використанням мікробного інгібування, в яких антибіотик, присутній у зразку, подавляє ріст бактерій і
Створює очищену зону, пропорційну концентрації антибіотика, присутнього у зразку. Проте цей спосіб не може забезпечити ідентифікацію антибіотика або точне визначення його концентрації. Способи мікробного інгібування також дуже повільні, весь процес продовжується декілька днів.
Методи хімічного скринінгу, такі як рідинна хроматографія з високою дозволяючою здатністю або мас-спектроскопія з використанням газової / рідинної хроматографії суперничають у визначенні крайніх членів 7/0 пропорції: структурна різноманітність/полярність кожної антибіотичної групи, наприклад, пеніциліни, сульфаміди, аміноглікозиди, тетрацикліни і т.д. Крім того, хроматографічні методи потребують більшої роботи по виготовленню зразку з метою забезпечення такого співвідношення сигналу до шуму, при якому можуть бути досягнуті межі виявлення.
Відомі мульти-аналітні пристрої включають Тгіаде (дивись Сіїпісаї Спетівігу З38(9): 1678-1684(1992) і 7/5 Камівог (див. Сіїпіса! Спетівігу 39(9): 1899-1903(1993)). Ці пристрої придатні тільки для кількісного аналізу.
Пристрій Тгіаде призначений для одночасного виявлення набору із семи лікарських засобів, якими зловживають, у сечі людини. Кожний пристрій може аналізувати тільки один зразок сечі. В кінці процедури оператор візуально оглядає кожну досліджувану специфічну для ліків зону на наявність червоної смуги. Всі стадії процедури аналізу повинні виконуватись оператором вручну. Також відсутня роздруківка результатів 2о тесту.
Використання пристрою Адмуізог подібне до використання пристрою Ттгіаде. Пристрій Адмізог перевіряє п'ять різних класів лікарських засобів, якими зловживають. Пристрій діє на основі принципів аглютинаційного аналізу, при цьому кожному лікарському засобу призначений окремий канал. Всі стадії процедури аналізу виконуються оператором. Негативні зразки мають склеєні частинки, в той час як позитивні зразки лікарського с г Засобу показують роздільне розташування частинок.
В основному в біосенсорах / мікровиготовлених пристроях для біологічного використання у ролі субстрату і) застосовують кремній. Іноді субстратом є скло або кварц. Кремній має кристалографічну структуру з чітко визначеними кристалічними площинами, що легко контролюються. Рівномірність кремнієвого субстрату ідеально підходить для використання в мульти-аналітному випробувальному пристрої. о зо Проте темні субстрати, такі як кремній, дають так званий ефект чорного тіла. При використанні для виявлення флуоресценції, під час якої фторофор збуджують, використовуючи світло з визначеною довжиною о хвилі, темний субстрат може поглинати випадково збуджену світлову енергію, таким чином зменшуючи -«ф випромінення світла фторофором.
Суть винаходу «
У відповідності з даним винаходом пристрій для проведення мульти-аналітних аналізів має у своєму складі ю субстрат і множину дискретних реакційних сайтів, кожен з яких має ліганд, ковалентно зв'язаний з субстратом,
Ї в якому поверхня субстрату між реакційними сайтами є інертною по відношенню до аналіту. Таким чином, даний винахід забезпечує твердий мульти-аналітний пристрій, який не здатний або майже не здатний до неспецифічного зв'язування. «
Заявлений пристрій може бути одержаний активуванням поверхні підходящого субстрату і нанесенням ряду в с лігандів на дискретні сайти цієї поверхні. При бажанні інші активні ділянки можуть бути заблоковані. Ліганди . можуть бути нанесені у водній системі, при цьому переважаючим є надання іншим ділянкам гідрофобних а властивостей. Ліганди можуть бути зв'язані з субстратом за допомогою зшивального агента. Зокрема, бажано, щоб активована поверхня переважно реагувала послідовно з органосиланом, біфункціональним зшивальним агентом і лігандом. с Даний винахід також передбачає забезпечення за допомогою біфункціональних поперечно-зшивальних агентів, що використовуються, високоефективного хімічного сполучення між органосиланами, ковалентне ве іммобілізованими на мікровиготовлених кремнієвих або керамічних субстратах. Біологічні ліганди можуть бути їх таким чином іммобілізовані в мульти-аналітні ряди.
Даний винахід виключає необхідність використання великої кількості індивідуальних наборів для реактивного о аналізу, а також декількох видів приладів, тим самим полегшуючи одночасне проведення множинних аналізів о одного зразка. Даний винахід забезпечує єдиний загальний аналізатор, придатний для одночасного виявлення широкого спектру хімічних речовин. Крім того, можна підібрати реактиви для тестування визначеного набору аналітів.
Даний винахід також передбачає іммобілізацію великої кількості біологічних лігандів. у просторово-визначений малюнок, що складається із крапок і ліній, шляхом мікро-рідинного розподілення ліганду
Ф) по хімічно-активованому субстрату. Біологічний ліганд ковалентне приєднаний до субстрату. Ефективність ка приєднання біологічного ліганду може бути такою, що хімічна реакція завершується протягом декількох хвилин.
Процедура іммобілізації забезпечує збереження біологічної активності біологічного ліганду на протязі як бо / Короткого, так і тривалого часу.
Даний винахід також забезпечує єдиний аналізатор для одночасного виявлення великої кількості аналітів в мульти-аналітній системі. Цей аналізатор передбачає максимальну зручність для кінцевого споживача, ідентифікуючи мульти-аналіт і даючи кількісне визначення кожного зразка, що випробовується. Система для аналізу, якій слід віддати перевагу, містить трансляційну платформу Х-У, апарат для обробки зразка, засіб для 65 Контролю рідинної обробки / течії, темну коробку, що контролюється за допомогою температури, камеру пристрою з зарядовим зв'язком, а також математичне забезпечення для обробки зображення. Платформа може бути зв'язана з відповідним мотором для досягнення заданої точності, наприклад, 10 Мм, для розміщення пристрою (пристроїв) на кожній стадії аналітичної процедури.
Опис креслень
На поданих кресленнях: фіг.1 показує утворення нерівномірної поверхні субстрату, фіг.2 показує хімічну активацію груп на поверхні субстрату, фіг.3, 5 і 6 показують ковалентну іммобілізацію ліганду на поверхні субстрату, фіг.4 показує використання латексних часток на поверхні субстрату, 70 фіг.7 - 11 ілюструють пристрої для введення субстратів, які здійснюють винахід, фіг.12 - 14 - схематичні вигляди системи, яка призначена для аналізу, пристрою згідно з даним винаходом, фіг.15 показує калібровочні криві для аналітів, що досліджуються за допомогою даного винаходу.
Опис винаходу
Субстрат, який використовується у пристрої згідно з даним винаходом, може, наприклад, містити кремній, /5 кварц, скло або керамічний матеріал. Керамічні субстрати (оксид алюмінію) є хорошою альтернативою кремнієвим субстратам, оскільки дозволяють успішно застосовувати як флуоресцентні, так і хемілюмінесцентні методи виявлення. Це відкриття було несподіваним, тому що кристалографія керамічних матеріалів не передбачає їх найближчого вибору як субстрату.
Керамічний субстрат можна виготовити таким чином, щоб забезпечити інтервал розміру гранул від 1 до ЗОМм. Переважаючий розмір часток керамічного субстрату, що використовується в цьому винаході, становить менше, ніж 20Мм, переважно менше 10Мм. Зменшений розмір часток сприяє значному покращенню рівномірності поверхні, що, в свою чергу, покращує проведення біологічних аналізів. Іншими важливими якостями керамічних субстратів є допуск топографії поверхні, пористість, вакуумна герметичність і нульове поглинання води. с
Керамічний матеріал, якому слід надати перевагу, складається із 9495 оксиду алюмінію (А! 2О3) з розміром частинок в межах 4-8Мм. Матеріал є вакуумно герметичним і після подрібнення має топографію поверхні 0,6 - і) 0,8Мм. Рівномірність поверхні може бути покращена за допомогою процесу шліфування, завдяки якому одержують поверхню з відхиленням 0,4 - О0,5Мм. Подальше покращення досягається поліруванням і шліфовкою, одержуючи поверхню з відхиленням 0,05 - О0,1Мм. о зо Було встановлено, що характеристика деяких керамічних субстратів залежить від характеристик розміру гранул. Було встановлено, що найкращі результати аналізу досягаються при розмірі гранул керамічних о матеріалів до 8Мм, наприклад, 4 - 8Мм. Було встановлено, що результати для матеріалів з великим розміром «г гранул незадовільні. Перевірка керамічних субстратів з розміром гранул приблизно 1Мм не призвела до покращення результатів порівняно з результатами, одержаними для субстрату з розміром гранул 4 - 8Мм. Це є « зв перевагою, оскільки вартість керамічного матеріалу з дуже малим розміром часток значно вище (приблизно в 5 ю раз).
Підходящі кремнієві субстрати виготовляють з плівкою оксиду, що має точну товщину, наприклад, допуск Ж 2нм для плівки оксиду товщиною 10Онм. Плівка оксиду може мати товщину 50 - 500нм, переважно менше 200нм, більш переважно коло 10Онм. «
Субстрат можна одержати як частину твердого мікровиготовленого і мікрообробленого пристрою, в с розробленого для широкого кола панель-тестів для проведення ветеринарних та клінічних діагнозів. Кожен твердий пристрій для тестів має ряд реакційних ділянок. Кожна реакційна ділянка є специфічною для окремого з аналіту. Реакційна ділянка може мати вигляд плями, жолоба, заглиблення, виїмки, западини або камери.
Реакційні ділянки утворюються за допомогою іммобілізуючих біологічних молекул на субстраті.
Звичайно пристрій згідно з цим винаходом має площу до 1см2. Площа кожного реакційного сайту звичайно с менше, ніж 1мм. їз Тверді субстрати виготовляють переважно таким чином, щоб забезпечити складну сітку отворів, камер, жолобків, западин, заглиблень і т.д. Переважаючим є також створення стовпчиків усередині жолобків або г» западин. Такі нерівності можуть допомогти у досягненні максимальної взаємодії ділянок поверхні між зв'язаними о 50 біологічними лігандами та реактивами аналізу, що в знаній мірі зменшує інкубаційний період для схожих порівняльних імуноаналізів і шаруватих імуноаналізів. 62 Як альтернатива або крім, наприклад, заглиблень або жолобків на кремнієвому або керамічному субстраті, поверхня може бути також мікровиготовлена таким чином, щоб на ній були камери / резервуари / жолобки для змішування об'ємом від нанолітра до мікролітра. Наприклад, кремнієву поверхню спочатку окислюють для утворення шару оксиду. Потім наносять шар фоторезиста, на якому утворюють бажаний малюнок. Після утворення малюнка на шарі оксиду фоторезист видаляють. Потім кремній протравлюють, наприклад, за о допомогою НЕ, а потім плівку оксиду видаляють. Нарешті, плівку оксиду рівномірно вирощують на всій поверхні іме) кремнієвої пластинки.
Ілюстрація процесу наводиться на фіг.1. На стадії (ії) кремнієву пластинку 1 окислюють з метою одержання 60 шару оксиду 2, на стадії (її) наносять фоторезистентний шар 3, на стадії (ії) за допомогою світла наносять малюнок, на стадії (ім) фоторезист видаляють, на стадії (М) пластинку 17 протравлюють, на стадії (мі) видаляють плівку оксиду і на стадії (мії) знову утворюється постійна плівка оксиду 2а,
Переважаючою є ковалентна іммобілізація біологічних лігандів. Можна використовувати пасивну адсорбцію, але на таку взаємодію впливають зміни рН, температури і концентрації іонів, вона може також у деяких випадках 65 призвести до вивільнення слабо зв'язаних лігандів під час стадій інкубування і промивання, таким чином погіршуючи відтворюваність аналізу. Бажано, звичайно, щоб після процедури іммобілізації біологічний ліганд зберігав максимальну активність.
Перед будь-яким хімічним активуванням поверхня субстратів повинна бути старанно очищена. Перша стадія переважно містить очищення поверхні ультразвуком у лужному детергенті з наступним виснажуючим промиванням двічі деіонізованою водою. Потім субстрати оброблюють кислотним розчином хрому. Цей розчин продовжує очистку поверхні і відкриває поверхневі епоксидні групи, як показано на фіг. 2. Епоксидні групи можуть бути також відкриті іншими способами, наприклад, дією ультразвуку на протязі 1 години.
Утворені таким чином поверхневі гідроксильні групи готові для дериватизації. Наприклад, як показано на фіг, З, послідовність реакцій має у своєму складі використання органосилану, потім біфункціонального 7/0 поперечно-зшивального агента 2-К-Х для утворення високореактивної проміжної сполуки і, нарешті, функціоналізованого ліганду для досягнення ковалентної іммобілізації.
Більш детально в органосиланах формули (КО)»з 51І-«"СНо)п-Х кожен К є алкільною або іншою гідрокарбільною групою, такою як СНз або СНоСН»у, п є цілим числом, наприклад, від 1 до 18; а Х є функціональна група, така як епоксициклогексил, МН», СНО, ОН, 5Н, р - хлорбензил, т -хлорбензил, Вг, СІ, -МН-СНо-СНо-МН», 2,3 - /5 епоксипропокси, -М-С-О, -М-С-5 або р-хлорсульфонілфеніл. Ці органосилани можуть бути вибрані з метою одержання або реактивної термінальної групи, яка здатна утворювати ковалентний зв'язок з біологічною молекулою, або менш реактивного залишку, такого як МН», де необхідне подальше активування за допомогою біфункціонального агента з- метою одержання відповідної кінцевої групи. Органосилани, що мають термінальні електрофільні функціональні групи, не потребують активування за допомогою біфункціонального 2о поперечно-зшивального агента, оскільки біологічні ліганди можуть бути іммобілізовані ковалентне через нуклеофільні групи на біологічному ліганді.
У тому випадку, коли органосилани мають нуклеофільні групи, будь-який з численних біофункціональних поперечно-зшивальних агентів може бути використаний з метою одержання у вищій мірі реактивної хімічної групи, через яку біологічна молекула або ліганд можуть бути приєднані ковалентне. Цей винахід має у своєму с об складі використання біфункціональних зшивальних агентів, які можуть бути використані для масового виробництва хімічно активованих субстратів, будучи достатньо стійкими для тривалого зберігання до і) ковалентного зв'язку біологічної молекули або зв'язуючого ліганду. Переважаючи зшивальні агенти є інертними у звичайних атмосферних умовах, тим не менш вони також достатньо реактивні для того, щоб утворювати ковалентна зв'язки з функціональними групами біологічного ліганду, що іммобілізується, впродовж дуже о
Зо Короткого проміжку часу (звичайно « 10 хвилин).
Біфункціональним зшивальним агентом може бути, наприклад, фосген, тіофосген, М, М-дісукцинімідил о карбонат, ксилілендіамін, 1,6-діаміногексан, 1,12-діамінододексан, 1,6-діізоціанатогексан, «г 1-,12-діїзоціанатододекан, 1,4-фенілендітіоїзоціанат, ціанурхлорид, терефтальдегід, р-нітробензоїлхлорид, сульфанілова кислота, 2-фторометилпіридин, р-толуолсульфонат, З-амінофенілборонова кислота, « р-бромфенілборонова кислота, діетилпірокарбонат, етил хлорформат, р-бромоаланін, р-бромфеніл гідразид, ю р-бромбензальдегід, 1,2-етиленгліколь р-бромбензальдегіда, М, М-карбонілдіїмідазол, терефталоїл хлорид, епіхлоргідрин, 1,4-діодобензол, 1,4-дібромбензол або похідне М-гідроксисукциніміду, наприклад, р-амінобензойної кислоти, р-бромбензойної кислоти, р-бромфенілоцтової кислоти, р-брометилбензойної кислоти, р-бромметилбензойної кислоти, р-формілбензойної кислоти, р-гідроксиметилбензойної кислоти, 1,2- « етиленгліколь р-формілбензойної кислоти, р-бромфенілпропіонова кислота або р-гідроксифенілпропіонова пт) с кислота. Для реакції з органосиланом, що має нуклеофільну або електрофільну термінальну групу, можна . використовувати фотолабільний перехресно-зшивальний агент. Таким агентом є, наприклад, М-гідросукцинімід и?» р-азідобензойної кислоти або р-амінобензофенон.
Замість або окрім використання біфункціональних зшивальних агентів можна також переважно ковалентне іммобілізувати шар латексних часток. Діаметр латексних часток переважно менше, ніж Б5ООнм, а більш с переважно менше, ніж 15О0нм. Латексні частки можуть мати ряд функціональних груп, наприклад, - СН Сі», -
СНО, р - хлорфеніл, р -хлорстірил, -МАМН, -МН-МНо або -МНо. Латексичні частки можна інкубувати при о концентрації приблизно 0,5 - 195 мас./об., при цьому субстрати модифікують підходящим органосиланом у їх присутності або відсутності гетеробіфункціонального зшивального агента, як описано вище.
Фіг.4 показує дві реакційні схеми іммобілізації латекса. За кожної з них може йти активація латекса о другим зшивальним агентом і іммобілізація біологічної молекули, або пряма ковалентна іммобілізація, о наприклад, антитіла.
Альтернативою використання полістирилових латексних часток є ковалентна іммобілізація біологічних лігіндів до похідних етиленглікогелю, який уже зв'язаний з силанізованим субстратом. Наприклад, похідні дв Поліетиленгліколю з двома електрофільними групами, такими як епокси або карбонілімідазол, вступають в реакцію з силаном, який має термінальну групу -МН», таким як АРТЕ5, на вибраному субстраті.
Ф) Переважаючою може також стати ковалентна іммобілізація біологічного ліганду прямо до силанового шару, ка таким чином видаляючи необхідність активування силану полімерними матеріалами або біфункціональними зшивальними агентами. Органосилани повинні бути чутливими до нуклеофільної атаки хімічною групою во (наприклад, МН», ЗН, ОН або МНУ-МН») на біологічному ліганді. Органосилани, придатні для прямого приєднання біологічного ліганду, можуть мати галидні, елокси-, -ізоціанато, - альдегідні або тозилатні функціональні групи. Така реакція показана на фіг.б, де Е є електрофільна група на органосилані. Прикладами Е є Вг, Сі, -
Оо-СнНО-СН-СН»5, - МСО, - СНО і р - хлорсульфонілфеніл.
Органосилани, які мають електрофільні групи, наприклад, гліцидокси, також мають ту перевагу, що вони б5 менш чутливі до полімерізації під час процедури силанізування завдяки відсутності нуклеофільних груп, здатних атакувати метокси - або епоксифункцію органосилану. Тому поверхня субстрату не повинна мати полімеризованого органосилану.
Хімія поверхонь забезпечує засіб для досягнення просторової дозволяючої здатності завдяки швидкій кінетиці утворення ковалентних зв'язків між хімічною функціональною групою поверхні і підходящою хімічною
Групою, що знаходиться у стерично вигідній позиції на біологічній молекулі, яка іммобілізується. Біологічну молекулу переважно наносять на поверхню субстрату за допомогою мікрорідинної піпетки у вигляді окремої краплі або ряду крапель, які утворюють лінію. Об'єм рідини, що наноситься, становить від 1 до 10Онл, переважно менше, ніж 5Онл, наприклад, ближче до 1Онл. Швидкість утворення ковалентних зв'язків така, що ковалентна іммобілізація досягається на протязі декількох хвилин, до того, як нанесена крапелька або лінія /о випарується з поверхні. Позиційна точність, з якою наноситься крапелька або лінія рідини, повинна мати допуск 2оМми.
Особливо, якщо ліганди наносять у воді, також бажано зробити поверхню гідрофобною з метою запобігання бокової дифузії нанесеної крапельки або лінії. Ця властивість забезпечує якість плями і відтворюваність, а також забезпечує ковалентну іммобілізацію великої кількості плям біологічних молекул на одиницю площі /5 поверхні.
Цей винахід запобігає проблеми, пов'язані з звичайною фотолітографією, забезпечуючи можливість утворення просторово різноманітних плям біологічних лігандів без необхідності використання УФ світла фізичних покриттів. Як зазначено вище, просторову дозволяючу здатність можна досягнути за допомогою мікронанесення.
Важливим фактором є швидка кінетика реакції ковалентної сполуки, яка необхідна для високоефективного з'єднання біологічного ліганду на просторово відмінній ділянці, і яка видаляє бокову дигресію іммобілізованого біологічного ліганду.
Потім хімічні залишки на субстраті, що не прореагували, можуть бути заблоковані, наприклад, за допомогою блокуючих молекул, відомих спеціалістам у даній галузі. Такими підходящими молекулами є білки, такі як казеїн, бичачий сировоточний альбумін, лактальбумін і т.д.. або блокатори з малою молекулярною вагою, такі як с ге Гліцин, глютамін і т.д
Можуть бути використані також фотолабільні зшивальні агенти. Наприклад, органосилан на поверхні і) субстрату в темноті вступає в реакцію з фотолабільним зшивальним агентом (наприклад, бензофеноном, арилазидами і т.д.). Потім, за бажанням, на поверхню наносять біологічні ліганди у вигляді плям, і після короткого періоду опромінення УФ світлом, або більш тривалого періоду опромінення видимим світлом о зо Здійснюють ковалентне приєднання. Ділянки поверхні субстрату, що залишились, блокують, використовуючи блокатори, подібні молекулам, описаним вище, у присутності УФ або видимого світла. о
Іммобілізовані біологічні молекули на субстраті можна стабілізувати, наприклад, інкубуванням в цукровому «г розчині (наприклад, трегалозі) на протязі короткого проміжку часу (1 година), а потім висушуванням при 377С на протязі 16 годин. Потім стабілізовані субстрати можуть бути для зберігання запаковані в пакети з фольги з « зв осушувачем. Іммобілізовані біологічні молекули зберігають стабільність на протязі б - 12 місяців і більше, ю наприклад, до більш ніж 2 років при зберіганні при температурі від 42 до 876.
Пристрої можуть бути розміщені у різноманітні носії, які забезпечують здатність контролювати ефективність зшивання реактивів тесту. Плинність рідинних реактивів можна контролювати капілярним тяжінням, віддентровою силою, вакуумною силою або електроосмотичною течією. Використання такої течії може запобігти « необхідність використання клапанів, таким чином відпадає необхідність використання механічних частин. з с Зв'язування скляної пластинки з мікровиготовленою поверхнею забезпечує утворення закритих каналів. До зв'язування скляної пластинки біологічні молекули ковалентне зв'язуються на поверхні. Багато процедур ;» зв'язування, наприклад, анодне зв'язування, потребують високих температур і можуть зруйнувати біологічну молекулу. Тому методи зв'язування повинні бути натурованими відносно іммобілізованих біологічних молекул.
Одним з підходящих методів є непряме зв'язування, наприклад, подібно до того, як вафлю зв'язують з скляною с пластинкою за допомогою підходящого клею, наприклад, епоксидного клею.
Потім пристрої можуть бути розміщені в підходящі носії. Різноманітні носії такого роду показані на фіг.7 пи і 8. Як приклад, розміри пристрою, показаного на фіг.8, складають 48,62мм х 48,62мм, включаючи западини, які їх мають внутрішній діаметр 1Омм і зовнішній діаметр 12,82мм. Відстань западин від центру до центру складає 15,36бмм. о Пристрої можуть мати у своєму складі деталі для поліпшення змішування реагентів тесту, зразків і т.д. Це о показано на фіг.9, де пристрій має у своєму складі сайт для введення реагенту 11, жолобки для реагенту 12 і сайти для тест-реагентів 13.
На фіг.10 пристрій має у своєму складі резервуари для реагентів 21, колектор для розподілення 22, ов Канальні тест-сайти для розподілення реагентів 23 і резервуар для відходів 24. Фіг.11 показує чотирьохканальну структуру для тесту із схожими частинами.
Ф) Цей винахід забезпечує повністю інтегровану систему для одночасного кількісного визначення аналітів, які ка мають різні молекулярні маси, структури і полярність. Набори аналітів можуть бути використані для проведення клінічної / ветеринарної діагностики або скринінгу лікарських засобів. во В залежності від аналітів відповідно вибирають зв'язуючі ліганди. Це залежить від вміння і досвіду спеціалістів. Підходящими аналітами є такі: - антибіотики, наприклад, тетрацикліни, сульфаміди, іонофори, аміноглікозиди, пеніциліни або фторхінолони; - гормони, наприклад, лютеінізуючий гормон, пролактин, фолікулостимулюючий гормон або тіреостимулюючий гормон; 65 - маркери серцевих порушень, наприклад, міоглобін, карбонова ангідраза, тропонін 1, глікогенфосфорилаза
ВВ, СК- МВ, зв'язуючий білок жирної кислоти або тропонін Т;
- маркери інфекційних захворювань; - маркери алергій, - лікарські засоби, якими зловживають; - ферменти: - віруси; - нуклеотиди і - пептиди.
Наприклад, один набір призначений для визначення сульфамідних антибіотиків. Цей винахід забезпечує 70 спосіб одночасного кількісного визначення до 20 окремих сульфамідів. Прикладами інших наборів є панелі для визначення серцевих порушень, фертильності та інфекційних захворювань.
Цей винахід забезпечує можливість одночасного визначення приблизно 20 аналітів, які можуть не мати структурної схожості. Матриці зразків, що тестуються, можуть мати у своєму складі сироватку, плазму, сечу, жовч, фекалії, тканину, воду і їжу Об'єм необхідного зразка дуже невеликий, звичайно « 1,5ум аналіт. 7/5 Тест-реагенти, наприклад, мічені ферментом антитіла і гаптени, мічені флуоресцеїном антитіла і гаптени, можуть міститися в загальному резервуарі для реагентів, значно знижуючи вимоги по зберіганню рідин.
В шаруватих аналізах, наприклад, лютеїнізуючого гормону, фолікулостимулюючого гормону, пролактину, тіреостимулюючого гормону І т.д., зразок добавляють разом з буфером і інкубують впродовж короткого проміжку часу, звичайно менше, ніж 30 хвилин, переважно менше 10 хвилин. Після стадії промивання добавляють суміш мічених визначаючих антитіл і інкубують далі на протязі визначеного проміжку часу. Цей проміжок теж звичайно становить менше 30 хвилин, переважно менше 10 хвилин. Потім пристрій промивають з метою видалення незв'язаних позначок і визначають кількість сигналу.
Для деяких аналізів переважальним може стати впровадження в мікровиготовлений пристрій засобу для видалення потенційних інтерферентів, таких як інтерференція ревматоїдного фактору. Видалення с ревматоїдного фактору може бути здійснене шляхом контакту зразка, який тестується, з ділянкою іммобілізованого імуноглобуліну, наприклад, контакт зразка, який досліджується, з ділянкою для реакції. і)
Наступним прикладом є інтерференція НАМА (людських антимишачих антитіл), Ці антитіла можуть викликати серйозні проблеми при проведенні аналізів з використанням моноклональних мишачих антитіл. Звичайно ця проблема вирішується шляхом включення в тест-реагенти дорогих домішок. Перевагою цього винаходу є о
Зо запобігання інтерференції НАМА за допомогою контакту зразка з ділянками на мікровиготовленому пристрої з метою видалення цих антитіл до того, як зразок буде розміщений на реакційну ділянку о
В цілому, ліганди можуть бути нанесені на частину пристрою, яка зв'язує домішки. Це особливо важливо, «І коли на поверхню пристрою, тобто, в жолобки, припустимо нанесення визначеної речовини. Можливість видалення інтерферентних компонентів збільшує точність одержуваних результатів. в
Визначальні позначки можуть бути також іммобілізовані на поверхні дендримерних молекул. Дендримерні МУ молекули є полімерні по своїй природі, вони синтезовані сполученням, що повторюється, невеликих будівельних молекул. Такі молекули з різною молекулярною масою виготовляються промислово фірмою Аїагіспй Спетісаї!в (з різноманітним набором термінальних функціональних груп, наприклад, МНо або СООН). У відповідності з звичайними методами сполучення для виготовлення визначаючих мічених коньюгатів можуть бути використані « гетеробіфункціональні зшивальні агенти. При використанні невеликих гаптенових молекул, наприклад, В - с агоністів, анаболічних стероїдів або антибіотиків, слід віддати перевагу сполученню невеликих дендримерів й (переважно, не більше 16 поверхневих груп) з великими дендримерами (звичайно більше 64 поверхневих груп). «» Гаптен з малою молекулярною масою (менше 1000 дальтон) сполучають з хімічними групами невеликого дендримеру з наступним ковалентним приєднанням визначальної позначки. Коньюгат дендримеру може бути очищений за допомогою діалізу і гель-проникаючої хроматографії. сл Тест-реагенти мають багато складових (наприклад, мічені ферментами антитіла, мічені флуоресцеїном антитіла, іммобілізовані латексом антитіла, дендримерні антитіло - фторофорні кон'югати, дендримерні антитіло ть - ферментні кон'югати, мічені ферментами гаптени, мічені флуоресцеїном гаптени і т.д.), необхідних для ї» конкретних наборів тестів. Набори можливих тестів дуже різноманітні і їх можна вибирати, виходячи з Клінічного діагнозу (або ветеринарного аналізу), в міру необхідності. Наприклад, необхідний набір для о визначення інфекційних захворювань (таких як гепатит, ВІЛ, сифіліс і т.д.). Інші набори мають у своєму складі о гормони фертильності, серцеві маркери, білки алергії і т.д. Так же, як і клінічні параметри, можна визначити широкий набір залишків лікарських засобів.
Цей винахід дає можливість ідентифікувати окремі сполуки, такі як антибіотики. Наприклад, на пристрої, який має площу поверхні 1см?, одночасно, звичайно на протязі декількох хвилин, можна одержати кількісний результат відносно 20 антибіотиків, з чутливістю, яка перевищує чутливість методів рідинної хроматографії з
ІФ) високою дозволяючою спроможністю і мас-спектроскопії з використанням газової хроматографії, і її можна ко порівняти з чутливістю звичайних ферментних імуноаналізів з одним параметром. Цей підхід можна легко застосувати до анаболічних стероїдів, бета-агоністів, бета-блокаторів, пестицидів, терапевтичних лікарських бо засобів і т.д.
При проведенні аналізів може бути використана хемілюмінесценція. біолюмінесценція або флуоресценція.
Система для визначення переважно являє собою камеру з зарядно-з'єднуючим пристроєм з обладнанням для вимірювання як флуоресцентного, так і хемілюмінесцентного світла. Коротко кажучи, указана камера приймає світловий сигнал, який виходить із ділянок на мікровиготовленому пристрої, які випробовуються, і перетворює 65 його у відносні світлові одиниці.
Використання систем для визначення, основані на флуоресценції, з підходящими оптичними фільтрами для мічених фторофорів дає прямі результати.
Підходящим хемілюмінесцентним реактивом є люмінол, який можна аналізувати при довжині хвилі 433 - 445нм. Можна також спостерігати хемілюмінесценцію, виходячи із визначення лужних, мічених фосфатазою біологічних молекул, і використовуючи 1,2-діоксетан.
З метою полегшення визначення аналітів цей винахід переважно застосовує хемілюмінесцентну систему визначення з використанням пристрою з зарядовим зв'язком. Перевага віддається чорній освітленій камері для поліпшення ефективності захвату при довжині хвилі світла, яке випромінює хемілюмінесцентна світлова реакція (приблизно 433 - 445нм у випадку з люміналом). 70 Вся система може контролюватися за допомогою персонального комп'ютера, де спеціально складена програма контролює таблицю Х-У, розподільчий пристрій, обробку зразка, спостереження за температурою, час інкубування і камеру з зарядно-з'єднуючим пристроєм. Фіг.12 - 14 показують організацію такої системи.
Фіг.12 схематично показує взаємодію персонального комп'ютера, який має два контрольних вузла 31 і 32.
Вузол 31 зв'язаний з системою зображення зарядно-з'єднуючого пристрою, який позначається як 33. Вузол 32 зв'язаний з розподільчим вузлом і трансляційною картою Х-У, при цьому планшет для зразка позначений як 34 і 35, відповідно.
Фіг.13 є схематичним зображенням трансляційної карти Х-У. Це креслення показує платформу для зразка 41, встановлену на лінійний виконуючий механізм 42. Трансляція Х-У знаходиться під контролем перехідних моторів 43 і 44, з'єднаних з відповідними приводами 45 і 46. Трансляція обмежується "вихідним положенням" датчиків 47 го 148.
Чутливість мічених біологічних молекул і деяких немічених біологічних молекул до світла може викликати необхідність проведення аналізів при відсутності світла. Відсутність світла досягається за допомогою світлонепроникної коробки. Температура світлонепроникного простору також переважно контролюється, наприклад, в діапазоні 0,2С , або, переважально, ж 0,17С, з метою забезпечення задовільної точності аналізу. сч
Фіг.14 показує прилад у перспективі. частину плану і зрізані вигляди збоку. Зокрема, фіг.14А показує контейнер 51 для зберігання реагентів, світлонепроникливі двері 52 і корпус камери 53 із з'ємною кришкою 54. і)
Основна частина камери може знаходитись поза кожухом. Лінзи камери розміщені у отворі в кожусі.
Фіг.148 показує окреслення зразків на пластинці для зразка 55, ділянки для відходів 56, а також ділянку для зображення 57. Камера 53 встановлена над цими ділянками. Фіг.14С показує, окрім контейнера 51, камеру о зо 53, карту Х-У 41, перехідний мотор 43 і розподільний насос 58.
Конструкція системи, показаної на фіг.14, базується на утримувачах З х З штативу для зразків, які можуть о одночасно мати у своєму складі 20 зразків. Це означає, що коли на кожному 1см? мікровиготовленого пристрою «І знаходяться 20 окремих реакційних ділянок, то на одному зразку можна одночасно проводити 3600 аналізів.
Альтернативно, одночасно можна проводити аналіз 180 зразків на 20 різноманітних параметрів тесту. М
Як вказано вище, аналіт можна позначити. Ліганд також можна позначити, забезпечуючи проведення аналізів (У при частковій зайнятості.
Наступні приклади Ілюструють винахід.
Приклад 1. Аналіз сульфонаміду «
У цьому прикладі 12 окремих антитіл (при цьому кожне антитіло специфічне для одного сульфонаміду) 0 іммобілізують шляхом ковалентного приєднання за допомогою контактної взаємодії до дискретних ділянок 8 с плоского керамічного оксид алюмінію) субстрату, що має хімічно модифіковану поверхню. Використовуючи й порівняльний імуноаналіз, проводять мульти-аналітний аналіз. "» Більш детально, керамічні субстрати (1см х 1їсм) очищають за допомогою ультразвуку, використовуючи лужний детергент (КВ5З35, 590 об/об) потім двічі деіонізовану воду, а потім розміщують в 6 М НСЇ на 16 годин.
Потім субстрати розміщують в хромову кислоту на 1 годину в ультразвуковій бані. ос Субстрати як можна більш ретельно промивають подвійно деіїонізованою водою і ацетоном, а потім висушують в печі при 1207 впродовж 2 годин. Після такої попередньої обробки субстрати силанізують, е використовуючи органосилан у-глицидоксипропіл триметоксисилан (1095 об./06б.) у безводному толуолі, 4 -
Сг» диметиламінопіридині (1,25г/л) і триетиламіні (195 об./0б.). Суміш піддають дефлегмації впродовж 4 годин, а потім відстоюють впродовж ночі при кімнатній температурі. Перед твердінням впродовж 4 годин при 1207С о субстрати промивають толуолом і ацетоном. 2 Після твердіння субстрати розміщують в контейнери і зберігають при кімнатній температурі до тих пір, поки сульфамідні антитіла не будуть нанесені у вигляді плям, Сульфамідні антитіла наносять у вигляді плям, використовуючи дозуючий пристрій ВІОБОТ ХУЗООО. Аналізу піддають 12 сульфамідів: сульфадоксин, сульфаметіозол, сульфахлорпіридазин, сульфаметоксіпіридазин, сульфамеразин, сульфапіридин, сульфасоксазол, сульфатіазол, сульфаметазин, сульфахіноксалін, сульфадіметоксин і сульфадіазин.
ІФ) Для кожного сульфонамідного антитіла відмірюваний об'єм складає приблизно 20нл. 12 сульфонамідних ко антитіл, що створюють 12 дискретних ділянок на субстраті площею см 2, інкубують на протязі 2 годин при 37"С. Субстрати промивають фосфатно-буферним соляним розчином (рН 7,2), який має у своєму складі 295 60 казеїну (мас./об.), а потім блокують в цьому ж буферному розчині впродовж ночі при 2 - 8"С. Після промивання вказаним розчином, якийО має у своєму складі РЕС 300 (0,0595 об./об.), пристрій розміщують в носій.
Мульти-сульфонамідні стандарти (200Мл) і суміш сульфонамідних кон'югатів пероксидази хріну (100Мл) розміщують в реакційні виїмки, які має пристрій, в установленому порядку, і інкубують впродовж 15 хвилин при кімнатній температурі. Стандарти містять 5, 10, 50 і 100 нг/мл для кожного з 12 сульфамідів. 65 Потім мульти-сульфонамідні пристрої промивають фосфатно-буферним соляним розчином (« лоліетиленгліколевим буфером для видалення надлишку реагентів | на кожен пристрій наносять по 300 Мл хемілюмінесцентного субстрату |люоминол (1,4ММ)/перекис водню сечовини (9,6мММ)| Пристрої відображують, використовуючи камеру пристрою з зарядовим зв'язком з витримкою до 4 хвилин. Для кожного із 12 окремих сульфонамідів одержують стандартні криві. Калібровочні криві для кожного із 12 окремих сульфонамідів показані графічно на фіг.15. Процентна величина В/Во, відкладена на осі У, показує в 95 інгібування величини нульового стандарту відносної світлової одиниці, викликаного кожним окремим сульфонамідним стандартом (відкладеним на осі Х як 10910).
Приклад 2. Аналіз гормону.
У цьому прикладі проводять мульти-аналітний аналіз трьох гормонів з високою молекулярною масою, а саме 7/0 пролактину, фолікулостимулюючого гормону і лютеїнізуючого гормону. Цей приклад ілюструє мульти-аналітний аналіз багатошарового імуноаналізу. В процесі визначення трьох гормонів на одній і тій же панелі значних перехресних реакцій не спостерігається.
Процедури попередньої хімічної обробки і силанизування проводять так само, як описано в Прикладі 1.
Моноклональні антитіла пролактину, фолікулостимулюючого гормону або лютеїнізуючого гормону (відмірюють приблизно 2Онл антитіла) іммобілізують на дискретних ділянках хімічно модифікованого субстрату.
Мультианалітні аналізи проводять як на кремнієвих, так і на керамічних субстратах, при цьому епоксидна поверхня така ж, як описано у Прикладі 1. 150цл складного стандарту на основі сироватки трьох вищезазначених гормонів і 150Мл буферного розбавлюючого розчину додають до пристрою і інкубують на протязі 15 хвилин при кімнатній температурі. Після стадії промивання додають ЗО0Мл загальної суміші кон'югатів пероксидази із хріну лютеїнізуючого гормону, пролактину і фолікулостимулюючого гормону, і інкубують на протязі 15 хвилин. Потім пристрій промивають з метою видалення надлишку реагентів і наносять хемілюмінесцентний реагент |(люмінол (1,4мММ) / перекис водню сечовини (9,6мММ)). Пристрій відображають в камері пристрою з зарядовим зв'язком з витримкою до 4 хвилин.
Після обробки зображень відкладають стандартні криві для кожного гормону. с
Приклад 3. Аналіз сульфаміду.
На відміну від Прикладу 1, мульти-сульфамідний аналіз також проводять, використовуючи мікрожолобки. о
Пристрій показаний на фіг.11. У цьому прикладі резервуари 21 для додавання реагентів мають розміри 2мм х 2мм і глибину ЗООМм (об'єм 1,2Мл), канали 23 мають довжину 5мм, ширину 200Мм і глибину 100Мм (об'єм 100нл), а резервуар 24 має розмір 1,9мм х 8,6Мм і глибину ЗООМм ( об'єм 4,9Мл). Га»)
Хімічне модифікування поверхні здійснюють так, як описано у Прикладі 1. У кожен із жолобків вносять по одному антитілу і інкубують на протязі 2 годин при 37"С. Потім субстрати блокують і промивають, як у Прикладі - 1. -
Змішують мульти-сульфамідний стандарт (200Мл) і кон'югати сульфамідної пероксидази із хріну (100Мл) По 1Мл реагента, що утворюється, добавляють за допомогою піпетки у кожний резервуар, забезпечуючи таким З
ЧИНОМ жолобок, покритий антитілом, для кожного сульфаміду Стандарти, як і належить бути, мають 10 або ю 10Онг/мл всіх сульфамідів.
Реагент тече завдяки капілярній дії. Після інкубування на протязі 2 хвилин пристрій промивають 5 разів фосфатно-буфернимо соляним розчином / поліетиленгліколем, потім добавляють хемілюмінесцентний реагент (люминол (1,4мМ) / перекис водню сечовини (9,бмМ))|. «
Пристрій відображують в камері пристрою з зарядовим зв'язком з витримкою до 4 хвилин. Процентні шщ с величини В/Во для чотирьох сульфамідних кривих наведені в Таблиці 1.
І»
Сульфамід 15 сл т ї» , , , , , . о Користь цього винаходу у порівнянні з фотолітографією показана за допомогою ступеню неспецифічної о адсорбції біологічних молекул на фотолабільному (обробленому бензофеноном) субстраті. Результати наведені в Таблиці 2.
Ф. юю
Мишачий дб визначають, використовуючи кон'югат антимишачої пероксидази із хріну з застосуванням 60 хемілюмінесцентного виявлення за допомогою камери пристрою з зарядовим зв'язком. Кремнієві або керамічні субстрати, які мають іммобілізований бензофеноновий фотолабільний зшивальний агент, не повинен зв'язувати мишачий дос під час реакції при відсутності світла. Однак відбувається неспецифічне зв'язування, оскільки приблизно 8095 середньої відносної світлової одиниці, яку одержують при проведенні зв'язування мишачого дО при УФ світлі, виникає завдяки пасивним взаємодіям зв'язування. Ряд біологічних молекул, які іммобілізуються бо через ковалентну взаємодію, згідно з цим винаходом явно більш чітко визначений.
Очевидність ковалентного приєднання наведена в прикладах, описаних нижче. У першому випадку керамічні субстрати силанізують АРТЕ5, а потім піддають реакції з біотин-ї С-сульфо МН. Контрольний керамічний субстрат не силанізують АРТЕБЗ, тому відсутні термінальні нуклеофільні МН.- групи для реакції з сукцинімідиловим ефіром похідного біотину Ці субстрати потім піддають реакції з кон'югатом авідину і флуорецинізоціаноту, а флюоресценцію визначають за допомогою камери пристрою з зарядовим зв'язком.
Результати наведені в Таблиці 3. ! сек.) сек.) вм опорно силу рєвиятю юю 100 ва 0111105
Говюцоми тет
Це ясно показує специфічну іммобілізацію біотину-ЇС-МНЗ. Максимальна концентрація іммобілізованого біотину - ЇС-МН5 становить приблизно 100Омг/мл, оскільки показник відносної світлової одиниці для 500Мг/мл субстрату не змінився.
В наступному прикладі керамічні субстрати, силанізовані АРТЕ5З, піддають реакції з дигідразидним зшивальним агентом. Сульфамідні антитіла обробляють періодатом натрію з метою надання їм реактивності по відношенню до гідразидного зшивального агента. Контрольні сульфамідні антитіла піддають простому діалізу проти буферного розчину ацетату натрію, який має рН 5,5. Значення відносної світлової одиниці наведені в
Таблиці 4 (необроблені) і Таблиці 5 (оброблені періодатним способом). Результати чітко показують, що гідразидний зшивальний агент успішно зв'язується з керамічною поверхнею. Контрольні антитіла (без періодатного активування) дали дуже погані стандартні криві у порівнянні з ковалентна іммобілізованими с 29 сульфамідними антитілами. о
Процентні величини зв'язування завдяки ковалентним або пасивним взаємодіям порівнюються в Таблицях 6 і 7. На ковалентну взаємодію у середньому припадає 81,895 всього зв'язування, що чітко вказує на ковалентне зв'язування сульфамідних антитіл. «в) зо о
Супьфадоюин о 00000вє00вео 051 бевияалею -
Сульфаметиюи 00050360 «
Супьфакортравидино баб 006520 зв Супьофаметокситіридазин 1066000 ві ю (Сульфесоюазол 004879 00108 023 Невиявлено, -
Сульфатяют 00000262 08мо 0800 «
Сульфеметями 00 Бевиявлено виявлено 2000 З з с (сульфадиметоксин 0 804 (Невиявлено, 00081197 ;»
Ф г
Супьфаклоріридазих 24944 75650300 209608 ть о
Сульфасоюяют 00519 ббве0 2702209 с 29
Ф) о во б5 Сульфамеразин 82,7 17,3 бульфаметяаин 10
Сульфехноюали 0000298 о |онтшт о Гонти 2
Ковалентна іммобілізація: Пряме нанесення плям на глицидоксисиланову поверхню.
Пасивна іммобілізація: Пряме нанесення плям на поверхню, оброблену дихлордиметилсиланом. о)
Очевидно, що ковалентний метод дає більш високі результати у порівнянні з пасивним методом. Результати пасивного методу можна збільшити приблизно в 2 рази шляхом попередньої кислотної обробки сульфамідних антитіл, але вони все ж таки нижчі, ніж результати ковалентного методу. о зо Також проводиться підтверджуючий аналіз хімічно модифікованого кремнію і керамічних субстратів з використанням рентгенофотонної спектроскопії. Були записані оглядові спектри двох довільних ділянок кожного о зразка субстратів, які призначені для визначення хімічного складу їх поверхонь. Результати наведені в Таблиці « 8 (в атомних процентах). « з ю
С ввяюю0000000 дпяна| с|о|в|л|нісіся
Кремнієвий субстрат (необроблений) роя ее ватіава 0-11 2 зовюрво
Кремнієвий субстрат, Го БББ38ИМОБ| - 102065 - | « ю силанізований АРТЕВ (2 55622509 - ОБО, - | З7З с я візіаввизо| 7229 5 ревовотая, тва ; т Кремнієвий субстрат АРТЕЗ оброблений я вв 25ОЇе6| - ви о - ет 2 вввімтев - бо
Керамічний субстрат (необроблений) о етовзитзиза - Ав т 2 ртливе вва лот
Керамічний субстат, 00000011 Мтореза ле ва! 2 силанізованийАРТЕВ 00000002 Белз за 5я ь ЛИ доденизвня зт 2 Блозовтт оз. («в) о Аналіз атомного складу показує дуже хорошу конверсію батьківського силікону і керамічних субстратів за допомогою органосилану АРТЕ5 з хорошою відтворюванютю складу поверхні двох досліджуваних ділянок для кожного зразка. Субстрати, мічені ФІТЦ, показують 7095 і 7795 маркування кремнію і керамічного матеріалу 5Б відповідно.
Кількісні методи флуоресцентного вимірювання на темному кремнієвому субстраті порівнюють з (Ф) результатами, одержаними на білому керамічному (оксид алюмінію) субстраті. Результати по відносній світловій ка одиниці, одержані за допомогою пристрою з зарядовим зв'язком для флуоресцентних молекул (ФІТЦ), ковалентне зв'язаних з кожним субстратом, порівнюють з кількісним методом після видалення ФІТЦ -молекул, бор Використовуючи метод Ноок та інші (І апдтиїг 1991, том 7, 142 - 151).
Таблиця 9
Субстрат |Час витримки зарядно-з'єднувального пристрою (сек)| Середнє |Кількість видолених ФІТЦ - молекул/субстрат о
Кількісний аналіз флуоресцентної позначки, одержаної в результаті видалення ФІТЦ - маркування від субстрату і вимірювання сигналу за допомогою камери пристрою з зарядовим зв'язком показують, що, незважаючи на 1000-кратне збільшення сигналу керамічного матеріалу порівняно з кремнієм, дійсно спостерігається значно більша кількість ФІТЦ - молекул на кремнієвому субстраті.
Це явище далі ілюструється прикладами, наведеними в Таблиці 10, одержаними в результаті аналізу, який проводиться на кремнієвих і керамічних субстратах з використанням флуоресцентних латексних часток, пов'язаних з пролактиновим антитілом, яке використовується як визначальна система. Наводиться також / величина відносних світлових одиниць (витримка 2О0сек.). з
Властивості керамічного матеріалу забезпечують вищі результати по-кремнію при використанні цього методу флуоресцентного визначення. В подальшому проблеми дії темного тіла на кремній при використанні флуоресценції можна вирішити шляхом використання хемілюмінесценції як методу виявлення. При порівнянні ідентичних аналізів фолікулостимулюючого гормону, які проводяться на кремнії і керамічному матеріалі з використанням хемілюмінесцентного визначення, останній потребував в два рази більшого часу витримки, ніж керамічний матеріал, для одержання такої ж величини відносної світлової одиниці.
В описі використані такі скорочення:
АРТЕЗ - амінопропілтриетоксисилан; с 29 СК - МВ - субодиниця, що створює фермент МВ (кіназа); ге)
НЕКРО - піроксидаза хріну;
І С - сульфо - МН5З -сульфо - М - гідроксисукцинімід з довгим ланцюгом;
РІТС - ізотіокарбамат флуоресцеїну. «в)
Claims (25)
1. Твердий пристрій для проведення мультианалітних аналізів, який включає субстрат і множину дискретних « реакційних сайтів, кожний з яких має ліганд, ковалентно зв'язаний з поверхнею субстрату, який відрізняється Зо тим, що ділянки поверхні субстрату, які знаходяться між реакційними сайтами, є інертними по відношенню до Щео, аналіту, при цьому вказаний пристрій отриманий за допомогою процесу, що включає активування всієї вказаної поверхні субстрату, надання гідрофобності вказаним ділянкам між реакційними сайтами, і нанесення ряду лігандів на вказані дискретні ділянки поверхні у воді таким чином, що вказані ліганди не наносяться на « вказані гідрофобні ділянки між реакційними сайтами.
2. Пристрій по п. 1, який відрізняється тим, що поверхня субстрату є нерівномірною. о)
с З. Пристрій по п. 2, який відрізняється тим, що вказаний субстрат включає в себе ряд реакційних жолобків, "» виступів, стовпчиків, плям, камер, поглиблень, западин або виїмок.
" 4. Пристрій по будь-якому з пп. 1-3, який відрізняється тим, що субстрат складається з керамічного матеріалу, скла, кварцу або кремнію.
5. Пристрій по будь-якому з пп. 1-4, який відрізняється тим, що його площа складає менше за 1 см, іні
6. Пристрій по будь-якому з пп. 1-5, який відрізняється тим, що площа кожного реакційного сайта складає ї» менше за 1 мм.
7. Пристрій по п. 1, який відрізняється тим, що отриманий за допомогою процесу, що включає активування те всієї вказаної поверхні субстрату, надання гідрофобності вказаним ділянкам між реакційними сайтами і о 20 нанесення ряду лігандів на вказані дискретні ділянки поверхні у воді таким чином, що вказані ліганди не наносяться на вказані гідрофобні ділянки між реакційними сайтами.
с 8. Пристрій по п. 7, який відрізняється тим, що він містить ліганди, нанесені на поверхню, активовану органосиланом.
9. Пристрій по п. 8, який відрізняється тим, що органосилан має формулу (КО)з5і - (СНо)п - Х, де кожний К 99 являє собою гідрокарбильну групу, п - ціле число, а Х є функціональною групою. ГФ)
10. Пристрій по п. 8 або 9, який відрізняється тим, що він містить біфункціонально зшиваючий агент для з полегшення ковалентного приєднання біологічних лігандів до органосилану.
11. Пристрій по будь-якому з пп. 8-10, який відрізняється тим, що як біфункціональний зшиваючий агент він містить фотолабільний зшиваючий агент, який використовують для реакції з органосиланом. 60
12. Пристрій по п. 1, який відрізняється тим, що він містить ліганди, іммобілізовані на поверхні, дериватизованій макромолекулами.
13. Пристрій по будь-якому з пп. 1-12, який відрізняється тим, що додатково включає ліганди, зв'язуючі матеріали, присутність яких заважає аналізу аналіту.
14. Пристрій по п. 1, який відрізняється тим, що для виявлення аналіту воно містить хемолюмінесцентну бо систему визначення з використанням пристрою із зарядовим зв'язком із заднім освітленням, придатну для виявлення світла, що випромінюється хемолюмінесцентною світловою реакцією, при якій довжина хвилі світла, що виявляється, складає менше за 450 нм.
15. Пристрій по п. 1, який відрізняється тим, що як аналіти воно містить антибіотики, гормони, маркери берцевих порушень, маркери інфекційних захворювань, маркери алергії, лікарські засоби ферментів, що зловживаються, віруси, нуклеотиди і пептиди.
16. Пристрій по п. 1, який відрізняється тим, що він містить аналіти, які вводять в зразки суцільної крові, сироватки, плазми, сечі, калу, жовчі, тканини або їжі.
17. Система для мультианалітного аналізу, який відрізняється тим, що включає пристрій по будь-якому з пп.
7/0.1-13, трансляційну платформу, систему для обробки зразка, систему для подачі рідкого реагенту, темну коробку з температурою, що контролюється, камеру пристрою із зарядовим зв'язком і прилад для обробки зображень.
18. Пристрій по п. 1, який відрізняється тим, що субстрат є керамічним.
19. Пристрій по п. 12, який відрізняється тим, що вказані макромолекули вибрані з групи, що складається з полістиролових латексних частинок, дендримерів і поліетиленгліколю, що містить хімічні групи, що полегшують /5 Ковалентне приєднання лігандів.
20. Спосіб проведення мультианалітного аналізу, що полягає в тому, що вводять зразок, що піддається мультианалітному аналізу, в контакт з пристроєм по п. 1 і визначають реакційні сайти, в яких аналіт зв'язаний і/або незв'язаний.
21. Спосіб формування твердого пристрою для проведення мультианалітних аналізів, який включає субстрат | множину дискретних реакційних сайтів, кожний з яких має ліганд, ковалентно зв'язаний з поверхнею субстрату, причому ділянки поверхні субстрату, які знаходяться між реакційними сайтами, є інертними по відношенню до аналіту, який полягає в тому, що активують всю вказану поверхню субстрату, надають гідрофобність вказаним ділянкам між реакційними сайтами і наносять ряд лігандів на вказані дискретні ділянки поверхні у воді таким чином, що вказані ліганди не наносяться на вказані гідрофобні ділянки між реакційними сайтами. сч
22. Спосіб формування твердого пристрою для проведення мультианалітних аналізів, що включає субстрат і множину дискретних реакційних сайтів, кожну з яких має ліганд, ковалентно зв'язаний з поверхнею субстрату, і) причому ділянки поверхні субстрату, які знаходяться між реакційними сайтами, є інертними по відношенню до аналіту, що полягає в тому, що активують всю вказану поверхню субстрату, блокують вказані ділянки між реакційними сайтами і наносять ряд лігандів на вказані дискретні ділянки поверхні у воді таким чином, що о зо вказані ліганди не наносяться на вказані блоковані ділянки між реакційними сайтами.
23. Твердий пристрій для проведення мультианалітних аналізів, який включає субстрат, що має щонайменше о одну активовану поверхню і безліч дискретних реакційних сайтів, кожний з яких має ліганд, ковалентно «Е зв'язаний з поверхнею субстрату, який відрізняється тим, що ділянки поверхні субстрату, які знаходяться між реакційними сайтами, є інертними по відношенню до аналіту. «
24. Твердий пристрій по п. 23, який відрізняється тим, що вказані ділянки поверхні субстрату, які ю знаходяться між реакційними сайтами, є гідрофобними.
25. Твердий пристрій по п. 23, який відрізняється тим, що вказаний субстрат є керамічним.
- . и? 1 щ» щ» («в) (42) іме) 60 б5
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP97302707 | 1997-04-21 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA54400C2 true UA54400C2 (uk) | 2003-03-17 |
Family
ID=8229307
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA98041977A UA54400C2 (uk) | 1997-04-21 | 1998-04-20 | Твердий пристрій для проведення мультианалітних аналізів, спосіб його формування і система, що включає такий пристрій |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6498010B1 (uk) |
| JP (1) | JP4209494B2 (uk) |
| KR (1) | KR100585548B1 (uk) |
| CN (1) | CN1178063C (uk) |
| AR (1) | AR015110A1 (uk) |
| AT (1) | ATE289684T1 (uk) |
| AU (1) | AU713388B2 (uk) |
| BR (1) | BR9800655A (uk) |
| CA (1) | CA2235183C (uk) |
| CZ (1) | CZ297165B6 (uk) |
| DE (1) | DE69829089T3 (uk) |
| EG (1) | EG22471A (uk) |
| ES (1) | ES2238750T5 (uk) |
| GB (1) | GB2324866B (uk) |
| GE (1) | GEP20022846B (uk) |
| HK (1) | HK1012202A1 (uk) |
| HR (1) | HRP980215A2 (uk) |
| HU (1) | HU220777B1 (uk) |
| ID (1) | ID20179A (uk) |
| MY (1) | MY114814A (uk) |
| NO (1) | NO981766L (uk) |
| NZ (1) | NZ330227A (uk) |
| PL (1) | PL325914A1 (uk) |
| PT (1) | PT874242E (uk) |
| RU (1) | RU2168174C2 (uk) |
| SG (1) | SG87765A1 (uk) |
| SK (1) | SK283340B6 (uk) |
| TR (1) | TR199800737A1 (uk) |
| TW (1) | TWI225928B (uk) |
| UA (1) | UA54400C2 (uk) |
| YU (1) | YU49328B (uk) |
| ZA (1) | ZA983345B (uk) |
Families Citing this family (76)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ297165B6 (cs) * | 1997-04-21 | 2006-09-13 | Randox Laboratories Ltd. A British Company Of Ardmore | Zpusob výroby zarízení s pevnou fází k provádení multianalytních rozboru |
| US20060029926A1 (en) * | 1998-05-06 | 2006-02-09 | Metrika, Inc. | Blocking compositions for immunoassays |
| JP4261661B2 (ja) * | 1999-01-28 | 2009-04-30 | キヤノン株式会社 | プローブ結合基板、プローブ結合基板の製造方法、プローブアレイ、標的物質の検出方法、サンプル中の一本鎖核酸の塩基配列を特定する方法、及びサンプル中の標的物質の定量方法 |
| US6326083B1 (en) * | 1999-03-08 | 2001-12-04 | Calipher Technologies Corp. | Surface coating for microfluidic devices that incorporate a biopolymer resistant moiety |
| ATE420365T1 (de) * | 1999-07-14 | 2009-01-15 | Spectral Diagnostics Inc | Präparierung von sphären für diagnostische tests |
| AUPR005600A0 (en) * | 2000-09-12 | 2000-10-05 | University Of Sydney, The | Diagnostic assay |
| GB0027064D0 (en) * | 2000-11-06 | 2000-12-20 | Randox Lab Ltd | Multi-analyte immunoassay |
| US6649078B2 (en) * | 2000-12-06 | 2003-11-18 | The Regents Of The University Of California | Thin film capillary process and apparatus |
| GB0102357D0 (en) | 2001-01-30 | 2001-03-14 | Randox Lab Ltd | Imaging method |
| WO2003006676A2 (en) | 2001-07-13 | 2003-01-23 | Nanosphere, Inc. | Method for immobilizing molecules onto surfaces |
| GB0120202D0 (en) | 2001-08-18 | 2001-10-10 | Psimedica | Body fluid collection and analysis |
| US7097882B2 (en) * | 2001-08-21 | 2006-08-29 | Samsung Sdi Co., Ltd. | Substrate for immobilizing physiological material, and method of fabricating same |
| GB0124338D0 (en) | 2001-10-10 | 2001-11-28 | Randox Lab Ltd | Biochips |
| US6780602B2 (en) * | 2001-11-01 | 2004-08-24 | Microbiosystems, Limited Partnership | Taxonomic identification of pathogenic microorganisms and their toxic proteins |
| KR100450191B1 (ko) * | 2001-12-28 | 2004-10-02 | 삼성에스디아이 주식회사 | 생체물질 고정용 기판 및 이의 제조방법 |
| CN1650166A (zh) * | 2002-04-12 | 2005-08-03 | 迈克纳斯公司 | 将分子固定在表面上的方法 |
| US20030208936A1 (en) * | 2002-05-09 | 2003-11-13 | Lee Charles Hee | Method for manufacturing embroidery decorated cards and envelopes |
| US20040115830A1 (en) * | 2002-09-25 | 2004-06-17 | Igor Touzov | Components for nano-scale Reactor |
| US7070922B2 (en) * | 2002-12-04 | 2006-07-04 | International Business Machines Corporation | Surface treatment |
| US20040129676A1 (en) * | 2003-01-07 | 2004-07-08 | Tan Roy H. | Apparatus for transfer of an array of liquids and methods for manufacturing same |
| US6972148B2 (en) | 2003-06-23 | 2005-12-06 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Glove having improved donning characteristics |
| US7407630B2 (en) | 2003-09-19 | 2008-08-05 | Applera Corporation | High density plate filler |
| US8277760B2 (en) | 2003-09-19 | 2012-10-02 | Applied Biosystems, Llc | High density plate filler |
| US9492820B2 (en) | 2003-09-19 | 2016-11-15 | Applied Biosystems, Llc | High density plate filler |
| US7998435B2 (en) | 2003-09-19 | 2011-08-16 | Life Technologies Corporation | High density plate filler |
| US7695688B2 (en) * | 2003-09-19 | 2010-04-13 | Applied Biosystems, Llc | High density plate filler |
| JP4814103B2 (ja) | 2003-11-12 | 2011-11-16 | バイオ−ラッド・ハイファ・リミテッド | アレイフォーマットにおいて複数の結合反応を実行するためのシステムおよび方法 |
| JP2007531862A (ja) * | 2003-12-31 | 2007-11-08 | カウンシル オブ サイエンティフィク アンド インダストリアル リサーチ | 農薬分析のための方法およびキット |
| US20090010819A1 (en) * | 2004-01-17 | 2009-01-08 | Gyros Patent Ab | Versatile flow path |
| US8592219B2 (en) | 2005-01-17 | 2013-11-26 | Gyros Patent Ab | Protecting agent |
| ES2332523T3 (es) * | 2004-02-09 | 2010-02-08 | Rapid Pathogen Screening Inc. | Metodo para el diagnostico rapido de blancos en fluidos corporales humanos. |
| US20140031249A1 (en) * | 2004-07-20 | 2014-01-30 | Sqi Diagnostics Systems Inc. | Multiplex measure of isotype antigen response |
| US7229782B1 (en) | 2004-08-03 | 2007-06-12 | Labone, Inc. | Antibodies specific to multiple beta blockers and methods for their use |
| EP1657235B1 (en) | 2004-11-10 | 2011-09-21 | Randox Laboratories Ltd. | Phenethanolamine-derived haptens, immunogens and conjugates comprising them and antibodies recognising said immunogenes and conjugates |
| FR2879483B1 (fr) * | 2004-12-20 | 2007-04-27 | Commissariat Energie Atomique | Procede pour augmenter l'hydrophobicite d'un revetement externe d'un dispositif d'analyse, tel qu'une biopuce, un tel dispositif et procedes pour sa fabrication |
| US7396689B2 (en) * | 2005-02-04 | 2008-07-08 | Decision Biomarkers Incorporated | Method of adjusting the working range of a multi-analyte assay |
| US8445293B2 (en) * | 2005-02-09 | 2013-05-21 | Rapid Pathogen Screening, Inc. | Method to increase specificity and/or accuracy of lateral flow immunoassays |
| EP1712914A1 (fr) * | 2005-04-14 | 2006-10-18 | Unisensor S.A. | Procédé in vitro pour la detection et l'identification simultanées d'antibiotiques de classes differentes et trousse de diagnostic correspondante |
| EP1787699A1 (en) * | 2005-11-17 | 2007-05-23 | Vicam, L.P. | Multi-analyte affinity column |
| KR100722321B1 (ko) | 2005-12-28 | 2007-05-28 | 성균관대학교산학협력단 | 모세관력 리소그래피와 자기조립단분자막을 이용한 단백질패턴 형성 방법 및 이를 이용하여 제조된 단백질칩 |
| US8084765B2 (en) * | 2007-05-07 | 2011-12-27 | Xerox Corporation | Electronic device having a dielectric layer |
| EP3543357A1 (en) | 2007-05-08 | 2019-09-25 | Trustees of Boston University | Chemical functionalization of solid-state nanopores and nanopore arrays and applications thereof |
| JP5255247B2 (ja) * | 2007-09-04 | 2013-08-07 | 富士フイルム株式会社 | 基質の結合と反応生成物を同時に検出できるバイオセンサー |
| WO2009136613A1 (ja) | 2008-05-08 | 2009-11-12 | 株式会社 日立ハイテクノロジーズ | 自動分析装置 |
| JP5415538B2 (ja) | 2008-07-16 | 2014-02-12 | チルドレンズ メディカル センター コーポレーション | マイクロチャネルを有する臓器模倣装置ならびにその使用および製造方法 |
| ES2572377T3 (es) | 2009-07-29 | 2016-05-31 | Randox Laboratories Ltd | Método para la detección de la presencia, o el riesgo, de cáncer de vejiga |
| CA2808576A1 (en) | 2009-09-30 | 2011-04-07 | Quantapore, Inc. | Ultrafast sequencing of biological polymers using a labeled nanopore |
| US20140199764A1 (en) * | 2011-05-09 | 2014-07-17 | President And Fellows Of Harvard College | Microfluidic module and uses thereof |
| US9566560B2 (en) * | 2011-10-06 | 2017-02-14 | Illumina, Inc. | Array domains having rotated patterns |
| WO2013086486A1 (en) | 2011-12-09 | 2013-06-13 | President And Fellows Of Harvard College | Integrated human organ-on-chip microphysiological systems |
| GB201214440D0 (en) | 2012-08-13 | 2012-09-26 | Randox Lab Ltd | Kidney disease biomarker |
| US20140072959A1 (en) | 2012-09-12 | 2014-03-13 | Force Diagnostics, Inc. | Rapid tests for insurance underwriting |
| GB201218570D0 (en) | 2012-10-16 | 2012-11-28 | Randox Lab Ltd | Method |
| US9651539B2 (en) | 2012-10-28 | 2017-05-16 | Quantapore, Inc. | Reducing background fluorescence in MEMS materials by low energy ion beam treatment |
| US9862997B2 (en) | 2013-05-24 | 2018-01-09 | Quantapore, Inc. | Nanopore-based nucleic acid analysis with mixed FRET detection |
| BE1022360B1 (fr) * | 2013-11-19 | 2016-03-24 | Tekinvest Sprl | Puits de microplaque, support de maintien et procede pour la detection d'analytes |
| US10288618B2 (en) * | 2014-04-09 | 2019-05-14 | Randox Laboratories Ltd. | Diagnosis of cancer by detecting dimeric IL-18 |
| WO2015161219A1 (en) * | 2014-04-17 | 2015-10-22 | SFC Fluidics, Inc. | Microdialysis platform |
| ES2686736T3 (es) | 2014-07-01 | 2018-10-19 | Randox Laboratories Ltd. | Combinaciones de biomarcadores para su uso en la detección del cáncer de páncreas |
| US9885079B2 (en) | 2014-10-10 | 2018-02-06 | Quantapore, Inc. | Nanopore-based polymer analysis with mutually-quenching fluorescent labels |
| WO2016065339A1 (en) | 2014-10-24 | 2016-04-28 | Quantapore, Inc. | Efficient optical analysis of polymers using arrays of nanostructures |
| CN112881728A (zh) | 2015-07-15 | 2021-06-01 | Hycor生物医学有限责任公司 | 可定制仪器 |
| GB201519142D0 (en) | 2015-10-29 | 2015-12-16 | Randox Lab Ltd | Method |
| GB201520341D0 (en) * | 2015-11-18 | 2015-12-30 | Randox Lab Ltd And Randox Teoranta | Improvements relating to substrates for the attachment of molecules |
| US20190154672A1 (en) | 2016-06-30 | 2019-05-23 | Randox Laboratories Ltd. | Measurement of fabp for diagnosis |
| US10823721B2 (en) | 2016-07-05 | 2020-11-03 | Quantapore, Inc. | Optically based nanopore sequencing |
| GB201818744D0 (en) | 2018-11-16 | 2019-01-02 | Randox Laboratories Ltd | Detection of bladder cancer |
| GB201910730D0 (en) | 2019-07-26 | 2019-09-11 | Randox Teoranta | Bovine Pathogen Array |
| GB201916186D0 (en) | 2019-11-07 | 2019-12-25 | Randox Laboratories Ltd | Biomarkers for aiding in the diagnosis of mental disorders |
| GB202014755D0 (en) | 2020-09-18 | 2020-11-04 | Randox Laboratories Ltd | Methods to determine coronavirus infectivty status |
| GB202019663D0 (en) | 2020-12-14 | 2021-01-27 | Randox Laboratories | Predictive biomarkers for risk of bladder cancer in diabetes patients |
| GB202104287D0 (en) | 2021-03-26 | 2021-05-12 | Randox Laboratories | Method for determining prognosis of chronic kidney disease |
| GB202111635D0 (en) | 2021-08-13 | 2021-09-29 | Randox Laboratories | Risk prediction model for prostate cancer |
| GB202114088D0 (en) | 2021-10-01 | 2021-11-17 | Randox Laboratories | Detection of bladder cancer in males |
| GB202203639D0 (en) | 2022-03-16 | 2022-04-27 | Randox Laboratories Ltd | Standardisation method for glycosylation arrays |
| GB202204413D0 (en) | 2022-03-29 | 2022-05-11 | Randox Laboratories Ltd | Markers for progression of inflammatory liver disease |
Family Cites Families (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0063810B1 (en) * | 1981-04-29 | 1986-03-05 | Ciba-Geigy Ag | New devices and kits for immunological analysis |
| SE431620B (sv) | 1982-07-07 | 1984-02-20 | Stojan Popovic | Suganordning, speciellt avsedd att anvendas som tennsug vid lodningsarbeten |
| US4591570A (en) * | 1983-02-02 | 1986-05-27 | Centocor, Inc. | Matrix of antibody-coated spots for determination of antigens |
| GB8314523D0 (en) * | 1983-05-25 | 1983-06-29 | Lowe C R | Diagnostic device |
| US4745075A (en) * | 1984-09-06 | 1988-05-17 | Burroughs Wellcome Co. | Diagnostic test methods |
| US4829010A (en) * | 1987-03-13 | 1989-05-09 | Tanox Biosystems, Inc. | Immunoassay device enclosing matrixes of antibody spots for cell determinations |
| GB8803000D0 (en) * | 1988-02-10 | 1988-03-09 | Ekins Roger Philip | Determination of ambient concentrations of several analytes |
| SU1696399A1 (ru) | 1988-07-01 | 1991-12-07 | Государственный научно-исследовательский и проектный институт по обогащению руд цветных металлов "Казмеханобр" | Способ очистки сточных вод от ионов т желых металлов |
| WO1990001564A1 (en) * | 1988-08-09 | 1990-02-22 | Microprobe Corporation | Methods for multiple target analyses through nucleic acid hybridization |
| US5077210A (en) * | 1989-01-13 | 1991-12-31 | Eigler Frances S | Immobilization of active agents on substrates with a silane and heterobifunctional crosslinking agent |
| US5120662A (en) * | 1989-05-09 | 1992-06-09 | Abbott Laboratories | Multilayer solid phase immunoassay support and method of use |
| US5474796A (en) * | 1991-09-04 | 1995-12-12 | Protogene Laboratories, Inc. | Method and apparatus for conducting an array of chemical reactions on a support surface |
| FR2693740B1 (fr) | 1992-07-17 | 1994-10-14 | Univ Joseph Fourier | Procédé de détection tissulaire ou cellulaire mettant en Óoeuvre des réactifs chimiluminescents. |
| EP0653065B1 (en) | 1992-08-03 | 2002-10-30 | Marconi Optical Components Limited | Separation method |
| JPH06148188A (ja) * | 1992-11-13 | 1994-05-27 | Olympus Optical Co Ltd | 免疫学的再検査方法 |
| EP0692096A1 (en) * | 1993-03-30 | 1996-01-17 | Terrapin Technologies, Inc. | Determination of concentration by affinity titration and competitive displacement in drug delivery |
| WO1994027137A2 (en) * | 1993-05-18 | 1994-11-24 | University Of Utah Research Foundation | Apparatus and methods for multianalyte homogeneous fluoroimmunoassays |
| GB9325100D0 (en) * | 1993-12-07 | 1994-02-02 | Univ Court Of The University O | Device |
| US5814565A (en) * | 1995-02-23 | 1998-09-29 | University Of Utah Research Foundation | Integrated optic waveguide immunosensor |
| US5624711A (en) * | 1995-04-27 | 1997-04-29 | Affymax Technologies, N.V. | Derivatization of solid supports and methods for oligomer synthesis |
| EP0768530A1 (en) * | 1995-10-16 | 1997-04-16 | Nippon Paint Co., Ltd. | Process for assaying biological substance |
| CZ297165B6 (cs) * | 1997-04-21 | 2006-09-13 | Randox Laboratories Ltd. A British Company Of Ardmore | Zpusob výroby zarízení s pevnou fází k provádení multianalytních rozboru |
| EP0874242B2 (en) * | 1997-04-21 | 2009-06-03 | Randox Laboratories Ltd. | Device and apparatus for the simultaneous detection of multiple analytes |
-
1998
- 1998-04-17 CZ CZ0116998A patent/CZ297165B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1998-04-17 BR BR9800655A patent/BR9800655A/pt not_active Application Discontinuation
- 1998-04-20 PT PT98303019T patent/PT874242E/pt unknown
- 1998-04-20 GB GB9808309A patent/GB2324866B/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-20 RU RU98107571/13A patent/RU2168174C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-04-20 SG SG9800759A patent/SG87765A1/en unknown
- 1998-04-20 NZ NZ330227A patent/NZ330227A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-04-20 ES ES98303019T patent/ES2238750T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-20 CA CA002235183A patent/CA2235183C/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-20 AT AT98303019T patent/ATE289684T1/de not_active IP Right Cessation
- 1998-04-20 DE DE69829089T patent/DE69829089T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-20 NO NO981766A patent/NO981766L/no not_active Application Discontinuation
- 1998-04-20 AU AU61988/98A patent/AU713388B2/en not_active Expired
- 1998-04-20 UA UA98041977A patent/UA54400C2/uk unknown
- 1998-04-20 HU HU9800920A patent/HU220777B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1998-04-21 KR KR1019980014131A patent/KR100585548B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1998-04-21 ID IDP980597A patent/ID20179A/id unknown
- 1998-04-21 HR HR97302707.1A patent/HRP980215A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1998-04-21 YU YU17498A patent/YU49328B/sh unknown
- 1998-04-21 JP JP11068798A patent/JP4209494B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-21 AR ARP980101840A patent/AR015110A1/es active IP Right Grant
- 1998-04-21 CN CNB981152546A patent/CN1178063C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1998-04-21 PL PL98325914A patent/PL325914A1/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-04-21 EG EG34198D patent/EG22471A/xx active
- 1998-04-21 GE GEAP19984247A patent/GEP20022846B/en unknown
- 1998-04-21 ZA ZA983345A patent/ZA983345B/xx unknown
- 1998-04-21 MY MYPI98001772A patent/MY114814A/en unknown
- 1998-04-21 TW TW087106047A patent/TWI225928B/zh not_active IP Right Cessation
- 1998-04-21 SK SK510-98A patent/SK283340B6/sk unknown
- 1998-04-21 TR TR1998/00737A patent/TR199800737A1/xx unknown
- 1998-12-16 HK HK98113653A patent/HK1012202A1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-10-07 US US09/413,799 patent/US6498010B1/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2168174C2 (ru) | Твердое устройство для проведения мультианалитных анализов, способ его формирования и система, включающая такое устройство | |
| EP0874242B1 (en) | Device and apparatus for the simultaneous detection of multiple analytes | |
| FI76888B (fi) | Nya medel och foerpackningar foer immunologiska analyser. | |
| US5851840A (en) | Biotinsilane compounds and a binding matrix containing these compounds | |
| US20060286682A1 (en) | Surface treatment | |
| US4689310A (en) | Methods for attaching ligands or anti-ligands to a solid phase | |
| EP2631007A1 (en) | Device for parallelization and performance increase in microarray-immunoassays with solid, non-porous capture-zone | |
| US4791069A (en) | Methods for attaching ligands or anti-ligands to a solid phase | |
| JP2009122088A (ja) | 吸光物質含有コロイドシリカ粒子を用いた生体分子の検出ないしは定量方法 | |
| US7011955B1 (en) | Quantitative determination of analytes in a heterogeneous system | |
| JP2002530661A (ja) | 光学分析用の改善された感度を有するマルチウェルアセンブリ | |
| US20030108972A1 (en) | Tethered receptor-ligand reagent and assay | |
| JP2001228151A (ja) | 免疫クロマトグラフィー装置 | |
| MXPA98003102A (es) | Dispositivo y aparato para la deteccion simultanea de analitos multiples | |
| US20070292964A1 (en) | Measuring Equipment and Measuring Method | |
| JP2004535585A (ja) | バイオチップおよびその製造方法 | |
| Jin et al. | Optical protein chip as microarrays for protein interaction determination | |
| JPH01317389A (ja) | 生化学反応用担体およびその製造方法 | |
| Mahmoud | THE IMPACT OF DIFFUSION ON BIOCHEMICAL ASSAY KINETICS IN 3D-HYDROGEL MICROARRAYS | |
| JP2002221522A (ja) | 測定キット及びそれを用いた測定方法 | |
| CA2149537A1 (en) | Method for preparing calibration curves |