UA126847C2

UA126847C2 - Дизаміщені піразольні сполуки як інгібітори кетогексокінази

Info

Publication number: UA126847C2
Application number: UAA202106634A
Authority: UA
Inventors: Дейвід Ендрю Коутс; Дэйвид Эндрю Коутс; Тімоті Барретт Дарем; Тимоти Барретт Дарем; Річард Дуейн Джонстон; Ричард Дуэйн Джонстон; Стівен Марк Мейсі; Стивен Марк Мэйси; Патрік Джанп'єтро Спінацце; Патрик Джанпьетро Спинацце; Дуглас Річард Стак; Дуглас Ричард Стак; Джеймс Лі Тот; Джеймс Ли Тот
Original assignee: Елі Ліллі Енд Компані; Эли Лилли Энд Компани
Priority date: 2019-06-17
Filing date: 2020-06-16
Publication date: 2023-02-08
Also published as: ES2961283T3; BR112021023153A2; AU2020295979A1; ZA202109067B; CR20210600A; EP3983404A1; IL288350A; TW202112768A; EP3983404B1; TWI750685B; MX2021015325A; US20200392118A1; US11999722B2; PE20220377A1; CL2021003342A1; CA3143490A1; JOP20210329A1; US20220017496A1; MA56208A; WO2020257171A1

Abstract

Цей винахід надає сполуку Формули І: , або її фармацевтично прийнятну сіль, а також застосування сполук Формули І, для лікування метаболічних станів, таких як цукровий діабет 2 типу, серцева недостатність, діабетична хвороба нирок і неалкогольний стеатогепатит.

Description

ев2

ОЇ

ХК хто її і

Ес 3 | Х М / х в або її фармацевтично прийнятну сіль, а також застосування сполук Формули І, для лікування метаболічних станів, таких як цукровий діабет 2 типу, серцева недостатність, діабетична хвороба нирок і неалкогольний стеатогепатит.

Цей винахід стосується нових сполук-інгібіторів кетогексокінази (КНК), фармацевтичних композицій, які містять ці сполуки, і застосування згаданих сполук для лікування певних станів, таких як цукровий діабет 2 типу (Т2ОМ), серцева недостатність, діабетична хвороба нирок і неалкогольний стеатогепатит (МАЗН).

КНК, на яку також посилаються як на фруктокіназу, являє собою фермент, який обмежує швидкість метаболізму фруктози. Кетогексокіназа каталізує фосфорилювання фруктози до фруктозо-1-фосфату (Е1Р), спричинюючи супутнє вичерпання рівня АТФ у клітинах. На відміну від глюкози, метаболізму фруктози бракує інгібування зворотного зв'язку, і він викликає накопичення подальших проміжних продуктів, які беруть участь у, наприклад, ліпогенезі, глюконеогенезі та окисному фосфорилюванні (Наппои, 5.А., еї аї.; У. Сіїп. Іпмеві., 128(2), 544- 555, 2018). Це мас негативні метаболічні наслідки, які пов'язані з низкою серйозних метаболічних порушень.

КНК існує у двох альтернативно сплайсованих ізоформах, які складаються з КНК-С і КНК-А, які відрізняються екзоном 3. КНК-С експресується переважно в печінці, нирках і кишечнику, тоді як КНК-А є більш поширеною. Миші з дефіцитом обох ізоформ повністю захищені від індукованого фруктозою метаболічного синдрому. Однак у мишей, яким бракує лише КНК-А, посилюються несприятливі метаболічні ефекти (Ізпітоїо Т., еї аїЇ.; Ргос. Маї. Асай. бсі. ОБА, 109(11), 4320-4325, 2012).

У декількох епідеміологічних та експериментальних дослідженнях було повідомлено, що підвищене споживання фруктози, а точніше посилення метаболізму фруктози, може відігравати важливу роль у розвитку певних розладів, включаючи метаболічний синдром, і, зокрема, у розвитку Т2ОМ (Зойіє еї аї.; у. Сііп, Іпмеві., 127(11), 4059-4074, 2017), серцевої недостатності (Мійзспіпк, Р., сі а).; Єшиг. Неаї у., 39, 2497-2505, 2018), діабетичної хвороби нирок (Сігійо, Р., еї а; У. Ат. бос. Мерпгої, 20, 545-553, 2009) і неалкогольної жирової хвороби печінки/неалкогольного стеатогепатиту (МАР О/МАЗН) (Моз, М.В., еї аї.; Нерашюіоду, 57, 2525- 2531, 2013). Очікується, що цільове інгібування КНК обмежить метаболізм фруктози та надасть ефективні варіанти лікування численних метаболічних розладів.

В 5 2017/0183328 Ат розкриті заміщені 3-азабіциклоЇ3.1.О)гексани як інгібітори КНК.

Нещодавно опубліковані дані показують, що інгібітор кетогексокінази РЕ-06835919 при введені

Зо протягом б тижнів зменшує весь жир у печінці, за результатами вимірів із застосуванням магнітно-резонансної томографії, пов'язаної із жировою фракцією густини протонов у пацієнтів с неалкогольною жировою хворобою печінки (У. Нераїоіоду. ЕАБІ Іпіегпайопа! Іімег Сопдгевзв5

Арзігасі5, зЗирріетепі Ме15 Мої. 70, Аргії 2019).

Сполуки, які містять карбоксильні функціональні групи, несуть ризик, пов'язаний з утворенням метаболітів ацилглюкуроніду (Мееї Мап еї аї., Тохісоіоду І ейегв, 272 (2017) 1-7).

Метаболіти ацилглюкуроніду часто є нестабільними та можуть бути хімічно активними, що призводить до ковалентного зв'язку з макромолекулами та токсичності.

Існує потреба в альтернативному лікуванні метаболічного синдрому та супутніх показань, включаючи Т2ОМ, серцеву недостатність, діабетичну хворобу нирок та МА5Н. Зокрема, існує потреба в сполуках, які є сильдійними інгібіторами КНК. Існує потреба в сполуках-інгібіторах

КНК, які мають переважні властивості, наприклад, хорошу біодоступність при пероральному прийомі для підтримування введення доз один раз на добу. Крім того, існує потреба в сполуках- інгібіторах КНК, які не мають карбоновокислотної складової і не мають здатності утворювати ацилглюкуроніди.

Відповідно, за одним з варіантів здійснення цього винаходу надана сполука Формули 1: ев2

ОЇ

М

А

«о /

М х 1 вк ; Формула де

Х являє собою М або С, заміщений СМ;

В" вибраний з-посеред: Н, 4 7

Кк Кк

М МН в

АВ но з. М з М М МН х х в? р Зо (е о о о о У ж он в он

С ЖІ ДГ ке х к х о он хр -ит тд тр -и он боро мо он о о Ох он я та ; обидва ВЕ: та ЕЗ являють собою Н, або один являє собою Н, а інший являє собою ОН;

ВУ, В», Не, ВД" та ЕР незалежно один від іншого являють собою Н або СНЗз;

ВУ? являє собою Н, СНз, СНЕСНгОН, С(-О)СНоМН» або С(-О)СН»; та

В"? являє собою ОН або МН»; або її фармацевтично прийнятна сіль.

За одним з конкретних варіантів здійснення цього винаходу К' вибраний з-посеред: Н,

в ж (тн . Гн хи хочу хи ху» о ! о ! о 7 | о ! 8 но М ут мл МН о о он он

У " . Н

Ж | і зон. М он моря" и | яр | З о о он хорт Оуен раль : ; он та о або їх фармацевтично прийнятних солей.

За одним з конкретних варіантів здійснення цього винаходу надана сполука Формули І, де Х являє собою М або С, заміщений СМ;

В' вибраний з-посеред: гОун

МН М о ; І ши або о ; іде

В2 являє собою Н, і ЕЗ являє собою ОН, або Е2 являє собою ОН, і ЕЗ являє собою Н, або обидва К: та КЗ являють собою Н; або її фармацевтично прийнятна сіль.

За одним з конкретних варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука являє собою сполуку Формули Іа:

ХК хто ї

ХМ

Ес

З | Х М /

М х 1

Кк ; Формула Іа або її фармацевтично прийнятну сіль.

За одним з конкретних варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука являє собою сполуку Формули Іс: с» /

ХК с її

Ж шо: 3 | Х М /

М х 1

Кк ; Формула Іс або її фармацевтично прийнятну сіль.

За одним з конкретних варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука являє собою сполуку Формули Іе:

Х

Ж са її й

Ес 3 | Х М /

М х 1

Кк ; Формула Іе або її фармацевтично прийнятну сіль.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу Х являє собою М.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу Х являє собою С, заміщений СМ.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу К!' являє собою гОун о

За одним з варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука являє собою сполуку

Формули І:

Х

М її хх

Ес

З | Х М /

М ню -/

М / о або її фармацевтично прийнятну сіль.

За одним з конкретних варіантів здійснення цього винаходу надана сукцинатна сіль сполуки

Х

М її хх

Ес

З | Х М /

М ню -/

М / о

За одним з варіантів здійснення цього винаходу, якому віддають перевагу, згадана сукцинатна сіль являє собою сесквісукцинатну сіль.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука Формули | являє собою сполуку:

С» /

Х

М ї

ХМ

Ес 3 | Х М /

М

У

Н або її фармацевтично прийнятну сіль.

С» /

Х т Її

ХМ шо: 3 | х М /

М

У

Н або її фармацевтично прийнятну сіль.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука Формули 1 являє собою сполуку:

Х

М її хх

Ес

Кк) | х М /

М

У

Н, або її фармацевтично прийнятну сіль.

М

ЖЕ

Ом о

По | м он / Н

М / о або її фармацевтично прийнятну сіль.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука Формули | являє собою сполуку: с» /

М

Ж

ОМ

С г | с /

М

У

Н або її фармацевтично прийнятну сіль.

Х

М

Ж

ОМ

С, вс | с /

М

У

Н або її фармацевтично прийнятну сіль.

За одним з конкретних варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука вибрана з групи, яку складають: 2-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1 -іл|-1-піперазин- 1-ілетанон;

М2Н)-1-І4-П1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-6-«трифторметил)піримідин-2-іл|азетидин-2- іл|метанол;

МК2Н)-1-І4-П1-(азетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6-«'трифторметил)піримідин-2-іл|Іазетидиий-2- іл|метанол; (25,38)-1-І4-(1-(азетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6-«(трифторметил)піримідин-2-іл|-2- метилазетидин-3-ол; 2-І4-І(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-«(трифторметил)-2-піридил|піразол-1-іл|-М-(2- гідроксіетил)ацетамід; 2-К2Н8)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 2-К25,38)-3-гідрокси-2-метилазетидин-1-іл|-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 2-К25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1-(1-метил-4-піперидил)піразол-4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 6-11-(1-(2-гідроксіетил)-4-піперидилі|піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 6-П1-(2-(диметиламіно)етилі|піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 6-П1-(2-гідроксіетил)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-«(трифторметил)піридин-3- карбонітрил; 2-К(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4-"'трифторметил)піридин-3- карбонітрил; 2-К25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-6-«трифторметил)піримідин; (25,38)-2-метил-1-І4-(1-К(ЗА)-піролідин-3-іл|Іпіразол-4-іл|-6-«трифторметил)піримідин-2- ілІіазетидин-3-ол;

Зо (25,38)-2-метил-1-І(4-(1-(38)-піролідин-3-іл|піразол-4-іл|-6-(трифторметил)піримідин-2- ілІіазетидин-3-ол; 2 А)-1-І4-П1-КЗА)-піролідин-3-іл|піразол-4-іл|-6-«трифторметил)піримідин-2-іл|Іазетидин-2- іл|метанол; 6-П1-(азетидин-3-іл)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)піридин-3- карбонітрил; 6-11-(1-(2-аміноацетил)-4-піперидилі|піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 6-11-(1-ацетил-4-піперидил)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 2-К25)-2-метилазетидин- 1-ілІ|-6-(1-(2-(4-метилпіперазин-1-іл)-2-оксоетил|піразол-4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 2-І4-І(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2-піридил|піразол-1-іл|-М, М- біс(2-гідроксіетил)ацетамід; 6-П1-(2-КЗА,4Н8)-3,4-дигідроксипіролідин-1-іл|-2-оксоетил|піразол-4-іл|-2-(25)-2- метилазетидин-1-іл|-4--трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 6-П1-(2-(35,45)-3,4-дигідроксипіролідин-1-іл|-2-оксоетил|піразол-4-іл|-2-К25)-2- метилазетидин-1-іл|-4--трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 6-1-(2,3-дигідроксипропіл)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 2-К25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1 Н-піразол-4-іл)-4-(трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 2-К(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1-тетрагідропіран-4-ілпіразол-4-іл)-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил; 6-П1-(З-гідрокси-4-піперидил)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил;

К2Н)-1-І4-1-(1-метилазетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6-«(трифторметил)піримідин-2-іл|Іазетидин-2- іл|метанол; або їх фармацевтично прийнятні солі.

За одним з конкретних варіантів здійснення цього винаходу згадана сполука являє собою 2-

І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(рифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1-іл|-1-піперазин-1- ілетанону сесквісукцинат, який також є відомим як етанон, 2-І4-(2-К25)-2-метил-1-азетидиніл|-6- (трифторметил)-4-піримідиніл|-1Н-піразол-1-іл|-1-(1-піперазиніл)-бутандіоат (1:1,5) або бутандіова кислота-2-(4-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4-іл)у -1 Н- піразол-1-іл)-1-(піперазин-1-іл)етан-1-он (1,5/1).

Формула І охоплює Формулу Іа, Формулу Ір, Формулу Іс, Формулу ІЗ, Формулу Іє, Формулу

Ії, Формулу Ід та Формулу ІЙ, і посилання на Формулу І нижче, наприклад, у способах лікування та терапевтичних застосуваннях, також слід читати як посилання на кожну та усі із цих підформул.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу наданий спосіб лікування Т2ОМ у пацієнта, що потребує такого лікування, який включає введення пацієнту ефективної кількості сполуки

Формули І або її фармацевтично прийнятної солі.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу наданий спосіб лікування серцевої недостатності у пацієнта, що потребує такого лікування, який включає введення пацієнту ефективної кількості сполуки Формули І або її фармацевтично прийнятної солі.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу наданий спосіб лікування діабетичної

Зо хвороби нирок у пацієнта, що потребує такого лікування, який включає введення пацієнту ефективної кількості сполуки Формули І або її фармацевтично прийнятної солі.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу наданий спосіб лікування МАБН у пацієнта, що потребує такого лікування, який включає введення пацієнту ефективної кількості сполуки

За одним з варіантів здійснення цього винаходу наданий спосіб лікування захворювання, вибраного з групи, яку складають метаболічний синдром, МАРІО, ожиріння, серцево-судинне захворювання, ішемічна хвороба серця, хронічна хвороба нирок, дисліпідемія та діабетичні ускладнення, наприклад, діабетична ретинопатія, у пацієнта, що потребує такого лікування, який включає введення цьому пацієнту ефективної кількості сполуки Формули 1 або її фармацевтично прийнятної солі.

Крім того, за одним з варіантів здійснення цього винаходу надана сполука Формули І або її фармацевтично прийнятна сіль для застосування в терапії. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надана сполука Формули | або її фармацевтично прийнятна сіль для застосування в лікуванні Т2ОМ. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надана сполука

Формули І або її фармацевтично прийнятна сіль для застосування в лікуванні серцевої недостатності. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надана сполука Формули 1 або її фармацевтично прийнятна сіль для застосування в лікуванні діабетичної хвороби нирок. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надана сполука Формули І або її фармацевтично прийнятна сіль для застосування в лікуванні МАЗН. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надана сполука Формули І або її фармацевтично прийнятна сіль для застосування в лікуванні метаболічного синдрому, МАРГО, ожиріння, серцево-судинного захворювання, ішемічної хвороби серця, хронічної хвороби нирок, дисліпідемії або діабетичних ускладнень, наприклад, діабетичної ретинопатії.

Крім того, за одним з варіантів здійснення цього винаходу надане застосування сполуки

Формули І або її фармацевтично прийнятної солі для виробництва лікарського засобу для лікування Т2ОМ. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надане застосування сполуки

Формули 1 або її фармацевтично прийнятної солі для виробництва лікарського засобу для лікування серцевої недостатності. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надане застосування сполуки Формули І, або її фармацевтично прийнятної солі для виробництва бо лікарського засобу для лікування діабетичної хвороби нирок. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надане застосування сполуки Формули І або її фармацевтично прийнятної солі для виробництва лікарського засобу для лікування МА5Н. За одним з варіантів здійснення цього винаходу надане застосування сполуки Формули І або її фармацевтично прийнятної солі для виробництва лікарського засобу для лікування метаболічного синдрому, МАРІО, ожиріння, серцево-судинного захворювання, ішемічної хвороби серця, хронічної хвороби нирок, дисліпідемії або діабетичних ускладнень, наприклад, діабетичної ретинопатії.

За одним з варіантів здійснення цього винаходу надана фармацевтична композиція, яка містить сполуку Формули І або її фармацевтично прийнятну сіль з одним або декількома фармацевтично прийнятними носіями, розріджувачами або наповнювачами. За одним з варіантів здійснення цього винаходу наданий спосіб одержання фармацевтичної композиції, який включає змішування сполуки Формули І або її фармацевтично прийнятної солі з одним або декількома фармацевтично прийнятними носіями, розріджувачами або наповнювачами.

У значенні, вживаному у цьому описі, терміни "лікування" або "лікувати" охоплюють стримування, уповільнення, припинення або обернення напрямку розвитку або тяжкості наявного симптому або розладу.

У значенні, вживаному у цьому описі, термін "пацієнт" стосується ссавця. Переважно пацієнт являє собою людину.

У значенні, вживаному у цьому описі, термін "ефективна кількість" стосується кількості або дози сполуки Формули 1 або її фармацевтично прийнятної солі, яка при одноразовому або багаторазовому введенні пацієнту забезпечує бажаний ефект у пацієнта, якого піддають діагностуванню або лікуванню.

Фахівець у цій галузі може визначити ефективну кількість із застосуванням відомих методів і шляхом спостереження за результатами, одержаними за аналогічних обставин. При визначенні ефективної кількості для пацієнта до уваги приймають численні фактори, в тому числі, але без обмеження ними: вид пацієнта; його розмір, вік і загальний стан здоров'я; конкретне захворювання або розлад, які піддають лікуванню; ступінь залучення або тяжкість захворювання чи розладу; реакція окремого пацієнта; конкретна сполука, яку вводять; спосіб введення; характеристики біодоступності препарату, який вводять; вибрана схема приймання лікарського засобу; застосування супутнього лікарського засобу; та інші відповідні обставини.

Сполуки Формули | є ефективними при добовій дозі, яка становить від приблизно 0,1 мг/кг до приблизно 15 мг/кг маси тіла.

Сполуки Формули І одержували у вигляді фармацевтичних композицій, які вводять будь- яким шляхом, який робить сполуку біодоступною. Переважно такі композиції призначені для перорального введення. Такі фармацевтичні композиції та процеси їх одержання добре відомі в цій галузі (Див., наприклад, Кептіподоп, ).Р., "Ветіпоаїюоп: ТНне 5сієпсе апа Ргасіїсе ої Рнаптасу",

Г.М. Аїеп, Еайог, 2279 Едйіоп, Рпагтасеціїса! Ргев5, 2012).

Сполуки Формули І та їх фармацевтично прийнятні солі можуть бути використані в способах лікування та терапевтичних застосуваннях за цим винаходом, при цьому перевагу віддають певним конфігураціям. Слід розуміти, що перелічені нижче переваги є застосовними як до методів лікування, терапевтичних застосувань, так і до сполук за цим винаходом.

Сполуки за цим винаходом включають: ев? о

А

«о /

М хи ; Формула Іа со й

ХУ еру /

М х 1

Кк ; Формула ІБ ев?

Он паї

М ак хх «су /

М х 1 в ; Формула Іс ев2 ої

М й

А

«о /

М х 1 в ; Формула Ій он о й

ХХ

«о /

М х 1

Кк ; Формула І он

Х с її

ХУ

«о /

М х 1

Кк. ; Формула Ії ще

Ж са її й «о /

М х 1

Кк. ; Формула Ід або он

Х са її

Ж еру /

М х 1

Кк. ; Формула Іп та їх фармацевтично прийнятні солі.

Незважаючи на те, що цей винахід передбачає всі окремі енантіомери та діастереомери, а також суміші згаданих сполук, включаючи рацемати, особливу перевагу віддають сполукам

Формули Іа, Формули Іс та Формули Іе та їх фармацевтично прийнятним солям.

Окремі енантіомери можуть бути відокремлені або розділені фахівцем у цій галузі у будь- якій зручній точці синтезу сполук Формули | із застосуванням методів, таких як методи селективної кристалізації, хіральної хроматографії (Дивись, наприклад, у. Уасдиев, еї аї., "Епапіотег!в5, Насетаїгїез, апа Незоїішіопв", допп Уміеу апа 5опв5, Іпс., 1981, та Е.І... ЕІеї! апа 5.Н.

УМієп, "Мегеоспетівму ої Огдапіс Сотроцйпав", УМіПеу-Іпіег5сіепсе, 1994), або надкритичної рідинної хроматографії (5ЕС) (Дивись, наприклад, Т.А. Вегдег; "Зирегсійіса! /Ріцід

Спготаїоагарну Ргітег!", Адіїепі Тесппоодієв, Ушу 2015).

Фармацевтично прийнятну сіль сполук Формули | можна одержати, наприклад, шляхом реакції відповідної вільної основи сполуки Формули І! та відповідної фармацевтично прийнятної кислоти у відповідному розчиннику за стандартних умов, добре відомих у цій галузі (Дивись,

наприклад, Вабвійп, К.У., еї аЇ.; Ога. Ргосев5. Ве5. Юеу., 4, 427-435, 2000 та Вегде, 5.М., еї аї.; у.

Рпагт. 5евї, 66, 1-19, 1977). Сіллю, якій віддається перевага, є сукцинатна сіль. Сіллю, якій віддається особлива перевага, є сесквісукцинатна сіль. У сесквісукцинатній солі співвідношення вільна основа:сукцинат становить 1:1,5. Сукцинатна сіль також відома як бутандісатна сіль.

Сполуки Формули І або їх солі можуть бути одержані різноманітними способами, відомими фахівцю у цій галузі, деякі з яких проілюстровані наведеними нижче схемами, препаративними методиками та прикладами. Продукти кожного етапу наведених нижче схем можуть бути виділені традиційними методами, добре відомими у цій галузі, у тому числі, шляхом екстрагування, випарювання, осадження, хроматографування, фільтрування, розтирання в порошок та кристалізації. На схемах, наведених нижче, всі замісники, якщо не зазначено інше, відповідають попередньо наведеному визначенню. Реагенти та вихідні матеріали є легко доступними для фахівця в цій галузі. Для додаткового ілюстрування цього винаходу нижче наведені схеми, препаративні методики та приклади, які не обмежують обсягу винаходу. Крім того, фахівцю в цій галузі зрозуміло, що сполуки Формули І можуть бути одержані з використанням початкового матеріалу або проміжного продукту з відповідною бажаною стереохімічною конфігурацією, яку може одержати фахівець у цій галузі.

Деякі скорочення визначені таким чином: "АСМ" означає ацетонітрил; "ВОС" означає трет- бутоксикарбоніл; "ОСМ" означає метиленхлорид або дихлорметан; "СІРЕА" означає М,М- діізопропілетиламін; "ОМЕ" означає М,М-диметилформамід; "оМ5о" означає диметилсульфоксид; "ЕЇ 50" означає випарний детектор світлорозсіювання; "ЕБ/М5" означає мас-спектрометрію електророзпиленням; "Е(ОАс" означає етилацетат; "ЕЮН" означає етанол або етиловий спирт; "год" означає години або годину; "НАТО" означає (1-

Ібіс(ідиметиламіно)метилен|-1Н-1,2,3-триазоло|4,5-5|Іпіридинію-3-оксиду гексафторфосфат; "НРІГС" означає високоефективну рідинну хроматографію; "ІРА" означає ізопропіловий спирт; "Ме" означає метил; "Меон" означає метанол; "МТВЕ" означає метил-трет-бутиловий простий ефір; "хв" означає хвилину або хвилини; "т/7" означає відношення маси до заряду; "РИ" означає феніл; "КВЕ" означає круглодонну колбу; "КТ" означає кімнатну температуру; "ЗСХ" означає селективний катіонний обмін; "ЗЕМ" означає середню квадратичну помилку середнього; "ЗЕС" означає надкритичну рідинну хроматографію; "ТЕА" означає трифтороцтову кислоту; "ТНЕ"

Зо означає тетрагідрофуран.

Схема 1 в?

Х он с; . с

СІ ва що і 2 / Ж - й

АОС тт ДИ вс сі М А | / вро х

Ма і ' І в ХМ а / ' 2 З 7 ' І Х 1 в

На Схемі 1 зображено загальне одержання сполук Формули І. К'2 може бути таким самим, як КЕ! у кінцевій сполуці Формули І, або це може бути група, яка потребує перетворення для одержання К!' Формули І. Звичайні синтетичні перетворення В'2, такі як депротектування ВОС- групи, реакція гідролізу складного ефіру та амідного сполучення можуть бути виконані або до, або після етапу В. На етапі А реакція перехресного сполучення Сузукі між гетероарилдихлоридом 1 і піразолборонатним складним ефіром 2 дає заміщену піразольну сполуку 3. Цю реакцію проводили з використанням основи, наприклад, 2 М водного розчину

МагСО»з, в органічному розчиннику, наприклад, 1,4-діоксані, у присутності паладієвого каталізатора, такого як тетракіс(трифенілфосфін)паладій(0) або біс(трифенілфосфійи)паладій(І!) дихлорид, при підвищеній температурі. На етані В сполуку З піддавали реакції нуклеофільного ароматичного заміщення із заміщеним азетидином 4, та одержували сполуку Формули І. Цю реакцію проводили у присутності органічної основи, такої як ОІРЕА, в органічному розчиннику, такому як 1,4-діоксан, при підвищеній температурі.

Схема 2 сі хво я , С

Х и, у 4 1 х-К х

ШляхА | ро Шлях В с в? в2 он сі сі в?

Ж Ж ! хом й М Ж

СГ ні й.

ХУ вс бу ж- - - Бр а З ши хх / о | А о вс і Бе 7 М М 9 /

Й- - М / 6 7

Е М - - / н -

М у М | ї- ро х ро в2 сі в? з в"

А і й х-т ї м

М вс а Х На Ж ХХ й з | и з х Її є хх в

М Е ХУ І

- го МуЄ Ес й: х 8 Мі | / з | М

М М М

В -

Формула Г / 10 )- ї-к у- х М в н 5 На Схемі 2 зображено одержання підгрупи сполук Формули І, де піразол заміщений азотвмісним гетероциклом (Формула !). Складний піразолборонатний складний ефір 5 заміщений азотвмісним гетероциклом, як показано на Схемі 2, де "У" і "7" можуть, кожен незалежно, являти собою -СНо- або -СНо-СНе-, і "Ро" являє собою азотзахисну групу, таку як

ВОС. На етапі С реакція перехресного сполучення Сузукі між гетероарилдихлоридом 1 і піразолборонатним складним ефіром 5 дає заміщену піразольну сполуку 6. Як описано на Етапі

А Схеми 1, цю реакцію проводили з використанням основи, наприклад, 2 М водного розчину

МагСО»з, в органічному розчиннику, наприклад, 1,4-діоксані, у присутності паладієвого каталізатора, такого як тетракіс(трифенілфосфін)паладій(0) або біс(трифенілфосфін)паладій(І!) дихлорид, при підвищеній температурі. Можна використовувати два різні шляхи, як показано на

Схемі 2, Шлях А та Шлях В.

На Шляху А заміщену піразольну сполуку б піддавали депротектуванню на Етапі 0, та одержували сполуку 7. Наприклад, якщо "РО" являє собою ВОС, депротектування можна здійснити за допомогою ТЕА. На Етапі Е гетероциклічний азот сполуки 7 може бути підданий реакціям заміщення, наприклад, відновному амінуванню, ацилюванню або амідному сполученню, та одержували сполуку 8. Такі заміщення відображені як "К" на цій схемі. На Етапі

Е сполуку 8 піддають реакції нуклеофільного ароматичного заміщення із заміщеним азетидином 4, та одержували сполуку Формули Г. Як описано на Етапі В Схеми 1, цю реакцію проводили у присутності органічної основи, такої як ОІРЕА, в органічному розчиннику, такому як 1,4-діоксан,

при підвищеній температурі. Це може бути останнім етапом або, за альтернативним варіантом, група К може бути піддана подальшим звичайним синтетичним перетворенням, таким як видалення захисної групи.

На Шляху В заміщену піразольну сполуку 6 піддають реакції нуклеофільного ароматичного заміщення на Етапі С із заміщеним азетидином 4, та одержували сполуку 9. Це може бути здійснено із застосуванням реакції нуклеофільного ароматичного заміщення із заміщеним азетидином 4 у присутності органічної основи, такої як ОІРЕА, в органічному розчиннику, такому як 1,4-діоксан, при підвищеній температурі. Як альтернатива, Етап С і Етап б можуть бути виконані в одному реакторі, де спочатку завершується реакція перехресного сполучення Сузукі на Етапі С, а потім до реакційної суміші додавали азетидин 4 разом з органічною основою (наприклад, ОІРЕА), після чого Етап С виконували при підвищеній температурі. Захисну групу "РО" видаляли на Етапі Н (наприклад, за допомогою ТЕА, якщо РО являє собою ВОС), та одержували сполуку 10. На Етапі І азотна група сполуки 10 може зазнавати реакцій заміщення, наприклад, відновного амінування, ацилювання або амідного сполучення, та одержували сполуку Формули !. Це може бути останнім етапом або, як альтернатива, група КЕ може бути піддана подальшим звичайним синтетичним перетворенням, таким як видалення захисної групи.

Схема З в? о в? с сі в М

А о у Ж сах ! | М хм

АС я о-8в - НЕ 4 сх сот вс х - 5 2 ж вас сі / М | "м вс Х 7 " зі й 13 7 1 " С М. сод їй со со

Г

, ві с

Х ; т А хом

Ес Же х --- - і | Й Ес сх вх

М з " о 14 | ,

М

Формула !" - М сор у в

На Схемі 3 зображено одержання підгрупи сполук Формули І, де піразол заміщений ацетамідною групою (Формула І"). На етапі У реакція перехресного сполучення Сузукі між гетероарилдихлоридом 1 і піразолборонатним складним ефіром 11 дає заміщену піразольну сполуку 12. Як описано на Схемі 1 і Схемі 2, цю реакцію проводили з використанням основи, наприклад, 2 М водного розчину МагСО»з, в органічному розчиннику, наприклад, 1,4-діоксані, у присутності паладієвого каталізатора, такого як тетракіс(трифенілфосфін)паладій(0) або біс(трифенілфосфін)паладій(!ї) дихлорид, при підвищеній температурі На Етапі К

Зо гетероарилхлорид 12 піддавали нуклеофільному ароматичному заміщенню азетидином 4 у присутності органічної основи, такої як ОІРЕА, в органічному розчиннику, такому як 1,4-діоксан, при підвищеній температурі, та одержували сполуку 13. На Етапі Ії, гідроліз складного ефіру з використанням основи, наприклад, гідроксиду натрію, давав кислоту 14. На Етапі М кислоту 14 піддавали реакції амідного сполучення з аміном формули НМЕК'К", та одержували амідну сполуку Формули І". Амін НМЕ'К" може бути циклічним (наприклад, факультативно заміщений піперазин). Етап М може бути завершальним етапом або можуть відбуватися подальші звичайні синтетичні перетворення, такі як видалення захисної групи.

Препаративні методики та Приклади

Наведені нижче Препаративні методики та Приклади додатково ілюструють різні варіанти здійснення цього винаходу та ілюструють типовий синтез сполук за цим винаходом. Реагенти та початкові матеріали є легкодоступними або можуть бути легко синтезовані фахівцем у цій галузі. Слід розуміти, що Препаративні методики та Приклади викладені як ілюстрація, а не обмеження, і що фахівцем у цій галузі можуть бути внесені різні модифікації.

ЇС-ЕБ/М5 виконували на системі для рідинної хроматографії АС ЕМТФ НР 1200.

Вимірювання мас-спектрометрії електророзпиленням (одержані в позитивному та/або негативному режимі) виконували на квадрупольному мас-спектрометрі з мас-селективним детектором, підключеним до НРІ С, яка може мати або не мати ЕІ 50. Умови І С-М5 (низький рн): колонка: РНЕМОМЕМЕХФ СЕМІМІФ МХ С18, 2,0х50 мм, 3,0 мкм, 110 А; градієнт: 5-95 95 В протягом 1,5 хв, потім 9595 В протягом 0,5 хв, температура колонки: 50-/-10 "С; швидкість потоку: 1,2мл/хв; 1 мкл ін'єкційний об'єм; Розчинник А: деіонізована вода з 0,1 95 НСООН;

Розчинник В: АСМ з 0,1 95 мурашиної кислоти; довжина хвилі 200-400 нм і 212-216 нм. Якщо система НРІСНРІ С обладнана ЕІ! 5О, параметри є такими: температура випарника 45 с, температура небулайзера 40 "С і швидкість потоку газу 1,6 5І М (стандартний літр/хвилина).

Альтернативні умови І С-М5 (високий рН): колонка: колонка У/асег5 хВгіддет С18, 2,1х50 мм, 3,5 мкм; градієнт: 5-95 956 В протягом 1,5 хв, потім 95 95 В протягом 0,50 хв; температура колонки: 5047-10 "С; швидкість потоку: 1,2 мл/хв; 1 мкл ін'єкційний об'єм; Розчинник А: 10 мМ МНАНсСО», рН 9; Розчинник В: АСМ; довжина хвилі: 200-400 нм і 212-216 нм; за умови наявності ЕІ 50: температура випарника 45 "С, температура небулайзера 40"С і швидкість потоку газу 1,60751 М.

Порошкові рентгенограми (ХКРО) кристалічних твердих речовин одержували (із застосуванням порошкового рентгенівського дифрактометра ВгиКег 04 Епаеєамог, спорядженого джерелом СикКа і детектором Мапіес, що працює при 35 кВ і 50 мА. Зразок сканували у межах 4- 40" кута 28 з величиною кроку, що дорівнює 0,008" кута 29, при швидкості сканування 0,5 с/крок, з 1,0 мм розходженням, фіксованим рівнем антирозсіювання 6,6 мм та 11,3 мм діафрагмами детектора. Сухим порошком наповнювали кварцовий тримач зразка; поверхню розгладжували із застосуванням предметного скла. Дифрактограми кристалічної форми одержували при

Зо температурі і відносній вологості навколишнього середовища. Положення піків кристалічної форми визначали в МОІ-даде після зсуву всієї рентгенограми на основі внутрішнього стандарту

МІЗТ 675 з піками при 8,853 і 26,774" кута 26. З кристалографії добре відомо, що для будь-якої даної кристалічної форми відносна інтенсивність дифракційних піків може змінюватись унаслідок переважної орієнтації що є наслідком факторів, таких як морфологія і форма кристалу. У разі присутності ефектів переважної орієнтації інтенсивність піків змінюється, однак характеристичні позиції піків поліморфних модифікацій залишаються незмінними. Дивись, наприклад, Тпе Опіеа 5(асгез5 Рпагтасореїа 23, Майопа! Богтиїагу 218, раде5 1843-1844, 1995.

Окрім того, з кристалографії також добре відомо, що для будь-якої даної кристалічної форми кутові положення піків можуть дещо змінюватись. Наприклад, положення піків можуть зсуватись унаслідок змін температури або вологості, при яких аналізується зразок, зміщення зразка або присутності чи відсутності внутрішнього стандарту. У даному разі змінність положення піків 0,27 кута 29 буде враховувати потенційні зміни без перешкоджання однозначній ідентифікації зазначеної кристалічної форми. Підтвердження кристалічної форми може бути здійснене на основі будь-якої унікальної комбінації відмінних піків.

Препаративна методика 1

Сіль (25)-1-бензгідрил-2-метилазетидин((1,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан- 1- ілметансульфонової кислоти ш Зо

М-х, 87 -, а ен! -о

СА

Складали 2000 мл З3-горлу круглодонну колбу з краплинною лійкою, вхідним отвором для азоту та адаптером для термометра. Посудину продували азотом, і додавали (ЗК)-бутан-1,3-

діол (25 г, 277 ммоль), ОІРЕА (127 мл, 731 ммоль) і АСМ (556 мл). Суміш охолоджували до температури -30 "С. Краплями протягом З год. додавали трифторметансульфоновий ангідрид (101 мл, 601 ммоль) так, щоб внутрішня температура підтримувалась у межах від -35 "С до - 30 "С. Після завершення додавання перемішували протягом 10 хв при температурі від -35 "С до -30 "С. Краплями протягом 5 хв додавали трифторметансульфоновий ангідрид (1,9 мл, 11 ммоль) так, щоб внутрішня температура підтримувалась у межах від -35 "С до -30 "С. Після завершення додавання перемішували протягом 10 хв при температурі від -357С до -30 "С.

Краплями протягом 15 хв додавали ОІРЕА (127 мл, 731 ммоль) так, щоб внутрішня температура підтримувалась у межах від -35 "С до -30 "С. Після завершення додавання перемішували протягом 10 хв при температурі від -357С до -30"С. В окремій колбі в атмосфері азоту розчиняли амінодифенілметан (48,0 мл, 270 ммоль) в АСМ (49 мл), і одержаний розчин переносили у краплинну лійку. Протягом 40 хв до холодного трифлату краплями додавали розчин аміну так, щоб внутрішня температура підтримувалась у межах від -20"С до -35 76.

Після завершення додавання перемішували протягом 30 хв при температурі у межах від -35 "С до -30 "С. Реакційну суміш переносили на водяну баню, і витримували її з повільним нагріванням протягом 30 хв. Баню видаляли, і реакційну суміш витримували з нагріванням до кімнатної температури протягом 30 хв. Посудину переносили в нагрівальну оболонку, і протягом 30 хв реакційну суміш нагрівали до температури 45 "С, потім охолоджували до кімнатної температури. Одержану суміш виливали в 1200 мл води, та екстрагували толуолом (3х400 мл).

Екстракти об'єднували, і промивали водою і насиченим водним розчином Масі. Органічні речовини сушили над безводним Маг5О»:, фільтрували, і концентрували іп масо. Залишок сушили під вакуумом протягом ночі, потім його розчиняли в ОСМ (400 мл). На лійці з фриттою готували шар силікагелю, і врівноважували його сумішшю гептан/Е(Ас у співвідношенні 1:1.

Розчин продукту завантажували на шар силікагелю, і промивали 1600 мл суміші гептан/Е(ОАс у співвідношенні 1:1. Фільтрат концентрували, та одержували червоне масло. Масло розчиняли в

Меон (250 мл), і вміщували колбу на водяну баню (-10С). Порціями додавали | (-)- камфорсульфонову кислоту (61,6 г, 265 ммоль), підтримуючи внутрішню температуру нижче 207С. Одержану суміш перемішували протягом 15 хв, а потім концентрували іп масио до утворення коричневої піни. Піну із застосуванням вакуумного насоса висушували протягом 2

Зо год. Піну розчиняли в ОСМ (130 мл), потім із застосуванням краплинної лійки до перемішуваного розчину повільно додавали ЕІАс (1100 мл). Одержану суміш переносили у 4000 мл хімічну склянку, і перемішували у відкритому стані протягом ночі. Хімічну склянку охолоджували на льодяній бані протягом 10 хв. Осад збирали у лійку з фриттою шляхом вакуумної фільтрації, промиваючи мінімальною кількістю крижаного ЕАс. Тверду речовину висушували на фритті протягом 2 год. Одержану білу тверду речовину розчиняли у мінімальній кількості ОСМ, переносили у 2000 мл хімічну склянку, а потім повільно розбавляли ЕЮАсС, поки прозорий розчин не почне мутніти. Суспензію перемішували протягом 4 год. у відкритому стані.

Тверду речовину збирали шляхом вакуумної фільтрації із застосуванням лійки з фриттою, і сушили на фритті протягом ночі, та одержували вказану в заголовку сполуку (111,8 г, 238,06 ммоль, вихід 86 95) у вигляді білої твердої речовини. "Н ЯМР (400 МГц, ОМ50О-ав) 6 10,54-10,47 (т, 1Н), 7,61 (а, У-7,3 Гц, 5Н), 7,47-7,37 (т, 7Н), 5,85 (а, 9У-10,3 Гу, 1Н), 4,68-4,61 (т, 1Н), 3,91- 3,83 (т, 2Н), 3,37 (5, 8Н), 2,99 (а, 9-14,6 Гу, 1Н), 2,77-2,68 (т, 1Н), 2,51-2,44 (т, 4Н), 2,30-2,16 (т, 2Н), 1,91-1,81 (т, 2Н), 1,42-1,28 (т, ЗН), 1,08 (5, ЗН), 1,01 (а, 9У-6,614, ЗН), 0,77 (5, 4Н); 598 Фо ее ІНРІ С: Спігаісекю 0 (10х4,6 мм, 5 мкм), 5 мл/хв, 40 "С, ізократичний режим, 10 956 ЕЮН (0,2 95 ІРІМНг)УС ОЗ.

Препаративна методика 2

Сіль (1 К,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іл|Іметансульфонат-(25)-2-метилазетидин-1-ію

КК до

З оон

М я, пш-еО

Н

У 2250 мл посудину Парра додавали 20 95 (мас.) РА(ОН): на вуглеці (6,62 г). Посудину продували азотом, і додавали МеонН (250 мл). До одержаної суспензії повільно додавали розчин солі (25)-1-бензгідрил-2-метилазетидин-(1 8,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан- 1- іл|метансульфонової кислоти (111 г, 236 ммоль) у МеоН (250 мл). Посудину герметизували,

продували азотом, потім воднем, і підвищували тиск до 60 РБІ (0,4137 мПа). Реакційну посудину енергійно струшували у шейкері Парра протягом 15 год. при кімнатній температурі.

Посудину продували азотом, а потім реакційну суміш фільтрували через шар Сеїйеф, промиваючи Меон. Фільтрат концентрували, та одержували білу тверду речовину, і сушили іп масцо. Тверду речовину суспендували в 780 мл (1:11) МТВЕ/ЕАс, суміш нагрівали до температури 65"С протягом 20 год., потім охолоджували до кімнатної температури, і перемішували протягом ночі. Тверді речовини відфільтровували. Тверді речовини суспендували у 380 мл МТВЕ, і перемішували при кімнатній температурі протягом 24 год. Білу тверду речовину відфільтровували, та одержували вказану в заголовку сполуку (41,5 г, 137 ммоль, вихід 58 95). "Н ЯМР (400 МГц, ОМ5О-ав) 5 8,68-8,55 (т, 1Н), 4,51-4,42 (т, 1Н), 3,91-3,75 (т, 1), 3,36 (5, ЗН), 2,91 (й, 9-14,6 Гц, 1Н), 2,69-2,61 (т, 1Н), 2,52-2,46 (т, 2Н), 2,28-2,22 (т, 1Н), 2,17-2,10 (т, 1Н), 1,96 (І, 9У-4,5 Гц, 1Н), 1,89-1,79 (т, 1Н), 1,43 (а, 9У-6,7 Гц, 2Н), 1,36-1,26 (т, 1Н), 1,05 (5, 2Н), 0,75 (5, 2Н).

Препаративна методика З (А)-2-азетидинметанолу гідрохлорид ре

М сІН

До 2-горлої круглодонної колби з вхідним отвором для азоту додавали: (К)-1-(трет- бутоксикарбоніл)азетидин-2-карбонову кислоту (30 г, 146 ммоль), ТНЕ (300 мл) ії 4- метилморфолін (17,7 мл, 161 ммоль). Суміш охолоджували до температури -10 "С, і краплями додавали ізобутилхлорформіат (21 мл, 161 ммоль). Суміш перемішували протягом 30 хв, а потім нагрівали до кімнатної температури. Одержану тверду речовину відфільтровували.

Фільтрат охолоджували до температури 0 "С, і краплями додавали розчин боргідриду натрію (11,1 г, 292 ммоль) у воді (90 мл) (обережно: виділення газу). Після додавання суміш підігрівали до кімнатної температури, і перемішували протягом 30 хв. Суміш розбавляли МТВЕ (300 мл) і водою (100 мл). Суміш промивали спочатку насиченим водним розчином МанНсоз (200 мл), а потім насиченим водним розчином Масі (200 мл). Органічну фазу сушили над Моазох, фільтрували, і концентрували насухо, та одержували масло (27 г). Обережно додавали НСІ (4,0

Зо М) у 1,4-діоксані (110 мл) (Обережно: виділення газу), і одержану суміш перемішували протягом

З год. при кімнатній температурі. Розчинник випарювали іп масо, та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді масла (16 г, 89 95). Цей матеріал використовували безпосередньо в

Препаративних методиках 9, 11, 16 і 36.

Препаративна методика 4 (25,38)-2-метилазетидин-3-ол-|(1А,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іл|метансульфонова кислота о он Ха? ще т "он

М я, пе

Н

Етап 1 500 мл З-горлу круглодонну колбу споряджали додатковою лійкою та температурним датчиком. У колбу додавали бут-2-ен-1-ол (суміш цисітранс) (23,7 мл, 267 ммоль) і хлороформ (200 мл). Розчин охолоджували на льодяній бані доти, доки внутрішня температура не досягне 1,2 76. Краплями протягом 2 год. із застосуванням краплинної лійки додавали бром (13,7 мл, 267 ммоль) зі швидкістю «1 крапля/6б с. Після завершення додавання реакційну суміш нагрівали до кімнатної температури, і перемішували протягом 30 хв. Мішалку вимикали, і реакційну суміш відстоювали протягом З днів, гасили насиченим розчином Маг5О3з, і енергійно перемішували протягом 10 хв. Суміш відстоювали протягом З днів. Органічний шар видаляли, і водну фракцію екстрагували ОСМ (х3). Органічні речовини об'єднували, сушили над Маг50», фільтрували, і концентрували іп масио, та одержували 2,3-дибромбутан-1-ол (62,3 г, 269 ммоль).

Етап2

Процедура А 1 л З-горлу круглодонну колбу споряджали додатковою лійкою та температурним датчиком.

У колбу додавали 2,3-дибромбутан-1-ол (62,3 г, 269 ммоль) і ТНЕ (180 мл). Колбу вміщували на водяну баню при кімнатній температурі. Краплями протягом 10 хв із застосуванням краплинної лійки додавали розчин КОН (15,1 г, 269 ммоль) у воді (135 мл). Перемішували при кімнатній температурі протягом 2 год. Органічну фазу відокремлювали. Водну фракцію екстрагували

ЕЮАс (3х150 мл). Органічні речовини об'єднували, один раз промивали «200 мл розсолу, сушили над Ма»зоз, і фільтрували. Ретельно концентрували органічні речовини (100 мбар-10 кПа, 30 "С до мінімального об'єму, потім 10 мбар-1 кПа, 30 "С протягом 10 хв), та одержували 37 г суміші 2-(1-брометил)оксирану (60 95 (мас.)), 2,3-дибромбутан-1-олу (36 95 (мас.)) ії ЕЮАс (495 (мас.)), як визначено за допомогою "Н ЯМР. До суміші додавали ЕН (100 мл), амінодифенілметан (36 мл, 208,6 ммоль) і Мансоз (26 г, 309 ммоль). Реакційну суміш нагрівали до температури 65 "С протягом ночі. Охолоджували до кімнатної температури.

Процедура В

У першу колбу додавали 2,3-дибромбутан-1-ол (72,6 г, 313 ммоль) і ТНЕ (200 мл). Колбу вміщували на водяну баню при кімнатній температурі. Додавали розчин КОН (17,6 г, 314 ммоль) у воді (150 мл). Перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Органічну фазу відокремлювали. Водну фракцію екстрагували ЕАс (3х150 мл). Органічні речовини об'єднували, один раз промивали "200 мл насиченого водного розчину Масі, сушили над

Маг5О», і фільтрували. Органічний шар концентрували іп масо (100 мбар-10 кПа, 30 С до мінімального об'єму, потім 10 мбар-1 кПа, 30 "С протягом 10 хв), та одержували 41,1г суміші 2- (1-брометил)оксирану (75 95 (мас.)), 2,3-дибромбутан-1-олу (22 95 (мас.)) і ЕІОАс (З 95 (мас.)), як визначено із застосуванням "Н ЯМР.

У другу колбу вносили 2,3-дибромбутан-і-ол (10 г, 43 ммоль) і ТНЕ (30 мл). Колбу вміщували на водяну баню при кімнатній температурі. Додавали розчин КОН (2,42 г, 43,1 ммоль) у воді (20 мл). Перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Органічну фазу відокремлювали. Водну фракцію екстрагували ЕТОАс (3х150 мл). Органічні речовини об'єднували, один раз промивали "200 мл насиченого водного розчину Масі, сушили над

Зо Мао», і фільтрували. Органічний шар концентрували іп масо (100 мбар-10 кПа, 30 "С до мінімального об'єму, потім 10 мбар-1 кПа, 30 "С протягом 10 хв), та одержували 5,4 г суміші 2- (1-брометил)оксирану (66 95 (мас.)), 2,3-дибромбутан-1-олу (32 95 (мас.)) і ЕІОАс (2 95 (мас.)), як визначено із застосуванням "Н ЯМР.

У третю колбу вносили 2,3-дибромбутан-і-ол (10 г, 43 ммоль) і ТНЕ (30 мл). Колбу вміщували на водяну баню при кімнатній температурі. Додавали розчин КОН (2,42 г, 431 ммоль) у воді (20 мл). Суміш нагрівали до температури 50 "С протягом 2 год. Охолоджували до кімнатної температури. Органічну фазу відокремлювали. Водну фракцію екстрагували ЕЮАсС (3х50 мл). Органічні речовини об'єднували, один раз промивали «200 мл розсолу, сушили над

Мао», і фільтрували. Органічний шар концентрували іп масо (100 мбар-10 кПа, 30 "С до мінімального об'єму, потім 10 мбар-1 кПа, 30 "С протягом 10 хв), та одержували 5,4 г суміші 2- (1-брометил)оксирану (70 95 (мас.)), 2,3-дибромбутан-1-олу (28 95 (мас.)) і ЕІОАс (2 95 (мас.)), як визначено за допомогою "Н ЯМР.

Суміші з трьох реакцій об'єднували у круглодонній колбі, та одержували 51,9 г 2-(1- брометил)оксирану (73 95 (мас.)). Додавали ЕЮН (100 мл), амінодифенілметан (44 мл, 255,0 ммоль) ії МанНСОз (32 г, 380,926 ммоль). Одержану суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 2 год., а потім нагрівали до температури 65 "С, і продовжували перемішувати протягом ночі. Охолоджували до кімнатної температури. Неочищені реакційні суміші з Процедури і Процедури В об'єднували для очищення. Тверді речовини відфільтровували з промиванням ЕН. Фільтрат концентрували досуха. Одержане масло розчиняли в ЮСМ. Одержаний розчин двічі промивали розчином МНаАСІ, висушували над

Маг5О», фільтрували, і концентрували до об'єму «150 мл. Суміш відстоювали протягом ночі.

Тверді речовини відфільтровували. Фільтрат із застосуванням хроматографії на діоксиді кремнію з нормальною фазою (7095 МТВЕ:гексани) очищали, та одержували неочищений 1- бензгідрил-2-метилазетидин-3-ол (66,8 г). ЕБ/М5 (т/7): 254 (МАН).

Етап З 1-бензгідрил-2-метилазетидин-3-ол (66,8 г) розчиняли у МеОнН (608 мл). Одержаний розчин очищали із застосуванням колонки (5х25 см) их і-СейшШоб5е 5, використовуючи систему розчинників 85/15 СО/ЕОН з 0,595 диметилетиламіну і швидкістю потоку ЗООмл/хв, та одержували (25,3К)-1-бензгідрил-2-метилазетидин-3-ол (19,2 г). 60

Етап 4

У круглодонну колбу вносили (25,3К)-1-бензпдрил-2-метилазетидин-3З-ол (19,2 г, 75,8 ммоль), Ц(-)-камфорсульфонову кислоту (19 г, 80,2 ммоль), ЕН (100 мл) і ЕСО (50 мл). Суміш нагрівали до майже повного розчинення усіх твердих речовин з подальшою нетривалою обробкою ультразвуком. Суміш нагрівали до кипіння зі зворотним холодильником, потім охолоджували до кімнатної температури, і зберігали в морозильній камері протягом ночі. Тверді речовини відфільтровували, промивали великим об'ємом ЕСО, сушили при зниженому тиску, та одержували (25,3К)-1-бензгідрил-2-метилазетидин-3-ол-((1 8,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан- 1-ілІметансульфонову кислоту (31,9 г, 65,7 ммоль).

Етап 5

У круглодонну колбу вносили 20 95 гідроксиду паладію на вуглеці (50 95 (мас.) води) (2 г).

Каталізатор зволожували невеликим об'ємом ЕН. До суспензії додавали частковий розчин (25,38)-1-бензгідрил-2-метилазетидин-3-олчі| (18,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан- 1- іл|метансульфонової кислоти (20 г, 41,2 ммоль) в ЕЮН (400 мл). Суспензію барботували азотом протягом 5 хв, а потім на короткий час воднем. Реакційну суміш перемішували із застосуванням еластичної камери з воднем під тиском, поки весь початковий матеріал, за результатами І С-М5 аналізу, не зникне. Реакційну суміш фільтрували через шар Сеїйетф).

У другій колбі, використовуючи таку саму процедуру, гідрогенізували (25,3К)-1-бензгідрил-2- метилазетидин-3-ол-((1А,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іл|метансульфонову кислоту (10 г, 20,6 ммоль) з 20 95 гідроксиду паладію на вуглеці (50 9о (мас.) води) (1 г) в ЕЮН (200 мл).

У третій колбі, використовуючи таку саму процедуру, гідрогенізували (25,38)-1-бензгідрил-2- метилазетидин-3-ол(1 К,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іл|метансульфонову кислоту (2 г, 4,12 ммоль) з 20 95 гідроксиду паладію на вуглеці (50 95 (мас.) води) (0,2 г) в ЕН (40 мл).

Три вказані фільтрати об'єднували, і концентрували іп масио. Матеріал суспендували у н- гептані, обробляли ультразвуком протягом 10 хв, після чого відфільтровували тверді речовини.

Послідовність обробка ультразвуком-фільтрація повторювали ще чотири рази. Тверду речовину сушили іп масцо протягом ночі, та одержували вказану в заголовку сполуку (20,11 г; вихід 53 95 за 5 етапів). "Н ЯМР (399,85 МГц, Меоб): 4,35-4,25 (т, 2Н), 4,07 (да, 2-6,9 Гц, 10,6 Гц, 1Н), 3,78 (аа, У-7,0 Гц, 10,6 Гц, 1Н), 3,30 (т, 1Н), 2,79 (й, 9-14,9 Гу, 1Н), 2,70-2,63 (т, 1Н), 2,40-2,33 (т,

Зо 1Н), 2,08-2,03 (т, 2Н), 1,92 (й, 9У-18,4 Гу, 1Н), 1,69-1,62 (т, 1Н), 1,54 (а, 9-6,6 Гц, ЗН), 1,47-1,41 (т, 1Н), 1,14 (5, ЗН), 0,88 (5, ЗН).

Препаративна методика 5

Етил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)піразол-1-іл)лацетат о / 0-8

Ї М

ИЙ

М г о

У 500 мл круглодонну колбу вносили 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н- піразол (15 г, 77,32 ммоль), АСМ (150 мл), калію карбонат (32,06 г, 232,0 ммоль) та етилбромацетат (9,09 мл, 81,2 ммоль). Суспензію перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Реакційну суміш розподіляли між ЕТОАс (300 мл) і водою (250 мл). Шари відокремлювали, і водний шар екстрагували ЕЇОАс. Органічні речовини об'єднували, та промивали насиченим водним розчином хлориду натрію (500 мл), висушували над сульфатом натрію, фільтрували, концентрували іп масо, та одержували світло-жовте масло. Очищали шляхом хроматографування на силікагелі, використовуючи градієнт від 0 95 до 595 МеонН у

ОСМ, та одержували вказану в заголовку сполуку (16,8 г, 76 95). "Н ЯМР (400 МГц, ОМ5О-ав) 5 7,94 (5, 1Н), 7,60 (5, 1Н), 5,08 (5, 2Н), 4,14 (д, 9-71 Гц, 2Н), 1,26 (т, 12Н), 1,2 (1, 9-72 Гц, ЗН).

Препаративна методика 6 2-І4-(2-К25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1 -іл|!оцтова кислота с 4,

Е іх: х

Е | А

Р М о о

У 2000 мл круглодонну колбу вносили етил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2- іл)піразол-1-іл)ацетат (39,15 г, 132,8 ммоль), 2,4-дихлор-6-(трифторметил)піримідин (27,9 г, 126 ммоль), 1,4-діоксан (800 мл), водний розчин МагбОз (2 М, 200 мл, 400 ммоль) і біс(трифенілфосфін)паладій(ІІ)дихлорид (2,8 г, 4,0 ммоль). Суміш нагрівали до температури 85 "С. Через 2 год. суміш охолоджували до кімнатної температури. Реакційну суміш розділяли на дві частини, і використовували її у подальшому за описаними нижче методами:

Метод А:

До першої порції реакційної суміші додавали сіль ((1К,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1- іл|метансульфонат-(25)-2-метилазетидин-і-ію (18,69 г, 59,75 ммоль), і нагрівали до температури 70 С протягом 2,5 год. Охолоджували до кімнатної температури. Додавали водний розчин Маон (2 М, 166 мл, 332 ммоль), і перемішували протягом ночі при кімнатній температурі. Додавали ЕОАс (500 мл), і суміш перемішували протягом 30 хв. Підкисляли суміш до рнН-7 із застосуванням водного розчину НСІ (5 М), та екстрагували ЕЮАс (4х250 мл).

Органічні речовини об'єднували, промивали насиченим водним розчином Масі, сушили над

Маг?5О», фільтрували, і концентрували іп масо. Залишок розчиняли у ОСМ (125 мл), і краплями додавали сгептан (125 мл). Суміш перемішували протягом 30 хв. Тверду речовину відфільтровували, і промивали (1:11) ОСМ/гептаном (50 мл). Тверду речовину висушували на повітрі.

Метод В:

Другу порцію реакційної суміші концентрували іп масио для видалення 1,4-діоксану. Суміш розподіляли між ЕІОАс і водою. Водний шар відокремлювали, і органічний шар концентрували досуха. У колбу, яка містила залишок, додавали 1,4-діоксан (420 мл), водний розчин МагСОз (2

М, 75 мл, 150 ммоль) і сіль (1К,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іліметансульфонат-(25)-2-

Зо метилазетидин-і-ію (18,69 г, 59,75 ммоль). Суміш нагрівали до температури 70сС, іі перемішували протягом 1,5 год. Суміш охолоджували до кімнатної температури. Додавали водний розчин Маон (2 М, 125 мл, 250 ммоль), і перемішували протягом ночі. Додавали ЕТАс (500 мл), і перемішували протягом 30 хв. Водну фазу відокремлювали, і витримували її для осадження протягом ночі. Водну суміш підкисляли до рнН-7 із застосуванням водного розчину

НСІ (5 М), та екстрагували ЕЮАс (2х250 мл). Органічні речовини об'єднували, промивали насиченим водним розчином Масі, сушили над Ма»5О5, фільтрували концентрували іп масио, та одержували тверду речовину.

Метод очищення:

Продукти Методів і В об'єднували, і розчиняли у ТНЕ (485 мл). Додавали тіолову смолу зйаме5Ф (32 г). Суміш перемішували протягом 1 год., а потім фільтрували. Фільтрат концентрували іп масио, та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді білого порошку (31,7 г, 72 95). ЕБ/М5 (Іп/2): 342 (МАН); 340 (М-Н).

Препаративна методика 7 трет-бутил-4-(2-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-«(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1- іл|Іацетил|піперазин-1-карбоксилат

Х

М її

Е М х

Е | Й

Р М о

У с. у-- шт

У 1 л круглодонну колбу вносили 2-І4-(2-К25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6- (трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1-іл|дцтову кислоту (31,7 г, 91,0 ммоль), трет- бутилпіперазин-1-карбоксилат (20,5 г, 109 ммоль) і ОСМ (320 мл). До одержаного розчину додавали спочатку ЕВМ (25,6 мл, 182 ммоль), а потім краплями додавали розчин ангідриду 2,4,6-трипропіл-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфоринан-2,4,6-триоксиду (50 95 (мас.) в ЕІОАс, 68 мл, 114,2 ммоль). Перемішували при кімнатній температурі протягом 1 год. Реакційну суміш промивали водою (500 мл), а потім насиченим водним розчином Масі. Органічні речовини висушували над Ма»5О»:, фільтрували, концентрували у високому вакуумі, та одержували вказану в заголовку сполуку (52,5 г, чистота за оцінками 88 9о (мас.) на основі теоретичного кількісного виходу продукту). ЕБ/М5 (т/2): 510 (МАН); 508 (М-Н).

Препаративна методика 8 трет-Бутил-4-І4-(2-хлор-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1-іл|піперидин-1- карбоксилат

СІ ак

Е А х

Е | Й

Р М

(У -о

Х-

У флакон для мікрохвильового реактора додавали 2,4-дихлор-6-(трифторметил)піримідин (0,7 г, 3,05 ммоль) і 1,4-діоксан (15 мл). До розчину додавали трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5- тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол-1-іл)іпіперидин-І-карбоксилат (1,55 г, 4,0 ммоль), тетракіс(трифенілфосфін)паладій(О) (0,195 г, 0,17 ммоль), і водний розчин МагСОз (2 М, 5,5 мл, 11 ммоль). Флакон герметизували, і нагрівали в мікрохвильовому реакторі при 857 протягом 1 год. У другому флаконі проводили таку саму реакцію в тому самому масштабі.

Реакційні суміші об'єднували в ділильній лійці. Реакційну суміш розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію, та двічі екстрагували ЕЇОАс. Екстракти об'єднували, і сушили над

Маг5О», фільтрували і концентрували. Залишок очищали шляхом хроматографування на силікагелі, використовуючи градієнт від 0 95 до 50 95 Е(ОАс/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді білої твердої речовини (2,33 г, 88 95). ЕБ/М5 (п/з): 432, 434 (МН); 430, 432 (М-Н).

Препаративна методика 9 трет-Бутил-4-І4-(2-К2Н)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-6-«трифторметил)піримідин-4- іл|піразол-1-іл|піперидин-1-карбоксилат г» /

Х

М її

Е Ж х

Е | Й й М (У -о х-

У трьох окремих флаконах для мікрохвильового реактора об'єднували трет-бутил-4-(4-(2- хлор-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1-іл|піперидин-1-карбоксилат (1 г, 2,3 ммоль) і 1,4- діоксан (16 мл). Додавали (К)-2-азетидинметанолу гідрохлорид (0,52 г, 4,3 ммоль) і ОІРЕА (1,6 мл, 9,3 ммоль). Флакони герметизували, і нагрівали у мікрохвильовому реакторі до температури 130 "С протягом 2,5 год. Одержані реакційні суміші об'єднували, після чого одержану суміш розбавляли насиченим водним розчином Ма»СОз, і двічі екстрагували ЕЮАс. Екстракти об'єднували, висушували над Ма»5О:, фільтрували, та концентрували. Залишок очищали шляхом хроматографування на силікагелі, використовуючи градієнт від 10905 до 8095

ЕАс/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді білої піни (3,2 г, 95 95).

ЕБ/М5 (т/2): 483 (М.-Н).

Препаративна методика 10 трет-Бутил-3-І4-(2-хлор-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1-іл|Іазетидин-1-карбоксилат

СІ ак

Е хх х

Е | Й

Р М г но х-

У флакон для мікрохвильового реактора вносили 2,4-дихлор-6-(трифторметил)піримідин (0,50 г, 2,30 ммоль), 1,4-діоксан (22 мл) і воду (2 мл). До розчину додавали трет-бутил-3-(4- (4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол-1-іллуазетидин-1-карбоксилат (0,630 г, 1,71 ммоль), 1,1-бісбідифенілфосфіно)фероцені|дихлорпаладій(ІІ) (0,20 г, 0,26 ммоль) і К»СОз (500 мг, 3,67 ммоль). Флакон герметизували, і вміст перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Неочищену реакційну суміш завантажували на картридж із діоксидом кремнію, висушували у вакуумній печі, залишок очищали із застосуванням флеш-хроматографії (градієнт 0-45 96 ЕІЮАс/гексан), та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді світло-коричневого масла (0,375 г, 49 965). ЕБ/М5 (т/г): 348 (МАН -Ви); 402 (М-Н).

Препаративна методика 11 трет-Бутил-3-І4-(2-К2Н)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-6-«трифторметил)піримідин-4- іл|Іпіразол-1-іліазетидин-1-карбоксилат

С» /

М й

Е А х

Е | И

Р М г )-о х-

У флаконі об'єднували трет-бутил-3-(4-(2-хлор-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1- іл)азетидин-1-карбоксилат (190 мг, 0,47 ммоль) і ТНЕ (18 мл). Додавали (5)-2-азетидинметанолу гідрохлорид (150 мг, 1,23 ммоль) і ОІРЕА (1,0 мл, 5,7 ммоль). Флакон герметизували, і нагрівали в мікрохвильовому реакторі до температури 100 "С протягом 1 год. 40 хв. Після охолодження до кімнатної температури неочищену реакційну суміш завантажували на картридж із діоксидом кремнію, сушили у вакуумній печі, очищали залишок хроматографією на силікагелі з використанням градієнта від 0 9о до 80 9о (5 96 МЕеЕОН/ЕОАс)/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді безбарвного масла (153 мг, 72 95). ЕБ/М5 (т/2): 455 (М--Н).

Препаративна методика 12 трет-Бутил-3-І4-(2-(25,3Н8)-3-гідрокси-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4- іл|Іпіразол-1-іліазетидин-1-карбоксилат

Х

М її

Е С

Х

Е | А

Р М г )--о х-

Вказану в заголовку сполуку одержували по суті так, як описано в Препаративній методиці 11, використовуючи (25,3К)-2-метилазетидин-3-ол-((1Н8,45)-7,7-диметил-2-оксо-норборнан- 1- іл|метансульфонову кислоту. ЕБ/М5 (т/2): 455 (МАН).

Препаративна методика 13 трет-Бутил-3-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-«(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1- іл|Іазетидин-1-карбоксилат

Х

М ї

Е С х

Е | Й

Р М г д--

Кк

Вказану в заголовку сполуку одержували по суті так, як описано в Препаративній методиці 11, використовуючи сіль (1К,45)-7,7-диметил-2-оксо-норборнан-1-іліметансульфонат-(25)-2-

метилазетидин-1-ію. Реакційну суміш очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи 45 95 ЕІЮАс/гексанів. ЕБ/М5 (іп/27): 439 (М-Н).

Препаративна методика 14 2-І4-І(5-Ціано-6-К25)-2-метилазетидин-1-іл|-4--трифторметил)-2-піридил|піразол-1-іл|оцтова кислота

М

Ж

ОМ х

Е

Р М о он

У круглодонну колбу вносили етил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2- іл)упіразол-1-іллацетат (2,95 г, 10,5 ммоль), 2,6-дихлор-4-«(трифторметил)піридин-3-карбонітрил (2 г, 8,3 ммоль), 1,4-діоксан (52,4 мл) і водний розчин МагСбОз (2 М, 13,3 мл, 26,6 ммоль).

Одержану суміш барботували азотом протягом 10 хв. Додавали біс(трифенілфосфін)паладій(1 І) дихлорид (191 мг, 0,27 ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 16,5 год. Колбу споряджали парціальним конденсатором гарячого зрошення, і додавали сіль

І18,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ілметансульфонат-(25)-2-метилазетидин-1-ію (2,73 г, 9,10 ммоль). Суміш нагрівали до температури 70 "С, і перемішували протягом З год., потім охолоджували до кімнатної температури. Додавали водний розчин Маон (2 М, 21 мл, 42 ммоль), і суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 15 хв. Органічний розчинник випарювали іп масо. Залишок розбавляли водою (50 мл), і воду зливали з твердої речовини.

Цю процедуру з водою (50 мл) повторювали двічі. Тверду речовину збирали із застосуванням вакуумної фільтрації, і сушили на повітрі протягом ночі. Додавали 2-метилтетрагідрофуран (30,4 мл) і водний розчин лимонної кислоти (6,5 95 (мас), 30,4 мл). Перемішували протягом 5 хв, потім розділяли шари. Органічний шар промивали водним розчином лимонної кислоти (6,5 Фо (мас), 30,4 мл). Органічний розчин сушили над Мо9зО», фільтрували, концентрували, та одержували вказану в заголовку сполуку (3,14 г, чистота за оцінками 97 95 (мас.) на основі теоретичного кількісного виходу продукту). ЕБ/М5 (іт/2): 366 (МАН); 364 (М-Н).

Препаративна методика 15 трет-Бутил-4-І4-І(б-хлор-5-ціано-4-«трифтормегил)-2-піридил|піразол-1-іл|піперидин-1- карбоксилат

СІ

М

Ж тм

Е с х

Е | й й М (У -о х

Метод А:

У флакон для мікрохвильового реактора вносили 2,6б-дихлор-4-«-трифторметил)піридин-3- карбонітрил (497 мг, 2,063 ммоль), трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2- іл)упіразол-1-іл|піперидин-1-карбоксилат (867,2 мг, 2,3 ММОЛЬ), комплекс 1,7- бісідифенілфосфіно)фероценпаладій(І!) дихлориду та дихлорметану (СМ) (91,2 мг, 0,109 ммоль), водний розчин карбонату калію (З М розчин, 2,1 мл, 6,3 ммоль) та 1,4-діоксан (10,5 мл).

Одержану суміш барботували азотом протягом 5 хв, посудину герметизували, і нагрівали до температури 80 "С. Через 1 год. охолоджували до кімнатної температури. Суміш фільтрували через шар Сеїйеб, промиваючи ЕОАс. Концентрували, і залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 15 95 до 40 95 ЕОАсС в гексанах, після чого нетривало сушили іп масо при 35 "С, та одержували вказану в заголовку сполуку (705 мг, 64 95). ЕБ/М5 (тп/2): 454, 456 (М-Н).

Метод В:

У круглодонну колбу вносили 2,6-дихлор-4-(трифторметил)піридин-3-карбонітрил (1,07 г, 4,44 ммоль) і 1,4-діоксан (25 мл). Додавали трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2- діоксаборолан-2-іл)піразол-1-іл|Іпіперидин-1-карбоксилат (2,08 Г, 5,51 ммоль), тетракіс(трифенілфосфін)паладій(0) (200 мг, 0,17 ммоль) і водний розчин МагСОз (2 М, 8,5 мл, 17 ммоль). Реакційну суміш знегажували, і гріли при 85 "С протягом 1,5 год. Органічну фазу з реакційної суміші зливали, і неочищену реакційну суміш розділяли на дві рівні частини для використання в Препаративних методиках 16 та 17. ЕБ/М5 (Ітп/2): 454 (М-Н).

Препаративна методика 16 трет-Бутил-4-І4-(5-ціано-6-К2А)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-4-"'трифторметил)-2- піридиліпіразол-1-іл|Іпіперидин-1-карбоксилат

С» /

М

М вх тм

Е с х

Е | й й М (У -о х

У флакон для мікрохвильового реактора вносили 1/2 неочищеного реакційного продукту з

Препаративної методики 15, Метод В, (К)-2-азетидинметанолу гідрохлорид (0,5 г, 4 ммоль),

ПІРЕА (1,6 мл, 9,2 ммоль) і додаткову кількість 1,4-діоксану (16 мл). Реакційну суміш гріли при 120 "С протягом 2 год. Реакційну суміш охолоджували, концентрували, та одержували неочищений продукт. Залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 50 9о до 80 96 ЕІОАс/гексанів, і знову очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнта від 2 95 до 5 95 ІРА/ОСМ, та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді жовтувато-коричневої твердої речовини (264 мг, 26 95).

ЕБ/М5 (т/2): 507 (Ма-Н).

Препаративна методика 17 трет-Бутил-4-І(4-І(5-ціано-6-К25,3Н8)-3-гідрокси-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2- піридиліпіразол-1-іл|Іпіперидин-1-карбоксилат

Х

М

Ж

ОМ

Е Т хх

Е | Й

Р М

(У -о х

Вказану в заголовку сполуку одержували по суті так, як описано в Препаративній методиці 16, використовуючи другу 1/2 неочищеного реакційного продукту з Препаративної методики 15 і (25,38)-2-метилазетидин-3-ол-|(1Н8,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іл|метансульфонову кислоту. ЕБ/М5 (іт/2): 507 (МН).

Препаративна методика 18 2-Хлор-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4-(трифторметил)піридин-3-карбонітрилу гідрохлорид

СІ

М вх

ОМ

Е що х

Е | й

Р М

(У

Н НС

У флакон вносили трет-бутил-4-(4-(б-хлор-5-ціано-4-(трифторметил)-2-піридил|піразол- 1- іл|Іпіперидин-1-карбоксилат (705 мг, 1,5 ммоль), 4М розчин НСІ в 1,4-діоксані (1,5 мл, 6,0 ммоль) і ОСМ (1,5 мл). Суміш перемішували при кімнатній температурі Через 1 год. суміш концентрували іп масио, і залишок сушили іп масо протягом ночі, та одержували вказану в заголовку сполуку (608 мг), яку використовували як є без додаткового очищення в

Препаративних методиках 19 та 20. ЕБ/М5 (т/з2): 356, 358 (вільна основа М'-Н).

Препаративна методика 19 2-хлор-6-(1-(1-метил-4-піперидил)піразол-4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

СІ

М вх

ОМ

Е ще хх

Е | А й М

Х

У флакон вносили /2-хлор-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4--трифторметил)піридин-3- карбонітрилу гідрохлорид (303,3 мг, 0,74 ммоль), 13,3 М розчин формальдегіду у воді (0,2 мл, З ммоль), триацетоксиборогідрид натрію (378 мг, 1,73 ммоль) і 1,2-дихлоретан (6,0 мл). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 30 хв. Додавали насичений водний розчин бікарбонату натрію та двічі екстрагували ОСМ. Екстракти об'єднували, концентрували іп масио, та одержували вказану в заголовку сполуку (285 мг, вихід 99 905). ЕБ/М5 (т/з2): 370, 372 (М.Н).

Препаративна методика 20 трет-Бутил-4-І4-І(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2-піридил|піразол- 1-іл|Іпілеридин-1-карбоксилат

М

С

ОМ

Е с о х :

Е | А М

Е /

М о

Вказану в заголовку сполуку одержували з 2,6б-дихлор-4-«трифторметил)піридин-3- карбонітрилу та трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2)-іл)-1Н-піразол-1- іл)упіперидин-1-карбоксилату з використанням по суті такої самої процедури, що й у наведеному нижче Прикладі 10. Е5Б/М5 (Ііп/27): 491 (М-Н).

Зо

Препаративна методика 21 трет-Бутил-4-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-«(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1- іл|Іпіперидин-1-карбоксилат

Х

М її

Е А х

Е

Р М

У о

А / 2,4-дихлор-6-(трифторметил)піримідин (0,258 г, 1,1 ммоль) розчиняли у 1,4-діоксані (6 мл), і додавали трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил)-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол-1- іл)упіперидин-1-карбоксилат (0,591 г, 1,52 ммоль), тетракіс(трифенілфосфін)паладій(0) (68 мг, 0,059 ммоль) і 2 М водний розчин карбонату натрію (2,2 мл, 4,4 ммоль). Суміш нагрівали до температури 85"С в мікрохвильовому реакторі протягом 1 год. Охолоджували до кімнатної температури і додавали сіль (1Е,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іл|Іметансульфонат-(25)- 2-метилазетидин-1-ію (0,414 г, 1,36 ммоль) і ОІРЕА (0,6 мл, 3,4 ммоль). Суміш гріли протягом 2 год. при температурі 110 Сб. Суміш розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію, та двічі екстрагували ЕІОАс. Екстракти об'єднували, висушували над сульфатом натрію, потім фільтрували, і випарювали. Залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 0 95 до 50 95 Е(ОАс/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку (215 мг, 41 9б) у вигляді білої твердої речовини. ЕБ/М5 (Іп/2): 467 (МНН).

Препаративна методика 22 трет-Бутил-3-І4-Іб-хлор-5-ціано-4-«трифторметил)-2-піридилі|піразол-1-іл|азетидин-1- карбоксилат

СІ

М

ЖЕ

ОМ

Е с х

Е | є

Р М г хз о

У флакон вносили 3-ціано-2,6-дихлор-4-«трифторметил)піридин (0,360 г, 1,49 ммоль), 1,4- діоксан (7,5 мл), трет-бутил-3-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол-1- іл)яуазетидин-1-карбоксилат (0,727 г, 1,98 ммоль), тетракіс(трифенілфосфін)паладій(0) (95 мг,

0,08 ммоль) і 2 М водний розчин карбонату натрію (2,8 мл, 5,6 ммоль, 2 моль/л). Посудину герметизували, і гріли у мікрохвильовому реакторі при 85"С протягом 1 год. Розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію, і двічі екстрагували ЕЮАс. Екстракти об'єднували, висушували над сульфатом натрію, фільтрували, і випарювали. Залишок очищали шляхом хроматографування на силікагелі, використовуючи градієнт від 0 95 до 9095 ЕЮАс гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку (0,609 г, 95 95). ЕБ/М5 (т/зг): 426, 428 (М-

Н).

Препаративна методика 23 2-Хлор-6-(1-тетрагідропіран-4-ілпіразол-4-іл)-4-(трифторметил)піридин-3-карбонітрил

СІ

М

Ж

ОМ

Е що

М

Е

Р М

У

Вказану в заголовку сполуку одержували з 1-тетрагідропіран-4-іл-4-(4,4,5,5-тетраметил- 1,3,2-діоксаборолан-2-іл)упіразолу, використовуючи по суті таку ж процедуру, що й у

Препаративній методиці 22. ЕБ/ МС (т/2): 357, 359 (МН).

Препаративна методика 24 трет-Бутил-3-І4-І(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2-піридил|піразол- 1-іл|ідаззетидин-1-карбоксилат

М

М вх тм

Е Ще х

Е

Р М г

У-5 о трет-Бутил-3-І4-Іб-хлор-5-ціано-4-«трифторметил)-2-піридилі|піразол-1-іл|азетидин-1- карбоксилах (603 мг, 1,410 ммоль) розчиняли у ТНЕ (18 мл). Додавали сіль 1К,45)-7,7- диметил-2-оксонорборнан-1-іл|Іметансульфонат-(25)-2-метилазетидин-і-ію (519 мг, 1,711 ммоль) і ОІРЕА (0,75 мл, 4,3 ммоль), після чого суміш нагрівали до температури 130" протягом 2,5 год. Розчинник випарювали, і залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 0 95 до 50 95 Е(ОАс/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку (498 мг, 76 95) у вигляді безбарвного масла. ЕБ/М5 (т/2): 463 (М.Н), 461 (М-

Н).

Препаративна методика 25 трет-Бутил-М-(2-(4-(4-(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2- піридилі|піразол-1-ілІ|-1-піперидил|-2-оксоетилікарбамат

М

Ж

ОМ х

Е | й

Р М

(У ме

М о Н -- 2-К(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4-"'трифторметил)піридин-3- карбонітрил (0,129 г, 0,330 ммоль) розчиняли в ОСМ (1 мл). Додавали 2-(трет- бутоксикарбоніламіно)оцтову кислоту (69 мг, 0,39 ммоль), НАТИ (0,175 г, 0,460 ммоль) і ОІРЕА (0,18 мл, 1,0 ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом З год., потім розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію, та двічі екстрагували ОСМ.

Органічні речовини об'єднували, висушували над сульфатом натрію, потім фільтрували, та випарювали. Залишок очищали із застосуванням хроматографії з оберненою фазою на колонці із силікагелем С18 (розчинник А - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію, розчинник В - АСМ; градієнт від 10 95 до 91 95 В), та одержували вказану в заголовку сполуку (129 мг, 71 95). ЕБ/М5 (т/2): 548 (М'-Н).

Препаративна методика 26 1-(2,2-Диметил-/1,З|діоксолан-4-ілметил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-|(1,3,2|діоксаборолан-2-іл)- 1Н-піразол о о

М М о й 4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол (0,500 г, 2,50 ммоль) суспендували у ОМЕ (10 мл), потім додавали 4-(хлорметил)-2,2-диметил-1,3-діоксолан (0,73 мл, 5,0 ммоль) і карбонат цезію (1,64 г, 5,03 ммоль). Суміш нагрівали до температури 757 протягом ночі. Реакційну суміш розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію, та екстрагували ЕЮАс. Органічні речовини об'єднували, і чотири рази промивали насиченим водним розчином Масі, потім сушили над сульфатом натрію, фільтрували, випарювали, та одержували вказану в заголовку сполуку (780 мг), яку використовували у подальшому без

Зо додаткового очищення. ЕБ/М5 (іт/2): 309 (МН).

Препаративна методика 27 2-Хлор-6-11-(2,2-диметил-1,3-діоксолан-4-іл)метилі|піразол-4-іл|-4--трифторметил)піридин-3- карбонітрил

СІ

М вх

ОМ

Е с х

Е | Й

Е м - -1

З-ціано-2,6-дихлор-4-«трифторметил)піридин (0,352 г, 1,46 ммоль) розчиняли у 1,4-діоксані (7,3 МЛ). Додавали 1-(2,2-диметил-/1,З|діоксолан-4-ілметил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-

П,3,2Ідіоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол (0,602 г, 1,89 ммоль), тетракіс(трифенілфосфін)паладій(оО) (0,715 г, 0,619 ммоль) і водний 2 М розчин карбонату натрію (2,8 мл, 5,6 ммоль). Суміш продували азотом протягом 15 хв, потім нагрівали до температури 85 "С протягом 1,5 год.

Реакційну суміш розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію та двічі екстрагували ЕІЮАс. Органічні речовини об'єднували, сушили над сульфатом натрію, потім фільтрували, і випарювали. Залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 0 9о до 40 96 ЕІАс/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку (207 мг, 36 95) у вигляді безбарвного масла. ЕБ/М5 (т/2): 387, 389 (М-Н).

Препаративна методика 28 трет-Бутил-4-Іб-хлор-5-ціано-4-(трифторметил)-2-піридилі|піразол-1-карбоксилат

СІ

М

Ж

Ом х

Е | у

Р М уто х-

У флаконі об'єднували 3-ціано-2,б-дихлор-4-(трифторметил)піридин (195 мг, 0,785 ммоль), трет-бутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)піразол-1-карбоксилат (250 мг, 0,85 ммоль), 2 М водний розчин карбонату натрію (2,5 мл, 5,0 ммоль) і 1,4-діоксан (4 мл). Реакційну суміш знегажували при кімнатній температурі шляхом барботування реакційної суміші азотом при перемішуванні протягом 5 ХВ. Додавали П1,7- бісідифенілфосфіно)фероценідихлорпаладій(І) (185 мг, 0,240 ммоль), і реакційну суміш нагрівали до температури 100 "С протягом 2 год. Додавали воду, та екстрагували ЕОАСс.

Екстракти об'єднували, і концентрували іп масо. Залишок очищали із застосуванням

Зо хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 2595 до 50 9о Е(Ас/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку (40 мг, 14 95) у вигляді помаранчевої твердої речовини.

ЕБ/М5 (т/2): 271, 273 (М-Н-ВОС).

Препаративна методика 29 трет-Бутил-М-(2-(Ц2-(4-(2-К25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4- іл|піразол-1-іліацетиліаміно|)етилікарбамат

Х

М її

Е А х

Е | й

Р М о

М

Н Н в и о о Ж

У флакон вносили -2-І4-(2-(2,5)-2-метилазетидин-1-іл|-6--трифторметил)піримідин-434- іл|Іпіразол-1-іл|оцтову кислоту (200 мг, 0,586 ммоль), ОМЕ (2 мл), ОІРЕА (0,31 мл, 1,76 ммоль),

НАТИ (0,267 г, 0,703 ммоль) і М-ВОС-етилендіамін (0,102 мл, 0,644 ммоль). Перемішували протягом 8 год. при кімнатній температурі, потім очищали із застосуванням препаративної НРІ С

Іпараметри: розчинники - водний 10 мМ розчин бікарбонату амонію, рН 10/5 95 меон (розчинник А) і АСМ (розчинник В); передколонка - Уаїег5 ВЕН НІС, 100х30 мм, 5 мкм, 110 А із захисною колонкою ВЕН НІГІС, 15 х30 мм; колонка: РпепотепехФ Кіпеїех?Ф ЕМО С18, 100х30 мм, 5 мкм, 100 А із захисною колонкою ЕМО, 15х30 мм, з використанням вбудованого нагрівача при 50 "С; градієнт від 33 95 до 67 до ВІ, та одержували вказану в заголовку сполуку (179 мг, 6З 96). ЕБ/М5 (тп/2): 484 (МН).

Сполуки, наведені в Таблиці 1, одержували з використанням по суті такої самої процедури, що й у Препаративній методиці 29, і відповідного Наявного У Продажу аміну.

Таблиця 1

Номер ЕБ/М5 препаративної Назва Структура (т/2): методики (МАН) со м трет-бутил-(25)-2-метил-4- (е-(4-е-Ц25)-2- г а Х метилазетидин-1-іл|-6- ті | А (трифторметил)піримідин- М й 524 4-іл|Іпіразол-1- -ї іл|ІацетилІпіперазин-1- М карбоксилат )

М де

Кк

Таблиця 1

Номер ЕБ/М5 препаративної Назва Структура (т/2): методики (МАН) с

А трет-бутил-(35)-3-метил-4-| Р сх Х

Г2-І4-(2-К25)-2- Е | у; метилазетидин-1-іл|-6- Е М о

З1 (трифторметил)піримідин- х ( 524 4-іл|Іпіразол-1- іл)ацетил|піперазин-1- М карбоксилат пох

М у-е

З3 (трифторметил)пірим і М й 538 дин-4-іл|піразол-1- - іл|ІацетилІпіперазин-1- М карбоксилат )

М й-

Кк

Зб

Препаративна методика 34 трет-Бутил-(3Н)-3-І4-(2-К25,38)-3-гідрокси-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил) піримідин-4-іл| піразол-1-іл|Іпіролідин-1-карбоксилат

Х

М ї

Е С х

Е | А

Р М о ск

У реакційній посудині 2,4-дихлор-б-(трифторметил)піримідин (600 мг, 2,71 ммоль) об'єднували з (К)-трет-бутил-3-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол-1- іл)піролідин-1-карбоксилатом (1 г, 2,67 ммоль), 2 М водним розчином карбонату натрію (З мл, 6 ммоль) та біс(трифенілфосфін)паладіюції) дихлоридом (50 мг, 0,068 ммоль) у 1 ,4-діоксані (6 мл).

Знегажували азотом, і нагрівали суміш до температури 80 "С протягом 2 год. Розбавляли ЕЮАДс (75 мл), промивали водою та насиченим водним розчином Масі. Органічний шар сушили над сульфатом натрію, фільтрували, і концентрували. Залишок об'єднували з (25,3К)-2- метилазетидин-3-ол-((1А,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іл|їметансульфоновою / кислотою (420 мг, 1,32 ммоль) у 1,4-діоксані (4 мл) і ОІРЕА (0,7 мл, 4 ммоль) у флаконі. Посудину герметизували, і нагрівали до температури 120 "С в мікрохвильовому реакторі протягом 1 год.

Реакційну суміш завантажували безпосередньо на силікагель, і очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 095 до 8095 ЕЮАс/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку (570 мг, 92 95) у вигляді не зовсім білої піни. Е5Б/М5 (т/2): 469 МАНІ.

Препаративна методика 35 трет-Бутил-(35)-3-(4-(2-(25,38)-3-гідрокси-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил) піримідин-4-іл|Іпіразол-1-іл|Іпіролідин-1-карбоксилат

Х

М ї

Е хх х

Е | А

Р М

Со ск

Вказану в заголовку сполуку одержували по суті так, як описано в Препаративній методиці 34, використовуючи (5)-трет-бутил-3-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н- піразол-1-іл/піролідин-1-карбоксилат. Е5/М5 (іп/2): 469 (МАНІ.

Препаративна методика 36 трет-Бутил-3-(1 Н)-4-(2-К28)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-6-"'трифторметил)піримідин-4- іл|Іпіразол-1-іл|Іпіролідин-1-карбоксилат

С» /

Х

М ї

Е А х

Е | ИЙ

Р М м. ск

Вказану в заголовку сполуку одержували по суті так, як описано в Препаративній методиці 34, використовуючи (К)-2-азетидинметанолу гідрохлорид. ЕБ/М5 (т/з2): 469 |МАНІ.

Препаративна методика 37 трет-Бутил-4-І4-І(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2-піридил|піразол- 1-іл|-3-гідроксипіперидин-1-карбоксилат

М

М вх их вх

Е

Е / в

М и о о Х

У флакон вносили 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол (560 мг, 2,9 ммоль), трет-бутил-7-окса-4-азабіцикло|4.1.0)гептан-4-карбоксилат (580 мг, 2,9 ммоль), ОМЕ (10 мл) і карбонат цезію (1,7 г, 5,2 ммоль). Суміш нагрівали до температури 80 "С протягом 6 год.

Реакційну суміш розбавляли водою, та екстрагували ЕІАс. Екстракти об'єднували, і сушили над сульфатом натрію, фільтрували, концентрували, та одержували неочищений трет-бутил-3- гідрокси-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)піразол-1-іл|піперидин-1-карбоксилат (650 мг). Цей матеріал вносили у круглодонну колбу, і додавали 2,6б-дихлор-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил (300 мг, 1,2 ммоль), 1,4-діоксан (5 мл) і 2М водний розчин карбонату натрію (1,3 мл, 2,6 ммоль). Реакційну суміш знегажували при кімнатній температурі шляхом барботування реакційної суміші азотом при перемішуванні протягом 5 хв. Додавали тетракіс(трифенілфосфін)паладій(О) (80 мг, 0,06 ммоль), і додатково знегажували протягом ще

З хв. Реакційну суміш нагрівали до температури 80 "С протягом 4 год., потім охолоджували до кімнатної температури. Додавали ОІРЕА (0,6 мл, 3 ммоль) і сіль ((1К,45)-7,7-диметил-2- оксонорборнан-1-іл|метансульфонат-(25)-2-метилазетидин-і-ію (410 мг, 1,4 ммоль).

Перемішували протягом 30 хв при кімнатній температурі, а потім нагрівали до температури 80 "С протягом 1 год. Суміш розбавляли водою, і екстрагували ЕІОАс. Екстракти об'єднували, і сушили над сульфатом натрію, фільтрували і концентрували. Залишок очищали із застосуванням хроматографії з оберненою фазою (С18, градієнт від 10 95 до 100 95 АСМ/1ОМ водного розчину карбонату амонію «ж 5 95 метанолу), та одержували вказану в заголовку сполуку (95 мг, 15 95). ЕБ/М5 (т/л): 507 (МАН).

Приклад 1 2-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1 -іл|-1-піперазин- 1-ілетанон

Х

М її

Е не ху

Е

Е / а що

К. н

У 2л круглодонну колбу вносили трет-бутил-4-(2-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6- (трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1-іл|Ііацетилі|піперазин-1-карбоксилат (47,0 г, 89,5 ммоль), і додавали ОСМ (470 мл). До одержаної суміші краплями додавали ТЕА (60 мл, 778 ммоль), і перемішували при кімнатній температурі протягом 19 год. Додавали додаткову кількість ТЕА (8 мл, 110 ммоль), і продовжували перемішування протягом 18 год. Реакційну суміш повільно додавали у колбу, яка містила охолоджений водний розчин МНАОН (35 95 (мас), 150 мл, 1300 ммоль). Шари розділяли. Органічний шар промивали насиченим водним розчином Масі, сушили над Ма»5О:, фільтрували і концентрували. Залишок розчиняли у ЕОАс (400 мл), і концентрували іп масио. Залишок розчиняли в 1РА (400 мл), і концентрували іп масио, та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді не зовсім білої піни (32 г, 84 95). ЕБ/М5 (т/лг): 410 (МАН).

Приклад Та 2-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1 -іл|-1-піперазин- 1-ілетанону сесквісукцинат со о

Ж он

МОМ 1.5 но

Е ХО о х

Е | М

Е / а

Що

К.

Н

В реактор вносили спочатку 2-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-«(трифторметил)піримідин- 4-іл|піразол-1-іл|-1-піперазин-1-ілетанон (959 г, 2,34 моль), а потім ІРА (11,5 л). Додавали бурштинову кислоту (550 г, 4,69 моль), суміш нагрівали до температури 70-80"С, та одержували розчин. Суміш перемішували при 70-80 "С протягом 2 год., потім охолоджували до температури 25 "С протягом 6 год. Суміш фільтрували, і промивали ІРА (1 л). Одержану тверду речовину сушили при 40-50 "С протягом 6 год., та одержували вказану в заголовку сполуку (1070 г, 78 95) у вигляді білої твердої речовини. "Н-ММЕ (400 МГц, ОМ50-ав) 6 8,41 (5, 1Н), 8,18 (5, 1Н), 7,33 (5, 1Н), 5,24 (в, 2Н), 4,53-4,43 (т, 1Н), 4,06-3,93 (т, 2Н), 3,58-3,47 (т, АН), 2,95-2,82 (т, 4Н), 2,47-2,40 (т, 1Н), 2,37 (5, 6Н - сукцинати і метиленові групи, 1,5 екв, ), 2,02-1,92 (т, 1Н), 1,50 (а, 9-4 Гц, ЗН). Е5-М5 з високою роздільною здатністю (т/7): теоретичне 410,1911 (вільна основа МАН), спостережуване 410,1916.

Піки порошкової рентгенограми сполуки Прикладу Та наведені в Таблиці 2.

Таблиця 2

Піки порошкової рентгенограми сполуки Прикладу Та

Кут (22-тета) Відносна інтенсивність (95 найбільш інтенсивного піка) 27,5 95 22,7 95 33,3 9 30,5 96 100,0 95 6 щ БК 200 г | 22.1 96 53,8 9 8 щющКБхг2гіЗ ДГ | 44,9 96 нн ші 36,6 9 23,2 Зо

Приклад 2

М2Н)-1-І4-П1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-6-«трифторметил)піримідин-2-іл|азетидин-2- іл|Іметанол

С

М ак

Е А вх

Е | р,

Р М

(У

Н трет-Бутил-4-І4-(2-К2Н)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-6-«трифторметил)піримідин-4- іл|Іпіразол-1-іл|Іпіперидин-1-карбоксилат (2,55 г, 5,28 ммоль) розчиняли у ЮОСМ (50 мл), і додавали ТЕА (10 мл, 132 ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 30 хв, потім її наносили безпосередньо на смолу ЗСХ. Смолу промивали Меон, а потім розчином аміаку у МеОнН (7 М). Фракції, які містять потрібний продукт, об'єднували, і концентрували іп масо. Залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 0 95 до 9 95 (7 М розчин аміаь/МмеонН)уОСсМ, та одержували вказану в заголовку сполуку у вигляді білого порошку (2,02 г, 94 95). ЕБ/М5 (Ітп/2): 383 (МН); 381 (М-Н).

Приклад З

МК2Н)-1-І4-П1-(азетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6-«'трифторметил)піримідин-2-іл|Іазетидин-2- іл|Іметанол

СУ /

М й

Е Ж вх

Е | р

Р М

Ї

Н трет-Бутил-3-І4-(2-К2Н)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-6-«трифторметил)піримідин-4- іл|Іпіразол-1-іліазетидин-1-карбоксилат (153 мг, 0,336 ммоль) розчиняли у ОСМ (15 мл), і додавали ТЕА (5 мл, 66 ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 1 год., потім концентрували при зниженому тиску при кімнатній температурі. Залишок випарювали спільно з ОСМ, і сушили під вакуумом. Залишок очищали із застосуванням препаративної НРІ С (параметри: розчинник А - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію, рН 10/595 МмМеон, розчинник В - АСМ; колонка - РпепотепехФ Кіпеїех? ЕМО С18, 100х30 мм, 5 мкм, 100 А з 15х30 мм захисною колонкою ЕМО), та одержували вказану в заголовку сполуку (67 мг, 40 95) у вигляді білого порошку. ЕБ/М5 (Іп/2): 355 (МАН); 353 (М-Н).

Приклад 4 (25,38)-1-І4-(1-(азетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6-«(трифторметил)піримідин-2-іл|-2- метилазетидин-3-ол 5

Х

М її

Е о х

Е

Р М

Ї

Н трет-Бутил-3-І4-(2-(25,3Н8)-3-гідрокси-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4- іл|піразол-1-іл|іазетидин-1-карбоксилат (153 мг, 0,336 ммоль) розчиняли у ОЮОСМ (15 мл), і додавали ТЕА (5 мл, 66 ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 1 год., потім концентрували при зниженому тиску при кімнатній температурі. Залишок випарювали спільно з ОСМ, і сушили під вакуумом. Залишок очищали із застосуванням препаративної НРІ С (параметри: розчинник А - 10 мМ водний розчин МНАНСО: з 5 95 Меон, рн 10, розчинник В -

АСМ; колонка - РпепотепехФ Кіпеїех? ЕМО С18, 100х30 мм, 5 мкм, 100 А з 15х30 мм захисною колонкою ЕМО), та одержували вказану в заголовку сполуку (79 мг, 57 95) у вигляді білого

Зо порошку. ЕБ/М5 (т/7): 355 (М.а-Н); 353 (М-Н).

Приклад 5 2-І4-І(5-Ціано-6-К25)-2-метилазетидин-1-іл|-4--трифторметил)-2-піридил|піразол-1-іл|-М-(2- гідроксіетил)ацетамід

М

М вх

ОМ

Е с вх

Е

Е /

М о

М

Н де 2-І4-І(5-Ціано-6-К25)-2-метилазетидин-1-іл|-4--трифторметил)-2-піридил|піразол-1-іл|оцтову кислоту (351 мг, 0,96 ммоль) розчиняли у ОМЕ (2 мл), і додавали НАТИ (482 мг, 1,24 ммоль), етаноламін (0,1 мл, 2 ммоль) і ОТРЕА (0,5 мл, З ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 2 днів. Реакційну суміш очищали безпосередньо із застосуванням хроматографії з оберненою фазою (колонка із силікагелем С18), використовуючи градієнт від 595 до 95595 МесСм/водний розчин (МНа)2бОз (10 мМ), та одержували вказану в заголовку сполуку (110 мг, 28 95). ЕБ/М5 (п/2): 409 (МАН); 407 (М-Н).

Приклад 6 2-К2Н8)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-6-11-(4-піперидил)піразол-а4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил он

С

М

М С ех

ОМ

Е Т вх

Е

Р М

7

Н трет-Бутил-4-І4-(5-ціано-6-К2А)-2-(гідроксиметил)азетидин-1-іл|-4-"'трифторметил)-2- піридилі|піразол-1-іл|Іпіперидин-1-карбоксилат (264 мг, 0,52 ммоль) розчиняли у ОСМ (2 мл). До реакційної суміші однією порцією додавали ТЕА (2 мл), і перемішували протягом 1 год.

Реакційну суміш концентрували, розбавляли ОСМ, і концентрували реакційну суміш. Реакційну суміш розбавляли Меон (1 мл), і додавали насичений водний розчин МансСо»з для досягнення рН «8. Реакційну суміш очищали із застосуванням хроматографії з оберненою фазою (40 г, С18, градієнт 20-100 95 АСМ/10 мМ водний розчин (МНа)25СОз з 5 95 МеонН), та одержували вказану в заголовку сполуку (135,5 мг, 64 95). ЕБ/М5 (т/2): 407 (М-Н).

Приклад 7 2-К25,38)-3-гідрокси-2-метилазетидин-1-іл|-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

Х

М

М ше ех

ОМ

Е с вх

Е | р,

Р М

У н трет-Бутил-4-І(4-І(5-ціано-6-К25,3Н8)-3-гідрокси-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2- піридилі|піразол-1-іл|Іпіперидин-1-карбоксилат (220 мг, 0,43 ммоль) розчиняли у ОСМ (2 мл). До реакційної суміші однією порцією додавали ТЕА (2 мл), і перемішували протягом 1 год.

Реакційну суміш концентрували, розбавляли ОСМ, і концентрували реакційну суміш. Реакційну суміш розбавляли Меон (1 мл), і додавали насичений водний розчин МансСо»з для досягнення рН «2. Реакційну суміш очищали із застосуванням хроматографії з оберненою фазою (40 г, С18, градієнт 20-100 95 АСМ/10 мМ водний розчин (МНа)25СОз з 5 95 МеонН), та одержували вказану в заголовку сполуку (127 мг, 72 90). ЕБ/М5 (т/2): 407 (МН).

Приклад 8 2-К25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1-(1-метил-4-піперидил)піразол-4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

М

М С ех

ОМ

Е с вх

Е | м й М х

У флакон вносили 2-хлор-6-(/1-(1-метил-4-піперидил)піразол-4-іл|-4-"-трифторметил)піридин-

З-карбонітрил (261 мг, 0,8 ммоль), сіль | 1К,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан- 1- іл|метансульфонат-(25)-2-метилазетидин-1-ію (338 мг, 1,1 ммоль), ОІРЕА (0,4 мл, 2 ммоль) і

ТНЕ (3,7 мл). Флакон герметизували, і нагрівали до температури 130 С протягом 2 год.

Реакційну суміш розподіляли між ОСМ і 1М водним розчином НС. Водну фазу нейтралізували 1М Маон, потім тричі екстрагували ЮСМ. Органічні екстракти об'єднували. Сушили над сульфатом натрію, фільтрували, і концентрували іп масо. Матеріал сушили при 50"7С у вакуумній печі протягом 1 год.

Залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 5 95 до 10 96 Меон/ОсСМ, фракції, які містили вказану в заголовку сполуку, об'єднували, концентрували, і сушили у вакуумній печі при 50 С протягом ночі. Залишок очищали із застосуванням препаративної НРІС (параметри: розчинник А - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію з 5 95 Меон, розчинник В - АСМ; колонка - Хбгідде М, 30х75 мм, 5 мкм, 45 мл/хв; градієнт - від 5 9о до 100 95 В), та одержували вказану в заголовку сполуку (73 мг, 26 95).

Е5З/М5 (іт/2): 405 (М'-Н).

Приклад 9 6-1-(1-(2-Гідроксіетил)-4-піперидиліпіразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил с

МІ ре дб я

Е А вх

Е

Р М ву он

У 20 мл флакон вносили 2-хлор-6-|1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4--трифторметил)піридин-3- карбонітрилу гідрохлорид (304,3 мг, 0,63 ммоль), 2-Ігрет-бутил(ідиметил)силіл|оксиацетальдегід (219 мг, 1,19 ммоль), ОІРЕА (0,52 мл, 3,1 ммоль), триацетоксиборогідрид натрію (277,2 мг, 1,3 ммоль) і ОСМ (2,0 мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 2 год. Додавали 2-Ігрет-бутил(ідиметил)силіл|Іоксиацетальдегід (219 мг, 1,2 ммоль), і перемішували протягом ночі при кімнатній температурі. Додавали насичений водний розчин бікарбонату натрію, та двічі екстрагували ЮОСМ. Органічні фази об'єднували, промивали насиченим водним розчином МасСі, сушили над сульфатом натрію, фільтрували, (і концентрували іп масио. Залишок очищали хроматографією на силікагелі, використовуючи градієнт від 4095 до 70905 БЕ(ОАс ов гексанах, та одержували 6-(1-(1-(2-(трет- бутил(ідиметил)силіл|оксіетил|-4-піперидилі|піразол-4-іл|-2-хлор-4-(трифторметил)піридин-3- карбонітрил (220 мг, 58 95).

У флакон вносили 5-(1-(1-(2-Ітрет-бутилідиметил)силіл|оксіетил|-4-піперидилі|піразол-4-іл|-2- хлор-4-(трифторметил)піридин-3-карбонітрил (175 мг, 0,289 ммоль), сіль (1К,45)-7,7-диметил- 2-оксонорборнан-1-іл|метансульфонат-(25)-2-метилазетидин-1-ію (136 мг, 0,45 ммоль), ОІРЕА (0,15 мл, 0,85 ммоль) і ТНЕ (1,5 мл, 18 ммоль). Флакон герметизували, і нагрівали до 130 С

Зо протягом 60 хв. Реакційну суміш розподіляли між ЕОАс і 1М водним розчином НС, органічний шар видаляли, і водний шар тричі екстрагували ЕТОАс. Органічні екстракти об'єднували, промивали насиченим водним розчином Масі, сушили над сульфатом натрію, фільтрували, і концентрували іп масо. Залишок розчиняли у ТНЕ (1,3 мл), суміш охолоджували до температури 0 "С, потім краплями додавали 1 М розчин фториду тетрабутиламонію в ТНЕ (0,37 мл, 0,37 ммоль). Реакційну суміш витримували для нагрівання до кімнатної температури, и перемішували протягом ночі. Реакційну суміш концентрували іп масо. Залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи 10095 гексани з подальшим використанням градієнту від 1 95 до 10 95 (0,7 М розчин аміаку у МеОНуОСМ, та одержували вказану в заголовку сполуку (93 мг, 73 Ус). ЕБ/М5 (Ііп/7): 435 (МАН).

Приклад 10 6-П1-(2-(диметиламіно)етилі|піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

М

МІ

Є

Ом

Е ще х

Е | р и

У реакційну посудину вносили 2,6-дихлор-4-(трифторметил)піридин-3-карбонітрил (250 мг, 1,04 ммоль), М,М-диметил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил)-1,3,2-дюксаборолан-2-іл)-1Н-піразол-1- іл)етанамін (271 мг, 1,07 ммоль), 1,4-діоксан (10 мл), водний розчин карбонату калію (ЗМ, 1,04 мл 3,12 ммоль) і П,1"-бісідифенілфосфіно)фероцен|дихлорпаладій(І!)) (40 мг, 0,052 ммоль).

Посудину герметизували, і нагрівали до температури 80 С протягом 2 год., потім суміш охолоджували до кімнатної температури. Фільтрували через 3 г картридж із СеїШЩе?тб з використанням ЕАс для елюювання. Фільтрат концентрували випарюванням. До залишку додавали сіль ІЧ Р,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іл|Іметансульфонат-(25)-2- метилазетидин-1-ію (378 мг, 1,24 ммоль), ОІРЕА (0,9 мл, 5,2 ммоль) і ОМ5О (10 мл). Суміш нагрівали до температури 120 С протягом б год. Реакційну суміш розбавляли водою, і завантажували на картридж із 5ігаїа-ХІФ (8 г; попередньо промивали Меон, висушували, а потім промивали водою). Картридж промивали водою, а потім (1:11) МеОН/вода, і елюенти видаляли. Продукт елюювали МеоОонН, потім ОСМ і, нарешті, сумішшю ОСМ/Меон (1-1), елюйовані фракції об'єднували. Об'єднані фракції, які містили вказану в заголовку сполуку, концентрували. Залишок очищали із застосуванням препаративної НРІ С (параметри: розчинник

А - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію з 595 МеонН, рН 10, розчинник В - АСМ; передколонка - У/аїег5 ВЕН НІС, 100х30 мм, 5 мкм, 110 А з захисною колонкою ВЕН НІС (15х30 мм); колонка - РпепотепехФ Кіпеїех? ЕМО С18, 100х30 мм, 5 мкм, 100 А із захисною колонкою ЕМО (15х30 мм) з використанням вбудованого нагрівача при 50 "С; градієнт від 33 95 до 100 95 В), та одержували вказану в заголовку сполуку (53 мг, 13 95). ЕБ/М5 (т/2): 379 (МАН).

Приклад 11 6-П1-(2-гідроксіетил)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-«(трифторметил)піридин-3- карбонітрил

М

Є

ОМ

Е ще вх

Е | Й он

Вказану в заголовку сполуку одержували по суті за методом, описаним у Прикладі 10, з 2-(4- (4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1Н-піразол-1-іл)летанолом. ЕБ/М5З (пт/2): 352 (МН).

Приклад 12 2-К(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4-"'трифторметил)піридин-3- карбонітрил

М

МІ рез

ОМ

Е Ще

Р М трет-бутил-4-(4-(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2-піридил|піразол- 1-іл|Іпіперидин-1-карбоксилат (1,99 г, 4,06 ммоль) розчиняли у ОСМ (50 мл), і повільно додавали

ТЕА (10 мл, 132,3 ммоль). Перемішували при кімнатній температурі протягом 30 хв, потім реакційну суміш завантажували на чотири 10 г картриджі із БСХ. Картриджі промивали спочатку

Меон, а потім 7М розчином аміаку у МеОнН. Основні змиви концентрували іп масо. Залишок очищали із застосуванням хроматографії з оберненою фазою на колонці С18 із силікагелем (розчинник А: 10 мМ розчин бікарбонату амонію з 5 95 Меон; розчинник В: АСМ; градієнт: 10- 71 95 розчинника В), та одержували вказану в заголовку сполуку (709 мг, 45 95) у вигляді білої твердої речовини. Е5Б/М5 (іт/2): 391 (М-Н).

Приклад 13 2-К25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-6-«(трифторметил)піримідин

М ак

Е А вх

Е | М

Р М о

Н трет-Бутил-4-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-«(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1- іл|піперидин-1-карбоксилат (0,213 г, 0,457 ммоль) розчиняли у ОСМ (5 мл), і додавали ТЕА (1 мл). Суміш перемішували протягом 25 хв, потім реакційну суміш завантажували безпосередньо на 10 г картридж із БСХ. Картридж промивали Меон, після чого елюювали 7М розчином аміаку у Меон. Основний змив концентрували, та одержували вказану в заголовку сполуку (129 мг, 77 95). ЕБ/М5 (тп/2): 367 (МАН).

Приклади сполук, наведені в Таблиці З, одержували по суті за методом, описаним у

Прикладі 13, і відповідний захищений амін.

Таблиця З

Номер ЕБ/М5

Х

М

(25,38)-2-метил-1-І4-(1-(ЗВ)- А, піролідин-З-іл|Іпіразол-4-іл|-6- Е 14 (трифторметил)піримідин-2- т 369 ілазетидин-3-ол вк

Е | М

Е М

З

Х

М

(25,38)-2-метил-1-І4-(1-(35)- А, піролідин-З-іл|Іпіразол-4-іл|-6- | 369 (трифторметил)піримідин-2- Е ТО ілазетидин-3-ол вк

Е | М

Е М с

С» /

М р

Щ28)-1-І4-(1-(ЗВ)-піролідин-3- ) ЇЇ іл|піразол-4-іл|-6- Е 16 (трифторметил)піримідин-2- сх хх 369 ілІазетидин-2-іл|метанол Е | М

Е ко з

Приклад 17 6-П1-(Азетидин-3-іл)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)піридин-3- карбонітрил

М

ЖЕ

Ом

Е

Ж й

Е | лм й М ї

Н

Вказану в заголовку сполуку одержували, використовуючи по суті таку саму процедуру, що й у Прикладі 12, починаючи з трет-бутил-3-І4-І(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4- (трифторметил)-2-піридилі|піразол-1-ілІіазетидин-1-карбоксилату. Очищали із застосуванням препаративної НРІ С (параметри: розчинник А - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію з 5 95

Меон, розчинник В - АСМ; градієнт від 35 95 до 59 95 В; колонка - РпепотепехФ Кіпеїех? ЕМО

СІ 8, 100х30 мм, 5 мкм), та одержували вказану в заголовку сполуку. ЕБ/М5 (т/2): 363 (М-Н).

Приклад 18 6-1-(1-(2-Аміноацетил)-4-піперидилі|піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

М

МІ

-х

ОМ

Е с х

Е | р

Р М у о Мн,

Вказану в заголовку сполуку одержували, використовуючи по суті таку саму процедуру, що й у Прикладі 12, починаючи з трет-бутил-М-(2-(4-(4-(5-ціано-6-К(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4- (трифторметил)-2-піридил|піразол-1-іл|-1-піперидил|-2-оксоетилІ|карбамату. Очищали із застосуванням препаративної НРІС (параметри: розчинник А - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію з 5 95 Меон, розчинник В - Меон; градієнт - від 20 95 до 50 95 В; колонка -

РпепотепехФф КіпеїехФ ЕМО С18, 30х250 мм, 5 мкм). ЕБ/М5 (Іп/2): 448 (МАН).

Приклад 19 6-(1-(1-Ацетил-4-піперидил)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

М

МІ

Ше

ОМ

Е с х

Е | Й

Р М у о 2-К(25)-2-Метилазетидин-1-іл|-6-(1-(4-піперидил)піразол-4-іл|-4-"(трифторметил)піридин-3- карбонітрил (Приклад 12) (0,111 г, 0,284 ммоль) розчиняли у ОСМ (1 мл), і додавали піридин (0,026 мл, 0,32 ммоль). Суміш охолоджували до температури 0 "С, і додавали ацетилхлорид (0,024 мл, 0,34 ммоль). Суміш нагрівали до кімнатної температури, і перемішували протягом 30 хв. Суміш охолоджували до температури 0 "С, і додавали піридин (0,026 мл, 0,32 ммоль) та ацетилхлорид (0,024 мл, 0,34 ммоль). Нагрівали до кімнатної температури, і додатково перемішували ще протягом 30 хв. Реакційну суміш розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію, та двічі екстрагували ОСМ. Органічні речовини об'єднували, сушили над сульфатом натрію, фільтрували, і випарювали. Залишок очищали із застосуванням препаративної НРІ С (параметри: розчинник А - 10 мМ розчин бікарбонату амонію з 5 95 Ммеон; розчинник В - Меон; градієнт 25-55 95, 55 мл/хв; колонка - Рпепотепех? КіпеФех? ЕМО С18, 30х250 мм, 5 мкм), та одержували вказану в заголовку сполуку (67 мг, 55 95). ЕБ/М5 (т/л): 433 (МН).

Приклади 20-23

Приклади сполук, наведені в Таблиці 4, одержували, використовуючи по суті процедуру з

Прикладу 5 і відповідну карбонову кислоту та наявний у продажу амін.

Таблиця 4

ЕБ/М5 промер Назва Структура (т/2): рикладу МАН со

МА ох р 2-К25)-2-метилазетидин- 1-ілІ-6- (1-(2-(4-| є хо 20 метилпіперазин-1-іл)-2- в | хо 448 оксоетилі|піразол-4-іл|-4- Е М оо (трифторметил)піридин-3-карбонітрил М (

У к. х 5О0

Таблиця 4

ЕБ/М5 промер Назва Структура (т/2): рикладу Ман

МІ

М о. но

М но

М

М но

Приклад 24 6-1-(2,3-Дигідроксипропіл)піразол-4-іл|-2-К25)-2-метилазетидин-1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

М

МІ

-х

ОМ

Е с.

Е | дк

Е /

М Он що ЧА

2-Хлор-6-11-(2,2-диметил-1,3-дюксолан-4-іл)метил|піразол-4-іл|-4--трифторметил)піридин-3- карбонітрил (0,204 г, 0,527 ммоль) розчиняли в ТНЕ (6 мл). До суміші додавали водний розчин соляної кислоти (2 М, З мл, 6 ммоль), і перемішували при кімнатній температурі протягом 1,5 год. Суміш розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію, та двічі екстрагували

ЕЮОАс. Органіку об'єднували, і сушили над сульфатом натрію, потім фільтрували, випарювали, та одержували неочищений 2-хлор-6-11-(2,3-дигідроксипропіл)піразол-4-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил (183 мг). Цей неочищений матеріал повністю розчиняли у

ОМЕ (2 мл), потім додавали сіль (ЕК, 45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-іліметансульфонат- (25)-2-метилазетидин-1-ію (222 мг, 0,73 ммоль) і ОІРЕА (0,37 мл, 2,1 ммоль). Суміш нагрівали у мікрохвильовому реакторі при 130"С протягом 2,5 год. Реакційну суміш очищали із застосуванням препаративної НРІС (параметри: розчинник А - 10 мМ розчин бікарбонату амонію з 5 956 Меон; розчинник В - АСМ; градієнт 20-50 95, 60 мл/хв; колонка - РпепотепехФ

Кіпеєїехб ЕМО С18, 30х250 мм, 5 мкм), та одержували вказану в заголовку сполуку (102 мг, 51 95). ЕБ/М5 (т/2): 382 (МН).

Приклади 24а і 24Б

Приклад 2да: 6-(1-(2,3-дигідроксипропіл)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил - Ізомер 1

Приклад 24р: 6-11-(2,3-Дигідроксипропіл)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил - Ізомер 2

Ізомери 6-(1-(2,3-дигідроксипропіл)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-З3-карбонітрилу (86 мг) розділяли із застосуванням хіральної ЗЕС (параметри: колонка - РпепотепехФф ГГ их? СеїПІшозе-2, 21х250 мм; температура колонки -40 "С; розчинник - 15 96 ЕЮН/СО», 80 мл/хв), та одержували вказані в заголовку сполуки (зомер 1, перший елюйований ізомер: 35 мг, ЕБ/М5 (пт/27): 382 (МН); Ізомер 2, другий елюйований ізомер: 39 мг, ЕБ/М5 (т/2): 382 (М'я-Н)). Аналітична хіральна 5ЕС (параметри: колонка -

Рпепотепехб І их? СепПиове-2, 4,6х150 мм; розчинник - 15 96 ЕЮН/СО», 5 мл/хв): Ізомер 1 - час утримування 3,10 хв, 95,6 95 ее; Ізомер 2 - час утримування 3,52 хв - 94,4 9о ев.

Приклад 25

Зо 2-К(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1 Н-піразол-4-іл)-4-(трифторметил)піридин-3-карбонітрил с

МІ р-е дб в

Е А х

Е | р

Р М

Н

У флаконі об'єднували трет-бутил-4-(б-хлор-5-ціано-4-(трифторметил)-2-піридил|піразол- 1- карбоксилат (75 мг, 0,20 ммоль), 1,4-діоксан (1,5 мл) і ЕН (1 мл). Додавали ОІРЕА (130 мг, 1,0 ммоль) і сіль ІЧ К,45)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ілІметансульфонат (25)-2- метилазетидин-1-ію (117 мг, 0,39 ммоль). Реакційну суміш нагрівали у мікрохвильовому реакторі при 200 "С протягом 2 год. Реакційну суміш концентрували іп масо. Залишок очищали із застосуванням хроматографії з оберненою фазою на колонці С18 із силікагелем, використовуючи градієнт від 1095 до 10095 АСМ/води з 0,195 мурашиної кислоти, та одержували вказану в заголовку сполуку (35 мг, 41 95) у вигляді блідо-жовтої твердої речовини.

Е5З/М5 (іт/): 308 (МН), 306 (М-Н).

Приклад 26 2-К(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-6-(1-тетрагідропіран-4-ілпіразол-4-іл)-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

М

МІ ех

ОМ

Е Х хх

Е | й і о

У флаконі об'єднували 2-хлор-6-(1-тетрагідропіран-4-ілпіразол-4-іл)-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил (105 мг, 0,29 ммоль), 1,4-діоксан (1 мл), ЕН (0,5 мл),

РІРЕА (0,2 мл, 1 ммоль) і сіль ((1К,45)-7,7-диметил-2-оксо-норборнан-1-ілІметансульфонат- (25)-2-метилазетидин-1-ію (100 мг, 0,33 ммоль). Реакційну суміш нагрівали у мікрохвильовому реакторі при 150 "С протягом 2 год. Реакційну суміш концентрували іп масо. Залишок очищали із застосуванням хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт від 4095 до 50 95

КОАс/гексанів, та одержували вказану в заголовку сполуку (88 мг, 76 95) у вигляді світло-жовтої твердої речовини. ЕБ/М5 (іт/2): 392 (МАН).

Приклад 27 6-П1-(3-Гідрокси-4-піперидил)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4- (трифторметил)піридин-3-карбонітрил

М

М С,

Ше

ОМ

Е Ще хх

Е | М

Е /

М он (У

Н трет-Бутил-4-І4-І(5-ціано-6-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-4-(трифторметил)-2-піридил|піразол- 1-іл|-3-гідроксипіперидин-1-карбоксилат (85 мг, 0,17 ммоль) розчиняли у ОСМ (1 мл), потім додавали ТЕА (0,5 мл), і перемішували протягом 5 хв. Реакційну суміш концентрували іп масио.

Залишок очищали із застосуванням хроматографії з оберненою фазою (С18, градієнт від 20 95 до 100 95 АСМ/10 мм водний розчин карбонату амонію «ж 5 95 метанолу), та одержували вказану в заголовку сполуку (27 мг, 40 95) у вигляді білої твердої речовини. ЕБ/М5 (Іт/2): 407 (МАН).

Приклад 28

М-(2-аміноетил)-2-(4-(-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол- 1-іл)іацетамід

М й

Е А х

Е | ж

Е /

М о

М

Н в М, трет-Бутил-М-(2-(Ц2-(4-(2-К25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-(трифторметил)піримідин-4- іл|Іпіразол-1-іліацетилІіаміно|єтилІкарбамат (340 мг) розчиняли у чистій ТЕБА (5 мл), і перемішували при температурі навколишнього середовища. Через 2 хв гасили водним 10 розчином Маон до основності. Екстрагували ОСМ та ЕІОАс. Екстракти об'єднували, сушили над сульфатом натрію, фільтрували, і концентрували. Залишок очищали із застосуванням препаративної НРІ С (параметри; розчинники - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію, рн 10/5 96 МеОн (розчинник А) і АСМ (розчинник В); передколонка - Умаїег5 ВЕН НІЧІС, 100х30 мм, мкм, 110 А із захисною колонкою ВЕН НІГІС, 15х3Омм; колонка - РпепотепехФ Кіпеїех? ЕМО

С18, 100х30 мм, 5 мкм, 100 А із захисною колонкою ЕМО, 15х30 мм, з використанням вбудованого нагрівача при температурі 50 "С; градієнт від 14 95 до 4895 ВІ, та одержували вказану в заголовку сполуку (45 мг, 17 95). ЕБ/М5 (т/2): 384 (М'-Н).

Сполуки, наведені в Таблиці 5, одержували, використовуючи по суті таку саму процедуру, що і у Прикладі 28, і відповідний захищений амін.

Таблиця 5

ЕБ/М5 промер Назва Структура (т/2): р ду Ман

У

У н

Таблиця 5

ЕБ/М5 промер Назва Структура (т/2): рикладу МАН с м 2-І4-2-К25)-2-метилазетидин-1-іл|-6- | є - (трифторметил)піримідин-4-іл|піразол- вх м 424 1-ілІ-1-(25)-2-метилпіперазин-1- Ті Що іл|єстанон М /

Щ, ,

Її н

Приклад 33 4-П1-(азетидин-З3-іл)піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-«(трифторметил)піримідин

Х

М її

Е ХМ

Е | Б

М

Н трет-Бутил-3-І4-(2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6-«(трифторметил)піримідин-4-іл|піразол-1- іл|Іазетидин-1-карбоксилат (530 мг, 1,21 ммоль) розчиняли у ОСМ (50 мл). Додавали ТЕА (6 мл), і суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 1 год. Суміш концентрували іп масио, та одержували неочищену вказану в заголовку сполуку. Половину цього матеріалу очищали із застосуванням препаративної НРІ С (параметри: розчинники - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію, рН 10/5 95 Мен (розчинник А) і АСМ (розчинник В); передколонка - Магег5 ВЕН НІШСІС, 100х30 мм, 5 мкм, 110 А із захисною колонкою ВЕН НІГІС, 15х30 мм; колонка - Рпепотепех?

Кіпеїех? ЕМО С18, 100х30 мм, 5 мкм, 100 А із захисною колонкою ЕМО, 15х30 мм, з використанням вбудованого нагрівача при 50 "С; градієнт від 23 95 до 58 95 ВІ, та одержували вказану в заголовку сполуку (162 мг, 80 9о вихід від половини початкової речовини) у вигляді білої твердої речовини. ЕБ/М5 (Іт/2): 339 (МА-Н).

Приклад 34 2-К25)-2-метилазетидин- 1-іл|-4-(1-(1-метилазетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6- (трифторметил)піримідин

Х

М Ї

Е С іх

Е | р

Х

Половину неочищеного 4-(1-(азетидин-З3-іл/піразол-4-іл|-2-(25)-2-метилазетидин-1-іл|-6- (трифторметил)піримідину, одержаного у Прикладі 33 (0,6 ммоль), розчиняли в Меон (6 мл).

Додавали оцтову кислоту (0,1 мл) та 3,45 М водний розчин формальдегіду (1 мл), і суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 30 хв. Додавали триацетоксиборогідрид натрію (300 мг, 1,4 ммоль), і суміш перемішували протягом 2 год. Суміш концентрували іп масио. і залишок очищали із застосуванням препаративної НРІ С (параметри: розчинники - 10 мМ водний розчин бікарбонату амонію, рН 10/595 Меон (розчинник А) і АСМ (розчинник В); передколонка - М/аїегз ВЕН НІС, 100х30 мм, 5 мкм, 110 А із захисною колонкою ВЕН НІС, 15х30 мм; колонка - Рпепотепех? Кіпеїех? ЕМО С18, 100х30 мм, 5 мкм, 100 А із захисною колонкою ЕМО, 15х30 мм, з використанням вбудованого нагрівача при 50 "С; градієнт 33-67 95

ВІ, та одержували вказану в заголовку сполуку (128 мг, 61 95 вихід від половини початкової речовини у Прикладі 33) у вигляді білої твердої речовини. ЕБ/М5 (Іт/2): 353 (МАН).

Приклад 35 (25,38)-2-Метил-1-І4-(1-(1-метилазетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6-(трифторметил)піримідин-2- іл|Іазетидин-3-ол

Х

М ї

Е А вх

Е | р й М о

Вказану в заголовку сполуку одержували, використовуючи по суті таку саму процедуру, що і у Прикладі 34, починаючи З (25,3К)-1-І4-(1-(азетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6- (трифторметил)иіримідин-2-іл|-2-метилазетидин-3-олу (Приклад 4). ЕБ/М5 (Ііп/27): 369 (М.Н), 367 (М-Н).

Приклад 36

К2Н)-1-І4-(1-(1-метилазетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6-«(трифторметил)пірімідин-2-іл|Іазетидин-2- іл|метанол с

Х

М Ї

Е хх х

Е | р

Р М о

Вказану в заголовку сполуку одержували, використовуючи по суті таку саму процедуру, що і у Прикладі 34, починаючи з (2К)-1-І4-/1-(азетидин-3-іл)піразол-4-іл|-6-«трифторметил)піримідин- 2-іл|Ідзетидин-2-іл|метанолу (Приклад 3). ЕБ/М5 (ітп/2): 369 (М.Н), 367 (М-Н).

Дослідження

Дослідження ферментативної активності КНК для людських ізоформ КНК-С та КНК-А

Власна активність для інгібування активності КНК-С або КНК-А може бути визначена із застосуванням ферментативного дослідження, за яким визначали рівень продукування Е1Р.

Сполуки готували у ОМ5О, та тестували на 10-точковій кривій концентрації, щоб одержати 3- кратні серійні розведення сполук у 96-лунковому планшеті в діапазоні від 20 мкМ до 1,02 нМ.

Фермент готували у аналітичному буфері (50 мМ розчин 4-(2-гідроксіетил)піперазин-1- етансульфонової кислоти (НЕРЕ5), 10 мм хлориду калію, 100 мМ хлориду магнію, 2 мМ трис(2- карбоксіетилуфосфіну (ТСЕР), 0,01 95 п-октилглюкозиду|, та інкубували із сполуками при кімнатній температурі протягом 15 хв. Реакцію проводили в 100 мкл об'ємах, які містили субстратні концентрації фруктози (250 мкМ для дослідження КНК-С і 1,25 мМ для дослідження

КНК-А) і АТФ (150 мкМ для обох ізоформ), які далі інкубували при кімнатній температурі протягом 20 хв. Потім реакцію припинили додаванням стоп-буфера, який складався з 0,2 95 мурашиної кислоти та 1 мкг/мл внутрішнього стандарту "ЗСв-фруктозо-6-фосфату (ЗСв-ЕбР).

Планшети зберігали при -20 "С до дослідження Каріагіге М5.

Дослідження Каріагіге М5 для кількісного визначення ГІР

Автоматизовану екстракційну систему Адпепі 300 КаріагРіге (Адіїепі, запіа СіІага, штат

Каліфорнія) з трьома четвертинними насосами НРІ С підключали до потрійного квадрупольного мас-спектрометра Адіепі 6495 (Адйепі ТесппоЇодіе5, зЗапіа Сіага, штат Каліфорнія), спорядженого інтерфейсом джерела іонізації електророзпиленням (Е5І). Систему для мас- спектрометрії КаріайРіе споряджували твердофазним екстракційним (З5РЕ) картриджем із

Каріагіге С18 (тип С) багаторазового використання (59205А).

Розчинником А, який використовували для завантаження та промивання зразка, є 6 мМ розчин октиламіну (Асго5 Огдапіс5, номер за каталогом 129495000), доведений до рН 5,0 додаванням оцтової кислоти. Розчинник В, який використовували для елюювання зразків, являв собою 20 95 розчин води в АСМ, який містив 0,1 96 мурашиної кислоти. Зразки послідовно досліджували шляхом аспірації 10 мкл у петлю для збору під вакуумом безпосередньо з багатолункових планшетів. 10 мкл зразка завантажували на картридж С18, і промивали розчинником А зі швидкістю потоку 1,25 мл/хв протягом 5000 мс. Збережені досліджувані речовини у подальшому елюювали у мас-спектрометр із застосуванням розчинника В зі швидкістю потоку 1,25 мл/хв протягом 5000 мс. Систему знову врівноважували із застосуванням розчинника А зі швидкістю потоку 1,25 мл/хв протягом 2000 ме.

Потрійний квадрупольний мас-спектрометр споряджували джерелом Еб5І, а досліджувані речовини контролювали шляхом моніторингу вибраної реакції (ЗЕМ) у негативному режимі (М-

НІ. ЕТ1Р. контролювали при т/2 259,02/96,9, і "ЗСе-фруктозо-6-фосфат контролювали при т/2 264,99/97. Значення співвідношення площ для ЕР обчислювали з використанням "ЗСв- фруктозо-6-фосфату як внутрішній стандарт.

Сполуки Прикладів 1-36 були випробувані по суті так, як описано вище:

Таблиця 6 06011101 обіти) | 154-5,05(п0-3)..Г.-:З«ЖШ 00611111 5бижва5(пе3) | обБеі5ипе3) 08111111 вбаб(фтея)111 17111111 358-171

Таблиця 6

Дані, виражені як середнє значення ІБЕМ (середня квадратична помилка середнього) (п).

Результати, відображені в наведеній вище Таблиці 6, демонструють, що сполуки Прикладів 1-36 інгібують ферментативну активність як КНК-С, так і КНК-А.

Дослідження на клітинну активність КНК

Активність можна визначити із застосуванням клітинного дослідження на інгібування перетворення фруктози на Е1Р клітинною КНК. Клітини печінки Нербс2 висівали на 96-лункові планшети для культивування культури клітин у середовищі для вирощування |Юирессо'5

Моаййеа Еадієб5 тедішт (модифіковане за способом Дульбекко середовище Ігла) (ОМЕМ) з високим вмістом глюкози, 10 95 термоінактивованої фетальної бичачої сироватки (НІ ЕВ5), їх пеніциліну/стрептоміцину|, і залишали для прикріплення на ніч в інкубаторі при температурі 37 "С. Середовище для росту промивали, і замінювали на середовище для дослідження, яке складалося із середовища бібсо ОрімМЕМ 1 зі зменшеним вмістом сироватки, 0,1 9о казеїну, 8,33 мМ В-фруктози-"ЗСв, і концентрації сполук становили від 100 мкМ до 0,0051 мкМ (10- точкова крива концентрації). Планшети інкубували при 37 С протягом З год., після чого середовище для дослідження з клітинних лунок аспірували. Потім до клітин додавали стоп- розчин, який складався з 80 96 Мен, 2 мМ ацетату амонію та 50 нг/мл фруктозо-6-фосфату- 13б6. Планшети зберігали при -20 "С до проведення дослідження РарійРіге М5 (описаного вище).

Таблиця 7 71117176 | 22,955,15(п-3) 77711778... | 204-8,09(п-3) 777779 | 1500-39 з

Таблиця 7

Дані виражені як середнє значення «5ЕМ (п).

Результати, відображені в наведеній вище Таблиці 6, демонстрували, що сполуки Прикладів 1-36 інгібували метаболізм фруктози до Е1Р в клітинах Нерса.

Метод рідинної хроматографії з тандемною мас-спектрометрією (І С-М5/М5) для фармакокінетичних досліджень: Зразки екстрагували із застосуванням осадження білка шляхом додавання 180 мкл МеоОН:АСМ (1:21, у об'ємному відношенні), що містив внутрішній стандарт, до 50 мкл плазми. Потім зразки розбавляли МеОН:вода (1:11, у об'ємному відношенні) з метою одержання концентрації в межах стандартної кривої. Розведені зразки досліджували із застосуванням І С-М5/М5 з використанням потрійного квадрупольного мас-спектрометра 5сієех

АРІ 4000 (Арріїеа Віозуєіет5/МО5; ЕРовіеєг Сйу, штат Каліфорнія), спорядженого інтерфейсом

ТитфоІопЗргау, який працює в режимі позитивних іонів. Досліджувані речовини розділяли хроматографічним шляхом із застосуванням колонки ЕСНЕГОМ С18, 4 мкм, 20х2,1 мм. Умови рідинного хроматографування: вода/1 М бікарбонату амонію (2000:10, у об'ємному відношенні) (Мобільна фаза А) і Меонл М розчин бікарбонату амонію (2000:10, у об'ємному відношенні) (Мобільна фаза В).

Фармакокінетика у пацюків лінії Зргадое ОСаулеу

Фармакокінетичні властивості сполук Прикладу 1 та Прикладу 2 іп мімо продемонстровані із застосуванням пацюків лінії Зргадие ЮОаулеу (натщесерце; п-З/доза). Сполуку вводили одноразово пероральним (РО; 2 мг/кг або З мг/кг; об'єм 10 мл/кг) або внутрішньовенним (ІМ; 1 мг/кг; об'єм 1 мл/кг) шляхом у носії. Кров відбирали у кожної тварини в декількох часових точках від 0 год. до 48 год. після введення дози. Концентрації сполук Прикладу 1 і Прикладу 2 в плазмі визначали методом І С-М5/М5, як описано вище.

Для сполуки Прикладу 1 середній період напіввиведення становить 12,9 год., а біодоступність становить 83 95, як визначено шляхом перорального введення доз тоді як при внутрішньовенному введенні середній період напіввиведення становить 12,8 год., а середній кліренс становить 5,86 мл/хв/кг. Для сполуки Прикладу 2 середній період напіввиведення становив 5,12 год., а біодоступність становить 9595, як визначено шляхом перорального введення доз, тоді як при внутрішньовенному введенні середній період напіввиведення становив 4,29 год., а середній кліренс становив 56,4 мл/хв/кг. Ці дані показали, що сполуки

Прикладу 1 і Прикладу 2 мають різні рівні кліренсу, але обидві мають високу пероральну біодоступність і тривале виведення, що підтверджується адекватним середнім періодом напіввиведення.

Фармакокінетика у собак

Фармакокінетичні властивості сполук Прикладу 1 і Прикладу 2 іп мімо продемонстровано із застосуванням собак породи коротконогий гончак (нагодовані, п-3). Сполуку вводили одноразовою пероральною (Ро; 2 мг/кг або З мг/кг; об'ємом 2 мл/кг) або внутрішньовенною (ІМ; 1 мг/кг; об'ємом 1 мл/кг) дозою в розчиннику. Кров відбирали у кожної тварини в декількох часових точках від О год. до 72 год. після введення дози. Концентрації сполук Прикладу 1 і

Прикладу 2 в плазмі визначали методом І С-М5/М5, як описано вище.

Для сполуки Прикладу 1 середній період напіввиведення становив 36,6 год., і біодоступність становив 8795, як визначено шляхом перорального введення доз, тоді як при внутрішньовенному введенні середній період напіввиведення становив 28 год., а середній кліренс становив 3,41 мл/хв/кг. Для сполуки Прикладу 2 середній період напіввиведення становив 9,79 год., і біодоступність становив «100 95, як визначено шляхом перорального введення доз, тоді як при внутрішньовенному введенні середній період напіввиведення становив 10,3 год., і середній кліренс становив 19,6 мл/хв/кг. Ці дані показують, що сполуки

Claims

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Сполука Формули: ев2 Ол ХК хто її ХУ Ес 3 | Х М / х в де Х являє собою М або С, заміщений СМ; ВА" вибраний з: Н, 4 7 Кк Кк М МН в АК но з. М з М М МН 6 в М мо о о х У он М а ж М Б о он р -- ит до й -ИТТОН хооуттон мо он о о Ох он раль та ; обидва ВЕ: та ЕЗ являють собою Н або один являє собою Н, а інший являє собою ОН; ВУ, В», Не, В" та РУ, незалежно один від іншого, являють собою Н або СН»; ВУ? являє собою Н, СНз, СНЕСНгОН, С(-О)СНоМН» або С(-О)СН»; та Во являє собою ОН або МН»; або її фармацевтично прийнятна сіль.

2. Сполука за п. 1, де КЕ! вибраний з: шк: МН М со Ду тре о ше ше або о або її фармацевтично прийнятна сіль.

3. Сполука за п. 1 або 2, де згадана сполука являє собою: М й й вс | а / У в або її фармацевтично прийнятна сіль.

4. Сполука за будь-яким із пп. 1-3, де Х являє собою М, або її фармацевтично прийнятна сіль.

5. Сполука за будь-яким з пп. 1-3, де Х являє собою С, заміщений СМ, або її фармацевтично прийнятна сіль.

6. Сполука за будь-яким з пп. 1-4, де згадана сполука являє собою:

с у хо о х Е Е / М НМ -/ М / о або її фармацевтично прийнятна сіль.

7. Сполука або її фармацевтично прийнятна сіль за п. 6, яка є сукцинатною сіллю.

8. Спосіб лікування цукрового діабету 2 типу у пацієнта, який включає введення пацієнту, що потребує такого лікування, ефективної кількості сполуки за будь-яким із пп. 1-7 або її фармацевтично прийнятної солі.

9. Спосіб лікування серцевої недостатності у пацієнта, який включає введення пацієнту, що потребує такого лікування, ефективної кількості сполуки за будь-яким із пп. 1-7 або її фармацевтично прийнятної солі.

10. Спосіб лікування діабетичної хвороби нирок у пацієнта, який включає введення пацієнту, що потребує такого лікування, ефективної кількості сполуки за будь-яким із пп. 1-7 або її фармацевтично прийнятної солі.

11. Спосіб лікування неалкогольного стеатогепатиту у пацієнта, який включає введення пацієнту, що потребує такого лікування, ефективної кількості сполуки за будь-яким із пп. 1-7 або її рармацевтично прийнятної солі.

12. Спосіб лікування хронічної хвороби нирок у пацієнта, який включає введення пацієнту, що потребує такого лікування, ефективної кількості сполуки за будь-яким із пп. 1-7 або її фармацевтично прийнятної солі.

13. Сполука або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-7 для застосування в терапії.

14. Сполука або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-7 для застосування в лікуванні цукрового діабету 2 типу.

15. Сполука або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-7 для застосування в лікуванні серцевої недостатності.

16. Сполука або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-7 для застосування в лікуванні діабетичної хвороби нирок.

17. Сполука або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-7 для застосування в лікуванні неалкогольного стеатогепатиту. Зо

18. Сполука або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-7 для застосування в лікуванні хронічної хвороби нирок.

19. Фармацевтична композиція, що містить сполуку або її фармацевтично прийнятну сіль за будь-яким із пп. 1-7 з одним або декількома фармацевтично прийнятними носіями, розріджувачами або наповнювачами.

20. Спосіб одержання фармацевтичної композиції, який включає змішування сполуки або її фармацевтично прийнятної солі за будь-яким із пп. 1-7 з одним або декількома фармацевтично прийнятними носіями, розріджувачами або наповнювачами. 0 КомпютернаверсткаА. Крулевськийд (00000000 ДО "Український національний офіс інтелектуальної власності та інновацій", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601