EA043635B1 - Дизамещенные пиразольные соединения в качестве ингибиторов кетогексокиназы - Google Patents
Дизамещенные пиразольные соединения в качестве ингибиторов кетогексокиназы Download PDFInfo
- Publication number
- EA043635B1 EA043635B1 EA202192957 EA043635B1 EA 043635 B1 EA043635 B1 EA 043635B1 EA 202192957 EA202192957 EA 202192957 EA 043635 B1 EA043635 B1 EA 043635B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- pharmaceutically acceptable
- mmol
- acceptable salt
- compound
- trifluoromethyl
- Prior art date
Links
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title description 6
- 102100023418 Ketohexokinase Human genes 0.000 title description 3
- 108010062852 Ketohexokinase Proteins 0.000 title description 2
- 150000003217 pyrazoles Chemical class 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 158
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 154
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 67
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 48
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 31
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 claims description 17
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 16
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 claims description 14
- 206010053219 non-alcoholic steatohepatitis Diseases 0.000 claims description 9
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 9
- 208000007342 Diabetic Nephropathies Diseases 0.000 claims description 8
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 claims description 8
- 208000033679 diabetic kidney disease Diseases 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 6
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 claims description 5
- 150000003890 succinate salts Chemical group 0.000 claims description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 claims 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 claims 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 claims 2
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 claims 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 claims 2
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 claims 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 113
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 88
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 82
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 61
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 56
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 48
- 125000004353 pyrazol-1-yl group Chemical group [H]C1=NN(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 39
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 34
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 26
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 26
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- 125000004527 pyrimidin-4-yl group Chemical group N1=CN=C(C=C1)* 0.000 description 24
- -1 acyl glucuronide Chemical class 0.000 description 23
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 21
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 19
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 18
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 15
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 15
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 15
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 13
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- YNHIGQDRGKUECZ-UHFFFAOYSA-L bis(triphenylphosphine)palladium(ii) dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Pd+2].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 YNHIGQDRGKUECZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 12
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 11
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 10
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 10
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 10
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 10
- 238000002013 hydrophilic interaction chromatography Methods 0.000 description 10
- MIOPJNTWMNEORI-XVKPBYJWSA-N (R)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 9
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- WRXXBTBGBXYHSG-UHFFFAOYSA-N 2,6-dichloro-4-(trifluoromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound FC(F)(F)C1=CC(Cl)=NC(Cl)=C1C#N WRXXBTBGBXYHSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KGZFOZKAGZDAAM-MQLZJFRZSA-N [(1R,4S)-7,7-dimethyl-2-oxo-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]methanesulfonate (2S)-2-methylazetidin-1-ium Chemical compound C[C@H]1CC[NH2+]1.CC1(C)[C@H]2CC[C@]1(CS([O-])(=O)=O)C(=O)C2 KGZFOZKAGZDAAM-MQLZJFRZSA-N 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 8
- ZKLLSNQJRLJIGT-UYFOZJQFSA-N keto-D-fructose 1-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)COP(O)(O)=O ZKLLSNQJRLJIGT-UYFOZJQFSA-N 0.000 description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 8
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 7
- RZUXIYDMQGCCDD-UHFFFAOYSA-N 2,3-dibromobutan-1-ol Chemical compound CC(Br)C(Br)CO RZUXIYDMQGCCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical compound CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- NXQGGXCHGDYOHB-UHFFFAOYSA-L cyclopenta-1,4-dien-1-yl(diphenyl)phosphane;dichloropalladium;iron(2+) Chemical compound [Fe+2].Cl[Pd]Cl.[CH-]1C=CC(P(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C1.[CH-]1C=CC(P(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C1 NXQGGXCHGDYOHB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 125000000246 pyrimidin-2-yl group Chemical group [H]C1=NC(*)=NC([H])=C1[H] 0.000 description 7
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 7
- RVJIUWJMJDLQIP-XJKSGUPXSA-N (2s,3r)-1-benzhydryl-2-methylazetidin-3-ol Chemical compound C[C@H]1[C@H](O)CN1C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RVJIUWJMJDLQIP-XJKSGUPXSA-N 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 6
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 6
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 6
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- DNUTZBZXLPWRJG-UHFFFAOYSA-M piperidine-1-carboxylate Chemical compound [O-]C(=O)N1CCCCC1 DNUTZBZXLPWRJG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 6
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- ZTNFYAJHLPMNSN-UHFFFAOYSA-N 2,4-dichloro-6-(trifluoromethyl)pyrimidine Chemical compound FC(F)(F)C1=CC(Cl)=NC(Cl)=N1 ZTNFYAJHLPMNSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- YXGBQJQAKULVEL-UHFFFAOYSA-N 2-(1-bromoethyl)oxirane Chemical compound CC(Br)C1CO1 YXGBQJQAKULVEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000012223 aqueous fraction Substances 0.000 description 5
- 125000004566 azetidin-1-yl group Chemical group N1(CCC1)* 0.000 description 5
- 125000004273 azetidin-2-yl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 5
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 5
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 5
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000007339 nucleophilic aromatic substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 5
- RFIOZSIHFNEKFF-UHFFFAOYSA-M piperazine-1-carboxylate Chemical compound [O-]C(=O)N1CCNCC1 RFIOZSIHFNEKFF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 4
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 4
- LELOWRISYMNNSU-UHFFFAOYSA-N Hydrocyanic acid Natural products N#C LELOWRISYMNNSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006069 Suzuki reaction reaction Methods 0.000 description 4
- VRSOSRMEIFBXPO-MMQQMKSISA-N [(1R,4S)-7,7-dimethyl-2-oxo-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]methanesulfonate (2S,3R)-2-methylazetidin-1-ium-3-ol Chemical compound C[C@@H]1[NH2+]C[C@H]1O.CC1(C)[C@H]2CC[C@]1(CS([O-])(=O)=O)C(=O)C2 VRSOSRMEIFBXPO-MMQQMKSISA-N 0.000 description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 4
- NNJFYVAXRAPUES-UHFFFAOYSA-N azetidin-2-ylmethanol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC1CCN1 NNJFYVAXRAPUES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000001539 azetidines Chemical class 0.000 description 4
- 239000002585 base Substances 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 4
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 4
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 4
- AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 1-[6-[4-(5-chloro-6-methyl-1H-indazol-4-yl)-5-methyl-3-(1-methylindazol-5-yl)pyrazol-1-yl]-2-azaspiro[3.3]heptan-2-yl]prop-2-en-1-one Chemical compound ClC=1C(=C2C=NNC2=CC=1C)C=1C(=NN(C=1C)C1CC2(CN(C2)C(C=C)=O)C1)C=1C=C2C=NN(C2=CC=1)C AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101100063435 Caenorhabditis elegans din-1 gene Proteins 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- DIMMFFDORHVOJU-UHFFFAOYSA-N Cl.ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCNCC1 Chemical compound Cl.ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCNCC1 DIMMFFDORHVOJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 3
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 3
- QKGCQHXUGXQHBD-QPUJVOFHSA-N N1CC(C1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H]([C@@H](C1)O)C Chemical compound N1CC(C1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H]([C@@H](C1)O)C QKGCQHXUGXQHBD-QPUJVOFHSA-N 0.000 description 3
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 3
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 3
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 3
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 3
- YUEZJHOSHBTWPV-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-[4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazol-1-yl]acetate Chemical compound C1=NN(CC(=O)OCC)C=C1B1OC(C)(C)C(C)(C)O1 YUEZJHOSHBTWPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182480 glucuronide Natural products 0.000 description 3
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 3
- NXJCBFBQEVOTOW-UHFFFAOYSA-L palladium(2+);dihydroxide Chemical compound O[Pd]O NXJCBFBQEVOTOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000012321 sodium triacetoxyborohydride Substances 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- QSQWENQPOSRWLP-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-[4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazol-1-yl]piperidine-1-carboxylate Chemical compound C1CN(C(=O)OC(C)(C)C)CCC1N1N=CC(B2OC(C)(C)C(C)(C)O2)=C1 QSQWENQPOSRWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 3
- WTJUXIVJCJSBMN-IMWBMVJGSA-N (2S)-1-benzhydryl-2-methylazetidin-1-ium [(1R,4S)-7,7-dimethyl-2-oxo-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]methanesulfonate Chemical compound CC1(C)[C@H]2CC[C@]1(CS([O-])(=O)=O)C(=O)C2.C[C@H]1CC[NH+]1C(c1ccccc1)c1ccccc1 WTJUXIVJCJSBMN-IMWBMVJGSA-N 0.000 description 2
- RVJIUWJMJDLQIP-UHFFFAOYSA-N 1-benzhydryl-2-methylazetidin-3-ol Chemical compound CC1C(O)CN1C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RVJIUWJMJDLQIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BQDJLAWUTBCDHK-UHFFFAOYSA-N 2-(trifluoromethyl)pyrimidine Chemical compound FC(F)(F)C1=NC=CC=N1 BQDJLAWUTBCDHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOIXNOMHHWGUTG-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-[4-pyridin-4-yl-1-(2,2,2-trifluoroethyl)pyrazol-3-yl]phenoxy]methyl]quinoline Chemical compound C=1C=C(OCC=2N=C3C=CC=CC3=CC=2)C=CC=1C1=NN(CC(F)(F)F)C=C1C1=CC=NC=C1 NOIXNOMHHWGUTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MEBFFOKESLAUSJ-UHFFFAOYSA-N 2-[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxyacetaldehyde Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)OCC=O MEBFFOKESLAUSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TVOJIBGZFYMWDT-UHFFFAOYSA-N 4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-1h-pyrazole Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C1=CNN=C1 TVOJIBGZFYMWDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RGBAWAZVXQMPEN-UHFFFAOYSA-N 6-[1-[1-[2-[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxyethyl]piperidin-4-yl]pyrazol-4-yl]-2-chloro-4-(trifluoromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound [Si](C)(C)(C(C)(C)C)OCCN1CCC(CC1)N1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)Cl)C#N)C(F)(F)F RGBAWAZVXQMPEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JMCGEZXGRIWQLL-LBPRGKRZSA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F JMCGEZXGRIWQLL-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- SSBDTLAAMGQLAD-ZDUSSCGKSA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)NCCNC(OC(C)(C)C)=O)C(F)(F)F Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)NCCNC(OC(C)(C)C)=O)C(F)(F)F SSBDTLAAMGQLAD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VLEINZDDVAQJMD-UHFFFAOYSA-N ClC1=C(C(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C#N Chemical compound ClC1=C(C(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C#N VLEINZDDVAQJMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JSYNOXSZIMKDIO-UHFFFAOYSA-N ClC1=C(C(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C#N Chemical compound ClC1=C(C(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C#N JSYNOXSZIMKDIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HOZGJHWZOJVGEU-UHFFFAOYSA-N ClC1=C(C(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C#N Chemical compound ClC1=C(C(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C#N HOZGJHWZOJVGEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GOKLWXCTZGDAJW-UHFFFAOYSA-N ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C Chemical compound ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C GOKLWXCTZGDAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KTGAPILUNTYYFW-UHFFFAOYSA-N ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCOCC1 Chemical compound ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCOCC1 KTGAPILUNTYYFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XNZKQTMONOMKCW-UHFFFAOYSA-N ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)CC1OC(OC1)(C)C Chemical compound ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)CC1OC(OC1)(C)C XNZKQTMONOMKCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRIMOHMHCAZKBQ-UHFFFAOYSA-N ClC1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F Chemical compound ClC1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F SRIMOHMHCAZKBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IKSRRFQQDMGLHN-UHFFFAOYSA-N ClC1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F Chemical compound ClC1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F IKSRRFQQDMGLHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZQZDBQOEBDNLX-VIFPVBQESA-N N1CC(C1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)C Chemical compound N1CC(C1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)C CZQZDBQOEBDNLX-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- LVUCTISISVRTJU-SNVBAGLBSA-N N1CC(C1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)CO Chemical compound N1CC(C1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)CO LVUCTISISVRTJU-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- XVQYJNLYUFGIDG-NUHJPDEHSA-N OC(CN1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)N1[C@H](CC1)C)C#N)C(F)(F)F)CO Chemical compound OC(CN1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)N1[C@H](CC1)C)C#N)C(F)(F)F)CO XVQYJNLYUFGIDG-NUHJPDEHSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical compound C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N acetyl chloride Chemical compound CC(Cl)=O WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012346 acetyl chloride Substances 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 2
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- WCASXYBKJHWFMY-UHFFFAOYSA-N crotyl alcohol Chemical compound CC=CCO WCASXYBKJHWFMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- FCZCIXQGZOUIDN-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-diethoxyphosphinothioyloxyacetate Chemical compound CCOC(=O)COP(=S)(OCC)OCC FCZCIXQGZOUIDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002553 single reaction monitoring Methods 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960005137 succinic acid Drugs 0.000 description 2
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WJKHJLXJJJATHN-UHFFFAOYSA-N triflic anhydride Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)OS(=O)(=O)C(F)(F)F WJKHJLXJJJATHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (1R)-1,3-butanediol Natural products CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 1
- JWJVSDZKYYXDDN-ZCFIWIBFSA-N (2r)-1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]azetidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CC[C@@H]1C(O)=O JWJVSDZKYYXDDN-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- BJHIKXHVCXFQLS-HJLYHLTLSA-N (3s,4r,5r)-1,3,4,5,6-pentahydroxyhexan-2-one Chemical compound O[13CH2][13C@@H](O)[13C@@H](O)[13C@H](O)[13C](=O)[13CH2]O BJHIKXHVCXFQLS-HJLYHLTLSA-N 0.000 description 1
- PUPZLCDOIYMWBV-SCSAIBSYSA-N (R)-butane-1,3-diol Chemical compound C[C@@H](O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BOOVIFJKQGYEON-UHFFFAOYSA-N 1-(oxan-4-yl)-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazole Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C1=CN(C2CCOCC2)N=C1 BOOVIFJKQGYEON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KPXUWAMGPCLHKH-UHFFFAOYSA-N 1-[(2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)methyl]-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazole Chemical compound O1C(C)(C)OCC1CN1N=CC(B2OC(C)(C)C(C)(C)O2)=C1 KPXUWAMGPCLHKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 description 1
- MDUYWDNWFXSMJJ-OFLUOSHYSA-N 2-[(1S,5R)-3-[2-[(2S)-2-methylazetidin-1-yl]-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexan-6-yl]acetic acid Chemical compound C[C@H]1CCN1c1nc(cc(n1)C(F)(F)F)N1C[C@H]2C(CC(O)=O)[C@H]2C1 MDUYWDNWFXSMJJ-OFLUOSHYSA-N 0.000 description 1
- VRPJIFMKZZEXLR-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]acetic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCC(O)=O VRPJIFMKZZEXLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEHDAUWYRNEWBF-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazol-1-yl]ethanol Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C1=CN(CCO)N=C1 QEHDAUWYRNEWBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JWUJQDFVADABEY-UHFFFAOYSA-N 2-methyltetrahydrofuran Chemical compound CC1CCCO1 JWUJQDFVADABEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000005228 3‐azabicyclo[3.1.0]hexanes Chemical class 0.000 description 1
- BNPOTXLWPZOESZ-UHFFFAOYSA-N 4-(chloromethyl)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolane Chemical compound CC1(C)OCC(CCl)O1 BNPOTXLWPZOESZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HKMHAQBXKINVKU-NSHDSACASA-N C(#N)C=1C(=CC(=NC=1N1[C@H](CC1)C)C=1C=NN(C=1)CC(=O)NCCO)C(F)(F)F Chemical compound C(#N)C=1C(=CC(=NC=1N1[C@H](CC1)C)C=1C=NN(C=1)CC(=O)NCCO)C(F)(F)F HKMHAQBXKINVKU-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- VDCVQVMDKWCJOI-VIFPVBQESA-N C(#N)C=1C(=CC(=NC=1N1[C@H](CC1)C)C=1C=NN(C=1)CC(=O)O)C(F)(F)F Chemical compound C(#N)C=1C(=CC(=NC=1N1[C@H](CC1)C)C=1C=NN(C=1)CC(=O)O)C(F)(F)F VDCVQVMDKWCJOI-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- VHPVJRKTFPXTSU-QGZVFWFLSA-N C(#N)C=1C(=CC(=NC=1N1[C@H](CC1)CO)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F Chemical compound C(#N)C=1C(=CC(=NC=1N1[C@H](CC1)CO)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F VHPVJRKTFPXTSU-QGZVFWFLSA-N 0.000 description 1
- ISXZBRUTDXORGV-ZDUSSCGKSA-N C(C)(=O)N1CCC(CC1)N1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)N1[C@H](CC1)C)C#N)C(F)(F)F Chemical compound C(C)(=O)N1CCC(CC1)N1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)N1[C@H](CC1)C)C#N)C(F)(F)F ISXZBRUTDXORGV-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- ZGUZTMBHBWWXLM-LLVKDONJSA-N CN1CC(C1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)CO Chemical compound CN1CC(C1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)CO ZGUZTMBHBWWXLM-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- AXDATWGHJQHOFM-ZDUSSCGKSA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C AXDATWGHJQHOFM-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- CZIOEBQGUSKBAX-LBPRGKRZSA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCNCC1 Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCNCC1 CZIOEBQGUSKBAX-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- KUXLUIMRQROHFE-LBPRGKRZSA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCOCC1 Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)C1CCOCC1 KUXLUIMRQROHFE-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- IEAWGOWOTQVMLF-AWEZNQCLSA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F IEAWGOWOTQVMLF-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- AZDPSEDNWMOWHH-JTQLQIEISA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C)C(F)(F)F Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C)C(F)(F)F AZDPSEDNWMOWHH-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- HAUDFIFEGDNKJX-LBPRGKRZSA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)N1CCNCC1)C(F)(F)F Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)N1CCNCC1)C(F)(F)F HAUDFIFEGDNKJX-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- QSGPVIVCHVGAAD-QMMMGPOBSA-N C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)O)C(F)(F)F Chemical compound C[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)O)C(F)(F)F QSGPVIVCHVGAAD-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- XJNROESZUXXXFR-TVQRCGJNSA-N C[C@@H]1N(C[C@H]1O)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C)C(F)(F)F Chemical compound C[C@@H]1N(C[C@H]1O)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C)C(F)(F)F XJNROESZUXXXFR-TVQRCGJNSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YTHIPMJMMMSZAB-UHFFFAOYSA-N ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)CC(CO)O Chemical compound ClC1=NC(=CC(=C1C#N)C(F)(F)F)C=1C=NN(C=1)CC(CO)O YTHIPMJMMMSZAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910016523 CuKa Inorganic materials 0.000 description 1
- GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N D-F6P Natural products OCC(=O)C(O)C(O)C(O)COP(O)(O)=O GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000156 Fructokinases Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 229940119490 Ketohexokinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXGFTHNEKPQMOG-CYBMUJFWSA-N N1CCC(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)CO Chemical compound N1CCC(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)CO KXGFTHNEKPQMOG-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- MXEUJQPKIRWPTJ-JTQLQIEISA-N NCCNC(CN1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)C)=O Chemical compound NCCNC(CN1N=CC(=C1)C1=NC(=NC(=C1)C(F)(F)F)N1[C@H](CC1)C)=O MXEUJQPKIRWPTJ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- GRLCTYXHGPVHAY-AWEZNQCLSA-N OCCN1CCC(CC1)N1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)N1[C@H](CC1)C)C#N)C(F)(F)F Chemical compound OCCN1CCC(CC1)N1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)N1[C@H](CC1)C)C#N)C(F)(F)F GRLCTYXHGPVHAY-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- ZZLVIISBPKMCBS-MRXNPFEDSA-N OC[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F Chemical compound OC[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F ZZLVIISBPKMCBS-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 1
- UOTIAKXFWZHFBO-CYBMUJFWSA-N OC[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F Chemical compound OC[C@@H]1N(CC1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F UOTIAKXFWZHFBO-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- FZDYDDBXXVCRTR-YMRXKLBXSA-N O[C@@H]1CN(C[C@H]1O)C(CN1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)N1[C@H](CC1)C)C#N)C(F)(F)F)=O Chemical compound O[C@@H]1CN(C[C@H]1O)C(CN1N=CC(=C1)C1=CC(=C(C(=N1)N1[C@H](CC1)C)C#N)C(F)(F)F)=O FZDYDDBXXVCRTR-YMRXKLBXSA-N 0.000 description 1
- LDQWFUTYSNWEHY-XHDPSFHLSA-N O[C@H]1[C@@H](N(C1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N(C1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)C1CN(C1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C LDQWFUTYSNWEHY-XHDPSFHLSA-N 0.000 description 1
- AFIJUXVPVBJBKQ-DUVNUKRYSA-N O[C@H]1[C@@H](N(C1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)[C@@H]1CN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N(C1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)[C@@H]1CN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C AFIJUXVPVBJBKQ-DUVNUKRYSA-N 0.000 description 1
- AFIJUXVPVBJBKQ-JGGQBBKZSA-N O[C@H]1[C@@H](N(C1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)[C@H]1CN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N(C1)C1=NC(=CC(=N1)C=1C=NN(C=1)[C@H]1CN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)C(F)(F)F)C AFIJUXVPVBJBKQ-JGGQBBKZSA-N 0.000 description 1
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 1
- 229940125819 PF-06835919 Drugs 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 1
- GMWFCJXSQQHBPI-UHFFFAOYSA-N azetidin-3-ol Chemical compound OC1CNC1 GMWFCJXSQQHBPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HONIICLYMWZJFZ-UHFFFAOYSA-N azetidine Chemical compound C1CNC1 HONIICLYMWZJFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002393 azetidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- PBAYDYUZOSNJGU-UHFFFAOYSA-N chelidonic acid Natural products OC(=O)C1=CC(=O)C=C(C(O)=O)O1 PBAYDYUZOSNJGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N diethylenediamine Natural products C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000003821 enantio-separation Methods 0.000 description 1
- 238000007824 enzymatic assay Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 238000010931 ester hydrolysis Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- PQJJJMRNHATNKG-UHFFFAOYSA-N ethyl bromoacetate Chemical compound CCOC(=O)CBr PQJJJMRNHATNKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000004110 gluconeogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N isobutane Chemical compound CC(C)C NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010977 jade Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000004132 lipogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- FFYUPQYQWGIUBC-WCCKRBBISA-N methanesulfonate (2S)-2-methylazetidin-1-ium Chemical class CS(=O)(=O)[O-].C[C@@H]1[NH2+]CC1 FFYUPQYQWGIUBC-WCCKRBBISA-N 0.000 description 1
- OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N methanol-d1 Chemical compound [2H]OC OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- DAZXVJBJRMWXJP-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylethylamine Chemical compound CCN(C)C DAZXVJBJRMWXJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N octan-1-amine Chemical compound CCCCCCCCN IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N octyl beta-D-glucopyranoside Chemical compound CCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000010627 oxidative phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000634 powder X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000010956 selective crystallization Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 238000004808 supercritical fluid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- IGWFVUAHNXWIFY-CQSZACIVSA-N tert-butyl (3r)-3-[4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazol-1-yl]pyrrolidine-1-carboxylate Chemical compound C1N(C(=O)OC(C)(C)C)CC[C@H]1N1N=CC(B2OC(C)(C)C(C)(C)O2)=C1 IGWFVUAHNXWIFY-CQSZACIVSA-N 0.000 description 1
- MCVBUGLOVGXRGL-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 3-hydroxy-4-[4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazol-1-yl]piperidine-1-carboxylate Chemical compound OC1CN(CCC1N1N=CC(=C1)B1OC(C(O1)(C)C)(C)C)C(=O)OC(C)(C)C MCVBUGLOVGXRGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPISOFJLWYBCAV-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazole-1-carboxylate Chemical compound C1=NN(C(=O)OC(C)(C)C)C=C1B1OC(C)(C)C(C)(C)O1 IPISOFJLWYBCAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MMPWHAJQEZIIEH-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 7-oxa-4-azabicyclo[4.1.0]heptane-4-carboxylate Chemical compound C1N(C(=O)OC(C)(C)C)CCC2OC21 MMPWHAJQEZIIEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AOCSUUGBCMTKJH-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-(2-aminoethyl)carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCN AOCSUUGBCMTKJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWXPZXBSDSIRCS-UHFFFAOYSA-N tert-butyl piperazine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCNCC1 CWXPZXBSDSIRCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M triflate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 238000002525 ultrasonication Methods 0.000 description 1
Description
Данное изобретение относится к новым соединениям ингибиторов кетогексокиназы (КГК), фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, и применению соединений для лечения некоторых состояний, таких как сахарный диабет 2 типа (СД 2 типа), сердечная недостаточность, диабетическая болезнь почек и неалкогольный стеатогепатит (НАСГ).
КГК, также именуемая фруктокиназой, представляет собой скорость-лимитирующий фермент, участвующий в метаболизме фруктозы. Он катализирует фосфорилирование фруктозы до фруктозо-1фосфата (Ф1Ф), вызывая сопутствующее истощение клеточного уровня АТФ. В отличие от глюкозы, в метаболизме фруктозы отсутствует ингибирование по типу обратной связи, и он запускает накопление последующих промежуточных продуктов, участвующих, например, в липогенезе, глюконеогенезе и окислительном фосфорилировании (Hannou, S.A. et al., J. Clin. Invest., 128(2), 544-555, 2018). Это имеет негативные последствия для метаболизма, которые связаны с рядом серьезных метаболических нарушений.
КГК существует в двух альтернативно сплайсированных изоформах, состоящих из КГК-С и КГК-А, различающихся экзоном 3. КГК-С экспрессируется в основном в печени, почках и кишечнике, тогда как КГК-А встречается повсеместно. Мыши, дефицитные по обеим изоформам, полностью защищены от возникновения метаболического синдрома, индуцированного фруктозой. Однако неблагоприятные метаболические эффекты усугубляются у мышей, лишенных только КГК-А (Ishimoto T. et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 109(11), 4320-4325, 2012).
В нескольких эпидемиологических и экспериментальных исследованиях сообщалось, что повышенное потребление фруктозы, а точнее увеличение метаболизма фруктозы, может играть важную роль в развитии некоторых нарушений, включая метаболический синдром и, в частности, в развитии СД 2 типа (Softic et al., J. Clin. Invest., 127(11), 4059-4074, 2017), сердечной недостаточности (Mirtschink, P. et al., Eur. Heart J., 39, 2497-2505, 2018), диабетической болезни почек (Cirillo, P. et al., J. Am. Soc. Nephrol, 20, 545-553, 2009) и НАЖБП/НАСГ (Vos, M.B. et al., Hepatology, 57, 2525-2531, 2013). Ожидается, что целевое ингибирование КГК ограничит метаболизм фруктозы и обеспечит эффективные варианты лечения ряда метаболических нарушений.
В US 2017/0183328 A1 описаны замещенные 3-азабицикло[3.1.0]гексаны в качестве ингибиторов КГК. Недавно опубликованные данные показывают, что ингибитор кетогексокиназы PF-06835919, вводимый в течение 6 недель, снижает содержание жира в печени в целом, измеренное с помощью протонной плотности жировой фракции по данным магнитно-резонансной томографии у субъектов с неалкогольной жировой болезнью печени (J. Hepatology, EASL International Liver Congress Abstracts, Supplement № 1S, vol. 70, April 2019).
Соединения, содержащие карбоксильные функциональные группы, несут риск, связанный с образованием метаболитов ацилглюкуронида (Vleet Van et al., Toxicology Letters, 272 (2017) 1-7). Метаболиты ацилглюкуронида часто нестабильны и могут быть химически реакционноспособными, что приводит к ковалентному связыванию с макромолекулами и токсичности.
Существует потребность в альтернативных способах лечения метаболического синдрома и связанных с ним показаний, включая СД 2 типа, сердечную недостаточность, диабетическую болезнь почек и НАСГ. В частности, существует потребность в соединениях, которые являются сильными ингибиторами КГК. Существует потребность в соединениях ингибиторов КГК, обладающих полезными свойствами, например хорошей биодоступностью при пероральном приеме для обеспечения дозировки один раз в сутки. Кроме того, существует потребность в соединениях ингибиторов КГК, которые не имеют фрагмента карбоновой кислоты и не обладают способностью образовывать ацилглюкурониды.
Соответственно в одном варианте реализации данного изобретения предложено соединение формулы I
N X^N
Формула I где X представляет собой N или C, замещенный CN; R1 выбран из H,
- 1 043635
оба R2 и R3 представляют собой H или один представляет собой H, а другой представляет собой OH;
R4, R5, R6, R7 и R9 независимо представляют собой H или CH3;
R8 представляет собой H, CH3, CH2CH2OH, C(=O)CH2NH2 или C(=O)CH3; и
R10 представляет собой OH или NH2; или его фармацевтически приемлемая соль.
В конкретном варианте реализации изобретения R1 выбран из H,
или его фармацевтически приемлемая соль.
В конкретном варианте реализации изобретения предложено соединение формулы I, где X представляет собой N или C, замещенный CN;
R1 выбран из
и где R2 представляет собой H, a R3 представляет собой OH, или
R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или оба R2 и R3 представляют собой Н;
или его фармацевтически приемлемая соль.
В конкретном варианте реализации изобретения соединение имеет формулу Ia
- 2 043635 или представляет собой его фармацевтически приемлемую соль.
В конкретном варианте реализации изобретения соединение имеет формулу Ic
или представляет собой его фармацевтически приемлемую соль.
В конкретном варианте реализации изобретения соединение имеет формулу Ie
Формула 1е;
или представляет собой его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте реализации изобретения X представляет собой N.
В одном варианте реализации изобретения X представляет собой C, замещенный CN.
В одном варианте реализации изобретения R1 представляет собой
В одном варианте реализации изобретения соединение формулы I представляет собой
N
или его фармацевтически приемлемую соль.
В конкретном варианте реализации изобретения предложена сукцинатная соль
В предпочтительном варианте реализации изобретения сукцинатная соль представляет собой сесквисукцинатную соль.
В одном варианте реализации изобретения соединение формулы I представляет собой
- 3 043635 или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте реализации изобретения соединение формулы I представляет собой
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте реализации изобретения соединение формулы I представляет собой
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте реализации изобретения соединение формулы I представляет собой
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте реализации изобретения соединение формулы I представляет собой
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте реализации изобретения соединение формулы I представляет собой
или его фармацевтически приемлемую соль.
- 4 043635
В конкретном варианте реализации изобретения соединение выбрано из
2-[4- [2- [(25)-2-метилазетидин-1 -ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1 -ил] -1 пиперазин-1 -илэтанона;
[(27?)-1 - [4- [ 1 -(4-пиперидил)пиразол-4-ил] -6-(трифторметил)пиримидин-2-ил] азетидин-2ил]метанола;
[(27?)-1 - [4-[ 1 -(азетидин-3 -ил)пиразол-4-ил] -6-(трифторметил)пиримидин-2-ил]азетидин-2ил]метанола;
(2S,3R)-1 - [4- [ 1 -(азетидин-3 -ил)пиразол-4-ил] -6-(трифторметил)пиримидин-2-ил] -2метилазетидин-3-ола;
2-[4-[5-циано-6-[(2Л')-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1-ил]-А'(2-гидроксиэтил)ацетамида;
2- [(27?)-2-(ги дроксиметил)азетидин-1 -ил] -6- [ 1 -(4-пиперидил)пиразол-4-ил] -4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
2- [(25,37?)-3 -гидрокси-2-метилазетидин-1 -ил] -6- [ 1 -(4-пип еридил)пиразол-4-ил] -4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
2- [(25)-2-метилазети дин-1 -ил] -6- [ 1 -(1 -метил-4-пиперидил)пиразол-4-ил] -4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
6- [ 1 - [ 1 -(2-гидроксиэтил)-4-пиперидил] пиразол-4-ил] -2-[(28)-2-метилазетидин-1 -ил] -4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
6- [ 1 - [2-(диметиламино)этил] пиразол-4-ил] -2- [(25)-2-метилазетидин-1 -ил ] -4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
6- [ 1 -(2-гидроксиэтил)пиразол-4-ил ] -2- [(26)-2-метилазети ди н-1 -ил] -4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
2- [(26)-2-метилазети дин-1 -ил] -6- [ 1 -(4-пиперидил)пиразол-4-ил] -4-(трифторметил)пиридин-3 карбонитрила;
2- [(26)-2-метилазети дин-1 -ил] -4- [ 1 -(4-пиперидил)пиразол-4-ил] -6(трифторметил)пиримидина;
(25,37?)-2-метил-1 - [4- [ 1 - [(37?)-пирролидин-3 -ил]пиразол-4-ил] -6-(трифторметил)пиримидин-2ил]азетидин-3-ола;
(25,37?)-2-метил-1 - [4- [ 1 - [(35)-пирролидин-3 -ил ]пиразол-4-ил] -6-(трифторметил)пиримидин-2ил]азетидин-3-ола;
[(27?)-1 - [4- [ 1 - [(37?)-пирролидин-3 -ил]пиразол-4-ил] -6-(трифторметил)пиримидин-2ил]азетидин-2-ил]метанола;
6- [ 1 -(азетидин-3 -ил)пиразол-4-ил] -2- [(26)-2-метилазети дин-1 -ил] -4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрила;
6-[1-[1-(2-аминоацетил)-4-пиперидил]пиразол-4-ил]-2-[(26)-2-метилазетидин-1-ил]-4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
6- [ 1 -(1 -ацетил-4-пиперидил)пиразол-4-ил] -2- [(25)-2-метилазети дин-1 -ил] -4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
2- [(26)-2-метилазетидин-1 -ил] -6- [ 1 - [2-(4-метилпиперазин-1 -ил)-2-оксоэтил] пиразол-4-ил ] -4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
2- [4- [5 -циано-6- [(25)-2-метилазетидин-1 -ил] -4-(трифторметил)-2-пири дил ]пиразол-1 -ил ] -Ν,Ν бис(2-гидроксиэтил)ацетамида;
- 5 043635
6- [ 1 - [2- [(3R,4R)-3,4-дигидроксипирроли дин-1 -ил ] -2-оксоэтил]пиразол-4-ил] -2- [(2S)-2метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрила;
6- [ 1 - [2- [(3^,40)-3,4-дигидроксипирролидин-1 -ил] -2-оксоэтил ]пиразол-4-ил] -2- [(20)-2- метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрила;
6- [ 1 -(2,3 -диги дроксипропил)пиразол-4-ил] -2- [(25)-2-метилазетидин-1 -ил] -4- (трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
2-[(25)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(1Н-пиразол-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрила;
2-[(20)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(1-тетрагидропиран-4-илпиразол-4-ил)-4(трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
6- [ 1 -(3 -гидрокси-4-пиперидил)пиразол-4-ил] -2- [(2Л)-2-мети лазети д и н-1 -ил] -4- (трифторметил)пиридин-З-карбонитрила;
М-(2-аминоэтил)-2- [4- [2- [(20)-2-метилазетидин-1 -ил] -6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1-ил]ацетамида;
2-[4-[2-[(20)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]-1-[(30)-
-метилпиперазин-1 -ил]этанона;
2-[4-[2-[(20)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]-1-[(20)2-метилпиперазин-1 -ил]этанона;
-(3,3 - диметилпиперазин-1 -ил)-2- [4- [2- [(2Л)-2-метилазети д и н-1 -ил] -6(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]этанона;
- [(2Х, 5R)-2,5 -диметилпиперазин-1 -ил] -2- [4- [2- [(2Л)-2-метилазети д ин-1 -ил] -6(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]этанона;
4-[1-(азетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-2-[(20)-2-метилазетидин-1-ил]-6(трифторметил)пиримидина;
2- [(25)-2-метилазети дин-1 -ил] -4- [ 1 -(1 -метилазетидин-3 -ил)пиразол-4-ил ] -6- (трифторметил)пиримидина;
(2Х,37?)-2-метил-1 - [4- [ 1 -(1 -метилазетидин-3 -ил)пиразол-4-ил] -6-(трифторметил)пиримидин-2ил]азетидин-3-ола; или
[(27?)-1 - [4- [ 1 -(1 -метилазетидин-3 -ил)пиразол-4-ил] -6-(трифторметил)пирими дин-2ил]азетидин-2-ил]метанола;
или его фармацевтически приемлемой соли.
В конкретном варианте реализации изобретения соединение представляет собой 2-[4-[2-[(2S)-2метилазетидин-1 -ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1 -ил]-1 -пиперазин-1 -илэтанона сесквисукцинат, который также известен как 2-[4-[2-[(2S)-2-метил-1-азетидинил]-6-(трифторметил)-4пиримидинил]-1H-nиразол-1-ил]-1-(1-пиперазинил)этанон, бутандиоат (1:1,5) или бутандиовая кислота2-(4- {2-[(28)-2-метилазетидин-1 -ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил} -1 H-пиразол-1 -ил)-1 -(пиперазин1-ил)этан-1-он (1,5/1).
Формула I включает формулы Ia, Ib, Ic, Id, Ie, If, Ig и Ih, и ссылка на формулу I, приведенная ниже, например, в способах лечения и терапевтических применениях, также должна рассматриваться как ссылка на все эти подформулы без исключения.
В одном варианте реализации данного изобретения предложен способ лечения СД 2 типа у пациента, нуждающегося в таком лечении, который включает введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном варианте реализации данного изобретения предложен способ лечения сердечной недостаточности у пациента, нуждающегося в таком лечении, который включает введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном варианте реализации данного изобретения предложен способ лечения диабетической болезни почек у пациента, нуждающегося в таком лечении, который включает введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном варианте реализации данного изобретения предложен способ лечения НАСГ у пациента, нуждающегося в таком лечении, который включает введение пациенту эффективного количества соеди- 6 043635 нения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном варианте реализации данного изобретения предложен способ лечения заболевания, выбранного из группы, состоящей из метаболического синдрома, НАЖБП, ожирения, сердечнососудистого заболевания, ишемической болезни сердца, хронического заболевания почек, дислипидемии и осложнений диабета, например диабетической ретинопатии, у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
Более того, в одном варианте реализации данного изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии. В одном варианте реализации данного изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения при лечении СД 2 типа. В одном варианте реализации данного изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения при лечении сердечной недостаточности. В одном варианте реализации данного изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения при лечении диабетической болезни почек. В одном варианте реализации данного изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения при лечении НАСГ. В одном варианте реализации данного изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении метаболического синдрома, НАЖБП, ожирения, сердечно-сосудистого заболевания, ишемической болезни сердца, хронического заболевания почек, дислипидемии и осложнений диабета, например, диабетической ретинопатии.
Более того, в одном варианте реализации данного изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения СД 2 типа. В одном варианте реализации данного изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения сердечной недостаточности. В одном варианте реализации данного изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения диабетической болезни почек. В одном варианте реализации данного изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения НАСГ. В одном варианте реализации данного изобретения предложено использование соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения метаболического синдрома, НАЖБП, ожирения, сердечнососудистого заболевания, ишемической болезни сердца, хронического заболевания почек, дислипидемии и осложнений диабета, например, диабетической ретинопатии.
В одном варианте реализации данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами. В одном варианте реализации данного изобретения предложен способ получения фармацевтической композиции, включающий смешивание соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами.
Применяемый в данном документе термин лечение или лечить включает сдерживание, замедление, остановку или обратное развитие прогрессирования или тяжести существующего симптома или расстройства.
Применяемый в данном документе термин пациент относится к млекопитающему. Пациентом является предпочтительно человек.
Применяемый в данном документе термин эффективное количество относится к количеству или дозе соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, которое при однократном или многократном введении пациенту обеспечивает требуемый эффект у пациента, подлежащего диагностике или лечению.
Эффективное количество может установить специалист в данной области техники, используя известные методики и наблюдая результаты, полученные при аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного количества для пациента, рассматривается множество факторов, включая, но не ограничиваясь ими, вид пациента; его размер, возраст и общее состояние здоровья; конкретное вовлеченное заболевание или расстройство; степень вовлеченности или тяжесть заболевания или расстройства; реакцию отдельного пациента; конкретное вводимое соединение; способ введения; характеристики биодоступности вводимого препарата; выбранный режим дозирования; применение сопутствующих лекарственных средств; и другие имеющие отношение обстоятельства. Соединения формулы I эффективны при суточной дозировке, которая находится в диапазоне от около 0,1 мг/кг до около 15 мг/кг массы тела.
Соединения формулы I составляют в фармацевтические композиции, которые вводят любым способом, обеспечивающим биодоступность соединения. Предпочтительно указанные композиции предназначены для перорального введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники (см., например, Remington, J. P., Remington: The Science and Practice
- 7 043635 of Pharmacy, L.V. Allen, editor, 22 изд., Pharmaceutical Press, 2012).
Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли могут применяться в способах лечения и терапевтических целях данного изобретения, при этом определенные конфигурации являются предпочтительными. Следует понимать, что следующие предпочтения применимы как к способам лечения и терапевтическим применениям, так и к соединениям по данному изобретению.
Соединения по данному изобретению включают
Формула 1е;
- 8 043635
ОН
F3
N
R
Формула If;
R
Формула Ig; или
R
Формула Ih;
и их фармацевтически приемлемые соли.
Хотя данное изобретение охватывает все индивидуальные энантиомеры и диастереомеры, а также смеси указанных соединений, включая рацематы, соединения формулы Ia, формулы Ic и формулы Ie и их фармацевтически приемлемые соли являются особенно предпочтительными.
Отдельные энантиомеры могут быть отделены или разделены рядовым специалистом в данной области техники в любой удобный момент синтеза соединений формулы I, такими способами, как методики селективной кристаллизации, хиральная хроматография (см., например, J. Jacques et al., Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley and Sons, Inc., 1981, и E.L. Eliel and S.H. Wilen, Stereochemistry of Organic Compounds, Wiley-Interscience, 1994), или сверхкритическая жидкостная хроматография (СЖХ) (см., например, T.A. Berger, Supercritical Fluid Chromatography Primer, Agilent Technologies, July 2015).
Фармацевтически приемлемая соль соединения формулы I может быть получена, например, реакцией соответствующего свободного основания соединения формулы I и соответствующей фармацевтически приемлемой кислоты в подходящем растворителе в стандартных условиях, хорошо известных в данной области техники (см., например, Bastin, R.J. et al., Org. Process. Res. Dev., 4, 427-435, 2000; и Berge, S.M. et al., J. Pharm. Sci, 66, 1-19, 1977). Предпочтительной солью является сукцинатная соль. Особенно предпочтительной солью является сесквисукцинатная соль. В сесквисукцинатной соли соотношение свободного основания к сукцинату составляет 1:1,5. Сукцинатная соль также известна как бутандиоатная соль.
Соединения формулы I или их соли могут быть получены с помощью множества процедур, известных рядовому специалисту в данной области техники, некоторые из которых представлены ниже на схемах, в получениях и примерах. Продукты каждого этапа на приведенных ниже схемах могут быть выделены традиционными методами, хорошо известными в данной области техники, включая экстракцию, упаривание, осаждение, хроматографию, фильтрование, растирание и кристаллизацию. На следующих схемах все заместители, если не указано иное, являются такими, как определено ранее. Реагенты и исходные вещества общедоступны рядовым специалистам в данной области техники. Не ограничивая объем изобретения, следующие схемы, получения и примеры представлены для дополнительной иллюстрации изобретения. Дополнительно рядовому специалисту в данной области техники понятно, что соединения формулы I могут быть получены с применением исходного материала или промежуточного соединения с соответствующей необходимой стереохимической конфигурацией, которая может быть получена специалистом в данной области техники.
Определенные сокращения определены следующим образом.
АЦН относится к ацетонитрилу;
- 9 043635
BOC относится к трет-бутоксикарбонилу;
ДХМ относится к хлористому метилену или дихлорметану;
ДИПЭА относится к Ν,Ν-диизопропилэтиламину;
ДМФ относится к Ν,Ν-диметилформамиду;
ДМСО относится к диметилсульфоксиду;
ELSD относится к испарительному детектору рассеяния света;
ЭР/МС относится к масс-спектрометрии с электрораспылением;
EtOAc относится к этилацетату;
EtOH относится к этанолу или этиловому спирту;
ч относится к часу или часам;
HATU относится к 1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиниум-3-оксида гексафторфосфату;
ВЭЖХ относится к высокоэффективной жидкостной хроматографии;
ИПС относится к изопропиловому спирту;
Me относится к метилу;
MeOH относится к метанолу;
МТБЭ относится к метил-трет-бутиловому эфиру;
мин относится к минуте или минутам;
m/z относится к отношению массы к заряду;
Ph относится к фенилу;
КДК относится к круглодонной колбе;
КТ относится к комнатной температуре;
СКО относится к селективному катионному обмену;
SEM относится к стандартной ошибке среднего;
СЖХ относится к сверхкритической жидкостной хроматографии;
ТФК относится к трифторуксусной кислоте;
ТГФ относится к тетрагидрофурану.
Схема 1
На схеме 1 изображен общий способ получения соединений формулы I. R1a может быть таким же, что и R1 в конечном соединении формулы I, или он может представлять собой группу, требующую преобразования для достижения R1 формулы I. Обычные синтетические превращения R1a, такие как реакции снятия защитной BOC, гидролиза сложного эфира и амидного сочетания, можно проводить до или после этапа B. На этапе A реакция кросс-сочетания Сузуки между гетероарилдихлоридом 1 и сложным пиразолборонатным эфиром 2 дает замещенное пиразольное соединение 3. Эту реакцию проводят с использованием основания, например 2 М водного Na2CO3, в органическом растворителе, например 1,4-диоксане, в присутствии палладиевого катализатора, такого как тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) или бис(трифенилфосфин)палладия (II) дихлорид, при повышенной температуре. На этапе B соединение 3 подвергают реакции нуклеофильного ароматического замещения замещенным азетидином 4 для получения соединения формулы I. Эту реакцию проводят в присутствии органического основания, такого как ДИПЭА, в органическом растворителе, таком как 1,4-диоксан, при повышенной температуре.
- 10 043635
Схема 2
На схеме 2 изображено получение подгруппы соединений формулы I, в которых пиразол замещен азотсодержащим гетероциклом (формула I'). Сложный пиразолборонатный эфир 5 замещен азотсодержащим гетероциклом, как это показано на схеме 2, на которой каждый Y и Z может независимо представлять собой -CH2- или -CH2-CH2-, a PG представляет собой группу, защищающую азот, такую как BOC. На этапе C реакция кросс-сочетания Сузуки между гетероарилдихлоридом 1 и сложным пиразолборонатным эфиром 5 дает замещенное пиразольное соединение 6. Как описано на этапе A схемы 1, эту реакцию проводят с использованием основания, например 2 М водного Na2CO3, в органическом растворителе, например 1,4-диоксане, в присутствии палладиевого катализатора, такого как тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) или бис(трифенилфосфин)палладия (II) дихлорид, при повышенной температуре. Могут быть выбраны два разных пути, как это изображено на схеме 2 - путь А и путь Б.
В пути А с замещенного пиразольного соединения 6 снимают защиту на этапе D для получения соединения 7. Например, если PG представляет собой BOC, снятие защиты может быть выполнено с помощью ТФК. На этапе E гетероциклический азот соединения 7 может подвергаться реакциям замещения, например восстановительному аминированию, ацилированию или амидному сочетанию, для получения соединения 8. Такие замещения обозначены на этой схеме буквой R. На этапе F соединение 8 подвергают реакции нуклеофильного ароматического замещения замещенным азетидином 4 для получения соединения формулы I'. Как описано на этапе B схемы 1, эту реакцию проводят в присутствии органического основания, такого как ДИПЭА, в органическом растворителе, таком как 1,4-диоксан, при повышенной температуре. Это может быть последним этапом или, в альтернативном варианте, группа R может быть подвергнута дальнейшим рутинным синтетическим превращениям, таким как удаление защитной группы.
В пути В замещенное пиразольное соединение 6 подвергается реакции нуклеофильного ароматического замещения на этапе G замещенным азетидином 4 для получения соединения 9. Это может быть достигнуто путем реакции нуклеофильного ароматического замещения замещенным азетидином 4 в присутствии органического основания, такого как ДИПЭА, в органическом растворителе, таком как 1,4диоксан, при повышенной температуре. В альтернативном варианте, этапы C и G могут быть выполнены за одну процедуру, при которой реакция кросс-сочетания Сузуки на этапе C завершается первой, а затем к реакционной смеси добавляют азетидин 4 вместе с органическим основанием (например, ДИПЭА), а затем этап G продолжается при повышенной температуре. Защитная группа PG удаляется на этапе H (например, с помощью ТФК, если PG представляет собой BOC) для получения соединения 10. На этапе I азотная группа соединения 10 может подвергаться реакциям замещения, например, восстановительному аминированию, ацилированию или амидному сочетанию, для получения соединения формулы I'. Это может быть последним этапом или, в альтернативном варианте, группа R может быть подвергнута дальнейшим рутинным синтетическим превращениям, таким как удаление защитной группы.
- 11 043635
Схема 3
На схеме 3 изображено получение подгруппы соединений формулы I, в которых пиразол замещен ацетамидной группой (формула I). На этапе J реакция кросс-сочетания Сузуки между гетероарилдихлоридом 1 и сложным пиразолборонатным эфиром 11 дает замещенное пиразольное соединение 12. Как описано на схемах 1 и 2, эту реакцию проводят с использованием основания, например 2 М водного Na2CO3, в органическом растворителе, например 1,4-диоксане, в присутствии палладиевого катализатора, такого как тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) или бис(трифенилфосфин)палладия (II) дихлорид, при повышенной температуре. На этапе K гетероарилхлорид 12 подвергается нуклеофильному ароматическому замещению азетидином 4 в присутствии органического основания, такого как ДИПЭА, в органическом растворителе, таком как 1,4-диоксан, при повышенной температуре для получения соединения 13. На этапе L гидролиз сложного эфира с использованием основания, например, гидроксида натрия, дает кислоту 14. На этапе M кислота 14 подвергается реакции амидного сочетания с амином формулы HNR'R для получения амидного соединения формулы I. Амин HNR'R может быть циклическим (например, необязательно замещенным пиперазином). Этап M может быть последним этапом или могут происходить дополнительные рутинные синтетические преобразования, такие как удаление защитной группы.
Получения и примеры
Следующие получения и примеры дополнительно иллюстрируют различные варианты реализации данного изобретения и демонстрируют типовые способы синтеза соединения по изобретению. Реагенты и исходные материалы легко доступны или могут быть легко синтезированы рядовыми специалистами в данной области техники. Следует понимать, что получения и примеры приведены для иллюстрации, а не ограничения и что рядовыми специалистами в данной области техники могут быть осуществлены различные модификации.
ЖХ-ЭР/МС проводили на системе для жидкостной хроматографии AGILENT® HP1200. Измерения масс-спектрометрии с электрораспылением (полученные в положительном и/или отрицательном режиме) проводили на квадрупольном масс-спектрометре с масс-селективным детектором, подключенном к системе ВЭЖХ, которая может быть оснащена ELSD или нет.
Условия ЖХ-МС (низкое pH).
Колонка: PHENOMENEX® GEMINI® NX C18 2,0x50 мм, 3,0 мкм, 110 А;
градиент: 5-95% В в течение 1,5 мин, а затем 95% В в течение 0,5 мин;
температура колонки: 50±10°C;
скорость потока: 1,2 мл/мин;
объем впрыска: 1 мкл;
растворитель A: деионизированная вода с 0,1% HCOOH;
растворитель B: АЦН с 0,1% муравьиной кислоты;
длина волны 200-400 и 212-216 нм.
Если ВЭЖХ оснащена ELSD, настройки являются следующими: температура испарителя 45°C, температура распылителя 40°C и расход газа 1,6 ст. л/мин.
Альтернативные условия ЖХ-МС (высокий pH).
Колонка: колонка Waters xBridge® C18 2,1x50 мм, 3,5 мкм;
градиент: 5-95% В в течение 1,5 мин, затем 95% В в течение 0,50 мин;
температура колонки: 50±10°C;
скорость потока: 1,2 мл/мин;
объем впрыска: 1 мкл;
- 12 043635 растворитель A: 10 мМ NH4HCO3, pH 9;
растворитель B: АЦН;
длина волны: 200-400 и 212-216 нм;
при наличии ELSD: температура испарителя 45°C, температура распылителя 40°C и расход газа 1,60 ст. л/мин.
Профили РПД кристаллических твердых веществ записывали на рентгеновском порошковом дифрактометре Bruker D4 Endeavor, оснащенном источником CuKa и детектором Vantec, работающим при 35 кВ и 50 мА. Образец сканировали от 4 до 40 2θ° с размером шага 0,008 2θ° и скоростью сканирования 0,5 с/шаг, используя щель расходимости 1,0 мм, неподвижную антирассеивающую щель 6,6 мм и щель детектора 11,3 мм. Сухой порошок упаковывали в кварцевый держатель образца и с помощью предметного стекла получали гладкую поверхность. Профили дифракции кристаллической формы записывали при температуре и относительной влажности окружающей среды. Положения пиков кристаллов определяли в MDI-Jade после полного сдвига дифрактограмм на основе внутреннего стандарта NIST 675 с пиками при 8,853 и 26,774 2θ°. В области кристаллографии хорошо известно, что для любой данной кристаллической формы относительные интенсивности дифракционных пиков могут варьироваться вследствие предпочтительной ориентации, обусловленной такими факторами, как морфология и структура кристалла. Если присутствует влияние предпочтительной ориентации, интенсивности пиков изменяются, но характерные положения пиков полиморфа остаются неизменными. См., например, The United States Pharmacopeia #23, National Formulary #18, pages 1843-1844, 1995. Дополнительно в области кристаллографии также хорошо известно, что для любой данной формы кристалла угловые положения пиков могут незначительно изменяться. Например, положения пиков могут смещаться из-за изменения температуры, при которой анализируется образец, смещения образца или наличия или отсутствия внутреннего стандарта. В данном случае предполагается, что вариабельность положения пика, составляющая ±0,2 2θ°, учитывает указанные возможные отклонения, не препятствуя точному определению указанной кристаллической формы. Подтверждение кристаллической формы может быть основано на любой уникальной комбинации характеристических пиков.
Получение 1.
Соль (2S)-1-бензгидрил-2-метилазетидин-[(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1ил]метансульфоновой кислоты.
Трехгорлую КДК на 2000 мл соединяли с капельной воронкой, впускным отверстием для азота и переходником для термометра. Сосуд продували азотом и добавляли (3R)-бутан-1,3-диол (25 г, 277 ммоль), ДИПЭА (127 мл, 731 ммоль) и АЦН (556 мл). Смесь охлаждали до -30°C. По каплям в течение 3 ч добавляли ангидрид трифторметансульфоновой кислоты (101 мл, 601 ммоль) так, чтобы внутренняя температура поддерживалась от -35 до -30°C. После завершения добавления перемешивали в течение 10 мин при температуре от -35 до -30°C. По каплям в течение 5 мин добавляли ангидрид трифторметансульфоновой кислоты (1,9 мл, 11 ммоль) так, чтобы внутренняя температура поддерживалась от -35 до -30°C. После завершения добавления перемешивали в течение 10 мин при температуре от -35 до -30°C. По каплям в течение 15 мин добавляли ДИПЭА (127 мл, 731 ммоль) так, чтобы внутренняя температура поддерживалась от -35 до -30°C. После завершения добавления перемешивали в течение 10 мин при температуре от -35 до -30°C. В отдельной колбе в атмосфере азота растворяли аминодифенилметан (48,0 мл, 270 ммоль) в АЦН (49 мл) и полученный раствор переносили в капельную воронку. Раствор амина по каплям добавляли к холодному трифлату в течение 40 мин, чтобы внутренняя температура поддерживалась в пределах от -20 до -35°C. После завершения добавления перемешивали в течение 30 мин при температуре от -35 до -30°C. Реакционную смесь переносили на водяную баню и давали ей медленно нагреться в течение 30 мин. Баню убирали и реакционной смеси давали нагреться до КТ в течение 30 мин. Сосуд переносили в колбонагреватель и реакционную смесь нагревали до 45°C в течение 30 мин, затем охлаждали до КТ. Полученную смесь выливали в 1200 мл воды и экстрагировали толуолом (400 млх3). Экстракты объединяли и промывали водой и насыщенным водным раствором NaCl. Органические слои сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток сушили в вакууме в течение ночи, затем растворяли в ДХМ (400 мл). Готовили слой из геля из диоксида кремния на воронке со спеченным слоем и уравновешивали его смесью гептана/EtOAc 1:1. Раствор продукта загружали на слой из геля из диоксида кремния и промывали 1600 мл смеси гептана/EtOAc 1:1. Фильтрат концентрировали для получения маслянистого вещества красного цвета. Маслянистое вещество растворяли в MeOH (250 мл) и колбу помещали на водяную баню (~10°C). Частями добавляли L(-)-камфорсульфоновую кислоту (61,6 г, 265 ммоль), поддерживая внутреннюю температуру ниже 20°C. Полученную смесь перемешивали в течение 15 мин и затем концентрировали в вакууме до получения пенистого вещества коричневого цвета.
- 13 043635
Пенистое вещество сушили на вакуумном насосе в течение 2 ч. Пенистое вещество растворяли в ДХМ (130 мл), затем к перемешиваемому раствору через капельную воронку медленно добавляли EtOAc (1100 мл). Полученную смесь переносили в мерный химический стакан на 4000 мл и перемешивали на воздухе в течение ночи. Стакан охлаждали на ледяной бане в течение 10 мин. Осадок собирали в воронку со спеченным слоем вакуумной фильтрацией, промывая минимальным количеством ледяного EtOAc. Твердое вещество сушили на спеченном слое в течение 2 ч. Полученное твердое вещество белого цвета растворяли в минимальном количестве ДХМ, переносили в мерный химический стакан на 2000 мл и затем медленно разбавляли с помощью EtOAc, пока прозрачный раствор не становился мутным. Суспензию перемешивали в течение 4 ч на открытом воздухе. Твердые вещества собирали фильтрованием под вакуумом с применением воронки со спеченным слоем и сушили на спеченном слое в течение ночи для получения указанного в заголовке соединения (111,8 г, 238,06 ммоль, выход 86%) в виде твердого вещества белого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЛ): δ 10,54-10,47 (m, 1H), 7,61 (d, J=7,3 Гц, 5H), 7,47-7,37 (m, 7H), 5,85 (d, J=10,3 Гц, 1H), 4,68-4,61 (m, 1H), 3,91-3,83 (m, 2H), 3,37 (s, 8H), 2,99 (d, J=14,6 Гц, 1H), 2,77-2,68 (m, 1H), 2,51-2,44 (m, 4H), 2,30-2,16 (m, 2H), 1,91-1,81 (m, 2H), 1,42-1,28 (m, 3H), 1,08 (s, 3H), 1,01 (d, J=6,6 Гц, 3H), 0,77 (s, 4H); ее>98% (ВЭЖХ: Chiralcel® OJ (10 смх4,6 мм, 5 мкм), 5 мл/мин, 40°C изократический 10% EtOH (0,2% iPrNH2)/CO2).
Получение 2.
Соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфонат(2S)-2-метилазетидин-1-ия.
Η
В сосуд Парра объемом 2250 мл добавляли 20 мас.% Pd(OH)2 на угле (6,62 г). Колбу продували азотом, и добавляли MeOH (250 мл). К полученной суспензии медленно добавляли соль (2S)-1-бензгидрил2-метилазетидин-[(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоновой кислоты (111 г, 236 ммоль), растворенную в MeOH (250 мл). Сосуд закупоривали. Продували азотом, затем водородом, и повышали давление до 60 фунтов/кв. дюйм. Реакционный сосуд энергично встряхивали в смесительном аппарате Парра в течение 15 ч при КТ. Сосуд продували азотом, и затем фильтровали реакционную смесь сквозь слой Celite®, промывая MeOH. Фильтрат концентрировали для получения твердого вещества белого цвета, и сушили под вакуумом. Твердое вещество суспендировали в 780 мл смеси МТБЭ/EtOAc 1:1 и смесь нагревали до 65°C в течение 20 ч, затем охлаждали до КТ и перемешивали в течение ночи. Твердые вещества собирали фильтрацией. Твердые вещества суспендировали в 380 мл МТБЭ и перемешивали при КТ в течение 24 ч. Твердое вещество белого цвета собирали фильтрацией для получения указанного в заголовке соединения (41,5 г, 137 ммоль, выход 58%).
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8,68-8,55 (m, 1H), 4,51-4,42 (m, 1H), 3,91-3,75 (m, 1H), 3,36 (s, 3H), 2,91 (d, J=14,6 Гц, 1H), 2,69-2,61 (m, 1H), 2,52-2,46 (m, 2H), 2,28-2,22 (m, 1H), 2,17-2,10 (m, 1H), 1,96 (t, J=4,5 Гц, 1H), 1,89-1,79 (m, 1H), 1,43 (d, J=6,7 Гц, 2H), 1,36-1,26 (m, 1H), 1,05 (s, 2H), 0,75 (s, 2H).
Получение 3.
(R)-2-азетидинметанола гидрохлорид.
OH
Qj CIH H
В двухгорлую КДК, оборудованную впускным отверстием для азота, добавляли (R)-1-(третбутоксикарбонил)азетидин-2-карбоновую кислоту (30 г, 146 ммоль), ТГФ (300 мл) и 4-метилморфолин (17,7 мл, 161 ммоль). Смесь охлаждали до -10°C и по каплям добавляли изобутилхлорформиат (21 мл, 161 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 мин, затем нагревали до КТ. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией. Фильтрат охлаждали до 0°C и по каплям добавляли раствор боргидрида натрия (11,1 г, 292 ммоль) в воде (90 мл) (осторожно: выделение газа). После добавления смесь нагревали до КТ и перемешивали в течение 30 мин. Смесь разбавляли МТБЭ (300 мл) и водой (100 мл). Смесь промывали насыщенным водным NaHCO3 (200 мл), а затем насыщенным водным NaCl (200 мл). Органическую фазу сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали досуха для получения маслянистого вещества (27 г). Осторожно добавляли HCl (4,0 М) в 1,4-диоксане (110 мл) (осторожно: выделение газа), и полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при КТ. Растворитель выпаривали в вакууме для получения указанного в заголовке соединения в виде маслянистого вещества (16 г, 89%). Этот материал сразу использовали в способах получения 9, 11, 16 и 36.
- 14 043635
Получение 4.
(2S,3R)-2-метилазетидин-3-ол-[(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоновая кислота.
Этап 1.
Трехгорлую КДК на 500 мл оснащали капельной воронкой и датчиком температуры. В колбу добавляли бут-2-ен-1-ол (смесь цис/транс) (23,7 мл, 267 ммоль) и хлороформ (200 мл). Раствор охлаждали на ледяной бане, пока внутренняя температура не достигала 1,2°C. По каплям через капельную воронку добавляли бром (13,7 мл, 267 ммоль) в течение 2 ч со скоростью ~1 капля/6 с. После завершения добавления реакционную смесь нагревали до КТ и перемешивали в течение 30 мин. Перемешивание выключали, и реакционной смеси давали отстояться в течение 3 дней. Гасили нас. раствором Na2S2O3 и интенсивно перемешивали в течение 10 мин. Смеси давали отстояться в течение 3 дней. Органический слой удаляли, и водную фракцию экстрагировали ДХМ (х3). Органические слои объединяли и сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме для получения 2,3-дибромбутан-1-ола (62,3 г, 269 ммоль).
Этап 2.
Процедура А.
3-горловую КДК объемом 1 л оснащали капельной воронкой и датчиком температуры. В колбу добавляли 2,3-дибромбутан-1-ол (62,3 г, 269 ммоль) и ТГФ (180 мл). Колбу помещали на водяную баню при КТ. По каплям добавляли раствор KOH (15,1 г, 269 ммоль) в воде (135 мл) через капельную воронку в течение 10 мин. Перемешивали при КТ в течение 2 ч. Органическую фазу отделяли. Водную фракцию экстрагировали EtOAc 3х150 мл. Органические слои объединяли, промывали один раз ~200 мл рассола, сушили над Na2SO4 и фильтровали. Органические вещества тщательно концентрировали (100 мбар, 30°C до минимального объема, затем 10 мбар, 30°C в течение 10 мин) для получения 37 г смеси 2-(1бромэтил)оксирана (60 мас.%), 2,3-дибромбутан-1-ола (36 мас.%) и EtOAc (4 мас.%), что было определено с помощью 1H ЯМР. К смеси добавляли EtOH (100 мл), аминодифенилметан (36 мл, 208,6 ммоль) и NaHCO3 (26 г, 309 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 65°C в течение ночи. Охлаждали до КТ.
Процедура Б.
В первую колбу добавляли 2,3-дибромбутан-1-ол (72,6 г, 313 ммоль) и ТГФ (200 мл). Колбу помещали на водяную баню при КТ. Добавляли раствор KOH (17,6 г, 314 ммоль) в воде (150 мл). Перемешали при КТ в течение ночи. Органическую фазу отделяли. Водную фракцию экстрагировали EtOAc (3х150 мл). Органические слои объединяли, один раз промывали ~200 мл насыщенного водного раствора NaCl, сушили над Na2SO4 и фильтровали. Органический слой концентрировали в вакууме (100 мбар, 30°C до минимального объема, затем 10 мбар, 30°C в течение 10 мин) для получения 41,1 г смеси 2-(1бромэтил)оксирана (75 мас.%), 2,3-дибромбутан-1-ола (22 мас.%) и EtOAc (3 мас.%), что было определено с помощью 1H ЯМР.
Во вторую колбу добавляли 2,3-дибромбутан-1-ол (10 г, 43 ммоль) и ТГФ (30 мл). Колбу помещали на водяную баню при КТ. Добавляли раствор KOH (2,42 г, 43,1 ммоль) в воде (20 мл). Перемешали при КТ в течение ночи. Органическую фазу отделяли. Водную фракцию экстрагировали EtOAc 3х50 мл. Органические слои объединяли, один раз промывали ~200 мл насыщенного водного раствора NaCl, сушили над Na2SO4 и фильтровали. Органический слой концентрировали в вакууме (100 мбар, 30°C до минимального объема, затем 10 мбар, 30°C в течение 10 мин) для получения 5,4 г смеси 2-(1бромэтил)оксирана (66 мас.%), 2,3-дибромбутан-1-ола (32 мас.%) и EtOAc (2 мас.%), что было определено с помощью 1H ЯМР.
В третью колбу добавляли 2,3-дибромбутан-1-ол (10 г, 43 ммоль) и ТГФ (30 мл). Колбу помещали на водяную баню при КТ. Добавляли раствор KOH (2,42 г, 43,1 ммоль) в воде (20 мл). Смесь нагревали до 50°C в течение 2 ч. Охлаждали до КТ. Органическую фазу отделяли. Водную фракцию экстрагировали EtOAc 3х50 мл. Органические слои объединяли, промывали один раз ~200 мл рассола, сушили над Na2SO4 и фильтровали. Органический слой концентрировали в вакууме (100 мбар, 30°C до минимального объема, затем 10 мбар, 30°C в течение 10 мин) для получения 5,4 г смеси 2-(1-бромэтил)оксирана (70 мас.%), 2,3-дибромбутан-1-ола (28 мас.%) и EtOAc (2 мас.%), что было определено с помощью 1H ЯМР.
Смеси трех реакций объединяли вместе в КДК для получения 51,9 г 2-(1-бромэтил)оксирана (73 мас.%). Добавляли EtOH (100 мл), аминодифенилметан (44 мл, 255,0 ммоль) и NaHCO3 (32 г, 380,926 ммоль). Полученную смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч, затем нагревали до 65°C и продолжали перемешивание в течение ночи. Охлаждали до КТ. Неочищенные реакционные смеси из процедур А и Б объединяли вместе для очистки. Твердые вещества удаляли фильтрацией, промывая EtOH. Фильтрат концентрировали досуха. Полученное маслянистое вещество растворяли в ДХМ. Полученный раствор дважды промывали раствором NH4Cl, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали до
- 15 043635 объема ~150 мл. Смеси давали отстояться в течение ночи. Твердое вещество удаляли фильтрацией. Фильтрат очищали с помощью нормально-фазовой хроматографии на силикагеле (70% МТБЭ:гексаны) для получения неочищенного 1-бензгидрил-2-метилазетидин-3-ола (66,8 г).
ЭР/МС (m/z): 254 (M+H).
Этап 3.
1-бензгидрил-2-метилазетидин-3-ол (66,8 г) растворяли в MeOH (608 мл). Полученный раствор очищали с помощью колонки Lux i-Cellulose 5 5x25 см, используя систему растворителей 85/15 CO2/EtOH с 0,5% диметилэтиламина и скоростью потока 300 мл/мин для получения (2S,3R)-1-бензгидрил-2метилазетидин-3-ола (19,2 г).
Этап 4.
В КДК загружали (2S,3R)-1-бензгидрил-2-метилазетидин-3-ол (19,2 г, 75,8 ммоль), L(-)-камфорсульфоновую кислоту (19 г, 80,2 ммоль), EtOH (100 мл) и Et2O (50 мл). Смесь нагревали до тех пор, пока почти все твердые частицы не растворились, затем кратковременно обрабатывали ультразвуком. Смесь нагревали до кипения, затем охлаждали до КТ и хранили в морозильной камере в течение ночи. Твердые вещества собирали фильтрацией, промывали большим объемом Et2O и сушили при пониженном давлении для получения (2S,3R)-1-бензгидрил-2-метилазетидин-3-ола, [(1R,4S)-7,7-диметил-2оксонорборнан-1-ил]метансульфоновой кислоты (31,9 г, 65,7 ммоль).
Этап 5.
В КДК загружали 20%-ный гидроксид палладия на угле (50 мас.% воды) (2 г). Катализатор смачивали небольшим объемом EtOH. К суспензии добавляли частичный раствор (2S,3R)-1-бензгидрил-2метилазетидин-3-ола; [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоновой кислоты (20 г, 41,2 ммоль) в EtOH (400 мл). Суспензию барботировали азотом в течение 5 мин, а затем кратковременно барботировали водородом. Реакционную смесь перемешивали в баллоне с водородом до тех пор, пока весь исходный материал не исчез согласно анализу ЖХ-МС. Реакционную смесь отфильтровывали сквозь слой из Celite®.
Во второй колбе, используя ту же процедуру, гидрировали (2S,3R)-1-бензгидрил-2-метилазетидин3-ол; [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоновую кислоту (10 г, 20,6 ммоль) с 20%-ным гидроксидом палладия на угле (50 мас.% воды) (1 г) в EtOH (200 мл).
В третьей колбе, используя ту же процедуру, гидрировали (2S,3R)-1-бензгидрил-2-метилазетидин3-ол; [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоновую кислоту (2 г, 4,12 ммоль) с 20%-ным гидроксидом палладия на угле (50 мас.% воды) (0,2 г) в EtOH (40 мл).
Три фильтрата объединяли вместе и концентрировали в вакууме. Материал суспендировали в нгептане и обрабатывали ультразвуком в течение 10 мин, а затем твердые вещества собирали фильтрацией. Последовательность ультразвуковой обработки и фильтрации повторяли еще четыре раза. Твердое вещество сушили в вакууме в течение ночи для получения указанного в заголовке соединения (20,11 г, выход 53% за 5 этапов).
Ή ЯМР (399,85 МГц, MeOD): δ 4,35-4,25 (m, 2H), 4,07 (dd, J=6,9, 10,6 Гц, 1H), 3,78 (dd, J=7,0, 10,6 Гц, 1H), 3,30 (m, 1H), 2,79 (d, J=14,9 Гц, 1H), 2,70-2,63 (m, 1H), 2,40-2,33 (m, 1H), 2,08-2,03 (m, 2H), 1,92 (d, J=18,4 Гц, 1H), 1,69-1,62 (m, 1H), 1,54 (d, J=6,6 Гц, 3H), 1,47-1,41 (m, 1H), 1,14 (s, 3H), 0,88 (s, 3H).
Получение 5.
Этил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразол-1-ил)ацетат.
В КДК на 500 мл загружали 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-Ш-пиразол (15 г, 77,32 ммоль), АЦН (150 мл), калия карбонат (32,06 г, 232,0 ммоль) и этилбромацетат (9,09 мл, 81,2 ммоль). Суспензию перемешивали при КТ в течение ночи. Реакционную смесь разделили между EtOAc (300 мл) и водой (250 мл). Слои разделили, и водный слой экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли и промывали насыщенным водным хлоридом натрия (500 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме для получения маслянистого вещества светложелтого цвета. Очищали хроматографией на силикагеле с применением градиента от 0 до 5% MeOH в ДХМ для получения указанного в заголовке соединения (16.8 г, выход 76%).
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7,94 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,14 (q, J=7,1 Гц, 2H), 1,26 (m, 12H), 1,02 (t, J=7,2 Гц, 3H).
- 16 043635
Получение 6.
2-[4-[2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]уксусная кислота.
В КДК на 2000 мл загружали этил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразол-1ил)ацетат (39,15 г, 132,8 ммоль), 2,4-дихлор-6-(трифторметил)пиримидин (27,9 г, 126 ммоль), 1,4-диоксан (800 мл), водный Na2CO3 (2 М, 200 мл, 400 ммоль) и бис(трифенилфосфин)палладия (II) дихлорид (2,8 г, 4,0 ммоль). Смесь нагревали до 85°C. Через 2 ч смесь охлаждали до КТ. Реакционную смесь разделяли на две части и обрабатывали в соответствии со следующими методами.
Метод А.
К первой порции реакционной смеси добавляли соль [(1R,48)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1ил]метансульфоната (28)-2-метилазетидин-1-ия (18,69 г, 59,75 ммоль) и нагревали до 70°C в течение 2,5 ч. Охлаждали до КТ. Добавляли водный NaOH (2 М, 166 мл, 332 ммоль) и перемешивали при КТ в течение ночи. Добавляли EtOAc (500 мл), и смесь перемешивали в течение 30 мин. Смесь подкисляли до pH 7, используя водную HCl (5 М), и экстрагировали EtOAc (4x250 мл). Органические слои объединяли, промывали насыщенным водным NaCl, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в ДХМ (125 мл), и по каплям добавляли гептан (125 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин. Твердое вещество собирали фильтрацией и промывали смесью ДХМ/гептана 1:1 (50 мл). Твердое вещество сушили на воздухе.
Метод Б.
Вторую порцию реакционной смеси концентрировали в вакууме для удаления 1,4-диоксана. Смесь разделили между EtOAc и водой. Водный слой отделили, и органический слой концентрировали досуха. В колбу, содержащую остаток, добавляли 1,4-диоксан (420 мл), водный Na2CO3 (2 М, 75 мл, 150 ммоль) и соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (28)-2-метилазетидин-1-ия (18,69 г, 59,75 ммоль). Смесь нагревали до 70°C и перемешивали в течение 1,5 ч. Смесь охлаждали до КТ. Добавляли водный NaOH (2 М, 125 мл, 250 ммоль) и перемешивали в течение ночи. Добавляли EtOAc (500 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Водную фазу отделяли и оставляли отстаиваться в течение ночи. Водную смесь подкисляли до pH 7, используя водную HCl (5 М), и экстрагировали EtOAc (2x250 мл). Органические слои объединяли, промывали насыщенным водным NaCl, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме для получения твердого вещества.
Метод очистки.
Продукты из методов А и Б объединяли и растворяли в ТГФ (485 мл). Добавляли тиоловую смолу SiliaMetS® (32 г). Смесь перемешивали в течение 1 ч, а затем фильтровали. Фильтрат концентрировали под вакуумом для получения указанного в заголовке соединения в виде порошка белого цвета (31,7 г, 72%).
ЭР/МС (m/z): 342 (M+H); 340 (M-H).
Получение 7.
Трет-бутил-4-[2-[4-[2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1ил] ацетил] пиперазин-1 -карбоксилат.
В КДК на 1 л загружали 2-[4-[2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1-ил]уксусную кислоту (31,7 г, 91,0 ммоль), трет-бутилпиперазин-1-карбоксилат (20,5 г, 109 ммоль) и ДХМ (320 мл). К полученному раствору добавляли Et3N (25,6 мл, 182 ммоль), а затем по
- 17 043635 каплям раствор ангидрида 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфоринан-2,4,6-триоксида (50 мас.% в EtOAc, 68 мл, 114,2 ммоль). Перемешивали при КТ в течение 1 ч. Реакционную смесь промывали водой (500 мл), а затем насыщенным водным NaCl. Органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в высоком вакууме для получения указанного в заголовке соединения (52,5 г, чистота оценивается в 88 мас.%, исходя из теоретического количественного выхода продукта).
ЭР/МС (m/z): 510 (M+H); 508 (M-H).
Получение 8.
Трет-бутил-4-[4-[2-хлор-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1 -ил]пиперидин-1 -карбоксилат.
В пробирку для микроволновой печи добавляли 2,4-дихлор-6-(трифторметил)пиримидин (0,7 г, 3,05 ммоль) и 1,4-диоксан (15 мл). К раствору добавляли трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1П-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (1,55 г, 4,0 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (0,195 г, 0,17 ммоль) и водный Na2CO3 (2 М, 5,5 мл, 11 ммоль). Пробирку герметизировали и нагревали в микроволновом реакторе при 85°C в течение 1 ч. Во второй пробирке проводили ту же реакцию в том же масштабе. Реакционные смеси объединяли в делительной воронке. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия и дважды экстрагировали EtOAc. Экстракты объединяли и сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 50% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (2,33 г, 88%).
ЭР/МС (m/z): 432, 434 (M+H); 430, 432 (M-H).
Получение 9.
Трет-бутил-4-[4-[2-[(2R)-2-(гидроксиметил)азетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил] пиразол-1 -ил]пиперидин-1 - карбоксилат.
В трех отдельных пробирках для микроволнового реактора смешивали трет- бутил-4-[4-[2-хлор-6(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилат (1 г, 2,3 ммоль) и 1,4-диоксан (16 мл). Добавляли гидрохлорид (R)-2-азетидинметанола (0,52 г, 4,3 ммоль) и ДИПЭА (1,6 мл, 9,3 ммоль). Пробирки герметизировали и нагревали в микроволновом реакторе при 130°C в течение 2,5 ч. Полученные реакционные смеси объединяли, затем смесь разбавляли насыщенным водным NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Экстракты объединяли и сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 10 до 80% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения в виде пенистого вещества белого цвета (3,2 г, 95%).
ЭР/МС (m/z): 483 (M+H).
- 18 043635
Получение 10.
Трет-бутил-3-[4-[2-хлор-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]азетидин-1-карбоксилат.
В пробирку для микроволнового реактора добавляли 2,4-дихлор-6-(трифторметил)пиримидин (0,50 г, 2,30 ммоль), 1,4-диоксан (22 мл) и воду (2 мл). К раствору добавляли трет-бутил-3-(4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-Ш-пиразол-1-ил)азетидин-1-карбоксилат (0,630 г, 1,71 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II) (0,20 г, 0,26 ммоль) и K2CO3 (500 мг, 3,67 ммоль). Пробирку герметизировали и перемешивали при КТ в течение ночи. Неочищенную реакционную смесь загружали в картридж с диоксидом кремния, сушили в вакуумной печи, и остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (градиент от 0 до 45% EtOAc/гексана) для получения указанного в заголовке соединения в виде маслянистого вещества светло-коричневого цвета (0,375 г, 49%).
ЭР/МС (m/z): 348 (M+H-tBu); 402 (M-H).
Получение 11.
Трет-бутил-3-[4-[2-[(2R)-2-(гидроксиметил)азетидин-1-ил]-6-(трифторметил)nиримидин-4ил]пиразол-1 -ил]азетидин-1 -карбоксилат.
В пробирке смешивали трет-бутил-3-[4-[2-хлор-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1ил]азетидин-1-карбоксилат (190 мг, 0,47 ммоль) и ТГФ (18 мл). Добавляли (R)-2-азетидинметанола гидрохлорид (150 мг, 1,23 ммоль) и ДИПЭА (1,0 мл, 5,7 ммоль). Пробирку герметизировали и нагревали в микроволновом реакторе при 100°C в течение 1 ч 40 мин. После охлаждения до КТ неочищенную реакционную смесь загружали в картридж с диоксидом кремния, сушили в вакуумной печи и остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 80% (5% MeOH/EtOAc)/гексaнов для получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества (153 мг, 72%).
ЭР/МС (m/z): 455 (M+H).
Получение 12.
Трет-бутил-3-[4-[2-[(2S,3R)-3-гидрокси-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1 -ил]азетидин-1 -карбоксилат.
Указанное в заголовке соединение по существу получали, как это описано в получении 11, используя (2S,3R)-2-метилазетидин-3-ол [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксо-норборнан-1-ил]метансульфоновую ки
- 19 043635 слоту.
ЭР/МС (m/z): 455 (M+H).
Получение 13.
Трет-бутил-3-[4-[2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1ил]азетидин-1-карбоксилат.
Указанное в заголовке соединение по существу получали, как это описано в получении 11, используя соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфонαта (2S)-2-метилазетидин-1-ия. Реакционную смесь очищали хроматографией на силикагеле, используя 45% EtOAc/гексанов.
ЭР/МС (m/z): 439 (M+H).
Получение 14.
2-[4-[5-циαно-6-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1-ил]уксусная кислота.
В КДК загружали этил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразол-1-ил)ацетат (2,95 г, 10,5 ммоль), 2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил (2 г, 8,3 ммоль), 1,4-диоксан (52,4 мл) и водный Na2CO3 (2 М, 13,3 мл, 26,6 ммоль). Смесь барботировали азотом в течение 10 мин. Добавляли дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия (II) (191 мг, 0,27 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 16.5 ч. Колбу оснащали обратным холодильником и добавляли соль [(1R,4S)-7,7-диметил2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (2S)-2-метилазетидин-1-ия (2,73 г, 9,10 ммоль). Смесь нагревали до 70°C и перемешивали в течение 3 ч, затем охлаждали до КТ. Добавляли водный NaOH (2 М, 21 мл, 42 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 15 мин. Органический растворитель выпаривали в вакууме. Остаток разбавляли водой (50 мл), и воду отцеживали от твердого вещества. Этот процесс повторяли с водой (50 мл) два раза. Твердое вещество собирали с помощью вакуумной фильтрации и сушили на воздухе в течение ночи. Добавляли 2-метилтетрагидрофуран (30,4 мл) и водную лимонную кислоту (6,5 мас.%, 30,4 мл). Перемешивали в течение 5 мин, а затем разделяли слои. Органический слой промывали водной лимонной кислотой (6,5 мас.%, 30,4 мл). Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали для получения указанного в заголовке соединения (3,14 г, чистота оценивается в 97 мас.% исходя из теоретического количественного выхода продукта).
ЭР/МС (m/z): 366 (M+H); 364 (M-H).
Получение 15.
Трет-бутил-4-[4-[6-хлор-5-циано-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1-ил]пиперидин-1карбоксилат.
Метод А.
В пробирку для микроволнового реактора добавляли 2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин-3
- 20 043635 карбонитрил (497 мг, 2,063 ммоль), трет-бутил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилат (867,2 мг, 2,3 ммоль), комплекс 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладия (II) дихлорида и ДХМ (91,2 мг, 0,109 ммоль), водный карбонат калия (3 М раствор, 2,1 мл, 6,3 ммоль) и 1,4-диоксан (10,5 мл). Смесь барботировали азотом в течение 5 мин, герметизировали и нагревали до 80°C. Через 1 ч охлаждали до КТ. Смесь фильтровали через слой Celite® и промывали EtOAc. Остаток концентрировали и очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 15 до 40% EtOAc в гексанах, затем быстро сушили в вакууме при 35°C для получения указанного в заголовке соединения (705 мг, 64%).
ЭР/МС (m/z): 454, 456 (M-H).
Метод Б.
В КДК добавляли 2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил (1,07 г, 4,44 ммоль) и 1,4-диоксан (25 мл). Добавляли трет-бутил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразол-1ил]пиперидин-1-карбоксилат (2,08 г, 5,51 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (200 мг, 0,17 ммоль) и водный Na2CO3 (2 М, 8,5 мл, 17 ммоль). Реакционную смесь дегазировали азотом и нагревали при 85°C в течение 1,5 ч. Из реакционной смеси отцеживали органическую фазу и неочищенную реакционную смесь разделяли на два равных количества для использования в получениях 16 и 17.
ЭР/МС (m/z): 454 (M-H).
Получение 16.
Трет-бутил-4-[4-[5-циано-6-[(2R)-2-(гидроксиметил)азетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2пиридил]пиразол-1 -ил]пиперидин-1 -карбоксилат.
В пробирку для микроволнового реактора добавляли 1/2 неочищенного продукта реакции из метода Б получения 15, (R)-2-азетидинметанола гидрохлорид (0,5 г, 4 ммоль), ДИПЭА (1,6 мл, 9,2 ммоль) и дополнительное количество 1,4-диоксана (16 мл). Суспензию нагревали при 120°C в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали до неочищенного продукта. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 50 до 80% EtOAc/гексанов, и снова очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 2 до 5% ИПС/ДХМ, для получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества рыжевато-коричневого цвета (264 мг, 26%).
ЭР/МС (m/z): 507 (M+H).
Получение 17.
Трет-бутил-4-[4-[5-циано-6-[(2S,3R)-3-гидрокси-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2пиридил]пиразол-1 -ил]пиперидин-1 -карбоксилат.
Указанное в заголовке соединение по существу получали, как это описано в получении 16, используя вторую 1/2 неочищенного продукта реакции из получения 15 и (2S,3R)-2-метилазетидин-3-ол [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоновую кислоту.
ЭР/МС (m/z): 507 (M+H).
- 21 043635
Получение 18.
2-хлор-6-[1-(4-пиперидил)пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрила гидрохлорид.
В пробирку добавляли трет-бутил-4-[4-[6-хлор-5-циано-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1ил]пиперидин-1-карбоксилат (705 мг, 1,5 ммоль), 4 М HCl в 1,4-диоксане (1,5 мл, 6,0 ммоль) и ДХМ (1,5 мл). Смесь перемешивали при КТ. Через 1 ч смесь концентрировали в вакууме, и остаток сушили в вакууме в течение ночи для получения указанного в заголовке соединения (608 мг), которое использовали как есть без дополнительной очистки в получении 19 и 20.
ЭР/МС (m/z): 356, 358 (свободное основание M+H).
Получении 19.
2-хлор-6-[1 -(1 -метил-4-пиперидил)пиразол-4-ил] -4-(трифторметил)пиридин-3 -карбонитрил.
В пробирку добавляли 2-хлор-6-[1-(4-пиперидил)пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрила гидрохлорида (303,3 мг, 0,74 ммоль), 13,3 М формальдегида в воде (0,2 мл, 3 ммоль), триацетоксиборгидрид натрия (378 мг, 1,73 ммоль) и 1,2-дихлорэтан (6,0 мл). Смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Добавляли насыщенный водный бикарбонат натрия и дважды экстрагировали ДХМ. Экстракты объединяли и концентрировали в вакууме для получения указанного в заголовке соединения (285 мг, выход 99%).
ЭР/МС (m/z): 370, 372 (M+H).
Получение 20.
Трет-бутил-4-[4-[5-циано-6-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1ил]пиперидин-1-карбоксилат.
Указанное в заголовке соединение получают из 2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин-3 карбонитрила и трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол-1-ил)пиперидин1-карбоксилата, используя по существу ту же процедуру, что и в примере 10 ниже.
ЭР/МС (m/z): 491 (M+H).
Получение 21.
Трет-бутил-4-[4-[2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1ил] пиперидин-1 -карбоксилат.
- 22 043635
2,4-дихлор-6-(трифторметил)пиримидин (0,258 г, 1,1 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (6 мл) и добавляли трет-бутил-(4-(4-(4,4,5,5-тетраметил)-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-nиразол-1-ил)пиперидин-1карбоксилат (0,591 г, 1,52 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (68 мг, 0,059 ммоль) и 2 М водный карбонат натрия (2,2 мл, 4,4 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в микроволновом реакторе в течение 1 ч. Охлаждали до КТ и добавляли соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1ил]метансульфоната (2S)-2-метилазетидин-1-ия (0,414 г, 1,36 ммоль) и ДИПЭА (0,6 мл, 3,4 ммоль). Смесь нагревали при 110°C в течение 2 ч. Смесь разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия и дважды экстрагировали EtOAc. Экстракты объединяли, высушили над сульфатом натрия, затем фильтровали и упаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 50% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения (215 мг, 41%) в виде твердого вещества белого цвета.
ЭР/МС (m/z): 467 (M+H).
Получение 22.
Трет-бутил-3-[4-[6-хлор-5-циано-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1-ил]азетидин-1-карбоксилат.
В пробирку добавляли 3-циано-2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин (0,360 г, 1,49 ммоль),
1,4-диоксан (7,5 мл), трет-бутил-3-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-Ш-пиразол-1 ил)азетидин-1-карбоксилат (0,727 г, 1,98 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (95 мг, 0,08 ммоль) и 2 М водный карбонат натрия (2,8 мл, 5,6 ммоль, 2 моль/л). Сосуд герметизировали и нагревали в микроволновом реакторе при 85°C в течение 1 ч. Разбавляли насыщенным бикарбонатом натрия и дважды экстрагировали EtOAc. Экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 90% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения (0,609 г, 95%).
ЭР/МС (m/z): 426, 428 (M-H).
Получение 23.
2-хлор-6-(1-тетрагидропиран-4-илпиразол-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил.
Указанное в заголовке соединение получают из 1-тетрагидропиран-4-ил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)пиразола, используя по существу ту же процедуру, что и в получении 22.
ЭР/МС (m/z): 357, 359 (M+H).
Получение 24.
Трет-бутил-3-[4-[5-циано-6-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1ил]азетидин-1 -карбоксилат.
Трет-бутил-3-[4-[6-хлор-5-циано-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1-ил]азетидин-1-карбоксилат (603 мг, 1,410 ммоль) растворяли в ТГФ (18 мл). Добавляли соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан1-ил]метансульфоната (2S)-2-метилазетидин-1-ия (519 мг, 1,711 ммоль) и ДИПЭА (0,75 мл, 4,3 ммоль),
- 23 043635 затем смесь нагревали при 130°C в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали, и остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 50% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения (498 мг, 76%) в виде бесцветного маслянистого вещества.
ЭР/МС (m/z): 463 (M+H), 461 (M-H).
Получение 25.
Трет-бутил-N-[2-[4-[4-[5-циано-6-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-
-ил] -1 -пиперидил] -2-оксоэтил]карбамат.
\ / 111
N 7 F F U'N
I C-n
2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-[1-(4-пиперидил)пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрил (0,129 г, 0,330 ммоль) растворяли в ДХМ (1 мл). Добавляли 2-(третбутоксикарбониламино)уксусную кислоту (69 мг, 0,39 ммоль), HATU (0,175 г, 0,460 ммоль) и ДИПЭА (0,18 мл, 1,0 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 3 ч, затем разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия и дважды экстрагировали ДХМ. Органические слои объединяли, сушили над сульфатом натрия, затем фильтровали и упаривали. Остаток очищали обращенно-фазовой хроматографией на C18, связанной с диоксидом кремния, (растворитель A=10 мМ водный бикарбонат аммония, растворитель В=АЦН; градиент от 10 до 91% В) для получения указанного в заголовке соединения (129 мг, 71%).
ЭР/МС (m/z): 548 (M+H).
Получение 26.
1-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Hпиразол.
4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол (0,500 г, 2,50 ммоль) суспендировали в ДМФ (10 мл), затем добавляли 4-(хлорметил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан (0,73 мл, 5,0 ммоль) и карбонат цезия (1,64 г, 5,03 ммоль). Смесь нагревали при 75°C в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия и экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли и промывали четыре раза насыщенным водным NaCl, затем сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали для получения указанного в заголовке соединения (780 мг), которое использовали далее без дополнительной очистки.
ЭР/МС (m/z): 309 (M+H).
Получение 27.
2-хлор-6-[1-[(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил]пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрил.
3-Циано-2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин (0,352 г, 1,46 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (7,3 мл). Добавляли 1-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметил)-4-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан2-ил)-1H-nиразол (0,602 г, 1,89 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (0,715 г, 0,619 ммоль) и водный 2 М карбонат натрия (2,8 мл, 5,6 ммоль). Смесь продували азотом в течение 15 мин, затем нагревали до 85°C в течение 1,5 ч. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия и дважды экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли и сушили над сульфатом натрия, затем фильтровали и упаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 40% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения (207 мг, 36%) в виде бесцветного маслянистого вещества.
- 24 043635
ЭР/МС (m/z): 387, 389 (M+H).
Получение 28.
Трет-бутил-4-[6-хлор-5-циано-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1-карбоксилат.
В пробирке объединяли 3-циано-2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин (195 мг, 0,785 ммоль), третбутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразол-1-карбоксилат (250 мг, 0,85 ммоль), 2 М водный карбонат натрия (2,5 мл, 5,0 ммоль) и 1,4-диоксан (4 мл). Реакционную смесь дегазировали при КТ, барботируя азот через реакционную смесь при перемешивании в течение 5 мин. Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II) (185 мг, 0,240 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 2 ч. Добавляли воду и экстрагировали EtOAc. Экстракты объединяли и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 25 до 50% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения (40 мг, 14%) в виде твердого вещества оранжевого цвета.
ЭР/МС (m/z): 271, 273 (M-H-BOC).
Получение 29.
Трет-бутил-N -[2-[[2-[4-[2-[(2 S)-2-метилазетидин-1 -ил] -6-(трифторметил)пиримидин-4-ил] пиразол1-ил]ацетил]амино]этил]карбамат.
В пробирку добавляли
2-[4-[2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4 ил]пиразол-1-ил]уксусную кислоту (200 мг, 0,586 ммоль), ДМФ (2 мл), ДИПЭА (0,31 мл, 1,76 ммоль), HATU (0,267 г, 0,703 ммоль) и N-BOC-этилендиамин (0,102 мл, 0,644 ммоль). Перемешивали в течение 8 ч при КТ, затем очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворители - 10 мМ водный бикарбонат аммония, pH 10/5% MeOH (растворитель A) и АЦН (растворитель B); предколонка - Waters BEH HILIC 100x30 мм, 5 мкм, 110 А с защитной колонкой BEH HILIC 15x30 мм; колонка: Phenomenex® Kinetex® EVO C18, 100x30 мм, 5 мкм, 100 А с защитной колонкой EVO 10 мм с использованием встроенного нагревателя при 50°C; градиент от 33 до 67% В) для получения указанного в заголовке соединения (179 мг, 63%).
ЭР/МС (m/z): 484 (M+H).
Соединения, приведенные в табл. 1, получают, используя по существу ту же процедуру, что и в получении 29, и соответствующий коммерчески доступный амин.
- 25 043635
Таблица 1
| Номер Получения | Название | Структура | ЭР/МС (m/z) (M+H) |
| 30 | трет-бутил-(28)-2метил-4- [2- [4- [2- [(25)2-метилазети дин-1 ил]-6- (трифторметил)пирим идин-4-ил]пиразол-1 ил]ацетил]пиперазин1 -карбоксилат | *0* Y> F о N—\ y—N ^-0 0 | 524 |
| 31 | трет-6утил-(38)-3метил-4- [2- [4- [2- [(25)2-метилазети дин-1 ил]-6- (трифторметил)пирим идин-4-ил]пиразол-1 ил]ацетил]пиперазин1 -карбоксилат | О , У °γΗΟ ° | 524 |
| 32 | mpem-6yTnn-(2R,5S)2,5-диметил-4-[2-[4-[2[(25)-2- метилазетидин-1 -ил]- 6- (трифторметил)пирим идин-4-ил]пиразол-1 ил]ацетил]пиперазин- 1 -карбоксилат | |Ύν F.YYL/\ f7 Y\n F N—/ V-N ^~-0 0 | 538 |
| 33 | трети-бутил-2,2диметил-4-[2-[4-[2- [(25)-2- метилазети дин -1 -ил ] 6- (трифторметил)пирим идин-4-ил]пиразол-1 ил]ацетил]пиперазин1 -карбоксилат | N N<^N fY Y\n F n~5 -A-n ' У-0 0 | 538 |
- 26 043635
Получение 34.
Трет-бутил-(3R)-3-[4-[2-[(2S,3R)-3-гидрокси-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил] пиразол-1 -ил] пирролидин-1 -карбоксилат.
ОН
В реакционном сосуде объединяли 2,4-дихлор-6-(трифторметил)пиримидин (600 мг, 2,71 ммоль) с (R)-трет-бутил-3 -(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 H-пиразол-1 -ил)пирролидин-1 карбоксилатом (1 г, 2,67 ммоль), 2 М водным карбонатом натрия (3 мл, 6 ммоль) и бис(трифенилфосфин)дихлоридом палладия (II) (50 мг, 0,068 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл). Смесь дегазировали азотом и нагревали при 80°C в течение 2 ч. Разбавляли EtOAc (75 мл), промывали водой и насыщенным водным NaCl. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток объединяли в пробирке с (2S,3R)-2-метилазетидин-3-олом [(1R,4S)-7,7-диметил-2оксонорборнан-1-ил]метансульфоновой кислоты (420 мг, 1,32 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) и ДИПЭА (0,7 мл, 4 ммоль). Сосуд герметизировали и нагревали при 120°C в микроволновом реакторе в течение 1 ч. Реакционную смесь наносили непосредственно на силикагель и очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 80% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения (570 мг, 92%) в виде беловатого пенистого вещества.
ЭР/МС (m/z): 469 [M+H].
Получение 35.
Трет-бутил-(3S)-3-[4-[2-[(2S,3R)-3-гидрокси-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1-ил]пирролидин-1-карбоксилат.
ОН <V>
Q^O 0^
Указанное в заголовке соединение по существу получали, как это описано в получении 34, используя (S)-трет-бутил-3-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-πиразол-1-ил)πирролидин-1карбоксилат.
ЭР/МС (m/z): 469 [M+H].
Получение 36.
Трет-бутил-3-[(1R)-4-[2-[(2R)-2-(гидроксиметил)азетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1-ил]пирролидин-1-карбоксилат.
- 27 043635
Указанное в заголовке соединение по существу получали, как это описано в получении 34, используя (R)-2-азетидинметанола гидрохлорид.
ЭР/МС (m/z): 469 [M+H].
Получение 37.
Трет-бутил-4-[4-[5-циано-6-[(2S)-2-метилазетидин-1-uл]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1ил] -3 -гидроксипиперидин-1 -карбоксилат.
В пробирку добавляли 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол (560 мг, 2,9 ммоль), трет-бутил-7-окса-4-азабицикло[4.1.0]гептан-4-карбоксилат (580 мг, 2,9 ммоль), ДМФ (10 мл) и карбонат цезия (1,7 г, 5,2 ммоль). Смесь нагревали при 80°C в течение 6 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали для получения неочищенного трет-бутил-3-гидрокси-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилата (650 мг). Этот материал помещали в КДК и добавляли 2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил (300 мг, 1,2 ммоль), 1,4-диоксан (5 мл) и 2 М водный карбонат натрия (1,3 мл, 2,6 ммоль). Реакционную смесь дегазировали при КТ, барботируя азот через реакционную смесь при перемешивании в течение 5 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (80 мг, 0,06 ммоль) и дегазировали в течение дополнительных 3 мин. Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 4 ч, затем охлаждали до КТ. Добавляли ДИПЭА (0,6 мл, 3 ммоль) и соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (2S)-2-метилазетидин1-ия (410 мг, 1,4 ммоль). Перемешивали в течение 30 мин при КТ, а затем нагревали при 80°C в течение 1 ч. Смесь разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Экстракты объединяли и сушили над сульфат натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью обращенно-фазовой хроматографии (C18, градиент от 10 до 100% АЦН/10 мМ водного карбонат аммония+5% метанол) для получения указанного в заголовке соединения (95 мг, 15%).
ЭР/МС (m/z): 507 (M+H).
Пример 1.
2-[4-[2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]-1-пиперазин1-илэтанон.
В КДК на 2 л загружали трет-бутил-4-[2-[4-[2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1-ил]ацетил]пиперазин-1-карбоксилат (47,0 г, 89,5 ммоль) и добавляли ДХМ (470 мл). К смеси по каплям добавляли ТФК (60 мл, 778 ммоль) и перемешивали при КТ в течение 19 ч. Добавляли дополнительное количество ТФК (8 мл, 110 ммоль) и продолжали перемешивание в течение 18 ч. Медленно добавляли реакционную смесь в колбу, содержащую охлажденный водный NH4OH (35 мас.%, 150 мл, 1300 ммоль). Слои разделяли. Органический слой промывали насыщенным водным NaCl, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc (400 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в ИПС (400 мл) и концентрировали в вакууме для получения указанного в заголовке соединения в виде беловатого пенистого вещества (32 г, 84%).
ЭР/МС (m/z): 410 (M+H).
- 28 043635
Пример 1a.
2-[4-[2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)nuримидин-4-ил]пиразол-1-ил]-1-пиперазин1-илэтанона сесквисукцинат.
В реактор добавляли 2-[4-[2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол1-ил]-1-пиперазин-1-ил-этанон (959 г, 2,34 моль), а затем ИПС (11,5 л). Добавляли янтарную кислоту (550 г, 4,69 моль) и смесь нагревали до 70-80°C, чтобы получить раствор. Смесь перемешивали при температуре от 70 до 80°C в течение 2 ч, затем охлаждали до 25°C в течение 6 ч. Смесь отфильтровывали и промывали ИПС (1 л). Полученные твердые вещества сушили при 40-50°C в течение 6 ч для получения указанного в заголовке соединения (1070 г, 78%) в виде твердого вещества белого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8,41 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,53-4,43 (m, 1H), 4,06-3,93 (m, 2H), 3,58-3,47 (m, 4H), 2,95-2,82 (m, 4H), 2,47-2,40 (m, 1H), 2,37 (s, 6H - сукцинатные метиленовые группы, 1,5 экв.), 2,02-1,92 (m, 1H), 1,50 (d, J=4 Гц, 3H).
ЭР-МС высокого разрешения (m/z): теоретически 410,1911 (свободное основание M+H), наблюдаемое 410,1916.
Пики РИД из примера 1a приведены в табл. 2.
Таблица 2
Пики порошковой рентгеновской дифракции примера 1a
| Пик | Угол (° 2-тета) | Относительная интенсивность (% от самого интенсивного пика) |
| 1 | 12,1 | 27,5 % |
| 2 | 14,1 | 22,7 % |
| 3 | 16,3 | 33,3 % |
| 4 | 17,7 | 30,5 % |
| 5 | 18,9 | 100,0% |
| 6 | 20,0 | 22,1 % |
| 7 | 20,5 | 53,8 % |
| 8 | 21,3 | 44,9 % |
| 9 | 22,0 | 36,6 % |
| 10 | 24,3 | 23,2 % |
Пример 2.
[(2R)-1 -[4-[ 1 -(4-пиперидил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-2-ил]азетидин-2-ил]метанол.
Трет-бутил-4-[4-[2-[(2R)-2-(гидроксиметил)азетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол1-ил]пиперидин-1-карбоксилат (2,55 г, 5,28 ммоль) растворяли в ДХМ (50 мл) и добавляли ТФК (10 мл, 132 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин, затем наносили непосредственно на смолу для СКО. Смолу промывали MeOH, а затем аммиаком в растворе MeOH (7 М). Фракции, содержащие требуемый продукт, объединяли и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 9% (7 М аммиака/MeOH)/ДХМ, для получения указанного в заголовке соединения в виде порошка белого цвета (2,02 г, 94%).
ЭР/МС (m/z): 383 (M+H); 381 (M-H).
- 29 043635
Пример 3.
[(2R)-1-[4-[1-(азетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-2-ил]азетидин-2ил]метанол.
Трет-бутил-3-[4-[2-[(2R)-2-(гидроксиметил)азетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол1-ил]азетидин-1-карбоксилат (153 мг, 0,336 ммоль) растворяли в ДХМ (15 мл) и добавляют ТФК (5 мл, 66 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем концентрировали при пониженном давлении при КТ. Остаток выпаривали совместно с ДХМ и сушили в вакууме. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворитель A=10 мМ водный бикарбонат аммония, pH 10/ 5% MeOH, растворитель В=АЦН; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18, 100x30 мм, 5 мкм, 100 А с защитной колонкой EVO 15x30 мм) для получения указанного в заголовке соединения (67 мг, 40%) в виде порошка белого цвета.
ЭР/МС (m/z): 355 (M+H); 353 (M-H).
Пример 4.
(2S,3R)-1-[4-[1-(азетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-2-ил]-2-метилазетидин3-ол.
Трет-бутил-3-[4-[2-[(2S,3R)-3-гидрокси-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1-ил]азетидин-1-карбоксилат (153 мг, 0,336 ммоль) растворяли в ДХМ (15 мл) и добавляли ТФК (5 мл, 66 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем концентрировали при пониженном давлении при КТ. Остаток выпаривали совместно с ДХМ и сушили в вакууме. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворитель A=10 мМ водный NH4HCO3 с 5% MeOH, pH 10, растворитель В=АЦН; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18, 100x30 мм, 5 мкм, 100 А с защитной колонкой EVO 15x30 мм) для получения указанного в заголовке соединения (79 мг, 57%) в виде порошка белого цвета.
ЭР/МС (m/z): 355 (M+H); 353 (M-H).
Пример 5.
2-[4-[5-циано-6-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1-ил]-N-(2гидроксиэтил)ацетамид.
2-[4-[5-циано-6-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1-ил]уксусную кислоту (351 мг, 0,96 ммоль) растворяли в ДМФ (2 мл) и добавляли HATU (482 мг, 1,24 ммоль), этаноламин (0,1 мл, 2 ммоль) и ДИПЭА (0,5 мл, 3 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 2 д. Реакционную смесь сразу очищали обращенно-фазовой хроматографией (диоксид кремния, связанный с C18), используя градиент от 5 до 95% MeCN/водного (NH4)2CO3 (10 мМ), для получения указанного в заголовке
- 30 043635 соединения (110 мг, 28%).
ЭР/МС (m/z): 409 (M+H); 407 (M-H).
Пример 6.
2-[(2R)-2-(гидроксиметил)αзетидин-1-ил]-6-[1-(4-пиперидил)пирαзол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил.
Трет-бутил-4-[4-[5-циано-6-[(2R)-2-(гидроксиметил)азетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2пиридил]пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилат (264 мг, 0,52 ммоль) растворяли в ДХМ (2 мл). К реакционной смеси одной порцией добавляли ТФК (2 мл) и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли ДХМ, и реакционную смесь концентрировали. Реакционный материал разбавляли MeOH (1 мл) и добавляли насыщенный водный NaHCO3, чтобы получить pH~8. Реакционную смесь очищали с помощью обращенно-фазовой хроматографии (40 г, C18, градиент 20-100% АЦН/10 мМ водного (NH4)2CO3 с 5% MeOH) для получения указанного в заголовке соединения (135,5 мг, 64%).
ЭР/МС (m/z): 407 (M+H).
Пример 7.
2-[(2S,3R)-3-гидрокси-2-метилαзетидин-1-ил]-6-[ 1 -(4-пиперидил)пиразол-4-ил]-4(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил.
он
Трет-бутил-4-[4-[5-циано-6-[(2S,3R)-3-гидрокси-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2пиридил]пиразол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилат (220 мг, 0,43 ммоль) растворяли в ДХМ (2 мл). К реакционной смеси одной порцией добавляли ТФК (2 мл) и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли ДХМ, и реакционную смесь концентрировали. Реакционный материал разбавляли MeOH (1 мл) и добавляли насыщенный водный NaHCO3, чтобы получить pH~2. Реакционную смесь очищали с помощью обращенно-фазовой хроматографии (40 г, C18, градиент 20-100% АЦН/10 мМ водного (NH4)2CO3 с 5% MeOH) для получения указанного в заголовке соединения (127 мг, 72%).
ЭР/МС (m/z): 407 (M+H).
Пример 8.
2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-[1-(1-метил-4-пиперидил)пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил.
В пробирку добавляли 2-хлор-6-[1-(1-метил-4-пиперидил)пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил (261 мг, 0,68 ммоль), соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (2S)-2-метилазетидин-1-ия (338 мг, 1,1 ммоль), ДИПЭА (0,4 мл, 2 ммоль) и ТГФ (3,7 мл). Пробирку герметизировали и нагревали при 130°C в течение 2 ч. Реакционную смесь разделяли между ДХМ и 1 H водным HCl. Водную фазу нейтрализовали 1 H NaOH, затем трижды экстрагировали ДХМ. Органиче
- 31 043635 ские экстракты смешивали. Сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Материал сушили при 50°C в вакуумном сушильном шкафу в течение 1 ч. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 5 до 10% MeOH/ДХМ, фракции, содержащие указанное в заголовке соединение, объединяли, концентрировали и сушили в вакуумной печи при 50°C в течение ночи. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворитель A=10 мМ водный бикарбонат аммония с 5% MeOH, растворитель В=АЦН; колонка - Xbridge™ 30x75 мм 5 мкм, 45 мл/мин; градиент от 5 до 100% В) для получения указанного в заголовке соединения (73 мг, 26%).
ЭР/МС (m/z): 405 (M+H).
Пример 9.
6-[1-[1-(2-гидроксuэтил)-4-пиперидил]пиразол-4-uл]-2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил.
ОН
В пробирку на 20 мл добавляли гидрохлорид 2-хлор-6-[1-(4-пиперидил)пиразол-4-ил]-4(трифторметил)пиридин-3-карбонитрила (304,3 мг, 0,63 ммоль), 2-[третбутил(диметил)силил]оксиацетальдегид (219 мг, 1,19 ммоль), ДИПЭА (0,52 мл, 3,1 ммоль), триацетоксиборгидрид натрия (277,2 мг, 1,3 ммоль) и ДХМ (2,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч. Добавляли 2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиацетальдегид (219 мг, 1,2 ммоль) и перемешивали в течение ночи при КТ. Добавляли насыщенный раствор водного бикарбоната натрия и дважды экстрагировали ДХМ. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным водным NaCl, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 40 до 70% EtOAc в гексанах, для получения 6-[1-[1-[2-[третбутил(диметил)силил]оксиэтил]-4-пиперидил]пиразол-4-ил]-2-хлор-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрил (220 мг, 58%).
В пробирку добавляли 6-[1-[1-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-4-пиперидил]пиразол-4-ил]2-хлор-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил (175 мг, 0,289 ммоль), соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (2S)-2-метилазетидин-1-ия (136 мг, 0,45 ммоль), ДИПЭА (0,15 мл, 0,85 ммоль) и ТГФ (1,5 мл, 18 ммоль). Сосуд герметизировали и нагревали при 130°C в течение 60 мин. Реакционную смесь разделяли между EtOAc и 1 H HCl, органический слой удаляли и водный слой трижды экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли, промывали насыщенным водным NaCl, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в ТГФ (1,3 мл), и смесь охлаждали до 0°C, затем по каплям добавляли 1 М фторид тетрабутиламмония в ТГФ (0,37 мл, 0,37 ммоль). Реакционной смеси давали нагреться до КТ и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя 100% гексанов, затем используя градиент от 1 до 10% (0,7 H аммиака в MeOH)/ДХМ, для получения указанного в заголовке соединения (93 мг, 73%).
ЭР/МС (m/z): 435 (M+H).
Пример 10.
6-[1-[2-(диметиламино)этил]пиразол-4-ил]-2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-4(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил.
В реакционный сосуд добавляли 2,6-дихлор-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил (250 мг, 1,04 ммоль), N,N-диметил-(2-(4-(4,4,5,5-тетраметил)-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол-1-ил)этанамuн (271 мг, 1,07 ммоль), 1,4-диоксан (10 мл), водный карбонат калия (3 М, 1,04 мл 3,12 ммоль) и [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II)) (40 мг, 0,052 ммоль). Сосуд герметизировали и нагревали при 80°C в течение 2 ч, затем смесь охлаждали до КТ. Фильтровали через 3 г картридж
- 32 043635
Celite® с помощью EtOAc для элюирования. Фильтрат концентрировали упариванием. К остатку добавляли соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (28)-2-метилазетидин-1-ия (378 мг, 1,24 ммоль), ДИПЭА (0,9 мл, 5,2 ммоль) и ДМСО (10 мл). Смесь нагревали при 120°C в течение 6 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и загружали в картридж 8trata-XL® (8 г; предварительно промытый MeOH, высушенный, а затем промытый водой). Картридж промывали водой, а затем смесью MeOH/воды 1:1 и элюенты удаляли. Продукт элюировали MeOH, затем ДХМ и, наконец, смесью ДХМ/MeOH 1:1, объединяя элюированные фракции. Объединенные фракции, содержащие указанное в заголовке соединение, концентрировали. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворитель A=10 мМ водный бикарбонат аммония с 5% MeOH pH 10, растворитель В=АЦН; предколонка - Waters BEH HILIC 100x30 мм, 5 мкм, 110 Ас защитной колонкой BEH HILIC 15x30 мм; колонка Phenomenex® Kinetex® EVO C18, 100x30 мм, 5 мкм, 100 А с защитной колонкой EVO 15x30 мм с использованием встроенного нагревателя при 50°C; градиент от 33 до 100% В) для получения указанного в заголовке соединения (53 мг, 13%).
ЭР/МС (m/z): 379 (M+H).
Пример 11.
6-[1-(2-гидроксиэтил)пиразол-4-ил]-2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрил.
Указанное в заголовке соединение по существу получали, используя метод, описанный в примере 10, с 2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол-1-ил)этанолом.
ЭР/МС (m/z): 352 (M+H).
Пример 12.
2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-6-[1-(4-пиперидил)пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрил.
Трет-бутил-4-[4-[5-циано-6-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1ил]пиперидин-1-карбоксилат (1,99 г, 4,06 ммоль) растворяли в ДХМ (50 мл) и медленно добавляли ТФК (10 мл, 132,3 ммоль). Перемешивали при КТ в течение 30 мин, затем реакционную смесь загружали в четыре 10 г картриджа для СКО. Картриджи промывали MeOH, а затем 7 H аммиаком в MeOH. Основные промывные воды концентрировали в вакууме. Остаток очищали обращенно-фазовой хроматографией на C18, связанной с диоксидом кремния (растворитель A: 10 мМ бикарбонат аммония с 5% MeOH; растворитель B: АЦН; градиент: 10-71 % растворителя B) для получения указанного в заголовке соединения (709 мг, 45%) в виде твердого вещества белого цвета.
ЭР/МС (m/z): 391 (M+H).
Пример 13.
2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-4-[1-(4-пиперидил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин.
Трет-бутил-4-[4-[2-[(28)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1ил]пиперидин-1-карбоксилат (0,213 г, 0,457 ммоль) растворяли в ДХМ (5 мл) и добавляли ТФК (1 мл). Смесь перемешивали в течение 25 мин, затем реакционную смесь загружали непосредственно в 10 г картридж для СКО. Картридж промывали MeOH, а затем элюировали 7 H аммиаком в MeOH. Основные
- 33 043635 промывные воды концентрировали для получения указанного в заголовке соединения (129 мг, 77%).
ЭР/МС (m/z): 367 (M+H).
Примеры в табл. 3 получали, используя по существу метод, описанный в примере 13, и соответствующий защищенный амин.
Таблица 3
| Номер примера | Название | Структура | ЭР/МС (m/z): (M+H) |
| 14 | (2Х,ЗЯ)-2-метил-1 - [4- [ 1 -[(ЗЯ)пирролидин-3 -ил]пиразол-4-ил] 6-(трифторметил)пиримидин-2ил]азетидин-3-ол | ОН <V> N^N F Т А ^ΝΗ | 369 |
| 15 | (25,ЗЯ)-2-метил-1-[4-[1-[(35)- пирролидин-3 -ил]пиразол-4-ил] 6-(трифторметил)пиримидин-2ил]азетидин-3-ол | ОН Λ..... Ν Ν^Ν fTTA^x fY та F Ν ^C-NH | 369 |
| 16 | [(27?)-1 - [4- [ 1 - [(ЗЛ)-пирролидин -3 ил]пиразол-4-ил]-6- (трифторметил)пиримидин-2- ил]азетидин-2-ил]метанол | Λ он ...../ N N<An f^aaL^x fY та ^?NH | 369 |
Пример 17.
6-[1-(αзетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрил.
Указанное в заголовке соединение получали по существу, используя ту же процедуру, что и в примере 12, начиная с Ίрет-бутил-3-[4-[5-циано-6-[(2S)-2-метилαзетидин-1-ил]-4-(Ίрифторметил)-2пиридил]пиразол-1-ил]азетидин-1-карбоксилата. Очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворитель A - 10 мМ водный бикарбонат аммония с 5% MeOH, растворитель B - АЦН; градиент от 35 до 59% В; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18, 100x30 мм, 5 мкм) для получения указанного в заголовке соединения.
ЭР/МС (m/z): 363 (M+H).
- 34 043635
Пример 18.
6-[1-[1 -(2-аминоацетил)-4-пиперидил] пиразол-4-ил] -2-[(2S)-2-метuлазетuдин-1 -ил] -4(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил.
Указанное в заголовке соединение получали, используя по существу ту же процедуру, что и в примере 12, начиная с трет-бутuл-N-[2-[4-[4-[5-цuαно-6-[(2S)-2-метилαзетuдин-1-ил]-4-(трифторметuл)-2пиридил]пиразол-1-ил]-1-пиперидил]-2-оксоэтил]карбамата. Очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворитель A - 10 мМ бикарбонат аммония с 5% MeOH; растворитель B - MeOH; градиент от 20 до 50% В, 55 мл/мин; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18 30 ммх250 мм, 5 мкм).
ЭР/МС (m/z): 448 (M+H).
Пример 19.
6-[1-(1 -ацетил-4-пиперидил)пиразол-4-ил] -2-[(2S)-2-метилазетидин-1 -ил] -4(трифторметил)пиридин-3-карбонитрил.
2-[(2S)-2-метилазетидuн-1-ил]-6-[1-(4-nuперидил)nиразол-4-ил]-4-(трифторметил)nирuдин-3карбонитрил (пример 12) (0,111 г, 0,284 ммоль) растворяли в ДХМ (1 мл) и добавляли пиридин (0,026 мл, 0,32 ммоль). Смесь охлаждали до 0°C и добавляли ацетилхлорид (0,024 мл, 0,34 ммоль). Смесь нагревали до КТ и перемешивали в течение 30 мин. Смесь охлаждали до 0°C и добавляли пиридин (0,026 мл, 0,32 ммоль) и ацетилхлорид (0,024 мл, 0,34 ммоль). Нагревали до КТ и перемешивали еще 30 мин. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия и дважды экстрагировали ДХМ. Органические слои объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворитель A - 10 мМ бикарбонат аммония с 5% MeOH; растворитель B - MeOH; градиент 25-55%, 55 мл/мин; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18 30x250 мм, 5 мкм) для получения указанного в заголовке соединения (67 мг, 55%).
ЭР/МС (m/z): 433 (M+H).
Примеры 20-23.
Примеры в табл. 4 получали, используя по существу процедуру из примера 5, подходящую карбоновую кислоту и коммерчески доступный амин.
- 35 043635
Таблица 4
| Номер примера | Название | Структура | ЭР/МС (m/z): (M+H) |
| 20 | 2- [(25)-2-метилазети дин-1 -ил] -6- [ 1 [2-(4-метилпиперазин-1 -ил)-2оксоэтил] пиразол-4-ил] -4(трифторметил)пири дин-3 карбонитрил | X / 1 11 N 1\К 1 fVVY^ О С- N \ | 448 |
| 21 | 2-[4-[5-циано-6-[(25)-2метилазетидин-1 -ил] -4(трифторметил)-2- пиридил]пиразол-1 -ил]-М,М-бис(2гидроксиэтил)ацетамид | ΞΕ О ] о z- Z LL LL | 453 |
| 22 | 6-[1-[2-[(ЗЯ,4Я)-3,4- дигидроксипирролидин-1 -ил] -2оксоэтил] пиразол-4-ил] -2- [(2S)-2метилазетидин-1 -ил] -4- (трифторметил)пири дин-3 карбонитрил | Ϋ..... F Wh HO | 451 |
| 23 | 6-[1-[2-[(35,45)-3,4- дигидроксипирролидин-1 -ил] -2оксоэтил] пиразол-4-ил] -2- [(25)-2 - метилазетидин-1 -ил] -4- (трифторметил)пири дин-3 карбонитрил | mV / th $ 6 I | 451 |
Пример 24.
6-[1-(2,3-дигидроксипропил)пиразол-4-ил]-2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил.
2-хлор-6-[1-[(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил]пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3карбонитрил (0,204 г 0,527 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл). К смеси добавляли водную соляную кислоту (2 М, 3 мл, 6 ммоль) и перемешивали при КТ в течение 1,5 ч. Смесь разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия и дважды экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли и сушили над сульфатом натрия, затем фильтровали и упаривали для получения неочищенного 2-хлор-6-[1-(2,3дигидроксипропил)пиразол-4-ил]-4-(трифторметил)пиридин-3-карбонитрила (183 мг).
- 36 043635
Неочищенный материал полностью растворяли в ДМФ (2 мл), затем добавляли соль [(1R,4S)-7,7диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (2S)-2-метилазетидин-1-ия (222 мг, 0,73 ммоль) и ДИПЭА (0,37 мл, 2,1 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе при 130°C в течение 2,5 ч. Реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворитель A - 10 мМ бикарбоната аммония с 5% MeOH; растворитель B - АЦН; градиент от 20 до 50%, 60 мл/мин; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18 30x250 мм, 5 мкм) для получения указанного в заголовке соединения (102 мг, 51%).
ЭР/МС (m/z): 382 (M+H).
Примеры 24а и 24б.
Пример 24а.
6-[1-(2,3-дигидроксипропил)nиразол-4-ил]-2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил - изомер 1.
Пример 24б.
6-[1-(2,3-дигидроксипропил)nиразол-4-uл]-2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил - изомер 2.
Изомеры 6-[1 -(2,3-дигидроксипропил)пиразол-4-ил] -2-[(2S)-2-метилазетидин-1 -ил] -4(трифторметил)пиридин-3-карбонитрила (86 мг) разделяли с использованием хиральной СЖХ (параметры: колонка - Phenomenex® Lux® Cellulose-2, 21x250 мм; температура колонки - 40°C; растворитель 15% EtOH/CO2, 80 мл/мин) для получения указанных в заголовке соединений (изомер 1, изомер, элюируемый первым: 35 мг, ЭР/МС (m/z): 382 (M+H); изомер 2, изомер, элюируемый вторым: 39 мг, ЭР/МС (m/z): 382 (M+H)). Аналитическая хиральная СЖХ (параметры: колонка - Phenomenex® Lux® Cellulose2, 4,6x150 мм; растворитель - 15% EtOH/CO2, 5 мл/мин): изомер 1 - время удерживания 3,10 мин, 95,6% ее; изомер 2 - время удерживания 3,52 мин - 94,4% ее.
Пример 25.
2-[(2S)-2-метилазетидuн-1-ил]-6-(1H-пuразол-4-ил)-4-(трифторметил)nuридuн-3-карбонитрил.
В пробирке объединяли трет-бутил-4-[6-хлор-5-циано-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1карбоксилат (75 мг, 0,20 ммоль), 1,4-диоксан (1,5 мл) и EtOH (1 мл). Добавляли ДИПЭА (130 мг, 1,0 ммоль) и соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (2S)-2-метилазетидин-1ия (117 мг, 0,39 ммоль). Реакционную смесь нагревали в микроволновом реакторе при 200°C в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали обращенно-фазовой хроматографией на C18, связанной с диоксидом кремния, используя градиент от 10 до 100% АЦН/воды с 0,1% муравьиной кислоты, для получения указанного в заголовке соединения (35 мг, 41%) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета.
ЭР/МС (m/z): 308 (M+H), 306 (M-H).
Пример 26.
2-[(2S)-2-метилазетидин-1 -ил] -6-( 1 -тетрагидропиран-4-илпиразол-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил.
В пробирке объединяли 2-хлор-6-(1-тетрагидропиран-4-илпиразол-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил (105 мг, 0,29 ммоль), 1,4-диоксан (1 мл), EtOH (0,5 мл), ДИПЭА (0,2 мл, 1 ммоль) и соль [(1R,4S)-7,7-диметил-2-оксонорборнан-1-ил]метансульфоната (28)-2-метилазетидин-1-ия (100 мг, 0,33 ммоль). Реакционную смесь нагревали в микроволновом реакторе при 150°C в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя градиент от 40 до 50% EtOAc/гексанов, для получения указанного в заголовке соединения (88 мг, 76%) в виде твердого вещества светло-желтого цвета.
ЭР/МС (m/z): 392 (M+H).
- 37 043635
Пример 27.
6-[ 1 -(-3-гuдрокси-4-пиперuдил)пuразол-4-ил]-2-[(2S)-2-метuлазетuдин-1 -ил]-4-(трифторметил)пиридин3-карбонитрил.
Трет-бутил-4-[4-[5-циано-6-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-(трифторметил)-2-пиридил]пиразол-1ил]-3-гидроксипиперидин-1-карбоксилат (85 мг, 0,17 ммоль) растворяли в ДХМ (1 мл), затем добавляли ТФК (0,5 мл) и перемешивали в течение 5 мин. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали обращенно-фазовой хроматографией (C18, градиент от 20 до 100% АЦН/10 мМ водного карбоната аммония+5% метанола) для получения указанного в заголовке соединения (27 мг, 40%) в виде твердого вещества белого цвета.
ЭР/МС (m/z): 407 (M+H).
Пример 28.
N-(2-аминоэтил)-2-[4-[2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1ил]ацетамид.
Трет-бутил-N-[2-[[2-[4-[2-[(2S)-2-метuлазетидuн-1-ил]-6-(трифторметuл)пuримидин-4-ил]пиразол1-ил]ацетил]амино]этил]карбамат (340 мг) растворяли в чистой ТФК (5 мл) и перемешивали при температуре окружающей среды. Через 2 мин гасили водным NaOH до щелочного состояния. Экстрагировали ДХМ и EtOAc. Экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворители - 10 мМ водный бикарбонат аммония, pH 10/5% MeOH (растворитель A) и АЦН (растворитель B); предколонка - Waters BEH HILIC 100x30 мм, 5 мкм, 110 А с защитной колонкой BEH HILIC 15x30 мм; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18, 100x30 мм, 5 мкм, 100 А с защитной колонкой EVO 15x30 мм с использованием проточного нагревателя при 50°C; градиент от 14 до 48% В) для получения указанного в заголовке соединения (45 мг, 17%).
ЭР/МС (m/z): 384 (M+H).
Соединения, приведенные в табл. 5, получали, используя по существу ту же процедуру, что и в примере 28, и соответствующий защищенный амин.
- 38 043635
Таблица 5
| Номер примера | Название | Структура | ЭР/МС (m/z): (M+H) |
| 29 | 2- [4- [2- [(25)-2-метилазетидин-1 ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1 -ил] -1 - [(35)-3 метилпиперазин-1 -ил]этанон | N<^N F | 424 |
| 30 | 2- [4- [2- [(25)-2-метилазетидин-1 ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1 -ил] -1 - [(25)-2метилпиперазин-1 -ил]этанон | <V> N^N .....D '—N H | 424 |
| 31 | 1-(3,3-диметилпиперазин-1-ил)-2[4- [2- [(25)-2-метилазетидин-1 -ил] 6-(трифторметил)пиримидин-4ил]пиразол-1 -ил]этанон | LL LL | 438 |
| 32 | 1 - [(2S,5R) -2,5-диметилпиперазин-1 ил] -2- [4- [2- [(25)-2-метилазети дин- 1 -ил] -6-(трифторметил)пирими дин4-ил]пиразол-1 -ил]этанон | <V> N^N fY T n F о c λ-N ''' H | 438 |
Пример 33.
4-[1-(азетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин.
Трет-бутил-3-[4-[2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]пиразол-1ил]азетидин-1-карбоксилат (530 мг, 1,21 ммоль) растворяли в ДХМ (50 мл). Добавляли ТФК (6 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Смесь концентрировали в вакууме для получения указанного в заголовке неочищенного соединения. Половину этого материала очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (параметры: растворители - 10 мМ водный бикарбонат аммония, pH 10/5% MeOH (растворитель A)
- 39 043635 и АЦН (растворитель B); предколонка - Waters BEH HILIC 100x30 мм, 5 мкм, 110 А с защитной колонкой BEH HILIC 15x30 мм; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18, 100x30 мм, 5 мкм, 100 А с защитной колонкой EVO 15x30 мм с использованием проточного нагревателя при 50°C; градиент от 23 до 58% В) для получения указанного в заголовке соединения (162 мг, выход 80% от половины исходного материала) в виде твердого вещества белого цвета.
ЭР/МС (m/z): 339 (M+H).
Пример 34.
2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-4-[1-(1-метилазетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин.
Половину неочищенного 4-[1-(азетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-2-[(2S)-2-метилазетидин-1-ил]-6(трифторметил)пиримидина (0,6 ммоль), полученного в примере 33, растворяли в MeOH (6 мл). Добавляли уксусную кислоту (0,1 мл) и 3,45 М водный формальдегид (1 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Добавляли триацетоксиборгидрид натрия (300 мг, 1,4 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали препаративной ВЭЖХ (параметры: растворители - 10 мМ водный бикарбонат аммония pH 10/5% MeOH (растворитель A) и АЦН (растворитель B); предколонка - Waters BEH HILIC 100x30 мм, 5 мкм, 110 А с защитной колонкой BEH HILIC 15x30 мм; колонка - Phenomenex® Kinetex® EVO C18, 100x30 мм, 5 мкм, 100 А с защитной колонкой EVO 15x30 мм с использованием встроенного нагревателя при 50°C; градиент 33-67% В) для получения указанного в заголовке соединения (128 мг, выход 61% от половины исходного материала в примере 33) в виде твердого вещества белого цвета.
ЭР/МС (m/z): 353 (M+H).
Пример 35.
(2S,3R)-2-метил-1-[4-[1-(1-метилазетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-2ил] азетидин-3 -ол.
Указанное в заголовке соединение получали, используя по существу ту же процедуру, что и в примере 34, начиная с (2S,3R)-1-[4-[1-(азетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-2-ил]-2метилазетидин-3-ола (пример 4).
ЭР/МС (m/z): 369 (M+H), 367 (M-H).
Пример 36.
[(2R)-1-[4-[ 1-(1 -метилазетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-2-ил]азетидин-2ил]метанол.
Указанное в заголовке соединение получали, используя по существу ту же процедуру, что и в при
- 40 043635 мере 34, начиная с [(2R)-1-[4-[1-(азетидин-3-ил)пиразол-4-ил]-6-(трифторметил)пиримидин-2-ил]азетидин2-ил]метанола (пример 3).
ЭР/МС (m/z): 369 (M+H), 367 (M-H).
Методы анализа.
Анализ активности фермента КГК для КГК-С человека и КГК-А человека.
Истинная эффективность ингибирования активности КГК С или А может быть измерена с использованием ферментативного анализа, который измеряет продукцию F1P. Соединения готовили в ДМСО и испытывали с применением 10-точечной кривой концентрации, с получением 3-кратных серийных разведений соединений в 96-луночном планшете в диапазоне от 20 мкМ до 1,02 нМ. Фермент готовили в буфере для анализа (50 мМ 4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновая кислота (ГЭПЭС), 10 мМ хлорид калия, 100 мМ хлорид магния, 2 мМ трис(2-карбоксиэтил)фосфин (ТКЭФ), 0,01% н-октилглюкозида) и инкубировали с соединениями при КТ в течение 15 мин. Реакцию проводили в объемах 100 мкл, содержащих концентрации в субстрате фруктозы (250 мкМ для анализа КГК-С и 1,25 мМ для анализа КГК-А) и АТФ (150 мкМ для обеих изоформ), которые дополнительно инкубировали при КТ в течение 20 мин. Затем реакцию останавливали добавлением останавливающего буфера, состоящего из 0,2% муравьиной кислоты и 1 мкг/мл внутреннего стандарта 13C6-фруктозо-6-фосфата (13C6-F6P). Планшеты хранили при -20°C до анализа RapidFire MS.
Анализ RapidFire MS для количественного определения F1P.
Автоматическая экстракционная система Agilent 300 RapidFire (Agilent, Санта-Клара, Калифорния) с тремя четвертичными насосами для ВЭЖХ соединена с трехквадрупольным масс-спектрометром Agilent 6495 (Agilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния), оборудованным источником ионизации электрораспылением (ИЭР). Система RapidFire Mass Spec оснащена многоразовым картриджем (G9205A) RapidFire C18 (тип C) для твердофазной экстракции (ТФЭ).
Растворитель А, применяемый для загрузки и промывки образца, представляет собой 6 мМ октиламин (Acros Organics 129495000), доведенный до pH 5,0 с помощью уксусной кислоты. Растворитель B, применяемый для элюирования образца, представляет собой 20% воды в АЦН, содержащем 0,1% муравьиной кислоты. Образцы последовательно анализировали посредством отбора 10 мкл непосредственно из многолуночных планшетов на заборную петлю под вакуумом. 10 мкл образца загружали в картридж C18 и промывали с применением растворителя A при скорости потока 1,25 мл/мин в течение 5000 мс. Удерживаемый аналит элюировали в масс-спектрометр с применением растворителя B при скорости потока 1,25 мл/мин в течение 5000 мс. Систему повторно уравновешивали с применением растворителя A при скорости потока 1,25 мл/мин в течение 2000 мс.
Трехквадрупольный масс-спектрометр был оснащен источником ИЭР, и аналиты контролировали с помощью мониторинга выбранной реакции (МВР) в отрицательном режиме [M-Н]-. F1P контролировали при m/z 259,02/96,9 и 13С6-фруктозо-6-фосфат контролировали при m/z 264,99/97. Значения отношения площадей для F1P рассчитывали с применением 13С6-фруктозо-6-фосфата в качестве внутреннего стандарта.
Соединения примеров от 1 до 36 испытывали по существу, как описано выше.
Таблица 6
| Номер примера | чКГК-С 1С5о (нМ) | чКГК-А 1С5о (нМ) |
| 1 | 20,7 ± 3,88 (п=4) | 24,2 ± 2,9 (п=4) |
| 2 | 134 ±43,1 (п=7) | 98,2 ± 25,0 (п=7) |
| 3 | 41,9 ±6,77 (п=3) | 45,4 ±29,5 (п=4) |
| 4 | 14,4 ± 1,12 (п=3) | 11,4 ± 4,34 (п=4) |
| 5 | 57,0 ± 32,6 (п=5) | 37,7 ± 19,9 (п=5) |
| 6 | 25,7 ± 5,14 (п=2) | 15,4 ±5,05 (п=3) |
| 7 | 18,1 ±4,85 (п=2) | 6,02 ± 2,27 (п=3) |
| 8 | 56,1 ± 62,5 (п=3) | 25,2 ± 15,7 (п=3) |
| 9 | 6,26 (п=1) | 3,58 (п=1) |
- 41 043635
| 10 | 418 ±503 (п=3) | 246 ± 248 (п=3) |
| и | 8,03 (п=1) | 5,23 (п=1) |
| 12 | 3,87 ± 0,391 (п=4) | 3,65 ± 0,817 (п=4) |
| 13 | 15,5 ±20,4 (п=3) | 7,69 ± 7,97 (п=3) |
| 14 | 15,9 ± 4,37 (п=2) | 19,1 ±2,98 (п=3) |
| 15 | 27,2 ± 8,60 (п=2) | 26,7 ±3,66 (п=3) |
| 16 | 28,0 ±17,3 (п=2) | 30,0 ± 5,09 (п=3) |
| 17 | 16,1 ±7,96 (п=4) | 13,2 ± 12,7 (п=4) |
| 18 | 59,2 ± 67,8 (п=3) | 35,6 ±32,4 (п=3) |
| 19 | 54,3 (п=1) | 29,2 (п=1) |
| 20 | 150 ±243 (п=3) | 81,8 ± 92,6 (п=3) |
| 21 | 55,2 ±28,1 (п=3) | 39,2 ± 13,6 (п=3) |
| 22 | 61,3 ±57,5 (п=3) | 33,7 ± 17,8 (п=3) |
| 23 | 41,6 ±47,1 (п=3) | 24,9 ± 15,3 (п=3) |
| 24 | 7,91 (п=1) | 7,29 (п=1) |
| 24а | 6,06 (п=1) | 9,99 (п=1) |
| 246 | 4,89 (п=1) | 6,75 (п=1) |
| 25 | 13,6 ±7,2 (п=4) | 16,9 ±9,7 (п=4) |
| 26 | 28,4 (п=1) | 22,2 (п=1) |
| 27 | 9,21 (п=1) | 4,63 (п = 1) |
| 28 | 68,0 (п=1) | 51,0 (п=1) |
| 29 | 38,6 (п=1) | 103 (п=1) |
| 30 | 46,3 (п=1) | 57,8 (п=1) |
| 31 | 34,7 (п=1) | 70,5 (п=1) |
| 32 | 13,3 (п=1) | 41,5 (п=1) |
| 33 | 4,90 ±1,31 (п=2) | 3,63 ± 1,13 (п=3) |
| 34 | 3,71 ±0,178 (п=2) | 5,41 ±6,13 (п=3) |
| 35 | 2,63 (п=1) | 1,59 (п=1) |
| 36 | 10,0 (п=1) | 3,98 (п=1) |
Данные выражены как среднее знaчение±SEM (n).
Результаты, представленные в табл. 6 выше, демонстрируют, что соединения примеров от 1 до 36 ингибируют ферментативную активность как КГК-С, так и КГК-А.
Анализ клеточной активности КГК.
Эффективность может быть измерена с помощью клеточного анализа ингибирования превращения фруктозы в F1P клеточной КГК. Клетки HepG2 высевали на 96-луночные планшеты для культивирования клеток в среде для выращивания (среда Игла, модифицированная Дульбекко (СИМД) с высоким содержанием глюкозы, 10% инактивированная нагреванием фетальная бычья сыворотка (HI ФБС), 1х пенициллин/стрептомицин) и оставляли для прикрепления в течение ночи в инкубаторе при 37°C. Среду для выращивания промывали и заменяли аналитической средой, состоящей из среды Gibco OptiMEM 1 с пониженным содержанием сыворотки, 0,1% казеина, 8,33 мМ D-фруктозо-13C6 и соединения в концентрациях от 100 до 0,0051 мкМ (10-точечная кривая концентрации). Планшеты инкубировали при 37°C в течение 3 ч, после чего среду для анализа откачивали из лунок для клеток. Затем к клеткам добавляли останавливающий раствор, состоящий из 80% MeOH, 2 мМ ацетата аммония и 50 нг/мл фруктозо-6фосфaтa-13C6. Планшеты хранили при -20°C до анализа RapidFire MS (описанного выше).
Соединения примеров от 1 до 36 испытывали по существу, как описано выше.
- 42 043635
Таблица 7
| Номер примера | HepG2 IC50 |
| 1 | 41,1 ±8,13 (п=3) |
| 2 | 98,4 ± 8,69 (п=3) |
| 3 | 40,2 ± 10,9 (п=4) |
| 4 | 16,8 ±4,97 (п=4) |
| 5 | 83,6 ± 8,16 (п=3) |
| 6 | 22,9 ±5,15 (п=3) |
| 7 | 8,06 ± 1,41 (п=3) |
| 8 | 20,4 ± 8,09 (п=3) |
| 9 | 15,0 (п=1) |
| 10 | 118 ±24,2 (п=3) |
| И | 48,4 (п=1) |
| 12 | 5,36 ± 0,0912 (п=3) |
| 13 | 26,2 ± 4,30 (п=3) |
| 14 | 34,9 ± 8,26 (п=3) |
| 15 | 52,7 ±3,08 (п=3) |
| 16 | 73,2 ± 14,9 (п=3) |
| 17 | 1,66 ±0,435 (п=3) |
| 18 | 16,3 ± 1,84 (п=3) |
| 19 | 95,9 (п=1) |
| 20 | 35,7 ±3,47 (п=3) |
| 21 | 102 ±5,47 (п=3) |
| 22 | 109 ±9,69 (п=3) |
| 23 | 76,2 ± 7,07 (п=3) |
| 24 | 27,0 (п=1) |
| 24а | 18,2 (п=1) |
| 246 | 27,2 (п=1) |
| 25 | 33,5 ± 9,07 (п=3) |
| 26 | 81,6 (п=1) |
| 27 | 6,93 (п=1) |
| 28 | 144(п=1) |
| 29 | 145(п=1) |
| 30 | 143(п=1) |
| 31 | 119(п=1) |
| 32 | 62,9 (п=1) |
| 33 | 6,13 ±0,528 (п=3) |
| 34 | 2,93 ±0,156 (п=3) |
| 35 | 6,41 (п=1) |
| 36 | 13,4 (п=1) |
Данные выражены как среднее значение ± SEM (п).
Результаты, представленные в табл. 7 выше, демонстрируют, что соединения примеров от 1 до 36 ингибируют метаболизм фруктозы до F1P в клетках HepG2.
Жидкостный хроматографический метод с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС) для про
Claims (19)
- ведения фармакокинетических анализов. Образцы экстрагировали с помощью осаждения белка путем добавления 180 мкл MeOH:АЦН (1:1, об./об.), содержащего внутренний стандарт, к 50 мкл плазмы. Затем образцы разбавляли смесью MeOH:воды (1:1, об./об.) для получения концентраций в пределах диапазона стандартной кривой. Разбавленные образцы анализировали с помощью ЖХ-МС/МС с применением тройного квадрупольного масс-спектрометра Sciex API 4000 (Applied Biosystems/MDS; Фостер Сити, Калифорния), оборудованного интерфейсом TurboIonSpray, и работающего в режиме регистрации положительных ионов. Анализируемые вещества разделяли хроматографически с использованием колонки ECHELON C18 4 мкм 20X2,1 мм. Условия ЖХ представляли собой следующие: вода/1 М бикарбонат аммония (2000:10, об./об.) (подвижная фаза A) и MeOH/1 М бикарбонат аммония, (2000:10, об./об.) (подвижная фаза B).Фармакокинетика у крыс Sprague Dawley.Фармакокинетические свойства in vivo примера 1 и примера 2 продемонстрированы с использованием крыс Sprague Dawley (натощак; п=3/путь введения). Соединение вводили однократной пероральной (ПО; 2 или 3 мг/кг; объем 10 мл/кг) или внутривенной (ВВ; 1 мг/кг; объем 1 мл/кг) дозой в носителе. Кровь собирали у каждого животного в нескольких временных точках от 0 до 48 ч после введения дозы. Концентрации в плазме для примера 1 и примера 2 определяли методом ЖХ-МС/МС, как описано выше.Для примера 1 средний период полувыведения составлял 12,9 ч, а биодоступность составляла 83%, как определено при ПО введении, в то время как при ВВ введении средний период полувыведения составлял 12,8 ч, а средний клиренс составлял 5,86 мл/мин/кг. Для примера 2 средний период полувыведения составлял 5,12 ч, а биодоступность составляла 95%, как определено при ПО введении, в то время как при ВВ введении средний период полувыведения составлял 4,29 ч, а средний клиренс составлял 56,4 мл/мин/кг. Эти данные показывают, что примеры 1 и 2 имеют разные уровни клиренса, но оба имеют высокую пероральную биодоступность и длительное выведение, о чем свидетельствует адекватный средний период полувыведения.Фармакокинетика у собак.Фармакокинетические свойства примера 1 in vivo продемонстрированы на собаках породы бигль (после кормления, п=3). Соединение вводили однократной пероральной (ПО; 2 или 3 мг/кг; объем 2 мл/кг) или внутривенной (ВВ; 1 мг/кг; объем 1 мл/кг) дозой в носителе. Кровь отбирали у каждого животного в нескольких временных точках от 0 до 72 ч после введения дозы. Концентрации в плазме для примера 1 и примера 2 определяли методом ЖХ-МС/МС, как описано выше.Для примера 1 средний период полувыведения составлял 36,6 ч, а биодоступность составляла 87%, как определено при ПО введении, в то время как при ВВ введении средний период полувыведения составлял 28 ч, а средний клиренс составлял 3,41 мл/мин/кг. Для примера 2 средний период полувыведения составлял 9,79 ч, а биодоступность составляла ~100%, как определено при ПО введении, в то время как при ВВ введении средний период полувыведения составлял 10,3 ч, а средний клиренс составлял 19,6 мл/мин/кг. Эти данные показывают, что примеры 1 и 2 имеют разные уровни клиренса, но оба имеют высокую пероральную биодоступность и длительное выведение, о чем свидетельствует адекватный средний период полувыведения.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Соединение формулыгде X представляет собой N или C, замещенный CN; R1 выбран из H,- 44 043635оба R2 и R3 представляют собой H или один представляет собой H, а другой представляет собой OH;R4, R5, R6, R7 и R9 независимо представляют собой H или СН3;R8 представляет собой H, CH3, CH2CH2OH, C(=O)CH2NH2 или C(=O)CH3; иR10 представляет собой OH или NH2;или его фармацевтически приемлемая соль.
- 2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R1 выбран изили его фармацевтически приемлемая соль.
- 3. Соединение по п.1 или 2, отличающееся тем, что соединение представляет собойили его фармацевтически приемлемую соль.
- 4. Соединение по любому из пп.1-3, отличающееся тем, что X представляет собой N, или его фармацевтически приемлемая соль.
- 5. Соединение по любому из пп.1-3, отличающееся тем, что X представляет собой C, замещенный CN, или его фармацевтически приемлемая соль.
- 6. Соединение по любому из пп.1-4, отличающееся тем, что соединение представляет собойили его фармацевтически приемлемую соль.
- 7. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.6, отличающееся тем, что фармацевтически приемлемая соль представляет собой сукцинатную соль.
- 8. Способ лечения сахарного диабета 2 типа у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли.
- 9. Способ лечения сердечной недостаточности у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по любому из пп. 1 -7 или его фармацевтически приемлемой соли.
- 10. Способ лечения диабетической болезни почек у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли.
- 11. Способ лечения неалкогольного стеатогепатита у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли.- 45 043635
- 12. Способ лечения хронического заболевания почек у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли.
- 13. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-7 для лечения сахарного диабета 2 типа.
- 14. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-7 для лечения сердечной недостаточности.
- 15. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-7 для лечения диабетической болезни почек.
- 16. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-7 для лечения неалкогольного стеатогепатита.
- 17. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-7 для лечения хронического заболевания почек.
- 18. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-7 с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами.
- 19. Способ получения фармацевтической композиции, включающий смешивание соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-7 с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами.Евразийская патентная организация, ЕАПВРоссия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/862,382 | 2019-06-17 | ||
| US62/975,887 | 2020-02-13 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA043635B1 true EA043635B1 (ru) | 2023-06-07 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2866152T3 (es) | Derivados de tirosina amida como inhibidores de la Rho-quinasa | |
| ES2648228T3 (es) | Derivados de imidazo[1,2-b]piridazina como inhibidores de cinasa | |
| CA3143490C (en) | Disubstituted pyrazole compounds as ketohexokinase inhibitors | |
| KR102146477B1 (ko) | Ｓｙｋ 억제제 | |
| KR102522832B1 (ko) | 호흡기 세포융합 바이러스 （ｒｓｖ）의 복제에 대하여 저해 활성을 갖는 피페리딘 치환된 피라졸로［１，５―ａ］피리미딘 유도체 | |
| US9732087B2 (en) | Diamino-pyridine, pyrimidine, and pyridazine modulators of the histamine H4 receptor | |
| JP2017518276A (ja) | ブルトン型チロシンキナーゼ（ｂｔｋ）インヒビターとしての多フルオロ置換化合物 | |
| US20220242870A1 (en) | Heterocycle-fused pyrimidine derivative and use thereof | |
| CN111670183A (zh) | 作为cdk8/19抑制剂的新型杂环化合物 | |
| CN116472270A (zh) | Cdk抑制剂 | |
| JP2023536891A (ja) | 重症肺炎を治療するためのｊａｋ阻害剤化合物 | |
| KR20200024852A (ko) | Nik 억제제로서의 신규 치환 아자인돌린 유도체 | |
| WO2023060362A1 (en) | Ras inhibitors, compositions and methods of use thereof | |
| WO2019085996A1 (zh) | 作为mTORC1/2双激酶抑制剂的吡啶并嘧啶类化合物 | |
| EA043635B1 (ru) | Дизамещенные пиразольные соединения в качестве ингибиторов кетогексокиназы | |
| CN117098763A (zh) | Tyk2抑制剂 | |
| JP2023553830A (ja) | 新規インダゾール誘導体 | |
| KR20230083276A (ko) | 오토탁신 억제제 화합물 |