UA125114C2

UA125114C2 - Кормова композиція для тварин і способи її застосування

Info

Publication number: UA125114C2
Application number: UAA201710786A
Authority: UA
Inventors: Девід Уізерспун; Дэвид УИЗЕРСПУН; Тамміраж Кумар Ірагаварапу; Таммираж Кумар Ирагаварапу
Original assignee: Сінгента Партісіпейшнс Аг; Сингента Партисипейшнс Аг
Priority date: 2015-04-10
Filing date: 2016-04-08
Publication date: 2022-01-12
Also published as: US11154594B2; WO2016164732A2; NZ735928A; AU2016245959C1; AU2021200798A1; RU2762075C2; RU2017138996A; US20200230215A1; JP2018512149A; JP2021141894A; AU2016245959B9; RU2017138996A3; US20180360926A1; AU2021200798B2; EP3280271A2; US11806388B2; EP3280271A4; WO2016164732A3; CA2981310C; US20210038701A1

Abstract

Винахід належить до кормової композиції для тварин, яка містить матеріал трансгенної рослини кукурудзи, що включає гранули кукурудзи, зерно кукурудзи, силос кукурудзи, ядра кукурудзи сухого плющення, пластівці із ядер кукурудзи, одержані під дією пари, цільні ядра кукурудзи, грубоподрібнені ядра кукурудзи, кукурудзу з високою вологістю, або будь-яку їх комбінацію, де матеріал трансгенної рослини кукурудзи містить рекомбінантну α-амілазу. Також винахід стосується способу збільшення середньодобового приросту ваги тварини, підвищення ефективності засвоювання корму твариною, який включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин.

Description

ЗАЯВА ЩОДО ЕЛЕКТРОННОЇ ПОДАЧІ ПЕРЕЛІКУ ПОСЛІДОВНОСТЕЙ

Перелік послідовностей у текстовому форматі АЗСІЇ, представлений відповідно до 37 СЕК. 1.821, під назвою "80783 5Т2541хі", розміром 15179 байт, створений 4 квітня 2016 року і поданий за допомогою ЕЕ5-ШжМ/ЕВ, представлений замість паперової копії. Даний перелік 5 послідовностей тим самим включено за допомогою посилання в опис даного документа для його розкриття.

ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ ВИНАХОДУ

Даний винахід стосується кормових композицій для тварин і способів їх застосування для збільшення приросту ваги у тварин.

ПЕРЕДУМОВИ ВИНАХОДУ

Корми для тварин можна розділити на дві групи: (1) концентрати або комбікорми і (2) грубі корми. Концентрати або комбікорми мають високу енергетичну цінність, в тому числі жири, зернові злаки (ячмінь, кукурудза, овес, жито, пшениця) і вторинні продукти їхньої переробки, різновиди шроту з високим вмістом білка або різновиди макухи (сої, рапсу, насіння бавовнику, арахісу тощо) і вторинні продукти переробки цукрового буряку, цукрової тростини, сировини тваринного походження і сировини з риби, які можна одержати у вигляді гранул або крихт.

Концентрати або комбікорми можуть бути повними, оскільки вони здатні забезпечити всі щоденні потреби в кормах, або вони здатні забезпечити частину раціону, доповнюючи все те, що може бути забезпечено як продовольчий раціон. Грубий корм включає пасовищні трави, види сіна, силос, коренеплоди, солому і сухий корм для тварин (стебла кукурудзи).

Корм становить найбільші витрати під час вирощування тварин для одержання продуктів харчування. Таким чином, даний винахід стосується композицій і способів підвищення ефективності засвоювання корму тваринами, внаслідок чого зменшуються витрати виробництва.

КОРОТКИЙ ОПИС ВИНАХОДУ

В одному аспекті даного винаходу передбачається кормова композиція для тварин, яка містить мікробну са-амілазу. У деяких аспектах мікробна а-амілаза місить поліпептид, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з амінокислотною послідовністю під 5ЕО ІЮО МО: 1, або поліпептид, який кодується нуклеотидною послідовністю, що

Зо характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під

ЗЕО ІО МО:2, ЗЕО ІЮ МО:3, БЕО ІЮ МО:4 та/або 5ЕО ІЮ МО:5.

В іншому аспекті даного винаходу передбачається кормова композиція для тварин, яка містить рослинний матеріал, де рослинний матеріал містить рослинну експресовану гетерологічну а-амілазу. У деяких конкретних варіантах здійснення експресована гетерологічна с-амілаза кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під 5ЕО ІЮ МО:2, 5ЕО ІЮ МО:3,

ЗЕО ІЮ МО:4 та/або ЗЕО ІЮ МО:5, або містить поліпептид, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з амінокислотною послідовністю під ЗЕО ІЮ МО:1.

У даному винаході додатково передбачається кормова композиція для тварин, яка містить рослинний матеріал із трансгенної рослини або частини рослини, що містить рекомбінантну а- амілазу, яка кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під 5ЕО ІЮ МО:2, 5ЕО ІЮ МО:3,

ЗБО ІО МО:4 та/або 5ЕО ІЮ МО:5, або яка містить поліпептид, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з амінокислотною послідовністю під 5ЕО 1Ю МО:1.

В інших аспектах у даному винаході передбачається кукурудзяний раціон, який містить рослинний матеріал із трансгенної рослини кукурудзи або частини рослини, стабільно трансформованих рекомбінантною а-амілазою, яка кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під

ЗЕО І МО:2, ЗЕО ІЮ МО:3, 5ЕО ІО МО:4 та/або 5ЕО ІЮО МО:5. У додаткових аспектах даного винаходу передбачається кормова композиція для тварин, яка містить кукурудзяний раціон за даним винаходом.

У додатковому аспекті в даному винаході передбачається спосіб збільшення середньодобового приросту ваги тварини, який включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом, де середньодобовий приріст ваги тварини збільшується на величину від приблизно 0,05 фунта/доба до 10 фунтів/доба.

У додатковому аспекті даного винаходу передбачається спосіб збільшення швидкості росту (приросту ваги) тварини, який включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом, де швидкість росту тварини збільшується на величину від приблизно 0,05 фунта/доба до 10 фунтів/доба.

У додатковому аспекті даного винаходу передбачається спосіб скорочення кількості діб, необхідної для досягнення потрібної ваги у тварини, який включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом, внаслідок чого скорочується кількість діб, необхідна для досягнення потрібної ваги.

В інших аспектах передбачається спосіб підвищення ефективності засвоювання корму твариною, при цьому спосіб включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом у кількості, ефективній для підвищення ефективності засвоювання корму вказаною твариною.

Вищевказані та інші аспекти даного винаходу далі будуть описані більш докладно, беручи до уваги інші варіанти здійснення, описані у даному документі. Слід розуміти, що даний винахід можна здійснювати в різних формах, і його не слід розглядати як обмежений варіантами здійснення, викладеними у даному документі. Навпаки, дані варіанти здійснення представлені з тим, щоб дане розкриття було докладним і повним, і повністю передавало обсяг даного винаходу фахівцеві у даній галузі техніки.

ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ

Якщо контекст не визначає інше, то зокрема передбачається, що різні ознаки даного винаходу, описаного у даному документі, можна використовувати у будь-якій комбінації.

До того ж, даним винаходом також передбачається, що у деяких варіантах здійснення даного винаходу будь-яку ознаку або комбінацію ознак, викладених у даному документі, можна виключити або опустити. Для ілюстрації, якщо в описі стверджується, що композиція містить компоненти А, В і С, то це зокрема передбачає, що будь-яке з А, В або С або їх комбінації можна опустити і відхилити окремо або у будь-якій комбінації.

Якщо не вказано інше, то всі технічні та наукові терміни, які використовуються у даному документі, мають таке значення, що зазвичай є зрозумілим фахівцю в даній галузі техніки, до якої належить даний винахід. Термінологія, яка використовується у даному документі в описі даного винаходу, використовується лише для опису конкретних варіантів здійснення і не призначена для обмеження даного винаходу.

Як передбачається, використовувані в описі даного винаходу і формулі винаходу, що додається, форми однини також включають форми множини, якщо контекст явно не вказує

Зо інше.

Термін "та/або", використовуваний у даному документі, стосується й охоплює будь-яку і всі можливі комбінації з одного або декількох відповідних перелічених елементів, а також відсутність комбінацій при інтерпретації як альтернативи ("або").

Термін "приблизно", використовуваний у даному документі у випадку якщо згадується вимірювана величина, така як дозування або період часу тощо, призначений для охоплення змін певної кількості на 2095, -10 95, 595, 1 У, -0,5 95 або навіть -0,1 95 від загальної кількості (наприклад, кількості приросту ваги або корму, що дається).

Вирази, використовувані у даному документі, такі як "від Х до У" і "від приблизно Х до У", варто інтерпретувати як такі, що включають Х і У. Вирази, використовувані у даному документі, такі як "від приблизно Х до У", означають "від приблизно Х до приблизно У", Вирази, використовувані у даному документі, такі як "приблизно Х-У", означають "від приблизно Х до приблизно У."

Терміни "містять", "містить" і "який містить", використовувані у даному документі, вказують на наявність певних ознак, цілих чисел, стадій, дій, елементів та/або компонентів, але не виключають наявність або додавання однієї або декількох інших ознак, цілих чисел, стадій, дій, елементів, компонентів та/або їхніх груп.

Перехідний вираз "що складається переважно з", використовуваний у даному документі, означає, що обсяг пункту формули винаходу слід інтерпретувати як такий, що охоплює вказані матеріали або стадії, перелічені в пункті формули винаходу, а також такі, які суттєво не впливають на основну і нову характеристику(-и) заявленого винаходу. Таким чином, термін "що складається переважно з", у разі використання у пункті формули даного винаходу, не призначений для інтерпретації як еквівалент терміну "що містить".

Даний винахід стосується композицій і способів підвищення ефективності засвоювання корму тваринами, внаслідок чого зменшуються витрати виробництва. Автори даного винаходу зробили несподіване відкриття, що у тварин, яких годували кормовою композицією для тварин, яка містить мікробну а-амілазу, може спостерігатися збільшення середньодобового приросту ваги або швидкості росту, підвищення ефективності засвоювання корму або потребуватися скорочена кількість діб для досягнення потрібної ваги порівняно з тваринами, які не одержували вказану кормову композицію. 60 Відповідно, в одному аспекті даного винаходу передбачається кормова композиція для тварин, яка містить мікробну а-амілазу. У додаткових аспектах даного винаходу мікробна а- амілаза місить поліпептид, що характеризується щонайменше 8095 ідентичністю з амінокислотною послідовністю під 5ЕО ІЮ МО, або поліпептид, який кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується щонайменше 8095 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під ЗЕО ІЮО МО:2, 5ЕО ІЮ МО:3, 5ЕО ІО МО:4 та/або 5ЕО ІЮО МО:5. У деяких варіантах здійснення са-амілаза являє собою рідину. Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу кормова композиція для тварин за даним винаходом може являти собою добавку, що містить рідку мікробну а-амілазу, яку можна додавати до корму, який дають тварині.

В іншому аспекті даного винаходу передбачається кормова композиція для тварин, яка містить рослинний матеріал, при цьому рослинний матеріал містить рослинну експресовану рекомбінантну са-амілазу. У деяких конкретних варіантах здійснення експресована рекомбінантна а-амілаза кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під 5ЕО ІЮ МО:2,

ЗЕО ІЮ МО:3, 5ЕО ІЮО МО:4 та/або 5ЕО ІЮ МО:5, або містить поліпептид, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з амінокислотною послідовністю під ЗЕО ІЮ МО:1.

Таким чином, у додаткових варіантах здійснення у даному винаході додатково передбачається кормова композиція для тварин, яка містить рослинний матеріал із трансгенної рослини або частини рослини, що містить рекомбінантну с-амілазу, яка кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під зЗЕО ІЮ МО:2, ЗЕО ІЮ МО:3, ЗЕО ІЮ МО:4 та/або 5ЕО ІЮ МО:5, або яка містить поліпептид, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з амінокислотною послідовністю під 5ЕО ІЮ МО:1.

У конкретних варіантах здійснення трансгенна рослина або частина рослини можуть містити від приблизно 1 до приблизно 100 95 за вагою рослинного матеріалу. Таким чином, наприклад, трансгенна рослина або частина рослини можуть містити приблизно 1 95, 2 9, З Уо, 4 У, 5 95, боб, 790, 8905, 9595, 1095, 11 90, 1295, 13 90, 1495, 1590, 1695, 17 90, 18 95, 19 95, 20 дю, 21 9, 22 90, 23 ую, 24 6, 25 6, бю, 2 о, 28 0, 29 о, ЗО У, З1 9о, З2 Ую, 33 90, 34 У, 35 90, 36 У, 37 90, 38 У, 39 У, 40 У, 41 У, 42 У, 4З У, 44 У, 45 У, 46 У, 47 90, АВ У, 49 95, 50 У, 51 95, 52 У, 5З 90,

Коо) 54 Ув, 55 95, 56 9, 57 90, 58 У, 59 95, 60 У, 61 95, 62 У, 63 У, 64 У, 65 У, 66 У, 67 У, 68 У, 69 Об, 7095, 71 ую, 72 дю, 73 90, 74 о, 75 Уо, 76 90, 77 Чо, 79 Чо, 79 Уо, 80 У, 81 Фо, 82 90, 83 90, 84 Фо, 85 о, 86 96, 87 95, 88 У, 89 У, 90 95, 91 У, 92 У, 93 95, 94 У, 95 У, 96 95, 97 У, 98 У, 99 95, 100 95 за вагою рослинного матеріалу і т. п., або будь-який діапазон у вказаних межах. Таким чином, у деяких варіантах здійснення рослинний матеріал може передбачати один або декілька різних типів рослин. Таким чином, наприклад, рослинний матеріал може походити з рослини, в якій експресується рекомбінантна або гетерологічна (наприклад, мікробна) а-амілаза. В інших варіантах здійснення рослинний матеріал містить, складається головним чином із або складається із матеріалу з рослини, в якій експресується рекомбінантна або гетерологічна (наприклад, мікробна) а-амілаза, і матеріалу з рослини, в якій вказана рекомбінантна або гетерологічна а-амілаза не експресується (наприклад, товарної рослини). Таким чином, у деяких варіантах здійснення, у випадку якщо рослинний матеріал містить матеріал із рослини, в якій експресується рекомбінантна або гетерологічна (наприклад, мікробна) а-амілаза, і матеріал із рослини, в якій вказана рекомбінантна або гетерологічна са-амілаза не експресується (наприклад, товарної рослини), то матеріал із рослини, в якій експресується рекомбінантна або гетерологічна (наприклад, мікробна) а-амілаза, може містити від приблизно 1 95 до приблизно 99956 за вагою рослинного матеріалу, і матеріал із рослини, що не експресує вказану рекомбінантну або гетерологічну с-амілазу, може містити від приблизно 99 95 до приблизно 1 95 за вагою рослинного матеріалу.

У додаткових варіантах здійснення рослинний матеріал може становити від приблизно 5 95 до приблизно 10095 за вагою кормової композиції для тварин. Таким чином, наприклад, рослинний матеріал може становити приблизно 5 925, 6 9о, 7 Фо, 8 95, 9 90, 10 95, 11 95, 12 95, 13 9, 1495,1595,1695,17 Фо, 18 Фо, 19 95, 20 У, 21 Ую, 22 95, 23 90, 24 ую, 25 90, 26 0, 27 Чо, 28 90, 29 90,

ЗО бю, З1 У, З2 Ую, ЗЗ Ус, 34 Зв, 35 У, 36 Зо, 37 Чо, 38 У, 39 90, 40 У, 41 95, 42 У, 4З 95, 44 У, 45 90,

Аб Ус, 47 У, АВ У, 49 У, 50 Ув, 51 У, 52 У, 53 У, 54 У, 55 95, 56 У, 57 90, 58 У, 59 95, 60 Ус, 61 95, 62 Фо, 63 9, 64 Фо, 65 95, 66 У, 67 90, 68 У, 69 95, 70 У, 71 90, 72 о, /З 0, 74 о, 75 о, 76, 77 о, 78 Ув, 79 95, 80 Фо, 81 9, 82 У, 83 95, 84 Фо, 85 95, 86 9о, 87 У, 88 У, 89 Ус, 90 У, 91 Ус, 92 У, 93 У, 9495, 9595, 96 95, 97 Уо, 98 Ус, 99 ую, 100 90 за вагою кормової композиції для тварин і т. п., та/або будь-який діапазон у вказаних межах.

Корм для тварин за даним винаходом може бути в будь-якій формі, придатній для даного бо винаходу. Таким чином, у деяких варіантах здійснення форма корму для тварин може являти собою без обмеження гранули, зерно, в тому числі один або декілька типів змішаних зерен (тобто змішане зерно), суміш зерна і гранул, силос, скатаний в сухому стані, пластівці, одержані під дією пари, цільне ядро, грубо подрібнені ядра (наприклад, грубо подрібнене зерно кукурудзи), кукурудзу з високою вологістю та/або будь-яку їх комбінацію. У деяких варіантах здійснення корм для тварин може містити інші компоненти, в тому числі без обмеження грубо подрібнені ядра, вологу зернову барду, суху зернову барду, кукурудзяний силос, доповнення/рідкі доповнення, корм на основі кукурудзяної клейковини та/або подрібнене сіно.

Термін "рослинний матеріал", використовуваний у даному документі, включає будь-яку частину, в тому числі без обмеження ендосперм, зародки (зав'язь), перикарп (оболонка висівок), квітоніжку (кореневий чохлик), пилок, насінні зачатки, насіння (зерно), листя, квітки, гілки, стебла, плоди, ядра, колосся, початки, плівки, квітконіжки, коріння, кінчики коренів, пиляки, рослинні клітини, в тому числі рослинні клітини, які є інтактними в рослинах та/або частинах рослин, протопласти рослин, тканини рослин, тканинні культури рослинних клітин, калюси рослин, скупчення рослинного матеріалу тощо. Крім того, термін "рослинна клітина", використовуваний у даному документі, стосується структурної і фізіологічної одиниці рослини, яка містить клітинну стінку, а також може стосуватися протопласту. Рослинна клітина за даним винаходом може перебувати у вигляді окремої виділеної клітини, або може бути культивованою клітиною, або може бути частиною більш високоорганізованої одиниці, наприклад такої як рослинна тканина або орган рослини. "Протопласт" є виділеною рослинною клітиною, що не має клітинної стінки або має лише часткову клітинну стінку. Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу трансгенна рослина або частина рослини, які містять рекомбінантну а-амілазу, що кодується нуклеотидною послідовністю за даним винаходом, містять клітину, яка містить вказану рекомбінантну а-амілазу, що кодується нуклеотидною послідовністю за даним винаходом, де клітина являє собою клітину будь-якої рослини або частини рослини, в том числі без обмеження клітину кореня, клітину листка, клітину тканинної культури, клітину насіння, клітину квітки, клітину плоду, клітину пилку тощо. В ілюстративних варіантах здійснення рослинний матеріал може являти собою насінину або зерно.

Рослинний матеріал може походити із будь-якої рослини. У деяких варіантах здійснення рослинний матеріал походить із рослини, в якій може експресуватися рекомбінантна або

Зо гетерологічна (наприклад, мікробна) са-амілаза. Крім того, як обговорювалось у даному документі, в інших варіантах здійснення рослинний матеріал може являти собою суміш рослинного матеріалу із рослини, в якій експресується рекомбінантна або гетерологічна (наприклад, мікробна) са-амілаза, а також із рослини, в якій вказана рекомбінантна або гетерологічна а-амілаза не експресується (наприклад, товарної рослини). Таким чином, в ілюстративних варіантах здійснення рослинний матеріал може являти собою суміш рослинного матеріалу зі звичайної "товарної" рослини (наприклад, товарної кукурудзи) і рослинного матеріалу із трансгенної рослини за даним винаходом, що експресує рекомбінантну або гетерологічну а-амілазу.

Таким чином, у деяких варіантах здійснення рослинний матеріал може походити із рослини кукурудзи, рослини сорго, рослини пшениці, рослини ячменю, рослини жита, рослини вівса, рослини рису та/або рослини проса. В ілюстративних варіантах здійснення рослинний матеріал може походити із рослини кукурудзи. В інших варіантах здійснення рослинний матеріал може являти собою насінину або зерно із рослини кукурудзи. У конкретних варіантах здійснення рослинний матеріал може являти собою рослину кукурудзи, що передбачає трансформант кукурудзи 3273 див. патент США Мо 80934531.

У деяких варіантах здійснення даний винахід передбачає "загальний змішаний раціон", що містить рослинний матеріал із трансгенної рослини кукурудзи або частини рослини, стабільно трансформованих рекомбінантною а-амілазою, яка кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під

БО ЗЕО ІЮ МО:2, 5ЕО ІЮО МО:3, 5ЕО ІЮО МО:4 та/"або 5ЕО ІО МО: 5, або яка містить поліпептид, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з амінокислотною послідовністю під ЗЕО ІЮ МО:1. Термін "загальний змішаний раціон", використовуваний у даному документі, може означати 24-годинний кормовий раціон для окремої тварини, який включає, наприклад, рослинний матеріал із трансгенної рослини кукурудзи або частини рослини (наприклад, ядра кукурудзи, грубо подрібнене зерно кукурудзи тощо), доповнення і добавки (наприклад, вітаміни і мінеральні речовини) та/або "грубі корми" (наприклад, пасовищні трави, види сіна, силос, коренеплоди, солому і сухий корм для тварин (стебла кукурудзи)).

У деяких варіантах здійснення рослинний матеріал із трансгенної рослини кукурудзи або частини рослини становить від приблизно 195 до приблизно 10095 за вагою загального 60 змішаного раціону. Таким чином, наприклад, трансгенна рослина або частина рослини можуть містити приблизно 1 то, 2 то, З то, 4 96, 5 оо, (в Зо, 7 о, 8 то, 9 то, 10 то, 11 то, 12 то, 13 то, 14 55, 15 96, 16 96, 17 Ов, 18 У, 19 У, 20 У, 21 У, 22 У, 23 У, 24 9, 25 0,269, 27 о, 28 9, 29 о, ЗО 9,

З1 У, З2 У, ЗЗ Зо, 34 ув, 35 Зо, 36 Зв, 37 Ую, З8 У, 39 У, 40 95, 41 Ус, 42 95, 4З У, 44 95, 45 У, б 95,

А7 ув, АВ У, 49 У, 50 У, 51 У, 52 У, 5З Ую, 54 У, 55 У, 56 95, 57 Ую, 58 95, 59 У, 60 90, 61 Ус, 62 95, 6З Фо, 64 95, 65 У, 66 95, 67 У, 68 95, 69 У, 70 90, 71 Зою, 72, 73 о, 7/4, 75 о, бю, 77 о, 78 о, 79 Ув, 80 95, 81 Фо, 82 95, 83 Уо, 84 95, 85 У, 86 95, 87 У, 88 У, 89 У, 90 Ус, 91 У, 92 Ус, 93 У, 94 о, 95 965, 96 95, 97 Уо, 98 95, 99 95, 100 95 за вагою рослинного матеріалу і т. п., та/"або будь-який діапазон у вказаних межах.

В інших варіантах здійснення передбачається кормова композиція для тварин, яка містить загальний змішаний раціон за даним винаходом. У деяких варіантах здійснення загальний змішаний раціон може становити від приблизно 5 95 до приблизно 100 956 за вагою кормової композиції для тварин. Таким чином, наприклад, змішаний раціон може становити приблизно

Бо, бр, 7 90, 8 90, 9 Зо, 10 90, 11 У, 12 95, 13 У, 14 95, 15 У, 16 У, 17 95, 18 Ус, 19 95, 20 У, 21 95, 22 90, 23 ую, 24 6, 25 6, бю, 2 о, 28 0, 29 о, ЗО У, З1 9о, З2 Ую, 33 90, 34 У, 35 90, 36 У, 37 90, 38 У, 39 У, 40 У, 41 У, 42 У, 4З У, 44 У, 45 У, 46 У, 47 90, АВ У, 49 95, 50 У, 51 95, 52 У, 5З 90, 54 Ув, 55 95, 56 9, 57 90, 58 У, 59 95, 60 У, 61 95, 62 У, 63 У, 64 У, 65 У, 66 У, 67 У, 68 У, 69 Об, 709,71 90,72, 739, 74, 759, 76, 77 о, 78 У, 79 У, 80 У, 81 Ус, 82 Уо, 83 Ус, 84 Уо, 85 9, 86 96, 87 95, 88 У, 89 У, 90 95, 91 У, 92 У, 93 95, 94 У, 95 У, 96 95, 97 У, 98 У, 99 95, 100 95 за вагою кормової композиції для тварин і т. п., тал"або будь-який діапазон у вказаних межах. В ілюстративних варіантах здійснення загальний змішаний раціон становить приблизно 50 95 кормової композиції для тварин.

В інших додаткових варіантах здійснення даний винахід передбачає кукурудзяний раціон, який містить рослинний матеріал із трансгенної рослини кукурудзи або частини рослини, стабільно трансформованих рекомбінантною а-амілазою, яка кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з нуклеотидною послідовністю під зЗЕО ІЮ МО:2, ЗЕО ІЮ МО:3, ЗЕО ІЮ МО:4 та/або 5ЕО ІЮ МО:5, або яка містить поліпептид, що характеризується щонайменше приблизно 80 95 ідентичністю з амінокислотною послідовністю під 5ЕО ІО МО:1. Термін "кукурудзяний раціон", використовуваний в даному документі, означає добову норму кукурудзи для окремої тварини.

Зо У деяких варіантах здійснення рослинний матеріал із трансгенної рослини кукурудзи або частини рослини становить від приблизно 1 95 до приблизно 100 95 за вагою кукурудзяного раціону. Таким чином, наприклад, трансгенна рослина або частина рослини можуть містити приблизно 1 то, 2 зо, З то, 4 Зо, 5 У, (в Зо, 7 о, 8 то, 9 то, 10 то, 11 то, 12 то, 13 то, 14 то, 15 то, 16 95, 17 У, 18 У, 19 96, 20 У, 21 ув, 22 90, 23 У, 24 6, 259, 266,27 о, 28 У, 29 9, ЗО о, 31 90,

За ую, ЗЗ У, 34 Зо, 35 Ув, Зб Зо, 37 Чо, 38 У, 39 У, 40 У, 41 95, 42 У, 4З 95, 44 У, 45 95, Аб У, 47 90,

АВ У, 49 У, 50 У, 51 У, 52 Ую, 53 У, 54 У, 55 У, 56 У, 57 90, 58 У, 59 95, 60 Ус, 61 95, 62 Ус, 63 95, 64 Фо, 65 95, 66 Фо, 67 95, 68 У, 69 95, 70 У, 71 95, 72 У, 7З о, 74 о, 75 о, 76 о, 77 о, 78 Чо, 79 о, 80 Фо, 81 95, 82 У, 83 95, 84 Фо, 85 95, 86 9о, 87 95, 88 9Уо, 89 Ус, 90 У, 91 Ус, 92 У, 93 Ус, 94 У, 95 У, 96 Фо, 97 У, 98 Фо, 99 о, 100 95 за вагою рослинного матеріалу і т. п., та/або будь-який діапазон у вказаних межах.

В інших варіантах здійснення передбачається кормова композиція для тварин, яка містить кукурудзяний раціон за даним винаходом. У деяких варіантах здійснення кукурудзяний раціон може становити від приблизно 595 до приблизно 100 95 за вагою кормової композиції для тварин. Таким чином, наприклад, кукурудзяний раціон може становити приблизно 5 95, 6 95, 7 о, 890,9 9, 10 95, 11 Ув, 12 У, 13 Ув, 1495, 15 90, 16 У, 17 У, 18 У, 19 95, 20 У, 21 95, 22 У, 23 90, 24 96,2590,26 96,27 ув, 28 Ую, 29 Ув, ЗО Зв, З1 У, З2 Ую, ЗЗ 9Уо, 34 У, 35 90, 36 У, 37 90, 38 У, 39 90,

АО У, 41 У, 42 У, 4З У, 44 У, 45 У, Аб У, 47 У, АВ У, 49 95, 50 У, 51 95, 52 У, 53 95, 54 У, 55 90, 56 96, 57 95, 58 У, 59 95, 60 У, 61 95, 62 У, 63 95, 64 У, 65 У, 66 У, 67 Зо, 68 У, 69 У, 70 У, 71 У,

Та, 390, А, 7590, 76, 77 о, 78 Чо, 79 9о, 80 в, 81 Ус, 82 Уо, 83 Ус, 84 Уо, 85 Ус, 86 9о, 87 У, 88 то, 89 то, 90 то, 91 то, 92 то, 93 то, 94 то, 95 то, 96 то, 97 то, 98 то, 99 то, 100 95 за вагою кормової композиції для тварин і т. п., талабо будь-який діапазон у вказаних межах. В ілюстративних варіантах здійснення кукурудзяний раціон становить приблизно 50 95 кормової композиції для тварин.

У деяких варіантах здійснення загальний змішаний раціон може передбачати вологий корм на основі кукурудзяної клейковини, вміст якого може становити від приблизно 1095 до приблизно 40 95 за вагою кормової композиції для тварин. У додаткових варіантах здійснення загальний змішаний раціон може передбачати вологий корм на основі кукурудзяної клейковини, вміст якого може становити приблизно 10 95, 11 95, 1295, 1395, 1495, 155905, 16 90, 17 Фо, 18 9, 19 У, 20 96, 21 Ую, 22 6, 23 У, 24 в, 25 0, 266,2 о, 28 9, 29 о, 30 90, 31 У, З2 9о, ЗЗ У, 34 90, бо З5 У, 36 У, 37 Фо, 38 90, 39 У, 40 до за вагою кормової композиції для тварин.

В інших варіантах здійснення загальний змішаний раціон може передбачати модифіковану зернову барду з розчинними речовинами, вміст якої може становити від приблизно 5 95 до приблизно 25 95 за вагою кормової композиції для тварин. У додаткових варіантах здійснення загальний змішаний раціон може передбачати модифіковану зернову барду з розчинними речовинами, вміст якої може становити приблизно 5 95, б У, 7 У, 8 У, З бо, 10 95, 11 Ов, 12 9, 1395, 14 95,1595, 16 Фо, 17 90, 18 95, 19 Фо, 20 ую, 21 У, 22 У, 23 Уо, 24 90, 25 о за вагою кормової композиції для тварин.

У додаткових варіантах здійснення загальний змішаний раціон може передбачати вологу зернову барду з розчинними речовинами, вміст якої може становити від приблизно 5 95 до приблизно 25 95 за вагою кормової композиції для тварин. У додаткових варіантах здійснення загальний змішаний раціон може передбачати вологу зернову барду з розчинними речовинами, вміст якої може становити приблизно 5 95, б Зо, 7 90, 895, 9 90, 10 90, 11 У, 12 95, 13 90, 14 9, 1595, 1695,17 95,18 95,19 95, 20 9Уо, 21 ую, 22 Фо, 23 У, 24 У, 25 9Уо за вагою кормової композиції для тварин.

Різні нуклеїнові кислоти або білки, що характеризуються гомологією, називають у даному документі "гомологічними". Термін "гомолог" включає гомологічні послідовності від того самого виду та інших видів, а також ортологічні послідовності від того самого виду та інших видів. "Гомологія" стосується ступеня подібності двох або більше послідовностей нуклеїнових кислот та/або амінокислот, що виражають у вигляді процентної ідентичності положень (тобто подібності або ідентичності послідовностей). Гомологія також стосується уявлення про подібні функціональні властивості різних нуклеїнових кислот або білків. Таким чином, композиції та способи за даним винаходом додатково включають гомологи нуклеотидних послідовностей і поліпептидних послідовностей за даним винаходом (наприклад, ЗЕО ІЮ МО:1, 5ЕО ІЮ МО2,

ЗБО ІО МО:3, 5БЕО ІЮ МО 4, 5БО ІО МО:5). Термін "ортолог", використовуваний у даному документі, стосується гомологічних нуклеотидних послідовностей та/або амінокислотних послідовностей у різних видів, які походять від спільного спадкового гена під час видоутворення. Гомолог за даним винаходом характеризується значною ідентичністю послідовності (наприклад, 70 о, 75 95, 80 Уо, 81 о, 82 905, 83 У, 84 95, 85 бо, 86 Уо, 87 У, 88 Оо, 89 то, 90 зо, 91 то, 92 то, 93 то, 94 то, 95 то, 96 то, 97 то, 98 то, 99 Фо, та/або 100 Фо) із ЗЕО ІЮ МО1,

Коо) ЗЕО ІЮ МО:2, ЗЕО ІЮ МО:3, ЗЕО ІЮ МО:4 або 5ЕО ІО МО:5.

Гомолог ЗЕО ІЮ МО:1, 5ЕО ІЮ МО:2, ЗЕО ІЮ МО:3, 5ЕО ІЮО МО:4 та/або 5ЕО ІОЮО МО:5 може використовуватись з будь-якою кормовою композицією або способом за даним винаходом, окремо або в комбінації один з одним, та/або із БЕО ІЮ МО:1, БЕО ІЮ МО:2, 5ЕО ІЮ МО:3, ЗЕО

ІО МО:4 та/або 5ЕО ІО МО:5.

Термін "ідентичність послідовностей", використовуваний у даному документі, стосується ступеня інваріантності двох оптимально вирівняних послідовностей полінуклеотидів або пептидів у всьому вікні вирівнювання компонентів, наприклад нуклеотидів або амінокислот. "Ідентичність" можна легко розрахувати за допомогою відомих способів, у тому числі без обмеження описаних у: Сотриїайопа! Моїесшіаг Віоіоду (І езК, А. М., ва.) Охтога Опіметейу Ргевв5,

Мем Моїк (1988); Віосотриїййпа: Іптогтаїйс5 апа Сепоте Рго|есів (Зтій, О. МУ., ед.) Асадетіс

Ргезв, Мем Могк (1993); Сотриїег Апаїузі5 ої Зедиепсе Ваїа, Рап І (Стійіп, А. М., апа сиійіп, Н. а., вд5.) Нитапа Ргез5, Мем Уегзеу (1994); Зедиепсе Апаїузів іп МоІесшіаг Віоіоду (моп Неїпіє, С., ед.) Асадетіс Ргезв (1987); і Зедиепсе Апаїувів Ріїтег (Спірб5Ком, М. апа Оемегеих, »9., еав.)

Зіоскіоп Ргевз5, Мем Хогк (1991).

Терміни "відсоткова ідентичність послідовностей" або "відсоткова ідентичність", використовувані у даному документі, стосуються відсоткової частки ідентичних нуклеотидів у лінійній полінуклеотидній послідовності еталонної ("із запиту") молекули полінуклеотиду (або її комплементарного ланцюга) порівняно з тестовою ("їз бази даних") полінуклеотидною молекулою (або її комплементарним ланцюгом), у випадку якщо дві послідовності оптимально вирівняні. У деяких варіантах здійснення "процентна ідентичність" може відноситися до процентної частки ідентичних амінокислот в амінокислотній послідовності.

Вираз "у значній мірі ідентичні" у контексті двох молекул нуклеїнової кислоти, нуклеотидних послідовностей або білкових послідовностей стосується до двох або більше послідовностей або підпослідовностей, які характеризуються щонайменше приблизно 7095, щонайменше приблизно 7595, щонайменше приблизно 80 95, щонайменше приблизно 81 95, щонайменше приблизно 82 95, щонайменше приблизно 83 9565, щонайменше приблизно 84 95, щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 86 95, щонайменше приблизно 87 9565, щонайменше приблизно 88 95, щонайменше приблизно 89 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 96 9565, щонайменше приблизно 97 956, щонайменше 60 приблизно 98595 або щонайменше приблизно 99595 ідентичністю нуклеотидів або амінокислотних залишків при порівнянні та вирівнюванні на максимальну відповідність, яку вимірюють за допомогою одного з наступних алгоритмів порівняння послідовностей, описаних у даному документі і відомих з рівня техніки, або за допомогою візуального перегляду. У деяких варіантах здійснення даного винаходу значна ідентичність спостерігається в межах області послідовностей, довжина якої становить щонайменше від приблизно 50 залишків до приблизно 200 залишків, від приблизно 50 залишків до приблизно 150 залишків тощо. Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу значна ідентичність існує в межах області послідовностей, яка становить щонайменше приблизно 50, приблизно 60, приблизно 70, приблизно 80, приблизно 90, приблизно 100, приблизно 110, приблизно 120, приблизно 130, приблизно 140, приблизно 150, приблизно 160, приблизно 170, приблизно 180, приблизно 190, приблизно 200 або більше залишків у довжину. У додатковому варіанті здійснення послідовності є значною мірою ідентичними по всій довжині кодуючих областей. Крім того, в ілюстративних варіантах здійснення в значній мірі ідентичні нуклеотидні або білкові послідовності виконують значною мірою ту ж функцію (наприклад, с-амілазна активність). Таким чином, у деяких конкретних варіантах здійснення послідовності є значною мірою ідентичними в межах щонайменше приблизно 150 залишків і характеризуються а-амілазною активністю.

Для порівняння послідовностей, зазвичай одна послідовність виступає як еталонна послідовність, з якою порівнюють тестові послідовності. Під час використання алгоритму порівняння послідовностей тестові та еталонні послідовності вводять у комп'ютер, за необхідності задають координати підпослідовності і задають програмні параметри алгоритму порівняння послідовностей. Потім за допомогою алгоритму порівняння послідовностей обчислюють відсоток ідентичності послідовності для тестової послідовності(-ей) відносно еталонної послідовності на основі заданих параметрів програми.

Оптимальне вирівнювання послідовностей для вирівнювання у вікні порівняння добре відоме фахівцям у даній галузі техніки і може проводитися за допомогою інструментів, таких як алгоритм пошуку локальної гомології Сміта-Уотермана, алгоритм вирівнювання ділянок гомології Нідлмана-Вунша, спосіб пошуку подібності Пірсона-Ліпмана і необов'язково за допомогою комп'ютеризованих шляхів реалізації даних алгоритмів, таких як САР, ВЕ5ТРЇІТ,

ЕАЗТА Її ТЕА5ТА, доступних як частина ССО УМізсопзіп РасКадеф (Ассеїгу5 Іпс., Сан-Дієго,

Зо Каліфорнія). "Частка ідентичності" стосовно вирівняних сегментів тестової послідовності та еталонної послідовності являє собою число ідентичних компонентів, які є спільними для двох вирівняних послідовностей, поділене на загальне число компонентів у сегменті еталонної послідовності, тобто у всій еталонній послідовності або меншій певній частині еталонної послідовності. Відсоткова ідентичність послідовностей являє собою частку ідентичності, помножену на 100. Порівняння однієї або декількох полінуклеотидних послідовностей може проводитись із повнорозмірною полінуклеотидною послідовністю, або її частиною, або з полінуклеотидною послідовністю більшої довжини. Щодо цілей даного винаходу, то "відсоткову ідентичність" також можна визначати із застосуванням ВІ А5ТХ версії 2.0 для трансльованих нуклеотидних послідовностей і ВІ А5ТМ версії 2.0 для полінуклеотидних послідовностей.

Програмне забезпечення для проведення аналізів ВГА5Т є загальнодоступним завдяки

Національному центру біотехнологічної інформації. Даний алгоритм включає спочатку ідентифікацію пар послідовностей із найбільшою подібністю (НОР) шляхом ідентифікації коротких "слів" із довжиною М/ у послідовності запиту, які або збігаються, або задовольняють деякий позитивний граничний бал Т при вирівнюванні зі "словом" такої самої довжини у послідовності з бази даних. Т називається граничним показником сусіднього "слова" (Ай5сйиі єї аІ,, 1990). Ці первинні збіги сусідніх "слів" виступають як затравки для запуску пошуків для виявлення НОР більшої довжини, які їх містять. Збіги "слів" потім продовжуються в обох напрямках уздовж кожної послідовності настільки, наскільки може бути збільшений сукупний показник вирівнювання. Сукупні показники розраховують із застосуванням для нуклеотидних послідовностей параметрів М (бал, що нараховують для пари залишків, що збігаються; завжди »0) і М (штраф за залишки, що не збігаються; завжди «0). У разі амінокислотних послідовностей, для розрахунків сукупного показника використовують матрицю замін. Продовження збігів "слів" у кожному напрямку припиняється, у разі якщо сукупний показник вирівнювання знижується на величину Х від його максимального досягнутого значення, при цьому сукупний показник падає до нуля або менше внаслідок накопичення одного або декількох вирівнювань залишків із від'ємними показниками або у разі досягнення кінця однієї з послідовностей. Параметри алгоритму ВГА5Т УУ, Т і Х визначають чутливість і швидкість вирівнювання. Програма ВГАЗТМ (для нуклеотидних послідовностей) використовує за замовчуванням довжину "слова" (ММ), що становить 11, очікуване значення (Е), що становить 10, граничне значення, що становить 100, 60 М-5, М- -4, а також порівняння обох ниток. Для амінокислотних послідовностей програма

ВГАБТР використовує за замовчуванням довжину "слова" (МУ), що становить 3, очікуване значення (Е), що становить 10, а також матрицю замін ВГОБИМба2 |див. Непікоїї 5 Непікоїї, Ргос

Маї! Асад. 5сі ОБА 89: 10915 (1989)|.

Додатково до розрахунків відсоткової ідентичності послідовності алгоритм ВГА5Т також виконує статистичний аналіз подібності між двома послідовностями (див., наприклад, Капіп 5

АБС, Ргос. Маї!. Асад. осі. ОСОБА 90: 5873-5787 (1993))Ї. Однією мірою схожості, наданою алгоритмом ВІАБТ, є найменша сумарна ймовірність (Р(М)), яка передбачає показник імовірності, згідно з яким збіги між двома нуклеотидними або амінокислотними послідовностями будуть спостерігатися випадковим чином. Наприклад, тестова послідовність нуклеїнової кислоти вважається подібною до еталонної послідовності, якщо найменша сумарна ймовірність при порівнянні тестової нуклеотидної послідовності з еталонною нуклеотидною послідовністю становить від менше ніж приблизно 0,1 до менше ніж приблизно 0,001. Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу найменша сумарна ймовірність при порівнянні тестової нуклеотидної послідовності з еталонною нуклеотидною послідовністю дорівнює менше ніж приблизно 0,001.

Дві нуклеотидні послідовності також можуть вважатися значною мірою ідентичними, у випадку якщо дві послідовності гібридизуються одна з одною за жорстких умов. У деяких ілюстративних варіантах здійснення дві нуклеотидні послідовності, які вважаються в значній мірі ідентичними, гібридизуються одна з одною за дуже жорстких умов. "Жорсткі умови гібридизації" та "жорсткі умови відмивання під час гібридизації" у контексті експериментів із гібридизації нуклеїнових кислот, як наприклад Саузерн- і нозерн-гібридизація, залежать від послідовності і відрізняються при різних параметрах навколишнього середовища.

Розширений посібник із гібридизації нуклеїнових кислот можна знайти в Тіі55еп І арогаюгу

Тесппіднев іп Віоспетівігу апа Моїесшіаг Віоіоду-Нубгідіганоп м/їп Мисієїс Асіа Ргобез5 частина глава 2 "Омег/ем/ ої ргіпсіріев ої Нубгіаігайоп апа Ше зігаїеду ої писієїс асій ргобе аззаув"

ЕІбземіеї, Мем Мої (1993). Зазвичай умови гібридизації і відмивання високої жорсткості вибирають так, щоб температура була приблизно на 5 "С нижчою від точки плавлення (Тт) для конкретної послідовності за визначених йонній силі та рН.

Тт являє собою температуру (за визначених йонній силі та рН), при якій 50 95 цільової

Зо послідовності гібридизується з ідеально підібраним зондом. Для дуже жорстких умов вибирають температуру, що дорівнює Тт для конкретного зонда. Прикладом жорстких умов гібридизації для гібридизації комплементарних послідовностей нуклеотидів, які мають більше 100 комплементарних залишків на фільтрі в Саузерн- або нозерн-блоті, є 50 95 формамід із 1 мг гепарину при 42 С, причому гібридизацію здійснюють протягом ночі. Прикладом умов відмивання високої жорсткості є 0,15 М Масі при 72 "С протягом приблизно 15 хвилин.

Прикладом умов відмивання високої жорсткості є відмивання за допомогою 0,2х 55С за 65 20 протягом 15 хвилин (див. опис буфера 55С в ЗатбгооК, нижче). Для видалення фонового сигналу зонда найчастіше відмиванню в умовах високої жорсткості передує відмивання в умовах низької жорсткості. Прикладом умов відмивання середньої жорсткості для дуплекса, наприклад із більше ніж 100 нуклеотидами, є їх 55С при 45 "С протягом 15 хвилин. Прикладом умов відмивання низької жорсткості для дуплекса, наприклад із більше ніж 100 нуклеотидами, є 4-бх 552 при 40 "С протягом 15 хвилин. Для коротких зондів (наприклад, від приблизно 10 до 50 нуклеотидів) жорсткі умови зазвичай передбачають концентрації солей менше приблизно 1,0

М іонів Ма, зазвичай приблизно 0,01-1,0 М концентрації йонів Ма (або інших солей) при рН 7,0- 8,3, а також температурі зазвичай щонайменше приблизно 30 "С. Жорсткі умови також можуть бути досягнуті з додаванням дестабілізувальних засобів, таких як формамід. Загалом, співвідношення сигнал-шум, яке в 2х (або більше) рази перевищує співвідношення, що спостерігається для незв'язаного зонда під час конкретного гібридизаційного аналізу, вказує на виявлення специфічної гібридизації. Нуклеотидні послідовності, які не гібридизуються одна з одною за жорстких умов, є все ще значною мірою ідентичними, якщо білки, які вони кодують, є значною мірою ідентичними. Це може відбуватися, наприклад, у випадку якщо копія нуклеотидної послідовності створена із застосуванням максимальної виродженості кодонів, допущеної генетичним кодом.

Нижче наведено приклади комплексів умов гібридизації/відмивання, які можна застосовувати для клонування гомологічних нуклеотидних послідовностей, які є практично ідентичними еталонним нуклеотидним послідовностям (наприклад, 5ЕО ІЮ МО:2, ЗЕО ІЮО МО:3,

ЗЕО ІЮО МОС4, 5ЕО ІО МО:5). В одному варіанті здійснення еталонна нуклеотидна послідовність гібридизується з "тестовою" нуклеотидною послідовністю в 7 96 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРох, 1 мм ЕОТА при 50 2С із відмиванням у 2Х 55С, 0,1 95 505 при 50 С. В іншому 60 варіанті здійснення еталонна нуклеотидна послідовність гібридизується з "тестовою"

нуклеотидною послідовністю в 7 96 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРоО»з, 1 мМ ЕОТА при 50 еС із відмиванням в 1Х 55С, 0,195 505 при 50 "С або в 7 95 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРо», 1 мМ ЕОТА при 50 2С із відмиванням в 0,5Х 55С, 0,1 956 505 при 50 С. У ще інших додаткових варіантах здійснення еталонна нуклеотидна послідовність гібридизується з "тестовою" нуклеотидною послідовністю в 7 96 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МарРох, 1

ММ ЕОТА при 50 С із відмиванням у 0,1Х 55С, 0,195 505 при 50 С або в 795 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРо», 1 мм ЕОТА при 50 2С із відмиванням у 0,1Х 555, 0,1 96 505 при 65 20.

У конкретних варіантах здійснення ще однією ознакою того, що дві нуклеотидні послідовності або дві поліпептидні послідовності є в значній мірі ідентичними, може бути те, що білок, який кодується першою нуклеїновою кислотою, імунологічно перехресно реагує з білком, який кодується другою нуклеїновою кислотою, або специфічно зв'язується з ним. Таким чином, у деяких варіантах здійснення поліпептид може бути в значній мірі ідентичним другому поліпептиду, наприклад коли два поліпептиди відрізняються тільки консервативними замінами.

Відповідно, у деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачаються нуклеотидні послідовності, що характеризуються значною ідентичністю послідовності з нуклеотидною послідовністю під ЗЕО ІЮ МО:2, 5ЕБЕО ІЮ МО:3, 5БО ІЮО МО: 4 та/або 5БЕО ІЮ МО:5. Терміни "значна ідентичність послідовності" або "значна подібність послідовності" означають ідентичність або подібність з іншою нуклеотидною послідовністю щонайменше на приблизно 70 96, 75 о, 80 9о, 81 Уо, 82 9о, 83 о, 84 95, 85 90, 86 90, 87 9о, 88 Фо, 89 Фо, 90 9, 91 90, 92 90, 93 о, 9495, 9595, 96 90, 97 95, 9895, 99 95, та/"або 100 95. Таким чином, у додаткових варіантах здійснення терміни "значна ідентичність послідовності" або "значна подібність послідовності" означають ідентичність або подібність з іншою нуклеотидною послідовністю в діапазоні від приблизно 70 95 до приблизно 100 95, від приблизно 75 95 до приблизно 100 95, від приблизно 80 95 до приблизно 100 95, від приблизно 81 95 до приблизно 100 95, від приблизно 82 95 до приблизно 100 95, від приблизно 83 95 до приблизно 100 95, від приблизно 84 95 до приблизно 100 95, від приблизно 85 95 до приблизно 100 95, від приблизно 86 95 до приблизно 100 95, від приблизно 87 956 до приблизно 100 95, від приблизно 88 95 до приблизно 100 95, від приблизно 8995 до приблизно 100 95, від приблизно 90 95 до приблизно 100 95, від приблизно 91 95 до

Ко) приблизно 100 95, від приблизно 92 95 до приблизно 100 95, від приблизно 93 95 до приблизно 100 95, від приблизно 94 95 до приблизно 100 95, від приблизно 95 95 до приблизно 100 95, від приблизно 96 956 до приблизно 100 95, від приблизно 97 95 до приблизно 100 95, від приблизно 9895 до приблизно 100 95 та/або від приблизно 9995 до приблизно 100 95. Отже, у деяких варіантах здійснення нуклеотидна послідовність за даним винаходом являє собою нуклеотидну послідовність, що характеризується значною ідентичністю послідовності з нуклеотидною послідовністю під 5ЕО ІЮ МО:2, ЗЕО ІЮ МО:З3, ЗЕО ІЮ МО: 4 або 5ЕО ІЮ МО:5 і кодує поліпептид, який характеризується а-амілазною активністю. У деяких варіантах здійснення нуклеотидна послідовність за даним винаходом являє собою нуклеотидну послідовність, що характеризується 80-100 95 ідентичністю послідовності з нуклеотидною послідовністю під 5ЕО

ІО МО:2, ЗЕО ІЮ МО:3, ЗЕО ІЮ МО:4 або 5ЕО ІЮО МО:5 і кодує поліпептид, який характеризується а-амілазною активністю. В ілюстративних варіантах здійснення нуклеотидна послідовність за даним винаходом являє собою нуклеотидну послідовність, що характеризується 95 95 ідентичністю послідовності з нуклеотидною послідовністю під зЕО ІЮ МО:2, 5ЕО ІЮ МО:З3, 5ЕО

ІО МО:4 або 5ЗЕО ІО МО:5 і кодує поліпептид, який характеризується а-амілазною активністю.

У деяких варіантах здійснення поліпептид за даним винаходом містить, складається головним чином із або складається із амінокислотної послідовності, яка щонайменше на приблизно 70 95, наприклад, щонайменше на 70 95, 75 90, 80 Ус, 81 9, 82 Ус, 83 Ус, 84 Фо, 85 бо, 86 95, 87 95, 88 95, 89 о, 90 95, 91 95, 92 95, 93 9о, 94 95, 95 95, 96 95, 97 9о, 98 Зо, 99 90 та/або 100 95 ідентична амінокислотній послідовності під 5Е0 ІЮ МО':1 і характеризується а-амілазною активністю.

У деяких варіантах здійснення поліпептидна або нуклеотидна послідовність можуть являти собою варіант з консервативною модифікацією. Термін "варіант із консервативною модифікацією", використовуваний у даному документі, стосується поліпептидних і нуклеотидних послідовностей, що містять окремі заміни, делеції або додавання, при яких змінюється, додається або видаляється одна амінокислота або нуклеотид, або невеликий відсоток амінокислот або нуклеотидів у послідовності, при цьому зміна призводить у результаті до заміни амінокислоти на хімічно подібну амінокислоту. Таблиці консервативних замін, у яких наведені функціонально подібні амінокислоти, добре відомі в даній галузі техніки.

Як використовується в даному документі, варіант поліпептиду з консервативною бо модифікацією є біологічно активним, а отже характеризується потрібною активністю еталонного поліпептида (наприклад, а-амілазною активністю), як описано в даному документі. Варіант може виникати в результаті, наприклад, генетичного поліморфізму або дій людини. Біологічно активний варіант еталонного поліпептиду може характеризуватися щонайменше приблизно 40 95, 45 96, 50 9о, 55 Фо, 60 Фо, 65 9, 70 90, 75 Фо, 80 Фо, 85 Фо, 90 Фо, 91 9, 92 90, 93 9, 94 95, 95 90, 96 9», 97 9», 98 Фо, 99 95, або більшою ідентичністю або подібністю послідовності (наприклад, від приблизно 40 95 до приблизно 99 95 або більшої ідентичності або подібності послідовності і будь-який діапазон у вказаних межах) з амінокислотною послідовністю еталонного поліпептиду, як визначено за допомогою програм для вирівнювання послідовностей і параметрів, описаних в інших місцях даного документа. Активний варіант може відрізнятися від послідовності еталонного поліпептиду лише 1-15 амінокислотними залишками, лише 1-10, наприклад 6-10, лише 5, лише 4, 3, 2 або навіть 1 амінокислотним залишком.

Варіанти, що зустрічаються в природі, можуть існувати в популяції. Ці варіанти можна виявити за допомогою добре відомих методик молекулярної біології, таких як полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) і гібридизація, як описано нижче. Одержані синтетичним шляхом нуклеотидні послідовності, наприклад послідовності, одержані за допомогою сайт-спрямованого мутагенезу або ПЛР-опосередкованого мутагенезу, які кодують поліпептид за даним винаходом, також включені як варіанти. Заміни, додавання або делеції одного або декількох нуклеотидів або амінокислот можна вводити в нуклеотидну або амінокислотну послідовність, розкриту в даному документі, так що заміни, додавання або делеції вводяться у білок, що кодується.

Додавання (вставки) або делеції (усікання) можна здійснювати в М-кінцевій або С-кінцевій ділянках нативного білка або в одній або декількох ділянках нативного білка. Аналогічно, заміну одного або декількох нуклеотидів або амінокислот можна здійснювати в одній або декількох ділянках нативного білка.

Наприклад, консервативні амінокислотні заміни можна здійснювати за одним або кількома передбаченими, переважно несуттєвими, амінокислотними залишками. "Несуттєвий" амінокислотний залишок являє собою залишок, який можна змінити в послідовності білка дикого типу без зміни біологічної активності, тоді як "суттєва" амінокислота є необхідною для біологічної активності. "Консервативна амінокислотна заміна" є такою, при якій амінокислотний залишок заміщають амінокислотним залишком з подібним бічним ланцюгом. Родини амінокислотних залишків, які мають подібні бічні ланцюги, відомі в даній галузі техніки. Ці родини включають амінокислоти з основними бічними ланцюгами (наприклад, лізин, аргінін, гістидин), кислотними бічними ланцюгами (наприклад, аспарагінова кислота, глутамінова кислота), незарядженими полярними бічними ланцюгами (наприклад, гліцин, аспарагін, глутамін, серин, треонін, тирозин, цистеїн), неполярними бічними ланцюгами (наприклад, аланін, валін, лейцин, ізолейцин, пролін, фенілаланін, метіонін, триптофан), бета- розгалуженими бічними ланцюгами (наприклад, треонін, валін, ізолейцин) та ароматичними бічними ланцюгами (наприклад, тирозин, фенілаланін, триптофан, гістидин). Такі заміни не можуть бути здійснені щодо консервативних амінокислотних залишків або щодо амінокислотних залишків, які перебувають у консервативному мотиві, оскільки такі залишки є істотними для активності білка.

Наприклад, варіанти амінокислотної послідовності еталонного поліпептиду можна одержувати шляхом мутування нуклеотидної послідовності, що кодує фермент. Можна здійснювати рекомбінантну експресію одержаних у результаті мутантів у рослин і проводити скринінг щодо тих, у яких зберігається біологічна активність, шляхом аналізу а-амілазної активності з використанням способів, добре відомих із рівня техніки. Способи мутагенезу та змін нуклеотидної послідовності добре відомі в даній галузі техніки. Див., наприклад, КипкКеї! (1985)

Ргос. МаїЇ. Асад. осі. ОБА 82:488-492; Кипкеї еї аї. (1987) Меїйодв5 іп Епгутої. 154:367-382; і

Тесппідциез іп Моїіесціаг Віооду (УМаїКег а Сзаазіга єд5., МасМіМйап Рибіїзніпу Со. 1983) і посилання, що цитуються в них; а також патент США Ме 4873192. Зрозуміло, що мутації, здійснені в ДНК, яка кодує варіант, не повинні призводити до порушення рамки зчитування, і в результаті них переважно не будуть формуватися комплементарні області, які можуть утворювати вторинну структуру тАМА. Див. публікацію європейської патентної заявки Мо 75444.

Рекомендації щодо відповідних амінокислотних замін, які не впливають на біологічну активність білка, що представляє інтерес, можна знайти в моделі Юаупоїї єї аї. (1978) АйМав ої Ргоївїп

Зедиєпсе апа бігписіше (Національний фонд біомедичних досліджень, Вашингтон, округ

Колумбія), включеної в даний документ за допомогою посилання.

Делеції, вставки та заміни в поліпептидах, описаних у даному документі, очевидно не будуть призводити до корінних змін у характеристиках поліпептиду (наприклад, активності поліпептиду). Однак, у випадку якщо складно передбачити точний ефект заміни, делеції або бо вставки до її здійснення, то фахівець у даній галузі техніки зрозуміє, що ефект можна оцінювати за допомогою звичайних скринінгових аналізів, за допомогою яких можна здійснювати скринінг щодо певних активностей поліпептиду, що становить інтерес (наприклад, а-амілазної активності).

У деяких варіантах здійснення композиції за даним винаходом можуть містити активні фрагменти поліпептиду. Термін "фрагмент", використовуваний у даному документі, означає частину еталонного поліпептида, яка зберігає поліпептидну активність а-амілази. Фрагмент також означає частину молекули нуклеїнової кислоти, яка кодує еталонний поліпептид.

Активний фрагмент поліпептиду можна одержати, наприклад, шляхом виділення ділянки молекули нуклеїнової кислоти, що кодує поліпептид, яка експресує фрагмент поліпептиду (наприклад, за допомогою рекомбінантної експресії іп міо), і оцінки активності фрагмента.

Молекули нуклеїнової кислоти, що кодує такі фрагменти, можуть складатись із щонайменше приблизно 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, або 2200 суміжних нуклеотидів, або діапазону в указаних межах, або аж до числа нуклеотидів, наявних у повнорозмірній молекулі нуклеїнової кислоти, що кодує поліпептид. Як такі, поліпептидні фрагменти можуть складатись із щонайменше приблизно 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 525, 550, 600, 625, 650, 675, або 700 суміжних амінокислотних залишків, або будь-якого діапазону в указаних межах, або аж до загального числа амінокислотних залишків, наявних у повнорозмірному поліпептиді. Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачається поліпептид, що містить, що складається головним чином із або що складається із щонайменше приблизно 150 суміжних амінокислотних залишків поліпептиду за даним винаходом (наприклад, 5ЕО ІЮ МО 1) і який характеризується а- амілазною активністю.

Терміни "експресують", "експресує", "експресований" або "експресія" тощо, використовувані в даному документі стосовно молекули нуклеїнової кислоти та/або нуклеотидної послідовності (наприклад, РНК або ДНК), вказують на те, що молекула нуклеїнової кислоти та/або нуклеотидна послідовність транскрибуються і необов'язково транслюються. Таким чином, молекула нуклеїнової кислоти та/або нуклеотидна послідовність можуть експресувати або продукувати поліпептид, що становить інтерес, або функціональну нетрансльовану РНК.

Зо "Гетерологічна" або "рекомбінантна" нуклеотидна послідовність являє собою нуклеотидну послідовність, у природних умовах не асоційовану з клітиною-хазяїном, у яку її вводять, у тому числі множинні копії що не зустрічаються в природі, нуклеотидної послідовності, що зустрічається в природі. "Нативна" або "дикого типу" нуклеїнова кислота, нуклеотидна послідовність, поліпептид або амінокислотна послідовність стосуються тієї що зустрічається в природі, або ендогенної нуклеїнової кислоти, нуклеотидної послідовності, поліпептиду або амінокислотної послідовності.

Таким чином, наприклад, "тАМА дикого типу" являє собою тВМА, яка в природі зустрічається в організмі або є ендогенною щодо нього. "Гомологічна" послідовність нуклеїнової кислоти являє собою нуклеотидну послідовність, у природних умовах асоційовану з клітиною-хазяїном, у яку її вводять.

Також терміни "нуклеїнова кислота", "молекула нуклеїнової кислоти", "нуклеотидна послідовність" і "полінуклеотид", використовувані в даному документі, можна використовувати взаємозамінно, і вони охоплюють як РНК, так і ДНК, у тому числі СОМА, геномну ДНК, таАМА, синтетичну (наприклад, хімічно синтезовану) ДНК або РНК, а також химери РНК і ДНК. Вираз полінуклеотид, нуклеотидна послідовність або нуклеїнова кислота відноситься до ланцюга нуклеотидів, незалежно від довжини ланцюга. Нуклеїнова кислота може бути дволанцюговою або одноланцюговою. У разі одноланцюгової молекули нуклеїнова кислота може являти собою сенсову нитку або антисенсову нитку. Нуклеїнову кислоту можна синтезувати за допомогою олігонуклеотидних аналогів або похідних (наприклад, інозину або фосфотіоатних нуклеотидів).

Такі олігонуклеотиди можна використовувати, наприклад, для одержання нуклеїнових кислот, які характеризуються зміненими можливостями спарювання основ або підвищеною стійкістю до нуклеаз. Даний винахід додатково передбачає нуклеїнову кислоту, яка є комплементарною (яка може бути або повністю комплементарною, або частково комплементарною) нуклеїновій кислоті, нуклеотидній послідовності або полінуклеотиду за даним винаходом. Молекули нуклеїнової кислоти та/або нуклеотидні послідовності, надані в даному документі, представлені в даному документі в напрямку 5-3 зліва направо, і представлені із застосуванням стандартного коду для представлення нуклеотидних символів, як викладено у правилах представлення послідовностей США, розділ 37 СЕК, 551.821-1.825, і стандарті 57. 25

Всесвітньої організації інтелектуальної власності (УМІРО).

У деяких варіантах здійснення рекомбінантні молекули нуклеїнових кислот, нуклеотидні послідовності та поліпептиди за даним винаходом є "виділеними". "Виділена" молекула нуклеїнової кислоти, "виділена" нуклеотидна послідовність або "виділений" поліпептид являють собою молекулу нуклеїнової кислоти, нуклеотидну послідовність або поліпептид, який шляхом втручання людини існує окремо від свого природного середовища і, таким чином, не є природним продуктом. Виділена молекула нуклеїнової кислоти, нуклеотидна послідовність або поліпептид можуть перебувати в очищеній формі, тобто бути щонайменше частково відокремленими від щонайменше деяких інших компонентів організму або вірусу, що зустрічаються в природі, наприклад структурних компонентів клітини або вірусу або інших поліпептидів або нуклеїнових кислот, зазвичай асоційованих із полінуклеотидом. В ілюстративних варіантах здійснення виділена молекула нуклеїнової кислоти, виділена нуклеотидна послідовність та/або виділений поліпептид є чистими щонайменше на приблизно 1 Зо, 2 о, 10 то, 20 то, Зо то, 40 то, 50 то, 6о0 то, 70 то, 80 то, 90 то, 95 95 або більше.

В інших варіантах здійснення виділена молекула нуклеїнової кислоти, нуклеотидна послідовність або поліпептид можуть існувати в неприродному середовищі, наприклад такому як рекомбінантна клітина-хазяїн. Таким чином, наприклад, щодо нуклеотидних послідовностей термін "виділена" означає, що вона відокремлена від хромосоми та/або клітини, в якій вона зустрічається в природі. Полінуклеотид також є виділеним, якщо він відокремлений від хромосоми та/або клітини, в яких він зустрічається в природі, а потім вбудований у генетичне оточення, у хромосому та/або клітину, в яких він не зустрічається в природі (наприклад, іншій клітині-хазяїні, інших регуляторних послідовностях та/або іншому положенні в геномі відносно природних умов). Відповідно, рекомбінантні молекули нуклеїнової кислоти, нуклеотидні послідовності та поліпептиди, що кодуються ними, є "виділеними" у тому розумінні, що завдяки людині вони існують незалежно від свого природного середовища, а отже не є природними продуктами, однак у деяких варіантах здійснення вони можуть бути введені в рекомбінантну клітину-хазяїна та існувати в ній.

У деяких варіантах здійснення нуклеотидні послідовності та/або молекули нуклеїнової кислоти за даним винаходом можуть бути функціонально пов'язані з рядом промоторів для експресії в клітинах-хазяїнах (наприклад, рослинних клітинах). Термін "функціонально

Зо пов'язаний з", використовуваний в даному документі, при згадуванні першої послідовності нуклеїнової кислоти, яка функціонально пов'язана з другою послідовністю нуклеїнової кислоти, означає ситуацію, при якій перша послідовність нуклеїнової кислоти перебуває у функціональному взаємозв'язку із другою послідовністю нуклеїнової кислоти. Наприклад, промотор функціонально пов'язаний із кодуючою послідовністю, якщо промотор впливає на транскрипцію або експресію кодуючої послідовності. "Промотор" ДНК являє собою нетрансльовану послідовність, яка знаходиться вище кодуючої області ДНК, що містить сайт зв'язування для РНК-полімерази та ініціює транскрипцію

ДНК. "Промоторна область" може також включати в себе інші елементи, які діють як регулятори експресії генів. Промотори можуть включати в себе, наприклад, конститутивні, індуковані, регульовані в часі, регульовані в процесі розвитку, хімічно регульовані, тканинопереважні та тканиноспецифічні промотори для застосування при одержанні рекомбінантних молекул нуклеїнової кислоти, тобто химерних генів. У певних аспектах "промотор", придатний згідно з даним винаходом, є промотором, здатним ініціювати транскрипцію нуклеотидної послідовності в клітині рослини. "Химерний ген" являє собою рекомбінантну молекулу нуклеїнової кислоти, у якій промотор або інша регуляторна нуклеотидна послідовність функціонально пов'язана з нуклеотидною послідовністю, яка кодує тЕМА або яка експресується у вигляді білка таким чином, що регуляторна нуклеотидна послідовність здатна регулювати транскрипцію або експресію асоційованої нуклеотидної послідовності. Регуляторна нуклеотидна послідовність химерних генів зазвичай не є функціонально пов'язаною з асоційованою нуклеотидною послідовністю, яка зустрічається в природі.

Вибір промотору буде різним залежно від часових і просторових вимог щодо експресії, а також залежно від клітини-хазяїна, що піддається трансформації. Таким чином, наприклад, експресія нуклеотидної послідовності може відбуватися в будь-якій рослині та/або частині рослини (наприклад, у листках, у квітконіжках або стеблах, у колоссі, у суцвіттях (наприклад, колосках, волотях, початках тощо), у коренях, насінні та/або паростках тощо). Хоча, як було показано, багато промоторів із дводольних рослин функціонують в однодольних рослинах і навпаки, по можливості промотори дводольних вибирають для експресії у дводольних рослинах, а промотори однодольних вибирають для експресії в однодольних рослинах. Однак не існує будь-яких обмежень щодо походження вибраних промоторів, достатньо того, що вони є функціональними в управлінні експресією нуклеотидних послідовностей у потрібній клітині.

Промотори, придатні за даним винаходом, включають без обмеження ті, які управляють експресією нуклеотидної послідовності конститутивно, ті, які управляють експресією у разі індукції, а також ті, які управляють експресією тканиноспецифічно або специфічно щодо розвитку. Ці різноманітні типи промоторів відомі з рівня техніки.

Приклади конститутивних промоторів включають без обмеження промотор вірусу цеструму (стр) (патент США Мо 7166770), промотор гена актину-1 рису (УМапо еї аї. (1992) Мої. Сеї). Віо!. 12:3399-3406; а також патент США Мо 5641876), промотор 355 Саму (овдеї! еї а!. (1985) Маїшге 313:810-812), промотор Самм 195 (І аулоп еї аї. (1987) Ріапі Мої. Вісі. 9:315-324), промотор гена поз (Ебепт еї аї. (1987) Ргос. Маї). Асад. сі ОБА 84:5745-5749), промотор гена Аап (УмаїКег еї аї. (1987) Ргос. Маї). Асад. сі. ОБА 84:6624-6629), промотор гена сахарозосинтази (Хапд 5 КиззеїЇ (1990) Ргос. Маїй. Асад. осі. ОБА 87:4144-4148) і промотор гена убіквітину. Конститутивний промотор, одержаний із гена убіквітину, накопичується в клітинах багатьох типів. Убіквітинові промотори були клоновані з декількох видів рослин з метою застосування у трансгенних рослинах, наприклад у соняшнику (Віпеї еї аї!., 1991. Ріапі Зсієпсе 79: 87-94), маїсі (Спгієтепзеп еї а!., 1989. Ріапі Моїєс. Вісі. 12: 619-632) і арабідопсисі (Моггів еї аіІ. 1993. Ріапі Моїес. Віо|. 21:895-906). Убіквітиновий промотор маїсу (рБіР) був розроблений у трансгенних системах однодольних, і його послідовність і вектори, сконструйовані для трансформації однодольних рослин, розкриті в патентній заявці ЕР 0342926. Додатково касети експресії з промотором, описані в МеБїЇгоу єї аї. Мої. Сеп. Сепеї. 231: 150-160 (1991)), можна легко модифікувати для експресії нуклеотидних послідовностей, і вони є особливо придатними для застосування в однодольних хазяїнів.

У деяких варіантах здійснення можна застосовувати тканиноспецифічні/тканинопереважні промотори. Патерни тканиноспецифічної або тканинопереважної експресії включають без обмеження патерни експресії, специфічної або переважної щодо зелених тканин, специфічної або переважної щодо кореня, специфічної або переважної щодо стебла та специфічної або переважної щодо квітки. Промотори, які є придатними для експресії в зеленій тканині, включають в себе множину промоторів, які здійснюють регуляцію генів, що беруть участь у фотосинтезі, і багато з них були клоновані як з однодольних, так і з дводольних рослин. В одному варіанті здійснення промотор, придатний згідно з даним винаходом, являє собою промотор РЕРС маїсу з гена фосфоенолкарбоксилази (Ниазреїй 5 СзгШа, Ріапі Моїес. Віо!. 12:579-589 (1989). Необмежувальні приклади тканиноспецифічних промоторів включають промотори, асоційовані з генами, які кодують запасні білки насіння (такі як ДВ-конгліцинін, круциферин, напін і фазеолін), зеїн або білки олійних тілець (такі як олеозин) або білки, залучені в біосинтез жирних кислот (у тому числі ацилпереносний білок, стеароїл-АСР-десатуразу та десатурази жирних кислот (Тай 2-1)), та іншими нуклеїновими кислотами, які експресуються під час ембріонального розвитку (такий як Все4, див., наприклад, Кгіаї єї аї. (1991) беєай 5сі. Вев. 1:209-219; а також патент ЕР Мо 255378). Тканиноспецифічні або тканинопереважні промотори, придатні для експресії нуклеотидних послідовностей у рослин, зокрема маїсу, включають без обмеження промотори, які керують експресією в корені, серцевині стебла, листку або пилку.

Такі промотори розкриті, наприклад, в публікації згідно РСТ Мо УМО 93/07278, яка включена в даний документ за допомогою посилання в усій своїй повноті. Інші необмежувальні приклади тканиноспецифічних або тканинопереважних промоторів включають промотор гена гибівсо бавовнику, розкритий у патенті США Мо 6040504; промотор сахарозосинтази рису, розкритий у патенті США Мо 5604121; специфічний щодо кореня промотор, описаний де Егатопа (РГЕВ5 290:103-106 (1991)); у патенті ЕР 0452269, виданому Сіра-Сеїду); специфічний щодо стебла промотор, описаний у патенті США Мо 5625136 (виданий Сіра-Сеїду), і при цьому він управляє експресією гена маїсу ІгрА; і промотор вірусу жовтої кучерявості листя цеструму, розкритий в публікації згідно РСТ Мо УМО 01/73087, всі з яких включені за допомогою посилання.

Додаткові приклади тканиноспецифічних/тгканинопереважних промоторів включають без обмеження промотори, специфічні щодо кореня, НСеЗ (Чеопад еї аї. Ріапі Рнузіої. 153:185-197 (2010)| ії КВ7 (патент США Ме 5459252), промотор гена лектину (ІГіпазігот еї а!ї. (1990) Оег.

Сепеї. 311:160-167; і МодКіп (1983) Род. Сіїп. ВіоЇ. Нез. 138:87-98), промотор гена алкогольдегідрогенази 1 кукурудзи (Оеппі5 єї аіІ. (1984) Мисівїс Асід5 Вев. 12:3983-4000), 5- аденозил-і -метіонінсинтетази (ЗАМ5) (Мапаеєг Мі|пзбгидде еї аї. (1996) Ріапі апа Сеї! Рнузіоіоду, 37(8):1108-1115), промотор генів світлозбирального комплексу кукурудзи (Вапзаї єї аї. (1992)

Ргос. Маїй!. Асад. 5сі. ОБА 89:3654-3658), промотор гена білка теплового шоку кукурудзи (О'ОеїЇ еї аі. (1985) ЕМВО 3. 5:451-458; і Коспевіег єї аі. (1986) ЕМВО 3. 5:451-458), промотор гена бо малої субодиниці КиВР-карбоксилази гороху (Саб5птоге, "МисІіеаг депе5 епсодіпуд (Ше 5таї!

зурипії ої гірціозе-!, 5-різрпозрпаєе сагрохуїазе" стр. 29-39 у: Сепеїїс Епдіпеєгіпа ої Ріапів (НоїІаепдег ей., Ріепит Рге55 1983; і Роцізеп еї аі. (1986) Мої. Сеп. Сепеї. 205:193-200), промотор гена манопінсинтази Ті-плазміди (І аподгідде єї аі. (1989) Ргос. Май). Асад. бсі. ОБА 86:3219-3223), промотор гена нопалінсинтази Ті-плазміди (Іаподгідде еї аї. (1989) вище), промотор гена халконізомерази петунії (мап Типеп сеї аї!. (1988) ЕМВО 3. 7:1257-1263), промотор гена багатого на гліцин білка 1 квасолі (КеПег єї а). (1989) Сепев5 Юеєу. 3:1639-1646), промотор усіченої СамМм 355 (ООеєїЇ єї аІ. (1985) Маїшге 313:810-812), промотор гена пататина картоплі (УУепгіег єї а. (1989) Ріапі Мої. Вісі. 13:347-354), промотор з клітин коренів (Ууататоїо еї аї. (1990) Мисівїс Асіа5 Рез. 18:7449), промотор гена зеїну маїсу (Кгі єї аї. (1987) Мої. Сеп. Сепеї. 207:90-98; І апдгідде єї а!. (1983) СеїІ 34:1015-1022; Веїпа вї а!. (1990) Мисівїс Асіаз Рез. 18:6425;

Ввіпа сї а. (1990) Мисівїс Асіах Нев. 18:7449; і Умапаеєгї єї аї. (1989) Мисівїс Асіа5 Нев. 17:2354), промотор гена глобуліну-! (Веїапдег еї аї. (1991) Сепеїйсв 129:863-872), сар-промотор гена а- тубуліну (Зийймап еї аї!. (1989) Мої. Сеп. Сепеї. 215:431-440), промотор гена РЕРСази (Ниазреїй а Ста (1989) Ріапі Мої. Віо!. 12:579-589), промотори, зв'язані з комплексами Е-генів (Спапаїег еї аї. (1989) Ріапі СеїЇ 1:1175-1183), і промотори гена хальконсинтази (ЕгапКеп еї аї. (1991)

ЕМВО 9. 10:2605-2612).

Особливо придатним для експресії, специфічної для насіння, є промотор гена віциліну гороху (Сако єї а). (1992) Мої. Сбеп. Сепеї. 235:33-40; а також специфічні для насіння промотори, розкриті в патенті США Мо 5625136. У деяких варіантах здійснення промотор може являти собою промотор, специфічний щодо ендосперма, в тому числі без обмеження промотор гамма-зеїну маїсу або промотор АОР-орр маїсу.

Промотори, придатні для експресії в зрілому листку, являють собою промотори, які включаються в дію, коли починається старіння, такі як промотор ЗАС з Агарідорзів (Сап еї аї. (1995) Зсієпсе 270:1986-1988).

Окрім того, можна застосовувати промотори, що функціонують у пластидах.

Необмежувальні приклади таких промоторів включають промотор 5'-0ТЕ. гена 9 бактеріофага

ТЗ та інші промотори, розкриті в патенті США Мо 7579516. Інші промотори, придатні згідно з даним винаходом, включають без обмеження промотор 5-Е9 гена малої субодиниці КиврР- карбоксилази та промотор гена інгібітору трипсину Кунітца (КІЇїЗ).

Зо У деяких варіантах здійснення даного винаходу можна застосовувати індуковані промотори.

Таким чином, наприклад, промотори, регульовані хімічними речовинами, можна застосовувати для модуляції експресії гена в рослині шляхом використання екзогенного хімічного регулятора.

Регуляція експресії нуклеотидних послідовностей за допомогою промоторів, регульованих хімічними речовинами, забезпечує синтез поліпептидів за даним винаходом тільки тоді, коли культурні рослини обробляють індукуючими хімічними речовинами. Залежно від мети, промотор може являти собою промотор, індукований хімічною речовиною, де застосування хімічної речовини індукує експресію гена, або промотор, який пригнічується хімічною речовиною, де застосування хімічної речовини пригнічує експресію гена.

Промотори, індуковані хімічними речовинами, відомі з рівня техніки і включають без обмеження промотор Іп2-2 маїсу, який активується антидотами бензолсульфонамідних гербіцидів, промотор О5Т маїсу, який активується гідрофобними електрофільними сполуками, які застосовують як досходові гербіциди, і промотор РА-їа тютюну, який активується саліциловою кислотою (наприклад, система РКлта), стероїд-залежні промотори (див., наприклад, промотор, індукований глюкокортикоїдами, в 5спепа еї аіІ. (1991) Ргос. Маї!. Асад.

Зсі. ОБА 88, 10421-10425 і МеМеїїї5 еї аіІ. (1998) Ріапі 4. 14, 247-257) і промотори, індуковані тетрациклінами та пригнічуються тетрациклінами (див., наприклад, Саїх еї аї. (1991) Мої. Сеп.

Сепеї. 227, 229-237 і патенти США МоМо 5814618 і 5789156), промотори системи І ас-репресора, промотори системи, індукованої міддю, промотори системи, індукованої саліцилатом (наприклад, системи РК1а), промотори, індуковані глюкокортикоїдами (Аоуата еї аї. (1997)

Ріапі 9. 11:605-612), і промотори системи, індукованої екдизоном.

Інші необмежувальні приклади індукованих промоторів включають промотори, індуковані

АВА і тургорним тиском, промотор гена білка, який зв'язується з ауксином (Зспм/сь еї аї. (1993)

Ріапі 7. 4:423-432), промотор гена УДФ-глюкозофлавоноїдглікозилтрансферази (Каївіоп еї аї. (1988) Сепеїйсв 119:185-197), промотор гена інгібітора протеїнази МРІ (Согаего еї аї!. (1994) Ріапі

У. 6:141-150) ії промотор гена гліцеральдегід-3-фосфатдегідрогенази (Копіег єї аї!. (1995) Ріапі

МОЇ. ВіоІ. 29:1293-1298; Мапіпе? еї а!. (1989) 9. Мої. ВіоІ. 208:551-565; та Опідієу еї а!. (1989) ..

Мої. Емої. 29:412-421). Також включені системи, індуковані бензолсульфонамідом (патент США

Мо 5364780) та індуковані спиртами (публікації Міжнародних патентних заявок МоМо УМО 97/06269 і УМО 97/06268), а також промотори гена глутатіон-5-трансферази. Аналогічно можна 60 застосовувати будь-який індукований промотор, описаний у Саї; (1996) Сицтепі Оріпіоп

Віотесппої. 7:168-172 і Саї» (1997) Аппи. Нему. Ріапі Рпузіої. Ріапі Мої. Вісі. 48:89-108. Інші хімічно індуковані промотори, придатні для управління експресією нуклеотидних послідовностей за даним винаходом у рослин, розкриті в патенті США Мо 5614395, який включений у даний документ за допомогою посилання у всій своїй повноті. Хімічна індукція експресії генів також докладно викладена в опублікованій заявці ЕР 0332104 (виданій Сіра-Сеїду) і в патенті США Мо 5614395. У деяких варіантах здійснення промотор для хімічної індукції може являти собою промотор РЕ-1а тютюну.

Поліпептид за даним винаходом може бути або не бути націленим на ділянку в рослині шляхом застосування сигнальної послідовності. Відомо, що численні сигнальні послідовності впливають на експресію або націлювання полінуклеотиду на конкретну ділянку/тканину або за межами конкретної ділянки/тканини. Придатні сигнальні послідовності та промотори, які забезпечують націлювання, відомі в даній галузі техніки і включають без обмеження ті, що наведені в даному документі |див., наприклад, патент США Мо 7919681). Приклади мішеней включають без обмеження вакуолю, ендоплазматичний ретикулум (ЕК), хлоропласт, амілопласт, крохмальну гранулу, клітинну стінку, насіння або конкретну тканину, наприклад ендосперм. Таким чином, нуклеотидна послідовність, що кодує поліпептид за даним винаходом (наприклад, ЗЕО О МО:1), може бути функціонально пов'язана із сигнальною послідовністю для націлювання та/або збереження поліпептиду в ділянці в рослині. У деяких варіантах здійснення сигнальна послідовність може являти собою М-кінцеву сигнальну послідовність із маху, М- кінцеву сигнальну послідовність із гама-зеїну, домен, що зв'язує крохмаль, або С-кінцевий домен, що зв'язує крохмаль. У додаткових варіантах здійснення сигнальна послідовність може являти собою сигнальну послідовність ЕК, послідовність утримання ЕК, сигнальну послідовність ЕК і додаткову послідовність утримання ЕК. Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу поліпептиди а-амілази можуть бути злиті з однією або кількома сигнальними послідовностями (та/"або нуклеотидні послідовності, що кодують указані поліпептиди, можуть бути функціонально пов'язані з нуклеотидними послідовностями, що кодують указані сигнальні послідовності).

Термін "касета експресії"? використовуваний в даному документі, означає молекулу нуклеїнової кислоти, яка містить нуклеотидну послідовність, що становить інтерес (наприклад,

Ко) нуклеотидна послідовність під 5БЕО ІЮ МО:2, 5ЕО ІЮ МО:3, ЗЕО ІЮ МО:4 та/або 5ЕО ІО МО:5), де вказана нуклеотидна послідовність функціонально пов'язана щонайменше з регуляторною послідовністю (наприклад, промотором). Таким чином, у деяких варіантах здійснення за даним винаходом передбачається касета експресії розроблена для експресії нуклеотидних послідовностей під ЗЕО ІЮ МО: 2, 5ЕО ІО МО: 3, 5ЕО ІО МО: 4 та/або 5ЕО ІО МО: 5. Таким чином, наприклад, один або декілька промоторів рослин, функціонально пов'язаних з нуклеотидною послідовністю під 5БЕО ІЮ МО:2, ЗЕО ІЮО МО: 3, 5ЕО ІЮО МО:4 та/або 5ЕО ІО МО:5, або нуклеотидною послідовністю, майже ідентичною нуклеотидній послідовності під 5ЕО ІЮ

МО:2, 5ЕО ІЮ МО:3, 5ЕО ІО МО:4 та/або 5ЕО ІОЮО МО:5, може передбачатись в касеті експресії для експресії в організмі або його клітині (наприклад, рослині, частині рослини та/або рослинній клітині).

Касета експресії, яка містить нуклеотидну послідовність, що становить інтерес, може бути химерною, а це означає те, що щонайменше один з її компонентів є гетерологічним щодо щонайменше одного з інших її компонентів. Касета експресії також може являти собою послідовність, що зустрічається в природі, але яка була одержана в рекомбінантній формі, придатній для гетерологічної експресії. Однак, як правило, касета експресії є гетерологічною щодо хазяїна, тобто конкретна послідовність нуклеїнової кислоти в касеті експресії не зустрічається в природі в клітині-хазяїні, й її необхідно було ввести в клітину-хазяїна або предка клітини-хазяїна за допомогою події трансформації.

Додатково до промоторів, функціонально пов'язаних із нуклеотидною послідовністю, що експресується, касета експресії за даним винаходом може також включати в себе інші регуляторні послідовності. Термін "регуляторна послідовність", використовуваний у даному документі, означає нуклеотидну послідовність, розташовану вище (5'-ч-екодуючі послідовності), у межах та/або нижче (3'-некодуючі послідовності) кодуючої послідовності, та/або яка впливає на транскрипцію, процесинг або стабільність РНК, або трансляцію асоційованої кодуючої послідовності. Регуляторні послідовності включають без обмеження промотори, енхансери, інтрони, лідерні послідовності, що регулюють трансляцію, сигнали термінації та сигнальні послідовності поліаденілювання. У деяких варіантах здійснення касета експресії також може включати в себе нуклеотидні послідовності, кодуючі сигнальні послідовності, функціонально пов'язані з полінуклеотидною послідовністю за даним винаходом.

Для цілей даного винаходу регуляторні послідовності або області можуть бути нативними/аналогічними щодо рослини, частини рослини та/або рослинної клітини, та/або регуляторні послідовності можуть бути нативними/аналогічними щодо інших регуляторних послідовностей. Як альтернатива, регуляторні послідовності можуть бути гетерологічними щодо рослини (та/"або частини рослини, та/або рослинної клітини) та/л"або одна до одної (тобто регуляторних послідовностей). Таким чином, наприклад, промотор може бути гетерологічним, у випадку якщо він функціонально пов'язаний із полінуклеотидом від виду, відмінного від виду, від якого одержали промотор. Як альтернатива, промотор може також бути гетерологічним щодо вибраної нуклеотидної послідовності, якщо промотор одержаний від того ж самого/аналогічного виду, від якого одержаний полінуклеотид, однак один або обидва (тобто промотор та/або полінуклеотид) у значній мірі модифіковані порівняно із своєю вихідною формою та/або геномним локусом, та/або промотор не є нативним промотором щодо функціонально пов'язаного полінуклеотиду.

Як відомо, ряд нетрансльованих лідерних послідовностей, одержаних із вірусів, підсилює експресію генів. Зокрема, лідерні послідовності вірусу тютюнової мозаїки (ТММ, "Фш- послідовність"), вірусу хлоротичної плямистості маїсу (МСММУ) і вірусу мозаїки люцерни (АММ) продемонстрували ефективність щодо підсилення експресії (Сайе еї аї. (1987) Мисівїс Асійвб

Вевз.15:8693-8711; і 5Ки?езкі єї аї. (1990) Ріапії Моїес. Віої. 15:65-79). Інші лідерні послідовності, відомі у даній галузі техніки, включають без обмеження лідерні послідовності пікорнавірусів, такі як лідерна послідовність з 5'-чекодучої області вірусу енцнефаломіокардиту (ЕМСМ) (ЕїІгоу-5їеїЇп еї аІ. (1989) Ргос. Май). Асай. 5сі. ОБА 86:6126-6130); лідерні послідовності потівірусів, такі як лідерна послідовність вірусу гравірування тютюну (ТЕМ) (АЇїЇїзоп еї аї. (1986) Мігоїюду 154:9-20); лідерну послідовність вірусу карликової мозаїки маїсу (МОМУ) (Аїйі5оп еї аї. (1986), вище); лідерну послідовність білка, що зв'язується з важким ланцюгом імуноглобулінів людини (ВіР) (МасеїЇак 5 Затоми (1991) Маште 353:90-94); нетрансльовану лідерну послідовність тЕеМА білка оболонки АММ (РНК 4 АМУ; Чобіїпд 5 Сейгке (1987) Маште 325:622-625); лідерну послідовність вірусу тютюнової мозаїки ТММ (Саїе еї аї. (1989) МоїІесшаг Віооду ої АВМА 237-256) і лідерну послідовність МСММ (І оттеїі еї аї. (1991) Мігоїоду 81:382-385). Див. також ОеПа-Сіорра 6! а). (1987) Ріапі РНузіої. 84:965-968.

Зо Касета експресії також може необов'язково містити область термінації транскрипції та/або трансляції (тобто область термінації), що функціонує у рослин. Різноманітні термінатори транскрипції доступні для застосування в касетах експресії, і вони відповідають за термінацію транскрипції за межами гетерологічної нуклеотидної послідовності, що становить інтерес, і правильне поліаденілювання тЕМА. Область термінації може бути нативною щодо області ініціації транскрипції може бути нативною щодо функціонально зв'язаної нуклеотидної послідовності, що становить інтерес, може бути нативною щодо рослини-хазяїна або може бути одержаною від іншого джерела (наприклад, бути чужорідною або гетерологічною щодо промотору, нуклеотидної послідовності, що становить інтерес, рослини-хазяїна або будь-якої їхньої комбінації). Належні термінатори транскрипції включають без обмежень термінатор 355

САМУ, термінатор гена (ті, термінатор гена нопалінсинтази та/"або термінатор гена грс5-ЕЗ гороху. Їх можна застосовувати як у однодольних, так і у дводольних рослин. Додатково можна застосовувати нативний термінатор транскрипції кодуючої послідовності.

Касета експресії за даним винаходом може також містити нуклеотидну послідовність щодо селектовного маркера, який можна застосовувати для відбору трансформованої рослини, частини рослини та/або рослинної клітини. Термін "селектовний маркер", використовуваний у даному документі, означає нуклеотидну послідовність, яка при експресії надає відмінного фенотипу рослині, частині рослини та/або рослинній клітині, що експресує даний маркер, і таким чином дає змогу відрізняти ці трансформовані рослини, частини рослин та/або рослинні клітини від тих, які не мають маркера. Така нуклеотидна послідовність може кодувати або селектовний маркер, або маркер, що піддається скринінгу, залежно від того, чи надає маркер ознаку, за якою можна провести відбір за допомогою хімічних засобів, наприклад за допомогою селективного засобу (наприклад, антибіотика, гербіциду тощо), або від того, чи є маркер просто ознакою, яку можна ідентифікувати шляхом спостереження або тестування, як наприклад шляхом скринінгу (наприклад, ознакою, що визначається в К-локусі). Звісно, існує множина прикладів придатних селектовних маркерів, які відомі з рівня техніки і можуть застосовуватись у касетах експресії, описаних в даному документі.

Приклади селектовних маркерів включають без обмеження нуклеотидну послідовність, яка кодує пео або прій, що надають стійкості до канаміцину, 5418 тощо (Роїгукив еї аї. (1985) Мої.

Сеп. Сепеї. 199:183-188); нуклеотидну послідовність, яка кодує Баг, що надає стійкості до бо фосфінотрицину; нуклеотидну послідовність, яка кодує змінену 5-енолпірувілшикімат-3-

фосфатсинтазу (ЕРБР-синтазу), що надає стійкості до гліфосату (Ніпснеє есеї аї. (1988) Віоїеси. 6:915-922); нуклеотидну послідовність, яка кодує нітрилазу, таку як рхп із КіерзієПа огаєпає, що надає стійкості до бромоксинілу (ебаіКег єї а). (1988) Зсієпсе 242:419-423); нуклеотидну послідовність, яка кодує змінену ацетолактатсинтазу (АГ 5), що надає стійкості до імідазолінону, сульфонілсечовини або інших АЇ З-інгібувальних хімічних речовин (європейська патентна заявка ЕР Мо 154204); нуклеотидну послідовність, яка кодує стійку до метотрексату дигідрофолатредуктазу (ОНЕК) (Те! сеї аї. (1988) 9. Віої. Спет. 263:12500-12508); нуклеотидну послідовність, яка кодує далапондегалогеназу, що надає стійкості до далапону; нуклеотидну послідовність, яка кодує манозо-6-фосфатізомеразу (яка також називається фосфоманозоізомеразою (РМІ)), що надає здатності до метаболізму манози (патенти США МоМо 5767378 та 5994629); нуклеотидну послідовність, яка кодує змінену антранілатсинтазу, що надає стійкості до 5-метилтриптофану; та/або нуклеотидну послідовність, яка кодує При, що надає стійкості до гігроміцину. Фахівець у даній галузі здатний вибрати придатний селектовний маркер для застосування в касеті експресії за даним винаходом.

Додаткові селектовні маркери включають без обмеження нуклеотидну послідовність, яка кодує В-глюкуронідазу або ціаА (2405), що кодує фермент, для якого відомі різні хромогенні субстрати; нуклеотидну послідовність К-локусу, що кодує продукт, який регулює продукування антоціанінових пігментів (червоного кольору) у рослинних тканинах (ОеїПарогіа еї аї., "МоІесшаг сіопіпуд ої Ше таїіе В-пі аІПеїе Бу ігапзрозоп-їаддіпуд м/ййп Ас, " стор. 263-282, у Спготозоте

Бігисште апа Еипсійоп: Ітрасі ої Мем/у Сопсерів, 181й 5іадієї Сепеїїс5 бБутровішт (Сивіаївоп 5

Арре!5 ейд5., Ріепит Ргез55 1988)); нуклеотидну послідовність, яка кодує В-лактамазу, фермент, для якого відомі різні хромогенні субстрати (наприклад, РАБАС, хромогенний цефалоспорин) (Зшісійе (1978) Ргос. Маї!. Асад. сі. ОБА 75:3737-3741); нуклеотидну послідовність, яка кодує

ХУЕ, що кодує катехолдіоксигеназу (7иКкому5Ку єї аї. (1983) Ргос. Май). Асад. сі. ОБА 80:1101- 1105); нуклеотидну послідовність, яка кодує тирозиназу, фермент, здатний окислювати тирозин до ООРА і допахінону, який в свою чергу конденсується з утворенням меланіну (Каї еї аї. (1983) У. Сеп. Містобріо!. 129:2703-2714); нуклеотидну послідовність, яка кодує ВД-галактозидазу, фермент, для якого існують хромогенні субстрати; нуклеотидну послідовність, яка кодує люциферазу (Ішх), що забезпечує виявлення за допомогою біолюмінесценції (Оу єї аї. (1986)

Ко) Зсіепсе 234:856-859); нуклеотидну послідовність, яка кодує екворин, який може бути використаний у виявленні чутливої до кальцію біолюмінесценції (Ргазпег сеї аї!. (1985) Віоспет.

Віорпуб. Нев5. Сотт. 126:1259-1268); або нуклеотидну послідовність, яка кодує зелений флуоресцентний білок (Міед? еї аї. (1995) Ріапі Сеї! Рерогіз 14:403-406). Фахівець у даній галузі здатний вибрати придатний селектовний маркер для застосування в касеті експресії за даним винаходом.

В інших аспектах даного винаходу передбачається спосіб збільшення швидкості росту (приросту ваги) або середньодобового приросту ваги тварини, при цьому спосіб включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом, де швидкість росту тварини або середньодобовий приріст ваги тварини збільшується на величину від приблизно 0,05 фунта/доба до 10 фунтів/доба порівняно зі швидкістю росту контрольної тварини, якій не давали кормову композицію для тварин за даним винаходом. Таким чином, у деяких варіантах здійснення збільшення швидкості росту або середньодобового приросту ваги може складати приблизно 0,05, 0,06, 0,07,0,08,0,09,0,1,0,1, 0,125,0,15,0,175, 0,2, 0,225, 0,25, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,525, 0,55, 0,575, 0,6, 0,625, 0,65, 0,675, 0,7, 0,725, 0,75, 0,775, 0,8, 0,825, 0,85, 0,875, 0,9, 0,925, 0,95, 0,975, 1, 1,25,1,5,1,75,2,2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,25, 3,5, 3,75,4, 41, 4,2, 4,21, 4,22, А 23, 4,24, 4,25, 4,26, 4,27, 4,28, 4,29, 4,3, 4,31, 4,32, 4,33, 4,34, 4,35, 4,36, 4,37, 4,38, 4,39, 4,4, 4,41, 4,42, 4,43, 4,44, 4,45, 4,46, 4,47, 4,48, 4,49, 4,5, 4,75,5,5,25,5,5,5,75,6,6,25,6,5,6,75, 7, 7,25, 7,5, 7,75, 8, 8,25, 8,5, 8,75, 9, 9,25, 9,5, 9,75, 10 фунтів/доба тощо, та/або будь-який діапазон у вказаних межах. У деяких конкретних варіантах здійснення збільшення швидкості росту або середньодобового приросту ваги може становити від приблизно 0,05 фунта/доба до приблизно 0,5 фунта/доба. У додаткових варіантах здійснення збільшення швидкості росту або середньодобового приросту ваги може становити приблизно 0,1 фунта/доба порівняно з ростом контрольної тварини, якій не давали вказану кормову композицію для тварин.

В інших додаткових аспектах даного винаходу передбачається спосіб зменшення кількості діб, необхідної для досягнення потрібної ваги у тварини, при цьому спосіб включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом, внаслідок чого зменшується кількість діб, необхідна для досягнення потрібної ваги, порівняно з кількістю діб, необхідних для досягнення такої ж потрібної ваги у контрольної тварини, яку не годували 60 вказаною кормовою композицією для тварин.

Терміни "потрібна вага" або "потрібна остаточна вага", використовувані у даному документі, можуть означати живу вагу або вагу парної туші. Таким чином, наприклад, для великої рогатої худоби потрібна жива вага може становити від приблизно 950 до приблизно 1600 фунтів і потрібна вага парної туші може становити від приблизно 700 до приблизно 1000 фунтів.

Перед надходженням на майданчик для відгодівлі, велика рогата худоба проводить більшу частину свого життя, випасаючись на пасовищі або на випасі, а потім її транспортують на майданчик для остаточної відгодівлі, де її годують зерном та іншими кормовими концентратами.

Зазвичай, велика рогата худоба надходить на майданчик для відгодівлі з вагою, що становить від приблизно 600 до приблизно 750 фунтів. Залежно від ваги під час розміщення, умов харчування і потрібної остаточної ваги, тривалість періоду перебування на майданчику для відгодівлі може становити в діапазоні від приблизно 90 діб до приблизно 300 діб. Середній приріст може становити від приблизно 2,5 до приблизно 5 фунтів за добу.

Відповідно, в іншому аспекті даного винаходу кількість діб, необхідну для досягнення потрібної ваги у тварини, якій згодовували кормові композиції для тварин за даним винаходом, можна зменшити на величину від приблизно 1 доби до приблизно 30 діб порівняно з контрольною твариною, якій не згодовували вказану кормову композицію для тварин. У деяких варіантах здійснення кількість діб, необхідну для досягнення потрібної ваги у тварини, якій згодовували кормові композиції для тварин за даним винаходом, можна зменшити на величину від приблизно 1 доби до приблизно 25 діб, від приблизно 1 доби до приблизно 20 діб, від приблизно 5 діб до приблизно 20 діб, від приблизно 5 діб до приблизно 15 діб тощо, порівняно з контрольною твариною, якій не згодовували вказану кормову композицію для тварин. Таким чином, у деяких варіантах здійснення кількість діб, необхідну для досягнення потрібної ваги у тварини, якій згодовували кормові композиції для тварин за даним винаходом, можна зменшити на приблизно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 діб тощо, та/або будь-який діапазон у вказаних межах.

В інших аспектах даного винаходу передбачається спосіб підвищення ефективності засвоювання корму твариною, при цьому спосіб включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом у кількості, ефективній для підвищення ефективності засвоювання корму вказаною твариною порівняно з контрольною твариною, якій

Зо не згодовували вказану кормову композицію для тварин.

Ефективність засвоювання корму можна розрахувати як приріст ваги тіла тварини на кількість корму, який їй дають. У деяких варіантах здійснення вага тіла являє собою остаточну вагу тіла перед забоєм. У додаткових варіантах здійснення корм, що дається, являє собою кількість корму, яка забезпечується протягом періоду від приблизно 90 діб до приблизно 300 діб. Таким чином, у деяких варіантах здійснення корм, що дається, являє собою кількість корму, яка дається протягом періоду від приблизно 100 діб до приблизно 275 діб, від приблизно 125 діб до приблизно 250 діб, від приблизно 150 діб до приблизно 225 діб, від приблизно 180 діб до приблизно 200 діб тощо.

Відповідно, у деяких варіантах здійснення період часу (кількість діб), протягом якого вимірюють приріст ваги, становить 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 2А8, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284,

БО 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300 діб тощо, та/або будь-який діапазон у вказаних межах.

У додаткових аспектах даного винаходу кормова цінність кукурудзи для тварини підвищується на величину від приблизно 1 95 до приблизно 25 95 порівняно з контрольною твариною, якій не згодовували вказану кормову композицію для тварин. Кормова цінність дорівнює різниці коефіцієнта кормовіддачі кормової композиції за даним винаходом і коефіцієнта кормовіддачі для контрольної тварини, якій не згодовували кормову композицію за даним винаходом, розділеній на коефіцієнт кормовіддачі для вказаної контрольної тварини, якій не згодовували вказану кормову композицію, із розділенням всього на відсотковий вміст кукурудзи в указаній кормовій композиції. Відповідно, у деяких варіантах здійснення підвищення 60 кормової цінності кукурудзи може становити приблизно 1 95, 2 Ус, З 95, 4 90, 5 90, 6 У, 7 У, 8 Уо,

995,1095,11 95,12 90,13 95, 14 95, 1595, 1695, 17 У, 18 Ую, 19 Фо, 20 У, 21 Фо, 22 90, 23 90, 24 90, 2595 тощо, та/або будь-який діапазон у вказаних межах. У конкретних варіантах здійснення підвищення харчової цінності кукурудзи становить від приблизно 195 до приблизно 10 95 порівняно з контролем. В ілюстративному варіанті здійснення підвищення харчової цінності становить приблизно 5 95 порівняно з контролем.

У додаткових аспектах даного винаходу ефективність засвоювання корму твариною підвищується на величину від приблизно 0,005 до приблизно 0,1 порівняно з контрольною твариною, якій не згодовували вказану кормову композицію для тварин. Відповідно, у деяких варіантах здійснення підвищення ефективності засвоювання корму може становити приблизно 0,005, 0,006, 0,007, 0,008, 0,009,0,01,0,011, 0,012, 0,013, 0,014, 0,015, 0,016, 0,017, 0,018, 0,019, 0,02, 0,021, 0,022, 0,023, 0,024, 0,025, 0,026, 0,027, 0,028, 0,029, 0,03 тощо, та/або будь-який діапазон у вказаних межах. У конкретних варіантах здійснення підвищення ефективності засвоювання корму становить від приблизно 0,005 до приблизно 0,01 порівняно з контролем. В ілюстративному варіанті здійснення підвищення ефективності засвоювання корму становить приблизно 0,06 порівняно з контролем. Ефективність засвоювання корму, також відома як "ССЕ", являє собою середньодобовий приріст ваги, розділений на споживання твариною сухої речовини за добу.

У деяких варіантах здійснення тварині згодовують від приблизно 1 фунта до приблизно 30 фунтів кормової композиції для тварин за даним винаходом на тварину за добу. Відповідно, у деяких варіантах здійснення тварині згодовують приблизно 1 фунт, 2 фунти, З фунти, 4 фунти, 5 фунтів, 6 фунтів, 7 фунтів, 8 фунтів, У фунтів, 10 фунтів, 11 фунтів, 12 фунтів, 13 фунтів, 14 фунтів, 15 фунтів, 16 фунтів, 17 фунтів, 18 фунтів, 19 фунтів, 20 фунтів, 21 фунт, 22 фунти, 23 фунти, 24 фунти, 25 фунтів, 26 фунтів, 27 фунтів, 28 фунтів, 29 фунтів, 30 фунтів кормової композиції для тварин за даним винаходом на тварину за добу тощо, та/або будь-який діапазон в указаних межах. У деяких варіантах здійснення тварині згодовують від приблизно 9 фунтів до приблизно 21 фунта кормової композиції для тварин за даним винаходом на тварину за добу. У деяких варіантах здійснення тварині можна згодовувати кормову композицію для тварин за даним винаходом ай Ійрійшт, або від приблизно одного разу до приблизно трьох разів на добу (наприклад, 1, 2, 3), або будь-яку їх комбінацію.

Зо Кормову композицію для тварин за даним винаходом можна згодовувати будь-якій тварині, наприклад, сільськогосподарській тварині, тварині зоопарку, лабораторній тварині та/або домашній тварині. У деяких варіантах здійснення тварина може являти собою без обмеження представників бикових (наприклад, свійська велика рогата худоба (корови (наприклад, молочної та/або м'ясної породи)), бізон, буйвол), представників конячих (наприклад, кінь, віслюк, зебра тощо), представників пташиних (наприклад, курка, перепілка, індичка, качка тощо; наприклад, свійська птиця), вівцю, козу, антилопу, свиню (наприклад, домашню свиню), представників собачих, котячих, гризунів (наприклад, мишу, щура, морську свинку); кролика, рибу тощо. У деяких варіантах здійснення тварина може являти собою корову. У деяких варіантах здійснення тварина може являти собою домашню птицю. В інших варіантах здійснення тварина може являти собою курку. У додаткових варіантах здійснення тварина може являти собою свиню. У інших додаткових варіантах здійснення тварина може являти собою свиню.

У додаткових варіантах здійснення даний винахід передбачає спосіб збільшення об'єму молока від молочної тварини (наприклад, корови, кози тощо), який включає згодовування вказаній молочній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом, при цьому об'єм надою молока від указаної молочної тварини збільшується на величину від приблизно 5 95 до приблизно 200 95 порівняно з об'ємом надою молока від контрольної тварини, якій не давали вказану кормову композицію для тварин за даним винаходом. У деяких варіантах здійснення збільшення об'єму молока відбувається протягом періоду часу від приблизно 1 до приблизно 72 годин. В інших варіантах здійснення об'єм надою молока від указаної тварини збільшується на

БО величину від приблизно 25 95 до приблизно 175 95, від приблизно 50 95 до приблизно 150 95 тощо. У додаткових варіантах здійснення об'єм надою молока від указаної тварини збільшується на приблизно 5 95, 10 95, 15 95, 20 95, 25 90, 30 Зо, 35 90, 40 95, 45 90, 50 95, 55 о, бо б, 6596, 70 96, 75 6, 80 95, 8595, 90 95, 9596, 100 95, 105 95, 110 Ув, 11595, 120 95, 125 Об, 130 95, 135 У, 140 95, 145 95, 150 95, 15595, 160 У, 165 У, 170 У, 175 95, 180 Ус, 185 95, 190 95, 19595 та/або 20095 порівняно з контрольною твариною, якій не згодовували кормову композицію для тварин за даним винаходом.

Терміни "збільшувати", "збільшення", "збільшений", "підсилювати", "підсилений", "що підсилює" і "підсилення" (та їх граматичні варіанти), використовувані в даному документі, описують збільшення середньодобового приросту ваги тварини або швидкості росту (приросту бо ваги) тварини за допомогою згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом, де середньодобовий приріст ваги або швидкість росту тварини збільшені на величину від приблизно 0,05 фунта/доба до приблизно 10 фунтів/доба, або підвищення ефективності засвоювання корму твариною за допомогою згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за даним винаходом у кількості, ефективній для підвищення ефективності засвоювання корму вказаною твариною. Дане збільшення середньодобового приросту ваги, швидкості росту (приросту ваги) або ефективності засвоювання корму твариною можна визначати за допомогою порівняння середньодобового приросту ваги, швидкості росту (приросту ваги) або підвищення ефективності засвоювання корму твариною з твариною, якій не згодовували кормову композицію для тварин за даним винаходом (тобто контролем).

Терміни "зменшувати", "зменшений", "що зменшує", "зменшення", "скорочувати", "пригнічувати" і "знижувати" (та їх граматичні варіанти), використовувані в даному документі, описують, наприклад, зменшення або скорочення кількості діб, необхідної для досягнення потрібної ваги у тварини порівняно з контролем (наприклад, у контрольної тварини, якій не згодовували кормову композицію для тварин).

Даний винахід більш докладно описано в наступних прикладах, які призначені лише для ілюстрації, оскільки для фахівців у даній галузі техніки будуть очевидні їхні численні модифікації та варіації.

ПРИКЛАДИ

Експеримент 1

Триста кросбредних биків (первинна ВМУ-658236 фунтів) використовували в остаточному дослідженні на майданчику для відгодівлі в Адгісийига! Везєагсі апа Оємеіортепі Сепієї ОМ! (АВОС) біля Міда, Небраска. Великій рогатій худобі згодовували раціон в обмеженій кількості, що становила 2 95 від ВМУ, який складався із 32 95 вологої кукурудзяної зернової барди плюс розчинні речовини, 32 95 люцернового сіна, 32 95 кукурудзи сухого плющення і 4 95 добавки (основа ЮМ) протягом п'яти днів до початку експерименту. В 0-й і 1-й день реєстрували значення вихідної ваги у межах двох днів, які усереднювали і використовували як вихідний ВМУ.

Биків розділяли на блоки за ВМУ в блоки з легким, середнім і важким ВМУ (відповідно п-3, 2 і 1 повторності загонів), стратифікованим за ВМУ, і розподіляли випадковим чином до одного із 30 загонів, при цьому по загонах випадковим чином розподіляли один із п'яти раціонів для

Зо обробки. Нараховувалося 10 голів/загін і б повторностей/обробка. Раціони для обробки включали 1) комерційне джерело кукурудзи (СОМ), 2) кукурудзу Еподеп, яку тестували (ЗУМ), 3) суміш 50:50 СОМ і БУМ, 4) СОМ з вологим кормом на основі кукурудзяної клейковини (СОМ-5В) і 5) 5УМ з вологим кукурудзяним глютеновим кормом (5УМ-5В) в схемі рандомізованих блоків (таблиця 1). Биків адаптували до раціонів завершальної відгодівлі протягом 21-денного періоду, при цьому кукурудзою заміщували люцернове сіно, тоді як включення кукурудзяного силосу, вологої кукурудзяної зернової барди плюс розчинні речовини (М/ОС5) і добавка залишалися такими самими у всіх раціонах. В раціонах, що містили вологий корм на основі кукурудзяної клейковини (Змеєї Вгапф (Сагоді!!); 5В), концентрація залишалась такою самою в усіх зернових раціонах для адаптації. Раціони складали так, щоб задовольнити або перевищити вимоги МКС щодо білка і мінеральних речовин. Кінцеві раціони завершальної відгодівлі забезпечували 360 мг/бика за добу румензину (30 г/тонна ОМ) і 90 мг/бика за добу тилану (9 г/ тонна ОМ). Биків імплантували в 1-й день за допомогою Кемаїог-Х5.

Всіх биків збирали в комерційній скотобійні (Ссгеаїег Отайа РаскК, Омаха, Небраска) на 173-й день. Кінцевий живий ВУМ збирали в день забою, і для розрахунку забойного виходу застосовували 4 Фо поправку на втрату ваги. Корм, котрий давали на 173-й день, складав 50 95

ОМІ попереднього дня, і зважування здійснювали в 4:00 після полудня. Потім биків перевозили і утримували до забою на наступний день. Вагу парної туші і показники печінки реєстрували в день забою. Товщину жиру, область ІМ і оцінку мармуровості ОБОА реєстрували через 48 год. охолодження. Кінцеві ВММ, АОС і Ес розраховували із застосуванням НСУМУ, скоригованої до

БО загального забойного виходу 63 95.

Експеримент 2

Двісті сорок кросбредних биків (первинна ВУУ-634ж234 фунтів) використовували в остаточному дослідженні на майданчику для відгодівлі в РаппапаІе Кезеагсп апа Ехіепзіоп

Сепієг ОМ (РНКЕС) біля Скотсблаффа, Небраска. Протоколи обмеженої годівлі великої рогатої худоби і первинної ВМУ були такими самими, як в експ. 1. Биків розділяли на блоки за

ВУМ в блоки з легкою, середньою і важкою ВУМ, стратифікованою за ВМУ, і випадковим чином розподіляли до одного із 24 загонів, при цьому по загонах випадковим чином розподіляли один із чотирьох раціонів для обробки. Нараховувалося 10 голів на загін і б повторностей на обробку.

Раціони для обробки включали 1) СОМ, 2) БУМ, 3) суміш 4) СОМ з ферментом (Атаїе; АїйКеси, 60 Іпс.), доданим до раціону за норми 5 г/бика за добу (М2; таблиця 2). Процедури обмеженої годівлі, зважування, розділення на блоки, імлантування і зернової адаптації були такими самими як в експ. 1. Биків в блоках з важкою, середньою і легсою ВМ/ збирали в комерційній скотобійні (Сагдіїї Меаї ЗоІшіоп5, Форт Морган, Колорадо) на 148, 169 і 181-й день (відповідно).

В останній день бикам не давали корму і зважували о 8:00 до полудня перед перевезенням і забоєм в той же день. Дані аналізували як схеми рандомізованих блоків з блоком первинної ВУУ як фіксованого результату і загоном як експериментальної одиниці.

Таблиця 1

Раціони для обробки з оцінюванням тестованої кукурудзи і стандартної кукурудзи із

Змевї Вгап або без нього (експ. 1) (Комерційнакукурудза 68.0 | - | 340 | 5850 | - (Тестованакукурудзазд /--://///- | 680 | 340 | - | 5850 вмевіВгапл///////777777777111171171111 А.А 250 | 250щ мраві 77777771 150 | 1550 | 150 | щ - | -

Сечовина: 1 06 | 06 | 06 | 04 | 042 щ

Хлоридкалю 777771 0002 | 002 | 002 | щЩ - | - пан ване і яв | шко шко піддавали аналізу, 90

Р 777777771717171717171717171717111111111111о40 | 039 | 039 | 046 | 044 "Стандартна кукурудза з вологим кормом на основі кукурудзяної клейковини, Зуевї Вгап. гТестована кукурудза від Зупдепіа з вологим кормом на основі кукурудзяної клейковини,

Змевї Вгап.

ЗТестована кукурудза, одержана від Зупдепіа при процедурах відстежування походження.

Зберігали, обробляли і згодовували окремо. «Мороз - різновиди модифікованої зернової барди з розчинними речовинами.

Добавка містила 30 г/тонна румензину і 9 г/тонна тилану.

Таблиця 2

Раціони для обробки з оцінюванням тестованої кукурудзи і стандартної кукурудзи з додаванням ферменту або без нього (експ. 2)

Кукурудзаї 77771111 600 | 7-17 320 | 640 (Тестованакукурудза.ї /-/-:/ 1-1 640 177320 | щЩщ(-

Рідсеадобавка?? | 60 | 60 |. р 60 | 2 юЮщ6 " понині ви нш | як аналізу, 90

Р 11111111 054 | 031 1 032 | 0934 2Рідка добавка містила 0,6 95 сечовини, 1,6 95 Са, 0,3 95 солі, 0,02 95 хлориду калію, вітаміни і мікроелементи.

ЗРумензин (30 г/гтонна) і тилан (9 г/тонна) додавали за допомогою мікропристрою. «Фермент додавали за допомогою мікропристрою за норми 5 г/бик за добу.

Таблиця З

Вплив кукурудзяного гібрида на показники продуктивності і фізіологічного стану бика при завершальній відгодівлі та характеристики туші бика без Змеєї Вгап (експ. 1)

Не нніаніінйань; ННЯ ННЯ НИ тварини (Характеристикитуші 77777111

Продовження Таблиці З

СОМ - контрольний комерційний кукурудзяний гібрид, БУМ - кукурудзяний тестований гібрид від зупдепіа.

Суміш - 50:50 суміш СОМ і БУМ на основі ОМ.

Розрахована із НСМУ, скоригована до загального забійного виходу 63 95. »Аналізували як СЕ, зворотну величину Е:О. в6Ступінь мармуровості: 300 - легкабо, 400 - невеликасо, "Розраховували як 2,5 - (2,5 х жир на 12-ому ребрі) з (0,2 х 2,5 |КРНІ) -- (0,0038 х НСММ) - - (0,32 х область І М). а, ьСередні величини в межах ряду з відмінними верхніми індексами відрізняються (Р-0,05).

Таблиця 4

Вплив кукурудзяного гібрида і включення Зу/еєї Вгап на показники продуктивності і фізіологічного стану бика при завершальній відгодівлі та характеристики туші (експ. 1)

НЕ онко ННЯ ННЯ НОЯ НОЯ стану тварини (Характеристикитуші 77777111 95 ЗВ - раціони без Зугевї Вгап, 25 95 ЗВ - раціони, що містять 25 95 Змуевї Вгап,

СОМ - комерційний кукурудзяний гібрид, ЗУМ - тестована кукурудза від Зупдепіа. зРозрахована із НСМУ, скоригована до загального забійного виходу 63 95. «Аналізували як с:Е, зворотну величину Е:О. »Ступінь мармуровості: 300 - легкасо, 400 - невеликасо, вРозраховували як 2,5-- (2,5 х жир на 12-ому ребрі) х (0,2 х 2,5 ЇКРНІ) «- (0,0038 х НСМІ) - - (0,32 х область І М). а, БеСередні величини в межах ряду з відмінними верхніми індексами відрізняються (Р-0,05).

Таблиця 5

Вплив кукурудзяного гібрида і включення ферменту альфа-амілази на показники продуктивності і фізіологічного стану бика при завершальній відгодівлі та характеристики туші (експ. 2) речень ідйннййінніний ННЯ ННЯ ННЯ НИЖНЯ стану тварини (Характеристикитуші 77777111 (Абсцеси печінки, 96 77778393 | 500 | 0 | 533

СОМ - комерційний кукурудзяний гібрид, ЗУМ - тестована кукурудза від Зупдепіа, суміш - 50:50 суміш СОМ і БУМ на основі ОМ, МА - включення комерційно доступного ферменту альфа-амілази в раціони на основі СОМ. 23розрахована із НСМУ, скоригована до загального забійного виходу 63 95. «Аналізували як с:Е, зворотну величину Е:О. »Ступінь мармуровості: 300 - легкасо, 400 - невеликасо, брозраховували як 2,5 - (2,5 х жир на 12-ому ребрі) з (0,2 х 2,5 |КРНІ) -- (0,0038 х НСММ) - - (0,32 х область І М). а. ьСередні величини в межах ряду з відмінними верхніми індексами відрізняються (Р.-0,05).

Експеримент З 173-денне остаточне дослідження здійснювали із використанням деякої кількості кросбредних биків (вихідна ВУМ (вага тіла) - 685346 фунтів) по схемі рандомізованих блоків.

Бикам згодовували раціон в обмеженій кількості, що становила 2 95 від ВМУ, який складався із 47,5 95 люцернового сіна, 47,5 90 вологого корму на основі кукурудзяної клейковини і 595 добавки (основа ОМ (суха речовина)) протягом п'яти днів перед початком експерименту. В 0-й і 1-й день реєстрували значення дводенної вихідної ваги і усереднювали для визначення вихідної ВМУ. Поряд з вимірюванням вихідної ВУМ в 1-й день, биків імплантували за допомогою

Вемаїог-Х5. Биків розділяли на блоки за ВМУ в блоки з легкою і важкою ВМУ, стратифіковані за

ВМУ, і розподіляли випадковим чином до загону. По загонах випадковим чином розподіляли раціони для обробки з 8 головами/загін і 6 повторностями/обробка.

Раціони для обробки (таблиця б) узгоджували з факторами, в тому числі тестованою кукурудзою або контролем (Еподеп або Моп-Еподеп) і типом побічного продукту (МОС5 (різновиди модифікованої зернової барди з розчинними речовинами) або Змеєї Вгап). Побічні продукти, використовувані в даному дослідженні, забезпечували або як джерело білка (18 95

МОС5), або як засоби для контролю ацидозу (3595 5В (Змеєї ВгапФ (Сагоі!))). Биків адаптували до раціонів завершальної відгодівлі протягом 21-денного періоду з кукурудзою, яка заміщувала люцернове сіно, тоді як включення соргового силосу, Змееї Вгап або МОСЗ: і добавки залишалося таким самим в усіх раціонах. Раціони складали так, щоб задовольнити або перевищити вимоги МАС щодо білка і мінеральних речовин. Кінцеві раціони завершальної відгодівлі забезпечували 330 мг/бик за добу румензину (30 г/тонна ОМ) і 90 мг/бик за добу тилану (8,18 г/тону ОМ).

Всіх биків на 174-й день збирали в комерційній скотобійні (Ссгеаїег Отана РасК, Омаха,

Небраска). Корм, котрий давали на 173-й день, складав 5095 ОМІ попереднього дня, і зважування здійснювали в 4:00 після полудня. Потім биків перевозили в комерційну скотобійню і утримували до забою на наступний день. Значення ваги парної туші і показники печінки реєстрували в день забою, при цьому характеристики туші, такі як товщину жиру на 12-ому ребрі, область ІМ їі оцінку мармуровості ОБОВА, реєстрували через 48 г. охолодження. Оцінку виходу розраховували із застосуванням ОБОА рівняння У (у0:-2,5-42,5 (товщина жиру, дюйм) - 0,32 (область ЇМ, дюйм?) ї- 0,2 (жир КРН, 95) жї- 0,0038 (НСУМ, фунт)|. Кінцевий ВУМ, АрО (середньодобовий приріст ваги) і С:Е (співвідношення приросту ваги до корму) розраховували із застосуванням НСМУ (вага парної туші), скоригованої до загального забійного виходу 63 95.

Таблиця 6

Композиція раціону на основі ОМ, яку згодовували бикам при завершальній відгодівлі ієнт 9 (Тестованакукурудза ОВС? 695 | - /|525| | - | - | - Ї

КонтрольсвС? /-/-:/ 17177 - 1 7-1 7-1 - 1 655| - |525| - вмевіВгал///////77777777717171711- 11 - 1350| 350 - | - | 350 | з50 меш ем зернової барди плюс 18,0 18,0 18,0 18,0 розчинні речовини

Сечовина 055 | 0551) - | - | 055 | 055| - | - пн ня ви ж яв пт в жлі я який піддавали аналізу, 90

Р 77717 7 1710958 | 039 | 053 | 053 | 034 | 035 | бо | 051

Кк 77777717 171047 |048|068|068)| 045 | 045 | 066 | 066 "Моро - різновиди модифікованої зернової барди плюс розчинні речовини. 2греС - кукурудза сухого плющення. «Добавка містила 30 г/гону румензину і 9 г/тону тилану.

Таблиця 7

Вплив тестованої кукурудзи на показники продуктивності та фізіологічного стану великої рогатої худоби при завершальній відгодівлі 0 Ітосвванялурудн! Корея;

ПервиннаВУУ, фунт Ї111117177007771111717117111699 2 "рес : скатана в сухому стані кукурудза. "Розрахована із НСМУ, скоригована до загального забійного виходу 63 95. в6Ступінь мармуровості: 400 - невеликасо; 500 - помірнасо, "Розраховували як 2,5-- (2,5 х жир на 12-ому ребрі) ж (0,2 х 2,5 |КРНІ) х --(0,0038 х НОМУ) - (0,32 х область І М). а, ьСередні величини в межах ряду з відмінними верхніми індексами відрізняються (Р.-0,10).

Таблиця 8

Вплив тестованої кукурудзи і типу побічного продукту на показники продуктивності та фізіологічного стану великої рогатої худоби при завершальній відгодівлі

Дт до пос |і т іт фізіологічного стану

ПервиннаВУУ, фунт. 700. | 698 | 699 7 щ | 700 "МОоО5 - різновиди модифікованої зернової барди плюс розчинні речовини. "Розрахована із НСМУ, скоригована до загального забійного виходу 63 95. вбСтупінь мармуровості: 400 - невеликасо; 500 - помірнасо, "Розраховували як 2,5 -- (2,5 х жир на 12-ому ребрі) «ж (0,2 х 2,5 |КРНІ) -- (0,0038 х НСММ) - - (0,32 х область І М).

Вищевикладене є ілюстрацією даного винаходу і не означає його обмеження. Даний винахід визначається наступною формулою винаходу, в яку слід включати також і еквіваленти пунктів формули винаходу.

Усі публікації, заявки на патенти, власне патенти та інші посилання, процитовані в даному документі, включені за допомогою посилання у всій своїй повноті з метою пояснення ідей, які стосуються речення та/або пункту, в яких наведено дане посилання.

ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ

«1105 5УМОЕМТА РАКТІСІРАТІОМ5 ДАО

Ісавамагари, Таттісга) Китагє

Міє-пегзрооп, рамій «1295 КОРМОВІ КОМПОЗИЦІЇ ДЛЯ ТВАРИН І СПОСОБИ ЇХ ЗАСТОСУВАННЯ «130» 80783-МО-КЕС-ОКОо-Р-1 «1505 5 62/145,587 «1515 2015-84-10 «1605 5 «170» РабептІп версія 3.5 «2105 1 «211» 436 «212» Білок «213» Штучна

Зо «2205» «223» Синтетичний «4005 1

Мет АТа Гу Туг Ге бій Ге бі бі сб1у сб1у Ма! І1е Меї б1п А1а 1 5 18 15

Рпе Туг Тер Азр Маї Рго бег бІ1у с1у ІІе Тер Тер Азр Тг Пе Аг 20 25 за б1п Гуз І1е Рго сб1и Тер Туг Азр Аїа с01у І1е бег Аіа І1е Тер Пе 35 40 45

Рго Рго А1а бег Гуз с01у Меї бег с01у б1у Туг бег Меїє о1у Туг Ар ва 50

Рго Туг Азр Туг Рпе Азр Ге б1у сб1и Туг Туг біп Гуз о1у Тиг Маї 65 78 75 80 55 бі Тис Асе Рпе с1у бег ух біп бі Гей І1е Ахп Меїє ІТе Азп Тиг 85 90 95

А1а Ні5 А1а Туг с1у ІІе ух Ма! І1е Аїа Азр ІІе Маї І1е Азп Ні

166 185 116

Аге Аї1а б01у о1у Ар Гей біи Тер Азп Рго Рпе Ма! с1у Азр Туг Тиг 115 129 125

Тер Те Азр Ре бег Гуз Маї Аїа бег с1у Гуз Туг Тйг Аа Азп Туг 1308 135 140

Ге Азр Ре Ні Рго Азп бІ1и Ге Ні5 А1їа б1у Азр бег о01у Тиг Рпе 145 158 155 160 со1у о1у Туг Рго Азр ІІе Су Ні Ар Гуз бег Тгр Азр бІп Туг Тер 165 176 175

Гей Тер Аїа 5ег біп бі 5ег Туг А1ї1а Аїа Туг Ге Аге 5ег І1е с1у 188 185 199

І1е Азр А1ї1а Тер Аге Рпе Ар Туг Маї Гуз с1у Туг о1у Аа Тер Маї 195 290 295

Ммаї Гуз Азр Тгр Гей Азп Тер Тгр о1у с1у Тер Аїа Ма! о1у соїи Туг 216 215 229

Зо

Тер Азр Тис Азп Маї Азр АТа Ге Ге Азп Тгр Аїа Туг бег 5ег О1у 225 230 235 240

А1Т1а Гуз Маї Рпе Азр Рпе Рго їеи Туг Туг Гуз Меї Азр Аїа А1а Рпе 245 259 255

Азр Азп Гуз Азп І1е Рго Аїа Гей Маї б1и АТа Гей Гуз Азп с1у о1у 260 265 279

Тис Маї Маї 5ег Аге Ар Рго Рпе Гуз Аїа Ма! Тиг Ріпе Маї А1а Азп 275 2808 285

Ні Азр Тиг Азр ІТ1е І1е Тер Азп Гуз Туг Рго Аїа Туг Аїа Ре Пе 290 295 389

Гей Тйг Туг бІи с01у біп Рго Тйг І1е Рпе Туг Аге Азр Туг о1и би 305 316 315 320

Тер Гем Ахп Гуз Ар Гуз Гей Гуз Азп Ге ІІе Тер І1е Ні Ар Ап 325 339 335

ІЇец Аїа с1у сб1у бег Тйг бег І1е Ма! Туг Туг Азр 5ег Азр оїи Ме 340 345 359

І1е Рпе Маї Аг Азп б1у Туг о1у бег Гуз Рго о01у Гей ІІе Тиг Туг 355 360 365

І1е Ахп Гей б1у б5ег бег Гуз Маї о1у Аге Тгр Ма! Туг Маї Рго Гу 370 375 зва

Рпе Аїа сб1у Аї1а Сух5 І1е Ні5 б1и Туг Тпг о1у Азп Гей с1у с1у Тер 385 399 395 489

Ммаї Азр Гуз Туг Маї Туг 5ег 5ег о1у Тгр Маї Туг Геи оси Аа Рго 485 416 415

А1а Туг Азр Рго АТїа Азп с1у б1п Туг с1у Туг 5ег Ма1! Тер 5ег Туг 4209 425 430

Суз с1у Ма1! О1У 435 «2185 2

Зо «211» 1388 «2125 ДНК «213» Штучна «229»

З5 «223» Синтетичний «4005 2 асевссаавї асстввавсії вбрРаввавевс ввсвРІваєса всаврвсвії стаствевас 6о вІсссвавсв вгавесаєств віверасасс аїссевссава аваєссссва вІввтасвас 120 вссввсаєстї ссвсвасств васассвсса всЕсссаавв всаєвсссвв вееСстастсв 188 асеввстасв асссвтасва стастєсвас сІсевсвавї астассаваа вбресасевів 240 вавасвсвсї їсеввРїссаа всаврвавсіс аїсаасаєвра їсаасасввс всасвсстас 3080 весаєсаавв їсассесврра саєсвсвасс аассасареб ссевесвевсва сстврартвв 36о аасссвЕєсв ЇсеЕсваста сасстврасе вастєстсса аввісвсстс сееЕсаавтас 420 ассвссаастї асстсвастї ссассссаас вавствсасе севвсвасіс севсасвітс 480 бесввстТасс сввасаєств ссасвасаав ТсствРевасс автастевстї стревсстсв 540 саввавтїсстї асвсввсста сствсвстІсс аєсевсаєсв асвесвіввсв стЕСсвастас (512)2) вЕсаавевстї асевевссів РевІРвІсаар ваствестса астееірвРе сСеВСТВРеСВ 66а

БЕВРесваві аствевасас саасвїсвас всествстса астеввсста стсстссевс 720 вссааввєвї свастєссс сствтастас аараєсевасв севсстїсва саасааваас 788 асссевсвс ЇсвІсварвс сстваараас гєесевСасев ТеВІСТсСссв свасссвіс 840 ааввссвіва сстЕсвІїсвсС саассасвас асввасаєса сстврРаасаа втасссевсв 980 тасвсстїса ссстсасста сваврввссав сссасваєстї стассвсва стасваввав 960 "7 ТевствРааса аврвасаавстї саавгаасств аєстеваєсс асвасаасст сесеввсевс 19820 тссаставта ссвївтаста свасіссвас ваваєваєстї єсвїссвсаа севСстасевс 1980 тссаавсссв всстваїсас втасаєсаас стееРеЕсТссЕ ссаарвєевв ссесСтвРРІВ 11406 тасвтсссва авсссвссев свсвІвсатєс сасвавтаса ссевсаасстї севесевсіве 1280 вБЕввасаавї асвївтастс стссевсТве вЕстасствв аввссссввс стасвасссс 1260 7 вссаасевсс автасевста сіссеївІРе їсстТаствсе всвісевс 1308 «2105 З «2115» 2223 «2125» ДНК «213» Штучна «220»

Зо «223» Синтетичний «4005» з асевссаавї асстввавсії вбрРаввавевс ввсвРІваєса всаврвсвії стаствевас 6о

З5 вІсссвавсв вгавесаєств віверасасс аїссевссава аваєссссва вІввтасвас 120 вссввсаєстї ссвсвасств васассвсса всЕсссаавв всаєвсссвв вєвестастсв 188 асеввстасв асссвтасва стастєсвас сІсевсвавї астассаваа вбресасевів 240 7 вавасвсвсї їсеввРїссаа всаврвавсіс аїсаасаєвра їсаасасввс всасвсстас 3080 весаєсаавв їсассесврра саєсвсвасс аассасареб ссевесвевсва сстврартвв 360 аасссвЕєсв ЇсевЕсваста сасстврасе вастєстсса аввісвссіс сеесаавтас 420 ассвссаастї асстсвастї ссассссаас вавствсасе севвсвасіс севсасвітс 480 бесввстТасс сввасаєств ссасвасаав ТсствРевасс автастевстї стревсстсв 540 7 саввавтїсстї асвсевсста сствсвсТсс ассввсаєсв асесвїввсв стЕсвастас (512)2) вЕсаавевстї асевевссів РевІРвІсаар ваствестса астееірвРе сСеВСТВРеСВ 66а

БІРвгЕсСваві аствевррасас саасвісвас всествстса асіревсста стссіссевс 720 вссааввєвї свастсссс сствтастас аавраєевасв севсстІїсра саасаараас 780 ассссввсвс тсвІсваврвс сстваараас вєвесевсасев ЄввРїстсссв свасссвітс 840

Зо ааввссвіва сстЕсвІїсвсС саассасвас асввасаєса сстврРаасаа втасссевсв 980 тасвсстїса ссстсасста сваврввссав сссасваєстї стассвсва стасваввав 960 і ТеествРааса аврвасаавстї саавгаасств аєстеваєсс асвасаасстї сесервсевс 19820 тссаставта ссвївтаста свасіссвас ваваєваєстї єсвїссвсаа севСстасевс 1980 тссаавсссв всстваїсас втасаєсаас стееРеЕсТссЕ ссаарвєевв ссесСтвРРІВ 11406 тасвтсссва авсссвссев свсвІвсатс сасвавтаса ссеесаасстї севсевсіве 1280 вБЕввасаавї асвївтастс стссевсТве вЕстасствв аввссссввс стасвасссс 1260 й вссаасевсс автасевста стссвївївв тсстаствсв всвЕсвеЕсас аєсваєстест 1320 весаєсстсв аввссвасав ввісстсасс вЕсавсссст астасвссва вєвавстсатс 1380

Тссвесассе ссавевеств свравсісврас аасаєсаєвс всстсассвв сатсассевс 1440 ассвІсаасв всаєЄввасві савсвавівв вассссавса вевасаавта саєсвссвів 15806 аавтасвасв ЕвІсвасввс сеРЕврРаввсс аавесвстра асаарваввс всЕвСсаввсв 1560 7 Баввісеввс ТсссСевІРва ссеРаасаєс ссествРївв свіЕСсаєсвве саввствваа 1620

Бвавсаваавв вссссвасвії саєвєвсввсс вссассссвс авсісаєвва васввїввав 1680

Зо Бвасвіївсава СВТ СсТвСсїЇ вєрРеСсасеввс аараавраавї їсвавсвсає вссаєвавс 17406 вБссваввава автЕссссаврве саарвесесвс вссвІвРвІСсСа автєсаасес ввсвстввсв 1880 сассасаєса ТевссевсвС свасвівстс вссвісасса вссесЕТсва вссствсевс 1860 7 сІсаєсссавс Евсавевеваї всврастасева асвссствсв сствсвСсвІсС сассевівва 1920 сІсвІсваса ссаєсаєсва аресаавасс вввІїссаса ЄРевссвСсСсСТ савсвісвас 1980

Тесаасвісе ТерРавссевс вгвасвісаав ааввїввсса ссассттвса всевсвссатс 29040 аагвсевісв всасвссввс втіасваввав асерївавва аствсаєває ссавваєстс 2180

Тсстврааве вссствСссСаа ваастеввав аасвеївствс їсавсстсев вРІСВССВВС 2160 7 Бесвавссав вєвевїїваарв сваврвавасс всессесІсв ссаарвавгаа свїевссевсв 2220 сес 2223 «2105 4 «2115» 3285 «2125» ДНК «2135 Азрегві110и5 5Ппігоцзаті «400» 4 вссассссвв ссвастввся стісссавтісс аєстастєсс тсстсассва ссвсЕСсвсс 6о свсассвасв встссассас свссасствс аасассвссв ассаваавта стесевсевс 120 асстввсаврв всаїсаєсва саавстісвас тасаєссаве всасвеввстї сассвссатс 188

Теваєсассс севІвассвс ссавстсссв савассассв сстасевсва свсостассас 240 і вестастввс авсаввасає стастіссстс аасвавраасї асеввесассвс свасвасстс 3080 ааввссстстї сстссвсссІ ссасвавсес ввсаєвтасс тсасевсвва сетевіввсс 360 аассасаєвв встасвасев сессевстсс Тссвтввасії астссвівІї саавссвЕїс 420 тсстсссаве астасетсса сссвЕсствсС тссаєссава астасварва ссавасссав 480 вБЕввРаввастї встввсІсвРеЕ свасаасасс вЕвїссстсс сввасстсва сассассаав 540 й васвїввРїва аваасваврїв вбасвастве вївеввсТссс тсвЕвІссаа стасессатс (512)2) васевсстсс всаєсвасас свїрРааврсас вівесаваавв астєстевсс вевестасаас 66а ааввссевссв всвівтасів саєсввсвав вівсісвасе Тевасссввс стасасствс 720 ссвтассава асвіваєвва севесвївсТсС аастасссва єстастассс встсстсаас 780 всстЕсаавї ссасстссвв стІсваєввас васстстаса асаєваєсаа сассевєваав 840 7 Тссваствсс сввастссас сстсстсввс асстссвТІвР авраассасва саасссвсвс 980 гСсвсстссТ асассаасва сасєсвссстс вссааваасе ЄввссвсстТ сассатєсстс 960

Зо аасвасевса їсссваїсає стасвссевс сарравсавс астасессвв сееЕсаасвас 19820 ссввссаасс всваввссас ствевсЕстТсс ввстасссва ссвастссва вствтасаав 1980 сІсаєсвсстї ссвссаасвс саєссвсаас тасвссаєстї ссаарвасас севстЕсвРів 11406 7 асстасаавра астевссваї стасаарвас васассасса севссаєвсв сааврввсасс 1280 васевстссс аваєсвсвас саєсстстсс аасаарввся сстІссввсва стсстасасс 1260

СЕСТСССТСТ ССЕвСвСсСвЕ стасассвсс веЕссавсавс їсассварвї вассевствс 1320 ассассвіва ссвївРеСсІсС срасвевесаас вІвессееТвРС срасевссвР сРеССТССсВ 1380 свсвІвсСІсЇ асссвассва ваавстсвсс ввсіссаавра таєвстсстс стссаавссв 1440 7 вссассстсв асесстввсї стІссаасвавє вссассвіївв сссвсассвс саєсстсаас 15806 аасассевсв ссвасевсвс СІРЕВБЕВСІСС ввСсвссвасї ссевСАТСВІ ВРІРВССТСС 1560 ссвІссассв асаасссвва стастестас асстввассс всвастіссевв саєсвівстс 1620 аавассстсв Тввасстстї ссвсаасвевс васассвасс сстстссас сассвавсас 1680 тасаєстсст сссаввссаєт сасссаввес вївсссаасс свіссввСсва сстстсстсс 17406 7 БВСевссТсв всвавссваа вїїсаасвсе васвавасся сстасессвв стсствРевсС 1880 свсссвсавс всвасевссс ввссстссвсС вссассвсса срассевстї серессавтев 1860 стІсстІсваса асвевстасас стссвссвсс ассваваєсе ЄвїевссвсЕ свівсвСаас 1920 васстЕстсстІ асвїввссса втаствраас савассевст асвасстств вРрваврваввтв 1980 аасевстсст ссттсСтТтсас саєсессевтв савсассесе ссстсеївва вевстссесс 29040

ТСсвссассв ссвівввсСТсС стсствсТсс ТввІвсвасї сссаввсссс всаватсстс 2180

Тестасстсс автссттств вассевстсс тасаєсстсв ссаастєсва стсстсссвс 2160 "7 Тссввсааве асассаасас сстсстсввс тссаєссаса сстЕссвассс врарвссевс 2220

Тесвасвасї ссассттсса вссвївсТсс ссвсвсвссс тсвссаасса саарвагввів 2280

БЕввастсстї Єссвстссає стасассстс аасвасевсс тстссвастс сваврвссвів 2340 вБсСвТвевсс встасссврра ввастісстас тасаасевврса асссвіввіЄ сстсСтвСасс 24080 сІсвссвссв ссвавсавсї стасвасвсс сІстассавї вбервасаавса вєРестсссів 2460 7 ваваєсассв асвевіссстї свасЕєстєс ааввссстстї астссввсвс свссассевс 2520 асстасесст сстсстсстс сасстастсс тссаєсвєвї ссвссвІрРаа вассетсвсс 2580 васевсттсв вІссаєсвї вравасссас вссвсстсса асевстссстї сіссвавсав 2640 гссвасаавї ссвасввесва свавствісс всссвсвасс тсасстввіс стасвссвсс 2798 стІсстІсассв ссаасаассвя ссвсаастсс вїевРївссвсС свісстТвРев сРавасстсс 2760 7 всстТсстссв ЄвссвевСас ствСсвссвсс асстссвсст ссвесасста стсстссвів 2820 ассвтІвассї сствРвссвІс саїєсвіввсс ассевсврвса ссассассас свссассасс 2880

З5 ассевсіссв всЕвсвІвас стіссасстсс ааврассасса ссассвссіс саавгасстсс 2940 ассассасстї сстссасстс ствсассасс ссвассвссв ЄвевссвІвас стссвасстс зево ассвссасса ссасстасвв сраваасаєс тасстсвївв встссаєстс ссавстсевс зе6о 7 ваствввава сстссвасевв саєсвссстс тссвссваса автасасстс сессаасссв 3120 ссвїввтасв ївассвївас ссісссевсс ввсвРавіссї свавртасаа вІссатссвс 3180

БІвЕвавіссв асвасіссвї вравріївввав їссвасссва ассесвавта сассвївссе 3240 саввсствсв всвавсссас свссассвїв ассврасассї ввсвс 3285 «2195 5 «211» 1326 «2125 ДНК «213» Штучна «220» «223» Синтетичний «4005 5 асевсваавс астєввствс саїєвсвствв Євсавсстсс тавсевсттвІ астестствс 6о

ТСвевевСтсСсс австввссса ассссаввіс стстЕссаве ввБЕЄсааств ввавртсвве 120 аавгаавсаав Рева саастасстс стеРевсеве ТвРасвасає сессесвасв 188

БеввСссасвс асвістввсї сссвсавссв Тсвсасісвв ївевСсвСссвСа ввевтасатев 240

СССЕвССввс ТстТасвассї врасвсвісс аавтасевса сссасвсвва всЕсаавтсв 3080 сЕсассесев свіЕїссасвс саавевсвіс саврївсвісв ссвасвісвї рассаассас 360 свствсвссв астасаавва севссвсввс асстаствсв сСТЕСсварвв севСасвссс 420 васавссвсс сваствввв ссссвасаєв аєствсаврсв асвасасвса втастссаас 480

БеБСесеввС ассевсвасас вєввввссвас ТЕсвсСсвсСсв свсссвасає свассасстс 540 аасссвсвсв ївсавсавва всЕстсввас твевстсаасї ввстсаавтс свасстсевс (512)2)

ТЕсвасевсї весвссІсва стСсвссаав вестастссв ссвссвісвсС сааввтвтас 66а вЕсвасавса ссвсссссас сеЄсвЕсвІсС вссваватаїєї вєвавстссст ссастасвас 720 весаасевсв авссвіссав саассарвас вссвасарвс аввавствві саастеввсе 780 саресевІРв ВСЕВССССВС СсеСевСсВІЇС вастєсасса ссааревсвї всЕвсаввсв 840 вссвіссавв всвавсівів весвсасраар вгасевсаасе всааввсвсс севвватсватс 980

Зо БЕСТЕВСІвсС сеБаврааввс свісасвіїс вісвасаасс асрасассвв стіссасвсав 960 аасесвсввс саєсєсссстс свасааввїс асвсавевсї асвсстатає сстсасвсас 19820 ссавваастс сасвсаєсеї стасвассас вет срасї враасстраа всаврваватс 1980 авсвсвсівї ствсеРІвар вБісаарааас ввваїєссасс севврРавсва вствРаасатс 11406 сІсвссвссв асевеваєсі стасвісвсс ааваєсвасе асааввїсає сеЕвааватс 1280 веЕвЕсасеві асвасвїсев ваасстваїс ссстсавраст тссасевссвї Євсссстввс 1260 аасаастасї весвБїЕсїРерРа раавсасевї стРававссїс саврсевевсв всассастав 1320

Claims

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Кормова композиція для тварин, яка містить матеріал трансгенної рослини кукурудзи, що включає гранули кукурудзи, зерно кукурудзи, силос кукурудзи, ядра кукурудзи сухого плющення, пластівці із ядер кукурудзи, одержані під дією пари, цільні ядра кукурудзи, грубоподрібнені ядра кукурудзи, кукурудзу з високою вологістю або будь-яку їх комбінацію, де матеріал трансгенної рослини кукурудзи містить рекомбінантну а-амілазу, та де рекомбінантна с-амілаза містить поліпептид, що характеризується щонайменше 95 95 сгомологією з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ МО:1

2. Кормова композиція для тварин за п. 1, де матеріал трансгенної рослини кукурудзи становить від 1 до 100 95 за вагою кормової композиції для тварин, де необов'язково матеріал трансгенної рослини кукурудзи становить від 5 до 100 95 за вагою кормової композиції для тварин.

З. Кормова композиція для тварин за п. 1 або 2, де рекомбінантна с-амілаза націлена на органелу, вибрану із групи, що складається з хлоропласту, вакуолі, цитоплазми, апопласту та ендоплазматичного ретикулуму.

4. Кормова композиція для тварин за будь-яким із пп. 1-3, де кукурудза передбачає бо трансформант кукурудзи 3272.

5. Кормова композиція для тварин за будь-яким із пп. 1-4, де тварина являє собою сільськогосподарську тварину, тварину зоопарку та/"або домашню тварину.

6. Спосіб збільшення середньодобового приросту ваги тварини, який включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за будь-яким із пп. 1-5, при цьому середньодобовий приріст ваги тварини збільшується на величину від 0,0227 до 4,536 кг/добу.

7. Спосіб підвищення ефективності засвоювання корму твариною, який включає згодовування вказаній тварині кормової композиції для тварин за будь-яким із пп. 1-5 у кількості, ефективній для підвищення ефективності засвоювання корму вказаною твариною.

8. Спосіб за п. 7, де ефективність засвоювання корму твариною підвищується на величину від 1 до25 95.

9. Спосіб за будь-яким із пп. 6-8, де тварина являє собою ссавця, птаха або рибу.

10. Спосіб за п. 9, де ссавець є представником бичачих, вівцею, козою або свинею, або птах являє собою курку, індичку, перепілку або качку.

11. Спосіб збільшення об'єму надою молока від молочної тварини, такої як корови або кози, який включає згодовування вказаній молочній тварині кормової композиції для тварин за будь- яким із пп. 1-5, при цьому об'єм надою молока від вказаної молочної тварини збільшується на величину від 5 до 200 95 порівняно з об'ємом надою молока від контрольної тварини, якій не давали вказану кормову композицію для тварин.