UA124522C2 - Спосіб кількісної оцінки рівнів простатичного антигену - Google Patents
Спосіб кількісної оцінки рівнів простатичного антигену Download PDFInfo
- Publication number
- UA124522C2 UA124522C2 UAA201709438A UAA201709438A UA124522C2 UA 124522 C2 UA124522 C2 UA 124522C2 UA A201709438 A UAA201709438 A UA A201709438A UA A201709438 A UAA201709438 A UA A201709438A UA 124522 C2 UA124522 C2 UA 124522C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- antigen
- prostate
- prostate antigen
- kit
- titer
- Prior art date
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 320
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 320
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 320
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 title claims abstract description 186
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 63
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 claims abstract description 15
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 claims description 49
- 102100038358 Prostate-specific antigen Human genes 0.000 claims description 49
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 48
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 37
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 37
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 24
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 23
- 238000011002 quantification Methods 0.000 claims description 22
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- 102100038356 Kallikrein-2 Human genes 0.000 claims description 11
- 101710176220 Kallikrein-2 Proteins 0.000 claims description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 9
- 229910052747 lanthanoid Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 150000002602 lanthanoids Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 8
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 claims description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 claims description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 6
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 6
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 claims description 6
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 claims description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 claims description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 2
- 230000036765 blood level Effects 0.000 claims 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 52
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 33
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 18
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 17
- 239000010421 standard material Substances 0.000 description 12
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 11
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 239000012482 calibration solution Substances 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 4
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 3
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 229910052693 Europium Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 2
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N europium atom Chemical group [Eu] OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 2
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 101100295884 Aedes aegypti SGPRor7 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000007698 Alcohol dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 101150041122 Orco gene Proteins 0.000 description 1
- 206010072353 Painful ejaculation Diseases 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 229910052772 Samarium Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 229910052771 Terbium Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000448053 Toya Species 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002967 competitive immunoassay Methods 0.000 description 1
- AEBZCFFCDTZXHP-UHFFFAOYSA-N europium(3+);oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[Eu+3].[Eu+3] AEBZCFFCDTZXHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N iron(II,III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]O[Fe]=O SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920005597 polymer membrane Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000575 proteomic method Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZUNJOHGWZRPMI-UHFFFAOYSA-N samarium atom Chemical compound [Sm] KZUNJOHGWZRPMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- GZCRRIHWUXGPOV-UHFFFAOYSA-N terbium atom Chemical compound [Tb] GZCRRIHWUXGPOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57434—Specifically defined cancers of prostate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6445—Kallikreins (3.4.21.34; 3.4.21.35)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
- G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
- G01N2333/96425—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals
- G01N2333/96427—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general
- G01N2333/9643—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general with EC number
- G01N2333/96433—Serine endopeptidases (3.4.21)
- G01N2333/96441—Serine endopeptidases (3.4.21) with definite EC number
- G01N2333/96455—Kallikrein (3.4.21.34; 3.4.21.35)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2496/00—Reference solutions for assays of biological material
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Винахід стосується способу визначення рівнів простатичного антигену, комплекту для виявлення простатичного антигену та способу приготування стандартів простатичного антигену для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену у зразку.
Description
(54) СПОСІБ КІЛЬКІСНОЇ ОЦІНКИ РІВНІВ ПРОСТАТИЧНОГО АНТИГЕНУ (57) Реферат:
Винахід стосується способу визначення рівнів простатичного антигену, комплекту для виявлення простатичного антигену та способу приготування стандартів простатичного антигену для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену у зразку.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
Підвищені рівні загального простат-специфічного антигену (ПСА) у крові мають стосунок до розладів, пов'язаних з передміхуровою залозою, включаючи рак передміхурової залози. Є численні докази того, що вимірювання рівнів ізоформ ПСА окремо у поєднанні з вимірюванням рівня людського калікреїну 2 (лК2) веде до вдосконалення прогнозів, що стосуються наявності у суб'єкта раку передміхурової залози. Зазвичай в аналізах для вимірювання підвищених рівнів простатичних антигенів, таких як ізоформи ПСА і лК2, для кількісного визначення рівнів простатичного антигена використовують калібрувальні криві за антигеном.
Короткий опис винаходу
Аспекти розкритої тут інформації стосуються усвідомлення того, що використовувані наразі для простатичних аналізів стандарти потребують використання великих кількостей простатичних антигенів, що не ефективно з точки зору витрат. Більше того, широкий діапазон концентрацій, охоплюваний стандартами у наразі використовуваних аналізах, може призвести до неточної кількісної оцінки концентрації антигену, оскільки діапазони стандартів не налаштовані належним чином на кількості антигену, наявні у типовому клінічному зразку. Тому було визнано потребу у нових стандартах, які є ефективними з точки зору витрат і забезпечують підвищену точність кількісної оцінки рівня антигену.
Багато аналізів для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену спираються на порівняння виявленого антигенного сигналу з набором значень, одержаних від набору стандартних концентрацій антигену. Однак використовувані наразі аналізи не є ефективними з точки зору витрат, оскільки потребують великих кількостей стандартів простатичних антигенів.
Наприклад, деякі аналізи простатичного антигену спираються на стандарти, що мають максимальну концентрацію до 350 нг/мл ІПСА або до 22 нг/мл лК2 на аналіз. Більше того, широкий діапазон простатичного антигена, охоплюваний застосовуваними наразі антигенними стандартами, може призвести до неточної кількісної оцінки рівня простатичного антигена у зразку та підвищити ризик неправильного діагнозу. Дане відкриття вирішує ці проблеми шляхом надання ефективних з точки зору витрат композицій та способів для вдосконаленої кількісної оцінки рівнів простатичного антигену.
Відповідно, в одному з аспектів розкрита тут інформація забезпечує спосіб кількісної оцінки
Зо рівнів простатичного антигена. В деяких варіантах виконання спосіб включає виконання імуноаналізу для визначення наявності простатичного антигену в зразку; та кількісну оцінку рівнів простатичного антигена, виявленого у зразку, відносно мінімального набору інформативних стандартів простатичного антигену, визначених за допомогою того ж самого імуноаналізу. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену включає принаймні два титри, що містять попередньо визначені кількості простатичних антигенів, де найвищий титр набору становить від ї) концентрації простатичного антигену у крові верхнього квартилю цільової популяції суб'єктів до ії) концентрації, у 75 разів вищої за цю концентрацію простатичного антигену у крові. В деяких варіантах виконання величина найнижчого ненульового титру в наборі менша за межу кількісної оцінки імуноаналізу. В деяких варіантах виконання цільова популяція суб'єктів складається з чоловіків, медіана віку яких знаходиться в діапазоні від 60 до 70 років. В деяких варіантах виконання цільова популяція суб'єктів складається з чоловіків, нижній квартиль віку яких знаходиться в діапазоні від 55 до 65 років. В деяких варіантах виконання цільова популяція суб'єктів складається з чоловіків, верхній квартиль віку яких знаходиться в діапазоні від 65 до 75 років. В деяких варіантах виконання простатичний антиген вибраний з групи, яка складається з: загального простат-специфічного антигену (зПСА), вільного простат-специфічного антигену (ВПСА), інтактного простат-специфічного антигену (ІПСА) та людського калікреїну 2 (лК2). У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою ІПСА або лК2. У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою інтактний простат-специфічний антиген (ІПСА). В деяких варіантах виконання найнижчий ненульовий титр набору становить 0,025 нг/мл. В деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить 15 нг/мл. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0 нг/мл, 0,025 нг/мл, 0,089 нг/мл, 0,322 нг/мл, 1,157 нг/мл, 4,167 нг/мл та 15 нг/мл. У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою лК2. В деяких варіантах виконання найнижчий ненульовий титр набору становить 0,002 нг/мл. В деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить 8 нг/мл. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0 нг/мл, 0,002 нг/мл, 0,011 нг/мл, 0,055 нг/мл, 0,290 нг/мл, 1,524 нг/мл та 8 нг/мл. В деяких бо варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з семи титрів стандарту простатичного антигену. В деяких варіантах виконання кожний проміжний титр стандарту простатичного антигену рівновіддалений від нижчого та вищого титрів у логарифмічному масштабі. В деяких варіантах виконання імуноаналіз вибраний з групи, що складається з посиленого дисоціацією лантанідного флуоресцентного імуноаналізу
ОРЕСРІАФ, імуноферментного аналізу (ІФА, ЕГІ5ЗА), радіоїмуноаналізу (РІА), сендвіч-аналізу, вестерн-блоттингу та імунопреципітаційного аналізу (ПА). В деяких варіантах виконання імуноаналіз являє собою ОЕЇ РІАФ). В деяких варіантах виконання імуноаналіз являє собою ІФА.
В деяких варіантах виконання зразок одержують від суб'єкта-людини. В деяких варіантах виконання зразок являє собою біопсію тканини передміхурової залози. В деяких варіантах виконання зразок являє собою зразок крові або плазми крові.
У деяких аспектах розкрита тут інформація забезпечує комплект для виявлення простатичного антигену, призначений для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену, де комплект включає мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену для кількісної оцінки простатичного антигену у зразку із застосуванням імуноаналізу, де кожен стандарт простатичного антигену наявний у контейнері як розчин. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену включає принаймні два титри, що містять попередньо визначені кількості простатичних антигенів, де найвищий титр набору становить від ї) концентрації простатичного антигену у крові верхнього квартилю цільової популяції суб'єктів до ії) концентрації, у 75 разів вищої за цю концентрацію простатичного антигену у крові. В деяких варіантах виконання величина найнижчого ненульового титру в наборі менша за межу кількісної оцінки імуноаналізу. В деяких варіантах виконання простатичний антиген вибраний з групи, яка складається з: загального простат- специфічного антигену (ЗПСА), вільного простат-специфічного антигену (вПСА), інтактного простат-специфічного антигену (ІПСА) та людського калікреїну 2 (лК2). У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою ІПСА або лК2. У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою інтактний простат-специфічний антиген (ІПСА). В деяких варіантах виконання найнижчий ненульовий титр набору становить 0,025 нг/мл. В деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить 15 нг/мл. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0 нг/мл, 0,025 нг/мл, 0,089 нг/мл, 0,322 нг/мл, 1,157 нг/мл, 4,167 нг/мл та 15 нг/мл. У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою лк2. В деяких варіантах виконання найнижчий ненульовий титр набору становить 0,002 нг/мл. В деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить 8 нг/мл. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0 нг/мл, 0,002 нг/мл, 0,011 нг/мл, 0,055 нг/мл, 0,290 нг/мл, 1,524 нг/мл та 8 нг/мл. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з семи титрів стандарту простатичного антигену. В деяких варіантах виконання кожний проміжний титр стандарту простатичного антигену рівновіддалений від нижчого та вищого титрів у логарифмічному масштабі.
У деяких аспектах розкрита інформація стосується способу приготування стандартів простатичного антигену для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену у зразку, де спосіб включає: (ї) одержання антигену, пов'язаного із раком передміхурової залози; (ії) приготування вихідного розчину антигену в придатному буфері, де вихідний розчин має титр від і, концентрації простатичного антигену у крові верхнього квартилю цільової популяції суб'єктів до і) концентрації, у 75 разів вищої за цю концентрацію простатичного антигену у крові; та (її) приготування мінімального набору стандартів простатичного антигену шляхом серійних розведень вихідного розчину так, щоб кожен проміжний титр стандарту простатичного антигену був рівновіддалений від нижчого та вищого титрів у логарифмічному масштабі. В деяких варіантах виконання цільова популяція суб'єктів складається з чоловіків, медіана віку яких знаходиться в діапазоні від 60 до 70 років. В деяких варіантах виконання цільова популяція суб'єктів складається з чоловіків, нижній квартиль віку яких знаходиться в діапазоні від 55 до 65 років. В деяких варіантах виконання цільова популяція суб'єктів складається з чоловіків, верхній квартиль віку яких знаходиться в діапазоні від 65 до 75 років. В деяких варіантах виконання простатичний антиген вибраний з групи, яка складається з: загального простат-специфічного антигену (ЗПСА), вільного простат-специфічного антигену (вПСА), інтактного простат- специфічного антигену (ІПСА) та людського калікреїну 2 (лК2). У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою ІПСА або лК2. У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою інтактний простат-специфічний антиген (ІПСА). В деяких варіантах бо виконання найнижчий ненульовий титр набору становить 0,025 нг/мл. В деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить 15 нг/мл. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0 нг/мл, 0,025 нг/мл, 0,089 нг/мл, 0,322 нг/мл, 1,157 нг/мл, 4,167 нг/мл та 15 нг/мл. У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою лКк2. В деяких варіантах виконання найнижчий ненульовий титр набору становить 0,002 нг/мл. В деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить 8 нг/мл. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0 нг/мл, 0,002 нг/мл, 0,011 нг/мл, 0,055 нг/мл, 0,290 нг/мл, 1,524 нг/мл та 8 нг/мл. В деяких варіантах виконання мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену складається з семи титрів стандарту простатичного антигену. В деяких варіантах виконання кожний проміжний титр стандарту простатичного антигену рівновіддалений від нижчого та вищого титрів у логарифмічному масштабі.
КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР
На ФІГ. 1 показано необмежуючу діаграму типу "ящик з вусами" рівнів лк2 (нг/мл) в популяції суб'єктів (М-1012).
На ФІГ. 2 показано необмежуючу діаграму типу "ящик з вусами" рівнів ІПСА (нг/мл) в популяції суб'єктів (М-1012).
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
Аспекти цього винаходу надають стандарти для кількісної оцінки рівня простатичного антигена у зразку. Описані у розкритій тут інформації стандарти являють собою вдосконалення порівняно з використовуваними наразі стандартами, оскільки вони є ефективними з точки зору витрат (напр., потребують менших кількостей простатичного антигену) та забезпечують набори значень, які більш близько налаштовані під клінічно значущі діапазони простатичних антигенів.
Відкриття частково стосується усвідомлення того, що калібрування діапазону титрів до мінімального набору інформативних стандартів простатичного антигену значно знижує витрати, одночасно забезпечуючи підвищену точність кількісної оцінки рівня простат-антигенів. Тому в деяких з аспектів розкрита тут інформація забезпечує вдосконалені способи кількісної оцінки рівнів простатичного антигена. Способи зазвичай включають виконання імуноаналізу для
Зо визначення наявності простатичного антигену в зразку; та кількісну оцінку рівнів простатичного антигена, виявленого у зразку, відносно мінімального набору інформативних стандартів простатичного антигену, визначених за допомогою того ж самого імуноаналізу.
Тут і далі "мінімальний набір інформативних стандартів простатичного антигену" - це набір стандартів простатичного антигену для конкретного імуноаналізу, що включає принаймні два титри, що містять попередньо визначені кількості простатичних антигенів, де величина найнижчого титру набору менша за межу кількісної оцінки імуноаналізу, і де величина найвищого титру набору становить від ї) концентрації простатичного антигену у крові верхнього квартилю цільової популяції суб'єктів (напр., чоловіків, у яких підозрюють наявність раку передміхурової залози або таких, що потребують біопсії) до її) концентрації, у 100 разів вищої за цю концентрацію простатичного антигену у крові. У деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить від ї) концентрації простатичного антигену у крові верхнього квартилю цільової популяції суб'єктів до ії) концентрації, у 75 разів вищої за цю концентрацію простатичного антигену у крові. У деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить від ї) концентрації простатичного антигену у крові верхнього квартилю цільової популяції суб'єктів до ії) концентрації, у 50 разів вищої за цю концентрацію простатичного антигену у крові.
У деяких варіантах виконання найвищий титр набору становить від ії) концентрації простатичного антигену у крові верхнього квартилю цільової популяції суб'єктів до ії) концентрації, у 25 разів вищої за цю концентрацію простатичного антигену у крові.
В деяких варіантах виконання величина найнижчого ненульового титру в наборі менша за межу кількісної оцінки імуноаналізу. Тут і далі термін "межа кількісної оцінки" позначає найменшу кількість матеріалу, яку можна виявити та оцінити кількісно з використанням імуноаналізу. В деяких варіантах виконання межа кількісної оцінки є найменшою кількістю матеріалу, яку можна виявити та оцінити кількісно з коефіцієнтом варіації менш ніж 25 956, менш ніж 15 95, менш ніж 5 95 або менш ніж 1 95 при використанні імуноаналізу.
В деяких варіантах виконання величина найнижчого ненульового титру в наборі менша за межу чутливості імуноаналізу. Тут і далі термін "межа чутливості" позначає найменшу кількість матеріалу, яку можна виявити, але не обов'язково оцінити кількісно при використанні імуноаналізу.
Стандарти простатичного антигену бо В деяких аспектах розкрита тут інформація забезпечує стандарти простатичного антигена для кількісної оцінки рівня простатичного антигена у зразку. Тут і далі "стандарт простатичного антигена" - це істотно гомогенний препарат простатичного антигена, придатний для встановлення еталону, за яким можна виміряти невідому кількість простатичного антигена. В деяких варіантах виконання стандарт простатичного антигена включає препарат простатичного антигена з чистотою принаймні 80 95, принаймні 85 95, принаймні 90 95, принаймні 95 95 або принаймні 99 95. Однак у деяких варіантах виконання стандарт включає гомогенний препарат простатичного антигена у середовищі (напр., як розчин), яке подібне до середовища аналізованого зразка (напр., зразка крові, сироватки, сечі або плазми). Наприклад, стандарт простатичного антигена може бути доданий до зразка крові, сироватки, сечі або плазми, який інакше не містив би простатичного антигена. Завдяки цьому фон стандарта простатичного антигену і невідомого зразка подібний або однаковий, що може поліпшити точність виявлення і кількісного визначення.
В деяких варіантах виконання для визначення концентрації конкретного антигену в зразку використовують калібрувальні криві за концентрацією. Наприклад, калібрувальну криву за концентрацією можна отримати, будуючи графік у координатах відносних одиниць флуоресценції (ВОФ) до множини відомих концентрацій антигена (напр., набору концентрацій антигена). Потім для визначення концентрації антигена у зразку можна порівняти значення
ВОФ, отримане від зразка з невідомою концентрацією антигену, з калібрувальною кривою.
У деяких варіантах виконання стандартний матеріал включає набір титрів антигену. Тут і далі термін "набір антигенів" позначає множину дискретних титрів антигену. В деяких варіантах виконання кожний титр антигену з набору поміщений у окремий контейнер. В деяких варіантах виконання набір стандартів антигену готують з вихідного розчину, титр антигену в якому вищий, ніж максимальна концентрація антигену в наборі. В деяких варіантах виконання набір стандартів антигену готують з вихідного розчину шляхом серійного розведення вихідного розчину. В деяких варіантах виконання набір антигенів готують з вихідного розчину, концентрація антигену в якому рівна максимальній концентрації антигену в наборі. В деяких варіантах виконання набір антигенів має від 1 до 20 титрів антигену, від 5 до 15 титрів антигену або від 8 до 12 титрів антигену. В деяких варіантах виконання набір антигенів має 1, 2, 3, 4, 5,6, 7,8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 або 20 титрів антигену.
Зо У деяких аспектах винахід стосується відкриття того, що встановлення мінімального набору стандартів простатичного антигену значно знижує витрати, одночасно забезпечуючи підвищену точність кількісної оцінки рівня простат-антигенів. Тут і далі термін "інформативний" позначає здатність антигену або набору антигенів забезпечувати клінічно значущу кількісну оцінку антигену в зразку, який має невідому кількість або концентрацію антигену. Наприклад, стандарт із широким діапазоном концентрацій антигену може дати набір значень (напр., калібрувальну криву), в якому клінічно значущі концентрації антигену виходять за межі корисного діапазону значень. Це може знизити придатність отриманих значень для прогнозу і тому тяжіє до меншої інформативності. З іншого боку, застосування стандартів, діапазон концентрацій антигену в яких узгоджується з імовірними кількостями або концентраціями антигену в цільовій популяції, є інформативним, тому що отримані значення (напр., калібрувальна крива) мають більшу кількість клінічно значущих концентрацій антигену, які входять в корисний діапазон значень (кривої).
В деяких аспектах розкрита інформація стосується розподілу концентрацій простатичного антигену в наборі інформативних концентрацій простатичного антигену. В деяких варіантах виконання кожна інформативна концентрація простатичного антигену з набору рівновіддалена від вищої та/або нижчої інформативної концентрації простатичного антигену. Тут і далі термін "рівновіддалена" позначає число одиниць між концентраціями простатичного антигену.
Наприклад, кожна з концентрацій 1 нг/мл, 2 нг/мл, З нг/мл та 4 нг/мл рівновіддалена (тобто, на 1 нг/мл) від вищої та/або нижчої концентрації в лінійному масштабі. Одиниці можна вимірювати в будь-якому підходящому масштабі, такому як лінійний масштаб або логарифмічний масштаб (напр., дію, натуральний логарифм (ЛН) і т.д.-). В деяких варіантах виконання кожна інформативна концентрація простатичного антигену з набору рівновіддалена від вищої та/або нижчої інформативної концентрації простатичного антигену в логарифмічному масштабі.
Наприклад, інформативний набір антигенів ІПСА може включати 0 нг/мл, 0,025 нг/мл, 0,089 нг/мл, 0,322 нг/мл, 1,157 нг/мл, 4,167 нг/мл та 15 нг/мл. Наприклад, інформативний набір антигенів лК2 може включати 0 нг/мл, 0,002 нг/мл, 0,011 нг/мл, 0,055 нг/мл, 0,290 нг/мл, 1,524 нг/мл та 8 нг/мл. Рівновіддалені концентрації антигену можуть бути приготовані будь-яким придатним методом, таким як серійне розведення, або розчинення кількості антигену в належному буфері для одержання розчину з інформативною концентрацією антигену. бо У розкритій тут інформації передбачені різні типи антигенів. Приклади антигенів включають,
але не обмежуються ними, пептиди, білки, ліпопротеїни, глікопротеїни та малі молекули (напр., гаптени). Інші необмежуючі приклади антигенів включають нуклеїнові кислоти, такі як ДНК, РНК та олігонуклеотиди. У деяких варіантах виконання розкритою тут інформацією забезпечені стандарти, що включають простатичні антигени. Тут і далі термін "простатичний антиген" позначає антиген, що продукується або експресується у передміхуровій залозі суб'єкта.
Приклади простатичних антигенів включають, але не обмежуються ними, загальний простат- специфічний антиген (зПСА), вільний простат-специфічний антиген (вПСА), інтактний простат- специфічний антиген (ІПСА) та людський калікреїн 2 (лК2). У деяких варіантах виконання стандартний матеріал включає інформативний набір концентрацій ІПСА. У деяких варіантах виконання стандартний матеріал включає інформативний набір концентрацій лк2.
Тут і далі термін "суб'єкт" позначає ссавця, в якого є або підозрюється наявність раку, або перевіряється наявність раку. Приклади суб'єктів включають людину, приматів, що не відносяться до людей (напр., ігрунок та мавп), свиней, коней, котів, собак, щурів та мишей. У деяких варіантах виконання суб'єкт являє собою людину. У деяких варіантах виконання суб'єкт являє собою людину, яка має або у якої підозрюється рак передміхурової залози. У деяких варіантах виконання суб'єкт являє собою людину, яку перевіряють на наявність раку передміхурової залози. Суб'єкти-люди можуть виявляти або не виявляти ознак або симптомів раку передміхурової залози, включаючи потребу частого сечовипускання, особливо вночі, ускладнений початок сечовипускання або затримка сечі, слабкий або переривчастий потік сечі, болісне або пекуче сечовипускання, труднощі з ерекцією, болісна еякуляція і/або кров у сечі або спермі.
Розкритою тут інформацією також передбачені контейнери для стандартних матеріалів.
Стандартні матеріали згідно наданого тут опису можуть бути поміщені у будь-яку підходящу посудину. Необмежуючі приклади підходящих посудин включають флакони (напр., скляні флакони або пластикові флакони), пробірки, блістерні упаковки, пляшки, пакети і планшети для аналізів. У деяких варіантах виконання набір концентрації антигену (напр., набір інформативних концентрацій простатичного антигену) може бути поміщений у множину контейнерів. Наприклад, набір із семи інформативних концентрацій простатичного антигену може зберігатися у семи запаяних пробірках, в кожній пробірці - один інформативний стандарт простатичного антигену. В
Зо загальному стандартні матеріали під час знаходження у контейнері перебувають у рідкій фазі.
Однак фахівцеві в даній галузі відомо, що стандартний матеріал, наприклад, білковий антиген, може перебувати у вигляді порошку (наприклад, у ліофілізованій формі) та бути відновленим до інформативної концентрації антигену за допомогою належної кількості розчинника (наприклад, води або буферного розчину).
У деяких варіантах виконання розкрита інформація стосується комплектів, що включають стандартні матеріали. Комплекти можуть включати стандартний матеріал, обладнання, пов'язане з проведенням аналізу (напр., планшети для аналізу, необхідні буфери, інструменти та апарат для відбору зразків і т.д.), а також інструкції з проведення аналізу із застосуванням стандартного матеріалу. У деяких варіантах виконання розкритою інформацією забезпечений комплект, що має множину контейнерів, у кожному контейнері міститься стандартний матеріал.
У деяких варіантах виконання кожен контейнер включає інформативну концентрацію простатичного антигена з набору інформативних концентрацій простатичного антигена. У деяких варіантах виконання описані тут комплекти додатково включають інструкції з кількісної оцінки рівнів простатичного антигена у зразку.
Розкритою інформацією також передбачені способи приготування стандартів простатичних антигенів. У деяких варіантах виконання розкрито спосіб приготування стандарту простатичного антигену для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену, де спосіб включає (ї) одержання антигену, пов'язаного із раком передміхурової залози; (її) приготування вихідного розчину антигену в придатному буфері або розчиннику; та (ії) приготування набору інформативних концентрацій з вихідного розчину, де кожна інформативна концентрація в наборі має концентрацію, що рівновіддалена від вищих і/або нижчих концентрацій у логарифмічному масштабі. У деяких варіантах виконання пов'язаний із раком передміхурової залози антиген є простатичним антигеном. У деяких варіантах виконання простатичний антиген вибраний з групи, яка складається із ЗПСА, вВПСА,
ІПСА та лК2. У деяких варіантах виконання простатичний антиген являє собою ІПСА або лК2.
Необмежуючі приклади придатних буферів і/або розчинників включають воду, фосфатно- сольовий буфер (ФСБ) і трис-сольовий буфер (ТОБ). Набір інформативних концентрацій антигену може бути приготований з вихідного розчину, наприклад, шляхом серійних розведень до одержання множини інформативних концентрацій антигену. бо Аналізи для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену
У деяких аспектах розкрита тут інформація стосується способів кількісної оцінки рівнів простатичного антигену. Винахід частково базується на відкритті того, що описані тут стандарти простатичних антигенів уможливлюють більш точну і ефективну з точки зору витрат кількісну оцінку простатичних антигенів, ніж використовувані наразі стандарти простатичних антигенів.
Відповідно, у деяких аспектах розкритою тут інформацією забезпечено спосіб кількісної оцінки рівнів простатичного антигена, який включає виконання імуноаналізу задля виявлення наявності у зразку простатичного антигену та кількісну оцінку рівнів простатичного антигену, виявленого у зразку, на основі значень, одержаних при оцінці набору інформативних концентрацій простатичного антигену за допомогою імуноаналізу. Наприклад, у деяких варіантах виконання інформативний набір концентрацій антигену є інформативним набором концентрацій ІПСА. У деяких варіантах виконання інформативний набір концентрацій антигену є інформативним набором концентрацій лк2.
Додаткові способи виявлення присутності простатичних антигенів описані, наприклад, у
О5БМ 61/972,099, поданій 28 березня 2014 року, зміст якої включений у цей опис шляхом посилання у всій своїй повноті.
Імуноаналізи
Рівні простат-специфічних антигенів (напр., ЗПСА, ІПСА, вПСА та лК2) можна оцінювати будь-яким придатним методом. У деяких варіантах виконання забезпечуються антитіла або антигензв'язувальні фрагменти, придатні для застосування в імуноаналізах. Імуноаналізи, де застосовуються такі антитіла або антигензв'язувальні фрагменти, можуть бути конкурентними або неконкурентними імуноаналізами прямого або непрямого формату. Необмежуючими прикладами таких аналізів є посилений дисоціацією лантанідний флуоресцентний імуноаналіз (ОЕГРІАЄ), імуноферментний аналіз (ІФА, ЕЇГІЗА), радіоімуноаналіз (РІА), сендвіч-аналіз (імунометричний аналіз), проточна цитометрія, вестерн-блоттинг, імунопреципітаційний аналіз, імуногістохімічний аналіз, імуномікроскопія, імунохроматографічний аналіз та протеомний аналіз.
В деяких варіантах виконання імуноаналіз являє собою ОЕЇРІА?. ОЕЇ РІАФ (посилений дисоціацією лантанідний флуоресцентний імуноаналіз) - це технологія інтенсивності флуоресценції з розділенням по часу (ФРЧУЧ), розроблена для виявлення присутності сполуки
Зо або біомолекули із застосуванням реагентів, мічених хелатами лантаноїдів. Аналізи ОЕЇ РІД? універсальні, сумісні з різними планшет-рідерами та, як промивна технологія, сумісні з різними типами зразків (напр., кров'ю, сироваткою, плазмою, клітинами і т.д.). Технологія базується на флуоресценції хелатів лантаноїдів (європію, самарію та тербію). Час затухання флуоресценції цих лантанідно-хелатних міток набагато довший за традиційні флуорофори, уможливлюючи ефективне використання розділення по часу для зниження аутофлуоресцентного фону.
Значний зсув Стокса (різниця між довжинами хвиль збудження і випромінювання) та вузькі піки випромінювання сприяють зростанню співвідношення сигнал-шум. Чутливість додатково підвищується через принцип посилення дисоціацією: хелат лантаноїду дисоціює, утворюючи новий високофлуоресцентний хелат у захисному міцелярному розчині. На відміну від традиційного ІФА, ОЕЇ РІА? не потребує застосування ферменту (напр., пероксидази хріну, ПХ) для генерування сигналу, який можна виявити.
Антигени або антитіла або антигензв'язувальні фрагменти можуть бути іммобілізовані, напр., зв'язуванням на твердих субстратах (напр., носіях, мембранах, колонках, протеомних матрицях і т.д.). Приклади твердих субстратних матеріалів включають скло, полістирол, полівінілхлорид, полівінілідендифторид, поліпропілен, поліетилен, полікарбонат, декстран, нейлон, амілози, природні та модифіковані целюлози, такі як нітроцелюлоза, поліакриламіди, агарози та магнетит. Природа субстрату може бути як фіксованою, так і суспендованою в розчині (напр., кульки).
У деяких варіантах виконання мічені антитіла або антигензв'язувальні фрагменти можуть бути використані як індикатори для виявлення комплексів антигена, зв'язаного з антитілом.
Приклади видів міток, які можуть використовуватись для створення індикаторів, включають ферменти, радіоактивні ізотопи, колоїдні метали, флуоресцентні сполуки, магнітні, хемілюмінесцентні сполуки та біолюмінесцентні сполуки. Радіомічені антитіла готують відомими способами шляхом приєднання радіоактивного ізотопа, такого як "ЗЕи, УЗН, З2Р, 555, 59ГРе або "25, який потім може бути виявлений гамма-лічильником, сцинтиляційним лічильником або авторадіографією. Як обговорювалося вище, антитіла і антигензв'язувальні фрагменти альтернативно можуть бути помічені ферментами, такими як алкогольдегідрогеназа дріжджів, пероксидаза хріну, лужна фосфатаза і подібні, тоді проявлені та виявлені спектрофотометрично або візуально. Придатні флуоресцентні мітки включають ізотіоціанат флуоресцеїну, бо флуоресцамін, родамін та подібні. Придатні хемілюмінесцентні мітки включають люмінол,
імідазол, оксалатний естер, люциферин та інші.
Імуноаналіз може включати контактування зразку, напр., зразка плазми, що містить антиген, з антитілом або антигензв'язувальним фрагментом (напр., Е(аб), Е(аб)г2), в умовах, що уможливлюють утворення комплексів зв'язування між антитілом або антигензв'язувальним фрагментом та антигеном. У деяких варіантах виконання зразок плазми контактують з антитілом або антигензв'язувальним фрагментом в умовах, придатних для зв'язування антитіла або антигензв'язувального фрагмента з цільовим антигеном, якщо антиген присутній у зразку.
Це може бути здійснено у придатній реакційній камері, такій як пробірка, лунка планшета, мембранна ванна, посудина для культивування клітин, предметне скло мікроскопа або інша камера. У деяких варіантах виконання антитіло або антигензв'язувальний фрагмент іммобілізують на твердому субстраті. Антитіло або антигензв'язувальні фрагменти, що зв'язуються з антигеном у зразку, можуть позначатися терміном "захоплювальне антитіло". У деяких варіантах виконання захоплювальне антитіло включає мітку (напр., біотинову мітку), що сприяє його іммобілізації на твердому субстраті за допомогою взаємодії, до якої залучена мітка (напр., взаємодії біотин-стрептавідин, де на твердому субстраті іммобілізований стрептавідин).
У деяких варіантах виконання твердим субстратом є поверхня реакційної камери. У деяких варіантах виконання твердий субстрат виконаний з полімерної мембрани (напр., нітроцелюлозної смужки, полівінілідендифторидної (ПВДФ) мембрани і т.д.). В інших варіантах виконання твердий субстрат є біологічною структурою (напр., поверхня бактеріальної клітини).
Інші приклади твердих субстратів описані тут і будуть очевидні звичайному фахівцеві в даній галузі.
У деяких варіантах виконання антитіло та антигензв'язувальний фрагмент іммобілізують на твердому субстраті до контактування з антигеном. В інших варіантах виконання іммобілізацію антитіла і антигензв'язувального фрагмента виконують після утворення комплексів зв'язування.
У ще інших варіантах виконання антиген іммобілізують на твердому субстраті до утворення комплексів зв'язування. У деяких варіантах виконання до реакційної камери можуть додавати індикатор для виявлення іммобілізованих комплексів зв'язування. У деяких варіантах виконання індикатор включає вторинне антитіло, мічене так, щоб його можна було виявити, спрямоване проти антигену. У деяких варіантах виконання індикатор включає вторинне антитіло, мічене так,
Зо щоб його можна було виявити, спрямоване проти захоплювального антитіла. У деяких варіантах виконання первинне антитіло або антигензв'язувальний фрагмент сам по собі мічений так, щоб його можна було виявити.
В одному із варіантів виконання описані тут методи імуноаналізу включають іммобілізацію антитіл або антигензв'язувальних фрагментів на твердому субстраті; нанесення зразка (напр., зразка плазми) на твердий субстрат в умовах, що уможливлюють зв'язування антигена з антитілами або антигензв'язувальними фрагментами, якщо він наявний у зразку; видалення надлишку зразка з твердого субстрату; нанесення індикатора (напр., антитіл або антигензв'язувальних фрагментів, мічених так, щоб їх можна було виявити) в умовах, що уможливлюють зв'язування індикатора зі зв'язаними з антигеном іммобілізованими антитілами або антигензв'язувальними фрагментами; промивання твердого субстрату і аналізування на присутність індикатора.
У деяких варіантах виконання антитіло та антигензв'язувальний фрагмент іммобілізують на твердому субстраті після контактування з антигеном у реакційній камері. У деяких варіантах виконання антитіло та антигензв'язувальний фрагмент іммобілізують на твердому субстраті до контактування з антигеном у реакційній камері. В будь-якому випадку до реакційної камери можуть додавати індикатор для виявлення іммобілізованих комплексів зв'язування. У деяких варіантах виконання індикатор включає вторинне антитіло, мічене так, щоб його можна було виявити, спрямоване проти антигену. У деяких варіантах виконання індикатор включає вторинне антитіло, мічене так, щоб його можна було виявити, спрямоване проти первинного антитіла або антигензв'язувального фрагмента. Як було описано вище, мітка, яку можна виявити, може бути, наприклад, радіоїзотопом, флуорофором, люмінесцентною молекулою, ферментом, біотиновою групою, епітопною міткою або молекулою барвника. Придатні мітки, які можна виявити, описані в цьому документі.
У деяких варіантах виконання було виявлено, що виконання певних імунсаналізів у буфері з низьким рН веде до більш чутливого виявлення антигену. Відповідно, у деяких варіантах виконання індикаторне антитіло приводять у контакт із захоплювальним антитілом у буфері, що має рН в діапазоні від 6,5 до менш ніж 7,75 так, що індикатор зв'язується з комплексом захоплювальне антитіло-антиген. У деяких варіантах виконання рН буферу становить близько 6б,5,6,6,6,7,6,8,6,9, 7,0, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5 або 7,6. бо Слід розуміти, що в будь-якому з описаних тут аналізів захоплювальні антитіла можна міняти місцями з індикаторними антитілами.
У деяких варіантах виконання імуноаналіз, яким вимірюють рівень вПСА, включає контактування наявного у зразку плазми крові вПСА із захоплювальним антитілом, специфічним до вВПСА, в умовах, в яких перше захоплювальне антитіло зв'язується з вПСА, утворюючи комплекс захоплювальне антитіло-вВПСА; та виявлення комплексу захоплювальне антитіло-
ВПСА з використанням індикатора. Захоплювальне антитіло може бути антитілом НІ117. У деяких варіантах виконання індикатор включає антитіло 5А1О0 або його фрагмент (напр., фрагмент Е(аб)). У деяких варіантах виконання індикатор включає антитіло або його фрагмент (напр., фрагмент К(ар), що має амінокислотну послідовність, принаймні на 80 95, принаймні на 85 95, принаймні на 90 95 або принаймні на 99 95 подібну до послідовності антитіла 5А10. У деяких варіантах виконання індикатор включає антитіло або його фрагмент (напр., фрагмент
Кар), що має амінокислотну послідовність, принаймні на 90 95, принаймні на 91 95, принаймні на 92 965, принаймні на 93 95, принаймні на 94 95, принаймні на 95 95, принаймні на 96 965, принаймні на 97 95, принаймні на 98 95 або принаймні на 99 95 подібну до послідовності антитіла
БА10.
Послідовності важкого і легкого ланцюгів антитіла 5АТ1О0, що можуть бути включені у фрагменти, показані нижче:
Важкий ланцюг БА10
ЕМО МЕЗОРСОП ОРБОТІ 5І ТО5ЕЗИаБ5І БТ ТаМИамзУЛАОРЗОаКаї ЕМ АНІ УМ/0ЕО
КАМУМРБІК5ЗВІ ТІЗЕОЗЗАМОМУНІ КІТЗЕМАРАОЗАТУУСАВНКОСУУаМЕрМмМмаОстТАСТУ5 (5ЕО І
МО: 1)
Легкий ланцюг 5А10
РІММТО5ОКЕМЗТЗУаОАУЗУТСКАЗОМУМТОМАМУУООКРИООЗРКАІЕЗТОЗУВЗЗаУРОВЕТ азваватореЕт т ММоО5ЕОІАЕМЕСООУ5ММУРІ ТЕЕАСТКМОІ М (ЗЕО І МО: 2)
У деяких варіантах виконання імуноаналіз, яким вимірюють рівень ІПСА, включає контактування наявного у зразку плазми крові ІПСА із захоплювальним антитілом, специфічним до вільного ПСА, який включає ІПСА та надщерблений ПСА, в умовах, в яких друге захоплювальне антитіло зв'язується принаймні з ІПСА, утворюючи комплекс захоплювальне антитіло-ІПСА, та виявлення комплексу захоплювальне антитіло-ІПСА з використанням другого індикатора. У деяких варіантах виконання індикатор включає антитіло 404. У деяких варіантах виконання захоплювальне антитіло є антитілом 5А10 або його фрагментом (напр., рфррагментом
Каб)).
У деяких варіантах виконання імуноаналіз, яким вимірюють рівень зПСА, включає контактування наявного у зразку плазми крові зПСА із захоплювальним антитілом, специфічним до ЗПСА, в умовах, в яких третє захоплювальне антитіло зв'язується з зПСА, утворюючи комплекс захоплювальне антитіло-3ІПСА; та виявлення комплексу захоплювальне антитіло-
ЗПСА з використанням третього індикатора. У деяких варіантах виконання індикатор включає антитіло Н5О. У деяких варіантах виконання захоплювальне антитіло є антитілом Н117.
У деяких варіантах виконання імуноаналіз, яким вимірюють рівень лК2, включає контактування наявного у зразку плазми крові ПСА із блокувальними антитілами, специфічним до ПСА; контактування наявного у зразку плазми крові лК2 із четвертим захоплювальним антитілом, специфічним до лК2, в умовах, в яких четверте захоплювальне антитіло зв'язується з лК2, утворюючи комплекс захоплювальне антитіло-лК2; та виявлення комплексу захоплювальне антитіло-лК2 з використанням четвертого індикатора. У деяких варіантах виконання індикатор включає антитіло 7031. У деяких варіантах виконання захоплювальне антитіло є 6НІ10 К(аб)». У деяких варіантах виконання бокувальні антитіла включають антитіло 5Н7, антитіло 5Нб та антитіло 2Е9.
У Таблиці 1 нижче перелічені антитіла та антигензв'язувальні фрагменти, які можуть бути використані в описаних тут способах, та їх відповідні епітопи.
Таблиця 1
Антитіла та епітопи/Джерела антитіл антитіла
РЕ НИМИ Ен тво кокс НН бно Спіапашіаг КаїйїКгєїп 2 іп Зегит. Сіїпй Спет. 46(2), 198-206.
ЦПа єї а. 1991. Ргозіаіе-5ресіїйс Апіїдеп іп Зегит Оссиг5 амінокислоти 79- | Ргедотіпапіу іп Сотріех м/йй аїІрпа-1-Апііспутоїгурвіп. Сіїп Спет. ?Е9 93 і/або 80-91 37(9), 1618-1625. Ріїопеп, еї а). Осіептіпайоп апа апаїузів ої білка ПСА (5ЕО І | апіідепіс еріорез ої рговіаїе з5ресіїіс апіїдеп (РБА) апа питап
МО: 3) діапаціаг КаїйКгеїп 2 (пКг) изіпу зупіпеїйс реріїде5 апа сотриїег тоадвеїїпа. Ргоївіп Зсієпсе (1998), 7:259-269
Митптікко єї а. 2000. Ргодисійп апа СНагасієгігайоп ої Момеї Апії-
БЕ7 Рговіаїе-5ресіїйс Апіїдеп (РБЗА) Мопосіопа! Апіїродієз Тнаї бо Мої
Оеїесі ІпієтпаПу Сієамей І уз145-І уз146 Іпасіїме РБА. Сіїп Спет. 46(10):1610-1618. амінокислоти 225-
Б5Нб |237 білка ПСА Миттікко еї аї. 2000. Зирга
ЗЕО ІЮО МО: З 761.1... |Митіккоерав200б0.5ура.ї7/////////7777777777771111111111111111сС1С амінокислоти 75- | Егікв5оп еї а. 2000. Юца!-Іабе! їіте-гезоїмед іттипоПноготеїгіс
Еар 89, 80-94 і/або 82- |аззау ої їеє апа юїа! Рговіаіе-5ресіїйс Апіїдеп Вазед оп Кесотрбіпапі
БАТО |39 білка ПСА (5ЕО)| Раб Ргадтепів. Сіїп Спет 46(5), 658-666.
ІО МО: З Рігопеп вї аІ. Зирга амінокислоти 130- 404 (|144 білка ПСА И.5. Раїепі Мо. 7872104
ЗЕО ІЮО МО: З ний 17777771 0085. Раївпі Мо. 5672480....:К(«КХ/.Г.:/(КЬССС:/«(/////////:/ /ЗЕ но 17777771 008. Раївпі Мо 5672480....:К( 4б.:С:/КУ:Ї:4:х////:/и/: «Ж С во 80-94 аб /во И.5. Раїепі Мо. 5939533, Епгореап СоїІесіп ої Апітаї! СеїЇ Сийигев
БАТО (се т аво Ве Ассеввіоп питрег 93091201. 39 білка ПСА (БЕО Рігопеп евї а. Зирга
ІЮ МО: З мор
У деяких аспектах розкрита тут інформація стосується застосування імуноаналізів для кількісної оцінки рівня антигена у зразку. Тут і далі термін "кількісна оцінка" позначає визначення кількості або концентрації антигена у зразку на основі стандарта простатичного антигену, що включає набір інформативних концентрацій антигену. Наприклад, рівень ІПСА можна кількісно оцінити шляхом контактування набору інформативних концентрацій ІПСА з антитілом, яке можна виявити; одержання набору значень (напр., калібрувальної кривої) на основі виявленого вихідного сигналу від кожної з інформативних концентрацій ІПСА, зв'язаної з антитілом; контактування зразка з невідомою концентрацією ІПСА з антитілом, яке можна виявити; вимірювання виявленого вихідного сигналу від зв'язаного з антитілом ІПСА зразка; та кількісної оцінки рівня ІПСА у зразку на основі порівняння з набором значень, одержаних при вимірюванні інформативних концентрацій.
У деяких варіантах виконання набір значень одержують шляхом отримання виявленого вихідного сигналу антитіл. У деяких варіантах виконання виявлені вихідні сигнали отримують за допомогою зчитувачів флуоресценції, наприклад, флуоресцентних мікроскопів, мікропланшет- рідерів та/"або УФ-спектрофотометрів. У деяких варіантах виконання зчитувачі флуоресценції під'єднані до комп'ютера. У деяких варіантах виконання комп'ютер включає програмне забезпечення (наприклад, бойМах Рго"М або Сепб5 Оаїа Апаїузіз) для розрахунку калібрувальних кривих на основі виявлених вихідних сигналів.
Аспекти даного винаходу можуть бути виконані з використанням комп'ютера. Наприклад, кількість простатичного антигена у зразку може бути визначена відносно стандарту простатичного антигена шляхом отримання імуноаналітичних вимірювань простатичного антигена у зразку і їх порівняння за допомогою комп'ютера з кількостями простатичного антигена у мінімальному наборі стандартів простатичного антигена. Наприклад, комп'ютерні системи, описані в цьому документі, можна застосовувати для виявлення вихідного сигналу зв'язування антиген-антитіло, або для створення калібрувальної кривої на основі значень вихідного сигналу, отриманих від набору інформативних концентрацій антигена. Комп'ютерна система може включати один або більше процесорів та один або більше комп'ютерно зчитуваних енергонезалежних носіїв інформації (напр. пам'ять і один або більше енергонезалежних носіїв інформації). Процесор(и) можуть контролювати запис даних у та зчитування даних з пам'яті та енергонезалежного пристрою зберігання інформації у будь-який придатний спосіб, оскільки описані тут аспекти даного винаходу не обмежені в цьому відношенні.
Для виконання будь-яких описаних тут функцій, напр., для обрахунку рівнів простатичного антигена на основі мінімального набору інформативних простатичних антигенів, процесор(и) можуть виконувати одну або більше інструкцій, таких як програмні модулі, записаних на одному або більше комп'ютерно зчитуваних носіях інформації (напр., пам'яті), які можуть слугувати енергонезалежними комп'ютерно зчитуваними носіями інформації, що зберігають інструкції для виконання процесором. Як правило, програмні модулі включають підпрограми, програми, об'єкти, компоненти, структури даних тощо, які виконують окремі завдання або реалізують окремі абстрактні типи даних. Варіанти виконання також можуть бути втілені у середовищі розподілених обчислень, де завдання виконуються віддаленими пристроями обробки даних, сполученими мережею зв'язку. У середовищі розподілених обчислень програмні модулі можуть бути розташовані як на локальних, так і на віддалених комп'ютерних носіях інформації, включаючи пристрої пам'яті Введення даних та програмні команди можуть прийматися комп'ютером через інтерфейс введення. Інтерфейс введення може включати клавіатуру, сенсорний екран, О5В-порт, СО-привід, ОМО-привід або інший інтерфейс введення.
Слід розуміти, що різні варіанти виконання можуть бути створені з одною або більше вищеописаних ознак. Вищезазначені аспекти та ознаки можна використовувати в будь-якій придатній комбінації, оскільки даний винахід не обмежений в цьому відношенні. Слід також розуміти, що фігури ілюструють різноманітні компоненти та ознаки, що можуть бути включені в різні варіанти виконання. Задля спрощення деякі фігури можуть ілюструвати більш ніж одну необов'язкову ознаку або компонент. Однак винахід не обмежується конкретними варіантами
Зо виконання, показаними на фігурах. Слід розуміти, що винахід охоплює варіанти виконання, які можуть включати лише частину компонентів, показаних на будь-якій із фігур, лабо може також охоплювати варіанти виконання, які поєднують компоненти, показані на кількох різних фігурах.
ПРИКЛАДИ
Приклад 1: Послідовності для ПСА та людського калікреїну 2
Білок ПСА (ЗЕО ІЮ МО: 3)
ІМОАСМ ЕСЕКНІЗОРМОМІ МАБВаВАМСИаСМІ МНРОУМУМІ ТААНСІВМКОМУП І САН ЕНРЕОТОО
МЕОМ5НЗЕРНРІ МОМ КМАБРГАРИаВОБЗ5НОЇ МИ ВІ ЗЕРАЕЇ ТОАУКУМОЇ РТОЕРАГ атТСУА5
СУавІЕРЕЕР ТРККІ ОСМОІ НМІЗМОМСАОУНРОКУТКЕМІ СДаРМ ТаскЗтоИОрБИаСРІ МСМа
МІ'ОВІТ5УМОЗЕРСАЇ РЕАРБІ УТКУУНУВКУМКОТІМАМР
Білок лК2 (ЗЕО ІЮ МО: 4)
ІМОАСМ ЕСЕКНІЗОРМУОМАМУЗНОМ АНСОИСМІ МНРОМУМІ ТААНСІ ККМЗОУУУ САНМІ ГЕРЕОТ
СОВМРУЗНЗЕРНРІ УММБІ КНОБЗІАРОЕОЗ5НОЇ МІ ВІ ЗЕРАКІТОМУМУКМІ СІ РТОЕРАГ ТОМА
ЗаМавІЕРЕЕН АРАБІ ОСУБІ НІ І ЗМОМСАВАМУЗЕКМТЕЕРМІ САС М ТасКОотоасарзасРІ МО
Мама 5УМУаРЕРСАЇ РЕКРАМУТКУУНУВКУМКОТІААМР
Приклад 2: Вдосконалені стандартні матеріали для виявлення простатичних антигенів
Попередні стандарти ІПСА мали максимальну концентрацію в діапазоні від 166 до 350 нг/мл.
В цьому прикладі описана переробка рецептури стандартів ІПСА шляхом серійного розведення максимальної концентрації 15 нг/мл, як показано у Таблиці 2. Показаний нижче Інформативний
Набір забезпечує кілька переваг порівняно з попередніми наборами стандартів. По-перше, зниження максимальної концентрації ІПСА знижує витрати приблизно у 11-23 рази, тому що потрібно менше антигену. По-друге, звужений діапазон аналізу дозволяє більшій кількості точок (напр., значень) на калібрувальній кривій потрапити у клінічно значущий діапазон концентрацій
ІПСА для діагнозу раку передміхурової залози. Нарешті, застосування семи серійно розведених концентрацій (напр., рівновіддалених концентрацій) уможливлює розміщення специфікацій на необроблених значеннях сигналів, виявлених у наборі, що покращує контроль якості від партії до партії стандартів і від запуску до запуску аналізу.
Таблиця 2
Порівняння наборів стандартів ІПСА (нг/мл) стандартів 1 стандартів 2 стандартів З стандартів нн ши шили пили нити
Таким же чином переробили стандарти людського калікреїну 2 (лК2). Попередньо доступні стандарти лК2 мають максимальну концентрацію в діапазоні від 13,1 до 22,7 нг/мл, як показано у Таблиці 3. Показаний нижче Інформативний Набір забезпечує кілька переваг порівняно з попередніми наборами стандартів. По-перше, зниження максимальної концентрації лК2 знижує витрати приблизно у 1,6-2,8 рази, тому що потрібно менше антигену. По-друге, звужений діапазон аналізу дозволяє більшій кількості точок (напр., значень) на калібрувальній кривій потрапити у клінічно значущий діапазон концентрацій лК2 для діагнозу раку передміхурової залози. Нарешті, застосування семи серійно розведених концентрацій (напр., рівновіддалених концентрацій) уможливлює розміщення специфікацій на необроблених значеннях сигналів, виявлених у наборі, що покращує контроль якості від партії до партії стандартів і від запуску до запуску аналізу.
Таблиця З
Порівняння наборів стандартів лК2 (нг/мл) нини пиши ви 11111111 11111181
Приклад 3: Застосування стандартів ІПСА та лКО в аналізі 4АК-показника
В цьому прикладі описане застосування вищеописаних стандартів ІПСА та лкКа2 у тесті на 4К- показник. 4К-показник - це калібрований багатопараметричний індивідуалізований показник ризику, що визначається за алгоритмом, який включає вимірювання чотирьох калікреїнових білків, асоційованих із передміхуровою залозою, у зразку крові - загального простат- специфічного антигену (ЗПСА), вільного ПСА (вПСА), інтактного ПСА (ІПСА) та людського калікреїну 2 (лК2) - а також наступну клінічну інформацію: наявність (або відсутність) попередньої негативної біопсії, вік пацієнта та наявність (або відсутність) вузликів під час пальцевого ректального обстеження (ПРО). Алгоритм обраховує імовірність ризику виявлення раку пізньої стадії (7 по шкалі Глісона), якби виконували біопсію простати. Тест призначений для застосування як допоміжний засіб при прийнятті клінічного рішення щодо виконання біопсії простати.
Концентрації зПпСА та вПСА визначали комерційно доступними аналізами, схваленими ЕСА для використання у діагностиці людини (прилад Коспе"М Сораб? та аналізи ЕПІесзувз?).
Зо Концентрації ІПСА та лК?2 визначали за допомогою тесту, розробленого для виконання на приладі РегкіпЕІтег? АшіоОЕЇ РІАЄ.
У пробірку К"ЕЮОТА відбирали зразок венозної крові. Розмір пробірки повинен бути достатньо великим, щоб вмістити приблизно 7,5 мл крові (принаймні 5 мл крові). Для забезпечення доброго змішування з ЕОТА пробірку з кров'ю потрібно перевернути 8 разів незадовго після відбору зразку. Такі кількості крові забезпечують одержання достатньої кількості плазми. На одне визначення чотирьох калікреїнових маркерів потрібно приблизно 1 мл плазми. Два мілілітри (2 мл) плазми дозволяють переробити аналіз за потреби.
Наявність ІПСА та лК2 визначали сендвічним (неконкурентним) імуноаналізом. В аналізі
ІПСА використано два різних продукти - моноклональних мишачих антитіла. Захоплювальна проба являє собою біотинільований, рекомбінантний Нізв-Сувє-мічений Рар-фрагмент моноклонального антитіла 5АТ1О0 зі специфічністю до вПСА (компонентом якого є іПсСА).
Індикатором є мічене європієм моноклональне антитіло 404, зі специфічністю до ІПСА та комплексованого ПСА (ПСА-АСТ). У комбінації ці реагенти специфічні до ІПСА. В аналізі лк? використано п'ять різних продуктів - моноклональних мишачих антитіл. Захоплювальна проба являє собою біотинільований Е(ар)2-фрагмент моноклонального антитіла бНІ0 зі специфічністю до лкК2 та зПСА. Індикатором є мічене європієм моноклональне антитіло 71, зі специфічністю до лК2 та зПСА. Аналіз потребує застосування блокувальних антитіл до зПСА.
Зразок розводять сумішшю трьох моноклональних антитіл до зПСА (клони 2Е9, 5Е7 та 5Нб), і індикаторний препарат також містить 5Нб. У комбінації ці реагенти специфічні до лк2.
Аналізи калібрують наступним чином. Аналіз ІПСА калібрують по ОЕЇ РІАЄ Ргобіацшв"М РБА
Егее/Гога! Кії, який у свою чергу калібрують по ВООЗ 96/670 (ЗПСА) та 96/668 (ВПСА). Аналіз
Ргоеіайз уможливлює кількісне визначення зПСА та впПСА, частиною якого є іПсСА.
Призначення калібрувальних розчинів ІПСА визначають з середнього відновлення, одержаного для аналізів ЗПСА та вПСА. Аналіз лК2 калібрують по ОЕЇГ РІА? Ргобіайшв"М РБА Егев/Тоїа! Кії, який у свою чергу калібрують по ВООЗ 96/670 (зПСА) та 96/668 (ВПСА). Аналіз Ргозіацш5 уможливлює кількісне визначення зПСА та вПСА, і компонент зПСА має еквімолярну перехресну специфічність до лК2. Призначення калібрувальних розчинів лК2 визначають з відновлення, одержаного для аналізу зПСА.
Сигнали, одержані при визначенні ІПСА та лК?2 в імуноаналізах, тоді порівнюють із сигналами, одержаними при визначення набору стандартів (напр., калібрувальних розчинів), використовуючи ті самі антитіла ІПСА та лК2. Кожен з аналізів ІПСА та лК2 використовує 7 стандартів (напр., калібрувальних розчинів). Вимірювання стандартів (напр., калібрувальних розчинів) використовують для визначення меж чутливості аналізу. Межі чутливості визначаються межею кількісної оцінки (МКО) на нижньому кінці та найконцентрованішим
Зо калібрувальним розчином на верхньому кінці. Для аналізів ІПСА та лК2 МКО визначали за допомогою СІ 5І ЕР-17А. Межі чутливості аналізу показані в Таблиці 4 нижче.
Таблиця 4
Межі чутливості 4К-показника для ІПСА і лК2 11111111111111пСА111111111171Ї11111лкг//
Очікувані значення ІПСА та лК2 отримували аналізом даних клінічного випробування 4К- тесту в США, яке включало 1012 учасників. Учасників ділили на три групи на основі патологічного дослідження тканин після виконання пацієнтові біопсії. Дані показані нижче у
Таблицях 5 та 6, а також як діаграми "ящик-з-вусами" на ФІГ. 1 та ФІГ. 2. Результати вказують на те, що 99,9 95 значень лкК2 (1011/1012) та 99,6 95 значень ІПСА (1008/1012) підпадають під межі чутливості аналізів.
Таблиця 5
Значення ІПСА та лКк2 111111 0МІ 111 пСА(нмлуї///// | о лкКа(нмлу////:Ж 11111111. |Медіана |Міжквартильний діапазон| Медіана |Міжквартильний діапазоні
Хвороба легкої стадії
Хвороба важкої стадії 231| 0.511 /|(0.360, 0.783) 0.107 |(0.063, 0.1 76) по шкалі Глісона 7
Таблиця 6
Дані перцентилів ІПСА та лкКа (всі суб'єкти, М-1012) ниж пи пили ним нини нн нини пиши я с: пиши 89011110 Ї111111111111109841 пиши нннишшх пиши ши кс тлшш
Ефективність аналізів для ІПСА та лкК2 оцінювали за допомогою СІ 5І ЕР5-А2 та СІ 5І ЕРб-А.
Результати наведені нижче у Таблиці 7. Слід зауважити, що в кожному аналізі (напр., ІПСА або лкК2г) значення коефіцієнту варіації у межах чутливості залишаються низькими («15 95). Крім цього, значення КЗ: в кожному аналізі становить 1. Разом ці дані вказують на високу точність та чіткість у межах чутливості аналізу.
Таблиця 7
Ефективність аналізу 1С111111111пСА1111111111Ї1111111111слкСсС -е000000 ня ОКО
Чіткість 1.0 нг/мл СУМ х 8 95 1.1-15 нг/мл 1.0 нг/мл СМ х 8 95
См х 596 1.1-8 нг/мл СМ х 10 95 відновленням відсутність)
Оцінювали клінічну ефективність тесту на 4К-показник. 1012 пацієнтів в цілому брали участь у сліпому проспективному клінічному дослідженні у 26 урологічних центрах у Сполучених
Штатах. З метою одержання групи представників сучасної практики відбору біопсій участь була відкритою для всіх чоловіків, кому призначили біопсію простати, без урахування віку, ПСА, ПРО або попередньої біопсії. Кожен учасник пройшов трансректальну біопсію принаймні 10 ядер простати під ультразвуковим контролем, і в кожному центрі виконали гістопатологічне дослідження згідно прийнятої практики. Пацієнтів з історією лікування, про яку було відомо, що вона впливає на рівні ПСА, виключали. Перед біопсією всліпу відбирали зразок крові та відправляли до лабораторії ОРКО Габ у Нешвіллі, ТМ, для перевірки на чотири калікреїнові маркери (зПСА, вПСА, ІПСА та лК2). Результати по чотирьом калікреїновим маркерам, гістопатології, ПРО та дані щодо попереднього біопсійного статусу розкривали та аналізували чотири незалежні спеціалісти з біостатистики, і вони показані в Таблиці 8. Слід знову-таки зауважити, що рівні ІПСА та лкК2 знаходились в межах чутливості а налізу та мали високозначущий р-показник.
Таблиця 8
Таблиця даних по пацієнтам 7777777777717.7.р.рюрюрю | Негативна біопсія | Легка стадія РСа | Важка стадія РСа | р-показник 11111111 (м-542:5495) | (М-239;2495) |(М-2315239) 111550 1771 3005595). | 6б(г25о) | З0п39) 1150-75 | 48108995) | 220(929) | 197(8595 15751711 3105795) | 13(549) | з10п39)
Раса 17111111 004
Афроамериканська | 44(8.195) | 14(599595 | 27029)
Кавказька 0 45808595) | 218(9195) | 19308493
Пспанськаї////// 1777 28(529) | 4079) | 40795) інша 77777777 1711 100.89) | 3039) | 4079) | щ
Невідомо 2(04905 | 000935 | З(п39) простати 11140717 гта(Б19) | 146(6б19) | л40(б19) | щ 1110-25. 17 36(669) | 110469) | 39079) 11117525... 1.7... 000935 | 3039) | 15(6.59) ее й а|ровсью | пббме | есе | ою загального ПСА до 21 (15, 26) 17 (13, 25) 13 (10, 19) -0.0001 вільного 5996-1095 6 ющ/ 130(2495) | 57(2495) | 13(5.695) лоо6-1596 7701490) | 29012953 | 23009) 1596-2096 / 46(8.595) | 2701193 | 22009) 2096 177 83015965) | 82(3495) | 1610709)
Клінічна Т-стадяду/|77777777711111111Ї111111111111Ї111111111111111Ї1
ВЕТО: ВЯП НО С ЛЕ: У Т5 ИН ОН ПОГ ЖЕ ТУ ИЙ ПО
ВГ от и ПОН о СТВ НИНІ НИ Ж ТУТ: НТ ПИЙ НО
ФА 77771171 11140079) | з6пбя) | 727 нн пи ПЕ ЕС 5 ПО г Гол Т5 Я ПО ж ши ши шин НИМИ
ЗА 77777171 о09) | зп) | 771 ке я ПОСТ НЯ ПОН ПОГ 5 НЯ ПО хо) | ла) 171 шк 100 | во. ві 55
Глісона 06777171 гоп | 0009) | щ 84717719) | лови) 171 ав7171111111111111111111711111о(09) | 590269) | щ 8111111111111111711111о(09) | 35059) | щ 91111111 о(09) | 2бпто) | 7727 пи Ти ПО ПОЛОН ОГС ПТ Я ПОН: УГТ ПЕТ ПОН ПО
Незважаючи на те, що в даному документі були описані та проілюстровані кілька варіантів здійснення даного винаходу, звичайні фахівці в даній галузі можуть легко передбачити безліч інших способів та/або структур для виконання функцій та/або отримання результатів та/або однієї або декількох переваг, описаних в даному документі, і кожен з таких варіантів та/або модифікацій вважається охопленим обсягом цього винаходу. У більш загальному розумінні, фахівцям у даній галузі легко зрозуміти, що всі параметри, розміри, матеріали та конфігурації, описані в даному документі, описані як приклади і що фактичні параметри, розміри, матеріали та/або конфігурації будуть залежати від конкретного застосування або застосувань, для яких використовується інформація з даного винаходу. Спеціалісти в даній галузі розпізнають або зможуть встановити багато еквівалентів конкретних варіантів здійснення описаного тут винаходу, використовуючи не більше, ніж звичайне експериментування. Тому слід розуміти, що вищезгадані варіанти здійснення представлені лише як приклад і що в межах доданої формули винаходу та еквівалентів до неї винахід може застосовуватися інакше, ніж це конкретно описано та заявлено. Даний винахід стосується кожної описаної тут окремої ознаки, системи, виробу, матеріалу та/або способу. Крім того, будь-яка комбінація двох або більше таких ознак, систем, виробів, матеріалів та/або способів, якщо тільки такі ознаки, системи, вироби, матеріали та/або способи не взаємно несумісні, включена в обсяг даного винаходу.
Невизначені артиклі "а" та "ап", використані в даних описі та в формулі, слід розуміти як "принаймні один", якщо чітко не вказано інше.
Фразу "та/або", використану в даних описі та в формулі, слід розуміти як "будь-який або обидва" з елементів, з'єднаних нею, наприклад, елементів, які в деяких випадках присутні спільно, і в інших випадках присутні окремо. Крім елементів, спеціально ідентифікованих фразою "та / або", необов'язково можуть бути присутніми інші елементи, незалежно від того, пов'язані вони чи не пов'язані зі спеціально ідентифікованими елементами, якщо чітко не вказано інше. Таким чином, як необмежуючий приклад, посилання на "А і/або В", коли воно використовується разом з виразом відкритого формату, таким як "включає", може в одному варіанті стосуватися А без В (необов'язково включаючи відмінні від В елементи); в іншому варіанті В без А (необов'язково включаючи відмінні від А елементи); в ще одному варіанті як А, так і Б (необов'язково включаючи інші елементи); і т.п.
Зо Тут і далі в описі та формулі значення "або" слід розуміти як таке саме, як в "і/або", як визначено вище. Наприклад, при відокремленні елементів у списку "або" чи "і/або" слід тлумачити як таке, що включає, наприклад, включення щонайменше одного, але також включення більше ніж одного з числа чи списку елементів, і, необов'язково, додаткових неперерахованих пунктів. Тільки терміни, які чітко вказують на протилежне, наприклад, "тільки один з" або "лише один з", або, коли використовується в формулі, "що складається з", будуть посилатися на включення лише одного елемента з числа чи списку елементів. Загалом, термін "або" в цьому документі повинен тлумачитися лише як вираження виключних альтернатив (наприклад, "один або інший, але не обидва"), якщо йому передують умови винятковості, такі як "або-або", "один 3", "лише один з" або "точно один 3". "Складається по суті 3", коли використовується в формулі, має звичайне значення, яке використовується в галузі патентного права.
В даних описі та формулі словосполучення "принаймні один", що стосується списку одного або більше елементів, слід розуміти як принаймні один елемент, вибраний з будь-якого одного або більше елементів у списку елементів, але не як те, що обов'язково містить щонайменше один з кожного елемента, спеціально переліченого у списку елементів, і не виключає будь-яких комбінацій елементів у списку елементів. Це визначення також дозволяє присутність необов'язкових елементів, додатково до елементів, спеціально ідентифікованих у списку елементів, до яких відноситься словосполучення "принаймні один", незалежно від того, пов'язані вони чи не пов'язані зі спеціально ідентифікованими елементами. Таким чином, як необмежувальний приклад, "принаймні один з А та В" (або, еквівалентно, "принаймні один з А або В" або, еквівалентно, "принаймні один з А та/або В") може посилатися, в одному варіанті, принаймні на один, необов'язково більше ніж один, А, без присутності В (і, необов'язково, включаючи елементи, відмінні від В); в іншому варіанті, щонайменше на один, необов'язково більше ніж один, В, без присутності А (і необов'язково, включаючи елементи, відмінні від А); у ще одному варіанті, щонайменше на один, необов'язково більше ніж один, А, і щонайменше один, необов'язково більше ніж один, В (і необов'язково, включаючи інші елементи); тощо.
У формулі, як і у вищенаведеному описі, всі перехідні фрази, такі як "включає", "містить", "несе", "має", "вміщує", "залучене", "утримує" тощо, слід розуміти як відкриті, наприклад, такі, що означають включення, але не обмежуючись ним. Тільки перехідні фрази "що складається з " та 60 "складається по суті з ", слід розуміти як закриті або напівзакритіперехідні фрази, відповідно, як зазначено в Інструкції з патентного розгляду патентного відомства Сполучених Штатів, розділ 2111.03.
Використання порядкових термінів, таких як "перший", "другий", "третій" тощо, у формулі для модифікації елемента формули саме по собі не означає будь-який пріоритет, першочерговість або порядок одного елемента формули над іншим або порядок у часі, в якому виконуються дії способу, натомість є лише засобом відрізнити один елемент формули, що має певну назву, від іншого елемента, що має ту саму назву (але для використання порядкового терміна), щоб відрізнити елементи формули.
Слід також розуміти, що, якщо чітко не вказано інше, в будь-яких способах, заявлених у цьому документі, які включають більше одного етапу чи дії, порядок етапів або дій способу необов'язково обмежується порядком, в якому читаються етапи або дії способу.
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1105 ОРКО Ріадповрісв, І1І1ІС «1205 СТАНДАРТИ ПРОСТАТИЧНОГО АНТИГЕНУ ТА ЇХ ЗАСТОСУВАННЯ «1305 СсС1256.700155000 «1405 Поки що не призначено «1415 Узгоджено цим «1505 785 62/139,365 «1515 2015-03-27 «1605 14 «1705 РабепсІпПп версія 3.5 «2105 1 «2115 119 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний поліпептид
Зо «4005 1 бі Маї біп Гей Уаі бій бек с1іу Рго с1іу Іїе Гей сіп Рго бек біп 1 5 10 15
ТПЕ Гей бек Гей ТПг Сув бек Ріпе бек біу Рібе бек Іецй бек ТПг ТПг 20 25 Зо сіу Меє с1у Маї бек Тгр І1е Акуд біп Рго бек сіу Пув б1у Геп сі1ц 35 40 45
ТЕр геш Аїа Нів Ггец Туг Тгр Авр бій Авр Гув Агд Туг АБп Рго 5бег 50 55 6о
Тецп Гпув Бек Агуд Гей ТПг Іїе Бек бій Авр бек бБег Агуд АвБп біп Уаї 65 70 75 80
Рпе Гей пув І1е ТПг бек Уаії б1у Рго А1ї1а Авр бек Аїа ТПг Тук Туг 85 90 95
Сув А1а Агуд Гпув с1у Тук Тук с1у Тук Рпе Авр Туг Тер С1у біп с01Уу 100 105 110
ТБЕгЕ АТїа Ггецп ТПг Уаї бек 5бег 115 «2105 Ж «2115 107 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний поліпептид «4005 М:
Авр І1е Уаї Меєсє ТПг біп бек біп Гпув Рре Меє бек ТПг бек Уаі1і ШУ 1 в; 10 15
Авр Акуд Уаї бек Уа1і ТПпг Сув пув Аза бек біп Авп Уаі Авп ТПг Авр 20 25 30
Ууаї Аза Тер Тук біп сбіп Пув Рго сіу біп бек Рго ув Аї1а еп Ше 35 40 45
Рпе бек ТПг бек Туг Агуд бек бек сіу Уа1і Рго АвБр Агд Рпе ТбПг 1У 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1е ТПг Авп Уа1і сіп б5ег 65 70 75 80 бі Авр Теп Аза бій Тук Рпе Сув біп біп Тук Бек Авп Тук Рго Іецй 85 90 95
ТПЕ Рпе с1іу Аїа сіу ТБПг Гув Уаі1і Авр Гец Авп 100 105 «2105 З «2115 237 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 З
І1е Уаї сіу сб1у ТкЕр б1п Сув біц Ппув Нів бек біп Рго Тгр Сіп Уаї 1 5 10 15
Тен Маії А1їа бек Акуд с1іу Агуд Аїа Уаї Сув сіу с1іу Уа1ї Іец Уаї Нів 20 25 30
Рго біп Тгр Уаі Іецп ТПпг Аза Азїа Нів Сув Іїе Агуд Авп Пув бек Уаї 35 40 45
І1е Гец Гец с1у Агкуд Нів бек ІТец Робе Ні Рго сій Авр ТПг с1у сіп 50 55 бо
Уаї Рпе сіп Уа1ї Бек Нів бек РіПе Рго Нів Рго Гей Туг Авр Меє 5ег 65 70 75 80
Тецшц еп ув Авп Агуд Рпе Гей Агуд Рго с1у Авр Авр бБекг бег Нів Авр 85 90 95
Зо Пен Меє Ге Гецп Агуд Гей бек б1іц Рго Аїа сій Тей ТПг Авр Аїа Уаї1! 100 105 110
Тпув Маї Меє Авр Гей Рго ТПг сіп бій Рго Аза Гец сіу ТПг ТК Сув 115 120 125
Туг Аїа бек сіу Тгр біу бек І1е бій Рго біц біц Рре Іецй ТПг Рго 130 135 140
Тув Гув Гей сіп Сув Уаі1 Авр Гей Нів Уа1і Іїе бек Авп Авр Уа1ї! Сув 145 150 155 160
А1їа сіп Уаї Нів Ркго біп Гуз Уаї ТПпг Гуз Рпе Меє Гей Сув Аїа 0Щ1У 165 170 175
Агуд Тер Тпг біу б1у Ппув Бек ТПг Сув бек б1у Авр бек с1у б1у Рго 180 185 190
Тец Маї Сув Авп сіу Уа1і Гей сіп с1у Іїе ТПг бек Тер сіу бек бій 195 200 205
Рго Сув Аза Іецй Рго бій Аг Ркго бек Гецп Туг ТПг Ппув Уа1 Уа1ї Нів 210 215 220
Тук Агуд пув Тер І1е пуб Авр ТПг Іїе Уаї Аїа АБп Рго 225 230 235 «2105 4 «2115 237 «2125 РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 4
І1е Уаї сіу б1у ТкЕр б1п1 Сув біцш Гув Нів Бек біп Рго Тер сіп Уаї 1 5 10 15
А1їа Уа1 Тук бек Нів біу Тер Аїа Нів Сув біу бі1у Уаї Гей Уаї1ї Нів 20 25 Зо
Рго біп Ткр Маї Геш ТПг Аза Аза Нів Сув Гей пуб Ппув Авп бек сіп 35 40 45
Уаї ТеЕр геш сб1у Акуд Нів Авп Гей Робе сіц Рго біц АБр ТПпгЕ с1у сіп 50 55 6о
Акуд Уа1і Рго Уаії бек Нів бек РібПе Рго Нів Рго Гей Туг Авп Меє 5ег 65 70 75 80
Тецшп еп Гпув Нів біп Бек Гей Агуд Рго Авр бій Авр бБекг бег Нів Авр 85 90 95
Тец Меє Гей Гей Агуд Гей бек сій Рго Аїа Гпув І1їе ТПг Ар Уа1ї! Уаї 100 105 110 пув Маї Гецп с1у Гей Ркго ТПг біп біц Рго Аїа Гей сіу ТПг ТрПкг Сув 115 120 125
Туг Аїа бек сіу Тгр біу бек Іїе сбіц Рго біц біц Рре Гей Агд Рго 130 135 140
Акуд Бек Гей біп Сув Уаії бек Гец Нів Іец ІТец бек Авп Авр Меє Сув 145 150 155 160
Аза Акуд Аїа Туг бек біцш Гув Уаії ТПг біцш Рпе Меє Гей Сув Аїа 0Щ1У 165 170 175
Тецп Тер ТПпг сіу с1у Ппув Авр ТПг Сув с1іу с1у Авр бек біу б1у Рго 180 185 190
Тем Маї Сув Авп сіу Уаії Іїей сбіп сі1у І1е ТПг бек Ткгр сб1у Рго сі1ц 195 200 205
Рго Сув Аїа Іецй Рго бій Ппув Рго А1їа Уаї Тук ТПг Ппув Уа1 Уа1ї Нів 210 215 220
Тук Агуд пув Тер І1е пуб АвБр ТПг Ії1е Аза Аїа АБп Рго
Claims (48)
1. Спосіб кількісної оцінки рівнів простатичного антигену, що включає: виконання імуноаналізу для вимірювання рівня простатичного антигену в зразку, де простатичний антиген являє собою інтактний простат-специфічний антиген (ІПСА) та/або людський калікреїн 2 (лК2); виконання аналогічного імуноаналізу для вимірювання рівня простатичного антигену в кожному титрі в наборі стандартів простатичного антигену, де набір стандартів простатичного антигену включає принаймні два титри, що містять відомі рівні простатичного антигену, причому кожний проміжний титр простатичного антигену рівновіддалений від нижчого та вищого титрів у логарифмічному масштабі, де величина найнижчого ненульового титру в наборі менша за межу кількісної оцінки імунсаналізу, і де рівень простатичного антигену в найвищому титрі у наборі знаходиться між і) рівнем простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі та ії) рівнем простатичного антигену, що у 100 разів вищий за рівень простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі; та визначення рівня простатичного антигену у зразку на основі виміряних рівнів простатичного антигену в наборі стандартів простатичного антигену.
2. Спосіб за п. 1, у якому найвищий титр у наборі стандартів простатичного антигену знаходиться між і) рівнем простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі та ії) рівнем простатичного антигену, що у 75 разів вищий за рівень простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі.
З. Спосіб за п. 1 або п. 2, у якому цільова популяція суб'єктів чоловічої статі складається з чоловіків, медіана віку яких знаходиться в діапазоні від 60 до 70 років.
4. Спосіб за будь-яким з пп. 1-3, у якому цільова популяція суб'єктів чоловічої статі складається з чоловіків, нижній квартиль віку яких знаходиться в діапазоні від 55 до 65 років.
5. Спосіб за будь-яким з пп. 1-4, у якому цільова популяція суб'єктів чоловічої статі складається з чоловіків, верхній квартиль віку яких знаходиться в діапазоні від 65 до 75 років.
6. Спосіб за будь-яким з пп. 1-5, у якому простатичний антиген являє собою інтактний простат- специфічний антиген (ІПСА).
7. Спосіб за п. 6, у якому найнижчий ненульовий титр набору становить 0,025 нг/мл.
8. Спосіб за п. 6 або п. 7, у якому найвищий титр набору становить 15 нг/мл.
9. Спосіб за будь-яким з пп. 6-8, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0, 0,025, 0,089, 0,322, 1,157, 4,167 та 15 нг/мл.
10. Спосіб за будь-яким з пп. 1-5, у якому простатичний антиген являє собою лк.
11. Спосіб за п. 10, у якому найнижчий ненульовий титр набору становить 0,002 нг/мл.
12. Спосіб за п. 10 або п. 11, у якому найвищий титр набору становить 8 нг/мл.
13. Спосіб за будь-яким з пп. 10-12, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0, 0,002, 0,011, 0,055, 0,290, 1,524 та 8 нг/мл.
14. Спосіб за будь-яким з пп. 1-13, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з семи титрів стандарту простатичного антигену.
15. Спосіб за будь-яким з пп. 1-14, у якому імуноаналіз вибраний з групи, що складається з посиленого дисоціацією лантанідного флуоресцентного імуноаналізу, імуноферментного аналізу (ІФА, ЕЇЇ5А), радіоімуноаналізу (РІА), сендвіч-аналізу, вестерн-блотингу та імунопреципітаційного аналізу (ІПА).
16. Спосіб за п. 15, у якому імуноаналіз є посиленим дисоціацією лантанідним флуоресцентним імуноаналізом.
17. Спосіб за п. 15, у якому імуноаналіз є ІФА.
18. Спосіб за будь-яким з пп. 1-17, у якому зразок одержують від суб'єкта-людини.
19. Спосіб за будь-яким з пп. 1-18, у якому зразок є біопсією тканини передміхурової залози.
20. Спосіб за будь-яким з пп. 1-19, у якому зразок є зразком крові або плазми крові.
21. Комплект для виявлення простатичного антигену, де простатичний антиген являє собою інтактний простат-специфічний антиген (ІПСА) та/або людський калікреїн 2 (лК2), призначений для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену, де комплект включає: набір стандартів простатичного антигену для кількісної оцінки простатичного антигену у зразку із застосуванням імуноаналізу, де кожен стандарт простатичного антигену наявний у контейнері як розчин, причому набір стандартів простатичного антигену включає принаймні два титри, що містять відомі рівні простатичного антигену, причому кожний проміжний титр простатичного антигену рівновіддалений від нижчого та вищого титрів у логарифмічному масштабі, де величина найнижчого ненульового титру в наборі менша за межу кількісної оцінки імуноаналізу, і де рівень простатичного антигену в найвищому титрі у наборі знаходиться між ї) рівнем простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі та ії) рівнем простатичного антигену, що у 100 разів вищий за рівень простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі.
22. Комплект за п. 21, у якому найвищий титр набору знаходиться між ії) рівнем простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі та ії) рівнем простатичного антигену, що у 75 разів вищий за рівень простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі.
23. Комплект за п. 21 або п. 22, у якому простатичний антиген являє собою інтактний простат- специфічний антиген (ІПСА).
24. Комплект за п. 23, у якому найнижчий ненульовий титр набору становить 0,025 нг/мл.
25. Комплект за п. 23 або п. 24, у якому найвищий титр набору становить 15 нг/мл.
26. Комплект за будь-яким з пп. 23-25, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0, 0,025, 0,089, 0,322, 1,157, 4,167 та 15 нг/мл.
27. Комплект за п. 21 або п. 22, у якому простатичний антиген являє собою лкК2.
28. Комплект за п. 27, у якому найнижчий ненульовий титр набору становить 0,002 нг/мл.
29. Комплект за п. 27 або п. 28, у якому найвищий титр набору становить 8 нг/мл.
30. Комплект за будь-яким з пп. 27-29, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0, 0,002, 0,011, 0,055, 0,290, 1,524 та 8 нг/мл.
31. Комплект за будь-яким з пп. 21-30, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з семи титрів стандарту простатичного антигену.
32. Комплект за будь-яким з пп. 21-31, який додатково включає блокувальні антитіла до загального простат-специфічного антигену (ЗПСА).
33. Комплект за будь-яким з пп. 21-32, який додатково включає антитіло, яке можна виявити, зі специфічністю до простатичного антигену.
34. Комплект за п. 33, у якому антитіло, яке можна виявити, є міченим за допомогою ферменту, радіоактивного ізотопу, колоїдного металу, флуоресцентної сполуки, магнітної сполуки, хемілюмінесцентної сполуки, біолюмінесцентної сполуки, або їх комбінацій.
35. Комплект за будь-яким з пп. 21-34, який додатково включає біотинільоване захоплювальне антитіло зі специфічністю до простатичного антигену.
36. Спосіб приготування стандартів простатичного антигену для кількісної оцінки рівнів простатичного антигену у зразку, де спосіб включає: () одержання антигену, пов'язаного із раком передміхурової залози, де антиген являє собою інтактний простат-специфічний антиген (ІПСА) та/або людський калікреїн 2 (лК2); (і) приготування вихідного розчину простатичного антигену в придатному буфері, де вихідний розчин має титр між ї) рівнем простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі та ії) рівнем простатичного антигену, що у 75 разів вищий за рівень простатичного антигену у крові у верхньому квартилі цільової популяції суб'єктів чоловічої статі; та (ії) приготування набору стандартів простатичного антигену шляхом серійних розведень вихідного розчину так, щоб кожен проміжний титр стандарту простатичного антигену був рівновіддалений від нижчого та вищого титрів у логарифмічному масштабі, і так, що величина найнижчого ненульового титру в наборі менша за межу кількісної оцінки імунсаналізу.
37. Спосіб за п. 36, у якому цільова популяція суб'єктів чоловічої статі складається з чоловіків, медіана віку яких знаходиться в діапазоні від 60 до 70 років.
38. Спосіб за п. 36 або п. 37, у якому цільова популяція суб'єктів чоловічої статі складається з чоловіків, нижній квартиль віку яких знаходиться в діапазоні від 55 до 65 років.
39. Спосіб за будь-яким з пп. 36-38, у якому цільова популяція суб'єктів чоловічої статі складається з чоловіків, верхній квартиль віку яких знаходиться в діапазоні від 65 до 75 років.
40. Спосіб за будь-яким з пп. 36-39, у якому простатичний антиген являє собою інтактний простат-специфічний антиген (ІПСА).
41. Спосіб за п. 40, у якому найнижчий ненульовий титр набору становить 0,025 нг/мл.
42. Спосіб за п. 40 або п. 41, у якому найвищий титр набору становить 15 нг/мл.
43. Спосіб за будь-яким з пп. 40-42, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0, 0,025, 0,089, 0,322, 1,157, 4,167 та 15 нг/мл.
44. Спосіб за будь-яким з пп. 36-39, у якому простатичний антиген являє собою лК2.
45. Спосіб за п. 44, у якому найнижчий ненульовий титр набору становить 0,002 нг/мл.
46. Спосіб за п. 44 або п. 45, у якому найвищий титр набору становить 8 нг/мл.
47. Спосіб за будь-яким з пп. 44-46, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з наступних титрів стандарту простатичного антигену: 0, 0,002, 0,011, 0,055, 0,290, 1,524 та 8 нг/мл.
48. Спосіб за будь-яким з пп. 36-47, у якому набір стандартів простатичного антигену складається з семи титрів стандарту простатичного антигену.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201562139365P | 2015-03-27 | 2015-03-27 | |
| PCT/US2016/024149 WO2016160545A1 (en) | 2015-03-27 | 2016-03-25 | Prostate antigen standards and uses thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA124522C2 true UA124522C2 (uk) | 2021-10-05 |
Family
ID=56975150
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201709438A UA124522C2 (uk) | 2015-03-27 | 2016-03-25 | Спосіб кількісної оцінки рівнів простатичного антигену |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US11921115B2 (uk) |
| EP (2) | EP3253800B1 (uk) |
| JP (1) | JP6749337B2 (uk) |
| CN (1) | CN107406510B (uk) |
| CA (1) | CA2979559A1 (uk) |
| DE (1) | DE202016008692U1 (uk) |
| DK (1) | DK3253800T3 (uk) |
| ES (1) | ES2867798T3 (uk) |
| HU (1) | HUE055020T2 (uk) |
| IL (1) | IL254412B (uk) |
| MX (2) | MX2017012320A (uk) |
| PL (1) | PL3253800T3 (uk) |
| PT (1) | PT3253800T (uk) |
| TW (1) | TWI698639B (uk) |
| UA (1) | UA124522C2 (uk) |
| WO (1) | WO2016160545A1 (uk) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101754812B (zh) | 2007-05-04 | 2013-06-26 | 克拉洛诊断仪器公司 | 流体连接器和微流体系统 |
| EP3278877B1 (en) | 2009-02-02 | 2020-06-03 | Opko Diagnostics, LLC | Structures for controlling light interaction with microfluidic devices |
| CA2866007C (en) | 2012-03-05 | 2023-01-03 | Oy Arctic Partners Ab | Methods and apparatuses for predicting risk of prostate cancer and prostate gland volume |
| DE202015009668U1 (de) | 2014-03-28 | 2019-01-21 | Opko Diagnostics, Llc | Zusammensetzungen zur Diagnose von Prostatakrebs |
| DE102015105979A1 (de) | 2015-04-20 | 2016-10-20 | Mankiewicz Gebr. & Co. Gmbh & Co. Kg | Verbesserte Beschichtungssysteme, deren Verwendung zur Beschichtung von Bauteilen sowie damit beschichtete Bauteile für Windkraftanlagen |
| EP3387447A4 (en) | 2015-12-11 | 2019-08-28 | Opko Diagnostics, LLC | FLUID SYSTEMS WITH INCUBATION SAMPLES AND / OR REAGENTS |
| ES2871082T3 (es) | 2015-12-29 | 2021-10-28 | Opko Diagnostics Llc | Dispositivo de recolección de fluidos y métodos relacionados |
| KR102342988B1 (ko) * | 2017-06-15 | 2021-12-27 | 션전 피알에스 리미티드 | Ihc 항원 영상 척도 외삽 방법 |
| US11662564B2 (en) | 2017-06-15 | 2023-05-30 | Shenzhen Prs Limited | Paraffin shield coating for microscope slide |
Family Cites Families (97)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6176962B1 (en) | 1990-02-28 | 2001-01-23 | Aclara Biosciences, Inc. | Methods for fabricating enclosed microchannel structures |
| SE9002480D0 (sv) | 1990-07-23 | 1990-07-23 | Hans Lilja | Assay of free and complexed prostate-specific antigen |
| EP0635575A1 (en) | 1993-07-22 | 1995-01-25 | Wallac Oy | Monoclonal antibodies against epitopes found in free but not in alpha-1-antichmotrypsin complexed prostate specific antigen |
| US5516639A (en) | 1993-07-22 | 1996-05-14 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Antibodies specific for human prostate glandular kallkrein |
| EP0725593B1 (en) | 1993-10-28 | 2004-04-07 | I-Stat Corporation | Fluid sample collection and introduction device |
| US5599677A (en) | 1993-12-29 | 1997-02-04 | Abbott Laboratories | Immunoassays for prostate specific antigen |
| US5585069A (en) | 1994-11-10 | 1996-12-17 | David Sarnoff Research Center, Inc. | Partitioned microelectronic and fluidic device array for clinical diagnostics and chemical synthesis |
| US5614372A (en) | 1995-02-24 | 1997-03-25 | Lilja; Hans | Early detection of prostate cancer (CAP) by employing prostate specific antigen (PSA) and human glandular kallikrein (hGK-1) |
| CA2228485A1 (en) | 1995-08-03 | 1997-02-20 | Akzo Nobel Nv | Diagnostic device |
| US6143509A (en) | 1996-02-06 | 2000-11-07 | Abbott Laboratories | Prostate specific antigen peptides and uses thereof |
| WO1997039351A1 (en) | 1996-04-12 | 1997-10-23 | Carter Herbert B | Novel methods for the prediction and early detection of prostatic adenocarcinoma |
| US5840501A (en) | 1996-10-25 | 1998-11-24 | Bayer Corporation | Determination of cPSA |
| US5945289A (en) | 1996-12-20 | 1999-08-31 | Lehrer; Steven | Method for detecting prostate cancer by apolipoprotein E (Apo-E) genotyping |
| US5842787A (en) | 1997-10-09 | 1998-12-01 | Caliper Technologies Corporation | Microfluidic systems incorporating varied channel dimensions |
| SE9704934D0 (sv) | 1997-12-30 | 1997-12-30 | Pharmacia & Upjohn Diag Ab | Analysförfarande med tillsättning i två eller flera positioner |
| FI980488A (fi) | 1998-03-04 | 1999-09-05 | Arctic Partners Oy Ab | Uusi diagnostinen menetelmä |
| FR2780791B1 (fr) | 1998-07-03 | 2000-09-01 | Bio Merieux | Methode de depistage ou de diagnostic d'un adenocarcinome ou d'une pathologie benigne de la prostate et procede de mise en oeuvre |
| WO2000044940A2 (en) | 1999-01-28 | 2000-08-03 | Gen-Probe Incorporated | Nucleic acid sequences for detecting genetic markers for cancer in a biological sample |
| US6444425B1 (en) | 1999-04-02 | 2002-09-03 | Corixa Corporation | Compounds for therapy and diagnosis of lung cancer and methods for their use |
| US7211397B2 (en) | 1999-04-30 | 2007-05-01 | Beckman Coulter, Inc. | Method of analyzing non-complexed forms of prostate specific antigen in a sample to improve prostate cancer detection |
| US6136549A (en) | 1999-10-15 | 2000-10-24 | Feistel; Christopher C. | systems and methods for performing magnetic chromatography assays |
| FI20002127A0 (fi) * | 2000-09-27 | 2000-09-27 | Artic Partners Oy Ab | Uusi vasta-aine, immunomääritys ja menetelmä eturauhassyövän havaitsemiseksi |
| CA2424941A1 (en) | 2000-10-10 | 2002-04-18 | Aviva Biosciences Corporation | An integrated biochip system for sample preparation and analysis |
| AU4322102A (en) | 2000-11-20 | 2002-06-18 | Eastern Virginia Med School | Methods and devices for the quantitative detection of prostate specific membraneantigen and other prostatic markers |
| US20040219163A1 (en) | 2001-10-03 | 2004-11-04 | Frelinger John G. | Human glandular kallikrein (hk2)-specific monoclonal antibodies that enhance or inhibit the enzymatic activity of hk2 |
| CA2468674A1 (en) | 2001-12-05 | 2003-06-12 | University Of Washington | Microfluidic device and surface decoration process for solid phase affinity binding assays |
| US20030235816A1 (en) | 2002-03-14 | 2003-12-25 | Baylor College Of Medicine (By Slawin And Shariat) | Method to determine outcome for patients with prostatic disease |
| US20050272052A1 (en) | 2002-04-09 | 2005-12-08 | Affymetrix, Inc. | Molecular genetic profiling of gleason grades 3 and 4/5 prostate cancer |
| JPWO2003100425A1 (ja) | 2002-05-28 | 2005-11-04 | 株式会社常光 | 免疫学的クロマトグラフ法の試験紙片の読み取り定量装置 |
| DK1540010T3 (da) | 2002-08-06 | 2010-07-26 | Univ Johns Hopkins | Anvendelse af biomarkører til påvisning af ovariecancer |
| US20040115794A1 (en) | 2002-12-12 | 2004-06-17 | Affymetrix, Inc. | Methods for detecting transcriptional factor binding sites |
| AU2004209578A1 (en) | 2003-02-07 | 2004-08-19 | Diagnocure Inc. | Method to detect prostate cancer in a sample |
| US7461048B2 (en) | 2003-07-21 | 2008-12-02 | Aureon Laboratories, Inc. | Systems and methods for treating, diagnosing and predicting the occurrence of a medical condition |
| US20060269971A1 (en) | 2003-09-26 | 2006-11-30 | Mount Sinai Hospital | Methods for detecting prostate cancer |
| EP1535667A1 (en) | 2003-11-28 | 2005-06-01 | Sysmex Corporation | Analyzer, assay cartridge and analyzing method |
| AU2003292497A1 (en) | 2003-12-10 | 2005-06-29 | The Provost Fellows And Scholars Of The College Of The Holy And Undivided Trinity Of Queen Elizabeth Near Dublin | A modular biochip assembly |
| CA2834041C (en) | 2003-12-31 | 2017-05-16 | President And Fellows Of Harvard College | Assay device and method |
| DK1776181T3 (da) | 2004-01-26 | 2014-01-06 | Harvard College | System og fremgangsmåde til fluidtilførsel |
| US8030057B2 (en) | 2004-01-26 | 2011-10-04 | President And Fellows Of Harvard College | Fluid delivery system and method |
| TW200538734A (en) | 2004-03-12 | 2005-12-01 | Aureon Biosciences Corp | Systems and methods for treating, diagnosing and predicting the occurrence of a medical condition |
| EP1747466A2 (en) | 2004-05-11 | 2007-01-31 | Baylor College Of Medicine | Method to predict prostate cancer |
| US20060154276A1 (en) | 2004-05-13 | 2006-07-13 | Prometheus Laboratories Inc. | Methods of diagnosing inflammatory bowel disease |
| US8173433B2 (en) | 2004-08-02 | 2012-05-08 | Vermillion, Inc. | Platelet biomarkers for cancer |
| MX2007003003A (es) | 2004-09-17 | 2007-11-09 | Univ Johns Hopkins | Biomarcadores para cancer de mama. |
| US8663600B2 (en) | 2005-02-17 | 2014-03-04 | Diaprost Ab | Diagnosis of prostate cancer |
| WO2006122312A2 (en) | 2005-05-11 | 2006-11-16 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods of testing using a microfluidic cassette |
| US20070065954A1 (en) | 2005-09-15 | 2007-03-22 | Minoru Taya | Surface plasmon resonance biosensor system for detection of antigens and method for determining the presence of antigens |
| WO2007109881A1 (en) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Phenomenome Discoveries Inc. | Biomarkers useful for diagnosing prostate cancer, and methods thereof |
| CA2656140A1 (en) | 2006-07-03 | 2008-01-10 | Exonhit Therapeutics Sa | Prostate specific transcripts and the use thereof for prostate cancer therapeutics and diagnostics |
| CN1973778A (zh) | 2006-12-08 | 2007-06-06 | 南京大学 | 胃癌术后严重并发症风险度的预测方法 |
| EP2106262B1 (en) | 2006-12-22 | 2015-11-18 | Phadia AB | Novel prostate kallikrein allergen |
| CN101754812B (zh) | 2007-05-04 | 2013-06-26 | 克拉洛诊断仪器公司 | 流体连接器和微流体系统 |
| WO2008140774A2 (en) | 2007-05-08 | 2008-11-20 | Picobella Llc | Methods for diagnosing and treating prostate and lung cancer |
| CN101329343A (zh) | 2007-06-19 | 2008-12-24 | 天津迪爱盟生物技术有限公司 | 新一代早期诊断前列腺癌试剂盒及其制备方法和检测方法 |
| WO2009029550A2 (en) * | 2007-08-24 | 2009-03-05 | Singulex, Inc. | Highly sensitive system and methods for analysis of prostate specific antigen (psa) |
| CN101377500A (zh) | 2007-08-31 | 2009-03-04 | 北京科美东雅生物技术有限公司 | 游离前列腺特异性抗原化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法 |
| JP5272011B2 (ja) | 2007-10-22 | 2013-08-28 | セントビンセンツ ホスピタル シドニー リミテッド | 予後判定の方法 |
| WO2009085196A1 (en) | 2007-12-21 | 2009-07-09 | Wake Forest University Health Sciences | Methods and compositions for correlating genetic markers with prostate cancer risk |
| JP5028697B2 (ja) | 2008-02-18 | 2012-09-19 | 富士フイルム株式会社 | 吸引シリンジ及び内視鏡用吸引シリンジ |
| JP2011521215A (ja) | 2008-05-14 | 2011-07-21 | エーテーハー チューリヒ | 前立腺癌の診断及び治療のためのバイオマーカー及び薬剤標的発見法、並びにそれを用いて決定されるバイオマーカーアッセイ |
| FR2934698B1 (fr) | 2008-08-01 | 2011-11-18 | Commissariat Energie Atomique | Procede de prediction pour le pronostic ou le diagnostic ou la reponse therapeutique d'une maladie et notamment du cancer de la prostate et dispositif permettant la mise en oeuvre du procede. |
| US8386187B2 (en) | 2008-10-20 | 2013-02-26 | Liposcience, Inc. | Lipoprotein insulin resistance indexes and related methods, systems and computer programs for generating same |
| WO2010065940A1 (en) | 2008-12-04 | 2010-06-10 | The Regents Of The University Of California | Materials and methods for determining diagnosis and prognosis of prostate cancer |
| US8591829B2 (en) | 2008-12-18 | 2013-11-26 | Opko Diagnostics, Llc | Reagent storage in microfluidic systems and related articles and methods |
| WO2010075446A1 (en) | 2008-12-23 | 2010-07-01 | Soar Biodynamics, Ltd. | Methods and systems for prostate health monitoring |
| US20120022793A1 (en) | 2009-01-19 | 2012-01-26 | Miraculins, Inc. | Biomarkers for the diagnosis of prostate cancer in a non-hypertensive population |
| EP3278877B1 (en) | 2009-02-02 | 2020-06-03 | Opko Diagnostics, LLC | Structures for controlling light interaction with microfluidic devices |
| JP2010243406A (ja) | 2009-04-08 | 2010-10-28 | F Hoffmann La Roche Ag | Ａｆｐおよびｐｉｖｋａ−ｉｉの測定値を特徴値とした識別関数を利用する、肝臓癌および慢性肝疾患の病態進行度の検出方法 |
| WO2010127322A1 (en) | 2009-05-01 | 2010-11-04 | Genomic Health Inc. | Gene expression profile algorithm and test for likelihood of recurrence of colorectal cancer and response to chemotherapy |
| JP5933432B2 (ja) | 2009-06-04 | 2016-06-08 | メタノミクス ヘルス ゲーエムベーハー | 前立腺癌を診断する手段と方法 |
| WO2011027308A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-10 | Koninklijke Philips Electronics N.V. | Novel tumor markers |
| WO2011027310A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-10 | Koninklijke Philips Electronics N.V. | Novel tumor markers |
| KR101141190B1 (ko) | 2009-10-19 | 2012-06-13 | 중앙대학교 산학협력단 | 전립선암에 대한 바이오마커 및 이를 이용한 전립선암 진단 |
| BR112012022917A2 (pt) | 2010-03-11 | 2017-01-10 | Pfizer | anticorpos com ligação a antígeno dependente de ph |
| MX2012012066A (es) | 2010-04-16 | 2012-12-17 | Opko Diagnostics Llc | Control de retroalimentacion en sistemas microfluidicos. |
| WO2012029080A1 (en) | 2010-08-30 | 2012-03-08 | Decode Genetics Ehf | Sequence variants associated with prostate specific antigen levels |
| BRPI1100857A2 (pt) | 2011-03-18 | 2013-05-21 | Alexandre Eduardo Nowill | agente imunomodulador e suas combinaÇÕes, seu uso e mÉtodo imunoterÁpico para a recontextualizaÇço, reprogramaÇço e reconduÇço do sistema imune em tempo real |
| WO2012129408A2 (en) | 2011-03-22 | 2012-09-27 | The Johns Hopkins University | Biomarkers for aggressive prostate cancer |
| WO2012170776A2 (en) * | 2011-06-09 | 2012-12-13 | Quanterix Corporation | Methods of determining a patient's prognosis for recurrence of prostate cancer and/or determining a course of treatment for prostate cancer following a radical prostatectomy |
| CN106226527B (zh) | 2011-07-21 | 2018-05-04 | 和光纯药工业株式会社 | 血浆中氨基酸分析用内标液、内标物质及血浆中氨基酸的定量方法 |
| CA2853669C (en) | 2011-10-28 | 2019-03-12 | Fredax Ab | Therapeutic agents and uses thereof |
| US20150044666A1 (en) | 2012-01-13 | 2015-02-12 | Iris International Inc. | Non-equilibrium two-site assays for linear, ultrasensitive analyte detection |
| CA2866007C (en) | 2012-03-05 | 2023-01-03 | Oy Arctic Partners Ab | Methods and apparatuses for predicting risk of prostate cancer and prostate gland volume |
| AU2013263473A1 (en) * | 2012-05-16 | 2014-11-20 | Phadia Ab | Method for indicating the presence or non-presence of prostate cancer |
| AU2013284448B2 (en) | 2012-06-27 | 2019-04-18 | Berg Llc | Use of markers in the diagnosis and treatment of prostate cancer |
| CN102818892B (zh) | 2012-08-16 | 2015-02-18 | 北京恩济和生物科技有限公司 | 一种前列腺特异性抗原检测试剂盒及其制备方法 |
| US9175291B2 (en) | 2012-10-11 | 2015-11-03 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Modulation of androgen receptor expression |
| JP2016508026A (ja) | 2012-11-20 | 2016-03-17 | ファディア・アクチボラゲットＰｈａｄｉａ ＡＢ | 前立腺癌を有する個体の予後診断方法 |
| EP2922967B1 (en) | 2012-11-20 | 2018-01-03 | Phadia AB | Method for indicating a presence or non-presence of aggressive prostate cancer |
| PL3071595T3 (pl) | 2013-11-19 | 2019-09-30 | Fredax Ab | Humanizowane przeciwciało przeciw kalikreinie-2 |
| AU2015230017B2 (en) | 2014-03-11 | 2021-06-17 | Phadia Ab | Method for detecting a solid tumor cancer |
| US20170089904A1 (en) | 2014-03-28 | 2017-03-30 | Opko Diagnostics, Llc | Compositions and methods for active surveillance of prostate cancer |
| DE202015009668U1 (de) | 2014-03-28 | 2019-01-21 | Opko Diagnostics, Llc | Zusammensetzungen zur Diagnose von Prostatakrebs |
| EP3268978A1 (en) | 2015-03-12 | 2018-01-17 | Thermo Finnigan LLC | Methods for data-dependent mass spectrometry of mixed biomolecular analytes |
| BR112017022391A2 (pt) | 2015-04-29 | 2018-07-10 | Opko Diagnostics Llc | composições e métodos para a fiscalização de câncer de próstata |
| US20190072555A1 (en) | 2017-08-14 | 2019-03-07 | Opko Diagnostics, Llc | Multiplex assays for evaluating prostate cancer status |
| US20210208146A1 (en) | 2018-05-16 | 2021-07-08 | Opko Diagnostics, Llc | Methods for detecting prostate cancer pathology associated with adverse outcomes |
-
2016
- 2016-03-25 EP EP16773820.2A patent/EP3253800B1/en active Active
- 2016-03-25 US US15/081,331 patent/US11921115B2/en active Active
- 2016-03-25 HU HUE16773820A patent/HUE055020T2/hu unknown
- 2016-03-25 PL PL16773820T patent/PL3253800T3/pl unknown
- 2016-03-25 PT PT167738202T patent/PT3253800T/pt unknown
- 2016-03-25 DE DE202016008692.9U patent/DE202016008692U1/de active Active
- 2016-03-25 DK DK16773820.2T patent/DK3253800T3/da active
- 2016-03-25 WO PCT/US2016/024149 patent/WO2016160545A1/en active Application Filing
- 2016-03-25 CN CN201680018332.XA patent/CN107406510B/zh active Active
- 2016-03-25 ES ES16773820T patent/ES2867798T3/es active Active
- 2016-03-25 CA CA2979559A patent/CA2979559A1/en active Pending
- 2016-03-25 UA UAA201709438A patent/UA124522C2/uk unknown
- 2016-03-25 JP JP2017550506A patent/JP6749337B2/ja active Active
- 2016-03-25 TW TW105109602A patent/TWI698639B/zh active
- 2016-03-25 MX MX2017012320A patent/MX2017012320A/es unknown
- 2016-03-25 EP EP17187201.3A patent/EP3318878A3/en not_active Withdrawn
-
2017
- 2017-09-11 IL IL254412A patent/IL254412B/en active IP Right Grant
- 2017-09-26 MX MX2022002138A patent/MX2022002138A/es unknown
-
2024
- 2024-01-19 US US18/417,162 patent/US20240159758A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL254412B (en) | 2021-01-31 |
| MX2017012320A (es) | 2018-01-18 |
| MX2022002138A (es) | 2022-03-17 |
| ES2867798T3 (es) | 2021-10-20 |
| WO2016160545A1 (en) | 2016-10-06 |
| US20160282349A1 (en) | 2016-09-29 |
| EP3318878A3 (en) | 2018-07-11 |
| DE202016008692U1 (de) | 2019-02-13 |
| TWI698639B (zh) | 2020-07-11 |
| TW201643429A (zh) | 2016-12-16 |
| CN107406510B (zh) | 2022-02-18 |
| US11921115B2 (en) | 2024-03-05 |
| CN107406510A (zh) | 2017-11-28 |
| JP6749337B2 (ja) | 2020-09-02 |
| PL3253800T3 (pl) | 2021-08-23 |
| EP3253800B1 (en) | 2021-03-03 |
| JP2018511055A (ja) | 2018-04-19 |
| US20240159758A1 (en) | 2024-05-16 |
| HUE055020T2 (hu) | 2021-11-29 |
| IL254412A0 (en) | 2017-11-30 |
| PT3253800T (pt) | 2021-04-28 |
| EP3253800A4 (en) | 2018-11-07 |
| EP3318878A2 (en) | 2018-05-09 |
| DK3253800T3 (da) | 2021-05-31 |
| US20170370938A9 (en) | 2017-12-28 |
| EP3253800A1 (en) | 2017-12-13 |
| CA2979559A1 (en) | 2016-10-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA124522C2 (uk) | Спосіб кількісної оцінки рівнів простатичного антигену | |
| WO2017107974A1 (zh) | 血清psmd4蛋白的检测试剂盒及其检测方法与应用 | |
| JP7136697B2 (ja) | デンスブレストを有する女性における乳癌の検出のためのバイオマーカー | |
| CN105572353A (zh) | 一种用于检测肝癌标志物的抗体芯片试剂盒 | |
| WO2020069580A1 (en) | Biomarker combinations for determining aggressive prostate cancer | |
| Zhang et al. | Analysis of clinical and biological samples using microsphere-based multiplexing Luminex system | |
| CN106680515B (zh) | 用于肺癌诊断的多分子标志物组合 | |
| AU2021203920A1 (en) | Biomarkers for detection of breast cancer | |
| JP6457119B2 (ja) | 生化学検査と免疫反応検査を行うマルチユニット、及びこれを用いた検査方法 | |
| CN112534262A (zh) | 检测手足口病的方法 | |
| CN109324192A (zh) | 快速定量检测抗核抗体含量的检测方法 | |
| Donahue et al. | Antibodies in biosensing | |
| WO2013119279A2 (en) | Assays and methods for the diagnosis of ovarian cancer | |
| CN105929151A (zh) | 前列腺特异性抗原同源异构体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 | |
| Lu et al. | High-throughput evaluation of metabolic activities using reverse phase protein array technology | |
| US20140275292A1 (en) | Systems and methods employing human stem cell markers for detection, diagnosis and treatment of circulating tumor cells | |
| Sohn et al. | ANA Testing: From Microscopy to Multiplexing | |
| ES2502068B1 (es) | Método para el diagnóstico de Trombocitemia esencial y kit para realizarlo | |
| Saxena et al. | Immunotechnology in Disease Diagnosis | |
| WO2019035805A1 (en) | MULTIPLEX ASSAYS TO EVALUATE PROSTATE CANCER CONDITION |